KR20230136625A - 라파마이신 유사체 및 이의 용도 - Google Patents

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KR20230136625A
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데이비드 존 오'닐
에딘 샤이아
성 우 안토니 강
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얀센 파마슈티카 엔브이
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Abstract

본 발명은 화합물, 이의 조성물, 및 이를 사용하는 방법을 제공한다.

Description

라파마이신 유사체 및 이의 용도
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2021년 1월 22일자로 출원된 미국 가출원 제63/140,523호 및 2021년 6월 15일자로 출원된 미국 가출원 제63/202,524호에 대해 35 U.S.C. § 119(e) 하에 이익을 주장하며, 이들 각각의 개시내용은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
기술분야
본 발명은 mTORC1 활성을 조절하는 데 유용한 화합물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 제공된 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적으로 허용가능한 조성물 및 다양한 장애의 치료에서 그러한 조성물을 사용하는 방법을 제공한다.
mTOR 복합체 1(mTORC1)은 단백질, 지질 및 세포소기관의 생합성을 포함하여 다수의 동화작용 과정을 촉진함으로써, 그리고 자가포식과 같은 이화작용 과정을 제한함으로써 세포 성장 및 증식을 양성으로 조절한다. mTORC1 기능에 대한 지식의 많은 부분은 세균성 마크롤라이드 라파마이신의 사용으로부터 유래된다. 세포에 들어갈 때, 라파마이신은 12 kDa의 FK506-결합 단백질(FKBP12)에 결합하고, mTOR의 FKBP 12-라파마이신 결합 도메인(FRB)과 상호작용하여, mTORC1 기능을 억제한다(문헌[Guertin, D.A. & Sabatini, D.M. Cancer Cell 12(1): 9-22 (2007)]). mTORC1에 대한 효과와 대조적으로, FKBP12-라파마이신은 mTOR 복합체 2(mTORC2)와 물리적으로 상호작용하거나 격렬하게 억제할 수 없다(문헌[Janinto, E. et al., Nat. Cell Bio., 6(11): 1122-8 (2004)]; 문헌[Sarbassov, D.D. et al., Curr. Biol. 14(14): 1296-302 (2004)]). 이들 관찰에 기초하여, mTORC1 및 mTORC2는 각각 라파마이신-민감성 및 라파마이신-둔감성 복합체로서 특징지어졌다. 그러나, 만성 라파마이신 처리가 일부 경우에는 mTORC2 활성을 그의 조립을 차단함으로써 억제할 수 있기 때문에, 이러한 패러다임은 완전히 정확하지 않을 수 있다(문헌[Sarbassov, D.D. et al., Mol. Cell, 22(2): 159-68 (2006)]). 또한, 최근 보고는 중요한 mTORC1 기능이 라파마이신에 의한 억제에 내성이 있음을 시사한다(문헌[Choo, A.Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 105(45): 17414-9 (2008)]; 문헌[Feldman, M.E. et al., PLoS Biol., 7(2):e38 (2009)]; 문헌[Garcia-Martinez, J.M. et al., Biochem J., 421(1): 29-42 (2009)]; 문헌[Thoreen, C.C. et al., J. Biol. Chem., 284(12): 8023-32 (2009)]). 따라서, mTORC1의 선택적 억제는 단백질 합성 및 세포 대사의 조절장애를 수반하는 질환의 치료를 가능하게 할 것이다. 또한, mTORC1 활성화 경로를 조절하는 이러한 상세한 이해는, 이의 기능 범위에 걸쳐 mTORC1 활성을 조절함으로써 비정상적인 질환 과정을 조절하기 위한 새로운 전략의 발견을 허용할 것이다.
많은 질환은 전술한 바와 같이 이벤트에 의해 유발되는 비정상적인 세포 반응과 연관된다. 이러한 질환에는 자가면역 질환, 염증성 질환, 골질환, 대사 질환, 신경계 및 신경퇴행성 질환, 암, 심혈관 질환, 알레르기 및 천식, 알츠하이머병, 및 호르몬-관련 질환이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
라파마이신 복합체 1(mTORC1)의 기계론적 표적은 성장 인자, 세포 스트레스, 및 영양소 및 에너지 수준과 같은 다양한 환경 단서를 감지하는 마스터 성장 조절제이다. 활성화되면, mTORC1은 mRNA 번역 및 지질 합성과 같은 동화 과정을 강화하는 기질을 인산화하고, 자가포식과 같은 이화 과정을 제한한다. mTORC1 조절장애는 당뇨병, 간질, 신경변성, 면역 반응, 골격근 성장 억제, 암을 포함하여 광범위한 질환에서 발생한다(문헌[Howell, J.J. et al., Biochem. Soc. Trans., 41: 906-12 (2013)]; 문헌[Kim, S.G. et al., Molecular and cells, 35(6): 463-73 (2013)]; 문헌[Laplante, M. & Sabatini, D.M., Cell, 149(2): 274-93 (2012)]).
라파마이신은 초기에 이스터 섬의 토양 샘플로부터 스트렙토마이세스 하이그로스코피쿠스(Streptomyces hygroscopicus)에 의해 생성된 항진균 대사물로서 발견되었다. 이어서, 라파마이신은 포유류 세포에서 면역억제 및 항증식 특성을 갖는 것으로 밝혀져, 라파마이신의 작용 방식을 확인하는 데 관심을 갖게 되었다. 라파마이신은 S6K1 인산화의 강력한 억제제인 것으로 나타났다. 동시에, 라파마이신(TOR)의 표적이 효모 및 동물 세포에서 확인되었다. 라파마이신은 12 kDa FK506-결합 단백질(FKBP12)과 기능 이득 복합체를 형성하며, 이러한 복합체는 포유류 TOR(mTOR, 기계론적 TOR로도 알려짐) 복합체 1(mTORC1)의 알로스테릭 억제제로서 결합하고 특이적으로 작용한다.
mTOR의 생화학적 및 유전적 분석은 이것이 2개의 기능적으로 별개 복합체에 존재함을 입증하였다. mTORC1의 핵심 성분은 mTOR, mLST8(mammalian lethal with sec-13 protein 8), 및 TOR의 조절-관련 단백질(Raptor)로 이루어진다. 추가 성분은 DEP-도메인-함유 mTOR-상호작용 단백질(DEPTOR) 및 프롤린-풍부 Akt 기질 40 kDa(PRAS40)를 포함한다.
mTOR 복합체 2(mTORC2) 코어는 mTOR, mTOR의 라파마이신 둔감 동반물(Rictor), 스트레스-활성화 단백질 키나제-상호작용 단백질 1(mSIN1), 및 mLST8로 구성된다. Protor 1/2(protein observed with rictor 1/2) 및 DEPTOR은 추가 조절 성분이다. S6 키나제 분석 1(S6K1) 및 진핵 억제 인자 eIF4E 결합 단백질 1(4E-BP1)은 mTORC1의 2개의 잘-특징화된 기질인 반면, AKT는 mTORC2의 하나의 잘-특징화된 기질이다(문헌[Li, J. et al., Cell Met., 19(3):373-9 (2014)]).
FKBP12-라파마이신은 mTORC2에 결합하지 않기 때문에, 라파마이신은 초기에 mTORC1만 억제하는 것으로 생각된다(문헌[Sarbassov, D.D. et al., Curr. Biol., 14(14): 1296-302 (2004)]). 그러나, 2006년에, 라파마이신이 mTORC2의 조립과 기능을 억제하고 pAkt를 억제한다고 밝혀졌다(문헌[Sarbassov, D.D. et al., Molecular Cell, 22(2): 159-68 (2006)]). Akt의 S473(mTORC2 기질) 및 S6K1의 T389(mTORC1 기질)의 인산화에 대한 라파마이신의 영향을 여러 세포주에서 비교하였다. PC3, HEK-293T, HeLa 및 H460 세포에서 라파마이신으로 1시간 또는 24시간 처리하면 S6K1 인산화를 억제하였으며, mTORC1의 억제와 일치하였다. 라파마이신에 의한 S6K1의 선택적 억제는 Akt 인산화를 증가시켜야 하며, 실제로 이것은 HeLa 세포에 보고된 것이다. 그러나, PC3 세포에서, 약물은 Akt 인산화를 강하게 감소시켰고 이는 라파마이신이 이 세포주에서 선택적이지 않음을 시사한다. pAKT의 부분적 억제가 HEK-293T 세포에서 관찰된다. 세포주의 약 1/3에서 라파마이신은 Akt 인산화를 강력하게 또는 부분적으로 억제하는 반면 약물은 다른 세포주에서 Akt 인산화에 영향을 미치지 않거나 증가시켰다. 24시간 후 pAKT의 억제는 또한 내피 및 근육 세포를 포함하는 일차 및 비형질전환 세포주에서도 관찰된다. 라파마이신은 또한 생체내에서 pAkt를 억제하는 것으로 나타났는데, 이는 약물로 1주 동안 매일 처리한 마우스가 흉선, 지방 조직, 심장 및 폐에서 Akt 인산화를 감소시켰기 때문이다. 이러한 발견은 라파마이신에 의한 Akt 인산화의 억제가 일반적이며 정상 세포주, 암 세포주 및 생체내에서 발생한다는 것을 입증했다.
Sarbassov 등에 의해 라파마이신 및 그의 유사체(CCI 779, 에베롤리무스로도 알려진 RAD001, AP23573)는 특정 세포주 및 조직에서 mTORC2 기능을 억제할 수 있다고 결론지어졌다. Akt의 라파마이신 매개 억제는 약물의 부작용을 설명하는 데 도움이 될 수 있다. 예를 들어, 라파마이신은 인슐린 자극 Akt 활성이 지방 분해를 억제하는 데 중요한 역할을 하는 조직 유형인 지방 조직에서 Akt 인산화를 강력하게 억제한다. 지방세포에서 라파마이신에 의한 Akt의 억제는 인슐린이 존재하는 경우에도 지방분해가 높게 유지되도록 하여, 간에서 트리글리세리드를 생성하는 데 사용할 수 있는 혈장 내 유리 지방산 축적을 초래하여, 라파마이신으로 치료받은 환자에게서 일반적으로 보이는 고지혈증에 대한 분자 메커니즘을 제공한다.
Pereira 등(문헌[Mol Cell Endocrinol., 355(1): 96-105 (2012)])은 인간 공여자의 지방 생검을 통해 얻어진 지방세포에서 글루코스 흡수 및 인슐린 신호전달 단백질에 대한 라파마이신 효과를 탐구하였다. 치료 농도(0.01 μM)에서 라파마이신은 AKT(PKB) Ser473 인산화를 감소시켰고 손상된 인슐린 신호전달을 통해 인간 지방세포에서 포도당 흡수를 감소시켰다.
Lamming 등(문헌[Science., 335(6076): 1638-1643 (2012)])은 라파마이신이 생체내에서 mTORC2를 방해하고 mTORC2가 간 포도당신생합성의 인슐린-매개 억제에 필요하다는 것을 입증했다.
유사한 결과가 인간에서 나타났다. Di Paoloet 등은 인간에서 유사한 발견을 발표하였다(문헌[JASN, 17(8): 2236-2244 (2006)]). 연구의 주요 목적은 세포 성장 및 생존의 조절뿐만 아니라 영양분 및 성장 인자에 대한 세포 반응에서 라파마이신의 중요한 역할을 고려하여, 라파마이신에 대한 만성 노출이 AKT 활성화에 미치는 영향을 확인하는 것이었다. 이들은 mTOR 억제가 기저 및 인슐린 유발 AKT 인산화의 뚜렷한 하향조절과 관련이 있음을 발견했다. AKT는 주로 인슐린의 많은 대사 작용을 담당하며, 따라서 AKT 활성화의 저하가 신장 이식 수용자의 인슐린 저항성 증가와 유의미한 상관관계가 있다고 결론지었다.
Kennedy 등은 최근 대사와 노화에서 mTORC1과 mTORC2의 역할을 검토했다(문헌[Cell Metab., 23(6): 990-1003 (2016)]).
따라서, 직접적인 mTORC2 억제의 결여로 인해 개선된 안전성 및 내약성을 갖는 강력하고 mTORC1 특이적 억제제를 제공할 필요성이 남아있다.
이제 본 발명의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 억제제 mTORC1 억제제로서 효과적임이 밝혀졌다. 그러한 화합물은 하기 일반 화학식 I을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염이다:
I
상기 식에서, 각각의 R1, R2, R3, R3′, R4, R5, R5′, R6, L1, L2, X, X1, X2, 및 X3는 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
본 발명의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 mTORC1과 연관된, 다양한 질환, 장애 또는 병태를 치료하는데 유용하다. 그러한 질환, 장애 또는 병태는 본 명세서에 기재된 것들을 포함한다.
도 1은 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-59, I-57, 및 I-55로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 2는 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-69, I-66, I-64, 및 I-62 로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 3은 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-85, I-97, 및 I-83로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 4는 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-34, I-49, 및 I-31로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 5는 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-37, I-43, 및 I-40로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 6은 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-14로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 7은 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-4, I-27, 및 I-47로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 8은 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-9, 및 I-21로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
도 9는 24시간 동안 PC3 세포를 라파마이신 I-18, 및 I-45로 처리한 후에 수행된 웨스턴 블롯의 비교를 도시한다.
특정 실시형태의 상세한 설명
1. 본 발명의 특정 실시형태의 일반적인 설명
놀랍게도, 제공된 화합물이 장기간에 걸쳐 mTORC1을 억제하지만 mTORC2에 영향을 미치지 않는다(pAKT에 미치는 영향으로 측정됨)는 것이 발견되었다(예를 들어, 8시간, 24시간, 30시간, 및 48시간). 이러한 신규한 활성은 라파마이신과 그 유사체의 C-7 위치에서 충분히 커다란 기가 존재함을 전제로 한다. OMe(라파마이신에서 볼 수 있음), OEt, OBn과 같이 이 위치에서의 작은 치환은 24시간에 mTORC2에 대한 선택성을 부여하지 않는다. 중간 길이의 기, 예컨대 OCH2CH2OH 또는 OCH2CH2CH2OH는 24시간에 mTORC2에 대한 부분 선택성을 나타내지만, 여전히 약간의 억제 수준을 나타낸다. 비교하면, 본 발명의 것과 같은 더 큰 기는 pAKT의 영향에 의해 측정된 바와 같이 mTORC2에 대한 현저한 선택성을 제공한다.
이러한 치환의 위치는 또한 관찰된 선택성에 중요하다. 예를 들어, C-43 위치에서 더 큰 치환기의 도입은 본 출원에서 청구된 이러한 독특한 선택성 프로파일을 야기하지 않는다.
명확성을 위해, 라파마이신의 구조는 언급된 C-7 및 C-43 위치와 함께 하기에 재현된다.
라파마이신
일부 실시형태에서, 본 발명은 pS6K에 의해 측정된 바와 같은 강력한 mTORC1 억제제인 신규한 라파마이신 유사체를 제공한다. 라파마이신 및 에베롤리무스와는 달리, 이러한 화합물은 더 긴 시점(예, 24시간 및 48시간)에서 pAKT를 억제하지 않는다. 이들 화합물은 또한 라파마이신과 비교하여 개선된 용해도 및 개선된 약동학을 나타낸다.
본 발명에서 mTORC1의 억제제로서 사용되는 화합물의 활성은 시험관내, 생체내 또는 세포주에서 분석될 수 있다. 시험관내 검정은 mTORC1의 억제를 결정하는 분석을 포함한다. mTORC1의 억제제로서 본 발명에 이용되는 화합물을 분석하기 위한 상세한 조건은 당업자에게 잘 알려져 있다. 그러한 방법은 문헌[Liu et al., Cancer Research, 73(8): 2574-86 (2013)] 및 문헌[Liu et al., J. Biological Chemistry 287(13): 9742-52 (2012)]에 상세히 기술된다.
일 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
I
상기 식에서,
X 및 X3는 독립적으로 공유 결합, -CR2-, -NR-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, -O-, -S-, 또는 -SO2NR-이고;
L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -S(O)2-, -C(O)-, -C(S)-, -C(R)2-, -CH(R)-, -CF2-, -P(O)(R)-, -Si(R)2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
각각의 -Cy1-은 독립적으로 페닐렌, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴렌으로부터 선택된 임의로 치환된 2가 고리이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이거나, 또는
동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성하고;
L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
R1 및 R2는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR, -CN, -NO2, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고,
R3는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이고;
R3′는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이거나,
R3와 R3′는 함께 =O 또는 =S를 형성하고;
R4 및 R6는 독립적으로 수소, -OR, -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
R5와 R5′는 각각 수소이거나 함께 =O 또는 =NOR을 형성하고;
X1 및 X2는 각각 독립적으로 -CR2-, -S-, 또는 -S(O)-이고,
여기서 X1 및 X2 중 적어도 하나는 -CR2-이다.
2. 화합물 및 정의:
본 발명의 화합물은 본 명세서에 일반적으로 기술된 것들을 포함하며, 본 명세서에 개시된 부류, 하위부류 및 종에 의해 추가로 예시된다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, 달리 지시되지 않는 한 하기 정의가 적용될 것이다. 본 발명의 목적을 위해, 화학 원소는 원소 주기율표, CAS 버전, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed에 따라 식별된다. 추가적으로, 유기 화학의 일반적인 이론은 문헌["Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999], 및 문헌["March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001]에 기술되어 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참조로 포함된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "지방족" 또는 "지방족 기"는 완전 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하는 직쇄(즉, 비분지형) 또는 분지형, 치환 또는 비치환된 탄화수소 사슬, 또는 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하는 모노사이클릭 탄화수소, 또는 완전 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하지만 방향족(또한 "카르보사이클", "지환족" 또는 "사이클로알킬"로도 지칭됨)은 아니며, 분자의 나머지에 대한 단일 부착점을 갖는 바이사이클릭 탄화수소를 의미한다. 달리 명시되지 않는 한, 지방족 기는 1 내지 6개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 실시형태에서, 지방족 기는 1 내지 5개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시형태에서, 지방족 기는 1 내지 4개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시형태에서, 지방족 기는 1 내지 3개의 지방족 탄소 원자를 함유하고, 또 다른 실시형태에서, 지방족 기는 1 내지 2개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 실시형태에서, 지환족"(또는"카르보사이클"또는"사이클로알킬")은 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하지만 방향족이 아니며, 분자의 나머지 부분에 대한 단일 부착점을 갖는 모노사이클릭 C3-C6 탄화수소를 지칭한다. 적합한 지방족 기에는 선형 또는 분지형, 치환 또는 비치환된 알킬, 알케닐, 알키닐 기 및 이들의 하이브리드, 예컨대 (사이클로알킬)알킬, (사이클로알케닐)알킬 또는 (사이클로알킬)알케닐이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
용어 "헤테로원자"는 산소, 황, 질소, 인, 또는 규소(질소, 황, 인, 또는 규소의 임의의 산화된 형태 포함); 임의의 염기성 질소의 4차화된 형태 또는; 헤테로사이클릭 고리의 치환가능한 질소, 예를 들어 N (3,4-다이하이드로-2H-피롤릴에서), NH (피롤리디닐에서) 또는 NR+ (N-치환 피롤리디닐에서) 중 하나 이상을 의미한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "불포화"는 모이어티가 하나 이상의 불포화 단위를 갖는 것을 의미한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "2가 C1-8(또는 C1-6) 포화 또는 불포화, 직쇄 또는 분지형 탄화수소 사슬"은 본 명세서에 정의된 바와 같이 직쇄 또는 분지형인 2가 알킬렌, 알케닐렌, 및 알키닐렌 사슬을 지칭한다.
용어 "알킬렌"은 2가 알킬 기를 지칭한다. "알킬렌 사슬"은 폴리메틸렌 기, 즉 -(CH)2)n-이며, n은 양의 정수, 바람직하게는 1 내지 6, 1 내지 4, 1 내지 3, 1 내지 2, 또는 2 내지 3이다. 치환된 알킬렌 사슬은 하나 이상의 메틸렌 수소 원자가 치환기로 대체된 폴리메틸렌 기이다. 적합한 치환기는 치환된 지방족 기에 대해 하기에 기재된 것들을 포함한다.
용어 "알케닐렌"은 2가 알케닐 기를 지칭한다. 치환된 알케닐렌 사슬은 하나 이상의 수소 원자가 치환기로 대체된 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 폴리메틸렌 기이다. 적합한 치환기는 치환된 지방족 기에 대해 하기에 기재된 것들을 포함한다.
용어 "할로겐"은 F, Cl, Br, 또는 I를 의미한다.
"아르알킬", "아르알콕시" 또는 "아릴옥시알킬"에서와 같이 단독으로 또는 더 큰 모이어티의 일부로서 사용되는 용어 "아릴"은 총 5 내지 14개의 고리 구성원을 갖는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 고리 시스템을 지칭하며, 여기서 시스템 내의 적어도 하나의 고리는 방향족이고, 시스템 내 각각의 고리는 3 내지 7개의 고리 구성원을 함유한다. 용어 "아릴"은 용어 "아릴 고리"와 상호교환적으로 사용될 수 있다. 본 발명의 특정 실시형태에서, "아릴"은 하나 이상의 치환기를 가질 수 있는, 페닐, 바이페닐, 나프틸, 안트라실 등을 포함하지만 이로 한정되지 않는 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 또한 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "아릴"의 범주에는 방향족 고리가 하나 이상의 비-방향족 고리, 예컨대 인다닐, 프탈이미딜, 나프티미딜, 페난트리디닐, 또는 테트라하이드로나프틸 등에 융합된 기도 포함된다.
단독으로 또는 더 큰 모이어티의 일부로서 사용되는 용어 "헤테로아릴" 및 "헤테로아르-", 예를 들어 "헤테로아르알킬" 또는 "헤테로아르알콕시"는 5 내지 10개의 고리 원자, 바람직하게는 5, 6, 또는 9개의 고리 원자를 갖고; 환형 어레이에서 공유되는 6, 10, 또는 14개의 π 전자를 갖고; 탄소 원자에 더하여, 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 기를 지칭한다. 용어 "헤테로원자"는 질소, 산소 또는 황을 지칭하며, 질소 또는 황의 임의의 산화된 형태, 및 염기성 질소의 임의의 4차화된 형태를 포함한다. 헤테로아릴 기는, 제한 없이, 티에닐, 푸라닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트라이아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 아이속사졸릴, 옥사다이아졸릴, 티아졸릴, 아이소티아졸릴, 티아다이아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 인돌리지닐, 퓨리닐, 나프피리디닐, 및 프테리디닐을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "헤테로아릴" 및 "헤테로아르-"는 또한 헤테로방향족 고리가 하나 이상의 아릴, 지환족, 또는 헤테로사이클릴 고리에 융합되는 기를 포함하며, 여기서 라디칼 또는 부착점은 헤테로방향족 고리 상에 존재한다. 비제한적인 예는 인돌릴, 아이소인돌릴, 벤조티에닐, 벤조푸라닐, 다이벤조푸라닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤즈티아졸릴, 퀴놀릴, 아이소퀴놀릴, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 4H-퀴놀리지닐, 카르바졸릴, 아크리디닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라하이드로아이소퀴놀리닐, 및 피리도[2,3-b]-1,4-옥사진-3(4H)-온을 포함한다. 헤테로아릴 기는 모노- 또는 바이사이클릭일 수 있다. 용어 "헤테로아릴"은 용어 "헤테로아릴 고리", "헤테로아릴 기" 또는 "헤테로방향족"과 상호교환적으로 사용될 수 있으며, 이들 용어는 임의로 치환된 고리를 포함한다. 용어 "헤테로아르알킬"은 헤테로아릴에 의해 치환된 알킬 기를 지칭하며, 여기서 알킬 및 헤테로아릴 부분은 독립적으로 임의로 치환된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "헤테로사이클", "헤테로사이클릴", "헤테로사이클릭 라디칼", 및 "헤테로사이클릭 고리"는 상호교환적으로 사용되며, 상기 정의된 바와 같이, 포화되거나 부분적으로 불포화되고, 탄소 원자에 더하여, 하나 이상, 바람직하게는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 안정한 5원 내지 7원 모노사이클릭 또는 7원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로사이클릭 모이어티를 지칭한다. 헤테로사이클의 고리 원자와 관련하여 사용될 때, 용어 "질소"는 치환된 질소를 포함한다. 예로서, 산소, 황 또는 질소로부터 선택되는 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 포화 또는 부분 불포화 고리에서, 질소는 N (3,4-다이하이드로-2H-피롤릴에서), NH (피롤리디닐에서) 또는 +NR (N-치환 피롤리디닐에서)일 수 있다.
헤테로사이클릭 고리는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 그의 펜던트 기에 부착되어 안정한 구조를 생성할 수 있고 고리 원자들 중 임의의 것은 임의로 치환될 수 있다. 그러한 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 라디칼의 예에는, 제한 없이, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로티오페닐 피롤리디닐, 피페리디닐, 피롤리닐, 테트라하이드로퀴놀리닐, 테트라하이드로아이소퀴놀리닐, 데카하이드로퀴놀리닐, 옥사졸리디닐, 피페라지닐, 다이옥사닐, 다이옥솔라닐, 다이아제피닐, 옥사제피닐, 티아제피닐, 모르폴리닐, 및 퀴누클리디닐이 포함된다. 용어 "헤테로사이클", "헤테로사이클릴", "헤테로사이클릴 고리", "헤테로사이클릭 기", "헤테로사이클릭 모이어티" 및 "헤테로사이클릭 라디칼"은 본 명세서에서 상호교환적으로 사용되며, 또한 헤테로사이클릴 고리가 하나 이상의 아릴, 헤테로아릴 또는 지환족 고리에 융합된 기, 예컨대 인돌리닐, 3H-인돌릴, 크로마닐, 페난트리디닐, 또는 테트라하이드로퀴놀리닐을 포함한다. 헤테로사이클릴 기는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭(예를 들어, 가교된 바이사이클릭 또는 스피로사이클릭)일 수 있다. 용어 "헤테로사이클릴알킬"은 헤테로사이클릴에 의해 치환된 알킬 기를 지칭하며, 여기서 알킬 및 헤테로사이클릴 부분은 독립적으로 임의로 치환된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "부분 불포화"는 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 포함하는 고리 모이어티를 지칭한다. 용어 "부분 불포화"는 다수의 불포화 부위를 갖는 고리를 포함하는 것으로 의도되지만, 본 명세서에 정의된 바와 같이 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티를 포함하는 것으로 의도되지는 않는다.
본 명세서에 기재된 바와 같이, 본 발명의 화합물은 "임의로 치환된" 모이어티를 함유할 수 있다. 일반적으로, 용어 "치환된"은 지정된 모이어티의 하나 이상의 수소가 적합한 치환기로 대체됨을 의미한다. 달리 지시되지 않는 한, "임의로 치환된" 기는 기의 각각의 치환가능한 위치에서 적합한 치환기를 가질 수 있고, 임의의 주어진 구조에서 하나 초과의 위치가 명시된 기로부터 선택된 하나 초과의 치환기로 치환될 수 있을 때, 치환기는 모든 위치에서 동일하거나 상이할 수 있다. 본 발명에 의해 구상되는 치환기의 조합은 바람직하게는 안정하거나 화학적으로 실현 가능한 화합물의 형성을 초래하는 것이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "안정한"은 제조, 검출, 및 특정 실시형태에서, 그의 회수, 정제, 및 본 명세서에 개시된 목적들 중 하나 이상에 대한 이들의 사용을 허용하기 위해 조건을 적용될 때 실질적으로 변경되지 않는 화합물을 지칭한다.
"임의로 치환된" 기의 치환가능한 탄소 원자 상의 적합한 1가 치환기는 독립적으로 할로겐; -(CH2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O(CH2)0-4R°, -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH)0-4CH(OR°)2; -(CH2)0-4SR°; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4Ph; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1; R°로 치환될 수 있는 -CH=CHPh; R°로 치환될 수 있는 -(CH2)0-4O(CH2)0-1-피리딜; -NO2; -CN; -N3; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4C(O)OSiR°3; -(CH2)0-4OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-4SR-, SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)0-4S(O)2R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -P(O)2R°; -P(O)R°2; -OP(O)R°2; -OP(O)(OR°)2; SiR°3; -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)O-N(R°)2; 또는 -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)C(O)O-N(R°)2, 여기서 각각의 R°는 하기 정의된 바와 같이 치환될 수 있으며 독립적으로 수소, C1-6 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, -CH2-(5 내지 6원 헤테로아릴 고리), 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리, 또는 상기 정의에도 불구하고, R°의 2개의 독립적인 발생은 개재 원자(들)와 함께, 아래에 정의된 바와 같이 치환될 수 있는, 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개 헤테로원자를 갖는 3원 내지 12원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 모노- 또는 바이사이클릭 고리이다.
R° (또는 2개의 독립적 발생의 R°가 개재 원자와 함께 형성한 고리) 상의 적합한 1가 치환기는, 독립적으로 할로겐, -(CH2)0-2R, -(haloR), -(CH2)0-2OH, -(CH2)0-2OR, -(CH2)0-2CH(OR)2; -O(haloR), -CN, -N3, -(CH2)0-2C(O)R, -(CH2)0-2C(O)OH, -(CH2)0-2C(O)OR, -(CH2)0-2SR, -(CH2)0-2SH, -(CH2)0-2NH2, -(CH2)0-2NHR, -(CH2)0-2NR 2, -NO2, -SiR 3, -OSiR 3, -C(O)SR , -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)C(O)OR, 또는 -SSR이고, 여기서 각각의 R는 불포화이거나 "halo"가 앞에 오는 것은 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리로부터 선택된다. R°의 포화 탄소 원자 상의 적합한 2가 치환기는 =O 및 =S를 포함한다.
"임의로 치환된" 기의 포화 탄소 원자 상의 적합한 2가 치환기는 하기를 포함한다: =O, =S, =NNR* 2, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R* 2))2-3O-, 또는 -S(C(R* 2))2-3S-, 여기서 각각의 독립적인 발생의 R*은 수소, 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 불포화 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리로부터 선택된다. "임의로 치환된" 기의 인접한 치환가능한 탄소에 결합된 적합한 2가 치환기는 하기를 포함한다: -O(CR* 2)2-3O-, 여기서 각각의 독립적인 발생의 R*은 수소, 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 불포화 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리로부터 선택된다.
R*의 지방족 기 상의 적합한 치환기는 할로겐, -R, -(haloR), -OH, -OR, -O(haloR), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR, -NH2, -NHR, -NR 2, 또는 -NO2을 포함하며, 여기서 각각의 R는 불포화이거나 "halo"가 앞에 오는 것은 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리이다.
"임의로 치환된" 기의 치환가능한 질소 상의 적합한 치환기는 -R†, -NR† 2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2NR† 2, -C(S)NR† 2, -C(NH)NR† 2, 또는 -N(R†)S(O)2R†를 포함하고; 여기서 각각의 R†은 수소, 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 불포화 -OPh, 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 불포화 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리, 또는 상기 정의에도 불구하고, 2개의 독립적인 발생의 R†는 개재 원자(들)과 함께 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 불포화 3원 내지 12원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 모노- 또는 바이사이클릭 고리를 형성한다.
R†의 지방족 기에 적합한 치환기는 독립적으로 할로겐, -R, -(haloR), -OH, -OR, -O(haloR), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR, -NH2, -NHR, -NR 2, 또는 -NO2이며, 여기서 각각의 R는 불포화이거나 "halo"가 앞에 오는 것은 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph 또는 질소, 산소 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등이 없이 인간 및 하부 동물의 조직과 접촉하는 데 사용하기에 적합한, 확고한 의학적 판단의 범위 내에 있고, 합리적인 이익/위험비에 상응하는 염을 지칭한다. 약제학적으로 허용가능한 염은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, S. M. Berge 등은 문헌[J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19]에서 약학적으로 허용가능한 염을 상세히 기술하며, 상기 문헌은 본 명세서에 참조로 포함된다. 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 적합한 무기 및 유기 산 및 염기로부터 유래된 것들을 포함한다. 약제학적으로 허용가능한 비독성 산 부가 염의 예는 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산 및 과염소산과 같은 무기산으로, 또는 아세트산, 옥살산, 말레산, 타르타르산, 시트르산, 석신산 또는 말론산과 같은 유기산으로, 또는 이온 교환과 같은 당업계에 사용되는 다른 방법을 사용하여 형성된 아미노기의 염이다. 다른 약제학적으로 허용가능한 염은 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 시트레이트, 사이클로펜탄프로피오네이트, 다이글루코네이트, 도데실설페이트, 에탄설포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글리세로포스페이트, 글루코네이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시-에탄설포네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 설페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄설포네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, p-톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 발레레이트 염 등을 포함한다.
적절한 염기로부터 유래된 염은 알칼리 금속, 알칼리 토금속, 암모늄 및 N+(C1-4알킬)4 염을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속 염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘, 마그네슘 등을 포함한다. 추가의 약제학적으로 허용가능한 염은, 적절한 경우, 할라이드, 하이드록사이드, 카르복실레이트, 설페이트, 포스페이트, 니트레이트, 저급 알킬 설포네이트 및 아릴 설포네이트와 같은 반대 이온을 사용하여 형성된 비독성 암모늄, 4차 암모늄 및 아민 양이온을 포함한다.
달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 나타낸 구조를 갖는 화합물은 또한 이의 임의의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 수화물 및 다형체를 포함하는 것으로 의도된다.
달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 나타낸 구조를 갖는 화합물은 또한 구조의 모든 이성질체(예를 들어 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 및 기하학적(또는 입체형태) 이성질체) 형태; 예를 들어, 각각의 비대칭 중심에 대한 R 및 S 배위, Z 및 E 이중 결합 이성질체, 및 Z 및 E 입체형태 이성질체를 포함하는 것을 의미한다. 따라서, 본 화합물의 단일 입체화학 이성질체 및 거울상 이성질체, 부분입체 이성질체, 및 기하학적(또는 입체형태) 이성질체 혼합물은 본 발명의 범주 내에 있다. 달리 언급되지 않는 한, 본 발명의 화합물의 모든 호변 이성질체 형태는 본 발명의 범주 내에 있다. 또한, 달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 나타낸 구조는 또한 하나 이상의 동위원소 풍부 원자의 존재만 상이한 화합물을 포함하는 것을 의미한다. 예를 들어, 중수소 또는 삼중수소에 의한 수소의 대체, 또는 13C- 또는14 C-풍부 탄소에 의한 탄소의 대체를 포함하는 본 구조를 갖는 화합물은 본 발명의 범주 내에 있다. 이러한 화합물은 예를 들어 분석 도구로서, 생물학적 검정의 프로브로서, 또는 본 발명에 따른 치료제로서 유용하다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "측정가능한 친화도" 및 "측정가능하게 억제한다"는 본 발명의 화합물 또는 이의 조성물을 포함하는 샘플과, mTORC1, 상기 화합물 또는 이의 조성물의 부재 하에 mTORC1을 포함하는 등가의 샘플 사이의 mTORC1 활성의 측정가능한 변화를 의미한다.
3. 예시적인 실시형태의 설명
전술한 바와 같이, 특정 실시형태에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
I
상기 식에서,
X 및 X3는 독립적으로 공유 결합, -CR2-, -NR-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, -O-, -S-, 또는 -SO2NR-이고;
L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, -SiR2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
각각의 -Cy1-은 독립적으로 페닐렌, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴렌으로부터 선택된 임의로 치환된 2가 고리이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이거나, 또는
동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성하고;
L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
R1 및 R2는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR, -CN, -NO2, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고,
R3는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이고;
R3′는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이거나,
R3와 R3′는 함께 =O 또는 =S를 형성하고;
R4 및 R6는 독립적으로 수소, -OR, -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
R5와 R5′는 각각 수소이거나 함께 =O 또는 =NOR을 형성하고;
X1 및 X2는 각각 독립적으로 -CR2-, -S-, 또는 -S(O)-이고,
여기서 X1 및 X2 중 적어도 하나는 -CR2-이다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
I'
상기 식에서,
X 및 X3는 독립적으로 공유 결합, -CR2-, -NR-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, -O-, -S-, 또는 -SO2NR-이고;
L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, -SiR2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
각각의 -Cy1-은 독립적으로 페닐렌, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴렌으로부터 선택된 임의로 치환된 2가 고리이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이거나, 또는
동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성하고;
L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
R1 및 R2는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR, -CN, -(CR2)1-4NR2, -COR, -CONR2, -CONR(CR2)1-4NR2, -NO2, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, -P(O)R2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고,
R3는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이고;
R3′는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이거나,
R3와 R3′는 함께 =O 또는 =S를 형성하고;
R4 및 R6는 독립적으로 수소, -OR, -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
R5와 R5′는 각각 수소이거나 함께 =O 또는 =NOR을 형성하고;
X1 및 X2는 각각 독립적으로 -CR2-, -S-, 또는 -S(O)-이고,
여기서 X1 및 X2 중 적어도 하나는 -CR2-이다.
본 명세서 전반에 걸쳐 언급된 용어 "라파마이신" 및 이의 구조는 라파마이신 및 이의 유사체를 포함하는 것으로 의도됨을 이해할 것이다.
본 명세서에 언급된 라파마이신의 유사체(즉, 라팔로그)는 예시를 위한 것이며 본 발명을 제한하도록 의도되지 않는다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, X 및 X3는 독립적으로 공유 결합, -CR2-, -NR-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, -O-, -S-, 또는 -SO2NR-이다.
일부 실시형태에서, X는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, X는 -CR2-이다. 일부 실시형태에서, X는 -NR-이다. 일부 실시형태에서, X는 -NRCO-이다. 일부 실시형태에서, X는 -NRCO2-이다. 일부 실시형태에서, X는 -NRCONR-이다. 일부 실시형태에서, X는 -NRSO2-이다. 일부 실시형태에서, X는 -O-이다. 일부 실시형태에서, X는 -S-이다. 일부 실시형태에서, X는 -SO2NR-이다.
일부 실시형태에서, X3는 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, X3는 -CR2-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -NR-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -NRCO-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -NRCO2-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -NRCONR-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -NRSO2-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -O-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -S-이다. 일부 실시형태에서, X3는 -SO2NR-이다.
일부 실시형태에서, X는 비대칭 기, 예컨대 -NRCO-, -NRCO2-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-이고, X는 -NRCOL1-, -NRCO2L1-, -NRSO2L1-, 및 -SO2NRL1-로서 L1에 결합한다.
일부 실시형태에서, X3는 비대칭 기, 예컨대 -NRCO-, -NRCO2-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-이고, X3는 -NRCOR2, -NRCO2R2, -NRSO2R2, 및 -SO2NRR2로서 R2에 결합한다.
일부 실시형태에서, X 및 X3는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, -SiR2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L1은 공유 결합이다. 일부 실시형태에서, L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, -SiR2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L1은 -CH2-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -(CH2)3-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -(CH2)4-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -(CH2)5-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2O-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -(CH2CH2O)2-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -(CH2CH2O)3-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2OCH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2SO2CH2CH2O-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-이다. 일부 실시형태에서, L1은 -CH2CH2OCH2CH2-이다.
일부 실시형태에서, L1은 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, 각각의 -Cy1-은 독립적으로 페닐렌, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴렌으로부터 선택된 임의로 치환된 2가 고리이다.
일부 실시형태에서, -Cy1-은 페닐렌으로부터 선택되는 임의로 치환된 2가 고리이다. 일부 실시형태에서, -Cy1-은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌이다. 일부 실시형태에서, -Cy1-은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5원 내지 6원 헤테로아릴렌이다.
일부 실시형태에서, -Cy1-은 이다.
일부 실시형태에서, -Cy1-은 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, 각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이거나, 또는 동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R은 수소이다. 일부 실시형태에서, R은 임의로 치환된 C1-6 지방족이다. 일부 실시형태에서, R은 C1-6 할로알킬이다. 일부 실시형태에서, R은 임의로 치환된 3원 내지 8원 포화 또는 부분적으로 불포화된 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 임의로 치환된 페닐일 수 있다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R은 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리이다. 일부 실시형태에서, 동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성한다.
일부 실시형태에서, R은 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체된다.
일부 실시형태에서, L2는 이다.
일부 실시형태에서, L2는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, R1 및 R2는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR, -CN, -(CR2)1-4NR2, -COR, -CONR2, -CONR(CR2)1-4NR2, -NO2, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, -P(O)R2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택되는 임의로 치환된 기이다.
일부 실시형태에서, R1은 수소이다. 일부 실시형태에서, R1은 할로겐이다. 일부 실시형태에서, R1은 -OR이다. 일부 실시형태에서, R1은 -CN이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NO2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NR2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NR(C1-6 할로알킬)이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NRCOR이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NRCO2R이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NRCONR2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NRSO2R이다. 일부 실시형태에서, R1은 -SR이다. 일부 실시형태에서, R1은 -SO2NR2이다. 일부 실시형태에서, R1은 임의로 치환된 C1-6 알킬이다. 일부 실시형태에서, R1은 임의로 치환된 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 임의로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R1은 임의로 치환된 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R1은 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R1은 메틸이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NH2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NHMe이다. 일부 실시형태에서, R1은 -NMe2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -CH2CF3이다. 일부 실시형태에서, R1은 -SO2-NH2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -CONH2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -CONMe2이다. 일부 실시형태에서, R1은 -OCONHMe이다. 일부 실시형태에서, R1은 -CO2H이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다. 일부 실시형태에서, R1은 이다.
