KR20240029316A - 활막 표적화 화합물 및 이의 용도 - Google Patents

활막 표적화 화합물 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20240029316A
KR20240029316A KR1020220107613A KR20220107613A KR20240029316A KR 20240029316 A KR20240029316 A KR 20240029316A KR 1020220107613 A KR1020220107613 A KR 1020220107613A KR 20220107613 A KR20220107613 A KR 20220107613A KR 20240029316 A KR20240029316 A KR 20240029316A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
present
pharmaceutically acceptable
solvate
hydrate
Prior art date
Application number
KR1020220107613A
Other languages
English (en)
Inventor
김도경
김재훈
Original Assignee
경희대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 경희대학교 산학협력단 filed Critical 경희대학교 산학협력단
Priority to KR1020220107613A priority Critical patent/KR20240029316A/ko
Priority to PCT/KR2023/009907 priority patent/WO2024043523A1/ko
Publication of KR20240029316A publication Critical patent/KR20240029316A/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
    • A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 활막을 특이적으로 표적화하는 화합물 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따라 제조된 화합물은 in vitro 및 in vivo에서 독성을 나타내지 않고, 생물학적 환경에서 안정적이었으며, 활막 세포 및 생체 내 활막 부위를 특이적으로 표적화할 수 있으므로, 이를 약물 개발 및 의료 분야에 이용할 수 있으며, 활막 관련 질환의 진단 및 치료에 유용하게 활용될 수 있다.

Description

활막 표적화 화합물 및 이의 용도{synovium targeting compound and uses thereof}
본 발명은 활막을 특이적으로 표적화하는 화합물 및 이의 용도에 관한 것이다.
관절염은 관절 및 주변 조직에 영향을 미치는 상태에 대한 일반적인 용어이다. 관절은 무릎, 손목, 손가락, 발가락, 및 엉덩이와 같이, 뼈들이 함께 있는 신체 내에 위치한다. 관절염의 2가지 가장 일반적인 유형은 골관절염 및 류마티스 관절염이다. 골관절염(Osteoarthritis, OA)은 미국에서만 2천만명 이상의 개인에게 영향을 미치는 가장 일반적인 유형의 관절 질환이다. 이는 70세 이상의 노인에게서 만성 장애의 주된 원인이며, 미국에서 매년 1,850억 달러 이상을 소비한다. 이는 엉덩이, 무릎, 목, 등 아래, 또는 손의 작은 관절을 흔히 포함하는 고통스러운, 퇴행성 관절 질환이다. 골관절염은 특수한 업무를 수행하거나 좋아하는 운동을 하거나 과도한 체중를 지니고 다님으로써 반복된 과다사용으로 인해 손상되는 관절에서 일반적으로 진행된다. 골관절염은 활막 관절내 관절(유리질) 연골의 생화학적 파괴를 유발하는 퇴행성 장애로 고려될 수 있다. 그러나, 현재의 관점은 관절염이 관절 연골 뿐만 아니라 연하골 및 활막을 포함하는 전체 관절 기관을 포함하는 것도 유지하고 있다. 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis, RA)은 손가락, 엄지손가락, 손목, 팔꿈치, 어깨, 무릎, 발, 및 발목에서 다양한 관절을 일반적으로 포함하는 자가염증성 질환으로, 관절 주위를 둘러싸고 있는 활막이라는 조직의 염증 때문에 일어나며, 전체 인구의 약 1~2% 가량에서 발병하는 것으로 알려진 질환이다 (Alamanosa and Drosos, Autoimmun. Rev., 4:130-136 (2005)). 류마티스 관절염의 발병은 유전적-환경적 인자가 작용하며, 유전적인 요인이 대략 60% 정도 기여하는 것으로 알려져 있다. 또한, 관절 내 부위 또는 관절 주변 부위에만 영향을 미치는 다른 관절염 상태들과는 달리, 류마티스 관절염은 피부, 혈관, 심장, 폐 및 근육을 포함하는 신체에 걸쳐 관절 외 조직에서 염증을 야기할 수 있는 전신성 질환이다. 통풍은 활액 및 다른 조직 속에서 요산일나트륨 결정의 침착 및 신장에서 뇨산 결석의 형성으로부터 생성되는 질환이다. 통풍은 전형적으로 중년기 동안에 일어나며 30세 이전에는 일반적이지 않다. 여성은 폐경기 전에는 통풍 관절염 공격을 거의 받지 않는다.
활막 (활액 또는 활액막)(synovium)은 관절연골에 가장 근접해 있는 조직으로서 활막 연골종증 및 골연골 스퍼스와 같은 악성 상태에서 유리연골을 생성할 수 있는 유일한 조직이며, 연골손상 복구를 위하여 활막으로부터 세포들이 리크루팅된다는 보고가 있었다.
한편, 특정 부위를 표적화하는 방법에 대한 연구는 여러 질병의 정밀 치료 및 정밀 진단과 같은 의료 기술 개발과 함께 지속적으로 관심 받아온 분야이다. 특정 부위의 표적화하는 방법으로는 유전자 및 폴리에틸렌글리콜, 펩타이드 등과 같은 특정 물질을 이용하여 연구 개발되어지고 있다. 그 중에서 펩타이드를 이용한 표적화 방법은 낮은 면역원성, 저비용, 장기 보관 및 쉬운 취급과 같은 장점을 가지고 있어서 많은 각광을 받아온 분야이다 (Accardo, A., Tesauro, D., & Morelli, G. Polymer journal, 2013, 45(5), 481-493.).
활막 부위내에 약제학적으로 활성인 유효성분을 보유함으로써 약물이 장기간에 걸쳐 전달되도록 하는, 포유동물내 관절에 약제학적으로 활성인 유효성분을 전달하는 것이 당해 기술에서 여전히 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 활막을 표적화하는 물질을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 활막 표적화 약물 전달체를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 관절염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
아울러, 본 발명의 목적은 활막 조영제 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적의 달성을 위해, 본 발명은 활막을 표적화하는 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 물질에 약제학적 활성 성분이 접합된, 활막 표적화 약물 전달체를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 약물 전달체를 포함하는 관절염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 활막 조영제 조성물을 제공한다.
본 발명에 따라 제조된 화합물은 in vitro 및 in vivo에서 독성을 나타내지 않고, 생물학적 환경에서 안정적이었으며, 활막 세포 및 생체 내 활막 부위를 특이적으로 표적화할 수 있으므로, 이를 약물 개발 및 의료 분야에 이용할 수 있으며, 활막 관련 질환의 진단 및 치료에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 다양한 용매 조건 (증류수, 생리 식염수 및 세포 배양액)에서 본 발명의 DRL-TAM의 흡광 및 형광 방출 특성을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 다양한 pH 조건 (pH 3, 5, 7 및 9)에서 본 발명의 DRL-TAM의 흡광 및 형광 방출 특성을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 DRL-TAM의 광안정성을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 3 종류의 세포에서 1 내지 100 μM 농도의 DRL-TAM의 세포 독성을 확인한 결과를 나타낸 도이다:
b.End3: 마우스 뇌조직 유래 내피 세포;
HEK293: 인간 배아 신장 유래 상피 세포; 및
RSPC; 마우스 활막 유래 일차 세포.
