KR20230147337A - 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 유효성분인 일엽추 추출물은 미세먼지 유발 폐 염증의 완화, 개선 및 치료에 효과가 있음에 따라, 본 발명은 과도한 미세먼지 유발 폐 염증 질환의 발명 위험성을 감소시키고, 다양한 미세먼지 유발 폐 염증의 예방, 개선 및 치료용 의약, 식품, 의약외품 등으로 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
미세먼지(Diesel exhaust particulate)는 다양한 크기, 구성 그리고 발생원을 가지고 있는 입자상 복합 오염물질로, 일반적으로 대기 중에 부유하고 있는 분진으로 보통 직경 10 ㎛ 이하인 먼지를 미세먼지(PM10)라고 하고, 2.5 ㎛ 이하인 먼지는 초미세먼지(PM2.5)라 하며, 이보다 더 작은 0.1 ㎛ 이하를 극초미세먼지(PM0.1)라고 한다. 발생원인은 석탄이나 석유 같은 화석연료의 연소과정에서 배출되는 인위적인 발생원과 황사, 화산재, 산불 등의 자연환경 자체에 의한 발생원으로 나눌 수 있다. 이러한 미세먼지의 성분은 매우 복잡하고 다양하며, 입자의 크기, 표면적 및 화학적 조성에 따라 건강의 위험도가 달라지는 것으로 알려져 있다.
특히, 대기 중의 미세먼지는 호흡기 질환과 관련성이 높고, 단기적으로 폐염증 반응 및 호흡기 증상의 악화와 약 사용 증가, 병원 입원 및 사망률 증가를 초래하며, 장기적으로는 하기도 증상 증가, 폐기능 감소, 천식 및 만성 폐쇄성 폐질환(COPD) 환자의 악화 및 폐암을 증가시킨다.
최근 발표되는 미세먼지 관련 문헌들에서 미세먼지는 폐기능을 떨어뜨리고, 장기간 노출되면 폐 염증을 유발하는 것을 확인하였다. 또한 만성폐쇄성폐질환에 대하여 미세먼지 PM10의 농도가 증가할수록 COPD 입원환 자가 많아짐을 통해 관련성을 입증한바 있다. 천식에 대해서는 미세먼지 PM2.5 농도에서 유의성있는 결과를 확인하였으며, 장기적 노출에 대한 성인 천식 발생에서 통계적 유의성을 확인하였다. 미세먼지와 간질성 폐질환 그리고 특발성 폐섬유화증 등의 다양한 질환들에 대한 연관성이 지속적으로 연구되고 있는바, 미세먼지에 의해 유발된 호흡기와 폐 손상 및 염증을 완화시킬 수 있는 소재에 대한 필요성 역시 급증할 것으로 여겨진다.
미세먼지는 종래 세균이나 일시적인 중독 다른 구성의 기도 유입에 대한 호흡기 및 폐 손상과 달리 인체 면역력으로 퇴치할 수 없고, 미세먼지가 호흡기를 통해 유입되면 강제로 배출할 방법도 없으며, 이러한 손상으로 언제 어떤 문제가 발생할지 정확히 알지 못하고 있으므로, 미세먼지로 인해 유도된 기도와 폐의 손상을 예방, 완화, 치료 또는 개선할 수 있고, 이를 통해 유도된 호흡기 질환을 치료할 수 있는 새로운 치료제에 대한 요구가 절실한 실정이다.
이와 같은 미세먼지 유발 폐 염증에 관한 질환 및 이의 기전 등에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으나 기존 약물 치료의 한계점들이 지적되고 있다. 따라서, 미세먼지 유발 폐 염증을 효과적으로 치료, 개선하면서도 장기 손상이나 독성을 나타내지 않는 천연물 또는 천연물 유래 약물에 대한 필요성이 있다.
한편, 광대싸리는 이른 봄 부드러운 잎의 경우 나물로 식용하고, 잎, 줄기 및 뿌리는 약용에 사용하는데, 생약명은 일엽추(Securinega suffruticosa)라고 지칭한다. 일엽추는 맛이 맵고 쓰고 약성은 따듯하며 약효는 혈관을 튼튼하게 하여 혈액순환을 돕고 비장과 신장을 도와주며 류머티즘에 의한 요통, 사지마비, 반신불수, 안명신경마비, 소아마비 등의 후유증을 치료한다고 알려져 있다.
