KR20230134448A - 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물 - Google Patents
환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 환삼덩굴 추출물과 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물, 호흡기 건강 개선용 사료 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물에 대한 것이다.
본 발명에 따른 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물은 난알부민으로 유도된 천식 동물 모델의 혈중 호산구 수를 감소시키고, 혈청 내 총 IgE 수준을 감소시키며, 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도를 감소시키므로, 호흡기 건강 개선용 식품 조성물, 호흡기 건강 개선용 사료 조성물, 알레르기성 호흡기 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물, 또는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 사료 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
본 발명에 따른 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물은 난알부민으로 유도된 천식 동물 모델의 혈중 호산구 수를 감소시키고, 혈청 내 총 IgE 수준을 감소시키며, 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도를 감소시키므로, 호흡기 건강 개선용 식품 조성물, 호흡기 건강 개선용 사료 조성물, 알레르기성 호흡기 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물, 또는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 사료 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 환삼덩굴 추출물과 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물, 호흡기 건강 개선용 사료 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물에 대한 것이다.
알레르기성 호흡기 질환은 알레르기 반응이 관여하는 질환 중 호흡기 질환을 뜻하며, 대표적으로 알레르기성 천식 (또는 ‘기관지 천식’이라고도 함), 기관지염 또는 알레르기성 비염이 있다. 기관지 천식 (Bronchial asthma)은 폐 속에 있는 기관지가 아주 예민해진 상태로, 때때로 기관지가 좁아져서 숨이 차고 기침을 심하게 하는 증상을 나타내는 병을 말하며, 기관지의 알레르기 염증 반응 때문에 발생하는 알레르기 질환이다. 최근 서구화 및 식습관의 변화에 따라 기관지 천식의 유병률은 증가하고 있는 추세이며, 이에 따른 진료 및 치료비용 역시 증가하고 있다. 시장조사/컨설팅기관 그랜드 뷰 리서치의 보고에 의하면 기관지 천식 환자가 전 세계에 약 3억 3천명 이상 (약 4.83%의 발병률)인 것으로 추정하고 있으며, 이 중에서 매년 34만 명 이상이 사망에 이르는 것으로 보고되어 있어, 공중보건학 측면에서 세계적인 관심 질환 중 하나이다.
기관지염 (Bronchitis)은 폐의 기관지에 생기는 염증으로, 90% 이상의 원인이 바이러스 감염인 급성 기관지염과 달리, 대기 오염이나 석탄 채굴, 곡물 처리, 직물 제조, 축산, 금속 주조 등의 직종에서 자극이 강한 먼지의 만성 흡입 등이 원인으로 작용하는 만성 기관지염은 운동 시의 천명음과 호흡 곤란, 낮은 산소 포화도를 나타내며, 2년이 넘도록 가래, 기침이 끊이지 않고, 매년 3개월 이상 지속된다. 45 세 이상의 사람, 흡연자, 대기 오염이 심한 지역에 거주하는 사람과 천식이 있는 사람은 만성 기관지염에 걸릴 위험이 더 높은 것으로 알려져 있다.
알레르기성 비염 (Allergic rhinitis)은 코 점막이 특정 물질에 대하여 과민반응을 나타내는 것으로 알레르기를 일으키는 원인 물질 (알레르겐 또는 항원)이 코 점막에 노출된 후 자극 부위로 비만세포, 호산구를 비롯한 여러 종류의 IgE 항체를 매개로 하는 염증세포가 몰려들어 이들이 분비하는 다양한 매개물질에 의하여 염증반응이 발생하는 질환이다. 연속적으로 일어나는 발작적인 재채기, 맑은 콧물, 코막힘 등의 세 가지 주요 증상을 특징으로 하며, 이 세 가지 증상 중 두 가지 이상의 증상을 가지고 있을 때 알레르기 비염을 의심할 수 있다. 특징적인 증상 외에도 코 주위 가려움, 두통, 후각 감퇴 등의 증상이 동반될 수 있으며 합병증으로 중이염, 부비동염, 인후두염 등이 동반될 수 있다.
이와 같은 알레르기성 호흡기 질환은 유전적인 인자와 환경적인 인자가 상호 작용하여 발병하며, 대개의 경우 완치가 쉽지 않은 대표적인 난치성 만성 질환이다. 숙주 요인으로 유전 인자, 비만, 성별 등이 있으며, 환경인자로 먼지 진드기, 꽃가루, 애완동물, 호흡기 감염바이러스, 운동, 아스피린 등의 약물, 흡연, 대기오염, 화학물질, 식품, 스트레스가 원인이 되고 있다. 알레르기 피부 단자검사, 알레르기 특이항체검사, 알레르겐 기관지 천식유발 검사 등의 방법으로 원인을 찾을 수 있으나, 원인 규명을 완전하게 해내는 것은 어렵다.
현재, 알레르기성 호흡기 질환의 치료에 사용되고 있는 약물은 스테로이드 제제, 항히스타민제, 기관지 확장제 또는 항생제 등이 있다. 스테로이드 제제와 항생제의 경우, 면역반응 및 염증반응 억제를 통하여 알레르기성 질환의 치료에 사용되고 있으며, 기관지 확장제의 경우, 호흡곤란 등의 임상증상 발현 시에 이를 상쇄시킴으로써 사용되고 있다. 그러나, 이러한 약물은 면역억압, 골수생성억제 등의 부작용을 비롯한 항생제 내성, 그리고 장기사용 시의 부작용이 발견되어 치료제로서 사용이 매우 제한적이다. 따라서 이러한 부작용들을 극복하고 독성이 적으며, 치료 효과가 탁월한 천연물 혹은 새로운 화합물의 개발이 필요한 실정이다.
한편, 환삼덩굴 (Humulus japonicus)은 들이나 산에서 흔히 볼 수 있는 쌍떡잎식물 쐐기풀목 삼과의 덩굴성 한해살이풀로, 한방에서는 율초라 불리고 있다. 상기 환삼덩굴은 혈액순환을 촉진하므로 손발 저림, 폐쇄동맥경화 등의 혈액순환 장애, 및 고혈압, 뇌졸중 등과 같은 각종 혈관질환의 개선에 효능이 있다고 알려져 있고, 신경을 안정시켜주어 스트레스나 화병 예방에 도움을 주며, 아토피의 예방과 증상 완화에도 도움을 준다고 알려져 있다.
또한, 타임 (Thymus vulgaris)은 꿀풀과의 키가 작은 목본 식물로서 유럽과 아프리카에 분포하며, 민간요법으로 항염증제, 거담제, 항균제, 구취제, 진정 및 발한 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
또한 자주천인국 (Echinacea purpurea)은 국화과의 여러해살이 식물로서 북미가 원산이며, 꽃이 화려해서 전 세계적으로 관상용으로 널리 재배되고 있으며, 면역력을 증강시켜 감기나 각종 바이러스 감염의 치료제로도 사용되고 있다.
본 발명자들은 환삼덩굴 복합추출물이 호흡기 건강 개선 효과가 우수하고, 특히 알레르기성 호흡기 질환에 우수한 효능이 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 목적은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 환삼덩굴 추출물 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 사료 조성물을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 호흡기 건강 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 환삼덩굴은 환삼덩굴의 줄기, 잎 또는 지상부 전초일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 타임은 타임의 줄기, 잎 또는 지상부 전초일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 자주천인국은 자주천인국의 줄기, 잎 또는 지상부 전초일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 환삼덩굴 추출물, 타임 추출물 및 자주천인국 추출물은 각각 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합용매에 의한 추출물일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는 상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 혈중 호산구 수 감소 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 혈청 내 IgE 수치 감소 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 감소 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 호흡기 건강 개선은 알레르기성 호흡기 질환의 개선일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 엑스제, 젤리 제형, 티백 제형 또는 음료 제형일 수 있다.