일부 실시형태에서, R2는 수소이다. 일부 실시형태에서, R2는 할로겐이다. 일부 실시형태에서, R12는 -OR이다. 일부 실시형태에서, R2는 -CN이다. 일부 실시형태에서, R2는 -(CR2)1-4NR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -COR이다. 일부 실시형태에서, R2는 -CONR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -CONR(CR2)1-4NR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NO2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NR(C1-6 할로알킬)이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NRCOR이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NRCO2R이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NRCONR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -NRSO2R이다. 일부 실시형태에서, R2는 -SR이다. 일부 실시형태에서, R2는 -SO2NR2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -P(O)R2이다. 일부 실시형태에서, R2는 임의로 치환된 C1-6 지방족이다. 일부 실시형태에서, R2는 임의로 치환된 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R2는 임의로 치환된 페닐이다. 일부 실시형태에서, R2는 임의로 치환된 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R2는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R2는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리이다. 일부 실시형태에서, R2는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리이다. 일부 실시형태에서, R2는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 임의로 치환된 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리이다.
일부 실시형태에서, R2는 메틸이다. 일부 실시형태에서, R2는 -CHF2이다. 일부 실시형태에서, R2는 -CF3이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다.
일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다.
일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다. 일부 실시형태에서, R2는 이다.
일부 실시형태에서, R1 및 R2는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, R3는 수소, 할로겐, -OR, 또는 -OSiR3이다.
일부 실시형태에서, R3는 수소이다. 일부 실시형태에서, R3는 할로겐이다. 일부 실시형태에서, R3는 -OR이다. 일부 실시형태에서, R3는 -OSiR3이다.
일부 실시형태에서, R3는 -OMe이다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, R3′는 수소, 할로겐, -OR, 또는 -OSiR3이다.
일부 실시형태에서, R3는 수소이다. 일부 실시형태에서, R3는 할로겐이다. 일부 실시형태에서, R3는 -OR이다. 일부 실시형태에서, R3는 -OSiR3이다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, 일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 함께 =O 또는 =S를 형성한다.
일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 함께 =O를 형성한다. 일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 함께 =S를 형성한다.
일부 실시형태에서, R3 및 R3'는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, R4 및 R6는 독립적으로 수소, -OR, -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이다.
일부 실시형태에서, R4는 수소이다. 일부 실시형태에서, R4는 -OR이다. 일부 실시형태에서, R4는 -NR2이다. 일부 실시형태에서, R4는 -NRCOR이다. 일부 실시형태에서, R4는 -NRCO2R이다. 일부 실시형태에서, R4는 -NRCONR2이다. 일부 실시형태에서, R4는 -NRSO2R이다. 일부 실시형태에서, R4는 -SR이다. 일부 실시형태에서, R4는 -SO2NR2이다. 일부 실시형태에서, R4는 임의로 치환된 C1-6 지방족이다.
일부 실시형태에서, R4는 -OH이다. 일부 실시형태에서, R4는 -OMe이다.
일부 실시형태에서, R6는 수소이다. 일부 실시형태에서, R6는 -OR이다. 일부 실시형태에서, R6는 -NR2이다. 일부 실시형태에서, R6는 -NRCOR이다. 일부 실시형태에서, R6는 -NRCO2R이다. 일부 실시형태에서, R6는 -NRCONR2이다. 일부 실시형태에서, R6는 -NRSO2R이다. 일부 실시형태에서, R6는 -SR이다. 일부 실시형태에서, R6는 -SO2NR2이다. 일부 실시형태에서, R6는 임의로 치환된 C1-6 지방족이다.
일부 실시형태에서, R6는 -OMe이다.
일부 실시형태에서, R4 및 R6는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, R5 및 R5'는 각각 수소이거나, 또는 함께 =O 또는 =NOR을 형성한다.
일부 실시형태에서, R5는 수소이다. 일부 실시형태에서, R5′는 수소이다. 일부 실시형태에서, R5 및 R5′는 함께 =O를 형성한다. 일부 실시형태에서, R5 및 R5′는 함께 =NOR을 형성한다.
일부 실시형태에서, R5 및 R5′는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
상기에 정의되고 본 명세서에 기재된 바와 같이, X1 및 X2는 각각 독립적으로 -CR2-, -S-, 또는 -S(O)-이고, 여기서 X1 및 X2 중 적어도 하나는 -CR2-이다.
일부 실시형태에서, X1은 -CR2-이다. 일부 실시형태에서, X1은 -S-이다. 일부 실시형태에서, X1은 -S(O)-이다. 일부 실시형태에서, X2는 -CR2-이다. 일부 실시형태에서, X2는 -S-이다. 일부 실시형태에서, X2는 -S(O)-이다.
일부 실시형태에서, X1 및 X2는 표 1의 화합물에 도시된 것들로부터 선택된다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이며, 이에 의해 화학식 I-a-1의 화합물을 제공한다:
I-a-1
상기 식에서,
X는 -CR2-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-이고;
각각의 X3, R1, R2, R3, R3′, R4, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이며, 이에 의해 화학식 I-a-2의 화합물을 제공한다:
I-a-2
상기 식에서,
X3는 -CR2-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-이고;
각각의 X, R1, R2, R3, R3′, R4, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이며, 이에 의해 화학식 I-a-3의 화합물을 제공한다:
I-a-3
상기 식에서,
R4는 -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
각각의 X, X3, R1, R2, R3, R3′, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이며, 이에 의해 화학식 I-a-4의 화합물을 제공한다:
I-a-4
상기 식에서,
R6는 -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
각각의 X, X3, R1, R2, R3, R3′, R4, R5, R5′, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이고, X3는 공유 결합이고, R2는 수소이며, 이에 의해 화학식 I-b-1의 화합물을 제공한다:
I-b-1
상기 식에서,
각각의 X, R1, R3, R3′, R4, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이고, R3는 -OMe이고, R3′는 수소이며, 이에 의해 화학식 I-b-2의 화합물을 제공한다:
I-b-2
상기 식에서,
각각의 X, X3, R1, R2, R4, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
특정 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서 아래에 제시된 바와 같이 X1은 -CH2-이고, X2는 -CH2-이고, L2는 이고, X3는 -O-이고, R2는 이며, 이에 의해 화학식 I-b-3의 화합물을 제공한다:
I-b-3
상기 식에서,
각각의 X, R1, R3, R3′, R4, R5, R5′, R6, 및 L1은, 개별적으로 및 조합하여, 본 명세서에 정의되고 기재된 바와 같다.
라파마이신은 상표명 Rapamune®(일반명 시롤리무스)으로 시판되며 항증식 및 면역억제 활성에 대해 잘 알려져 있다. 라파마이신은 이식 거부 예방용 및 재협착을 예방하기 위한 스텐트 코팅용으로 FDA 승인을 받았다. 라파마이신의 문서화된 이점 외에도 라파마이신이 다수의 심각한 부작용과 관련되어 있다는 것은 잘 알려져 있다. 이러한 부작용으로는 포도당 내성 감소 및 인슐린 민감성 저하와 같은 당뇨병 유사 증상을 포함한다. 또한, 라파마이신은 Akt 신호전달 경로(Akt 및 ERK의 활성화 포함)를 활성화하여 환자의 암 위험을 증가시키는 것으로 보고되었다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "라파마이신 단독"이라는 어구는 본 발명의 화합물을, 대안으로서 라파마이신 또는 이의 유사체, 예컨대 에베롤리무스와 비교하기 위한 것이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I 또는 I'는 라파마이신 단독보다 더욱 효과적이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I-a-1 내지 I-a-5는 라파마이신 단독보다 더욱 효과적이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I-b-1 내지 I-b-3는 라파마이신 단독보다 더욱 효과적이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I 또는 I'의 화합물은 환자에게 투여될 때, 라파마이신이 투여될 때보다 더 많은 및/또는 더 적은 중증도의 부작용을 초래한다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I-a-1 내지 I-a-5의 화합물은 환자에게 투여될 때, 라파마이신이 투여될 때보다 더 많은 및/또는 더 적은 중증도의 부작용을 초래한다.
일부 실시형태에서, 제공된 화학식 I-b-1 내지 I-b-3의 화합물은 환자에게 투여될 때, 라파마이신이 투여될 때보다 더 많은 및/또는 더 적은 중증도의 부작용을 초래한다.
본 발명의 예시적인 화합물은 하기 표 1에 제시되어 있다.
[표 1]
일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 표 1에 제시된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 발명은 상기 표 1에 제시된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체 이성질체, 호변 이성질체 및 다형체를 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 발명은 하나 이상의 수소가 중수소에 의한 대체된 것을 포함하여 상기 표 1에 제시된 화합물을 제공한다. 본 발명은 또한 C7 위치에서의 라세미 혼합물로서 상기 표 1에 제시된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다. 또한, C7 하이드록실 위치에서의 라세미 혼합물로서 상기 표 1에 제시된 화합물은 다양한 방법, 예를 들어 키랄 크로마토그래피에 의해 부분입체 이성질체로 분리될 수 있다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하며, 여기서
L2가 이고;
R3 및 R3′가 수소이고;
R5 및 R5′가 함께 =O를 형성하고;
X1 및 X2가 둘 모두 -CH2-인 경우,
-X-L1-R1, -X3-R2, R4, 및 R6는 표 1A의 각 행에서 하기에 제시된 조합 이외의 조합으로 존재한다.
[표 1A]
일부 실시형태에서, 본 발명은 화합물이 표 1A의 화합물 중 하나 이상이 아닌 화학식 I 또는 I'의 화합물을 제공한다. 일부 실시형태에서, 본 발명은 하나 이상의 수소가 중수소로 대체된, 상기 표 1A의 화합물을 제외한 화학식 I 또는 I'의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체 이성질체, 호변 이성질체 및 다형체를 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 화학식 I 또는 I'의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체 이성질체, 호변 이성질체 및 다형체를 제공하며, 여기서
L2가 이고;
R3 및 R3′가 수소이고;
R5 및 R5′가 함께 =O를 형성하고;
X1 및 X2가 둘 모두 -CH2-인 경우,
-X-L1-R1, -X3-R2, R4, 및 R6는 표 1A의 각 행에서 하기에 제시된 조합 이외의 조합으로 존재한다.
4. 용도, 제형 및 투여
약제학적으로 허용가능한 조성물
다른 실시형태에 따르면, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 유도체 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 애쥬번트, 또는 비히클을 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물 중의 화합물의 양은, 생물학적 샘플 또는 환자에서 mTORC1을 측정가능하게 억제하는 데 효과적이도록 하는 양이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물 중의 화합물의 양은, 생물학적 샘플 또는 환자에서 mTORC1을 측정가능하게 억제하는 데 효과적이도록 하는 양이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 이러한 조성물을 필요로 하는 환자에게 투여하기 위해 제형화된다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 환자에게 경구 투여를 위해 제형화된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "환자"는 동물, 바람직하게는 포유류, 가장 바람직하게는 인간을 의미한다.
용어 "약제학적으로 허용가능한 담체, 애쥬번트 또는 비히클"은 제형화된 화합물의 약리학적 활성을 파괴하지 않는 비독성 담체, 애쥬번트 또는 비히클을 지칭한다. 본 발명의 조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용가능한 담체, 애쥬번트 또는 비히클은 이온 교환체, 알루미나, 스테아르산알루미늄, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 인산염과 같은 완충 물질, 글리신, 소르브산, 포타슘 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세라이드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예컨대 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 염화나트륨, 아연 염, 콜로이드 실리카, 마그네슘 트라이실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모지를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물은 경구, 비경구, 흡입 분무에 의해, 국소, 직장내, 비강내, 구강내, 질내 또는 이식된 저장소를 통해 투여될 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "경구"는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액내, 흉골내, 척수강내, 간내, 병변내 및 두개내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 바람직하게는, 조성물은 경구, 복강내 또는 정맥내로 투여된다. 본 발명의 조성물의 멸균 주사용 형태는 수성 또는 유성 현탁액일 수 있다. 이들 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사용 제제는 또한 무독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중 멸균 주사용 용액 또는 현탁액, 예를 들어, 1,3-부탄다이올 중 용액일 수 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 게다가, 멸균 고정유가 용매 또는 현탁 매체로서 통상적으로 사용된다.
이러한 목적으로, 합성 모노- 또는 다이글리세라이드를 포함하는 임의의 무자극성(bland) 고정유가 사용될 수 있다. 올레산 및 이의 글리세라이드 유도체와 같은 지방산은 올리브유 또는 피마자유와 같은 천연 약제학적으로-허용가능한 오일, 특히 그의 폴리옥시에틸화 버전에서와 같이 주사제의 제조에 유용하다. 이러한 오일 용액 또는 현탁액은 또한 에멀젼 및 현탁액을 포함하는 약제학적으로 허용가능한 투여 형태의 제형에 일반적으로 사용되는, 카르복시메틸 셀룰로오스 또는 유사한 분산제와 같은 장쇄 알코올 희석제 또는 분산제를 함유할 수 있다. 다른 통상 사용되는 계면활성제, 예컨대 Tweens, Spans 및 다른 유화제 또는 약제학적으로 허용가능한 고체 또는 다른 투여 형태의 제조에 통상 사용되는 생체이용률 향상제가 제형화를 위해 또한 사용될 수 있다.
본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 캡슐, 정제, 수성 현탁액 또는 용액을 포함하지만 이로 한정되지 않는 임의의 경구용으로 허용가능한 투여 형태로 경구 투여될 수 있다. 경구용 정제의 경우, 통상 사용되는 담체는 락토스 및 옥수수 전분을 포함한다. 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트가 또한 전형적으로 첨가된다. 캡슐 형태의 경구 투여의 경우, 유용한 희석제는 락토스 및 건조된 옥수수 전분을 포함한다. 경구 사용을 위해 수성 현탁액이 요구될 때, 활성 성분은 유화제 및 현탁화제와 배합된다. 필요하다면, 소정의 감미제, 향미제 또는 착색제가 또한 첨가될 수 있다.
대안적으로, 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 직장내 투여를 위한 좌제 형태로 투여될 수 있다. 이들은, 실온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체이며, 이에 따라 직장 내에서 융해되어 약물을 방출하게 될 적합한 무자극성 부형제와 작용제를 혼합함으로써 제조될 수 있다. 그러한 물질은 코코아 버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 또한 국소 투여될 수 있으며, 치료의 표적이 눈, 피부, 또는 하부 장관의 질병을 포함한, 국소 적용에 의해 용이하게 접근가능한 부위 또는 기관을 포함할 때 특히 그러하다. 적합한 국소 제형이 이들 영역 또는 기관 각각에 대해 용이하게 제조된다.
하부 장관을 위한 국소 적용이 직장 좌제 제형(상기 참조) 또는 적합한 관장 제형에서 달성될 수 있다. 국소-경피 패치가 또한 사용될 수 있다.
국소 적용을 위해, 약제학적으로 허용가능한 조성물은 하나 이상의 담체 중에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 연고로 제형화될 수 있다. 본 발명의 화합물의 국소 투여를 위한 담체는 광유, 액체 바셀린, 백색 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스 및 물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 대안적으로, 약제학적으로 허용가능한 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 중에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적합한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체는 광유, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데칸올, 벤질 알코올 및 물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
안과용 용도의 경우, 제공되는 약제학적으로 허용가능한 조성물은, 염화벤잘코늄과 같은 방부제와 함께 또는 없이 등장성의 pH 조정된 멸균 식염수 중의 용액으로서, 등장성의 pH 조정된 멸균 식염수 중에 미분화된 현탁액으로서 제형화될 수 있다. 대안적으로, 안과용 용도의 경우, 약제학적으로 허용가능한 조성물은 페트롤라툼과 같은 연고로 제형화될 수 있다.
본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 또한 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 그러한 조성물은 약제학적 제형의 기술분야에 잘 알려진 기법에 따라 제조되고, 벤질 알코올 또는 다른 적합한 방부제, 생체이용률을 향상시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로카본, 및/또는 다른 통상적인 가용화제 또는 분산제를 사용하여, 식염수 중 용액으로서 제조될 수 있다.
가장 바람직하게는, 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 경구 투여를 위해 제형화된다. 그러한 제형은 식품과 함께 또는 식품 없이 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 식품 없이 투여된다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 식품과 함께 투여된다.
단일 투여 형태의 조성물을 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 본 발명의 화합물의 양은 처리된 숙주, 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 바람직하게는, 제공된 조성물은 억제제의 0.01 내지 100 mg/kg/일의 투여량이 이들 조성물을 투여받는 환자에게 투여될 수 있도록 제형화되어야 한다.
또한, 임의의 특정 환자에 대한 특정 투여량 및 치료 요법은, 사용되는 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반 건강, 성별, 식이, 투여 시간, 배출 속도, 약물 조합, 및 치료 의사의 판단 및 치료하는 특정 질환의 중증도를 포함하는 다양한 요인에 따라 좌우될 것임을 이해해야 한다. 조성물 중의 본 발명의 화합물의 양은 또한 조성물 중의 특정 화합물에 따라 좌우될 것이다.
화합물 및 약제학적으로 허용가능한 조성물의 용도
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본 명세서에 기재된 바와 같이 질환 또는 장애, 또는 이의 하나 이상의 증상의 역전, 완화, 발병 지연 또는 진행 억제를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발생한 후에 투여될 수 있다. 다른 실시형태에서, 치료는 증상의 부재 하에 투여될 수 있다. 예를 들어, 치료는 증상의 개시(예를 들어, 증상의 이력 및/또는 유전적 또는 다른 민감성 인자의 관점) 전에 민감한 개체에게 투여될 수 있다. 증상이 해결된 후에, 예를 들어 그의 재발을 방지하거나 지연시키기 위해 치료가 또한 계속될 수 있다.
제공된 화합물은 mTORC1의 억제제이며, 따라서 mTORC1의 활성과 관련된 하나 이상의 장애를 치료하는 데 유용하다. 따라서, 특정 실시형태에서, 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 본 발명은 mTORC1-매개 장애를 치료하는 방법을 제공한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "mTORC1-매개" 장애, 질환 및/또는 병태는 mTORC1이 역할을 하는 것으로 알려져 있는 임의의 질환 또는 다른 유해한 병태를 의미한다. 따라서, 본 발명의 또 다른 실시형태는 mTORC1이 역할을 하는 것으로 알려져 있는 하나 이상의 질환의 중증도를 치료 또는 감소시키는 것에 관한 것이다. 특정 실시형태에서, mTORC1-매개 장애, 질환 및/또는 병태는 문헌[Matt Kaeberlin, Scientifica, vol. 2013, Article ID 849186]에 의해 기재된 것들로부터 선택된다.
본 명세서에 기재된 방법은 대상체에서 암의 치료 방법을 포함한다. 이 맥락에서 사용되는 바와 같이, "치료하는"은 암의 적어도 하나의 증상 또는 임상 파라미터를 개선하거나 향상시키는 것을 의미한다. 예를 들어, 치료는 종양 크기 또는 성장 속도의 감소를 초래할 수 있다. 치료는 모든 대상체에서 암을 치유하거나 시간의 차도 100%를 야기할 필요는 없다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "암"은 자율 성장, 즉 신속하게 증식하는 세포 성장을 특징으로 하는 비정상적인 상태 또는 병태에 대한 역량을 갖는 세포를 지칭한다. 상기 용어는 조직병리학적 유형 또는 침습성의 병기와 무관하게 모든 유형의 암성 성장 또는 발암성 과정, 전이성 조직 또는 악성종양으로 변환된 세포, 조직, 또는 기관을 포함하는 것으로 의미된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "종양"은 암성 세포, 예를 들어 암 세포 덩어리를 지칭한다.
본 명세서에 기재된 방법을 사용하여 치료 또는 진단될 수 있는 암은 폐, 유방, 갑상선, 림프구, 위장관 및 비뇨생식기에 영향을 미치는 다양한 기관계의 악성종양, 뿐만 아니라 대부분의 결장암, 신장 세포 암종, 전립선암 및/또는 고환 종양, 비소세포 폐 암종, 소장 암 및 식도 암과 같은 악성종양을 포함하는 선암종을 포함한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 방법은 대상체에서 암종을 치료 또는 진단하는 데 사용된다. 용어 "암종"은 당업계에 인식되어 있고 호흡계 암종, 위장계 암종, 비뇨생식계 암종, 고환 암종, 유방 암종, 전립선 암종, 내분비계 암종, 및 흑색종을 포함하는 상피 또는 내분비 조직의 악성종양을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 암은 신장 암종 또는 흑색종이다. 예시적인 암종은 자궁경부, 폐, 전립선, 유방, 두경부, 결장 및 난소의 조직으로부터 형성되는 것들을 포함한다. 상기 용어는 또한 암육종을 포함하고, 예를 들어 이는 암종성 및 육종성 조직으로 구성된 악성 종양을 포함한다. "선암종"은 선상 조직으로부터 유래된 암종 또는 종양 세포가 인식가능한 선상 구조를 형성하는 암종을 지칭한다.
용어 "육종"은 당업계에 인식되어 있으며, 중간엽 유래의 악성 종양을 지칭한다.
일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 방법에 의해 치료되는 암은 증가된 수준의 mTORC1을 갖거나 정상 조직 또는 동일한 조직의 다른 암에 비해 mTORC1의 발현 또는 활성 증가를 갖는 암이며; 당업계에 공지되고 본 명세서에 기재된 방법은 이러한 암을 식별하는 데 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 본 방법은 암의 세포를 포함하는 샘플을 수득하는 단계, 샘플에서 mTORC1 활성을 결정하는 단계, 및 본 명세서에 기재된 바와 같은 치료제(예를 들어, 제공된 mTORC1의 억제제)를 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 암은 mTORC1 활성의 증가된 수준을 갖는 것으로 본 명세서에 제시된 것이다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 장애, 질환, 또는 병태가 세포 증식성 장애를 포함하지만 이로 한정되지 않는 하나 이상의 장애, 질환, 및/또는 병태를 치료하는 방법을 제공한다.
세포 증식성 장애
본 발명은 세포 증식성 장애(예를 들어, 암)의 진단 및 예후를 위한 방법 및 조성물 및 mTORC1 활성을 억제함으로써 이들 장애의 치료를 특징으로 한다. 본 명세서에 기재된 세포 증식 장애는, 예를 들어 암, 비만 및 증식 의존적 질환을 포함한다. 그러한 장애는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 진단될 수 있다.
암
암은 백혈병(예를 들어, 급성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수구성 백혈병, 급성 골수모구성 백혈병, 급성 전골수구성 백혈병, 급성 골단구성 백혈병, 급성 단핵구 백혈병, 급성 적백혈병, 만성 백혈병, 만성 골수구성 백혈병, 만성 림프구성 백혈병),
진성다혈구증, 림프종(예를 들어, 호지킨병 또는 비호지킨병), 발덴스트롬 거대글로불린혈증, 다발성 골수종, 중쇄 질환, 및 고형 종양, 예를 들어 육종 및 암종(예를 들어, 섬유육종, 점액육종, 지방육종, 연골육종, 골육종, 척삭종, 혈관육종, 내피육종, 림프관육종, 림프관내피육종, 활막종, 중피종, 유잉 종양, 평활근육종, 횡문근육종, 결장암, 췌장암, 유방암, 난소암, 전립선암, 편평 세포 암종, 기저 세포 암종, 선암종, 땀샘 암종, 피지선 암종, 유두 암종, 유두 선암종, 낭선암종, 수질성 암종, 기관지 암종, 신장 세포 암종, 간암, 담관 암종, 융모막암종, 정상피종, 배아 암종, 윌름 종양, 자궁경부암, 자궁암, 고환암, 폐암종, 소세포 폐암종, 방광 암종, 상피 암종, 신경아교종, 성상세포종, 수모세포종, 두개인두종, 상의세포종, 송과체종, 혈관모세포종, 청신경종, 핍지교종, 신경초종, 수막종, 흑색종, 신경모세포종 및 망막모세포종)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 암은 흑색종 또는 유방암이다.
섬유성 질환
특발성 폐 섬유증(IPF). PI3K 경로는 IPF의 주요 병변인 섬유화 병소에서 활성화된다. mTOR 키나제 억제제 GSK2126458은 IPF 유래 폐섬유 아세포에서 PI3K 경로 신호전달 및 기능적 반응을 감소시키고 mTOR 억제는 IPF 환자 모델에서 콜라겐 발현을 감소시킨다. 폐 섬유증의 블레오마이신 모델에서, 라파마이신 치료는 항섬유성이며, 라파마이신은 또한 시험관내에서 섬유모세포에 의한 α-평활근 액틴 및 피브로넥틴의 발현을 감소시킨다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 특발성 폐 섬유증(IPF)을 치료하는 데 사용된다(문헌[Mercer, P.F. et al., Thorax., 71(8): 701-11 (2016)]; 문헌[Patel, A. S., et al., PLoS One, 7(7): e41394 (2012)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 특발성 폐 섬유증(IPF)을 치료하는 방법을 제공한다.
신장 섬유증. mTORC1은 신장 섬유증에서 주요 병원성 세포 유형인 근섬유아세포에서 활성화된다. 신장 섬유증(UUO)의 뮤린 모델에서 라파마이신에 의한 mTOR의 억제는, 섬유증 마커의 발현 및 세뇨관간질 손상을 감쇠시킨다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 신장 섬유증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Jiang, L., et al., J Am Soc Nephrol, 24(7): 1114-26 (2013)]; 문헌[Wu, M.J. et al., Kidney International, 69(11): 2029-36 (2006)]; 문헌[Chen, G. et al., PLoS One, 7(3): e33626 (2012)]; 문헌[Liu, C.F. et al., Clin Invest Med, 37(34): E142-53 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 신장 섬유증을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 경피증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Mitra, A., et al., J Invest Dermatol. Dermatol. 135(11): 2873-6 (2015)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 경피증을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 비대 흉터 및 켈로이드 질환을 치료하는 데 사용된다(문헌[Syed, F., et al., Am J Pathol. 181(5): 1642-58 (2012)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 비대 흉터 및 켈로이드 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 심장 섬유증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Yano, T., et al., J Mol Cell Cardiol. 91: 6-9 (2016) 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 심장 섬유증을 치료하는 방법을 제공한다.
다른 증식성 질환
다른 증식성 질환에는, 예를 들어 비만, 양성 전립선 과형성, 건선, 비정상적인 각질화, 림프증식성 장애(예를 들어, 림프계 세포의 비정상적 증식이 있는 장애), 만성 류마티스성 관절염, 동맥경화증, 재협착증 및 당뇨병성 망막병증을 포함한다. 본 명세서에 참고로 포함된 증식성 질환은 미국 특허 제5,639,600호 및 제7,087,648호에 기재된 것들을 포함한다.
기타 장애
기타 장애는 폼페병, 고셔병, 뮤코다당증, 다발성 설파타제 결핍증을 포함하나 이에 제한되지 않는 리소좀 축적 질환; 파킨슨병, 알츠하이머병, 헌팅턴병, 알파 1-항트립신 결핍증 및 척수 구근 근위축증과 같은 신경퇴행성 질환을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 천식을 치료하는 데 사용된다(문헌[Hua, W., et al., Respirology, 20(7): 1055-65 (2015)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 천식을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 리소좀 축적 질환을 치료하는 데 사용된다(문헌[Sardiello, M., Annals of the New York Academy of Sciences, 1371(1): 3-14 (2016)]; 문헌[Awad, O., et al., Hum Mol Genet. 24(20): 5775-88 (2015)]; 문헌[Spampanato, C., et al., EMBO Mol Med., 5(5): 691-706 (2013)]; 문헌[Medina, D.L., et al., Dev Cell., 21(3): 421-30 (2011)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 리소좀 축적 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 파킨슨병을 치료하는 데 사용된다(문헌[Decressac, M., et al., Proc Natl Acad Sci U S A., 110(19):E1817-26 (2013)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 파킨슨병을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 알츠하이머병을 치료하는 데 사용된다(문헌[Polito, V.A., et al., EMBO Mol Med. 6(9):1142-60 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 알츠하이머병을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 헌팅턴병을 치료하는 데 사용된다(문헌[Tsunemi, T., et al., Sci Transl Med., 4(142): 142ra97 (2012)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 헌팅턴병을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 알파 1-항트립신 결핍증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Pastore, N. et al., EMBO Mol Med., 5(3): 397-412 (2013)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 알파 1-항트립신 결핍증을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 척수 구근 근위축증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Cortes, C.J., et al., Nat Neurosci., 17(9): 1180-9 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 척수 구근 근위축증을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 취약 X 증후군(FXS), 근위축성 측삭 경화증(ALS), 간질, 국소 피질 이형성증(FCD), 편측거대뇌증(HME), 가변 병소가 있는 가족성 초점 간질(FFEV), 측두엽 간질(TLE), 발작, 신경퇴행성 질환, 다운 증후군, 레트 증후군(RTS) 또는 뇌에서 mTOR 신호전달의 활성화 또는 과다 활성화와 관련된 질환을 치료하는 데 사용된다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 취약 X 증후군(FXS)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 근위축성 측삭 경화증(ALS)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 간질을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 국소 피질 이형성증(FCD)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 편측거대뇌증(HME)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 가변 병소가 있는 가족성 초점 간질(FFEV)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 측두엽 간질(TLE)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 발작을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 신경퇴행성 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 다운 증후군을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 레트 증후군(RTS)을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 투여하는 단계를 포함하는, 이를 필요로 하는 환자에서 뇌에서 mTOR 신호전달의 활성화 또는 과다 활성화와 관련된 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 FKBP12에 결합하여 복합체를 형성한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물과 FKBP12 사이의 복합체는 mTOR의 FK506-라파마이신 결합 도메인과 상호작용한다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 FKBP12에 결합하고 FRAP와 FKBP12 사이의 단백질-단백질 상호작용을 방해한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물의 R1 기는 FRAP 및 FKBP12 둘 모두와 상호작용한다.
본 발명은 mTORC1 활성의 억제제인 화합물을 제공하며 pS6K 억제(mTORC1 활성의 척도) 및 pAKT 활성화(mTORC2 활성의 척도)에 의해 측정된 바와 같이 mTORC2에 비해 mTORC1을 선택적으로 억제하는 것으로 나타났다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 mTORC1을 선택적으로 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2를 측정가능하게 억제하지 않는다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 >10 μM의 pAKT 활성화 IC50을 갖는다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >10배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >20배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >50배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >100배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >150배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >200배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >500배 선택성으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 mTORC2에 비해 >1000배 선택성으로 mTORC1을 억제한다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 만성 치료 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 24시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 36시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 48시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 72시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 96시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 120시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 144시간의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 1주의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 약 1주 초과의 처리 또는 노출 후 mTORC2에 비해 선택적으로 mTORC1을 억제한다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 기존의 라팔로그보다 덜 면역 억제적이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 라파마이신보다 덜 면역 억제적이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 에베롤리무스보다 덜 면역 억제적이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 템시롤리무스보다 덜 면역 억제적이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 리다포롤리무스보다 덜 면역 억제적이다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 우미롤리무스보다 덜 면역 억제적이다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 라팔로그보다 적게 인터페론 감마(IFN-γ) 생성을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 라파마이신보다 적게 IFN-γ 생성을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 에베롤리무스보다 적게 IFN-γ 생성을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 템시롤리무스보다 적게 IFN-γ 생성을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 리다포롤리무스보다 적게 IFN-γ 생성을 억제한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 우미롤리무스보다 적게 IFN-γ 생성을 억제한다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 손상된 조직에서 섬유증 바이오마커의 발현을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 손상된 조직에서 콜라겐 I(COL1A2)의 발현을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 손상된 조직에서 콜라겐 III(COL3A1)의 발현을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 손상된 조직에서 피브로넥틴(FN1)의 발현을 감소시킨다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 면역 세포가 손상된 조직에 침투하는 경향을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 대식 세포가 손상된 조직에 침투하는 경향을 감소시킨다.
일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 라팔로그보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 라파마이신보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 에베롤리무스보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 템시롤리무스보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 리다포롤리무스보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 우미롤리무스보다 적은 포도당 내성을 유도한다. 일부 실시형태에서, 제공된 화합물은 위약 또는 비히클 단독보다 유의하게 포도당 내성을 유도하지 않는다.
따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 mTORC1을 억제하는 화합물을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, mTORC1과 관련된 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 상기 화합물은 mTORC2를 억제하지 않는다. 그러한 화합물은 라파마이신 및 라팔로그가 동물 모델 또는 인간 질환 설정에서 이점을 나타내는 적응증에 사용될 수 있다. 이러한 적응증은 하기를 포함한다:
대사 질환의 치료(2형 당뇨병에서 비만 및 인슐린 저항성) mTORC1 경로의 억제는 효모, 파리 및 마우스에서 수명 연장으로 이어지고, 칼로리 제한은 장생 및 인슐린 민감도를 개선한다. 기본 메커니즘은 mTORC1 활성화의 조절에 의해 기능하는 것으로 제안되었다. 라파마이신-유도 인슐린 저항성은 mTORC2의 억제에 의해 매개되고 선택적 mTORC1 억제제가 인슐린 민감성 및 포도당 항상성을 개선할 것으로 예측되는 것으로 나타났다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 대사 질환(2형 당뇨병에서 비만 및 인슐린 저항성)을 치료하는 데 사용된다(문헌[Yu, Z., et al., J Gerontol A Biol Sci Med Sci, 70(4), 410-20 (2015)]; 문헌[Fok, W.C., et al., Aging Cell 13 (2): 311-9 (2014)]; 문헌[Shum, M., et al., Diabetologia, 59(3):592-603 (2016)]; 문헌[Lamming, D.W., et al., Science 335(6076): 1638-43 (2012)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 대사 질환(2형 당뇨병에서 비만 및 인슐린 저항성)을 치료하는 방법을 제공한다.
신경섬유종증. NF1 유전자에서의 돌연변이에 의해 신경섬유종증 1형(NF1)이 유발된다. 이의 단백질 생성물인 뉴로피브로민은 종양 억제인자의 기능을 하며 궁극적으로 mTOR의 구성적 상향조절을 생성한다. mTOR 억제제는 NF1 관련 총상 신경섬유종에서 종양 크기를 줄이고 항증식 효과를 유도하는 것으로 나타났다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 신경섬유종증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Franz, D.N., et al., Curr Neurol Neurosci Rep., 12(3): 294-301 (2012)]; 문헌[Varin, J., et al., Oncotarget., 7: 35753-67 (2016)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 신경섬유종증을 치료하는 방법을 제공한다.
심근병증 및 골격근이영양증, Emery-Dreifuss 근이영양증 모델(LMNA -/- ). LMNA의 돌연변이는 지대근이영양증(LGMD1B), Emery-Dreifuss 근이영양증(EDMD2/3), 확장성 심근병증(DCM) 및 전도계 질환(CMD1A), 지방이영양증, Charcot-Marie-Tooth 질병, 및 Hutchinson-Gilford 프로게리아 증후군(HGPS)을 포함하는 몇몇 인간 질환을 초래한다. Lmna-/-마우스는 mTORC1 활성을 상승시켰고, Lmna-/- 마우스 내의 라파마이신에 의한 단기 치료는 mTORC1 신호전달 감소, 심장 및 골격근 기능 개선 및 약 50% 만큼 향상된 생존을 초래한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 심근병증 및 골격근이영양증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Ramos, F., et al., Sci Transl Med., 4(144): 144ra103 (2012)]; 문헌[Bonne, G. & Quijano-Roy, S., Handb Clin Neurol., 113: 1367-76 (2013)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 심근병증 및 골격근이영양증을 치료하는 방법을 제공한다.
레이 증후군(Leigh syndrome). Ndufs4 넉아웃(KO) 마우스는 레이 증후군의 모델로서 사용되고 mTORC1 및 대사 결함의 과활성화를 나타낸다. 라파마이신으로 처리된 Ndufs4 KO 마우스는 수명을 연장시켰고, 이러한 질환과 연관된 대사 및 신경학적 결함을 개선한다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 레이 증후군을 치료하는 데 사용된다(문헌[Johnson, S.C., et al., Science, 342(6165): 1524-8 (2013)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 레이 증후군을 치료하는 방법을 제공한다.
종양학. 라팔로그에 의한 mTOR의 억제는 뮤린 암 모델에서 그리고 암 환자에서 항종양 활성을 갖는 것으로 나타났다. 민감한 암 유형의 예에는 간세포 암종, 유방암, 맨틀 세포 림프종, 폐 암종, 결절성 경화증 및 림프관평활근종증이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 암 및 종양학적 장애를 치료하는 데 사용된다(문헌[Ilagan, E. & manning, B.D., Trends Cancer, 2(5): 241-51 (2016)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 암 및 종양학적 장애를 치료하는 방법을 제공한다.
비알코올성 지방간염(NASH). 본 발명은 투명 분해 세포질 단백질에 대한 자가포식을 유도하는 억제제를 제공하며, NASH 질환은 간에서 지질 침착물, 염증 및 섬유증을 특징으로 한다. mTORC1 경로의 억제는 자가포식을 유도하고, SREBP-1을 하향조절하여 지질 생합성을 감소시켜 지질 저장을 감소시킨다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하는 데 사용된다(문헌[Puri, P. & Chandra, A., J Clin Exp Hepatol, 4(1): 51-9 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법을 제공한다.
결절성 경화증(TSC) 및 림프관평활근종증(LAM). mTOR의 조절 실패는 유전성 장애 결절성 경화증 컴플렉스(TSC) 및 관련 폐 질환인 림프관평활근종증(LAM)의 병인에 매우 중요하다. 두 질환 모두 TSC1 또는 TSC2의 돌연변이에 의해 mTORC1의 하류 신호전달의 부적절한 활성으로 이어진다. TSC 환자는 뇌를 포함한 많은 기관에서 비악성 종양을 발생시키는 반면, 대부분 여성인 LAM 환자는 특정 기관이나 조직, 특히 폐, 림프절 및 신장에 비정상적인 근육 유사 세포를 축적한다. 라팔로그, 에베롤리무스 및 시롤리무스는 현재 TSC 및 LAM 둘 모두의 치료에 대해 각각 미국 FDA에 의해 승인되어 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 결절성 경화증 및 림프관평활근종증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Wander, S.A., et al., J. Clin. Invest., 121(4): 1231-41 (2011)]; 문헌[Taveira-DaSilva, A.M. & Moss, J., J. Clin Epidemiol., 7: 249-57 (2015)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 결절성 경화증 및 림프관평활근종증을 치료하는 방법을 제공한다.
노화 및 노화 질환. 라파마이신은 번역을 조절하는 포유류의 TORC1 복합체를 억제하고 마우스를 포함한 다양한 종의 수명을 연장한다. 라파마이신은 노화 세포의 전염증성 표현형을 억제하는 것으로 나타났다. 노화 세포가 나이가 들면서 축적됨에 따라, SASP(노화 관련 분비 표현형)는 조직을 파괴하고 암을 비롯한 노화 관련 병리에 기여할 수 있습니다. mTOR의 억제는 노화 세포에 의한 염증성 사이토카인의 분비를 억제하였다. 라파마이신은 IL6을 포함한 사이토카인 수준을 감소시키고 막 결합 사이토카인 IL1A의 번역을 억제했다. 감소된 IL1A는 NF-κB 전사 활성을 감소시키며, 이는 SASP를 제어한다. 따라서, mTORC1 억제제는 노화 관련 염증을 억제함으로써 후기 암을 포함하는 노화 관련 병리를 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 노화 및 노화 질환을 치료하는 데 사용된다(문헌[Laberge, R.M., et al., Nature Cell Biology, 17(8): 1049-61 (2015)]; 문헌[Nacarelli, T., et al., Free Radic Biol Med., 95: 133-54 (2016)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 노화 및 노화 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
당뇨병성 신장병증 및 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 신장 관련 합병증. 당뇨병성 신장병증은 1형 및 2형 당뇨병의 신장 합병증으로, 당뇨병 환자의 약 40%에 영향을 미친다. 높은 수준의 포도당은 신장이 혈액을 걸러내기 위해 과도하게 작용하여 신장 손상을 초래한다. 연구에 따르면 mTOR 경로는 당뇨병성 신장병증 환자에서 고도로 활성화되며 만성 고혈당으로 인한 병리학적 변화 및 신장 기능 장애에 역할을 할 수 있다. 또한, mTOR 억제는 고인슐린혈증을 약화시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 당뇨병성 신장병증 또는 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 신장 관련 합병증을 치료하는 데 사용된다(문헌[Mori, H., et al., Biochem. Res. Commun. 384(4): 471-5 (2009)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 당뇨병성 신장병증 또는 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 신장 관련 합병증을 치료하는 방법을 제공한다.
다낭성 신장 질환. 다낭성 신장 질환(PKD)은 결국 신부전을 초래하는 파괴적인 신장 낭종의 발생 및 축적을 특징으로 한다. PKD는 상염색체 우성(ADPKD) 또는 열성(ARPKD)일 수 있다. 기능 장애 mTOR 신호전달 경로는 ADPKD 및 ARPKD에서 관찰되었다. 따라서, mTORC1 경로의 정상화는 낭종의 발생 및 질환의 진행을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 PKD를 치료하는 데 사용된다(문헌[Torres, V.E., et al., Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5(7): 1312-29 (2010)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 PKD를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, PKD는 상염색체 우성이다. 일부 실시형태에서, PKD는 상염색체 열성이다.
