KR20240080122A - 벌 화분 유래 엑소좀을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 상기 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 상기 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.
피부 노화에는 여러 가지 원인이 있는데, 특히 자외선과 호흡을 통해 생성되는 활성산소는 피부노화에 가장 중요한 원인으로 꼽힌다. 활성산소는 피부 세포 및 조직 손상을 주도한다. 정상의 경우 비정상적인, 노화된 세포를 사멸하여 균형을 만들지만 과하게 발생될 경우 피부 항산화 방어망을 파괴하고 지질 과산화, 단백질 산화, 세포간질 성분을 파괴, 콜라겐과 엘라스틴 등 피부 단백질을 파괴하며, 그 결과 탄력감소, 주름, 색소 침착 등 피부 노화로 이어진다. 최근 단백질 섭취와 피부 수분의 증가에 양의 상관관계를 입증하는 연구 결과 있으며, 영양학적인 측면에서 양질의 단백질 섭취가 피부건강에 밀접한 관련이 있다고 유추할 수 있다. 그러나, 식품을 통한 단백질 섭취가 피부에 미치는 영향은 미미한 수준에 불과하다.
항산화, 항노화 등의 특정 약리 작용을 가진 식물 추출물은 국내에 약 500여종 이상이 알려져 있지만, 대부분 피부에 미치는 효과가 검증되지 않은 상태이며, 식물추출물 안에는 수많은 성분들이 다양한 비율로 존재하고 있기 때문에 어떤 효과를 가진 유효물질을 찾는 것은 어려운 과정이다. 또한 식물 성분 중 효과를 나타내는 유효물질이 하나의 성분으로써 단독으로 작용할 수도 있지만 여러 성분들의 상호작용을 통해서만 그 효과가 나타날 수도 있다. 더욱이 기존 다양한 식물 추출물은 피부 장벽 통과가 어려워 단지 이를 피부에 바르는 것만으로는 효과가 제한적인 것으로 알려져 있다.
이에 따라, 부작용은 최소화하면서도 피부 미백, 산화 방지, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선, 항염 및 주름 방지 효과를 모두 극대화할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 또한, 피부 자극, 세포 독성 등의 위해 요소가 적어 함량의 제한 없이 사용할 수 있는 화장료 조성물에 대한 요구도 증가하고 있다.
한편, 엑소좀은 세포막의 구조와 동일한 이중인지질막으로 이루어진 수십 내지 수백 나노미터 크기의 소포체로서 세포가 분비하는 세포 간 신호전달 매개체로서 이를 통해 전달된 다양한 세포 신호는 표적 세포의 활성화, 성장, 이동, 분화, 탈분화, 사멸(apoptosis), 괴사(necrosis)를 포함한 세포 행동을 조절한다고 알려져 있다.
엑소좀은 유래된 세포의 성질 및 상태에 따라 특이적인 유전물질과 생체활성 인자들이 포함되어 있는데, 동물의 줄기세포에서 분리되는 엑소좀은 포함된 인자가 목적 이외의 효과를 나타낼 수 있으며, 엑소좀의 분리에 있어 줄기세포가 포함될 수 있다는 점에서 안정성의 문제가 있다. 그러나, 동물세포 유래 엑소좀의 안정성 문제는 식물세포의 엑소좀을 이용하는 것으로 해결될 수 있다. 이에, 식물세포의 엑소좀에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으나 아직 미진한 상태이다.
특히, 화분 추출물의 효능은 주로 항진균, 항균, 항바이러스 효과가 있음이 알려져 있고, 벌 화분에는 엑소좀 성분이 존재하나, 아직까지 벌 화분 유래 엑소좀 성분은 화장품 성분으로 쓰인 적이 없고 피부 안티에이징에 관한 연구도 거의 되어있지 않다.