도 5는 본 발명의 DRL-TAM (1 내지 100 μM)의 용혈 반응을 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 6은 본 발명의 DRL-TAM의 in vitro 활막 표적화 효과 및 시각과 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다:
b.End3: 마우스 뇌조직 유래 내피 세포;
HEK293: 인간 배아 신장 유래 상피 세포;
RSPC; 마우스 활막 유래 일차 세포;
a: 공초점 현미경 이미지;
b: DRL-TAM의 형광 세기; 및
c: CellMask Green 세포막 염색(CellMask Green plasma membrane stain)과 동일한 위치에서의 DRL-TAM의 형광 세기.
도 7은 DRL-TAM의 생체 내에서의 분포 과정을 확인한 이미지를 나타낸 도이다.
도 8은 DRL-TAM의 신체 장기 및 부위에서의 분포 과정을 확인한 이미지 및 그래프를 나타낸 도이다.
도 9는 활막을 특이적으로 시각화시킬 수 있는 본 발명의 DRL-TAM의 화학식을 나타낸 도이다.
이하, 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않으며 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기술된 것들과 유사하거나 등가인 임의의 방법 및 재료가 본 발명을 테스트하기 위한 실행에서 사용될 수 있지만, 바람직한 재료 및 방법이 본원에서 기술된다.
본 명세서 전반을 통하여, 천연적으로 존재하는 아미노산에 대한 통상의 1문자 및 3문자 코드가 사용될 뿐만 아니라 Aib(α-아미노이소부티르산), Sar(N-methylglycine) 등과 같은 다른 아미노산에 대해 일반적으로 허용되는 3문자 코드가 사용된다. 또한 본 발명에서 약어로 언급된 아미노산은 하기와 같이 IUPAC-IUB 명명법에 따라 기재되었다:
알라닌: A, 아르기닌: R, 아스파라긴: N, 아스파르트산: D, 시스테인: C, 글루탐산: E, 글루타민: Q, 글리신: G, 히스티딘: H, 이소류신: I, 류신: L, 리신: K, 메티오닌: M, 페닐알라닌: F, 프롤린: P, 세린: S, 트레오닌: T, 트립토판: W, 티로신: Y 및 발린: V.
일 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 1]
.
일 구현예에서, 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 활막 표적화용일 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 다양한 용매 조건 및 pH 조건, 및 빛 조사 조건에서 안정성이 높으며, 상기와 같은 다양한 조건에서도 농도에 비례하여 효능을 안정적으로 나타낼 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 세포 독성이 없고 생체 내에서 용혈 반응을 나타내지 않아 안전할 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디아이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 상기 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다. 또한, 이 혼합물에서 용매나 과량의 산을 증발시켜서 건조하거나 또는 석출된 염을 흡입 여과시켜 제조할 수도 있다. 또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이 때, 금속염으로는 나트륨, 칼륜 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
일 구현예에서, 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 표지 물질을 추가로 포함할 수 있으며, 표지 물질은 발색효소, 방사성동위원소, 크로모포어(chromophore), 발색 물질, 발광 물질, 형광 물질(fluorescer), 상자성 입자(superparamagnetic particles) 및 초상자성입자(ultrasuper paramagnetic particles)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있다.
일 구현예에서, 발색효소는 스트렙트아비딘(streptavidin)이 결합된 홀스래디시 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase; HRP), 알칼라인 포스파타아제(Alkaline phosphatase; AP), β-갈락토시다아제(galactosidase), 루시페라아제(luciferase), 아세틸콜린스테라제, 유레아제(urease), 카탈라아제(catalase), 아스파르기나아제(asparginase), 리보뉴클레아제(ribonuclease), 말레이트 데하이드로지나아제(malate dehydrogenase), 스타필로코칼 뉴클레아제(staphylococcal nuclease), 트리오스 포스페이트 이소머라아제(triose phosphate isomerase), 글루코오스산화효소, 사이토크롬 P450 및 퍼옥시다아제 화합물일 수 있다.
일 구현예에서, 형광 물질은 형광 단백질(fluorescent protein), 발광 단백질(photoprotein), 루시퍼라제(luciferase), 형광염료(fluorescent dye) 또는 시분해 형광입자 (Time-resolved Fluorescence, TRF)일 수 있으며, 형광 물질은 알렉사 플루오르 350, 405, 430, 488, 500, 514, 633, 647, 660, 680, 700, cy3, cy5, cy7, 루피(Rubpy)(tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(Ⅱ)), FITC(fluoresein Isothiocyanate), 로다민 6G(rhodamine 6G), 로다민 B(rhodamine B), TAMRA(5(6)-Carboxytetramethylrhodamine), 텍사스 레드(Texas Red), DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole) 및 쿠마린으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것이 더욱 바람직하고, TAMRA인 것이 가장 바람직하다.
일 구현예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 활막 표적화 조성물로 사용될 수 있으며, 표적화 조성물은 용매, 산, 염기, 및 버퍼 용액 중에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수 있다. 상기 표적화 조성물은 용매, 버퍼 용액 또는 이들의 혼합물에 전술한 화합물을 첨가하고, 여기에 산 또는 염기를 첨가하여 준비될 수 있다. 또한 상기 표적화 조성물은 당해 기술분야에서 사용할 수 있는 다른 첨가제를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 조성물이 포함하는 용매, 산, 염기, 및 버퍼 용액의 함량은 요구되는 성능에 따라 적절히 조절될 수 있다. 상기 용매는 물, 테트라하이드로퓨란(tetrahydrofuran, THF), 메탄올, 에탄올, HI 수용액, N,N-디메틸포름아미드 (N, N-dimethylformamide, DMF), 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 또는 상기 조성물은 다른 약물 및 화학 분자와의 조합을 포함할 수 있다. 해당 약물은 특정 부위에 효능을 가지는 약물을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 약물, 조영제 영양제, 형광체 등 화학 시료로 사용할 수 있는 것이라면 모두 가능하다.
