KR20230101722A - 메타리지움 아니소플리애 ft83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법 - Google Patents

메타리지움 아니소플리애 ft83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20230101722A
KR20230101722A KR1020220184585A KR20220184585A KR20230101722A KR 20230101722 A KR20230101722 A KR 20230101722A KR 1020220184585 A KR1020220184585 A KR 1020220184585A KR 20220184585 A KR20220184585 A KR 20220184585A KR 20230101722 A KR20230101722 A KR 20230101722A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
strain
composition
culture
metarhizium anisopliae
test
Prior art date
Application number
KR1020220184585A
Other languages
English (en)
Inventor
박순한
정남준
김근곤
서인식
구성모
김영준
한지희
Original Assignee
주식회사 남보
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 남보 filed Critical 주식회사 남보
Publication of KR20230101722A publication Critical patent/KR20230101722A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P7/00—Arthropodicides
    • A01P7/02—Acaricides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P7/00—Arthropodicides
    • A01P7/04—Insecticides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

본 발명은 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 이를 포함하는 병충 방제용 조성물 및 방제 방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 균주 및 조성물은 작물에서 약해를 일으키지 않으면서 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 및/또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)의해 유발된 병충해를 효과적으로 방제할 수 있는 효과를 나타내어 다양한 병충에 대한 살충제로 이용될 수 있다.