본 발명의 주된 목적은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 제조하는 방법으로 제조된 벌화분 엑소좀을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 개선 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 벌 화분 엑소좀, 또는 이를 포함하는 조성물의 피부 개선 용도를 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시 형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한, 본 발명의 하나의 양태는 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "벌 화분 (Bee pollen)은" 일벌들이 꽃꿀(nectar)과 꽃가루를 수집할 때 꽃가루와 꽃꿀, 타액 등이 혼합된 것으로 일벌들은 이를 뒷다리에 부착시켜 벌통으로 운반하여 먹이로 이용한다. 상기 벌 화분은 20여종의 아미노산, 플라보노이드, 16가지의 천연 비타민, 미네랄 성분 등을 포함하고 있으며, 피로회복, 면역력 증가, 안티에이징, 항산화에 효과가 있어 최근 많은 관심을 받고 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "엑소좀 (exosome)"은 다양한 세포들로부터 분비되는 막 구조의 작은 소낭을 의미하며, 세포밖 소포체(Extracellular Vesicles, EVs)의 한 종류로 정의된다. 유전물질인 mRNA와 miRNA, 단백질, 지방, 대사물질 같은 다양한 생물학적 정보를 함유하고 있으며, 이러한 물질을 타깃 세포로 전달하여 세포기능 조절에 기여한다. 세포는 특정 메시지를 엑소좀 형태로 분비하고 엑소좀의 표면 Marker나 크기 등에 의해 특정 세포의 것으로 식별하는 것으로 알려져 있으며 기존 다른 종류의 입자들보다 높은 생체 적합성과 체내 안정성을 가진다. 엑소좀은 대부분의 인간을 포함한 포유류의 혈액, 소변, 타액 및 세포 배양액을 포함하는 모든 생물학적 유체에서 발견되었을 뿐 아니라 식물도 엑소좀(미세소낭)을 생성하는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "벌 화분 엑소좀 (Bee pollen exosome)"은 식물 유래 엑소좀의 하나로, 식물 유래 엑소좀은 식물 세포 자체가 분비하는 생리활성 및 신호전달물질이 들어있어 세포간의 이동과 흡수에 도움을 주는 천연 나노입자이며, 식물에서 정제한 엑소좀은 포유류 유래 엑소좀에 비해 독성이 없다고 알려져 있다. 구체적으로, 본 발명의 벌 화분 엑소좀은 벌 화분으로부터 유래된 엑소좀을 의미하는 것일 수 있다. 상기 용어는 벌 화분 소포와 혼용되어 사용될 수 있다.
본 발명에서는 상기 벌 화분 엑소좀에 정제수, 부틸렌글라이콜, 1,2-헥산다이올, 에틸헥실글리세린 등과 같은 용매를 투입하여 원료화 한 것을 벌 화분 엑소좀 원료라고 명명하였다.
본 발명의 조성물에 벌 화분 엑소좀 원료의 부피(v/v) %는 0.001 내지 20%, 0.001 내지 15%, 또는 0.001 내지 10%의 부피 %로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 벌 화분 엑소좀 원료 내의 벌 화분 엑소좀은 1X10^4 particle/ml 내지 1X10^12 particle/ml, 구체적으로 1X10^5 particle/ml 내지 1X10^11 particle/ml, 더욱 구체적으로 1X10^6 particle/ml 내지 1X10^10 particle/ml의 농도로 포함될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 조성물 내의 벌 화분 엑소좀의 중량(w/w) %는 0.0000001% 내지 1%, 0.0000001% 내지 0.1%, 0.0000001% 내지 0.01%, 또는 0.0000001% 내지 0.001%일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 피부 미백, 피부 탄력 증진 및 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 멜라닌 생성 억제 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 NO 생성 억제 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 세포 활성 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이포함된 조성물에 비해 콜라겐 합성 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어 "화분 추출물"은 화분을 다양한 용매에 침지한 다음 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 화분은 종자를 만드는 유관속 식물의 생식기관으로, 수컷 배우체를 보호하기 위해 견고한 껍질로 둘러싸여 있는 구조로서, 꽃가루라고도 불리우며 주로 바람이나 곤충에 의해 운반되어 수정한 후 종자를 형성한다. 화분은 곤충에 의해 매개되는 충매화분과 바람에 의해 매개되는 풍매화분이 있다.
본 발명의 용어 "벌 화분 추출물"은 일벌들이 꽃꿀(nectar)과 꽃가루를 수집할 때 꽃가루와 꽃꿀, 타액 등이 혼합된 벌 화분을 다양한 용매에 침지한 다음 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다.
본 발명의 용어 "식물 엑소좀"은 식물에서 추출된 50 ~ 200 nm 정도의 크기를 갖는 엑소좀 혹은 엑소좀 유사 세포외 소포체를 통칭한다. 식물 유래 엑소좀은 포유류 세포에서 분비되는 엑소좀에 비해 낮은 독성과 면역원성을 가지며, 콜레스테롤의 함량이 매우 적어 체내 안정성 및 생체적합성이 매우 높다고 알려져 있다. 뿐만 아니라 식물에서 유래한 항산화 성분 혹은 단백질 성분에 의해 식물 유래 엑소좀은 상처 치료 및 피부 재생 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서의 "피부 미백"이라 함은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써 피부 톤을 밝게 할 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부의 과색소 침착을 개선하는 것을 말한다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 멜라닌 생성 억제 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명에서의 "피부 탄력 증진"이란 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시켜주는 것으로, 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐(collagen)이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지되는 것을 말한다.
상기 용어 '증진'은 피부의 탄력의 효과가 더 좋아지는 거나, 촉진되거나, 나아지는 것을 모두 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 본 발명의 피부 탄력 증진은 본 발명의 조성물이 벌 화분 엑소좀이 포함되지 않은 대조군에 비하여 콜라겐 합성 효과가 최소 0.5배 이상 올라간 것을 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 있어서, "주름 개선"이란 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 콜라겐 합성 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명에서의 "피부 보습"이란 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다.
