KR20230134486A - 메탄 방출을 감소시키기 위한 조성물, 반추 동물의대사 효율을 개선하기 위한 방법 및 메탄 생성 억제제 투여 - Google Patents
메탄 방출을 감소시키기 위한 조성물, 반추 동물의대사 효율을 개선하기 위한 방법 및 메탄 생성 억제제 투여 Download PDFInfo
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Abstract
메탄 배출을 감소시키고/시키거나 하나 이상의 메탄생성균을 억제하기 위한 조성물이 제공된다. 상기 조성물은 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물, 바람직하게는 브로모포름 및 알리신을 포함한다. 상기 조성물은 폴리페놀 화합물을 추가로 포함할 수 있다. 상기 조성물을 포함하는 동물 사료가 또한 기재되어 있다.
Description
본 발명은 메탄 배출을 감소시키기 위한 및/또는 하나 이상의 메탄 생성 유기체(즉, 메탄생성균(methanogen))를 억제하기 위한 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 반추 동물의 대사 효율을 개선하기 위한 방법 및 반추 동물, 특히 농업 반추 동물에 대한 메탄생성 억제제의 투여를 위한 방법에 관한 것이다.
반추 동물은 탄소와 질소를 함유하는 사료를 섭취하며, 이는 탄소-풍부 지질, 지방, 지방산, 및 탄수화물 및 질소-풍부 단백질, 핵산, 아미노산 및 뉴클레오티드를 포함하는 다양한 물질로 전환된다.
이들 물질로 전환된 사료는 동물 성장에 기여하며 다양한 가치 있는 축산물의 주요 구성분이다.
그러나 소, 양 및 염소와 같은 반추 동물은 탄소 및 질소의 비효율적인 사용자이다. 탄소로부터의 반추 동물 메탄 생산은 사료로부터의 총 에너지 섭취량의 2 내지 12%의 에너지 손실을 나타낸다.
또한, 반추 동물은 사료로부터 이들의 질소의 50% 이상을 배설할 수 있으며, 이는 주로 소변 및 분변 질소의 형태이다.
반추 동물로부터의 탄소 및 질소의 손실은 가치 있는 동물 성장으로서 손실되며 강력한 온실 가스인 메탄 및 아산화질소를 대기로 배출하고 토양에서 질소 침출에 기여하는 등 환경에 중대한 영향을 미친다. 동물 성장을 개선하고 환경으로의 탄소 및 질소 배출을 줄이기 위해 반추 동물에게 투여되는 사료 보충제는 비용이 많이 들고 최적의 경제적인 방법으로 투여하기는 어렵다.
반추 동물의 메탄 생성을 줄이는 알려진 방법 중 하나는 해조류를 사용하는 것이다. 그러나 동물에게 다량의 해조류를 먹이면 잠재적인 위험 인자가 있을 수 있다. 위험 인자 중 하나는 사료 섭취량과 성능의 감소이다. 식이에서 더 높은 수준으로 섭취된 해조류는 소고기(Roque et al., 2021) 및 젖소(Roque et al., 2019, Stefenoni et al., 2021, Muizelaar et al., 2021)의 건물 채식량(dry matter intake)을 감소시켰다. 소는 정기적으로 해조류를 거부하거나 신선한 사료와 혼합했을 때 해조류를 선택하는 것으로 관찰되었으며, 이는 해조류의 기호성이 좋지 않음을 나타낸다(Muizelaar et al., 2021). 더 낮은 사료 섭취량은 또한 젖소에게 고용량 수준의 해조류를 공급했을 때 우유 생산량이 감소하는 것으로 나타난 바와 같이 성능이 저하될 수 있다(Roque et al., 2019, Stefenoni et al., 2021, Muizelaar et al., 2021). 해조류는 또한 높은 요오드 수준을 함유하는 것으로 알려져 있으며(Makkar et al., 2016) 이의 축산물로의 이동이 연구되었다. 해조류(아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis))를 식이에 0.25% 및 0.5% 포함 수준으로 육우에게 섭취시키면 106 내지 225mg/일의 요오드가 매일 섭취된다(Roque et al., 2021). 이는 이 연구에서 0.5mg/kg DMI(NRC, 2006) 및 10kg DM 섭취량을 기준으로 약 5mg/일의 일일 권장 요오드 섭취량을 초과한다. 우유에서 요오드의 이동은 더 큰 관심사이다. Lean 등(2021)에 따르면 식이에 0.5%의 아스파라곱시스 탁시포르미스를 먹이면 요오드 수준이 3mg/L로 5배 증가하였다.
특히 상기 언급된 위험 인자가 감소되고/되거나 조성물이 해조류에 비해 개선된 기호성을 갖는, 메탄 배출을 줄이기 위한 개선된 조성물을 개발할 필요가 분명히 있다.
또한 환경으로의 메탄 배출 및 질소 배설을 줄이고 동물 성장 수준을 개선하고 가치 있는 축산물의 양을 증가시키기 위해 반추 동물의 대사 효율을 개선할 필요가 있다.
본 발명은 반추 동물의 대사 효율을 개선하는 사료 보충제를 제공함으로써 이러한 필요성을 해결한다. 사료 보충제는 환경으로의 메탄 배출 및 질소 배설을 줄이고 배출된 메탄 및 배설된 질소로 전환될 에너지를 가치 있는 축산물로 전환시켜, 반추 동물의 대사 효율을 개선한다.
반추 동물에 대한 사료 보충제 투여를 개선하여 동물 성장을 개선하고 환경으로의 탄소 및 질소 손실을 줄일 필요가 분명히 있다.
본 발명은 메탄의 배출 및 질소의 배설을 최적으로 경제적으로 줄이고 방출된 메탄 및 배설된 질소로 전환될 에너지를 가치 있는 축산물로 전환시키는 조성물 및 메탄생성 억제제 사료 보충제 투여를 제공함으로써 이러한 필요성을 해결한다.
본 발명에 따르면, 제1 측면에서, 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물을 포함하는 메탄 배출 감소를 위한 조성물이 제공된다.
일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 유기브롬 화합물이다. 바람직한 양태에서, 유기할로겐 화합물은 브로모포름(CHBr3)이다.
일부 양태에서, 유기황 화합물은 식물의 알리움(Allium) 종으로부터 유래한다. 일부 양태에서, 유기황 화합물은 알리신(alicin)(C6H10S2O); 디알릴 설파이드(C6H10S); 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 및 알릴 머캅탄(C3H6S)으로부터 선택된다. 바람직한 양태에서, 유기황 화합물은 알리신이다.
일부 양태에서, 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 1:10 내지 1:3500, 보다 바람직하게는 1:1000 내지 1:2500이다.
일부 양태에서, 조성물은 폴리페놀 화합물을 추가로 포함한다. 일부 양태에서, 폴리페놀 화합물은 바이오플라보노이드를 포함하거나 바이오플라보노이드이다. 일부 양태에서, 폴리페놀 화합물은 나린진, 네오헤스페리딘 또는 이들의 조합을 포함한다.
일부 양태에서, 조성물은 하나 이상의 메탄생성균을 억제하기 위해 사용된다. 일부 양태에서, 조성물은 동물, 보다 특히 반추 동물, 예를 들어, 소, 염소 또는 양의 대사 효율을 개선하기 위해 사용된다.
본 발명자들은 본 발명의 조성물이 유기할로겐 화합물(예를 들어, 브로모포름)이 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)과 조합될 때 높은 메탄생성균 억제율(%)을 나타내는 것으로 밝혀졌다.
특히, 유기할로겐 및 유기황 화합물이 상승적으로 작용하여 메탄 생성을 감소시킬 수 있는 것으로 나타났다. 상승작용적 조합은 개별 성분의 합보다 더 큰 효과를 제공한다. 본 발명자들은 유기할로겐 화합물(예를 들어, 브로모포름) 및 유기황 및 폴리페놀 화합물을 포함하는 분말 혼합물(예를 들어, NXRH214 분말)을 포함하는 조성물이 또한 메탄생성균의 효율적인 억제를 야기하는 것으로 추가로 밝혀졌다.
또한 본 발명에 따르면, 제2 측면에서, 본 발명의 또는 달리 본원에 개시된 바와 같은 조성물을 포함하는 동물 사료이다.
또한 본 발명에 따르면, 제3 측면에서, 메탄 방출을 감소시키고/시키거나 메탄생성균을 억제하고/하거나 동물의 대사 효율을 개선하기 위한, 본 발명의 조성물 또는 본 발명의 동물 사료의 용도이다.
또한 본 발명에 따르면, 제4 측면에서, 본 발명의 조성물 또는 동물 사료를 동물, 보다 특히 반추 동물에게 투여함을 포함하여, 메탄 배출을 감소시키는 방법이다. 일부 예에서, 반추 동물은 소, 염소 또는 양이다.
또한 본 발명에 따르면, 제5 측면에서, 본 발명의 조성물 또는 동물 사료를 동물, 보다 특히 반추 동물에게 투여함을 포함하여, 하나 이상의 메탄생성균을 억제하는 방법이다. 일부 예에서, 반추 동물은 소, 염소 또는 양이다.
또한 본 발명에 따르면, 제6 측면에서, 본 발명의 조성물 또는 동물 사료를 동물, 특히 반추 동물에게 투여함을 포함하여, 동물의 대사 효율을 개선하는 방법이다. 일부 예에서, 반추 동물은 소, 염소 또는 양이다.
또한 본원에는 하나 이상의 메탄생성균을 억제하는 조성물이 개시되어 있으며, 상기 조성물은 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물을 포함한다. 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물은 본원에 달리 기재된 바와 같다.
또한 본원에는 동물의 대사 효율을 개선하기 위한 조성물이 개시되어 있으며, 상기 조성물은 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물을 포함한다. 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물은 본원에 달리 기재된 바와 같다.
또한 본원에는 반추 동물에게 적어도 한 종류의 메탄생성 억제제의 유효량을 투여하는 단계를 포함하여 반추 동물에서 배설된 질소를 감소시키고/시키거나 배출된 메탄을 감소시키고/시키거나 질소-풍부 및 탄소-풍부 물질을 증가시키는 방법이 개시되어 있다. 한 양태에서, 상기 방법은 본원에 개시된 바와 같은 임의의 조성물을 상기 반추 동물에게 투여함을 포함한다.
한 양태에서, 메탄생성 억제제는, 유기할로겐 화합물; 유기할로겐-풍부 해양 거대조류(marine macroalgae); 유기황 화합물; 유기황-풍부 식물; 폴리페놀 화합물; 및 폴리페놀-풍부 식물을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
한 양태에서, 유기할로겐 화합물은, CH3Cl; CH3Br; CH3I; CH2Cl2; CH2Br2; CH2I2; CHCl3; CHBr3; CHI3; CCl4; CBr4; CH2ClBr; CH2ClI; CH2BrI; CHBr2Cl; CHBrI2; CHBrClI; CHBr2I; CHBrCl2; CH3CH2Br; CH3CH2I; CH3CH2CH2I; CH3(CH2)3I; CH3(CH2)4Br; CH3(CH2)4I; (CH3)2CHI; CH3CH2CH(CH3)I; (CH3)2CHCH2I; BrCH2CH2Br; ClCH=CCl2; 및 CH3CH2CH2CH2I를 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
한 양태에서, 유기할로겐-풍부 해양 거대조류는, 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)를 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
한 양태에서, 유기황 화합물은, 유기황 2차 대사산물; 알리신(C6H10S2O); 디알릴 설파이드(C6H10S); 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 및 알릴 머캅탄(C3H6S)을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
한 양태에서, 유기황-풍부 식물은, 알리움 사티붐(Allium sativum); 알리움 암펠로프라숨(Allium ampeloprasum); 및 알리움 세파(Allium cepa)를 포함하는 그룹으로부터 선택된 알리움 종(Allium species)이다.
한 양태에서, 폴리페놀 화합물은, 플라보노이드; 바이오플라보노이드; 비-바이오플라보노이드를 포함하는 그룹으로부터 선택된다. 적어도 하나의 폴리페놀 화합물은, 예를 들어, 적어도 하나의 바이오플라보노이드; 안토크산틴; 플라본; 플라보놀; 플라바논; 플라바노놀; 플라반; 안토시아니딘; 이소플라반; 네오플라반 안토크산틴; 이소플라본; 프로안토시아니딘; 페놀산; 하이드록시신남산; 쿠마린; 스틸베노이드; 안트라퀴논; 리그난; 리그닌; 탄닌; 폴리페놀 단백질; 카테킨; 루틴; 아카세틴; 제니스테인; 캠페롤; 갈로카테킨; 카테킨 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 퀘르세틴; 알로카테킨; 갈로카테신 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 에피갈로카테신 갈레이트; 캠페롤; 퀘르세틴; 나린진; 네오헤스페리딘; 에리오시트린; 이소나린진; 나린제닌; 헤스페리딘; 로이폴린; 디오스민; 디디민; 헤스페레틴; 폰시린; 에피카테킨; 갈로 카테킨; 에피갈로 카테킨; 쿠마르산; 신남산; 갈산; 엘라그산; 프로토카테추산; 클로로겐산; 카페산; 페룰산; 푸니칼라진; 및 푸니칼린을 포함할 수 있다.
한 양태에서, 폴리페놀-풍부 식물은, 알리움 종(Allium species); 브라시카 종(Brassica species); 카멜리아 종(Camelia species); 캅시쿰 종(Capsicum species); 시트러스 종(Citrus species); 시트러스 오란티움(Citrus aurantium); 쿠쿠미스 종(Cucumis species); 말루스 종(Malus species); 무사 종(Musa species); 파세올루스 종(Phaseolus species); 프루누스 종(Prunus species); 푸니카 종(Punica species); 피루스 종(Pyrus species); 솔라눔 종(Solanum species); 및 박시니움 종(Vaccinium species)을 포함하는 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 반추 동물에서 배설된 질소 및 배출된 탄소를 감소시키고 가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 물질을 증가시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본원에 기재된 사료 보충제 또는 본원에 기술된 사료를 상기 동물에게 투여하는 단계를 포함한다.
본원에는 또한 상기 반추 동물에게 적어도 한 종류의 메탄생성 억제제의 유효량을 단계적으로 투여함을 포함하여 반추 동물에서 배설된 질소를 감소시키고/시키거나 배출된 메탄을 감소시키고/시키거나 질소-풍부 및 탄소-풍부 물질을 증가시키는 방법이 개시되어 있다. 한 양태에서, 상기 방법은 본원에 개시된 바와 같은 조성물을 상기 반추동물에게 투여함을 포함한다.
한 양태에서, 단계적 투여는, 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택된 상기 반추 동물의 중량의 백분율인 적어도 하나의 용량의 메탄생성 억제제를 갖는다.
