KR20240054646A - 야생딸기 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
야생딸기 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물은 지방세포의 지방 축적을 억제하고, 지방세포의 분화 및 지방의 대사 조절에 관여하는 단백질의 발현을 조절하는 효과를 나타냄으로써, 비만, 지방간 등의 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용할 수 있다.
Description
본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
비만이란 대사 장애로 인하여 지방이 체내에 과잉 축적된 상태로서, 칼로리 섭취가 성장과 신체활동에 필요한 에너지보다 초과되어 일어나는 열량 불균형 현상으로 야기되며, 대개 체내의 지방이 남자는 체중의 25%, 여자는 30% 이상인 경우를 말한다. 특히 비만은 당뇨, 고지혈증, 심혈관계 질환 및 동맥경화증 등, 각종 대사성 질환의 원인이 될 뿐만 아니라, 비만으로 인한 사망률의 증가는 대사성 질환, 담낭질환, 호르몬 감수성 암과 위장관 암 등에서 명확하게 나타나며, 비만은 또한 비치명적인 요통, 관절염, 불임 등의 신체적 질병과 정신·사회적 기능의 저하 등 정신적 질병의 위험성도 증가시킨다.
AMPK(AMP-activated protein kinase)는 catalytic α subunit, regulatory β 및 γ subunit로 구성되어 있는 serine/threonine kinase이다. 에너지 균형 조절자로서 지질과 포도당을 조절하여 당뇨와 비만의 대사에 중요한 역할을 한다. AMPK는 에너지 소모로 유발된 AMP/ATP ratio의 증가에 따른 γ subunit의 AMP 결합이며, α subunit의 threonine residue Thr172 인산화와 allosteric activation 촉진에 의해 활성화가 유발된다. AMPK의 활성화는 포도당 생성 및 지방 생성을 감소시키며, ACC 및 포도당 산화의 불활성화를 통해 지방산과 같은 ATP 소비에서 활성 ATP 생산 과정으로 전환시킨다. 또한, AMPK의 활성화는 지방산 합성과 콜레스테롤 합성을 조절하는 ACC(acetyl-CoA carboxylase)를 인산화시킴으로서 ACC효소를 불활성화시킨다.
전지방세포에서 지방세포로 분화가 일어나는 과정은 세포형태의 변화, 유전자 발현의 변화, 호르몬 민감성의 변화 그리고 단백질 발현의 변화가 복합적으로 작용하는 과정이다. 지방세포의 형성 과정에서 가장 중요한 조절인자는 peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)s와 CCAAT/enhancer binding protein(C/EBP)s로 알려져 있다. 분화가 시작되면 초기 전사 인자인 C/EBP-β, C/EBP-δ가 C/EBP-α와 PPAR-γ의 발현량을 증가시키며, 이는 최종적으로 lipoprotein lipase (LPL), leptin, adiponectin, fatty acid binding protein (FABP) 4와 같은 최종 마커들의 발현을 촉진시킨다.
항비만 약물에 대한 연구는 전 세계적으로 다양하게 진행되고 있다. 세로토닌과 노르에피네프린의 재흡수를 억제하는 작용을 하는 sibutramine은 심혈관계 부작용으로 인하여 사용 금지되었고, 소장에서 지방분해 효소의 작용을 억제하여 지방흡수를 감소시키는 orlistat는 지방변, 복부불편감 등의 부작용이 있다. 최근에는 locaserine, bupropione-naltrexone, phentermine-topiramate가 비만치료 약물로 사용되고 있으며, 이 중 가장 빈용 처방되는 locaserine은 sibutramine과 유사한 serotonin 활성 관련 약물로서 낮은 빈도의 두통, 오심, 현훈 등의 부작용이 보고되고 있다.
본 발명의 목적은 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 물, 에탄올, 에탄올 수용액 등의 추출용매로 추출할 수 있다.
상기 대사성 질환은 바람직하게는 비만 또는 지방간일 수 있으나, 이에 제한하지 않는다.
상기 약학적 조성물은 경구 투여, 경피 투여, 국소 투여, 흡입 투여, 비강내 투여, 정맥내 투여, 진피내 투여, 복강내 투여, 주사 및 피하 주사용 제형으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 제형으로 투여될 수 있으나, 이에 제한하지 않는다.