일 구현예에서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 관절염 질환의 진단용 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 신체 내 특정 부분을 특이적으로 표적화할 수 있는 새로운 펩타이드를 개발하였으며 (실시예 1 참조), 이 신규 펩타이드는 DRL은 in vitro 및 in vivo에서 독성을 나타내지 않았으며, 생물학적 조성인 수용액(pH 7.4)과 세포 배양액에서 안정적으로 사용 가능하고, 약물 동태학적으로 마우스의 체내에서 짧은 시간 안에 분포되었으며 (10분 내지 20분), 특이적으로 활막 세포 또는 생체 내 활막 부위 (활막이 많이 존재하는 흉골, 척수, 다리뼈, 발 등)를 표적화할 수 있어, 세포 단위와 생체 단위 모두에서 작용 가능할 수 있음을 확인하였다.
본 발명에서 용어, "표적화"는 특정 세포 또는 생체 내 부위를 표적화하는 능력을 말하며, 물질의 체내 분포 시 특이적으로 해당 부분으로 전달되는 특성을 의미한다. 표적화 특성은 특정 생체 부분에 한하여 나타나는 특성으로 해당 부분을 제외한 나머지 부분과 비교하여 유의적으로 많은 양이 전달되는 특성을 의미할 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화학식 1의 화합물 (DRL 펩타이드)을 암호화하는 핵산, 상기 핵산을 포함하는 벡터 또는 상기 벡터를 포함하는 숙주세포에 관한 것이다.
일 구현예에서, 벡터는 플라스미드 벡터, 코즈미드 벡터, 박테리오 파아지 벡터 및 바이러스 벡터 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 적합한 벡터는 프로모터, 오퍼레이터, 개시코돈, 종결코돈, 폴리아데닐화 시그널 및 인핸서 같은 발현 조절 엘리먼트 외에도 막 표적화 또는 분비를 위한 시그널 서열 또는 리더 서열을 포함하며 목적에 따라 다양하게 제조될 수 있다. 벡터의 프로모터는 구성적 또는 유도성일 수 있다. 상기 시그널 서열에는 숙주가 에스케리치아 속(Escherichia sp.) 박테리아인 경우에는 PhoA 시그널 서열, OmpA 시그널 서열 등이, 숙주가 바실러스속(Bacillus sp.) 박테리아인 경우에는 α-아밀라아제 시그널 서열, 서브틸리신 시그널 서열 등이, 숙주가 효모(yeast)인 경우에는 MFα 시그널 서열, SUC2 시그널 서열 등이, 숙주가 동물세포인 경우에는 인슐린 시그널 서열, α-인터페론 시그널 서열, 항체 분자 시그널 서열 등을 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한 벡터는 벡터를 함유하는 숙주 세포를 선택하기 위한 선택 마커를 포함할 수 있고, 복제 가능한 벡터인 경우 복제 기원을 포함한다. 예를 들어, 상기 벡터는 "플라스미드"이며, 환형의 이중 가닥 DNA 루프를 지칭하는 것으로서, 여기에 예컨대, 표준 분자 클로닝 기법에 의해 추가적인 DNA 세그먼트가 삽입될 수 있다.
상기 벡터는 각각 전기천공법 (electroporation), 리포펙션, 바이러스 벡터, 나노파티클 (nanoparticles) 뿐만 아니라, PTD (Protein translocation domain) 융합 단백질 방법 등을 통해 생체 내 또는 세포 내로 전달될 수 있다.
본 발명에서 용어, "벡터"는 핵산서열을 복제할 수 있는 세포로의 도입을 위해서 핵산서열을 삽입할 수 있는 전달체를 의미한다. 핵산서열은 외생 (exogenous) 또는 이종 (heterologous)일 수 있다. 벡터로서는 플라스미드, 코스미드 및 바이러스(예를 들면 박테리오파지)를 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 당업자는 표준적인 재조합 기술에 의해 벡터를 구축할 수 있다(Maniatis, et al., Molecular Cloning , A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1988; 및 Ausubel et al., In: Current Protocols in Molecular Biology , John, Wiley & Sons, Inc, NY, 1994 등).
일 구현예에서, 상기 벡터의 제작 시, 상기 화학식 1의 화합물 (DRL 펩타이드)을 생산하고자 하는 숙주세포의 종류에 따라 프로모터(promoter), 종결자(terminator), 인핸서(enhancer) 등과 같은 발현조절 서열, 막 표적화 또는 분비를 위한 서열 등을 적절히 선택하고 목적에 따라 다양하게 조합할 수 있다.
일 구현예에서, 숙주세포는 에스케리치아 속(Escehreichia sp.), 살모넬라 속(Salmonellae sp.), 예르시니아 속(Yersinia sp.), 쉬겔라 속(Shigella sp.), 엔테로박터 속(Enterobacter sp.), 슈도모나스 속(Pseudomonas sp.), 프로테우스 속(Proteus sp.) 또는 클레브시엘라 속(Klebsiella sp.)의 박테리아일 수 있으며, 에스케리치아 속의 Escherichia coli인 것이 융합 단백질의 대량 생산에 더욱 바람직하다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화학식 1의 화합물 (DRL 펩타이드), 이의 유사체 또는 이의 변이체를 포함하는 융합단백질 또는 이를 암호화하는 핵산에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "융합단백질"은 둘 이상의 단백질 또는 단백질 내 특정 기능을 담당하는 도메인이 각각의 단백질 또는 도메인이 본연의 기능을 담당하도록 연결된 재조합 단백질(recombinant protein)을 의미한다. 상기 둘 이상의 단백질 또는 도메인 사이에는 통상적으로 유연한 구조를 갖는 링커 펩타이드(linker peptide)가 삽입될 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "펩타이드"는 아미노산 중합체로서, 천연 아미노산 뿐 아니라, 비단백질성 아미노산도 구성요소로 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용된, 용어 "변이체"는 기준 물질과 비교하였을 때 최소한 한개의 아미노산 차이(치환, 삽입 또는 결손)를 포함하는 대응하는 아미노산 서열을 말한다. 특정 구체예들에 있어서 "변이체"는 기준 서열과 비교하였을 때 높은 아미노산 서열 상동성(homology) 및/또는 보존적 아미노산 치환, 결손 및/또는 삽입을 가진다.
본 발명에서 사용된, 용어 "유사체"는 아미노산의 측쇄 또는 알파-아미노산 백본에 대하여 하나 이상의 다른 기능기로 치환된 유사체를 포함할 수 있다. 측쇄 또는 백본 개질화 펩타이드 유사체의 예로는 피롤리딘 고리가 하이드록시기로 치환된 하이드록시프롤린이나, N-메틸 글리신 "펩토이드"를 들 수 있으나, 이로 제한되지 않는다. 단백질 유사체의 종류에 대해서는 당업계에 공지되어 있다.
본 발명에 따른 펩타이드 변이체는 특정 아미노산 잔기 위치에서 아미노산 잔기가 보존적으로 치환된 변이체도 포함하는 의미로 해석된다.