한 양태에서, 단계적 투여는, 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택된 상기 반추 동물의 사료 중량의 백분율인 적어도 하나의 용량의 메탄생성 억제제를 갖는다.
한 양태에서, 단계적 투여는, 1분; 1시간; 1일; 2일; 3일; 4일; 5일; 6일; 7일; 10일; 2주; 3주; 4주; 6주; 2개월; 3개월; 4개월; 6개월; 9개월; 및 12개월을 포함하는 그룹으로부터 선택된 연속 용량들 사이에 적어도 하나의 간격을 갖는다.
도 1 및 도 2는 메타노코커스 마리팔루디스(Methanococcus maripaludis) 배양액으로 배양한 후 본 발명의 다양한 조성물의 메탄 억제율(%)을 보여준다.
본 발명에 따르면, 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물을 포함하는 메탄 배출 감소를 위한 조성물이 제공된다. 상기 조성물은 또한 하나 이상의 메탄생성균을 억제하기 위해 사용될 수 있다. 본원에 언급된 임의의 "조성물"은 또한 "동물 사료 보충제"로 지칭될 수 있다.
일부 양태에서, 하나 이상의 메탄생성균은 메타노박테리움(Methanobacterium), 메타노사르시나(Methanosarcina), 메타노브레비박터(Methanobrevibacter), 메타노사르시나(Methanosarcina), 메타노쿨레우스(Methanoculleus), 메타노스파에라(Methanosphaera), 메타노코르푸스쿨룸(Methanocorpusculum), 메타노폴리스(Methanofollis), 메타노제니움(Methanogenium), 메타노마이크로븀(Methanomicrobium), 메타노피루스(Methanopyrus), 메타노레귤라(Methanoregula), 메타나사에타(Methanasaeta), 메탄써모박터(Methanthermobacter) 또는 Methanococcus(메타노코커스) 속을 갖는다. 일부 양태에서, 하나 이상의 메탄생성균은 메타노박테리움 포르미시쿰(Methanobacterium formicicum), 메타노박테리움 브리안티(Methanobacterium bryantii), 메타노브레비박터 루미난티움(Methanobrevibacter ruminantium), 메타노브레비박터 밀레라에(Methanobrevibacter millerae), 메타노브레비박터 올레예(Methanobrevibacter olleyae), 메타노마이크로븀 모빌(Methanomicrobium mobile), 메타노쿨레우스 올렌탕이(Methanoculleus olentangyi), 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노브레비박터 보비스코리아니(Methanobrevibacter boviskoreani), 메타노박테리움 베이징겐세(Methanobacterium beijingense), 메타노쿨레우스 마리스니그리(Methanoculleus marisnigri), 메타노쿨레우스 부르겐시스(Methanoculleus bourgensis), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei), 메타노브레비박터 고트샬키(Methanobrevibacter gottschalkii), 메타노브레비박터 타우에리(Methanobrevibacter thaueri), 메타노브레비박터 스미스이(Methanobrevibacter smithii), 메타노스파에라 슈타트마나에(Methanosphaera stadtmanae), 메타노브레비박터 워세이(Methanobrevibacter woesei), 메타노브레비박터 월리니(Methanobrevibacter wolinii)로부터 선택된다. 일부 예에서, 하나 이상의 메탄생성균은 메타노코커스 마리팔루디스(Methanococcus maripaludis)이다.
이하, 본 발명은 첨부된 설명을 참조하여 본 발명의 바람직한 양태에 따라 기재된다. 그러나, 본 발명의 바람직한 양태에 관한 설명을 제한하는 것은 본 발명의 논의를 용이하게 하기 위한 것일 뿐임을 이해해야 하며 당업계의 숙련가는 청구범위의 범주를 벗어나지 않으면서도 다양한 변형을 고안할 수 있을 것으로 보인다.
- 유기할로겐 화합물
본 발명의 조성물은 유기할로겐 화합물(즉, 적어도 하나의 유기할로겐 화합물)을 포함한다.
유기할로겐 화합물은 할로겐을 함유하는 유기 화합물이다. 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 C1-C6 알킬 할로겐 화합물이다. 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 염소, 브롬, 요오드, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 CH3Cl; CH3Br; CH3I; CH2Cl2; CH2Br2; CH2I2; CHCl3; CHBr3; CHI3; CCl4; CBr4; CH2ClBr; CH2ClI; CH2BrI; CHBr2Cl; CHBrI2; CHBrClI; CHBr2I; CHBrCl2; CH3CH2Br; CH3CH2I; CH3CH2CH2I; CH3(CH2)3I; CH3(CH2)4Br; CH3(CH2)4I; (CH3)2CHI; CH3CH2CH(CH3)I; (CH3)2CHCH2I; BrCH2CH2Br; ClCH=CCl2; 및 CH3CH2CH2CH2I를 포함한다. 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 트리할로메탄이다. 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은 유기브롬 화합물이고, 보다 바람직하게는 상기 유기할로겐 화합물은 브로모포름(CHBr3)이다.
유기할로겐 화합물의 생물학적 공급원은 유기할로겐-풍부 해양 거대조류이다. 예를 들어, 유기할로겐-풍부 해양 거대조류는, 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 1종의 해양 거대조류를 포함한다. 따라서, 일부 양태에서, 유기할로겐 화합물은, 예를 들어, 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 유기할로겐-풍부 해양 미세조류(marine microalgae)로부터 유래된다.
다른 양태에서, 유기할로겐 화합물은 박테리아, 진균 및 시아노박테리아에 의해 생성된다. 예를 들어, 박테리아는 스트렙토마이세스 종(Streptomyces sp.) 및 조벨리아 갈락타니보란스(Zobellia galactanivorans)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종의 박테리아를 포함한다. 예를 들어, 진균은 피리쿨라리아 오리자에(Pyricularia oryzae), 쿠르불라리아 이나에쿠알리스(Curvularia inaequalis), 피레노포라 트리티시-레펜티스(Pyrenophora tritici-repentis) 및 엠벨리시아 디디모스포라(Embellisia didymospora)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종의 진균을 포함한다. 예를 들어, 시아노박테리아는 트리코데스뮴 에리트라에움(Trichodesmium erythraeum), 시네코코커스 종(Synechococcus sp.) 및 아카리오클로리스 마리나(Acaryochloris marina)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종의 시아노박테리아를 포함한다.
다른 양태에서, 유기할로겐은 합성적이며, 즉, 유기할로겐은 화학적으로 합성된다. 다른 양태에서, 유기할로겐은 재조합 효모에 의해 생산된다.
일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물의 농도는 100nM 초과, 또는 110nM 초과, 또는 120nM 초과, 또는 130nM 초과, 또는 140nM 초과, 또는 150 nM 초과이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물의 농도는 10000nM 미만 또는 1000nM 미만 또는 500nM 미만 또는 200nM 미만, 또는 175nM 미만, 또는 160nM 미만, 또는 150nM 미만, 또는 140nM 미만, 또는 130nM 미만이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물의 농도는 100nM 내지 10000nM, 100nM 내지 1000nM, 100nM 내지 500nM, 100nM 내지 300nM, 100nM 내지 200nM, 또는 110nM 내지 175nM이다. 일부 예에서, 유기할로겐 화합물은 유기브롬 화합물, 바람직하게는 브로모포름이다.
- 유기황 화합물
본 발명의 조성물은 유기황 화합물(즉, 적어도 하나의 유기황 화합물)을 포함한다.
유기황 화합물은 황을 함유하는 유기 화합물이다. 특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 티오에테르, 티오에스테르, 티오아세탈, 티올, 디설파이드, 폴리설파이드, 설폭사이드, 설폰, 티오설피네이트, 설프이미드, 설폭스이미드, 설폰디이민, 티오케톤, 티오알데히드, 설핀, 설펜, 티오카복실산(디티오카복실산 포함), 설폰산, 설핀산, 설펜산, 설폰산 에스테르, 설핀산 에스테르, 설펜산 에스테르, 설폰산 아미드, 설핀산 아미드, 설펜산 아미드, 설포늄 화합물, 옥소설포늄 화합물, 설포늄 일라이드, 옥소설포늄 일라이드, 티오카보닐 일라이드, 설퍼란 및 퍼설퍼란으로부터 독립적으로 선택될 수 있다. 특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 티오에스테르, 설폭사이드, 티오에테르, 디설파이드, 폴리설파이드(트리설파이드 포함) 및 티올로부터 독립적으로 선택된다. 특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 티오에스테르, 설폭사이드, 티오에테르, 디설파이드 및 폴리설파이드(트리설파이드 포함)로부터 독립적으로 선택된다. 특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 디설파이드 및 폴리설파이드(트리설파이드 포함)로부터 독립적으로 선택된다. 특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 디설파이드이다.
일부 양태에서, 유기황 화합물은 식물의 알리움(Allium) 종으로부터 유래한다. 일부 양태에서, 유기황 화합물은 디설파이드 화합물, 보다 구체적으로는 디알릴 디설파이드 화합물이다.
특정 양태에서, 각각의 유기황 화합물은 알리신, 알리신, 알릴프로필 디설파이드, 디알릴 트리설파이드, s-알릴시스테인, 비닐디티인(3-비닐-4H-1,2-디티인 및 2-비닐-4H-1,3-디티인) 및 디알릴 디설파이드로부터 독립적으로 선택된다.
일부 양태에서, 유기황 화합물은 알리신(C6H10S2O); 디알릴 설파이드(C6H10S); 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 및 알릴 머캅탄(C3H6S)으로부터 선택된다. 특정 양태에서, 적어도 하나의 유기황 화합물은 알리신이거나 알리신을 포함한다.
알리신은 화학식 C6H10OS2 및 하기 구조를 갖는 유기황 화합물이다.
알리신과 같은 유기황 화합물은, 예를 들어, 마늘 또는 다른 알리움(Allium) 종으로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 마늘(알리움 사티붐)과 같은 알리움 종의 추출물로부터 수득될 수 있다. 용어 추출물은 수성 추출물, 비수성 추출물, 알코올성 추출물, 농축물, 오일, 침연(macerations), 분말, 과립 및 이들 중 둘 이상의 조합을 포함한다. 예를 들어, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 생마늘, 건조 마늘 또는 이들의 조합으로부터 수득될 수 있다. 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은, 예를 들어, 알리움 사티붐, 알리움 우르시눔(Allium ursinum), 일리움 피스툴로숨(Allium fistulosum), 알리움 세파 및 알리움 트리코쿰(Allium tricoccum)과 같이 현재 알려져 있거나 나중에 밝혀진 알리움의 아종 및 변종 중 어느 것으로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 독립적으로 아종 오피오스코로돈(ophioscorodon)(하드넥 마늘(hard neck garlic)) 및 사티붐(소프트넥 마늘(soft neck garlic))의 마늘로부터 유래될 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 포르셀라인 마늘(porcelain garlic), 로캄볼 마늘(rocambole garlic), 퍼플 스트립 마늘(purple stripe garlic), 마블드 퍼플 스트립 마늘(marbled purple stripe garlic), 글레이즈드 퍼플 스트립 마늘(glazed purple stripe garlic), 아티초크 마늘(artichoke garlic), 실버스킨 마늘(silverskin garlic), 아시아 마늘(asiatic garlic), 터번 마늘(turban garlic) 및 크리올 마늘(Creole garlic)로부터 독립적으로 유래될 수 있다. 특히, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 알리움 사티붐으로부터 수득될 수 있다.
유기황 화합물(예를 들어, 알리신)이 유래될 수 있는 알리움(Allium)은, 예를 들어, 처리되거나 가공되었을 수 있다. 예를 들어, 알리움은 "숙성" 또는 "흑색"(예를 들어 숙성 또는 흑마늘)일 수 있으며, 알리움을 제어된 조건에서 보관하고 특정 온도, 습도 및 용매하에서 예를 들어 며칠 또는 몇 주에 걸쳐 가열하여 마이야르(Maillard) 또는 갈변(browning) 반응을 겪은 후 정향의 색이 어두워지게 함으로써 수득된다. 예를 들어, 알리움은 "건조" 또는 "탈수"될 수 있으며, 이는 신선하거나 숙성되지 않은 마늘을 30℃ 내지 120℃ 사이의 온도로 가열하고 이의 구성분을 상이한 화합물로 변형시키거나 전환시키면서 또는 그렇게 하지 않으면서 약 3 내지 10%의 수분 함량을 달성함으로써 수득된다. 예를 들어, 알리움은 "신선"하거나 "숙성되지 않을" 수 있으며(예를 들어 신선한 또는 숙성되지 않은 마늘), 이의 구성분을 상이한 화합물로 변형하거나 전환하기 위해 의도적으로 특별한 처리 또는 가공을 거치지 않고 수득된다. 신선하거나 숙성되지 않은 알리움은, 예를 들어, 냄새를 제거(탈취)하기 위해 처리 또는 가공되었을 수 있다(예를 들어 탈취된 마늘 추출물). 일반적으로 캡슐화 또는 코팅 공정을 적용하여 냄새를 가리거나 줄일 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 녹차, 파슬리, 바질, 시금치 등과 같은 맛-차폐 성분이 조성물의 냄새를 가리거나 줄이기 위해 첨가될 수 있다.
유기황 화합물(예를 들어, 알리신)은 본원에 기재된 조성물에 혼입되기 전에 단리 및/또는 정제될 수 있거나 그렇지 않을 수 있다. 이와 같이, 특정 양태에서, 본원에 기재된 조성물은 생마늘, 건조 마늘 및/또는 마늘 추출물을 포함할 수 있다. 다른 양태에서, 유기황 화합물(예를 들어 알리신)은 화학적으로 합성된다. 특정 양태에서, 알리신은 알리나제(allinase)의 천연 공급원을 처리하여 알리나제를 방출하고, 처리된 알리나제 공급원을 알리인과 접촉시켜 알리인을 효소적으로 알리신으로 전환시키고 임의로 알리신을 추출함으로써 수득될 수 있다. 적합한 방법은 예를 들어 제WO 03/004668호에 추가로 기재되어 있으며, 이의 내용은 본원에 참고로 포함된다.
다른 양태에서, 유기황 화합물, 예를 들어, 알리신은 합성적이며, 즉 화학적으로 합성될 수 있다.
일부 양태에서, 조성물 중 유기황 화합물의 농도는 10μM 초과, 또는 100μM 초과, 또는 150μM 초과, 또는 175μM 초과, 또는 200μM 초과, 또는 225μM 초과, 또는 250μM 초과, 또는 275μM 초과이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기황 화합물의 농도는 350μM 미만, 또는 325μM 미만, 또는 300μM 미만, 또는 275μM 미만, 또는 250μM 미만, 또는 225μM 미만이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기황 화합물의 농도는 10μM 내지 350μM이고, 100μM 내지 350μM이며, 150μM 내지 350μM이고, 일부 예에서, 200 내지 300μM이다.