또한, 본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물은 지방세포의 지방 축적을 억제하고, 지방세포의 분화 및 지방의 대사 조절에 관여하는 단백질의 발현을 조절하는 효과를 나타냄으로써, 비만, 지방간 등의 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료에 유용할 수 있다.
도 1은 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 2는 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 지질 축적율을 측정한 결과이다.
도 3은 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 세포 내 에너지 상태와 관련 있는 AMPK 인산화를 확인한 결과, 지방 생성 및 지방산 산화와 관련이 있는 ACC 인산화를 확인한 결과, 지방세포분화에 결정적인 역할을 하는 중요 전사인자인 PPARγ 발현을 확인한 결과, 지방산 산화에 관여하는 CPT-1 단백질 발현을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 2는 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 지질 축적율을 측정한 결과이다.
도 3은 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 세포 내 에너지 상태와 관련 있는 AMPK 인산화를 확인한 결과, 지방 생성 및 지방산 산화와 관련이 있는 ACC 인산화를 확인한 결과, 지방세포분화에 결정적인 역할을 하는 중요 전사인자인 PPARγ 발현을 확인한 결과, 지방산 산화에 관여하는 CPT-1 단백질 발현을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
약학적 조성물
본 발명의 유효물질은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환자, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 유효물질에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 유효물질의 인체에 대한 효과적인 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로 약 0.001-100 mg/kg/일이며, 바람직하게는 0.01-35 mg/kg/일이다. 몸무게가 70㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.07-7000 mg/일이며, 바람직하게는 0.7-2500 ㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
건강식품 및 건강기능성식품 조성물
식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 통상적인 의미에서의 건강식품 및 건강기능성식품을 모두 포함한다.
건강식품의 예로는 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 등을 들 수 있다.
건강기능식품의 예로는 정제, 캡슐제, 환제, 액제 형태 등의 건강기능성식품을 들 수 있다.
본 발명에 따른 유효물질을 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효물질의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 및 건강기능성식품 중의 상기 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 유지를 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명 유효물질을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트라이톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강기능성 식품 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 유효물질을 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품 및 건강기능성식품 조성물은 천연 과일쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 유효물질을 함유하는 건강식품 및 건강기능성식품 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
화장료 조성물
본 발명은 유효물질을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 화장료 조성물은, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태일 수 있다. 더욱 구체적인 형태로는 화장수, 유액, 크림, 스킨, 로션, 세럼, 에센스, 에멀젼, 파우더, 화장연고, 스프레이, 젤, 팩, 클렌저, 비누, 샴푸, 린스, 입욕제, 세정제 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 폼(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 유효물질에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
본 발명의 유효물질을 함유하는 화장료 조성물에 있어서, 통상적으로 함유되는 화장료 조성물에 본 발명의 유효물질이 0.1 내지 50 중량%, 바람직하게는 1 내지 10 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명의 유효물질을 피부 외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 야생딸기(
Fragaria orientalis
) 추출물의 제조
야생딸기(Fragaria orientalis) 채집 후 해독 건조 작업을 거쳤으며, 건조된 원료를 분쇄하였다. 다음으로, 건조 원료 중량의 10배에 해당하는 증류수를 첨가하고 2시간 동안 가열하여 추출하였다. 추출액을 여과하여 고체상과 액체상을 분리한 후, 잔류물을 버리고 감압농축하였다. 다음으로, -20℃ 이하에서 free-dryer로 농축하여 시료를 준비하였다.
<실험예 1> In vitro 췌장 Lipase 저해활성 평가
Enzyme buffer에 porcine pancreatic lipase를 2.5 ㎎/㎖ 농도로 녹여 사용하였다. Tris buffer (100 mM Tris-HCl, 5mM CaCl2, pH 7.0)를 준비하여, lipase가 섞여있는 enzyme buffer와 Tris buffer를 혼합함. 1 ㎎/㎖시료를 준비한 후, buffer 혼합물에 시료를 혼합하고, 37℃에서 15분간 배양하였다. Substrate solution (10 mM p-nitrophenyl butyrate in DMF)를 첨가한 후 다시 37℃에서 30분간 배양하여 ELISA 405 nm에서 흡광도를 측정하여 Lipase 저해활성을 분석하였다.