상기한 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 호흡기 건강 개선용 사료 조성물을 제공한다.
상기한 또 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 알레르기성 호흡기 질환은 알레르기성 천식, 알레르기성 비염, 알레르기성 비결막염, 부비동염, 과민성 폐렴 및 기관지염 중에서 선택되는 1종 이상일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 약학 조성물은 경구용 제제일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 의하면, 상기 경구용 제제는 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 트로키제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 또는 에어로졸일 수 있다.
상기한 또 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물을 제공한다.
상기한 또 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 사료 조성물로서, 상기 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나, 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 개선용 사료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 인간, 또는 인간을 제외한 동물에게 상기 조성물을 경구 투여하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 알레르기성 호흡기 질환 치료용 의약, 또는 동물용 의약 제조를 위한 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물의 신규 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 조성물은 난알부민으로 유도된 천식 동물 모델의 혈중 호산구 수를 감소시키고, 혈청 내 총 IgE 수준을 감소시키며, 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도를 감소시키는 등 호흡기 건강 개선 효과가 우수하므로, 호흡기 건강 개선용 식품 조성물, 호흡기 건강 개선용 사료 조성물, 알레르기성 호흡기 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물, 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 제조예 1에 따른 환삼덩굴 추출물을 HPLC 분석한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 랫드 유래 비만세포에 환삼덩굴 추출물, 타임 추출물, 자주천인국 착즙액, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 복합추출물을 처리함과 동시에, 알레르기 반응을 유도한 후, Th2 사이토카인인 IL-4의 분비 수준을 평가하였다. 그 결과, 알레르기 유발대조군의 IL-4 생산량을 100%로 했을 때 환삼덩굴 추출물만을 처리한 시험군은 감소 효과가 전혀 없는 반면, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 복합추출물을 처리한 시험군은 유발대조군에 비해 IL-4 분비량이 현저히 감소하였음을 확인하였다. 특히, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 복합추출물은 상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 혼합에 의해 상승효과가 나타난 것이라고 판단하였다.
또한, 본 발명의 발명자들은 마우스 대식세포주에 환삼덩굴 추출물, 타임 추출물, 자주천인국 착즙액, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 복합추출물을 각각 처리함과 동시에 LPS를 처리하여 염증반응을 유도한 후, NO 생성량을 측정하였다. 그 결과 염증반응 유발대조군의 NO 생성량을 100%로 했을 때 환삼덩굴 추출물만을 처리한 시험군은 감소 효과가 전혀 없는 반면, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 복합추출물을 처리한 시험군은 유발대조군에 비해 NO 생성량이 현저히 감소하였음을 확인하였다. 특히, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 복합추출물은 상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액 (또는 추출물)의 혼합에 의해 상승효과가 나타난 것이라고 판단하였다.
또한, 본 발명의 발명자들은 알레르기성 호흡기 질환 동물 모델에 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 복합추출물을 경구 투여한 후, 혈중 호산구 비율, 혈청 내 총 IgE 농도 및 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도를 평가하였다. 그 결과, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 복합추출물의 경구 투여에 의한 알레르기성 호흡기 질환에 현저한 치료 효능이 있음을 확인하였다.
본 명세서에서, “환삼덩굴 복합추출물”은 환삼덩굴 추출물과 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물을 의미한다.
본 명세서에서, “호흡기 건강 개선 효과”는 혈중 호산구 수 감소, 혈청 내 IgE 수치 감소, 및 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 감소 중에서 선택되는 하나 이상의 효과로 인한 것일 수 있고, 더 나아가 알레르기성 호흡기 질환의 개선 효과일 수 있다.
본 발명은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
상기 조성물은 환삼덩굴 추출물만을 단독으로 함유하는 경우 호흡기 건강 개선 효능이 유의하게 나타나지 않지만, 환삼덩굴 추출물과 타임 추출물, 또는 자주천인국 착즙액 또는 추출물을 혼합한 복합물로서 함유하는 경우 호흡기 건강 개선 효능에 대한 상승효과가 나타난다.
상기 환삼덩굴 추출물은 환삼덩굴의 줄기, 잎 또는 지상부 전초의 추출물일 수 있으나, 경구 투여에 의한 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환 치료 효능은 지상부 전초의 추출물이 더욱 뛰어나다.
상기 타임 추출물은 타임의 줄기, 잎 또는 지상부 전초의 추출물일 수 있으나, 경구 투여에 의한 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환 치료 효능은 지상부 전초의 추출물이 뛰어나다.
한편, 상기 타임 (Thyme)은 선백리향으로 알려져 있는 티무스 불가리스 (Thymus vulgaris), 티무스 지기스 (Thymus zygis) 또는 이들의 혼합물로서, 백리향 (Thymus quinquecostatus)과 구별된다. 타임 (Thyme)은 백리향에 비해 호흡기 건강 개선 효과, 특히 알레르기성 호흡기 질환의 치료 효과가 현저히 우수하다.
상기 자주천인국 (Echinacea purpurea) 착즙액 또는 추출물은 자주천인국의 잎, 줄기 또는 이를 포함하는 지상부 전초의 착즙액 또는 추출물일 수 있으나, 경구 투여에 의한 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환의 치료 효능은 지상부 전초의 착즙액이 더욱 뛰어나다.
상기 자주천인국의 착즙액은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합 용매에 의한 자주천인국 수성 추출물이나, 또는 이들을 헥산, 에틸아세테이트 등으로 분획한 지용성 추출물에 비해 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환에 대한 치료 효능이 더욱 뛰어나다.
본 발명에서 사용되는 용어 “착즙액”은 자주천인국 줄기, 잎 또는 지상부 전초를 압착, 또는 분쇄 및 압착하여 얻은 착즙액, 이들로부터 분획한 분획물, 이들 착즙액 또는 분획물을 추가적으로 농축한 농축물, 이를 정제 또는 분리한 정제물도 포함하고, 상기 착즙액, 분획물, 농축물 또는 정제물을 건조한 건조물 또는 그를 분쇄한 분말을 포함하는 의미로 사용된다.
상기 자주천인국 착즙액 1 중량부를 제조하기 위해 건조되지 않은 자주천인국 약 20 내지 100 중량부, 바람직하게는 30 내지 60 중량부가 필요하고, 상기 자주천인국 착즙액 1 중량부를 제조하기 위해 자주천인국 착즙액 10 내지 50 중량부, 바람직하게는 15 내지 30 중량부가 필요하다.
상기 각 추출물을 추출하는 추출용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합용매일 수 있다.
상기 물은 식품 제조에 적합할 경우 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 지하수, 정제수, 증류수, 탈이온수 등이 이용될 수 있다.
상기 탄소수 1 내지 4의 알코올은 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올 또는 노말-부탄올 등이 이용될 수 있고, 바람직하게는 에탄올이다.