- 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율
일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 바람직하게는 1:10 내지 1:3500이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 1:50 내지 1:3500, 또는 1:100 내지 1:3500, 또는 1:500 내지 1:3500, 또는 1:750 내지 1:3500, 또는 1:1000 내지 1:3500, 또는 1:1500 내지 1:3500, 또는 1:2000 내지 1:3500이다. 일부 양태에서, 조성물 중 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 1:500 내지 1:3000, 또는 1:500 내지 1:2750, 또는 1:500 내지 1:2500, 또는 1:500 내지 1:2000, 또는 1:500 내지 1:1500이다. 바람직한 양태에서, 조성물 중의 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 1:750 내지 1:3000, 또는 1:1000 내지 1:2500이다.
일부 예에서, 유기할로겐은 브로모포름과 같은 유기브롬 화합물이고, 유기황 화합물은 알리신과 같은 디설파이드이다.
- 폴리페놀 화합물
본 발명의 조성물은 폴리페놀 화합물(즉, 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들))을 추가로 포함할 수 있다.
용어 페놀은 방향족 탄화수소 그룹에 직접 결합된 하이드록실 그룹(-OH)을 포함하는 화합물을 지칭한다. 용어 폴리페놀 화합물은 하나 이상의 페놀 그룹을 포함하는 화합물을 지칭한다. 본원에 기재된 폴리페놀 화합물은 바이오플라보노이드, 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 상기 적어도 하나의 폴리페놀 화합물은, 예를 들어, 적어도 하나의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다.
용어 바이오플라보노이드는 식물 및 진균 2차 대사산물의 한 부류를 지칭하며 두 개의 페닐 환(A 및 B) 및 헤테로사이클릭 환(C)으로 구성된 15-탄소 골격의 일반적인 구조를 가지며 때로는 C6-C3-C6으로 약칭된다. 따라서 바이오플라보노이드는 폴리페놀이다. 용어 바이오플라보노이드는 안토크산틴(플라본 및 플라보놀 포함), 플라바논, 플라바노놀, 플라반 및 안토시아니딘을 포함한다. 용어 바이오플라보노이드는 또한 플라본 백본(2-페닐-1,4-벤조피론), 이소플라반 백본(3-페닐크로멘-4-온) 또는 네오플라반 백본(4-페닐쿠마린)을 갖는 화합물을 포함한다. 용어 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물은 본원에 기재된 바와 같은 용어 바이오플라보노이드의 정의하에 속하지 않는 당업계에 공지된 다른 부류의 폴리페놀 화합물을 지칭한다. 용어 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물은 6개 이상의 탄소, 7개 이상의 탄소, 8개 이상의 탄소, 9개 이상의 탄소, 10개 이상의 탄소, 13개 이상의 탄소, 14개 이상의 탄소, 16개 이상의 탄소, 18개 이상의 탄소 또는 30개 이상의 탄소를 포함하는 폴리페놀 화합물을 포함한다. 용어 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물은 폴리페놀산(C6-C1 구조), 스틸베노이드(C6-C2-C6 구조), 안트라퀴논(C6-C2-C6 구조) 및 리그난((C6-C3)2 구조)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 양태에서, 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물은 리그닌, 카테콜 멜라닌, 플라볼란, 폴리페놀 단백질 및 폴리페놀을 포함하지만 이에 제한되지 않는 식물 중합체이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드는 각각 독립적으로 안토크산틴(플라본 및 플라보놀 포함), 플라바논(플라바논 글리코시드 포함), 플라바노놀, 플라반, 이소플라본, 안토시아니딘 및 프로안토시아니딘으로부터 선택된다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드의 각각은 안토크산틴 및 플라바논(플라바논 글리코시드 포함)으로부터 독립적으로 선택된다. 특정 양태에서, 모든 바이오플라보노이드는 안토크산틴 및/또는 플라바논이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 독립적으로 플라본 또는 플라바논이다. 특정 양태에서, 모든 바이오플라보노이드는 플라본 및/또는 플라바논이다. 플라본 및 플라바논은, 예를 들어, 각각 독립적으로 플라본 글리코시드 및 플라바논 글리코시드일 수 있다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 플라바논이다. 특정 양태에서, 모든 바이오플라보노이드(들)는 플라바논이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 플라바논 글리코시드이다. 특정 양태에서, 모든 바이오플라보노이드(들)는 플라바논 글리코시드이다. 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는, 예를 들어, 나린진, 네오헤스페리딘, 에리오시트린, 이소나린진, 나린제닌, 헤스페리딘, 로이폴린, 디오스민, 디디민, 헤스페레틴, 폰시린, 카테킨, 루틴, 아카세틴, 제니스테인, 캠페롤, 퀘르세틴, 에피카테킨, 갈로카테킨, 에피갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨 갈레이트 및 갈로카테킨 갈레이트로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 나린진 및 네오헤스페리딘을 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 나린진 및 네오헤스페리딘의 조합이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 카테킨, 루틴, 아카세틴, 제니스테인, 캠페롤, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트 및 퀘르세틴 중 하나 이상을 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 카테킨, 루틴, 아카세틴, 제니스테인 및 캠페롤 중 하나 이상을 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 카테킨, 루틴, 아카세틴, 제니스테인 및 캠페롤의 조합이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 갈로카테신 갈레이트, 에피갈로아카테신 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴 중 하나 이상을 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴 중 하나 이상을 포함한다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 갈로카테신 갈레이트, 에피갈로카테신 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴의 조합이다. 특정 양태에서, 하나 이상의 바이오플라보노이드(들)는 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴의 조합이다.
일부 양태에서, 폴리페놀은 하나 이상의 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물을 포함한다. 일부 양태에서, 하나 이상의 비-바이오플라보노이드 페놀 화합물은 각각 독립적으로 페놀산, 스틸베노이드, 안트라퀴논, 리그난, 리그닌, 탄닌, 폴리페놀 단백질 및 폴리페놀로부터 선택된다. 특정 양태에서, 하나 이상의 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물 각각은 탄닌 및 폴리페놀로부터 독립적으로 선택된다. 특정 양태에서, 모든 비-바이오플라보노이드 폴리페놀 화합물은 탄닌 및/또는 폴리페놀이다.
본원에 기재된 조성물은 하나 이상의 폴리페놀 화합물을 포함한다. 예를 들어, 조성물은 2개 이상의 폴리페놀 화합물 또는 3개 이상의 폴리페놀 화합물 또는 4개 이상의 폴리페놀 화합물, 또는 5개 이상 또는 6개 이상, 또는 7개 이상 또는 8개 이상 또는 9개 이상 또는 10개 이상의 폴리페놀 화합물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 폴리페놀 화합물을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 조성물은 하나 이상의 바이오플라보노이드를 포함한다. 예를 들어, 조성물은 2개 이상의 바이오플라보노이드, 또는 3개 이상의 바이오플라보노이드, 또는 4개 이상의 바이오플라보노이드, 또는 5개 이상 또는 6개 이상, 또는 7개 이상, 8개 이상, 또는 9개 이상 또는 10개 이상의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 나린진 및 네오헤스페리딘일 수 있는 2개의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 조성물은 카테킨, 루틴, 아카세틴, 제니스테인 및 캠페롤일 수 있는 5개의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 대안적인 양태에서, 조성물은 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴일 수 있는 7개의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 대안적인 양태에서, 조성물은 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피갈로카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 갈로카테신 갈레이트, 에피갈로카테신 갈레이트, 캠페롤 및 퀘르세틴일 수 있는 9개의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다.
하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 예를 들어 식물(예를 들어, 과일 또는 채소)의 일부로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 플라보놀은 토마토, 콩, 아몬드 및/또는 순무로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 플라반-3-올은 복숭아, 자두, 딸기 및/또는 녹차로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 플라본은 수박 및/또는 후추로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 플라보논은 시트러스 종 과일로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 안토시아니딘은 블루베리, 바나나, 딸기, 크랜베리 및/또는 자두로부터 수득될 수 있다. 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 예를 들어 오렌지, 레몬, 자몽, 포멜로 또는 라임과 같은 시트러스 종 과일로부터 수득될 수 있다. 특히, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 오렌지로부터 수득될 수 있다. 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 예를 들어 석류(Punica granatum) 또는 소코트라 석류(푸니카 프로토푸니카(Punica protopunica))와 같은 푸니카 종(Punica species) 과일로부터 수득될 수 있다. 특히, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 석류(푸니카 그라나툼(Punica granatum))로부터 수득될 수 있다.
하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어, 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 예를 들어, 카멜리아 종 식물의 일부(예를 들어 잎), 예를 들어 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis), 카멜리아 탈리엔시스(Camellia taliensis), 카멜리아 올레이페라(Camellia oleifera), 카멜리아 아시밀리스(Camellia assimilis), 카멜리아 아잘레아(Camellia azalea), 카멜리아 브레비스틸라(Camellia brevistyla), 카멜리아 카우다타(Camellia caudata), 카멜리아 체키안골레오사(Camelllia chekiangoleosa), 카멜리아 크리산타(Camellia chrysantha), 카멜리아 크리산토이데스(Camellia chrysanthoides), 카멜리아 콘나타(Camellia connata), 카멜리아 크랍넬리아나(Camellia crapnelliana), 카멜리아 쿠스피다타(Camellia cuspidata), 카멜리아 유플레비아(Camellia euphlebia), 카멜리아 유리오이데스(Camellia euryoides), 카멜리아 플라바(Camellia flava), 카멜리아 플레우리이(Camellia fleuryi), 카멜리아 포레스티이(Camellia forrestii), 카멜리아 프라테르나(Camellia fraterna), 카멜리아 푸르푸라세아(Camellia furfuracea), 카멜리아 길베르티이(Camellia gilbertii), 카멜리아 그란타미아나(Camellia granthamiana), 카멜리아 그리시이(Camellis grijsii), 카멜리아 헹추넨시스(Camellia hengchunensis), 카멜리아 히에말리스(Camellia hiemalis), 카멜리아 홍콩엔시스(Camellia hongkongensis), 카멜리아 이라와디엔시스(Camellia irrawadiensis), 카멜리아 자포니카(Camellia japonica), 카멜리아 키시이(Camellia kissii), 카멜리아 루트추엔시스(Caemllia lutchuensis), 카멜리아 미야기이(Camellia miyagii), 카멜리아 니티디시마(Camellia nitidissima), 카멜리아 노코엔시스(Camellis nokoensis), 카멜리아 파르비플로라(Camellia parviflora), 카멜리아 피타르디이(Camellia pitardii), 카멜리아 플레우로카르파(Camellia pleurocarpa), 카멜리아 폴리오돈타(Camellia polyodonta), 카멜리아 푸부페탈라(Camellia pubupetala), 카멜리아 레티쿨라타(Camellia reticulata), 카멜리아 로시플로라(Camellia rosiflora), 카멜리아 루스티카나(Camellia rusticana), 카멜리아 살리시폴리아(Camellia salicifolia), 카멜리아 살루에넨시스(Camellia saluenensis), 카멜리아 사산카(Camellia sasanqua), 카멜리아 세미세라타(Camellia semiserrata), 카멜리아 트라스노코엔시스(Camellis trasnokoensis), 카멜리아 트사이(Camellia tsaii), 카멜리아 퉁히넨시스(Camellia tunghinensis), 카멜리아 베트남엔시스(Camellia vietnamensis), 카멜리아 x 윌리암시이(Camellia x williamsii) 및 카멜리아 유나넨시스(Camellia yunnanensis)로부터 수득될 수 있다. 특히, 하나 이상의 바이오플라보노이드는 카멜리아 시넨시스(Camellis sinensis)(차 식물)로부터 수득될 수 있다. 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis)의 임의의 아종 또는 변종이 사용될 수 있다. 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis)의 일부(예를 들어, 잎)는 처리되지 않을 수 있거나, 예를 들어, 스팀화, 위축(withering), 압연, 산화, 발효 및/또는 건조에 의해 처리될 수 있다. 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 예를 들어, 녹차(카멜리아 시넨시스) 잎으로부터 수득될 수 있다.
예를 들어, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 시트러스 종 과일, 푸니카 종 과일, 또는 카멜리아 종 식물의 일부의 추출물로부터 수득될 수 있다. 용어 추출물은 수성 추출물, 비수성 추출물, 알코올성 추출물, 농축물, 오일, 침연, 분말, 과립 및 이들 중 둘 이상의 조합을 포함한다. 예를 들어, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 건조된 시트러스 과일, 건조된 푸니카 과일 또는 건조된 카멜리아 식물 부분(예를 들어, 잎)으로부터 수득될 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는, 생 시트러스 과일, 생 푸니카 과일 또는 생 카멜리아 식물 부분(예를 들어, 잎)으로부터 수득될 수 있다.
하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 본원에 기재된 조성물에 혼입되기 전에 단리 및/또는 정제될 수 있거나 그렇지 않을 수 있다. 이와 같이, 특정 양태에서, 본원에 기재된 조성물은 생 시트러스 과일, 건조 시트러스 과일 및/또는 시트러스 과일 추출물, 또는 생 푸니카 과일, 건조 푸니카 과일 및/또는 푸니카 과일 추출물, 또는 생 카멜리아 식물, 건조 카멜리아 식물 및/또는 카멜리아 식물 추출물을 포함할 수 있다.
다른 양태에서, 하나 이상의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 하나 이상의 바이오플라보노이드는 각각 독립적으로 화학적으로 합성될 수 있다.
특정 양태에서, 본원에 기재된 조성물은 2개의 폴리페놀 화합물, 예를 들어 2개의 바이오플라보노이드를 포함한다. 제1 폴리페놀 화합물 대 제2 폴리페놀 화합물, 예를 들어 제1 바이오플라보노이드 대 제2 바이오플라보노이드의 비율은, 예를 들어 약 0.5:5 내지 약 3:1의 범위일 수 있다. 예를 들어, 제1 폴리페놀 화합물 대 제2 폴리페놀 화합물, 예를 들어 제1 바이오플라보노이드 대 제2 바이오플라보노이드의 비율은 약 0.5:5 내지 약 2.5:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 2:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 1.5:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 1:1의 범위일 수 있다. 예를 들어, 제1 폴리페놀 화합물 대 제2 폴리페놀 화합물, 예를 들어 제1 바이오플라보노이드 대 제2 바이오플라보노이드의 비율은 약 1:5 내지 약 3:1, 또는 약 1.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 2:5 내지 약 3:1, 또는 약 2.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 3:5 내지 약 3:1, 또는 약 3.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 4:5 내지 약 3:1, 또는 약 4.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 5:5 내지 약 3:1의 범위일 수 있다. 비율은 바람직하게는 2:1이다.