실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물 1mg/mL의 췌장 Lipase 저해활성을 평가한 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
| 췌장 Lipase 저해율 | |
| 실시예 1 | 49.2% |
표 1에 나타난 바와 같이, Lipase 저해활성이 우수하여 항비만, 지방간, 고지혈증 등의 대사성 질환 치료제로 유용할 수 있음을 확인하였다.
<실험예 2> In vitro 세포기반 체지방 감소 기능성 평가
(1) 세포배양 및 추출물 처리
체지방 감소 기능성 평가를 실시하기 위해 마우스 유래 지방전구 세포인 3T3-L1 세포를 ATCC에서 분양받아 사용하였다. 세포는 10% bovine calf serum (BSC), 1% penicillin streptomycin을 첨가한 Dulnecco's modigied Eagle's medium (DMEM) 배지에서 37℃, 5% CO2에서 8일간 배양 후, 10% fetal bovine serum (FBS)가 첨가된 DMEM 배지에서 배양시켜 confluent한 상태가 되면 분화를 유도하면서 시료를 처리하였다. 분화가 시작한 시점(D-0)에서 10% FBS, 1% penicillin/streptomycin, 2 g/㎖ insulin, 2 μM dexamethasone, 111 ㎍/㎖ isobutylxanthine이 포함된 DMEM 배지로 교환하여 배양한 후, 10% FBS, 1% penicillin/streptomycin, 2 g/㎖ insulin이 포함된 DMEM 배지로 바꿔주고, D-5일 이후, insulin을 첨가하지 않은 배지로 배양하였다. 시료는 분화 배지 교환 시 매번 동일한 농도로 처리하였다.
(2) 세포독성 평가
3T3-L1 세포에서 시료의 세포독성 평가를 실시하기 위해 MTT assay를 실시하였다. 2 X 104으로 3T3-L1 지방전구세포를 60mm dish에 배양 후, 100% confluence시켰다. 3T3-L1 지방전구세포에 분화 미디어와 약물을 처리하였다. 1일 뒤 1 ㎎/㎖ MTT solution을 처리하였다. 4h 배양 후, DMSO를 처리하여 세포를 용해하여 ELISA 507 nm에서 흡광도를 측정하여 세포의 생존 및 증식에 미치는 영향을 확인하였다.
실시예 1에서 준비한 야생딸기 추출물을 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 및 1 ㎎/㎖ 농도로 세포독성을 측정한 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1은 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 1에 나타난 바와 같이, 세포 생존율을 80% 이상을 나타내는 처리농도 범위(0.1 내지 0.6 ㎎/㎖)에서 Oil red O 및 western blot을 진행하였다.
(3) Oil red O 염색
3T3-L1 세포에서 시료의 세포분화 억제 및 지질 축적억제를 확인하기 위해 지방세포로 분화된 세포내의 지방을 염색하여 분화정도를 측정하였다. 2.5X106으로 3T3-L1 지방전구세포를 60mm dish에 배양 후, 120% confluence시켰다. 이후, 분화 media (0.5 mM 3-Isobutyl-1-methylxanthine, 10 ㎍/㎖ Insulin, 2 μM Dexa)와 약물을 2일 간격으로 6일간 처리하였다. 약물 처리 7일차 세포를 cacodylate buffer (pH 7.2)로 4℃에서 2시간 고정시킨 후 세척하여 Oil red O 염색 시약으로 염색하였다. 염색된 지방세포의 지방함량 측정을 위해 건조시킨 후, 100% isopropyl alcohol로 추출하여 ELISA 510 nm에서 흡광도를 측정하였다.
실시예 1에서 준비한 야생딸기 추출물을 0.05, 0.1 및 0.2 ㎎/㎖ 농도로 처리 후, Oil-red-O 염색을 실시한 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2는 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 지질 축적율을 측정한 결과이다.
도 2에 나타난 바와 같이, 모든 농도에서 대조군에 대하여 80% 이하로 유의하게 지방세포 분화 축적 및 억제능을 나타내었고, 처리농도가 증가할수록 지질 축적율이 감소하는 경향을 확인할 수 있었다.