국소 분절 사구체 경화증(FSGS) 및 기타 신장 경화증과 관련된 질환. FSGS는 미국에서 말기 신장 질환(ESRD)을 야기하는 가장 일반적인 1차 사구체 장애이다. 질환이 진행됨에 따라, Bowman 캡슐에서 족세포와 이들이 커버하는 사구체 기저막의 표면적에 불일치가 존재한다. 연구에 따르면 족세포 크기 제어는 mTOR에 의해 조절되며 mTOR 활성화는 질환 진행에 기여함을 보여준다. 또한 구성적 mTORC1 활성화는 마우스 녹다운 실험에서 FSGS 유사 병변을 유발하는 것으로 나타났다. 따라서 mTORC1 억제는 자가포식 활동을 정상화하거나 증가시킴으로써 (FSGS) 또는 기타 신장 경화증과 관련된 질환을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 FSGS 또는 기타 신장 경화증과 관련된 질환을 치료하는 데 사용된다(문헌[Zschiedrich, S. et al., J. Am. Soc. Nephrol. 28(7): 2144-57 (2017)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 FSGS 또는 기타 신장 경화증과 관련된 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
연령 관련 황반 변성. 연령 관련 황반 변성(AMD)은 황반에서 광수용체의 사망을 특징으로 하는 실명의 주요 원인이다. AMD 진행의 가능한 메커니즘은 단백질 침착 및 기능 장애 소기관으로 이어지는 산화 스트레스를 포함하여, 망막 색소 상피 비대, 탈분화 및 궁극적인 위축을 초래한다. mTOR은 망막 색소 상피의 탈분화에 관여한다. 따라서 mTORC1 억제는 비대 및 탈분화를 차단하여 AMD를 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 연령 관련 황반 변성을 치료하는 데 사용된다(문헌[Kolosova, N.G., et al., Am. J. Path. 181(2): 472-7 (2012)] 및 문헌[Zhen, C. & Vollrath, D., Aging 3(4): 346-47 (2011)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 연령 관련 황반 변성을 치료하는 방법을 제공한다.
당뇨병성 황반 부종. 당뇨병성 황반 부종(DME)은 당뇨병이 있는 사람에서 실명의 주요 원인이며, 당뇨병이 있는 사람의 약 35%에 영향을 미친다. 연구에 따르면 DME의 병인은 다양한 사이토카인과 케모카인이 관여하는 염증성 질환이다. 만성 염증성 및 산화 스트레스는 DME의 진행에 기여할 수 있다. 따라서, mTORC1의 억제는 염증 반응을 감소시킴으로써 DME 증상 및 진행을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 DME를 치료하는 데 사용된다(문헌[Okamoto, T., et al., PLOS ONE, (11)(1): e0146517], https://doi.org/10.1371/journal.pone.0146517 (2016) 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 DME를 치료하는 방법을 제공한다.
당뇨병성 망막병증. 당뇨병성 망막병증(DR)은 성인에서 약 5%의 실명을 차지하며 만성 고혈당증 및 인슐린 신호전달 경로의 결함과 관련되는 일반적인 눈 질환이다. DR 환자는 만성 고혈당증으로 인한 염증, 활성 산소 종 및 소포체 스트레스에 의해 망막 혈관 및 신경에 지속적인 손상을 입는다. 유의하게, 라파마이신은 인슐린 유도 저산소증 유발 인자-1(HIF-1) 및 망막 세포 노화의 작용을 차단하고, 자가포식을 유도하는 것으로 나타났으며 초기 혈관의 아폽토시스를 촉진하고 혈관신생을 예방하는 데 도움이 될 수 있다. 따라서 mTORC1의 억제는 염증을 감소시키고 병원성 신호전달 경로를 억제함으로써 DR 증상 및 진행을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 DR을 치료하는 데 사용된다(문헌[Di Rosa, M., et al., Curr. Neuropharmacol. 14(8): 810-25 (2016)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 DR을 치료하는 방법을 제공한다.
녹내장. 녹내장은 노화 및 안압 상승과 관련된 흔한 시신경병증이며, 돌이킬 수 없는 실명의 주요 원인이다. 연구에 따르면 자가포식세포작용의 mTOR 의존적 조절 장애가 질환 진행의 요인이 될 수 있다. 따라서, mTORC1의 억제는 자가포식을 정상화하거나 증가시킴으로써 진행을 늦추거나 녹내장을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 녹내장을 치료하는 데 사용된다(문헌[Porter, K., et al., Biochim. Biophys. Acta. 1852(3): 379-85 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 녹내장을 치료하는 방법을 제공한다.
면역 기능 회복. mTORC1 억제는 CD4+ 및 CD8+ T 림프구에서 PD-1(programmed death-1) 수용체의 발현을 감소시켜 T 세포 신호전달을 촉진하는 것으로 나타났다. 따라서, mTORC1 억제는 적응 면역 반응을 개선하여 면역 기능을 회복시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 면역 기능을 회복하는 데 사용된다(문헌[Mannick, J.B., et al., Sci. Trans. Med. 6(268): ppra179 (2014)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 면역 기능을 회복시키는 방법을 제공한다.
호흡 및/또는 요로 감염의 치료. mTORC1 억제는 항바이러스 유전자 발현 및 반응의 상향조절에 의해 감염을 감소시킬 수 있다. 따라서, mTORC1 억제는 환자의 면역 체계가 호흡기 및/또는 요로 감염을 방어하는 능력을 향상시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 호흡기 및/또는 요로 감염을 치료하는 데 사용된다. (문헌[Mannick, J.B., et al., Sci. Trans. Med. 10(449): eaaq1564 (2018)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 면역 기능을 회복시키는 방법을 제공한다.
심부전. mTORC1 활성은 스트레스에 대한 반응으로 심장 비대에 필수적이지만 경색 후 심장 리모델링의 결과로서 심장 장애를 초래할 수 있다. mTORC1의 억제는 압력 과부하에 대한 반응으로 심장 리모델링 및 심부전을 감소시킨다. 따라서, mTORC1의 억제는 심근 손상을 입은 환자의 심부전을 감소시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 심부전을 치료하는 데 사용된다(문헌[Sciarretta, S. et al., Circ. Res. 122(3): 489-505 (2018)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 심부전을 치료하는 방법을 제공한다.
골관절염. 골관절염(OA)은 연골 및 관절 염증의 손실을 초래하는 만성 퇴행성 질환이다. mTOR은 콜라겐 항상성 및 회전율과 연골의 리모델링에서 유의적인 역할을 할 수 있다. 따라서, mTORC1의 억제는 연골 회전율을 정상화함으로써 진행을 늦추거나 골관절염 증상을 완화시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 골관절염을 치료하는 데 사용된다(문헌[Pal, B., et al., Drugs R&D, 15(1): 27-36 (2017)]참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 골관절염을 치료하는 방법을 제공한다.
폐동맥 고혈압. 폐동맥 고혈압(PAH)은 폐혈관 저항성을 증가시키는 것과 관련된 진행성 치명적 질환이다. 폐동맥 평활근 세포 증식 및 이동은 동맥벽 비후의 진행과 연관되어 혈관 수축을 악화시킨다. 따라서, mTORC1의 억제는 혈관 리모델링을 감소시킴으로써 PAH를 완화시킬 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 PAH를 치료하는 데 사용된다(문헌[Ma, X., et al., Interact. Cardiovasc. Thorac. Surg. 25(2): 206-11 (2017)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 PAH를 치료하는 방법을 제공한다.
만성 폐색성 폐질환. 감소된 자가포식은 만성 폐쇄성 폐질환(COPD) 환자의 세포 노화를 가속화하는 단백질 및 기타 세포 물질의 축적을 초래한다. 따라서, mTORC1의 억제는 자가포식을 정상화하거나 증가시킴으로써 진행을 늦추거나 COPD 증상을 개선할 수 있다.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 COPD를 치료하는 데 사용된다(문헌[Fujii, S., et al., Oncoimmunology 1(5): 630-41 (2012)] 참조). 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 COPD를 치료하는 방법을 제공한다.
mTORC 억제가 유익할 수 있는 추가적인 치료적 적응증은 다음과 같다: 심혈관 질환(급성 관상동맥 증후군), 스텐트 용출로 인한 관상동맥 폐색, 다낭성 신장 질환, 및 낭종 형성 또는 낭포 형성과 관련된 신장 질환), 신경 섬유종증, TSC1 및/또는 TSC2 돌연변이와 관련된 간질, 다낭성 간, 선천성 손발톱 비대증, 취약 x 증후군, 프리드리히 운동 실조증, 포이츠-예거스 증후군, 신생혈관 연령 관련 황반 변성을 포함한 눈 질환, 포도막염, 당뇨병성 황반 부종, 폐 섬유증을 포함한 섬유아세포 성장, 신부전/섬유증, 대사증후군, 면역 노화를 포함한 면역계 질환, 루푸스 신염, 만성 면역 혈소판 감소증, 다발성 경화증, 림프종을 포함한 암, TSC1/2 돌연변이와 관련된 종양, TSC1/2 돌연변이와 관련된 혈관지방종, 유방암, 간세포암, 백혈병, 신경아교종, 아데노이드 낭성 암종, 노화, 자폐증 및 혈관성 류마티스 관절염.
일부 실시형태에서, mTORC1 활성을 억제하는 방법은 심혈관 질환(급성 관상동맥 증후군), 스텐트 용출로 인한 관상동맥 폐색, 다낭성 신장 질환, 신경 섬유종증, TSC1 및/또는 TSC2 돌연변이와 관련된 간질, 다낭성 간, 선천성 손발톱 비대증, 취약 x 증후군, 프리드리히 운동 실조증, 포이츠-예거스 증후군, 신생혈관 연령 관련 황반 변성을 포함한 눈 질환, 포도막염, 당뇨병성 황반 부종, 폐 섬유증을 포함한 섬유아세포 성장, 신부전/섬유증, 대사증후군, 면역 노화를 포함한 면역계 질환, 루푸스 신염, 만성 면역 혈소판 감소증, 다발성 경화증, 림프종을 포함한 암, TSC1/2 돌연변이와 관련된 종양, TSC1/2 돌연변이와 관련된 혈관지방종, 유방암, 간세포암, 백혈병, 신경아교종, 아데노이드 낭성 암종, 노화, 자폐증 및 혈관성 류마티스 관절염을 치료하는 데 사용된다.
따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명은 제공된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 혈관 질환(급성 관상동맥 증후군), 스텐트 용출로 인한 관상동맥 폐색, 다낭성 신장 질환, 신경 섬유종증, TSC1 및/또는 TSC2 돌연변이와 관련된 간질, 다낭성 간, 선천성 손발톱 비대증, 취약 x 증후군, 프리드리히 운동 실조증, 포이츠-예거스 증후군, 신생혈관 연령 관련 황반 변성을 포함한 눈 질환, 포도막염, 당뇨병성 황반 부종, 폐 섬유증을 포함한 섬유아세포 성장, 신부전/섬유증, 대사증후군, 면역 노화를 포함한 면역계 질환, 루푸스 신염, 만성 면역 혈소판 감소증, 다발성 경화증, 림프종을 포함한 암, TSC1/2 돌연변이와 관련된 종양, TSC1/2 돌연변이와 관련된 혈관지방종, 유방암, 간세포암, 백혈병, 신경아교종, 아데노이드 낭성 암종, 노화, 자폐증 및 혈관성 류마티스 관절염을 치료하는 방법을 제공한다.
본 발명의 약제학적으로 허용가능한 조성물은 치료되는 감염의 중증도에 따라, 인간 및 다른 동물에게 경구, 직장내, 뇌수조내, 질내, 복막내, 국소(분말, 크림, 연고, 또는 점적제에 의해서와 같이), 협측, 구강 및 비강 분무로서 등으로 투여될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 화합물은 원하는 치료 효과를 수득하기 위해 1일 1회 이상 1일에 대상체 체중의 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg 및 바람직하게는 약 1 mg/kg 내지 약 25 mg/kg의 투여량 수준으로 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다.
경구 투여를 위한 액체 투여 형태는 약제학적으로 허용되는 에멀젼, 마이크로에멀젼, 용액, 현탁액, 시럽 및 엘릭시르제를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 활성 화합물 이외에도, 액체 투여 형태는 당업계에서 일반적으로 사용되는 불활성 희석제를 함유할 수 있으며, 불활성 희석제는, 예를 들어 물 또는 다른 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알코올, 아이소프로필 알코올, 에틸 카르보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 다이메틸포름아미드, 오일(특히, 면실유, 땅콩유, 옥수수유, 배아유, 올리브유, 피마자유, 및 참깨유), 글리세롤, 테트라하이드로푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이들의 혼합물이다. 불활성 희석제 이외에, 경구 조성물은 또한 애쥬번트, 예컨대 습윤제, 유화 및 현탁화제, 감미제, 향미제, 및 방향제를 포함할 수 있다.
주사용 제제, 예를 들어, 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 적합한 분산 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사용 제제는 또한 무독성 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의, 예를 들어 1,3-부탄다이올 중 용액으로서 멸균 주사용 용액, 현탁액 또는 에멀젼일 수도 있다. 사용될 수 있는 허용되는 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액, U.S.P. 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 게다가, 멸균 고정유가 용매 또는 현탁 매체로서 통상적으로 사용된다. 이러한 목적으로, 합성 모노- 또는 다이글리세라이드를 포함하는 임의의 무자극성 고정유가 사용될 수 있다. 게다가, 지방산, 예컨대 올레산이 주사제의 제조에 사용된다.
주사가능한 제형은 예를 들어 박테리아-유지 필터를 통한 여과에 의해, 또는 사용 전에 멸균수 또는 다른 멸균 주사용 매질에 용해 또는 분산될 수 있는 멸균 고체 조성물 형태의 멸균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다.
본 발명의 화합물의 효과를 연장시키기 위해, 피하 또는 근육내 주사로부터 화합물의 흡수를 늦추는 것이 종종 바람직하다. 이는 불량한 수용해도를 갖는 결정질 또는 비정질 재료의 액체 현탁액을 사용함으로써 달성될 수 있다. 이어서, 화합물의 흡수 속도는 용해 속도에 좌우되며, 이는 결국 결정 크기 및 결정 형태에 따라 달라질 수 있다. 대안적으로, 비경구 투여된 화합물 형태의 지연된 흡수는 화합물을 오일 비히클에 용해 또는 현탁시킴으로써 달성된다. 주입가능한 데포 형태는 폴리락타이드-폴리글리콜라이드와 같은 생분해성 중합체에 화합물의 마이크로캡슐 매트릭스를 형성함으로써 제조된다. 화합물 대 중합체의 비율 및 사용되는 특정 중합체의 성질에 따라, 화합물의 방출 속도가 제어될 수 있다. 다른 생분해성 중합체의 예에는 폴리(오르토에스테르) 및 폴리(무수물)이 포함된다. 데포 주사용 제형은 또한 신체 조직과 상용성인 리포솜 또는 마이크로에멀젼에 화합물을 포획함으로써 제조된다.
직장내 또는 질내 투여를 위한 조성물은 바람직하게는 좌제이며, 좌제는 본 발명의 화합물을, 주위 온도에서는 고체이지만 체온에서는 액체이고, 이에 따라 직장강(rectum cavity) 또는 질강(vaginal cavity) 내에서 융해되어 활성 화합물을 방출하는 적합한 무자극성 부형제 또는 담체, 예컨대 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜 또는 좌제 왁스와 혼합함으로써 제조될 수 있다.
경구 투여를 위한 고체 투여 형태는 캡슐, 정제, 알약, 분말, 및 과립을 포함한다. 그러한 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 불활성의 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 담체, 예컨대 소듐 시트레이트 또는 인산이칼슘 및/또는 a) 충전제 또는 증량제, 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및 규산, b) 결합제, 예컨대 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리디논, 수크로스, 및 아카시아, c) 습윤보유제(humectant), 예컨대 글리세롤, d) 붕해제, 예컨대 한천-한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 소정 규산염, 및 탄산나트륨, e) 용액 지연제, 예컨대 파라핀, f) 흡수 촉진제, 예컨대 4차 암모늄 화합물, g) 습윤제, 예컨대 세틸 알코올 및 글리세롤 모노스테아레이트, h) 흡수제, 예컨대 카올린 및 벤토나이트 점토, 및 i) 윤활제, 예컨대 활석, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 소듐 라우릴 설페이트, 및 이들의 혼합물과 혼합된다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다.
유사한 유형의 고체 조성물이 또한, 락토스 또는 유당뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질-충전 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅 및 셸, 예컨대 장용 코팅 및 약제학적 제형 분야에 잘 알려진 다른 코팅을 사용하여 제조될 수 있다. 이들은 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 이들이 장관의 소정 부분에, 선택적으로 지연된 방식으로, 활성 성분(들)만을, 또는 이를 우선적으로 방출하는 조성물의 것일 수 있다. 사용될 수 있는 매립형 조성물의 예에는 중합체 물질 및 왁스가 포함된다. 유사한 유형의 고체 조성물이 또한, 락토스 또는 유당뿐만 아니라 고분자량 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 사용하여 연질 및 경질-충전 젤라틴 캡슐에서 충전제로서 사용될 수 있다.
활성 화합물은 또한 상기에 언급된 바와 같이 하나 이상의 부형제를 사용하여 마이크로캡슐화된 형태일 수 있다. 정제, 당의정, 캡슐, 알약, 및 과립의 고체 투여 형태는 코팅 및 셸, 예컨대 장용 코팅, 방출 제어 코팅 및 약제학적 제형 분야에 잘 알려진 다른 코팅을 사용하여 제조될 수 있다. 그러한 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 적어도 하나의 불활성 희석제, 예컨대 수크로스, 락토스 또는 전분과 혼합될 수 있다. 그러한 투여 형태는 또한, 통상의 실무에서와 같이, 불활성 희석제 이외의 추가 물질, 예를 들어 정제화 윤활제 및 다른 정제화 보조제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트 및 미세결정질 셀룰로스를 포함할 수 있다. 캡슐, 정제 및 알약의 경우, 투여 형태는 또한 완충제를 포함할 수 있다. 이들은 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 이들이 장관의 소정 부분에, 선택적으로 지연된 방식으로, 활성 성분(들)만을, 또는 이를 우선적으로 방출하는 조성물의 것일 수 있다. 사용될 수 있는 매립형 조성물의 예에는 중합체 물질 및 왁스가 포함된다.
본 발명의 화합물의 국소 또는 경피 투여를 위한 투여 형태는 연고, 페이스트, 크림, 로션, 겔, 분말, 용액, 스프레이, 흡입제 또는 패치를 포함한다. 활성 성분은 약제학적으로 허용되는 담체 및 필요에 따라 임의의 필요한 방부제 또는 완충제와 멸균 조건 하에서 혼합된다. 안과용 제형, 점적제, 및 점안제가 또한 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 고려된다. 추가적으로, 본 발명은 경피 패치의 사용을 고려하는데, 이는 신체에 대한 화합물의 제어된 전달을 제공한다는 추가의 이점을 갖는다. 그러한 투여 형태는 적절한 매질 중에 화합물을 용해 또는 분배함으로써 제조될 수 있다. 흡수 향상제는 또한 피부를 가로질러 화합물의 플럭스(flux)를 증가시키는 데 사용될 수 있다. 속도는 속도 제어 멤브레인을 제공하거나 화합물을 중합체 매트릭스 또는 겔 중에 분산시킴으로써 제어될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "생물학적 샘플"은 세포 배양물 또는 이의 추출물; 포유동물 또는 이의 추출물로부터 얻은 생검 물질; 및 혈액, 타액, 소변, 대변, 정액, 눈물 또는 기타 체액 또는 이들의 추출물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 mTORC1에 의해 매개되는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 이러한 장애는 본 명세서에 상세히 기술되어 있다.
치료될 특정 병태 또는 질환에 따라, 그 병태를 치료하기 위해 통상 투여되는 추가의 치료제가 본 발명의 조성물에 존재할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 특정 질환, 또는 병태를 치료하기 위해 통상 투여되는 추가의 치료제는 치료되는 질환 또는 병태에 대해 "적절한" 것으로 알려져 있다.
본 발명의 화합물은 또한 다른 항증식성 화합물과 조합하여 이점을 위해 사용될 수 있다. 그러한 항증식성 화합물은 아로마타제 억제제; 항에스트로겐; 토포아이소머라제 I 억제제; 토포아이소머라제 II 억제제; 미세소관 활성 화합물; 알킬화 화합물; 히스톤 데아세틸라제 억제제; 세포 분화 과정을 유도하는 화합물; 사이클로옥시게나제 억제제; MMP 억제제; mTOR 억제제; 항종양 대사물질; 플라틴 화합물; 단백질 또는 지질 키나제 활성 및 추가의 항-혈관생성 화합물을 표적화/감소시키는 화합물; 단백질 또는 지질 포스파타아제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; 고나도렐린 작용제; 항안드로겐; 메티오닌 아미노펩티다제 억제제; 매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제; 비스포스포네이트; 생물학적 반응 개질제; 항증식성 항체; 헤파라나제 억제제; Ras 발암성 아이소형의 억제제; 텔로머라제 억제제; 프로테아좀 억제제; 혈액 악성종양의 치료에 사용되는 화합물; Flt-3의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; Conforma Therapeutics의 17-AAG(17-알릴아미노겔다나마이신, NSC330507), 17-DMAG(17-다이메틸아미노에틸아미노-17-데메톡시-겔다나마이신, NSC707545), IPI-504, CNF1010, CNF2024, CNF1010과 같은 Hsp90 억제제; 테모졸로마이드(Temodal®); 키네신 스핀들 단백질 억제제, 예컨대 GlaxoSmithKline의 SB715992 또는 SB743921, 또는 CombinatoRx의 펜타미딘/클로르프로마진; Array BioPharma의 ARRY142886, AstraZeneca의 AZD6244, Pfizer의 PD181461 및 류코보린과 같은 MEK 억제제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "아로마타제 억제제"는 에스트로겐 생성을 억제하는 화합물, 예를 들어 기질 안드로스텐디온 및 테스토스테론의 에스트론 및 에스트라다이올로의 전환에 관한 것이다. 상기 용어는 스테로이드, 특히 아타메스탄, 엑세메스탄 및 포르메스탄, 특히 비스테로이드, 특히 아미노글루테티미드, 로글레티미드, 피리도글루테티미드, 트릴로스탄, 테스토락톤, 케토코나졸, 보로졸, 파드로졸, 아나스트로졸 및 레트로졸을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 엑세메스탄은 상표명 Aromasin™으로 시판된다. 포르메스탄은 상표명 Lentaron™으로 시판된다. 파드로졸은 상표명 Afema™으로 시판된다. 아나스트로졸은 상표명 Arimidex™으로 시판된다. 레트로졸은 상표명 Femara™ 또는 Femar™으로 시판된다. 아미노글루테티미드 상표명 Orimeten™으로 시판된다. 아로마타제 억제제인 화학요법제를 포함하는 본 발명의 조합은 유방 종양과 같은 호르몬 수용체 양성 종양의 치료에 특히 유용하다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "항에스트로겐"은 에스트로겐 수용체 수준에서 에스트로겐의 효과를 길항하는 화합물에 관한 것이다. 상기 용어는 타목시펜, 풀베스트란트, 랄록시펜 및 랄록시펜 염산염을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 타목시펜은 상표명 Nolvadex™으로 시판된다. 랄록시펜 염산염은 상표명 Evista™으로 시판된다. 풀베스트란트는 상표명 Faslodex™으로 투여될 수 있다. 항에스트로겐인 화학요법제를 포함하는 본 발명의 조합은 유방 종양과 같은 에스트로겐 수용체 양성 종양의 치료에 특히 유용하다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "항안드로겐"은 안드로겐 호르몬의 생물학적 효과를 억제할 수 있는 임의의 물질에 관한 것이며, 비칼루타미드(Casodex™)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "고나도렐린 작용제"는 아바렐릭스, 고세렐린 및 고세렐린 아세테이트를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 고세렐린은 상표명 Zoladex™으로 투여될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "토포아이소머라제 I 억제제"는 토포테칸, 기마테칸, 이리노테칸, 캄프토테시안 및 이의 유사체, 9-니트로캄프토테신 및 거대분자 캄프토테신 접합체 PNU-166148을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이리노테칸은, 예를 들어 상표명 Camptosar™으로 시판되는 형태로 투여될 수 있다. 토포테칸은 상표명 Hycamptin™으로 시판된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "토포아이소머라제 II 억제제"는 안트라사이클린, 예를 들어 독소루비신(Caelyx™와 같은 리포솜 제형 포함), 다우노루비신, 에피루비신, 이다루비신 및 네모루비신, 안트라퀴논 미톡산트론 및 로속산트론, 및 포도필로톡신 에토포시드 및 테니포시드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 에토포시드는 상표명 Etopophos™으로 시판된다. 테니포시드는 상표명 VM 26-Bristol으로 시판된다. 독소루비신은 상표명 Acriblastin ™ 또는 Adriamycin™으로 시판된다. 에피루비신은 상표명 Farmorubicin™으로 시판된다. 이다루비신은 상표명 Zavedos™으로 시판된다. 미톡산트론은 상표명 Novantron으로 시판된다.
용어 "미세소관 활성제"는 파클리탁셀 및 도세탁셀과 같은 탁산; 빈블라스틴 또는 빈블라스틴 설페이트, 빈크리스틴 또는 빈크리스틴 설페이트, 및 비노렐빈과 같은 빈카 알칼로이드; 디스코데몰라이드; 콜키신 및 에포틸론 및 이의 유도체를 포함하지만 이로 한정되지 않는 미세소관 안정화 화합물, 미세소관 불안정화 화합물 및 미세소관 중합 억제제에 관한 것이다. 파클리탁셀은 상표명 Taxol™으로 시판된다. 도세탁셀은 상표명 Taxotere™으로 시판된다. 빈블라스틴 설페이트는 상표명 Vinblastin R.P™로 시판된다. 빈크리스틴 설페이트는 상표명 Farmistin™으로 시판된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "알킬화제"는 사이클로포스파미드, 이포스파미드, 멜팔란 또는 니트로소우레아(BCNU 또는 Gliadel)를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 사이클로포스파미드는 상표명 Cyclostin™으로 시판된다. 이포스파미드는 상표명 Holoxan™으로 시판된다.
용어 "히스톤 데아세틸라제 억제제" 또는 "HDAC 억제제"는 히스톤 데아세틸라제를 억제하고 항증식 활성을 갖는 화합물에 관한 것이다. 이는 하이드록삼산(SAHA)을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
"항신생물성 항대사물"은 5-플루오로우라실 또는 5-FU, 카페시타빈, 젬시타빈, DNA 탈메틸화 화합물, 예컨대 5-아자시티딘 및 데시타빈, 메토트렉세이트 및 에다트렉세이트, 및 엽산 길항제, 예컨대 페메트렉시드를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 카페시타빈은 상표명 Xeloda™으로 시판된다. 젬시타빈은 상표명 Gemzar™으로 시판된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "플라틴 화합물"은 카르보플라틴, 시스-플라틴, 시스플라티넘 및 옥살리플라틴을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 카르보플라틴은 예를 들어 상표명 Carboplat™으로 시판되는 형태로 투여될 수 있다. 옥살리플라틴은 예를 들어 상표명 Eloxatin™으로 시판되는 형태로 투여될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "단백질 또는 지질 키나제 활성; 또는 단백질 또는 지질 포스파타제 활성; 또는 추가의 항-혈관신생 화합물을 표적화하거나 감소시키는 화합물"은 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 단백질 티로신 키나제 및/또는 세린 및/또는 트레오닌 키나제 억제제 또는 지질 키나제 억제제, 예컨대 a) 혈소판 유래 성장 인자 수용체(PDGFR)의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 PDGFR의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 특히 PDGF 수용체를 억제하는 화합물, 예컨대 N-페닐-2-피리미딘-아민 유도체, 예컨대 이나티닙, SU101, SU6668 및 GFB-111; b) 섬유아세포 성장 인자 수용체(FGFR)의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; c) 인슐린-유사 성장 인자 수용체 I(IGF-IR), 예컨대 IGF-IR의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 특히 IGF-I 수용체의 키나제 활성을 억제하는 화합물, 또는 IGF-1 수용체의 세포외 도메인 또는 그의 성장 인자를 표적화하는 항체; d) Trk 수용체 티로신 키나제 패밀리, 또는 에프린 B4 억제제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; e) AxI 수용체 티로신 키나제 패밀리의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; f) Ret 수용체 티로신 키나제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; g) Kit/SCFR 수용체 티로신 키나제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 이마티닙; h) PDGFR 패밀리의 일부인 C-Kit 수용체 티로신 키나제의 활성의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 C-Kit 수용체 티로신 키나제 패밀리를 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 특히 C-Kit 수용체를 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 이마티닙; i) c-Abl 패밀리, 그의 유전자-융합 산물(예를 들어, BCR-Abl 키나제) 및 돌연변이체, 예컨대 c-Abl 패밀리 구성원 및 이들의 유전자 융합 산물의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 N-페닐-2-피리미딘-아민 유도체, 예컨대 이마티닙 또는 닐로티닙(AMN107); PD180970; AG957; NSC 680410; ParkeDavis의 PD173955; 또는 다사티닙(BMS-354825); j) 단백질 키나제 C(PKC) 및 세린/트레오닌 키나제의 Raf 패밀리의 구성원, MEK, SRC, JAK/pan-JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt, Ras/MAPK, PI3K, SYK, TYK2, BTK 및 TEC 패밀리의 구성원 및/또는 사이클린-의존성 키나제 패밀리(CDK)의 구성원의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물(미도스타우린과 같은 스타우로스포린 유도체 포함); 추가 화합물의 예는 UCN-01, 사핀골(safingol), BAY 43-9006, 크리오스타틴(Bryostatin) 1, 페리포신(Perifosine); llmofosine; RO 318220 및 RO 320432; GO 6976; lsis 3521; LY333531/LY379196; 아이소키놀린 화합물; FTIs; PD184352 또는 QAN697 (P13K 억제제) 또는 AT7519 (CDK 억제제)을 포함함; k) 단백질 티로신 키나제 억제제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 단백질-티로신 키나제 억제제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 이마티닙 메실레이트(Gleevec™) 또는 티르포스틴, 예컨대 티르포스틴 A23/RG-50810; AG 99; 티르포스틴 AG 213; 티르포스틴 AG 1748; 티르포스틴 AG 490; 티르포스틴 B44; 티르포스틴 B44 (+) 거울상 이성질체; 티르포스틴 AG 555; AG 494; 티르포스틴 AG 556, AG957 및 아다포스틴 (4-{[(2,5-다이하이드록시페닐)메틸]아미노}-벤조산 아다만틸 에스테르; NSC 680410, 아다포스틴)을 포함함; l) 수용체 티로신 키나제의 표피 성장 인자 패밀리의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물 (호모- 또는 헤테로다이머인 EGFR1 ErbB2, ErbB3, ErbB4) 및 이의 돌연변이체, 예컨대 표피 성장 인자 수용체 패밀리의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 특히 EGF 수용체, ErbB2, ErbB3 및 ErbB4와 같은 EGF 수용체 티로신 키나제 패밀리의 구성원을 억제하거나, EGF 또는 EGF 관련 리간드에 결합하는 화합물, 단백질 또는 항체, CP 358774, ZD 1839, ZM 105180; 트라스투주맙(Herceptin™), 세툭시맙(Erbitux™), Iressa, Tarceva, OSI-774, Cl-1033, EKB-569, GW-2016, E1.1, E2.4, E2.5, E6.2, E6.4, E2.11, E6.3 또는 E7.6.3, 및 7H-피롤로-[2,3-d]피리미딘 유도체임; m) c-Met 수용체의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 예컨대 c-Met의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물, 특히 c-Met 수용체의 키나제 활성을 억제하는 화합물, 또는 c-Met의 세포외 도메인을 표적화하거나 HGF에 결합하는 항체, n) 하나 이상의 JAK 패밀리 구성원(JAK1/JAK2/JAK3/TYK2 및/또는 pan-JAK)의 키나제 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물이며,
PRT-062070, SB-1578, 바리시티닙, 파크리티닙, 모멜로티닙, VX-509, AZD-1480, TG-101348, 토파시티닙, 및 룩솔리티닙을 포함하지만 이로 한정되지 않음; o) PI3 키나제(PI3K)의 키나제 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물로서, ATU-027, SF-1126, DS-7423, PBI-05204, GSK-2126458, ZSTK-474, 부파리십, 피크트레리십, PF-4691502, BYL-719, 다크토리십, XL-147, XL-765, 및 이데라리십을 포함하지만 이로 한정되지 않음; 및 q) Hh(hedgehog protein) 또는 SMO(smoothened receptor) 경로의 신호전달 효과를 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물 - 시클로파민, 비스모데깁, 이트라코나졸, 에리스모데깁 및 IPI-926(사리데깁)을 포함하지만 이로 한정되지 않음 - 을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "PI3K 억제제"는 PI3Kα, PI3Kγ, PI3Kδ, PI3Kβ, PI3K-C2α, PI3K-C2β, PI3K-C2γ, Vps34, p110-α, p110-β, p110-γ, p110-δ, p85-α, p85-β, p55-γ, p150, p101, 및 p87을 포함하지만 이로 한정되지 않는, 포스파티딜이노시톨-3-키나제 패밀리의 하나 이상의 효소에 대해 억제 활성을 갖는 화합물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 본 발명에 유용한 PI3K 억제제의 예는 ATU-027, SF-1126, DS-7423, PBI-05204, GSK-2126458, ZSTK-474, 부파리십, 피크트레리십, PF-4691502, BYL-719, 다크토리십, XL-147, XL-765, 및 이데라리십을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "Bcl-2 억제제"는 B-세포 림프종 2 단백질(Bcl-2)에 대한 억제 활성을 갖는 화합물을 포함하지만 이로 한정되지 않으며, ABT-199, ABT-731, ABT-737, 아포고시폴, Ascenta의 pan-Bcl-2 억제제, 커큐민(및 유사체), 이중 Bcl-2/Bcl-xL 억제제(Infinity Pharmaceuticals/Novartis Pharmaceuticals), Genasense (G3139), HA14-1(및 이의 유사체; WO 2008/118802호 참조), 나비토클락스(및 이의 유사체, 미국 특허 번호 제7,390,799호 참조), NH-1(Shenayng Pharmaceutical University), 오바토클락스(및 이의 유사체, WO 2004/106328호 참조), S-001(Gloria Pharmaceuticals), TW 시리즈 화합물(Univ. of Michigan), 및 베네토클락스를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 일부 실시형태에서, Bcl-2 억제제는 소분자 치료제이다. 일부 실시형태에서, Bcl-2 억제제는 펩티도미메틱이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "BTK 억제제"는 AVL-292 및 이브루티닙을 포함하지만 이에 제한되지 않는 브루톤 티로신 키나제(BTK)에 대한 억제 활성을 갖는 화합물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "SYK 억제제"는 PRT-062070, R-343, R-333, Excellair, PRT-062607, 및 포스타마티닙을 포함하지만 이로 한정되지 않는 비장 티로신 키나제(SYK)에 대한 억제 활성을 갖는 화합물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
BTK 억제 화합물, 및 본 발명의 화합물과 조합된 그러한 화합물에 의해 치료가능한 병태의 추가의 예는 WO 2008/039218호 및 WO 2011/090760호에서 찾아볼 수 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 포함된다.
SYK 억제 화합물, 및 본 발명의 화합물과 조합된 그러한 화합물에 의해 치료가능한 병태의 추가의 예는 WO 2003/063794호, WO 2005/007623호, 및 WO 2006/078846호에서 찾아볼 수 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 포함된다.
PI3K 억제 화합물, 및 본 발명의 화합물과 조합된 그러한 화합물에 의해 치료가능한 병태의 추가의 예는 WO 2004/019973호, WO 2004/089925호, WO 2007/016176호, 미국 특허 제8,138,347호, WO 2002/088112호, WO 2007/084786호, WO 2007/129161호, WO 2006/122806호, WO 2005/113554호, 및 WO 2007/044729호에서 찾아볼 수 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 포함된다.
JAK 억제 화합물, 및 본 발명의 화합물과 조합된 그러한 화합물에 의해 치료가능한 병태의 추가의 예는 WO 2009/114512호, WO 2008/109943호, WO 2007/053452호, WO 2000/142246호, 및 WO 2007/070514호에서 찾아볼 수 있으며, 이의 전체 내용은 본 명세서에 참고로 포함된다.
추가의 항-혈관신생 화합물은 예를 들어 단백질 또는 지질 키나제 억제와 무관한 활성에 대한 또 다른 메커니즘을 갖는 화합물, 예를 들어 탈리도미드(Thalomid™) 및 TNP-470을 포함한다.
본 발명의 화합물과 조합하여 사용하기에 유용한 프로테아좀 억제제의 예에는 보르테조밉, 다이설피람, 에피할로카테킨-3-갈레이트(EGCG), 살리노스포라미드 A, 카르필조밉, ONX-0912, CEP-18770, 및 MLN9708이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
단백질 또는 지질 포스파타제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 예를 들어 포스파타제 1, 포스파타제 2A, 또는 CDC25의 억제제, 예컨대 오카다산 또는 이의 유도체이다.
세포 분화 과정을 유도하는 화합물은 레티노산, α- γ- 또는 δ-토코페롤 또는 α- γ- 또는 δ-토코트리에놀을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 사이클로옥시게나제 억제제는 Cox-2 억제제, 5-알킬 치환 2-아릴아미노페닐아세트산 및 유도체, 예컨대 셀레콕시브(Celebrex™), 로페콕시브(Vioxx™), 에토리콕시브, 발데콕시브 또는 5-알킬-2- 아릴아미노페닐아세트산, 예컨대 5-메틸-2-(2'-클로로-6'-플루오로아닐리노)페닐 아세트산, 루미라콕시브를 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "비스포스포네이트"는 에트리돈산, 클로드론산, 틸루드론산, 파미드론산, 알렌드론산, 이반드론산, 리세드론산 및 졸레드론산을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 에트리돈은 상표명 Didronel™으로 시판된다. 클로드론산은 상표명 Bonefos™으로 시판된다. 틸루드론산은 상표명 Skelid™으로 시판된다. 파미드론산은 상표명 Aredia™으로 시판된다. 알렌드론산은 상표명 Fosamax™으로 시판된다. 이반드론산은 상표명 Bondranat™으로 시판된다. 리세드론산은 상표명 Actonel™으로 시판된다. 졸레드론산은 상표명 Zometa™으로 시판된다. 용어 "mTOR 억제제"는 라파마이신(mTOR)의 포유동물 표적을 억제하고 항증식 활성을 갖는 화합물, 예컨대 시롤리무스(Rapamune®), 에베롤리무스(Certican™), CCI-779 및 ABT578에 관한 것이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "헤파라나제 억제제"는 헤파린 설페이트 분해를 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물을 지칭한다. 상기 용어는 PI-88을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "생물학적 반응 개질제"는 림프카인 또는 인터페론을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "Ras 발암성 아이소형의 억제제", 예컨대 H-Ras, K-Ras, 또는 N-Ras는 Ras의 발암성 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; 예를 들어, "파르네실 트랜스퍼라제 억제제", 예컨대 L-744832, DK8G557 또는 R115777(Zarnestra™)을 지칭한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "텔로머라제 억제제"는 텔로머라제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물을 지칭한다. 텔로머라제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 특히 텔로메스타틴과 같은 텔로머라제 수용체를 억제하는 화합물이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "메티오닌 아미노펩티다제 억제제"는 메티오닌 아미노펩티다제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물을 지칭한다. 메티오닌 아미노펩티다제의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 벤가미드 또는 이의 유도체를 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "프로테아좀 억제제"는 프로테아좀의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물을 지칭한다. 프로테아좀의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 보르테조밉(Velcade™) 및 MLN 341을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제" 또는 ("MMP" 억제제)는 콜라겐 펩티도미메틱 및 비펩티도미메틱 억제제, 테트라사이클린 유도체, 예를 들어 하이드록사메이트 펩티도미메틱 억제제 바티마스타트 및 이의 경구적으로 생체이용가능한 유사체 마리마스타트(BB-2516), 프리노마스타트(AG3340), 메타스타트(NSC 683551) BMS-279251, BAY 12-9566, TAA211, MMI270B 또는 AAJ996을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "혈액학적 악성종양의 치료에 사용되는 화합물"은 FMS-유사 티로신 키나제 수용체(Flt-3R)의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는, FMS-유사 티로신 키나제 억제제; 인터페론, 1-β-D-아라비노푸란실사이토신(ara-c) 및 비설판; 및 역형성 림프종 키나제를 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물인 ALK 억제제를 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.
FMS-유사 티로신 키나제 수용체(Flt-3R)의 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 특히 PKC412, 미도스타우린, 스타우로스포린 유도체, SU11248 및 MLN518와 같은 Flt-3R 수용체 키나제 패밀리의 구성원을 억제하는 화합물, 단백질 또는 항체이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "HSP90 억제제"는 HSP90의 고유 ATPase 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물; 유비퀴틴 프로테오솜 경로를 통해 HSP90 클라이언트 단백질을 분해하거나 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물을 포함하지만 이로 한정되지 않는다. HSP90의 고유 ATPase 활성을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 특히 HSP90의 ATPase 활성을 억제하는 화합물, 단백질 또는 항체, 예컨대 17-알릴아미노, 17-데메톡시젤다마이신(17AAG), 젤다마이신 유도체; 다른 젤다마이신 관련 화합물; 라디시콜 및 HDAC 억제제이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "항증식성 항체"는 트라스투주맙(Herceptin™), 트라스투주맙-DM1, 에르비툭스, 베바시주맙(Avastin™), 리툭시맙(Rituxan®), PRO64553 (항-CD40) 및 2C4 항체를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 항체는 온전한 단클론 항체, 다클론 항체, 적어도 2개의 온전한 항체로부터 형성된 다중특이성 항체, 및 항체 단편 - 이들이 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 - 을 의미한다.
