KR20240049275A - 항-cgrp 항체를 사용한 군발성 두통의 치료 - Google Patents

항-cgrp 항체를 사용한 군발성 두통의 치료 Download PDF

Info

Publication number
KR20240049275A
KR20240049275A KR1020247005340A KR20247005340A KR20240049275A KR 20240049275 A KR20240049275 A KR 20240049275A KR 1020247005340 A KR1020247005340 A KR 1020247005340A KR 20247005340 A KR20247005340 A KR 20247005340A KR 20240049275 A KR20240049275 A KR 20240049275A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
seq
administration
hours
cgrp
antibody
Prior art date
Application number
KR1020247005340A
Other languages
English (en)
Inventor
뵈른 스페를링
프랑크 라르센
이브 베스테르고르 클레베
Original Assignee
하. 룬드벡 아크티에셀스카브
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 하. 룬드벡 아크티에셀스카브 filed Critical 하. 룬드벡 아크티에셀스카브
Publication of KR20240049275A publication Critical patent/KR20240049275A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Abstract

군발성 두통의 치료를 필요로 하는 환자에 대한 항-CGRP 길항제 항체의 투여 단계를 포함하는, 군발성 두통을 치료하는 방법이 제공된다.

Description

항-CGRP 항체를 사용한 군발성 두통의 치료
선행 출원 정보
본 출원은 2021년 8월 27일에 출원된 미국 가출원 제63/237,639호에 대한 우선권을 주장하며, 그 전체가 본원에서 참조로 포함된다.
서열 목록 개시
전자 서열 목록(1267 SEQ listing-2022-08-03.xml; 크기: 771,633바이트; 및 생성일: 2022년 8월 3일)의 내용은 그 전체가 본원에서 참조로 포함된다.
서열은 서열 길이로 인해 ST.26 XML 파일로의 입력이 허용되지 않았다.
아래 표 A는 우선권 출원인 미국 가출원 제63/237,639호(위에서 확인되었으며 그 전체가 본원에서 참조로 포함됨)에 존재하는 서열을 나열하지만 서열 길이로 인해 본 출원과 함께 제출된 1267 SEQ listing-2022-08-03.xml 파일에는 포함될 수 없다.
[표 A]
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
Figure pct00005
분야
본 발명은 인간 칼시토닌 유전자 관련 펩티드(이후 본원에서 "CGRP")에 특이적으로 결합하는 항체 및 이의 단편(Fab 단편 포함)을 사용하는, 두통 장애, 예컨대 군발성 두통의 치료 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 인간 칼시토닌 유전자 관련 펩티드(이후 본원에서 "CGRP")에 특이적으로 결합하는 항체 및 이의 단편(Fab 단편 포함)을 사용하는, 두통, 예를 들어, 군발성 두통의 즉각적 치료에 관한 것이다.
관련 기술의 설명
칼시토닌 유전자 관련 펩티드(CGRP)는 37개 아미노산 길이의 다기능성 신경펩티드로서 생산된다. 인간에게는 CGRP의 두 가지 형태인 CGRP-알파 및 CGRP-베타 형태가 존재하며 이들은 유사한 활성을 갖는다. CGRP-알파 및 CGRP-베타는 인간에서 3개의 아미노산이 다르며, 상이한 유전자로부터 유래된다. CGRP는 활성화될 때 뇌막 내에서 신경펩티드를 방출하는, 삼차 신경과 같은 수많은 조직으로부터 방출되어, 혈관확장, 혈관 누출, 및 비만 세포 분해를 특징으로 하는 신경성 염증을 매개한다(Durham, P.L., New Eng. J. Med., 350 (11):1073-75 (2004)). CGRP의 생물학적 효과는, 수용체-연관 막 단백질(RAMP)과 공동으로, 7개의 막관통 성분으로 이루어진 CGRP 수용체(CGRP-R)를 통해 매개된다. CGRP-R은 수용체 성분 단백질(RCP)의 활성을 더 필요로 하며, 이는 G 단백질을 통한 아데닐레이트 사이클라제에 대한 효율적인 결합 및 cAMP 생산에 필수적이다(Doods, H., Curr. Op. Invest. Drugs, 2(9):1261-68 (2001)).
편두통은 미국 내 성인 인구의 약 10%에 영향을 미치는 신경혈관성 장애이고, 전형적으로 극심한 두통을 수반한다. CGRP는 편두통의 발달에 두드러진 역할을 하는 것으로 여겨진다. 실제로, 여러 업체, 즉, Amgen, Eli Lilly, Teva 및 Alder Biopharmaceuticals(최근 Lundbeck A/S에 의해 인수됨)는 편두통 두통을 치료하거나 방지하는 데 사용하기 위한 항-CGRP 및 항-CGRP-R 항체를 개발하였다. 본 양수인은, 모두 그 전문이 참조로 포함되는, "ANTI-CGRP COMPOSITIONS AND USE THEREOF"라는 명칭으로 2012년 5월 21일에 출원된 PCT 출원 공개 제WO/2012/162243호, "USE OF ANTI-CGRP ANTIBODIES AND ANTIBODY FRAGMENTS TO PREVENT OR INHIBIT PHOTOPHOBIA OR LIGHT AVERSION IN SUBJECTS IN NEED THEREOF, ESPECIALLY MIGRAINE SUFFERERS"라는 명칭으로 2012년 5월 21일에 출원된 PCT 출원 공개 제WO/2012/162257호, "USE OF ANTI-CGRP OR ANTI-CGRP-R ANTIBODIES OR ANTIBODY FRAGMENTS TO TREAT OR PREVENT CHRONIC AND ACUTE FORMS OF DIARRHEA"라는 명칭으로 2012년 5월 21일에 출원된 PCT 출원 공개 제WO/2012/162253호 및 "REGULATION OF GLUCOSE METABOLISM USING ANTI-CGRP ANTIBODIES"라는 명칭으로 2014년 7월 3일에 출원된 PCT 출원 공개 제WO/2015/003122호를 포함하여 항-CGRP 항체 및 이의 용도와 관련된 특허 출원을 종래에 출원하였다.
군발성 두통(예컨대 만성 또는 삽화성 군발성 두통)은 자율신경 증상, 예컨대 눈물흘림, 결막 충혈, 및 비강 울혈과 빈번하게 연관된, 극심한 편측성 두통의 발병을 특징으로 하는, 드물지만 무력화하는 원발성 두통 장애이다(두통 장애의 국제 두통 협회 국제적 분류 제3판[HIS ICHD-3]). 군발성 두통의 진단은 ICHD-3에 의해 명확하게 인식되고 정의된다.
군발성 두통의 사회적 영향은 상당하며 상당한 직간접적 경제적 결과와 연관된다. 군발성 두통의 유병률은 0.1%로 여성에 비해 남성의 평균 발생률이 2배 내지 6배 더 높다. 그러나 남성에 비해 여성에서의 군발성 두통의 오진으로 인해 그 비율은 더 낮을 수 있다.
메타분석에 기초하여, 군발성 두통의 평생 유병률은 100,000명당 124명의 평균 유병률을 나타내며, 여기서 삽화성 형태는 만성 형태보다 6배 더 큰 유병률을 나타내었다. 군발성 두통의 거의 모든 임상적 양태, 특히 질환의 중증도, 진단의 어려움 및 이용 가능한 치료 옵션과 관련하여 유의한 충족되지 않은 수요가 존재한다. 군발성 두통 발병을 경험하는 대부분의 환자는 자신의 통증 강도를 상상할 수 있는 최악의 통증으로 또는 이와 가깝게(10 cm 시각 아날로그 척도(VAS) 사용) 평가한다.
군발성 두통의 약리학 설비(pharmacological armamentarium)는 급성/급성기 치료법, 과도기 치료법 및 방지 치료로 이루어진다. 제1선 급성 치료는 수마트립탄을 피하 투여하고 100% 산소를 흡입하는 것이다. 과도기 치료법은 방지제가 적절하게 적정될 때까지 환자를 완화하기 위해 종종 사용되며 경구 스테로이드 또는 대후두 신경(GON) 차단으로 이루어진다. 현재 이용 가능한 방지적 약리학적 치료는 비특이적이고, 불충분하며, 부작용으로 인해 제한된다. 방지 치료는 베라파밀을 최우선으로 사용하여 발병 빈도를 감소시키는 것을 목표로 하지만, 군발성 두통 환자의 50% 내지 80%만이 반응자이고; 많은 환자가 고용량을 필요로 하기 때문에 부작용으로 인해 그 사용이 제한된다. 다른 방지 치료는 이의 부작용 프로파일, 증거 부족 및 높은 비용으로 인해 매력이 떨어진다. 병원에서는 환자의 통증을 경감시키고 삶의 질을 개선하기 위해 몇몇 유형의 치료를 조합하고 있다.
칼시토닌 유전자 관련 펩티드(CGRP)의 혈장 또는 혈청 수준 증가는 통증 증후군, 예컨대 편두통 및 군발성 두통과 연관된다. 군발성 두통 환자는 편두통 환자 및 건강한 대조군에 비해 CGRP 수준이 더 높다. 편두통에서와 마찬가지로 CGRP 수준은 발병 동안 변경된다.
일 양태에서, 본 개시내용은 증상의 즉각적 경감을 필요로 하는 환자의 삽화성 또는 만성인, 군발성 두통을 치료하거나 즉각적 방지 치료를 필요로 하는 환자의 군발성 두통을 방지하는 방법을 제공하며, 이를 필요로 하는 환자에게 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열; 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는 400 mg의 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함한다. 일 구현예에 따르면 항체는 인간 IgG1 유형을 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 투여 시 적어도 하나의 군발성 두통 증상을 나타낼 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 머리 통증을 가질 수 있다.
일부 양태에서 통증은 하기 증상 편두통 유사 오심 및 전조증상 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 군발성 두통 발병 동안의 일반적인 징후 및 증상은 다음을 포함한다: 한쪽 눈, 그 뒤 또는 주위의 통증, 단측성 통증, 안절부절 못함, 눈물흘림 또는 과도한 눈물흘림, 눈 충혈, 예를 들어 통증이 있는 이환측의 눈 충혈, 예를 들어 이환측 상에서만의 코막힘 또는 콧물, 예를 들어 이환측의 이마 또는 얼굴 발한, 창백한 피부(창백함(pallor)) 또는 홍조, 예를 들어 이환측의 눈 주위 부기, 예를 들어 이환측의 처진 눈꺼풀.
일부 양태에서, 하나 이상의 상기 징후 또는 증상은 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 경감될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 더 이상 군발성 두통을 갖지 않을 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 정맥내 투여는 대략 30분 내지 60분의 기간에 걸쳐 주입될 수 있다.
일부 양태에서, 군발성 두통 증상은 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 감소될 수 있거나 없어질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 주입 완료 2시간 후 증상이 없을 수 있다.
일부 양태에서, 상기 방법은 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 방법은 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 더욱 바람직하게는 12주마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 및 물을 포함하거나 이로 이루어지는 제형에 포함될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형은 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있거나 이로 이루어질 수 있거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형은 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있거나 이로 이루어질 수 있거나, 상기 값의 +/- 5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 5% 내의 pH를 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형은 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있거나 이로 이루어질 수 있거나, 상기 값의 +/- 1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 1% 내의 pH를 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형은 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있거나 이로 이루어질 수 있거나, 상기 값의 +/- 0.5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.5% 내의 pH를 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형은 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있거나 이로 이루어질 수 있거나, 상기 값의 +/- 0.1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.1% 내의 pH를 가질 수 있다.
일부 양태에서, 상기 제형 중 상기 L-히스티딘은 L-히스티딘 및 L-히스티딘 일수화물의 혼합물을 포함한다. 상기 제형 중 상기 3.1 ㎎의 히스티딘은 L-히스티딘(1 ㎎) 및 L-히스티딘 일수화물(2.8 ㎎)의 혼합물을 포함할 수 있고, 이는 최종 제형에서 최대 3.1 ㎎ L-히스티딘 유리 염기로 합산된다.
일부 양태에서, 상기 제형은 100 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함될 수 있고 여기서 각각의 ㎖은 100 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를, pH 5.8에서 함유한다.
일부 양태에서, 상기 제형은 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함될 수 있고 여기서 각각의 ㎖은 300 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를, pH 5.8에서 함유한다.
일부 양태에서, 환자는 추가적인 편두통 또는 두통 약제를 수여받고 있거나 수여받았을 수 있다.
일부 양태에서, 환자는 항-CGRP 항체의 투여 전에, 이와 동시에 또는 후에 추가적인 편두통 또는 두통 약제를 수여받을 수 있다.
일부 양태에서, 환자는 상기 항-CGRP 항체의 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 항-CGRP 항체의 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 추가적인 편두통 또는 두통 약제를 수여받을 수 있다.
일부 양태에서, 상기 추가적인 편두통 약제는 급성 및/또는 만성 편두통 약제를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 추가적인 편두통 또는 두통 약제는 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 예컨대 EXCEDRIN® 또는 EXCEDRIN MIGRAINE®, 항구토 약제, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 추가적인 편두통 또는 두통 약제는 비오피오이드 진통제, 예컨대 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함할 수 있으며; 상기 트립탄은 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄, 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함할 수 있고; 상기 오피오이드는 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함할 수 있고; 상기 병용 약제는 진통제 효과를 갖는 2개 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함할 수 있고/있거나 상기 병용-진통제는 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함할 수 있고/있거나 상기 병용-진통제는 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 편두통 또는 두통은 급성 편두통 또는 두통, 전조증상을 갖거나 갖지 않는 편두통, 만성 편두통, 삽화성 편두통, 만성/삽화성 편두통, 편마비성 편두통, 군발성 두통, 편두통성 신경통, 만성 두통, 긴장성 두통, 일반 두통, 두부 또는 경부의 기저 구조적 문제로 인한 두통, 부비강 두통(예컨대, 부비강염과 연관된), 및 알레르기 유도 두통 또는 편두통을 포함하는 군으로부터 선택될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 피치아 패스토리스(Pichia pastoris)에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 CHO 세포에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 3개월마다 상기 400 ㎎의 항-CGRP 항체를 투여받을 수 있다.
일부 양태에서, 상기 치료 방법은 군발성 두통 증상의 즉각적 경감을 야기할 수 있다.
일부 양태에서, 상기 치료 방법은 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 야기할 수 있다.
본 개시는 이를 필요로 하는 환자에게 유효량의 적어도 하나의 항-CGRP 항체 또는 항체 단편 또는 항-CGRP-R 항체 또는 항체 단편 또는 본원에서 개시되는 상기 항체 또는 항체 단편을 포함하는 하나 이상의 제형을 투여하는 단계를 포함하는, 군발성 두통(예컨대 만성 또는 삽화성 두통)의 즉각적 치료 방법을 추가로 제공한다.
일부 양태에서, 상기 항체는 상기 환자가 군발성 두통을 갖는 동안 투여될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 항체 투여는 상기 군발성 두통의 발병 1시간 내지 6시간 내에 개시될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 군발성 두통은 삽화성 군발성 두통 또는 만성 군발성 두통을 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체 또는 항체 단편 Ab6 또는 그의 Fab 단편은 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열, 및 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 갖거나; 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열, 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 갖는다. 일 구현예에 따르면 항체는 인간 IgG1 유형을 가질 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 상기 폴리펩티드는 선택적으로 각각 인간 경쇄 및 중쇄 불변 영역 폴리펩티드, 예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역에 연결되고, 상기 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해를 변경하도록 변형될 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함한다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함하고, 여기서 이의 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해 또는 다른 효과기 기능을 변경하도록 변형될 수 있다. 일부 양태에서, 임의의 상기 언급된 항-CGRP 항체 또는 항체 단편, 바람직하게는 Ab6은 선택적으로, 본원에서 개시되는, 예를 들어 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80을, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하는 제형에 포함될 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항체의 상기 투여되는 투여량은 400 ㎎일 수 있다. 일부 양태에서, 상기 투여량은 정맥내로, 예를 들어 식염수 용액, 예컨대 적합한 부피, 예컨대 100 ㎖ 중 0.9% 염화나트륨 중에 투여될 수 있다.
일부 양태에서, 상기 환자는 군발성 두통, 예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통에 대한 ICHD-3 진단 기준을 충족한다.
일부 양태에서, 상기 환자는 타격 목록 A 내지 C에 따라 적어도 5회의 발병을 나타낼 수 있다,
A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
B. 하기 중 1개 또는 2개:
(1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
ii. 비강 울혈 및/또는 비루
iii. 눈꺼풀 부종
iv. 이마 및 얼굴 발한
v. 동공축소 및/또는 안검하수
(2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
일부 양태에서 군발성 두통 증상은 예를 들어 (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증, 및 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 하나 이상(예컨대, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 모두): 결막 충혈 및/또는 눈물흘림; 비강 울혈 및/또는 비루; 눈꺼풀 부종; 이마 및 얼굴 발한; 동공축소 및/또는 안검하수; 안절부절 못하거나 동요하는 느낌으로 이루어지거나 이를 포함하는 목록으로부터 선택된다.
일부 양태에서, 상기 환자는 관해 기간 없거나 적어도 1년 동안 3개월 미만으로 지속되는 관해를 가지며 상기에 따른 발병을 나타낼 수 있다.
본 개시는 이를 필요로 하는 환자에게 유효량의 항-CGRP 항체 또는 항-CGRP 항체 단편 또는 본원에서 개시되는 상기 항-CGRP 항체 또는 항-CGRP 항체 단편을 포함하는 하나 이상의 제형을 투여하는 단계를 포함하는, 군발성 두통을 치료하거나 방지하는 방법을 제공한다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체 Ab6은 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 갖거나; 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 갖는다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함할 수 있다. 일부 양태에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 상기 폴리펩티드는 선택적으로 각각 인간 경쇄 및 중쇄 불변 영역 폴리펩티드, 예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역에 연결되며, 상기 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해를 변경하도록 변형될 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함한다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함하고, 이의 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해 또는 다른 효과기 기능을 변경하도록 변형될 수 있다. 임의의 상기 언급된 항-CGRP 항체 또는 항체 단편, 바람직하게는 Ab6은 본원에서 개시되는, 예를 들어, 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80을, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하는 제형에 선택적으로 포함될 수 있다. 상기 항체의 투여된 투여량은 약 100 ㎎ 내지 약 400 ㎎, 예컨대 400 ㎎일 수 있다. 투여량은 상이한 수단에 의해, 예를 들어, 정맥내로, 예를 들어 식염수 용액, 예컨대 적합한 부피, 예컨대 100 ㎖ 중 0.9% 염화나트륨 중에 투여될 수 있다.
본 개시는 또한 군발성 두통의 치료를 필요로 하는 환자에게 400 ㎎의 항-CGRP 항체를 포함하는 제1 투여량을 정맥내 투여하는 단계를 포함하는, 군발성 두통을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 상기 항-CGRP 항체는 바람직하게는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하고, 여기서 상기 제1 투여량의 투여 후 처음 24시간에, 예컨대 1/2시간, 1시간, 2시간 또는 12시간 내에 환자는 군발성 두통과 관련된 통증 또는 다른 징후 또는 증상의 경감을 나타낸다.
또 다른 양태에서, 본 개시는 군발성 두통의 치료를 필요로 하는 환자에게 약 100 ㎎ 내지 약 300 ㎎의 항-CGRP 항체를 포함하는 제1 투여량을 정맥내 투여하는 단계를 포함하는, 군발성 두통을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 상기 항-CGRP 항체는 바람직하게는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하고, 투여일 다음 첫째 날에 환자는 군발성 두통과 관련된 통증 또는 증상의 경감을 나타낸다.
일부 예시적인 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체의 투여량, 예를 들어 제1 투여량은 400 ㎎일 수 있다.
다른 예시적인 구현예에서, 군발성 두통을 치료하는 방법은 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 더욱 바람직하게는 12주마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함할 수 있다.
항체는 본원에서 개시되는, 예를 들어, 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80을, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하는 제형에서 제공되거나 투여될 수 있다.
일부 구현예에서, 치료될 환자는 만성 군발성 두통 환자 또는 삽화성 군발성 두통 환자일 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 무글리코실화될 수 있거나, 글리코실화된다면 오로지 만노스 잔기만을 함유할 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드로 이루어질 수 있다. 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드로 이루어질 수 있다.
일부 구현예에서, 상기 항-인간 CGRP 항체 또는 항체 단편은 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 및/또는 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 항-인간 CGRP 항체 또는 항체 단편은 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩된 가변 경쇄 및/또는 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩된 가변 중쇄를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 항-인간 CGRP 항체 또는 항체 단편은 SEQ ID NO: 221의 경쇄 및/또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄를 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 항-인간 CGRP 항체 또는 항체 단편은 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 및/또는 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 VL 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 VH 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 폴리펩티드는 선택적으로 인간 경쇄 및 중쇄 불변 영역 폴리펩티드, 예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역에 각각 연결되고, 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해를 변경하도록 변형될 수 있고, 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함하고, 그의 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해 또는 다른 효과기 기능을 변경하도록 변형될 수 있다.
일부 구현예에서, 임의의 상기 언급된 항-CGRP 항체 또는 항체 단편은 본원에서 개시되는 제형, 예를 들어, 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하는 제형에 포함될 수 있다. 항체 또는 단편은 상이한 수단에 의해, 예를 들어, 정맥내로, 예를 들어, 적합한 부피, 예컨대, 100 ㎖ 중 0.9% 염화나트륨과 같은 식염수 용액 중에 투여될 수 있다.
다른 구현예에서, 약 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체 또는 항체 단편은, 예를 들어, 정맥내 투여된다.
예시적인 구현예에서, 항-인간 CGRP 항체 또는 항체 단편은 최대 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 3개월마다 또는 12주마다의 빈도로, 예를 들어, 정맥내로, 투여되고, 여기서 항체 투여량은 대략 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 3개월마다 또는 12주마다의 빈도로 투여되는 상이한 제형으로 분할되거나 단일 제형으로 투여된다. 어구 "항체 투여량이 상이한 제형으로 분할되거나 단일 제형으로 투여된다"는, 동일하거나 상이한 경로(예를 들어, i.v., i.m., 및/또는 s.c.), 투여 부위에 의해서일 수 있는, 비교적 짧은 기간 내에, 예를 들어, 수시간의 기간, 예를 들어 1시간 내지 8시간, 약 1일의 기간 내에, 약 2일 내에, 또는 약 1주 내에 언급된 양의 항체의 투여를 나타낸다.
다른 예시적인 구현예에서, 상기 언급된 방법에 사용되는 항-인간 CGRP 항체는 적어도 10일의 생체내 반감기를 갖는다.
다른 예시적인 구현예에서, 항-인간 CGRP 항체는 적어도 15일의 생체내 반감기를 갖는다.
다른 예시적인 구현예에서, 상기 언급된 방법에 사용되는 항-인간 CGRP 항체는 적어도 20일의 생체내 반감기를 갖는다.
다른 예시적인 구현예에서, 상기 언급된 방법에 사용되는 항-인간 CGRP 항체는 적어도 20일 내지 30일의 생체내 반감기를 갖는다.
다른 예시적인 구현예에서, 상기 언급된 방법에 사용되는 항-인간 CGRP 항체는 인간 α-CGRP 및 β-CGRP에 결합한다.
다른 예시적인 구현예에서, 투여되는 항-인간 CGRP 항체 투여량은 최대 반응(Imax)의 5% 내에서 지속적인 약력학(PK) 활성을 야기한다(더 낮은 항체 용량과 비교하여).
다른 예시적인 구현예에서, 투여되는 항-인간 CGRP 항체 투여량은 항체 투여 후 적어도 2개월 내지 3개월 동안 유지되는 지속적인 약력학(PK) 활성을 야기하고, 여기서 항-인간 CGRP 항체의 PK 분석은 혈장 농도로부터 얻어진다.
다른 예시적인 구현예에서, 투여되는 항-인간 CGRP 항체 투여량은 400 ㎎이고, 이는 2개월 이하마다의 빈도로 투여된다.
본 발명은 추가적으로 CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 특이적인 항-CGRP 항체 및 이의 단편, 특히, 원하는 에피토프 특이성, 높은 친화도 또는 결합능 및/또는 기능적 특성을 갖는 항체의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 바람직한 구현예는 CGRP에 결합하고/결합하거나 CGRP를 CGRP 수용체("CGRP-R")에 결합시켜 매개된 생물학적 활성을 억제할 수 있는 키메라 또는 인간화 항체 및 이의 단편(Fab 단편 포함)의 용법에 관한 것이고, 예를 들어, 여기서 이러한 항체는 선택적으로 이를 발현하도록 조작된 재조합 세포, 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 추가로 선택적으로 피치아 패스토리스 및 CHO 세포로부터 유래된다.
바람직한 에피토프에 대한 치료용 항체의 더 높은 친화도는 항체의 투여 용량 감소 또는 빈도 감소, 및 그에 따른 부작용 감소로 이어질 수 있으므로 특이적이고 유용한 에피토프에 대한 높은 친화도가 부작용을 피하기 위해 특히 요망된다. 치료용 항체의 고친화도 결합에 의해 유발되는 효과가 더 강력하고 더 견고할수록, 항체를 투여해야 하는 빈도가 경감되고/되거나 감소된 용량으로 투여될 수 있다. 빈번한 투여 및 높은 용량은 부작용을 유발할 위험이 더 높으므로, 특이적 에피토프에 높은 친화도로 결합하여 강력하고 연장된 효과를 제공하는 항체가 매우 유리하다. 청구되는 발명은 이러한 항체를 제공한다.