(4) 단백질 발현 분석
3T3-L1 세포에서 지방분화 및 대사에 관여하는 단백질들의 발현 변화를 측정하기 위하여 western bloting을 실시하였다. Oil red O staining과 같은 일정으로 세포 처리하였다. Lysis buffer를 이용하여, 세포를 파괴한 뒤 4℃에서 1,3000 rpm으로 30분간 원심분리하여 얻은 상층액을 bradford법으로 단백질을 정량하였다. 정량한 50 ㎍의 단백질을 12% SDS-page gel을 사용하여 100V에서 1시간 30분 전기영동 후 Transfer 시켰다. 이후 Transfer된 membrane을 1h Blocking 한 후 1차 항체를 over night 반응시켰다. 2차 항체를 1h 반응 시킨 후 ECL(Electro-chemiluminescence)을 이용하여 PPAR-γ, CPT-1, ACC, P-ACC 및 AMPK, P-AMPK 등의 발현정도를 측정하였다.
실시예 1에서 준비한 야생딸기 추출물을 0.05, 0.1 및 0.2 ㎎/㎖ 농도에서 처리하고 western blot 분석을 실시한 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3은 실시예 1에서 제조한 야생딸기 추출물의 처리농도에 따른 3T3-L1 세포의 세포 내 에너지 상태와 관련 있는 AMPK 인산화를 확인한 결과, 지방 생성 및 지방산 산화와 관련이 있는 ACC 인산화를 확인한 결과, 지방세포분화에 결정적인 역할을 하는 중요 전사인자인 PPARγ 발현을 확인한 결과, 지방산 산화에 관여하는 CPT-1 단백질 발현을 확인한 웨스턴 블롯 결과이다.
도 3에 나타난 바와 같이,
세포 내의 에너지 상태와 관련있는 AMPK 인산화를 확인한 결과, 모든 군에서 증가하는 경향을 나타내었으며, 특히 0.1 및 0.2 mg/ml 농도에서 유의한 증가를 나타내었고,
지방 생성 및 지방산 산화와 관련이 있는 ACC 인산화가 저농도군에 비해 고농도군에서 유의한 증가를 나타냈으며, 이는 AMPK 인산화로 인해 ACC가 인산화됨으로서, ACC를 불활성화 시킨 것으로 사료되고,
지방세포분화에 결정적인 역할을 하는 중요 전자인사인 PPARγ는 모든 농도군에서 유의한 감소를 나타내었고,
지방산 산화에 관여하는 CPT-1 단백질 발현은 농도의존적으로 증가하는 경향을 나타내었다.
<실험예 3> In vivo 체지방 감소 기능성 평가
(1) 식이 유도 비만 동물모델
45% kcal% fat (D12451, Research Diets, USA) 급여를 통한 비만을 유발한 마우스 모델을 실험에 사용하였다. 5주령, 수컷 C57BL/6 mouse를 1주 적응 시킨 뒤, 총 6주 동안 45% kcal% fat와 약물을 300 ㎎/㎏로 경구투여하였다. 이후 희생하여 체중 증가량, 식이섭취량, 식이효율, 조직 및 지방 무게 등을 측정하였다.
(2) 체중 및 식이 섭취량
실험 시작일로부터 매일 일정시간에 측정하였다.
식이효율은 체중 증가량(g) / 식이섭취량(g) × 100으로 계산하였다.
고지방식이와 FO(Fragaria orientalis)를 급여한 mouse의 6주간의 평균 체중 변화를 표 2에 나타내었다.
표 2에 나타난 바와 같이, 최종 체중(Final BW) 및 체중 증가량(body weight gain, BWG)은 ND군에 비해 HFD군이 유의하게 증가하였음을 알 수있으며, 식이효율(FER)은 증가하는 경향을 나타냈으며, FO군은 HFD군에 비해 최종 제중, 체중 증가량, 식이효율 모두 유의한 감소를 나타낸다. 이는 고지방 식이로 인해 C57BL/6 mouse에서 체중 증가와 지방 축적이 유도 ?瑛습? 나타내며, FO를 투여함으로써 비만 유도된 생쥐에서 체중이 유의적으로 감소한 것을 나타낸다.