급성 골수성 백혈병(AML)의 치료를 위해, 본 발명의 화합물은 표준 백혈병 요법과 조합하여, 특히 AML의 치료에 사용되는 요법과 조합하여 사용될 수 있다. 특히, 본 발명의 화합물은 예를 들어 파르네실 트랜스퍼라제 억제제 및/또는 AML의 치료에 유용한 다른 약물, 예컨대 다우노루비신, 아드리아마이신, Ara-C, VP-16, 테니포시드, 미톡산트론, 이다루비신, 카르보플라티넘 및 PKC412와 조합하여 투여될 수 있다.
다른 항-백혈병 화합물은 예를 들어 데옥시시티딘의 2'-알파-하이드록시 리보스(아라비노시드) 유도체인 피리미딘 유사체인 Ara-C를 포함한다. 또한 하이포잔틴, 6-머캅토류린(6-MP) 및 플루다라빈 포스페이트의 퓨린 유사체가 포함된다. 히스톤 데아세틸라제(HDAC) 억제제, 예컨대 소듐 부티레이트 및 수베로일아닐리드 하이드록삼산(SAHA)을 표적화하거나 감소시키거나 억제하는 화합물은 히스톤 데아세틸라제로 알려진 효소의 활성을 억제한다. 특이적 HDAC 억제제는 MS275, SAHA, FK228(이전에 FR901228), 트리코스타틴 A 및, N-하이드록시-3-[4-[[[2-(2-메틸-1H-인돌-3-일)-에틸]- 아미노]메틸]페닐]-2E-2-프로펜아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 N-하이드록실-3-[4-[(2-하이드록시에틸){2-(1H-인돌-3-일)에틸]-아미노]메틸]페닐]-2E-2-프로펜아미드, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 특히 락테이트 염을 포함하지만 이로 한정되지 않는 미국 특허 제6,552,065호에 개시된 화합물을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이 소마토스타틴 수용체 길항제는 소마토스타틴 수용체를 표적화하거나 치료하거나 억제하는 화합물, 예컨대 옥트레오타이드, 및 SOM230을 지칭한다. 종양 세포 손상 접근법은 이온화 방사선과 같은 접근법을 지칭한다. 상기 및 이하에서 지칭되는 용어 "이온화 방사선"은 전자기선(예컨대, X-선 및 감마선) 또는 입자(예컨대 알파 및 베타 입자)로서 발생하는 이온화 방사선을 의미한다. 이온화 방사선은 방사선 요법에 제공되지만 이로 한정되지 않고, 당업계에 알려져 있다(문헌[Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, in Principles and Practice of Oncology, Devita et al., Eds., 4th Edition, Vol. 1, pp. 248-275 (1993)] 참조).
또한 EDG 결합제 및 리보뉴클레오티드 환원효소 억제제가 포함된다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "EDG 결합제"는 FTY720과 같은 림프구 재순환을 조절하는 면역억제제의 부류를 지칭한다. 용어 "리보뉴클레오티드 환원효소 억제제"는 플루다라빈 및/또는 사이토신 아라비노시드(ara-C), 6-티오구아닌, 5-플루오로우라실, 클라드리빈, 6-머캅토퓨린(특히 ALL에 대한 ara-C와 조합) 및/또는 펜토스타틴을 포함하지만 이로 한정되지 않는 피리미딘 또는 퓨린 뉴클레오시드 유사체를 지칭한다. 리보뉴클레오티드 환원효소 억제제는 특히 하이드록시우레아 또는 2-하이드록시-1H-아이소인돌-1,3-디온 유도체이다.
또한 특히 VEGF의 화합물, 단백질 또는 단클론 항체, 예컨대 1-(4-클로로아닐리노)-4-(4-피리딜메틸)프탈라진 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 1-(4-클로로아닐리노)-4-(4-피리딜메틸)프탈라진 석시네이트; Angiostatin™; Endostatin™; 안트라닐산 아미드; ZD4190; ZD6474; SU5416; SU6668; 베바시주맙; 또는 항-VEGF 항체 또는 항-VEGF 수용체 항체, 예컨대 rhuMAb 및 RHUFab, VEGF 압타머, 예컨대 Macugon; FLT-4 억제제, FLT-3 억제제, VEGFR-2 IgGI 항체, 안지오자임(RPI 4610) 및 베바시주맙(Avastin™)이 포함된다.
본 명세서에 사용되는 광역학 요법은 암을 치료하거나 예방하기 위해 감광성 화합물로 알려진 특정 화학물질을 사용하는 요법을 지칭한다. 광역학 요법의 예에는 Visudyne™ 및 포피머 나트륨과 같은 화합물을 사용한 치료가 포함된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 혈관신생억제 스테로이드는 혈관 신생을 차단하거나 억제하는 화합물, 예컨대 아네코르타브, 트리암시놀론, 하이드로코르티손, 11-α-에피하이드로코르티솔, 코르텍솔론, 17α-하이드록시프로게스테론, 코르티코스테론, 데속시코르티코스테론, 테스토스테론, 에스트론 및 덱사메타손을 지칭한다.
코르티코스테로이드를 포함하는 임플란트는 플루오시놀론 및 덱사메타손과 같은 화합물을 지칭한다.
다른 화학요법 화합물은 식물 알칼로이드, 호르몬 화합물 및 길항제; 생물학적 반응 조절제, 바람직하게는 림포카인 또는 인터페론; 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 올리고뉴클레오티드 유도체; shRNA 또는 siRNA; 또는 기타 화합물 또는 다른 또는 알려지지 않은 작용 메커니즘을 갖는 화합물을 포함한다.
코드 번호, 제네릭 또는 상품명으로 식별되는 활성 화합물의 구조는 표준 개요서 "The Merck Index"의 실제 버전 또는 데이터베이스, 예를 들어 Patents International(예: IMS World Publications)에서 취할 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 공지된 치료 과정, 예를 들어, 호르몬 또는 방사선의 투여와 조합하여 사용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 제공된 화합물은, 특히 방사선요법에 대한 불량한 감도를 나타내는 종양의 치료를 위해 방사선 감작제로서 사용된다.
본 발명의 화합물은 단독으로 또는 하나 이상의 다른 치료 화합물과 조합하여 투여될 수 있으며, 가능한 조합 요법은 고정된 조합의 형태를 취하거나 본 발명의 화합물 및 하나 이상의 다른 치료 화합물의 투여는 시차를 두거나 서로 독립적으로 또는 고정된 조합과 하나 이상의 다른 치료 화합물의 조합 투여로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물은 화학요법, 방사선요법, 면역요법, 광선치료, 외과적 개입, 또는 이들의 조합과 조합하여 종양 요법에 대해 특히 투여되거나 또는 추가로 투여될 수 있다. 장기 요법은 위에서 설명한 다른 치료 전략의 맥락에서 애쥬번트 요법과 마찬가지로 동일하게 가능하다. 다른 가능한 치료는 종양 퇴행 후 환자의 상태를 유지하기 위한 요법, 또는 예를 들어 위험에 처한 환자의 경우 화학예방 요법이다.
이러한 추가 제제는 다중 투여 요법의 일부로서 본 발명의 화합물 함유 조성물과 별도로 투여될 수 있다. 대안적으로, 이들 작용제는 단일 조성물에서 본 발명의 화합물과 함께 혼합된 단일 투여 형태의 일부일 수 있다. 다중 투여 요법의 일부로 투여되는 경우, 2개의 활성제는 동시에, 순차적으로 또는 서로 일반적으로 5시간 이내의 일정 시간 내에 투여될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어 "조합", "조합된" 및 관련 용어는 본 발명에 따른 치료제의 동시 또는 순차적 투여를 의미한다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 별도의 단위 투여 형태로 또는 단일 단위 투여 형태로 함께 다른 치료제와 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 추가의 치료제 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 애쥬번트 또는 비히클을 포함하는 단일 단위 투여 형태를 제공한다.
단일 투여 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 본 발명의 화합물 및 추가 치료제(상기 기재된 바와 같은 추가 치료제를 포함하는 조성물에서) 둘 모두의 양은 치료 숙주 및 특정 방식에 따라 달라질 것이다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 0.01 내지 100 mg/kg 체중/일의 본 발명의 화합물의 투여량이 투여될 수 있도록 제형화되어야 한다.
추가 치료제를 포함하는 조성물에서, 추가 치료제 및 본 발명의 화합물은 상승적으로 작용할 수 있다. 따라서, 이러한 조성물 중의 추가 치료제의 양은 해당 치료제만을 사용하는 단일 요법에서 요구되는 것보다 적을 것이다. 그러한 조성물에서 0.01 내지 1,000 μg/kg 체중의 추가 치료제의 투여량이 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물에 존재하는 추가 치료제의 양은 유일한 활성제로서 그 치료제를 포함하는 조성물에 일반적으로 투여되는 양 이하일 것이다. 바람직하게는 현재 개시된 조성물 중의 추가 치료제의 양은 유일한 치료적 활성제로서 해당 제제를 포함하는 조성물에 일반적으로 존재하는 양의 약 50% 내지 100% 범위일 것이다.
일부 실시형태에서, 본 발명의 화합물과 조합하여 투여되는 추가 치료제는 또 다른 mTOR 억제제이다. 일부 실시양태에서, 추가적인 mTOR 억제제는 mTOR의 촉매 활성 부위에 결합함으로써 mTOR를 억제한다. 이러한 추가적인 mTOR 억제제의 예에는 다음을 포함한다: 다크토리십, 8-(6-메톡시-피리딘-3-일)-3-메틸-1-(4-피페라진-1-일-3-트라이플루오로메틸-페닐)-1,3-다이하이드로-이미다조[4,5-c]퀴놀린-2-온(WO 2006/122806호), 비스투세르팁(AZD2014; WO 2009/153597호); AZD8055(WO 2009/153597호; XL388(미국 특허 출원 공개 제2010/0305093호); 사파니세르팁(MLN0128; INK128; WO 2015/051043호); DS3078; 아피톨리십(GDC0980; WO 2008/070740호); 오미팔리십(GSK-2126458; WO 2008/14446호; NVP-BGT226(문헌[Chang, K.Y., et al., Clin. Cancer Res. 17(22): 7116-26 (2011)]); 복스탈리십(XL765; SAR245409; WO 2007/044813호); PF04691502(WO 2008/032162호); 게다톨리십(PF05212384; PKI-587; WO 2009/143313호); SF1126(WO 2004/089925호); GSK1059615(WO 2007/136940호); BI-860585; OSI 027(WO 2007/061737호); VS 5584(WO 2010/114484호); CC-223(WO 2010/062571호); DCBCI-0901(문헌[Lee, Y.E., et al., Mol. Canc. Thera. 12(11 Suppl): Abstract nr C270 (2013)):]); LY3023414(WO 2012/097039호); P529(WO 2007/133249호); 파눌리십(P7170; WO 2012/007926호); DS-7423(문헌[Kashiyama, T., et al., PLoS One 9(2): e87220 (2014)]); PWT33567 메실레이트(VCD-597; WO 2010/110685호); ME-344(NV-128; 문헌[Navarro, P., et al., Cell Rep. 15(12):2705-18 (2016)]); ABTL0812(WO 2010/106211호); WYE-132; EXEL-3885(문헌[Eur J Cancer Suppl. 6(12): Abst 322 (2008)]); EXEL-4431(문헌[Eur J Cancer Suppl. 6(12): Abst 322 (2008)]); AR-mTOR-26(문헌[101st Annu Meet Am Assoc Cancer Res (AACR) (April 17-21, Washington, D.C.) 2010, Abst 4484]); NV-128(문헌[A.B. Alvero et al., Mol Cancer Ther. 10(8): 1385-93 (2011)]); 살리노마이신(VS-507; 문헌[upta, P.B., et al., Cell 138(4): 645-59 (2009)]; BN-107; BN-108; WAY-600; WYE-687; WYE-354(문헌[Yu, K., et al., Cancer Res. 69(15): 6232-40 (2009)]; Ku-063794(문헌[Garcia-Martinez, J.M., et al., Biochem. J. 421(1): 29-42 (2009)]; 토르키닙(PP242; 문헌[Apsel, B., et al., Nat. Chem. Biol. 4(11): 691-99 (2008)]); PP30; CZ415(REF); INK1069; EXEL-2044; EXEL-7518; SB2158; SB2280; AR-mTOR-1(문헌[Wallace, E.M., et al., Mol. Canc. Thera. 8(12 Suppl): Abst. B267 (2009)]).
본 명세서에서 임의의 특정 추가 mTOR 억제제에 대한 언급은 또한 이의 임의의 약제학적으로 허용가능한 염, 입체 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 수화물 및 다형체를 포함한다.
본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적 조성물은 또한 보철물, 인공 판막, 혈관 이식편, 스텐트 및 카테터와 같은 이식 가능 의료 장치를 코팅하기 위한 조성물에 혼입될 수 있다. 예를 들어, 혈관 스텐트는 재협착(손상 후 혈관 벽의 다시 좁아짐)을 극복하는 데 사용되어 왔다. 그러나, 스텐트 또는 다른 이식가능 장치를 사용하는 환자는 혈전 형성 또는 혈소판 활성화 위험이 있다. 이러한 원치 않는 효과는 키나제 억제제를 포함하는 약제학적으로 허용가능한 조성물로 장치를 미리 코팅함으로써 예방되거나 완화될 수 있다. 본 발명의 화합물로 코팅된 이식가능 장치는 본 발명의 또 다른 실시형태이다.
실시예
하기 실시예에 기술된 바와 같이, 특정한 예시적 실시형태에서, 화합물은 하기 일반 절차에 따라 제조된다. 일반적인 방법이 본 발명의 특정 화합물의 합성을 나타내지만, 하기 일반적인 방법 및 당업자에게 공지된 다른 방법이 본 명세서에 기재된 바와 같은 모든 화합물 및 이들 화합물의 각각의 하위 부류 및 종에 적용될 수 있음을 이해할 것이다(또한 문헌[Luengo, J.I. et al., Chem. Biol., 2(7): 471-81 (1995)]; 문헌[Grinfeld, A.A. et al., Tet. Lett., 35(37): 6835-38 (1994)]; PCT/US2019/037507; 및 PCT/US2020/063351 참조, 이의 전제 내용은 본 명세서에 참조로 포함된다).
이하에서 하기의 실시예가 (반응 단계 세부사항보다는) LC/MS, 1H NMR, 19F NMR 등과 같은 분석적 측정만을 나열한 경우, 표제 화합물은 본 명세서의 합성 반응식 및 실시예에 기재된 바와 같은 절차에 따라 제조되었으며, 당업자가 쉽게 인식하는 바와 같이 적합한 시약 및 반응물을 선택하고 대체하는 것으로 이해될 것이다.
실시예에서 달리 지시되지 않는 한, 모든 온도는 섭씨 온도(℃)로 표시된다. 모든 반응은 달리 언급되지 않는 한 주위 온도에서 불활성 분위기 하에서 수행되었다. 달리 명시되지 않는 한, 반응 용액은 N2(g) 또는 Ar(g) 분위기 하에서 실온에서 교반되었다. 합성 세부 사항 없이 사용되는 시약은 공지된 방법에 따라, 예를 들어 문헌 절차에 따라 구매가능하거나 제조된다. 용액을 "농축 건조"시켰을 때에는, 감압 하에서 회전 증발기를 사용하여 농축시켰고, 용액을 건조시켰을 때에는, 전형적으로 건조제, 예컨대 MgSO4 또는 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 합성 생성물이 잔류물로서 분리된 것으로 열거되어 있는 경우, 용어 "잔류물"은 생성물이 분리된 물리적 상태를 제한하지 않으며, 예를 들어 고체, 오일, 포움, 검, 시럽 등을 포함할 수 있음을 당업자는 이해할 것이다.
하기 실시예에 기재된 화합물 및 상응하는 분석 데이터를 얻는 데 있어서, 달리 지시되지 않는 한, 하기 실험 및 분석 프로토콜을 따랐다.
LC-MS: 달리 지시되지 않는 한, 사용된 분석 LC-MS 시스템은 20ADXR 펌프, SIL-20ACXR 오토샘플러, CTO-20AC 컬럼 오븐, M20A PDA 검출기 및 LCMS 2020 MS 검출기를 갖는 양이온 검출 모드에서 전자분무 이온화(ESI)가 있는 Shimadzu LCMS-2020으로 구성되었다. 컬럼은 HALO a C18 30*5.0 mm, 2.7 μm이었다. 이동상 A는 0.05% TFA를 함유하는 물이었고, 이동상 B는 0.05% TFA를 함유하는 아세토니트릴이었다. 구배는 2.0분 내 5% 이동상 B로부터 100% (95%)로, 0.7분을 유지하고, 이어서 0.05분에 걸쳐 5% 이동상 B로 복귀하고 0.25분 동안 유지하였다. 컬럼 오븐(CTO-20AC)을 40.0℃에서 작동시켰다. 유량은 1.5 mL/분이었고, 주입 부피는 1 μl였다. PDA(SPD-M20A) 검출은 190 내지 400 nm의 범위였다. 이온화가능 공급원으로서 전기분무 이온화로 구성된 MS 검출기; 획득 모드: Scan; 분무 가스 유량: 1.5 L/분; 건조 가스 유량: 15 L/분; 검출기 전압: 튜닝 전압 ± 0.2 kv; 온도: 250℃; 가열 블록 온도: 250℃; 스캔 범위: 90.00 내지 900.00 m/z. ELSD(Alltech 3300) 검출기 파라미터: 드리프트 튜브 온도: 60±5℃; N2 유량: 1.8±0.2 L/분. 이동상 구배를 개별 화합물에 대해 최적화하였다. 질량 계산치(calcd.)는 정확한 질량에 상응한다.
분취용 HPLC: 달리 언급되지 않는 한, 분취용 HPLC 정제를 2489 UV 검출기를 갖는 Waters Auto 정제 시스템(2545-2767)으로 수행하였다. 컬럼은 다음 중 하나로부터 선택된다: Waters C18, 19 x150 mm, 5 μm; XBridge Prep OBD C18 컬럼, 30×150mm 5μm; XSelect CSH Prep C18 OBD 컬럼, 5μm,19*150mm; XBridge Shield RP18 OBD 컬럼, 30x150mm, 5μm; Xselect CSH 플루오로 페닐, 30 x 150 mm, 5 μm; 또는 YMC-Actus Triart C18, 30 x 150 mm, 5 μm. 이동상은 0.1% FA 또는 10 mmol/L NH4HCO3를 함유하는 수중 아세토니트릴(5-95%)의 혼합물로 구성되었다. 유량을 25 mL/분으로 유지하고, 주입 부피는 1200 μL였고, UV 검출기는 2개의 채널 254 nm 및 220 nm를 사용하였다. 이동상 구배를 개별 화합물에 대해 최적화하였다.
정상 플래시 크로마토그래피: 달리 언급되지 않는 한, 용리액으로서 에틸 아세테이트(EtOAc)/헥산, 에틸 아세테이트(EtOAc)/석유 에테르(b.p. 60 내지 90℃), CH2Cl2/MeOH, 또는 CH2Cl2/10% MeOH 중 2N NH3를 사용하여, 정상 플래시 컬럼 크로마토그래피(FCC)를 사전-패키징된 실리카 겔 컬럼(예컨대, RediSep®)으로 실리카 겔 상에서 수행하였다.
1H NMR: 달리 언급되지 않는 한, DMSO-d6 또는 CDCl3 용액 중 400 ㎒ 분광계(또는 500 ㎒ 분광계)를 사용하여 1H NMR 스펙트럼을 획득하였다. 핵 자기 공명(NMR) 스펙트럼 특성은 백만분율(ppm)으로 표시되는 화학적 이동(δ)을 지칭한다. 테트라메틸실란(TMS)을 DMSO-d6 용액 중의 내부 표준물로서 사용하였다. 커플링 상수(J)는 헤르츠(Hz)로 보고된다. 다중도에 대한 시프트의 특성은 s (단일선), d (이중선), t (삼중선), q (사중선), dd (이중 이중선), dt (이중 삼중선), m (다중선), br (브로드)로서 보고된다.
실험 섹션에 사용된 약어 목록.
CH3CN: 아세토니트릴
DCM: 다이클로로메탄
DMAP: 다이메틸 아미노피리딘
DMF: N,N-다이메틸포름아미드
DMSO: 다이메틸 설폭사이드
EDCI: 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카르보다이이미드
ESI: 전기분무 이온화
EtOAc: 에틸 아세테이트
Et2O: 다이에틸 에테르
EtOH: 에탄올
h: 시간
HCl: 염화수소
HF: 불화수소
HND-8: 산성 이온 교환 수지(예를 들어, Amberlyst)
H2O: 물
HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피
MeOH: 메탄올
min: 분
MgSO4: 황산마그네슘
mL: 밀리리터
mM: 밀리몰농도
mmol: 밀리몰
MS: 질량 분석
N2: 질소 가스
NaHCO3: 중탄산나트륨
NaOH: 수산화나트륨
Na2SO4: 황산나트륨
NH3: 암모니아
NH4Cl: 염화암모늄
NMR: 핵 자기 공명
℃: 섭씨 온도
prep-HPLC: 분취용 고성능 액체 크로마토그래피
PE: 석유 에테르
p-TsOH: 파라-톨루엔설폰산
rt: 실온
TASF: 트리스(다이메틸아미노)설포늄 다이플루오로메틸실리케이트
TEA: 트라이에틸아민
TFA: 트라이플루오로아세트산
THF: 테트라하이드로푸란
합성예: 중간체
중간체 I의 합성
Figure pct00152
톨루엔(5 mL) 중 라파마이신(0.2 g, 0.22 mmol)의 용액에 양성자 스펀지(0.94 g, 4.38 mmol)를 실온에서 첨가하고, 이어서 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(0.54 g, 3.28 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고 이후 냉각시키고 실리카 겔 크로마토그래피 및 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(50 mg, 24% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 964.2 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.50 - 5.80 (m, 4H), 5.62 (ddd, J = 22.9, 14.5, 7.9 ㎐, 1H), 5.32 (dt, J = 11.6, 7.7 ㎐, 2H), 5.18 - 5.03 (m, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.95 - 3.54 (m, 5H), 3.50 - 3.33 (m, 7H), 3.32 - 3.21 (m, 3H), 3.18 - 2.92 (m, 8H), 2.83 - 2.48 (m, 3H), 2.25 (dd, J = 30.1, 10.7 ㎐, 2H), 2.02 (ddd, J = 34.0, 26.3, 9.6 ㎐, 4H), 1.88 - 1.56 (m, 14H), 1.51 - 1.16 (m, 9H), 1.15 - 0.82 (m, 18H), 0.79-0.68 (m, 1H).
중간체 II의 합성
Figure pct00153
단계 1: 3-요오도프로필트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(40mL) 중 3-요오도프로판-1-올(4 g, 21.51mmol) 및 2,6-루티딘(4.61 g, 43mmol)의 혼합물을 N2 하에 0℃로 냉각시키고 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(6.67 g, 23.66 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하고 이후 10% PE 중 EtOAc로 켄칭시키고, 짧은 실리카 겔 컬럼을 통해 여과하였다. 여액을 진공 중에 농축시켜 3-요오도프로필 트라이플루오로메탄설포네이트(6.72 g, 98 수율)를 밝은 황색 액체로서 수득하였다.
단계 2: (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(중간체 II). 톨루엔(40 mL) 중 라파마이신(2 g, 2.19 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(5.72 mL, 32.82 mmol)의 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 빙냉 포화 수성 NaHCO3(50 mL)에 붓고, 얼음물(60 mL× 2), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE: EA= 3: 1)를 통해 정제하여 중간체 II(1.45 g, 60% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다.
ESI-MS (EI+, m/z): 1104.5 [M+Na]+.
중간체 III 및 VI의 합성
Figure pct00154
단계 1: 2-메톡시에틸 트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(50 mL) 중 2-메톡시에탄올(4.5 g, 59.14 mmol) 및 DIEA(11.46 g, 88.71 mmol)의 용액에 0℃에서 N2 하에 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(18.35 g, 65.05 mmol)를 적가하였다. 이를 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 DCM(50 mL)으로 희석하고, Sat.NaHCO3(50 mL), 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 이후 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과하고 진공 중에 농축시켜 2-메톡시에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(12.3 g, 99% 수율)를 갈색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 4.62 (t, J=4.4 ㎐, 2H), 3.71 (t, J=4.6 ㎐, 2H), 3.42 (s, 3H).
단계 2: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실)프로판-2-일)-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(중간체 III). 톨루엔(30 mL) 중의 라파마이신(3 g, 3.28 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(8.48 g, 65.63 mmol)을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 저온 NaHCO3(50 mL)에 붓고, 빙수(2 x 60 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA = 1:2)를 통해 정제하여 중간체 III(1.2 g, 38% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 5.95-6.42 (m, 4H), 5.14-5.58 (m, 4H), 4.41-4.81 (m, 1H), 4.17-4.28 (m, 1H), 3.84-4.00 (m, 1H), 3.63-3.79 (m, 4H), 3.49-3.59 (m, 2H), 3.31-3.46 (m, 10H), 3.07-3.22 (m, 5H), 2.55-2.76 (m, 2H), 2.31-2.35 (m, 1H), 1.91-2.10 (m, 3H), 1.61-1.88 (m, 19H), 1.41-1.55 (m, 4H), 1.15-1.36 (m, 7H), 0.83-1.11 (m, 16H), 0.69-0.76 (m, 1H).
단계 3: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실)프로판-2-일)-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(중간체 VI). 톨루엔(10 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-41,44-다이메톡시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.5 g, 0.51 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(1.65 g, 7.71 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(1.01 g, 6.17 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 반응물을 3시간 동안 50℃로 가열하고 이후 여과하고, EA(60 mL)로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl(60 mL × 10), 물(60 mL) 및 염수(60 mL)로 세정하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=1:1)를 통해 정제하여 중간체 VI(92 mg, 18% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 6.03-6.42 (m, 4H), 5.08-5.60 (m, 4H), 4.10-4.74 (m, 1H), 3.73-3.93 (m, 4H), 3.49-3.71 (m, 5H), 3.44-3.46 (m, 3H), 3.34-3.41 (m, 4H), 3.24-3.31 (m, 3H), 3.07-3.18 (m, 7H), 2.48-2.82 (m, 2H), 1.95-2.35 (m, 5H), 1.53-1.83 (m, 18H), 1.42-1.52 (m, 3H), 1.22-1.37 (m, 6H), 1.04-1.15 (m, 10H), 0.86-0.97 (m, 7H), 0.69-0.79 (m, 1H).
중간체 IV의 합성
Figure pct00155
단계 1: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. DMF(60 mL) 중 라파마이신(5 g, 5.47 mmol)의 용액에 이미다졸(1.49 g, 21.88 mmol) 및 tert-부틸-클로로-다이메틸-실란(2.47 g, 16.41 mmol, 3.05 mL)을 첨가하였다. 반응물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 이후 저온 포화 NH4Cl 용액(40 mL) 및 Et2O: PE(60 mL, 2:1)에 부었다. 유기층을 포화 NH4Cl 용액(20 mL), 물 및 염수(20 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(10%에서 50%로의 PE 중 EtOAc)를 통해 정제하여 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(4 g, 71% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1050.5 [M+Na]+.
단계 2: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. 톨루엔(15 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(1 g, 0.97 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(2.5 g, 11.67 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(2.39 g, 14.59 mmol, 1.60 mL)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 반응물을 이후 50℃로 6시간 동안 가열하고, 냉각하고, 여과하였다. 여액을 농축시키고 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 (28E,30E,32E,33E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-44,46,47-트라이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-65,66-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(48),33(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(0.45 g, 44% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1064.6 [M+Na]+.
단계 3: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. THF(10 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(0.4 g, 0.38 mmol)의 용액에 피리딘 하이드로플루오라이드(3.8 g, 38.37 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 45℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM 및 포화 NaHCO3로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(0.16 g, 45% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 949.9 [M+Na]+.
단계 4: (1R,2R,4S)-4-((R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(중간체 IV). DCM(10 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(0.26 g, 0.28 mmol)의 용액에 DCM(1 mL) 중 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.17 g, 0.84 mmol) 및 다이메틸포스핀 클로라이드(0.315 g, 2.80 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3 용액, 빙냉 0.5 N HCl, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: MeOH= 40: 1)를 통해 정제하여 중간체 IV(100 mg, 36% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1025.8 [M+Na]+.
중간체 V/IX의 합성
Figure pct00156
단계 1: 2-((tert-부틸다이페닐실릴)옥시)에탄-1-올. Tert-부틸클로로다이페닐실란(26.61 g, 96.83 mmol)의 용액에 피리딘 (44 mL) 중 에틸렌 글리콜(49.28 g, 793.97 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이후 물(500 mL)에 붓고, EtOAc(200 mL × 3)로 추출하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA: PE=1:8)를 통해 정제하여 2-((tert-부틸다이페닐실릴)옥시)에탄-1-올(25 g, 86% 수율)을 무색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 323.1 [M+Na] +.
단계 2: 2-((tert-부틸다이페닐실릴) 옥시) 에틸 트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(120 mL) 중 2-((tert-부틸다이페닐실릴)옥시)에탄-1-올(17.13 g, 57 mmol) 및 DIEA(11.05 g, 85.52 mmol)의 용액에 0℃에서 N2 하에 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(17.69 g, 62.71 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 DCM(200 mL)으로 희석하고, sat.NaHCO3(100 mL × 3), 물(100 mL × 2) 및 염수(100 mL)로 세정하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시켜 2-((tert-부틸다이페닐실릴)옥시)에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(24.5 g, 99% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 3: (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤. 톨루엔(100 mL) 중 라파마이신(5 g, 5.47 mmol) 및 2-((tert-부틸다이페닐실릴)옥시)에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(23.66 g, 54.69 mmol)의 용액에 DIEA(8.48 g, 65.63 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 58℃에서 16시간 동안 교반하고, 이후 저온 포화 NaHCO3 용액(200 mL)에 붓고 EtOAc(100 mL × 3)로 추출하였다. 유기층을 물(100mL× 3) 및 염수(100mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=3:1)를 통해 정제하여 (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤(4.7 g, 72% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1219.5 [M+Na] +.
단계 4: (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤(2 g, 1.67 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(3.94 g, 18.39 mmol)의 용액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(2.19 g, 13.37 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 혼합물을 이후 5시간 동안 50℃로 가열하고, 여과하고, EA(60 mL)로 희석하고, 포화 NH4Cl (aq)(60 mL × 3), 물(60 mL) 및 염수(60 mL)로 세정하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE: EA= 3: 1)를 통해 정제하여 (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(700 mg, 35% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1232.7 [M+Na] +.
단계 5: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,43,44-트라이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(중간체 V). THF(10 mL) 중 (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(0.6 g, 0.495 mmol)의 용액에 피리딘·HF(0.39 g, 4.96 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 포화 NaHCO3 용액(20 mL)으로 켄칭시키고, 0℃에서 EA(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE: 아세톤= 3: 1)를 통해 정제하여 중간체 V(430 mg, 89% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 994.7 [M+Na] +.
중간체 VII의 합성
Figure pct00157
단계 1: (27E,29E,31E,32E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-다이하이드록시-44,47-다이메톡시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-페녹시카르보티오일옥시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(48),32(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤. DCM(8 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(300 mg, 0.328 mmol)의 용액에 피리딘(208 mg, 2.63 mmol) 및 O-페닐 카르보노클로리도티오에이트(283 mg, 1.64 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, NH4Cl, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(0%에서 100%로 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(150 mg, 44% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1072.3 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 7.41 (t, J = 7.9 ㎐, 2H), 7.29 (d, J = 7.4 ㎐, 1H), 7.12 (d, J = 7.8 ㎐, 2H), 6.44 - 6.09 (m, 3H), 5.96 (d, J = 10.4 ㎐, 1H), 5.61 - 5.38 (m, 2H), 5.29 (d, J = 5.2 ㎐, 1H), 5.22 - 5.06 (m, 2H), 4.79 (s, 1H), 4.20 (dd, J = 16.6, 6.0 ㎐, 1H), 3.93 - 3.52 (m, 4H), 3.51 - 3.28 (m, 10H), 3.14 (s, 3H), 2.91 - 2.55 (m, 3H), 2.25 (dd, J = 91.2, 12.9 ㎐, 4H), 1.97 (d, J = 4.8 ㎐, 2H), 1.90 - 1.69 (m, 9H), 1.60 (t, J = 22.2 ㎐, 11H), 1.54 - 1.38 (m, 7H), 1.37 - 1.19 (m, 5H), 1.11 (ddd, J = 25.6, 13.0, 7.6 ㎐, 10H), 1.01 - 0.84 (m, 10H).
단계 2: (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-39-[(1R)-2-[(1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-30,31,32,33,42,43-헥사메틸-59,60-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(42),28(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤. 톨루엔(15 mL) 중 (27E,29E,31E,32E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-다이하이드록시-44,47-다이메톡시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-페녹시카르보티오일옥시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(48),32(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(1.4 g, 1.33 mmol)의 용액에 트라이에틸보란(157 mg, 1.60 mmol) 및 비스(트라이메틸실릴)실릴-트라이메틸-실란(994 mg, 4 mmol, THF 중 1M)을 첨가하였다. 생성된 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반하고, 이후 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(0%에서 50%로 PE 중 EtOAc)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.6 g, 50% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 920.0 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.59 - 5.85 (m, 4H), 5.68 - 5.06 (m, 4H), 4.68 (dd, J = 48.1, 31.4 ㎐, 1H), 4.49 - 3.99 (m, 2H), 3.99 - 3.51 (m, 4H), 3.52 - 3.27 (m, 7H), 3.29 - 3 (m, 5H), 2.88 - 2.53 (m, 3H), 2.20 (ddd, J = 80.2, 58.5, 14.9 ㎐, 6H), 1.80 (dd, J = 34.0, 5.5 ㎐, 7H), 1.63 (d, J = 16.1 ㎐, 12H), 1.52 - 1.19 (m, 10H), 1.21 - 0.78 (m, 19H), 0.70 (dd, J = 16.1, 9.9 ㎐, 2H).
단계 3: (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,39S,40S,41R,42R,51R)-51-하이드록시-39,41,42-트라이메톡시-40-[(1R)-2-[(1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-31,32,33,34,43,44-헥사메틸-59,60-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(43),29(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤(중간체 VI). 톨루엔(8 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-39-[(1R)-2-[(1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-30,31,32,33,42,43-헥사메틸-59,60-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(42),28(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(200 mg, 0.222 mmol)의 용액에 N1,N1,N8,N8-테트라메틸나프탈렌-1,8-다이아민(668 mg, 3.12 mmol) 및 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(365 mg, 2.23 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 50℃에서 1시간 동안 교반하고, 이후 냉각시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(45% PE 중 EtOAc)를 통해 정제하여 중간체 VI(50 mg, 12% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 934.2 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.54 - 5.81 (m, 4H), 5.78 - 5.02 (m, 5H), 4.52 (dd, J = 105.2, 28.6 ㎐, 1H), 4.38 - 3.94 (m, 1H), 3.93 - 3.53 (m, 4H), 3.54 - 3.01 (m, 12H), 3.03 - 2.46 (m, 3H), 2.45 - 1.88 (m, 6H), 1.90 - 1.54 (m, 16H), 1.54 - 1.19 (m, 9H), 1.19 - 0.76 (m, 16H), 0.70 (d, J = 11.0 ㎐, 2H).
화합물 합성예
실시예 1: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-45,46-다이메톡시-44-[(1R)-2-[(1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(47),29(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-1)의 합성
Figure pct00158
THF(5 mL) 중 중간체 VII(150 mg, 0.164 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(395 mg, 3.29 mmol)의 용액에 HND-8(25 mg)을 50℃에서 Ar 하에 첨가하였다. 생성된 용액을 50℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(85% 수중 H3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(I- 1: 105 mg, 64% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1022.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.83 (m, 4H), 5.72 - 5.08 (m, 4H), 4.41 (ddd, J = 101.7, 68.7, 23.6 ㎐, 2H), 4.01 - 3.03 (m, 22H), 2.93 - 2.50 (m, 5H), 2.42 - 1.70 (m, 17H), 1.52 - 1.21 (m, 16H), 1.20 - 0.78 (m, 18H), 0.77-0.65 (m, 1H).
실시예 2: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-3-((R)-1-((1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-21-(2-((2-메톡시에틸)설포닐)에톡시)-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-2)의 합성:
Figure pct00159
단계 1: 2-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에틸설포닐]에탄올. 피리딘(20 mL) 중 2-(2-하이드록시에틸설포닐)에탄올(5.01 g, 32.47 mmol)의 용액에 tert-부틸-클로로-다이페닐-실란(2.22 g, 8.08 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 15℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 물(200 mL)로 희석하고, EtOAc(100 mL× 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: PE= 1: 2)를 통해 정제하여 2-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에틸설포닐]에탄올(2.25 g, 71% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3): δ 7.65-7.67 (m, 4H), 7.42-7.47 (m, 6H), 4.09-4.14 (m, 4H), 3.44-3.46 (m, 2H), 3.25-3.27 (m, 2H), 2.57-2.60 (m, 1H), 1.06 (s, 9H).
단계 2: tert-부틸-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-다이페닐-실란. 톨루엔(20 mL) 중 2-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에틸설포닐]에탄올(8.6 g, 21.91 mmol) 및 N1,N1,N8,N8-테트라메틸나프탈렌-1,8-다이아민(14.08 g, 65.72 mmol)의 용액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(10.78 g, 65.72 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 18시간 동안 교반하고, 이후 농축시키고, 물(200 mL)로 처리하고, EtOAc(150 mL×2)로 추출하였다. 합한 유기층을 농축시키고, 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(PE: EtOAc= 3:1)를 통해 정제하여 tert-부틸-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-다이페닐-실란(7.9 g, 89% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 429.0 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3): δ 7.67-7.69 (m, 4H), 7.39-7.45 (m, 6H), 4.07-4.10 (m, 2H), 3.82-3.84 (m, 2H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.29-3.31 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).
단계 3: 2-(2-메톡시에틸설포닐)에탄올. THF(10 mL) 중 tert-부틸-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-다이페닐-실란(8.6 g, 21.15 mmol)의 용액에 Py·HF(31.44 g, 317.26 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 18시간 동안 교반하고, 이후 농축시키고, EtOAc(100 mL)로 처리하였다. NaHCO3(aq.150 mL)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이후 여과하고, EtOAc(20 mL)로 세정하였다. 합한 유기층을 농축시키고, 역상 크로마토그래피(물)를 통해 정제하여 2-(2-메톡시에틸설포닐)에탄올(3.55 g, 99% 수율)을 황색 오일로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 169.0 [M+H] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 4.09-4.13 (m, 2H), 3.83-3.86 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.31-3.37 (m, 4H), 2.68-2.71 (m, 1H).
단계 4: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-45,46-다이메톡시-44-[(1R)-2-[(1S,3S)-3-메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,47,48-헥사메틸-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(47),29(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-2). THF(3 mL) 중 중간체 VII(200 mg, 0. 22 mmol) 및 2-(2-메톡시에틸설포닐)에탄올(369 mg, 2.19 mmol)의 용액에 HND-8(80 mg)을 50℃에서 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 이후 포화 NaHCO3(aq.)(20 mL)로 켄칭시키고, EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(0-100% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(I-2, 25 mg, 11% 수율)을 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1069.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 6.05-6.43 (m, 4H), 5.10-5.59 (m, 4H), 4.41-4.44 (m, 1H), 3.53-3.90 (m, 7H), 3.24-3.46 (m, 15H), 3.03-3.17 (m, 4H), 2.89-2.95 (m, 1H), 2.70-2.78 (m, 1H), 2.51-2.69 (m, 2H), 2.17-2.34 (m, 4H), 1.94-2.15 (m, 4H), 1.54-1.89 (m, 25H), 1.22-1.53 (m, 12H), 1.01-1.20 (m, 12H), 0.84-0.96 (m, 8H), 0.69-0.82 (m, 1H).
실시예 3: (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-3), (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-4) 및 (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-5)의 합성
Figure pct00160
단계 1: (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(중간체 VIII). DCM(15 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(1.0 g, 1.09 mmol)의 용액에 실온에서 물(15 mL) 중 불화칼륨 하이드로플루오라이드(1.28 g, 16.41 mmol) 및 브로모 다이플루오로(트라이메틸실릴)메탄(2.22 g, 10.94 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 18시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl 용액, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: PE= 1: 1.2)를 통해 정제하여 표제 화합물(110 mg, 10% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 985.8 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.72 - 5.83 (m, 5H), 5.62 (ddd, J = 22.9, 14.6, 7.9 ㎐, 1H), 5.49 - 5.01 (m, 3H), 4.67 (s, 1H), 3.98 - 3.54 (m, 6H), 3.52 - 3.05 (m, 15H), 2.88 - 2.52 (m, 3H), 2.41 - 1.68 (m, 16H), 1.56 - 1.19 (m, 10H), 1.17 - 0.86 (m, 17H), 0.76 (dd, J = 24.3, 12.0 ㎐, 2H).
