KR20230151335A - 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물 - Google Patents

레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20230151335A
KR20230151335A KR1020220050911A KR20220050911A KR20230151335A KR 20230151335 A KR20230151335 A KR 20230151335A KR 1020220050911 A KR1020220050911 A KR 1020220050911A KR 20220050911 A KR20220050911 A KR 20220050911A KR 20230151335 A KR20230151335 A KR 20230151335A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
retinol
booster
skin
base
wrinkles
Prior art date
Application number
KR1020220050911A
Other languages
English (en)
Inventor
이선주
김미나
전승현
이서경
Original Assignee
주식회사 엘지생활건강
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 엘지생활건강 filed Critical 주식회사 엘지생활건강
Priority to KR1020220050911A priority Critical patent/KR20230151335A/ko
Priority to PCT/KR2023/005433 priority patent/WO2023211061A1/ko
Publication of KR20230151335A publication Critical patent/KR20230151335A/ko
Priority to KR1020240122445A priority patent/KR20240136918A/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/31—Hydrocarbons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/63—Steroids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/671—Vitamin A; Derivatives thereof, e.g. ester of vitamin A acid, ester of retinol, retinol, retinal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 레티놀 및 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물 및 피부 주름 정도와 연관유의성을 갖는 유전자 다형성 마커의 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계를 포함하는 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 정보제공방법에 관한 것이다.

Description

레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물{Composition for wrinkle improvement comprising a retinol booster as an active ingredient}
본 발명은 레티놀 및 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물 및 피부 주름 정도와 연관유의성을 갖는 유전자 다형성 마커의 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계를 포함하는 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 정보제공방법에 관한 것이다.
피부는 신체에서 가장 바깥 부분을 덮고 있는 조직으로, 항상 외부 환경과 접하며 유해 요인들로부터 인체를 보호하는 기능을 가짐과 동시에 눈에 보이기 때문에 미적인 부분도 담당하고 있는 중요한 부분이다. 피부에 주름, 색소 침착 등의 노화 징후가 축적되면 미적인 가치가 감소하기 때문에 이러한 징후들을 예방 혹은 개선해줄 수 있는 솔루션에 대한 소비자 니즈는 항상 존재해왔다. 특히 피부 주름은 나이를 판단하는 가장 대표적인 지표로 여겨지기 때문에 동안 피부를 원하는 여성들에게 주름 개선 화장품은 필수 아이템으로 자리잡게 되었다.
레티놀은 현존하는 주름 개선 원료 중 가장 우수한 효능이 기대되는 원료이지만, 자극 반응, 레티놀에 대한 반응성 낮음 등의 문제로 기대하는 만큼의 주름 개선량을 얻지 못하는 소비자도 존재한다. 또한 레티놀 반응성이 높아 효과적인 주름 개선이 기대되는 소비자라도 본인이 이를 인지하지 못하면 자극 등이 동반되는 적응기간을 버티지 못하고 사용을 중단함으로써 기대 효과를 얻지 못하기도 한다. 이처럼 효능에 대한 개체차는 피부 개선 제품에 대한 체감 효능 및 만족도를 저해하는 큰 장애물이 되고 있다(한국공개특허 제10-2009-0122770호).
현재 매우 다양한 유전자 다형성 마커가 밝혀지고 있으나, 피부색이나 미백, 수분, 자외선 등과 관련이 있는 마커가 대부분이며 기작 연구가 동반된 경우는 흔하지 않은 실정이다. 특히 주름 관련 다형성 마커는 기작이 연구된 경우나 이에 대한 맞춤형 소재가 개발된 경우가 거의 없다고 볼 수 있다.
이러한 배경 하에 본 발명자들은 유전정보와 피부타입 정보의 빅데이터 구축을 통한 한국인 피부 특성 분류체계를 구축하고자 하였으며, 개체의 피부 특성을 결정하는 유전적 특징을 파악하여 과학적 피부 분류 기준을 구축하고, 이를 근거로 한 개인 맞춤형 유효성분을 개발하여, 다양한 제품 세분화를 통해 피부 특성별 맞춤형 화장품 개발에 기여하고자 예의 노력한 결과, 피부 주름과 유의적 상관관계를 갖는 특정 단일염기다형성 (SNP) 마커를 선별하고 유전정보를 바탕으로 주름 개선에 도움을 줄 수 있는 개인 맞춤형 레티놀 부스터를 제공할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 레티놀 및 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 화장품 조성물, 또는 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 하나의 목적은 피부 주름 정도 연관 유의성 단일염기다형성 마커의 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계를 포함하는 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 정보제공방법을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시 형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
또한, 당해 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 통상의 실험만을 사용하여 본 발명에 기재된 본 발명의 특정 양태에 대한 다수의 등가물을 인지하거나 확인할 수 있다. 또한, 이러한 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.
본 발명의 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 레티놀 및 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어, "레티놀(retinol)"은 비타민 A의 한 종류로 순수 비타민이라고도 한다. 피부의 표피세포가 원래의 기능을 유지하기 위하여 중요한 역할을 하는 물질이다. 동물의 장의 점막세포에 존재하며, 녹황색 식물에 많이 포함되어 있다. 활성 형태인 레티노산(Retinoic acid)으로 변형되기도 하며, 표피세포가 원래의 기능을 유지하는 데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 또한, 피부 세포에 존재하는 세포 핵 가운데 DNA로 하여금 RNA를 발현시켜 세포분화를 촉진하고, 동물의 세포 사이에 섬유상 고체로 존재하는 경단백질인 콜라겐과 탄성섬유로 구성된 엘라스틴 등의 생합성을 촉진해 주름을 감소시키고 피부 탄력을 증대시키는 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
상기 레티놀은 약 2000 내지 6000IU의 양으로 함유할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 일 예로, 약 2000 내지 6000IU, 약 3500 내지 5500IU, 또는 약 2500 내지 4500IU일 수 있다.
본 발명은 피부에 대한 레티놀의 효능이 약 6000IU까지는 그 농도에 따라 비례적으로 증가하고, 6000IU 이상에서는 큰 차이가 발생하지 않는 사실을 발견하고(S.Kang et al.,J.InvestigativeDermatology, 105, 549-556, 1995), 피부자극은 최소화하면서 레티놀의 효능은 높일 수 있는 함량으로 5000IU 이하를 설정하여 피부에 대한 효과를 극대화한 조성물을 제공하고자 하는 것이다. 또한, 레티놀에 대한 반응성을 높이기 위하여 다양한 레티놀 부스터를 사용하여 레티놀의 효과를 극대화 한 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명에서 '레티놀 부스터(booster)'는 레티놀과 함께 작용하여 주름 개선에 효과를 증폭시키는 물질을 의미한다. 레티놀은 피부 주름을 감소시키고 피부 탄력을 증대시키는 효능이 있으나, 레티놀에 의한 반응성은 개체에 따라 달라질 수 있는바, 레티놀 부스터는 레티놀과 함께 작용하여 레티놀에 의한 반응성을 증가시켜 피부 주름 개선 효과를 극대화하는데 도움을 주는 것이면 특별히 제한되지 않는다.