본 발명에서 "보존적 치환"이란 1개 이상의 아미노산을 해당 펩타이드 변이체의 생물학적 또는 생화학적 기능의 손실을 야기하지 않는 유사한 생화학적 특성을 갖는 아미노산으로 치환하는 것을 포함하는 변이체의 변형을 의미한다. "보존적 아미노산 치환"은 아미노산 잔기를 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체시키는 치환이다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기 부류는 해당 기술분야에 규정되어 있으며, 잘 알려져 있다. 이들 부류는 염기성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 대전되지 않은 극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 글리신, 아스파라진, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비-극성 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지된 측쇄를 갖는 아미노산(예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄를 갖는 아미노산 (예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)을 포함한다.
본 발명에 따른 펩타이드 또는 이를 포함하는 융합단백질은 표준 합성 방법, 재조합 발현 시스템, 또는 임의의 다른 당해 분야의 방법에 의해 제조될 수 있다. 예컨대, 본 발명의 화학식 1의 DRL 펩타이드는 아스파틱산 및 아르기닌, 류신을 순차적으로 반응시켜 제조할 수 있다. 본 발명에 따른 펩타이드 또는 이를 포함하는 융합단백질은, 예를 들어 하기를 포함하는 방법을 포함하는 다수의 방법으로 합성될 수 있다:
(a) 단백질을 고체상 또는 액체상 방법의 수단으로 단계적으로 또는 단편 조립에 의해 합성하고, 최종 단백질 생성물을 분리 및 정제하는 방법; 또는
(b) 단백질을 인코딩하는 핵산 작제물을 숙주세포 내에서 발현시키고, 발현 생성물을 숙주 세포 배양물로부터 회수하는 방법; 또는
(c) 단백질을 인코딩하는 핵산 작제물의 무세포 시험관 내 발현을 수행하고, 발현 생성물을 회수하는 방법; 또는
(a), (b) 및 (c)의 임의의 조합으로 단백질 단편을 수득하고, 이어서 단편을 연결시켜 단백질을 수득하고, 당해 단백질을 회수하는 방법.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드 또는 이를 포함하는 융합단백질을 암호화하는 핵산 또는 상기 핵산을 포함하는 플라스미드 벡터에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 약제학적 활성 성분이 접합(conjugate)된, 활막 표적화 약물 전달체에 관한 것이다.
일 구현예에서, 약제학적 활성 성분은 RNA, DNA, 항체, 이펙터, 약물, 전구약물, 독소, 펩타이드 또는 전달 분자일 수 있다.
일 구현예에서, 약물은 펩타이드 약물, 단백질 약물, 탈감작화제, 항원, 비-스테로이드성 소염제, 소염 약물, 마취제, 항산화제, 항감염제, 화학치료제, 항-통각반응제, DMOAD, 동화작용제, 항-이화작용제, 자가소화작용 조절제, 항-파골세포-매개된 골 손실제, 기능식품제(nutraceutical agent), 진통제, 생물제제(biologics) 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 비-스테로이드성 소염제는 에토페나메이트, 셀레콕시브, 아프리콕시브, 로페콕시브, 나부메톤, 베노릴레이트, 에토리콕시브, 암피록시캄, 아미노페마존, 발데콕시브, 아세토미노펜, 부펙사막, 니메술리드, 파레콕시브, 메페남산, 덱시부프로펜, 이부프로펜, 플루르비프로펜, 아스피린, 덱스데토프로펜, 디클로페낙, 디플루니살, 에토돌락, 페노프로펜, 피로콕시브, 플루르비프로펜, 인도메타신, 케토프로펜, 케토록락, 로르녹시캄, 록소프로펜, 록소막, 루미라콕시브, 메클로페남산, 멜록시캄, 나프록센, 나프로신, 니말록스, 옥사포로진, 피록시캄, 살살레이트, 술린닥, 테녹시캄, 톨페남산, 로피비카인 또는 이의 혼합물일 수 있다.
일 구현예에서, 화학식 1의 DRL 펩타이드와 약제학적 활성 성분은 링커를 매개로 연결/결합될 수 있으며, 링커는 펩타이드나 리간드, 항체, 항체 단편 등의 단백질의 아민기(amine group), 카르복시기(carboxyl group) 또는 설프히드릴기(sulfhydryl group)나 압타머 등의 핵산의 인산기(phosphate group, 히드록시기(hydroxyl group)를 통해 결합할 수 있는 작용기를 가진 임의의 링커를 사용할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 링커는 약물에 따라 적절한 것을 선택하여 사용할 수 있다. 예컨대 약물에, 알데하이드 반응기를 가지는 링커를 연결하고 화학식 1의 DRL 펩타이드의 N 말단의 아미노기에 결합시킬 수 있다.
이러한 링커의 작용기는 아이소티오시아네이트(isothiocyanate), 아이소시아네이트(isocyanates), 아실 아자이드(acyl azide), NHS 에스터(NHS ester), 설포닐 클로라이드(sulfonyl chloride), 알데하이드(aldehyde), 글리옥살(glyoxal), 에폭사이드(epoxide), 옥시레인(oxirane), 칼보네이트(carbonate), 아릴 할라이드(arylhalide), 이미도에스터(imidoester), 카보이미드(carbodiimide), 안하이드라이드(anhydride), 플루오로페닐 에스터(fluorophenyl ester), 히드록시메틸포스핀(hydroxymethyl phosphine), 말레이미드(maleimide), 할로아세틸(haloacetyl), 피리딜디설파이드(pyridyldisulfide), 티오술포네이트(thiosulfonate), 또는 비닐술폰(vinylsulfone) 등일 수 있다. 링커는 프로테아제에 의해서 절단 가능하거나, 산이나 염기 조건에서 절단 가능하거나, 고온이나 광조사에 의해서 절단 가능하거나 또는 환원 또는 산화 조건에서 절단 가능한 링커일 수 있고, 또는 이러한 조건들에서 절단 가능하지 않은 링커일 수도 있다. 절단 가능한 링커로서는 예컨대 산성 조건에서 절단되는 히드라존(hydrazone) 링커, 프로테아제에 의해 절단되는 펩타이드 링커, 환원 조건에서 절단되는 디설파이드(disulfide) 작용기를 갖는 링커 등을 들 수 있고, 절단 가능하지 않은 링커로서는 MCC(Maleimidomethyl cyclohexane-1-carboxylate) 링커, MC(maleimidocaproyl) 링커, 또는 그 유도체로서 석신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)사이클로헥산-1-카르복실레이트(sMCC) 링커나 설포석신이미딜-4-(N-말레이미도메틸)사이클로헥산-1-카르복실레이트(sulfo-sMCC)를 들 수 있다. 또한 링커는 자가 희생 링커(self-immolative linker) 또는 절단 후 흔적을 남기지 않는 링커(traceless linker)일 수 있다. 자가 희생 링커는 예컨대 발명의 명칭이 "Hydrophilic self-immolative linkers and conjugates thereof "인 미국 특허 제9,089,614호에 개시된 링커, 명칭이 "SELF-IMMOLATIVE LINKERS CONTAINING MANDELIC ACID DERIVATIVES, DRUG-LIGAND CONJUGATES FOR TARGETED THERAPIES AND USES THEREOF"인 국제공개 제WO2015038426호에 개시된 링커를 들 수 있으며, 절단 후 흔적을 남기지 않는 링커로서는 페닐하이드라지드 링커, 아릴-트리아젠 링커, 문헌[Blaney, et al., "Traceless solid-phase organic synthesis," Chem Rev. 102: 2607-2024 (2002)]에 개시된 링커 등일 수 있다.