본 발명에서의 "피부 재생"이란 손상된 피부 부위에 존재하는 wound healing 관여 유전자 및 세포증식 관여 유전자의 발현량을 증가시켜, 피부를 재생시키는 것을 의미한다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 세포 활성 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명에서의 "피부 진정"은 피부에 시원함을 주는 것, 피부 온도를 강화시키는 것, 피부에 청량감을 부여하는 것, 또는 피부에 냉감을 부여하는 것 등을 의미하는 것이나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서의 "피부 광채(radiance) 개선"은 피부색을 보다 빛나게 하고, 피부에 윤기를 주는 것을 모두 포함하는 의미한다. 피부색의 광채는 다수의 외부 또는 내부 인자에 의해 영향을 받을 수 있다. 외부 인자로는, 태양광으로의 노출, 온도 및 습도 변화로의 노출, 또는 오염물로의 노출이 언급될 수 있다. 피부색의 광채에 영향을 미치는 내부 인자는 스트레스, 피로, 호르몬 변화, 상피의 탈수 또는 피부 장벽 기능의 손상, 또는 심지어 노화가 언급될 수 있다. 이와 같은 외부 및 내부 인자들은 피부색을 칙칙하게 하여, 균일하지 않고, 윤기 없고, 창백하게 하거나, 심지어 허약해 보이게 하는 경향이 있고, 피부 결함의 존재를 증진시키거나 또는 심지어 악화시키는 경향이 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 피부 광채를 개선시키는 것일 수 있다.
상기 용어 '개선'은 본 발명의 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 증상의 정도를 적어도 감소시키거나, 효과를 극대화시키는 모든 행위를 의미한다. 일 예로, 본 발명의 조성물이 벌 화분 엑소좀이 포함되지 않은 대조군에 비하여 멜라닌 생성이 억제, NO 생성 억제, 세포 활성 효과가 증가, 콜라겐 합성 효과가 증가되는 것을 모두 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서의 "항염증"은 염증을 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 염증반응의 조절은 대단히 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위한 것으로 알려져 있다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 그 결과로 영구적인 유전자의 변형이 야기된다. 이처럼 ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다. 염증 과정 중에는 많은 양의 염증유도 사이토카인(proinflammatory cytokines), 아질산(nitric oxide, NO) 그리고 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)이 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2, COX-2)에 의해 생성된다. 염증은 다양한 염증성 질환을 유발하는 원인으로써, 본 발명의 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물은 항염증 작용을 통해 다양한 염증성 질환에 대한 예방 및 개선 효과를 가질 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 NO 생성 억제 효과가 증가되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 유연화장수(영양유액), 수렴 화장수, 영양화장수, 아이크림, 세럼, 영양크림, 클렌징크림, 클렌징로션, 클렌징폼, 클렌징워터, 마사지크림, 파우더, 에센스, 팩, 피부접착용 패취, 피부접착용 겔, 파우더, 연고, 서스펜션, 에멀젼, 헤어토닉, 헤어트리트먼트, 샴푸 또는 린스, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유지, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 함유할 수 있다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 기능성식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 기능성식품 조성물은 피부 미백, 피부 탄력 증진 및 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 기능성 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 기능성 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 또는 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염증 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함한다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 의약외품 조성물은 피부 미백, 피부 탄력 증진 및 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제의 대표적인 예로는, 락토즈, 덱스트로스, 슈크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 글리세린, 아카시아 고무, 알지네이트, 칼슘포스페이트, 칼슘카보네이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 식물성 오일, 주사가능한 에스테르, 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우리지 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물을 의약외품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선, 피부 재생, 보습 성분, 피부 진정, 피부 광채 개선 및 항염 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선, 피부 재생, 보습 성분, 피부 진정, 피부 광채 개선 및 항염 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선, 피부 재생, 보습 효과, 피부 진정, 피부 광채 개선 및 항염 효과는 더욱 증가될 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 상기 의약외품 조성물은 당업계에 공지된 미백 성분으로서, 코즈산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민-C(L-Ascorbic acid); 당업계에 공지된 피부 탄력, 주름 개선 또는 보습 성분으로서, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베툴린산 및 클로렐라 추출물; 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있을 것이며, 상기 함량 범위는 피부 안전성, 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.
본 발명의 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 연고액, 물티슈, 코팅제 등을 예시할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물은 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 또는 피부 보습 방법에 사용될 수 있다. 상기 개체는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물을 제한 없이 포함한다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분을 저온 추출하는 단계; 및 상기 추출물에서 엑소좀을 분리하는 단계;를 포함하는 벌 화분 엑소좀의 제조방법을 제공한다.
구체적으로, 벌 화분을 저온 추출하는 단계에서 저온은 4℃ 내지 25℃, 4℃ 내지 20℃, 또는 4℃ 내지 15℃일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 단계에서 저온 추출 단계 전에 벌 화분의 유효성분의 파괴를 최소화하기 위하여 맷돌공법으로 분쇄할 수 있으나, 일반적으로 사용되는 분쇄 방법이라면 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 추출물에서 엑소좀을 분리하는 단계는 원심분리를 이용하여 침전물을 제거할 수 있다. 이후에, 여과장치를 이용하여 정제할 수 있으나, 당해 분야에 공지된 적합한 분리 또는 정제 방법이라면 제한없이 수행될 수 있다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 개선 방법을 제공한다.