단계 2: (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(CP-NAV-067-1410). THF(5 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(200 mg, 0.21 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(498 mg, 4.15 mmol)의 용액에 0℃에서 N2 하에 4-메틸벤젠술폰산 수화물(197 mg, 1.04 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 이 온도에서 2시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, EtOAc로 추출하고, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(76% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(I-3: 40 mg, 18% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 3: (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(CP-NAV-067-1429-P1) 및 (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42R,43S,44R,45R,55R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(CP-NAV-067-1429-P2). 100 mg의 혼합물을 키랄 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE: DCM: EtOAc: MeOH= 3: 3: 1: 0.3)를 통해 정제하여 표제 화합물(I-4: 28 mg, 28% 수율) 및 (I-5: 15 mg, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서1 mg/mL
주입량: 5 mL
이동상: 헥산/EtOH=70/30(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 38℃
I-4: ESI-MS (EI+, m/z): 1073.7 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.60 - 6.05 (m, 4H), 5.91 (dd, J = 41.4, 11.1 ㎐, 1H), 5.58 - 5.07 (m, 4H), 4.74 (s, 1H), 4.19 (dd, J = 14.0, 6.0 ㎐, 1H), 3.95 - 3.26 (m, 24H), 3.12 (dd, J = 16.8, 7.9 ㎐, 1H), 2.92 - 2.51 (m, 3H), 2.40 - 1.86 (m, 8H), 1.84 - 1.64 (m, 11H), 1.54 - 1.16 (m, 10H), 1.16 - 0.83 (m, 18H), 0.78-0.65 (m, 1H).
I-5: ESI-MS (EI+, m/z): 1073.7 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.64 - 5.88 (m, 5H), 5.75 - 5.08 (m, 5H), 4.28 (s, 1H), 4.03 - 3.02 (m, 26H), 2.98 - 1.90 (m, 9H), 1.86-1.63 (m, 16H), 1.50 - 1.17 (m, 6H), 1.16 - 0.81 (m, 18H), 0.78-0.61 (m, 1H).
실시예 4: (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-6), (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-9) 및 (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-10)
Figure pct00161
단계 1: (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-6). THF(10 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(0.1 g, 0.1 mmol, 실시예 3으로부터) 및 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(245 mg, 2.07 mmol)의 용액에 50℃에서 N2 하에 HND-8(50 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 50℃에서 교반하고, 냉각시키고, 여과하고, 여액을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(2 mL)에 붓고, EtOAc(20 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: PE= 4: 1) 및 60% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(30 mg, 28% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1072.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.58-5.92 (m, 5H), 5.53-4.75 (m, 5H), 4.27-4.09 (m, 2H), 3.84-3.67 (m, 9H), 3.63-3.54 (m, 2H), 3.45-3.28 (m, 10H), 3.25-3.07 (m, 3H), 2.84-2.55(m, 3H), 2.35-2.20(m, 2H), 2.13-1.86 (m, 6H), 1.46-1.77(m, 37H), 1.43-1.17 (m, 14H), 1.11-0.82 (m, 22H), 0.79-0.69 (m, 1H).
단계 2: (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-9) 및 (24E,26E,28E,29E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-10). 115 mg의 혼합물을 키랄 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE: DCM: EtOAc: MeOH= 3: 3: 1: 0.3)를 통해 정제하여 표제 화합물 I-9(35 mg, 30% 수율) 및 I-10(12 mg, 10% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 0.2 mg/mL
주입량: 5 mL
이동상: 헥산/EtOH=60/40(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 266 nm
온도: 35℃
I-9: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.59 - 6.10 (m, 4H), 5.91 (dd, J = 28.2, 10.4 ㎐, 1H), 5.58 - 5.06 (m, 4H), 4.75 (dd, J = 16.6, 9.8 ㎐, 1H), 4.69 - 4.53 (m, 1H), 4.17 (d, J = 5.7 ㎐, 1H), 3.91 - 3.54 (m, 12H), 3.48 - 3.01 (m, 13H), 2.91 - 2.53 (m, 3H), 2.38-1.81 (m, 7H), 1.83 - 1.64 (m, 9H), 1.52 - 1.19 (m, 10H), 1.16 - 0.81 (m, 18H), 0.74 (dd, J = 24.3, 12.0 ㎐, 1H).
I-10: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.67 - 5.84 (m, 5H), 5.70 - 5.07 (m, 4H), 4.37 - 4.07 (m, 3H), 3.98 (t, J = 4.3 ㎐, 1H), 3.87 - 3.57 (m, 8H), 3.56 - 3.05 (m, 13H), 2.93 - 1.97 (m, 10H), 1.94 - 1.64 (m, 15H), 1.54 - 1.20 (m, 7H), 1.18 - 0.83 (m, 18H), 0.77-0.61 (m, 1H).
실시예 5: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-48-메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-45-[(1R)-2-[(1S,3R)-3-메톡시-4-(옥세탄-3-일옥시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-67,68-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-7)의 합성
Figure pct00162
단계 1: [(37S,39R,41R)-4-[(2R)-(22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-45-메톡시-42-[(2-(2메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-48,49,50,51,52-펜타옥소-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라-43-일]프로필]-41-메톡시-39-사이클로헥실] 트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(10 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-42-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-64,65-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(46),27(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(화합물 A는 U.S. 10,980,784호에 따라 제조함, 1 g, 1 mmol) 및 2,6-다이메틸 피리딘(1.07 g, 10 mmol)의 용액에 트라이플루오로메탄설폰산 무수물(1.41 g, 4.99 mmol)(1 mL DCM 중에 용해됨)을 0℃에서 N2 하에 적가하였다. 반응물을 0.5시간 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다.
단계 2: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-48-메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-45-[(1R)-2-[(1S,3R)-3-메톡시-4-(옥세탄-3-일옥시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-67,68-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-7). 단계 1로부터의 반응 용액을 N2 하에 0℃로 냉각시키고, DIPEA(1.29 g, 9.96 mmol) 및 옥세탄-3-올(0.74 g, 9.96 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고, 20시간 동안 교반하고, 이후 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(80% PE 중 EtOAc) 및 역상 크로마토그래피(60% 수중 CH3CN으로 용출시킴)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.055 g, 5% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1079.9 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39-5.94 (m, 4 H), 5.54-5.12 (m, 4H),4.79-4.49 (m, 4H), 4.27-3.98 (m, 2H), 3.91-3.74 (m, 3H), 3.63-3.52 (m, 9H), 3.50-3.12 (m, 13H), 2.81-2.49(m, 3H), 2.26-1.97 (m, 4H), 1.91-1.49 (m, 29H), 1.53-1.12 (m, 12H), 1.14-0.84 (m, 15H).
실시예 6: (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,45R,46R,56R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-8)의 합성
Figure pct00163
단계 1: 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄. DMF(20 mL) 중 옥세탄-3-올(8 g, 108 mmol) 및 2-브로모에톡시메틸벤젠(34.84 g, 162 mmol)의 용액에 수소화나트륨(5.18 g, 216 mmol)을 배치식으로 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 0℃에서 및 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응물을 이후 50 mL의 NH4Cl(sat. aq.)로 켄칭시키고, 이후 EtOAc(50 mL × 2)로 추출하고, 유기층을 합치고 농축시켰다. 잔류물을 PE:EtOAc(8:1)로 용출시키는 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄(12.4 g, 55% 수율)을 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.32 (s, 4H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 4.72 (dd, J = 6.3, 5.7 ㎐, 2H), 4.64 - 4.60 (m, 2H), 4.58 (dd, J = 8.6, 3.0 ㎐, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.57 (dt, J = 5.6, 2.7 ㎐, 5H).
단계 2: 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올. MeOH(20 mL) 중 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄(8 g, 38.41 mmol)의 용액에 Pd/C(4.09 g, 38.41 mmol, 10%)를 배치식으로 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 16시간 동안 교반하고, 이후 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE: EtOAc= 1: 5)를 통해 정제하여 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(2.96 g, 65% 수율)을 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 4.79 (dd, J = 8.3, 4.3 ㎐, 2H), 4.62 (dt, J = 10.1, 4.9 ㎐, 3H), 3.75 (d, J = 3.9 ㎐, 2H), 3.54 - 3.45 (m, 2H), 2.44 (d, J = 5.9 ㎐, 1H).
단계 3: (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤: DCM(15 mL) 중 라파마이신(1 g, 1.09 mmol)의 용액에 실온에서 30 mL 물에 용해시킨 브로모다이플루오로(트라이메틸실릴)메탄(2.22 g, 10.94 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 16시간 동안 실온에서 교반하고, 이후 빙냉 포화 수성 NaHCO3(10 mL)에 부었다. 유기층을 물(10 mL× 3) 및 염수(10 mL× 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc : PE = 1 : 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(200 mg, 19% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 986.5 [M+Na]+, T = 2.428 min.
단계 4: (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,52R)-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-39,41,42-트라이메톡시-30,31,32,33,43,44-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(43),28(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤: 톨루엔(6 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(300 mg, 0.31 mmol)의 용액에 실온에서 N1,N1,N8,N8-테트라메틸나프탈렌-1,8-다이아민(867 mg, 4.04 mmol) 및 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(0.51 g, 3.11 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 50℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 여과하고, 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: PE=1:1.5) 및 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(100 mg, 33% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1000.5 [M+Na]+.
단계 5: (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,45R,46R,56R)-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-8). THF(5 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,52R)-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-39,41,42-트라이메톡시-30,31,32,33,43,44-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(43),28(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤(50 mg, 0.05 mmol) 및 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(121 mg, 1.02 mmol)의 용액에 HND-8(25 mg)을 50℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 50℃에서 교반하고, 이후 냉각시키고, 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: PE = 1:1)를 통해 정제하여 표제 화합물(7 mg, 13% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1086.6 [M+Na]+, T = 2.479 min. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.88 (m, 4H), 5.34 (d, J = 3.5 ㎐, 4H), 4.86 - 4.10 (m, 2H), 3.94 - 3.51 (m, 8H), 3.51 - 2.99 (m, 13H), 2.85 - 2.45 (m, 3H), 2.46 - 1.97 (m, 6H), 1.97 - 1.54 (m, 20H), 1.55 - 1.21 (m, 11H), 1.21 - 0.81 (m, 17H), 0.83 - 0.65 (m, 2H).
실시예 7: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-11)의 합성:
Figure pct00164
단계 1: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. DMF(60 mL) 중 라파마이신(5 g, 5.47 mmol)의 용액에 이미다졸(1.49 g, 21.88 mmol)을 실온에서 첨가한 후, 바로 tert-부틸-클로로-다이메틸-실란(2.47 g, 16.41 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 NH4Cl 수용액(40 mL) 및 Et2O: 석유 에테르(60 mL, 2:1)의 혼합물에 부었다. 유기층을 이후 포화 NH4Cl 수용액(20 mL)으로 세정하고, 물 및 염수(20 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(10%에서 50%로 석유 에테르 중 EtOA)를 통해 정제하여 표제 화합물(4 g, 71% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1050.5 [M+Na]+.
단계 2: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. 톨루엔(15 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(1 g, 0.97 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(2.5 g, 11.67 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(1.6 mL, 14.59 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 혼합물을 이후 50℃로 6시간 동안 가열하고, 이후 냉각시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(0.45 g, 0.43 mmol)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1064.6 [M+Na]+.
단계 3: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. THF(10 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(0.4 g, 0.38 mmol)의 용액에 피리딘 하이드로플루오라이드(3.34 mL, 38.37 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 45℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 수성 NaHCO3의 혼합물에 붓고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(160 mg, 45% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 949.9 [M+Na]+.
단계 4: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-11). DCM(15 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(500 mg, 538.68 μmol)의 용액에 TFA(1.66 mL, 21.55 mmol)를 -50℃에서 첨가하였다. 혼합물을 동일 온도에서 10분 동안 교반하고, 이후 DCM(0.2 mL)에 용해시킨 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.91 g, 16.16 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -10℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM 및 수성 NaHCO3의 혼합물로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 이후 역상 크로마토그래피(70% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-11을 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1036.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.80 (m, 4H), 5.75 - 5.03 (m, 4H), 4.83 - 4.09 (m, 4H), 3.99 - 3.53 (m, 7H), 3.52 - 3.02 (m, 15H), 3.01 - 2.44 (m, 5H), 2.11 (ddd, J = 99.8, 49.8, 39.7 ㎐, 7H), 1.83 - 1.61 (m, 13H), 1.52 - 1.20 (m, 10H), 1.18 - 0.80 (m, 17H), 0.69 (dd, J = 23.8, 11.9 ㎐, 1H).
실시예 8: (28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,61R)-48-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-74,75-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-12)의 합성:
Figure pct00165
단계 1: 1,4-다이옥산-2-일메탄올. THF(120 mL) 중 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(7.77 g, 65.77 mmol) 및 HND-8(2.33 g, 65.77 mmol)의 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축시켜 1,4-다이옥산-2-일메탄올(6.97 g, 90% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.87 - 3.39 (m, 9H), 2.37 - 2.11 (m, 1H).
단계 2: 3-요오도프로필트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(40 mL) 중 3-요오도프로판-1-올(4 g, 21.51 mmol) 및 2,6-루티딘(4.61 g, 43.01mmol)의 혼합물을 0℃ 로 N2 하에 냉각시키고, 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(6.67 g, 23.66 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 10% 석유 에테르 중 EtOAc로 켄칭시키고 짧은 실리카 겔 컬럼에 통과시키고, 여과하고, 농축시켜 3-요오도프로필 트라이플루오로메탄설포네이트(6.72 g, 98% 수율)를 수득하였다.
단계 3: (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 라파마이신(2 g, 2.19 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(4.24 g, 32.82 mmol)의 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 빙냉 포화 NaHCO3(50 mL)에 붓고, 얼음물로 2회(60 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EA =3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.45 g, 61% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1104.5 [M+Na]+.
단계 4: (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-68,69-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤. DCM(7.2 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(1.35 g, 1.25 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(0.48 g, 3.74 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 HCl 1N으로 pH 5로 산성화하였다. 유기상을 H2O로 세정하고 상 분리기에 통과시키고, 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA:5% NH3/MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.5 g, 37% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1042.0 [M+Na]+.
단계 5: (28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,61R)-48-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-74,75-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-12). DCM(16 mL) 중 (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-68,69-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(0.4 g, 0.38 mmol) 및 1,4-다이옥산-2-일메탄올(1.36 g, 11.52 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.75 g, 15.36 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 -10℃에서 교반하고, 이후 차가운 포화 수성 NaHCO3(10 mL), 물(10 mL× 3) 및 염수(10 mL× 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 반응 혼합물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-12(156 mg, 34% 수율)를 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1150.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 6.01 (m, 4H), 5.47 (d, J = 43.7 ㎐, 3H), 5.33 - 5.10 (m, 2H), 4.22 (d, J = 31.5 ㎐, 2H), 3.73 (dd, J = 48.2, 40.9 ㎐, 12H), 3.39 (dd, J = 28.6, 10.3 ㎐, 10H), 3.02 (d, J = 10.8 ㎐, 3H), 2.71 (d, J = 16.9 ㎐, 9H), 2.32 (s, 2H), 2.12 - 1.37 (m, 31H), 1.35 - 0.75 (m, 20H).
실시예 9: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-14) 및 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48R,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-13)의 합성
Figure pct00166
단계 1: 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄. DMF(160 mL) 중 옥세탄-3-올(10 g, 135 mmol)의 용액에 수소화나트륨(3.24 g, 135mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 이 온도에서 30분 동안 교반하고, 이후 2-브로모에톡시메틸벤젠(43.55 g, 202.49 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 2시간 동안 0℃에서 이후 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응물을 800 mL의 NH4Cl(sat., aq.)을 첨가하여 켄칭시키고, 이후 2x120 mL의 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 합치고 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르/EA(8: 1)로 용출시키는 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(16.4 g, 78.75 mmol)을 무색 액체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 231 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.41 - 7.23 (m, 6H), 4.79 - 4.70 (m, 2H), 4.68 - 4.52 (m, 6H), 3.62 - 3.53 (m, 4H).
단계 2: 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올. MeOH(20 mL) 중 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄(4 g, 19.21 mmol)의 용액에 Pd/C(2.04 g, 19.21mmol)을 N2 하에 첨가하고, 이후 생성된 용액을 H2 하에 40℃에서 밤새 교반하고, 이후 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르: EA= 1: 5로 용출시키는 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(2.1 g, 93% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 4.79 (td, J = 5.8, 2.1 ㎐, 2H), 4.62 (dt, J = 10.2, 4.9 ㎐, 3H), 3.80 - 3.69 (m, 2H), 3.52 - 3.44 (m, 2H), 2.36 (s, 1H).
단계 3: 3-요오도프로필트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(40 mL) 중 3-요오도프로판-1-올(4 g, 21.5 mmol) 및 2,6-루티딘(4.61 g, 43 mmol)의 혼합물에 0℃에서 N2 하에 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(6.67 g, 23.66 mmol)를 적가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 10% 석유 에테르 중 EtOAc로 켄칭시키고, 짧은 실리카 겔 컬럼을 통해 정제하고; 여액을 감압 하에서 농축시켜, 황색 여액을 진공 중에 농축시켜 표제 화합물(6.72 g, 98% 수율)을 밝은 황색 액체로서 수득하였다.
단계 4: (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 라파마이신(2 g, 2.19 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(5.72 mL, 32.82 mmol)의 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 NaHCO3(50 mL)에 붓고, 얼음물(60 mL× 2), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EA= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.45 g, 61% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1104.5 [M+Na]+.
단계 5: (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-68,69-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤. DCM(7.2 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(중간체 II, 1.35 g, 1.25 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(0.65 mL, 3.74mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 1N HCl 수용액으로 pH=5로 산성화하였다. 유기상을 H2O로 세정하고, 상 분리기를 통해 여과하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA: 5% 7 M MeOH 중 NH3 = 4: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(498 mg, 37% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1042.0 [M+Na]+.
단계 6: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤. DCM(30 mL) 중 (26E,28E,30E,31E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49S,58R)-48-에틸-49,58-다이하이드록시-46-메톡시-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-69,70-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(50),31(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(200 mg, 0.19 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(0.59 mL, 7.70 mmol)을 -50℃에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 10분 동안 -50℃에서 교반하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(682 mg, 5.77 mmol, DCM에 용해됨)을 동일 온도에서 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 -10℃에서 교반하고, 이후 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(15 mL)에 붓고, DCM(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(40 mg, 18% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1126.69 [M+H] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39 - 5.98 (m, 4H), 5.55 - 5.03 (m, 5H), 4.78 - 4.43 (m, 4H), 4.15 (d, J = 40.7 ㎐, 2H), 3.71 (t, J = 21.3 ㎐, 6H), 3.60 - 3.45 (m, 3H), 3.46 - 3.14 (m, 10H), 2.96 (d, J = 11.0 ㎐, 3H), 2.56 (d, J = 54.3 ㎐, 8H), 2.26 (s, 2H), 2.17 - 2.03 (m, 2H), 1.94 (s, 4H), 1.80 - 1.32 (m, 15H), 1.28-1.10 (m, 11H), 1.06 - 0.56 (m, 19H).
단계 7: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-14) 및 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48R,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-13). 120 mg의 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,61R)-51,61-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(3-모폴리노프로폭시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(17% 석유 에테르 중 MeOH: DCM: EA: 3: 3: 1)를 통해 정제하여 I-14(7.2 mg, 6% 수율)를 백색 고체로서 및 I-13(14.8 mg, 12% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 2.5 cm I.D. × 25 cm L, 10 μm
샘플 용액: 이동상에서 1.3 mg/mL
주입량: 8 mL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 20 mL/분;
파장: UV 254 nm
온도: 38℃
I-14: ESI-MS (EI+, m/z): 1126.8 [M+H] +; 1148.9 [M+Na] +. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.41 - 5.74 (m, 4H), 5.51 - 5.01 (m, 4H), 4.80 - 4.41 (m, 5H), 4.10 (d, J = 5.4 ㎐, 1H), 3.88 - 2.88 (m, 26H), 2.72 - 2.13 (m, 12H), 2.00 - 1.27 (m, 26H), 1.10 - 0.59 (m, 20H).
I-13: ESI-MS (EI+, m/z): 1126.8 [M+H] +; 1148.9 [M+Na] +.
1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.41 - 5.80 (m, 4H), 5.63 - 5.01 (m, 4H), 4.76 - 4.45 (m, 5H), 4.25 - 3.92 (m, 2H), 3.87 - 2.88 (m, 25H), 2.71 - 2.04 (m, 12H), 1.91 (d, J = 28.3 ㎐, 5H), 1.62 (ddt, J = 39.3, 32.9, 10.5 ㎐, 14H), 1.47 - 1.29 (m, 7H), 1.08 - 0.55 (m, 20H).
실시예 10: (28E,30E,32E,33E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,52R,53R,62R)-52,62-다이하이드록시-53-메톡시-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,41,42,43,54,55-헥사메틸-49-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-74,75-다이옥사-65-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(54),33(55)-테트라엔-56,57,58,59,60-펜톤(I-15)의 합성:
Figure pct00167
단계 1: (27E,29E,31E,32E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,58R)-48,58-다이하이드록시-46,49-다이메톡시-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-69,70-다이옥사-61-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(50),32(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤. DCM(30 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-요오도프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(중간체 II, 1.45 g, 1.34 mmol), 1-메틸피페라진(0.16 g, 1.61 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(0.52 g, 4.02 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고 1N HCl로 pH 5로 산성화하였다. 유기상을 H2O로 세정하고 상 분리기에 통과시키고, 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA:5% NH3/MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.96 g, 68% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 5.95-6.39 (m, 4H), 5.16-5.55 (m, 4H), 4.10-4.22 (m, 2H), 3.55-3.87 (m, 6H), 3.30-3.43 (m, 8H), 2.98-3.17 (m, 6H), 2.67-2.86 (m, 9H), 2.50-2.64 (m, 3H), 2.46 (S, 2H), 2.27-2.35 (m, 2H), 1.95-2.05 (m, 7H), 1.79-1.86 (m, 3H), 1.74-1.76 (m, 3H), 1.58-1.71 (m, 8H), 1.46-1.54 (m, 3H), 1.31-1.35 (m, 2H), 0.86-1.35 (m, 23H).
단계 2: (28E,30E,32E,33E,40R,41S,42R,43R,45S,47S,50S,52R,53R,62R)-52,62-다이하이드록시-53-메톡시-50-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,41,42,43,54,55-헥사메틸-49-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-74,75-다이옥사-65-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(54),33(55)-테트라엔-56,57,58,59,60-펜톤(I-15). DCM(20 mL) 중 (27E,29E,31E,32E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,58R)-48,58-다이하이드록시-46,49-다이메톡시-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(4-메틸피페라진-1-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-69,70-다이옥사-61-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(50),32(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(0.78 g, 0.74 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3.38 g, 29.65 mmol)을 -40℃에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 10분 동안 -40℃에서 교반하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(2.63 g, DCM 중 22.23 mmol)을 동일 온도에서 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 -20℃에서 교반하고, 이후 0℃에서 포화 수성 NaHCO3 용액(25 mL)에 붓고, DCM(25 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(25 mL) 및 염수(25 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 수중 0.01% HCOOH를 함유하는 50% CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-15(120 mg, 14% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1140.8 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3): δ 5.97-6.36 (m, 4H), 5.15-5.49 (m, 4H), 4.57-4.79 (m, 5H), 4.04-4.27 (m, 2H), 3.73-3.86 (m, 2H), 3.54-3.64 (m, 3H), 3.33-3.52 (m, 11H), 2.64-3.09 (m, 15H), 2.48-2.63 (m, 4H), 2.28-2.35 (m, 2H), 1.86-2.11 (m, 8H), 1.61-1.79 (m, 11H), 1.14-1.56 (m, 12H), 0.82-1.09 (m, 18H).
실시예 11: [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-16), [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-55,56,57,58,59-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-18) 및 [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48R,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-55,56,57,58,59-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-17)의 합성
Figure pct00168
단계 1: tert-부틸 N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(5 mL) 중 2-모폴리노에탄아민(10 g, 76.81 mmol)의 용액에 트리에틸아민(5.35 mL, 38.41 mmol) 및 tert-부톡시카르보닐 tert-부틸 카르보네이트(18.44 g, 84.5 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 200 mL의 다이클로로메탄으로 희석하고, 이후 30 mL의 10% 중탄산나트륨 및 30 mL의 염수로 세정하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물(17 g, 96% 수율)을 회백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 231.3 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.78 - 3.62 (m, 4H), 3.24 (d, J = 5.5 ㎐, 2H), 2.45 (dd, J = 8.0, 3.9 ㎐, 6H), 1.49 - 1.42 (m, 9H).
단계 2: tert-부틸 N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. Tert-부틸 N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(18 g, 78.16 mmol)를 DMF(240 mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, NaH(9.38 g, 234.47 mmol, 60% 순도)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이후 0℃로 냉각시키고, 요오도메탄(12.2 g, 85.97 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 이후 에틸 아세테이트(500 ml)로 희석하고, 포화 염화암모늄 수용액(300 mL) 및 염수(300 mL×5)로 순차적으로 세정하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 미정제 표제 화합물(14 g, 73% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 245.3 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.74 - 3.64 (m, 4H), 3.34 (s, 2H), 2.93 - 2.81 (m, 3H), 2.48 (d, J = 4.8 ㎐, 6H), 1.46 (s, 10H).
단계 3: N-메틸-2-모폴리노-에탄아민. 염산(4 M, 143.25 mL)에 0℃에서 tert-부틸 N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(14 g, 57.3 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 50 분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 NH3(7 M, 81.86 mL)로 처리하고, 1시간 동안 교반하고, 이후 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: MeOH: TEA= 90: 10: 0.1)를 통해 정제하여 표제 화합물(7.4 g, 90% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 145.1 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, DMSO-d 6) δ 9.03 (s, 2H), 3.80 (s, 4H), 3.26 (dd, J = 44.9, 20.4 ㎐, 8H), 2.63 (s, 3H).
단계 4: [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(30E,32E,34E,35E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,50R,51R,61R)-61-하이드록시-48,51-다이메톡시-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-50-트라이메틸실릴옥시-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-30,32,34(52),35(53)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(5 mL) 중 (25E,27E,29E,30E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-43-트라이메틸실릴옥시-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(45),30(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.5 g, 0.507 mmol) 및 피리딘(160.4 mg, 2.03 mmol, 164 μL)의 용액에 0℃에서 아르곤 하에 트리포스겐(150.43 mg, 0507 mmol, THF(20 mL)중)을 시린지를 통해 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 이후 트리에틸아민(0.41 g, 4.06 mmol) 및 N-메틸-2-모폴리노-에탄아민(1.46 g, 10.14 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 추가 1시간 동안 교반하고, DCM으로 희석하고, 수성 NH4Cl 용액, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(8% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(386 mg, 66% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1156.4 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.57 - 5.93 (m, 4H), 5.73 - 5.47 (m, 1H), 5.27 - 4.98 (m, 2H), 4.72 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.36 - 3.54 (m, 12H), 3.54 - 3.05 (m, 12H), 2.93 (s, 4H), 2.40 (dt, J = 34.4, 23.8 ㎐, 11H), 2.04 (s, 5H), 1.88 - 1.52 (m, 12H), 1.52 - 1.17 (m, 10H), 1.20 - 0.73 (m, 17H), 0.10 - -0.14 (m, 9H).
단계 5: [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. 아세톤(5 mL) 및 물(5 mL) 중의 [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(30E,32E,34E,35E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,50R,51R,61R)-61-하이드록시-48,51-다이메톡시-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-50-트라이메틸실릴옥시-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-30,32,34(52),35(53)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(1.8 g, 1.56 mmol)의 용액에 0.5 N 황산(4.67 mL)을 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 100 mL EtOAc 및 100 mL의 포화 수성 NaHCO3 용액의 혼합물에 부었다. 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(5% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.4 g, 83% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.47 - 5.84 (m, 4H), 5.60 - 5.05 (m, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.34 - 4.10 (m, 1H), 3.92 - 3.52 (m, 7H), 3.52 - 3.23 (m, 10H), 3.13 (d, J = 2.7 ㎐, 4H), 2.92 (s, 3H), 2.78 - 2.39 (m, 8H), 2.40 - 2.00 (m, 5H), 2.03 - 1.53 (m, 18H), 1.53 - 1.11 (m, 12H), 1.11 - 0.87 (m, 13H), 0.83 (d, J = 6.5 ㎐, 2H).
단계 6: [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-55,56,57,58,59-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-16). DCM(5 mL) 중 [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(0.2 g, 0.18 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(426 μL, 5.53 mmol)를 -10℃에서 적가하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.436 g, 3.69 mmol)을 적가하고, 혼합물을 -10℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 수성 NaHCO3 용액, 물 및 염수로 세정하고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(65% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-16(63 mg, 29% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1170.8 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46-6.01 (m, 4H), 5.56-5.15 (m, 4H), 4.75 (s, 2H), 4.60 (s, 3H), 4.18 (s, 2H), 3.72 (s, 6H), 3.64-3.03 (m, 13H), 2.94 (s, 3H), 2.80-2.28 (m, 9H), 2.13-1.87 (m, 4H), 1.84-1.38 (m, 24H), 1.85-0.75 (m, 25H).
단계 7: [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-55,56,57,58,59-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-18) 및 [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48R,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-55,56,57,58,59-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(53),33(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-17). 120 mg의 I-16을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하여 I-18(27.5 mg, 23% 수율)을 백색 고체로서 및 I-17(16.1 mg, 13% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC(IC00CE-UF123)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 25 cm L
주입량: 20 μl
이동상: EtOH=100%
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-18: ESI-MS (EI+, m/z): 1170.8 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.40 - 5.78 (m, 4H), 5.62-5.03 (m, 4H), 4.76 - 4.39 (m, 6H), 4.12 (d, J = 5.9 ㎐, 1H), 3.88 - 3.59 (m, 6H), 3.56 - 3.00 (m, 17H), 2.86 (s, 3H), 2.79 - 2.18 (m, 11H), 2.15 - 1.81 (m, 5H), 1.59 (t, J = 15.2 ㎐, 13H), 1.49-1.15 (m, 11H), 1.10 - 0.66 (m, 18H).
I-17: ESI-MS (EI+, m/z): 1170.7 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.49 - 5.81 (m, 4H), 5.64 - 5.06 (m, 4H), 4.66 (d, J = 65.7 ㎐, 3H), 4.23 (d, J = 26.2 ㎐, 2H), 3.94 - 3.03 (m, 28H), 2.98-2.22 (m, 15H), 2.21 - 1.69 (m, 11H), 1.54-1.18 (m, 13H), 1.15 - 0.69 (m, 19H).
실시예 12: [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-19), [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-21) 및 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-20)
Figure pct00169
단계 1: (25E,27E,29E,30E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-43-트라이메틸실릴옥시-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(45),30(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. EtOAc(35 mL) 중 라파마이신(5.5 g, 6.02 mmol) 및 이미다졸(3.2 g, 48 mmol)의 용액에 TMSCl(5.2 g, 48 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이후 0.5 N H2SO4 용액(24 mL)을 0℃에서 첨가하였다. 첨가 후, 생성된 용액을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc(100 mL) 및 염수(50 mL)로 희석하고, 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(4.33 g, 2 단계에 대해 73%)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1008.2 [M+Na] +. 1H-NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.50 - 5.80 (m, 4H), 5.61 (ddd, J = 23.0, 14.1, 7.6 ㎐, 1H), 5.37 - 5.19 (m, 2H), 5.07 (ddd, J = 11.3, 9.1, 5.2 ㎐, 1H), 4.71 (d, J = 1.4 ㎐, 1H), 3.89 - 3.56 (m, 4H), 3.50 - 3.30 (m, 6H), 3.29 - 3.18 (m, 3H), 3.18 - 3.04 (m, 3H), 2.97 - 2.86 (m, 1H), 2.84 - 2.45 (m, 3H), 2.43 - 2.05 (m, 4H), 1.97 (dd, J = 10.0, 5.4 ㎐, 2H), 1.86 - 1.50 (m, 19H), 1.49 - 0.81 (m, 23H), 0.68 (dd, J = 23.6,11.9 ㎐, 1H), 0.05- 0.07 (m, 9H).
단계 2: [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(29E,31E,33E,34E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,60R)-60-하이드록시-47,50-다이메톡시-38,39,40,41,51,52-헥사메틸-53,54,55,56,57-펜타옥소-49-트라이메틸실릴옥시-72,73-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-29,31,33(51),34(52)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(40 mL) 중 (25E,27E,29E,30E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-43-트라이메틸실릴옥시-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(45),30(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(2 g, 2.03 mmol) 및 피리딘(0.64 g, 8.11 mmol)의 용액에 트리포스겐(0.6 g, 10 mL DCM 중 2.03 mmol)을 시린지에 의해 0℃에서 아르곤 하에 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 이후 TEA(0.62 g, 6.08 mmol) 및 2-모폴리노에탄아민(0.53 g, 4.06 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 추가 1시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, 수성 NH4Cl 용액, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(8% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(2 g, 86% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다.
단계 3: [(39S,41R,43R)-4-[(2R)-2-[(26E,28E,30E,31E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-다이하이드록시-44,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-50,51,52,53,54-펜타옥소-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-45-일]프로필]-43-메톡시-41-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. 아세톤(40 mL) 및 H2O(10 mL) 중의 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(29E,31E,33E,34E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,60R)-60-하이드록시-47,50-다이메톡시-38,39,40,41,51,52-헥사메틸-53,54,55,56,57-펜타옥소-49-트라이메틸실릴옥시-72,73-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-29,31,33(51),34(52)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실]-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(2 g, 1.75 mmol)의 용액에 0.5 N H2SO4(2.63 mmol, 5.3 mL)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 8 시간 동안 교반하고, 이후 100 mL EtOAc 및 100 mL의 포화 수성 NaHCO3 용액의 혼합물에 부었다. 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(5% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.5 g, 80% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다.
단계 4: [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(4 mL) 중 [(39S,41R,43R)-4-[(2R)-2-[(26E,28E,30E,31E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-다이하이드록시-44,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-50,51,52,53,54-펜타옥소-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-45-일]프로필]-43-메톡시-41-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(02 g, 0.18 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(0.85 g, 7.47 mmol)를 -40℃에서 첨가하였다. 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.22 g, 1.87 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 저온 포화 수성 NaHCO3(30 mL)에 붓고, DCM(30 mL)으로 추출하고, 물(30 mL) 및 염수(30mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼에 의해 정제하여 I-19(35 mg, 16% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1179.6 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.41-5.90 (m, 4H), 5.58-5.39 (m, 2H), 5.30-5.15 (m, 2H), 4.80-4.51 (m, 5H), 4.32-3.95 (m, 2H), 3.92-3.66 (m, 7H), 3.60-3.40 (m, 4H), 3.39-3.20 (m, 11H), 3.19-3.05 (m, 2H), 2.79-2.62 (m, 2H), 2.61-2.40 (m, 7H), 2.37-2.20 (m, 2H), 2.15-1.90 (m, 5H), 1.84-1.58 (m, 17H), 1.54-1.16 (m, 7H), 1.15-0.83 (m, 17H), 0.82-0.75 (m, 1H).
단계 5: [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-21) 및 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-20)
115 mg의 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,50R,51R,61R)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-47-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-54,55,56,57,58-펜타옥소-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(52),32(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트를 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(12% 석유 에테르 중 MeOH: DCM: EA= 3: 3: 1)를 통해 정제하여 I-21(23 mg, 20% 수율)을 백색 고체로서 및 I-20(10 mg, 8.7% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 2.5 cm I.D. × 25 cm L, 10 μm
샘플 용액: 이동상에서 3 mg/mL
주입량: 10 mL
이동상: EtOH=100%
유량: 10 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-21: ESI-MS (EI+, m/z): 1156.9 [M+H] +, 1178.8 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.78 (m, 4H), 5.74 - 5.01 (m, 5H), 4.68 (ddd, J = 37.1, 11.1, 6.1 ㎐, 6H), 4.32 - 4.13 (m, 1H), 3.96 - 3.06 (m, 23H), 2.79 - 2.24 (m, 10H), 2.17 - 1.18 (m, 29H), 1.17 - 0.76 (m, 19H).
I-20: ESI-MS (EI+, m/z): 1156.9 [M+H] +, 1178.8 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.58 - 5.81 (m, 4H), 5.67 - 5.02 (m, 5H), 4.44 (dd, J = 176.8, 44.7 ㎐, 6H), 4.03 - 3.05 (m, 26H), 2.83 - 2.29 (m, 10H), 2.17 - 1.19 (m, 27H), 1.16 - 0.69 (m, 19H).
실시예 13: (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-44-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]-56-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(48),27(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-23)
Figure pct00170
단계 1: (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤(중간체 IX는 실시예 22에 따라 제조, 2 g, 1.67 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(3.94 g, 18.39 mmol)의 용액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(2.19 g, 13.37 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 50℃로 5시간 동안 가열하고, 이후 냉각하고, 여과하고, EA(60 mL)로 희석하고, sat. NH4Cl(aq)(60 mL × 3), 물(60 mL) 및 염수(60 mL)로 세정하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EA= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(700 mg, 35% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1232.7 [M+Na] +.
단계 2: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,43,44-트라이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. THF(10 mL) 중 (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(600 mg, 0.496 mmol)의 용액에 피리딘·HF(392 mg, 4.96 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 EA(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: 아세톤= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(430 mg, 89% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 994.7 [M+Na] +.
단계 3: (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-44-[2-(2-아지도에톡시)에톡시]-56-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-68,69-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(48),27(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤. THF(10 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,43,44-트라이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(450 mg, 462.85 μmol) 및 2-(2-아지도에톡시)에탄올(1.21 g, 9.26 mmol)의 용액에 HND-8(100 mg)을 50℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 22시간 동안 50℃에서 교반하고, 이후 냉각하고, 여과하였다. 여액을 포화 수성 NaHCO3(10 mL)의 용액에 0℃에서 붓고, EA(30 mL)로 추출하고, 유기층을 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(70% 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 표제 화합물(250 mg, 50% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1093.4 [M+Na] +.
단계 4: (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-44-[2-(2-아미노에톡시)에톡시]-56-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(48),27(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-23). THF(10 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-44-[2-(2-아지도에톡시)에톡시]-56-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-68,69-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(48),27(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(0.6 g, 0.56 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(0.44 g, 1.68 mmol)을 천천히 첨가하였다. 생성된 용액을 60℃에서 2시간 동안 교반하고, 0.05 ml의 물을 첨가하고, 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하고, 이후 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(0.025% TFA를 포함하는 CH3CN/H2O)에 의해 정제하여 I-23(40 mg, 7% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1045.7 [M+H] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 4.61-5.96 (m, 4H), 5.69-5.07 (m, 4H), 4.51-4.01 (m, 3H), 3.82-3.52 (m, 7H), 3.47-3.37(m, 5H), 3.31-3.04 (m, 13H), 2.88-2.52 (m, 2H), 2.38-1.97 (m,7H), 1.85-1.52 (m,17H), 1.38-1.13 (m, 7H), 1.12-0.98 (m, 5H), 0.98-0.77 (m, 17H), 0.75-0.68 (m, 1H).
실시예 14: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-21-((1,4-다이옥산-2-일)메톡시)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-24) 및 (27E,29E,31E,32E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-25)의 합성.
Figure pct00171
Figure pct00172
단계 1: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. DMF(60 mL) 중 라파마이신(5 g, 5.47 mmol)의 용액에 실온에서 이미다졸(1.49 g, 21.88 mmol) 및 tert-부틸-클로로-다이메틸-실란(2.47 g, 16.41 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 수성 NH4Cl(40 mL) 및 Et2O:석유 에테르(60 mL, 2:1)의 혼합물에 부었다. 유기층을 포화 수성 NH4Cl(20 mL)로 세정하고, 물 및 염수(20 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(10%에서 50%로 석유 에테르 중 EtOA)를 통해 정제하여 표제 화합물(4 g, 71% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1050.5 [M+Na]+.
단계 2: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. 톨루엔(15 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(1 g, 0.97 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(2.5 g, 11.67 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(1.6 mL, 14.59 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 50℃로 6시간 동안 가열하고, 이후 냉각시키고, 여과하고, 여액을 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(0.45 g, 0.43 mmol)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1064.6 [M+Na]+.
단계 3: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온. THF(10 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-((tert-부틸다이메틸실릴)옥시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(400 mg, 038 mmol)의 용액에 피리딘 하이드로플루오라이드(3.34 mL, 38.37 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 45℃로 가온하고, 5시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(0.16 g, 45% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 949.9 [M+Na]+.
단계 4: (1R,2R,4S)-4-((R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트. DCM(10 mL) 중 (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(0.26 g, 0.28 mmol)의 용액에 DCM(1 mL)중의 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.173 g, 0.84 mmol) 및 다이메틸포스핀 클로라이드(0.315 g, 2.8 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc로 희석하고, 수성 NaHCO3 용액, 빙냉 0.5 N HCl 용액, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: MeOH= 40: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.1 g, 36% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1025.8 [M+Na]+.