일 예로, 상기 레티놀 부스터는 루페올(lupeol), 수크랄페이트(sucralfate), 및 글루타치온(glutathione)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 용어 "루페올(lupeol)"은 식물 유래, 구체적으로 콩과 식물 유래의 지용성 성분으로 직접적으로 피지를 녹여줄 수 있고, 모공 안으로 들어가 여드름 균을 살균할 수 있으며, 여드름 발생 원인이 되는 피지 생성, 염증, 각질화 등 여드름의 여러 원인을 억제시켜 주는 기능을 한다.
상기 용어 '수크랄페이트(sucralfate)'는 위궤양, 위식도 역류 질환, 위 염증 등을 치료하고 스트레스성 궤양을 예방하는데 사용하는 약물이다. 수크랄페이트의 염 부분이 위벽에 있는 피브로인(fibroin)과 결합하여 하나의 막을 형성하고, 상기 막이 위벽을 코팅하여 위산, 담즙 등으로부터 위를 보호함으로써 위의 통증을 완화시킴으로써 수크랄페이트가 제산제로 기능할 수 있다.
상기 용어 '글루타치온(Glutathione, γ-glutamyl-cysteinyl-glycine, GSH)'은 세 개의 아미노산으로 이루어진 펩타이드이며, DNA의 deoxyribonucleotide 전구체 합성에 중요한 역할을 한다. 이러한　글루타치온은 에스트로겐(estrogens), 프로스타그란틴(prostaglandins), 류코트리엔(leukotrienes)의 대사 프로세싱(metabolic processing)에 작용하며, 단백질의 설프하이드릴 그룹(sulfhydryl group)에 직접 또는 간접적으로 작용하여 단백질의 구조를 조절하며, 세포에 작용하는 산화제(oxidative)와 그 외의 스트레스에 대한 보호작용을 한다.　
본 발명의 레티놀 부스터는 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.0001 내지 10 중량 %로 함유하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 일 예로, 본 발명의 레티놀 부스터는 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.0001 내지 10 중량 %, 약 0.0005 내지 5 중량 %, 약 0.001 내지 5 중량 %, 약 0.01 내지 5 중량 %, 약 0.0001 내지 3 중량 %, 약 0.0005 내지 3 중량 %, 약 0.001 내지 3 중량 %, 약 0.01 내지 3 중량 %, 약 0.0001 내지 1 중량 %, 약 0.0005 내지 1 중량 %, 약 0.001 내지 1 중량 %, 또는 약 0.01 내지 1 중량 %일 수 있다.
본 발명의 목적상 상기 레티놀 부스터는 피부 주름 개선을 촉진할 수 있는 효과를 부여한다.
본 발명의 목적상 상기 용어 '피부 주름'은 개인 피부 중 일부 부위의 탄력이 떨어져 피부가 접히는 모양이 관찰되는 것을 의미한다. 피부의 접힘으로 인해 주름 부위는 주변부 피부에 비해 음영이 지므로, 주변부 피부에 비해 상대적으로 어둡게 관찰된다. 또한 주름은 대부분 선형의 모양을 가지므로, 음영진 부위가 연결되어 일정 길이 이상으로 관찰될 때 주름으로 정의될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서, 용어 "약(about)"은 특정 숫자 값 앞에 제시될 수 있다. 본 출원에서 사용되는 용어 "약"은 용어 뒤에 기재되는 정확한 숫자뿐만 아니라, 거의 그 숫자이거나 그 숫자에 가까운 범위까지 포함한다. 그 숫자가 제시된 문맥을 고려하여, 언급된 구체적인 숫자와 가깝거나 거의 그 숫자인지 여부를 결정할 수 있다. 일 예로, 용어 "약"은 숫자 값의 -10% 내지 +10% 범위를 지칭할 수 있다. 다른 예로, 용어 "약"은 주어진 숫자 값의 -5% 내지 +5% 범위를 지칭할 수 있다. 그러나 이에 제한되지 않는다.
상기 조성물은 개인 맞춤형인 것을 특징으로 한다. 구체적으로, 특정 피부 주름 정도 연관 유의성 단일염기다형성(SNP) 마커를 갖는 개체를 대상으로, 개인 맞춤용 레티놀 부스터를 제공할 수 있다.
일 예로, 피부 주름 정도 연관 유의성 단일염기다형성(SNP) 마커는 표 1에서 선택된 어느 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "다형성(polymorphism)"이란 하나의 유전자 좌위(locus)에 두 가지 이상의 대립유전자(allele)가 존재하는 경우를 말하며 다형성 부위 중에서, 사람에 따라 단일 염기만이 다른 것을 단일염기다형성(single nucleotide polymorphism, SNP)이라 한다. 바람직한 다형성 마커는 선택된 집단에서 1% 이상, 더욱 구체적으로 10% 또는 20% 이상의 발생빈도를 나타내는 두 가지 이상의 대립유전자를 가진다.‘유전자 다형성 마커'는 일반적으로 동일한 유전자 위치(염기)에서 두 가지 이상의 대립유전자(allele)가 관찰되는 경우를 말하며, 일반적으로 개인에 따라서 상위 대립유전자(major allele)/상위 대립유전자(major allele), 상위 대립유전자(major allele)/하위 대립유전자(minor allele), 하위 대립유전자(minor allele)/하위 대립유전자(minor allele) 의 경우가 존재한다. 본 발명에서는 "다형성 마커"와 혼용될 수 있으며, 하위 대립 유전자의 염기와 염기 부위를 의미하거나, 염색체의 number와 base position과 함께 정의될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "대립유전자(allele)"는 상동염색체의 동일한 유전자좌위에 존재하는 한 유전자의 여러 타입을 말한다. 대립유전자는 다형성을 나타내는데 사용되기도 하며, 예컨대, SNP는 두 종류의 대립인자(biallele)를 갖는다. 또한, 염색체의 number와 base position이 동일한 둘 이상의 염기의 조합을 의미하며, 상기 염기는 특정한 집단의 개체들에서 발생 빈도가 높은 상위 대립유전자(major allele)와 상기 상위 대립유전자 보다 발생 빈도가 낮은 하위 대립유전자(minor allele)를 포함한다.
구체적으로, 본 발명의 유전자 다형성 마커들은 피부 주름과 연관유의성이 있는 것으로, 두 가지 대립유전자(allele)를 보유할 수 있으며, 상위 대립유전자(major allele)/하위 대립유전자(minor allele), 하위 대립유전자(minor allele)/하위 대립유전자(minor allele), 상위 대립유전자(major allele)/상위 대립유전자 (major allele)를 보유하는 경우로 나눌 수 있다.