상기 용어 '벌 화분 엑소좀'은 전술한 바와 같다. 상기 피부 개선 방법은 본 발명의 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물이 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀을 포함하는 조성물에 비해 i) 멜라닌 생성 억제, ii) NO 생성 억제, iii) 세포 활성 증가; 및/또는 iv) 콜라겐 합성 증가와 같은 효과를 가짐을 확인하여 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 또는 항염을 개선하는 방법을 제공하는 것이나, 이에 제한되지 않는다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 벌 화분 엑소좀을 제공한다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물을 제공한다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 벌 화분 엑소좀, 또는 이를 포함하는 조성물의 피부 개선 용도를 제공한다.
상기 용어 '벌 화분 엑소좀'은 전술한 바와 같다. 본 발명의 피부 개선 용도는 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 피부 재생용, 피부 진정용, 피부 광채 개선용 또는 항염증용인 것을 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물은 피부 미백, 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 피부 재생, 피부 진정, 피부 광채 개선 및 항염 효과가 우수하다. 구체적으로 본 발명의 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀을 포함하는 조성물에 비해 멜라닌 생성 억제 효과, NO 생성 억제 효과, 세포 활성 효과 및 콜라겐 합성 효과가 우수하므로 피부 미백용, 탄력 증진용 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 피부 재생용, 피부 진정용, 피부 광채 개선용 및 항염증용 화장료 조성물로서의 활용도가 높다.
도 1은 벌 화분 엑소좀 원료 제조 공정도를 나타낸 것이다.
도 2는 벌 화분 엑소좀의 MMP-1 저해효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼의 탄력링 개선 평가를 나타낸 것이다.
도 4는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼의 눈밑, 팔자, 턱밑, 또는 목주름 개선 정도를 나타낸 것이다.
도 5는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 제형의 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 + 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용시 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 V.S. 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 8는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 V.S. 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가 변화량을 나타낸 것이다.
도 2는 벌 화분 엑소좀의 MMP-1 저해효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼의 탄력링 개선 평가를 나타낸 것이다.
도 4는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼의 눈밑, 팔자, 턱밑, 또는 목주름 개선 정도를 나타낸 것이다.
도 5는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 제형의 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 + 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용시 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 V.S. 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가 결과를 나타낸 것이다.
도 8는 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 V.S. 벌 화분 엑소좀 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가 변화량을 나타낸 것이다.
이하 본 발명을 하기 예에 의해 상세히 설명한다. 다만, 하기 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 하기 예에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
제조예 1: 벌 화분 엑소좀의 제조
본 발명의 벌 화분 엑소좀을 제조하기 위해, 설악산에서 꽃이 피는 시기(3월~5월경)에 꿀벌에 의해 채집된 벌 화분을 이용하였다. 구체적으로, 상기 벌 화분을 유효성분의 파괴를 최소화하기 위하여 전통방식의 맷돌공법으로 분쇄하여 세포벽을 파쇄한 후 저온에서 24~72시간 정제수로 추출하였다. 상기 저온은 4℃~25℃이고, 구체적으로, 4℃~15℃일 수 있다. 이후, 8,000rpm 또는 5,000 x g으로 원심분리를 하여 침전물을 제거하였고, 상등액을 취한 후 0.2~5.0μm의 공극 크기를 갖는 필터에 여과하여 엑소좀이 포함된 여액을 수득하고, 100kDa 필터를 사용하는 TFF 장비(접선흐름여과장치)를 이용하여 분자량 Cut-off 및 세척하여 정제된 엑소좀을 분리하였다(도 1의 step 1~step 5).
제조예 2: 벌 화분 엑소좀 원료의 제조
질량% 기준으로 제조예 1로부터 얻어진 벌 화분 엑소좀 0.00003%에 부틸렌글라이콜 10%, 1,2-헥산다이올 2%, 에틸헥실글리세린 0.05% 및 정제수(to 100%)를 투입하여 원료화 한 것을 '벌 화분 엑소좀 원료'라고 명명하였다(도 1의 step 6~step 8). 상기 벌 화분 엑소좀 원료의 밀도는 1.004g/ml일 수 있다.
실시예 1: 멜라닌 생성 억제 효능 확인
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료의 미백 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 멜라닌 생성 억제 효과를 측정하였다.
구체적으로, 상기 벌 화분 엑소좀 원료의 미백 효능은 melanocyte내에 존재하는 멜라닌 색소의 양이 감소하는 정도를 측정하여 평가하였다. 상기 벌 화분 엑소좀 원료를 0.01%, 0.1% 농도(v/v%)로 희석하여 B16f10 melanocyte에 처리하고 72시간 배양한 후, 멜라닌을 정량하여 미백 효능을 평가하였다. 멜라닌 함량은 총 단백질량 대비로 계산한 후, DMSO 대조군 기준 멜라닌 생성 저해율을 %로 구하였다. 양성대조군으로 Arbutin 200 ppm를 처리하였다.
