KR810001233B1 - 안정한 1α-히드록시 비타민 D류 함유 유성 제제의 제법 - Google Patents

Abstract

내용 없음

Description

안정한 1α-히드록시 비타민 D류 함유 유성 제제의 제법

첨부 도면은 시판품의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드와 본 발명에 의한 제제를 각각 고속 액체 크로마토그래피한 비교 그래프

본 발명은 1α-히드록시 비타민 D류를 함유하는 안정한 경구 투여용 유성 제제의 제법에 관한 것이다.

근년에 와서 1α위치에 수산기를 갖는 여러가지의 1α-히드록시 비타민 D류의 강한 비타민 D양의 생물 활성이 주목되고 있다. 그러나, 이 비타민 D류는 그 생물 활성이 극히 강하기 때문에 의약으로서의 1회의 투여량이 극히 소량이고, 제제중에서의 분산이 특히 균일하여야 한다. 그러기 때문에 제제화하는 방법으로서는 1α-히드록시 비타민 D류를 유성기제(機制)에 용해시켜 유성 용액으로 한느것이 제제중의 분산성으로 보아 적합하고, 특히 유성 용액을 연질 캅셀화합으로써 경구 투여용 제제로서의 사용성이 한층 더 향상한다. 그러나 전기한 바와 같이 1α-히드록시 비타민 D류의 의약으로서의 투여량이 극히 소량이기 때문에 (제제하에 사용하는 유성기제는 1α-히드록시 비타민 D류의 10⁴내지 10⁵배량이 됨)사용하는 유성기제의 품질 여하에 따라서는1α-히드록시 비타민 D류의 안전성이 좌우되며 그 생물활성이 크게 손상되는 결과가 된다. 또한 ,1α-히드록시 비타민 D류는 빛, 특히 자외선에 극히 불안정한 물질이므로 제제화상의 취급은 조심스럽게 행하지 않으면 안되며, 유성 용액의 제조 및 연 캅셀화 조작은 완전한 차광하에 시행된다. 그리고 이들 제제는 자외선 뿐만아니라 가시 광성하에서 불안정하여 제제화된 유성 용액아니 연질 캅셀은 경시적으로 그의 생물 활성이 크게 손실된다. 이것을 방지하기 위하여는 저장이나 수송을 냉암소에 행할 필요가 있고 따라서 그 취급이 극히 번잡하다.

본 발명자들은 이와같은 실정을 감안하여 1α-히드록시 비타민 D류의 안정한 제제, 특히 유성 기제에 관하여 여러가지로 연구한 결과 ,지방산의 트리클리세라이드, 특히 포화 중쇄 지방산의 트리클리세라이드가 1α-히드록시 비타민 D류의 분산성에 월등하고 또한 장벽(腸壁)으로부터의 흡수로 우수하다는 사실을 밝혀 내었다. 이 자방산의 트리글리세라이드를 사용하여 1α-히드록시 비타민 D류의 유성용액을 제제하고 통상법에 의하여 연질 캅셀화하며 동시에 자외선을 차단하는 투명 필름으로 피복함으로써 자외선에 대하여 안정하고 장벽으로부터의 흡수가 양호한 유성 제제가 얻어졌다. 그러나, 이와같은 제제로서도 가시광선하에 있어서의 불안정성을 해소되지 않았다. 이것은 현재 시판의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드가 그 원료를 천연산품에 의존하고 있고 통상의 분리, 정제 수단으로는 1α-히드록시 비타민 D류와 같이 불안정하고 극미량이기는 하나 안정성에 영향을 주는 물질의 제거가 불가능하기 때문이다. 본 발명자들은 시판의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 수차에 걸쳐, 증류 탈색 등의 수단을 강구하여 정제를 시도하였는데, 그것을 기제로한 1α-히드록시 비타민 D류의 유성제제는 여전히 광선하에 있어서도 불안정하고 경시적으로 생물 활성이 손실되었다.

본 발명자들은 다시 연구를 거듭하는 고정에서 가경스럽게도 1α-히드록시 비타민 D류를 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드에 용해시키기전에 그 포화 중쇄 지방산의 글리세라이드에 자외선을 조사함으로써 극히 안정된 1α-히드록시 비타민 D류의 유성 용액이 얻어지는 사실을 밝혀내었다. 또한, 자외선 조사처리를 행한 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 고속 액체 크로마토그래피에 의한 어떤 종류의 조건하에서의 측정에 있어서 특징적인 피이크 변화가 인정된다는 점, 그리고 이 피이크 변화와 1α-히드록시 비타민 D류의 유성 용액의 안정성 사이에 명백한 상관성이 있다는 점을 밝혀내어 이와같은 사실 규명에 입각하여 여러가지 검토를 거듭한 결과를 본 발명을 완성한 것이다.