피부 주름 연관 유의성 다형성 마커의 대립 유전자를 가지고 있는 경우, 개체가 가지고 있는 대립 유전자에 따라 레티놀에 의한 반응성에 의해 피부 주름 개선 효과가 달라질 수 있으며, 일 예로 상위 대립유전자(major allele)/상위 대립유전자 (major allele), 상위 대립유전자(major allele)/하위 대립유전자(minor allele), 또는 하위 대립유전자(minor allele)/하위 대립유전자(minor allele)를 보유하고 있는 경우에 레티놀에 의한 반응성, 즉, 주름 개선 정도가 높거나 혹은 낮은 피부 특성을 가짐을 측정할 수 있으며, 이에 따라 레티놀에 의한 반응성이 낮은 개체에 주름 개선을 증대시키기 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는데 있어 정보를 제공할 수 있다.
본 발명에서 용어, "rs_id"란 1998년부터 SNP 정보를 축적하기 시작한 NCBI가 초기에 등록되는 모든 SNP에 대하여 부여한 독립된 표지자인 rs-ID를 의미한다. 이와 같은 표에 기재된 rs_id는 본 발명의 다형성 마커인 SNP 마커를 의미한다.
상기 단일염기다형성 마커는 표 1에 표시된 단일염기다형성 마커들 중에서 선택된 1종 이상의 단일염기다형성 마커일 수 있다. 상기 표 1에 표시된 단일염기다형성 마커는 피부 주름 정도와 연관성이 있는지 정도를 판단하는 것일 수 있다.
본 발명의 단일염기다형성 마커의 피부의 주름 정도는 각 마커들의 빈도 수를 측정하여 판단하였다. 이와 같은 유의성은 0.05 미만, 0.01 미만, 0.001 미만, 0.0001 미만, 0.00001 미만, 0.000001 미만, 0.0000001 미만, 0.00000001 미만, 또는 0.000000001 미만의 p-value와 같은 p-값을 특징으로 하나 이에 제한되지는 않는다. 구체적으로 p-value가 0.01 미만일 수 있으며, 더 구체적으로 p-value가 0.001 미만일 수 있고, 보다 더 구체적으로 0.0001 미만일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 단일염기다형성(SNP) 마커는 표 1에 표시된 마커 중 선택되는 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 단일염기다형성 (SNP) 마커는 1개 이상일 수 있으며, 2개 이상 등 주름을 판단할 수 있는 개수의 조합으로 이용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 마커는 SNP 그 자체, 또는 상기 SNP 위치를 포함하는 5-100개의 연속적인 DNA 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드, 또는 이의 상보적인 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 예로, 상기 주름 정도 연관 유의성 단일염기다형성 마커는 EDAR 또는 BNC2의 단백질을 코딩하는 유전자 내에 존재하는 하나 이상의 단일염기다형성 마커일 수 있으며, 구체적으로, rs3827760 또는 rs16935073인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 예로, SNP 아이디가 rs3827760의 경우, Chr.Position (GRCh ver. 37)이 "2:109513601"로 기재되어 있고, Allele이 G>A 로 개시되어 있다면, 이는 인간의 2번 염색체의 109513601번째 염기가 G 또는 A 임을 나타내는 것이며, allele의 ">" 왼쪽에 위치하는 염기가 상위 대립유전자(major allele)를 오른쪽에 위치하는 염기가 하위 대립유전자(minor allele)를 의미하는 것일 수 있다.
하나의 구체예로, 표 1에서 선택되는 마커는 인간의 2번 염색체의 109513601번째 염기가 G 또는 A인(rs3827760), 상기 109513601째 염기를 포함하는 5-100개의 연속적인 DNA 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드;
인간의 9번 염색체의 16795790번째 염기가 A 또는 C인(rs16935073), 상기 16795790번째 염기를 포함하는 5-100개의 연속적인 DNA 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드; 및 이들의 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드로 이루어진 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기에 기재된 마커는 표 1에서 일부만을 예시로 기재한 것일 뿐이며, 다른 위치의 염색체에서도 상기와 동일한 방법으로 선택될 수 있다.
본 발명의 목적상 상기 용어'피부 주름 정도'는 피부 주름으로 인해 일정 길이 이상의 선형의 부위가 주변부 피부에 비해 상대적으로 어둡게 관찰될 때 모든 대상 영역을 합산하여 전체 측정 부위 대비 비율을 측정한 결과를 의미하나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 표 1에서 선택된 어느 하나 이상의 단일염기다형성(SNP) 마커를 이용하여 주름 생성이 쉬운지 여부를 판단하는 것을 의미한다. 더욱 구체적으로, 주름 생성이 쉬운 피부 타입은 노화 진행이 빨라서 피부 면적 당 주름이 많이 생성되는 비율이 높은 피부 타입을 의미한다.
본 발명의 상기 대립유전자는 각각의 개체에서 염색체의 number가 동일하고, 그 중에서 SNP의 상위 대립유전자(major allele) 및 하위 대립유전자(minor allele)가 존재하고, 다형성 마커의 다형성 부위의 염기가 하위 대립유전자로 하나씩 늘어감에 따라 상위 대립유전자는 하나씩 줄어갈 수 있으며, 상위 대립유전자로 하나씩 늘어감에 따라 하위 대립유전자는 하나씩 줄어갈 수 있다. 다만, 하위대립유전자 및 상위대립유전자가 늘어나고 줄어들 수 있는 범위는 i) 상위 대립유전자(major allele)/상위 대립유전자(major allele), ii) 상위 대립유전자(major allele)/하위 대립유전자(minor allele), iii) 하위 대립유전자(minor allele)/하위 대립유전자(minor allele)의 3가지 타입 안에서 일 수 있으며, 상기 3가지 타입의 범위 내에서 대립 유전자가 줄어들거나, 늘어날 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물은 화장료 조성물로 사용될 수 있으며, 다양한 형태로 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유지, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 상기 조성물은 피부 주름의 완화 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 대한민국 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람, 동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함 된다.
일 구현예로, 본 발명의 의약외품 조성물은 바디 클렌저, 샴푸, 컨디셔너, 폼, 비누, 마스크, 연고제, 크림, 로션, 에센스 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 형태로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또 하나의 양태로서, 본 발명은 (a) 개체로부터 생물학적 시료를 수득하는 단계; (b) 상기 생물학적 시료로부터 rs3827760 또는 rs16935073인 단일염기다형성 마커의 다형성 부위를 증폭하거나 프로브와 혼성화하는 단계; 및 (c) 상기 (b) 단계의 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계를 포함하는, 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 용어, "개체"란 피부 주름 정도에 대한 진단을 하기 위한 피험자를 의미한다. 상기 검체에서 머리카락, 뇨, 혈액, 각종 체액, 분리된 조직, 분리된 세포 또는 타액과 같은 시료 등으로부터 DNA를 수득할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 (a) 단계의 게놈 DNA 수득 방법은 당업자에게 알려진 어떠한 방법이든 사용가능하다.
