KR840000057B1

KR840000057B1 - 글라우신 포스페이트 염류의 제조방법

Info

Publication number: KR840000057B1
Application number: KR7902849A
Authority: KR
Inventors: 에스 엠 왕 사무엘
Original assignee: 리챠드 고든 워터맨; 더 다우 케미칼 캄파니
Priority date: 1979-08-21
Filing date: 1979-08-21
Publication date: 1984-01-31
Also published as: KR830001230A

Abstract

내용 없음.

Description

글라우신 포스페이트 염류의 제조방법

본 발명은 진해 및 진통제로 유용한 l-글라우신, d,l-글라우신 및 l-과 d,l-글라우신의 혼합물의 포스페이트 염류의 제조방법에 관한 것이다. 다음 구조식의 글라우신은 별표(*)로써 표시된 비대칭 중심을 갖는다.

따라서 두개의 광학이성체가 가능하다. 둘중의 하나 즉 우선형태(d-글라우신)만이 천연적으로 생성되며 황색 양귀비로부터 분리시킬 수 있다. 라세미체, d,l-글라우신은 다음 문헌 [참조 : Frank 및 Tietze의 Angewandte Chemie(1967) pp. 815-6]에 기술된 방법에 따라 파파베린으로부터 합성하거나, 다음의 문헌에 기술된 방법에 따라 합성할 수 있다[참조 : Cham 및 Maitland의 J. Chem. Soc. (C) 1966, 753 또는 Cava등의 J. Org. Chem. 35,175(1970)]. 이 두가지 에난티오머의 분리는 통상적인 방법, 예를들면 d 또는 l-타타르산 같은 광학적 활성이 있는 산을 사용하여 디아스테레오아이소머성 염을 형성시킨후 이를 분별 결정시켜 수행할 수 있다.

d-글라우신 하이드로브로마이드 및 d-글라우신 하이드로글로라이드가 진해활성을 갖고 있다는 것은 이미 공지되어 있다[참조 : Donev, Farmatsia(Sofia) 1962, 12, (4), p.17 및 Alesh inskaya, Khim. Farm. Zh. 10, (1), pp.144-147(1976) 및 Chemical Abstracts 84 : 159725

].

덧붙여, 알레쉰스 카야(Aleshinskaya)의 문헌에는 가시있는 황색 양귀비에서 얻어진 글라우신(d-글라우신)은 쥐에 있어서 헥세날 및 클로랄 하이드레이트에 의한 수면시간을 연장시키며, 50 내지 100mg/kg을 투여했을 때 진해활성을 나타내며 또한 아드레날린 효능 억제활성을 나타낸다고 기술되어 있다.

최근 조사에 의하면 글라우신 하이드로브로마이드의 좌선성화합물 및 라세믹 이성체가 우선성 화합물보다 진통효과가 더 우수하다는 것을 입증하였다(벨기에 특허 제866,079호).

상기 구조식에 나타난 바와 같이 글라우신은 구조적으로 코데인 같은 다른 식물의 알칼로이드와 유사하다. 코덴인 및 유사한 화합물(예 : 하이드로코든)은 진해제 및 마취성 진통제로 널리 공지되어 있다[참조 : Merck Index Ninth Ed., Merck & Co., Rahway, N. J.(1976) Monographs Nos. 2420124 및 4672].

이 화합물들은 습관성, 탐닉성이 있음에도 불구하고 진해제로 가장 널리 사용되고 있다. 진해제는 보통 경구투여되며, 대부분 엘릭서제, 현탁액 또는 시럽같은 액형제제 형태로 투여되나 녹을때까지 입안에 넣고 있는 고형의 마름모꼴 정제 또는 코프드롭 형태로 투여되기도 한다. 이 두가지 경우에서 알카로이드의 쓰고 좋지 못한 맛이 이 시약의 단점이다. 코데인의 좋지 못한 맛과 뒷맛을 없애기 위하여 여러가지 제제를 개발하였으나 이 기술은 아직도 완전히 성공적이 아니다. 글라우신은, 코데인과 같이, 좋지못한 쓴 맛을 낸다.

우리는, 놀랍게도 l-및 d,l-글라우신 포스페이트염이 d-글라우신보다도 더 우수한 진해호과를 나타내는 것 이외에, d-글라우신보다 기대이상으로 우수한 진통효과를 나타내며, 탐닉성이 매우 낮고, 특히 바람직한 용해도와 안전성을 가지며, 예상밖의 감칠맛이 있으므로 경구투여하기에 바람직하다는 것을 발견하였다.

신규의 글라우신 포스페이트 염은 동몰량 이하의 d-글라우신과 혼합된 l-글라우신의 포슬페이트를 포함한다. 동몰량의 l- 및 d-이성체의 혼합물이 라세미체, d, l-혼합물이므로, 본 발명의 혼합된 에난티오머는 라세미체 또는 라세미체와 l-에난티오머의 혼합물, 즉 d,l-글라우신 또는 l-과 d,l-글라우신의 혼합물로 간주할 수 있다.

본 발명의 신규 포스페이트염은 염기 형태의 l-글라우신 또는 d,l-글라우신(또는 이의 혼합물)을 유기염기의 포스페이트 염류를 제조하기에 적합한 조건하에서 인산과 반응시킴으로써 제조된 결정성 고체이다.