출원된 대로 출원의 데이터는 나열된 항체가 CGRP에 효과적으로 결합하고, 펩티드 호르몬이 그 세포 수용체에 결합하는 것을 방지하여 하류 세포 신호전달을 억제한다는 것을 입증한다. Ab6(ALD403 또는 엡티네주맙으로도 알려짐)은 출원된 대로 출원에 개시되어 있으며 CGRP 관련 질환의 치료를 가능하게 하는 원하는 에피토프 특이성, 높은 친화도 및 기능적 특성을 나타내는, 유용한 항체로 예시되어 있다. Ab6은 그 리간드와 빠르게 연합하고 리간드를 매우 느리게만 방출하는 것을 추가로 특징으로 한다. 2019년 7월 미국 두통 학회 제61회 연례 과학 회의에서 발표된 Ab6(ALD403 또는 엡티네주맙이라고도 함)에서 엡티네주맙:CGRP 리간드 결합 계면이 구조적으로 특성규명되었으며 CDR은 리간드 CGRP에 광범위한 접촉을 형성한다. 원자 분해능 3차원 복합체 구조 분석은 CGRP의 C 말단 단부가 중쇄 및 경쇄에 의해 형성된 깊고 좁은 포켓에 결합한다는 것을 드러내어 결합이 CGRP에 결합하기 위해 깊은 양으로 하전된 포켓 및 큰 소수성 표면을 통한다는 것을 입증하며, 두 표면 모두 강력한 모양 및 전하 상보성을 드러내고, 이는 결합 특이성 및 친화도에 기여한다. 포켓은 Ab6 VH와 VL 도메인 사이의 계면에 독특하게 형성되며 Phe37의 말단 아실화를 사용하여 활성화된 형태에서 CGRP 펩티드의 C-말단 부분을 밀접하게 수용한다. 결론은 엡티네주맙 분자 구조의 Fab 영역의 독특한 속성이 α-CGRP에 대한 결합의 특이성 및 강도를 입증한다는 것이다. 임상 시험은 CGRP 관련 질환을 치료하기 위한 Ab6의 특별한 적합성을 확인하여, 편두통 치료에 대해 6개월에 걸쳐 연장된 유효성을 입증하였다(보도 자료: "Alder Presents Positive Clinical Data for ALD403 at the 17th Congress of the International Headache Society", 2015년 5월 15일) 및 부록 4(2상 인간 임상 시험 결과: "Randomized, double-blind, placebo-controlled trial of ALD403, an anti-CGRP antibody in the prevention of frequent episodic migraine"("시험 결과")). Ab6을 사용한 임상 시험으로부터의 추가 결과는 편두통 진단을 받은 개체에게 Ab6(ALD403)(1000 ㎎)을 단회 정맥내 투여 후 환자가 편두통 일수의 상당한 감소를 보고하였음을 입증하였다. 특히, 치료 후 12주에 걸쳐 ALD403을 수여받은 환자의 61%는 편두통 일수의 50% 감소를 보고했으며(위약을 수여받은 환자의 33%와 비교하여), ALD403을 수여받은 환자의 33%는 편두통 일수의 75% 감소를 보고했고(위약을 수여받은 환자의 9%와 비교하여), 놀랍게도 ALD403을 수여받은 환자의 16%는 편두통 일수의 100% 감소를 보고했다(위약을 수여받은 환자의 0%와 비교하여). ALD403 치료 후 24주 후에도 동일한 경향이 관찰되었다. 특히, ALD403을 수여받은 환자의 53%는 편두통 일수의 50% 감소를 보고했으며(위약을 수여받은 환자의 28%와 비교하여), ALD403을 수여받은 환자의 26%는 편두통의 75%를 보고했고(위약을 수여받은 환자의 7%와 비교하여), ALD403을 수여받은 환자의 11%는 편두통 일수의 100% 감소를 보고하였다(위약을 수여받은 환자의 0%와 비교하여).
본 발명의 또 하나의 바람직한 구현예에서, cAMP의 CGRP-알파-, CGRP-베타-, 및 랫트 CGRP-주도의 생산을 억제하는 전장 항체 및 이의 Fab 단편이 고려된다. 본 발명의 추가의 바람직한 구현예에서, 투여 후 수령체에서 혈관확장을 감소시키는 전장 및 이의 Fab 단편이 고려된다.
본 발명은 또한 하나 이상의 기능적 또는 검출 가능한 모이어티에 컨쥬게이트된 항-CGRP 항체 및 이의 결합 단편의 컨쥬게이트의 용법을 고려한다. 본 발명은 또한 키메라 또는 인간화 항-CGRP 또는 항-CGRP/CGRP-R 복합 항체 및 이의 결합 단편의 용법을 고려한다. 일 구현예에서, 결합 단편은 Fab, Fab', F(ab')2, Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역의약품), 카멜바디, 나노바디, 및 IgNAR을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
도 1a 내지 도 1f는 항체 Ab1 내지 Ab14에 대한 전장 중쇄의 폴리펩티드 서열을 이들의 프레임워크 영역(FR), 상보성 결정 영역(CDR), 및 불변 영역 서열로 구분하여 제공한다.
도 2a 내지 도 2d는 항체 Ab1 내지 Ab14에 대한 전장 경쇄의 폴리펩티드 서열을 이들의 프레임워크 영역(FR), 상보성 결정 영역(CDR), 및 불변 영역 서열로 구분하여 제공한다.
도 3a 내지 도 3p는 항체 Ab1 내지 Ab14에 대한 전장 중쇄를 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열을 이들의 프레임워크 영역(FR), 상보성 결정 영역(CDR), 및 불변 영역 코딩 서열로 구분하여 제공한다.
도 4a 내지 도 4i는 항체 Ab1 내지 Ab14에 대한 전장 경쇄를 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열을 이들의 프레임워크 영역(FR), 상보성 결정 영역(CDR), 및 불변 영역 코딩 서열로 구분하여 제공한다.
도 5는 가변 영역 및 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 중쇄 폴리펩티드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 6은 프레임워크 영역(FR) 및 불변 영역을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 중쇄 폴리펩티드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 7은 가변 영역 및 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 경쇄 폴리펩티드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 8은 프레임워크 영역(FR) 및 불변 영역을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 경쇄 폴리펩티드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 9는 가변 영역 및 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 중쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내의 폴리뉴클레오타이드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 10은 프레임워크 영역(FR) 및 불변 영역을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 중쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 11은 가변 영역 및 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 경쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내의 폴리뉴클레오타이드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 12는 프레임워크 영역(FR) 및 불변 영역을 포함하는 서열 특징의 항체 Ab1 내지 Ab14의 전장 경쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 예시적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내의 폴리펩티드 서열 좌표, 및 각각의 개별 특징의 SEQ ID NO를 제공한다.
도 13은 기간 전반에 걸쳐 각각의 모니터링 시점에 편두통의 50%, 75% 또는 100% 감소를 나타낸 Ab6(처리군) 또는 위약군으로 처리된 실시예 2에 기재된 인간 임상 시험에서 대상체의 수를 나타낸다. 각각의 군의 우측 막대는 1000 ㎎ Ab6를 받은 환자에 해당하고, 각각의 군의 좌측 막대는 매칭되는 위약 대조군에 해당한다. 각각의 반응률 군에서, Ab6를 받은 환자는, 나타나 있는 각각의 개개 군에서 0.0155, 0.0034, 및 0.0006의 p 값으로, 위약-처리 대조군보다 유의하게 더 큰 반응률을 가졌다. 투여된 항체는 피. 패스토리스에서 생성되었고, SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201의 중쇄 폴리펩티드로 이루어졌다.
도 14는 치료 후 12주에 걸친 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 나타낸다. (p=0.0078). 윗선(적색) 및 아랫선(청색)은 각각 위약-처리 대조군 및 1000 ㎎ Ab6이 투여된 환자에 대한 결과를 나타낸다.
도 15는 치료 후 12주에 걸친 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 삽화수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 나타낸다. 윗선(적색) 및 아랫선(청색)은 각각 위약-처리 대조군 및 1000 ㎎ Ab6이 투여된 환자에 대한 결과를 나타낸다.
도 16은 치료 후 12주에 걸친 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 시간수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 나타낸다. 윗선(적색) 및 아랫선(청색)은 각각 위약-처리 대조군 및 1000 ㎎ Ab6이 투여된 환자에 대한 결과를 나타낸다.
도 17은 환자 선별, 처리군 및 대조군으로의 배정, 및 후속 조치를 거친 환자의 손실을 요약한 것이다.
도 18은 기준선, 치료 후 제4주, 치료 후 제8주 및 치료 후 제12주의 Ab6-처리군 및 위약군에 대한 HIT-6 반응자 분석을 비교한 것이다.
도 19는 HIT-6 분석에서 기준선 및 Ab6 투여후 두통의 효과가 단지 "일부 있음" 또는 "거의 없음/전혀 없음"을 지시한 환자의 백분율을 나타낸다. 기준선에서 대부분의 환자는 편두통의 "상당한" 또는 "중증" 영향을 가졌다. 각각의 후속 시점에, 1000 ㎎ Ab6를 투여받은 환자(청색으로 되어 있는, 각각의 군의 좌측 막대)는 위약 대조군(적색으로 되어 있는, 각각의 군의 우측 막대)에 비해 유의하게 더 큰 백분율로 단지 "일부 있음" 또는 "거의 없음/전혀 없음"의 HIT-6 영향을 가졌다.
도 20은 1000 ㎎의 단일 투여량으로 정맥내 투여된 Ab6에 대한 약동학(PK) 프로파일을 포함한다.
도 21은 Ab6의 단일 1000 ㎎ 정맥내 투여량에 대한 무혈장 약동학(PK) 매개변수 N(환자 수), 평균, 및 표준 편차(SD)를 포함한다. 표에 나타낸 매개변수 및 단위는 Cmax(㎍/㎖), AUC0-∞(㎎*hr/㎖), 반감기(일), Vz(ℓ) 및 CL(㎖/hr)이다.
도 22는 실시예 2에 기재된 연구에 대한 단일 용량으로서 Ab6(1000 ㎎ i.v.) 대 위약의 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 변화(평균 +- SEM)를 나타낸다.
도 23은 실시예 2에 기재된 연구에 대한 전체 분석 집단의 시간 경과에 따른 평균 편두통 일수(+/- SD)를 나타낸다. 관찰된 빈도를 완료율의 역수와 곱함으로써 21일 내지 27일 동안 e다이어리가 완료된 방문 간격에 정규화가 적용되었다.
도 24는 실시예 2에 기재된 연구의 1주 내지 4주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 25는 실시예 2에 기재된 연구의 1주 내지 4주 동안 위약군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 26은 실시예 2에 기재된 연구의 5주 내지 8주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 27은 실시예 2에 기재된 연구의 5주 내지 8주 동안 위약군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 28은 실시예 2에 기재된 연구의 9주 내지 12주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 29는 실시예 2에 기재된 연구의 9주 내지 12주 동안 위약군에 대한 실제 및 변화 편두통 일수의 분포를 나타낸다.
도 30은 실시예 2에 기재된 연구의 Ab6 및 위약 처리군에 대한 50% 반응자 비율을 나타낸다. 편두통 빈도가 50% 이상 감소된 대상체는 50% 반응자인 것으로 간주되었다. 관찰된 빈도를 완료율의 역수와 곱함으로써 21일 내지 27일 동안 e다이어리가 완료된 방문 간격에 정규화가 적용되었다.
도 31은 실시예 2에 기재된 연구의 Ab6 및 위약 처리군에 대한 75% 반응자 비율을 나타낸다. 편두통 빈도가 75% 이상 감소된 대상체는 75% 반응자인 것으로 간주되었다. 도 30에 기재된 바와 같이 정규화가 적용되었다.
도 32는 실시예 2에 기재된 연구의 Ab6 및 위약 처리군에 대한 100% 반응자 비율을 나타낸다. 편두통 빈도가 100% 감소된 대상체는 100% 반응자인 것으로 간주되었다. 도 30에 기재된 바와 같이 정규화가 적용되었다.
도 33은 실시예 2에 기재된 연구의 전체 분석 집단에 대한 시간 경과에 따른 평균 편두통 중증도를 나타낸다. 사용된 척도와 관련하여, 3의 평균 편두통 스코어는 "증등도 통증"을 나타낸다.
도 34는 실시예 2에 기재된 연구의 위약 및 처리군에 대한 측정된 속성의 기준선으로부터의 변화를 요약한 것이다.
도 35는 실시예 3에 기재된 임상 시험에서 제1일, 제7일, 제14일, 제21일, 및 제28일에 300 ㎎, 100 ㎎, 및 위약 처리군에서 편두통이 있는 환자의 백분율을 나타낸다. 맨 윗선은 위약에 대한 결과를 나타내고, 맨 아랫선은 300 ㎎ 투여량에 대한 결과를 나타내고, 중간선은 100 ㎎ 투여량에 대한 결과를 나타낸다.
도 36은 실시예 3에 기재된 임상 시험에서 제1개월 내에, 제1개월 내지 제3개월에 걸쳐(1차 주입 후), 및 제4개월 내지 제5개월에 걸쳐(2차 주입 후) 편두통 일수의 50% 감소를 달성한 300 ㎎ 및 100 ㎎ 처리군에서 환자의 백분율을 나타낸다. 각각의 그래프에서, 데이터 막대는 좌측에서 우측으로 100 ㎎, 300 ㎎, 및 위약군에 대한 결과를 나타낸다. 통계적 유의성은 나타낸 바와 같다. ++는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타내고; +는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타내고(비조정); §는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타낸다(사후).
도 37은 실시예 3에 기재된 임상 시험에서 제1개월 내에, 제1개월 내지 제3개월에 걸쳐(1차 주입 후), 및 제4개월 내지 제5개월에 걸쳐(2차 주입 후) 편두통 일수의 75% 감소를 달성한 300 ㎎ 및 100 ㎎ 처리군에서 환자의 백분율을 나타낸다. 데이터 순서 및 통계적 유의성 표시는 도 36에 지시된 바와 같다.
도 38은 실시예 3에 기재된 임상 시험에서 제1개월 내에, 제1개월 내지 제3개월에 걸쳐(제1 주입 후), 및 제4개월 내지 제5개월에 걸쳐(제2 주입 후) 편두통 일수의 100% 감소를 달성한 300 ㎎ 및 100 ㎎ 처리군에서 환자의 백분율을 나타낸다. 데이터 순서 및 통계적 유의성 라벨은 도 36에 지시된 바와 같다.
도 39는 실시예 3에 기재된 임상 시험에서 각각의 처리군의 환자 특징을 요약한 것이다. *편두통 방지 치료에 대한 미국 신경 학회(American Academy of Neurology)/미국 두통 학회(American Headache Society) 지침에 따름(코드화된 의료 데이터의 임상 검토에 의해 확인된 약제); SD, 표준 편차; BMI, 체질량 지수.
도 40은 만성 편두통 환자의 인간 임상 시험에 대한 기준선 하위군별 제1개월 내지 제3개월에 걸친 평균 편두통 일수(MMD)의 기준선으로부터의 변화에서 위약과의 차이이다. 그래프에서, 데이터 점은 평균 값을 나타내며, 선은 맨 좌측에 표시된 바와 같이 각각의 하위군에 대한 100 ㎎(윗선) 또는 300 ㎎(아랫선) 처리군의 위약으로부터의 변화의 95% 신뢰 구간(CI)을 나타낸다.
도 41은 삽화성 편두통 환자의 인간 임상 시험에 대한 기준선 하위군별 제1개월 내지 제3개월에 걸친 평균 편두통 일수(MMD)의 기준선으로부터의 변화에서 위약과의 차이이다. 그래프는 도 40에서와 같이 표시되어 있다.
도 42는 기준선에 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 만성 편두통 환자에서 2개 용량 간격에 걸친 평균 편두통 일수(MMD)의 기준선으로부터의 변화이다. 세모: 위약(n=366). 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6(n=356). 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6(n=350).
도 43은 기준선에 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 만성 편두통 환자에서 급성 약제 사용의 평균 일수이다. 세모: 위약(n=366). 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6(n=356). 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6(n=350).
도 44는 기준선 급성 약제 사용 일수가 상이한 만성 편두통 환자의 하위군별 급성 약제 사용의 기준선으로부터의 변화이다. 실선: 기준선에 월 10일 이상 급성 약제를 사용한 환자. 점선: 기준선에 적어도 월 1일 및 월 10일 미만 급성 약제를 사용한 환자. 세모: 위약. 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6. 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6.
도 45는 기준선 급성 약제 사용과 만성 편두통 환자의 하위군별 급성 약제 일수의 요약이다.
도 46은 기준선에 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 삽화성 편두통 환자에서 2개 용량 간격에 걸친 평균 편두통 일수(MMD)의 기준선으로부터의 변화이다. 세모: 위약(n=222). 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6(n=221). 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6(n=222).
도 47은 기준선에 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 삽화성 편두통 환자에서 평균 급성 약제 사용 일수이다. 세모: 위약(n=222). 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6(n=221). 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6(n=222).
도 48은 기준선 급성 약제 사용 일수가 상이한 삽화성 편두통 환자의 하위군별 급성 약제 사용의 기준선으로부터의 변화이다. 실선: 기준선에 월 10일 이상 급성 약제를 사용한 환자. 점선: 기준선에 적어도 월 1일 및 월 10일 미만 급성 약제를 사용한 환자. 세모: 위약. 원: 용량 당 100 ㎎ Ab6. 네모: 용량 당 300 ㎎ Ab6.
도 49는 기준선 급성 약제 사용과 삽화성 편두통 환자의 하위군별 급성 약제 일수의 요약이다.
도 50은 편두통 데이터에서의 제-1일의 포함. 제0일은 주입일로 정의된다. 따라서, 제0일 상의 데이터는 주입-후 치료 효과를 시사한다.
군발성 두통의 치료를 위한 항-CGRP 항체의 용도가 본원에 기재된다. 추가적으로, 항-CGRP 항체는 만성 및 삽화성 군발성 두통의 치료에 효과적인 것으로 여겨진다. 이 치료는 투여 후 첫째 날에 경감을 보이면서 효능의 매우 빠른 개시 및 첫 ½시간 내(예컨대 처음 시간, 2시간, 3시간 또는 예를 들어 12시간 이내)에서조차 증상과 통증에 대한 효과가 있는 것으로 나타났다.
정의
본 발명은 기재된 특정한 방법론, 프로토콜, 세포주, 동물 종 또는 속, 및 시약으로 제한되지 않고 달라질 수도 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 본원에서 사용되는 용어는 단지 특정한 구현예를 설명하려는 목적을 위한 것이며, 본 발명의 범위를 제한하려고 의도된 것이 아니고, 본 발명의 범위는 첨부된 청구항에 의해서만 제한될 것임이 이해되어야 한다. 본원에서 사용되는 단수형 및 정관사형은 상기 문맥이 명확하게 다르게 지시하지 않는 한, 복수의 지시 대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "세포"의 언급은 복수의 상기 세포를 포함하며, "단백질"의 언급은 하나 이상의 단백질 및 당업자에게 널리 공지된 이의 동등물 등의 언급을 포함한다. 본원에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어들은, 달리 분명하게 지시되지 않는 한 본 발명이 속하는 기술분야에서 당업자에게 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다.
본원에서 사용되는 용어 "군발성 두통" 및 "만성" 또는 "삽화성" 군발성 두통은 그 질병이 ICHD-3(Headache Classification Committee of the International Headache Society (IHS), The International Classification of Headache Disorders, 3rd edition, Cephalalgia. 2018 Jan;38(1):1-211)에 지정된 기준을 충족하는 군발성 두통을 지칭한다. 군발 기간(cluster period)은 일반적으로 수 주 내지 수 개월 동안 지속된다. 각 군발 기간의 시작일 및 지속기간은 기간마다 일관될 수 있다. 예를 들어, 군발 기간은 계절성으로, 예컨대 매년 봄 또는 매년 가을에 발생할 수 있다. 삽화성 군발성 두통의 경우 두통은 1주 내지 예를 들어, 12주 동안 발생하며, 또 다른 군발 기간이 시작되기 전에, 예를 들어 12개월 정도 지속될 수 있는 통증이 없는 관해 기간에 의해 분리된다. 만성 군발 기간이 1년 초과 동안 계속될 수 있거나 통증이 없는 기간이 한 달 미만 지속될 수 있다.
군발성 두통은 일반적으로 경고 없이 빠르게 발생(strike)하지만 편두통과 유사한 오심 및 전조증상이 초기 징후일 수 있다. 두통 동안 일반적인 징후 및 증상은 다음을 포함한다:
· 일반적으로 한쪽 눈 안, 뒤 또는 주위에 위치하지만 얼굴, 두부 및 경부의 다른 부위로 방사될 수 있는 극심한 통증
· 단측 통증
· 안절부절 못함
· 과도한 눈물흘림
· 이환측의 눈 충혈
· 이환측의 코막힘 또는 콧물
· 이환측의 이마 또는 얼굴 발한
· 창백한 피부(창백함) 또는 안면 홍조
· 이환측 눈 주위의 부기
· 이환측의 눈꺼풀 처짐
군발 기간 동안 두통은 보통 매일, 때로는 하루에 여러 번 발생한다. 단일 발병은 15분 내지 3시간 지속될 수 있으며 발병은 종종 매일 같은 시간에 발생한다. 대부분의 발병은 밤에, 보통 잠자리에 들고 1시간 내지 2시간 후에 발생한다.
군발성 두통을 경험하는 대상체는 안와, 안와상, 측두 또는 이들 부위의 임의의 조합인, 15분 내지 180분 지속되고 격일 1회 내지 1일 8회 발생하는 중증의, 엄밀히 일측성인 통증의 발병을 경험할 것이다. 통증은 동측 결막 충혈, 눈물흘림, 비강 울혈, 비루, 이마 및 얼굴 발한, 동공축소, 안검하수 및/또는 눈꺼풀 부종 및/또는 안절부절 못함 또는 동요와 연관된다. 진단 기준은 아래 목록 A 내지 C에 따라 적어도 5회의 발병을 나타내는 대상체를 포함한다.
A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
B. 하기 중 1개 또는 2개
(1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
ii. 비강 울혈 및/또는 비루
iii. 눈꺼풀 부종
iv. 이마 및 얼굴 발한
v. 동공축소 및/또는 안검하수
(2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
만성 군발성 두통의 경우, 대상체는 관해 기간 없거나 3개월 미만의 관해 기간을 가지고, 적어도 1년 동안 위에 따른 발병을 나타낼 수 있다. 삽화성 군발성 두통의 경우, 대상체는 적어도 3개월 동안 지속되는 통증이 없는 기간에 의해 분리되는, 7일 내지 1년 지속되는 기간에 발생하는 위에 따른 발병을 나타낼 수 있다.
통증은 일반적으로 시작하자마자 갑자기 끝나며 강도는 급격히 감소한다. 발병 후 대부분의 사람들은 통증이 없지만 지쳐 있다.
본원에서 사용되는 용어 "주간 발병의 감소의 감소"는 환자가 극심한 편측성 두통의 발병을 가질 가능성의 감소(예를 들어, 명시된 백분율 감소, 예컨대 50%) 및/또는 환자가 명시된 기간, 예컨대 항체의 첫 번째 투여량 후, 18시간, 20시간, 24시간, 28시간 또는 30시간 기간, 바람직하게는 24시간 기간, 또는 항체 투여일 다음 첫째 날(즉, 항체 투여가 완료된 날 다음 첫 번째 하루 종일)에 자신의 발병 통증 강도를 상상할 수 있는 최악의 통증으로 또는 이에 가까운 수준으로(10 ㎝ 시각 아날로그 척도(VAS) 사용) 평가할 가능성의 감소를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "군발성 두통으로 진단된"은 환자의 공식적인 진단이 수행되었는지 여부에 관계없이 군발성 두통의 임상 기준, 예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통의 임상 기준을 충족하는 환자를 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 "정맥내 투여하는"은 물질, 예를 들어, 항체가 그러한 환자의 순환, 가장 전형적으로는 정맥 순환에 직접 도입되는 투여 방식을 나타낸다. 이러한 물질은 담체 유체, 예컨대, 수용액, 예를 들어, 생리 식염수에 도입될 수 있다. 이러한 물질은, 투여가 단기간에 걸쳐(예를 들어, 1일 내, 바람직하게는 12시간 내, 더욱 바람직하게는 6시간 내, 및 가장 바람직하게는 1시간 내지 2시간 내) 완료되는 한, 단일 제형 또는 다중 제형으로 투여될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "즉각적 경감"은 환자의 증상, 예를 들어 군발성 두통 징후 또는 만성/삽화성 군발성 두통과 연관된 증상의 경감을 의미하는 것으로 의도되며, 여기서 상기 징후 또는 증상의 경감은 항-CGRP 항체 치료 후 신속하게 또는 즉각적으로 경험되고, 예를 들어, 하나 이상의 징후 또는 증상의 경감은 Ab6를 사용하는 주입 후 짧은 시기 내에, 예컨대 수 분 또는 수 시간 내에, 예컨대 10분, 20분, 30분, 60분, 1시간, 2시간 또는 6시간, 최대, 예를 들어, 1일 내에, 환자에 의해 경험된다.
본원에서 사용되는 용어 "즉각적 방지 치료"는 환자의 군발성 두통 증상의 방지, 예를 들어 만성/삽화성 군발성 두통과 연관된 군발성 두통의 방지를 의미하는 것으로 의도된다. 이러한 맥락에서, "즉각적 방지 치료"는 대상체의 치료 또는 군발성 두통이 발생할 위험이 있는 대상체의 예방적 치료를 지칭하며, 대상체에서 군발성 두통이 발생할 확률의 감소를 야기한다. 전형적으로 증상의 방지는 항-CGRP 항체 치료 후 신속하게 또는 즉각적으로 경험되고, 예를 들어, 하나 이상의 증상의 방지는 Ab6으로의 주입 후 단기간 내에, 예컨대 수 분 또는 수 시간 내에, 예컨대 10분, 20분, 30분, 60분, 1시간, 2시간 또는 6시간, 최대 예를 들어, 1일 내에 환자에 의해 경험된다.
본원에서 사용되는 용어 "4-점 척도" 또는 "4점 통증 척도" 또는 "VRS" 또는 "VRS-4"는 통증을 측정하기 위해 사용되는 4-점 구두 평가 척도(VRS)(VRS-4)를 나타낸다(문헌["The International Classification of Headache Disorders, 3rd edition", Cephalalgia, 2018, Vol. 38(1) 1-211, at pg. 210 ("intensity of pain")] 참조). VRS에서 환자는 3은 중증, 2는 중등도, 1은 경증, 및 0은 통증 없음의 4점 척도(0 내지 3) 상에서 통증을 구두 평가하도록 요청된다. 이는 또한 그 기능적 결과의 관점으로 표현되는 구두 평가 척도 상에서 스코어링될 수 있다: 0, 통증 없음; 1, 경증 통증, 일반 활동을 방해하지 않음; 2, 중등도 통증, 일반 활동을 억제하지만 전체적으로 방지하는 것은 아님; 3, 중증 통증, 모든 활동을 방지함.
칼시토닌 유전자 관련 펩티드(CGRP): 본원에서 사용되는 CGRP는 American Peptides(Sunnyvale CA) 및 Bachem(Torrance, CA)으로부터 이용 가능한 하기 호모사피엔스 CGRP-알파 및 호모사피엔스 CGRP-베타 아미노산 서열뿐만 아니라, 이들 CGRP 아미노산 서열의 임의의 막-결합 형태 외에도, 이 서열의 돌연변이(뮤티엔), 스플라이스 변이체, 이소형, 오르토로그, 동족체 및 변이체를 포함한다:
CGRP-알파: ACDTATCVTHRLAGLLSRSGGVVKNNFVPTNVGSKAF-NH2(SEQ ID NO: 561), 여기서, 말단 페닐알라닌은 아미드화되어 있음;
CGRP-베타: ACNTATCVTHRLAGLLSRSGGMVKSNFVPTNVGSKAF-NH2(SEQ ID NO: 562), 여기서, 말단 페닐알라닌은 아미드화되어 있음.
