KR20230110160A - 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법 및 그에 의하여 생산된 엑소좀을 포함하는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 고압 산소를 처리하여 엑소좀의 생산성을 향상시키는 방법 및 그에 의하여 생산된 엑소좀을 포함하는 조성물에 관한 것이며, 본 발명의 방법을 이용하는 경우 엑소좀의 생산성을 효과적으로 향상시킬 수 있으므로 이를 엑소좀을 활용하는 진단 및 치료 등에 매우 유용하게 이용할 수 있다.

Description

엑소좀 생산성을 증가시키는 방법 및 그에 의하여 생산된 엑소좀을 포함하는 조성물{Methods for increasing productivity of exosomes and composition including exosomes produced by the methods}
본 발명은 고압 산소 처리를 이용하여 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법 및 그에 의하여 생산된 엑소좀을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
엑소좀은 여러 종류의 세포들로부터 분비되는 막 구조의 작은 소낭이다. 엑소좀의 직경은 대략 30 내지 300 nm 인 것으로 보고되어 있다. 엑소좀은 전자 현미경을 통한 연구에서 원형질막으로부터 직접 떨어져 나가는 것이 아니라 다낭체(multivesicular bodies, MVBs)라고 불리는 세포 내 특정 구획에서 기원하며 세포 밖으로 방출, 분비되는 것이 관찰되었다. 즉, 다낭체와 원형질막의 융합이 일어나면, 소낭들은 세포 밖 환경으로 방출되는데, 이것을 엑소좀이라고 부른다. 이러한 엑소좀이 어떤 분자적 기작에 의해 만들어지는지 확실히 밝혀진 바가 없으나, 적혈구 세포뿐만 아니라, B-림프구, T 림프구, 수지상 세포, 혈소판, 대식 세포 등을 포함한 다양한 종류의 면역세포들과 종양 세포, 줄기세포 등도 살아 있는 상태에서 엑소좀을 생산하여 분비한다고 알려졌다.
또한 최근 연구에 따르면 엑소좀은 세포 간 신호 전달 및 폐기 관리와 같은 과정에서 중요한 역할을 한다고 보고되었다(Edwin van der pol et al., Pharmacological Reviews July 2012, 64 (3) 676-705). 엑소좀은 질병에 대한 예후, 치료 및 건강과 질병을 위한 바이오 마커로 사용될 수 있는 잠재력을 갖고 있고, 최근 임상 적용에 대한 관심이 증가하고 있다.
발명의 배경이 되는 기술은 본 발명에 대한 이해를 보다 용이하게 하기 위해 작성되었다. 발명의 배경이 되는 기술에 기재된 사항들이 선행기술로 존재한다고 인정하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
한편, 세포가 생성하는 엑소좀이 미량이므로 이를 효율적으로 다량 얻기 위한 엑소좀 생산성을 증가시킬 수 있는 방법이 요구되고 있는 실정이다.
이에 본 발명자들은 엑소좀 생산성 효과적으로 증가시킬 수 있는 방법을 개발하고자 하였다.
그 결과, 본 발명의 발명자들은 줄기세포 배양 시 고압산소를 처리하여 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법을 개발하기에 이르렀다.
이에 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는, 줄기세포의 배양과정에서 고압 산소를 처리하여 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
전술한 바와 같은 과제를 해결하기 위해, 세포가 포함된 시료를 제1 기압의 환경에서 배양하는 단계; 및 상기 제1 기압보다 높은 제2 기압의 환경에서 상기 시료를 배양하는 단계; 를 포함하며, 상기 제2 기압 조건은 고압의 산소에 의해 조성되는 방법이 제시된다.
본 발명에서 "세포"는 신체로부터 얻은 모든 종류의 체세포일 수 있으며, 예를 들어 피부, 모낭, 치근, 지방, 혈액, 소변, 점액, 타액, 눈물, 혈장, 혈청, 뇨, 객담, 척수액, 흉수, 유두 흡인물, 림프액, 기도액, 장액, 및 비뇨생식관액, 모유, 림프계 체액, 정액, 뇌척수액, 기 관계내 체액, 복수, 낭성 종양 체액, 양수액 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 엑소좀을 분비하는 세포라면 이에 한정되지 않는다. 또한, “세포”는 신체로부터 얻은 체세포 이외에 식물, 동물 등의 인간과는 다른 개체에서 얻은 세포일 수도 있다.