결정성 고체염은 약 0.3 또는 0.4 내지 약 0.6 또는 0.7몰비의 과량의 인산, 전형적으로 1몰의 글라우신 염기에 대해 약 1.4 내지 1.6몰의 인산을 함유한다. 과량의 인산을 사용하여 용이하게 수득된 우세한 결정성 포스페이트 염은 약 1.4 내지 1.6 및 보통 l- 또는 d,l-글라우신의 몰당 인산을 약 1.4 내지 1.5몰비로 함유한다. 글라우신 및 인산의 몰비는 원소분석, 또는 x-레이 크리스탈로 그래피 및 결정 밀도측정과 같은 통상의 방법으로 측정할 수 있다. 이 염은 예를들어 글라우신 포스페이트(2 : 3), 또는 (글라우신)₂·3H₃PO₄, 또는 글라우신 1 1/2 H₃PO₄등으로 생각할 수 있다.

l- 및 d,l-글라우신 포스페이트 염류는 약 240 내지 약 254℃에서 녹으며, 물에는 잘 녹으나 메틸렌클로라이드, 아세톤 및 디에틸에테르와 유기용매에 잘 녹지 않는다. 이들은 용액에서 산성을 나타내며 일반적으로 수용액(0.5g/100ml)에서 약 2.4 내지 2.6의 pH를 갖는다. 특히 제조시 정확한 융점은 사용된 제법 및 정제 방법에 따라 변화할 수 있는데, 이는 반응매체 또는 재결정 용매에 의한 결합수 또는 결정성 용매화물 형성과 같은 인자가 포함되기 때문이다.

글라우신 포스페이트염은, 사용된 반응물의 양에 따라, 디글라우신 포스페이트로 생각되는 소량의 두번째 글라우신 포스페이트를 함유할 수 있으며, 이는 원소분석시(2 : 3) 구조를 나타낸다 할지라도 약 219 내지 221℃에서의 디퍼런셜 스캐닝 칼로리메트리 피크(differential Scanning Calorimetry peak)로 검출할 수 있다. 이 피크는, 생성물을 추가의 인산으로 처리하여 제조할 수 있는데, 이로써 낮은 온도에서 녹는 불순물이 함유되지 않은 글라우신 포스페이트(2 : 3)염이 수득된다. 과량의 인산을 사용하였을 경우, 염은 반응하지 않은 인산과 함께 수득될 수 있다. 공존하는 과량의 인산은 통상의 방법 예를들어 여과, 또는 부분중화법으로 제거할 수 있다. 과량의 l-또는 d,l-글라우신을 사용하였을 경우, 염은 반응조건 및 사용한 용매에 따라 반응하지 않은 글라우신과 함께 수득될 수도 있다. 반응하지 않은 글라우신은 재결정 및 세척과 같은 통상의 정제기술로 제거하거나, 추가의 인산을 사용하여 포스페이트 염으로 전환시킬 수 있다.

본 발명 화합물은 유리 글라우신 염기를 인산과 반응시켜 쉽게 제조할 수 있다. 반응은 아세톤, 에탄올, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 메탄올, 디에틸에테르 또는 에틸아세테이트와 같은 불활성 유기용매 존재하에 용이하게 진행된다. 포스페이트 염은 보통 침전물 형태로 형성되며, 이는 여과 또는 경사법 같은 통상의 기술로 회수하여 재결정 및 세척과 같은 통상의 방법으로 정제할 수 있다.

반응은 전형적으로 유리 글라우신 염기를 주위온도 내지 혼합물의 비점에서 유기용매에 녹이고 이 용액을 과량의 인산과 혼합함으로써 수행한다. 인산은 약 0.5 내지 약1 내지 2내지 3배 몰과량 또는 그 이상으로 사용한다. 동몰량 또는 과량의 글라우신 반응물을 사용하면 글라우신 포스페이트(2 : 3) 염과 불순물(반응하지 않거나 부분적으로 반응한 글라우신염기)과의 혼합물이 얻어질 수 있는데, 이와같은 생성물은 추가의 인산과 반응시켜 불순물을 글라우신 포스페이트(2 : 3)으로 전환시킬 수 있다.

비교적 순수한 형태이거나, 과량의 인산과 공존하는 고형 포스페이트 형태의 글라우신 포스페이트(2 : 3)염을 얻으려고 과량의 인산을 사용할 경우, 과량의 인산함량은 부분적 중화시킨후 재결정시킴으로써 감소시킬 수 있다. 이 과정에서 먼저 고형염을 적정하여 글라우신 몰량 이상의 과량인 인산의 몰량을 측정하고, 이어서 고형염을 알콜성 알칼리 금속 수산화물 염기(예 : 메탄올 또는 에탄올에 함유되어 있는 수산화나트륨 또는 수산화 칼륨)와 혼합할 수 있는데, 이때 알칼리금속 수산화물은 과량의 인산을 중화시키기에 충분한 양으로 사용한다. 이어서 글라우신 포스페이트(2 : 3)염을 예를들어 에탄올을 사용한 통상적인 재결정 방법으로 정제할 수 있다. 부분적 중화는 일반적으로, 결정성 형태의 유용한 염을 수득하기 위해서는 불필요하다. 바람직하기로는, 생성물을 4시간 내지 8시간동안 에탄올에서 환류하에 가열하여 처리한후 재결정 및 건조시키는 것이다. 염이 용액형태일 경우, 부분적 적정법으로 인산의 함량을 감소시키는 등의 통상적 방법에 의해 글라우신의 인산에 대한 비율을 증가시킬 수 있다. 이러한 과정에 의해 글라우신 염기와 글라우신 포스페이트 염의 혼합물이 생성되며 유리염기의 침전이 형성될 수 있다. 인산을 염내의 (2 : 3) 몰비율 이상으로 과량 추가 첨가하면 일반적으로 글라우신 포스페이트 침전이 형성된다.