발현 벡터: 이들 DNA 벡터는 표적 숙주 세포, 예를 들어, 효모 또는 포유동물 세포, 예컨대, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포 내에서 외래 단백질을 발현시키기 위한 조작을 용이하게 하는 요소를 함유한다. 간편하게, 형질전환을 위한 DNA의 서열 및 생산의 조작이 박테리아 숙주, 예를 들어, 대장균에서 일차적으로 수행되고, 일반적으로 벡터들은 박테리아 복제 기점 및 적절한 박테리아 선별 마커를 포함하는, 상기 조작을 용이하게 하는 서열들을 포함할 것이다. 선별 마커는 선별 배양 배지에서 성장한 형질전환된 숙주 세포의 생존 또는 성장에 필요한 단백질을 인코딩한다. 선별 유전자를 함유하는 벡터로 형질전환되지 않은 숙주 세포는 배양 배지에서 생존하지 않을 것이다. 전형적인 선별 유전자는 (a) 항생제 또는 다른 독소에 대한 내성을 부여하는 단백질, (b) 영양요구성 결핍을 보충하는 단백질, 또는 (c) 복합 배지로부터 이용 가능하지 않은 매우 중요한 영양소를 공급하는 단백질을 인코딩한다. 효모의 형질전환을 위한 예시적인 벡터 및 방법은, 예를 들어, 문헌[Burke, D., Dawson, D., & Stearns, T. (2000). Methods in yeast genetics: a Cold Spring Harbor Laboratory course manual. Plainview, N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press]에 기재되어 있다.
효모 또는 포유동물 세포에 사용하기 위한 발현 벡터는 일반적으로 형질전환된 효모 균주 또는 형질전환된 포유동물 세포를 확인하기 위한 영양요구성 또는 약물 선별 마커를 포함하는, 효모 또는 포유동물 특이적 서열들을 추가로 포함할 것이다. 약물 마커는 숙주 세포에서 벡터의 카피수를 증폭시키는 데 추가로 사용될 수 있다.
관심대상 폴리펩티드 코딩 서열은 숙주 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포에서의 폴리펩티드의 발현을 제공하는 전사 및 번역 조절 서열들에 작동 가능하게 연결된다. 이들 벡터 성분은 하기 중 하나 이상을 포함할 수 있지만, 이로 제한되지 않는다: 인핸서 요소, 프로모터, 및 전사 종결 서열. 폴리펩티드의 분비를 위한 서열들, 예를 들어, 신호 서열 등이 또한 포함될 수 있다. 효모 또는 포유동물 복제 기점은 선택적인데, 발현 벡터가 종종 숙주 세포 게놈 내로 통합되기 때문이다. 발명의 일 구현예에서, 관심대상 폴리펩티드는 효모 2배체 세포로부터의 폴리펩티드의 최적화된 분비를 제공하는 서열들에 작동 가능하게 연결되거나 융합된다.
핵산은 또 다른 핵산 서열과 기능적 관계 내로 배치될 때 "작동 가능하게 연결"된다. 예를 들어, 신호 서열을 위한 DNA는, 만약 이것이 폴리펩티드의 분비에 관여하는 전구단백질로서 발현되면, 폴리펩티드를 위한 DNA에 작동 가능하게 연결되고, 프로모터 또는 인핸서는 만약 이것이 서열의 전사에 영향을 미치면, 코딩 서열에 작동 가능하게 연결된다. 일반적으로, "작동 가능하게 연결"되는 것은 연결될 DNA 서열이 인접하는 것을 의미하고, 분비성 리더인 경우, 인접하고 해독틀(reading frame) 안에 있다는 것을 의미한다. 그러나, 인핸서는 인접할 필요가 없다. 연결은 간편한 제한 부위에서의 결찰(ligation)에 의해 또는 대안적으로는 당업자에게 공지된 PCR/재조합 방법(GatewayR Technology; Invitrogen, Carlsbad California)에 의해 달성된다. 그러한 부위가 존재하지 않는 경우, 합성 올리고뉴클레오타이드 어댑터 또는 링커가 통상적 관례에 따라 사용된다.
프로모터는 구조 유전자(일반적으로 약 100 내지 1000 bp 내)의 시작 코돈의 상류(5')에 위치하는 비번역 서열로서, 이들이 작동 가능하게 연결된 특정한 핵산 서열의 전사 및 번역을 제어한다. 이러한 프로모터들은 몇 가지 계열에 속한다: 유도성(inducible), 항시적(constitutive), 및 억제성(repressible) 프로모터(억제인자의 부재에 반응하여 전사 수준을 증가시킴). 유도성 프로모터는 배양 조건의 일부 변화, 예를 들어, 영양소의 존재 또는 부재 또는 온도 변화에 반응하여 이들의 제어 하에 있는 DNA로부터 증가된 전사 수준을 개시할 수 있다.
프로모터 단편은 또한 숙주 게놈 내의 동일한 부위 내로의 발현 벡터의 상동 재조합 및 통합을 위한 부위로서 작용할 수 있고, 대안적으로 선별 마커가 상동 재조합을 위한 부위로서 사용된다. 피치아 유래의 적합한 프로모터의 예는 AOX1와 프로모터(Cregg et al. (1989) Mol. Cell. Biol. 9:1316-1323); ICL1 프로모터(Menendez et al. (2003) Yeast 20(13):1097-108); 글리세르알데하이드-3-포스페이트 탈수소효소 프로모터(GAP)(Waterham et al. (1997) Gene 186(1):37-44); 및 FLD1 프로모터(Shen et al. (1998) Gene 216(1):93­102)를 포함한다. GAP 프로모터는 강한 항시적 프로모터이고 AOX 및 FLD1 프로모터는 유도성이다.
다른 효모 프로모터는 ADH1, 알코올 탈수소효소 II, GAL4, PHO3, PHO5, Pyk, 및 이들로부터 유래된 키메라 프로모터를 포함한다. 추가로, 비-효모 프로모터, 예컨대 포유동물, 곤충, 식물, 파충류, 양서류, 바이러스, 및 조류 프로모터가 본 발명에 사용될 수 있다. 가장 전형적으로 상기 프로모터는 포유동물 프로모터(발현된 유전자에 대해 잠재적으로 내인성임)를 포함하거나 효모 시스템에서의 효율적인 전사를 제공하는 효모 또는 바이러스 프로모터를 포함할 것이다.
포유동물 프로모터의 예는, 특히, 사이토메갈로바이러스(cytomegalovirus; CMV) 유래 프로모터, 닭 3-액틴(chicken 3-actin; CBM) 유래 프로모터, 선종성 용종증 대장균(adenomatous polyposis coli; APC) 유래 프로모터, 류신-풍부 반복 함유 G 단백질-결합 수용체 5(leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5; LGR5) 프로모터, CAG 프로모터, 베타 액틴 프로모터, 연장 인자-1(elongation factor-1; EF1) 프로모터, 초기 성장 반응 1(early growth response 1; EGR-1) 프로모터, 진핵세포 개시 인자 4A(eukaryotic initiation factor 4A; EIF4A1) 프로모터, 시미안 바이러스 40(simian virus 40; SV40) 초기 프로모터, 마우스 유방 종양 바이러스(mouse mammary tumor virus; MMTV), 인간 면역결핍 바이러스(human immunodeficiency virus; HIV) 긴 말단 반복(long terminal repeat; LTR) 프로모터, MoMuLV 프로모터, 조류 백혈병 바이러스 프로모터, 엡스테인-바 바이러스(Epstein-Barr virus) 급초기 프로모터, 라우스 육종 바이러스(Rous sarcoma virus) 프로모터, 뿐만 아니라 인간 유전자 프로모터, 예컨대, 이로 제한되지는 않지만, 액틴 프로모터, 미오신 프로모터, 헤모글로빈 프로모터, 및 크레아틴 키나제 프로모터를 포함한다. 상기 프로모터들 중 둘 이상의 조합이 또한 사용될 수 있다. 추가로, 유도성 프로모터가 사용될 수 있다. 유도성 프로모터의 사용은 그러한 발현을 원하는 경우 작동 가능하게 연결되는 폴리뉴클레오타이드 서열의 발현을 작동시키거나, 발현을 원하지 않는 경우 발현을 작동시키지 않을 수 있는 분자 스위치를 제공한다. 유도성 프로모터의 예는 메탈로티오닌 프로모터, 글루코코르티코이드 프로모터, 프로게스테론 프로모터, 및 테트라사이클린 프로모터를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
관심대상 폴리펩티드는 직접적인 재조합뿐만 아니라, 이종 폴리펩티드, 예를 들어, 신호 서열과의 융합 폴리펩티드, 또는 성숙한 단백질 또는 폴리펩티드의 N-말단에 특이적 절단 부위를 갖는 다른 폴리펩티드로서 재조합으로 생산될 수 있다. 일반적으로, 신호 서열은 벡터의 한 성분이거나 벡터 내로 삽입된 폴리펩티드 코딩 서열의 일부일 수 있다. 바람직하게 선택된 이종 신호 서열은 숙주 세포 내에서 이용 가능한 표준 경로 중 하나를 통해 인식되고 가공되는 신호 서열이다. 에스. 세레비지애 알파 인자 프리-프로신호는 피. 패스토리스로부터의 다양한 재조합 단백질의 분비에 효과적인 것으로 입증되었다. 다른 효모 신호 서열들은 알파 접합 인자 신호 서열, 인버타제 신호 서열, 및 다른 분비된 효모 폴리펩티드들로부터 유래된 신호 서열을 포함한다. 또한, 이들 신호 펩티드 서열은 2배체 효모 발현 시스템에서 향상된 분비를 제공하기 위해 조작될 수 있다. 포유동물뿐만 아니라 효모 세포에서 사용하기 위한 분비 신호들은 또한 포유동물 신호 서열을 포함하며, 이는 분비될 단백질에 대해 이종일 수 있거나, 분비될 단백질에 대한 천연 서열일 수 있다. 신호 서열은 프리-펩티드 서열을 포함하며, 일부 경우, 프로펩티드 서열을 포함할 수 있다. 면역글로불린 사슬, 예컨대, K28 프리프로독소 서열, PHA-E, FACE, 인간 MCP-1, 인간 혈청 알부민 신호 서열, 인간 Ig 중쇄, 인간 Ig 경쇄 등에서 발견되는 신호 서열들을 포함하는 이러한 많은 신호 서열들이 당분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Hashimoto et. al. Protein Eng 11(2) 75 (1998); 및 Kobayashi et. al. Therapeutic Apheresis 2(4) 257 (1998)]을 참조한다.
전사는 벡터 내로 전사 활성자 서열을 삽입함으로써 증가될 수 있다. 이들 활성자는 보통 약 10 bp 내지 300 bp인 DNA의 시스-작용 요소로서, 프로모터 상에 작용하여 그 전사를 증가시킨다. 전사 인핸서는 상대적으로 배향 및 위치 독립적이며, 인트론 내에서뿐만 아니라 코딩 서열 자체 내에서, 전사 단위의 5' 및 3'에서 발견된다. 인핸서는 코딩 서열의 5' 또는 3' 위치에서 발현 벡터 내로 접합될 수 있지만, 바람직하게는 프로모터로부터 5'부위에 위치한다.
진핵 숙주 세포에 사용되는 발현 벡터는 또한 전사의 종결 및 mRNA의 안정화에 필요한 서열을 함유할 수 있다. 그러한 서열은 진핵 또는 바이러스 DNA 또는 cDNA의 비번역된 영역에서, 번역 종결 코돈의 3'으로부터 통상적으로 이용 가능하다. 이들 영역은 mRNA의 비번역된 부분 내의 폴리아데닐화된 단편으로서 전사된 뉴클레오타이드 세그먼트를 함유한다.
상기 열거된 성분들 중 하나 이상을 함유하는 적합한 벡터의 제조는 표준 결찰 기술 또는 PCR/재조합 방법을 이용한다. 단리된 플라스미드 또는 DNA 단편들은 절단되고, 조정되고, 필요한 플라스미드를 생성하기 위한 원하는 형태로 또는 재조합 방법을 통해 다시 결찰된다. 제조된 플라스미드에서 정확한 서열을 확인하기 위한 분석을 위해, 상기 결찰 혼합물들을 사용하여 숙주 세포를 형질전환시키고, 성공적인 형질전환체를 적절한 경우 항생제 내성(예컨대, 암피실린 또는 제오신)에 의해 선택한다. 상기 형질전환체로부터 플라스미드를 제조하고, 제한 엔도뉴클레아제 절단에 의해 분석하고/분석하거나 서열을 분석한다.
단편들의 제한효소 처리 및 결찰의 대안으로서, att 부위에 기초한 재조합 방법 및 재조합 효소가 벡터 내로 DNA 서열을 삽입하는 데 사용된다. 상기 방법은, 예를 들어, 문헌[Landy (1989) Ann.Rev.Biochem. 58:913-949]에 기재되어 있고, 당업자에게 공지되어 있다. 상기 방법은 람다 및 대장균-인코딩된 재조합 단백질의 혼합물에 의해 매개되는 분자간 DNA 재조합을 이용한다. 재조합은 상호작용하는 DNA 분자들 상의 특이적 부착(att) 부위들 사이에서 일어난다. att 부위의 설명을 위해, 문헌[Weisberg and Landy (1983) Site-Specific Recombination in Phage Lambda, in Lambda II, Weisberg, ed. (Cold Spring Harbor, NY:Cold Spring Harbor Press), pp. 211-250]을 참조한다. 재조합 후 att 부위가 각각의 모 벡터에 의해 제공된 서열로 이루어진 하이브리드 서열이 되도록, 재조합 부위의 양태에 있는 DNA 세그먼트들은 스위치된다. 재조합은 임의의 위상기하학의 DNA들 사이에서 일어날 수 있다.
Att 부위는, 적절한 벡터 내로 관심대상 서열을 결찰하고, 특정 프라이머를 사용하여 att B 부위를 함유하는 PCR 생성물을 생성하고, att 부위를 함유하는 적절한 벡터 내로 클로닝된 cDNA 라이브러리를 생성하는 등에 의해, 관심대상 서열 내로 도입될 수 있다.
본원에서 사용된 바와 같이, 폴딩(folding)은, 아미노산 잔기들 간의 상호작용이 구조를 안정화시키는 작용을 하는 경우, 폴리펩티드 및 단백질의 3차원 구조를 나타낸다. 적절한 폴딩은 전형적으로 최적의 생물학적 활성을 야기하는 폴리펩티드의 배열이며, 항체의 경우에 활성, 예를 들어, 항원 결합에 대한 검정에 의해 편리하게 모니터링될 수 있다.
발현 숙주는 폴딩 및 이황화 결합 형성을 향상시키는 하나 이상의 효소, 즉 폴다제, 샤페로닌 등을 인코딩하는 서열의 도입에 의해 추가로 변형될 수 있다. 그러한 서열은 당분야에 공지된 바와 같은 벡터, 마커 등을 이용하여 효모 숙주 세포에서 항시적으로 또는 유도성으로 발현될 수 있다. 바람직하게는, 원하는 발현 패턴에 충분한 전사 조절 요소를 포함하는 서열들이 표적화된 방법론을 통해 효모 게놈에 안정적으로 통합된다.
예를 들어, 진핵 PDI는 단백질 시스테인 산화 및 이황화 결합 이성질화의 효율적인 촉매일 뿐만 아니라, 샤페론 활성을 나타낸다. PDI의 공동-발현은 다수의 이황화 결합을 갖는 활성 단백질의 생산을 용이하게 할 수 있다. BIP(면역글로불린 중쇄 결합 단백질), 사이클로필린 등의 발현이 또한 관심대상이다. 본 발명의 일 구현예에서, 반수체 모 균주 각각은 별개의 폴딩 효소를 발현하며, 예컨대 하나의 균주가 BIP를 발현하고, 다른 균주가 PDI 또는 이들의 조합을 발현할 수 있다.
용어들 "원하는 단백질" 또는 "원하는 항체"는 상호교환적으로 사용되며 일반적으로 표적에 특이적인 모 항체, 즉, CGRP 또는 키메라 또는 인간화 항체 또는 본원에 기재된 바와 같이 이들로부터 유래된 이의 결합 부분을 나타낸다. 용어 "항체"는 에피토프에 일치하거나 이를 인식하는 특이적 형상을 갖는 임의의 폴리펩티드 사슬-함유 분자 구조를 포함하는 것으로 의도되며, 여기에서 하나 이상의 비-공유 결합 상호작용들이 분자 구조 및 에피토프 간의 복합체를 안정화시킨다. 전형적인 항체 분자는 면역글로불린이며, 모든 공급원, 예컨대 인간, 설치류, 토끼, 소, 양, 돼지, 개, 다른 포유동물, 닭, 다른 조류 등으로부터 유래된 모든 유형의 면역글로불린, IgG, IgM, IgA, IgE, IgD 등이 "항체"인 것으로 간주된다. 본 발명에 따른 출발 물질로서 유용한 항체를 생산하기 위한 바람직한 공급원은 토끼이다. 수많은 항체 코딩 서열들이 기재되어 왔으며, 다른 것들은 당분야에 널리 공지된 방법에 의해 제기될 수 있다. 이의 예는 키메라 항체, 인간 항체 및 다른 비-인간 포유동물 항체, 인간화 항체, 단쇄 항체(예컨대 scFv), 카멜바디, 나노바디, IgNAR(상어로부터 유래된 단쇄 항체), 작은-모듈 면역의약품(SMIP) 및 Fab, Fab', F(ab')2 등과 같은 항체 단편을 포함한다. 문헌[Streltsov VA, et al., Structure of a shark IgNAR antibody variable domain and modeling of an early-developmental isotype, Protein Sci. 2005 Nov;14(11):2901-9. Epub 2005 Sep 30; Greenberg AS, et al., A new antigen receptor gene family that undergoes rearrangement and extensive somatic diversification in sharks, Nature. 1995 Mar 9;374(6518):168-73; Nuttall SD, et al., Isolation of the new antigen receptor from wobbegong sharks, and use as a scaffold for the display of protein loop libraries, Mol Immunol. 2001 Aug;38(4):313-26; Hamers-Casterman C, et al., Naturally occurring antibodies devoid of light chains, Nature. 1993 Jun 3;363(6428):446-8; Gill DS, et al., Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds, Curr Opin Biotechnol. 2006 Dec; 17(6):653-8. Epub 2006 Oct 19]을 참조한다.
예를 들어, 항체 또는 항원 결합 단편은 유전 공학에 의해 생산될 수 있다. 다른 방법과 마찬가지로, 이러한 기술에서, 항체-생산 세포는 원하는 항원 또는 면역원에 대해 감작화된다. 항체 생산 세포로부터 분리된 메신저 RNA가 PCR 증폭을 이용하여 cDNA를 만들기 위한 주형으로서 사용된다. 각각 초기 항원 특이성을 보유하는 하나의 중쇄 유전자 및 하나의 경쇄 유전자를 함유하는 벡터의 라이브러리가 발현 벡터 내로 상기 증폭된 면역글로불린 cDNA의 적절한 부분을 삽입함으로써 생산된다. 조합 라이브러리는 중쇄 유전자 라이브러리를 경쇄 유전자 라이브러리와 조합함으로써 구축된다. 이것은 중쇄 및 경쇄(항체 분자의 Fab 단편 또는 항원 결합 단편과 유사함)를 공동-발현하는 클론의 라이브러리를 생성한다. 이들 유전자를 갖는 벡터들은 숙주 세포 내로 공동-형질감염된다. 항체 유전자 합성이 상기 형질감염된 숙주에서 유도될 때, 중쇄 및 경쇄 단백질들이 자가-조립되어 항원 또는 면역원을 이용한 선별에 의해 검출될 수 있는 활성 항체를 생산한다.
관심대상 항체 코딩 서열은 천연 서열에 의해 인코딩된 것뿐만 아니라 유전 코드의 축퇴성에 의해 상기 개시되는 핵산 및 이의 변이체와 서열이 동일하지 않은 핵산에 의해 코딩된 것을 포함한다. 변이체 폴리펩티드는 아미노산(aa) 치환, 부가 또는 결실을 포함할 수 있다. 상기 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환이거나 또는 글리코실화 부위를 변화시키기 위한 것과 같은 비-필수 아미노산을 제거하거나 기능에 필요하지 않은 하나 이상의 시스테인 잔기의 치환 또는 결실에 의해 미스폴딩을 최소화하는 치환일 수 있다. 변이체는 단백질의 특정한 영역(예컨대, 기능적 도메인, 촉매성 아미노산 잔기 등)의 향상된 생물학적 활성을 보유하거나 갖도록 설계될 수 있다. 변이체는 또한 본원에서 개시되는 폴리펩티드의 단편, 특히 생물학적으로 활성인 단편 및/또는 기능적 도메인에 대응하는 단편을 포함한다. 클로닝된 유전자의 시험관내 돌연변이유발을 위한 기술들은 공지되어 있다. 단백분해 분해에 대한 이들의 내성을 개선하거나, 용해도 특성을 최적화하거나, 이들을 치료제로서 더 적합하게 하기 위해, 통상의 분자생물학적 기술을 이용하여 변형된 폴리펩티드 역시 본 발명에 포함된다.
키메라 항체는 하나의 종의 항체 생산 세포로부터 수득된 가변 경쇄 및 중쇄 영역(VL 및 VH)을 또 다른 종으로부터 유래된 불변 경쇄 및 중쇄 영역과 조합함으로써 재조합 방법에 의해 제조될 수 있다. 전형적으로 키메라 항체는 대부분 인간 도메인을 갖는 항체를 생산하기 위해, 설치류 또는 토끼 가변 영역 및 인간 불변 영역을 이용한다. 그와 같은 키메라 항체의 생산은 당분야에 널리 공지되어 있으며, 표준 방법에 의해 달성될 수 있다(예컨대, 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 제5,624,659호에 기재된 바와 같음). 본 발명의 키메라 항체의 인간 불변 영역이 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역으로부터 선택될 수 있음이 추가로 고려된다.
인간화 항체는 한층더 인간-유사 면역글로불린 도메인을 함유하고, 단지 동물-유래 항체의 상보성-결정 영역만을 포함하도록 조작된다. 이것은 모노클로날 항체의 가변 영역의 초-가변 루프의 서열을 주의깊게 조사하고, 이들을 인간 항체 사슬의 구조에 맞춤으로써 달성된다. 외관상 복잡함에도 불구하고, 상기 공정은 실제로는 간단하다. 예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 미국 특허 제6,187,287호를 참조한다.
전체 면역글로불린(또는 이들의 재조합 대응물) 외에도, 에피토프 결합 부위를 포함하는 면역글로불린 단편(예컨대, Fab', F(ab')2, 또는 다른 단편)이 합성될 수 있다. "단편", 또는 최소 면역글로불린은 재조합 면역글로불린 기술을 이용하여 설계될 수 있다. 예를 들어 본 발명에 사용하기 위한 "Fv" 면역글로불린은 융합된 가변 경쇄 영역 및 가변 중쇄 영역을 합성함으로써 생산될 수 있다. 항체의 조합, 예컨대 2개의 별개의 Fv 특이성을 포함하는 디아바디(diabody) 역시 관심대상이다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, SMIP(소분자 면역의약품), 카멜바디, 나노바디, 및 IgNAR이 면역글로불린 단편에 포함된다.
면역글로불린 및 이의 단편은, 예를 들어, 효과기 모이어티, 예컨대, 화학적 링커, 검출 가능한 모이어티, 예컨대, 형광 염료, 효소, 독소, 기질, 생물발광 물질, 방사선활성 물질, 화학발광 모이어티 등을 부가하도록 번역 후 변형될 수 있거나, 스트렙타비딘, 아비딘 또는 바이오틴 등과 같은 특이적 결합 모이어티가 본 발명의 방법 및 조성물에 이용될 수 있다. 부가적인 효과기 분자의 예가 아래에 제공되어 있다.
만약 유전 코드에 따른 폴리뉴클레오타이드 서열의 번역이 폴리펩티드 서열을 생성하는 경우(즉, 폴리뉴클레오타이드 서열이 폴리펩티드 서열을 "인코딩"하는 경우), 폴리펩티드 서열은 폴리펩티드 서열에 "대응"되며, 만약 두 개의 서열이 동일한 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 경우 하나의 폴리뉴클레오타이드 서열은 또 다른 폴리뉴클레오타이드 서열에 "대응"된다.
DNA 작제물의 "이종" 영역 또는 도메인은 더 큰 DNA 분자 내의 인식 가능한 DNA의 세그먼트로서, 자연에서 상기 더 큰 분자와 함께 발견되지 않는다. 따라서, 이종 영역이 포유동물 유전자를 인코딩하는 경우, 상기 유전자는 생물 공급원의 게놈 내에서 포유동물 게놈 DNA의 양태에 존재하지 않는 DNA가 보통 양태에 존재할 것이다. 이종 영역의 또 다른 예는 코딩 서열 자체가 자연에서 발견되지 않는 작제물(예를 들어, 게놈 코딩 서열이 인트론을 함유하는 cDNA, 또는 본래 유전자와 다른 코돈을 갖는 합성 서열)이다. 대립유전자 변화 또는 자연적으로 발생하는 돌연변이 사건은 본원에서 규정된 DNA의 이종 영역을 야기하지 않는다.
"코딩 서열"은 (유전 코드를 고려하여) 단백질 또는 펩티드 서열에 대응되거나 이들을 인코딩하는 코돈의 인프레임(in-frame) 서열이다. 2개의 코딩 서열들은, 만약 상기 서열 또는 이들의 상보적 서열이 동일한 아미노산 서열을 코딩하는 경우 서로 대응된다. 적절한 조절 서열과 연합된 코딩 서열은 폴리펩티드로 전사 및 번역될 수 있다. 폴리아데닐화 신호 및 전사 종결 서열이 보통 코딩 서열의 3'에 위치할 것이다. "프로모터 서열"은 세포에서 RNA 폴리머라제에 결합하여 하류(3' 방향) 코딩 서열의 전사를 개시할 수 있는 DNA 조절 영역이다. 프로모터 서열은 전형적으로 코딩 서열의 전사에 영향을 미치는 조절 분자(예컨대, 전사 인자)의 결합을 위한 부가적 부위를 함유한다. 코딩 서열은 세포에서 RNA 폴리머라제가 프로모터 서열을 결합하여 코딩 서열을 mRNA로 전사한 다음, 최종적으로 mRNA가 상기 코딩 서열에 의해 코딩된 단백질로 번역될 때, 상기 프로모터 서열의 "조절 하에" 있거나 상기 프로모터에 "작동 가능하게 연결"된다.