통상의 기술분야에서는 상기 예시한 바의 링커 이외에도 본 발명에 적용 가능한 수많은 링커가 상당한 수의 문헌을 통해 공지되어 있다. 그러한 문헌으로서 구체적으로 문헌[Castaneda, et al, "Acid-cleavable thiomaleamic acid linker for homogeneous antibodydrug conjugation," Chem Commun. 49: 8187-8189 (2013)], 문헌[Lyon, et al, "Self-hydrolyzing maleimides improve the stability and pharmacological properties of antibody-drug conjugates," Nat Biotechnol. 32(10):1059-1062 (2014)], 문헌[Dawson, et al "Synthesis of proteins by native chemical ligation," Science 1994, 266, 776-779], 문헌[Dawson, et al "Modulation of Reactivity in Native Chemical Ligation through the Use of Thiol Additives," J Am Chem Soc. 1997, 119, 4325-4329] 문헌[Hackeng, et al "Protein synthesis by native chemical ligation: Expanded scope by using straightforward methodology," Proc Natl Acad Sci USA 1999, 96, 10068-10073], 문헌[Wu, et al "Building complex glycopeptides: Development of a cysteine-free native chemical ligation protocol," Angew Chem Int Ed 2006, 45, 4116-4125], 문헌[Geiser et al "Automation of solid-phase peptide synthesis" in Macromolecular Sequencing and Synthesis, Alan R Liss, Inc, 1988, pp 199-218], 문헌[Fields, G and Noble, R (1990) "Solid phase peptide synthesis utilizing 9-fluoroenylmethoxycarbonyl amino acids", Int J Peptide Protein Res 35:161-214] 등이나, 미국 특허 제6,884,869호, 미국 특허 제7,498,298호, 미국 특허 제8,288,352호, 미국 특허 제8,609,105호, 미국 특허 제8,697,688호, 미국 특허공개 제2014/0127239호, 미국 특허공개 제2013/028919호, 미국 특허공개 제2014/286970호, 미국 특허공개 제2013/0309256호, 미국 특허공개 제2015/037360호, 미국 특허공개 제2014/0294851호, 국제 특허공개 WO2015057699, 국제 특허공개 WO2014080251, 국제 특허공개 제WO2014197854, 국제 특허공개 WO2014145090, 국제 특허공개 WO2014177042 등을 참조할 수 있다.
본 발명의 약물 전달체의 DRL 펩타이드와 약제학적 활성 성분은 생체 적합성 고분자를 매개로 또는 캐리어로 하여 결합될 수도 있다. 생체적합성 고분자는 생체조직 또는 혈액과 접촉하여 조직을 괴사시키거나 혈액을 응고시키지 않는 조직적합성(tissue compatibility) 및 항응혈성(blood compatibility)을 가지고 있는 고분자를 의미한다. 상기 생체적합성 고분자로서의 합성 중합체는 폴리에스테르, 폴리하이드 록시알카노에이트(PHAs), 폴리(α-하이드록시액시드), 폴리(β-하이드록시액시드), 폴리(3-하이드로식부티레이트-co-발러레이트; PHBV), 폴리(3-하이드록시프로프리오네이트; PHP), 폴리(3-하이드록시헥사노에이트; PHH), 폴리(4-하이드록시액시드), 폴리(4-하이드록시부티레이트), 폴리(4-하이드록시발러레이트), 폴리(4-하이드록시헥사노에이트), 폴리(에스테르아마이드), 폴리카프로락톤, 폴리락타이드, 폴리글리코라이드, 폴리(락타이드-co-글리코라이드; PLGA), 폴리디옥사논, 폴리오르토에스테르, 폴리언하이드라이드, 폴리(글리콜산-co-트리메틸렌카보네이트), 폴리포스포에스테르, 폴리포스포에스테르 우레탄, 폴리(아미노산), 폴리사이아노아크릴레이트, 폴리(트리메틸렌 카보네이트), 폴리(이미노카보네이트), 폴리(타이로신 카보네이트), 폴리카보네이트, 폴리(타이로신 아릴레이트), 폴리알킬렌 옥살레이트, 폴리포스파젠스, PHA-PEG, 에틸렌 비닐 알코올 코폴리머(EVOH), 폴리우레탄, 실리콘, 폴리에스테르, 폴리올레핀, 폴리이소부틸렌과 에틸렌-알파올레핀 공중합체, 스틸렌-이소브틸렌-스틸렌 트리블록 공중합체, 아크릴 중합체 및 공중합체, 비닐 할라이드 중합체 및 공중합체, 폴리비닐 클로라이드, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 메틸에테르, 폴리비닐리덴 할라이드, 폴리비닐리덴 플루오라이드, 폴리비닐리덴 클로라이드, 폴리플루오로알켄, 폴리퍼플루오로알켄, 폴리아크릴로니트릴, 폴리비닐 케톤, 폴리비닐 아로마틱스, 폴리스틸렌, 폴리비닐 에스테르, 폴리비닐 아세테이트, 에틸렌-메틸 메타크릴레이트 공중합체, 아크릴로니트릴-스틸렌 공중합체, ABS 수지와 에틸렌-비닐 아세테이트 공중합체, 폴리아마이드, 알키드 수지, 폴리옥시메틸렌, 폴리이미드, 폴리에테르, 폴리아크릴레이트, 폴리메타크릴레이트, 폴리아크릴산-co-말레산 또는 폴리아미노아민이며, 천연 중합체는 키토산, 덱스트란, 셀룰로오스, 헤파린, 히알루론산, 알기네이트, 이눌린, 녹말 또는 글리코겐이다.