d,l- 및 d-글라우신 포스페이트 염과 혼합물의 염은 추가의 인산과 공존 또는 복합되어 있건 아니건 또는 소량의 미반응 또는 부분적 반응된 글라우신을 함유하였건 아니건간에 모두 유사하게 바람직한 특성을 지닌 진해제 및 진통제로 유용하다. 일반적으로, d,l-글라우신 포스페이트 또는 l-글라우신 포스페이트 같은 단일 포스페이트염을 사용하는 것이 바람직하다. 바람직한 염은 d,l-글라우신 몰당 인산을 1.5몰비로 함유하는 염이다.

글라우신 포스페이트 염은 경구용 진해제로서 효과가 크며, 또한 경구투여하였을때 진통작용을 나타내는 동시에 감칠맛이 좋고 안정성 및 용해도가 우수하며 탐닉성과 같은 부작용을 나타내지 않는다.

본 화합물의 투여용량은 진해제로 사용할 때는 약 0.1 내지 40mg/kg 이상을 사용하며, 진통제로 사용할 때는 약 0.1 내지 약 60mg/kg를 사용하며, 바람직하기로는 경구투여한다. 그러나 복강내 주사와 같은 비경구투여시에도 진해 및 진통작용을 나타낸다.

본 발명의 화합물을 사용할 때는 하나 이상의 글라우신 포스페이트 진해유효량을 이를 필요로 하는 동물, 특히 포유동물에게 내부 투여한다. 투여시에는 정맥내, 복강내, 또는 근육내 주사와 같이 비경구 투여하거나, 구강이나 직장을 통하여 위장관내 투여하거나, 글라우신 포스페이트 용액을 후두 분무액 형태로 경구투여한다.

본 화합물의 진해유효량, 즉 기침을 억제 또는 완화시키기에 충분한 글라우신 포스페이트의 양은 치료할 동물의 연령, 형태 및 크기, 사용된 특정 염 또는 그 혼합물, 투여경로 및 빈도, 기침의 경중, 함유된 부식제 및 투여시간 등의 여러가지 요인에 따라 다르다. 글라우신 포스페이트의 진통유효량, 즉 글라우신포스페이트를 동물에 투여하였을 때 통증을 완화시키기에 충분한 글라우신 포스페이트의 양도 상기에서와 유사한 점들을 고려하여 선택한다. 글라우신 포스페이트 염은 일반적으로 경구 투여하였을 때가 비경구투여하였을 때보다 낮은 용량에서 유효하다. 예를들어 진해작용을 평가하였을 때, 코데인 포스페이트는 복강내 투여시 ED₅₀이 10.9mg/kg이고 경구투여서 ED₅₀이 86.6mg/kg인 반면, (d,l-글라우신)₂·3H₃PO₄는 경구 및 복강내 투여시 ED₅₀이 각각 17.8 및 17.3mg/kg로서 서로 유사하였다. 특정한 경우, 투여 용량은 서로 다른 용량에서의 진해작용을 관찰하는 등의 통상적 방법에 의해 확인할 수 있다.

우수한 진해 효과는 본 발명의 글라우신 염화합물을 동물체중 kg당 약 0.1 내지 약 0.2, 내지 약 0.5 내지 약 1 내지 약 10 내지 20 내지 25 내지 30 내지 40 내지 약 80mg으로 경구투여 하였을 때와 0.1 내지 40mg/kg으로 비경구투여 하였을때 나타난다. 일반적으로 통상적인 투여표에 따라 목적한 기침억제를 할 수 있는 최소량을 단일 용량으로 하여 투여하는 것이 바람직하며, 일반적으로 경구투여가 바람직하다.

본 발명의 글라우신 포스페이트는 경구성 진해 작용이 우수할 뿐 아니라 감칠맛도 난다.

경구투여에 적합한 정제, 캅셀, 로렌지, 엘릭서제, 시럽등의 용량단위가 바람직하며, 활성이 있는 글라우신 포스페이트 화합물은 통상의 시한방출캡셀 또는 정제로 제형할 수 있다.