특정 양태에서, 본원에 기재된 조성물은 나린진 및 네오헤스페리딘을 포함한다. 특정 양태에서, 적어도 하나의 폴리페놀은 나린진, 네오헤스페리딘 또는 이들의 조합의 주요 부분을 포함하고, 여기서 주요 부분은 폴리페놀 화합물의 총 중량의 적어도 50wt.%, 또는 적어도 60wt.%, 또는 적어도 70wt.%, 또는 적어도 80wt.%, 또는 적어도 90wt.%를 지칭한다. 나린진 대 네오헤스페리딘의 비율은, 예를 들어, 약 0.5:5 내지 약 3:1의 범위일 수 있다. 예를 들어, 나린진 대 네오헤스페리딘의 비율은 약 0.5:5 내지 약 2.5:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 2:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 1.5:1, 또는 약 0.5:5 내지 약 1:1의 범위일 수 있다. 예를 들어, 나린진 대 네오헤스페리딘의 비율은 약 1:5 내지 약 3:1, 또는 약 1.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 2:5 내지 약 3:1, 또는 약 2.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 3:5 내지 약 3:1, 또는 약 3.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 4:5 내지 약 3:1, 또는 약 4.5:5 내지 약 3:1, 또는 약 5:5 내지 약 3:1의 범위일 수 있다. 비율은 바람직하게는 2:1이다.
특정 양태에서, 총 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 16:1 내지 약 1:30의 범위이다. 예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 15:1 내지 약 1:30, 또는 약 14:1 내지 약 1:30, 또는 약 13:1 내지 약 1:30, 또는 약 12:1 내지 약 1:30, 또는 약 10:1 내지 약 1:30, 또는 약 16:1 내지 약 1:16의 범위일 수 있다. 예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율 (예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 9:1 내지 약 1:25, 또는 약 8:1 내지 약 1:20, 또는 약 7:1 내지 약 1:15, 또는 약 6:1 내지 약 1:10, 또는 약 5:1 내지 약 1:8, 또는 약 4:1 내지 약 1:7, 또는 약 3:1 내지 약 1:6, 또는 약 2:1 내지 약 1:5, 또는 약 1:1 내지 약 1:4의 범위일 수 있다. 예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 1:1 내지 약 1:3, 또는 약 2:1 내지 약 1:4의 범위일 수 있다. 예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 1:3일 수 있다.
특정 양태에서, 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 16:1 내지 약 1:30의 범위이다. 예를 들어, 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 15:1 내지 약 1:30, 또는 약 14:1 내지 약 1:30, 또는 약 13:1 내지 약 1:30, 또는 약 12:1 내지 약 1:30, 또는 약 10:1 내지 약 1:30, 또는 약 16:1에서 약 1:16의 범위일 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 9:1 내지 약 1:25, 또는 약 8:1 내지 약 1:20, 또는 약 7:1 내지 약 1:15, 또는 약 6:1 내지 약 1:10, 또는 약 5:1 내지 약 1:8, 또는 약 4:1 내지 약 1:7, 또는 약 3:1 내지 약 1:6, 또는 약 2:1 내지 약 1:5, 또는 약 1:1 내지 약 1:4의 범위일 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 1:4 내지 약 1:8, 또는 약 1:1 내지 약 1:3, 또는 약 2:1 내지 약 1:4의 범위일 수 있다. 예를 들어, 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율(예를 들어, 총 유기황 화합물 대 총 바이오플라보노이드의 비율)은 약 1:6일 수 있거나, 또는 약 1:3일 수 있다. 바람직한 양태에서, 유기황 화합물은 디설파이드 화합물이다. 바람직한 양태에서, 유기황 화합물은 알리신이고/이거나 폴리페놀 화합물은 나린진 및 네오헤스페리딘을 포함하는 바이오플라보노이드이다.
일부 양태에서, 유기황 화합물 및 적어도 하나의 폴리페놀 화합물은 혼합물로서 제공될 수 있다. 혼합물은 본원에 참고로 포함된 제WO 2018/220340 A1호에 기재된 바와 같을 수 있다. 본원에 개시된 예에서, 혼합물 중의 유기황 화합물 대 총 폴리페놀 화합물의 비율은 1:3이고, 마늘 분말 대 시트러스 추출물의 비율은 93:7이며, 이는 본원에 개시된 예에서 "NXRH214"로 지칭된다. 본원에 개시된 일부 예에서, 유기할로겐 화합물(예를 들어, 브로모포름) 대 유기황 및 폴리페놀 화합물을 포함하는 분말 혼합물(예를 들어, NXRH214 분말)의 비율은 1:100 내지 1:100,000, 보다 바람직하게는 1:30,000 내지 1:100,000, 또는 1:35,000 내지 1:83,000이다.
- 기타 첨가제
조성물은, 예를 들어, 비타민, 미네랄, 항생제, 성장 자극제 및 이들의 조합을 포함하는 다른 동물 사료 보충제를 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은, 예를 들어 메탄 생산/배출을 감소시키거나 동물에 대한 영양소의 이용가능성을 증가시키기에 적합한 다른 생물학적 활성 동물 사료 보충제를 포함할 수 있다. 비타민은 비타민 A, 비타민 D, 비타민 E, 비타민 K, 티아민, 리보플라빈, 피리독신, 시아노코발라민, 카로티노이드(베타카로틴, 제아잔틴, 루테인 및 리코펜 포함), 니아신, 엽산, 판토텐산, 비오틴, 비타민 C, 콜린, 이노시톨 및 이들의 염 및 유도체 중 임의의 하나 이상일 수 있다. 미네랄은 칼슘, 인, 마그네슘, 철, 아연, 망간, 구리, 코발트, 붕소, 요오드, 나트륨, 칼륨, 몰리브덴, 셀레늄, 크롬, 불소 및 염화물 중 임의의 하나 이상일 수 있다. 동물 사료 조성물은, 예를 들어, 약 0.001wt% 내지 약 5wt%의 각각의 추가적인 동물 사료 보충제 또는 약 0.01wt% 내지 약 5wt% 또는 약 0.1wt% 내지 약 5wt%의 각각의 추가적인 동물 사료 보충제를 포함할 수 있다.
조성물은, 예를 들어, 유기황 화합물, 유기할로겐 화합물 및 임의로 적어도 하나의 폴리페놀 화합물 이외에 다른 성분, 예를 들어, 향료, 착색제, 안정화제, 항산화제, 완충제, 유화제, 분산제, 증점제, 가용화제, 미량 영양소(예를 들어 셀레늄), 비타민, 기타 공급 물질(예를 들어 당 및 전분과 같은 탄수화물), 가용성 및 불용성 섬유, 셀룰로스, 리그노셀룰로스, 시리얼 곡물, 시리얼 밀기울, 곡물 중간체, 곡물 껍질, 과일 및 채소 종자, 외피, 껍질 등을 포함할 수 있다.
- 동물 사료
또한 본원에는 본원에 기재된 조성물을 포함하는 동물 사료가 개시되어 있다. 동물 사료는 고체(예를 들어 분말, 과립, 펠릿), 반고체(예를 들어 젤, 연고, 크림, 페이스트) 또는 액체(예를 들어 용액, 현탁액, 에멀젼)일 수 있다. 동물 사료는 독립적으로 고체, 반고체(예를 들어 겔, 연고, 크림, 페이스트) 또는 액체(예를 들어 용액, 현탁액, 에멀젼)일 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는 둘 다 액체이거나 둘 다 반고체이거나 둘 다 고체일 수 있다. 대안적으로, 동물 사료 및 조성물은 각각 상이한 물리적 상태일 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는 고체 또는 반고체일 수 있고, 조성물은 액체일 수 있다. 조성물은, 예를 들어, 반추 동물 사육장 배급물을 "탑-드레싱(top-dress)"(상부에 첨가)하기 위해 사용될 수 있거나, 또는 총 혼합 배급물로 블렌딩하기 위해 사용될 수 있다. 조성물은, 예를 들어, 동물의 음용수에 첨가될 수 있다. 특정 양태에서, 조성물은 섭취 직전, 예를 들어 섭취 전 최대 1시간 또는 섭취 전 최대 30분 또는 섭취 전 최대 15분 또는 섭취 전 최대 5분에 동물의 음용수에 첨가될 수 있다. 동물 사료의 세 가지 주요 유형은 조사료(roughage), 농축물 및 혼합 사료를 포함한다. 일반적으로, 조사료는 농축물보다 더 높은 백분율의 조 섬유 및 더 낮은 백분율의 소화 가능한 영양소를 함유한다. 예를 들어, 조사료는 20wt% 이상의 조 섬유 및 60wt% 이하의 총 소화 가능한 영양소를 함유하는 것으로 정의될 수 있다. 조사료는, 예를 들어, 건조 조사료(예를 들어 건초, 짚, 적어도 90wt% 건조물을 함유한 인위적으로 탈수된 사료), 사일리지(풀, 알팔파, 사탕수수 및 옥수수와 같은 녹색 사료로부터 형성되고 건조물 함량이 20 내지 50%인 사일로에서 보존됨) 및 목초(예를 들어 높은 수분 함량 및 일반적으로 30% 미만의 건조물을 갖는 사료를 제공하는 녹색 성장 목초)를 포함할 수 있다. 조사료의 두 가지 기본 유형은 풀 및 콩류를 포함한다. 풀은 일반적으로 콩류보다 섬유질과 건조물이 더 높다. 콩류는 일반적으로 단백질, 대사 에너지, 비타민 및 미네랄이 더 높다. 농축물은 조섬유의 비율이 상대적으로 낮고 조사료보다 소화 가능한 영양소의 비율이 높다. 예를 들어, 농축물은 20wt% 미만의 조섬유 및 60wt% 초과의 총 소화 가능한 영양소를 함유하는 것으로 정의될 수 있다. 농축물은 예를 들어 에너지-풍부 곡물 및 당밀을 포함할 수 있다. 옥수수, 밀, 귀리, 보리 및 마일로(수수)는 약 70 내지 80wt% 총 소화 가능한 영양소를 함유하는 에너지-풍부 곡물이다.
혼합 사료는 일반적으로 "완전한" 균형 잡힌 배급물을 제공하기 위한 조사료와 농축물의 혼합물이며 에너지, 단백질 또는 섬유질이 높거나 낮을 수 있다. 적어도 하나의 유기황 화합물 및 적어도 하나의 폴리페놀 화합물(예를 들어, 적어도 하나의 바이오플라보노이드)은, 예를 들어, 동물에게 투여되도록 의도되는 유기할로겐 화합물(들), 유기황 화합물(들) 및 임의로 폴리페놀 화합물(들)(예를 들어, 바이오플라보노이드(들))의 총량에 따라 다양한 양으로 동물 사료와 조합될 수 있다.
동물 사료는, 예를 들어, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.0001wt% 내지 약 10wt%의 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)을 포함할 수 있다. 동물 사료는, 예를 들어, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.3wt% 내지 약 10wt%의 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)을 포함할 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.001wt% 내지 약 9.5wt%, 또는 약 0.005wt% 내지 약 9wt%, 또는 약 0.01wt% 내지 약 8.5wt%, 또는 약 0.05wt% 내지 약 8wt%, 또는 약 0.1wt% 내지 약 7.5wt%, 또는 약 0.9wt% 내지 약 7wt%, 또는 약 1wt% 내지 약 6wt%, 또는 약 1.5wt% 내지 약 5.5wt%, 또는 약 2wt% 내지 약 5wt%, 또는 약 2.5wt% 내지 약 4.5wt%, 또는 약 3wt% 내지 약 4wt%의 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)을 포함할 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.4wt% 내지 약 9.5wt%, 또는 약 0.5wt% 내지 약 9wt%, 또는 약 0.6wt% 내지 약 8.5wt%, 또는 약 0.7wt% 내지 약 8wt%, 또는 약 0.8wt% 내지 약 7.5wt%, 또는 약 0.9wt% 내지 약 7wt%, 또는 약 1wt% 내지 약 6wt%, 또는 약 1.5wt% 내지 약 5.5wt%, 또는 약 2wt% 내지 약 5wt%, 또는 약 2.5wt% 내지 약 4.5wt%, 또는 약 3wt% 내지 약 4wt%의 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 동물 사료 보충제 또는 동물 사료 조성물에 존재하는 총 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)의 농도는 전형적으로 각 유기할로겐 화합물의 농도를 초과한다. 상기 나타낸 바와 같이, 동물 사료 중 유기할로겐 화합물 대 유기황 화합물의 비율은 약 1:10 내지 1:3500, 또는 1:100 내지 1:3500, 또는 보다 바람직하게는 1:1000 내지 1:2500일 수 있다. 따라서, 일부 양태에서, 동물 사료는, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.00015wt.% 내지 약 0.01wt.%의 유기황 화합물(예를 들어, 알리신)을 포함할 수 있다.
존재하는 경우, 동물 사료는, 예를 들어, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.0001wt% 내지 약 10wt%의 총 폴리페놀 화합물(예를 들어, 총 바이오플라보노이드)을 포함할 수 있다. 동물 사료는, 예를 들어, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.1wt% 내지 약 10wt%의 총 폴리페놀 화합물(예를 들어, 총 바이오플라보노이드)을 포함할 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.001wt% 내지 약 10wt%, 또는 약 0.005wt% 내지 약 10wt%, 또는 약 0.01wt% 내지 약 9.5wt%, 또는 약 0.05wt% 내지 약 9wt%, 또는 약 0.1wt% 내지 약 8.5wt%, 또는 약 0.7wt% 내지 약 8wt%, 또는 약 0.8wt% 내지 약 7.5wt%, 또는 약 0.9wt% 내지 약 7wt%, 또는 약 1wt% 내지 약 6wt%, 또는 약 1.5wt% 내지 약 5.5wt%, 또는 약 2wt% 내지 약 5wt%, 또는 약 2.5wt% 내지 약 4.5wt%, 또는 약 3wt% 내지 약 4wt%의 총 폴리페놀 화합물(예를 들어, 총 바이오플라보노이드)를 포함할 수 있다. 예를 들어, 동물 사료는, 동물 사료의 총 건조 중량을 기준으로 하여, 약 0.2wt% 내지 약 10wt%, 또는 약 0.3wt% 내지 약 10wt%, 또는 약 0.4wt% 내지 약 9.5wt%, 또는 약 0.5wt% 내지 약 9wt%, 또는 약 0.6wt% 내지 약 8.5wt%, 또는 약 0.7wt% 내지 약 8wt%, 또는 약 0.8wt% 내지 약 7.5wt%, 또는 약 0.9wt% 내지 약 7wt%, 또는 약 1wt% 내지 약 6wt%, 또는 약 1.5wt% 내지 약 5.5wt%, 또는 약 2wt% 내지 약 5wt%, 또는 약 2.5wt% 내지 약 4.5wt%, 또는 약 3wt% 내지 약 4wt%의 총 폴리페놀 화합물(예를 들어 총 바이오플라보노이드)을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 동물 사료 보충제 또는 동물 사료 조성물에 존재하는 총 유기황 화합물(예를 들어 알리신)의 농도는 총 폴리페놀 화합물(들)의 농도를 초과할 수 있다.