(3) 장기 및 지방 조직 무게 변화에 미치는 영향 평가
고지방식이와 FO를 6주간 급여한 mouse의 체중 100g 당 장기 및 지방 조직 무게 변화를 표 3에 나타내었다.
표 3에 나타난 바와 같이, 장기 조직 무게 변화는 FO군이 HFD군에 비해 간조직 무게는 유의한 감소를 나타냈으며, 신장 무게는 감소하는 경향을 나타내었다. 이는 FO 섭취가 간 조직에 콜레스테롤 및 중성지질 축적을 억제하였을 것으로 사료된다. 백색지방조직(WAT, white adipose tissue) 또한 모든 부위에서 HFD군에 비해 유의적 감소를 나타낸다. 한편, 갈색지방조직(BAT, brown adipose tissue)은 ND군 및 HFD군의 경우 거의 변화가 없으나, FO군에서 유의미하게 증가하는 경향을 나타내었다. 참조로, 갈색지방조직은 일반적인 저장 지방인 백색지방조직과 구별된다. 대사 활성, 특히 지방 분해와 지방산 산화 능력이 크며, 체온 조절을 위해 에너지를 생산하는 지방조직으로 알려져 있다.
약제의 제조예
본 발명에 따른 유효물질은 목적에 따라 여러 형태로 제제화가 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 유효물질을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 제제화 방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<약제 제조예 1> 산제의 제조
유효물질
2 g
유당
1 g
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<약제 제조예 2> 정제의 제조
유효물질
100 ㎎
옥수수전분
100 ㎎
유 당
100 ㎎
스테아린산 마그네슘
2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<약제 제조예 3> 캡슐제의 제조
유효물질
100 ㎎
옥수수전분
100 ㎎
유 당
100 ㎎
스테아린산 마그네슘
2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<약제 제조예 4> 주사제의 제조
유효물질
10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP
pH 3.5로 될 때까지
주사용 염화나트륨 BP
최대 1 ㎖
적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 본 발명에 따른 유효물질을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
<약제 제조예 5> 경비흡수제 (Nasal spray)의 제조
유효물질
1.0 g
아세트산나트륨
0.3 g
메틸파라벤
0.1 g
프로필파라벤
0.02 g
염화나트륨
적량
HCl 또는 NaOH
pH 조정 적량
정제수
적량
통상의 경비흡수제의 제조방법에 따라, 염수 (0.9% NaCl, w/v, 용매는 정제수) 1 mL당 유효물질 3 mg이 포함되도록 제조하고, 이를 불투명한 스프레이 용기에 충진하고 멸균시켜 경비흡수제를 제조하였다.
<약제 제조예 6> 액제의 제조
유효물질
100 mg
이성화당
10 g
만니톨
5 g
정제수
적량
통상의 액제의 제조방법에 따라, 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬 향을 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체 100 mL로 조절한 후 갈색 병에 충진하고 멸균시켜 액제를 제조하였다.
건강식품의 제조예
본 발명에 따른 유효물질은 목적에 따라 여러 형태의 건강식품으로 제조 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 유효물질을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 건강식품의 제조방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<건강식품 제조예 1> 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 유효물질 0.01-1 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<건강식품 제조예 2> 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 본 발명의 유효물질을 진공 농축기에서 감압농축하고 건조분말을 얻었다. 상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 유효물질의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 34 중량부, 율무 19 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
유효물질 (2 중량부),
영지(1.5 중량부), 및
지황(1.5 중량부).