본 발명 화합물을 사용함에 있어서, 글라우신 포스페이트 활성성분은, 바람직하기로는 약학적 담체와 약 0.001 내지 약 95중량%의 글라우신 포스페이트 염 화합물 또는 이의 약학적으로 무독한 염으로 구성된 조성물 형태로 사용하는 것이 바람직하다. "약학적담체"란 약학적 유효화합물을 동물에게 내부투여하기에 적합한 약학적 활성화합물을 제형하는데 유용한 공지의 약학적 부형제를 의미하는데, 이는 사용 조건하에서 거의 비독성이며 민감성이 없어야 한다. 이 조성물은 정제, 캅셀, 코프드롭, 로젠지, 트로키제, 좌제, 용제, 엘릭서제, 시럽, 에멀젼, 분산제, 습윤 가능한 기포형분제, 멸균주사제를 제형하는데 사용되는 공지의 방법으로 제조할 수 있으며, 목적한 특정형태의 조성물을 제조하는데 유용한 부형제 등을 함유할 수 있다. 포스페이트를 액형조성물로 제형할 때는 염의 침전을 막기 위해 불용성 포스페이트 염을 형성하는 양이온이 액형 조성물내에 없어야 한다.

본 화합물은 다른 활성성분 또는 다른 진해 또는 진통제와 함께 투여할 수 있다. 다른 활성성분의 예를 들면 항히스타민제, 충혈제거제, 거담제, 점약용해제, 기관지확장제 및 항균제 또는 국소마취제 등이 있다. 일반적으로 이들의 복합된 형태가 다른 증상을 동반한 기침이나 통증을 치료하는데 유효하다.

특히 바람직한 조성물은 트로치, 로젠지, 정제, 캡셀 같은 고형이나, 일정한 부피의 약제 등의 용량단위로, 진해제의 경우 각 단위당 약 0.1 내지 약 20 내지 30 내지 40mg의 글라우신 염을 함유하여, 진통제의 경우 약 0.1 내지 약 30 내지 약 60mg의 글라우신염을 함유하도록 제조된 것이다.

[실시예 1]

d,l-글라우신 포스페이트의 제법

A. 43.5g(0.1몰)의 글라우신 하이드로 브로마이드를 분리용 펀넬내에서 200ml의 탈염수에 현탁시킨다. 50ml의 수성 10% 수산화나트륨을 가하고 생성된 혼합물을 매회 100ml의 클로로포름으로 2회 추출한다. 합한 클로로포름추출물을 무수황산나트륨으로 건조시킨후 여과하고 감압하에 농축, 건조시켜 백색 고형의 d,l-글라우신 염기를 잔류물로서 수득한다. 융점 : 139℃, 수율 : 96%. 필요한 경우에 따라, 에틸아세테이트로 재결정시켜 더욱 정제할 수 있다.

B. 3.6g(0.01몰)의 d,l-글라우신 염기를 150ml의 알콜 USP(95% 에탄올, 5% 물)에 60℃로 가온하면서 녹이고, 100ml의 알콜 USP(95% 에탄올, 5% 물)에 12.0g(0.022몰)의 인산(물중의 85% 인산)을 분산시킨 용액을 교반하면서 20분에 걸쳐 서서히 가한다. 인산을 가하는 동안 d,l-글라우신 포스페이트 생성물이 침전으로 나타난다. 생성물을 여과하여 분리시킨다. 이 생성물의 융점은 240℃(분해)으로 나타났다. 백색 결정성 고체 생성물을 물중의 80% 에탄올과 혼합하고 환류온도로 가열한 후 주위온도로 냉각시켜서 재결정시킨다.

이어서 재결정시킨 생성물을 디에틸에테르 3부/에탄올 1부의 혼합물에 취하여 교반하고 여과하여 분리시킨 다음 건조시킨다. 이때 융점은 247℃(분해)로 나타났다.

수 율 : 94.3%

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄11/2 H₃PO₄

계 산 치 : C50.2, H5.91, N2.79

실 측 치 : 50.29, 6.03, 2.93

따라서 원소분석은 구조식(d,l-글라우신)₂·3H₃PO₄와 일치함을 알 수 있다[1 : 1 글라우신 포스페이트(C₂₁H₂₅NO₄·H₃PO₄)에 대한 원소분석의 이론치는 C55.63, H6.22 및 N3.09이다].

디퍼런설 스캐닝 칼로리메트리에 의하여 생성물은 247℃에서 단일의 큰 피크를 나타내며, 221℃에서 디-d,l-글라우신 포스페이트로 생각되는 단일의 작은 피크가 약 5% 이하를 차지하는 순도가 95% 이상인 것으로 판명되었다. (d,l-글라우신)₂·3H₃PO₄결정은 봉상 또는 침상의 불연속적 백색 결정이다.

C. 유사한 방법으로, 2g의 l-글라우신 하이드로 브로마이드를 물에 현탁시키고 5ml의 수성 10% 수산화나트륨을 가한후 혼합물을 매회 50ml의 클로로포름으로 2회 추출한다. 추출물을 탈수, 여과한후 증발, 건조시킨다. 생성된 l-글라우신 염기를 실시예 1B와 유사한 방법으로 0.25몰의 인산과 반응시킨다. 결정성 생성물을 분리시키고 5ml의 95% 에탄올 5에 녹인후 디에틸에테르를 가하여 재침전시키고 에탄올로 2차 재결정시킨다. 백색 결정성(l-글라우신)₂·3H₃PO₄-[l-글라우신 포스페이트(2 : 3)] 생성물의 융점은 242.9℃(분해)로 나타났다. 에탄올로 추가 재결정시킨후 생성물의 융점은 253℃로 나타났다.