본 발명에서 “엑소좀”은 세포에 의해 방출되는 엔도솜 유래의 지질 이중층을 갖는 작은 막 소포를 의미하며, 엑소좀은 세포 간 신호를 전달하기 위하여, 단백질, DNA, RNA 등을 가지고 세포 밖으로 분비되는 작은 소낭을 가리킬 수 있으며, 예컨대 단백질, 지질, mRNA, 마이크로RNA (miRNA) 및 게놈 DNA를 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 줄기세포 유래의 엑소좀은 CD9, CD63, CD81 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 마커 단백질을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
구체적으로, CD9, CD63 및 CD81은 엑소좀의 대표적인 포지티브 마커이므로 CD9, CD63 및 CD81의 함량과 엑소좀의 함량은 서로 선형성을 가지며, CD9, CD63 및 CD81 함량의 증가는 엑소좀 함량의 비례적인 증가를 의미한다.
일 구체예에서, 엑소좀은 제한되지는 않으나, 지방, 사람 혈액으로부터 유래, 추출 또는 분리된 것일 수 있다. 또는, 엑소좀은 줄기세포 또는 면역세포에서 추출될 수 있다. 상기 줄기세포는 배아줄기세포, 유도만능 줄기세포(induced pluripotent stem cell; iPSC), 성체줄기세포, 배아줄기세포 유래 중간엽 줄기세포, 또는 유도만능 줄기세포 유래 중간엽 줄기세포일 수 있다. 상기 면역세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 세포독성 T 세포(cytotoxic T cell), 수지상 세포 또는 대식 세포일 수 있다. 또한, 엑소좀은 신체로부터 얻은 세포 이외에 식물, 동물 등의 인간과는 다른 개체에서 얻은 세포로부터 유래, 추출 또는 분리된 것일 수도 있다.
또한 본 발명을 한정하지 않는 예시로서, 상기 성체줄기세포는 중간엽 줄기세포, 인간 조직 유래 중간엽 기질세포, 인간 조직 유래 중간엽 줄기세포, 및 다분화능 줄기세포로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 성체 줄기세포일 수 있다. 상기 중간엽 줄기세포는 제대, 제대혈, 골수, 지방, 근육, 신경, 피부, 양막, 와튼젤리 및 태반으로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 조직으로부터 유래된 중간엽 줄기세포일 수 있다. 바람직하게는 상기 성체 줄기세포는 중간엽 줄기세포, 예를 들어 지방, 골수, 제대 또는 제대혈 유래 줄기세포일 수 있으며, 보다 바람직하게는 지방 유래 줄기세포일 수 있다.
일 구체예에서 상기 엑소좀이 줄기세포로부터 추출되는 것일때, 상기 줄기세포는 지방 조직(예컨대, 인간의 지방 조직)으로부터 분리된 줄기세 포(예컨대, 인간 지방 유래 줄기세포)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 지방, 골, 연골, 근섬유 등 하나 이상의 중간엽 세포로 분화할 수 있는 세포를 모두 포함할 수 있다. 상기 지방 유래 줄기세포(ADSC)는 지방 전구세포, 기질세포, 다분화능 지방 유래 세포(multipotent adipose-derived cells) 또는 지방 유래 성체 줄기 세포(adipose derived adult stem cells) 중 적어도 1종일 수 있다.
상기 줄기세포 또는 상기 면역세포의 종류는 병원체에 의한 감염의 위험이 없고 면역 거부 반응을 일으키지 않는 것이라면 제한되지 않으나, 바람직하게는 인간 유래 줄기세포 또는 인간 유래 면역세포일 수 있다.