- 본 개시내용의 방법
본원에는 메탄을 감소시키는 방법, 예를 들어 동물에 의한 메탄 생산을 감소시키는 방법이 개시되어 있으며, 상기 방법은 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료를 동물, 보다 특히 반추 동물에게 투여함을 포함한다.
본원에 기재된 조성물 및 방법은, 예를 들어, 메탄 생산 및/또는 배출을 (동물 사료 보충제가 소비되지 않은 경우의 메탄 생산 및/또는 배출과 비교하여) 적어도 약 10% 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 동물 사료 보충제는 메탄 생산 및/또는 배출을 적어도 약 10%, 또는 적어도 약 15%, 또는 적어도 약 25%, 또는 적어도 약 30%, 또는 적어도 약 35%, 또는 적어도 약 40% 또는 적어도 약 45%, 또는 적어도 약 50%, 또는 적어도 약 60%, 또는 적어도 약 70%, 또는 적어도 약 80%까지 감소시킬 수 있다. 본원에 기재된 동물 사료 보충제는 예를 들어 메탄 생산 및/또는 배출을 최대 100%까지 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 동물 사료 보충제는 메탄 생산 및/또는 배출을 최대 약 99%, 또는 최대 약 98%, 또는 최대 약 97%, 또는 최대 약 96%, 또는 최대 약 95%, 또는 최대 약 90%, 또는 최대 약 85%, 또는 최대 약 80%, 또는 최대 약 75%, 또는 최대 약 70%까지 감소시킬 수 있다. 이는, 예를 들어, 호엔하임 가스 시험(Hohenheim gas test)에 의해 또는 압력계(manometer)를 사용하여 측정될 수 있다.
또한 본원에는 본원에 기재된 바와 같은 조성물 또는 동물 사료를 동물, 보다 특히 반추 동물에게 투여함을 포함하여 하나 이상의 메탄생성균을 억제하는 방법이 개시되어 있다. 일부 양태에서, 본원에 개시된 조성물 및 조합물은 메타노박테리움 메타노박테리움 포르미시쿰(Methanobacterium formicicum), 메타노박테리움 브리안티(Methanobacterium bryantii), 메타노브레비박터 루미난티움(Methanobrevibacter ruminantium), 메타노브레비박터 밀레라에(Methanobrevibacter millerae), 메타노브레비박터 올레예(Methanobrevibacter olleyae), 메타노마이크로븀 모빌(Methanomicrobium mobile), 메타노쿨레우스 올렌탕이(Methanoculleus olentangyi), 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노브레비박터 보비스코리아니(Methanobrevibacter boviskoreani), 메타노박테리움 베이징겐세(Methanobacterium beijingense), 메타노쿨레우스 마리스니그리(Methanoculleus marisnigri), 메타노쿨레우스 부르겐시스(Methanoculleus bourgensis), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei), 메타노브레비박터 고트샬키(Methanobrevibacter gottschalkii), 메타노브레비박터 타우에리(Methanobrevibacter thaueri), 메타노브레비박터 스미스이(Methanobrevibacter smithii), 메타노스파에라 슈타트마나에(Methanosphaera stadtmanae), 메타노브레비박터 워세이(Methanobrevibacter woesei), 메타노브레비박터 월리니(Methanobrevibacter wolinii)로부터 선택되는 하나 이상의 메탄생성균을 감소시키기 위해 사용될 수 있다.
또한 본원에는 동물의 대사 효율을 개선하는 방법이 개시되어 있으며, 상기 방법은 본 발명의 조성물 또는 동물 사료를 동물에게 투여함을 포함한다. 대사 효율의 개선은 축산물, 예를 들어 육류, 지방, 양모(즉, 섬유) 및 우유 중 하나 이상의 수율을 증가시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물 또는 방법은 동물의 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 및/또는 우유 생산을 개선할 수 있다.
본원에 기재된 조성물, 동물 사료 및 방법은, 예를 들어, 우유 및/또는 육류 및/또는 양모 생산을 (조성물 또는 동물 사료가 소비되지 않은 경우의 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산과 비교하여) 적어도 약 20% 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 조성물 또는 동물 사료는 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산을 적어도 약 25%, 또는 적어도 약 30%, 또는 적어도 약 35%, 또는 적어도 약 40%, 또는 적어도 약 45%, 또는 적어도 약 50% 증가시킬 수 있다. 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는, 예를 들어, 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산을 최대 100%까지 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 조성물 또는 동물 사료는 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산을 최대 약 95%, 또는 최대 약 90%, 또는 최대 약 85%, 또는 최대 약 80%, 또는 최대 약 75%, 또는 최대 약 70% 증가시킬 수 있다. 이는, 예를 들어, 하루에 생산된 우유의 용적에 의해 또는 동물의 중량에 의해 또는 생산된 양모 및/또는 지방 및/또는 육류의 중량에 의해 측정될 수 있다.
본원에 기재된 조성물 및 동물 사료는, 예를 들어, 우유 및/또는 육류 및/또는 양모 생산의 효율을 (조성물 또는 동물 사료가 소비되지 않은 경우의 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산의 효율과 비교하여) 적어도 약 20% 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산의 효율을 적어도 약 25%, 또는 적어도 약 30%, 또는 적어도 약 35%, 또는 적어도 약 40%, 또는 적어도 약 45%, 또는 적어도 약 50% 증가시킬 수 있다. 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는, 예를 들어, 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산의 효율을 최대 100% 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산의 효율을 최대 약 95%, 또는 최대 약 90%, 또는 최대 약 85%, 또는 최대 약 80%, 또는 최대 약 75%, 또는 최대 약 70% 증가시킬 수 있다. 효율은 특정 생물학적 과정(예를 들어 우유, 육류, 지방, 양모 생산)이 소비되는 영양 단위당 발생하는 정도와 관련이 있다. 이는, 예를 들어, 하루에 생산되는 우유의 용적 또는 동물의 중량 또는 양모 또는 지방의 중량의 변화를 동물에 의해 소비된 총 영양소로 나누어 측정될 수 있다. 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는, 예를 들어, 영양소 이용 가능성(nutrient availability)을 (조성물 또는 동물 사료가 소비되지 않은 경우의 우유 및/또는 육류 및/또는 지방 및/또는 양모 생산과 비교하여) 적어도 약 20% 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는 영양소 이용 가능성을 적어도 약 25%, 또는 적어도 약 30%, 또는 적어도 약 35%, 또는 적어도 약 40%, 또는 적어도 약 45%, 또는 적어도 약 50% 증가시킬 수 있다. 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는 예를 들어 영양소 이용 가능성을 최대 100% 증가시킬 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료는 영양소 이용 가능성을 최대 약 95%, 또는 최대 약 90%, 또는 최대 약 85%, 또는 최대 약 80%, 또는 최대 약 75%, 또는 최대 약 70% 증가시킬 수 있다. 영양소 이용 가능성은 생물학적/대사적 기능에 사용하기 위해 동물이 이용할 수 있는 영양소의 양을 지칭한다.
일부 양태에서, 반추 동물은 소, 염소, 양, 야크, 사슴 또는 영양이다. 일부 양태에서, 반추 동물은 소, 염소 또는 양이다.
조성물 또는 동물 사료는 동물에게 경구 투여될 수 있다. 일부 양태에서, 조성물 또는 동물 사료는 동물에게 매일 투여될 수 있다.
반추 동물의 대사 효율 개선
본 개시내용은 대사 효율을 개선하기 위해 반추 동물에게 경구 투여, 배출된 메탄의 감소 및 배설된 질소의 감소, 육류, 지방, 섬유질 및 우유와 같은 가치 있는 축산물의 증가를 위해 적합한 생물학적 또는 합성적으로 유래된 유기할로겐, 유기황 및 폴리페놀 화합물을 포함하는 사료 보충제 제제를 제공한다.
본 발명은 특정 유기할로겐 화합물, 유기황 화합물 및 폴리페놀 화합물이, 반추 동물에서 메탄의 배출을 감소시키기 위해 반추 동물에게 투여될 때, 또한 상기 반추 동물의 대사 효율을 개선하고 또한 소변 질소의 배설을 감소시키고 가치 있는 축산물의 생산을 증가시킨다는 예상치 못한 발견에 근거한다. 또한, 상기 유기할로겐 화합물, 유기황 화합물 및 폴리페놀 화합물이 특정 조합으로 투여될 때, 배출된 메탄 및 배설된 질소 둘 다의 감소에 놀라운 향상이 있으며 가치 있는 축산물의 생산 증가에 놀라운 향상이 있다.
본 발명자는 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 특정 조합을 포함하는 사료 보충제로부터 대사 효율에 대한 예상치 못한 놀라운 개선을 인지하였다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합은 반추 동물에게 투여될 때 메탄생성을 감소시키고 반추 동물 메탄 생산을 감소시킨다. 메탄생성의 감소는, 성장을 제한하거나 사멸시킴으로 인한 메탄생성 유기체의 감소; 메탄생성 과정에 관여하는 효소를 제한하거나 중지시킴으로 인한 메탄생성 과정의 감소를 포함하는 상이한 모드에 의해 발생한다.
소, 양 및 염소에서 확인된 메탄생성균은 메타노박테리움 포르미시쿰(Methanobacterium formicicum), 메타노박테리움 브리안티(Methanobacterium bryantii), 메타노브레비박터 루미난티움(Methanobrevibacter ruminantium), 메타노브레비박터 밀레라에(Methanobrevibacter millerae), 메타노브레비박터 올레예(Methanobrevibacter olleyae), 메타노마이크로븀 모빌(Methanomicrobium mobile), 메타노쿨레우스 올렌탕이(Methanoculleus olentangyi), 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노브레비박터 보비스코리아니(Methanobrevibacter boviskoreani), 메타노박테리움 베이징겐세(Methanobacterium beijingense), 메타노쿨레우스 마리스니그리(Methanoculleus marisnigri), 메타노쿨레우스 부르겐시스(Methanoculleus bourgensis), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei), 메타노브레비박터 고트샬키(Methanobrevibacter gottschalkii), 메타노브레비박터 타우에리(Methanobrevibacter thaueri), 메타노브레비박터 스미스이(Methanobrevibacter smithii), 메타노스파에라 슈타트마나에(Methanosphaera stadtmanae), 메타노브레비박터 워세이(Methanobrevibacter woesei), 및 메타노브레비박터 월리니(Methanobrevibacter wolinii)를 포함한다. 따라서, 일부 양태에서, 본원에 개시된 조성물 및 조합물은 메타노박테리움 포르미시쿰(Methanobacterium formicicum), 메타노박테리움 브리안티(Methanobacterium bryantii), 메타노브레비박터 루미난티움(Methanobrevibacter ruminantium), 메타노브레비박터 밀레라에(Methanobrevibacter millerae), 메타노브레비박터 올레예(Methanobrevibacter olleyae), 메타노마이크로븀 모빌(Methanomicrobium mobile), 메타노쿨레우스 올렌탕이(Methanoculleus olentangyi), 메타노사르시나 바르케리(Methanosarcina barkeri), 메타노브레비박터 보비스코리아니(Methanobrevibacter boviskoreani), 메타노박테리움 베이징겐세(Methanobacterium beijingense), 메타노쿨레우스 마리스니그리(Methanoculleus marisnigri), 메타노쿨레우스 부르겐시스(Methanoculleus bourgensis), 메타노사르시나 마제이(Methanosarcina mazei), 메타노브레비박터 고트샬키(Methanobrevibacter gottschalkii), 메타노브레비박터 타우에리(Methanobrevibacter thaueri), 메타노브레비박터 스미스이(Methanobrevibacter smithii), 메타노스파에라 슈타트마나에(Methanosphaera stadtmanae), 메타노브레비박터 워세이(Methanobrevibacter woesei), 및 메타노브레비박터 월리니(Methanobrevibacter wolinii)로부터 선택된 하나 이상의 메탄생성균을 감소시키기 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합은 메탄 배출 및 배설된 소변 질소의 감소, 및 가치 있는 축산물의 증가에서 예상치 못한 놀라운 향상을 가지며, 이는 예를 들어 다음을 포함하는 메탄생성 억제의 상이한 모드 간의 상승효과로 인한 것일 수 있다:
아스파라곱시스 종(Asparagopsis species)의 해양 거대조류로부터의 유기할로겐 화합물은 유기브롬, 특히 브로모포름(CHBr3, 트리브로모메탄)을 포함하며, 이는 메탄생성의 두 번째에서 마지막 단계에 필요한 환원된 비타민 B12 보조인자와 반응하여 메틸트랜스퍼라제 효소의 효율을 억제하고 또한 말단 전자 수용체로서 작용함으로써 메탄 생산을 경쟁적으로 억제한다.
알리움 종의 식물로부터의 유기황 화합물은 알리신 및 디알릴 디설파이드를 포함하며, 이는 중요한 티올-함유 효소와의 산화적 상호작용으로 인해 및 효소 HMG-CoA 환원효소를 억제함으로써 항메탄생성균 활성(antimethanogen activity)을 갖는다.
시트러스 종의 식물로부터의 폴리페놀 화합물은 플라보노이드 네오헤스페리딘 및 나린진을 포함하며, 이는 항메탄생성균 활성을 갖는다.
본 발명자는 본 발명의 보충제로 인한 대사 효율의 예상치 못한 놀라운 개선이 또한 예를 들어 다음을 포함하는 추가적인 건강상의 이점에 기인할 수 있음을 인지하였다: 위장 기생충의 감소를 유발하는 구충 효과(anthelmintic effect); 예를 들어 유선염(mastitis)을 포함하는 박테리아 감염의 감소를 유발하는 항균 효과; 및 반추 동물에게 투여될 때 본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합에서 존재하는 미량 미네랄 및 비타민의 보충 제공.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합은 특정 조합 및 특정 비율로 사료 보충제로서 투여될 수 있다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합은 별도의 사료 보충제로 투여되거나 혼합 조성물 사료 보충제로 조합될 수 있다.
용도
본원(모든 양태 및 양태의 조합을 포함함)에 기재된 조성물 또는 동물 사료 보충제는 동물에 의한 메탄 생산 및/또는 배출을 감소시키고, 동물에 의한 질소 배설을 감소시키고, 동물에 대한 영양소의 이용 가능성을 증가시키고/시키거나 동물에 의한 가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물을 증가시키기 위해 사용될 수 있다.