D. 유사한 방법으로, 250ml의 USP 알콜중의 56.8g의 d,l-글라우신을, 500ml의 USP 알콜중의 32g의 85%인산 용액중에 가하여 반응시킨다. 생성물은, 디퍼런설 스캐닝 칼로리 메트리에 의해 두개의 피크, 즉 245℃에서 하나의 피크, 219℃에서 더 작은 하나의 피크(이는 디-d,l-글라우신 포스페이트로 믿어짐)가 나타내는 것을 알 수 있다. (d,l-글라우신)₂·3H₃PO₄생성물을 120℃에서 하룻밤 건조시키고 원소분석한 결과 C, H, N, O의 함량이 각각 50.66, 6.06, 3.23, 30.09이며, 인(P)의 함량은 10.07인 것으로 나타났다.

C₂₁H₂₅NO₄·1 1/2 H₃PO₄의 원소분석이론치는 C : 50.20, H : 5.91, N : 2.79, O : 31.85, P : 9.25이다.

E. 유사한 공정으로 d,l-글라우신 포스페이트를 제조한다.

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄·1.4H₃PO₄

계 산 치 : C51.15, H5.97, N2.84, P8.8

실 측 치 : 50.80, 6.00, 2.95(4개의 평균치), 8.22

F. 융점이 245.2℃인 실시예 1D의 d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)을 3부의 디에틸에테르/1부의 에탄올 혼합물로 충분히 세척하고 건조시킨다. 이때의 융점은 250.7℃로 나타났다. 세척된 결정과 세척되지 않은 결정의 혼합물의 융점은 242.2℃인데, 이로써 두종의 글라우신 포스페이트 제제중에 다른 결정성 용매화물이 존재함을 알 수 있다.

G. 1g(0.0028몰)의 d,l-글라우신을 30ml의 증류된 아세톤중에 녹이고 0.3g(0.003몰)의 85% 인산을 가한다. 생성된 백색 침전물을 여과하여 회수하고, 20ml의 무수 아세톤으로 세척한 후 공기건조시키고 50내지 55℃에서 진공하에 하룻밤 건조시킨다. 생성물인 글라우신 포스페이트(1g)의 융점은 240 내지 243℃로 나타났다.

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄·1 1/2 H₃PO₄

실 측 치 : C51.2 H6.07 N2.96

계 산 치 : 50.2 5.91 2.79

20ml의 아세톤중의 0.6g의 d,l-글라우신과 0.4g의 인산을 사용하여 유사하게 진행시키고, 세척 및 공기건조시킨 생성물을 60℃에서 진공하에 2 1/2일간 건조시킨다. 글라우신 포스페이트의 융점은 240 내지 242℃로 나타났다.

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄·1.6H₃PO₄

실 측 치 : C49.3 H5.91 N2.76

계 산 치 : 49.24 5.86 2.73

H. 2.5971kg(5.95몰)의 d,l-글라우신 브로마이드, 10.0l의 탈염수 및 3.5l의 메틸렌클로라이드를 혼합한다. 이를 빠르게 교반하고 500ml의 50% 수산화나트륨을 서서히 가한다. 수산화나트륨을 100ml의 탈염수로 세척한다. 혼합물을 15분간 교반하고 교반을 중지시킨 다음 10분간 정치시켜 층을 분리시킨다. 메틸렌클로라이드층을 회수하여 저장한다.

수성층을 3.5ℓ의 메틸렌클로라이드와 혼합하고 혼합물을 15분간 빠르게 교반한다. 이 혼합물을 10분간 정치시켜 층을 분리시킨 후 메틸렌클로라이드층을 회수하고 200ml의 메틸렌클로라이드를 추가로 수성층에 가한다. 메틸렌클로라이드층을 회수하고 메틸렌클로라이드층을 모아 3ℓ의 탈염수와 혼합한다.

생성된 혼합물을 15분간 빠르게 교반하고 15분간 정치시켜 층을 분리시킨다. 메틸렌클로라이드층을 회수하여 저장한다. d,l-글라우신염기의 메틸렌클로라이드 용액을 1.4235kg(12.35몰)의 85% 인산을 9.81의 톨루엔-변성 무수에탄올에 녹여 잘 교반시킨 용액에 가한다. 농밀한 백색 슬러리가 형성된다. 이 슬러리를 15분간 교반하고 질소 대기하에서 14내지 16시간동안 정치시킨다. 이어서 교반을 시작하고 슬러리를 3ℓ의 소결된 유리펀넬중에 붓는다. 생성된 고체를 큰 유리 건조접시에 놓고 공기 건조시킨 후 50 내지 65℃에서 진공 건조시켜 2.902kg(97.1%)의 d,l-글라우신포스페이트를 수득한다.

22ℓ들이 플라스크에 1,500kg의 d,l글라우신 포스페이트와 15ℓ의 80% 톨루엔-변성 무수에탄올(물 20%)을 넣고 교반한 후 질소 대기하에서 가열, 환류(78℃)시킨다. 슬러리를 5 내지 6시간 환류시키고 22 내지 25℃로 냉각시킨다. 이어서 슬러리를 서서히 3ℓ의 소결된 유리펀넬에 넣고 생성된 고체를 공기-건조시킨다. 고체를 3ℓ의 톨루엔-변성 무수 에탄올로 충분히 세척하고 다시 공기-건조시킨다. 고체를 50 내지 65℃에서 진공 건조시켜 1.375kg(91.7% 회수율)의 d,l-글라우신 포스페이트를 수득한다. 디퍼런셜스캐닝 칼로리메트리에 의해 생성물은 단일 피크를 나타내는 것으로 판명되었으며 융점은 253℃로 나타났다.