그러나 당업계에서 사용되고 있거나 향후 사용될 수 있는 다양한 동물세포, 식물세포를 포함할 수 있으며 후술하는 실시예들에서 사용된 지방줄기세포는 본 발명에서 사용될 수 있는 동물세포의 일례로서 이해되어야 하며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 "시료"는 신체로부터 얻은 혈액, 소변, 점액, 타액, 눈물, 혈장, 혈청, 뇨, 객담, 척수액, 흉수, 유두 흡인물, 림프액, 기도액, 장액, 및 비뇨생식관액, 모유, 림프계 체액, 정액, 뇌척수액, 기관계내 체액, 복수, 낭성 종양 체액, 양수액 및 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있으며, 또한 배양 세포의 배지를 포함할 수 있으며, 또한 엑소좀을 분비하는 시료라면 이에 한정되지 않는다. 여기서 배지로는 FBS(Fetal Bovine Serum)가 포함된 것을 사용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며 상업적으로 입수가능한 엑셀세라퓨틱스 사의 CellCor™CD MSC, STEMCELL technology 사의 MesenCult™plus, Peprotech 사의 eproGrow™hMSC (Mesenchymal Stem Cell) Media, BI/Satorius 사의 MSC Nutristem ® 시리즈, Miltenyi biotec 사의 StemMACS™, Roosterbio 사의 RoosterNourish™, R&D systems 사의 StemXVivo™, Takara Bio 사의 Cellartis®MSC XF, Irvine Science/FUJI 사의 PRIME-XV XSFM 또는 PRIME-XV SFM, Ajinomoto 사의 StemFit for MSC, Lonza 사의 TheraPEAK™, Cellntec 사의 CnT-PR-MSC-XF 등이 사용될 수 있다.
일 실시예에서, 혈액은 몸 안의 세포에 산소와 영양소를 공급하고 세포의 신진대사에 의해 발생하는 이산화탄소와 노폐물을 회수하여 운반하는 역할을 하는 체액을 말한다. 혈장(plasma)은 혈액을 구성하는 액체 성분인데, 단백질을 비롯하 여 다종 다양한 유기물이나 무기물이 녹아 있는 용매 역할을 한다. 혈청 또는 수액(serum)은 혈액의 일부 성분으로 혈장에서 피브리노겐이 제거된 나머지 노란색 액체 성분을 말한다.
본 발명의 일 구체예의 엑소좀의 생산성 향상 방법은 엑소좀 생산 효율 및 수득율을 증가시키기 위해 줄기세포가 배양되는 과정에서 일반 배양조건과 유리한 조건 사이 환경조건 예를 들면, 배양기 내부의 압력 조건, 산소 농도 조건, 이산화탄소 농도 조건, 질소 농도 조건, 공기 조성 조건, 광원의 파장 조건, 온도 조건 등을 변화시켜 생산 효율 및 수득율을 증가를 달성할 수 있으며 더욱 구체적으로는 고압 산소를 처리하는 것을 특징으로 한다.
일 구체예에서, 세포가 포함된 시료를 제1 기압의 환경에서 배양하는 단계; 및 상기 제1 기압보다 높은 제2 기압의 환경에서 상기 시료를 배양하는 단계; 를 포함하며, 상기 제2 기압 조건은 고압의 산소에 의해 조성됨으로써, 엑소좀의 생산 효율 및 수득율을 증가하는 것일 수 있으며 이에 제한되지는 않는다.
보다 구체적으로 상기 시료로부터 엑소좀을 추출하는 단계; 를 더 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 구체적으로 상기 세포는 줄기세포일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 구체적으로 상기 제1 기압의 환경에서 배양하는 단계 및 상기 제2 기압의 환경에서 배양하는 단계가 2회 이상 반복 수행될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 구체적으로 상기 제2 기압은 1 내지 5ATA일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
보다 구체적으로 상기 제2 기압의 환경에서 시료를 배양하는 단계는 60 내지 120분간 수행될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 사용된 용어 '생산성' 및 “수득율”은 일정 시료에서 얻을 수 있는 엑소좀량을 의미하는 것으로, 본 실시예에서 설명한 실험방법을 포함하는 일반적인 정량화 방법을 통해 측정된 것을 의미한다.
일 구체예에서, 엑소좀의 생산 효율 및 수득율 향상 방법에 있어, 상기 생산 효율 및 수득율은 엑소좀 배양액 mL 당 엑소좀 입자수로 정의될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.
본 발명의 일 실시예에 따른 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법은 줄기세포 배양과정에서 상대적으로 가혹한 조건과 상대적으로 유리한 조건 사이 환경조건 예를 들면, 유리한 조건으로서 고압 산소를 처리하여 배양함으로서 생산 효율 및 수득율이 증가하는 효과를 가진다.
보다 구체적으로 유리한 조건으로서 고압 산소 처리는 1 내지 5ATA 조건에서 60분 내지 120분간, 1회 내지 5회 처리되는 것일 수 있으며, 바람직하게는 3ATA 조건에서 90분간, 3회 처리되는 것일 수 있으며 이를 통해 엑소좀 생산 효율 및 수득율이 증가하는 것을 확인하였다.