본 발명의 활막 표적화 약물 전달체는 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형의 약제학적 조성물로 제조될 수 있다. 여기서 "약학적으로 허용가능한 담체"는 생물체를 자극하지 않고 투여 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용되는 약학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 활막 표적화 약물 전달체를 유효성분으로 함유하는 관절염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 관절염 질환은 활막염, 류마티스 관절염 (RA), 청소년 류마티스 관절염, 골관절염 (OA), 통풍, 가통풍(pseudogout), 척추관절염 (SpA), 건선성 관절염, 강직성 척추염, 폐혈성 관절염, 관절염, 청소년 특발성 관절염, 둔상(blunt trauma), 관절 교체 또는 스틸(Still) 질환일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 조성물은 표지 물질을 추가로 포함할 수 있으며, 이 경우 관절염 질환을 진단과 동시에 치료할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효성분으로서 토르세미드 및/또는 크로몰린, 또는 이의 염 외에 공지된 관절염 질환 치료제를 추가로 포함할 수 있고, 이들 질환의 치료를 위해 공지된 다른 치료와 병용될 수 있다.
본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 관절염 질환의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 본 발명의 조성물의 투여로 관절염 질환의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명에서 유효성분과 결합하여 사용된 "치료학적으로 유효한 양"이란 용어는 대상 질환을 예방 또는 치료하는데 유효한 양을 의미하며, 본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack Publishing Co.에 기술되어있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 관절염 질환의 종류, 관절염 질환의 발병 원인, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 약학적 조성물은 경구형 제형, 외용제, 좌제, 멸균 주사용액 및 분무제를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있으며, 경구형 또는 주사 제형이 더욱 바람직하다.
본 발명에서 사용되는 용어, "투여"란, 임의의 적절한 방법으로 개체 또는 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 주사 제형으로 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다. 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다. 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제, 피하 주사제, 피내주사제, 근육 주사제, 점적 주사제 등이다. 주사제는 생리식염액, 링겔액 등의 수성 용제, 식물유, 고급 지방산 에스테르(예, 올레인산에칠 등), 알코올 류(예, 에탄올, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 비수성 용제 등을 이용하여 제조할 수 있고, 변질 방지를 위한 안정화제(예, 아스코르빈산, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨, BHA, 토코페롤, EDTA 등), 유화제, pH 조절을 위한 완충제, 미생물 발육을 저지하기 위한 보존제 (예, 질산페닐수은, 치메로살, 염화벤잘코늄, 페놀, 크레솔, 벤질알코올 등) 등의 약학적 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 상기 관절염 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함한 모든 동물을 의미하고, 본 발명의 약학적 조성물을 개체에게 투여함으로써 상기 질환들을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 기존의 치료제와 병행하여 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 본 발명의 활막 표적화 약물 전달체를 유효성분으로 함유하는 활막 조영제 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 상기 조성물은 표지 물질을 추가로 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 조영제 조성물은 관절염 질환의 진단용으로 사용될 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 아스파틱산 및 아르기닌, 류신을 순차적으로 반응시키는 단계를 포함하는, 하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 관한 것이다:
[화학식 1]
.
일 구현예에서, 상기 제조방법은 N,N-디메틸포름아미드에 아스파틱산과 아르기닌을 첨가하여 1차 반응시키는 단계; 및 N,N-디메틸포름아미드를 추가하여 류신을 2차 반응시켜 펩타이드를 형성시키는 단계를 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 펩타이드를 형성시키는 단계 이후에 반응시킨 물질을 회수하여 건조 및 농축하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 건조 및 농축하는 단계 이후에 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 정제하는 과정을 추가로 포함할 수 있다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 표적화 기능을 가진 화합물의 합성 및 정제
활막(synovium) 표적능을 가지는 화합물을 개발하기 위해, N,N-디메틸포름아미드에 Fmoc로 아민기를 보호한 아스파틱산, 아르기닌 및 염 (HOBT, HBTU 및 DIPEA)을 2시간 동안 반응시켜 1차 반응물을 형성하고, 1차 반응으로 합성된 물질에 동일한 방법으로 류신을 첨가하여 2차 반응으로 화합물을 형성하였다. 형성된 화합물에서 Fmoc를 제거하기 위해 20 % 피페리딘(piperidine)을 N,N-디메틸포름아미드에서 10분간 반응시켜 활막을 표적화하는 화합물로서 DRL(D; aspartic acid, R; arginine, L; leucine)의 아미노산 서열 (서열번호 1)로 이루어진 화학식 1의 디알엘 트리펩타이드 (DRL tripeptide) (표 1)를 형성하였다. 본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)의 효능을 확인하기 위해, 상기 화합물 (DRL 펩타이드), 라이신이 접합된 탐라(5-Carboxytetramethylrhodamine, TAMRA) 및 디이소프로필에틸아민(diisopropylethylamine)을 N,N-디메틸포름아미드에 넣고 하룻밤 동안 반응시켜 DRL 펩타이드에 표지 물질로서 탐라를 접합한 DRL-TAM (화학식 2)을 제조하였다. 형성된 물질을 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 분리 및 정제하였다.
펩타이드 이름 서열 (아미노에서 카르복시 방향) 서열번호
DRL DRL 1
실시예 2. DRL 펩타이드의 안정성 확인
본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)의 안정성을 확인하기 위해, 상기 실시예 1에서 제조한 DRL-TAM이 다양한 용매 조건, 다양한 pH 조건에서 안정적으로 여러 조건에서 유지되는지를 흡광 및 형광 방출 그래프를 측정함으로써 형광 안정성을 확인하였다. 구체적으로, 세포 및 생체의 사용시 안정적인지 확인하기 위해, 증류수 (DI.H2O), 생리 식염수 (pH 7.4) 및 세포 배양액 (DMEM media)의 조건하에서 DRL-TAM (10μM)의 흡광 및 형광 방출을 확인하였다. 또한, 다양한 pH에서의 안정성을 확인하기 위해, pH 3, 5, 7, 9 조건하에서 DRL-TAM (10μM)의 흡광 및 형광 방출을 확인하였다. 아울러, 빛 조사에 따른 DRL-TAM (10 μM)의 광안정성을 확인하기 위해, 530 nm 파장의 빛(50 mW/cm2 )을 60분 동안 조사하였고, 10분 간격으로 형광 세기를 확인하였다. 이 때, 흡광 스펙트럼(UV/Vis absorption spectra) 분석을 위해서는 UV/Vis 분광광도계(Agilent Technologies Cary 8454, USA)을 사용하였으며, 형광 스펙트럼(fluorescence spectra) 분석을 위해서는 형광 광도계(SHIMADZU CORP. RF-6000, Japan)을 사용하였고, 각 기기에 본 화합물을 넣어주는 셀(cell)은 1 cm 두께의 표준 석영 셀(standard quartz cell, internal volume=0.1 cm)을 이용하였다.