상기 (a) 단계의 수득한 DNA로부터 상기 단일염기다형성 마커의 다형성 부위를 증폭하거나 프로브와 혼성화하는 단계는 당업자에게 알려진 어떠한 방법이든 사용가능하다. 예를 들면, 표적 핵산을 PCR을 통하여 증폭하고 이를 정제하여 얻을 수 있다. 그 외 리가제 연쇄 반응(LCR) (Wu 및 Wallace, Genomics 4, 560(1989), Landegren 등, Science 241, 1077(1988)), 전사증폭(transcription amplification)(Kwoh 등, Proc. Natl.Acad. Sci. USA 86, 1173(1989)) 및 자가유지 서열 복제 (Guatelli 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 1874(1990)) 및 핵산에 근거한 서열 증폭 (NASBA)이 사용될 수 있다.
상기 방법 중 (b) 단계의 다형성 부위의 염기를 결정하는 것은 시퀀싱 분석, 마이크로어레이(microarray)에 의한 혼성화, 대립유전자 특이적인 PCR(allele specific PCR), 다이나믹 대립유전자 혼성화 기법(dynamic allele-specific hybridization, DASH), PCR 연장 분석, SSCP, PCR-RFLP 분석 또는 TaqMan 기법, SNPlex 플랫폼(Applied Biosystems), 질량 분석법(예를 들면, Sequenom의 MassARRAY 시스템), 미니-시퀀싱(mini-sequencing) 방법, Bio-Plex 시스템(BioRad), CEQ and SNPstream 시스템(Beckman), Molecular Inversion Probe 어레이 기술(예를 들면, Affymetrix GeneChip), 및 BeadArray Technologies(예를 들면, Illumina GoldenGate 및 Infinium 분석법)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 방법들 또는 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 이용가능한 다른 방법에 의해, 마이크로새틀라이트, SNP 또는 다른 종류의 다형성 마커를 포함한, 다형성 마커에서의 하나 이상의 대립유전자가 확인될 수 있다. 이와 같은 다형성 부위의 염기를 결정하는 것은 구체적으로 SNP 칩을 통해 수행할 수 있다.
상기 방법은 추가적으로 (i) (c)단계에서 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기가 상기 단일염기다형성 마커에 따른 하위 대립유전자(minor allele)인 염기를 하나 이상 포함하는 경우, 레티놀에 의한 반응성이 낮아 추가적인 레티놀 부스터를 처리해야 하는 것으로 정보를 제공하는 것이거나, (ii) (c) 단계에서 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기가 상기 단일염기다형성 마커에 따른 상위 대립유전자(major allele)인 염기를 하나 이상 포함하는 경우, 레티놀에 의한 반응성이 낮아 추가적인 레티놀 부스터를 처리해야 하는 것으로 정보를 제공하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 레티놀 부스터는 루페올, 수크랄페이트, 및 글루타치온으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 목적상 상기 주름 정도 연관 유의성 유전자는 각 개체의 특이적 레티놀 부스터를 선택할 수 있는 정보를 제공할 수 있다. 일 예로, EDAR 또는 BNC2 단백질을 코딩하는 유전자 내에 존재하는 하나 이상의 단일염기다형성 마커를 가진 개체의 경우, 레티놀 부스터로 루페올, 수크랄페이트, 및 글루타치온으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 처리할 경우에 레티놀에 의한 주름 개선을 증대시킬 수 있으나, 각 개체의 유전자 특성에 따라 최적의 레티놀 부스터 조합을 제공할 수 있다.
이는, 피부 주름과 유의적 상관관계를 갖는 특정 단일염기다형성 (SNP) 마커를 선별하고 유전정보를 바탕으로 레티놀에 주름 개선에 의한 효과를 극대화 할 수 있는 개인 맞춤형 레티놀 부스터를 선택할 수 있도록 정보를 제공할 수 있음을 시사하는 것이다.
일 예로, rs3827760의 염기 중 하나 이상의 하위 대립유전자(minor allele)를 포함하는 경우 루페올 및 수크랄페이트를 처리하는 단계를 추가적으로 선택하거나, rs16935073의 염기 중 하나 이상의 상위 대립유전자(major allele)를 포함하는 경우 글루타치온을 처리하는 단계를 추가적으로 선택하도록 하는 정보제공방법을 제공하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 방법과 병렬적으로, (i) (c)단계에서 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기가 상기 단일염기다형성 마커에 따른 상위 대립유전자(major allele)인 염기를 두 개 포함하는 경우, 레티놀에 의한 반응성이 높아 추가적인 레티놀 부스터를 처리하지 않고 레티놀만을 단독으로 처리하는 정보를 제공하는 것이거나, (ii) (c) 단계에서 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기가 상기 단일염기다형성 마커에 따른 하위 대립유전자(minor allele)인 염기를 두 개 포함하는 경우, 레티놀에 의한 반응성이 높아 추가적인 레티놀 부스터를 처리하지 않고 레티놀만을 단독으로 처리하도록 하는 정보를 제공하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 예로, rs3827760의 염기 중 두 개의 상위 대립유전자(major allele)를 포함하는 경우 레티놀을 단독으로 처리하는 단계를 추가적으로 선택하거나, rs16935073의 염기 중 두 개의 하위 대립유전자(minor allele)를 포함하는 경우 레티놀을 단독으로 처리하는 단계를 추가적으로 선택하도록 하는 정보제공방법을 제공하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "SNP 칩"은 수십만개의 SNP의 각 염기를 한번에 확인할 수 있는 DNA 마이크로어레이의 하나를 의미한다.
TaqMan 방법은 (1) 원하는 DNA 단편을 증폭할 수 있도록 프라이머 및 TaqMan 탐침을 설계 및 제작하는 단계; (2) 서로 다른 대립유전자의 탐침을 FAM 염료 및 VIC 염료로 표지(Applied Biosystems)하는 단계; (3) 상기 DNA를 주형으로 하고, 상기의 프라이머 및 탐침을 이용하여 PCR을 수행하는 단계; (4) 상기의 PCR 반응이 완성된 후, TaqMan 분석 플레이트를 핵산 분석기로 분석 및 확인하는 단계; 및 (5) 상기 분석결과로부터 단계 (1)의 폴리뉴클레오티들의 유전자형을 결정하는 단계를 포함한다.