단계 5: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-21-((1,4-다이옥산-2-일)메톡시)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-24). DCM(5 mL) 중 (1R,2R,4S)-4-((R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10,21-트라이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(129 mg, 0.129 mmol)의 용액에 TFA(0.49 mL, 6.42 mmol)를 -50℃에서 첨가하였다. 혼합물을 동일 온도에서 10분 동안 교반하고, 이후 DCM(0.5 mL)에 용해시킨 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.758 g, 6.42 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 이후 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 이후 역상 크로마토그래피(70% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-24(30 mg, 21% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1112.8 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.49 (br, 4H), 5.63 - 5.06 (m, 4H), 4.78 - 4.05 (m, 3H), 3.66 (ddd, J = 23.6, 18.4, 8.5 ㎐, 9H), 3.49 - 2.97 (m, 17H), 2.82 - 2.48 (m, 2H), 2.37 - 1.86 (m, 7H), 1.56 - 1.23 (m, 22H), 1.18 - 0.68 (m, 24H).
단계 6: (27E,29E,31E,32E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-25). 100 mg의 I-24를 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(8% 석유 에테르 중 MeOH: DCM: EA: 3: 3: 1)를 통해 정제하여 I-25(14 mg, 14% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 2.5 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 9 mg/mL
주입량: 15 mL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
ESI-MS (EI+, m/z): 1112.6 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.49 - 5.80 (m, 4H), 5.67 - 5.15 (m, 4H), 4.20-4.02 (m, 2H), 3.98 - 3.55 (m, 12H), 3.52 - 3.00 (m, 17H), 2.60 (ddd, J = 39.8, 34.1, 28.4 ㎐, 6H), 2.37 - 1.83 (m, 7H), 1.66 (dt, J = 39.0, 20.7 ㎐, 12H), 1.42 - 1.19 (m, 8H), 1.18 - 0.66 (m, 20H).
실시예 15: (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,45R,46R,55R)-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-55-하이드록시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-26) 및 (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,45R,46R,55R)-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-55-하이드록시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-27)의 합성
Figure pct00173
단계 1: (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,43S,45R,46R,55R)-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-55-하이드록시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-26). THF(15 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,51R)-51-하이드록시-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,41,42-트라이메톡시-30,31,32,33,43,44-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(43),28(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤(중간체 X는 실시예 16에 따라 제조, 0.312 g, 0.336 mmol)의 용액에 질소 하에 0℃에서 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.397 g, 3.36 mmol) 및 HND-8(624 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 및 TLC(석유 에테르: EtOAc= 1: 2)에 의해 정제하여 I-26(30 mg, 9% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1035.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3): 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.57 - 5.90 (m, 3H), 5.71 - 5.00 (m, 3H), 4.72 - 4.10 (m, 1H), 3.91 - 3.52 (m, 7H), 3.38 (dd, J = 22.8, 12.9 ㎐, 5H), 3.30 - 3.15 (m, 3H), 3.16 - 3.02 (m, 3H), 3.00 - 2.46 (m, 4H), 2.15 (dd, J = 97.2, 37.0 ㎐, 5H), 1.85 - 1.53 (m, 23H), 1.52 - 1.21 (m, 9H), 1.19 - 0.82 (m, 14H), 0.69 (d, J = 11.9 ㎐, 1H).
단계 2: (25E,27E,29E,30E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,45R,46R,55R)-42-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-55-하이드록시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-33,34,35,36,47,48-헥사메틸-66,67-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(47),30(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-27). 85 mg의 에피머 혼합물을 분취용 키랄 HPLC를 통해 이후 실리카 겔 크로마토그래피(헥산: DCM: EtOAc: MeOH= 3: 3: 1: 0.3)에 의해 정제하여 I-27(25 mg, 29% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 0.3 mg/mL
주입량: 3 mL
이동상: 헥산/EtOH=70/30(V/V)
유량: 25 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
ESI-MS (EI+, m/z): 1036.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44 - 5.80 (m, 4H), 5.65 - 5.01 (m, 4H), 4.64 (d, J = 15.9 ㎐, 1H), 3.99 - 3.52 (m, 11H), 3.47 - 3.02 (m, 16H), 3.02 - 2.46 (m, 5H), 2.43 - 1.85 (m, 8H), 1.83 - 1.64 (m, 9H), 1.46 - 1.19 (m, 10H), 1.16 - 0.83 (m, 18H), 0.79 - 0.59 (m, 1H).
실시예 16: (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-28)의 합성:
Figure pct00174
단계 1: (27E,29E,31E,32E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,55-다이하이드록시-43,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(47),32(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤. DMF(30 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(2 g, 2.19 mmol)의 용액에 이미다졸(0.596 g, 8.75 mmol) 및 tert-부틸 클로로다이메틸실란(0.989 g, 6.56 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 수성 NH4Cl 용액(40 mL) 및 Et2O: 석유 에테르(60 mL, 2:1)에 부었다. 유기층을 포화 수성 NH4Cl 용액(20 mL)으로 세정하고, 물 및 염수(20 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(10%에서 50%로의 석유 에테르 중 EtOAc)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.5 g, 67% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1049.8 [M+Na]+.
단계 2: (28E,30E,32E,33E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-44,46,47-트라이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-65,66-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(48),33(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤. 톨루엔(20 mL) 중 (27E,29E,31E,32E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,55-다이하이드록시-43,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(47),32(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.6 g, 0.58 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(1.5 g, 7 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(0.957 g, 5.83 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 50℃로 6시간 동안 가열하고, 이후 냉각시키고, 여과하고, 여액을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: 석유 에테르 = 4: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.24 g, 39% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1063.8 [M+Na]+.
단계 3: (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,51R)-51-하이드록시-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,41,42-트라이메톡시-30,31,32,33,43,44-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(43),28(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤. THF(10 mL) 중 (28E,30E,32E,33E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-44,46,47-트라이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-65,66-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(48),33(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(0.24 g, 0.23 mmol)의 용액에 피리딘 하이드로플루오라이드(2.28 g, 23.02 mmol, 2 mL)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 45℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 포화 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다 잔류물을 역상 크로마토그래피(78% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(0.105 g, 49% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 949.7 [M+Na]+.
단계 4: (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-28). THF(15 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,30R,31S,32R,33R,35S,37S,39S,40S,41R,42R,51R)-51-하이드록시-40-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,41,42-트라이메톡시-30,31,32,33,43,44-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(43),28(44)-테트라엔-45,46,47,48,49-펜톤(0.15 g, 0.16 mmol)의 용액에 질소 하에 0℃에서 2-(2-(2-메톡시에톡시)에톡시)에탄올(0.265 g, 1.62 mmol) 및 HND-8(0.3 g)을 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 8시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해, 이후 분취용 TLC(석유 에테르: 에틸 아세테이트= 1: 2)에 의해 정제하여 (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(36.5 mg, 21% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1035.8 [M+Na]+. 1HNMR (500 ㎒, CDCl3): 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.59 - 5.88 (m, 3H), 5.85 - 4.93 (m, 4H), 4.72 - 4.18 (m, 1H), 4.15 - 3.76 (m, 2H), 3.74 - 3.52 (m, 8H), 3.50 - 3.30 (m, 8H), 3.29 - 3.03 (m, 5H), 3.03 - 2.47 (m, 5H), 2.45 - 1.89 (m, 6H), 1.90 - 1.52 (m, 21H), 1.32 (ddd, J = 28.1, 22.9, 5.8 ㎐, 9H), 1.19 - 0.78 (m, 14H), 0.69 (d, J = 12.0 ㎐, 1H).
실시예 17: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에 톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-29), (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-31) 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-30)의 합성
Figure pct00175
단계 1: (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤. 톨루엔(5 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(0.2 g, 0.219 mmol)의 용액에 양성자 스펀지(0.938 g, 4.38 mmol) 및 이어서 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(0.539 g, 3.28 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하고, 냉각시키고, 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 이후 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 표제 화합물(50 mg, 24% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 964.2 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.50 - 5.80 (m, 4H), 5.62 (ddd, J = 22.9, 14.5, 7.9 ㎐, 1H), 5.32 (dt, J = 11.6, 7.7 ㎐, 2H), 5.18 - 5.03 (m, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.95 - 3.54 (m, 5H), 3.50 - 3.33 (m, 7H), 3.32 - 3.21 (m, 3H), 3.18 - 2.92 (m, 8H), 2.83 - 2.48 (m, 3H), 2.25 (dd, J = 30.1, 10.7 ㎐, 2H), 2.02 (ddd, J = 34.0, 26.3, 9.6 ㎐, 4H), 1.88 - 1.56 (m, 14H), 1.51 - 1.16 (m, 9H), 1.15 - 0.82 (m, 18H), 0.79-0.68 (m, 1H).
단계 2: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-29). 술포란(5 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(0.17 g, 0.18 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(0.43 g, 3.61 mmol)의 용액에 HND-8(35 mg)을 50℃에서 N2 하에 첨가하였다. 생성된 용액을 50℃에서 3시간 동안 교반하고, 여과하고, 여액을 85% 수중 CH3CN으로 용출시키면서 C18 컬럼에 통과시켜 I-29(65 mg, 35% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1052.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.81 (m, 4H), 5.74 - 5.03 (m, 4H), 4.68 - 4.15 (m, 2H), 3.99 - 3.52 (m, 11H), 3.50 - 3.22 (m, 16H), 3.21 - 2.98 (m, 6H), 2.94 - 2.44 (m, 3H), 2.37 - 1.89 (m, 7H), 1.86 - 1.69 (m, 7H), 1.52 - 1.24 (m, 9H), 1.22 - 0.84 (m, 21H), 0.74 (dd, J = 22.3, 10.9 ㎐, 1H).
단계 3: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-31) 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-64,65-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-30). 130 mg의 혼합물을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(헥산: DCM: EtOAc: MeOH, 3: 3: 1: 0에서 3: 3: 1: 0.4로)를 통해 정제하여 I-31(45 mg, 35% 수율)을 백색 고체로서 및 I-30(40 mg, 31% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 1.4 mg/mL
주입량: 15 mL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 60 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-31: ESI-MS (EI+, m/z): 1052.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.82 (m, 4H), 5.76 - 5.03 (m, 4H), 4.51 (dd, J = 56.0, 27.4 ㎐, 1H), 4.35 - 4.06 (m, 1H), 4.00 - 3.20 (m, 26H), 3.19 - 2.98 (m, 5H), 2.88 - 2.48 (m, 3H), 2.40 - 1.85 (m, 7H), 1.82 - 1.65 (m, 11H), 1.38 (ddd, J = 37.8, 31.6, 21.3 ㎐, 10H), 1.21 - 0.83 (m, 18H), 0.79-0.68 (m, 1H).
I-30: ESI-MS (EI+, m/z): 1052.2 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.52-5.81 (m, 4H), 5.77 - 5.04 (m, 5H), 4.70 - 4.14 (m, 2H), 4.01 - 2.97 (m, 31H), 2.64 (dd, J = 50.7, 36.3 ㎐, 3H), 2.42 - 1.68 (m, 16H), 1.50 - 0.61 (m, 30H).
실시예 18: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-32), (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-34) 및 (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-33)의 합성
Figure pct00176
단계 1: (27E,29E,31E,32E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,55-다이하이드록시-43,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(47),32(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤. DMF(15 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(2 g, 2.19 mmol)의 용액에 이미다졸(0.298 g, 4.38 mmol) 및 tert-부틸-클로로-다이메틸-실란(0.495 g, 3.28 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 수성 NH4Cl 용액(10 mL) 및 Et2O: 석유 에테르(300 mL, 2:1)에 붓고, 유기층을 포화 수성 NH4Cl 용액(100 mL)으로 세정하고, 물 및 염수(100 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(10%에서 50%로의 석유 에테르 중 EtOAc)에 의해 정제하여 표제 화합물(1.85 g, 82% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1050.2 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44 - 5.83 (m, 4H), 5.60 - 5.07 (m, 4H), 4.32 - 4.04 (m, 2H), 3.79 (d, J = 13.4 ㎐, 1H), 3.70 (d, J = 6.1 ㎐, 1H), 3.65 (dd, J = 9.8, 5.5 ㎐, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 1H), 3.43 - 3.28 (m, 8H), 3.13 (s, 3H), 2.94 - 2.81 (m, 1H), 2.73 (dd, J = 16.8, 5.9 ㎐, 2H), 2.63 - 2.47 (m, 1H), 2.33 (d, J = 12.7 ㎐, 2H), 2.07 - 1.89 (m, 4H), 1.89 - 1.40 (m, 19H), 1.38 - 1.02 (m, 15H), 1.02 - 0.76 (m, 18H), 0.69 (s, 1H), 0.05 (dd, J = 8.2, 5.1 ㎐, 6H).
단계 2: (27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,49R,50R,59R)-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-49,59-다이하이드록시-50-메톡시-47-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-38,39,40,41,51,52-헥사메틸-69,70-다이옥사-61-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(51),32(52)-테트라엔-53,54,55,56,57-펜톤. 술포란(20 mL) 중 (27E,29E,31E,32E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,55-다이하이드록시-43,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(47),32(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(1.7 g, 1.65 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(3.97 g, 33.06 mmol)의 용액에 HND-8(255 mg)을 50℃에서 N2 하에 첨가하고, 생성된 용액을 이후 50℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물에 붓고, EtOAc로 추출하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(50% 석유 에테르 중 EtOA)에 의해 및 이후 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 표제 화합물(950 mg, 51% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1138.2 [M+Na]+.
단계 3: (28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,50R,51R,60R)-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-60-하이드록시-50,51-다이메톡시-48-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-69,70-다이옥사-62-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-54,55,56,57,58-펜톤. 톨루엔(15 mL) 중 (27E,29E,31E,32E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,48S,49R,50R,59R)-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-49,59-다이하이드록시-50-메톡시-47-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-38,39,40,41,51,52-헥사메틸-69,70-다이옥사-61-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(51),32(52)-테트라엔-53,54,55,56,57-펜톤(0.5 g, 0.448 mmol)의 용액에 N1,N1,N8,N8-테트라메틸나프탈렌-1,8-다이아민(1.92 g, 8.96 mmol) 및 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(1.10 g, 6.72 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 생성된 용액을 50℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 0%에서 50%로의 석유 에테르 중 EtOAc로 용출시키는 실리카-겔 크로마토그래피를 통해 이후 역상 크로마토그래피(0%에서 100%로의 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 표제 화합물(160 mg, 32% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1152.2 [M+Na]+.
단계 4: (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤. THF(20 mL) 중 (28E,30E,32E,33E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,50R,51R,60R)-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[tert-부틸(다이메틸)실릴]옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-60-하이드록시-50,51-다이메톡시-48-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-69,70-다이옥사-62-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-54,55,56,57,58-펜톤(0.58 g, 0.513 mmol)의 용액에 Py·HF(2.54 g, 25.65 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 포화 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(75% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 표제 화합물(200 mg, 38% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1038.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.49 - 5.79 (m, 4H), 5.69 - 5.03 (m, 4H), 4.62 (d, J = 13.2 ㎐, 1H), 4.00 - 3.07 (m, 28H), 3.02 - 2.47 (m, 6H), 2.41 - 1.68 (m, 16H), 1.54 - 1.21 (m, 11H), 1.17 - 0.82 (m, 18H), 0.79 - 0.55 (m, 1H).
단계 5: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-32). DCM(3 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.18 g, 0.177 mmol)의 용액에 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.273 g, 1.33 mmol) 및 다이메틸포스핀 클로라이드(0.1 g, 0.89 mmol, 0.5 mL의 DCM에 용해)를 0℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 3.5시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3 용액으로 세정하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(수중 CH3CN)에 의해 정제하여 I-32(90 mg, 47% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1114.1 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.49 - 5.81 (m, 4H), 5.74 - 4.96 (m, 4H), 4.67 - 4.03 (m, 2H), 4.00 - 3.01 (m, 29H), 2.99 - 2.46 (m, 4H), 2.44 - 1.73 (m, 17H), 1.59 - 1.22 (m, 15H), 1.19 - 0.83 (m, 18H), 0.82 - 0.59 (m, 1H).
단계 6: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-34) 및 (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-33). 125 mg의 에피머 혼합물을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(헥산: DCM: EtOAc: MeOH, 3: 3: 1: 0에서 3: 3: 1: 0.3로)를 통해 정제하여 I-34(25 mg, 20% 수율)를 백색 고체로서 및 I-33(15 mg, 12% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 1.2 mg/mL
주입량: 10 mL
이동상: 헥산/EtOH=40/60(V/V)
유량: 25 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-34: ESI-MS (EI+, m/z): 1114.1 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.41 - 6.01 (m, 3H), 5.87 (dd, J = 83.6, 10.7 ㎐, 1H), 5.57 - 5.40 (m, 1H), 5.38 - 4.97 (m, 3H), 4.57 (s, 1H), 4.02 (d, J = 20.9 ㎐, 1H), 3.92 - 3.62 (m, 3H), 3.61 - 2.94 (m, 26H), 2.78 - 2.40 (m, 3H), 2.29-1.79 (m, 9H), 1.60 - 1.38 (m, 15H), 1.36 - 1.11 (m, 9H), 1.08 - 0.76 (m, 18H), 0.75 - 0.64 (m, 1H).
I-33: ESI-MS (EI+, m/z): 1114.1 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.48 - 5.79 (m, 4H), 5.63 - 5.02 (m, 4H), 4.56 (d, J = 62.6 ㎐, 1H), 3.99 - 3.09 (m, 28H), 3.01 - 2.49 (m, 5H), 2.40 - 1.72 (m, 18H), 1.54 - 1.19 (m, 14H), 1.18 - 0.81 (m, 19H), 0.78 - 0.59 (m, 1H).
실시예 19: (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-35), (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-37) 및 (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-36)의 합성
Figure pct00177
단계 1: (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤(중간체 IX는 실시예 22에 따라 제조, 1.8 g, 1.5 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(6.45 g, 30.08 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(3.70 g, 22.56 mmol)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 50℃로 5시간 동안 가열하고, 이후 혼합물을 물(50 mL)을 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 EtOAc(50 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(50 mL × 3) 및 염수(50 mL × 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EtOAc= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(700 mg, 38% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1232.2 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.70-7.68(m, 4H), 7.43-7.26(m, 6H), 6.40-5.87 (m, 4H), 5.68-5.07 (m, 4H), 4.67 (s, 1H), 4.48-4.13 (m, 1H), 3.81-3.57 (m, 7H), 3.47-3.33(m, 5H), 3.20-3.08 (m, 7H), 3.07-2.97 (m, 1H), 2.71-2.50 (m, 2H), 2.35-2.20 (m, 2H), 2.09-1.97(m, 3H), 1.70-1.66 (m, 6H), 1.61-1.58(m, 11H), 1.38-1.20 (m, 10H), 1.15-1.10 (m, 5H), 1.09-1.05(m, 10H), 0.98-0.73(m, 13H), 0.71-0.66 (m, 1H).
단계 2: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,43,44-트라이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. THF(7 mL) 중 (36E,38E,40E,41E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-68-하이드록시-56,58,59-트라이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-77,78-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-36,38,40(60),41(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(0.7 g, 0.578 mmol)의 용액에 Py·HF(0.457 g, 5.78 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하였고, 이후 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: 아세톤= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(250 mg, 44% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 995.0 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ6.48-6.01 (m, 4H), 5.71-5.08 (m, 4H), 4.68 (s, 1H), 4.50-4.08 (m, 1H), 3.83-3.55 (m, 7H), 3.45-3.08 (m, 17H), 3.00-2.51 (m, 2H), 2.40-2.32 (m, 2H), 2.16-1.97(m, 3H), 1.75-1.58(m, 15H), 1.30-1.24 (m, 6H), 1.15-1.10 (m, 5H), 0.98-0.82(m, 17H), 0.78-0.68 (m, 1H).
단계 3: (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-35). THF(4 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-53-하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,43,44-트라이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.25 g, 0.257 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(0.618 g, 5.14 mmol)의 용액에 HND-8(80 mg)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 4시간 동안 교반하였고, 이후 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고 0℃에서 EtOAc(30 mL)를 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상(85% 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 I-35(0.12 g, 44% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1082.8 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ6.42-5.98 (m, 4H), 5.85-5.08 (m, 4H), 4.72-4.65 (m, 1H), 4.51-4.10(m, 1H), 3.83-3.75 (m, 2H), 3.65-3.55 (m, 7H), 3.40-3.06(m, 17H), 2.71-2.46(m, 2H), 2.40-2.20 (m, 2H), 2.15-1.88(m, 3H), 1.75-1.58(m, 21H), 1.42-1.30 (m, 5H), 1.19-1.00(m,13H), 0.97-0.82(m, 10H), 0.78-0.68 (m, 1H).
단계 4: (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-37) 및 (23E,25E,27E,28E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45R,46S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-45-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-36). 140 mg의 에피머 혼합물을 분취용 키랄 HPLC를 통해 정제하여 I-37(30 mg, 30% 수율)을 백색 고체로서 및 I-36(30 mg, 30% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 4 mg/mL
주입량: 5 mL
이동상: 헥산/EtOH=70/30(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 38℃
I-37: ESI-MS (EI+, m/z): 1081.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.52 - 6.10 (m, 3H), 5.96 (dd, J = 62.3, 11.6 ㎐, 1H), 5.62 (ddd, J = 40.8, 14.6, 7.8 ㎐, 1H), 5.24 (ddd, J = 66.7, 18.2, 10.9 ㎐, 3H), 4.68 (s, 1H), 3.93 - 3.52 (m, 9H), 3.51 - 3.03 (m, 17H), 3.01 - 2.49 (m, 3H), 2.40 - 1.63 (m, 24H), 1.53 - 1.18 (m, 12H), 1.18 - 0.81 (m, 18H), 0.78-0.62 (m, 1H).
I-36: ESI-MS (EI+, m/z): 1081.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.56 - 5.81 (m, 4H), 5.75-5.15 (m, 4H), 4.01 - 3.51 (m, 16H), 3.51 - 3.06 (m, 20H), 2.85 - 2.49 (m, 2H), 2.45 - 1.64 (m, 18H), 1.47 - 1.19 (m, 10H), 1.17 - 0.61 (m, 19H).
실시예 20: (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-38), (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-40), 및 (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-39)의 합성
Figure pct00178
단계 1: (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-38). THF(5 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(0.05 g, 0.053 mmol) 및 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.125 g, 1.06 mmol)의 용액에 HND-8(0.02 g)을 50℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 50℃에서 교반하고, 이후 냉각시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-38(0.019 g, 35% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1050.1 [M+Na]+. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44-5.98 (m, 4H), 5.69-5.01 (m, 4H), 4.66-4.27 (m, 2H), 3.89-3.56 (m, 9H), 3.44-3.31 (m, 10H), 3.28-3.21 (m, 3H), 3.07-2.96 (m, 7H), 2.95-2.51(m, 4H), 2.34-1.82(m, 7H), 1.77-1.48 (m, 27H), 1.44-1.22(m, 8H), 1.20-1.01 (m, 13H), 1.01-0.88 (m, 8H), 0.85-0.65 (m, 2H).
단계 2: (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-40) 및 (26E,28E,30E,31E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-43-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-39). 140 mg의 에피머 혼합물을 분취용 키랄 HPLC를 통해 정제하여 I-40(36.6 mg, 26% 수율)을 백색 고체로서 및 I-39(17.2 mg, 12% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 2 mg/mL
주입량: 5 mL
이동상: 헥산/EtOH=70/30(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 38℃
I-40: ESI-MS (EI+, m/z): 1049.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.47 - 5.80 (m, 4H), 5.75-5.50 (m, 1H), 5.49 - 5.04 (m, 3H), 4.69-4.41 (m, 1H), 4.36 - 4.11 (m, 1H), 3.91 - 3.50 (m, 10H), 3.48 - 2.99 (m, 19H), 2.79-2.51 (m, 2H), 2.38 - 1.85 (m, 7H), 1.83 - 1.58 (m, 12H), 1.53 - 1.17 (m, 10H), 1.14 - 0.84 (m, 18H), 0.75 (d, J = 10.9 ㎐, 1H).
I-39: ESI-MS (EI+, m/z): 1049.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.60 - 5.70 (m, 4H), 5.66 - 5.01 (m, 4H), 4.72 - 4.14 (m, 2H), 4.10 - 3.50 (m, 9H), 3.49 - 2.98 (m, 18H), 2.59 (dd, J = 79.6, 49.4 ㎐, 3H), 2.40 - 1.64 (m, 19H), 1.52 - 1.20 (m, 10H), 1.19 - 0.65 (m, 20H).
실시예 21: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-41), (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-43), 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-42)의 합성
Figure pct00179
단계 1: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-41). THF(5 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(중간체 I, 0.15 g, 0.16 mmol) 및 2-(2-메톡시에틸설포닐)에탄올(0.268 g, 1.59 mmol)의 용액에 HND-8(50 mg)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서10 시간 동안 교반하고, 이후 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)을 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-41(44 mg, 26% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1100.0 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.50-5.96 (m, 4H), 5.80-5.02 (m, 4H), 4.83-4.75 (m, 1H), 4.76-4.39 (m, 1H), 3.85-3.80 (m, 2H), 3.75-3.53(m, 4H), 3.45-3.10 (m, 17H), 3.09-2.85(m,3H), 2.81-2.48 (m, 3H), 2.35-1.85 (m, 7H), 1.76-1.57 (m, 21H), 1.39-1.22 (m, 5H), 1.17-0.83(m, 18H), 0.79-0.66 (m, 1H).
단계 2: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-43) 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-44-[2-(2-메톡시에틸설포닐)에톡시]-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-66,67-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-42). 140 mg의 에피머 혼합물 분취용 키랄 HPLC를 통해 정제하여 I-43(18 mg, 20% 수율)을 백색 고체로서 및 I-42(26 mg, 29% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 2.5 mg/mL
주입량: 8 mL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 40 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-43: ESI-MS (EI+, m/z): 1099.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.48 - 5.83 (m, 4H), 5.56 (dd, J = 14.8, 8.1 ㎐, 1H), 5.49 - 5.02 (m, 3H), 4.75 (s, 1H), 3.91 - 3.51 (m, 9H), 3.46 - 3.18 (m, 18H), 3.16 - 2.98 (m, 6H), 2.96 - 2.45 (m, 3H), 2.38 - 1.66 (m, 17H), 1.54 - 1.16 (m, 13H), 1.25-0.65 (m, 19H).
I-42: ESI-MS (EI+, m/z): 1100.0 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.65 - 5.86 (m, 4H), 5.75-5.02 (m, 5H), 4.81 - 4.31 (m, 2H), 4.08 - 2.99 (m, 34H), 2.97-2.49 (m, 4H), 2.45 - 1.65 (m, 17H), 1.51 - 0.53 (m, 25H).
실시예 22: (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-45) 및 (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-44)의 합성
Figure pct00180
단계 1: 3-[tert-부틸(다이페닐)실릴] 옥시프로필 트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(80 mL) 중 3-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시프로판-1-올(7 g, 22.26 mmol) 및 DIPEA(5.82 mL, 33.39 mmol)의 혼합물에 0℃에서 N2 하에 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(6.91 g, 24.48 mmol)를 첨가하고, 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(150 mL)으로 희석하고, 포화 NaHCO3(50 mL), 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세정하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시프로필 트라이플루오로메탄설포네이트(9.9 g, 99.6% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. 미정제물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.67-7.63 (m, 4H), 7.47-7.37 (m, 6H), 4.77-4.73 (t, J=6 ㎐, 2H), 3.79-3.75 (t, J=6 ㎐, 2H), 2.04-1.98 (m, 2H), 1.06 (s, 1H).
단계 2: (35E,37E,39E,40E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-58,68-다이하이드록시-56,59-다이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-78,79-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(60),40(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤. 톨루엔(40 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,50R)-40,50-다이하이드록시-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-51-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(2 g, 2.19 mmol), 3-[tert-부틸(다이페닐)실릴] 옥시프로필 트라이플루오로메탄설포네이트(9.77 g, 21.88 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(4.57 mL, 26.25 mmol)의 혼합물을 58℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 빙냉 포화 NaHCO3(150 mL)에 붓고, EtOAc(200 mL)로 추출하고, 유기층을 물(150 mL×3) 및 염수(150 mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EA= 3: 1)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.8 g, 68% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다, ESI-MS (EI+, m/z): 1232.7 [M+Na] +.
단계 3: (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-63,64-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. THF(15 mL) 중 (35E,37E,39E,40E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-58,68-다이하이드록시-56,59-다이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-78,79-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(60),40(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(1.8 g, 1.49 mmol)의 용액에 피리딘·HF(1.2 mL, 14.87 mmol)를 첨가하고, 반응물을 30℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 EA(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: 아세톤 =3:1)를 통해 정제하여 표제 화합물(1.1 g, 76% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 994.7 [M+Na] +.
단계 4: (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤. DCM(4 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-63,64-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.2 g, 0.206 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(0.32 mL, 4.11 mmol)를 -40℃에서 첨가하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.49 g, 4.11 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 -40℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 빙냉 포화 수성 NaHCO3 용액에 붓고, DCM으로 추출하고, 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 이후 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(30 mg, 14% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1080.3 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.41-5.92 (m, 4H), 5.57-5.08 (m, 4H), 4.70-4.55 (m, 5H), 4.35-4.0 (m, 3H), 3.92-3.69 (m, 5H), 3.68-3.54 (m, 3H), 3.53-3.30 (m, 7H), 3.29-2.98 (m, 4H), 2.88-2.40 (m, 4H), 2.38-2.25 (m, 2H), 2.22-1.90 (m, 5H), 1.87-1.57 (m, 17H), 1.54-1.16 (m, 10H), 1.15-0.83 (m, 17H), 0.76-0.62 (m, 1H).
단계 5: (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-45) 및 (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-44). 139 mg의 (23E,25E,27E,28E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-68,69-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(49),28(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(13% 석유 에테르 중 MeOH:DCM:EA = 3:3:1)를 통해 정제하여 I-45(30 mg, 22% 수율)를 백색 고체로서 및 I-44(17 mg, 12% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 2.5 cm I.D. × 25 cm L, 10 μm
샘플 용액: 이동상에서 2 mg/mL
주입량: 8 mL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 23 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-45: ESI-MS (EI+, m/z): 1079.9 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.83 (m, 4H), 5.62 - 5.02 (m, 4H), 4.87 - 4.51 (m, 6H), 4.17 (d, J = 5.0 ㎐, 1H), 3.94 - 2.96 (m, 24H), 2.90 - 2.52 (m, 3H), 2.41 - 1.71 (m, 15H), 1.62 - 1.40 (m, 8H), 1.39 - 1.18 (m, 7H), 1.15 - 0.79 (m, 18H), 0.76-0.65 (m, 1H).
I-44: ESI-MS (EI+, m/z): 1079.8 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.48 - 5.81 (m, 4H), 5.75 - 5.08 (m, 4H), 4.87 - 4.53 (m, 5H), 4.40 - 4.11 (m, 2H), 4.06 - 3.71 (m, 5H), 3.70 - 2.89 (m, 24H), 2.87 - 1.74 (m, 17H), 1.55 - 1.17 (m, 11H), 1.16 - 0.82 (m, 18H), 0.73-0.65 (m, 1H).
실시예 23: (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-46) 및 (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-47)의 합성
Figure pct00181
단계 1: (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤. 톨루엔(24 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-41,44-다이메톡시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(중간체 III, 1.4 g, 1.44 mmol) 및 1,8-비스(다이메틸아미노)나프탈렌(4.63 g, 21.6 mmol)의 현탁액에 메틸 트라이플루오로메탄설포네이트(2.36 g, 14.4 mmol, 1.58 mL)를 실온에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 혼합물을 3시간 동안 50℃로 가열하고, 이후 여과하고, EtOAc(60 mL)로 희석하고, 포화 수성 NH4Cl 용액(60 mL × 2), 물(60 mL) 및 염수(60 mL)로 세정하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: EtOAc = 7: 3) 및 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 표제 화합물(0.22 g, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1009.5 [M+Na]+.
단계 2: (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-46). THF(10 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-54-하이드록시-42,44,45-트라이메톡시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-62,63-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(0.1 g, 0.101 mmol) 및 2-(2-메톡시에톡시)에탄올(0.244 g, 2.03 mmol)의 용액에 HND-8(0.04 g)을 50℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 50℃에서 교반하고, 이후 냉각시키고, 여과하고, 여액을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)에 붓고, EtOAc(15 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(15 mL) 및 염수(15 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: 석유 에테르 = 4: 1)를 통해 정제하여 I-46(0.065 g, 60% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1095.8 [M+Na]+. 1HNMR(400 ㎒, CDCl3) δ 6.43-5.84 (m, 4H), 5.72-5.06 (m, 4H), 4.84-4.17 (m, 2H), 3.96-3.73 (m, 4H), 3.70-3.52 (m, 10H), 3.50-3.43 (m, 4H), 3.41-3.30 (m, 8H), 3.29-3.20 (m, 3H), 3.18-2.99 (m, 5H), 2.96-2.50(m, 4H), 2.35-2.14 (m, 3H), 2.05-1.84(m, 5H), 1.80-1.56 (m, 21H), 1.55-1.23 (m, 10H), 1.16-1.00 (m, 11H), 0.97-0.84 (m, 9H), 0.81-0.69 (m, 1H).
단계 3: (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,46S,47S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-47). 50 mg의 에피머 혼합물을 분취용 키랄 HPLC를 통해 이후 실리카 겔 크로마토그래피(석유 에테르: DCM: EtOAc: MeOH= 3: 3: 1: 0.2)에 의해 정제하여 I-47(13 mg, 26% 수율)(13 mg, 26% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 0.55 mg/mL
주입량: 15 mL
이동상: 헥산/EtOH=70/30(V/V)
유량: 30 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 38℃
ESI-MS (EI+, m/z): 1095.8 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44 - 5.72 (m, 4H), 5.72-4.98 (m, 4H), 3.96 - 3.14 (m, 32H), 3.05 (d, J = 7.9 ㎐, 5H), 2.76 - 2.42 (m, 3H), 2.37 - 1.57 (m, 22H), 1.46 - 1.17 (m, 16H), 1.14 - 0.77 (m, 18H), 0.73-0.61 (m, 1H).
실시예 24: (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-49) 및 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-48)의 합성
Figure pct00182
단계 1: (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43S,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-49) 및 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,43R,44S,45R,46R,55R)-55-하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45,46-다이메톡시-43-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-64,65-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(I-48). 116 mg의 에피머 혼합물을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(헥산: DCM: EtOAc: MeOH= 3: 3: 1: 0.4)를 통해 정제하여 I-49(40 mg, 34% 수율)를 백색 고체로서 및 I-48(35 mg, 30% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분리 방법:
컬럼: CHIRALPAK IC
컬럼 사이즈: 5.0 cm I.D. × 25 cm L, 10μm
샘플 용액: 이동상에서 0.7 mg/mL
주입량: 18 mL
이동상: 헥산/EtOH=60/40(V/V)
유량: 60 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
I-49: ESI-MS (EI+, m/z): 1038.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.81 (m, 4H), 5.75 - 5.02 (m, 4H), 4.61 (d, J = 16.7 ㎐, 1H), 3.99 - 3.21 (m, 25H), 3.21 - 3.06 (m, 3H), 3.01 - 2.50 (m, 5H), 2.41 - 1.68 (m, 14H), 1.63 - 1.19 (m, 14H), 1.17 - 0.82 (m, 18H), 0.77-0.64 (m, 1H).
I-48: ESI-MS (EI+, m/z): 1038.1 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.62 - 5.87 (m, 4H), 5.77 - 5.02 (m, 4H), 4.72 - 4.27 (m, 1H), 3.99 - 3.06 (m, 28H), 3.00 - 2.47 (m, 6H), 2.43 - 1.70 (m, 15H), 1.52 - 1.20 (m, 12H), 1.18 - 0.79 (m, 18H), 0.69 (d, J = 11.7 ㎐, 1H).
실시예 25: (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-43-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-50)
Figure pct00183
단계 1: (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-43-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-50). DCM(40 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(중간체 I, 0.72 g, 0.76 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.18 mL, 15.28 mmol)을 -55℃에서 N2 하에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.81 g, 15.28 mmol, DCM에 용해됨)을 동일 온도에서 반응 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 -45℃에서 교반하고, 이후 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(60 mL)에 붓고 DCM(60 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(60 mL) 및 염수(60 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여액을 진공 중에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA)를 통해 및 이후 역상 크로마토그래피(67% 수중 CH3CN으로 용출시킴)에 의해 정제하여 I-50(0.07 g, 9% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1049.9 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.41-6.01 (m, 4H), 5.35-4.94 (m, 4H), 4.78-4.57 (m, 5H), 4.50-4.13 (m, 1H), 3.89-3.58 (m, 4H), 3.55-3.31 (m, 11H), 3.28-3.201 (m, 4H), 3.21-3.10 (m, 3H), 3.07-2.97 (m, 2H), 2.78-2.54 (m, 3H), 2.30-2.27 (m, 2H), 2.10-1.95 (m, 5H), 1.79-1.48 (m, 13H), 1.45-1.04 (m, 19H), 0.97-0.84 (m, 8H) 0.78-0.73 (m, 1H).
실시예 26: (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,58R)-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에톡시]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-51)의 합성
Figure pct00184
단계 1: (24E,26E,28E,29E,37R,38S,39R,40R,42S,44S,47S,48R,49R,58R)-47-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에톡시]-37,38,39,40,50,51-헥사메틸-66,67-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(50),29(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-51). THF(5 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(중간체 I, 0.2 g, 0.212 mmol) 및 2-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시]에탄올(0.349 g, 2.12 mmol)의 용액에 HND-8(50 mg)을 N2 하에 50℃에서 첨가하였다. 생성된 용액을 15 시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc로 희석하고, 여과하고, 이후 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 다시 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EtOAc: 석유 에테르 = 1: 0.8) 및 역상 크로마토그래피(85% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-51(40 mg, 18% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1095.8 [M+Na] +. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.60 - 5.79 (m, 4H), 5.76 - 5.06 (m, 4H), 3.93 - 2.97 (m, 33H), 2.92 - 2.49 (m, 3H), 2.47 - 1.75 (m, 22H), 1.51 - 0.63 (m, 29H).
실시예 27: (25E,27E,29E,30E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-44-[3-(1,2,4-트리아졸-4-일)프로폭시]-67,68-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-52)의 합성
Figure pct00185
단계 1: 3-(1,2,4-트리아졸-4-일)프로판-1-올. 메탄올(200 mL) 중 포르모하이드라지드(10 g, 166.51 mmol) 및 다이에톡시메톡시에탄(29.61 g, 199.82 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시키고, 이후 3-아미노프로판-1-올(12.51 g, 166.51 mmol)을 적가하였다. 반응물을 4시간 동안 환류시키고, 이후 농축시키고, 역상 크로마토그래피(10% 수중 CH3CN)에 의해 이후 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: CH3OH= 12: 1)에 의해 정제하여 표제 화합물(20.6 g, 97% 수율)을 엷은 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 128.1 [M+H]+, T = 0.189 min. 1H NMR (400 ㎒, MeOD-d 4) δ 8.49 (s, 2H), 4.18 (t, J = 7.0 ㎐, 2H), 3.48 (t, J = 5.9 ㎐, 2H), 2.00 - 1.90 (m, 2H).
단계 2: (25E,27E,29E,30E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-44-[3-(1,2,4-트리아졸-4-일)프로폭시]-67,68-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-52). DCM(20 mL) 중 3-(1,2,4-트리아졸-4-일)프로판-1-올(0.22 g, 1.75 mmol), (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(중간체 I, 0.33 g, 0.35 mmol) 및 TFA(0.48 g, 4.20 mmol)의 혼합물에 3-(1,2,4-트리아졸-4-일)프로판-1-올(0.22 g, 1.75 mmol)첨가하고, -30℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3에 붓고 유기층을 물로 2회 및 이후 염수로 세정하였다. 농축 후, 잔류물을 역상 크로마토그래피(MeOH: DCM= 1:15)를 통해 정제하여 I-52(60 mg, 17% 수율)를 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1038.3 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 8.36 - 7.82 (m, 1H), 6.49 - 5.92 (m, 4H), 5.75 - 4.96 (m, 5H), 4.51 - 3.92 (m, 2H), 3.64 (ddd, J = 34.7, 33.2, 24.8 ㎐, 4H), 3.48 - 3.20 (m, 11H), 3.08 (dd, J = 38.8, 18.3 ㎐, 7H), 2.92 - 2.42 (m, 5H), 2.25 (dd, J = 76.9, 68.3 ㎐, 8H), 1.94 - 1.46 (m, 19H), 1.44 - 0.96 (m, 20H), 0.96 - 0.62 (m, 9H).
실시예 28: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-108), (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-105), (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-104)의 합성
Figure pct00186
단계 1: (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤. DCM(30 mL) 중 라파마이신(2 g, 2.19 mmol)의 용액에 KHF2(2.56 g, 2 mL 물 중 32.82 mmol) 및 브로모다이플루오로(트라이메틸실릴)메탄(4.44 g, 21.88 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 수성 NaHCO3로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=3:1)를 통해 정제하여 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(0.4 g, 19% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 986.5 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.43-5.86 (m, 4H), 5.58-5.07 (m, 4H), 4.49 (s, 1H), 4.18-4.09 (m, 2H), 3.89-3.56 (m, 4H), 3.47-3.28 (m, 7H), 3.19-3.02 (m, 4H), 2.90-2.55 (m, 3H), 2.41-2.21 (m, 2H), 2.20-1.91 (m, 6H), 1.90-1.41 (m, 20H), 1.40-1.13 (m, 7H), 1.12-0.81 (m, 14H), 0.80-0.67 (m, 1H).