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄·1.5H₃PO₄

계 산 치 : C50.2 H5.91 N2.79

실 측 치 : 50.2 5.97 2.67

I. 상술한 바와 같이 제조된 l-글라우신 포스페이트를 에탄올로 3회 재결정시켜 미세한 분말상 결정형태의 정제된 염을 수득한다.

원소분석 : C₂₁H₂₅NO₄·1.5H₃PO₄

계 산 치 : C50.2 H5.91 N2.79

실 측 치 : 50.20 5.91 2.73

J. d,l-글라우신 포스페이트의 결정 밀도는, 벤젠과 사염화탄소의 혼합용액에 d,l-글라우신·1.5H₃PO₄의 결정 4개이상을 현탁시킨 후, 벤젠 및 사염화탄소의 비율을 조절하여 현탁된 결정의 밀도와 같도록 만들고, 비중병을 사용하여 동일-밀도의 현탁액을 생성시키는 혼합용액의 밀도를 측정함으로써 측정한다. 이렇게 하여 측정된 결정밀도는 1.460g/cm³이다.

d,l-글라우신·1.5H₃PO₄결정의 단위 셀 상수(unit cell constants)는 단일 결정 X-레이 크리스탈로그라피로 측정한다. 셀크기는 a=89.854Å 단위, b=8.565Å 단위 및 C=23.830Å 단위이며 결정은 93.7°의 β각을 가진 단사정으로 나타났다. 이론적 밀도는 다음 식으로 계산한다.

(여기서 최소겉보기 셀용적 V=1/8abc sinβ=2.286Å³단위(2.286×10^-21cm³)이고 Z는 작은 셀 용적당 4개의 분자를 말한다.)

(1 : 1) 글라우신 포스페이트의 경우 계산된 이론적 밀도는 1.319g/cm³이다. (1 : 2)염, 글라우신디포스페이트의 이론적 밀도는 1.602g/cm³이다. (2 : 1)염, 디글라우신 모노포스페이트의 이론적 밀도는 2.3g/cm³보다 크다. d,l-글라우신·1.5H₃PO₄의 이론적 결정 밀도는 1.460g/cm³이며, 이는 측정된 결정밀도에 상응한다.

[실시예 2]

몰모트 각 그룹에 시험화합물을 여러가지 용량으로 경구투여하고 대조군에는 증류수를 투여한다. 투여한 1시간후 몰모트를 10분간 5% 시트르산 에어로솔에 노출시킨다. 시트르산 에어로솔에 노출시킨 마지막 5분간에 일어난 기침 회수를 기록하고 몰모트 50%에서 기침억제하는 유효투여용량(ED₅₀)을 계산한다. 진해효과는 5분간의 시험기간동안 총 기침회수가 대조그룹의 몰모트당 평균 기침회수 이하로 적어도 2표준편차단위일때 기록한다. 이 조작에서 코데인 포스페이트는 ED₅₀이 86.6mg/kg ; d-글라우신 하이드로브로마이드는 ED₅₀이 89.0mg/kg ; d-글라우신 포스페이트는 ED₅₀이 170.1mg/kg ; d,l-글라우신 포스페이트[(d,l-글라우신)₂·3(H₃PO₄)]는 ED₅₀이 17.8mg/kg ; 및 l-글라우신 포스페이트 [(l-글라우신)₂·3(H₃PO₄)]는 ED₅₀이 10.9mg/kg인 것으로 나타났다.

코데인 포스페이트, d,l-글라우신 포스페이트 및 l-글라우신 포스페이트에 있어서 측정한 ED₅₀의 95% 신뢰한계(confidence limit)는 각기 52.3 내지 232.6, 6.0 내지 53.1 및 0.4 내지 33.8이다. 이 데이타로써 이 시험에서 글라우신 포스페이트가 코데인의 효능에 비해 약 4 내지 8배로 강함을 알 수 있다.

[실시예 3]

실시예 2와 유사한 방법으로, 각 시험 화합물을 몰모트에 복강내 주사로 투여하고 한 그룹에는 대조그룹으로써 증류수를 투여한다. 진해활성을 측정하기 위해, 실시예 2에서 기술한 바와 같이 시트르산 에어로솔 시험으로 ED₅₀을 계산한다. 코데인 포스페이트는 ED₅₀이 10.9mg/kg ; d-글라우신 하이드로브로마이드는 ED₅₀이 10.0mg/kg ; d,l-글라우신 포스페이트[(d,l-글라우신)₂·3(H₃PO₄)]는 ED₅₀이 17.3mg/kg인 것으로 나타났다.

[실시예 4]

코프시럽 베히클제제는 다음과 같은 약학적으로 허용되는 부형제를 함유하도록 제조한다.

물을 적당량 가하여 총량을 41로 함.