상기에서, 시퀀싱 분석은 염기서열 결정을 위한 통상적인 방법을 사용할 수 있으며, 자동화된 유전자분석기를 이용하여 수행될 수 있다. 또한, 대립유전자 특이적 PCR은 SNP가 위치하는 염기를 3' 말단으로 하여 고안한 프라이머를 포함한 프라이머 세트로 상기 SNP가 위치하는 DNA 단편을 증폭하는 PCR 방법을 의미한다. 상기 방법의 원리는, 예를 들어, 특정 염기가 A에서 G로 치환된 경우, 상기 A를 3' 말단염기로 포함하는 프라이머 및 적당한 크기의 DNA 단편을 증폭할 수 있는 반대 방향 프라이머를 고안하여 PCR 반응을 수행할 경우, 상기 SNP 위치의 염기가 A인 경우에는 증폭반응이 정상적으로 수행되어 원하는 위치의 밴드가 관찰되고, 상기 염기가 G로 치환된 경우에는 프라이머는 주형 DNA에 상보결합할수 있으나, 3' 말단 쪽이 상보결합을 하지 못함으로써 증폭반응이 제대로 수행되지 않는 점을 이용한 것이다. DASH는 통상적인 방법으로 수행될 수 있고, 구체적으로 프린스 등에 의한 방법에 의하여 수행될 수 있다.
한편, PCR 연장 분석은 먼저 단일염기 다형성이 위치하는 염기를 포함하는 DNA 단편을 프라이머 쌍으로 증폭을 한 다음, 반응에 첨가된 모든 뉴클레오티드를 탈인산화시킴으로써 불활성화시키고, 여기에 SNP 특이적 연장 프라이머, dNTP 혼합물, 디디옥시뉴클레오티드, 반응 완충액 및 DNA 중합효소를 첨가하여 프라이머 연장반응을 수행함으로써 이루어진다. 이때, 연장 프라이머는 SNP가 위치하는 염기의 5' 방향의 바로 인접한 염기를 3' 말단으로 삼으며, dNTP 혼합물에는 디디옥시뉴클레오티드와 동일한 염기를 갖는 핵산이 제외되고, 상기 디디옥시뉴클레오티드는 SNP를 나타내는 염기 종류 중 하나에서 선택된다. 예를 들어, A에서 G로의 치환이 있는 경우, dGTP, dCTP 및 dTTP 혼합물과 ddATP를 반응에 첨가할 경우, 상기 치환이 일어난 염기에서 프라이머는 DNA 중합효소에 의하여 연장되고, 몇 염기가 지난 후 A 염기가 최초로 나타나는 위치에서 ddATP에 의하여 프라이머 연장반응이 종결된다. 만일 상기 치환이 일어나지 않았다면, 그 위치에서 연장반응이 종결되므로, 상기 연장된 프라이머의 길이를 비교함으로써 SNP를 나타내는 염기 종류를 판별할 수 있게 된다.
이때, 검출방법으로는 연장 프라이머 또는 디디옥시뉴클레오티드를 형광 표지한 경우에는 일반적인 염기서열 결정에 사용되는 유전자 분석기(예를 들어, ABI사의 Model 3700 등)를 사용하여 형광을 검출함으로써 상기 SNP을 검출할 수 있으며, 무-표지된 연장 프라이머 및 디디옥시뉴클레오티드를 사용할 경우에는 MALDI-TOF(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight) 기법을 이용하여 분자량을 측정함으로써 상기 SNP를 검출할 수 있다.
본 발명의 피부 주름 정도와 연관유의성을 갖는 유전자 다형성 마커들을 통하여 개인의 피부 주름 정도에 대한 정보를 제공해 줄 수 있으며, 더 나아가서는 개인에게서 관찰되는 유전자 다형성 마커들의 정보에 따라 피부 주름 정도를 완화시켜줄 수 있는 맞춤형 성분 또는 제품을 개발할 수 있을 것이다.
도 1은 특정 유전자 SNP의 대립유전자 보유 여부에 따른 레티놀에 대한 반응성을 나타낸 것이다.
도 2는 EDAR(rs3827760)의 레티놀 부스터(루페올 및 수크랄페이트) 처리에 따른 주름개선 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 BNC2(rs1693073)의 레티놀 부스터(글루타치온) 처리에 따른 주름개선 효과를 나타낸 것이다.
도 4는 맞춤형 처방을 위하여 피부 주름 정도와 연관유의성을 갖는 유전자 다형성 마커의 다형성 부위의 염기를 확인하고 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 모식도를 나타낸 것이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
실시예 1: 피부 주름 연관유의성 유전자 다형성 마커 도출
한국인(여성)에서 유전정보에 따라 얼굴 피부 주름 정도(수치)에 차이가 나타나는 유전체 부위(유전자 변이)를 발굴하고자 하였다. 본 발명은 주름에 연관되어 있는 유전체 부위(유전자 변이)를 발굴하기 위한 것으로, 후보 유전자를 미리 선별하지 않고 유전체전장수준을 스크리닝 할 수 있는 microarray genotyping chip (Illumina社 제품)을 활용하였다.
본 발명에서 주름 정도를 평가하기 위하여 이미지 기반의 피부진단 전문기기(PIE社 Janus3)를 활용하였으며, 피부 주름 정도(수치)에 영향을 줄 수 있는 외부효과를 최소화하기 위하여 나이와 BMI, 군집 주성분 수치로 보정 후 활용하였다.
유전체 부위(유전자 변이)와 피부 주름 정도(수치)와의 연관성을 확인하기 위하여 선형회귀분석을 활용하여 상관유의성 및 유전적 효과를 수치화하였다.
1-1: 피부 주름 정도 평가 방법
일반적인 피부 주름 정도를 설명할 수 있는 유전자 다형성 마커를 도출해내기 위하여, 20~70대의 건강한 한국인 여성을 모집하였다. 또한, 피부 측정을 위하여 모든 분석 대상은 클렌징 또는 비누를 얼굴 세안을 하고 피부가 측정 환경에 적응할 수 있도록 어떠한 제품도 바르지 않고 30분간 대기한 후에 피부 주름 정도를 평가하였으며, 평가에는 이미지 기반의 피부진단 전문기기(PIE社 Janus3)를 활용하였다 (측정 및 분석은 기기 제조사의 매뉴얼에 따라 수행함). 구체적으로, 분석 대상자는 머리띠 착용 및 검은 천을 옷 위에 두른 후 얼굴을 기기에 내장된 이마 받침대와 턱 받침대에 고정하고 눈을 감은 상태로 측정을 위한 자세 유지하고, Janus 3 기기에 내장된 카메라를 통해 분석 대상자의 안면부에 대한 고해상도 이미지를 촬영하였다. Janus 3 자체에서 제공하는 프로그램은 양 눈 부위를 기준으로 눈의 바깥쪽 옆 영역과 눈 아래 영역을 정의하며, 해당 영역 내 모든 주름 부위를 추출하고 수치화하였다.