벡터는 DNA, RNA 또는 단백질과 같은 외래 물질을 생물 또는 숙주 세포 내로 도입하는 데 사용된다. 전형적인 벡터는 재조합 바이러스(폴리뉴클레오타이드용) 및 리포솜(폴리펩티드용)을 포함한다. "DNA 벡터"는 플라스미드, 파아지 또는 코스미드와 같은 레플리콘이며, 여기에 또 다른 폴리뉴클레오타이드 세그먼트가 부착되어 상기 부착된 세그먼트의 복제를 일으킨다. "발현 벡터"는 적절한 숙주 세포에 의해 폴리펩티드 합성을 지시할 조절 서열을 함유하는 DNA 벡터이다. 이것은 보통 프로모터가 RNA 폴리머라제를 결합하여 mRNA의 전사를 개시할 뿐만 아니라 리보솜 결합 부위 및 개시 신호가 mRNA의 폴리펩티드(들)로의 번역을 지시한다는 것을 의미한다. 적절한 부위에서 그리고 정확한 해독틀로 발현 벡터 내로 폴리뉴클레오타이드 서열을 통합한 다음, 벡터에 의해 적절한 숙주 세포를 형질전환시키는 것은 상기 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 인코딩된 폴리펩티드의 생산을 가능하게 한다.
폴리뉴클레오타이드 서열의 "증폭"은 특정한 핵산 서열의 다수의 카피의 시험관내 생산이다. 상기 증폭된 서열은 보통 DNA의 형태이다. 이러한 증폭을 수행하기 위한 다양한 기술들이 검토 문헌[Van Brunt (1990, Bio/Technol., 8(4):291-294]에 기재되어 있다. 폴리머라제 사슬 반응 또는 PCR은 핵산 증폭의 원형이며, 본원에서 PCR의 사용은 다른 적합한 증폭 기술의 예로서 고려되어야 한다.
현재 척추동물 내 항체의 일반적인 구조는 잘 이해되어져 있다(Edelman, G. M., Ann. N.Y. Acad. Sci., 190: 5 (1971)). 항체는 대략 23,000달톤의 분자량의 2개의 동일한 경쇄 폴리펩티드("경쇄"), 및 분자량 53,000 내지 70,000의 2개의 동일한 중쇄("중쇄")로 이루어진다. 상기 4개의 사슬은 이황화 결합에 의해 "Y" 배열로 연결되며, 여기서 경쇄는 "Y" 배열의 입에서 시작하는 중쇄를 묶는다. "Y" 배열의 "가지(branch)" 부분은 Fab 영역으로 지정되며; "Y" 배열의 줄기 부분은 FC 영역으로 지정된다. 아미노산 서열 배향은 "Y" 배열의 위쪽에 있는 N-말단으로부터 각각의 사슬의 아래에 있는 C-말단으로 진행된다. N-말단은 이를 유발한 항원에 대해 특이성을 갖는 가변 영역을 가지며, 이는 대략 100개 아미노산 길이이고, 경쇄 및 중쇄 사이에 그리고 항체마다 약간의 변화가 존재한다.
가변 영역은 각각의 사슬 내에서 사슬의 남은 길이를 확장시키고 특정 계열의 항체 내에서 항체의 특이성(즉, 그것을 유발하는 항원)이 변하지 않는 불변 영역에 연결된다. 면역글로불린 분자의 계열을 결정하는 5개의 공지된 주요 계열의 불변 영역(γ, μ, α, δ 및 ε(감마, 뮤, 알파, 델타, 또는 엡실론) 중쇄 불변 영역에 대응하는 IgG, IgM, IgA, IgD, 및 IgE)가 존재한다. 상기 불변 영역 또는 계열은 보체의 활성화(Kabat, E. A., Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry, 2nd Ed., p. 413-436, Holt, Rinehart, Winston (1976)), 및 다른 세포 반응(Andrews, D. W., et al., Clinical Immunobiology, pp 1-18, W. B. Sanders (1980); Kohl, S., et al., Immunology, 48: 187 (1983))을 포함하는 항체의 이후의 효과기 기능을 결정하는 반면, 가변 영역은 그것이 반응할 항원을 결정한다. 경쇄는 κ(카파) 또는 λ(람다) 중 하나로 분류된다. 각각의 중쇄 계열은 카파 또는 람다 경쇄 중 하나를 이용하여 제조될 수 있다. 하이브리도마에 의해 또는 B 세포에 의해 면역글로불린이 생성될 때, 경쇄 및 중쇄는 서로 공유 결합되고, 2개의 중쇄의 "꼬리" 부분은 공유 이황화 결합에 의해 서로 결합된다.
표현 "가변 영역" 또는 "VR"은 항체를 항원에 결합시키는 데 직접 관여하는 항체에서의 경쇄 및 중쇄의 각각의 쌍 안에 있는 도메인을 나타낸다. 각각의 중쇄는 하나의 말단에 가변 도메인(VH) 및 뒤이어 수많은 불변 도메인을 갖는다. 각각의 경쇄는 하나의 말단에 가변 도메인(VL) 및 그 다른 말단에 불변 도메인을 가지며; 경쇄의 불변 도메인은 중쇄의 첫 번째 불변 도메인과 정렬되고, 경쇄 가변 도메인은 중쇄의 가변 도메인과 정렬된다.
표현 "상보성 결정 영역", "초가변 영역", 또는 "CDR"은 항체의 경쇄 또는 중쇄의 가변 영역에서 발견되는 하나 이상의 초-가변 영역 또는 상보성 결정 영역(CDR)을 나타낸다(문헌[Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)] 참조). 이들 표현은 카바트 등에 의해 규정된 바와 같은 초가변 영역("Sequences of Proteins of Immunological Interest," Kabat E., et al., US Dept. of Health and Human Services, 1983) 또는 항체의 3차원 구조 내의 초가변 루프(Chothia and Lesk, J Mol. Biol. 196 901-917 (1987))를 포함한다. 각각의 사슬 내의 CDR은 프레임워크 영역에 의해 매우 가깝게 유지되며, 다른 사슬 유래의 CDR과 함께, 항원 결합 부위의 형성에 기여한다. CDR 내에는 항체-항원 상호작용에서 CDR에 의해 사용되는 중요한 접촉 잔기에 대응하는 선택성 결정 영역(SDR)으로서 기재되어 온 엄선된 아미노산이 존재한다(Kashmiri, S., Methods, 36:25-34 (2005)). 본 발명에서, 특정 항체 아미노산 또는 핵산 잔기가 번호로 언급되는 경우, 이는 일반적으로 특정 아미노산 또는 핵산 서열(즉, 특정 서열 식별자) 내의 및/또는 카바트 등의 넘버링에 따른 이의 위치를 나타낸다.
표현 "프레임워크 영역" 또는 "FR"은 항체의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역 내에 있는 하나 이상의 프레임워크 영역을 나타낸다(문헌[Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)] 참조). 이들 표현은 항체의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역 내의 CDR 사이에 삽입된 상기 아미노산 서열 영역을 포함한다.
"Cmax"는 약물이 투여된 후 항체 또는 다른 화합물이 시험된 영역(예를 들어, 혈청 또는 또 다른 구획, 예컨대, 뇌척수액)에서 달성하는 최대(또는 피크) 농도를 나타낸다. 예를 들어, 혈청 Cmax는 혈청으로부터 측정될 수 있으며, 예를 들어, 혈액 샘플을 수집하고, 이를 응고시키고, 원심분리 또는 다른 수단에 의해 고체 성분을 분리하여 혈청(혈액 세포도 응고 인자도 함유하지 않는 혈액)을 수득하고, 이후 ELISA 또는 당분야에 공지된 다른 수단에 의한 혈청 중 분석물의 농도를 검출함으로써 생성될 수 있다.
"AUC"는 달리 명시되지 않는 한 ㎎/㎖ * hr(또는 동등하게 ㎎ * hr/㎖)의 단위로 표현되는 농도-시간 곡선하 면적을 나타낸다. "AUC0-t"는 시간=0에서 마지막 정량화 가능한 농도까지의 농도-시간 곡선하 면적을 나타낸다. "AUC0-inf"는 무한대로 외삽된 시간=0에서부터의 농도-시간 곡선하 면적을 나타낸다.
"Imax"는 더 낮은 항-CGRP 항체 용량에 의해 유발되는 반응과 비교하여 항-CGRP 항체 투여량, 바람직하게는 350 ㎎ 이상, 더욱 전형적으로는 적어도 750 ㎎ 또는 1000 ㎎의 투여량에 의해 유발되는 최대 약력학적 반응을 나타내며, 예를 들어, 이러한 반응은 캡사이신의 국소 적용 후 혈관확장의 억제에 의해 검출될 수 있다.
CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항-CGRP 항체 및 이의 결합 단편
본 발명은 특히 도 1a 내지 도 12에서 확인되는 CDR, VL, VH, CL, CH 폴리펩티드 서열을 포함하거나 이로 이루어진 Ab1 내지 Ab14로 본원에서 나타내는 특이적 항-CGRP 항체 및 항체 단편의 용도를 포함한다. 특히 바람직한 항-CGRP 항체인 Ab6에 포함되는 폴리펩티드는 하기에서 추가로 기재된다.
항체 Ab6
바람직한 예시적인 구현예에서, 본 발명은 CGRP에 대한 결합 특이성을 가지며 아래에 제시된 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 보유하는, 인간화 항체를 포함한다:
Figure pct00006
본 발명은 또한 CGRP에 대한 결합 특이성을 가지며 아래에 제시된 서열을 포함하는 경쇄 서열을 보유하는, 인간화 항체를 포함한다:
Figure pct00007
본 발명은 추가로 CGRP에 대한 결합 특이성을 가지며 아래에 제시된 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 보유하는, 인간화 항체를 포함한다:
Figure pct00008
본 발명은 또한 CGRP에 대한 결합 특이성을 가지며 아래에 제시된 서열을 포함하는 중쇄 서열을 보유하는, 인간화 항체를 포함한다:
Figure pct00009
대안적으로, Ab6의 중쇄는 SEQ ID NO: 201의 C-말단 라이신이 결여될 수 있으며, 즉, Ab6은 아래에 제시된 서열을 포함하는 중쇄 서열을 보유할 수 있다:
Figure pct00010
본 발명은 추가로 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 서열 또는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)에 대응하는 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 폴리펩티드 서열 중 하나 이상, 및/또는 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 서열 또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)에 대응하는 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 폴리펩티드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩티드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 상기에 제시된 CDR, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 중쇄 및 경쇄 서열 중 하나 이상의 조합(그 모두를 포함)을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명은 또한 CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 항체 단편은 SEQ ID NO: 222 또는 SEQ ID NO: 221의 폴리펩티드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 본 발명의 항체 단편은 SEQ ID NO: 202 또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 폴리펩티드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명의 추가 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 서열 또는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)에 대응하는 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 폴리펩티드 서열 중 하나 이상을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명의 추가 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 서열 또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)에 대응하는 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 폴리펩티드 서열 중 하나 이상을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 하기 항체 단편을 포함하거나, 대안적으로 이들 중 1개, 2개, 3개 이상(이들 모두를 포함)으로 이루어진다: SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 영역; SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 영역; SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228); 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)).
본 발명의 특히 바람직한 구현예에서, 인간화 항-CGRP 항체는, SEQ ID NO: 221 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어지고, 본원에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab6이다.
본 발명의 추가로 특히 바람직한 구현예에서, 항체 단편은 CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다. 항체 Ab6과 관련하여, Fab 단편은 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 서열 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이러한 구현예는 추가로 CGRP에 대한 결합 특이성을 보유하면서 상기 Fab에서 SEQ ID NO: 222 및/또는 SEQ ID NO: 202의 부가, 결실, 및 변이체를 고려한다.
본 발명의 또 하나의 특히 바람직한 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 폴리펩티드는 선택적으로 인간 경쇄 및 중쇄 불변 영역 폴리펩티드, 예를 들어, 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역에 각각 연결되고, 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해를 변경하도록 변형될 수 있고, 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함한다.
본 발명의 또 하나의 특히 바람직한 구현예에서, 상기 항-CGRP 항체는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열을 발현하는 재조합 세포로부터 단리된 항체 발현 생성물을 포함할 수 있고, 여기서 상기 재조합 세포는 선택적으로 효모 또는 포유동물 세포, 예를 들어, 피치아 패스토리스 또는 CHO 세포를 포함하고, 그의 불변 영역은 선택적으로 글리코실화 또는 단백분해 또는 다른 효과기 기능을 변경하도록 변형될 수 있다.
본 발명의 또 하나의 특히 바람직한 구현예에서, 임의의 상기 언급된 항-CGRP 항체 또는 항체 단편은 선택적으로 본원에서 개시되는 제형, 예를 들어, 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하는 제형에 포함될 수 있다.
본원(내)에 기재된 본 발명의 일 구현예에서, Fab 단편은 Ab6의 효소 소화(예를 들어, 파파인)에 의해 생산될 수 있다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 항체, 예컨대, Ab6 또는 그의 Fab 단편은 포유동물 세포, 예컨대, CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 또는 미생물 시스템, 예컨대, 효모 세포(예를 들어, 2배체 효모, 예컨대, 2배체 피치아) 및 다른 효모 균주에서 발현을 통해 생산될 수 있다. 적합한 피치아 종은 피치아 패스토리스를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
또 다른 구현예에서, 항체 단편은 하기 비제한 형태 중 하나 이상으로 존재할 수 있다: Fab, Fab', F(ab')2, Fv 및 단쇄 Fv 항체 형태. 바람직한 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 항체는 아래에 제시된 서열을 포함하는 불변 카파 경쇄 서열을 추가로 포함한다:
Figure pct00011
또 하나의 바람직한 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 항체는 추가로 아래에서 제시된 서열을 포함하는 감마-1 불변 중쇄 폴리펩티드 서열 또는 카르복시 말단 라이신 잔기가 결여된 동일한 서열(각각 SEQ ID NO: 564 및 SEQ ID NO: 565)을 포함한다:
Figure pct00012
Figure pct00013
명확성을 위해, 본원에서 개시되는 임의의 항체는 개시되는 불변 영역 변이체 서열의 임의의 변이체를 포함하는 것으로 의도되며, 예를 들어, Ab6는 C-말단 라이신을 함유하는 SEQ ID NO: 564의 불변 영역을 포함할 수 있거나, C-말단 라이신이 결여된 SEQ ID NO: 565의 불변 영역을 포함할 수 있다. 따라서, SEQ ID NO: 201의 중쇄의 본원의 모든 개시는 또한 이의 C-말단 라이신 잔기가 결여된, 즉, Ab6(SEQ ID NO: 202)의 중쇄 가변 영역 서열 및 SEQ ID NO: 565의 불변 영역 서열을 갖는 변이체를 포함한다. 예를 들어, 중쇄에서 C-말단 라이신을 포함하는 항체를 인코딩하는 서열은, CHO 세포와 같은 세포주에서 발현될 때, 단백분해로 인해 상기 C-말단 라이신이 결여된 항체, 또는 상기 C-말단 라이신을 함유하거나 결여된 중쇄의 혼합물을 생성할 수 있다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 282, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 402, SEQ ID NO: 442, SEQ ID NO: 482, 또는 SEQ ID NO: 522로부터 선택된 VH 폴리펩티드 서열, 또는 그의 변이체를 포함하는; 추가로 SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 302, SEQ ID NO: 342, SEQ ID NO: 382, SEQ ID NO: 422, SEQ ID NO: 462, SEQ ID NO: 502, 또는 SEQ ID NO: 542로부터 선택된 VL 폴리펩티드 서열, 또는 그의 변이체를 포함하는 단리된 항-CGRP 항체의 용도를 고려하고, 여기서 상기 VH 또는 VL 폴리펩티드에서 프레임워크 잔기(FR 잔기) 중 하나 이상은 CGRP를 특이적으로 결합하는 항-CGRP 항체를 생성하도록 또 다른 아미노산 잔기로 치환되었다. 본 발명은 이들 항체의 인간화 및 키메라 형태를 고려한다. 키메라 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 불변 영역으로부터 유래된 Fc를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에서, 항체 또는 VH 또는 VL 폴리펩티드는 본원에서 참조된 안간화 과정의 개시 전에 하나 이상의 토끼 B 세포 집단으로부터 유래되거나 선택된다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 항체 및 이의 단편은 CGRP-R에 대한 결합 특이성을 갖지 않는다. 발명의 추가 구현예에서, 항-CGRP 항체 및 이의 단편은 CGRP와 CGRP-R의 회합을 억제한다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 항-CGRP 항체 및 이의 단편은 CGRP와 CGRP-R 및/또는 부가적 단백질 및/또는 그의 다량체의 회합을 억제하고/억제하거나, 그의 생물학적 효과를 길항한다.
본원에서 언급된 바와 같이, 항체 및 이의 단편은 효과기 모이어티, 예컨대, 화학적 링커, 검출 가능한 모이어티, 예컨대, 형광 염료, 효소, 기질, 생물발광 물질, 방사선활성 물질, 및 화학발광 모이어티, 또는 기능적 모이어티, 예컨대, 스트렙타비딘, 아비딘, 바이오틴, 세포독소, 세포독성제, 및 방사선활성 물질을 부가하도록 번역 후 변형될 수 있다.
항체 또는 그의 단편은 또한 폴리펩티드의 증가된 용해도, 안정성 및 순환 시간(생체내 반감기), 또는 감소된 면역원성(미국 특허 번호 제4,179,337호 참조)과 같은 부가적 이점을 제공하도록 화학적으로 변형될 수 있다. 유도체화에 대한 화학적 모이어티는 수용성 폴리머, 예컨대, 폴리에틸렌 글리콜, 에틸렌 글리콜/프로필렌 글리콜 코폴리머, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐 알코올 등으로부터 선택될 수 있다. 항체 및 이의 단편은 분자 내의 무작위의 위치에서, 또는 분자 내의 예정된 위치에서 변형될 수 있고, 1개, 2개, 3개 이상의 부착된 화학적 모이어티를 포함할 수 있다.
폴리머는 임의의 분자량을 가질 수 있고, 분지형 또는 비분지형일 수 있다. 폴리에틸렌 글리콜의 경우, 바람직한 분자량은 취급 및 제조에 용이하도록 약 1 kDa 내지 약 100 kDa이다(여기서 용어 "약"은 폴리에틸렌 글리콜의 제제에서, 일부 분자는 언급된 분자량보다 더 큰, 조금 적은 무게일 것을 나타냄). 다른 크기가 원하는 치료 프로파일(예를 들어, 원하는 지속된 방출의 지속기간, 효과, 생물학적 활성이 있다면, 취급 용이성, 치료 단백질 또는 유사체에 대한 폴리에틸렌 글리콜의 항원성 및 다른 공지된 효과의 정도 또는 부족)에 따라 사용될 수 있다. 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜은 약 200, 500, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10,000, 10,500, 11,000, 11,500, 12,000, 12,500, 13,000, 13,500, 14,000, 14,500, 15,000, 15,500, 16,000, 16,500, 17,000, 17,500, 18,000, 18,500, 19,000, 19,500, 20,000, 25,000, 30,000, 35,000, 40,000, 50,000, 55,000, 60,000, 65,000, 70,000, 75,000, 80,000, 85,000, 90,000, 95,000, 또는 100,000 kDa의 평균 분자량을 가질 수 있다. 분지형 폴리에틸렌 글리콜은, 예를 들어, 각각의 개시가 본원에 참조로 포함되는, 미국 특허 제5,643,575호; 문헌[Morpurgo et al., Appl. Biochem. Biotechnol. 56:59-72 (1996); Vorobjev et al., Nucleosides Nucleotides 18:2745-2750 (1999); 및 Caliceti et al., Bioconjug. Chem. 10:638-646 (1999)]에 기재되어 있다.
당업자에게 이용 가능한 수많은 부착 방법이 있다. 예를 들어, 본원에 참조로 포함되는 제EP 0 401 384호(PEG의 G-CSF에의 커플링)를 참조한다. 또한, 예를 들어, 문헌[Malik et al., Exp. Hematol. 20:1028-1035 (1992)](트레실 클로라이드를 사용하는 GM-CSF의 페길화를 보고함)을 참조한다. 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜은 아미노산 잔기를 거쳐 반응성 기, 예컨대, 유리 아미노 또는 카르복실 기를 통해 공유 결합될 수 있다. 반응성 기는, 활성화된 폴리에틸렌 글리콜 분자가 결합될 수 있는 것들이다. 유리 아미노 기를 갖는 아미노산 잔기는 라이신 잔기 및 N-말단 아미노산 잔기를 포함할 수 있고; 유리 카르복실 기를 갖는 것들은 아스파르트산 잔기 글루탐산 잔기 및 C-말단 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 설프하이드릴 기는 폴리에틸렌 글리콜 분자에 부착시키기 위해 반응성 기로서 또한 사용될 수 있다. 아미노 기에서의 부착, 예컨대 N-말단 또는 라이신 기에서의 부착이 치료 목적을 위해 바람직하다.
상기에서 제안된 바와 같이, 폴리에틸렌 글리콜은 임의의 수많은 아미노산 잔기에의 결합을 통해 단백질에 부착될 수 있다. 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜은 라이신, 히스티딘, 아스파르트산, 글루탐산, 또는 시스테인 잔기에 대한 공유 결합을 통해 폴리펩티드에 연결될 수 있다. 하나 이상의 반응 화학은 폴리에틸렌 글리콜을 특이적 아미노산 잔기(예를 들어, 라이신, 히스티딘, 아스파르트산, 글루탐산, 또는 시스테인) 또는 하나 초과의 유형의 아미노산 잔기(예를 들어, 라이신, 히스티딘, 아스파르트산, 글루탐산, 시스테인 및 이들의 조합)에 부착하기 위해 이용될 수 있다.
대안적으로, 항체 또는 그의 단편은 알부민(비제한적으로 재조합 인간 혈청 알부민 또는 단편 또는 그의 변이체를 포함(예를 들어, 그 전체가 본원에 참조로 포함되는, 1999년 3월 2일 발행된 미국 특허 제5,876,969호, 유럽 특허 제0 413 622호, 및 1998년 6월 16일 발행된 미국 특허 제5,766,883호 참조)) 또는 다른 순환 혈액 단백질, 예컨대, 트랜스페린 또는 페리틴과의 융합을 통해 증가된 생체내 반감기를 가질 수 있다. 바람직한 구현예에서, (단편 또는 그의 변이체를 포함하는) 본 발명의 폴리펩티드 및/또는 항체는 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 성숙한 형태의 인간 혈청 알부민(즉, 유럽 특허 제0 322 094호의 도 1 및 도 2에 나타나 있는 바와 같은 인간 혈청 알부민의 아미노산 1 내지 585)과 융합된다. 본 발명의 융합 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 또한 본 발명에 의해 포함된다.
검출 가능한 모이어티와 관련하여, 추가로 예시적인 효소는 홀스래디쉬 퍼옥시다제, 아세틸콜린에스테라제, 알칼리성 인산분해효소, 베타-갈락토시다제 및 루시퍼라제를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 추가로 예시적인 형광 물질은 로다민, 플루오레신, 플루오레신 이소티오시아네이트, 엄벨리페론, 디클로로트리아지닐아민, 파이코에리트린 및 단실 클로라이드를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 추가로 예시적인 화학발광 모이어티는 루미놀을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 추가로 예시적인 생물발광 물질은 루시페린 및 에쿼린을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 추가로 예시적인 방사선활성 물질은 요오드 125(125I), 탄소 14(14C), 황 35(35S), 트리튬(3H) 및 인 32(32P)를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
기능적 모이어티와 관련하여, 예시적인 세포독성제는 메토트렉세이트, 아미노프테린, 6-머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 사이타라빈, 5-플루오로우라실 데카바진; 알킬화제, 예컨대, 메클로레타민, 티오에파 클로르암부실, 멜팔란, 카르무스틴(BSNU), 미토마이신 C, 로무스틴(CCNU), 1-메틸니트로소우레아, 사이클로토스파마이드, 메클로레타민, 부설판, 디브로모만니톨, 스트렙토조토신, 미토마이신 C, 시스-디클로로디아민 백금(II)(DDP) 시스플라틴 및 카보플라틴(파라플라틴)을 포함하지만, 이로 제한되지 않고; 안트라사이클린은 다우노루비신(예전에 다우노마이신), 독소루비신(아드리아마이신), 데토루비신, 카르미노마이신, 아이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론 및 비스안트렌을 포함하고; 항생제는 닥티노마이신(악티노마이신 D), 블레오마이신, 칼리키아마이신, 미트라마이신, 및 안트라마이신(AMC); 및 항유사분열제, 예컨대, 빈카 알칼로이드, 빈크리스틴 및 빈블라스틴을 포함한다. 다른 세포독성제는 파클리탁셀(탁솔), 리신, 슈도모나스 외독소, 젬시타빈, 사이토칼라신 B, 그라마이시딘 D, 에티듐 브로마이드, 에메틴, 에토포사이드, 테노포사이드, 콜히친, 디하이드록시 안트라신디온, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 퓨로마이신, 프로카르바진, 하이드록시우레아, 아스파라기나제, 코르티코스테로이드, 마이토탄(O,P'-(DDD)), 인터페론, 및 이들 세포독성제의 혼합물을 포함한다.
추가 세포독성제는 화학치료제, 예컨대, 카보플라틴, 시스플라틴, 파클리탁셀, 젬시타빈, 칼리키아마이신, 독소루비신, 5-플루오로우라실, 미토마이신 C, 악티노마이신 D, 사이클로포스파마이드, 빈크리스틴 및 블레오마이신을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 식물 및 박테리아, 예컨대, 리신, 디프테리아 독소 및 슈도모나스 독소로부터 유래된 독성 효소는 인간화 또는 키메라 항체, 또는 그의 결합 단편에 컨쥬게이트되어, 세포-유형-특이적-사멸 시약을 생성할 수 있다(Youle, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:5483 (1980); Gilliland, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:4539 (1980); Krolick, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:5419 (1980)).
다른 세포독성제는 Goldenberg에 의한 미국 특허 제6,653,104호에 기재된 세포독성 리보뉴클레아제를 포함한다. 본 발명의 구현예는 또한, 방사선면역컨쥬게이트에 관한 것이고, 여기서 알파 또는 베타 입자를 방출하는 방사선핵종은 복합체-형성제의 사용과 함께 또는 없이 항체, 또는 그의 결합 단편에 안정되게 컨쥬게이트된다. 이러한 방사선핵종은 베타-에미터, 예컨대, 인-32(32P), 스칸듐-47(47Sc), 구리-67(67Cu), 갈륨-67(67Ga), 이트륨-88(88Y), 이트륨-90(90Y), 요오드-125(125I), 요오드-131(131I), 사마륨-153(153Sm), 루테튬-177(177Lu), 레늄-186(186Re) 또는 레늄-188(188Re), 및 알파-에미터, 예컨대, 아스타틴-211(211At), 납-212(212Pb), 비스무트-212(212Bi) 또는 비스무트-213(213Bi) 또는 악티늄-225(225Ac)을 포함한다.