일엽추는 그 추출물이 골다공증 등에 억제 효과를 나타내는 점(특허문헌 0001)과 혈관 질환 등에 치료 효과를 나타내는 점(특허문헌 0002)이 공지된바 있으나, 미세먼지 유발 폐 염증의 치료, 완화 등에 대하여 효능이 있다는 점은 공개된바 없다.
이에 본 발명자들은 일엽추를 에탄올 및/또는 증류수로 열수 추출함으로써, 다량의 수용성 활성성분을 추출하였고, 이러한 일엽추 추출물이 미세먼지 유발 폐 염증을 개선, 완화 및 치료할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 개시한다.
여기서, 상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있다.
여기서, 상기 약학적 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 및 에어로졸로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균된 수용액의 형태로 제형화하여 사용되는 것일 수 있다.
한편, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 식품 조성물을 추가로 개시한다.
여기서, 상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있다.
여기서, 상기 일엽추 추출물은 전체 식품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함될 수 있다.
한편, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 의약외품 조성물을 추가로 개시한다.
여기서, 상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있다.
여기서, 상기 일엽추 추출물은 전체 의약외품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함될 수 있다.
한편, 상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 일엽추 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물의 제조방법을 추가로 개시한다.
본 발명의 유효성분인 일엽추 추출물은 미세먼지 유발 폐 염증의 완화, 개선 및 치료에 효과가 있음에 따라, 본 발명은 과도한 미세먼지 유발 폐 염증 질환의 발명 위험성을 감소시키고, 다양한 미세먼지 유발 폐 염증의 예방, 개선 및 치료용 의약, 식품, 의약외품 등으로 활용될 수 있다.
본 발명의 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물은 천연 소재인 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유함에 따라, 부작용이 적고 장기간 사용하더라도 내성이 생길 가능성이 낮은 효과가 있다.
도 1은 기관지폐포세척액을 이용하여 케모카인의 발현 측정 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 2는 웨스턴 블랏과 RT-Qpcr 실험을 통하여 사이토카인의 단백질 발현 측정 결과를 이미지 및 그래프로 도시한 것이다.
도 3은 웨스턴 블랏과 RT-qPCR 실험을 통하여 사이토카인의 mRNA 발현 측정 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 4는 면역조직화학염색법을 이용하여 실험 동물모델의 폐를 염색 촬영한 결과를 이미지로 도시한 것이다.
도 2는 웨스턴 블랏과 RT-Qpcr 실험을 통하여 사이토카인의 단백질 발현 측정 결과를 이미지 및 그래프로 도시한 것이다.
도 3은 웨스턴 블랏과 RT-qPCR 실험을 통하여 사이토카인의 mRNA 발현 측정 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 4는 면역조직화학염색법을 이용하여 실험 동물모델의 폐를 염색 촬영한 결과를 이미지로 도시한 것이다.
본 출원에서 사용하는 용어는 단지 특정한 예시를 설명하기 위하여 사용되는 것이다. 때문에 가령 단수의 표현은 문맥상 명백하게 단수여야만 하는 것이 아닌 한, 복수의 표현을 포함한다. 덧붙여, 본 출원에서 사용되는 "포함하다" 또는 "구비하다"등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 단계, 기능, 구성요소 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 명확히 지칭하기 위하여 사용되는 것이지, 다른 특징들이나 단계, 기능, 구성요소 또는 이들을 조합한 것의 존재를 예비적으로 배제하고자 사용되는 것이 아님에 유의해야 한다.
한편, 다르게 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진 것으로 보아야 한다. 따라서, 본 명세서에서 명확하게 정의하지 않는 한, 특정 용어가 과도하게 이상적이거나 형식적인 의미로 해석되어서는 안 된다.