상기 혼합용매는 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 물과 에탄올의 혼합 용매인 경우 5 내지 95 중량% 에탄올 수용액, 10 내지 90 중량% 에탄올 수용액, 20 내지 80 중량% 에탄올 수용액, 30 내지 70 중량% 에탄올 수용액이 이용될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 추출용매가 20 내지 80 중량% 에탄올 수용액, 구체적으로는 30 내지 70 중량% 에탄올 수용액인 것이 호흡기 건강 개선에 더욱 바람직하게 작용할 수 있다.
상기 물 추출물의 제조는 특별히 한정할 필요는 없으나 상기 추출원료를 10 내지 100 ℃의 물로 2 내지 60 시간 동안 추출하여 제조할 수 있다.
상기 알코올 추출물, 또는 물과 알코올의 혼합 용매의 추출물의 제조는 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 상기 추출원료를 각각 추출용매와 1 : 10 내지 30, 바람직하게는 1 : 10 내지 20, 더욱 바람직하게는 1 : 14 내지 20의 중량비로 혼합하여 65 내지 95 ℃, 바람직하게는 70 내지 90 ℃, 더욱 바람직하게는 75 내지 85 ℃에서 1 내지 10시간, 바람직하게는 5 내지 10시간 동안 환류추출한 후 여과 및 감압농축을 수행하여 제조한 것일 수 있다. 상기 중량비가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 추출물에 추출원료의 유효성분이 적은 양으로 추출될 수 있다.
상기 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합용매에 의한 추출물은, 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합용매에 의한 추출물을 유기용매로 재분획한 분획물을 포함한다. 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 헥산, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 디에틸에테르 등에서 선택되는 하나 이상의 유기용매일 수 있고, 바람직하게는 헥산 또는 에틸아세테이트일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 “추출물”은 상기 추출용매를 이용하여 환삼덩굴, 타임 및 자주천인국에 포함된 성분을 추출한 추출물 (착즙액을 포함함), 이들로부터 분획한 분획물, 이들 추출물 또는 분획물을 추가적으로 농축한 농축물, 이를 정제 또는 분리한 정제물도 포함하고, 상기 추출물, 분획물, 농축물 또는 정제물을 건조한 건조물 또는 그를 분쇄한 분말을 포함하는 의미로 사용된다.
상기 정제물의 제조를 위해 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시키거나, 또는 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 부가할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 “복합추출물”은 1) 환삼덩굴 추출물, 및 타임 추출물 또는 자주천인국 추출물 (또는 착즙액)의 혼합물, 또는 2) 환삼덩굴, 및 타임 또는 자주천인국을 먼저 혼합한 후 이를 추출한 혼합물의 추출물을 모두 의미하는 것일 수 있다. 상기 복합추출물은 상기 1) 번과 같이 각각의 추출물 (또는 착즙액)을 따로 제조한 후 혼합하여 제조하는 것이 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환의 치료 효능 면에서 더욱 바람직하다.
본 발명의 환삼덩굴 복합추출물은 난알부민으로 유도된 천식 동물 모델의 혈중 호산구 수를 감소시키고, 혈청 내 총 IgE 수준을 감소시키며, 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도를 감소시킴으로써 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환에 대한 개선 또는 치료 효능을 나타낸다.
특히, 본 발명의 환삼덩굴 복합추출물은 추출물 (또는 착즙액)들 간의, 및/또는 추출물 (또는 착즙액) 내 유효성분들 간의 상승효과 또는 협업작용에 의하여 각각의 식물의 단독 추출물 (또는 착즙액)에 비해 더욱 우수한 혈중 호산구 수 감소 효능, 혈청 내 총 IgE 수준 감소 효능, 또는 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 감소 효능이 있음을 구체적으로 확인하였다.
구체적으로, 본 발명의 환삼덩굴 복합추출물은 환삼덩굴 단독 추출물에 비해 IL-4 생성 억제능 및 일산화질소(NO) 생성 억제능이 현저히 높아, 더욱 우수한 호흡기 건강 개선 효능을 나타낼 수 있다.
상기 복합추출물에 있어서, 상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는 상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비이고, 바람직하게는 5 : 95 내지 95 : 5 중량비이며, 특별히 한정할 필요는 없으나 10 : 90 중량비, 20 : 80 중량비, 30 : 70 중량비, 40 : 60 중량비, 50 : 50 중량비, 60 : 40 중량비, 70 : 30 중량비, 80 : 20 중량비, 90 : 10 중량비 또는 이들 사이의 임의의 범위일 수 있다. 호흡기 건강 개선 효능 면에서 바람직하게는 10 : 90 내지 60 : 40의 중량비이고, 더욱 바람직하게는 10 : 90 내지 50 : 50의 중량비이며, 더욱 바람직하게는 10 : 90 내지 30 내지 70의 중량비이고, 더욱 바람직하게는 10 : 90 내지 20 내지 80의 중량비일 수 있다. 상기 환삼덩굴 추출물에 대한 타임 추출물, 또는 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율이 상기 범위일 때 호흡기 건강 개선 효능이 더욱 강화될 수 있다.
한편, 본 발명의 “식품 조성물”은 유효성분으로 환삼덩굴 복합추출물 이외에, 식품 제조에 통상적으로 사용되는 식품의 기준 및 규격 (“식품공전”)에 기재된 식품으로 사용 가능한 식품 원료, 식품첨가물 공전에 기재된 식품첨가물을 포함할 수 있다.
상기 식품 조성물은 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 탄수화물 및 향미제를 포함할 수 있다. 상기 탄수화물은 단당류, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 이당류, 예를 들어 말토스, 설탕, 유당 등; 올리고당 또는 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 물엿, 사이클로덱스트린 등; 당알코올, 예를 들어 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제는 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)] 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
상기 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 식품 조성물을 제조하는 경우 환삼덩굴 추출물, 및 타임 추출물 또는 자주천인국 착즙액의 복합추출물은 알레르기성 호흡기 질환 개선 효능을 나타내는 함량이면 특별히 한정할 필요는 없으나, 예를 들어 0.1 내지 99 중량%, 0.5 내지 95 중량%, 1 내지 90 중량%, 2 내지 80 중량%, 3 내지 70 중량%, 4 내지 60 중량%, 5 내지 50 중량%로 포함될 수 있다.
상기 식품 조성물에서 유효성분인 환삼덩굴 복합추출물은 섭취자의 상태, 체중, 질병의 유무나 정도 및 기간에 따라 다르지만, 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들어 1 일 투여량을 기준으로 1 일 10 내지 5,000 mg, 바람직하게는 50 내지 4,000 mg, 더욱 바람직하게는 100 내지 3,000 mg, 가장 바람직하게는 200 내지 2,000 mg일 수 있고, 투여 횟수는 특별히 한정할 필요는 없으나 1 일 3 회 내지 1 주일에 1 회의 범위 내에서 통상의 기술자가 조절할 수 있다. 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있다.
상기 식품 조성물은 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 엑스제, 젤리 제형, 티백 제형 또는 음료 제형일 수 있다.
또한 일반 식품에 호흡기 건강 개선 기능성, 특히 알레르기성 호흡기 질환 개선 기능성을 부여하기 위하여 상기 환삼덩굴 복합추출물을 첨가할 수 있다. 첨가가 가능한 식품은, 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어 식품위생법 제7조에 따른 식품의 기준 및 규격 (“식품공전”)에 예시된 과자류, 빵 또는 떡류, 코코아가공품류 또는 초콜릿류, 식육 또는 알가공품, 어육가공품, 두부류 또는 묵류, 면류, 다류, 커피, 음료류, 특수용도식품, 장류, 조미식품, 드레싱류, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 주류, 건포류, 기타 식품류 등에 첨가될 수 있다. 또한 축산물위생관리법 제4조에 따른 축산물의 가공기준 및 성분규격 (“축산물공전”)에 예시된 유가공품, 식육가공품 및 포장육, 알가공품에 첨가될 수 있다.