특정 양태에서, 동물은 반추 동물이다. 반추 동물은 루미난티아(Ruminantia) 및 틸로포다(Tylopoda) 아목의 구성원으로부터 선택된 동물을 포함하며, 길들여진 반추 동물, 예를 들어, 소(예를 들어, 암소), 염소, 양, 버팔로, 야크, 사슴 또는 영양을 포함한다.
구체적으로, 본 발명의 조성물 또는 사료 보충제는, 유효량으로 반추 동물에게 투여될 때, 반추 동물 메탄 생산 감소를 유발하며, 이는 그렇지 않으면 주로 입과 콧구멍을 통해 가스를 내뿜음으로써 대기 중으로 방출되고, 사료로부터의 총 에너지 섭취의 2 내지 12%의 에너지 손실을 나타낸다.
메탄은 지구 온난화 지수가 이산화탄소의 28배에 달하는 온실 가스이다. 장내 메탄은 반추 동물 소화의 부산물이며 섬모 원생 동물, 박테리아, 고세균 및 혐기성 진균을 포함하는 복잡한 미생물 군집에 의해 메탄생성(methanogenesis)이라는 과정에 의해 생산된다. 소는 양 및 염소보다 각각 약 7배 및 9배 많은 메탄을 생산한다. 장내 메탄은 주로 반추위(rumen)(87% 내지 90%)에서 생산되며, 대장에서는 그보다 적은 정도(13% 내지 10%)로 생산된다.
본 발명의 조성물 및 사료 보충제는 메탄 생성으로부터 대사 에너지의 전환을 유발하고, 이를 동화 성장 과정(anabolic growth process)으로 지시한다. 따라서, 사료 보충제는, 동물 질량의 직접 계량; 빈 체질량(총 질량에서 장 내용물을 뺀 값)을 측정하기 위한 컴퓨터 단층 촬영(CT) 스캔; 사체 질량 및 조성 분석(순수 근육, 지방, 및 주요 지방 분포; 및 간을 포함하는 기관의 변화)에 의해 결정되는 반추 동물 생체중(liveweight)의 증가를 유발한다.
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 예는 조직-기반 상품이며 예를 들어 육류; 내장; 및 가죽을 포함한다.
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 또 다른 예는 분비-기반 상품 및 이러한 상품의 제품이며 예를 들어 우유; 전유; 분유; 크림; 아이스크림; 치즈; 및 요구르트를 포함한다.
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 또 다른 예는 섬유-기반 상품이며 예를 들어 양모; 뿔(horn); 및 가지진 뿔(antler)을 포함한다.
본 발명의 조성물 및 사료 보충제는 배뇨 후 목초지의 소변 자리(urine patch)에 침착되는 배설된 소변 질소의 감소를 야기할 가능성이 있는 대사 효율의 예상치 못한 놀라운 개선을 야기한다. 소변 자리에 과잉 배설된 질소가 최적의 목초지 식물 효율에 필요한 것보다 클 때, 과잉 질소는 질산염(NO3-) 침출 및 암모니아(NH3), 아산화질소(N2O) 및 질소(N2) 휘발을 통해 손실된다. 아산화질소는 특히 이산화탄소의 298배에 달하는 지구 온난화 지수를 갖는 온실 가스로서 대기에 해를 끼친다. 지하수로의 질소 손실은 수생 생물상의 통제되지 않은 성장을 유발하여 생태계를 손상시키고 독성 조류 번식을 일으키며 수역(water body)의 부영양화(eutrophication)를 유발할 수 있다.
제조 방법
본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료 보충제는 하나 이상의 유기할로겐 화합물(들) 및 하나 이상의 유기황 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들)을 조합함으로써 제조될 수 있다.
유기할로겐 화합물은 적합한 생물학적 공급원으로부터 합성 또는 추출될 수 있으며 원료 또는 가공된 형태로 사용될 수 있다. 예를 들어 유기할로겐 화합물은 CH3Cl; CH3Br; CH3I; CH2Cl2; CH2Br2; CH2I2; CHCl3; CHBr3; CHI3; CCl4; CBr4; CH2ClBr; CH2ClI; CH2BrI; CHBr2Cl; CHBrI2; CHBrClI; CHBr2I; CHBrCl2; CH3CH2Br; CH3CH2I; CH3CH2CH2I; CH3(CH2)3I; CH3(CH2)4Br; CH3(CH2)4I; (CH3)2CHI; CH3CH2CH(CH3)I; (CH3)2CHCH2I; BrCH2CH2Br; ClCH=CCl2; 및 CH3CH2CH2CH2I를 포함한다.
유기할로겐 화합물의 생물학적 공급원은 유기할로겐-풍부 해양 거대 조류이다. 예를 들어, 유기할로겐-풍부 해양 거대조류는 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 1종의 해양 거대조류를 포함한다.
유기황 화합물은 적절한 생물학적 공급원으로부터 합성 또는 추출될 수 있고, 원료 또는 가공된 형태로 사용될 수 있다. 유기황 화합물은 유기황 2차 대사산물; 알리신(C6H10S2O), 디알릴 설파이드(C6H10S), 디알릴 디설파이드(C6H10S2) 및 알릴 머캅탄(C3H6S)을 포함한다.
유기황 화합물의 생물학적 공급원은 유기황-풍부 식물이다. 예를 들어, 유기황-풍부 식물은 알리움 종; 알리움 사티붐(A. sativum)(마늘); 알리움 암펠로프라숨(A. ampeloprasum)(부추); 알리움 세파(A. cepa)(양파 및 쪽파)를 포함한다. 하나 이상의 유기황 화합물은, 예를 들어, 잎; 줄기; 나무껍질; 뿌리; 구근; 꽃; 과실; 및 종자를 포함하는 식물의 하나 이상의 부분으로부터 수득될 수 있다.
폴리페놀 화합물은 적합한 생물학적 공급원으로부터 합성 또는 추출될 수 있고, 원료 또는 가공된 형태로 사용될 수 있다. 예를 들어, 폴리페놀 화합물은 바이오플라보노이드 및 페놀 화합물을 포함한다. 용어 페놀 화합물은 방향족 탄화수소 그룹에 직접 결합된 하이드록실 그룹(-OH)을 포함하는 화합물 부류룰 지칭한다. 본원에 기재된 페놀 화합물은 바이오플라보노이드, 비-바이오플라보노이드 페놀 화합물 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 상기 적어도 하나의 폴리페놀 화합물은, 예를 들어, 적어도 하나의 바이오플라보노이드를 포함할 수 있다. 용어 바이오플라보노이드는 식물 및 진균 2차 대사산물의 한 부류를 지칭하며 두 개의 페닐 환(A 및 B) 및 헤테로사이클릭 환(C)으로 구성된 15-탄소 골격의 일반적인 구조를 가지며 때로는 C6-C3-C6으로 약칭된다. 용어 바이오플라보노이드는 안토크산틴(플라본 및 플라보놀 포함), 플라바논, 플라바노놀, 플라반 및 안토시아니딘을 포함한다. 용어 바이오플라보노이드는 또한 플라본 백본(2-페닐-1,4-벤조피론), 이소플라반 백본(3-페닐크로멘-4-온) 또는 네오플라반 백본(4-페닐쿠마린)을 갖는 화합물을 포함한다. 따라서 용어 폴리페놀 화합물은 안토크산틴; 플라바논(플라바논 글리코시드 포함); 플라보놀; 플라바노놀; 플라반; 이소플라본; 안토시아니딘; 프로안토시아니딘; 페놀산; 하이드록시신남산; 쿠마린; 스틸베노이드; 안트라퀴논; 리그난; 리그닌; 탄닌; 폴리페놀 단백질; 카테킨; 루틴; 아카세틴; 제니스테인; 캠페롤; 갈로카테킨; 카테킨 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 퀘르세틴; 알로카테킨; 갈로카테신 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 에피갈로카테신 갈레이트; 캠페롤; 퀘르세틴; 나린진; 네오헤스페리딘; 에리오시트린; 이소나린진; 나린제닌; 헤스페리딘; 로이폴린; 디오스민; 디디민; 헤스페레틴; 폰시린; 에피카테킨; 갈로카테킨; 에피갈로카테킨; 쿠마르산; 신남산; 갈산; 엘라그산; 프로토카테추산; 클로로겐산; 카페산; 페룰산; 푸니칼라진; 푸니칼린을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
폴리페놀 화합물의 생물학적 공급원은 폴리페놀-풍부 식물이다. 예를 들어, 폴리페놀-풍부 식물은 알리움 종; 브라시카 종; 카멜리아 종; 캅시쿰 종; 시트러스 종; 쿠쿠미스 종; 말루스 종; 무사 종; 파세올루스 종; 프루누스 종; 푸니카 종; 피루스 종; 솔라눔 종; 박시니움 종을 포함한다. 하나 이상의 폴리페놀 화합물은 예를 들어 잎; 줄기; 나무껍질; 뿌리; 구근; 꽃; 과실; 및 종자를 포함하는 식물의 하나 이상의 부분으로부터 수득될 수 있다.
본원에 기재된 조성물 또는 동물 사료 보충제는 하나 이상의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 하나 이상의 유기황-풍부 식물(들) 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀-풍부 식물(들)을 조합함으로써 제조될 수 있다.
성분들은 각 성분의 원하는 양을 갖는 조성물을 수득하기에 적절한 양으로 조합된다. 각각의 성분은 원하는 생성물을 수득하기에 적합한 임의의 순서 및 조합으로 하나 이상의 다른 성분과 조합될 수 있다. 예를 들어, 각 성분은 혼합 또는 블렌딩에 의해 조합될 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 유기할로겐 화합물(들) 및 하나 이상의 유기황 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들)은 하나 이상의 유기할로겐 화합물(들) 및 하나 이상의 유기황 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들)을 동물 사료 상부에 배치함으로써 동물 사료와 조합될 수 있다(탑-드레싱).
조성물은 건조 고체 형태, 예를 들어 분말 형태로 제조될 수 있으며, 의도된 완제품에 대한 제형의 유형에 따라 추가 가공 단계를 거칠 수 있다. 상기 방법은 성형 단계를 추가로 포함할 수 있으며, 여기서 혼합물은 성형, 가압, 분무 건조 또는 달리 바람직하게는 본원에 기재된 유형의 동물에 의한 소비에 적합한 치수 및/또는 텍스쳐를 갖는 형상(예를 들어, 바, 볼, 펠릿, 클러스터, 정제)으로 형성된다. 상기 방법은 동물 사료 또는 동물 사료 보충제를 주사기와 같은 특정 전달 장치에 수용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 동물 사료 보충제 또는 동물 사료를 동물의 위장(예를 들어, 반추 동물의 반추위)에 체류하도록 의도될 수 있는 볼루스 정제로 형성하는 것을 포함할 수 있다.
메탄생성 억제제 투여
본원에는 또한 배출된 메탄의 감소 및 배설된 질소의 감소를 위한 및 육류, 지방, 섬유질 및 우유와 같은 가치 있는 축산물의 증가를 위한, 대사 효율을 개선하기 위해 반추 동물에 경구 투여하기에 적합한 생물학적 유래 유기할로겐 및/또는 유기황 화합물 및/또는 폴리페놀 화합물을 포함하는 메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여 방법이 개시되어 있다.
본원에 사용된 용어 "단계적"은 적어도 하나의 메탄생성 억제제의 유효량의 적어도 하나의 용량을 투여하고, 임의로 얼마간의 유효 시간 간격 후에 적어도 하나의 메탄생성 억제제의 유효량의 적어도 하나의 연속 용량을 투여하는 것을 의미한다.
본 개시내용은 상기 사료 보충제가 특정 유효 용량의 양 및 특정 유효 시간 간격 둘 다로 상기 동물에게 단계적으로 투여될 때 개선된 대사 효율, 방출된 메탄의 감소 및 배설된 질소의 감소 및 육류, 지방, 섬유질 및 우유와 같은 가치 있는 축산물의 증가를 통해 놀라운 경제적 이익을 제공한다는 예상치 못한 발견에 근거한다.
메탄생성의 억제는, 예를 들어, 메탄생성에 관여하는 효소를 제한하거나 중단함으로 인한 또는 성장을 제한하거나 사멸시켜 메탄생성 유기체를 감소시킴으로 인한 메탄생성 과정의 감소를 포함하는 상이한 작용 모드에 의해 발생한다.
메탄생성 억제제는 예를 들어, 유기오할로겐 화합물; CH3Cl; CH3Br; CH3I; CH2Cl2; CH2Br2; CH2I2; CHCl3; CHBr3; CHI3; CCl4; CBr4; CH2ClBr; CH2ClI; CH2BrI; CHBr2Cl; CHBrI2; CHBrClI; CHBr2I; CHBrCl2; CH3CH2Br; CH3CH2I; CH3CH2CH2I; CH3(CH2)3I; CH3(CH2)4Br; CH3(CH2)4I; (CH3)2CHI; CH3CH2CH(CH3)I; (CH3)2CHCH2I; BrCH2CH2Br; ClCH=CCl2; CH3CH2CH2CH2I; 유기황 화합물; 유기황 2차 대사산물; 알리신(C6H10S2O), 디알릴 설파이드(C6H10S), 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 알릴 머캅탄(C3H6S); 폴리페놀 화합물; 플라보노이드; 바이오플라보노이드; 비-바이오플라보노이드; 안토크산틴; 플라본; 플라보놀; 플라바논; 플라바노놀; 플라반; 안토시아니딘; 이소플라반; 네오플라반 안토크산틴; 이소플라본; 프로안토시아니딘; 페놀산; 하이드록시신남산; 쿠마린; 스틸베노이드; 안트라퀴논; 리그난; 리그닌; 탄닌; 폴리페놀 단백질; 카테킨; 루틴; 아카세틴; 제니스테인; 캠페롤; 갈로카테킨; 카테킨 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 퀘르세틴; 알로카테킨; 갈로카테신 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 에피갈로카테신 갈레이트; 캠페롤; 퀘르세틴; 나린진; 네오헤스페리딘; 에리오시트린; 이소나린진; 나린제닌; 헤스페리딘; 로이폴린; 디오스민; 디디민; 헤스페레틴; 폰시린; 에피카테킨; 갈로카테킨; 에피갈로카테킨; 쿠마르산; 신남산; 갈산; 엘라그산; 프로토카테추산; 클로로겐산; 카페산; 페룰산; 푸니칼라진; 및 푸니칼린을 포함한다.
유기할로겐 화합물의 생물학적 공급원은 유기할로겐-풍부 해양 거대조류이다. 예를 들어, 유기할로겐-풍부 해양 거대조류는 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 1종의 해양 거대조류를 포함한다. 본원에 개시된 유기할로겐 화합물, 유기브롬 화합물 및 브로모포름은 또한 합성적일 있다.