또한, 벌 화분 엑소좀 원료의 멜라닌 생성 억제 효과가 대조군인 벌 화분 추출물 원료, 화분 추출물 원료, 식물 유래 엑소좀 원료보다 우수한지 확인하고자 하였다. 구체적으로, 벌 화분 추출물 원료는 벌 화분 엑소좀 제조시와 동일한 벌 화분을 같은 양을 사용하여 동일한 방법으로 분쇄하고, 동일한 온도조건(4℃~25℃에서 24-72시간 정제수로 추출을 진행하는 일반적인 저온 추출법으로 추출하였으며, 엑소좀 수득에 필요한 원심분리 단계부터는 진행하지 않고, 바로 벌 화분 엑소좀 원료와 동일한 조성이 되도록 용매를 추가(질량% 기준으로 부틸렌글라이콜 10%, 1,2-헥산다이올 2%, 에틸헥실글리세린 0.05% 및 정제수(to 100%))하여 원료화 한 것이다. 화분 추출물 원료는 일반 시중에서 구입한 화분(건조 찔레꽃잡화화분 제품)을 동일한 조건(분쇄, 4℃~25℃에서 24-72시간 정제수 추출)에서 저온 추출 진행 후 동일 조성으로 용매를 추가(질량% 기준으로 부틸렌글라이콜 10%, 1,2-헥산다이올 2%, 에틸헥실글리세린 0.05% 및 정제수(to 100%))하여 원료화 한 것이다. 또한, 식물 엑소좀 원료은 벌 화분 대신 다른 식물(당근)을 사용하여 동일한 공법으로 엑소좀 추출(벌 화분 대신 당근을 사용하여 도면1의 step 5까지 진행)하고 동일한 용매(질량% 기준으로 부틸렌글라이콜 10%, 1,2-헥산다이올 2%, 에틸헥실글리세린 0.05% 및 정제수(to 100%))를 추가하여 원료화한 것이다.
| 농도 (v/v%) | 벌 화분 엑소좀 원료 | 벌 화분 추출물 원료 | 화분 추출물 원료 | 식물 엑소좀 (carrot) 원료 |
| 0.01% | 37.6 | 25.2 | 18.0 | 10.4 |
| 0.1% | 38.0 | 28.0 | 19.9 | 16.5 |
그 결과, 표 1에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료를 처리한 군에서 멜라닌 생성 억제율(%)이 가장 우수함을 확인하였다. 양성대조군(Arbutin 200 ppm)의 경우 38.06%의 멜라닌 합성 저해를 나타내었다.
실시예 2: 피부 진정 및 항염 효과 확인
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료의 피부 진정 및 항염 효과를 확인하기 위하여, NO 생성 억제 효과를 다음과 같이 측정하여 대조군인 화분 추출물 원료, 벌 화분 추출물 원료, 식물 유래 엑소좀 원료와 비교하고자 하였다.
구체적으로, Raw 264.7 cell을 이용하여 상기 시료들의 NO 생성 억제 효과를 측정하였다. 양성 대조군으로는 20mg/ml L-NMMA1 (NOS 억제제)를 사용했으며 상기 시료들을 0.01%, 0.1% 농도(v/v%)로 희석하여 30분 전 처리 후, 1μg/ml LPS를 처리하고 24시간 배양한 후 NO 정량 Kit를 이용하여 NO 생성 억제능을 아래와 같이 평가하였다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
| 농도 (v/v%) | 벌 화분 엑소좀 원료 | 벌 화분 추출물 원료 | 화분 추출물 원료 | 식물 엑소좀 (carrot) 원료 |
| 0.01% | 48.32 | 38.32 | 34.38 | 17.47 |
| 0.1% | 57.20 | 44.24 | 38.18 | 14.59 |
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료를 처리한 군에서 NO 생성 억제율(%)이 가장 우수함을 확인하였다. 양성 대조군(20mg/ml L-NMMA1)의 경우 59.17% 억제능이 있었다. 이를 통해, 벌 화분 엑소좀 원료를 처리한 군에서 피부 진정 및 항염 효과가 가장 우수함을 알 수 있다.
실시예 3: 세포 활성 효과 확인
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료의 세포 증식 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 세포 활성 효과를 측정하였다.
구체적으로, HDF (Human Dermal Fibroblasts)세포를 96 well 플레이트에 1 x 104cells/well씩 동일하게 hemacytometer를 이용하여 계수한 후, 분주하였다. 24시간 동안 배양한 HDF 세포에 화분 엑소좀 원료를 각 well에 넣고, serum free DMEM 배지 100ul에서 37℃, 5% CO2incubator에서 24시간 동안 배양하였다. CCK-8 시약을 각 well에 10ul씩 넣고 1시간 배양 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다. 아무것도 처리하지 않은 무처리 대조군을 기준으로 백분율(%)로 증가한 세포 활성을 표시하였다. 양성대조군으로 FBS 5%를 사용하였다.