한편 상기 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물은 호흡기 건강 개선용 건강기능식품, 보다 구체적으로는 알레르기성 호흡기 질환 개선용 건강기능식품, 예를 들어 알레르기성 천식 또는 알레르기성 비염 개선용 건강기능식품으로 이용될 수 있다.
상기 “건강기능식품”은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 법적 기준에 따라 제조 (가공을 포함)한 식품 (건강기능식품에 관한 법률 제3조 제1호)을 말한다. 상기 “건강기능식품”은 국가마다 용어나 범위에 차이가 있을 수 있으나, 미국의 “식이 보충제 (Dietary Supplement)”, 유럽의 “식품 보충제 (Food Supplemnet)”, 일본의 “보건기능식품” 또는 “특정보건용식품 (Food for Special Health Use, FoSHU)”, 중국의 “보건식품” 등에 해당할 수 있다.
상기 식품 조성물 또는 건강기능식품은 식품첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, 식품첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한 “식품첨가물공전”의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 따른다.
본 발명의 다른 측면은 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 “환삼덩굴 복합추출물” 및 “호흡기 건강 개선”에 대해서는 이미 상술하였으므로, 과도한 중복을 피하기 위해 그 기재를 생략한다.
상기 “사료 조성물”은 유효성분으로 환삼덩굴 복합추출물 이외에, 식품의 기준 및 규격 (“식품공전”)에 기재된 식품으로 사용가능한 식품 원료, 식품첨가물 공전에 기재된 식품첨가물을 사용할 수 있고, 식품으로 사용가능한 식품 원료 또는 식품첨가물이 아니더라도 “사료 등의 기준 및 규격” 별표 1의 단미사료의 범위에 해당하는 원료, 별표 2의 보조사료의 범위에 해당하는 원료를 사용할 수 있다.
상기 “사료 조성물”은 “사료 등의 기준 및 규격”에 따른 보조사료 중 추출제일 수 있고, 상기 보조사료를 포함하는 배합사료일 수 있다.
상기 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 사료 조성물을 제조하는 경우 환삼덩굴 복합추출물은 호흡기 건강 개선 효능, 특히 알레르기성 호흡기 질환 개선 효능을 나타내는 함량이면 특별히 한정할 필요는 없으나, 예를 들어 0.1 내지 99 중량%, 0.5 내지 95 중량%, 1 내지 90 중량%, 2 내지 80 중량%, 3 내지 70 중량%, 4 내지 60 중량%, 5 내지 50 중량%로 포함될 수 있다.
상기 사료 조성물에서 유효성분인 환삼덩굴 복합추출물은 섭취 동물의 상태, 체중, 질병의 유무나 정도 및 기간에 따라 다르지만, 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들어 1 일 투여량을 기준으로 1 내지 5,000 mg, 바람직하게는 5 내지 2,000 mg, 더욱 바람직하게는 10 내지 1,000 mg, 더더욱 바람직하게는 20 내지 800 mg, 가장 바람직하게는 50 내지 500 mg일 수 있고, 투여 횟수는 특별히 한정할 필요는 없으나 1 일 3 회 내지 1 주일에 1회의 범위 내에서 통상의 기술자가 조절할 수 있다. 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 “환삼덩굴 복합추출물”에 대해서는 이미 상술하였으므로, 과도한 중복을 피하기 위해 그 기재를 생략한다.
본 발명에서 사용되는 용어 “알레르기성 호흡기 질환”은 호흡기에서 일어나는 알레르기성 반응을 수반하는 호흡기 질환을 제한 없이 포함할 수 있고, 예를 들어 알레르기성 천식, 알레르기성 비염, 알레르기성 비결막염, 부비동염, 과민성 폐렴 및 기관지염 중에서 선택되는 1종 이상의 호흡기 질환일 수 있으며, 바람직하게는 알레르기성 천식 또는 알레르기성 비염일 수 있고, 더욱 바람직하게는 알레르기성 천식일 수 있다.
상기 환삼덩굴 추출물을 단독으로 경구 투여할 경우 알레르기성 호흡기 질환에 대하여 치료 효능이 나타나지 않지만, 타임 추출물 또는 자주천인국 추출물 (또는 착즙액)과 혼합하여 복합물로 경구 투여할 경우 알레르기성 호흡기 질환 치료 효능의 상승효과가 현저히 뛰어나다.
본 발명의 약학 조성물은 환삼덩굴 복합추출물을 유효성분으로 포함함으로써 경구 투여에 의해 혈중 호산구 수 감소 효과, 혈청 내 IgE 수치 감소 효과, 또는 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 감소 효과를 나타낼 수 있다.
상기 “약학 조성물”, “의약”, “동물용 약학 조성물” 또는 “동물용 의약”은 유효성분으로 환삼덩굴 추출물, 및 타임 추출물 또는 자주천인국 착즙액의 복합추출물 이외에, 약학 조성물 등의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
상기 “담체”는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물이다. 상기 “부형제”는 유효성분에 적당한 형태를 부여하여 제형화하거나 양을 증가시켜 사용하기 편리하게 하기 위해 첨가하는 화합물이다. 상기 “희석제”는 대상 화합물의 생물학적 활성 형태를 안정화시킬 뿐만 아니라, 화합물을 용해시키게 되는 물에서 희석되는 화합물이다.
상기 담체, 부형제 및 희석제로는 특별히 한정할 필요는 없으나 예를 들어, 유당, 포도당, 설탕, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다.
상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약의 사용량은 환자 또는 치료대상 동물의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 무엇보다도, 치료대상 개체의 상태, 치료 대상 질환의 특정한 카테고리 또는 종류, 투여 경로, 사용되는 치료제의 속성에 의존적일 것이다.
상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약의 사용량은 환자 또는 치료대상 동물의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 무엇보다도, 치료대상 개체의 상태, 치료 대상 질환의 특정한 카테고리 또는 종류, 투여 경로, 사용되는 치료제의 속성에 의존적일 것이다.
상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약은 체내에서 활성성분의 흡수도, 배설속도, 환자 또는 치료대상 동물의 연령 및 체중, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증정도 등에 따라 적절히 선택되나, 일반적으로 1 일 10 내지 5,000 mg, 바람직하게는 50 내지 4,000 mg, 더욱 바람직하게는 100 내지 3,000 mg, 가장 바람직하게는 200 내지 2,000 mg으로 투여하는 것이 바람직하다. 이렇게 제형화된 단위 투여형 제제는 필요에 따라 일정시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.
상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약은 개별적으로 예방제 또는 치료제로서 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다.
상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 트로키제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구용 제제로 제형화하여 사용될 수 있다. 제형화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 설탕 또는 유당, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명의 또 다른 측면은 인간, 또는 인간을 제외한 동물에게 상기 조성물을 경구 투여하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료방법에 관한 것이다.
상기 알레르기성 호흡기 질환의 치료방법은 인간, 또는 인간을 제외한 동물, 특히 포유동물에게 상기 약학 조성물을 경구투여하는 것으로, 예를 들어 알레르기성 호흡기 질환을 가진 치료대상 개체에게 상기 약학 조성물을 경구투여하는 것이다.