본 발명에서 사용되는 용어, "폐 염증"은 폐에서 발생하는 모든 염증을 일컫으며, 세균이나 바이러스 등 급성 감염성에 의해 나타나게 되는 것들을 포함할 수 있다. 특히, 본 발명에서 사용되는 용어, '미세먼지 유발 폐 염증'은 먼지, 분진, 미세먼지 등의 대기오염으로 인한 물질에 장기간 노출됨에 따라 유발되는 폐의 염증을 의미할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"은 본 발명에 따른 약학적 조성물 또는 식품 조성물의 투여에 의해 염증반응을 억제시키거나 발명을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "치료"는 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 염증반응에 관한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다. 본 발명에 따른 식품 조성물은 염증반응의 예방 또는 개선을 위하여 해당 질환의 발병 단계 이전 또는 발병 후, 치료를 위한 약제와 동시에 또는 별개로서 사용될 수 있다.
본 발명은 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는, 미세먼지(Diesel exhaust particulate, DEP) 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 개시한다.
본 발명의 일엽추(Securinega suffruticosa)는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한없이 사용할 수 있으며, 상기 일엽추는 통상적인 추출 방법에 의해 얻을 수 있고, 시판되는 것을 구입하여 사용할 수 있다. 상기 추출물은 추출 처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들 조정제물 또는 정제물 중 어느 하나를 포함하는 것으로 한다.
상기 추출물을 제조하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출물을 제조하는 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법, 침지 추출법, 고온 및 고압 증기 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
또한, 본 발명의 일엽추 추출물은 친수성 용매(hydrophilic solvent)로 하여 추출된 것일 수 있다. 상기 친수성 용매는 물, C1 내지 C10의 알코올 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 알코올은 C1 내지 C10, C1 내지 C6 또는 C1 내지 C4의 하나 이상의 -OH기를 갖는 화합물일 수 있다. 상기 알코올은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올, sec-부탄올, 이소부탄올, tert-부탄올 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 나아가, 상기 일엽추 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출된 추출물인 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
나아가, 본 발명의 일엽추 추출물은 80 내지 120 ℃의 온도 범위에서 약 1 내지 3 시간동안 열수 추출하여 얻어지는 추출액인 것이 보다 바람직하다.
또한, 본 발명의 일엽추 추출물은 상기 추출물을 다시 한번 분획한 분획물을 포함하는 것이며, 상기 분획물을 추출물을 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 메탄올 및 물로부터 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 제조한 분획물일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 상기 유효성분 외에 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 이밖에 다른 약학적 활성 성분이나 활성 혼합물을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 패치제, 피복제, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 약학적 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 및 에어로졸로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균된 수용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
조성물에 포함 될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose) 또는 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (Witepsol), 마크로골, 트윈 (Tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 경피, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향료 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함한다.
한편, 본 발명은 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 식품 조성물을 추가로 개시한다. 나아가, 본 발명은 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 의약외품 조성물, 건강기능식품 등을 추가로 개시한다.
본 발명의 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물일 수 있다.
본 발명의 일엽추 추출물은 전체 식품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함될 수 있다.
본 발명의 일엽추 추출물은 전체 의약외품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 또는 식품 조성물은 일엽추 추출물을 단독 또는 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 포함할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 총 중량에 대하여 15 중량부 이하, 10 중량부 이하, 1중량 내지 15중량부, 1중량 내지 10중량부, 1중량 내지 5중량부, 또는 0.1중량 내지 15중량부의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다. 상기 식품 조성물은 예를 들어, 우유, 요플레 등의 식품 소재, 식음료, 기능성 식품으로 이용될 수 있다. 상기 식품 조성물은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 또한 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 또한, 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 이러한 첨가제는 조성물 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택될 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물은 질병에 대한 치료, 경감, 처치 또는 예방의 효과를 나타내나 의약품보다 인체에 미치는 작용이 경미한 물품을 의미한다. 약사법에 따른 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외하며, 보건복지부가 따로 정한 분류 기준에 의한 물품을 포함한다. 구체적으로 피부 외용제 또는 개인 위생용품일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물을 의약외품 조성물에 첨가할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.
한편, 본 발명은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 일엽추 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물의 제조방법을 추가로 개시한다.
중복되는 내용은 본 명세서의 복잡성을 고려하여 생략하며, 본 명세서에서 달리 정의되지 않은 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는 것이다.