또한, 화분 추출물 원료, 벌 화분 추출물 원료, 식물 유래 엑소좀 원료와 비교하여 벌 화분 엑소좀 원료의 세포 활성 효과가 대조군들보다 우수한지 확인하고자 하였다. 상기 시료들은 모두 0.01%, 0.1% 농도(v/v%)로 희석하여 평가하였다.
| 농도 (v/v%) | 벌 화분 엑소좀 원료 | 벌 화분 추출물 원료 | 화분 추출물 원료 | 식물 엑소좀 (carrot) 원료 |
| 0.01% | 23.30 | 12.20 | 2.05 | 2.34 |
| 0.1% | 29.20 | 15.42 | 2.50 | 7.20 |
그 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 처리시 다른 추출물 처리시에 비교하여 월등히 세포 활성 효과가 높게 나타남을 알 수 있다. 양성대조군으로 FBS 5% 처리시 세포활성이 34.77% 증가하였다.
실시예 4: 콜라겐 합성 효능 평가
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료의 콜라겐 합성 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 측정하였다.
구체적으로, HDF (Human Dermal Fibroblasts)세포를 이용하여 콜라겐 합성효과를 평가하였다. 벌 화분 엑소좀 원료 시료를 세포에 48 시간 전처리 한 후 human procollagen type I C-peptide(PIP) EIA kit를 사용하여 콜라겐 합성효능을 측정하였다. 시료의 콜라겐합성 효능은 무처리 대조군 대비 증가한 수치를 백분율(%)로 계산하여 결과를 표로 나타내었다. 양성대조군은 TGF-b 10ng/ml을 사용하였다.
또한, 벌 화분 엑소좀 원료의 콜라겐 합성 효과가 대조군인 화분 추출물 원료, 벌 화분 추출물 원료, 식물 유래 엑소좀 원료 보다 우수한지 확인하고자 하였다. 상기 시료들은 모두 0.01%, 0.1% 농도(v/v%)로 희석하여 평가하였다.
| 농도 (v/v%) | 벌 화분 엑소좀 원료 | 벌 화분 추출물 원료 | 화분 추출물 원료 | 식물 엑소좀 (carrot) 원료 |
| 0.01% | 13.30 | 8.40 | 2.14 | -1.20 |
| 0.1% | 18.20 | 8.92 | 1.21 | 1.15 |
그 결과, 표 4에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 처리시 다른 추출물 처리시에 비교하여 월등히 콜라겐 합성 효과가 높게 나타남을 알 수 있다. 양성대조군 TGF-b 처리 결과 무처리군에 비해 29.87% 콜라겐 합성이 증가하였다.
실시예 5: 항노화 효능 평가(MMP-1 저해 효능 확인)
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료의 항노화 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 MMP-1 저해 효능을 평가하였다.
구체적으로, HDF (Human Dermal Fibroblasts)세포를 이용하여 UV 조사시 증가하는 MMP-1의 저해 효능을 평가하였다. 6 well plate에 HDF 세포를 seedin한 후 24시간 후에 UVB를 25mJ/cm2 조사하고, 화분 엑소좀 원료 시료를 세포에 처리한 후 24시간 배양하여 MMP-1 DuoSet ELISA kit를 사용하여 MMP-1 발현량을 측정하였다. 상기 벌 화분 엑소좀 원료 시료의 MMP-1 효능은 무처리 대조군 대비로 계산하여 수치를 측정하여 결과를 그래프로 나타내었다. 양성대조군은 RA(Retinoic acid 0.3 ppm)를 사용하였다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 무처리 대조군에 비해 벌 화분 엑소좀 원료를 처리한 군에서 MMP-1 발현량이 31% 감소하여 MMP-1 저해 효능이 우수한 것을 확인할 수 있었다.
제조예 3: 벌 화분 엑소좀 함유 세럼 및 크림 제조
벌 화분 엑소좀 원료가 함유된 세럼 및 크림을 하기 표 5 및 표 6과 같은 조성으로 제조하였다.