예를 들어, 문헌[Hunter et al, Nature 144:945 (1962); David et al, Biochemistry 13:1014 (1974); Pain et al, J. Immunol. Meth. 40:219 (1981); 및 Nygren, J., Histochem. and Cytochem. 30:407 (1982)]에 기재된 방법들과 같이, 항체 또는 그의 결합 단편을 검출 가능한 모이어티 등에 컨쥬게이트하기 위한 방법이 당분야에 공지되어 있다.
본원에 기재된 구현예는 추가로, 본원에 제시된 항체, 항체 단편, 디아바디, SMIP, 카멜바디, 나노바디, IgNAR, 폴리펩티드, 가변 영역 및 CDR와 실질적으로 상동인 변이체 및 동등물을 포함한다. 이들은, 예를 들어, 보존적 치환 돌연변이를 함유할 수 있다(즉, 유사한 아미노산에 의한 하나 이상의 아미노산의 치환). 예를 들어, 보존적 치환은 어느 한 아미노산의 동일한 일반적인 부류 내의 또 다른 아미노산에 의한 치환, 예를 들어, 어느 한 산성 아미노산의 또 다른 산성 아미노산에 의한 치환, 어느 한 염기성 아미노산의 또 다른 염기성 아미노산에 의한 치환, 또는 어느 한 중성 아미노산의 또 다른 중성 아미노산에 의한 치환을 의미한다. 보존적 아미노산 치환에 의해 의도된 것은 당분야에 공지되어 있다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 본원에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR의 폴리펩티드 서열 중 어느 하나 이상에 대해 적어도 90% 이상의 서열 상동성을 갖는 폴리펩티드 서열을 고려한다. 더욱 바람직하게는, 본 발명은 본원에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR의 폴리펩티드 서열 중 어느 하나 이상에 대해 적어도 95% 이상의 서열 상동성, 더욱 더 바람직하게는 적어도 98% 이상의 서열 상동성, 및 더욱 더 바람직하게는 적어도 99% 이상의 서열 상동성을 갖는 폴리펩티드 서열을 고려한다. 핵산과 아미노산 서열 사이의 상동성을 측정하는 방법은 당업자에게 널리 공지되어 있다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 추가로, 항-CGRP 활성을 추가로 갖는 본원에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR의 상기-인용된 폴리펩티드 동족체를 고려한다. 항-CGRP 활성의 비제한적 예는 본원에 기재되어 있다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 임의의 다른 폴리뉴클레오타이드 서열에 대해 치환된 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드 또는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 항-CGRP 항체를 고려한다. 예를 들어, 이로 제한되지 않으면서, 본 발명은 본원에 기재된 임의의 가변 경쇄 및 가변 중쇄 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려하고, 추가로 본원에 기재된 임의의 다른 CDR 서열에 대한 본원에 기재된 임의의 CDR 서열의 치환으로부터 얻은 항체를 고려한다.
본 발명의 부가적인 예시적 구현예
또 다른 구현예에서, 본 발명은 동일한 중첩 선형 또는 형태적 에피토프(들)에 특이적으로 결합하고/결합하거나 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, 또는 Ab14로부터 선택된 항-인간 CGRP 항체로서 온전한 인간 CGRP 폴리펩티드 또는 그의 단편 상에 동일한 중첩 선형 또는 형태적 에피토프(들)에 결합하기 위해 경쟁하는 하나 이상의 항-인간 CGRP 항체 또는 그의 항체 단편을 사용하는 치료 방법을 고려한다. 바람직한 구현예에서, 항-인간 CGRP 항체 또는 그의 단편은 동일한 중첩 선형 또는 형태적 에피토프(들)에 특이적으로 결합하고/하거나 Ab3, Ab6, Ab13, 또는 Ab14로서 온전한 인간 CGRP 폴리펩티드 또는 그의 단편 상에 동일한 중첩 선형 또는 형태적 에피토프(들)에 결합하기 위해 경쟁한다.
본 발명의 바람직한 구현예는 CGRP에 대한 결합 특이성을 가지며 CGRP의 CGRP 수용체에의 결합에 의해 매개된 생물학적 활성을 억제하는 키메라 또는 인간화 항체 및 이의 단편(Fab 단편 포함)을 사용하는 치료 방법에 관한 것이다. 본 발명의 특히 바람직한 구현예에서, 키메라 또는 인간화 항-CGRP 항체는 Ab3, Ab6, Ab13, 또는 Ab14로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, 상기 기재된 치료 방법에 사용된 항-인간 CGRP 항체는 원상태 인간 CGRP 폴리펩티드의 전장에 걸치는 중첩 선형 펩티드 단편을 사용하여 에피토프 맵핑에 의해 확인된 바와 같이, Ab3, Ab6, Ab13, 또는 Ab14에 의해 특이적으로 결합된 온전한 CGRP 폴리펩티드 또는 그의 단편(들) 상에 동일한 중첩 선형 또는 형태적 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체이다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 또한 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113, 123, 또는 133으로부터 선택된 VH 폴리펩티드 서열, 또는 그의 변이체에 함유된 CDR 중 하나 이상, 및/또는 1, 11, 21, 31,41, 51, 61, 71, 81, 91, 101, 111, 121, 또는 131로부터 선택된 VL 폴리펩티드 서열, 또는 그의 변이체에 함유된 CDR 중 하나 이상을 포함하는, 단리된 항-CGRP 항체 또는 항체 단편을 사용하는 치료 방법에 관한 것이다.
본 발명의 일 구현예에서, 2개의 이전 단락에서 논의된 항-인간 CGRP 항체는 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, 또는 Ab14로부터 선택된 항-인간 CGRP 항체에 함유된 것과 동일한 각각의 가변 경쇄 및 가변 중쇄 영역에서 적어도 2개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
바람직한 구현예에서, 상기 기재된 치료 방법에 사용되는 항-인간 CGRP 항체는 Ab3 또는 Ab6에 함유된 것들과 동일한 각각의 가변 경쇄 및 가변 중쇄 영역에서 적어도 2개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 상기에서 논의된 항-인간 CGRP 항체의 CDR 모두는 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, 또는 Ab14로부터 선택된 항-인간 CGRP 항체에 함유된 CDR과 동일하다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 상기에서 논의된 항-인간 CGRP 항체의 CDR 모두는 Ab3 또는 Ab6으로부터 선택된 항-인간 CGRP 항체에 함유된 CDR과 동일하다.
본 발명은 추가로, 상기에서 논의된 하나 이상의 항-인간 CGRP 항체가 무글리코실화되거나, 글리코실화된다면 오로지 만노실화되고; 효과기 기능, 반감기, 단백분해, 및/또는 글리코실화를 변경하도록 변형된 Fc 영역을 함유하고; 인간, 인간화, 단쇄 또는 키메라이고; 토끼 (모) 항-인간 CGRP 항체로부터 유래된 인간화 항체인 치료 방법을 고려한다. 글리코실화를 저해하는 예시적인 돌연변이는, 그 전체가 참조로 포함되는 미국 특허 제5,624,821호에 기재된 바와 같이, IgG1와 같은 IgG 중쇄 불변 영역의 297번 위치에서 Asn 잔기의 Ala와 같은 또 다른 아미노산으로 돌연변이를 포함한다.
본 발명은 추가로 하나 이상의 항-인간 CGRP 항체를 고려하고, 여기서 상기 항체의 가변 경쇄 영역 및 가변 중쇄 영역 각각에서 프레임워크 영역(FR)은 비변형되거나 가변 경쇄 또는 중쇄 영역에서 하나 이상의 인간 FR 잔기의 모 토끼 항체의 대응하는 FR 잔기로의 치환에 의해 변형된 인간 FR이고, 여기서 상기 인간 FR은 라이브러리에 함유된 다른 인간 생식계열 항체 서열에 대해 대응하는 토끼 가변 중쇄 또는 경쇄 영역에 대한 이들의 고수준의 상동성에 기초한 인간 생식계열 항체 서열의 라이브러리부터 선택된 인간 가변 중쇄 및 경쇄 항체 서열로부터 유래되었다.
본 발명은 또한 약제 남용 두통, 예를 들어, 항-편두통 약물의 남용과 관련된 및/또는 트립탄 및/또는 에르고트 및/또는 진통제 남용과 관련된 약제 남용 두통을 치료하거나 방지하는 방법으로서, 약제 남용 두통을 나타내거나 약제 남용 두통이 일어날 위험이 있는 환자에게 치료적 유효량의 본원에 기재된 적어도 하나의 항-인간 CGRP 항체 또는 단편을 투여하는 단계를 포함하는, 방법을 고려한다. 본 발명은 또한 치료 방법이 본원에서 개시되는 둘 이상의 항-CGRP 항체 또는 그의 단편의 투여를 수반할 수 있다는 것을 고려한다. 하나보다 많은 항체가 환자에게 투여되면, 다중 항체는 동시에 또는 병행하여 투여될 수 있거나, 이의 투여에 시차를 둘 수 있다. CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-CGRP 항체, 및 이의 단편의 항-CGRP 활성은 또한 CGRP에 대한 결합 또는 이의 친화도의 이들의 강도에 의해 기재될 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-CGRP 항체, 및 이의 단편은 5x10-7 M, 10-7 M, 5x10-8 M, 10-8 M, 5x10-9 M, 10-9 M, 5x10-10 M, 10-10 M, 5x10-11 M, 10-11 M, 5x10-12 M, 10-12 M, 5x10-13 M, 또는 10-13 M 이하의 해리 상수(KD)와 함께 CGRP에 결합한다. 바람직하게는, 항-CGRP 항체 및 이의 단편은 10-11 M, 5x10-12 M, 또는 10-12 M 이하의 해리 상수와 함께 CGRP를 결합한다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-CGRP 항체, 및 이의 단편은 선형 또는 형태적 CGRP 에피토프에 결합한다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-CGRP 항체, 및 이의 단편의 항-CGRP 활성은 10-4 S-1, 5x10-5 S-1, 10-5 S-1, 5x10-6 S-1, 10-6 S-1, 5x10-7 S-1, 또는 10-7 S-1 이하의 오프-레이트(off-rate)와 함께 CGRP에 결합한다.
본 발명의 추가 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-CGRP 항체, 및 이의 단편의 항-CGRP 활성은 CGRP와 연관된 질환 및 장애의 증상을 방지하거나, 완화하거나, 감소시키거나, 대안적으로 그것을 치료하기 위해 항-CGRP 활성을 나타낸다. CGRP와 연관된 질환 및 장애의 비제한적 예는 본원에 제시되어 있고, 두통 및 편두통 장애를 포함한다.
항-CGRP 항체 폴리펩티드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드
상기 언급된 바와 같이, 본 발명은 특히 도 1a 내지 도 12에서 확인되는 서열을 갖는 CDR, VL, VH, CL, 및 CH 폴리펩티드를 포함하거나 이로 이루어진 Ab1 내지 Ab14로 본원에서 나타내는 특이적 항-CGRP 항체 및 항체 단편의 용도를 포함한다. Ab1 내지 Ab14에 포함되는 상기 VL, VH, CL, 및 CH 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열이 또한 도 1a 내지 도 12에 포함된다. 특히 바람직한 항-CGRP 항체인 Ab6의 CDR, VL, VH, CL, 및 CH 폴리펩티드를 인코딩하는 핵산 서열이 추가로 하기에 기재된다.
항체 Ab6
본 발명은 추가로 CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩티드를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 하기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다:
Figure pct00014
본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 인코딩하는 하기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다:
Figure pct00015
본 발명의 또 다른 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 하기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다:
Figure pct00016
본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 201의 중쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 하기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다:
Figure pct00017
본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 하기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다:
Figure pct00018
Figure pct00019
본 발명의 추가의 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 222의 경쇄 가변 서열 또는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명의 추가의 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 202의 중쇄 가변 서열 또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 항체 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 구현예에서, CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 하기 항체 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나, 대안적으로 이들 중 1개, 2개, 3개 이상(이들 모두를 포함)으로 이루어진다: SEQ ID NO: 222의 경쇄 가변 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 232; SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 231; SEQ ID NO: 202의 중쇄 가변 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 212; SEQ ID NO: 201의 중쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 211; SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 567; SEQ ID NO: 222의 경쇄 가변 서열 또는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드(SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238); 및 SEQ ID NO: 202의 중쇄 가변 서열 또는 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드(SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)).
본 발명의 바람직한 구현예에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 CGRP에 대한 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다. 항체 Ab6과 관련하여, 전장 Ab6 항체를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 231 및 SEQ ID NO: 201의 중쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 SEQ ID NO: 567을 포함하거나, 대안적으로 이로 이루어진다.
본 발명의 또 일 구현예는 포유동물 세포, 예컨대, CHO, NSO, HEK-293에서, 또는 진균, 곤충, 또는 미생물 시스템, 예컨대, 효모 세포, 예컨대, 효모 피치아에서 발현을 위한 발현 벡터로 통합된 이들 폴리뉴클레오타이드를 고려한다. 적합한 피치아 종은 피치아 패스토리스를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다. 본원(내)에 기재된 본 발명의 일 구현예에서, Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 다음에 Ab1의 효소 소화(예를 들어, 파파인)에 의해 생산될 수 있다. 본 발명의 또 하나의 구현예에서, 항-CGRP 항체, 예컨대, Ab1 또는 그의 Fab 단편은 포유동물 세포, 예컨대, CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 또는 미생물 시스템, 예컨대, 효모 세포(예를 들어, 2배체 효모, 예컨대, 2배체 피치아) 및 다른 효모 균주에서 Ab6 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생산될 수 있다. 적합한 피치아 종은 피치아 패스토리스를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
일 구현예에서, 본 발명은 SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 282, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 402, SEQ ID NO: 442, SEQ ID NO: 482, 또는 SEQ ID NO: 522로부터 선택된 항-CGRP VH 항체 아미노산 서열을 인코딩하거나, 그의 변이체를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이고, 여기서 적어도 하나의 프레임워크 잔기(FR 잔기)는 토끼 항-CGRP 항체 VH 폴리펩티드 또는 보존적 아미노산 치환에서 대응하는 위치에 존재하는 아미노산으로 치환되었다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 302, SEQ ID NO: 342, SEQ ID NO: 382, SEQ ID NO: 422, SEQ ID NO: 462, SEQ ID NO: 502, 또는 SEQ ID NO: 542로부터 선택된 항-CGRP VL 항체 아미노산 서열을 인코딩하거나, 그의 변이체를 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이고, 여기서 적어도 하나의 프레임워크 잔기(FR 잔기)는 토끼 항-CGRP 항체 VL 폴리펩티드 또는 보존적 아미노산 치환에서 대응하는 위치에 존재하는 아미노산으로 치환되었다.
추가의 또 다른 구현예에서, 본 발명은 SEQ ID NO: 22 및 SEQ ID NO: 2; SEQ ID NO: 62 및 SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 102 및 SEQ ID NO: 82; SEQ ID NO: 142 및 SEQ ID NO: 122; SEQ ID NO: 182 및 SEQ ID NO: 162; SEQ ID NO: 222 및 SEQ ID NO: 202; SEQ ID NO: 262 및 SEQ ID NO: 242; SEQ ID NO: 302 및 SEQ ID NO: 282; SEQ ID NO: 342 및 SEQ ID NO: 322; SEQ ID NO: 382 및 SEQ ID NO: 362; SEQ ID NO: 422 및 SEQ ID NO: 402; SEQ ID NO: 462 및 SEQ ID NO: 442; SEQ ID NO: 502 및 SEQ ID NO: 482; 또는 SEQ ID NO: 542 및 SEQ ID NO: 522에 함유된 폴리펩티드를 인코딩하는 서열을 포함하는 하나 이상의 이종 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다.
또 다른 구현예에서, 본 발명은 항-CGRP 항체로부터 유래된 적어도 하나의 CDR 폴리펩티드를 함유하는 폴리펩티드를 발현하는, 단리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이고, 상기 발현된 폴리펩티드 단독은 CGRP에 특이적으로 결합하거나 항-CGRP 항체로부터 유래된 적어도 하나의 CDR 폴리펩티드를 함유하는 폴리펩티드를 발현하는 또 다른 폴리뉴클레오타이드 서열과 공동으로 발현될 때 CGRP에 특이적으로 결합하고, 상기 적어도 하나의 CDR은 SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 62, SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 102, SEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 142, SEQ ID NO: 122, SEQ ID NO: 182, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 222, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 262, SEQ ID NO: 242, SEQ ID NO: 302, SEQ ID NO: 282, SEQ ID NO: 342, SEQ ID NO: 322, SEQ ID NO: 382, SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 422, SEQ ID NO: 402, SEQ ID NO: 462, SEQ ID NO: 442, SEQ ID NO: 502, SEQ ID NO: 482, SEQ ID NO: 542, 또는 SEQ ID NO: 522의 VL 또는 VH 폴리펩티드에 함유된 것들로부터 선택된다.
상기 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 숙주 세포 및 벡터가 또한 고려된다.
본 발명은 추가로, 본원에 제시된 바와 같이 가변 중쇄 및 경쇄 폴리펩티드 서열을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열, 뿐만 아니라 개별적인 상보성-결정 영역(CDR, 또는 초가변 영역)을 포함하는 벡터, 뿐만 아니라 상기 벡터 서열을 포함하는 숙주 세포를 고려한다. 본 발명의 일 구현예에서, 숙주 세포는 효모 세포이다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 효모 숙주 세포는 피치아 속에 속한다.
항체 및 이의 단편을 생산하는 방법
또 다른 구현예에서, 본 발명은 항-CGRP 항체 및 이의 단편을 생산하는 방법을 고려한다. 교배 적격 효모의 다배체, 바람직하게 2배체 또는 4배체 균주로부터 분비된 항체 및 이의 단편을 생산하는 방법은, 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 제US 2009/0022659호(Olson 등), 및 미국 특허 제7,935,340호(Garcia-Martinez 등)에 교시되어 있으며, 이들 각각의 개시는 그 전체가 본원에서 참조로 포함된다. 포유동물 세포, 예를 들어, CHO 세포에서 항체 및 이의 단편을 생산하는 방법은 추가로 당분야에 널리 공지되어 있다.
항체를 생산하는 다른 방법이 또한 당업자에게 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 키메라 항체를 생산하는 방법이 현재 당분야에 널리 공지되어 있다(예를 들어, 각각의 개시의 전체가 본원에 참조로 포함되는, 미국 특허 제4,816,567호(Cabilly 등); 문헌[Morrison et al., P.N.A.S. USA, 81:8651-55 (1984); Neuberger, M.S. et al., Nature, 314:268-270 (1985); Boulianne, G.L. et al., Nature, 312:643-46 (1984)] 참조).
마찬가지로, 인간화 항체를 생산하는 다른 방법이 현재 당분야에 널리 공지되어 있다(예를 들어, 각각의 개시의 전체가 본원에 참조로 포함되는, 미국 특허 제5,530,101호, 제5,585,089호, 제5,693,762호, 및 제6,180,370호(Queen 등); 미국 특허 제5,225,539호 및 제6,548,640호(Winter); 미국 특허 제6,054,297호, 제6,407,213호 및 제6,639,055호(Carter 등); 미국 특허 제6,632,927호(Adair); 문헌[Jones, P.T. et al, Nature, 321:522-525 (1986); Reichmann, L., et al, Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen, M, et al, Science, 239:1534-36 (1988)]참조).
용어 "오피오이드 진통제"는 본원에서 모르핀-유사 작용을 갖는 천연 또는 합성의 모든 약물을 나타낸다. 합성 및 반합성 오피오이드 진통제는 모두 상기 용어의 범위 내에 있는 하기 다섯 가지 화학적 부류의 화합물의 유도체이다: 페난트렌; 페닐헵틸아민; 페닐피페리딘; 모르피난; 및 벤조모르판. 예시적인 오피오이드 진통제는 코데인, 디하이드로코데인, 디아세틸모르핀, 하이드로코돈, 하이드로모르폰, 레보르판올, 옥시모르폰, 알펜타닐, 부프레노르핀, 부토르파놀, 펜타닐, 서펜타닐, 메페리딘, 메타돈, 날부핀, 프로폭시펜 및 펜타조신 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
용어 "NSAID"는 비-스테로이드성 항-염증 화합물을 나타낸다. NSAID는 사이클로옥시게나제를 억제하는 이들의 능력에 따라 분류된다. 사이클로옥시게나제 1 및 사이클로옥시게나제 2가 사이클로옥시게나제의 주요 두 가지 이소형이고, 대부분의 표준 NSAID는 두 가지 이소형의 혼합된 억제제이다. 대부분의 표준 NSAID는 하기 다섯 가지 구조적 카테고리 중 하나에 속한다: (1) 프로피온산 유도체, 예컨대, 이부프로펜, 나프록센, 나프로신, 디클로페낙, 및 케토프로펜; (2) 아세트산 유도체, 예컨대, 톨메틴 및 슬린닥; (3) 페남산 유도체, 예컨대, 메페남산 및 메클로페남산; (4) 바이페닐카르복실산 유도체, 예컨대, 디플루니살 및 플루페니살; 및 (5) 옥시캄, 예컨대, 피록심, 수독시캄, 및 이속시캄. 사이클로옥시게나제 2를 선택적으로 억제하는 또 다른 부류의 NSAID가 기재되어 있다. Cox-2 억제제는, 예를 들어, 모두 본원에 참조로 포함되는, 미국 특허 제5,616,601호; 제5,604,260호; 제5,593,994호; 제5,550,142호; 제5,536,752호; 제5,521,213호; 제5,475,995호; 제5,639,780호; 제5,604,253호; 제5,552,422호; 제5,510,368호; 제5,436,265호; 제5,409,944호; 및 제5,130,311호에 기재되어 있다. 특정의 예시적인 COX-2 억제제는 셀레콕시브(SC-58635), DUP-697, 플로술리드(CGP-28238), 멜록시캄, 6-메톡시-2 나프틸아세트산(6-MNA), 로페콕시브, MK-966, 나부메톤(6-MNA에 대한 전구약물), 니메술리드, NS-398, SC-5766, SC-58215, T-614; 또는 이의 조합을 포함한다.
일부 구현예에서, 아스피린 및/또는 아세트아미노펜은 본원의 CGRP 항체 또는 단편과 함께 복용될 수 있다. 아스피린은 또 다른 유형의 비-스테로이드성 항-염증 화합물이다.
약제학적 제형이 투여되는 대상체는, 예를 들어, 약제 남용 두통의 치료, 방지 및/또는 완화를 필요로 하거나, 그 밖에 약제 남용 두통의 억제 또는 약화로부터 유익할 임의의 인간 또는 비인간 동물일 수 있다. 예를 들어, 대상체는 약제 남용 두통으로 진단되거나, 약제 남용 두통을 앓을 위험이 있는 것으로 여겨지는 개체일 수 있다. 본 발명은 추가로 약제 남용 두통의 치료, 방지 및/또는 완화를 위한 약제의 제조에서 본원에서 개시되는 임의의 약제학적 제형의 용도를 포함한다.
투여
본 발명의 일 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 항체 또는 이의 CGRP 결합 단편은 400 ㎎의 투여량으로 대상체에게 투여된다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 항체, 또는 그의 CGRP 결합 단편, 뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 26주 또는 6개월마다 1회 이하, 예컨대, 16주 또는 4개월마다 1회 미만, 8주 또는 2개월마다 1회 이하, 4주마다 또는 매월 1회 이하, 2주마다 또는 격월로 1회 이하, 4주마다 또는 매월 1회 이하, 2주마다 또는 격월로 1회 이하, 매주 1회 이하, 또는 매일 1회 이하의 빈도로 수령 대상체에게 투여된다. 일반적으로, 순차적인 용량의 투여는 상기 언급된 일정으로부터 ± 수일 달라질 수 있고, 예를 들어, 3개월마다 또는 12주마다의 투여는 ± 제1일, 제2일, 제3일, 제4일, 제5일, 제5일, 또는 제7일의 상이한 일정으로의 용량 투여를 포함한다.
본 발명의 또 다른 구현예에서, 본원에 기재된 항-CGRP 항체, 또는 그의 CGRP 결합 단편, 뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 약제학적 제형으로 대상체에게 투여된다.
"약제학적 조성물"은 포유동물에의 투여에 적합한 화학적 또는 생물학적 조성물을 나타낸다. 이러한 조성물은 구체적으로 구강, 표피, 경막외, 흡입, 동맥내, 심장내, 뇌심실내, 진피내, 근육내, 비강내, 안구내, 복강내, 척수내, 척추강내, 정맥내, 경구, 비경구, 관장 또는 좌약을 통한 직장, 피하, 진피하, 설하, 경피, 및 경점막, 바람직하게는 정맥내를 포함하지만, 이로 제한되지 않는 수많은 경로 중 하나 이상을 통해 투여용으로 제형될 수 있다. 또한, 투여는 주사, 분말, 액체, 겔, 점적, 또는 다른 투여 수단에 의해 일어날 수 있다.
"약제학적 부형제" 또는 "약제학적으로 허용되는 부형제"는 담체, 보통 액체이고, 여기서 활성 치료제가 제형화된다. 본 발명의 일 구현예에서, 활성 치료제는 본원에 기재된 인간화 항체, 또는 그의 하나 이상의 단편이다. 부형제는 화학적 및/또는 생물학적 안정성, 및 방출 특징을 제공할 수는 있지만 일반적으로 제형에 대한 임의의 약리학적 활성을 제공하지 않는다. 예시적인 제형은, 예를 들어, 참조로 포함되는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Ed., Grennaro, A., Ed., 1995]에서 찾아볼 수 있다.
본원에서 사용되는 "약제학적으로 허용되는 담체" 또는 "부형제"는 생리적으로 상용성인 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항균제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제를 포함한다. 일 구현예에서, 담체는 비경구 투여에 적합하다. 대안적으로, 담체는 정맥내, 복강내, 근육내, 또는 설하 투여에 적합할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 멸균 주사용 용액 또는 분산물의 즉석 제조를 위한 멸균 수용액 또는 분산물 및 멸균 분말을 포함한다. 약제학적 활성 물질을 위한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당분야에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 화합물과 비상용성이라는 점을 제외하는 한, 본 발명의 약제학적 조성물에서의 그의 용도가 고려된다. 보충용 활성 화합물은 또한 조성물에 포함될 수 있다.