상기 치료를 위한 투여량, 투여 방법 및 투여 횟수는 상기 약학 조성물, 의약, 동물용 약학 조성물 또는 동물용 의약의 투여량, 투여 방법 및 투여 횟수를 참고할 수 있다.
이하, 실시예에 의하여 본 발명을 상세히 설명하겠으나, 다음 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
<실시예>
제조예 1: 환삼덩굴 추출물 (HJEE)
환삼덩굴의 지상부 전초 건조물을 칭량 및 세척한 후 원재료의 14배 중량에 해당하는 30 중량% 에탄올 수용액을 투입하고, 80±5 ℃에서 8시간 동안 환류 추출한 다음, 50~60 메쉬로 1차 여과하였다. 1차 여과된 추출물을 10 ㎛ 카트리지 필터를 이용하여 2차 여과한 다음, 60 ℃ 미만의 온도에서 고형분 함량이 30±5 %가 될 때까지 감압농축하였다. 이후, 고형분 중량 기준으로 7 : 3의 비율로 덱스트린을 투입한 후 95±5 ℃에서 20~30분간 살균하였다. 이후 살균된 혼합물을 170~220 ℃에서 분무건조하고 여과한 다음, 이후의 시험에 사용하였다. 상기 환삼덩굴 추출물 중 고형분 함량은 70 중량%였다.
제조예 2: 타임 추출물 (TVEE)
핀젤버그사의 “아이템번호: 0196306; Thyme dry extract”(분말)를 구매하여 타임 에탄올 추출물로 사용하였다. 상기 타임 에탄올 추출물은 타임 지상부 전초의 70 중량% 에탄올 수용액 추출물로서, 상기 타임 에탄올 추출물 중 고형분 함량은 80 중량%였다.
제조예 3: 자주천인국 착즙액
핀젤버그사의 “아이템번호: 0347318KR; Echinacea dried pressed juice (95% native)”(분말)를 구매하여 자주천인국 착즙액으로 사용하였다. 상기 자주천인국 착즙액은 건조하지 않은 자주천인국 지상부 전초를 착즙한 착즙액을 건조한 것이고, 상기 자주천인국 착즙액 중 고형분 함량은 95 중량%였다.
제조예 4: 자주천인국 추출물 (EPEE)
자주천인국의 지상부 전초 건조물을 칭량 및 세척한 후 원재료의 14~20배 중량에 해당하는 30 중량% 에탄올 수용액을 투입하고, 80±10 ℃에서 6~12시간 동안 환류 추출한 다음, 50~60 메쉬로 1차 여과하였다. 1차 여과된 추출물을 10 ㎛ 카트리지 필터를 이용하여 2차 여과한 다음, 60 ℃ 미만의 온도에서 고형분 함량이 30±5%가 될 때까지 감압농축한 후 95±10 ℃에서 살균하였다. 이후 살균된 혼합물을 170~220 ℃에서 분무건조하고 여과한 다음, 이후의 시험에 사용하였다. 상기 자주천인국 추출물 중 고형분 함량은 50~70 중량%였다.
실시예 1: 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물 제조
제조예 1의 환삼덩굴 추출물 및 제조예 2의 타임 추출물을 고형분 기준으로 1 : 1의 중량비로 혼합하여 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물을 제조하였다.
실시예 2: 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물 제조
제조예 1의 환삼덩굴 추출물 및 제조예 3의 자주천인국 착즙액을 고형분 기준으로 1 : 1의 중량비로 혼합하여 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물을 제조하였다.
실시예 3: 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 추출물의 혼합물 제조
제조예 1의 환삼덩굴 추출물 및 제조예 4의 자주천인국 추출물을 고형분 기준으로 1 : 1의 중량비로 혼합하여 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 추출물의 혼합물을 제조하였다.
<시험예>
하기 실험은 각각 3번씩 반복하여 수행되었으며, 각각의 실험데이터는 평균 ± 표준 편차(SD)로 표시하였다. 각 데이터에서, ###은 정상군과 비교하여 p<0.001에서 유의적 차이가 있음(Student's t-test)을 의미하고, *, ** 및 ***은 유발대조군과 비교하여 각각 p<0.05, p<0.01 및 p<0.001에서 유의적 차이가 있음(Student's t-test)을 의미한다.
시험예 1: 환삼덩굴 추출물의 유효성분인 Luteolin7-O-glucoside의 HPLC 함량 시험
1-1: 분석용 시료의 제조
환삼덩굴 추출물(HJEE)의 품질관리를 위한 성분으로 항염증 및 항알레르기 활성이 보고된 luteolin-7-O-glucoside를 사용하였다. Luteolin7-O-glucoside 표준품은 HPLC grade MeOH에 녹여 500 μg/mL의 농도로 제조하였다. 이를 이용하여 6회 serial dilution을 통해 추가적으로 250, 125, 62.5, 31.25, 15.63, 7.81 μg/mL 농도의 표준액을 제조하고 이를 0.2μm pore size의 nylon 재질의 syringe filter를 사용하여 여과한 다음, 이렇게 제조된 표준액을 이용하여 검량선을 작성하였다. 검액의 경우 3배치의 시료를 50% MeOH에 녹여 각각 10 mg/mL의 농도로 제조하고 이를 0.2μm pore size의 nylon 재질의 syringe filter를 사용하여 여과한 후 이를 검액으로 하여 실험을 수행하였다.
1-2: 분석조건의 확립
UV검출기(254 nm)를 이용하여 HPLC 시험법을 확립하고자 여러 분석조건에서 분리능을 검토하여 최종적으로 다음과 같은 분석조건을 확립하였다.
- System:Thermo Scientific 사의Dionex Ultimate 3000 HPLC system
- Column: YMC사의J’sphere ODS-H80 컬럼(4.6 mm × 250 mm, 4 μm, Cat. No. JH08S04-2546WT)
- Mobile phase: 0.1% formic acid in Water : Acetonitrile= 83: 17
(isocratic condition, 20 min), (Washing 5 min, Re-equilibration 5min)
- Flow rate: 1.0mL/min
- Injection volume: 10μL
- Column temperature: 30 ℃
- Detection: 254nm
1-3: HPLC 분석 결과
제조예 1에 따른 환삼덩굴 추출물을 상기 조건에 따라 HPLC 분석하여, 유효성분인 루테올린 7-O-글루코시드(Luteolin 7-O-glucoside)의 존재를 확인하였다(도 1).
확립된 HPLC 시험법을 이용하여 환삼덩굴 추출물 3배치에 대한 luteolin 7-O-glucoside의 함량을 분석한 결과, luteolin 7-O-glucoside의 RT(Retention time)은 약 16.7분 (10.84±0.26 mg/g)으로 확인되었으며(도 1), 제조예 1에 따른 환삼덩굴 추출물 3배치 각각의 luteolin 7-O-glucoside 함량은 10.84±0.26 mg/g, 8.49 ±0.09 mg/g, 8.78±0.09 mg/g 인 것으로 확인되었다.
시험예 2: A23187/PMA로 자극한 RBL-2H3 세포주를 이용한 Th2 사이토카인 억제 효과 확인
2-1: 시험방법
랫드 유래 비만세포주 (Rat mast cell line)인 RBL-2H3 세포를 American Type Culture Collection (ATCC, USA)에서 구입하여 배양하였다. 세포 배양을 위해 15% 열처리 비활성화된 FBS (Fetal bovine serum), 100 units/mL 페니실린 및 100 μg/mL 스트렙토마이신을 첨가한 EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium, ATCC, USA) 배지를 이용하였고, 5% CO2, 37 ℃의 습윤한 환경에서 세포를 배양하였다. 세포의 증식에 따른 과밀도 현상을 해소하기 위하여 0.05% trypsin-EDTA solution을 처리하여 세포를 부유시킨 후 계대 배양하였으며, 계대 수 4 ~ 5인 것을 실험에 사용하였다.