| 구분(중량%) | 실시예 | 비교예 | |||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 1 | |
| 벌화분엑소좀원료 | 1 | 3 | 5 | 10 | 0 |
| 부틸렌글라이콜 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
| 글리세린 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 프로판다이올 | 6 | 6 | 6 | 6 | 6 |
| 소듐폴리아크릴레이트 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 |
| 스쿠알란 | 3.5 | 3.5 | 3.5 | 3.5 | 3.5 |
| 향 | 0.24 | 0.24 | 0.24 | 0.24 | 0.24 |
| 정제수 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 |
| 구분(중량%) | 실시예 | 비교예 | ||
| 5 | 6 | 7 | 2 | |
| 벌화분엑소좀원료 | 1 | 2 | 3 | 0 |
| 디프로필렌글라이콜 | 5 | 5 | 5 | 5 |
| 글리세린 | 3 | 3 | 3 | 3 |
| 카보머 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 트로메타민 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 글리세릴스테아레이트 | 2 | 2 | 2 | 2 |
| 카프릴릭/카프릭트라이글리세라이드 | 4 | 4 | 4 | 4 |
| 향 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
| 정제수 | 잔량 | 잔량 | 잔량 | 잔량 |
실시예 6: 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼의 탄력링 개선 평가
Cutiscan CS 100을 이용하여 안면부 동일한 부위의 피부 탄력을 측정하며, 장치 내부에 제공된 일정한 음압으로 모든 방향에서 균일하게 피부를 몇 초간 끌어당긴 다음 몇 초간 다시 가해진 압력을 방출한다. 흡입 및 수축 시간 동안 프로브 내부에 조명이 있는 카메라는 광학 흐름 알고리즘에 의해 각 픽셀의 변위를 모니터링하며 측정단위는 Pixel이다. V1, V2, V3 값이 산출되어 0°(360°), 45°, 90°, 135°, 180°, 228°, 270°, 315°, 360° (0°)의 평균값을 사용하였다. V1은 흡입했을 때의 피부의 단단함을 평가하고, V2는 수축했을 때 피부의 되돌아 능력을 평가하며, V3는 V1과 V2의 비율의 곡선을 %로 나타낸다. 탄력을 나타내는 파라미터는 V2값과 V3값이며, V1값과 V2값을 이용하여 탄력을 나타내는 V3값을 사용한다. 탄력을 나타내는 V3값(단위 %)을 Y축으로 하여 탄력 개선 결과를 도 3의 그래프로 나타내었다. 3D 그래프 이미지는 0°~ 360°의 흡입과 수축을 시각화한 원통형의 '링' 형태를 띄고 있어서, 해당 시험에서는 '탄력링'으로 간주하여 시험을 진행하였다. 평가는 시험 제품 사용전(0주), 제품 사용 2주 후, 제품 사용 4주 후로 V3 값이 증가할수록 탄력이 개선됨을 의미한다.
그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼을 사용한 결과, 제품 사용 2주 후에는 38.95%가 개선되고, 제품 사용 4주 후에는 66.01%가 개선됨을 확인하였다.
실시예 7: 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼의 눈밑, 팔자, 턱밑, 목주름 개선 확인
제조예 2에서 제조된 벌 화분 엑소좀 원료가 함유된 세럼 및 크림의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여, 눈밑, 팔자, 턱밑, 목주름 개선 효능을 평가하였다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 좌우 눈밑 리프팅, 좌우 팔자 주름 부위 리프팅, 턱밑 처진 부위 리프팅, 목 주름 부위 리프팅은 3D 피부 촬영 장치인 Antera 3D CS(Miravex Ltd., Ireland)로 시험제품 사용 전후에 시험대상자의 동일한 좌우측 눈밑, 좌우측 팔자, 이중턱, 목 부위를 촬영하였으며, 촬영한 이미지를 Depressions-Medium mode로 분석하였다. 파라미터는 Volume(㎣) 값이며, 분석 값이 증가할수록 좌우 눈밑 리프팅, 좌우 팔자 주름 부위 리프팅, 턱밑 처진 부위 리프팅, 목 주름 부위 리프팅에 효과가 있음을 의미한다.
눈밑 리프팅(좌, 우) 평가 결과 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 사용 4주 후에 통계적으로 유의하게 개선되었고, 제품 사용 전(0주) 대비 제품 사용 2주 후 (좌: 16.820%, 우: 14.029%), 제품 사용 4주 후 (좌: 19.021%, 우: 20.911%)의 개선율을 확인하였다.
팔자 주름 부위 리프팅(좌, 우) 평가 결과 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 사용 4주 후에 통계적으로 유의하게 개선되었고, 제품 사용 전(0주) 대비 제품 사용 2주 후 (좌: 17.490%, 우: 22.121%), 제품 사용 4주 후 (좌: 29.504%, 우: 34.324% )의 개선율을 확인하였다.
턱밑 처진 부위 리프팅 평가 결과 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 사용 4주 후에 통계적으로 유의하게 개선되었고, 제품 사용 전(0주) 대비 제품 사용 2주 후 24.617%, 제품 사용 4주 후 43.938%의 개선율을 확인하였다.
목 주름 부위 리프팅 평가 결과 사용 전과 비교하여 사용 2주 후 사용 4주 후에 통계적으로 유의하게 개선되었고, 제품 사용 전(0주) 대비 제품 사용 2주 후 14.364%, 제품 사용 4주 후 28.432%의 개선율을 확인하였다
실시예 8: 벌 화분 엑소좀을 함유한 세럼 및 크림의 다각도 광채 평가
Skin-Glossymeter GL200WL을 이용하여 시험 부위(안면부)의 광채(G.U)를 측정하였다. Skin-Glossymeter GL200WL은 피부 표면에 보내진 빛의 반사로 광채값을 측정한다. 평가는 제품 사용 전, 제품 사용 직후의 광채 변화를 비교 분석하였고, 측정 값이 증가할수록 피부의 광채가 개선되었음을 의미한다. 측정 단위는 DSC(Diffuse Scattering Correction, G.U) 이다. 다각도 광채 평가는 제품 사용 전. 제품 사용 직후의 변화를 비교평가 하였다.