즉 본 발명은 1α-히드록시 비타민 D류와 기제로서 고석 액체 크로마토그래피를 사용하여 후기하는 시험에 2의 a) 및 b)에서 나타내는 측정 방법에 의하여 유지시간 2분 50초 부근으로 검출되는 피이크 높이가 내부 표준 물질로서 a) 및 b)와 동일 방법으로 측정한 아미노 안식 향산 에틸의 1.5×10^-10를의 피이크 높이보다도 작은 포화 지방산의 트리클리세라이드를 이루어지는 안정한 경구 투여용 1α-히드록시 비타민 D류 함유 유성 제제와 그의 제조법에 관한것이다.

본 발명의 1α-히드록시 비타민 D류 함유 유성제제의 제조는 기제로서의 포화중쇄 지방산 트리글리시리드를 광조사 처리한 후, 이것에 1α-히드록시 비타민 D류를 통상법에 의하여 용해시킴으로써 이루어진다. 조사 광원으로서는 태양광을 비롯하여 키세는 램프광, 수은 램프장, 형광등광 등 290mm이상의 파장의 파선을 포함하는 것은 모두 사용할 수 있다. 조사 시간은 광원의 종류 및 광도에 의하여 다르며, 수시간 내지 수십시간, 바람직하기로는 1내지 60시간 범위에서 적절히 선택된다. 또한, 광조사를 행함에 있어 사용하는 포화중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 불활성 가스로 치환하여 무용존 산소 상태에서 시행하면 단시간의 조사로 1α-히드록시 비타민 D류의 안정한 유성 기제가 얻어지는데, 유산소 상태로도 장시간 조사하면 거의 동등한 효과를 얻을 수 있다.

본 발명에 있어서 1α-히드록시 비타민 D류라 함은 1α위치에 수산기를 갖는 비타민 D류를 말하는 것으로 구체적으로는 1α-히드록시 비타민 D₃, 1α , 25-디히드록시 비타민 D₃,1α,24-디히드록시 비타민 D₃,1α,24,25-트리히드록시 비타민 D₃등이다. 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드이다.

이하에 본 발명을 더욱 상세히 설명하기 위하여 실험에 및 실시예를 들겠으나 본발명이 이들에 한정되는 것이 아님을 물론이다.

[시험예 1]

광조사 처리한 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드와 시판품과의 성분비의 차이를 고속 액채 크로마토그래피를 사용하여 비교하였다.

ODO일본국 닛세이 세이유사(世離油社) 제품: 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 50ml의 무색 유리앰푸올에 50ml충전하여 헬륨 가스를 150ml/분으로 1분간 치환시켜 융봉하고 이것을 키세는 램프(1.5KW)를 사용하여 각각 2,8,24,48시간 광조사 처리하였다. 얻어진 광조사 ODO와 시판 ODO와의 성분비의 차이를 고속 액체 크로마토그래피(일본국 워타즈리 및 티드 제품 AL[/GDC형(를 사용하여 이하와 같은 측정조건으로 비교하였다.

[측정조건]

결과를 첨부 도면에 나타낸다. 도면에 있어, (가)는 시판품의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드의 고속액체 크로마토그래피이고, (나),(다)(라)(마)는 (가)를 헬륨가스로 치환한 후 키세논 램프(1.5KW)로 각각 2,8,24,48시간 광조사 처리한 것의 고속 액체 크로마토그래피이다.

이 도면에서 명백한 바와 같이 조사 시간과 유지 시간 3 내지 6분 부근까지에 검출되는 피이크 높이의 사이에 명확한 상관성을 알아볼 수 있다.

[실험예 2]

상기 실험예 1에서의 측정 조건으로는 피이크가 복수개로 되기 때문에 그 면적을 정확히 계측하기가 곤란하고 또한, 이하에 기재하는 바와 같은 측정 조건으로 유지시간 2분 50초 부근에서 검출되는 피이크 높이를 측정하면 피이크 높이와 대응하는 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 기제로 사용한 1α-히드록시 비타민 D류 제제의 안정성과의 사이의 상관성이 명확해진다. 이 결과를 표로 나타낸다.

a)측정 조건

고정상 : 마이크로 포라실 컬럼

이동상 : 액체 크로마토그래피용 클로로포롬 : 액체 크로마토그래피용 아세트니트릴 =8:2

이동상 유속 : 1m/분

검출기 : 자외선 흡광 광도제 254m

검출 감도 : 0.02

b) 측정 방법

포화 중쇄 지방산의 트리클리세라이드를 정밀하게 계량하여 이동상과 동일 조성 용지를 가하여 정확히 희석 용해하여 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드로서 0.3μg 상당량을 시료로 한다.