상기 RBL-2H3 세포를 24-well plate에 2×105 cells/well로 세포를 분주하여 24시간 동안 배양하였다. 이후 배양배지를 제거한 다음, serum free media에 시험물질 7종 (제조예 1 ~ 제조예 4, 및 실시예 1 ~ 실시예 3)을 각각 세포독성이 없는 농도인 0.5 mg/mL로 처리하였다. 이와 동시에 비만세포를 감작시키기 위해 알레르기 반응을 유도하는 자극물질인 1 μM A23187 및 50 nM PMA를 처리한 다음 18시간 동안 배양하였다. 이후 배양액을 원심분리 (5,000 rpm, 3분, 4℃)하여 부유세포를 제거한 후, 감작된 비만세포에서 분비되는 대표적인 Th2 사이토카인인 인터류킨-4 (IL-4)을 Rat IL-4 ELISA Kit (KOMA BIOTECH, Korea)로 측정하여 하기 표 1 및 표 2에 나타내었다.
2-2: 시험결과
A23187과 PMA로 감작한 랫드 유래 비만세포주인 RBL-2H3에서 환삼덩굴 추출물, 타임 추출물 및 이들의 혼합물이 알레르기 반응을 유발하는 Th2 사이토카인인 IL-4 생산에 미치는 영향을 확인한 결과, 유발대조군의 IL-4 생산량을 100%로 했을 때 제조예 1 (환삼덩굴 추출물)을 처리한 시험군은 감소 효과가 전혀 없었으나, 실시예 1 (환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물) 및 제조예 2 (타임 추출물)를 처리한 시험군은 IL-4를 각각 약 96% 및 약 65% 감소시켰다. 특히, 실시예 1의 경우 유발대조군에 대한 IL-4 수준이 4.1±0.8%로서, 제조예 1 및 제조예 2와 동일한 농도 (0.5 mg/mL)로 처리된 점, 및 제조예 1 및 제조예 2를 고형분 기준으로 1 : 1의 중량비로 혼합하여 제조된 점을 감안할 때, 예상되는 IL-4 수준인 약 67.6%에 비해 현저히 낮은 것을 고려하면, 제조예 1과 제조예 2의 혼합에 의해 상승효과가 나타난 것으로 판단된다(표 1).
구분 | IL-4 level (% of 유발대조군) |
유발대조군 | 100 |
실시예 1 | 4.1±0.8*** |
제조예 1 | 100.0±19.5 |
제조예 2 | 35.2±9.2** |
또한, 상기 시험에서 환삼덩굴 추출물, 자주천인국 착즙액(또는 추출물) 및 이들의 혼합물이 비만세포의 IL-4 생산에 미치는 영향을 확인한 결과, 유발대조군의 IL-4 생산량을 100%로 했을 때 제조예 1 (환삼덩굴 추출물)을 처리한 시험군은 감소 효과가 전혀 없는 반면, 실시예 2 (환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물), 실시예 3 (환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 추출물의 혼합물), 제조예 3 (자주천인국 착즙액), 및 제조예 4 (자주천인국 추출물)를 처리한 시험군은 IL-4를 각각 약 82%, 58%, 56% 및 59% 감소시켰다. 특히, 실시예 2 또는 실시예 3의 경우 유발대조군에 대한 IL-4 수준이 각각 18.4±3.1 및 42.7±2.2%로서, 제조예 1, 제조예 3 및 제조예 4와 동일한 농도 (0.5 mg/mL)로 처리된 점, 및 제조예 1과 제조예 3 또는 제조예 4를 고형분 기준으로 1 : 1 중량비로 혼합하여 제조된 점을 감안할 때, 예상되는 IL-4 수준 (약 72.25 또는 약 70.7%)에 비해 IL-4가 현저히 낮은 것을 고려하면, 제조예 1과 제조예 3 또는 제조예 4의 혼합에 의해 상승효과가 나타난 것으로 판단된다. 또한, 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 착즙액을 혼합한 실시예 2의 경우 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 추출물을 혼합한 실시예 3에 비해 IL-4 감소율이 유의하게 높은 것으로 나타나, 자주천인국 착즙액을 함유하는 환삼덩굴 복합추출물의 효능이 더욱 우수한 것을 알 수 있다.
구분 | IL-4 level (% of 유발대조군) |
유발대조군 | 100 |
실시예 2 | 18.4±3.1*** |
실시예 3 | 42.7±2.2** |
제조예 1 | 100.2±23.6 |
제조예 3 | 44.3±1.8** |
제조예 4 | 41.2±4.3** |
시험예 3: LPS로 자극한 마우스 대식세포주를 이용한 NO 생성 억제 효과 확인
3-1: 세포배양
마우스 대식세포주인 RAW 264.7 세포를 ATCC (Solon, Ohio, USA)에서 분양 받아 실험에 사용하였으며, 100 units/mL의 penicillin-streptomycin(Sigma-Aldrich, USA)과 10% fetal bovine serum (FBS, Sigma-Aldrich)가 함유된 RPMI 1640 배지(Sigma-Aldrich)를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 배양을 통하여 충분한 세포 수가 확보되었을 때, RAW 264.7 세포를 24 well plate에 4 × 105 cells/well로 분주한 다음, 1 μg/mL LPS와 함께 제조예 1(환삼덩굴 추출물, HJEE), 제조예 2(타임 추출물, TVEE), 제조예 4(자주천인국 추출물, EPEE), 및 상기 환삼덩굴 추출물과 타임 추출물, 또는 환삼덩굴 추출물과 자주천인국 추출물을 각각 1:9, 3:7, 5:5, 7:3, 9:1로 혼합한 복합물을 각각 250 μg/mL로 처리하여 18시간 동안 배양한 후 세포배양액을 원심분리하여 얻은 상등액을 이용하여 NO assay를 실시하였다.
3-2: NO assay
위 시험에서 얻은 상등액 중의 NO 농도를 측정하기 위해 Griess reagent [0.2% N-(1-naphthyl)ethylene diamine solution: 0.2% sulfanilamide solution =1:1](Sigma-Aldrich)와 상등액을 1 :1 비율로 혼합한 후 10분 동안 반응시킨 후, 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준품으로 농도별 sodium nitrite 용액을 이용하여 검량선을 작성한 후, 각 상등액 샘플의 흡광도 값을 대입하여 NO의 농도를 계산하였다. 각 추출물 및 비율별 복합물의 NO 억제 효과를 유발대조군(LPS+Media)에 대한 통계적인 유의성을 토대로 평가하여 하기 표 3 및 표 4에 나타내었다.