단계 2: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-108). DCM(6 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,29R,30S,31R,32R,34S,36S,38S,39S,40R,41R,51R)-39-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-40,51-다이하이드록시-38,41-다이메톡시-29,30,31,32,42,43-헥사메틸-60,61-다이옥사-52-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(42),27(43)-테트라엔-44,45,46,47,48-펜톤(0.3 g, 0.31 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(0.71 g, 6.22 mmol, 0.48 mL)를 -40℃에서 첨가하였다. 혼합물을 교반하였고 10분 동안, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(0.74 g, 6.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고 0℃에서 DCM(30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL), 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시켰다. 잔류물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-108(50 mg, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1072.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.41-5.93 (m, 4H), 5.57-5.07 (m, 4H), 5.82-4.53 (m, 5H), 4.31-3.99 (m, 2H), 3.93-3.65 (m, 3H), 3.63-3.04 (m, 13H), 2.90-2.27 (m, 5H), 2.26-1.86 (m, 5H), 1.85-1.55 (m, 17H), 1.53-1.17 (m, 9H), 1.16-0.77 (m, 17H), 0.76-0.65 (m, 1H).
단계 3: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-105), (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,55R)-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(다이플루오로메톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-44,55-다이하이드록시-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-104). 0.17 g의 I-108을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE:DCM:EA=3:3:1의 혼합물 중의 8% MeOH)를 통해 정제하여 I-105(18 mg, 11% 수율)를 백색 고체로서 및 I-104(15 mg, 9% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-NA012)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 10 μl
이동상: 헥산/EtOH=60/40(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-105: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.6 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.67 - 5.84 (m, 5H), 5.56 - 5.02 (m, 4H), 4.81 - 4.53 (m, 5H), 4.17 (d, J = 5.6 ㎐, 1H), 3.93 - 3.63 (m, 4H), 3.60 - 3.04 (m, 14H), 2.94 - 2.52 (m, 3H), 2.40 - 1.82 (m, 7H), 1.81 - 1.40 (m, 19H), 1.25 (ddd, J = 23.7, 20.7, 10.9 ㎐, 5H), 1.14 - 0.65 (m, 18H).
I-104: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.63 - 5.90 (m, 5H), 5.73 - 5.03 (m, 4H), 4.80 - 4.54 (m, 5H), 4.31 - 3.66 (m, 5H), 3.59 - 3.04 (m, 14H), 2.93 - 1.96 (m, 10H), 1.94 - 1.59 (m, 12H), 1.54 - 1.19 (m, 11H), 1.15 - 0.63 (m, 19H).
실시예 29: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-21-((1,4-다이옥산-2-일)메톡시)-9,27-다이하이드록시-10-메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-107), [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,61R)-47-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-103) 및 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,61R)-47-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-102)의 합성
Figure pct00187
단계 1: (1R,2R,4S)-4-((R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(15 mL) 중 라파마이신(1 g, 1.09 mmol) 및 피리딘(0.35 mL, 4.38 mmol)의 용액에 DCM(0.5 mL) 중 트리포스겐(0.325 g, 1.09 mmol)을 시린지를 통해 0℃에서 아르곤 하에 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 이후 TEA(1.22 mL, 8.75 mmol) 및 2-모폴리노에탄아민(2.85 mL, 21.88 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, NH4Cl 수용액 및 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(8% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 (1R,2R,4S)-4-((R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,27-다이하이드록시-10,21-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실(2-모폴리노에틸)카르바메이트(0.25 g, 21% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1070.4 [M+H]+.
단계 2: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-21-((1,4-다이옥산-2-일)메톡시)-9,27-다이하이드록시-10-메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-107). DCM(6 mL) 중 [(39S,41R,43R)-4-[(2R)-2-[(26E,28E,30E,31E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,46R,47R,57R)-46,57-다이하이드록시-44,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-50,51,52,53,54-펜타옥소-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(48),31(49)-테트라엔-45-일]프로필]-43-메톡시-41-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(0.4 g, 0.37 mmol)의 용액에 TFA(1.15 mL, 14.95 mmol)를 -50℃에서 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반하였고, 이후 DCM(10 mL)에 용해시킨 1,4-다이옥산-2-일메탄올(1.32 g, 11.21 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -10℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM 및 수성 NaHCO3로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-107(63 mg, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1179.6 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.41 - 5.86 (m, 4H), 5.61 - 4.99 (m, 4H), 4.43 (dt, J = 105.0, 47.9 ㎐, 3H), 3.88 - 3.52 (m, 11H), 3.46 - 3.01 (m, 14H), 2.82 - 2.18 (m, 10H), 2.15 - 1.59 (m, 22H), 1.53 - 0.65 (m, 29H).
단계 3: [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47S,48S,50R,51R,61R)-47-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-103) 및 [(42S,44R,46R)-4-[(2R)-2-[(28E,30E,32E,33E,38R,39S,40R,41R,43S,45S,47R,48S,50R,51R,61R)-47-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-50,61-다이하이드록시-51-메톡시-38,39,40,41,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-76,77-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-28,30,32(52),33(53)-테트라엔-48-일]프로필]-46-메톡시-44-사이클로헥실] N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-102). 124 mg의 I-107을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하여 I-103(23.7 mg, 19% 수율)을 백색 고체로서 및 I-102(21.3 mg, 17% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-NA012)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 20 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 0.8 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 실온
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AD
I-103: ESI-MS (EI+, m/z): 1156.8 [M+H]+, 1178.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.35 - 5.75 (m, 4H), 5.52 - 4.93 (m, 4H), 4.50 (s, 1H), 4.14 (dd, J = 25.0, 13.4 ㎐, 1H), 3.85 - 3.44 (m, 14H), 3.41 - 2.93 (m, 15H), 2.83 - 1.77 (m, 17H), 1.76 - 1.11 (m, 17H), 1.08 - 0.62 (m, 24H).
I-102: ESI-MS (EI+, m/z): 1156.8 [M+H]+, 1178.8 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.58 - 5.85 (m, 4H), 5.57 - 5.08 (m, 4H), 4.63 - 3.92 (m, 3H), 3.88 - 3.04 (m, 24H), 2.80 - 1.94 (m, 14H), 1.87 - 1.44 (m, 28H), 1.13 - 0.60 (m, 20H).
실시예 30: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-109), (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,50S,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-101) 및 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,50R,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-100)의 합성
Figure pct00188
단계 1: (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-49,59-다이하이드록시-47,50-다이메톡시-36,37,38,41,51,52-헥사메틸-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(51),31(52)-테트라엔-53,54,55,56,57-펜톤. DCM(10 mL) 중 중간체 II(0.5 g, 0.46 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(179.14 mg, 1.39 mmol, 0.24 mL)의 용액을 20시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 포화 NH4Cl(30 mL × 3), 물(30 mL × 3) 및 염수(30 mL × 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-49,59-다이하이드록시-47,50-다이메톡시-36,37,38,41,51,52-헥사메틸-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(51),31(52)-테트라엔-53,54,55,56,57-펜톤(0.2 g, 40.5% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1069.1 [M+H]+, T = 1.918 min, 98% 순도, 254 nm.
단계 2: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-109). DCM(50 mL) 중 (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,41R,43S,45S,47S,48S,49R,50R,59R)-48-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-49,59-다이하이드록시-47,50-다이메톡시-36,37,38,41,51,52-헥사메틸-70,71-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(51),31(52)-테트라엔-53,54,55,56,57-펜톤(1.12 g, 1.05 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(3.58 g, 31.42 mmol, 2.42 mL)을 -45℃에서 N2 하에 첨가하고, 반응물을 10분 동안 교반하였다. 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(2.47 g, DCM 중 20.95 mmol)을 첨가하고, 반응물을 2시간 동안 -45℃에서 교반하였다. 반응물을 0℃에서 포화 NaHCO3(5 mL)에 붓고, DCM(10 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 40% 수중 CH3CN(0.001% HCOOH)으로 용출시키는 역상 컬럼을 통해 정제하여 I-109(0.074 g, 6% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1155.8 [M+H]+, T = 1.849 min, 254 nm. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.40-5.94 (m, 4H), 5.55-5.13 (m, 5H), 4.79-4.54 (m, 5H), 4.45-4.03 (m, 4H), 3.89-3.58 (m, 4H), 3.15-3.54 (m, 15H), 3.14-2.91 (m, 5H), 2.86-2.39 (m, 3H), 2.35-1.85 (m, 11H), 1.85-1.40 (m, 30H), 1.40-1.12 (m, 19H), 1.09-0.85 (m, 21H), 0.76-0.52 (m, 2H).
단계 3: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,50S,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-101) 및 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,50R,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[(2S,6R)-2,6-다이메틸모르폴린-4-일]프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-53,63-다이하이드록시-54-메톡시-39,40,41,44,55,56-헥사메틸-50-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-75,76-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(55),32(56)-테트라엔-57,58,59,60,61-펜톤(I-100). 94 mg의 I-109를 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하여 (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,44R,46S,48S,50S,51S,53R,54R,63R)-51-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3I-101(14 mg, 15% 수율)을 백색 고체로서 및 I-100(5 mg, 5% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-NA012)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 20 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 0.8 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 실온
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AD
I-101: ESI-MS (EI+, m/z): 1155.8 [M+H]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.36 - 5.74 (m, 4H), 5.51 - 4.97 (m, 4H), 4.71-4.42 (m, 5H), 4.10 (d, J = 5.7 ㎐, 1H), 3.87 - 3.06 (m, 19H), 3.03 - 2.87 (m, 2H), 2.84 - 2.46 (m, 4H), 2.39 - 1.62 (m, 18H), 1.56 - 1.32 (m, 12H), 1.11 - 0.89 (m, 13H), 0.88-0.58 (m, 20H).
I-100: ESI-MS (EI+, m/z): 1155.8 [M+H]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.55 - 5.80 (m, 4H), 5.55 - 5.03 (m, 4H), 4.85-4.45 (m, 5H), 4.11 (dd, J = 100.9, 30.7 ㎐, 3H), 3.88 - 3.15 (m, 19H), 3.10 - 2.09 (m, 14H), 2.01-1.74 (m, 18H), 1.54 - 1.14 (m, 15H), 1.09 - 0.63 (m, 20H).
실시예 31: [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-99)의 합성
Figure pct00189
단계 1: tert-부틸 N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(5 mL) 중 2-모폴리노에탄아민(10 g, 76.81 mmol)의 용액에 트리에틸아민(5.35 mL, 38.41 mmol) 및 tert-부톡시카르보닐 tert-부틸 카르보네이트(18.44 g, 84.49 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 25℃에서 교반하였다. 반응물을 200 mL의 디클로로메탄으로 희석하고, 이후 30 mL의 10% 중탄산나트및 30 mL의 염수로 세정하였다. 유기층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 tert-부틸 N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(17 g, 96% 수율)를 회백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 231.3 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.78 - 3.62 (m, 4H), 3.24 (d, J = 5.5 ㎐, 2H), 2.45 (dd, J = 8.0, 3.9 ㎐, 6H), 1.49 - 1.42 (m, 9H).
단계 2: tert-부틸 N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. Tert-부틸 N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(18 g, 78.16 mmol)를 DMF(240 mL)에 용해하고, 0℃로 냉각시키고, NaH(9.38 g, 234.47 mmol, 60% 순도)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 이후 0℃로 냉각시키고, 요오도메탄(12.2 g, 85.97 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 이후 에틸 아세테이트(500 mL)로 희석하고 포화 염화암모늄 수용액(300 mL) 및 염수(300 mL×5)를 순차적으로 세정하였다. 유기층을 황산나트륨으로 희석하고, 이후 농축시켜 tert-부틸 N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(14 g, 73% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 245.3 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.74 - 3.64 (m, 4H), 3.34 (s, 2H), 2.93 - 2.81 (m, 3H), 2.48 (d, J = 4.8 ㎐, 6H), 1.46 (s, 10H).
단계 3: N-메틸-2-모폴리노-에탄아민. tert-부틸 N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(14 g, 57.30 mmol)에 0℃에서 염산(4 M, 143.25 mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 50분 동안 교반하고, 농축시키고, NH3(7 M, 81.86 mL)을 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: MeOH: TEA= 90: 10: 0.1)를 통해 정제하여 N-메틸-2-모폴리노-에탄아민(7.4 g, 90% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 145.1 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, DMSO-d 6) δ 9.03 (s, 2H), 3.80 (s, 4H), 3.26 (dd, J = 44.9, 20.4 ㎐, 8H), 2.63 (s, 3H).
단계 4: [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(30E,32E,34E,35E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,50R,51R,61R)-61-하이드록시-48,51-다이메톡시-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-50-트라이메틸실릴옥시-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-30,32,34(52),35(53)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. DCM(5 mL) 중 라파마이신(0.5 g, 0.507 mmol) 및 피리딘(2.03 mmol, 0.164 mL)의 용액에 트리포스겐(150.43 mg, 20 mL THF 중 0.507 mmol)을 0℃에서 아르곤 하에 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하고, 이후 TEA(410 mg, 4.06 mmol) 및 N-메틸-2-모폴리노-에탄아민(1.46 g, 10.14 mmol)을 첨가하고, 생성된 용액을 0℃에서 추가 1 시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM으로 희석하고, 수성 NH4Cl, 물, 염수로 세정하고, 이후 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(8% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(30E,32E,34E,35E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,50R,51R,61R)-61-하이드록시-48,51-다이메톡시-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-50-트라이메틸실릴옥시-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-30,32,34(52),35(53)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(386 mg, 66% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1156.4 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.57 - 5.93 (m, 4H), 5.73 - 5.47 (m, 1H), 5.27 - 4.98 (m, 2H), 4.72 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.36 - 3.54 (m, 12H), 3.54 - 3.05 (m, 12H), 2.93 (s, 4H), 2.40 (dt, J = 34.4, 23.8 ㎐, 11H), 2.04 (s, 5H), 1.88 - 1.52 (m, 12H), 1.52 - 1.17 (m, 10H), 1.20 - 0.73 (m, 17H), 0.10 - -0.14 (m, 9H).
단계 5: [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트. 아세톤(5 mL) 및 물(5 mL) 중 [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(30E,32E,34E,35E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,48S,49S,50R,51R,61R)-61-하이드록시-48,51-다이메톡시-39,40,41,42,52,53-헥사메틸-54,55,56,57,58-펜타옥소-50-트라이메틸실릴옥시-73,74-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-30,32,34(52),35(53)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(1.8 g, 1.56 mmol)의 용액에 0.5 N 황산(0.5 M, 4.67 mL)을 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 100 mL EtOAc 및 100 mL의 포화 NaHCO3 용액의 혼합물에 부었다. 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제물을 실리카 겔 크로마토그래피(5% DCM 중 MeOH)를 통해 정제하여 [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(1.4 g, 83% 수율)를 밝은 황색 고체로서 제공하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.47 - 5.84 (m, 4H), 5.60 - 5.05 (m, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.34 - 4.10 (m, 1H), 3.92 - 3.52 (m, 7H), 3.52 - 3.23 (m, 10H), 3.13 (d, J = 2.7 ㎐, 4H), 2.92 (s, 3H), 2.78 - 2.39 (m, 8H), 2.40 - 2.00 (m, 5H), 2.03 - 1.53 (m, 18H), 1.53 - 1.11 (m, 12H), 1.11 - 0.87 (m, 13H), 0.83 (d, J = 6.5 ㎐, 2H).
단계 6: [(43S,45R,47R)-4-[(2R)-2-[(29E,31E,33E,34E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,62R)-48-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-55,56,57,58,59-펜타옥소-77,78-다이옥사-64-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-29,31,33(53),34(54)-테트라엔-49-일]프로필]-47-메톡시-45-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(I-99). DCM(15 mL) 중 [(40S,42R,44R)-4-[(2R)-2-[(27E,29E,31E,32E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-51,52,53,54,55-펜타옥소-71,72-다이옥사-60-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(49),32(50)-테트라엔-46-일]프로필]-44-메톡시-42-사이클로헥실] N-메틸-N-(2-모폴리노에틸)카르바메이트(0.4 g, 0.37 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(1.14 mL, 14.76 mmol)을 -40℃에서 N2 하에 첨가하고, 이후 1,4-다이옥산-2-일메탄올(0.87 g, 7.38 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 -40℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 이후 DCM 및 빙냉 수성 NaHCO3 용액의 혼합물에 붓고, 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(68% 수중 CH3CN)를 통해 정제하여 I-99(70 mg, 16% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1170.8 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.52 - 5.80 (m, 4H), 5.61 - 5.04 (m, 4H), 4.33 (dt, J = 75.6, 73.9 ㎐, 5H), 3.93 - 3.03 (m, 26H), 3.00 - 1.89 (m, 18H), 1.88-1.58 (m, 6H), 1.52-1.18 (m, 11H), 1.14 - 0.69 (m, 19H).
실시예 32: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-97)의 합성
Figure pct00190
220 mg의 I-11을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-97(71.5 mg, 33% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주량: 80 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-97: ESI-MS (EI+, m/z): 1036.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.48 - 5.82 (m, 4H), 5.72 - 5.04 (m, 4H), 4.81 - 4.50 (m, 5H), 3.97 - 3.09 (m, 20H), 3.00 - 2.48 (m, 5H), 2.36 - 1.86 (m, 7H), 1.83 - 1.55 (m, 14H), 1.52 - 1.20 (m, 9H), 1.17 - 0.61 (m, 19H).
실시예 33: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-[2-[2-(다이메틸아미노)에톡시]에톡시]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-95)의 합성
Figure pct00191
단계 1: (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤. DCM(10 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,31R,32S,33R,34R,36S,38S,40S,41S,42R,43R,52R)-41-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-52-하이드록시-40,42,43-트라이메톡시-31,32,33,34,44,45-헥사메틸-60,61-다이옥사-53-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(44),29(45)-테트라엔-46,47,48,49,50-펜톤(0.5 g, 0.53 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(1.82 g, 15.92 mmol, 1.23 mL)를 -40℃에서 첨가하였다. 이후 2-(2-요오도에톡시)에탄올(2.29 g, 10.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 DCM(30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=1:1)를 통해 정제하여 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.2 g, 33% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1148.4 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46-5.97 (m, 4H), 5.71-5.03 (m, 4H), 4.19-4.04(m, 1H), 3.93-3.53 (m, 7H), 3.50-3.38 (m, 8H), 3.37-3.21(m, 7H), 3.20-2.97(m, 6H), 2.96-2.50(m, 4H), 2.40-2.19(m, 4H), 2.18-1.85(m, 6H), 1.82-1.55(m, 13H), 1.53-1.21(m, 10H), 1.20-0.81(m, 13H), 0.79-0.69(m, 1H).
단계 2: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,47R,48R,57R)-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-[2-[2-(다이메틸아미노)에톡시]에톡시]-57-하이드록시-47,48-다이메톡시-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-66,67-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(49),30(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-95). DCM(5 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.3 g, 0.27 mmol), N-메틸메탄아민(120 mg, 2.66 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(344 mg, 2.66 mmol)의 용액을 18시간 동안 30℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(10 mL)으로 희석하고, 포화 NH4Cl(10 mL), 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-95(70 mg, 25% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1044.7 [M+H] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.81-6.70(m, 1H), 6.39-5.87(m, 4H), 5.58-5.39(m, 2H), 4.50-3.91(m, 4H), 3.87-3.49(m, 7H), 3.48-3.35(m, 7H), 3.34-3.20(m, 5H), 3.19-2.97(m, 6H), 2.90-2.76(m, 6H), 2.69-1.97(m, 17H), 1.88-1.40(m, 11H), 1.37-0.92(m, 21H), 0.91-0.77(m, 3H).
실시예 34: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,50,51-헥사메틸-45-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-67,68-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(50),30(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-94), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-83) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-82)의 합성
Figure pct00192
단계 1: (25E,27E,29E,30E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,46S,48R,49R,58R)-58-하이드록시-48,49-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,50,51-헥사메틸-45-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-67,68-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(50),30(51)-테트라엔-52,53,54,55,56-펜톤(I-94). DCM(30 mL) 중 (24E,26E,28E,29E,33R,34S,35R,36R,38S,40S,42S,43S,44R,45R,54R)-54-하이드록시-42,44,45-트라이메톡시-43-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-33,34,35,36,46,47-헥사메틸-62,63-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(46),29(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(중간체 VI, 0.62 g, 0.63 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.43 g, 12.57 mmol, 0.97 mL)을 -55℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.49 g, DCM 중 12.57 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 -45℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(40 mL)에 붓고 DCM(40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(40 mL) 및 염수(40 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA:PE=9:1) 이후 역상 크로마토그래피(40% 수중 CH3CN으로 용출시킴)를 통해 정제하여 I-94(0.074 g, 11% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1094.8 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.45-5.98 (m, 4H), 5.66-4.97 (m, 4H), 4.43-4.78 (m, 5H), 4.31-4.18 (m, 1H), 3.91-3.69 (m, 4H), 3.67-3.24 (m, 17H), 3.21-2.99 (m, 5H), 2.86-2.50 (m, 3H), 2.30-1.84 (m, 6H), 1.78-1.59 (m, 20H), 1.51-1.23 (m, 10H), 1.20-1.03 (m, 11H), 0.97-0.84 (m, 8H), 0.78-0.69 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-83) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-82). 130 mg의 I-94를 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-83(50.8 mg, 39% 수율)을 백색 고체로서 및 I-82(6.2 mg, 5% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. ×15 cm L
주입량: 10 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu-LC-20AD
I-83: ESI-MS (EI+, m/z): 1094.7 [M+H]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.82 (m, 4H), 5.71 - 5.02 (m, 4H), 4.81 - 4.49 (m, 5H), 4.00 - 3.20 (m, 24H), 3.19 - 2.98 (m, 5H), 2.95 - 2.43 (m, 3H), 2.36 - 1.84 (m, 7H), 1.80 - 1.56 (m, 13H), 1.52 - 1.22 (m, 9H), 1.19 - 0.68 (m, 19H).
I-82: ESI-MS (EI+, m/z): 1094.6 [M+H]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.84 (m, 4H), 5.78 - 5.02 (m, 4H), 4.74 - 4.42 (m, 5H), 3.91 - 2.79 (m, 29H), 2.72 - 1.56 (m, 24H), 1.46 - 0.59 (m, 27H).
실시예 35: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-106), (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-93) 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-92)의 합성
Figure pct00193
단계 1: 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄. DMF(160 mL) 중 옥세탄-3-올(10 g, 135 mmol)의 용액에 수소화나트륨(3.24 g, 135 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 생성된 용액을 이 온도에서 30분 동안 교반하고, 이후 2-브로모에톡시메틸벤젠(43.55 g, 202.49 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 2시간 동안 0℃에서 빙수욕에서 교반하고, 이후 실온으로 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 1200 mL의 NH4Cl(sat., aq.)로 켄칭시키고, 에틸 아세테이트(2 x 120 mL)로 추출하고, 유기층을 합치고 농축시켰다. 잔류물을 PE/EA(8:1)를 이용해 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄(16.4 g, 58% 수율)을 무색 액체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 231 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.41 - 7.23 (m, 6H), 4.79 - 4.70 (m, 2H), 4.68 - 4.52 (m, 6H), 3.62 - 3.53 (m, 4H).
단계 2: 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올. MeOH(20 mL) 중 3-(2-벤질옥시에톡시)옥세탄(4 g, 19.21 mmol)의 용액에 팔라듐(탄소 상 10%)(2.04 g, 19.21 mmol)을 N2 하에 첨가하였다. 용액을 H2 하에 40℃에서 밤새 교반하고, 이후 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE: EA= 1: 5)를 통해 정제하여 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(2.1 g, 93% 수율)을 무색 액체로서 제공하였다. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 4.79 (td, J = 5.8, 2.1 ㎐, 2H), 4.62 (dt, J = 10.2, 4.9 ㎐, 3H), 3.80 - 3.69 (m, 2H), 3.52 - 3.44 (m, 2H), 2.36 (s, 1H).
단계 3: 1,4-다이옥산-2-일메탄올. THF(60 mL) 중 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(4 g, 33.86 mmol) 및 HND-8(1.2 g)의 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축시켜 1,4-다이옥산-2-일메탄올(3.66 g, 92% 수율)을 무색 오일로서 제공하였다. 1HNMR (400 ㎒, CDCl3) δ 3.86 - 3.42 (m, 9H), 1.98 (s, 1H).
단계 4: 2-[tert-부틸(다이페닐)실릴] 옥시에틸 트라이플루오로메탄설포네이트. DCM(20 mL) 중 2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에탄올(7 g, 23.3 mmol) 및 DIEA(4.52 g, 34.95 mmol)의 용액에 0℃에서 N2 하에 트라이플루오로메틸설포닐 트라이플루오로메탄설포네이트(7.23 g, 25.63 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 DCM(150 mL)으로 희석하고, 포화 NaHCO3(50 mL), 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에틸 트라이플루오로메탄설포네이트를 갈색 오일로서 제공하였다. 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 7.68 - 7.65 (m, 4H), 7.47 - 7.38 (m, 6H), 4.59 - 4.53 (m, 2H), 3.94 - 3.86 (m, 2H), 1.07 (d, J = 5.4 ㎐, 9H).
단계 5: (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤. 톨루엔(20 mL) 중 라파마이신(2 g, 2.19 mmol), 2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(9.46 g, 21.88 mmol) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(3.39 g, 26.25 mmol)의 혼합물을 58℃에서 18시간 동안 교반하고, 이후 저온 포화 NaHCO3(150 mL)에 부었다. 이를 EtOAc(200 mL)추출하고, 유기층을 물(150 mL×3) 및 염수(150 mL)로 세정하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=3:1)를 통해 정제하여 (35E,37E,39E,40E,46R,47S,48R,49R,51S,53S,55S,56S,57R,58R,67R)-56-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[2-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시에톡시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-57,67-다이하이드록시-55,58-다이메톡시-46,47,48,49,59,60-헥사메틸-77,78-다이옥사-69-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(59),40(60)-테트라엔-61,62,63,64,65-펜톤을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z):1218.6 [M+Na] +.
단계 6: (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-63,64-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤. THF(70 mL) 중 (35E,37E,39E,40E,47R,48S,49R,50R,52S,54S,56S,57S,58R,59R,68R)-57-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-[3-[tert-부틸(다이페닐)실릴]옥시프로폭시]-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-58,68-다이하이드록시-56,59-다이메톡시-47,48,49,50,60,61-헥사메틸-78,79-다이옥사-70-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-35,37,39(60),40(61)-테트라엔-62,63,64,65,66-펜톤(3.46 g, 2.86 mmol)의 용액에 0℃에서 피리딘·HF(2.26 g, 28.58 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 3시간 동안 교반하고, 이후 0℃로 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(20 mL)로 켄칭시키고, EA(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA =2:3)를 통해 정제하여 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-63,64-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z):994.5 [M+Na] +
단계 7: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-106). DCM(40 mL) 중 (22E,24E,26E,27E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-41,44-다이메톡시-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-63,64-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-22,24,26(45),27(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.6 g, 0.62 mmol) 및 1,4-다이옥산-2-일메탄올(2.19 g, 18.51 mmol)의 용액에 -40℃에서 N2 하에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2.81 g, 24.69 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 -10℃에서 교반하고, 이후 빙냉 포화 NaHCO3(100 mL), 물(100 mL× 3) 및 염수(100 mL× 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 65% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-106을 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z):1080.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44 - 5.89 (m, 4H), 5.61 - 5.37 (m, 2H), 5.31 - 5.12 (m, 2H), 4.79 (d, J = 18.7 ㎐, 1H), 4.29 (d, J = 12.8 ㎐, 1H), 3.95 - 3.53 (m, 11H), 3.53 - 3.27 (m, 9H), 3.27 - 2.96 (m, 5H), 2.71 (s, 1H), 2.58 (d, J = 13.9 ㎐, 1H), 2.34 (d, J = 11.8 ㎐, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.87 - 1.57 (m, 20H), 1.47 (dd, J = 22.8, 10.6 ㎐, 3H), 1.26 - 0.77 (m, 19H), 0.70 (dd, J = 23.6, 12.0 ㎐, 1H).
단계 8: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44S,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-93) 및 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,44R,45S,47R,48R,57R)-44-(1,4-다이옥산-2-일메톡시)-47,57-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(3-하이드록시프로폭시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-48-메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-92). 240 mg의 I-106을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(DCM: PE: EA= 3: 3: 1의 혼합물 중 9% MeOH)를 통해 정제하여 I-93(45 mg, 19% 수율)을 백색 고체로서 및 I-92(25 mg, 10% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15cm L
주입량: 100 μl
이동상: 헥산/EtOH=60/40(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-93: ESI-MS (EI+, m/z):1080.8 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.37 - 5.74 (m, 4H), 5.51 - 5.00 (m, 4H), 4.10 (d, J = 6.0 ㎐, 1H), 3.86 - 3.44 (m, 14H), 3.40 - 2.90 (m, 15H), 2.82 - 2.45 (m, 3H), 2.34 - 1.34 (m, 24H), 1.30 - 1.10 (m, 7H), 1.05 - 0.53 (m, 19H).
I-92: ESI-MS (EI+, m/z):1080.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.88 (m, 4H), 5.70 - 5.06 (m, 4H), 4.23 (t, J = 32.2 ㎐, 2H), 4.01-3.52 (m, 12H), 3.52 - 2.88 (m, 16H), 2.78-1.98 (m, 9H), 1.92 - 1.72 (m, 8H), 1.51-1.20 (m, 17H), 1.14 - 0.60 (m, 19H).
실시예 36: (27E,29E,31E,32E,39R,40S,41R,42R,44S,46S,49S,51R,52R,62R)-51,62-다이하이드록시-52-메톡시-49-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-39,40,41,42,53,54-헥사메틸-48-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-74,75-다이옥사-63-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-27,29,31(53),32(54)-테트라엔-55,56,57,58,59-펜톤(I-91)의 합성
Figure pct00194
단계 1: (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤. DCM(50 mL) 중 중간체 II(2.9 g, 2.68 mmol), 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄(0.797 g, 8.04 mmol, 0.123 mL) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(1.04 g, 8.04 mmol, 1.40 mL)의 용액을 20시간 동안 22℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(10 mL)으로 희석하고, 포화 NH4Cl(10 mL × 3), 물(10 mL × 3) 및 염수(10 mL × 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(1.5 g, 53% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1053.8 [M+H]+, T = 1.882 min, 100% 순도, 254 nm.
단계 2: (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(I-91). DCM(25 mL) 중 (26E,28E,30E,31E,36R,37S,38R,39R,41S,43S,45S,46S,47R,48R,58R)-47,58-다이하이드록시-45,48-다이메톡시-46-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-[3-(2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄-6-일)프로폭시]사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-36,37,38,39,49,50-헥사메틸-69,70-다이옥사-59-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-26,28,30(49),31(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(0.5 g, 0.47 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.89 g, 16.61 mmol, 1.28 mL)을 -55℃에서 N2 하에 적가하였다. 반응물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.12 g, DCM 중 9.49 mmol)을 첨가하고, 반응물을 추가 2시간 동안 -20℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 포화 NaHCO3(40 mL)에 붓고, DCM(40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(40 mL) 및 염수(40 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 40% 수중 CH3CN(0.01% HCOOH)으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-91(0.06 g, 11% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1139.8 [M+H]+, T = 1.814 min, 98% 순도, 254 nm. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.40-5.95 (m, 4H), 5.54-5.12 (m, 4H), 4.85 (br, 4H), 4.79-4.54(m, 5H), 4.45-4.03 (m, 6H), 3.94-3.64 (m, 4H), 3.57-3.19 (m, 15H), 3.13-2.95 (m, 6H), 2.77-2.13 (m, 6H), 2.03-1.56 (m, 27H), 1.53-1.37 (m, 5H), 1.38-081 (m, 33H), 0.69-0.61 (m, 3H).
실시예 37: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-44-[2-[2-(메틸아미노)에톡시]에톡시]-65,66-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-90)의 합성
Figure pct00195
단계 1: (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤. DCM(10 mL) 중 중간체 I(2.9 g, 2.68 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(1.82 g, 15.92 mmol, 1.23 mL)를 -40℃에서 첨가하였다. 이후 2-(2-요오도에톡시)에탄올(2.29 g, 10.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE : EA = 1 : 1)를 통해 정제하여 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.3 g, 50% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 2: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-56-하이드록시-46,47-다이메톡시-35,36,37,38,48,49-헥사메틸-44-[2-[2-(메틸아미노)에톡시]에톡시]-65,66-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-90). DCM(8 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,45R,46R,55R)-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3,4-다이메톡시사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-55-하이드록시-43-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-45,46-다이메톡시-34,35,36,37,47,48-헥사메틸-63,64-다이옥사-56-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(47),28(48)-테트라엔-49,50,51,52,53-펜톤(0.38 g, 0.34 mmol), 메탄아민(0.105 g, 3.37 mmol, 0.117 mL) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(0.436 g, 3.37 mmol, 0.588 mL)의 용액을 24시간 동안 22℃에서 교반하였다. 반응물을 DCM(10 mL)으로 희석하고, 포화 NH4Cl(10 mL × 3)，물(10 mL × 3) 및 염수(10 mL × 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-90(55 mg, 16% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
실시예 38: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-88), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-72) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-71)의 합성
Figure pct00196
단계 1: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-88). DCM(10 mL) 중 라파마이신(0.5 g, 0.547 mmol)의 용액에 질소 하에 -40℃에서 TFA(1.87 g, 16.41 mmol)를 이후 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.29 g, 10.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고, 0℃에서 DCM(30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-88(120 mg, 22% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1022.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.42-5.88 (m, 4H), 5.58-5.08 (m, 4H), 4.83-4.54 (m, 5H), 4.35-3.93 (m, 2H), 3.91-3.68(m, 3H), 3.53-3.21(m, 13H), 2.99-2.41(m,5H), 2.38-1.87(m, 7H), 1.85-1.58(m, 13H), 1.55-1.17(m, 11H), 1.16-0.82(m, 17H), 0.80-0.63(m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-72) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-71). 200 mg의 I-88을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-72(31 mg, 16% 수율)를 백색 고체로서 및 I-71(18 mg, 9% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC-3 (IC30CE-NJ008)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 25 cm L
주입량: 10 μL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-72: ESI-MS (EI+, m/z): 1022.3 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.37 - 5.77 (m, 4H), 5.51 - 4.99 (m, 4H), 4.77 - 4.45 (m, 5H), 4.12 (dd, J = 13.5, 6.1 ㎐, 1H), 3.84 - 3.58 (m, 3H), 3.54 - 2.99 (m, 15H), 2.93 - 2.48 (m, 5H), 2.34 - 1.63 (m, 14H), 1.49 - 1.10 (m, 14H), 1.08 - 0.71 (m, 19H), 0.59 (dt, J = 16.8, 8.4 ㎐, 1H).
I-71: ESI-MS (EI+, m/z): 1022.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.44 - 5.86 (m, 4H), 5.66 - 4.99 (m, 4H), 4.77 - 4.46 (m, 5H), 4.25 - 3.59 (m, 5H), 3.55 - 3.02 (m, 15H), 2.96 - 1.83 (m, 13H), 1.81 - 1.59 (m, 10H), 1.46 - 1.10 (m, 10H), 1.08 - 0.48 (m, 19H).
실시예 39: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-89)의 합성
Figure pct00197
DCM(7 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(I-88)(0.290 g, 0.290 mmol)의 용액에 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.447 g, 2.17 mmol)를 0℃에서, 이후 DCM(2 mL) 중 다이메틸포스핀 클로라이드(0.16 g, 1.45 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 7시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, 포화 NaHCO3(30 mL), 0.5N HCl 수용액, 물(30 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 이후 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(0에서 15%로의 PE:EA:DCM(3:3:10) 중의 MeOH)를 통해, 이후 역상 크로마토그래피(60% 수중 CH3CN)에 의해 I-89(0.13 g, 42% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
실시예 40: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-87)의 합성
Figure pct00198
단계 1: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시사이클로헥실)프로판-2-일)-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-87). DCM(10 mL) 중 중간체 V(0.66 g, 0.679 mmol)의 용액에 TFA(3.1 g, 27.15 mmol, 2.09 mL)를 -50℃에서 첨가하였다. 10분 후, DCM(0.5 mL) 중 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(2.41 g, 20.37 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 5시간 동안 교반하였다. DCM 및 수성 NaHCO3 용액을 첨가하고, 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-87(129.4 mg, 18% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1080.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.46 - 5.93 (m, 4H), 5.65 - 5.01 (m, 4H), 4.82 - 4.15 (m, 4H), 3.92 - 3.54 (m, 9H), 3.51 - 3.07 (m, 16H), 2.95 - 2.48 (m, 3H), 2.37 - 1.83 (m, 6H), 1.82 - 1.46 (m, 19H), 1.44 - 1.21 (m, 7H), 1.17 - 0.81 (m, 18H), 0.74 (d, J = 11.9 ㎐, 1H).
실시예 41: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-86)의 합성
Figure pct00199
단계 1: (25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47-메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-44-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-67,68-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤. DCM(15 mL) 중 라파마이신(0.5 g, 0.547 mmol) 및 2-테트라하이드로피란-4-일옥시에탄올(2.4 g, 16.41 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2.49 g, 21.88 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하고, 이후 저온 포화 NaHCO3 용액(10 mL), 물(10 mL× 3) 및 염수(10 mL× 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 70% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼 크로마토그래피를 통해 정제하여 25E,27E,29E,30E,34R,35S,36R,37R,40S,42S,45S,46R,47R,56R)-46,56-다이하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47-메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-44-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-67,68-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-25,27,29(48),30(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(175 mg, 31% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z):1050.6 [M+Na]+.
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-86). DCM(9 mL) 중 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(0.25 g, 0.24 mmol)의 용액에 DCM(3 mL) 중 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.37 g, 1.82 mmol) 및 [클로로(메틸)포스포릴]메탄(0.137 g, 1.22 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 6시간 동안 교반하고, 이후 DCM(30 mL)으로 희석하고, 포화 NaHCO3(30 mL), 0.5N HCl 수용액, 물(30 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 이후 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 진공 중에 농축시키고, 미정제물을 실리카 겔 크로마토그래피(0에서 15%로의 PE:EA:DCM(3:3:10) 중 MeOH)를 통해 정제하여 I-86(130 mg, 48% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z):1126.4 [M+Na] +. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.53 - 5.81 (m, 4H), 5.6-5.12 (m, 4H), 4.33 - 3.70 (m, 7H), 3.65 - 2.90 (m, 16H), 2.84 - 1.97 (m, 8H), 1.95 - 1.17 (m, 36H), 1.14 - 0.63 (m, 19H).
실시예 42: (24E,26E,28E,29E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-43-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-46,56-다이하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47-메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-68,69-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-110), 1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-85) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-84)의 합성
Figure pct00200
단계 1: (24E,26E,28E,29E,34R,35S,36R,37R,39S,41S,44S,46R,47R,56R)-43-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-46,56-다이하이드록시-44-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47-메톡시-34,35,36,37,48,49-헥사메틸-68,69-다이옥사-57-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(48),29(49)-테트라엔-50,51,52,53,54-펜톤(I-110). DCM(60 mL) 중 에베롤리무스(1 g, 1.04 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(2.38 g, 20.88 mmol, 1.61 mL)을 -55℃에서 N2 하에 적가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, 이후 DCM 중 [(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메탄올(0.493 g, 4.17 mmol)을 첨가하고, 반응물을 1시간 동안 -20℃에서 교반하였다. 혼합물을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(80 mL)에 붓고, DCM(80 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(80 mL) 및 염수(80 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA)를 통해 다시 정제하여 I-110(65 mg, 6% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1066.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39-5.92 (m, 4H), 5.56-4.81 (m, 5H), 4.26-3.98 (m, 2H), 3.84-3.68 (m, 9H), 3.62-3.53 (m, 3H), 3.48-3.04 (m, 15H), 2.87-2.55 (m, 4H), 2.35-1.83 (m, 7H), 1.79-1.38 (m, 27H), 1.34-1.22 (m, 7H), 1.18-0.79 (m, 19H), 0.76-0.67 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-85) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-84). 110 mg의 I-110을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-85(32.2 mg, 29% 수율)를 백색 고체로서 및 I-84(12 mg 11% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 20 μL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-85: ESI-MS (EI+, m/z): 1066.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.42 - 5.82 (m, 4H), 5.59 - 5.07 (m, 4H), 4.81 (s, 1H), 4.17 (d, J = 6.1 ㎐, 1H), 3.89 - 3.53 (m, 15H), 3.47 - 3.01 (m, 16H), 2.90 - 2.52 (m, 3H), 2.41-1.85 (m, 8H), 1.82 - 1.42 (m, 8H), 1.39-1.18 (m, 10H), 1.15 - 0.61 (m,19H).
I-84: ESI-MS (EI+, m/z): 1066.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.42 - 5.86 (m, 4H), 5.59 - 5.07 (m, 4H), 4.30-3.95 (m, 3H), 3.87 - 3.03 (m, 28H), 2.97 - 1.71 (m, 21H), 1.52 - 1.17 (m, 14H), 1.13 - 0.64 (m, 19H).