약제학적 조성물은 전형적으로 제조 및 보관의 조건 하에서 멸균이고 안정해야 한다. 본 발명은, 약제학적 조성물이 동결건조된 형태로 존재하는 것을 고려한다. 조성물은 용액, 마이크로에멀션, 리포솜, 또는 높은 약물 농도에 적합한 다른 질서 있는 구조로서 제형될 수 있다. 담체는 용매 또는 분산 매질일 수 있고, 이것은, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜), 및 이들의 적합한 혼합물을 함유한다. 본 발명은 추가로, 약제학적 조성물에서 안정제의 포함을 고려한다. 적절한 유체성은, 예를 들어, 분산물의 경우에 필요한 입도의 유지에 의해 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
많은 경우에, 조성물에서 등장제, 예를 들어, 당, 폴리알코올, 예컨대, 만니톨, 소르비톨, 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사용 조성물의 장기적인 흡수는 흡수를 지연하는 제제, 예를 들어, 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물에서 포함함으로써 이루어질 수 있다. 게다가, 알칼리성 폴리펩티드는 시한 방출형 제형에서, 예를 들어, 서방형 폴리머를 포함하는 조성물에서 제형될 수 있다. 활성 화합물은 이식물 및 마이크로캡슐에 넣어진 전달 시스템을 포함하는 속방형, 예컨대, 조절 방출형 제형에 대항하여 화합물을 보호할 담체와 함께 제조될 수 있다. 생분해성의 생체적합성 폴리머가 사용될 수 있고, 그 예는 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리안하이드라이드, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르, 폴리락트산 및 폴리락틱 폴리글리콜 코폴리머(PLG)이다. 이러한 제형의 많은 제조 방법은 당업자에게 공지되어 있다.
예시적인 조성물은 수용액 중의 항-CGRP 항체 또는 그의 단편(예를 들어, Ab6), 부형제, 예컨대, 히스티딘, 등장제, 예컨대, 소르비톨, 및 계면활성제, 예컨대, 폴리소르베이트 80을 포함하거나, 필수적으로 포함하여 이루어지거나, 이루어진다. 예를 들어, 조성물은 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 예컨대, 약 5.8의 pH를 가지며, 1 ㎖ 부피 당, 약 100 ㎎의 항-CGRP 항체(예를 들어, Ab6), 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80, 또는, 대략적으로, 예를 들어, 상기 값의 10% 내, 상기 값의 5% 내, 상기 값의 1% 내, 상기 값의 0.5% 내, 또는 상기 값의 0.1% 내의 상기 구성성분, 및 물을 포함하거나, 필수적으로 포함하여 이루어지거나, 이루어질 수 있다. 예를 들어, pH 값은 5.8의 10% 내, 즉, 5.22 내지 6.38일 수 있다. Ab6 항체는 각각 SEQ ID NO: 222 및 SEQ ID NO: 202의 가변 경쇄 및 중쇄 폴리펩티드, 또는 각각 SEQ ID NO: 221 및 SEQ ID NO: 201의 경쇄 및 중쇄 폴리펩티드, 또는 각각 SEQ ID NO: 221 및 SEQ ID NO: 566의 경쇄 및 중쇄 폴리펩티드를 포함하거나, 이로 이루어질 수 있다. 조성물은 수용액, 또는 재구성될 때, 예를 들어, 물에 의한 첨가에 의해 상기 언급된 구성을 수득하는 농축물(예를 들어, 동결건조)의 형태일 수 있다. 예시적인 조성물은, ㎖ 당, 100 ㎎의 각각 SEQ ID NO: 221 및 SEQ ID NO: 201의 경쇄 및 중쇄 폴리펩티드, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80, 및 물 Q.S, 또는, 대략적으로, 예를 들어, 상기 양의 10% 내, 상기 양의 5% 내, 또는 상기 양의 1% 내, 상기 양의 0.5% 내, 또는 상기 양의 0.1% 내의 상기 구성성분으로 이루어진다. 또 다른 예시적인 조성물은, ㎖ 당, 100 ㎎의 각각 SEQ ID NO: 221 및 SEQ ID NO: 566의 경쇄 및 중쇄 폴리펩티드, 약 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 약 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 약 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80, 및 물 Q.S, 또는, 예를 들어, 대략적으로 상기 양의 10% 내, 상기 양의 5% 내, 또는 상기 양의 1% 내, 상기 양의 0.5% 내, 또는 상기 양의 0.1% 내의 구성성분으로 이루어진다. 조성물은 정맥내 또는 피하 투여, 바람직하게는 정맥내 투여에 적합할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 100 ㎖의 정맥 용액에 첨가되는 약 100 ㎎ 내지 약 300 ㎎ 항체의 양으로 정맥 용액(예컨대, 0.9% 염화나트륨)과 혼합하기에 적합할 수 있다. 바람직하게는, 조성물은 적어도 1개월, 3개월, 6개월, 12개월, 18개월, 또는 24개월 동안 상온에서 안정할 수 있는데, 예를 들어, 실온에서 저장 후 또는 특정 지속기간 동안 4℃에서 냉장될 때, 또는 그러한 지속기간 동안 저장을 시뮬레이션하는 가속화된 노화 시험에서 항체 또는 단편의 5% 이하 또는 10% 이하의 응집물의 형성을 나타낸다.
각각의 인용된 구현예에 대해, 화합물은 다양한 투여형으로 투여될 수 있다. 당업자에게 공지된 임의의 생물학적으로-허용되는 투여형, 및 이들의 조합이 고려된다. 이러한 투여형의 예는, 제한 없이, 재구성가능 분말, 엘릭시르, 액체, 용액, 현탁액, 에멀션, 분말, 과립, 입자, 마이크로입자, 분산성 과립, 카셰, 흡입제, 에어로졸 흡입제, 패치, 입자 흡입제, 이식물, 데포(depot) 이식물, 주사제(피하, 근육내, 정맥내, 및 진피내, 바람직하게는 정맥내 포함), 주입, 및 이들의 조합을 포함한다.
본 발명의 다양한 예시된 구현예의 상기 설명은 총 망라하거나 개시되는 정확한 형태로 본 발명을 한정하는 것으로 해석되지 않아야 한다. 본 발명의 특정 구현예 및 실시예들은 본원에서 예시적인 목적으로 기재되어 있지만, 관련 분야의 당업자에게 인식될 본 발명의 범위 내에서 다양한 동등한 변형이 가능하다. 본원에서 제공된 본 발명의 교시는 상기 기재된 실시예 이외의 다른 목적에 적용될 수 있다.
상기 상세한 설명에 비추어 본 발명에 이러한 그리고 다른 변화가 이루어질 수 있다. 일반적으로, 하기 청구항에서, 사용되는 용어들은 본 발명을 명세서 및 청구항에 개시된, 특정 구현예로 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다. 따라서, 본 발명은 상기 개시에 한정되지 않으나, 그 대신 본 발명의 범위는 하기 청구항에 의해 전적으로 결정될 것이다.
본 발명은 상기 설명 및 실시예에 상세히 기재되는 것 이외의 방식으로 실시될 수 있다. 상기 교시에 비추어 본 발명의 수많은 변형 및 변화가 가능하며, 따라서 첨부된 청구항의 범위 내에 속한다.
소정의 CGRP 항체 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩티드가 본 특허 출원의 제출 시 첨부된 서열 목록에 개시되어 있고, 상기 서열 목록의 개시는 전체가 본원에서 참조로 포함된다.
발명의 배경, 상세한 설명, 및 실시예에 인용된 각각의 문헌의 전체 개시(특허, 특허 출원, 신문 기사, 초록, 매뉴얼, 책자, 또는 다른 개시 포함)는 그 전체가 본원에서 참조로 포함된다.
하기 실시예들은 본 발명을 제조하고 사용하는 방법의 완전한 개시 및 설명을 당분야에서 당업자에게 제공하기 위해 제시되며, 이는 발명으로서 간주되는 것의 범위를 제한하고자 의도된 것이 아니다. 사용된 수치(예컨대, 양, 온도, 농도 등)에 대한 정확도를 보장하기 위한 노력이 있었으나, 약간의 실험 오차 및 편차는 허용되어야 한다. 달리 지시되지 않는 한, 부(part)는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이며, 온도는 섭씨이고, 압력은 대기압 또는 대기압 부근이다.
추가적인 예시적 실시예
S1. 군발성 두통 증상의 즉각적 경감을 필요로 하는 환자의 군발성 두통(예를 들어, 만성 군발성 두통 및/또는 삽화성 두통)을 치료하기 위한 또는 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 필요로 하는 환자의 군발성 두통(예를 들어, 만성 군발성 두통 및/또는 삽화성 두통)을 방지하기 위한 약제 제조를 위한 항-CGRP 항체의 용도로서, 상기 약제가 상기 항-CGRP 항체를 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 주입하기 위한 것이며, 상기 항-CGRP 항체는 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열, 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S2. 구현예 S1에 있어서, 상기 약제가 투여 시 적어도 하나의 군발성 두통 증상을 나타내는 환자에서 사용하기 위한, 항-CGRP 항체의 용도. S3. 구현예 S2에 있어서, 상기 적어도 하나의 군발성 두통 증상이 타격 목록 A 내지 C에 따른 적어도 5회의 발병을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도:
A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
B. 하기 중 1개 또는 2개 이상
(1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
ii. 비강 울혈 및/또는 비루
iii. 눈꺼풀 부종
iv. 이마 및 얼굴 발한.
v. 동공축소 및/또는 안검하수
(2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
S4. 구현예 S3에 있어서, 대상체가 머리 통증을 경험하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S5. 구현예 S2 내지 S4 중 어느 하나에 있어서, 증상이 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 경감되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S6. 구현예 S2 내지 S5 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 더 이상 군발성 두통을 갖지 않는, 항-CGRP 항체의 용도.
S7. 구현예 S1 내지 S6 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S8. 구현예 S1 내지 S7 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S9. 구현예 S1 내지 S8 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S10. 구현예 S1 내지 S9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S11. 구현예 S1 내지 S10 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S12. 구현예 S1 내지 S11 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S13. 구현예 S1 내지 S12 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S14. 구현예 S1 내지 S13 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S15. 구현예 S1 내지 S14 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S16. 구현예 S1 내지 S15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S17. 구현예 S1 내지 S16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S18. 구현예 S1 내지 S17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S19. 구현예 S1 내지 S18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S20. 구현예 S1 내지 S19 중 어느 하나에 있어서, 상기 정맥내 투여가 대략 30분 내지 60분의 기간에 걸쳐 주입되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S21. 구현예 S1 내지 S20 중 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 증상이 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 감소되거나 없어지는, 항-CGRP 항체의 용도.
S22. 구현예 S1 내지 S21 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 주입 완료 2시간 후 군발성 두통이 없는, 항-CGRP 항체의 용도.
S23. 구현예 S1 내지 S22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 상기 항-CGRP 항체의 약 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S24. 구현예 S1 내지 S22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 상기 항-CGRP 항체의 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S25. 구현예 S1 내지 S24 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 및 물을 포함하거나 이로 이루어지는 제형에 포함되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S26. 구현예 S25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체의 용도.
S27. 구현예 S25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 5% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체의 용도.
S28. 구현예 S25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 1% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체의 용도.
S29. 구현예 S25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.5% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체의 용도.
S30. 구현예 S25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.1% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체의 용도.
S31. 구현예 S25 내지 S30 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 L-히스티딘이 L-히스티딘 및 L-히스티딘 일수화물의 혼합물을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S32. 구현예 S25 내지 S30 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 3.1 ㎎의 히스티딘이 L-히스티딘(1 ㎎) 및 L-히스티딘 일수화물(2.8 ㎎)의 혼합물을 포함하며, 최종 제형에서 최대 3.1 ㎎ L-히스티딘 유리 염기로 합산되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S33. 구현예 S26 내지 S32 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 100 ㎎/㎖ 단일-400 바이알에 포함되며, 각각의 ㎖은 100 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 항-CGRP 항체의 용도.
S34. 구현예 S26 내지 S32 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되며, 각각의 ㎖은 300 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 항-CGRP 항체의 용도.
S35. 구현예 S26 내지 S32 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖은 300 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘, 예컨대 L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물, 폴리소르베이트 80, 소르비톨 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8 또는 약 5.8인, 항-CGRP 항체의 용도.
S36. 구현예 S1 내지 S35 중 어느 하나에 있어서, 상기 약제가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 2의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S37. 구현예 S1 내지 S36 중 어느 하나에 있어서, 상기 약제가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 3의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S38. 구현예 S1 내지 S37 중 어느 하나에 있어서, 상기 약제가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 2의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S38. 구현예 S1 내지 S37 중 어느 하나에 있어서, 상기 약제가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 1의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S40. 구현예 S1 내지 S39 중 어느 하나에 있어서, 상기 약제가 상기 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 임의의 급성 편두통 약제가 투여되지 않은 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체의 용도.
S41. 구현예 S40에 있어서, 상기 급성 편두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S42. 구현예 S41에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하고; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄, 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 진통 효과를 갖는 2개 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S43. 구현예 S1 내지 S39 중 어느 하나에 있어서, 환자가 추가적인 편두통 약제를 수여받고 있거나 수여받았던, 항-CGRP 항체의 용도.
S44. 구현예 S1 내지 S39 또는 S43 중 어느 하나에 있어서, 환자가 항-CGRP 항체의 투여 전에, 이와 동시에 또는 후에 편두통 약제를 수여받는, 항-CGRP 항체의 용도.
S45. 구현예 S1 내지 S39 또는 S43 및 S44 중 어느 하나에 있어서, 환자가 상기 항-CGRP 항체 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 항-CGRP 항체 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 편두통 약제를 수여받는, 항-CGRP 항체의 용도.
S46. 구현예 S44 또는 S45에 있어서, 상기 편두통 약제가 급성 및/또는 만성 편두통 약제를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S47. 구현예 S44 내지 S46 중 어느 하나에 있어서, 상기 편두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S48. 구현예 S47에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하며; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄, 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 진통 효과를 갖는 2개 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S49. 구현예 S1 내지 S48 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 피치아 패스토리스에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S50. 구현예 S1 내지 S48 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 CHO 세포에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S51. 구현예 S1 내지 S50 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 환자에게 3개월마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체가 투여되는, 항-CGRP 항체의 용도.
S52. 구현예 S1 내지 S51 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통 증상의 즉각적 경감을 야기하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S53. 구현예 S1 내지 S52 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 야기하는, 항-CGRP 항체의 용도.
S54. 구현예 S1 내지 S53 중 임의의 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 증상이 예를 들어 (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증 및 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 하나 이상(예컨대, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 모두)으로 이루어지거나 이를 포함하는 목록으로부터 선택되는, 항-CGRP 항체의 용도:
결막 충혈 및/또는 눈물흘림; 비강 울혈 및/또는 비루; 눈꺼풀 부종; 이마 및 얼굴 발한; 동공축소 및/또는 안검하수; 안절부절 못하거나 동요하는 느낌.
부가적인 예시적 구현예
E1. 증상의 즉각적 경감을 필요로 하는 환자의 군발성 두통(예를 들어, 만성 또는 삽화성 군발성 두통)의 치료에서 사용하기 위한 또는 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 필요로 하는 환자의 군발성 두통(예를 들어, 만성 또는 삽화성 군발성 두통)의 방지에서 사용하기 위한 항-CGRP 항체로서, 상기 항-CGRP 항체를 상기 CGRP 항체를 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 주입하기 위한 것이며, 상기 항-CGRP 항체는 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열, 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는, 항-CGRP 항체.
E2. 구현예 E1에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 투여 시 적어도 하나의 군발성 두통 증상을 나타내는 환자에서 사용하기 위한, 항-CGRP 항체.
E3. 구현예 E2에 있어서, 상기 적어도 하나의 군발성 두통 증상이 타격 목록 A 내지 C에 따른 적어도 5회의 발병을 포함하는, 항-CGRP 항체:
A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
B. 하기 중 1개 또는 2개 이상
(1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
ii. 비강 울혈 및/또는 비루
iii. 눈꺼풀 부종
iv. 이마 및 얼굴 발한
v. 동공축소 및/또는 안검하수
(2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
E4. 구현예 E3에 있어서, 대상체가 머리 통증을 경험하는, 항-CGRP 항체.
E5. 구현예 E2 내지 E4 중 어느 하나에 있어서, 대부분의 군발성 두통이 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 경감되는, 항-CGRP 항체.
E6. 구현예 E2 내지 E5 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 더 이상 군발성 두통을 갖지 않는, 항-CGRP 항체.
E7. 구현예 E1 내지 E6 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는, 항-CGRP 항체.
E8. 구현예 E1 내지 E7 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E9. 구현예 E1 내지 E8 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E10. 구현예 E1 내지 E9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E11. 구현예 E1 내지 E10 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E12. 구현예 E1 내지 E11 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E13. 구현예 E1 내지 E12 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E14. 구현예 E1 내지 E13 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E15. 구현예 E1 내지 E14 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E16. 구현예 E1 내지 E15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E17. 구현예 E1 내지 E16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E18. 구현예 E1 내지 E17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E19. 구현예 E1 내지 E18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E20. 구현예 E1 내지 E19 중 어느 하나에 있어서, 상기 정맥내 투여가 대략 30분 내지 60분의 기간에 걸쳐 주입되는, 항-CGRP 항체.
E21. 구현예 E1 내지 E20 중 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 증상이 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 감소되거나 없어지는, 항-CGRP 항체.
E22. 구현예 E1 내지 E21 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 주입 완료 2시간 후 군발성 두통이 없는, 항-CGRP 항체.
E23. 구현예 E1 내지 E22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 상기 항-CGRP 항체의 약 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E24. 구현예 E1 내지 E22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 상기 항-CGRP 항체의 400 ㎎의 투여량으로 정맥내 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E25. 구현예 E1 내지 E24 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 및 물을 포함하거나 이로 이루어지는 제형에 포함되는, 항-CGRP 항체.
E26. 구현예 E25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체.
E27. 구현예 E25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 5% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체.
E28. 구현예 E25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 1% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체.
E29. 구현예 E25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.5% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체.
E30. 구현예 E25에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.1% 내의 pH를 갖는, 항-CGRP 항체.
E31. 구현예 E25 내지 E30 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 L-히스티딘이 L-히스티딘 및 L-히스티딘 일수화물의 혼합물을 포함하는, 항-CGRP 항체.
E32. 구현예 E25 내지 E30 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 3.1 ㎎의 히스티딘이 L-히스티딘(1 ㎎) 및 L-히스티딘 일수화물(2.8 ㎎)의 혼합물을 포함하며, 최종 제형에서 최대 3.1 ㎎ L-히스티딘 유리 염기로 합산되는, 항-CGRP 항체.
E33. 구현예 E26 내지 E32 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 100 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되며, 각각의 ㎖은 100 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 항-CGRP 항체.
E34. 구현예 E26 내지 E32 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되며, 각각의 ㎖은 300 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎), 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 항-CGRP 항체.
E35. 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알을 포함하는 제형으로서, 각각의 ㎖은 구현예 E1 내지 E35에 따른 300 ㎎의 항-CGRP 항체, L-히스티딘 또는 L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물, 폴리소르베이트 80, 소르비톨, 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 약 5.8 또는 5.8인, 제형.
E36. 구현예 E1 내지 E35 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 2의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E37. 구현예 E1 내지 E36 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 3의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E38. 구현예 E1 내지 E37 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 2 또는 3의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E39. 구현예 E1 내지 E38 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 1의 통증 수준을 나타내는 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E40. 구현예 E1 내지 E39 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 상기 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 임의의 급성 편두통 약제가 투여되지 않은 환자에 대한 투여를 위한, 항-CGRP 항체.
E41. 구현예 E40에 있어서, 상기 급성 편두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E42. 구현예 E41에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하고; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄, 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 진통 효과를 갖는 2개 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 항-CGRP 항체.
E43. 구현예 E1 내지 E39 중 어느 하나에 있어서, 환자가 편두통 약제를 수여받고 있거나 수여받았던, 항-CGRP 항체.
E44. 구현예 E1 내지 E39 또는 E43 중 어느 하나에 있어서, 환자가 항-CGRP 항체의 투여 전에, 이와 동시에 또는 후에 편두통 약제를 수여받는, 항-CGRP 항체.
E45. 구현예 E1 내지 E39 또는 E43 및 E44 중 어느 하나에 있어서, 환자가 상기 항-CGRP 항체 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 항-CGRP 항체 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 편두통 약제를 수여받는, 항-CGRP 항체.
E46. 구현예 E44 또는 E45에 있어서, 상기 편두통 약제가 급성 및/또는 만성 편두통 약제를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E47. 구현예 E44 내지 E46 중 어느 하나에 있어서, 상기 편두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 항-CGRP 항체.
E48. 구현예 E47에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하며; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄, 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 진통 효과를 갖는 2개 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나 상기 병용-진통제가 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 항-CGRP 항체.
E49. 구현예 E1 내지 E48 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 피치아 패스토리스에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 항-CGRP 항체.
E50. 구현예 E1 내지 E39 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 CHO 세포에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 항-CGRP 항체.
E51. 구현예 E1 내지 E50 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 환자에게 3개월마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체가 투여되는, 항-CGRP 항체.
E52. 구현예 E1 내지 E51 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통 증상의 즉각적 경감을 야기하는, 항-CGRP 항체.
E53. 구현예 E1 내지 E52 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 야기하는, 항-CGRP 항체.
E.54 구현예 E1 내지 E53 중 임의의 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 증상이 예를 들어 15분 내지 180분 지속되는(치료하지 않는 경우), 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증 및 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 하나 이상(예컨대, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 모두)으로 이루어지거나 이를 포함하는 목록으로부터 선택되는, 항-CGRP 항체:
결막 충혈 및/또는 눈물흘림; 비강 울혈 및/또는 비루; 눈꺼풀 부종; 이마 및 얼굴 발한; 동공축소 및/또는 안검하수; 안절부절 못하거나 동요하는 느낌.
추가 구현예
EE1. 군발성 두통 증상을 갖는 환자의 군발성 두통(예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통)을 치료하거나 군발성 두통(예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통)의 방지 치료를 필요로 하는 환자의 군발성 두통을 방지하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 환자에게 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는 400 mg의 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
EE2. 구현예 1에 있어서, 상기 환자가 투여 시 적어도 하나의 군발성 두통 증상을 나타내는, 방법.
EE3. 구현예 1 또는 2에 있어서, 환자가 타격 목록 A 내지 C에 따른 적어도 5회의 발병을 경험하는, 방법:
A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
B. 하기 중 1개 및/또는 2개:
(1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
ii. 비강 울혈 및/또는 비루
iii. 눈꺼풀 부종
iv. 이마 및 얼굴 발한
v. 동공축소 및/또는 안검하수
(2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
EE4. 구현예 1 내지 3 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 적어도 3개월, 적어도 6개월, 적어도 9개월, 적어도 1년, 적어도 2년, 적어도 3년, 또는 3년 초과 동안 군발성 두통을 가졌거나 진단받았던, 방법.
EE5. 구현예 1 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 하기 하나 이상의 기준에 따라 분류되는, 방법: 남성, 흡연자, 약 20세 내지 약 50세 연령, 군발성 두통의 가족력을 가짐, 약제, 예컨대 니트로글리세린 또는 심장병을 치료하기 위해 사용되는 다른 약물을 사용하고 있음, 신체의 생물학적 시계(시상하부)에 이상을 갖는 것으로 진단받았음, 군발성 두통이 전형적으로 유발인자, 예컨대 음식, 호르몬 변화 또는 스트레스와 연관되지 않음, 또는 군발 기간의 개시 시 알코올 사용이 더 많은 두통 또는 증가된 머리 통증을 악화시키거나 유발함.
EE6. 구현예 1 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 머리 통증을 경험하는, 방법.
EE7. 구현예 1 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 징후 또는 증상이 상기 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1 내지 6시간 후에 경감되는, 방법.
EE8. 구현예 1 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1 내지 6시간 후에 더 이상 군발성 두통을 갖지 않는, 방법.
EE9. 구현예 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 각각 SEQ ID NO: 234; SEQ ID NO: 236; 및 SEQ ID NO: 238에 의해 인코딩되는 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 214; SEQ ID NO: 216; 및 잔기 GGGGACATC(2페이지, 표 A, 항목 번호 12 참조)에 의해 인코딩되는 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는, 방법.
EE10. 구현예 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE11. 구현예 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE12. 구현예 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서,상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE13. 구현예 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE14. 구현예 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE15. 구현예 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE16. 구현예 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE17. 구현예 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE18. 구현예 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE19. 구현예 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE20. 구현예 1 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE21. 구현예 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
EE22. 구현예 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 상기 정맥내 투여가 대략 30분 내지 60분의 기간에 걸쳐 주입되는, 방법.
EE23. 구현예 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 징후 또는 증상이 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 감소되거나 없어지는, 방법.
EE24. 구현예 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 환자가 주입 완료 2시간 후 군발성 두통이 없는, 방법.
EE25. 구현예 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 더 바람직하게는 12주마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는 방법.
EE26. 구현예 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80 및 물을 포함하거나 이로 이루어지는 제형에 포함되는, 방법.
EE27. 구현예 26에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 갖는, 방법.
EE28. 구현예 26에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨 및 0.15 ㎎ 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 5% 내의 pH를 갖는, 방법.
EE29. 구현예 26에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 1% 내의 pH를 갖는, 방법.
EE30. 구현예 26에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.5% 내의 pH를 갖는, 방법.
EE31. 구현예 26에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.1% 내의 pH를 갖는, 방법.
EE32. 구현예 26 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 L-히스티딘이 L-히스티딘 및 L-히스티딘 일수화물의 혼합물을 포함하는, 방법.
EE33. 구현예 26 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 3.1 ㎎의 히스티딘이 L-히스티딘(1 ㎎) 및 L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎)의 혼합물을 포함하고, 최종 제형에서 최대 3.1 ㎎ L-히스티딘 유리 염기로 합산되는, 방법.
EE34. 구현예 26 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 100 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 100 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎) 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 방법.
EE35. 구현예 26 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 300 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎) 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 방법.
EE36. 구현예 26 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 300 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘, L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물, 폴리소르베이트 80, 소르비톨 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8 또는 약 5.8인, 방법.
EE37. 구현예 1 내지 36 중 어느 하나에 있어서, 환자가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 2의 통증 수준을 나타내는, 방법.
EE38. 구현예 1 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 환자가 상기 항체의 투여 시 VRS-4 상에서 적어도 3의 통증 수준을 나타내는, 방법.
EE39. 구현예 1 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 환자가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 2의 통증 수준을 나타내는, 방법.
EE40. 구현예 1 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 환자가 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 VRS-4 상에서 최대 1의 통증 수준을 나타내는, 방법.
EE41. 구현예 1 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 환자에게 상기 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 투여 전후의 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 임의의 급성 편두통 약제가 투여되지 않는, 방법.
EE42. 구현예 41에 있어서, 상기 급성 편두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 항구토 약제, 바르비투레이트, 에르고타민 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 방법.
EE43. 구현예 42에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하고; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 진통 효과를 유발하는 상기 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인) 중 적어도 1개 또는 2개를 포함하는, 선택적으로 상이한 약물 클래스의, 2개 이상의 약물, 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나, 상기 병용 진통제는 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나, 상기 병용 진통제는 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 방법.
EE44. 구현예 1 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 환자가 편두통 또는 두통 약제를 수여받고 있거나 수여받았던, 방법.