유전자 채집은 타액 수집을 통하여 이루어졌으며, 효과적인 유전자 채집을 위해 모든 분석 대상은 채집 전 30분부터는 물을 포함한 어떠한 음식물 섭취를 금하였다.
상기 피험자 중 ① 임신, 수유 중 또는 6 개월 이내에 임신을 계획하고 있는 경우, ② 피부질환의 치료를 위해 스테로이드가 함유된 피부외형제를 1 개월 이상 사용한 경우, ③ 동일한 시험에 참가한 뒤 6 개월이 경과되지 않는 경우, ④ 민감성, 과민성 피부를 가진 경우, ⑤ 시험 부위에 점, 여드름, 홍반, 모세혈관확장 등의 피부 이상 소견이 있는 경우, ⑥ 시험 시작 3 개월 이내에 시험 부위에 동일 또는 유사한 화장품 또는 의약품을 사용한 경우, ⑦ 시험 부위에 시술(피부 박피술, 보톡스, 기타 피부관리)을 받거나 6 개월 이내 계획한 경우, ⑧ 만성 소모성 질환이 있는 경우 (천식, 당뇨, 고혈압 등), ⑨ 아토피 피부염을 가지는 경우, ⑩ 그 외 주 시험자의 판단으로 시험이 곤란하다고 판단되는 경우는 피험자에서 제외하였다.
1-2: 유전자 채집 및 분석 방법
유전자 분석을 위한 타액으로부터의 유전자 추출은 QIAamp mini prep kit (QIAGEN)을 이용하여 human genomic DNA를 추출하였으며, 그 품질은 흡광도 (OD 260/280) 또는 1.7, 농도 50ng/ul, 1x TAE 1% agarose gel을 통한 band 검사를 통해 확인하였으며 품질을 통과한 건에 한하여 유전자 분석을 수행하였다.
Illumina社 microarray genotyping chip을 이용하여 유전자 분석이 진행되었으며, 구체적으로는 동일 회사의 global screening array 제품을 이용하여 분석 대상자들의 유전자를 분석하였다.
Illumina社 microarray genotyping chip 유전자 분석 실험은 제공되는 매뉴얼에 따라 진행되었으며, 제공되는 시약을 사용하여 genomic DNA 증폭 (amplification), DNA 조각화 (fragmentation), 침전 (precipitation), 혼성화 (hybridization), 염색 (staining), 세척 (washing), 코팅 (coating), 스캐닝 (scanning)의 과정을 수행하였다.
실험이 완료된 microarray genotyping chip은 iScan Control Software (Illumina)를 이용하여 스캔하였으며, 스캔이 완료되면 idat 파일이 자동으로 생성되어 GenomeStudio (Illumina) 프로그램을 이용하여 데이터 품질관리 (sample call rate 98%, marker call rate 98%) 및 유전자정보 확인을 수행하였다.
본 실험에서는 유전자 분석 이후 데이터 품질관리를 통과한 데이터만 활용하였다.
1-3: 피부 주름 정도 연관 유전자 다형성 마커 도출
피부 주름 정도와 연관유의성을 갖는 유전자 다형성 마커들을 도출하기 위하여 PLINK v 1.90 프로그램을 사용하여 17,019명 한국인 여성의 피부 주름 정도와 유전자 다형성 마커 간 선형회귀분석을 수행하였으며, 분석을 위하여 PLINK v 1.90 및 SNP & Variation suite(Golden Helix, Inc., Bozeman, Montana, USA) 프로그램을 사용하였다.
실험을 통하여 확인된 유전자 다형성 마커들을 활용하여 추가적인 유전자 다형성 마커에 대한 정보를 확보하기 위하여 Imputation 분석을 Beagle v 5.1 프로그램을 사용하여 진행하였으며, 해당 분석을 진행하기 위하여 기준이 되는 참조데이터는 국제 공개 유전체데이터 database인 1000 Genomes project에 등록되어 있는 정보를 활용하였다.
Imputation은 실험으로 확보한 유전자 다형성 마커 정보를 토대로 분석되지 않은 유전자 다형성 마커 정보를 추론하는 통계학적 기법이다.
분석대상 유전자 다형성 마커들의 품질관리를 위하여 각 유전자 다형성 마커들이 하위 대립유전자 빈도 (minor allele frequency) 또는 0.01 및 하디-웨인버그 평형 (Hardy-Weinberg equilibrium) 또는 0.000001 기준을 넘는 것에 한하여 활용하였다.
피부 주름 정도와 연관성을 보이는 유전자 다형성 마커들의 유의성은 선형회귀분석 F-statistics를 통해 평가하였으며, 그 기준은 P-value < 0.00000005 로 설정하였다. 또한 다소 완화된 기준인 0.00000005 ≤ P-value < 0.0001에 해당하는 경우, 피부 주름 정도와 약한 수준의 연관성을 보이는 유전자 다형성 마커들로 추가적으로 선별하였다.
피부 주름 정도에 영향을 줄 수 있는 외부효과를 최소화하고 유전자정보에 따른 효과를 도출하기 위하여 나이, 폐경여부 또는 BMI 정보 또는 생활습관 (음주, 흡연, 식습관, 수면습관 등)의 정보로 피부 주름 정도를 보정하여 분석에 활용할 수 있다 (예: 선형회귀분석을 수행).
피부 주름과 유의하게 관련된 SNP 마커 대표적인 예들을 하기 표 1 에 나타냈다.
피부 주름 정도 연관 유전자 다형성 마커
분석 대상 표현형 SNP1) Gene1) Chr:Position1) Allele2) MAF3) P-value4) Effect size (β)5)
눈 밑 주름 rs3827760 EDAR 2:109513601 G>A 0.11 1.87E-08 -1.43
눈 옆 주름 rs16935073 BNC2 9:16795790 A>C 0.43 3.09E-10 0.83
1) 미국국립보건원 (NIH) ID, 해당 홈페이지에서 서열확인가능
2) (major allele) > (minor allele) 의미
3) minor allele frequency = (2mm + Mm)/2(MM + Mm + mm)
4) 3가지의 유전형(M/M, M/m, m/m)에 대한 표현형 차이의 통계적 유의성 (M: major allele, m: minor allele)
5) minor allele 이 하나씩 늘어감에 따라 표현형의 증감 변화정도 (- : 주름 감소, + : 주름 증가)
주름 정도 = 전체면적 대비 주름이 일어나는 부위의 면적 비율, 단 주름 부위의 intensity 가중치와 threshold 값 적용, 시판기기 이용 (Janus3, PIE社, Korea)
실시예 2: 피부 주름 개선에 대한 레티놀 반응성 확인을 위한 시험
실시예 1을 통해 얻어진 피부 주름 정도와 연관성을 보이는 다형성 마커를 기반으로 레티놀에 의한 피부 주름 개선의 효과를 극대화 할 수 있는 물질을 발굴하여 맞춤형 레티놀 부스터를 처방하고자 하였다.