표에 나타내는 각각이 피이크 높이는 측정기, 이동상, 측정 환경 등의 차이에 따라 측정 오차를 제거하기 위하여 내부 표준 물질로서 제9개정 일본 약국방의 아미노 안식향산 에틸을 포화 지방산의 트리글리세라이드의 측정과 동일 조건으로 측정하여 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드와 동등한 높이가 되는 아미노 안식향산 에틸의 물 농도롤 나타낸다. 또한, 표에 있어서의 잔존률은 실시예에 있어서 조제한 가각의 1α-히드록시 비타민 D₃함유 캅셀을 40˚C 항온조에서 60일간 가열 가속한 시료 및 연 캅셀의 표면을 차외선 차단 투명 필름으로 피복하여 조도 500 럭스의 형광등 아래에서 600시간 각 시료와 함께 동일 조전에서 폭로시킨 시료에 관하여 각각의 1α-히드록시 비타민 D₃의 양을 정량하고 ,가속전 또는 폭로전 것의 각 시료의 1α-히드록시 비타민 D₃의 양을 100으로 한 경우의 비율이다.

[표]

표에서 명백한 바와 같이 포화 중쇄 지방산의 트리글리세리이드의 피이크 높이와 그것을 사용한1α-히드록시 비타민 D류 제제의 안정성과의 사이에는 현저한 상관성이 있고, 피이크 높이가 낮아짐(아미노 안식향산 에틸로서의 물 농도가 감소됨)에 따라, 그의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 사용한 1α-히드록시 비타민 D류의 안정성이 월등하다는 결과를 나타내고 있다. 또한, 시판의 포화 중쇄 지방산의 글리세라이드는 2.5×10^-10몰 이상의 수치르 나타내어 1α-히드록시 비타민 류의 안정성이 극히 낮은데 대하여 자외선을 일정 시간 이상 조사한 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드의 측정치는 1.5×10^-10몰 이하이며, 그것을 사용한 1α-히드록시 비타민 D류 제제의 안정성도 극히 양호한 것으로 되었다.

[실시예 ]

시판의 3종의 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드의 트리글리세라이드(표의 시료 번호 1내지 3)에 각각 1α-히드록시 비타민 D류을 10μg의 농도로 용해하여 1캅셀 중에1α-히드록시 비타민 D₃으로서의 1μg함유하도록 연 캅셀 제조기를 사용하여 통상법에 의하여 투명한 캅셀을 제조하였다. 별도로 시료 3과 동일 시판품을 50ml의 무색 앰푸율에 충전하고 헬륨가스 150ml분으로 1분간 치환시켜 용봉한 후, 키세논램프(1.5KW)로 12,24,48시간 광조사하고, 이하 이광조사 처리한 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 사용하여 시판품과 동일하게 연질 캅셀을 제조하였다.(시료 번호 4내지 6)

Claims (1)

1. 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드를 광조사 처리하고, 이어서 광조사 처리한 포화 중쇄 지방산에 1α-히드록시 비타민 D류를 용해시킴으로써 이루어지는, 1α-히드록시 비타민 D류와, 기체로서 이하의 조건 즉

   a)고정상 : 마이크로포라실 커럼

   이동상 ; 액체 크로마토그래피용 클로로포롬 : 액체 크로마토그래피용 아세트니트릴(8:2)

   이동상 유속 : 1m/분

   검출기 : 자외선 흡광 광도제 254mm

   검출 감도 : 0.02

   b)포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드에 이동상과 동일 조건 용제를 가하여 희석 용해하여 포화 중쇄 지방산의 트리글리세라이드로서 0.3μg상당량을 시료로 함.

   의 조건하에서 고속 액체 크로마토그래피를 사용하여 측정하고, 유지 시간 2분 50초 부근에 검출되는 피이크 높이가 내부 표준 물질로서 상기 a)와 b)와 동일 방법에 의하여 측정한 아미노 안식향산 에틸의 1.5×10^-10몰의 피이크 높이보다도 작은 포와 중쇄 지방산의 트리글리세라이드로 이루어지는 안정한 경구 투여용 1α-히드록시 비타민 D류 함유 유성 제제의 제법

Images