그 결과, 세포 및 생체 조건에서, 흡광 스펙트럼은 모든 용액에서 554 nm에서 증가하고, 형광 방출 스펙트럼은 580 nm에서 600 nm 사이에서 증가하는 것으로 나타나 (도 1), 세포 및 생체의 사용에 있어 충분히 강한 형광 세기를 보이는 것이 확인되었다. 또한, 다양한 pH 조건에서, 흡광 스펙트럼은 모든 용액에서 550 nm에서 560 nm 사이에서 증가하고, 형광 방출 스펙트럼은 583 nm에서 증가하는 것으로 나타나 (도 2), 여러 생체 내의 조건에서 활용 가능한 강한 형광 세기를 보이는 것이 확인되었다. 아울러, 빛 조사시 60분 동안 거의 형광 세기가 거의 변화하지 않는 것으로 나타나 (도 3), 높은 광안정성을 보이는 것이 확인되었다.
실시예 3. DRL 펩타이드의 독성 분석
3-1. 세포 독성 확인
본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)이 세포에 적용하기에 안전한지 확인하기 위해 DRL-TAM을 이용하여 세포 독성 반응을 확인하였다. 구체적으로, 마우스 활막 유래 일차 세포와 대조군으로 마우스 뇌조직 유래 내피 세포 및 인간 배아 신장 유래 상피 세포에 DRL-TAM을 1 내지 100 μM 농도로 24시간 동안 처리하고, Cell Counting Kit-8 (Dojindo)를 이용하여 흡광값으로 세포 생존률을 측정하였다.
그 결과, 마우스 활막 유래 일차 세포 및 마우스의 뇌조직 유래 내피 세포, 인간 배아 신장 유래 상피 세포 모두에서 DRL-TAM (1-100 μM)가 유의미한 독성을 나타내지 않는 것으로 나타났다 (도 4).
3-2. 생체 내 독성 확인
본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)이 생체 내 사용에 있어 독성 반응을 나타내는지 확인하기 위해, DRL-TAM을 이용하여 마우스의 혈액에서의 용혈 반응을 확인하였다. 구체적으로, 마취된 마우스의 심장으로부터 바로 채혈한 혈액을 항응고 처리를 한 후 원심분리기 (4 ℃, 1300rpm, 3분)를 이용하여 생리 식염수로 2번 혈장을 세척하여 적혈구만을 순수하게 분리하였다. 정제된 적혈구 (8 %)에 DRL-TAM을 1-100 μM 농도로 1시간 동안 처리하였으며, 용혈 반응이 외부 요소에 의한 것이 아님을 입증하기 위하여 대조군으로써 생리 식염수 및 계면 활성제인 Triton X-100을 사용하였다. 이후 원심분리기 (4 ℃, 3000 rpm, 3분)를 이용하여 상층액을 분리하였고, 각 군에서 DRL-TAM과 대조군 처리 후 원심분리 전 및 후의 450 nm 여기파장에서 흡광도를 측정하여 용혈 반응을 그래프화하였다.
그 결과, 생리 식염수를 처리한 군과 DRL-TAM을 처리한 군 사이에서는 유의미한 차이가 관찰되지 않았으며, 계면 활성제를 처리한 군과 대비하여 나머지 모든 군에서 유의미한 차이가 관찰되었다 (도 5). 이를 통해, DRL 펩타이드가 생체 내에서 용혈 반응을 일으키지 않는 것을 확인하였다.
실시예 4. DRL 펩타이드의 활막 표적화 효능 및 시각화 특성 확인
4-1. 세포 수준에서의 활막 표적화 효능 및 시각화 특성
본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)의 세포 내에서의 표적화 효능 및 시각화 특성을 확인하기 위해, 활막 유래 일차 세포와 대조군으로써 마우스의 뇌조직 유래 내피 세포 및 인간 배아 신장 유래 상피 세포에 DRL-TAM (10 μM)을 24시간 동안 처리한 뒤 제거하고, 세포 소기관인 핵과 세포막을 구별하기 위하여 DAPI(4',6-diamidino-2-phenylindole) 및 CellMask Green plasma membrane stain를 각각 2 μL씩 20 분 동안 처리하였다. 이 후, 4 % 포름알데하이드(formaldehyde)를 6 분 동안 처리하여 공초점 현미경 (LSM-800, Carl Zeiss, Germany)으로 세포의 이미지를 확인하고, DRL-TAM의 형광 세기를 각 세포에서 비교 분석하였다.
그 결과, 대조군으로 사용한 두 세포에서보다 활막 유래 일차 세포에서 DRL-TAM이 현저히 높은 형광 세기를 나타냈으며, DRL-TAM이 세포막을 염색하는 CellMask Green plasma membrane stain과 동일한 위치에서 형광 세기를 나타내, 마우스의 활막 유래 세포의 세포막에 존재하는 것을 명확히 나타냈으므로 (도 6), DRL-TAM이 활막 표적화 효과를 가지고 이를 시각화할 수 있음을 확인하였다.
4-2. 생체 내 활막 표적화 효능 및 시각화 특성
본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)의 생체 내에서의 표적화 효능 및 시각화 특성을 확인하기 위해, DRM-TAM과 대조군으로써 탐라와 구조적 유사체인 로다민 B(rhodamine B)를 6주령의 마우스에 각각 5 mg/kg 농도로 미주 정맥 투여하고, 시간에 따른 물질의 생체 분포 과정을 형광 추적을 통하여 확인하였다. 또한, DRL-TAM의 생체 내 형광 세기가 가장 높은 시간인 투여 10분 후에 마우스를 희생시켜 신체 장기 및 부위를 적출하여 각각의 형광 세기를 대조군인 로다민 B와 비교 분석하였다.
시간에 따른 물질의 생체 분포 과정을 추적한 결과, 미주 정맥 투여 10분 후, DRL-TAM을 투여한 군에서 가장 높은 형광 세기를 보이는 것으로 나타났으며 (도 7), 이는 생체 내에서 DRL-TAM이 10분 동안 가장 많이 분포하는 것을 의미한다. 또한, 적출한 마우스의 신체 장기 및 부위에서 활막이 존재한다고 알려져 있는 부위와 활막이 존재하지 않는 부위를 나누어 형광 이미지를 확인한 결과, 활막이 존재하는 부위에 대조군인 로다민 B에 대비하여 DRL-TAM이 유의적으로 높은 복사 효율을 가지는 것으로 나타났으며. 반면에 활막이 존재하지 않는 부위의 복사 효율은 대조군인 로다민 B가 DRL-TAM보다 높게 나타났다 (도 8).
이를 통해, 본 발명의 화합물 (DRL 펩타이드)이 생체 내 특정 부위에 대해 특이적인 표적화 효능을 보이며, 이를 이용한 신체 특정 부위들을 시각화할 수 있음을 확인하였다.