이미지 촬영은 Mark-Vu(PSI Plus)를 이용하여 안면 부위를 촬영하였다. 얼굴 전면 부위의 동일한 위치를 제품 사용 전, 제품 사용 직후를 촬영하였으며 광택광(SL)을 사용하였다.
8-1. 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼 제형의 다각도 광채 평가
그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼을 사용한 결과, 제품 사용 전 대비 제품 사용 직후 우측 이마 226.67%, 우측 눈가 184.91%, 우측 볼 187.69%의 개선율을 나타내었다.
8-2. 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 원료 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가
그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼 + 벌 화분 엑소좀 원료 3%를 함유한 크림을 병행 사용한 결과, 제품 사용 전 대비 제품 사용 직후 우측 이마 273.95%, 좌측 눈가 259.87%, 좌측 볼 283.22%의 개선율을 나타내었다.
8-3. 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼 V.S. 벌 화분 엑소좀 원료 5%를 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 원료 3%를 함유한 크림 병행 사용 시 다각도 광채 평가
그 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이, 벌 화분 엑소좀 원료 5% 함유한 세럼과 벌 화분 엑소좀 원료 5% 함유한 세럼 + 벌 화분 엑소좀 원료 3% 함유한 크림을 병행 사용한 결과 단독 사용 및 병행 사용 모두에서 통계적으로 유의한 수준의 광채 증가를 나타내었다. 또한, 도 8에 나타낸 바와 같이, 각각의 다각도 광채 평가 변화량은 벌 화분 엑소좀 원료 5% 함유한 세럼 단복보다 벌 화분 엑소좀 원료 5% 함유한 세럼 & 벌 화분 엑소좀 원료 3%를 함유한 크림의 병행 사용일 때 더 높은 것을 알 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (10)
- 벌 화분 엑소좀(Bee pollen exosome)을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 피부 재생용, 피부 진정용, 피부 광채 개선용 또는 항염증용인 것인, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 벌 화분 엑소좀은 조성물 총 중량에 대하여 0.0000001 내지 1 중량%로 포함하는 것인, 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 화분 추출물, 벌 화분 추출물 또는 식물 엑소좀이 포함된 조성물에 비해 하기 i) 내지 iv)에서 선택된 하나 이상의 효과를 갖는 것인 화장료 조성물:
i) 멜라닌 생성 억제,
ii) NO 생성 억제,
iii) 세포 활성 증가; 및
iv) 콜라겐 합성 증가.
- 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물.
- 벌 화분 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물.
- 제5항 또는 제6항에 있어서,
상기 조성물은 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 피부 재생용, 피부 진정용, 피부 광채 개선용 또는 항염증용인 것인, 조성물.
- 벌 화분을 저온 추출하는 단계; 및
상기 추출물에서 엑소좀을 분리하는 단계;를 포함하는 벌 화분 엑소좀의 제조방법.
- 제8항의 제조방법으로 제조된 벌 화분 엑소좀.
- 제9항의 벌 화분 엑소좀을 포함하는 조성물.
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US18/521,016 US20240173249A1 (en) | 2022-11-29 | 2023-11-28 | Cosmetic composition containing bee pollen exosome |
| JP2023201813A JP2024078458A (ja) | 2022-11-29 | 2023-11-29 | ビーポーレン由来エクソソームを含む化粧料組成物 |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20220163348 | 2022-11-29 | ||
| KR1020220163348 | 2022-11-29 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20240080122A true KR20240080122A (ko) | 2024-06-05 |
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ID=91470187
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020230158409A KR20240080122A (ko) | 2022-11-29 | 2023-11-15 | 벌 화분 유래 엑소좀을 포함하는 화장료 조성물 |
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| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20240080122A (ko) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210135138A (ko) | 2020-05-04 | 2021-11-12 | 주식회사 바이오에프디엔씨 | 인삼 식물세포 유래 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 |
| KR20220104655A (ko) | 2021-01-18 | 2022-07-26 | 을지대학교 산학협력단 | 나노화된 벌화분 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료용 조성물 |
-
2023
- 2023-11-15 KR KR1020230158409A patent/KR20240080122A/ko unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210135138A (ko) | 2020-05-04 | 2021-11-12 | 주식회사 바이오에프디엔씨 | 인삼 식물세포 유래 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 |
| KR20220104655A (ko) | 2021-01-18 | 2022-07-26 | 을지대학교 산학협력단 | 나노화된 벌화분 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료용 조성물 |
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