상기 코프시럽 베히클에서의 d,l-글라우신 하이드로브로마이드의 용해도는 0.3%, 또는 약 15mg/5ml투여용량단위인 것으로 나타났다. d,l-글라우신 포스페이트의 용해도는 1%, 또는 약 50mg/5ml 투여용량 단위인 것으로 나타났다.

[실시예 5]

d,l-글라우신 포스페이트의 안정도는 실시예 4의 시럽베히클내에서 조사하였다.

주위온도 40℃ 및 55℃에 1개월후, 0.6%의 d,l-글라우신 포스페이트가 함유되도록 제형된 시럽은 각기 최초 글라우신 농도의 101.3%, 100.0% 및 98.4%가 유지되는 것으로 나타났다.

0.2% 코데인 포스페이트가 함유된 시럽은 주위온도, 40℃ 및 55℃에서 1개월둔 후 각기 97.5%, 104.5% 및 100%가 유지된 것으로 나타났으며, 0.2% d,l-글라우신 하이드로브로마이드가 함유된 시럽의 경우 주위온도, 40℃ 및 55℃에서 1개월후 각기 99%, 96% 및 89.5%이었다. 3개월후 남아있는 진해제의 양(%)은 다음과 같다.

55℃에서 12개월후 포스페이트염을 분석한 결과 101.8%이었고 하이드로브로마이드는 87.3%이었다.

[실시예 6]

실시예 5와 유사한 방법으로, 시럽제제를 제조하여 호박색 유리병과 투명한 유리병에 담고 주위온도에서 계속적으로 빛에 노출시킨다(형광 및 백열광을 합해 약 2000촉광으로 24hr/일동안).

일개월후 호박색 유리병의 d,l-글라우신 하이드로브로마이드 분석치는 84%이었고 투명 유리병의 것은 74.5%이었다. 호박색 유리병중의 d,l-글라우신 포스페이트 분석치는 97.7%, 투명유리병의 경우는 90%였다. 코데인 포스페이트는 두가지 용기에 있어 100% 분석치로서 안정한 것으로 나타났다.

유사한 조작에서, 결정성 글라우신 포스페이트(2 : 3)염은 40℃에서 2개월후 원래 글라우신 함량의 98%이상이 유지되는 것으로 나타났다.

[실시예 7]

d,l-글라우신 포스페이트 남용성은 원숭이를 사용하며 다음 문헌에 기술된 방법으로 시험하였다[참조 : Deneau 등의 Psychopharmacologia 16(1), 30-48, 1969].

이 조작에서는, 시험 원숭이를 감금하고 원숭이가 지렛대를 압박하는 반응을 보기 위하여 시험물질을 주입할 카테터(catheter)를 외경동맥에 삽입시킨다. 먼저 시험원숭이를, 한번 주입당 100마이크로그램/kg의 비율로 코데인을 자가-투여하도록 습관화시킨다. 이렇게 훈련되고 습관화된 두 마리 원숭이의 자가투여율은 100마이크로그램의 코데인양에서 지렛 약 100 내지 150번 지렛대 밀기/2시간으로 나타났다.

d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)를 코데인 대신 사용할 경우, 원숭이 반응율은 50,100,200 및 400마이크로그램/kg 주입시 코데인을 사용한 경우 100 내지 150/2시간에서 d,l-글라우신 포스페이트 대치후 10내지 20반응횟수/2시간으로, 감소된 것으로 나타났다.

[실시예 8]

물리적 의존도는 다음 문헌에 기술된 방법으로 마우스를 사용하여 평가한다[참조 : Saelens 등의 Arch. Int. Pharmacodynam, 190 : 213-218, 1971]. 이 과정에서, 시험 화합물의 용량을 간격을 두고 연이틀간 증가시키며 마우스에게 투여한다. 제2일의 마지막 용량을 투여한후, 몰핀 길항약인 나록손을 100mg/kg으로 복강내 주사하고 마우스에서 아편 투여 중지시 나타나는 특징적 점프행동 또는 몰핀 길항작용을 관찰한다. 이들 조작에서 몰핀설페이트는 마우스에서 흥분 및 스트라웁 테일(straub tail) 현상을 나타내며, 나록손 처리후 9마리 마우스중 5마리가 점프(총 96회 점프)하였다. 코데인 포스페이트는 스트라웁 테일현상 및 흥분을 나타내고, 나록손에 의해 유도된 점프가 6마리중 2마리에서 나타났다(총 23회 점프).

d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)은 최고용량(100mg/kg)에서 8마리의 마우스중 한마리도 스트라웁 테일현상 및 점프반응을 나타내지 않았다.

[실시예 9]

여러가지의 d,l-글라우신염을, 증류수에 녹인 0.2%(w/v)/용액으로서 제조한다. 여러가지 염용액 수적을 혀에 떨어뜨려 맛을 평가한다. 코데인 및 덱스트로 메토르판 같은 약제를 함유하는 제제의 맛에 익숙한 훈련된 맛시험자의 맹시험을 포함하는 이들 조작에서, 하이드로브로마이드는 시간에 따라 증가하는, 쓰고 자극성이 있으며 금속성 초기 맛을 가지는 불유쾌한 맛을 나타내었다.