2-1: 피험자 선정
생명윤리위원회 (Institutional Review Board, IRB, Korea)의 승인(LG-Wr_Healing-2020-1124) 후 ㈜LG생활건강 기관생명윤리위원회의 표준 운영지침 및 임상시험 기준에 따라 실시하였으며, 눈가, 눈밑에 주름이 많은 20~50대 성인으로 피부에 외관상 큰 이상이 없으며, 시험 시작 전 1달 이내 피부과 시술 경험이 없는 건강한 피시험자 18인을 선정하였다.
상기 피험자 중 1) 습진성/감염성 피부 질환을 보유한 자, 2) 알레르기성 특이 체질이거나 과민증이 있는 자, 3) 임신 중이거나 수유 중인 자, 4) 현저한 영양 장애자, 5) 약물이나 알코올 중독자, 6) 시험 부위에 점, 여드름, 문신, 홍반, 화상 자국 등을 보유한 자, 7) 동일한 시험에 참여한 뒤 1개월이 경과되지 않은 자, 8) 고혈압, 당뇨 질환자의 경우에는 피험자에서 제외하였다.
2-2: 시험 정보
레티놀 2500 IU 함유 에센스는 양쪽 눈밑과 눈가에 도포 (처음 2주간 격일로 도포, 3주차부터 매일 도포)하였다.
이후, 에센스 A-1(루페올 0.015%, 수크랄페이트 0.015%) 또는 에센스 A-2(글루타치온 0.01%)를 우측 얼굴 전면에, 에센스 B (vehicle 제형)를 좌측 얼굴 전면에 하루 2회(아침, 저녁) 도포하였다. 상기 에센스 B(vehicle 제형)의 구체적인 정보는 하기 표 2와 같다.
총 8주간 사용하였으며, 4주마다 안테라 3D를 이용하여 주름을 측정한 후, 눈밑의 미세주름 overall size를 구하였다. 상기 미세주름 overall size란, 안테라 측정 시 표면적과 비교하여 높이가 낮은 곳의 전체 부피를 전체 면적으로 나누어준 값을 의미한다.
Vehicle 제형 정보
성분명 함량
GMS-205 1.0%
ARLACEL 165 1.0%
OLIVEN 1000 1.0%
글리세린 8.5%
DPG-FG 10.0%
Activonol-6 2.0%
Dex Panthenol 5.0%
Allantoin 0.3%
양파추출액 3.0%
정제수 68.2%
2-3: 주름 개선율 계산
하기의 계산식을 이용하여 주름 개선율(%) 정도를 계산하였다.
X 100
통계적 유의성은 엑셀 통계 데이터 분석 프로그램의 t-검정을 이용하였으며, 유의성 검증 결과는 * p < 0.05로 표시하였다.
실시예 3: 피부 주름 정도 연관 유의성 다형성 마커와 레티놀 처리의 상관관계 확인
실시예 1을 통해 얻어진 피부 주름 정도와 연관성을 보이는 다형성 마커를 기반으로 레티놀에 의한 주름 개선 정도를 확인한 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 레티놀에 대한 반응성이 특정 유전자 SNP의 대립유전자 보유 여부에 따라 달라짐을 확인할 수 있었다.
일 예로, 표 1의 유전자 중 EDAR (rs3827760)의 경우에는 minor allele (A)를 보유하지 않은 그룹에서 레티놀 반응성이 높고, minor allele를 1개 이상 보유한 그룹에서 레티놀 반응성이 낮음을 확인할 수 있었다.
또한, BNC2 (rs16935073)의 경우에는 minor allele (C)를 2개 보유한 그룹에서 레티놀 반응성이 높고, major allele(A)를 1개 이상 보유한 그룹에서 레티놀 반응성이 낮음을 확인할 수 있었다.
이를 통해, 레티놀에 대한 반응성이 높아 주름 개선이 기대되는 그룹에는 레티놀 단독 처방 전에 이러한 사실을 미리 고지함으로써 적응 기간에 나타나는 다양한 부작용에 대한 거부감을 줄이는 동시에 효능에 대한 체감 정도를 높일 수 있어 꾸준한 레티놀 제품 사용을 유도할 수 있다.
실시예 4: 피부 주름 정도 연관 유의성 다형성 마커와 레티놀 반응성 부스터의 효과 확인
실시예 3을 통해 얻어진 피부 주름 정도 연관 유의성 다형성 마커와 레티놀 처리의 상관관계를 통해 레티놀 반응성이 낮은 그룹의 주름 개선 효율을 상승시켜줄 수 있는 물질을 제공하고자 하였다.
4-1: EDAR 분석 데이터 기반에 따른 레티놀 부스터의 피부 주름 관련 유전자 발현 효과 확인
피부 재생 단백질 EDAR(rs3827760)의 minor allele(A) 보유 그룹은 레티놀에 대한 반응성이 낮아 이에 대한 맞춤 처방을 하고자 하였다.
구체적으로, 레티놀 2500IU과 함께 루페올 0.015%, 및 수크랄페이트 0.015%을 처방하였다(에센스 A-1). 그 결과, 해당 그룹의 주름 개선 효능이 3.3% 에서 12.3%으로 약 3.7배 증가함을 확인하였다(도 2).
4-2: BNC2 분석 데이터 기반에 따른 레티놀 부스터의 피부 주름 관련 유전자 발현 효과 확인
피부 광민감성 단백질 BNC2(rs1693073)의 major allele(A) 보유 그룹은 레티놀에 대한 반응성이 낮아 이에 대한 맞춤 처방을 하고자 하였다.
구체적으로, 레티놀 2500IU과 함께 글루타치온 0.01%을 처방하였다(에센스 A-2). 그 결과 레티놀 단독 처리군은 오히려 주름이 생겼던 것에 반해 해당 처방을 복합 처리한 경우 주름 개선율이 12.2%로 나타남을 확인하였다(도 3).