상기 진술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (14)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    .
  2. 제 1항에 있어서, 활막을 특이적으로 표적화하기 위한, 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제 1항에 있어서, 표지 물질을 추가로 포함하는, 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  4. 제 3항에 있어서, 표지 물질은 발색효소, 방사성동위원소, 크로모포어(chromophore), 발색 물질, 발광 물질, 형광 물질(fluorescer), 상자성 입자(superparamagnetic particles) 및 초상자성입자(ultrasuper paramagnetic particles)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인, 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 제 4항에 있어서, 형광 물질은 형광 단백질(fluorescent protein), 발광 단백질(photoprotein), 루시퍼라제(luciferase), 형광염료(fluorescent dye) 또는 시분해 형광입자 (Time-resolved Fluorescence, TRF)인, 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  6. 제 4항에 있어서, 형광 물질은 알렉사 플루오르 350, 405, 430, 488, 500, 514, 633, 647, 660, 680, 700, cy3, cy5, cy7, 루피(Rubpy)(tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(Ⅱ)), FITC(fluoresein Isothiocyanate), 로다민 6G(rhodamine 6G), 로다민 B(rhodamine B), TAMRA(5(6)-Carboxytetramethylrhodamine), 텍사스 레드(Texas Red), DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole) 및 쿠마린으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인, 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  7. 제 1항의 화합물을 암호화하는 핵산.
  8. 제 7항의 핵산을 포함하는 벡터.
  9. 제 1항의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 약제학적 활성 성분이 접합(conjugate)된, 활막 표적화 약물 전달체.
  10. 제 9항에 있어서, 약제학적 활성 성분은 RNA, DNA, 항체, 이펙터, 약물, 전구약물, 독소, 펩타이드 또는 전달 분자인, 활막 표적화 약물 전달체.
  11. 제 10항에 있어서, 약물은 펩타이드 약물, 단백질 약물, 탈감작화제, 항원, 비-스테로이드성 소염제, 소염 약물, 마취제, 항산화제, 항감염제, 화학치료제, 항-통각반응제, DMOAD, 동화작용제, 항-이화작용제, 자가소화작용 조절제, 항-파골세포-매개된 골 손실제, 기능식품제(nutraceutical agent), 진통제, 생물제제(biologics) 또는 이들의 혼합물인, 활막 표적화 약물 전달체.
  12. 제 9항의 활막 표적화 약물 전달체를 유효성분으로 함유하는 관절염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  13. 제 12항에 있어서, 관절염 질환은 활막염, 류마티스 관절염 (RA), 청소년 류마티스 관절염, 골관절염 (OA), 통풍, 가통풍(pseudogout), 척추관절염 (SpA), 건선성 관절염, 강직성 척추염, 폐혈성 관절염, 관절염, 청소년 특발성 관절염, 둔상(blunt trauma), 관절 교체 또는 스틸(Still) 질환인, 관절염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  14. 제 1항의 화합물, 이의 수화물, 이의 용매화물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 제 9항의 활막 표적화 약물 전달체를 유효성분으로 함유하는 활막 조영제 조성물.





KR1020220107613A 2022-08-26 2022-08-26 활막 표적화 화합물 및 이의 용도 KR20240029316A (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220107613A KR20240029316A (ko) 2022-08-26 2022-08-26 활막 표적화 화합물 및 이의 용도
PCT/KR2023/009907 WO2024043523A1 (ko) 2022-08-26 2023-07-12 활막 표적화 화합물 및 이의 용도

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220107613A KR20240029316A (ko) 2022-08-26 2022-08-26 활막 표적화 화합물 및 이의 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20240029316A true KR20240029316A (ko) 2024-03-05

Family

ID=90013685

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220107613A KR20240029316A (ko) 2022-08-26 2022-08-26 활막 표적화 화합물 및 이의 용도

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR20240029316A (ko)
WO (1) WO2024043523A1 (ko)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003020751A2 (en) * 2001-09-05 2003-03-13 King's College London Homing peptides
EP1374907A3 (en) * 2002-06-24 2004-01-07 Ghanem Elias c/o Institut Jules Bordet Ghanem Drug transport and delivery system
EP4061427A4 (en) * 2019-11-22 2024-01-10 The Children's Hospital of Philadelphia ADENO-ASSOCIATED VIRUS VECTOR VARIANTS
WO2021113434A1 (en) * 2019-12-03 2021-06-10 Rodan & Fields, Llc Peptides and compositions for inhibiting hair growth
KR102351515B1 (ko) * 2019-12-17 2022-01-14 (주)수파드엘릭사 아릴 탄화수소 수용체의 활성을 억제하는 폡타이드 및 이를 이용하는 화장료 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
WO2024043523A1 (ko) 2024-02-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8957016B2 (en) Tumor activated prodrugs
EP0407122B1 (en) Novel modified PF4 compositions and methods of use
AU715632B2 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
JP2007501866A (ja) 胃腸疾患の治療のための方法および組成物
US20070292404A1 (en) Antimicrobial polymer conjugates
AU726434B2 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
JP6854759B2 (ja) 腫瘍微環境によって特異的活性化する小分子標的結合体およびその使用
US20060148718A1 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
JP2002531050A (ja) 抗メチオニンおよび抗ホモシステイン化学療法におけるメチオニナーゼの使用
CA2633636A1 (en) Photoactivatable antimicrobial agents
KR102035407B1 (ko) 자가 면역 및 염증성 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 짧은 합성 펩타이드
US6174858B1 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
JPH06509116A (ja) 修正されたｐｆ４組成物及び使用方法
JP2000506494A (ja) 良性前立腺過形成の治療に有用な複合体
Fu et al. Three rounds of stability-guided optimization and systematical evaluation of oncolytic peptide LTX-315
KR20240029316A (ko) 활막 표적화 화합물 및 이의 용도
US20180296652A1 (en) Formulations of pegylated arginine deiminase
KR101751501B1 (ko) 리피바디-단백질 독소 복합체, 그 제조방법 및 용도
WO2021156504A1 (en) Treatment of panx1 associates diseases
JP6758022B2 (ja) 血管内皮細胞増殖因子受容体阻害ペプチド
US11208443B2 (en) NAF-1 derived peptides and uses thereof
CA3222510A1 (en) Ghr-binding pending peptide and composition comprising same
KR20180007529A (ko) 분해가능 연결자를 포함하는 광증감제-펩타이드 결합체 및 그를 포함하는 광역학 진단 또는 치료용 조성물
JP5940542B2 (ja) 細胞導入ペプチドと皮膚導入促進剤とを組み合わせた皮膚導入システムおよび美白剤