설페이트, 말리에이트, 시트레이트, 아세테이트 및 p-톨루엔설포네이트염은 하이드로브로마이드와 유사하며 유사하게 불유쾌한 맛을 나타내었다.

살리실레이트 및 석시네이트염은 하이드로브로마이드보다 더 불유쾌한 맛을 나타내는 것으로 나타났다. d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)은 자극성이 있는 금속성 맛을 나타내지 않으며, 불유쾌하지 않은 것으로 나타났다.

[실시예 10]

A. 방향성 코프시럽 제제는 다음의 성분을 함유하도록 제조한다.

정제수 usp를 적당량 가하여 총 100ml로 만듬.

이 시럽은 0.6%(w/v)의 d,l-글라우신 포스페이트를 함유하며 5ml의 용량단위(1티스픈)은 30mg의 활성포스페이트염을 함유한다. 시럽은 금이 새겨진 5ml 들이 얇은 막의 주머니에 넣어서 봉하거나 통상의 유리병에 충진시킬 수 있다. 5ml의 용량당 15mg 및 20mg의 용량단위는 d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3) 또는 l-글라우신 포스페이트(2 : 3) 또는 이의 혼합물 300 내지 400mg을 사용하여 만들 수 있다.

B. 정제는 다음과 같이 제조한다 :

40g의 l-글라우신 포스페이트, 150g의 변성전분(sta-Rex 1500)을 혼합하고 충분량의 수성알콜(75%의 물+25%의 에탄올)로 입화하여 과립을 제조한다. 이 과립을 건조시키고 15g의 전분 usp, 1.5g의 스테아르산(40메쉬), 0.5g의 수소화된 식물성유(40메쉬), 3g의 콜로이드성 이산화실리콘 및 미세결정성 셀룰로오즈 적당량과 혼합하여 총 300g으로 만든다. 성분들을 혼합하고 11/22인치 정제다이를 사용하여 300mg의 정제로 타정한다. 정제는 각각 40mg의 l-글라우신 포스페이트를 함유한다.

C. 캅셀은 5g의 d,l-글라우신 포스페이트, 5g의 l-글라우신 포스페이트, 3g의 콜로이드성 실리카, 2g의 스테아르산 및 285g의 락토오즈를 혼합하고 혼합물을 캅셀당 300mg씩으로 2호 젤라틴캅셀에 충진시켜 제조한다.

이렇게 하여 제조된 캅셀은 캅셀당 10mg의 글라우신 포스페이트를 함유한다. 15, 20 또는 25mg과 같은 보다 큰 단위용량은 15, 20 또는 25g의 글라우신 포스페이트 및 락토오즈 적량을 가하여 300g으로 하여 제조할 수 있다. 보다 소용량도 유사하게 제조한다.

D. 트로키제는, 30g의 d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3), 435g의 분말상 슈가 및 35g의 분말상 아카시아를 혼합하고 충분량의 물을 가하여 유연한 덩어리를 형성시켜 덩어리를 원주형 통에 밀어 넣은 후 0.5g 크기로 나누어 제조한다.

[실시예 11]

다른 조작에서는, 여러가지 용량의 d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)를 마우스군에 경구투여 또는 복강내 주사로 투여하여, 마우스의 50% 치사량(LD₅₀)을 투여후 72시간 이내에 관찰된 사망율로부터 산출한다.

복강내 주사에 대한 LD₅₀은 178mg/kg이고, 경구투여에 대한 LD₅₀은 681mg/kg 이상으로 나타났다.

이들 데이타 및 실시예 2 및 3에서 측정된 ED₅₀의 데이타로부터, 포스페이트염이 경구진해활성에 대해 38의 치료율(LD₅₀/ED₅₀)을 나타내며, 복강내 활성에 대해 10의 치료율을 나타내는 것을 알 수 있다.

다른 조작에서는, l- 및 d-글라우신 포스페이트(2 : 3)를 각 몰모트에게 경구투여한 후 l- 또는 d-글라우신의 혈장내 농도를, 일정한 간격으로 측정한다. 이 데이타로써, l-글라우신 포스페이트는, 투여한후 15분내에 높은 글라우신 혈장농도를 생성시키며, 혈장농도는 일반적으로 2시간의 시험기간에 걸쳐 d-글라우신의 혈장농도보다 3 내지 6배로 높게 유지된다는 것을 알 수 있다.

[실시예 12]

시험화합물의 진통활성은 다음 문헌에 기술된, 페닐-p-퀴논 마우스 뒤틀림 시험으로 평가한다[참조 : Hender Shot & Forsaith, J. Pharmacol. Exptl. Therap. 125(3), 237 (1959)]. 시험 화합물을 투여하고 30분후 페닐-p-퀴논을 투여한다. 이 조작에서, d-글라우신·HBr, 코데인 포스페이트 및 d,l-글라우신 포스페이트(2 : 3)에 대한 ED₅₀(경구투여)은 각각 34.0, 21.1 및 23.0mg/kg인 것으로 나타났다.

Claims

유리염기 형태의, l-글라우신, d,l-글라우신 및 이들의 혼합물로부터 선택된 화합물을 과량의 인산과 반응시킴을 특징으로 하여 l-글라우신, d,l-글라우신 및 이의 혼합물 중에서 선택된 화합물의 포스페이트염을 제조하는 방법.