건강기능식품의 제조예
본 발명에 따른 유효물질은 목적에 따라 여러 형태의 건강기능식품으로 제조 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 유효물질을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 건강기능식품의 제조방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<건강기능식품 제조예 1> 건강기능식품의 제조
유효물질
100 mg
비타민 혼합물
적량
비타민 A 아세테이트
70 μg
비타민 E
1.0 mg
비타민 B1
0.13 mg
비타민 B2
0.15 mg
비타민 B6
0.5 mg
비타민 B12
0.2 μg
비타민 C
10 mg
비오틴
10 μg
니코틴산아미드
1.7 mg
엽산
50 μg
판토텐산 칼슘
0.5 mg
무기질 혼합물
적량
황산제1철
1.75 mg
산화아연
0.82 mg
탄산마그네슘
25.3 mg
제1인산칼륨
15 mg
제2인산칼슘
55 mg
구연산칼륨
90 mg
탄산칼슘
100 mg
염화마그네슘
24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능성 식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능성 식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능성 식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
<건강기능식품 제조예 2> 건강 기능 음료의 제조
유효물질
100 mg
구연산
100 mg
올리고당
100 mg
매실농축액
2 mg
타우린
100 mg
정제수를 가하여 전체
500 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 1 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다. 상기 조성비는 비교적 기호 음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
화장료의 제조예
본 발명에 따른 유효물질은 목적에 따라 여러 형태의 화장료로 제조 가능하다. 하기는 본 발명에 따른 유효물질을 활성성분으로 함유시킨 몇몇 화장료의 제조방법을 예시한 것으로 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
<화장료 제조예 1> 유연 화장수의 제조
유효물질
10.0 중량부
1,3-부틸렌글리콜
1.00 중량부
디소듐이디티에이
0.05 중량부
알란토인
0.10 중량부
디포타슘글리시리제이트
0.05 중량부
시트르산
0.01 중량부
소듐시트레이트
0.02 중량부
글리세레스-26
1.00 중량부
알부틴
2.00 중량부
하이드로제네이티드캐스터오일
1.00 중량부
에탄올
30.0 중량부
보존제
미량
착색제
미량
착향제
미량
정제수
잔량
<화장료 제조예 2> 영양 크림의 제조
유효물질
10.0 중량부
1,3-부틸렌글리콜
7.00 중량부
글리세린
1.00 중량부
D-판테놀
0.10 중량부
식물 추출물
3.20 중량부
마그네슘알루미늄실리케이트
0.30 중량부
PEG-40 스테아레이트
1.20 중량부
스테아르산
2.00 중량부
폴리소르베이트 60
1.50 중량부
친유형글리세릴스테아레이트
2.00 중량부
소르비탄세스퀴올리에이트
1.50 중량부
세테아릴알코올
3.00 중량부
미네랄오일
4.00 중량부
스쿠알란
3.80 중량부
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드
2.80 중량부
식물성오일
1.80 중량부
디메치콘
0.40 중량부
디포슘글리시리제이트
미량
알란토인
미량
소듐 히아루로네이트
미량
토코페릴아세테이트
적량
트리에탄올아민
적량
보존제
적량
착향제
적량
정제수
잔량
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특히 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (8)
- 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 에탄올 및 에탄올 수용액 중 1종의 추출용매로 추출하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 대사성 질환은 비만인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 대사성 질환은 지방간인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 경구 투여, 경피 투여, 국소 투여, 흡입 투여, 비강내 투여, 정맥내 투여, 진피내 투여, 복강내 투여, 주사 및 피하 주사용 제형으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 제형으로 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
- 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강식품 조성물.
- 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 포함하는,
비만, 지방간, 고지혈증, 고콜레스테롤증 및 동맥경화증 중 1종의 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 야생딸기(Fragaria orientalis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 셀룰라이트 감소 또는 예방용 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220134883A KR20240054646A (ko) | 2022-10-19 | 2022-10-19 | 야생딸기 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220134883A KR20240054646A (ko) | 2022-10-19 | 2022-10-19 | 야생딸기 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20240054646A true KR20240054646A (ko) | 2024-04-26 |
Family
ID=90883460
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020220134883A KR20240054646A (ko) | 2022-10-19 | 2022-10-19 | 야생딸기 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20240054646A (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210001260A (ko) | 2019-06-27 | 2021-01-06 | 주식회사 코스메카코리아 | 야생 딸기잎 추출물, 플로레틴 및 에델바이스 캘러스 배양추출물을 함유하는 항산화 효능을 갖는 화장료 조성물 |
-
2022
- 2022-10-19 KR KR1020220134883A patent/KR20240054646A/ko unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20210001260A (ko) | 2019-06-27 | 2021-01-06 | 주식회사 코스메카코리아 | 야생 딸기잎 추출물, 플로레틴 및 에델바이스 캘러스 배양추출물을 함유하는 항산화 효능을 갖는 화장료 조성물 |
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