유기황 화합물의 생물학적 공급원은 유기황-풍부 식물이다. 예를 들어, 유기황-풍부 식물은 알리움 종; 알리움 사티붐(A. sativum)(마늘); 알리움 암펠로프라숨(A. ampeloprasum)(부추); 알리움 세파(A. cepa)(양파 및 쪽파)를 포함한다. 하나 이상의 유기황 화합물은 예를 들어 잎; 줄기; 나무껍질; 뿌리; 구근; 꽃; 과실; 및 종자를 포함하는 식물의 하나 이상의 부분으로부터 수득될 수 있다. 본원에 개시된 유기황 화합물은 또한 합성적일 수 있다.
폴리페놀 화합물의 생물학적 공급원은 폴리페놀-풍부 식물이다. 예를 들어, 폴리페놀-풍부 식물은 알리움 종; 브라시카 종; 카멜리아 종; 캅시쿰 종; 시트러스 종; 쿠쿠미스 종; 말루스 종; 무사 종; 파세올루스 종; 프루누스 종; 푸니카 종; 피루스 종; 솔라눔 종; 박시니움 종을 포함한다. 하나 이상의 폴리페놀 화합물은 예를 들어 잎; 줄기; 나무껍질; 뿌리; 구근; 꽃; 과실; 및 종자를 포함하는 식물의 하나 이상의 부분으로부터 수득될 수 있다. 본원에 개시된 폴리페놀 화합물은 또한 합성적일 수 있다.
본 발명자는 유효 투여량 및 연속 투여량 사이의 유효 시간 간격 둘 다의 최적화를 위해 단계적 투여를 최적화함으로써 다음을 인지하였다:
1. 가치 있는 축산물의 증가가 반추 동물에서 최대화되어 경제적 이익에 기여하고;
2. 과잉-공급 또는 과다-투여가 방지되어 사료 보충제의 비용을 절감하고 경제적 이익에 기여하며;
3. 과잉-공급 또는 과다-투여가 방지되어 상기 사료 보충제가 상기 반추 동물에서 역생산성(counterproductivity)을 유발하는 것을 방지하고 경제적 이익에 기여한다.
본 발명자는 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및/또는 유기황-풍부 식물, 및/또는 폴리페놀-풍부 식물의 특정 조합을 포함하는 메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여를 주의 깊게 제어함으로써 예상치 못한 놀라운 경제적 이점을 인지하였다.
반추 동물에게 투여될 때 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및/또는 유기황-풍부 식물, 및/또는 폴리페놀-풍부 식물의 조합은 메탄생성을 감소시키고 반추 동물 메탄 생산을 감소시킨다. 메탄생성의 감소는, 성장을 제한하거나 사멸시킴으로 인한 메탄생성 유기체의 감소; 메탄생성에 관여하는 효소를 제한하거나 중지시킴으로 인한 메탄생성 과정의 감소를 포함하는 상이한 모드에 의해 발생한다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 특정 조합을 반추 동물에게 단계적으로 투여하는 것은 메탄 배출 및 배설된 소변 질소의 감소, 가치 있는 축산물의 증가에 있어서 예상치 못한 놀라운 향상을 가지며, 이는 예를 들어 다음을 포함하는 메탄생성의 상이한 억제 모드 간의 상승효과에 기인하는 것으로 보인다:
1. 아스파라곱시스 종의 해양 거대조류로부터의 유기할로겐 화합물은 유기브롬, 특히 브로모포름(CHBr3, 트리브로모메탄)을 포함하며, 이는 메탄생성의 두 번째에서 마지막 단계에 필요한 환원된 비타민 B12 보조인자와 반응하여 메틸트랜스퍼라제 효소의 효율을 억제하고 또한 말단 전자 수용체로서 작용함으로써 메탄 생산을 경쟁적으로 억제한다.
2. 알리움 종의 식물로부터의 유기황 화합물은 알리신 및 디알릴 디설파이드를 포함하며, 이는 중요한 티올-함유 효소와의 산화적 상호작용으로 인해 및 효소 HMG-CoA 환원효소를 억제함으로써 항메탄생성균 활성을 갖는다.
2. 시트러스 종의 식물로부터의 폴리페놀 화합물은 플라보노이드 네오헤스페리딘 및 나린진을 포함하며, 이는 항메탄생성균 활성을 갖는다.
본 발명자는 본 발명의 메탄생성 억제제 사료 보충제 또는 조성물의 단계적 투여로 인한 대사 효율의 예상치 못한 놀라운 개선이 또한, 예를 들어, 위장 기생충의 감소를 유발하는 구충 효과; 예를 들어 유선염을 포함하는 박테리아 감염의 감소를 유발하는 항균 효과; 및 반추 동물에게 투여될 때 본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 유기황-풍부 식물 및 폴리페놀-풍부 식물의 조합에서 존재하는 미량 미네랄 및 비타민의 보충 제공을 포함하는 추가의 건강상의 이점에 기인할 수 있음을 인지하였다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및/또는 유기황-풍부 식물 및/또는 폴리페놀-풍부 식물의 단계적 투여는 특정 조합 및 특정 비율로 사료 보충제로서 투여될 수 있다.
본 발명의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및/또는 유기황-풍부 식물 및/또는 폴리페놀-풍부 식물의 조합의 단계적 투여는 별개의 사료 보충제로서 투여되거나 혼합 조성물 사료 보충제(예를 들어, 본원에 기재된 조성물로서)로 조합될 수 있다.
용도
본원(모든 양태 및 양태의 조합 포함)에 기재된 메탄생성 억제제 동물 사료 보충제의 단계적 투여는 동물에 의한 메탄 생산 및/또는 배출을 감소시키고, 동물에 의한 질소 배설을 감소시키고, 동물에 대한 영양소의 이용 가능성을 증가시키고/시키거나 동물에 의한 가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물을 증가시키기 위해 사료 보충제 투여를 최적화하는데 사용될 수 있다.
특정 양태에서, 동물은 반추 동물이다. 반추 동물은 루미난티아 및 틸로포다 아목의 구성원으로부터 선택된 동물을 포함하며, 길들여진 반추 동물: 예를 들어, 소(예를 들어, 암소), 염소, 양, 버팔로, 야크, 사슴 또는 영양을 포함한다.
구체적으로, 본 발명의 메탄생성 억제제 사료 보충제 또는 조성물은, 반추 동물에게 투여될 때, 반추 동물 메탄 생산 감소를 유발하며, 이는 그렇지 않으면 주로 입과 콧구멍을 통해 가스를 내뿜음으로써 대기 중으로 방출되고, 사료로부터의 총 에너지 섭취의 2 내지 12%의 에너지 손실을 나타낸다.
메탄은 지구 온난화 지수가 이산화탄소의 28배에 달하는 온실 가스이다. 장내 메탄은 반추 동물 소화의 부산물이며 섬모 원생 동물, 박테리아, 고세균 및 혐기성 진균을 포함하는 복잡한 미생물 군집에 의해 메탄생성이라는 과정에 의해 생산된다. 소는 양 및 염소보다 각각 약 7배 및 9배 많은 메탄을 생산한다. 장내 메탄은 주로 반추위(87% 내지 90%)에서 생산되며, 대장에서는 그보다 적은 정도(13% 내지 10%)로 생산된다.
본 발명의 메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여는 메탄 생성으로부터 대사 에너지의 전환을 유발하고, 이를 동화 성장 과정으로 지시한다. 따라서, 사료 보충제는 다음에 의해 결정되는 반추 동물 생체중의 증가를 유발한다: 동물 질량의 직접 계량; 빈 체질량(총 질량에서 장 내용물을 뺀 값)을 측정하기 위한 컴퓨터 단층 촬영(CT) 스캔; 사체 질량 및 조성 분석(순수 근육, 지방, 및 주요 지방 분포; 및 간을 포함하는 기관의 변화).
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 예는 조직-기반 상품이며 예를 들어 육류; 내장; 및 가죽을 포함한다.
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 또 다른 예는 분비-기반 상품 및 이러한 상품의 제품이며 예를 들어 우유; 전유; 분유; 크림; 아이스크림; 치즈; 및 요구르트를 포함한다.
가치 있는 질소-풍부 및 탄소-풍부 축산물의 또 다른 예는 섬유-기반 상품이며 예를 들어 양모; 뿔; 및 가지진 뿔을 포함한다.
본 발명의 메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여는 배뇨 후 목초지의 소변 자리에 침착되는 배설된 소변 질소의 감소를 야기할 가능성이 있는 대사 효율의 예상치 못한 놀라운 개선을 야기한다. 소변 자리에 과잉 배설된 질소가 최적의 목초지 식물 효율에 필요한 것보다 클 때, 과잉 질소는 질산염(NO3-) 침출 및 암모니아(NH3), 아산화질소(N2O) 및 질소(N2) 휘발을 통해 손실된다. 아산화질소는 특히 이산화탄소의 298배에 달하는 지구 온난화 지수를 갖는 온실 가스로서 대기에 해를 끼친다. 지하수로의 질소 손실은 수생 생물상의 통제되지 않은 성장을 유발하여 생태계를 손상시키고 독성 조류 번식을 일으키며 수역의 부영양화를 유발할 수 있다.
단계적 투여 방법
본원에 기재된 조성물 또는 메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여는 적어도 하나의 메탄생성 억제제의 유효량의 적어도 하나의 용량을 투여하고, 임의로 얼마간의 유효 시간 간격 후에 적어도 하나의 메탄생성 억제제의 유효량의 적어도 하나의 연속 용량을 투여함으로써 수행될 수 있다.
시간 간격을 둔 메탄생성 억제제 사료 보충제의 연속 용량이 단계적 투여를 구성하는 것을 인지할 것이다. 또한, 연속 용량, 및 용량 사이의 시간 간격, 및 메탄생성 억제제는 용량별로, 및 시간 간격별로, 및 메탄생성 억제제별로 동일할 수 있거나, 이들은 상이한 용량 및/또는 상이한 시간 간격, 및/또는 상이한 메탄생성 억제제일 수 있다.
본원에 기재된 동물 사료 보충제 또는 조성물은 하나 이상의 유기할로겐-풍부 해양 거대조류 및 하나 이상의 유기황-풍부 식물(들) 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀-풍부 식물(들)을 조합함으로써 제조될 수 있다.
성분들은 각 성분의 원하는 양을 갖는 조성물을 수득하기에 적절한 양으로 조합된다. 각각의 성분은 원하는 생성물을 수득하기에 적합한 임의의 순서 및 조합으로 하나 이상의 다른 성분과 조합될 수 있다. 예를 들어, 각 성분은 혼합 또는 블렌딩에 의해 조합될 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 유기할로겐 화합물(들) 및 하나 이상의 유기황 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들)은 하나 이상의 유기할로겐 화합물(들) 및 하나 이상의 유기황 화합물(들) 및 하나 이상의 폴리페놀 화합물(들)을 동물 사료 상부에 배치함으로써 동물 사료와 조합될 수 있다(탑-드레싱).
메탄생성 억제제 사료 보충제는 건조 고체 형태, 예를 들어 분말 형태를 포함하는 형태로 단계적 투여에 도움이 되게 제조될 수 있으며, 의도된 완제품에 대한 제형의 유형에 따라 추가 가공 단계를 거칠 수 있다. 상기 방법은 성형 단계를 추가로 포함할 수 있으며, 여기서 혼합물은 성형, 가압, 분무 건조 또는 달리 바람직하게는 본원에 기재된 유형의 동물에 의한 소비에 적합한 치수 및/또는 텍스쳐를 갖는 형상(예를 들어, 바, 볼, 펠릿, 클러스터, 정제)으로 형성된다. 상기 방법은 동물 사료 또는 동물 메탄생성 억제제 사료 보충제를 주사기와 같은 특정 전달 장치에 수용하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방법은 조성물 또는 동물 사료를 동물의 위장(예를 들어, 반추 동물의 반추위)에 체류하도록 의도될 수 있는 볼루스 정제로 형성하는 것을 포함할 수 있다.
메탄생성 억제제 사료 보충제는 예를 들어 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 반추동물 체중의 백분율을 기준으로 한 용량으로 단계적으로 투여될 수 있다.
메탄생성 억제제 사료 보충제는 예를 들어 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 반추 동물에 의해 소비되는 사료 중량의 백분율을 기준으로 한 용량으로 단계적으로 투여될 수 있다.
메탄생성 억제제 사료 보충제의 단계적 투여는, 예를 들어, 1분; 1시간; 1일; 2일; 3일; 4일; 5일; 6일; 7일; 10일; 2주; 3주; 4주; 6주; 2개월; 3개월; 4개월; 6개월; 9개월; 및 12개월을 포함하는 그룹으로부터 선택된 연속 용량 사이의 적어도 하나의 시간 간격을 가질 수 있다.
본원에 기재된 모든 용도 및 방법은 순전히 비-치료적인 것으로 간주된다.
본 발명은 이제 하기 비제한적인 실시예만을 참조하여 기재될 것이다.
실시예 1 - 메탄생성 고세균 메타노코커스 마리팔루디스 ( Methanococcus maripaludis)에 의한 메탄 생산의 억제
i) 브로모포름 및 알리신
이 실험의 목적은 브로모포름 및 알리신이 메탄생성 고세균 메타노코커스 마리팔루디스 (Methanococcus maripaludis )에 의한 메탄 생산을 억제하는 능력에서 상승효과를 발휘하는지 여부를 알아보기 위한 것이었다.
이 실험을 위해, 991μl DMSO에 8.75μl 브로모포름을 첨가하여 100mM로 브로모포름을 제조하였다. 이를 10x 희석하여 10mM 용액을 생성하고, 추가로 희석하여 0.12mM 및 0.156mM 스톡 용액을 생성하였다. 48.6μl 알리신을 951.4μl DMSO에 첨가하여 300mM 스톡 용액을 만들고 32.5μl 알리신을 967.5μl DMSO에 첨가하여 200mM 스톡 용액을 만듦으로써 알리신 스톡 용액을 제조하였다. 실험은 다음과 같이 스크류 캡 Hungate 튜브에 5ml의 M141 배지(https://www.dsmz.de/microorganisms/medium/pdf/DSMZ_Medium141.pdf)를 추가한 다음 5μl 알리신 및/또는 5μl 브로모포름 또는 10μl DMSO를 첨가함으로써 설정되었다:
튜브 1: DMSO (10μl)
튜브 2: 브로모포름 (5μl 0.120mM) (120nM 최종) + 5μl DMSO
튜브 3: 브로모포름 (5μl 0.156mM) (156nM 최종) + 5μl DMSO
튜브 4: 알리신 (5μl 200mM) (200μM 최종) + 5μl DMSO
튜브 5: 알리신 (5μl 300mM) (300μM 최종) + 5μl DMSO
튜브 6: 브로모포름 (5μl 0.120mM) (120nM 최종) + 알리신 (5μl 200mM) (200μM 최종)
튜브 7: 브로모포름 (5μl 0.120mM) (120nM 최종) + 알리신 (5μl 300mM) (300μM 최종)
튜브 8: 브로모포름 (5μl 0.156mM) (156nM 최종) + 알리신 (5μl 200mM) (200μM 최종)
튜브 9: 브로모포름 (5μl 0.156mM) (156nM 최종) + 알리신 (5μl 300mM) (300μM 최종)
시험 물질을 첨가한 후, 밤새 M. 마리팔루디스 배양액 500μl를 각 반응 튜브에 첨가하였다. 각 튜브를 80% H2/20% CO2로 240kPa로 가스를 공급하고 37℃에서 24시간 동안 배양하였다.