이하, 첨부한 도면 및 실시예들을 참조하여 본 명세서가 청구하는 바에 대하여 더욱 자세히 설명한다. 다만, 본 명세서에서 제시하고 있는 도면 내지 실시예 등은 통상의 기술자에게 의하여 다양한 방식으로 변형되어 여러 가지 형태를 가질 수 있는 바, 본 명세서의 기재사항은 본 발명을 특정 개시 형태에 한정되는 것이 아니고 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 균등물 내지 대체물을 포함하고 있는 것으로 보아야 한다. 또한, 첨부된 도면은 본 발명을 통상의 기술자로 하여금 더욱 정확하게 이해할 수 있도록 돕기 위하여 제시되는 것으로서 실제보다 과장되거나 축소되어 도시될 수 있다.
{실시예 및 평가}
1. 연구배경
본 발명의 일엽추 (에탄올) 추출물은, 실험 동물 모델에 주기적으로 미세먼지를 노출시킨 후 유발된 폐에서의 염증 관련 인자들의 발현을 억제하여 미세먼지로 인한 호흡기 질환 및 염증을 억제하고 개선할 수 있음을 확인하였다.
본 실험에 사용된 일엽추는 Herbal Medicine (강원도 삼척 소재) 회사에서 구입하였으며, 일엽추의 줄기와 잎을 80% 에탄올에 일주일 동안 담근 후 농축 및 동결건조하여 사용하였다.
2. 실험예 (미세먼지 유발 폐 염증 동물 모델실험)
2.1. 실험디자인
본 실험에서는 8주령 수컷 SD rat에 미세먼지(Diesel exhaust particulate, DEP)를 20mg/kg/day의 양으로 노출시켜 폐 염증 동물 모델을 제작하였다. 실험이 진행되는 동안 온도(23±2℃), 습도(50~60%), 그리고 12시간 동안 암기와 명기 주기를 유지해 주었다. 적응기 5일을 거친 후, 다음과 같이 군을 나누었다.
① 비교예 1. control group (n = 10)
② 비교예 2. DEP group (20mg/kg/day, n = 10)
③ 실시예 1. DEP + 일엽추 에탄올 추출물(S.Suffruticosa, 100 mg/kg/day, n = 10)
④ 실시예 2. DEP + 일엽추 에탄올 추출물(S.Suffruticosa, 300 mg/kg/day, n = 10)
2.2 모델 제작 방법
SD rat에 미세먼지를 20mg/kg/day의 양으로 노출시켜 폐 염증 동물 모델을 제작하였다. 그 후 5일 뒤부터, 농축 및 동결건조된 일엽추 에탄올 추출물을 각각 100 및 300 mg/kg/day을 매일 식이 섭취하게 한 후 sacrifice를 진행하였다.
2.3. 실험방법
정상군, 비교군(폐 염증 유발군), 및 실험군(일엽추 에탄올 추출물 처리군)을 대상으로 ELISA 실험을 통해 케모카인 CXCL1, 2 발현을 측정하였고, 웨스턴 블랏과 RT-qPCR 실험을 통하여 사이토카인의 단백질 발현과 mRNA 발현을 측정하였으며, 면역조직화학염색법을 이용하여 실험 동물모델의 폐를 염색 촬영하였다.
3. 평가
3.1. 일엽추 에탄올 추출물의 투여에 의한 케모카인 발현 측정 평가
CXC-케모카인은 여러 폐 손상 모델에서 폐로의 호중구 모집에 관여한다고 기존의 연구를 통하여 입증되었다.
본 실험에서는 실험동물의 기관지폐포세척액 (bronchoalveolar lavage fluid)을 실험 동물 희생 후 수집한 후 ELISA 실험을 통하여 CXCL1, CXCL2 등의 케모카인의 발현을 측정하였다.
도 1은 기관지폐포세척액을 이용하여 케모카인의 발현 측정 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 1을 참조하면, 미세먼지에 노출된 동물모델에서의 염증 관여 인자인 케모카인 CXCL1, CXCL2의 발현이 증가되었으며 일엽추를 식이 섭취한 동물모델에서는 이러한 케모카인의 발현이 유의성 있게 감소하는 것을 확인할 수 있다.