본 발명에 따른 효과는 이상에서 예시된 내용에 의해 제한되지 않으며, 더욱 다양한 효과들이 본 명세서 내에 포함되어 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 고온 산소 처리 방법을 도식화한 것이다.
도 2는 대조군(A0)에서의 나노입자 추적 분석(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)　결과에 따른 엑소좀의 사이즈와 농도 분포를 나타낸 도이다.
도 3은 실험군(A1) 에서의 나노입자 추적 분석(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)　결과에 따른 엑소좀의 사이즈와 농도 분포를 나타낸 도이다.
도 4는 실험군(A2) 에서의 나노입자 추적 분석(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)　결과에 따른 엑소좀의 사이즈와 농도 분포를 나타낸 도이다.
도 5는 실험군(A3) 에서의 나노입자 추적 분석(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 결과에 따른 엑소좀의 사이즈와 농도 분포를 나타낸 도이다.
이상 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시 예들을 더욱 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 반드시 이러한 실시 예로 국한되는 것은 아니고, 본 발명의 기술사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양하게 변형 실시될 수 있다.
따라서, 본 발명에 개시된 실시 예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시 예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 그러므로, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
이하 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 세포 배양
엑소좀 추출을 위해 30 내지 40세 건강한 성인 남성의 하복부에서 각 70cc 의 지방을 흡입하여 기질혈관분획(SVF, stromal vascular fraction)을 추출한 후 대기압력을 갖는 -196℃ 질소탱크에서 냉동 처리하였다.
이후 상기 냉동 처리한 기질혈관분획을 해동하여 우태아혈청(Fetal bovine serum, FBS), 100 유닛(Units)/mL 페니실린 및 100 μg/mL 스트렙토마이신이 포함된 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 배양 배지로 사용하여 플라스크에 접종하고 37℃, Air, 5% CO2 배양기에서 7일간 배양하였으며, 충분한 줄기세포를 확보하기 위해 같은 조건에서 18일 더 배양하였다.
실시예 2. 고압 산소 처리
상기 실시예 1에서 배양한 세포를 4개군(A0, A1, A2, A3)으로 나누어 고압 산소 처리 횟수를 달리하여 하기와 같이 처리하였다.
각 샘플은 각 웰(10ml) 당 105 cells 수가 되도록 분주하였으며, 대조군 및 실험군은 각각 2개의 웰로 실험을 진행하였다.
고압 산소 처리는 고압 산소 챔버에서 3ATA, 90분간 세포를 배양함으로서 이루어졌으며 고압 산소 처리를 하지 않을 때는 37℃, Air, 5% CO2 조건의 일반 인큐베이터에서 배양하였다.
보다 구체적으로, 도 1에 나타낸 바와 같이 대조군인 A0는 고압 산소의 처리없이 일반 인큐베이터에서 4일간 배양하였으며, 실험군 중 A1은 배양 1일차에 1회의 고압 산소 챔버 내 배양을 시행한 후 일반 인큐베이터에서 70.5시간 배양하였으며, 실험군 중 A2는 배양 1일차 및 2일차에 각 1회씩, 총 2회의 고압 산소 챔버 내 배양을 시행한 후 46.5시간 동안 일반 인큐베이터에서 배양하였였고, 실험군 중 A3은 배양 1일차, 2일차 및 3일차에 각 1회씩, 총 3회의 고압 산소 챔버 내 배양을 시행한 후 22.5시간 일반 인큐베이터에서 더 배양하였다. 이후, 배양 4일차에 대조군 A0 및 실험군 A1 내지 A3을 모두 수거하여 총 8개의 웰 배양액을 -196℃ 질소탱크에서 냉동하였다.
실시예 3. 엑소좀 추출 및 특성 분석
상기 실시예 1에서 배양한 세포 및 실시예 2에서와 같이 고온 산소를 처리한 줄기세포로부터 엑소좀 생산성 및 수득율을 측정하기 위해 각 대조군 및 실험군에서 배양액을 수득한 뒤 ATPS(Aqueous Two-Phase System) 방법으로 엑소좀을 분리하였다.
상기 분리한 엑소좀은 나노입자 추적 분석(nanoparticle tracking)을 실시하여 입자의 크기와 농도를 측정하였다.