EE45. 구현예 1 내지 40 또는 44 중 어느 하나에 있어서, 환자가 항-CGRP 항체의 투여 전에, 이와 동시에 또는 후에 편두통 또는 두통 약제를 수여받는, 방법.
EE46. 1 내지 40 또는 45 내지 45 중 어느 하나에 있어서, 환자가 상기 항-CGRP 항체 투여 전후의 기간 내에, 예컨대 상기 항-CGRP 항체 투여 전후 15분 내에, 30분 내에, 1시간 내에, 2시간 내에, 3시간 내에, 4시간 내에, 5시간 내에, 또는 6시간 내에 편두통 또는 두통 약제를 수여받는, 방법.
EE47. 구현예 45 또는 46에 있어서, 상기 편두통 약제가 급성 및/또는 만성 편두통 약제를 포함하는, 방법.
EE48. 구현예 45 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 상기 편두통 또는 두통 약제가 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 항구토 약제, 바르비투레이트, 에르고타민, 또는 에르고트 유도체를 포함하는, 방법.
EE49. 구현예 48에 있어서, 상기 비-오피오이드 진통제가 파라세타몰(아세트아미노펜), 아세틸살리실산(아스피린), 또 다른 NSAID, 또는 또 다른 비-오피오이드 진통제를 포함하고; 상기 트립탄이 수마트립탄, 졸미트립탄, 나라트립탄, 리자트립탄, 엘레트립탄, 알모트립탄 또는 프로바트립탄 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 오피오이드가 옥시코돈, 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인 및 하이드로코돈 중 하나 이상의 사용을 포함하고; 상기 병용 약제가 적어도 1개 또는 2개가 진통 효과를 유발하는, 선택적으로 상이한 약물 클래스의, 2개 이상의 약물(예를 들어, 파라세타몰 및 코데인), 진통제 및 아주반트(예를 들어, 파라세타몰 및 카페인)를 포함하고/하거나, 상기 병용 진통제는 적어도 하나의 오피오이드(예컨대 트라마돌, 부토르파놀, 모르핀, 코데인, 하이드로코돈, 또는 이의 임의의 조합), 부탈비탈과 같은 바르비투레이트, 및/또는 카페인을 포함하고/하거나, 상기 병용 진통제는 아세틸살리실산(아스피린), 파라세타몰 및 카페인(EXCEDRIN®, EXCEDRIN MIGRAINE®)을 포함하는, 방법.
EE50. 구현예 1 내지 49 중 어느 하나에 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 피치아 패스토리스에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 방법.
EE51. 구현예 1 내지 49 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 CHO 세포에서 발현되거나 그 발현에 의해 수득되는, 방법.
EE52. 구현예 1 내지 51 중 임의의 어느 하나에 있어서, 상기 환자에게 3개월마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체가 투여되는, 방법.
EE53. 구현예 1 내지 52 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통 증상의 즉각적 경감을 야기하는, 방법.
EE54. 구현예 1 내지 53 중 어느 하나에 있어서, 상기 방법이 군발성 두통의 즉각적 방지 치료를 야기하는 방법.
EE55. 구현예 1 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 군발성 두통 증상이 예를 들어 (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증 및 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 하나 이상(예컨대, 1개, 2개, 3개, 4개, 5개 또는 모두)으로 이루어지거나 이를 포함하는 목록으로부터 선택되는, 방법:
결막 충혈 및/또는 눈물흘림; 비강 울혈 및/또는 비루; 눈꺼풀 부종; 이마 및 얼굴 발한; 동공축소 및/또는 안검하수; 안절부절 못하거나 동요하는 느낌.
EE56. 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는 항-CGRP 항체 400 ㎎ 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 군발성 두통의 치료 또는 방지를 위한 투여량 제형.
EE57. (i) 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는 항-CGRP 항체 400 ㎎ 및 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체를 각각 포함하는 하나 이상의 단일 용량 투여량 제형 및 (ii) 생체내 투여에 대한 지침을 제공하는 라벨 또는 다른 문서를 포함하는 군발성 두통의 치료 또는 방지를 위한 키트.
EE58. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 222의 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 202의 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE59. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 232에 의해 인코딩되는 가변 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 212에 의해 인코딩되는 가변 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE60. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE61. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE62. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE63. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE64. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE65. 구현예 56 또는 57에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 투여량 제형 또는 키트.
EE66. 구현예 56 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 갖는, 투여량 제형 또는 키트.
EE67. 구현예 56 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 5% 내의 pH를 갖는, 투여량 제형 또는 키트.
EE68. 구현예 56 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 1% 내의 pH를 갖는, 투여량 제형 또는 키트.
EE69. 구현예 56 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.5% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.5% 내의 pH를 갖는, 투여량 제형 또는 키트.
EE70. 구현예 56 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 0.1% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고/갖거나, 5.8 또는 상기 값의 +/- 0.1% 내의 pH를 갖는, 투여량 제형 또는 키트.
EE71. 구현예 66 내지 70 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 L-히스티딘이 L-히스티딘 및 L-히스티딘 일수화물의 혼합물을 포함하는 투여량 제형 또는 키트.
EE72. 구현예 66 내지 71 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형 중 상기 3.1 ㎎의 히스티딘이 L-히스티딘(1 ㎎) 및 L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎)의 혼합물을 포함하고, 최종 제형에서 방법이 최대 3.1 ㎎ L-히스티딘 유리 염기로 합산되는, 투여량 제형 또는 키트.
EE73. 구현예 56 내지 72 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 100 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 100 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎) 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 투여량 제형 또는 키트.
EE74. 구현예 56 내지 73 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 300 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘(1 ㎎), L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물(2.8 ㎎), 폴리소르베이트 80(0.15 ㎎), 소르비톨(40.5 ㎎) 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8인, 투여량 제형 또는 키트.
EE75. 구현예 56 내지 74 중 어느 하나에 있어서, 상기 제형이 300 ㎎/㎖ 단일 용량 바이알에 포함되고, 각각의 ㎖이 300 ㎎ 항-CGRP 항체, L-히스티딘, L-히스티딘 하이드로클로라이드 일수화물, 폴리소르베이트 80, 소르비톨 및 주사용수, USP를 함유하고, pH 5.8 또는 약 5.8인, 투여량 제형 또는 키트.
실시예
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위해 제공된 것이고, 어떠한 방식으로든 청구항의 범위를 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.
실시예 1
CGRP에 결합하는 항체의 제조
도 1a 내지 도 12의 서열을 갖는 예시적인 항-CGRP 항체 Ab1 내지 Ab14의 제조는 2012년 11월 29일에 공개된 소유된 PCT 출원 제WO/2012/162243호에 개시되어 있고, 상기 출원의 내용은 본원에서 참조로 포함된다. 이 출원은 피치아 패스토리스 세포에서 이들 항체의 합성을 예시한다. 본 출원인은 추가로 특히 CHO 세포에서 항-CGRP 항체 Ab1 내지 Ab14, 및 Ab6의 합성을 고려한다.
실시예 2
본 발명에 따른 항-CGRP 항체의 안전성 및 유효성을 평가하는 인간 임상 연구
임상 치료 프로토콜
Ab6로서 본원에서 확인된 인간화 항-CGRP IgG1 항체를 편두통 삽화의 수, 지속기간, 및/또는 강도를 억제하거나, 줄이거나, 방지하는 이의 능력에 대하여 인간 대상체에서 평가하였다. Ab6 항체는 각각 SEQ ID NO: 222 및 SEQ ID NO: 221에서 VL 및 경쇄 폴리펩티드를 함유하고, 각각 SEQ ID NO: 202 및 SEQ ID NO: 201에서 VH 및 중쇄 폴리펩티드를 함유한다. 이러한 항체는 중쇄 불변 영역에 돌연변이를 함유하는 IgG1 불변 영역을 포함한다(297번 위치의 아스파라긴 잔기를 알라닌 잔기로 대체하여, 실질적으로 글리코실화 및 용해 활성을 없앰)(미국 특허 제5,624,821호 참조).
특히, Ab6 항체의 임상 유효성을 위약 대조 이중-맹검 무작위 연구에서 시험하였다. 연구에서 개체는 모두 특정 기준에 기초하여 선택되었다. 특히 모두 50세 이하 연령의 편두통 환자로 진단되었고(ICHD-II, 2004 섹션 1), 추가로, 선별 전 3개월까지 각각 28일 중 5일 이상 및 14일 이하의 편두통과 함께 12개월 이상의 편두통 병력을 가졌다.
추가로, 연구에서 모든 개체는 28일 기간 당 14일 이하의 급성 편두통 약제를 사용했으며, 이 기간 중, 선별 전 3개월까지 28일 기간 당 및 무작위화 전 e다이어리 완료 28일 기간 당 10일 이하의 트립탄 사용이 있었다.
표 1은 연구 집단의 인구통계 특징을 요약한 것이다.
[표 1]
Figure pct00020
연구 내내, 모든 개체는 e-다이어리를 이용하여 매일 이들의 편두통 상태를 기록할 것을 요청받았다. e-다이어리에서, 연구의 대상체들은 월 편두통 일수, 월 편두통 삽화수, 월 편두통 시간수, 편두통 중증도, 및 트립탄과 같은 임의의 급성기 약제 사용을 기록할 것을 요청받았다.
또한, 연구 참가자들은 월 편두통 일수/시간수/삽화수 기준선을 확립하기 위해 항체 또는 위약으로의 처리 전 28일 기간에 이들의 편두통 상태를 e-다이어리를 사용하여 기록할 것을 요청받았다. 또한, 이를 통해 연구 대상체들이 e-다이어리의 사용에 익숙해질 수 있었다.
28일 실시 후, 연구 대상체들을 각각 80명의 대상체를 포함하여 두 개의 군으로 나누었다(도 17). 첫 번째 군, 즉, 항체 처리군에서, 군내 각각의 대상체(n=80)에 단일 1000 ㎎ 용량의 Ab6를 정맥내 투여하였다. 두 번째 군(n=80), 즉, 위약군에서, 각각의 대상체에게 수성 항체 담체 용액만을 함유하는 정맥 용액을 제공하였다.
처리군 및 위약군의 개체를 용량 투여 후 24주간 평가하였다. 처음에, 12주 중간 분석을 실시하였다. 12주 중간 분석에 이어, 정제된 분석을 실시하였다. 이러한 정제된 분석에는 잠재적으로, 예를 들어, 연구 프로토콜에 따라 환자 데이터의 추가 또는 제거, 예를 들어, e-다이어리로부터 완전히 로딩되지 않은 데이터 업데이트가 포함되었다. 이러한 보완으로 약간의 변화가 야기되었지만, 전반적인 결론은 변경되지 않았다.
항체 대 위약의 유효성을 e-다이어리 항목에 기록된 데이터를 부분적으로 기초하여 평가하였다. 예를 들어, 이러한 분석에는 처리군 대 위약군의 대상체에서 기록된 월 편두통 일수, 월 편두통 삽화수, 월 편두통 시간수의 수치 비교가 포함되었다. 둘 모두의 군에서 각각의 군의 반응자의 백분율(즉, 편두통 일수에 50%, 75%, 및 100% 감소가 있는 대상체)을 또한 비교하였다.
또한, MSQ 및 HIT-6 설문지에 대한 두 군 모두의 Ab6-처리 및 위약-처리 대상체의 반응이 평가되고 비교될 것이다. MSQ는 건강-관련 삶의 질(HRQL)에 대한 편두통의 영향을 평가하기 위해 빈번하게 사용되는 질환-특이적 도구이다. MSQ는 Glaxo Wellcome Inc.에서 개발한 16-문항 편두통-특이적 삶의 질 설문지(버전 1.0)를 포함한다. MSQ는 하기 세 가지 매개변수를 측정하는 것으로 가정된다: (i) 역할 기능-제한; (ii) 역할 기능-방지; 및 (iii) 정서적 기능.
HIT-6 또는 기능적 영향(두통 영향 시험 또는 HIT-6이라고도 불림)은 유사하게 편두통 강도를 평가하기 위한 널리 공지된 도구이다. 상기 검사는 6개 질의를 이용하여 개체의 기능적 건강 및 웰-빙에 대한 두통의 영향 및 이의 치료를 파악한다.
또한, CGRP 항체의 약동학(PK) 특성 및 면역원성이 Ab6 항체 처리 대상체에서 평가될 것이다.
임상 결과 및 분석
치료 대상체에서 12주간의 이러한 인간 임상 시험 및 분석의 결과는 하기 표 2에 요약되어 있다.
[표 2]
편두통 일수에 대한 반응자 분석
Figure pct00021
또한, 처리군 및 위약군의 반응자 수에 기초하여 임상 연구의 결과들을 비교하였다. 도 13에 나타낸 바와 같이, 중간 기간의 각각의 달에 편두통 일수의 50%, 75% 또는 100% 감소를 나타낸 대상체의 수를 처리군과 위약군에서 비교하였다. 도면에 나타낸 바와 같이, Ab6-처리군의 60%은 두통 일수의 적어도 50% 감소를 갖고, Ab6-처리군의 31%는 두통 일수의 적어도 75% 감소를 갖고, Ab 처리군의 15%는 두통 일수의 100% 감소를 가졌다.
대조적으로, 위약-처리군의 33%는 두통 일수의 적어도 50% 감소를 갖고, 위약-처리군의 9%는 두통 일수의 적어도 75% 감소를 갖고, 위약-처리군의 0%(없음)는 두통 일수의 100% 감소를 가졌다.
이들 결과는 편두통 일수의 감소가 Ab6-처리군에서 훨씬 더 컸다는 것을 분명히 보여준다. 유의한 위약 효과가 없었다면, 이들 수적 차이는 더 두드러졌을 것이다. (이러한 현상은 편두통 및 다른 신경학적 약물의 경우 흔히 매우 높으므로 상승된 위약 효과는 놀라운 것이 아니다).
또한, 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 변화%를 비교하였다. 도 14에 나타낸 바와 같이, 치료 후 12주 동안 두 군에 대하여 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 비교하였다. 통계적으로 유의한(p=0.0078) 이들 결과는 Ab6-처리군이 위약-처리군보다 기준선과 비교하여 월 두통 일수의 훨씬 더 큰 감소를 가졌다는 것을 분명히 보여준다.
또한, 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 삽화수의 기준선으로부터의 변화%를 비교하였다. 도 15에 나타낸 바와 같이, 치료 후 12주 동안 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 삽화수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 비교하였다. 이들 결과는 Ab6-처리군이 위약-처리군보다 기준선과 비교하여 월 편두통 삽화수의 유의하게 더 큰 감소를 가졌다는 것을 지시한다.
추가로, 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 시간수의 기준선으로부터의 변화%를 비교하였다. 도 16에 나타낸 바와 같이, 치료 후 12주 동안 두 군에 대하여 위약 및 Ab6-처리군에서 월 편두통 시간수의 기준선으로부터의 중앙값(± QR) 변화%를 비교하였다. 이들 결과는 Ab6-처리군이 위약-처리군보다 기준선과 비교하여 월 편두통 시간수의 더 큰 감소를 가졌다는 것을 분명히 보여준다.
또한, HIT-6 결과를 두 군 모두에 대하여 비교하였다. 언급된 바와 같이, 이 설문지는 빈번한/만성 편두통이 있는 개체의 편두통 상태를 평가하는 데 통용되는 것으로 확인된다. 도 18은 기준선, 치료 후 제4주, 치료 후 제8주 및 치료 후 제12주에 Ab6-처리군 및 위약군에 대하여 HIT-6 반응자 분석을 비교한 것이다. 각각의 시점의 결과는 Ab6-처리군이 위약군에 비해 HIT-6 스코어의 통계적으로 유의한 개선을 가졌다는 것을 입증해 주었는데, 즉, 제4주에 위약의 경우 30%와 비교하여 Ab6-처리군의 경우 54.4%이고(p=0.0023), 제8주에 위약의 경우 38.0%와 비교하여 Ab6-처리군의 경우 51.3%이고(p=0.1094), 제12주에 위약의 경우 33.3%와 비교하여 Ab6-처리군의 경우 61.1%(p=0.0007)였다. 도 19는 위약 및 Ab6 처리군에서 시간 경과에 따른 일부 있음 또는 거의 없음/전혀 없음의 HIG-6 스코어를 갖는 환자의 백분율을 나타낸다(통계적 유의성 표시).
또한, 도 20은 Ab6 투여 후 24주 기간에 걸친 1000 ㎎(㎎/㎖)의 단일 투여량으로 정맥내 투여된 Ab6에 대한 약동학(PK) 프로파일을 포함한다.
도 21은 Ab6의 단일 1000 ㎎ 정맥내 투여량에 대한 무혈장 약동학(PK) 매개변수 N(환자 수), 평균, 및 표준 편차(SD)를 포함한다. 표에 나타나 있는 매개변수 및 단위는 Cmax(㎍/㎖), AUC0-∞(㎎*hr/㎖), 반감기(일), Vz(ℓ) 및 CL(㎖/hr)이다.
제12주 내지 제24주의 환자 데이터에 대하여 추가 분석을 수행하였다. 처리군은 대조군에 비해 감소된 편두통 일수를 계속 나타냈지만, 차이 정도는 시간 경과에 따라 감소되었다. 추가로, 대조군은 기준선에서보다 더 적은 월 편두통 일수를 나타냈다. 이는 주어진 날에 환자들에게 편두통이 있었는지의 여부에 대한 질의에 확실한 응답을 한 결과여야 하는 편두통에 대한 추가 질의에 환자가 응답하는 데 시간과 노력을 들이지 않으려고 편두통이 실제로 발생한 날에 편두통을 보고하지 않았을 수 있는 "일지작성 피로(diary fatigue)"에 적어도 부분적으로 기인한 것으로 사료되었다.
연구 결과에 대한 추가 분석은 도 22 내지 도 33에 나타나 있다. 이들 결과는 Ab6(1000 ㎎ i.v.) 대 위약에 대한 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 변화(평균 +/- SEM)(도 22), 전체 분석 집단에 대한 시간 경과에 따른 평균 편두통 일수의 변화(+/- SD)(도 23)의 분석을 포함한다. 추가로, 제1주 내지 제4주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 24), 제1주 내지 제4주 동안 위약군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 25), 제5주 내지 제8주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 26), 제5주 내지 제8주 동안 위약군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 27), 9주 내지 12주 동안 Ab6 처리군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 28), 및 9주 내지 12주 동안 위약군에 대한 실제 편두통 일수 및 변화의 분포(도 29)가 나타나 있다.
반응자 비율 분석을 또한 수행하였다(도 30 내지 도 32). 이들 도면은 각각 Ab6 및 위약 처리군에 대한 50%, 75%, 및 100% 반응자 비율을 나타낸다. 편두통 빈도가 50% 이상 감소된 대상체는 50% 반응자인 것으로 간주되었다. 편두통 빈도가 75% 이상 감소된 대상체는 75% 반응자인 것으로 간주되었다. 마찬가지로, 편두통 빈도가 100% 감소된 대상체는 100% 반응자인 것으로 간주되었다.
도 22 및 도 30 내지 도 32에서, 관찰된 빈도를 완료율의 역수와 곱함으로써 21일 내지 27일 동안 e다이어리가 완료된 방문 간격에 정규화를 적용하였다.
편두통 중증도를 또한 분석하였다. 도 33은 전체 분석 집단에 대한 시간 경과에 따른 평균 편두통 중증도를 나타낸다. 사용된 척도에서, 3의 평균 편두통 스코어는 "증등도 통증"을 나타낸다.
도 34는 편두통 일수, 편두통 삽화수, 편두통 시간수, 평균 편두통 중증도, 두통 빈도, 및 HIT-6 스코어, MSQ(편두통 특정 삶의 질 설문지), RFP(역할 기능-방지), MSQ RFR(역할 기능-제한), 및 MSQ EF(정서적 기능)을 포함한 결과 척도의 기준선으로부터의 변화를 요약한 것이다.
실시예 3
만성 편두통 환자에서 항-CGRP 항체의 안전성 및 유효성을 평가하는 인간 임상 연구
본 실시예는 만성 편두통 방지에 대한 Ab6의 안전성 및 유효성을 평가하는 무작위 이중-맹검 위약-대조 임상 시험을 기재하는 것이다. 본 연구에서, 1,072명의 환자를 12주마다 1회 주입으로 투여되는 Ab6(300 ㎎ 또는 100 ㎎), 또는 위약을 받도록 무작위화하였다. 시험에 적격하기 위해, 환자는 적어도 월 15일 두통을 경험했어야 하며, 이 중 적어도 8일은 편두통에 대한 기준을 충족해야 한다. 시험에 참가한 환자는 기준선에서 평균 월 16.1일 편두통이 있었다. 연구 종점에는 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 평균 변화, 1일에 및 1일 내지 28일에 걸친 편두통 유병률 감소, 및 평균 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 적어도 50%, 75%, 및 100% 감소, 평균 월 급성 편두통-특이적 약제 일수의 기준선으로부터의 변화, 및 두통 영향 시험(HIT-6)에서 환자-보고 영향 스코어의 기준선으로부터의 감소가 포함되었다. 투여된 항체인 Ab6는 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201의 중쇄 폴리펩티드로 이루어진 항-CGRP 항체이다.
환자 특징은 위약, 100 ㎎의 항체, 또는 300 ㎎의 항체를 받은 환자별로 도 39에 요약되어 있다. 환자는 17.0년 내지 19.0년의 평균 편두통 진단 년수, 11.5년 내지 12.4년의 만성 편두통을 앓은 평균 지속기간을 가졌고, 환자의 44.3% 내지 45.2%가 적어도 하나의 예방 약제를 사용하였다. 기준선에서, 두 항체 처리군 모두는 평균 월 편두통 일수가 16.1인 반면, 위약군은 평균 월 편두통 일수가 16.2였다.
평균 월 편두통 일수의 기준선으로부터의 명시된 백분율(50%, 75%, 또는 100%) 감소는 월 편두통 일수의 주어진 백분율 감소를 나타낸 처리군 중 환자의 수 또는 백분율을 나타낸다. 예를 들어, 기준선에 월 16일 편두통을 나타내는 환자는 월 편두통 일수가 명시된 기간에 걸쳐 적어도 월 12일까지 감소된 경우 75% 반응자일 것이다.
결과는 도 35 내지 도 39에 나타나 있다. 도 35는 제1일, 제7일, 제14일, 제21일, 및 제28일에 300 ㎎, 100 ㎎, 및 위약 처리군에서 편두통이 있는 환자의 백분율을 나타낸다. 맨 윗선은 위약에 대한 결과를 나타내고, 맨 아랫선은 300 ㎎ 투여량에 대한 결과를 나타내고, 중간선은 100 ㎎ 투여량에 대한 결과를 나타낸다.
도 35에 나타낸 바와 같이, 제1일에 편두통 유병률의 백분율 감소는 300 ㎎ 투여량의 경우 52%, 100 ㎎ 투여량의 경우 50%, 및 위약의 경우 27%였다. 감소는 100 ㎎ 처리군과 300 ㎎ 처리군 둘 모두의 경우 위약군에 비해 통계적으로 유의했다.
도 36 내지 도 38은 제1개월 내에, 제1개월 내지 제3개월에 걸쳐(제1 주입 후), 및 제4개월 내지 제5개월에 걸쳐(제2 주입 후) 편두통 일수의 각각 50%, 75%, 및 100% 감소를 달성한 300 ㎎ 처리군과 100 ㎎ 처리군 환자의 백분율을 나타낸다. 각각의 그래프에서, 데이터 막대는 좌측에서 우측으로 100 ㎎, 300 ㎎, 및 위약군에 대한 결과를 나타낸다. 통계적 유의성은 나타낸 바와 같다. ++는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타내고; +는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타내고(비조정); §는 위약과의 통계적으로 유의한 차이를 나타낸다(사후).
실시예 4
만성 또는 삽화성 편두통 환자에서 항-CGRP 항체의 안전성 및 유효성을 평가하는 인간 임상 연구를 위한 기준선 하위군 분석
실시예 3에 기재된 만성 편두통의 연구에서, 섭취 시, 각각의 환자를 잠재적인 약제 남용 두통(MOH)에 대하여 평가하였다. MOH는 100 ㎎ 처리군에서 39.9%(139명의 환자), 300 ㎎ 처리군에서 42.0%(147명의 환자), 및 위약군에서 39.6%(145명의 환자)로 존재했다. 이러한 환자 서브세트에서 치료 결과의 평가는 항-CGRP 항체로의 치료가 MOH에 유효성이 있었다는 것을 지시하였다(도 41). 특히, 100 ㎎ 처리군에서, 평균 월 편두통 일수는 위약을 받은 MOH 환자와 비교하여 기준선에 MOH를 갖는 환자에서 -3.0일 변경되었다(95% CI, -4.56일에서 -1.52일로). 유사하게, 300 ㎎ 처리군에서, 평균 월 편두통 일수는 위약을 받은 MOH 환자와 비교하여 기준선에 MOH를 갖는 환자에서 -3.2일 변경되었다(95% CI, -4.66일에서 -1.78일로). 대조적으로, 기준선에 MOH가 없는 환자의 경우, 100 ㎎ 처리군에서, 평균 월 편두통 일수는 위약을 받은 기준선에 MOH가 없는 환자와 비교하여 -1.3일 변경되었다(95% CI, -2.43일에서 -0.16일로). 마찬가지로, 기준선에 MOH가 없는 환자의 경우, 300 ㎎ 처리군에서, 평균 월 편두통 일수는 위약을 받은 기준선에 MOH가 없는 환자와 비교하여 -2.1일 변경되었다(95% CI, -3.24일에서 -0.88일로). 17일 미만 또는 17일 이상의 평균 편두통 일수(MMD) 빈도를 갖는 환자, 진단 시 21세 이하 또는 21세 초과 연령의 환자, 15년 이하 또는 15년 초과의 편두통 지속기간을 갖는 환자, 전조증상이 동반된 편두통 또는 전조증상이 동반되지 않은 편두통을 앓고 있는 환자, 예방 약제 사용 이력이 있거나 예방 약제 사용 이력이 없는 환자, 병행 예방 약제를 사용한 또는 병행 예방 약제를 사용하지 않은 환자, 일수의 33% 이상 또는 일수의 33% 미만 트립탄 사용 환자에 대한 유효성을 포함하여, 다른 하위군에 대한 유효성이 또한 나타나 있다. 각각의 경우에, 각각의 하위군에 대한 유효성이 나타나 있다(도 41).