3-3: 시험결과
LPS로 RAW264.7 세포를 자극하여 염증반응을 유발하면서 제조예 1(환삼덩굴 추출물), 제조예 2(타임 추출물), 제조예 4(자주천인국 추출물), 및 상기 제조예 1과 제조예 2, 또는 제조예 1과 제조예 4를 각각 1:9, 3:7, 5:5, 7:3, 9:1로 혼합한 복합물을 각각 250 μg/mL로 처리하여 18시간 동안 배양한 후 NO 농도를 측정한 결과, 유발대조군(LPS+Media)에서 정상군(Normal) 대비 NO의 생성이 큰 폭으로 유의하게 증가된 반면, 각 추출물 및 비율별 복합물을 처리했을 때는 유발대조군에 비하여 유의하게 NO 생성을 억제하는 것으로 나타났다. 구체적으로, 제조예 1(환삼덩굴 추출물)과 제조예 2(타임 추출물), 및 이들의 배합비율별 NO 억제 효과를 관찰한 결과, 제조예 2(타임 추출물)의 배합비율이 높을수록 NO 억제 효과가 큰 것으로 나타났다.
구분 | NO (μM) | |
정상군 | 1.9±0.2 | |
유발대조군 | 63.2±8.4### | |
제조예 1 | 52.6±3.1* | |
제조예 2 | 41.7±4.2** | |
실시예 1 (제조예 1 : 제조예 2의 배합비) |
1 : 9 | 14.3±6.3*** |
3 : 7 | 22.6±5.2*** | |
5 : 5 | 28.3±6.1*** | |
7 : 3 | 33.8±5.6*** | |
9 : 1 | 42.3±2.9** |
한편, 제조예 1(환삼덩굴 추출물)과 제조예 4(자주천인국 추출물), 및 이들의 배합비율별 NO 억제 효과를 확인한 결과, 각 추출물 및 비율별 복합물을 처리했을 때는 유발대조군에 비하여 유의하게 NO 생성을 억제하는 것으로 나타났다. 구체적으로, 제조예 1(환삼덩굴 추출물)과 제조예 4(자주천인국 추출물), 및 이들의 배합비율별 NO 억제 효과를 관찰한 결과, 제조예 4(자주천인국 추출물)의 배합비율이 높을수록 NO 억제 효과가 큰 것으로 나타났다.
구분 | NO (μM) | |
정상군 | 2.2±0.3 | |
유발대조군 | 61.3±10.6### | |
제조예 1 | 52.5±2.5* | |
제조예 4 | 37.4±8.4** | |
실시예 3 (제조예 1 : 제조예 4의 배합비) |
1 : 9 | 15.0±1.9*** |
3 : 7 | 18.2±5.3*** | |
5 : 5 | 24.3±1.8*** | |
7 : 3 | 27.8±6.2*** | |
9 : 1 | 38.2±3.7* |
시험예 4: OVA 유발 천식 마우스 모델을 이용한 효능 시험
4-1: 시험방법
천식 마우스 모델 시험을 위한 실험동물로서 6주령된 암컷 BALB/c 생쥐를 ㈜코아텍 (평택, 한국)에서 공급받아 실험 당일까지 고형사료와 물을 충분히 공급하면서, 실온 23±3 ℃, 상대습도 55±15%, 환기횟수 10~20 회/hr, 조명시간 12 시간 (오전 8시 점등 ~ 오후 8시 소등) 및 조도 150~300 Lux를 유지하였다.
천식 유발 개시일 (Day 0) 및 Day 14에 난알부민 (ovalbumin, OVA) 20 μg과 백반(alum) 2 mg/0.2 mL/head을 정상군을 제외한 모든 시험군 동물에 복강투여 한 뒤, Day 21부터 Day 23까지 3% OVA를 매일 60분간 nebulizer를 이용하여 동물의 비강에 흡입시켜 천식을 유도하였다. 동시에 시험물질의 알레르기성 호흡기 질환에 대한 치료 효과를 확인하기 위해 실시예 1, 실시예 2 및 제조예 1 ~ 제조예 3을 유발 개시일 (Day 0)부터 유발 후 24 일째 (Day 23)까지 1일 1회씩 총 24 일간 200 mg/kg 용량으로 경구투여하였다. 투여 완료 후 부검일 (Day 24)에 해당 동물에 대하여 마취를 실시한 다음, 후대 정맥에서 채혈을 실시하고, 채혈한 혈액 중 일부를 항응고제인 EDTA-3K가 들어있는 CBC bottle에 주입한 후 자동혈액분석기 (ADVIA 2120, SIEMENS, USA)를 이용하여 혈중 호산구 함량에 대하여 분석하였다. 그리고 일부 혈액에서 혈청을 분리한 다음, 혈청 내 항알레르기 항체인 총 IgE 농도를 Mouse IgE ELISA kit (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 이용하여 측정하였다. 또, 기관지에서 기관지 폐포 세척액 (BALF, Bronchoalveolar lavage fluid)을 채취한 후, Mouse IL-4 ELISA Kit (KOMA BIOTECH, Korea)를 이용하여 BALF 내 IL-4 농도를 분석하였다. 본 시험과 관련된 시험군을 하기 표 5에 나타내었다.
구분 | 설명 | 동물수 |
G1 | 정상군, 천식 유발 않음, 생리식염수 | 5 |
G2 | 유발대조군, 천식 유발, 생리식염수 | 5 |
G3 | 시험군 1, 천식 유발, 실시예 1 200 mg/kg | 5 |
G4 | 시험군 2, 천식 유발, 실시예 2 200 mg/kg | 5 |
G5 | 비교시험군 1, 천식 유발, 제조예 1 200 mg/kg | 5 |
G6 | 비교시험군 2, 천식 유발, 제조예 2 200 mg/kg | 5 |
G7 | 비교시험군 3, 천식 유발, 제조예 3 200 mg/kg | 5 |
4-2: 시험결과
(1) 혈중 호산구 비율
시험물질의 호흡기 건강 개선 효과, 특히 알레르기성 호흡기 질환에 대한 치료 효과를 확인하기 위해, 시험물질을 경구투여한 천식 마우스 모델의 혈중 호산구 비율을 측정한 결과, 정상군 (G1)의 혈중 호산구 비율은 1.23%였고, OVA로 천식을 유도한 유발대조군 (G2)의 경우 정상군에 비해 3.6배 증가된 4.8%로 나타났다. 반면, 실시예 1을 경구투여한 시험군 1 (G3)의 혈중 호산구 비율은 유발대조군 대비 약 70%가 유의하게 감소하였고, 실시예 2를 경구투여한 시험군 2 (G4) 역시 유발대조군 대비 약 71%가 유의하게 감소하여 비교시험군 1, 2, 3 (G5, G6, G7)보다 더 우수한 효과를 보여주었다.
구분 | 혈중 호산구 비율(%) | 상대비율(% of 유발대조군) |
정상군 | 1.23±0.64 | 25.63 |
유발대조군 | 4.80±0.98## | 100 |
시험군 1 (실시예 1) | 1.48±0.75** | 30.83 |
시험군 2 (실시예 2) | 1.41±0.36** | 29.38 |
비교시험군 1 (제조예 1) | 4.52±0.52 | 94.17 |
비교시험군 2 (제조예 2) | 2.94±0.23* | 61.25 |
비교시험군 3 (제조예 3) | 2.56±0.17* | 53.33 |
(2) 혈청 내 총 IgE 농도
시험물질의 알레르기성 호흡기 질환에 대한 치료 효과를 확인하기 위해, 시험물질을 경구투여한 천식 마우스 모델의 혈청 내 항알레르기 항체인 총 IgE 농도를 측정한 결과, 정상군 (G1)의 혈청 내 총 IgE 농도는 364.40±31.33 ng/mL로 나타났고, 유발대조군 (G2)은 약 29배 유의하게 증가된 10623.1±2947.1 ng/mL로 나타났다. 반면, 실시예 1을 경구투여한 시험군 1 (G3)의 총 IgE 농도는 4553.7±648.5 ng/mL로 유발대조군 대비 약 57%가 유의하게 감소하였고, 실시예 2를 경구투여한 시험군 2 (G4)의 경우에도 유발대조군에 비해 약 70%가 유의하게 감소된 3232.97±877.33 ng/mL로 확인되어 비교시험군 1, 2, 3 (G5, G6, G7)보다 월등한 효과를 보여주었다.