그 결과 도 2 내지 5 및 표 1에 나타낸 바와 같이 분리된 엑소좀은 대략 200 nm 내외 크기 범위(통상적인 엑소좀의 크기 범위)에 분포하였고, 입자 크기 분포가 대체로 균일하여 엑소좀의 크기나 분포 특성을 만족시키는 것을 확인할 수 있었다. 또한 표 1에 나타낸 바와 같이 고압산소를 처리한 A1 내지 A3의 경우 고압산소 처리 횟수가 증가함에 따라 엑소좀 개수 농도가 증가하여, 엑소좀 생산성이 향상됨을 확인하였다.
[표 1]
또한, 분리된 엑소좀에 대하여 유세포 분석을 실시하여 CD9, CD63 및 CD81 마커의 존재를 확인하였다.
CD9, CD63 및 CD81은 엑소좀의 대표적인 포지티브 마커이므로 CD9, CD63 및 CD81의 함량과 엑소좀의 함량은 서로 선형성을 가지며, CD9, CD63 및 CD81 함량의 증가는 엑소좀 함량의 비례적인 증가를 의미한다.
구체적으로, CD81에 대해 양성(positive)인 엑소좀을 분리하기 위하여, 엑소좀-휴먼 CD81 분리/검출 키트(ThermoFisher Scientific)를 제조사의 지시에 따라 사용하였고, PE-마우스 항-인간 CD9 항체(PE-Mouse anti-human CD9; BD Biosciences), PE-마우스 항-인간 CD63 항체(PE-Mouse anti-human CD63; BD Biosciences) 및 PE-마우스 항-인 간 CD81 항체(PE-mouse anti-human CD81; BD Biosciences)를 사용하여 마커를 염색한 후, 유세포 분석기(ACEA Biosciences)를 이용하여 분석하였다. 그 결과, 도 6에 도시된 바와 같이, 실시예 2에서 분리된 엑소좀은 양성 마커인 CD9, CD63 및 CD81에 대해 양성 인 것을 확인하였다. 이러한 결과는 상기 분리된 엑소좀이 엑소좀에 반드시 존재해야 하는 특이적 마커 특성을 만족하고 있는 것임을 보여준다.
따라서 본 발명을 이용하는 경우 높은 수율로 효과적으로 엑소좀을 수득 및 대량 생산할 수 있음을 확인하였다.
한편, 상술한 실험은 일반 배양기와 고압산소 처리가 가능한 배양기에서 이루어졌으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 본 발명에 의한 방법은 내부에서 압력 조절이 가능한 바이오리액터에서 실행될 수 있다. 즉, 시료를 두가지 압력 조건을 가지는 배양기 사이에서 번갈아 배양하는 방식으로 본 발명의 방법을 수행할 수도 있고, 바이오리액터 내의 공간 내에서 압력 조건을 변화시켜 본 발명의 방법을 수행할 수도 있다.
이상 본 발명의 실시예들을 더욱 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 반드시 이러한 실시예로 국한되는 것은 아니고, 본 발명의 기술사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양하게 변형 실시될 수 있다. 따라서, 본 발명에 개시된 실시예들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 그러므로, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 보호 범위는 아래의 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (7)

  1. 세포가 포함된 시료를 제1 기압의 환경에서 배양하는 단계; 및
    상기 제1 기압보다 높은 제2 기압의 환경에서 상기 시료를 배양하는 단계; 를 포함하며,
    상기 제2 기압 조건은 고압의 산소에 의해 조성되는, 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 시료로부터 엑소좀을 추출하는 단계; 를 더 포함하는 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 세포는 줄기세포인, 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 제1 기압의 환경에서 배양하는 단계 및 상기 제2 기압의 환경에서 배양하는 단계가 2회 이상 반복 수행되는, 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 제2 기압은 1 내지 5ATA인, 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 제2 기압의 환경에서 시료를 배양하는 단계는 60 내지 120분간 수행되는, 엑소좀 생산성을 향상시키는 방법.
  7. 엑소좀을 포함하는 조성물로서,
    1ml 당 5X109개 이상의 엑소좀 개수농도를 가지는 엑소좀을 포함하는 조성물.
KR1020220098866A 2022-01-14 2022-08-08 엑소좀 생산성을 증가시키는 방법 및 그에 의하여 생산된 엑소좀을 포함하는 조성물 KR20230110160A (ko)

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