24시간 배양 후 압력계를 사용하여 튜브 내부의 압력을 측정하였다. 5몰의 H2/CO2가 1몰의 CH4를 생성하기 위해 소비된다는 점을 감안하여, 관찰된 압력 강하를 사용하여 대조 및 시험 반응에 의한 메탄의 양을 계산하고, 이로부터 억제율 퍼센트를 계산하였다.
ii) 브로모포름 및 유기황 및 폴리페놀을 포함하는 분말(NXRH214 분말)
이 실험의 목적은 브로모포름 및 유기황 및 폴리페놀을 포함하는 분말이 메탄생성 고세균 메타노코커스 마리팔루디스 ( Methanococcus maripaludis )에 의한 메탄 생산을 억제하는 능력에서 상승효과를 발휘하는지 여부를 알아보기 위한 것이었다.
이 실험을 위해, 8.75μl 브로모포름을 991μl DMSO에 첨가하여 100mM로 브로모포름을 제조하였다. 이를 10x 희석하여 10mM 용액을 생성하고, 추가로 희석하여 0.10mM 및 0.156mM 스톡 용액을 생성하였다. 샘플은 245mg NXRH214 분말을 35ml M141 배지 (https://www.dsmz.de/microorganisms/medium/pdf/DSMZ_Medium141.pdf)에 첨가하여 7mg/ml 스톡 용액을 생성함으로써 제조하였다. NXRH214 분말은 93:7 비율의 마늘 분말(알리신)과 시트러스 추출물(폴리페놀 플라보노이드 믹스)이며, 여기서 플라보노이드 믹스는 주로 나린진 및 네오헤스페리딘을 포함한다.
반응 튜브는 다음과 같이 설정하였다:
튜브 1: 0ml NXRH214 (NXRH214 없음) + 5ml M141 + 5μl DMSO
튜브 2: 1ml NXRH214 (1.4μg/ml NXRH214) + 5ml M141 + 5μl DMSO
튜브 3: 1.5ml NXRH214 (2.8μg/ml NXRH214) + 3.5ml M141 + 5μl DMSO
튜브 4: 0ml NXRH214 (NXRH214 없음) + 5ml M141 + 5μl 0.1mM 브로모포름 (100nM 브로모포름)
튜브 5: 1ml NXRH214 (1.4μg/ml NXRH214) + 5ml M141 + 5μl 0.1mM 브로모포름(100nM 브로모포름)
튜브 6: 1.5 ml NXRH214 (2.8μg/ml NXRH214) + 3.5ml M141 + 5μl 0.1mM 브로모포름(100nM 브로모포름)
튜브 7: 0ml NXRH214 (NXRH214 없음) + 5ml M141 + 5μl 0.156mM 브로모포름 (156nM 브로모포름)
튜브 8: 1ml NXRH214(1.4μg/ml NXRH214) + 5ml M141 + 5μl 0.156mM 브로모포름 (156nM 브로모포름)
튜브 9: 1.5ml NXRH214 (2.8μg/ml NXRH214) + 3.5ml M141 + 5μl 0.156mM 브로모포름 (156nM 브로모포름)
시험 물질의 첨가 후, 밤새 M. 마리팔루디스 배양액 500μl를 각 반응 튜브에 첨가하였다. 각 튜브를 80% H2 / 20% CO2로 240kPa로 가스를 공급하고 37℃에서 24시간 동안 배양하였다.
24시간 배양 후 압력계를 사용하여 튜브 내부의 압력을 측정하였다. 5몰의 H2/CO2가 1몰의 CH4를 생성하기 위해 소비된다는 점을 감안하여, 관찰된 압력 강하를 사용하여 대조 및 시험 반응에 의한 메탄의 양을 계산하고, 이로부터 억제율 퍼센트를 계산하였다.
실험 결과
i) 브로모포름 및 알리신 및 ii) 브로모포름 및 유기황 및 폴리페놀을 포함하는 분말(즉, NXRH214 분말)에 대한 실험 결과를 각각 도 1과 도 2 및 표 1과 표 2에 나타내었다.
결과는 브로모포름 및 알리신을 포함하는 조성물의 명확한 상승효과를 보여주며, 이는 두 성분 중 하나만으로 입증된 가스 억제율(%)을 분명히 초과한다.
결과는 또한 브로모포름 및 유기황 및 폴리페놀을 포함하는 분말(즉, NXRH214 분말)을 포함하는 조성물의 명확한 상승효과를 보여주며, 이는 DMSO의 존재하에서 어느 한 성분에 의해 입증된 가스 억제율(%)을 분명히 초과한다. NXRH214 분말은 알리신 및 폴리페놀 화합물, 보다 구체적으로는 바이오플라보노이드 화합물 나린진 및 네오헤스페리딘을 포함한다. 따라서, 브로모포름, 유기황 화합물 및 폴리페놀을 포함하는 조성물은 또한 메탄 생산을 효과적으로 억제하는데 사용될 수 있다.
결론
상기 데이터는 유기할로겐(즉, 브로모포름)이 유기황(즉, 알리신)과 단독으로 또는 폴리페놀(즉, 시트러스 추출물의 바이오플라보노이드)과 병용하여 조합될 때 높은 메탄생성균 억제율(%)을 명확하게 보여준다.
실시예 2
스위스의 Mootral™ SA에 의해 개발 및 판매되는 사료 보충제 Mootral™, 및 해양 거대조류 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata)의 제제를 다양한 비율로 혼합하고 다양한 용량과 다양한 시간 간격으로 완전히 풀을 먹인 식단에 양에게 단계적으로 투여하였다. 배출된 메탄, 혈액, 신체 및 대변을 측정하고 보충제를 제공받지 않은 대조군 동물과 비교하였다.
본 개시내용은 또한 다음의 단락들에 의해 기재될 수
있다
A. 적어도 한 종류의 메탄생성 억제제의 유효량을 상기 반추 동물에게 투여하는 단계를 포함하여, 반추 동물에서 배설된 질소를 감소시키고/시키거나 배출된 메탄을 감소시키고/시키거나 질소-풍부 및 탄소 풍부 물질을 증가시키는 방법.
B. 단락 A에 있어서, 상기 메탄생성 억제제가 유기할로겐 화합물; 유기할로겐-풍부 해양 거대조류; 유기황 화합물; 유기황-풍부 식물; 폴리페놀 화합물; 및 폴리페놀-풍부 식물을 포함하는 그룹으로부터 선택되는 방법.
C. 청구항 단락 B에 있어서, 상기 유기할로겐 화합물이 CH3Cl; CH3Br; CH3I; CH2Cl2; CH2Br2; CH2I2; CHCl3; CHBr3; CHI3; CCl4; CBr4; CH2ClBr; CH2ClI; CH2BrI; CHBr2Cl; CHBrI2; CHBrClI; CHBr2I; CHBrCl2 ; CH3CH2Br; CH3CH2I; CH3CH2CH2I; CH3(CH2)3I; CH3(CH2)4Br; CH3(CH2)4I; (CH3)2CHI; CH3CH2CH(CH3)I; (CH3)2CHCH2I; BrCH2CH2Br; ClCH=CCl2; 및 CH3CH2CH2CH2I를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 방법.
D. 청구항 단락 B에 있어서, 상기 유기할로겐-풍부 해양 거대조류가 아스파라곱시스 아르마타(Asparagopsis armata); 아스파라곱시스 탁시포르미스(Asparagopsis taxiformis); 딕티요타 종(Dictyota species); 외도고늄 종(Oedogonium species); 울바 종(Ulva species); 및 클라도포라 파텐티라메아(Cladophora patentiramea)를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 방법.
E. 청구항 단락 B에 있어서, 상기 유기황 화합물이 유기황 2차 대사산물; 알리신(C6H10S2O); 디알릴 설파이드(C6H10S); 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 및 알릴 머캅탄(C3H6S)을 포함하는 그룹으로부터 선택되는 방법.
F. 단락 B에 있어서, 상기 유기황-풍부 식물이 알리움 사티붐; 알리움 암펠로프라숨; 및 알리움 세파를 포함하는 그룹으로부터 선택된 알리움 종인 방법.
G. 단락 B에 있어서, 상기 폴리페놀 화합물이 플라보노이드; 바이오플라보노이드; 비-바이오플라보노이드를 포함하는 그룹으로부터 선택되고; 적어도 하나의 폴리페놀 화합물이, 예를 들어, 적어도 하나의 바이오플라보노이드; 안토크산틴; 플라본; 플라보놀; 플라바논; 플라바노놀; 플라반; 안토시아니딘; 이소플라 반; 네오플라반 안토크산틴; 이소플라본; 프로안토시아니딘; 페놀산; 하이드록시신남산; 쿠마린; 스틸베노이드; 안트라퀴논; 리그난; 리그닌; 탄닌; 폴리페놀 단백질; 카테킨; 루틴; 아카세틴; 제니스테인; 캠페롤; 갈로카테킨; 카테킨 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 퀘르세틴; 할로카테킨; 갈로카테신 갈레이트; 에피카테킨; 에피갈로카테킨; 에피카테킨 갈레이트; 에피갈로카테신 갈레이트; 캠페롤; 퀘르세틴; 나린진; 네오헤스페리딘; 에리오시트린; 이소나린진; 나린제닌; 헤스페리딘; 로이폴린; 디오스민; 디디민; 헤스페레틴; 폰시린; 에피카테킨; 갈로카테킨; 에피갈로카테킨; 쿠마르산; 신남산; 갈산; 엘라그산; 프로토카테추산; 클로로겐산; 카페산; 페룰산; 푸니칼라진; 및 푸니칼린을 포함할 수 있는 방법.
H. 단락 B에 있어서, 상기 폴리페놀-풍부 식물이 알리움 종; 브라시카 종; 카멜리아 종; 캅시쿰 종; 시트러스 종; 시트러스 오란티움; 쿠쿠미스 종; 말루스 종; 무사 종; 파세올루스 종; 프루누스 종; 푸니카 종; 피루스 종; 솔라눔 종; 및 박시니움 종을 포함하는 그룹으로부터 선택되는 방법.
I. 반추 동물에게 적어도 한 종류의 메탄생성 억제제의 유효량을 단계적으로 투여함을 포함하여, 반추 동물에서 배설된 질소를 감소시키고/시키거나 배출된 메탄을 감소시키고/시키거나 질소-풍부 및 탄소 풍부 물질을 증가시키는 방법.
J. 단락 I에 있어서, 상기 단계적 투여가 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택된 상기 반추 동물의 중량의 백분율인 메탄생성 억제제의 적어도 1회 용량을 갖는 방법.
K. 단락 I에 있어서, 상기 단계적 투여가 0.01%, 0.03%, 0.05%, 0.075%, 0.1%; 0.2%; 0.3%; 0.4%; 0.5%; 0.6%; 0.7%; 0.8%; 0.9%; 1.0%; 1.1%; 1.2%; 1.3%; 1.4%; 1.5%; 2.0%; 2.5%; 3.0%; 3.5%; 4.0%; 4.5%; 5.0%; 및 10%를 포함하는 그룹으로부터 선택된 상기 반추 동물의 중량의 백분율인 메탄생성 억제제의 적어도 1회 용량을 갖는 방법.
L. 단락 I 내지 K 중 어느 하나에 있어서, 상기 단계적 투여가 1분; 1시간; 1일; 2일; 3일; 4일; 5일; 6일; 7일; 10일; 2주; 3주; 4주; 6주; 2개월; 3개월; 4개월; 6개월; 9개월; 및 12개월을 포함하는 그룹으로부터 선택된 연속 용량 사이에 적어도 하나의 간격을 갖는 방법.
Claims (19)
- 유기할로겐 화합물 및 유기황 화합물을 포함하는, 메탄 배출 감소를 위한 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 유기할로겐 화합물이 유기브롬 화합물인, 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 유기할로겐이 브로모포름인, 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유기황 화합물이 식물의 알리움 종(Allium species)으로부터 유래하는, 조성물.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유기황 화합물은 알리신(C6H10S2O); 디알릴 설파이드(C6H10S); 디알릴 디설파이드(C6H10S2); 및 알릴 머캅탄(C3H6S)인, 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유기황 화합물은 알리신(C6H10S2O)인, 조성물.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유기할로겐 대 유기황의 비율이 1:10 내지 1:3500인, 조성물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유기할로겐 대 유기황의 비율이 1:1000 내지 1:2500인, 조성물.
- 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 적어도 하나의 폴리페놀 화합물을 추가로 포함하는, 조성물.
- 제9항에 있어서, 상기 적어도 하나의 폴리페놀 화합물이 적어도 하나의 바이오플라보노이드를 포함하는, 조성물.
- 제9항에 있어서, 상기 적어도 하나의 폴리페놀 화합물이 나린진, 네오헤스페리딘 또는 이들의 조합을 포함하는, 조성물.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 하나 이상의 메탄생성균(methanogen)을 억제하기 위한, 조성물.
- 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 동물의 대사 효율을 개선하기 위한, 조성물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 동물 사료.
- 메탄 배출을 감소시키고/시키거나 하나 이상의 메탄생성균을 억제하고/하거나 동물의 대사 효율을 개선하기 위한, 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물 또는 제14항에 따른 동물 사료의 용도.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물 또는 제14항의 동물 사료를 동물에게 투여함을 포함하여, 메탄 배출을 감소시키는 방법.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물 또는 제14항의 동물 사료를 동물에게 투여함을 포함하여, 하나 이상의 메탄생성균을 억제하는 방법.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 조성물 또는 제14항의 동물 사료를 동물에게 투여함을 포함하여, 동물의 대사 효율을 개선하는 방법.
- 제16항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 동물이 반추 동물이고, 바람직하게는 상기 반추 동물이 소, 염소 또는 양인, 방법.
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