구분 | 혈청 내 총 IgE 농도 (ng/mL) | 상대비율(% of 유발대조군) |
정상군 | 364.40±31.33 | - |
유발대조군 | 10,623.1±2,947.1### | 100 |
시험군 1 (실시예 1) | 4,553.7±648.5** | 42.87 |
시험군 2 (실시예 2) | 3,232.97±877.33*** | 30.43 |
비교시험군 1 (제조예 1) | 9,886.3±923.6 | 93.06 |
비교시험군 2 (제조예 2) | 6,940.1±526.8* | 65.33 |
비교시험군 3 (제조예 3) | 5,539.9±1,052.3* | 52.15 |
(3) 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도
시험물질이 기관지 내 알레르기 반응에 미치는 영향을 확인하기 위해, 시험물질을 경구투여한 천식 마우스 모델의 기관지 폐포 세척액(BALF) 내 IL-4 농도를 분석한 결과, 정상군 (G1)의 BALF 내 IL-4 농도는 7.90±2.26 pg/mL로 나타났고, 유발대조군 (G2)은 약 28배 유의하게 증가된 224.77±124.15 pg/mL로 확인되었다. 반면, 실시예 1을 경구투여한 시험군 1 (G3)의 BALF 내 IL-4 농도는 유발대조군 대비 약 92%가 유의하게 감소된 18.0±2.1 pg/mL으로 확인되었고, 실시예 2를 경구투여한 시험군 2 (G4)의 경우 유발대조군에 비해 약 77%가 유의하게 감소된 51.9±40.3 pg/mL으로 관찰되어 비교시험군 1, 2, 3 (G5, G6, G7)보다 IL-4 억제 효과가 더 큰 것으로 확인되었다.
구분 | BALF 내 IL-4 농도 (pg/mL) | 상대비율(% of 유발대조군) |
정상군 | 7.90±2.26 | 3.51 |
유발대조군 | 224.77±124.15## | 100 |
시험군 1 (실시예 1) | 18.0±2.1*** | 8.00 |
시험군 2 (실시예 2) | 51.9±40.3** | 23.09 |
비교시험군 1 (제조예 1) | 216.56±98.2 | 96.35 |
비교시험군 2 (제조예 2) | 99.4±16.4* | 44.21 |
비교시험군 3 (제조예 3) | 120.5±35.6* | 53.62 |
이상을 종합할 때, 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물, 또는 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액(또는 추출물)의 복합추출물이 OVA로 천식을 유발한 마우스 모델에서 혈중 호산구수, 혈청 내 총 IgE 농도 및 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 등 알레르기성 천식과 같은 호흡기 질환의 임상병리 기전에 중요한 지표를 유의하게 감소시킴으로써 호흡기 건강 개선 효과, 특히 알레르기성 호흡기 질환에 대한 치료 효과를 나타내는 것을 알 수 있다.
아래에 본 발명의 환삼덩굴 복합추출물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1: 산제의 제조
실시예 1의 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2: 정제의 제조
실시예 2의 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3: 캡슐제의 제조
실시예 1의 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물 10 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4: 과립제의 제조
실시예 2의 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼륨 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 5: 음료 제형의 제조
실시예 1의 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합물 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조예 사용하였다.
제제예 6: 사료 조성물의 제조
실시예 2의 환삼덩굴 추출물 및 자주천인국 착즙액의 혼합물 0.1 kg, 옥수수 25.5 kg, 소맥 15.04 kg, 소맥분 8.15 kg, 미강 7.4 kg, 대두박 18 kg, 옥구르텐 1 kg, 닭부산물 14 kg, 동물성유지 9 kg, 가공염 0.3 kg, 인산제삼칼슘 0.3 kg, 석회석 1 kg, 염화콜린 0.01 kg, 비타민 0.05 kg, 미네랄 0.05 kg 및 소화효소제 0.1 kg을 혼합하여 동물 (개, 애완견) 사료 조성물을 제조하였다.
비록 본 발명이 상기에 언급된 바람직한 실시예로서 설명되었으나, 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다양한 수정이나 변형을 하는 것이 가능하다. 또한, 첨부된 특허청구범위는 본 발명의 요지에 속하는 이러한 수정이나 변형을 포함한다.
Claims (18)
- 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물로서,
상기 환삼덩굴 복합추출물은,
환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나,
환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 환삼덩굴은 환삼덩굴의 줄기, 잎 또는 지상부 전초인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 환삼덩굴 추출물, 타임 추출물 및 자주천인국 추출물은 각각 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 그들의 혼합용매에 의한 추출물인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는
상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 혈중 호산구 수 감소 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 혈청 내 IgE 수치 감소 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 기관지 폐포 세척액 내 IL-4 농도 감소 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 호흡기 건강 개선은 알레르기성 호흡기 질환의 개선인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 엑스제, 젤리 제형, 티백 제형 또는 음료 제형인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 식품 조성물. - 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물로서,
상기 환삼덩굴 복합추출물은,
환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나,
환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 호흡기 건강 개선용 사료 조성물. - 제10항에 있어서,
상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는
상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물. - 제10항에 있어서,
상기 호흡기 건강 개선은 알레르기성 호흡기 질환의 개선인 것을 특징으로 하는 호흡기 건강 개선용 사료 조성물. - 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물로서,
상기 환삼덩굴 복합추출물은,
환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나,
환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물. - 제13항에 있어서,
상기 알레르기성 호흡기 질환은 알레르기성 천식, 알레르기성 비염, 알레르기성 비결막염, 부비동염, 과민성 폐렴 및 기관지염 중에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물. - 제13항에 있어서,
상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는
상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비인 것을 특징으로 하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물. - 제13항에 있어서,
상기 약학 조성물은 경구용 제제인 것을 특징으로 하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물. - 환삼덩굴 (Humulus japonicus) 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물로서,
상기 환삼덩굴 복합추출물은,
환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 복합추출물이거나,
환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 복합추출물인 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물. - 제17항에 있어서,
상기 환삼덩굴 추출물 및 타임 추출물의 혼합비율, 또는
상기 환삼덩굴 추출물, 및 자주천인국 착즙액 또는 추출물의 혼합비율은 고형분 기준으로 1 : 99 내지 99 : 1의 중량비인 것을 특징으로 하는 알레르기성 호흡기 질환의 치료 또는 예방용 동물용 약학 조성물.
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KR101043509B1 (ko) | 2011-01-25 | 2011-06-23 | 이상권 | 호흡기질환 및 아토피 피부염에 효능을 가지는 무수 유산균 발효 건강 기능식품의 제조방법 |
-
2023
- 2023-03-14 KR KR1020230033550A patent/KR20230134448A/ko unknown
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KR101043509B1 (ko) | 2011-01-25 | 2011-06-23 | 이상권 | 호흡기질환 및 아토피 피부염에 효능을 가지는 무수 유산균 발효 건강 기능식품의 제조방법 |
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