3.2. 일엽추 에탄올 추출물의 투여에 의한 사이토카인 단백질 및 mRNA 발현 측정 평가
사이토카인은 신체의 방어체계를 제어하고 자극하는 신호물질로 사용되는 당단백질로 특히 미세먼지 노출에 대한 염증반응의 주요 매개체를 나타내는 것으로 알려져 있다.
도 2는 웨스턴 블랏과 RT-Qpcr 실험을 통하여 사이토카인의 단백질 발현 측정 결과를 이미지 및 그래프로 도시한 것이다.
도 3은 웨스턴 블랏과 RT-qPCR 실험을 통하여 사이토카인의 mRNA 발현 측정 결과를 그래프로 도시한 것이다.
도 2 및 3을 참조하면, 웨스턴 블랏(Western blot)과 RT-qPCR 실험을 통하여 사이토카인의 단백질 발현과 mRNA 발현을 측정한 결과, 미세먼지를 노출시킨 실험 동물 모델의 폐에서 interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor- a (TNF- a), mucin 5AC (Muc5AC) 과 같은 사이토카인의 단백질, mRNA의 발현이 증가되었으며, 일엽추를 식이 섭취한 그룹에서 유의성 있는 감소를 확인할 수 있다.
3.3. 일엽추 에탄올 추출물의 투여에 의한 사이토카인 발현 측정 평가
면역조직화학염색법을 이용하여 실험 동물모델의 폐를 염색 촬영하였다. 실험 동물 모델의 폐 조직을 10% 포름알데하이드에 고정시킨 후 6μm 절편으로 제작한 후 염색을 시행하였다.
도 4는 면역조직화학염색법을 이용하여 실험 동물모델의 폐를 염색 촬영한 결과를 이미지로 도시한 것이다.
도 4를 참조하면, 미세먼지 노출 동물모델의 폐 조직에서 발생한 사이토카인의 양이 증가하는 것을 확인하였으며, 일엽추를 식이 섭취한 그룹에서 사이토카인의 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있다.
본 실험을 통하여 일엽추를 투여하는 것은 미세먼지에 의하여 유발되는 폐 손상 및 폐 염증을 개선시키고 감소시키는 역할을 수행한다는 것을 확인하였다. 특히, 일엽추 추출물을 300 mg/kg/day의 농도로 투여하였을 때 미세먼지 유발 폐 염증의 개선 및 치료 효과가 매우 유의성 있게 효과를 나타내는 것을 확인하였다.
본 발명의 유효성분인 일엽추 추출물은 미세먼지 유발 폐 염증의 완화, 개선 및 치료에 효과가 있음에 따라, 본 발명은 과도한 미세먼지 유발 폐 염증 질환의 발명 위험성을 감소시키고, 다양한 미세먼지 유발 폐 염증의 예방, 개선 및 치료용 의약, 식품, 의약외품 등으로 활용될 수 있다.
본 발명의 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 조성물은 천연 소재인 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유함에 따라, 부작용이 적고 장기간 사용하더라도 내성이 생길 가능성이 낮은 효과가 있다.
이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 수정 및 변형이 가능할 것이다.
따라서, 본 발명에 개시된 실시예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (10)
- 일엽추 추출물을 유효성분으로 함유하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물인, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 및 에어로졸로 이루어진 군으로부터 선택된 1종의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균된 수용액의 형태로 제형화하여 사용되는 것을 특징으로 하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 제4항에 있어서,
상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물인, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 제4항에 있어서,
상기 일엽추 추출물은 전체 식품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함되는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 일엽추 추출물을 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 의약외품 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 일엽추 추출물은 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 추출물인, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 의약외품 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 일엽추 추출물은 전체 의약외품 조성물에 대해 0.01 내지 99.99% 중량비로 포함되는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 개선용 의약외품 조성물.
- 일엽추를 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 일엽추 추출물을 제조하는 단계;를 포함하는, 미세먼지 유발 폐 염증 예방 및 치료용 약학적 조성물의 제조방법.
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KR20210055383A (ko) | 2019-11-07 | 2021-05-17 | 원광대학교산학협력단 | 일엽추 추출물을 포함하는 혈관 질환의 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물 |
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- 2022-04-14 KR KR1020220046225A patent/KR20230147337A/ko unknown
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