이를 통해, 레티놀에 대한 반응성이 낮은 그룹에는 각각의 그룹에 대해 맞춤형 처방을 제공함으로써 주름 개선 효율을 상승시킬 수 있음을 알 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (12)

  1. 레티놀; 및 루페올(lupeol), 수크랄페이트(sucralfate), 및 글루타치온(glutathione)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 레티놀 부스터는 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.0001 내지 10 중량 %로 함유하는 것을 특징으로 하는 것인, 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 레티놀을 2000 내지 6000IU의 양으로 함유하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 주름 개선은 EDAR 또는 BNC2의 단백질을 코딩하는 유전자 내에 존재하는 하나 이상의 단일염기다형성 마커를 가진 개체를 대상으로 하는 것인, 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 단일염기다형성 마커는 rs3827760 또는 rs16935073인 것인, 조성물.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 단일염기다형성 마커는 인간의 2번 염색체의 109513601번째 염기가 G 또는 A인(rs3827760), 상기 109513601째 염기를 포함하는 5-100개의 연속적인 DNA 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드;
    인간의 9번 염색체의 16795790번째 염기가 A 또는 C인(rs16935073), 상기 16795790번째 염기를 포함하는 5-100개의 연속적인 DNA 서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드; 및 이들의 상보적인 폴리뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드로 이루어진, 조성물.
  7. (a) 개체로부터 생물학적 시료를 수득하는 단계;
    (b) 상기 생물학적 시료로부터 rs3827760 또는 rs16935073인 단일염기다형성 마커의 다형성 부위를 증폭하거나 프로브와 혼성화하는 단계; 및
    (c) 상기 (b) 단계의 증폭된 또는 혼성화된 다형성 부위의 염기를 확인하는 단계를 포함하는, 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하는 정보제공방법.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 레티놀 부스터는 루페올, 수크랄페이트, 및 글루타치온으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것인, 정보제공방법.
  9. 제7항에 있어서,
    rs3827760의 염기 중 하나 이상의 하위 대립유전자(minor allele)를 포함하는 경우 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터는 루페올 및 수크랄페이트를 선택하는 것인, 정보제공방법.
  10. 제7항에 있어서,
    rs3827760의 염기 중 두 개의 상위 대립유전자(major allele)를 포함하는 경우, 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하지 않는 것인, 정보제공방법.
  11. 제7항에 있어서,
    rs16935073의 염기 중 하나 이상의 상위 대립유전자(major allele)를 포함하는 경우, 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터는 글루타치온을 선택하는 것인, 정보제공방법.
  12. 제7항에 있어서,
    rs16935073의 염기 중 두 개의 하위 대립유전자(minor allele)를 포함하는 경우, 주름 개선을 위한 맞춤용 레티놀 부스터를 선택하지 않는 것인, 정보제공방법.
KR1020220050911A 2022-04-25 2022-04-25 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물 KR20230151335A (ko)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220050911A KR20230151335A (ko) 2022-04-25 2022-04-25 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물
PCT/KR2023/005433 WO2023211061A1 (ko) 2022-04-25 2023-04-21 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물
KR1020240122445A KR20240136918A (ko) 2022-04-25 2024-09-09 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020220050911A KR20230151335A (ko) 2022-04-25 2022-04-25 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020240122445A Division KR20240136918A (ko) 2022-04-25 2024-09-09 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230151335A true KR20230151335A (ko) 2023-11-01

Family

ID=88519331

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220050911A KR20230151335A (ko) 2022-04-25 2022-04-25 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물
KR1020240122445A KR20240136918A (ko) 2022-04-25 2024-09-09 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020240122445A KR20240136918A (ko) 2022-04-25 2024-09-09 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물

Country Status (2)

Country Link
KR (2) KR20230151335A (ko)
WO (1) WO2023211061A1 (ko)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020042084A (ko) * 2000-11-30 2002-06-05 정진호 피부의 탄력을 조절하는 방법 및 그를 위한 조성물
TWI332401B (en) * 2001-08-21 2010-11-01 Shiseido Co Ltd Materials which are capable of enhancing laminin-5 producing ability in epidermal cell and the use thereof
WO2019190182A1 (ko) * 2018-03-27 2019-10-03 (주)메디젠휴먼케어 단일염기다형성을 이용한 피부 또는 탈모 표현형 예측 방법
KR102170764B1 (ko) * 2018-11-06 2020-10-27 주식회사 코리아나화장품 나노구조 지질 전달체로 안정화된 유효성분을 함유하는 화장료 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023211061A1 (ko) 2023-11-02
KR20240136918A (ko) 2024-09-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Du et al. Gender differences in association between serotonin transporter gene polymorphism and personality traits
Lee et al. Multiple mitochondrial DNA deletions associated with age in skeletal muscle of rhesus monkeys
JP2016019531A (ja) 皮膚サンプルの年齢範囲の決定方法
JP2013226096A (ja) 被験者の肌質を判定する方法及び該方法に基づく化粧品の提供方法
KR20130016013A (ko) 미백 피부 타입 유전자 다형성 마커 및 이의 용도
JP2014108094A (ja) 肌質に関する遺伝子型に対応したサプリメントセットの提供方法
O'Donnell et al. Detection of an atypical 22q11 deletion that has no overlap with the DiGeorge syndrome critical region.
Inoue et al. Correlation of axillary osmidrosis to a SNP in the ABCC11 gene determined by the Smart Amplification Process (SmartAmp) method
Wei et al. A novel locus for disseminated superficial porokeratosis maps to chromosome 18p11. 3
CN105950738A (zh) 一种用于评估皮肤抗过敏情况的引物和探针及试剂盒
JP5191906B2 (ja) ヒトの記憶性能に影響を及ぼす遺伝子
Iglesia et al. A multi‐functional anti‐aging moisturizer maintains a diverse and balanced facial skin microbiome
KR101267430B1 (ko) 핵산을 안정적으로 보관하는 새로운 피부 유전자 카드와이를 이용한 유전자 분석방법, 그리고 이의 응용 방법
KR20230151335A (ko) 레티놀 부스터를 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물
Hai et al. Bivariate genome-wide association study suggests that the DARC gene influences lean body mass and age at menarche
Yang et al. Identification of a novel locus for Marie Unna hereditary hypotrichosis to a 17.5 cM interval at 1p21. 1–1q21. 3
CN105950737A (zh) 一种用于评估皮肤防御情况的引物和探针及试剂盒
CN118829414A (zh) 包含视黄醇增强剂作为有效成分的用于改善皱纹的组合物
KR20240073656A (ko) 피부 미세 주름 개선용 조성물
Horev et al. Mutations in lipase H cause autosomal recessive hypotrichosis simplex with woolly hair
KR20240073657A (ko) 처진 모공 주름 개선용 조성물
KR20240074136A (ko) 팔자 주름 개선용 조성물
KR20230073062A (ko) 자극 완화제를 유효성분으로 포함하는 레티놀에 의한 항자극 또는 항염용 조성물
KR20230157785A (ko) 히드로퀴논을 포함하는 처방의 피부 밝기 변화 예측 방법 및 시스템
CN118201591A (zh) 包含视黄醇的配方的皮肤刺激信息预测方法及系统，以及包含刺激缓解剂作为有效成分的针对视黄醇的抗刺激或抗炎用组合物

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right