실시예 43: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-81), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-69)의 합성
Figure pct00201
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-81). DCM(20 mL) 중 중간체 VI(0.5 g, 0.507 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.16 g, 10.14 mmol, 0.78 mL)을 -55℃에서 N2 하에 적가하였다. 반응물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, 이후 DCM 중 2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시] 에탄올(1.64 g, 10.14 mmol)을 동일 온도에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 2 시간에 걸쳐 가온하였다. 반응물을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(40 mL)에 붓고 DCM(40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(40 mL) 및 염수(40 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA)를 통해 정제하고, 60% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 다시 정제하여 I-81(0.03 g, 5% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1138.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.45-6.00 (m, 4H), 5.54-5.08 (m, 4H), 4.78-4.57 (m, 5H), 4.45-4.30(m, 1H), 3.88-3.79 (m, 4H), 3.70-3.50 (m, 9H), 3.47-3.42 (m, 4H), 3.38-3.30 (m, 5H), 3.28-3.23 (m, 3H), 3.22-3.03 (m, 5H), 2.75-2.50 (m, 2H), 2.31-1.84 (m, 6H), 1.76-1.48 (m, 18H), 1.53-1.21 (m, 10H), 1.18-1.04 (m, 11H), 0.98-0.83 (m, 8H), 0.80-0.67 (m, 2H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-69). 100 mg의 I-81을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-69(25 mg, 25% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CE-BN011)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 25 cm L
주입량: 50 μL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-69: ESI-MS (EI+, m/z): 1138.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.42 - 5.73 (m, 4H), 5.72-4.98 (m, 4H), 4.72 - 4.47 (m, 5H), 3.94 - 2.92 (m, 32H), 2.90 - 2.39 (m, 3H), 2.33 - 1.49 (m, 17H), 1.47 - 1.13 (m, 12H), 1.07 - 0.57 (m, 20H).
실시예 44: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-80) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-62)의 합성
Figure pct00202
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-80). DCM(15 mL) 중 중간체 V(0.6 g, 0.62 mmol)의 용액에 TFA(2.11 g, 18.51 mmol, 1.43 mL)를 -40℃에서 N2 하에 첨가하고, 2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시] 에탄올(2 g, 12.34 mmol)을 이후 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 포화 NaHCO3(aq) 용액(20 mL)의 용액에 붓고 DCM(20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-80(50 mg, 7% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1124.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.46-5.97 (m, 4H), 5.73-5.03 (m, 4H), 4.70-4.54 (m, 5H), 4.50-4.12(m, 2H), 3.93-3.73 (m, 3H), 3.72-3.50 (m, 8H), 3.49-3.03(m, 13H), 2.98-2.51(m, 4H), 2.38-1.87(m, 7H), 1.83-1.55(m, 17H), 1.54-1.15(m, 10H), 1.14-0.81 (m, 17H), 0.80-0.68 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-62). 129 mg의 I-80을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-62(30.6 mg, 24% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. ×15 cm L
주입량: 10 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu-LC-20AD
I-62: ESI-MS (EI+, m/z): 1124.3 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.51 - 5.80 (m, 4H), 5.73 - 5.03 (m, 4H), 4.86 - 4.53 (m, 5H), 3.99 - 3.03 (m, 31H), 2.99 - 2.50 (m, 4H), 2.40 - 1.83 (m, 10H), 1.82 - 1.44 (m, 9H), 1.43 - 1.18 (m, 9H), 1.18 - 0.67 (m, 19H).
실시예 45: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-76), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-66) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-65)의 합성
Figure pct00203
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-76). DCM(40 mL) 중 중간체 III(0.5 g, 0.51 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.17 g, 10.29 mmol)을 -55℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하고, 이후 [(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메탄올(1.03 g, DCM 중 8.74 mmol)을 동일 온도에서 첨가하였다. 반응물을 2 시간에 걸쳐 -10℃로 가온하고, 이후 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(40 mL)에 붓고 DCM(50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(EA 100%)를 통해 및 이후 65% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-76(0.08 g, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1080.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39-5.92 (m, 4H), 5.56-4.81 (m, 5H), 4.28-3.98 (m, 3H), 3.90-3.68 (m, 9H), 3.65-3.28 (m, 16H), 3.26-2.97 (m, 5H), 2.88-2.46 (m, 4H), 2.35-1.91 (m, 6H), 1.89-1.60 (m, 18H), 1.55-1.16 (m, 10H), 1.14-0.83 (m, 18H), 1.76-0.65 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-66) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-65). 155 mg의 I-76을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-66(33.2 mg, 21.42% 수율)을 백색 고체로서 및 I-65(13.8 mg, 9% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. ×15 cm L
주입량: 10 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254 nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu-LC-20AD
I-66: ESI-MS (EI+, m/z): 1080.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.43 - 5.82 (m, 4H), 5.60 - 5.07 (m, 4H), 4.82 (s, 1H), 4.17 (d, J = 5.7 ㎐, 1H), 3.88 - 3.00 (m, 31H), 2.88 - 2.51 (m, 3H), 2.40 - 1.68 (m, 13H), 1.55-1.30 (m, 8H), 1.29-1.15 (m, 7H), 1.14 - 0.62 (m, 19H).
I-65: ESI-MS (EI+, m/z): 1080.4 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.45 - 5.87 (m, 4H), 5.71 - 5.10 (m, 4H), 4.10 (dd, J = 85.6, 30.3 ㎐, 3H), 3.86 - 2.83 (m, 30H), 2.82 - 1.71 (m, 17H), 1.54 - 1.14 (m, 14H), 1.12 - 0.59 (m, 19H).
실시예 46: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-78) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-77)의 합성
Figure pct00204
단계 1: (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤. DCM(10 mL) 중 라파마이신(0.5 g, 0.547 mmol)의 용액에 질소 하에 TFA(1.87 g, 16.41 mmol, 1.26 mL)를 -40℃에서 첨가하였다. 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.29 g, 10.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)를 첨가하여 켄칭시키고 0℃에서 DCM(30 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 80% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41R,42S,44R,45R,54R)-44,54-다이하이드록시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-45-메톡시-32,33,34,35,46,47-헥사메틸-41-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-65,66-다이옥사-55-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(46),28(47)-테트라엔-48,49,50,51,52-펜톤(120 mg, 22% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1022.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.42-5.88 (m, 4H), 5.58-5.08 (m, 4H), 4.83-4.54 (m, 5H), 4.35-3.93 (m, 2H), 3.91-3.68(m, 3H), 3.53-3.21(m, 13H), 2.99-2.41(m,5H), 2.38-1.87(m, 7H), 1.85-1.58(m, 13H), 1.55-1.17(m, 11H), 1.16-0.82(m, 17H), 0.80-0.63(m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤. DCM(7 mL) 중 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(0.29 g, 0.29 mmol)의 용액에 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.45 g, 2.17 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. DCM(2 mL) 중 다이메틸포스핀 클로라이드(0.163 g, 1.45 mmol)를 첨가하고, 반응물을 0℃에서 7 시간 동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고, 포화 NaHCO3(30 mL), 0.5N HCl 수용액, 물(30 mL) 및 염수(50 mL)로 세정하였다. 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 중에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(0에서 15%로의 PE:EA:DCM(3:3:10) 중 MeOH)를 통해 및 역상 크로마토그래피(60% 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(130 mg, 42% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1098.7 [M+Na]+.
단계 3: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-78) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-77). 150 mg의 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-78(28.5 mg, 19% 수율)을 백색 고체로서 및 I-77(12.3 mg, 8% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CE-QE014)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 25 cm L
주입량: 10 μL
이동상: 헥산/EtOH=40/60(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AD
I-78: ESI-MS (EI+, m/z): 1098.7 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.37 - 5.78 (m, 4H), 5.52 - 5.02 (m, 4H), 4.79 - 4.44 (m, 5H), 4.24 - 3.94 (m, 2H), 3.89 - 3.57 (m, 3H), 3.55 - 2.88 (m, 15H), 2.80 - 2.42 (m, 3H), 2.36 - 1.78 (m, 8H), 1.75 - 1.35 (m, 16H), 1.32 - 1.10 (m, 11H), 1.08 - 0.57 (m, 19H).
I-77: ESI-MS (EI+, m/z): 1098.7 [M+Na] +. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39 - 5.93 (m, 4H), 5.65 - 5.01 (m, 4H), 4.80-4.46 (m, 5H), 4.26 - 3.91 (m, 4H), 3.51 - 3.10 (m, 13H), 3.04 - 1.91 (m, 11H), 1.86 - 1.52 (m, 20H), 1.49 - 1.11 (m, 10H), 1.08 - 0.57 (m, 19H).
실시예 47: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-79), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-64) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-63)의 합성
Figure pct00205
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-79). DCM(35 mL) 중 중간체 III(0.5 g, 0.51 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.17 g, 10.29 mmol, -0.79 mL)을 -55℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 -45℃에서 교반하고, [(2S)-1,4-다이옥산-2-일]메탄올(0.97 g, DCM 중 8.23 mmol)을 첨가하고, 이후 혼합물을 1시간에 걸쳐 -10℃로 가온하였다. 반응물을 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(40 mL)에 붓고, DCM(40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(40 mL) 및 염수(40 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA)를 통해 정제하고, 이후 60% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 다시 정제하여 I-79(0.1 g, 18% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1080.6 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.39-5.92 (m, 4H), 5.57-4.77 (m, 5H), 4.31-3.98 (m, 3H), 3.85-3.67 (m, 8H), 3.65-3.24 (m, 17H), 3.22-2.97 (m, 3H), 2.75-2.26 (m, 5H), 2.17-1.90 (m, 5H), 1.86-1.58 (m, 17H), 1.51-1.16 (m, 10H), 1.15-0.81 (m, 18H), 0.76-0.65 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-64) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-30-[[(2R)-1,4-다이옥산-2-일]메톡시]-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-63). 146 mg의 I-79를 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-64(31.2 mg, 21% 수율)를 백색 고체로서 및 I-63(15.4 mg, 11% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CE-BN011)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. ×25cm L
주입량: 10 μL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu-LC-20AD
I-64: ESI-MS (EI+, m/z): 1080.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.43 - 5.81 (m, 4H), 5.58 - 5.08 (m, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.17 (d, J = 5.6 ㎐, 1H), 3.89 - 3.26 (m, 28H), 3.22 - 2.99 (m, 4H), 2.89 - 2.46 (m, 3H), 2.38 - 1.67 (m, 13H), 1.55 - 1.16 (m, 13H), 1.13 - 0.59 (m, 20H).
I-63: ESI-MS (EI+, m/z): 1080.3 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.47 - 5.93 (m, 4H), 5.70 - 5.14 (m, 4H), 4.34 - 3.94 (m, 3H), 3.86 - 2.93 (m, 30H), 2.87 - 1.87 (m, 9H), 1.72 (t, J = 14.6 ㎐, 8H), 1.51 - 1.16 (m, 12H), 1.13 - 0.59 (m, 21H).
실시예 48: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시)-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-75)의 합성:
Figure pct00206
DCM(15 mL) 중 중간체 IV(0.5 g, 0.498 mmol)의 용액에 TFA(2.27 g, 19.92 mmol, 1.53 mL)를 -50℃에서 첨가하였다. 10분 후 DCM(0.5 mL) 중 2-(옥세탄-3-일옥시)에탄올(1.76 g, 14.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -10℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-75(180.7 mg, 33% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1112.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.47 - 5.79 (m, 4H), 5.38 (dddd, J = 91.9, 76.3, 49.1, 19.1 ㎐, 4H), 4.80 - 4.03 (m, 7H), 3.94 - 2.94 (m, 22H), 2.93 - 1.83 (m, 11H), 1.67 - 1.30 (m, 22H), 1.30 - 0.82 (m, 21H), 0.77 (dd, J = 24.4, 12.2 ㎐, 1H).
실시예 49: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(3-모폴리노프로폭시)-1,5,11,28,29-펜타옥소-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-74)의 합성:
Figure pct00207
DCM(15 mL) 중 중간체 IV(0.35 g, 0.349 mmol)의 용액에 TFA(1.59 g, 13.94 mmol)를 -50℃에서 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하고, 이후 DCM(0.5 mL)에 용해시킨 3-모폴리노프로판-1-올(1.52 g, 10.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -10℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-74(138.8 mg, 36% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1118.7 [M+H]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 6.19 (dd, J = 78.7, 69.0 ㎐, 4H), 5.32 (d, J = 60.0 ㎐, 4H), 4.11 (s, 2H), 3.93 - 3.54 (m, 9H), 3.47 - 2.93 (m, 18H), 2.90 - 1.93 (m, 17H), 1.32 (dd, J = 60.9, 36.3 ㎐, 17H), 1.19 - 0.62 (m, 26H).
실시예 49: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-68), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-57) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-56)
Figure pct00208
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-68). THF(15 mL) 중 (23E,25E,27E,28E,32R,33S,34R,35R,37S,39S,41S,42S,43R,44R,53R)-43,53-다이하이드록시-41,44-다이메톡시-42-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-32,33,34,35,45,46-헥사메틸-62,63-다이옥사-54-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-23,25,27(45),28(46)-테트라엔-47,48,49,50,51-펜톤(0.5 g, 0.51 mmol) 및 피라진-2-일메탄올(0.96 g, 8.74 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠술폰산 수화물(0.49 g, 2.57 mmol, 0.395 mL)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응물을 22 시간 동안 40℃에서 교반하고, 이후 저온 포화 수성 NaHCO3(30 mL)에 붓고 DCM(10 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(30 mL) 및 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA) 및 이후 70% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를 통해 I-68(0.08 g, 15% 수율)을 밝은 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1072.5 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 8.73-8.70 (m, 1H), 8.56-8.48 (m, 2H), 6.42-5.98 (m, 4H), 5.60-4.82 (m, 4H), 4.62-4.15 (m, 4H), 4.07-3.86 (m, 2H), 3.75-3.48 (m, 6H), 3.47-3.20 (m, 12H), 3.16-2.95 (m, 4H), 2.98-2.10 (m, 6H), 2.05-1.54 (m, 23H), 1.56-1.16 (m, 10H), 1.15-0.82 (m, 19H), 0.79-0.64 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-57) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-19-메톡시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-56). 200 mg의 I-68을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE:DCM:EA 3:3:1 중 11% MeOH)를 통해 정제하여 I-57(24.4 mg, 12% 수율)을 백색 고체로서 및 I-56(21.5 mg, 10% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 10 μl
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-57: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 8.49 (d, J = 2.4 ㎐, 2H), 6.41 - 5.90 (m, 4H), 5.59 - 5.08 (m, 4H), 4.91 (s, 1H), 4.58 (d, J = 13.8 ㎐, 1H), 4.44 - 4.32 (m, 1H), 4.18 (t, J = 16.3 ㎐, 1H), 3.94 (dd, J = 21.3, 14.0 ㎐, 2H), 3.71 (ddd, J = 25.5, 13.1, 7.6 ㎐, 3H), 3.60 - 3.26 (m, 15H), 3.22 - 2.95 (m, 3H), 2.86 - 2.54 (m, 3H), 2.37 - 2.16 (m, 2H), 2.01 (dd, J = 31.2, 14.8 ㎐, 5H), 1.70 (dd, J = 31.5, 12.5 ㎐, 9H), 1.51 - 1.16 (m, 11H), 1.14 - 0.79 (m, 18H), 0.71 (dd, J = 23.8, 12.1 ㎐, 1H).
I-56: ESI-MS (EI+, m/z): 1072.7 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 8.73 (s, 1H), 8.51 (d, J = 2.5 ㎐, 2H), 6.43-5.78(m, 4H), 5.71 - 5.01 (m, 4H), 4.65 - 4.16 (m, 4H), 4.03 - 3.61 (m, 4H), 3.56 - 2.90 (m, 18H), 2.85 - 1.69 (m, 16H), 1.41 (ddd, J = 79.6, 43.9, 14.6 ㎐, 14H), 1.14 - 0.59 (m, 20H).
실시예 50: (3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-9,27-다이하이드록시-10-메톡시-3-((R)-1-((1S,3R,4R)-3-메톡시-4-(2-메톡시에톡시)사이클로헥실)프로판-2-일)-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-21-(2-(피라진-2-일)에톡시)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-헥사데카하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-펜타온(I-60)의 합성
Figure pct00209
DCM(15 mL) 중 중간체 III(0.5 g, 0.51 mmol)의 용액에 TFA(2.35 g, 20.57 mmol)를 -50℃에서 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하고, 이후 DCM(0.5 mL)에 용해시킨 2-피라진-2-일에탄올(1.92 g, 15.43 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 이후 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-60(162.8 mg, 30% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1086.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 8.65 - 8.29 (m, 1H), 6.53 - 5.95 (m, 4H), 5.56 - 5.14 (m, 4H), 4.59 - 3.65 (m, 6H), 3.62 - 2.43 (m, 25H), 2.15 (dt, J = 144.5, 40.3 ㎐, 6H), 1.56 - 1.16 (m, 16H), 1.15 - 0.54 (m, 26H).
실시예 51: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-67), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-59) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-58)
Figure pct00210
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-67). THF(15 mL) 중 에베롤리무스(0.977 g, 8.87 mmol)의 용액에 4-메틸벤젠술폰산 수화물(0.496 g, 2.61 mmol)을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응물을 10 시간 동안 40℃에서 교반하고, 이후 저온 포화 수성 NaHCO3(30 mL)에 붓고, EA(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(30 mL) 및 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(DCM :MeOH = 1:5)를 통해 이후 60% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 I-67(0.11 g, 20% 수율)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다 ESI-MS (EI+, m/z): 1059.6 [M+Na]+. 1H NMR (400 ㎒, CDCl3) δ 8.743-8.70 (m, 1H), 8.56-8.48 (m, 2H), 6.42-5.93 (m, 4H), 5.60-4.89 (m, 5H), 4.63-4.06 (m, 4H), 4.017-3.53 (m, 7H), 3.46-3.28 (m, 8H), 3.25-2.91 (m, 4H), 3.16-2.95 (m, 4H), 2.88-2.42 (m, 4H), 2.32-1.97 (m, 8H), 1.96-1.61 (m, 23H), 1.56-1.13 (m, 12H), 1.11-0.82 (m, 17H), 0.76-0.63 (m, 1H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-59) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-1,18-다이하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-19-메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(피라진-2-일메톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-58). 220 mg의 I-67을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE:DCM:EA 3:3:1 중 11% MeOH)를 통해 정제하여 I-59(40.2 mg, 18% 수율)를 백색 고체로서 및 I-58(32.1 mg, 15% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 10 μL
이동상: 헥산/EtOH=50/50(V/V)
유량: 1.0 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-59: ESI-MS (EI+, m/z): 1059.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 8.49 (d, J = 2.0 ㎐, 2H), 6.45 - 5.91 (m, 4H), 5.60 - 5.09 (m, 4H), 4.90 (s, 1H), 4.58 (dd, J = 13.6, 4.1 ㎐, 1H), 4.46 - 4.33 (m, 1H), 4.19 (dd, J = 20.7, 6.5 ㎐, 1H), 4.02 - 3.51 (m, 8H), 3.48 - 3.02 (m, 12H), 2.88 - 2.54 (m, 3H), 2.36 - 1.88 (m, 7H), 1.85 - 1.63 (m, 11H), 1.52 - 1.17 (m, 10H), 1.14 - 0.79 (m, 18H), 0.75 - 0.64 (m, 1H).
I-58: ESI-MS (EI+, m/z): 1059.0 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 8.79 (s, 1H), 8.51 (d, J = 2.3 ㎐, 2H), 6.43 - 5.96 (m, 4H), 5.74 - 5.08 (m, 4H), 4.90 (s, 1H), 4.65 - 4.18 (m, 4H), 4.01 - 3.54 (m, 6H), 3.50 - 2.82 (m, 14H), 2.76 - 1.69 (m, 14H), 1.56 - 1.19 (m, 16H), 1.16 - 0.60 (m, 19H).
실시예 52: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-21-(2-((테트라hydro-2H-pyran-4-일)옥시)에톡시)-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-70), (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-55) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-54)의 합성
Figure pct00211
단계 1: (1R,2R,4S)-4-((2R)-2-((3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,23S,26R,27R,34aS)-27-하이드록시-9,10-다이메톡시-6,8,12,14,20,26-헥사메틸-1,5,11,28,29-펜타옥소-21-(2-((테트라하이드로-2H-피란-4-일)옥시)에톡시)-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-테트라코사하이드로-3H-23,27-에폭시피리도[2,1-c][1]옥사[4]아자사이클로헨트라이아콘틴-3-일)프로필)-2-메톡시사이클로헥실 다이메틸포스피네이트(I-70). DCM(15 mL) 중 중간체 IV(0.5 g, 0.498 mmol)의 용액에 TFA(2.27 g, 19.92 mmol, 1.53 mL)를 -50℃에서 첨가하였다. 반응물을 10분 동안 교반하고, 이후 DCM(0.5 mL)에 용해시킨 2-테트라하이드로피란-4-일옥시에탄올(2.18 g, 14.94 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 -10℃에서 24 시간 동안 교반하고, 이후 DCM 및 NaHCO3 수용액으로 희석하였다. 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 I-70(89.8 mg, 16% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1140.5 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.61 - 5.89 (m, 4H), 5.77 - 5.06 (m, 4H), 4.66 - 4.01 (m, 2H), 4.01 - 3.47 (m, 6H), 3.47 - 2.93 (m, 15H), 2.92 - 2.33 (m, 3H), 2.33 - 1.84 (m, 7H), 1.71 - 1.34 (m, 29H), 1.33 - 0.66 (m, 26H).
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-55) 및 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30R,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-(2-테트라하이드로피란-4-일옥시에톡시)-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-54). 100 mg의 I-70을 키랄 분취용 HPLC를 통해 분리하고, 이후 실리카 겔 크로마토그래피(PE:DCM:EA 3:3:1 중 8% MeOH)를 통해 정제하여 I-55(26.5 mg, 25% 수율)를 백색 고체로서 및 I-54(11.4 mg, 11% 수율)를 백색 고체로서 제공하였다.
키랄 분석 방법:
컬럼: CHIRALPAKIC (IC00CD-TB016)
컬럼 사이즈: 0.46 cm I.D. × 15 cm L
주입량: 50 μl
이동상: EtOH=100%
유량: 0.5 mL/분
파장: UV 254nm
온도: 35℃
HPLC 장비: Shimadzu LC-20AT
I-55: ESI-MS (EI+, m/z): 1140.6 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.50-5.76 (m, 4H), 5.58 - 4.96 (m, 4H), 4.19 - 3.49 (m, 9H), 3.46 - 2.86 (m, 17H), 2.81 - 2.46 (m, 2H), 2.37 - 1.68 (m, 18H), 1.60 - 1.17 (m, 22 H), 1.13 - 0.70 (m, 20H).
I-54: ESI-MS (EI+, m/z): 1140.4 [M+Na]+. 1H NMR (500 ㎒, CDCl3) δ 6.36 - 5.75 (m, 4H), 5.46 - 4.97 (m, 4H), 4.65 (s, 1H), 4.11 (d, J = 5.7 ㎐, 1H), 3.90 - 3.58 (m, 5H), 3.53 - 3.17 (m, 18H), 2.89 - 2.38 (m, 6H), 2.31 - 1.64 (m, 20H), 1.55-1.20 (m, 17H), 1.07 - 0.56 (m, 20H).
실시예 53: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-73)의 합성
Figure pct00212
단계 1: (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-67,68-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤. DCM(5 mL) 중 중간체 I(0.5 g, 0.539 mmol)의 용액에 2,2,2-트라이플루오로아세트산(1.23 g, 10.77 mmol, 0.83 mL)을 -55℃에서 N2 하에 적가하였다. -45℃에서 10분 동안 교반 후, 2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에탄올(1.75 g, DCM 중 10.77 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 0℃ 로 1시간에 걸쳐 가온하고, 이후 0℃에서 포화 수성 NaHCO3(70 mL)에 붓고, DCM(70 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(70 mL) 및 염수(70 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(100% EA)에 의해, 이후 60% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 크로마토그래피를에 의해 정제하여 (24E,26E,28E,29E,35R,36S,37R,38R,40S,42S,45S,47R,48R,57R)-57-하이드록시-45-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-47,48-다이메톡시-35,36,37,38,49,50-헥사메틸-44-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-67,68-다이옥사-58-아자트라이사이클로헥사트라이아콘타-24,26,28(49),29(50)-테트라엔-51,52,53,54,55-펜톤(120 mg, 21% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-다이메틸포스포릴옥시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-1-하이드록시-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-73). DCM(6 mL) 중 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-하이드록시-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-30-[2-[2-(옥세탄-3-일옥시)에톡시]에톡시]-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(0.3 g, 0.28 mmol)의 용액에 2,6-다이-tert-부틸-4-메틸피리딘(0.437 g, 2.13 mmol) 및 다이메틸포스핀 클로라이드(159.45 mg, 1.42 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 3.5시간 동안 교반하고, 이후 EtOAc로 희석하고, NaHCO3 수용액으로 세정하고, 물, 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피(0%에서 75%로의 수중 CH3CN)에 의해 정제하여 I-73(110 mg, 34% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1156.6 [M+Na]+.
실시예 54: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[2-[2-(다이메틸아미노)에톡시]에톡시]-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.0 4,9 ]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-53)의 합성
Figure pct00213
단계 1: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-30-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤. DCM(10 mL) 중 중간체 V(0.24 g, 0.247 mmol)의 용액에 TFA(844.38 mg, 7.41 mmol, 0.57 mL)를 -50℃에서 첨가하였다. 10분 후, DCM(0.05 mL) 중 2-(2-요오도에톡시)에탄올(1.07 g, 4.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -20℃에서 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 DCM 및 수성 NaHCO3 용액으로 희석하고, 유기층을 물 및 염수로 세정하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-30-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(130 mg, 46% 수율)을 백색 고체로서 제공하였다.
단계 2: (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-30-[2-[2-(다이메틸아미노)에톡시]에톡시]-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(I-53). DCM(3.92 mL) 중 (1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,32S,35R)-1-하이드록시-12-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-하이드록시에톡시)-3-메톡시-사이클로헥실]-1-메틸-에틸]-30-[2-(2-요오도에톡시)에톡시]-18,19-다이메톡시-15,17,21,23,29,35-헥사메틸-11,36-다이옥사-4-아자트라이사이클로[30.3.1.04,9]헥사트라이아콘타-16,24,26,28-테트라엔-2,3,10,14,20-펜톤(0.36 g, 0.31 mmol), N-메틸메탄아민(0.42 g, 9.34 mmol, 0.54 mL) 및 N-에틸-N-아이소프로필-프로판-2-아민(1.21 g, 9.34 mmol, 1.63 mL)의 용액을 17 시간 동안 25℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(10 mL)으로 희석하고, 포화 NH4Cl(10 mL x 3)，물(10 mL x 3) 및 염수(10 mL x 3)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 여액을 진공 중에 농축시켰다. 잔류물을 50% 수중 CH3CN으로 용출시키는 역상 컬럼에 의해 정제하여 I-53(40 mg, 12% 수율)을 황색 고체로서 제공하였다. ESI-MS (EI+, m/z): 1095.4 [M+Na]+.
실시예 55: AlphaLISA Ultra pS6K1 검정
검정 프로토콜:
1. MCF-7 세포를 Corning 3701 플레이트에 시딩하고 20 내지 24시간 동안 인큐베이션한다. 12,000 내지 16,000개의 세포가 웰당 36 μL 배지에 시딩될 것이다.
2. 배양 배지를 신선한 배지로 바꾸고 추가 2시간 동안 인큐베이션한다.
3. 12 μL (4X) 화합물을 HAMILTON에 의해 세포 플레이트에 첨가한다. 최종 DMSO 농도는 0.5%이다. 90분 동안 인큐베이션한다.
4. HAMILTON에 의해 38 μL를 흡인하고, 웰당 10 μL를 남긴다.
5. HAMILTON을 사용하여 10 μL의 2X 용해 완충액을 첨가하고; 웰의 총 부피는 20 μL이다. 세포가 30분 동안 진탕되도록 한다. 플레이트를 플라스틱 포일로 덮고 -80℃에서 분석까지 플레이트를 저장한다.
6. 실온에서 세포 용해물을 해동하고 10 μL 용해물을 검정 플레이트(Optiplate-384)로 옮긴다.
7. 5 μL 수용체 비드를 검정 플레이트에 첨가하고 2시간 동안 인큐베이션한다.
8. 5 μL 공여체 비드를 첨가하고 2시간 동안 인큐베이션한다.
9. EnSpire Multimode Plate Reader로 플레이트를 카운트한다.
[표 2]
실시예 56: AlphaLISA Ultra pAKT 검정
검정 프로토콜:
1. MCF-7 세포를 Corning 3701 플레이트에 넣고 20 내지 24시간 동안 인큐베이션한다. 16,000 내지 20,000개의 세포가 웰당 36 μL 배지에 시딩될 것이다.
2. 배양 배지를 신선한 배지로 바꾸로 추가 90분 동안 인큐베이션한다.
3. 12 μL (4X) 화합물을 HAMILTON에 의해 세포 플레이트에 첨가한다. 최종 DMSO 농도는 0.5%이다. 2시간 동안 인큐베이션한다.
4. HAMILTON에 의해 38 μL를 흡인하고, 웰당 10 μL를 남긴다.
5. HAMILTON을 사용하여 10 μL의 2X 용해 완충액을 첨가하고; 웰의 총 부피는 20 μL이다. 세포가 30분 동안 진탕되도록 한다. 플레이트를 플라스틱 포일로 덮고 -80℃에서 분석까지 플레이트를 저장한다.
6. 실온에서 세포 용해물을 해동하고 10 μL 용해물을 검정 플레이트(Optiplate-384)로 옮긴다.
7. 5 μL 수용체 비드를 검정 플레이트에 첨가하고 2시간 동안 인큐베이션한다.
8. 5 μL 공여체 비드를 첨가하고 2시간 동안 인큐베이션한다.
9. EnSpire Multimode Plate Reader로 플레이트를 카운트한다.
[표 3]
실시예 57: 24시간 및 48시간 시점에서 웨스턴 블롯 기반 pS6K1 및 pAKT 검정
검정 프로토콜:
1. 웰당 500,000개의 PC3 세포로 6개의 웰 플레이트를 시딩하고 20 내지 24시간 동안 인큐베이션한다.
2. 화합물을 세포 플레이트에 첨가한다. 24 내지 48시간 동안 인큐베이션한다.
4. 플레이트를 얼음 위에 배치하고, 배지를 흡인을 통해 제거한다. 웰을 1 mL의 1 x PBS로 세척하고, 이후 완전히 흡인한다.
5. 110 μL의 1% Triton 용해 완충액을 첨가하고, 각각의 웰을 격렬하게 긁어낸다.
6. 세포 균질물을 얼음 상의 1.5 mL 에펜도르프 튜브로 옮기고, 10,000 rpm으로 10분 동안 4℃에서 회전시킨다.
7. 생성된 세포 용해물의 단백질 농도를 Bradford 검정을 이용하여 정량화하였고 샘플 실행을 1x MES 완충액이 있는 4 내지 12% Bis/Tris 겔에서 웨스턴 블롯을 통해 분석하였다.
8. 겔을 50V로 100분 동안 멤브레인으로 옮기고, Odyssey 블로킹 완충액으로 30분 동안 차단한 다음 1차 항체(pS6K1 T389 Rabbit 또는 pAkt S473 Rabbit)와 함께 밤새 4℃에서 회전기에서 인큐베이션하였다.
9. 멤브레인을 TBS-T로 3회 세척하고, 각각의 세척 사이에 5분 인큐베이션한 다음 2차 항체(LiCor IRDye 800 Donkey Anti Rabbit)와 함께 30분 이상 동안 인큐베이션하였다.
10. 멤브레인을 TBS-T로 3회 세척하고 각 세척 사이에 5분 인큐베이션하였다.
11. 이어서, 겔을 실온에서 PBS로 5분 동안 인큐베이션한 다음 Li-Cor를 사용하여 이미지화하였다.
표 4는 pS6K1 및 pAKT 검정에서 본 발명의 선택된 화합물의 억제 활성(IC50), 및 100 mM 인산염 완충액(pH 7.4)에서의 용해도를 나타낸다. 화합물 번호는 표 1의 화합물 번호에 해당한다.
키나제 검정에 의해 pS6K1 및 pAKT IC50을 비교함으로써 mTORC2에 비해 mTORC1을 선택적으로 억제하는 본 발명의 화합물은 표 4의 "mTORC1 선택적 @90분" 컬럼에서 "있음"으로 표시된다. 키나제 검정에 의해 pS6K1 및 pAKT IC50을 비교함으로써 선택적이지 않은 화합물은 표 4의 "mTORC1 선택적 @90분" 컬럼에서 "없음"으로 표시된다. 웨스턴 블롯 검정에 의해 mTORC2에 비해 mTORC1을 선택적으로 억제하고 적어도 24시간 동안 선택성을 유지하는 본 발명의 화합물은 표 4의 "mTORC1 선택적 @24시간" 컬럼에서 "있음" 및 도 1 내지 도 9에 표시된 웨스턴 블롯 검정의 이미지로 표시된다. 24시간 마크에서 선택적이지 않은 화합물은 표 4의 "mTORC1 선택적 @24시간" 컬럼에서 "없음"으로 표시된다. "N/A"는 "검정되지 않음"을 나타내고 "N/C"는 "산출되지 않음"을 나타낸다.
"A"로 표시된 화합물은 1 nM 미만(x < 1 nM)의 IC50을 나타내었다. "B"로 표시된 화합물은 1 nM 이상 10 nM 미만(1 nM ≤ x < 10 nM)의 IC50을 나타내었다. "C"로 표시된 화합물은 10 nM 이상 100 nM 미만(10 nM ≤ x < 100 nM)의 IC50을 나타내었다. "D"로 표시된 화합물은 100 nM 이상 1 μM 미만(100 nM ≤ x < 1 μM)의 IC50을 나타내었다. "E"로 표시된 화합물은 1 μM 이하(1 μM ≤ x)의 IC50을 나타내었다.
[표 4]
본 발명의 다수의 실시형태를 설명하였지만, 본 발명의 기본 실시예는 본 발명의 화합물 및 방법을 이용하는 다른 실시형태를 제공하도록 변경될 수 있음이 명백하다. 따라서, 본 발명의 범위는 예로서 제시된 특정 실시형태에 의해서가 아니라 첨부된 특허청구범위에 의해 정의되어야 함을 이해할 것이다.

Claims (20)

  1. 화학식 I'의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:

    I'
    상기 식에서,
    X 및 X3는 독립적으로 공유 결합, -CR2-, -NR-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, -O-, -S-, 또는 -SO2NR-이고;
    L1은 공유 결합 또는 C1-30 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 10개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, -SiR2-, -Si(OR)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
    각각의 -Cy1-은 독립적으로 페닐렌, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릴렌, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴렌으로부터 선택된 임의로 치환된 2가 고리이고;
    각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이거나, 또는
    동일한 원자 상의 2개의 R 기는 개재 원자와 함께, 이들이 부착된 동일한 원자에 더하여, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리를 형성하고;
    L2는 임의로 치환된 C1-6 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이고, 여기서 사슬의 1 내지 2개 메틸렌 단위는 -Cy1-로 독립적으로 선택적으로 대체되고;
    R1 및 R2는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR, -CN, -(CR2)1-4NR2, -COR, -CONR2, -CONR(CR2)1-4NR2, -NO2, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, -P(O)R2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고,
    R3는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이고;
    R3′는 수소, 할로겐; -OR, 또는 -OSiR3이거나,
    R3와 R3′는 함께 =O 또는 =S를 형성하고;
    R4 및 R6는 독립적으로 수소, -OR, -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족이고;
    R5와 R5′는 각각 수소이거나 함께 =O 또는 =NOR을 형성하고;
    X1 및 X2는 각각 독립적으로 -CR2-, -S-, 또는 -S(O)-이고,
    여기서 X1 및 X2 중 적어도 하나는 -CR2-이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화학식들 중 어느 하나로부터 선택되는, 화합물:

    I-a-1
    (상기 식에서,
    X는 -CR2-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-임),

    I-a-2
    (상기 식에서,
    X3는 -CR2-, -NRCO-, -NRCO2-, -NRCONR-, -NRSO2-, 또는 -SO2NR-임),

    I-a-3
    (상기 식에서,
    R4는 -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족임),

    I-a-4
    (상기 식에서,
    R6는 -NR2, -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 임의로 치환된 C1-6 지방족임)

    I-b-1

    I-b-2

    I-b-3
    또는 이들의 약제학적으로 허용가능한 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, L1은 C1-10 2가 직쇄 또는 분지형 포화 또는 불포화 탄화수소 사슬이며, 여기서 사슬의 1 내지 5개의 메틸렌 단위는 -Cy1-, -O-, -S-, -SO2-, -C(O)-, -C(S)-, -CR2-, -CF2-, -P(O)(R)-, 또는 -NR-로 독립적으로 선택적으로 대체되는, 화합물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, L1은 -CH2-, -CH2CH2-, -(CH2)3-, -(CH2)4-, -(CH2)5-, -CH2CH2O-, -(CH2CH2O)2-, -(CH2CH2O)3-, -CH2CH2OCH2CH2-, -CH2CH2SO2CH2CH2O-, 및 -CH2CH2OCH2CH2OCH2CH2-로부터 선택되는, 화합물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, L1은 공유 결합인, 화합물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로사이클릭 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기인, 화합물.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 수소, -OR, -CN, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기로부터 선택되는, 화합물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 메틸, -CH2CF3, -NH2, -NHMe, -NMe2, -SO2NH2, -CONH2, -CONMe2, -OCONHMe, -CO2H, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , 또는 인, 화합물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 수소, -OR, -CN, -NR2, -NR(C1-6 할로알킬), -NRCOR, -NRCO2R, -NRCONR2, -NRSO2R, -SR, -SO2NR2, 또는 C1-6 지방족, 3원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 카르보사이클릭 고리, 페닐, 8원 내지 10원 바이사이클릭 방향족 카르보사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4원 내지 8원 포화 또는 부분 불포화 모노사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 갖는 7원 내지 10원 포화 또는 부분 불포화 바이사이클릭 헤테로사이클릭 고리, 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 5원 내지 6원 모노사이클릭 헤테로방향족 고리, 및 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 8원 내지 10원 바이사이클릭 헤테로방향족 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기로부터 선택되는, 화합물.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 메틸, -CHF2, , , , , , , , , , , , , , , , , 또는 인, 화합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 표 1에 나타낸 것들로부터 선택되는, 화합물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 애쥬번트 또는 비히클을 포함하는 약제학적으로 허용가능한 조성물.
  13. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 그의 약제학적 조성물을 mTORC-매개 질환, 장애 또는 병태의 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 상기 환자에서 mTORC-매개 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 화합물과 조합하여 추가 치료제를 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
  15. 제13항에 있어서, mTORC-매개 질환, 장애, 또는 병태는 당뇨병성 신장병증, 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 신장 관련 합병증, 상염색체 우성 다낭성 신장 질환(ADPKD), 상염색체 열성 다낭성 신장 질환(ARPKD), 낭종 형성 또는 낭포 형성과 관련된 신장 질환, 국소 분절 사구체 경화증(FSGS) 및 기타 신장 경화증과 관련된 질환, 라민병증(laminopathy), 연령 관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 황반 부종, 당뇨병성 망막병증, 녹내장, 연령 관련 망막 질환, 면역 체계 노화, 호흡기 감염, 요로 감염, 심부전, 골관절염, 폐동맥 고혈압(PAH) 및 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)으로부터 선택되는, 방법.
  16. 제13항에 있어서, mTORC-매개 질환, 장애 또는 병태는 취약 X 증후군(FXS), 근위축성 측삭 경화증(ALS), 간질, 국소 피질 이형성증(FCD), 편측거대뇌증(HME), 가변 병소가 있는 가족성 초점 간질(FFEV), 측두엽 간질(TLE), 발작, 신경퇴행성 질환, 다운 증후군, 레트 증후군(RTS) 및 뇌에서 mTOR 신호전달의 활성화 또는 과다 활성화와 관련된 질환으로부터 선택되는, 방법.
  17. mTORC-매개 질환, 장애, 또는 병태의 치료를 필요로 하는 환자에서 mTORC-매개 질환, 장애, 또는 병태를 치료하기 위한 의약의 제조에 있어서의, 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적 조성물의 용도.
  18. 제17항에 있어서, 상기 화합물과 조합하여 추가 치료제를 추가로 포함하는, 용도.
  19. 제17항에 있어서, mTORC-매개 질환, 장애, 또는 병태는 당뇨병성 신장병증, 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 신장 관련 합병증, 상염색체 우성 다낭성 신장 질환(ADPKD), 상염색체 열성 다낭성 신장 질환(ARPKD), 낭종 형성 또는 낭포 형성과 관련된 신장 질환, 국소 분절 사구체 경화증(FSGS) 및 기타 신장 경화증과 관련된 질환, 라민병증, 연령 관련 황반 변성(AMD), 당뇨병성 황반 부종, 당뇨병성 망막병증, 녹내장, 연령 관련 망막 질환, 면역 체계 노화, 호흡기 감염, 요로 감염, 심부전, 골관절염, 폐동맥 고혈압(PAH) 및 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)으로부터 선택되는, 용도.
  20. 제17항에 있어서, mTORC-매개 질환, 장애 또는 병태는 취약 X 증후군(FXS), 근위축성 측삭 경화증(ALS), 간질, 국소 피질 이형성증(FCD), 편측거대뇌증(HME), 가변 병소가 있는 가족성 초점 간질(FFEV), 측두엽 간질(TLE), 발작, 신경퇴행성 질환, 다운 증후군, 레트 증후군(RTS) 및 뇌에서 mTOR 신호전달의 활성화 또는 과다 활성화와 관련된 질환으로부터 선택되는, 용도.
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