삽화성 편두통이 있는 환자의 또 다른 인간 임상 시험에서, 환자를 이중 맹검, 병렬 연구에서 Ab6 100 ㎎(n=221), 300 ㎎(n=222), 또는 위약(n=222)을 받도록 무작위화하였다. 28일 선별 기간 후, 환자에게 총 4회 주입으로 3개월마다 약물 또는 위약을 정맥내 투여하였다(도 40). 100 ㎎ 처리군과 300 ㎎ 처리군 둘 모두의 경우 1개월 내지 3개월에 걸쳐 유효성이 나타났고, 편두통 일수의 평균 변화는 위약군의 경우 -3.2일과 비교하여, 100 ㎎ 처리군의 경우 -3.9일 및 300 ㎎ 처리군의 경우 -4.3일이었다. 9일 이하 또는 9일 초과의 평균 편두통 일수(MMD) 빈도를 갖는 환자, 진단 시 21세 이하 또는 21세 초과 연령의 환자, 15년 이하 또는 15년 초과의 편두통 지속기간을 갖는 환자, 및 전조증상이 동반된 편두통 또는 전조증상이 동반되지 않은 편두통을 앓고 있는 환자에 대한 유효성을 포함하여, 환자 하위군에 대한 유효성이 또한 나타났다.
실시예 5
만성 및 삽화성 편두통 환자에서 약제 사용에 대한 Ab6 처리 효과
실시예 3에 기재된 만성 편두통 환자 및 실시예 4에 기재된 삽화성 편두통 환자의 연구 동안, 환자들은 또한 매일 e다이어리에 급성 약제의 사용을 기록하고, 본인의 재량으로 급성 약제 사용을 허용하였다. 편두통의 급성 약제는 에르고트, 트립탄, 및 진통제(예를 들어, NSAID, 오피오이드, 및 카페인-함유 병용 진통제)를 포함하였다.
추가 분석을 위해, 환자들을 28일 선별 기간(1일 내지 9일 또는 10일 이상; "기준선") 동안 급성 약제 사용의 일수로 계층화하였다. 급성 약제의 개별 유형에 대해 급성 약제 일수를 계산하고 더했는데, 이는 동일한 역일에 2개 이상 유형의 약제를 사용하는 경우 이들이 별개의 약제 사용 일수로 계수되었다는 것을 의미한다. 예를 들어, 환자가 동일한 날에 오피오이드 및 트립탄을 복용한 경우, 이는 급성 약제 사용 2일로 계수되었다. 이들 분석은 28일 기준선 선별 기간 동안 적어도 1일 급성 약제를 사용한 환자를 포함하였다.
28일 기준선 기간 동안 급성 약제를 사용한 만성 편두통과 삽화성 편두통 환자 둘 모두에서, Ab6 처리는 투여 후 이르면 제1개월에 월 편두통 일수 및 급성 약제 일수의 평균 감소를 위약보다 더 크게 야기하였고, 6개월에 걸쳐 2개 용량 간격으로 결과는 유사했다.
Ab6는 기준선 동안 1일 이상 급성 약제를 사용한 만성 편두통 환자에서 6개월의 치료에 걸쳐 평균 월 편두통 일수를 위약보다 더 크게 감소시킨 것으로 일관되게 입증하였다(도 42). 기준선 동안 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 만성 편두통 환자는 6개월의 전체 치료 기간에 걸쳐 이르면 치료 1개월 후에 급성 약제 사용을 위약보다 더 크게 감소시킨 것으로 입증되었다(도 43). 기준선 동안 1일 내지 9일 급성 약제를 복용한 만성 편두통 환자의 하위군에서, 급성 약제 사용 일수의 기준선으로부터의 변화는 6개월의 치료에 걸쳐 위약보다 300 ㎎ Ab6 군에서 더 컸다(도 44). 6개월의 전체 기간에 걸쳐 위약과 비교하여 둘 모두의 Ab6 처리군의 경우 기준선에 적어도 월 10일 약제를 사용한 환자에서 월 약제 일수의 분명한 감소가 관찰되었다. 도 45는 기준선에서 1일 이상, 1일 내지 9일, 및 10일 이상 급성 약제를 사용한 만성 편두통 환자의 하위군에서 제1개월 및 제6개월 약제 사용 일수의 변화를 나타낸다. 기준선에서 월 1일 내지 9일 사용한 환자에서 제6개월 Ab6 100 ㎎를 제외하고, Ab6는 급성 약제 사용을 감소시키는 데 위약보다 더 큰 치료 효과를 입증하였다.
유사하게, 6개월에 걸쳐 2개 용량 간격에 걸쳐, 기준선 동안 1일 이상 급성 약제를 사용한 삽화성 편두통 환자는 위약보다 Ab6에서 평균 월 편두통 일수의 더 큰 감소를 경험했다(도 46). 기준선 동안 적어도 월 1일 급성 약제를 사용한 삽화성 편두통 환자는 6개월의 전체 치료 기간에 걸쳐 이르면 치료 1개월 후에 위약보다 급성 약제 사용의 더 큰 감소를 입증하였다(도 47). 기준선 동안 1일 내지 9일 급성 약제을 복용한 삽화성 편두통 환자의 하위군에서, 급성 약제 사용 일수의 기준선으로부터의 변화는 6개월의 치료에 걸쳐 위약보다 Ab6에서 더 컸다(도 48). 샘플 크기가 작을수록 시간 경과에 따라 패턴을 덜 일관되게 만들 수 있지만, 기준선 동안 10일 이상 급성 약제을 복용한 환자의 하위군에서 유사한 패턴이 관찰되었다. 도 49는 기준선에서 1일 이상, 1일 내지 9일, 및 10일 이상 급성 약제을 사용한 삽화성 편두통 환자의 하위군에서 제1개월 및 제6개월 약제 사용 일수의 변화를 나타낸다. 기준선에 월 10일 이상 사용한 환자에서 제6개월 Ab6 100 ㎎을 제외하고, 급성 약제 사용의 감소는 위약보다 Ab6 처리군에서 더 컸다.
결과는 약제-남용 두통의 위험이 있는(월 10일 이상 급성 약제 사용) 삽화성 편두통과 만성 편두통 환자 둘 모두가 급성 약제 사용의 가장 큰 감소를 입증하였고, 이때 Ab6 처리가 일반적으로 위약보다 약제 사용 일수의 더 큰 감소를 야기한다는 것을 보여준다.
대상체의 10% 초과에서 가장 빈번하게 보고된 급성 두통 약제는 토마피린 N(44.5%)(파라세타몰, 아스피린, 및 카페인 조합), 이부프로펜(40.6%), 수마트립탄(33.6%), 파라세타몰(아세트아미노펜)(20.3%), 및 나프록센 소듐(10.2%)을 포함하였다. 대상체의 10% 초과에서 가장 빈번하게 보고된 방지용 두통 약제는 토피라메이트(12.5%)였다.
실시예 6
편두통의 급성 발병을 경험하는 대상체에서 항-CGRP 항체의 유효성
본 실시예는 편두통의 급성 치료에 대한 Ab6의 안전성 및 유효성을 평가하는 무작위, 이중-맹검, 위약-대조 임상 시험을 기재한다. 본 연구에서, 대략 450명의 환자를 100 ㎎ Ab6 또는 위약을 받도록 무작위화한다. 선별 기간(대략 1주 내지 8주) 동안 환자를 편두통 빈도 및 약제 사용 빈도에 대해 평가한다. 적격 환자는 선별 전 3개월 내에 월 약 4일 내지 15일의 편두통 일수의 편두통 발병 빈도를 갖는다. 병력에 따르면, 대상체의 전형적인 편두통 발병은, 치료하지 않는 경우, 중등도 내지 중증 강도의 두통 통증 및 오심, 눈부심, 또는 소리공포증의 가장 성가신 증상과 연관될 것이다. 대상체는 시험에 참가하기 위해 편두통 정성분석의 개시 전에 적어도 24시간 동안 두통이 없어야 한다. 치료 당일, 환자는 연구 장소로 이동할 것이며 100 ㎎ Ab6 또는 위약의 정맥내 주입을 발병 시작으로부터 약 1시간 내지 6시간에 시작할 것이다. 환자는 선별 전 6개월의 기간 내에 임의의 다른 모노클로날 항체(예를 들어, 임의의 CGRP 길항제 항체)를 수여받지 않았을 것이다.
공동-일차 종결점은 두통 통증 없음까지의 시간 및 가장 성가신 증상의 부재까지의 시간이다. 공동-핵심 이차 종결점은 제2시간의 두통 통증 없음 및 제2시간의 가장 성가신 증상의 부재이다. 이차 종결점은 두통 통증 경감까지의 시간, 24시간 및 48시간 동안 지속적인 두통 통증 없음을 포함하는 제2시간의 두통 통증 없음, 24시간경 및 48시간경 구제 약제의 사용, 제2시간의 눈부심 부재, 제2시간의 소리공포증 부재, 제2시간의 오심 부재, 제4주의 두통 영향 시험(HIT 6)에서 기준선으로부터의 변화, 및 제4주의 편두통 치료 최적화 설문지-6(mTOQ-6)에서 기준선으로부터의 변화이다. 탐색 종결점은 2시간 이외의 모든 시점에서의 두통 통증 부재, 2시간 이외의 모든 시점에서의 눈부심 부재, 2시간 이외의 모든 시점에서의 소리공포증 부재, 2시간 이외의 모든 시점에서의 오심 부재, 대상체가 제2시간에 두통 통증이 없을 때의 통증 재발, 제4주의 환자 전반적 변화 영향(PGIC), 및 다음 편두통까지의 시간이다. 두통 통증은 3이 중증, 2가 중등도, 1이 경증, 및 0이 통증 없음인 4-점 척도 상에서 수집한다. 통증 없음은 구제 약제의 부재 하에 통증 없음(0)이다(시험에서 구제 약제와 항체의 효과를 구별하기 위해, 구제 약제는 주입 완료 후 2시간 동안 사용되지 않지만, 정상 사용 과정에서는, 구제 약제가 선택적으로 사용될 수 있음을 주지한다; 구제 약제의 모든 사용이 데이터로 수집된다).
통계 분석은 통증 없음까지의 시간 및 가장 성가신 증상 부재까지의 시간, 및 각각의 다른 상기 언급된 종결점을 포함하여, Ab6 또는 위약을 수여받는 환자 간 종결점에서 차이의 유의성을 결정하기 위해 수행한다.
구제 약제의 사용은 편두통의 경감을 제공하기 위해 대상체에 제공되는 임의의 개입(의학적 또는 장치)을 나타낸다. 본 연구에서 상기 구제 약제의 효과와 항체의 효과를 구별하기 위해, 이는 연구 약물 투여의 완료 후 2시간보다 빠르게는 제공되지 않아야 하지만, 구제 약제가 금기되지는 않는다. 구제 약제 사용을 필요로 하는 대상체의 비율을 연구에서 요약한다. 급성 구제 약제에는 편두통 또는 편두통 연관 증상을 치료하기 위한 임의의 약제, 예를 들어, 트립탄, 진통제, 예컨대 비-오피오이드 또는 오피오이드/마약제, 아세트아미노펜, NSAID, 병용 약제, 예컨대 EXCEDRIN® 또는 EXCEDRIN MIGRAINE®, 항구토 약제, 에르고타민, 에르고트 유도체 등이 포함된다.
편두통-연관 증상(눈부심, 소리공포증 및 오심)의 부재는 대상체에 의해 보고되는, 각각의 상기 언급된 편두통-연관 증상의 부재 또는 존재를 나타낸다. 구제 약제의 투여 없이, 증상이 부재하는 대상체의 비율을 연구에서 요약한다.
두통 영향 시험(HIT-6)을 전체 스코어의 기준선으로부터의 변화로 평가하고 요약하며 연구에서 처리군 간에 비교한다.
편두통 치료 최적화 설문지-6(mTOQ-6)을 전체 스코어의 기준선으로부터의 변화로 평가하고 요약하며 연구에서 처리군 간에 비교한다.
두통 통증 경감까지의 시간을 대상체가 이의 통증 경감을 보고하는 주입 완료 후 제1 시점으로 평가하고, 이의 두통 통증이 구제 약제의 투여 없이 중등도 또는 중증(2 또는 3)으로부터 경증 또는 통증 없음(1 또는 0)으로 사라졌음을 의미한다.
통증 재발은 제2시간에 두통 통증이 없는(0) 환자에 대한 약물 투여의 48시간 내의 임의의 중증도의 두통 발생으로 평가한다. 임의의 중증도의 두통 통증의 재발을 갖는 대상체의 비율을 연구에서 요약한다.
연구는 Ab6이 급성 편두통 치료를 위해 효과적이고 안전함을 나타낸다.
실시예 7
중요 임상 연구에서 환자는 실시예 3에 기재된 바와 같이 100 ㎎ 또는 300 ㎎ 투여량으로 Ab6을 수여받았다. 통계 분석에서 제-1일(Ab6의 주입 후)의 포함은 치료 효과가 평가되는 경우 뚜렷한 치료 효과가 주입 후 즉각적으로 존재함을 나타낸다(도 50). 도면에서 제0일은 주입일로 정의되며 제-1일 데이터는 주입-전 상태를 나타낸다. 제-1일(기준선, 주입 전날)부터 제0일까지 편두통 백분율에서의 실질적 감소가 뚜렷하다. 또한, 효과의 크기는 100 ㎎ 투여량보다 300 ㎎ 투여량으로 더 크고, 둘 다 위약군에 비해 더 큰 효과를 나타낸다.
실시예 8
삽화성 군발성 두통을 갖는 환자에서 엡티네주맙의 유효성 및 안전성을 평가하기 위한 중재, 무작위, 이중 맹검, 병렬군, 위약 대조 지연 시작 연구.
임상 연구에서 본 발명의 발명자들은 삽화성 군발성 두통(eCH)을 갖는 환자에서의 엡티네주맙(Ab6)의 유효성을 평가하고 있다. 이 연구의 대상 집단은 IHS ICHD-3 분류에 기초하여 선별 방문 전에 eCH에 대한 증거가 문서화된 eCH를 갖는 환자로 정의된다. 이 연구는 2개의 초기 처리군: 엡티네주맙 400 ㎎ 또는 위약(1:1 비율) 중 하나에 무작위화 시스템을 통해 무작위로 배정된 약 300명의 환자를 포함한다. 선별 방문부터 안전성 추적 방문까지의 총 연구 지속기간은 대략 77주이며 선별 기간(대략 12개월/52주), 선별 기간 2(7일), 위약 대조 기간(4주), 활성 치료 기간(4주), 치료 후 관찰 기간(8주), 및 안전성 추적 기간(8주)을 포함한다.
환자는 적어도 한 번의 전형적인 군발성 두통 발병의 존재를 특징으로 하는 군발성 두통 발작(bout)의 시작을 경험한 후 가능한 빨리, 그리고 첫 번째 발병의 시작 후 늦어도 1주일 내에 선별 기간 2에 들어갈 것이다. 예외적인 상황 하에, 환자가 첫 번째 전형적인 군발성 두통 발병 후 두 번째 주 동안에만 선별 방문 2에 참석할 수 있을 때, 이 환자를 연구에 등록할 가능성이 조사자와 논의될 것이고 개별 환자의 전형적인 발작 지속기간에 대한 알려진 병력의 맥락에서 결정이 내려질 것이다.
적격 환자는 기준선 방문(제0일/방문 3) 시 45분(+15분)에 걸쳐 IV 주입으로 투여되는 엡티네주맙 400 ㎎ 또는 위약을 수여받도록 무작위로 배정될 것이다. 주입은 아침에 투여되는 것이 바람직하다. 모든 환자는 연구의 활성 치료 기간을 계속할 것이며 맹검처리된 방식으로 제4주(방문 6) 종료 시 45분(+15분)에 걸쳐 투여되는 두 번째 IMP 주입(엡티네주맙 400 ㎎ 또는 위약)을 수여받아, 이전에 엡티네주맙에 노출된 환자는 위약을 수여받고 위약으로 무작위화된 환자는 엡티네주맙 400 ㎎을 수여받을 것이다.
평가(또는 종결점)는 다음과 같은 반응의 측정을 포함할 것이다: 주당 발병 횟수(제1~2주)의 75% 감소; 급성기 치료법이 사용된 주당 횟수의 기준선으로부터의 변화(제1~4주). 16주 내에 군발성 두통 발작의 해소까지의 시간, 두 번째 주입 후 주당 급성기 약제(트립탄 및 O2)의 사용 및 16주 내에 주당 방지 약제의 발생률 및 유병률.

Claims (15)

  1. 군발성 두통 증상을 갖는 환자의 군발성 두통(예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통)을 치료하거나 군발성 두통(예컨대 만성 군발성 두통 또는 삽화성 군발성 두통)의 방지 치료를 필요로 하는 환자의 군발성 두통을 방지하는 방법으로서, 이를 필요로 하는 환자에게 각각 SEQ ID NO: 224; SEQ ID NO: 226; 및 SEQ ID NO: 228의 경쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열 및 각각 SEQ ID NO: 204; SEQ ID NO: 206; 및 잔기 GDI(2페이지, 표 A, 항목 번호 11 참조)의 중쇄 CDR 1, 2, 및 3 폴리펩티드 서열을 포함하는 400 mg의 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 환자가 투여 시 적어도 하나의 군발성 두통 증상을 나타내는, 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 환자가 타격 목록 A 내지 C에 따른 적어도 5회의 발병을 경험하는, 방법:
    A. (치료하지 않는 경우) 15분 내지 180분 지속되는 중증 또는 매우 중증의 편측성 안와, 안와상 및/또는 측두 통증
    B. 하기 중 1 및/또는 2:
    (1) 두통에 동측성인 하기 증상 또는 징후 중 적어도 하나:
    i. 결막 충혈 및/또는 눈물흘림
    ii. 비강 울혈 및/또는 비루
    iii. 눈꺼풀 부종
    iv. 이마 및 얼굴 발한
    v. 동공축소 및/또는 안검하수
    (2) 안절부절 못하거나 동요하는 느낌
    C. 격일 1회 내지 1일 8회의 빈도로 발생.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 적어도 3개월, 적어도 6개월, 적어도 9개월, 적어도 1년, 적어도 2년, 적어도 3년, 또는 3년 초과 동안 군발성 두통을 가졌거나 진단받았던, 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 하기 하나 이상의 기준에 따라 분류되는, 방법: 남성, 흡연자, 약 20세 내지 약 50세 연령, 군발성 두통의 가족력을 가짐, 약제, 예컨대 니트로글리세린 또는 심장병을 치료하기 위해 사용되는 다른 약물을 사용하고 있음, 신체의 생물학적 시계(시상하부)에 이상을 갖는 것으로 진단받았음, 군발성 두통이 전형적으로 유발인자, 예컨대 음식, 호르몬 변화 또는 스트레스와 연관되지 않음, 또는 군발 기간의 개시 시 알코올 사용이 더 많은 두통 또는 증가된 머리 통증을 악화시키거나 유발함.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 머리 통증을 경험하는, 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 군발성 두통 징후 또는 증상이 상기 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 경감되는, 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 상기 투여 후, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 더 이상 군발성 두통을 갖지 않는, 방법.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 221의 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 201 또는 SEQ ID NO: 566의 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 SEQ ID NO: 231에 의해 인코딩되는 경쇄 폴리펩티드 및 SEQ ID NO: 211 또는 SEQ ID NO: 567에 의해 인코딩되는 중쇄 폴리펩티드를 포함하는, 방법.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 군발성 두통 징후 또는 증상이 투여 후 즉각적으로, 예컨대 투여 후 첫째 날 내에, 투여 후 12시간 내에, 투여 후 6시간 내에, 투여 후 5시간 내에, 투여 후 4시간 내에, 투여 후 3시간 내에, 투여 후 2시간 내에, 또는 투여 후 1시간 내에, 투여 후 30분 내에, 또는 예컨대 투여 1시간 내지 6시간 후에 감소되거나 없어지는, 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 주입 완료 2시간 후 군발성 두통이 없는, 방법.
  13. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 10주 내지 14주마다, 바람직하게는 11주 내지 13주마다, 보다 바람직하게는 12주마다 400 ㎎의 상기 항-CGRP 항체를 정맥내 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-CGRP 항체가 히스티딘(L-히스티딘), 소르비톨, 폴리소르베이트 80, 및 물을 포함하거나 이로 이루어지는 제형에 포함되는, 방법.
  15. 제26항에 있어서, 상기 제형이, 1 ㎖ 부피 당, 100 ㎎의 항-CGRP 항체, 3.1 ㎎의 L-히스티딘, 40.5 ㎎의 소르비톨, 및 0.15 ㎎의 폴리소르베이트 80을 포함하거나 이로 이루어지거나, 상기 값의 +/- 10% 내인 양의 각각의 구성성분을 갖고, 5.8 또는 상기 값의 +/- 10% 내의 pH를 갖는, 방법.
KR1020247005340A 2021-08-27 2022-08-26 항-cgrp 항체를 사용한 군발성 두통의 치료 KR20240049275A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163237639P 2021-08-27 2021-08-27
US63/237,639 2021-08-27
PCT/IB2022/058002 WO2023026245A1 (en) 2021-08-27 2022-08-26 Treatment of cluster headache using anti-cgrp antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20240049275A true KR20240049275A (ko) 2024-04-16

Family

ID=83188745

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020247005340A KR20240049275A (ko) 2021-08-27 2022-08-26 항-cgrp 항체를 사용한 군발성 두통의 치료

Country Status (6)

Country Link
KR (1) KR20240049275A (ko)
CN (1) CN117813325A (ko)
AU (1) AU2022333323A1 (ko)
CA (1) CA3229059A1 (ko)
IL (1) IL310885A (ko)
WO (1) WO2023026245A1 (ko)

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
GB8725529D0 (en) 1987-10-30 1987-12-02 Delta Biotechnology Ltd Polypeptides
EP0401384B1 (en) 1988-12-22 1996-03-13 Kirin-Amgen, Inc. Chemically modified granulocyte colony stimulating factor
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5766883A (en) 1989-04-29 1998-06-16 Delta Biotechnology Limited Polypeptides
FR2650598B1 (fr) 1989-08-03 1994-06-03 Rhone Poulenc Sante Derives de l'albumine a fonction therapeutique
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
FR2669336B1 (fr) 1990-11-20 1993-01-22 Adir Nouveaux derives d'oxazolo pyridines, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
JP4124480B2 (ja) 1991-06-14 2008-07-23 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
FR2686899B1 (fr) 1992-01-31 1995-09-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
US5604260A (en) 1992-12-11 1997-02-18 Merck Frosst Canada Inc. 5-methanesulfonamido-1-indanones as an inhibitor of cyclooxygenase-2
US5409944A (en) 1993-03-12 1995-04-25 Merck Frosst Canada, Inc. Alkanesulfonamido-1-indanone derivatives as inhibitors of cyclooxygenase
WO1994021293A1 (en) 1993-03-19 1994-09-29 Duke University Method of treatment of tumors with an antibody binding to tenascin
US5474995A (en) 1993-06-24 1995-12-12 Merck Frosst Canada, Inc. Phenyl heterocycles as cox-2 inhibitors
US5436265A (en) 1993-11-12 1995-07-25 Merck Frosst Canada, Inc. 1-aroyl-3-indolyl alkanoic acids and derivatives thereof useful as anti-inflammatory agents
US5643575A (en) 1993-10-27 1997-07-01 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5475995A (en) 1994-05-16 1995-12-19 Livingston; George G. Truck spare tire locking rod
US5616601A (en) 1994-07-28 1997-04-01 Gd Searle & Co 1,2-aryl and heteroaryl substituted imidazolyl compounds for the treatment of inflammation
AU3272695A (en) 1994-08-12 1996-03-07 Immunomedics Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US5521213A (en) 1994-08-29 1996-05-28 Merck Frosst Canada, Inc. Diaryl bicyclic heterocycles as inhibitors of cyclooxygenase-2
US5593994A (en) 1994-09-29 1997-01-14 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Prostaglandin synthase inhibitors
US5552422A (en) 1995-01-11 1996-09-03 Merck Frosst Canada, Inc. Aryl substituted 5,5 fused aromatic nitrogen compounds as anti-inflammatory agents
US5639780A (en) 1995-05-22 1997-06-17 Merck Frosst Canada, Inc. N-benzyl indol-3-yl butanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors
US5510368A (en) 1995-05-22 1996-04-23 Merck Frosst Canada, Inc. N-benzyl-3-indoleacetic acids as antiinflammatory drugs
US5604253A (en) 1995-05-22 1997-02-18 Merck Frosst Canada, Inc. N-benzylindol-3-yl propanoic acid derivatives as cyclooxygenase inhibitors
US6653104B2 (en) 1996-10-17 2003-11-25 Immunomedics, Inc. Immunotoxins, comprising an internalizing antibody, directed against malignant and normal cells
US9056905B2 (en) 2007-05-21 2015-06-16 Alderbio Holdings Llc Antibodies to TNF-α and use thereof
HUE043782T2 (hu) 2007-05-21 2019-09-30 Alderbio Holdings Llc IL-6 elleni antitestek és alkalmazásuk
AR086515A1 (es) 2011-05-20 2013-12-18 Alderbio Holdings Llc Uso de anticuerpos o fragmentos de anticuerpos anti-cgrp o anti-cgrp-r para tratar o prevenir las formas cronicas y agudas de la diarrea
SI3495392T1 (sl) 2011-05-20 2021-11-30 H. Lundbeck A/S Sestavki proti CGRP in uporaba le-teh
CN107827982B (zh) 2011-05-20 2021-07-06 H.伦德贝克公司 抗cgrp抗体和抗体片段用于在有需要的受试者中预防或抑制畏光或厌光的用途
CA2916980C (en) 2013-07-03 2023-02-21 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Regulation of glucose metabolism using anti-cgrp antibodies
PE20211708A1 (es) * 2019-01-08 2021-09-01 H Lundbeck As Tratamiento de cefalea por uso excesivo de medicamentos usando anticuerpos anticgrp o anti-cgrp-r
JOP20210247A1 (ar) * 2019-05-02 2023-01-30 H Lundbeck As علاج الصداع باستخدام أجسام مضادة لـ cgrp
AU2020355233A1 (en) * 2019-09-25 2022-05-19 Allergan Pharmaceuticals International Limited Combination therapy with CGRP antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
CA3229059A1 (en) 2023-03-02
WO2023026245A1 (en) 2023-03-02
CN117813325A (zh) 2024-04-02
IL310885A (en) 2024-04-01
AU2022333323A1 (en) 2024-02-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11639381B2 (en) Treatment of headache using anti-CGRP antibodies
EP3498732B1 (en) Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
US20190276525A1 (en) Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
US20200216525A1 (en) Treatment of medication overuse headache using anti-cgrp or anti-cgrp-r antibodies
US20220251178A1 (en) Treatment of headache using anti-cgrp antibodieshereof
US20240101653A1 (en) Treatment of most bothersome symptom (mbs) associated with migraine using anti-cgrp antibodies
KR20240049275A (ko) 항-cgrp 항체를 사용한 군발성 두통의 치료
TWI839435B (zh) 使用抗cgrp 抗體急性治療和快速治療頭痛
EP4026845A1 (en) Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
NZ617448B2 (en) Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
EA040545B1 (ru) Анти-prlr антитела и их применение