Description

메타리지움 아니소플리애 FT83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법 {Metarizium anisopliae FT83 strain, control composition comprising the same, and control method using the same}
본 발명은 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 작물에서 약해를 일으키지 않으면서 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)의해 유발된 병충해를 효과적으로 방제할 수 있는 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물, 및 이를 이용한 방제 방법에 대한 것이다.
작은뿌리파리 (Bradysia agrestis Sasakawa)는 파리목 (Diptera) 검정날개버섯파리과 (Sciaridae)의 Bradysia 속에 속하는 곤충으로, 형태학적으로 성충의 크기는 1.1~2.4 mm이며 머리는 흑갈색이고 몸은 대체로 검은색을 띤다. 알은 타원형으로 길이는 0.2mm 정도이며, 알 덩어리 또는 낱개로 낳는다. 유충은 4령까지 있으며, 유충의 몸길이는 4mm 정도로 머리는 검고 몸은 투명하여 섭식한 먹이가 보인다. 작은뿌리파리는 5월 하순에 가장 많이 발생하는 것으로 알려져 있으며, 여름에는 적어졌다가 가을에 다시 증가하고, 시설하우스에서 자주 발생하는 것으로 알려져 있다. 작은뿌리파리는 1978년 일본 시설하우스에서 재배되고 있던 백합과 오이에서 처음 보고되었으며, 우리나라에서는 1998년 경남 진주의 한 육묘장의 수박유묘에서 처음 보고되었다.
작은뿌리파리는 최근 습한 온실환경에서 밀도가 늘어난다고 관찰되었으며, 작은뿌리파리의 유충에 의해 식물의 줄기나 뿌리가 갉아먹히게 되거나, 뿌리골무를 통해 뿌리내부로 침입하여 식물을 가해하는 등의 피해를 입히고, 최근에는 딸기 폿트육묘 재배에서도 작은뿌리파리의 발생이 크게 증가하여 농가의 피해가 막심한 상황이다.
점박이응애 (Tetranychus urticae)는 원예, 화훼 그리고 밭작물에 막대한 피해를 일으키는 주요 해충이다. 거미류 진드기목의 응애과에 속하며, 보통 한 해에 10회 이상 발생하고 각종 과수와 채소에 기생하면서 해를 끼친다. 점박이응애는 약 0.2㎜ 크기로 하플로이드 (haplodiploid) 양식을 지니고 있고 세대수가 짧아 다른 해충에 비해 살비제 저항성 발달이 빠르다. 현재 전 세계적으로 약 90 여종 이상의 살비제가 개발되어 있고, 국내에서는 약 50여종이 상용화되어 있으나 현재까지 등록된 대부분의 살비제에 저항성 개체군이 발생한 상태이다.
고자리파리 (Delia antiqua)는 연작하는 포장에서 많이 발생하는 해충으로, 유충은 마늘, 양파, 파 부추와 백합과 화훼류의 뿌리가 난 부분에서부터 파먹어 들어가 지하부의 비늘줄기를 가해하여, 아래 잎부터 노랗게 되어 말라 죽게된다. 피해받은 식물은 뿌리의 중간이 잘라진 채 잘 뽑아지며, 그 속에서 구더기 모양의 유충을 쉽게 관찰된다.
현재, 작은뿌리파리, 고자리파리 및 점박이응애를 방제하기 위해서 다양한 화학적 살충제가 이용되고 있으나, 화학농약은 인간과 가축에 독성을 나타낼 뿐만 아니라 생태계의 파괴, 농산물의 잔류독성, 병해충에 대한 약제 저항성 유발 등의 문제점을 나타낸다고 알려져있다. 그리고, 근래의 농산물 소비자들은 변화된 소비행태에 따라 저농약, 무농약 또는 유기농 농산물을 선호하고 있는 추세이며, 작물 재배 농가들도 이러한 변화에 맞춰 친환경농업을 추구하고 있다. 변화된 상황과 및 환경 보호적 관점에서, 최근에는 생물학적 방제연구과 큰 관심을 받으면서 진행되고 있으며, 딸기 작은뿌리파리, 고자리파리 및 점박이응애의 심각성과 맞물려 이를 방제하기 위한 미생물제제에 대한 필요성이 크게 대두되고 있는 상황이다.
이에 본 발명자들은 본 발명의 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주가 병충에 대한 살충 활성이 있음을 규명하였고, 본 발명에 따른 균주 및 이를 포함하는 조성물이 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 및/또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대한 방제효과가 월등히 우수한 것을 확인하였다.
이에, 본 발명의 목적은 살충활성을 갖는 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 균주의 배양물, 배양물의 농축물, 배양물의 건조물 및 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는, 병충 방제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 병충 방제 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 이를 포함하는 병충 방제용 조성물 및 방제 방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 균주 및 조성물은 병충에 의해 유발된 식물체의 병충해를 효과적으로 방제할 수 있다.
이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 양태는, 살충활성을 갖는 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주이다.
본 발명에 있어서, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주는 (재)농업기술실용화재단을 통해 수득하였다
본 발명의 일 구현예에서, 균주의 ITS (Internal transcribed spacer) 서열은 서열번호 1의 염기 서열을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 있어서 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주는 공시 균주인 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) NHJ6195 균주와 99%의 상동성을 가지고 있음이 확인되었으며, 양 균주간의 상이성이 인정되었다.
본 발명에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주의 기존 공시 균주와의 상동성은 NCBI 데이터베이스의 Blast 검색을 통해 확인되었다.
본 발명자들은 수득한 균주를 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주로 명명하고, 국립농업과학원 미생물은행 (Korean Agricultural Culture Collection; KACC)에 2021.03.05자로 기탁하여 수탁번호 KACC 83042BP를 부여받았다.
본 명세서 상의 용어 "병충"은 병해를 일으키는 벌레를 의미하는 것으로, 병충은 농업해충, 위생해충 및 산림해충을 포함할 수 있으나, 병충의 종류는 제한되는 것은 아니다. 또한, 병충은 성충 및 유충 모두를 포함한다. 본 발명의 일 구현예에서, 병충은 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)인 것일 수 있다.
본 명세서 상의 용어 "작은뿌리파리 (Bradysia agrestis)"는 파리목 검정날개버섯파리과 Bradysia 속으로, 성충은 크기는 1.1~2.4mm이며 딸기, 백합, 오이, 수박 등 양액재배 작물에 병충해를 일으킨다.
본 명세서 상의 용어 "점박이응애 (Tetranychus urticae)"는 응애목 잎응애과 Tetranychus 속으로, 암컷 성충은 몸길이가 0.4~0.5 mm이고, 수컷 성충은 0.3 mm 정도이고 몸이 담갈색으로 홀쭉하며 배 끝이 뾰족하고 다리가 긴 특징이 있다. 점박이응애는 가지, 감귤, 국화, 더덕, 들깨, 딸기, 땅콩, 배, 사과, 수박, 안개꽃, 오이, 장미, 접시꽃, 참외, 카네이션, 콩 등의 작물에 병충해를 일으키는 것으로 알려져 있다.
본 명세서 상의 용어 "고자리파리 (Delia antiqua)"는 파리목 꽃파리과로 주로 파 또는 마늘에 대해서 병해를 일으키는 것으로 알려져 있다. 고자리파리는 연3회 발생하고 가을에 발생하는 유충은 대부분 번데기로 월동에 들어가지만 일부 남부지방에서는 유충 상태로도 월동하며, 성충은 기주식물의 잎 틈새나 주위의 흙속에 알을 낳는다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 본 발명에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주는 파, 딸기, 상추, 오이, 배추, 및 토마토 등의 작물에 약해를 일으키지 않으면서, 딸기에서 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대한 방제효과가 우수함을 확인하였고 (도 8, 도 10 및 도 12 참조), 파에서 고자리파리 (Delia antiqua)에 대한 방제효과가 우수함을 확인하였다.
또한, 본 발명에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주는 기존 합성 살균제 (합성 농약)와의 합제 시, 상승 효과를 유발하여 상용 농도 이하의 합성 농약 사용 시에도 상용 농도 사용과 유사한 수준 또는 그 이상의 병충 방제 효과를 가진다. 따라서, 합성 살균제의 상용 농도 사용량을 줄임과 동시에 환경친화적으로 병충해를 방제하는데 사용될 수 있다.
메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주와 합제로 사용될 수 있는 합성 농약은 벤퓨라카브 (benfuracarb), 디플루벤주론 (diflubenzuron), 펜티온 (fenthion) 또는 테플루벤주론 (teflubenzuron), 다조맷 (dazomet), 메탐소듐 (Metam sodium), 프로클로아즈 망간 (prochloaz manganese), 플룩사피록사드 (fluxapyroxad), 피라클로스트로빈 (pyraclostrobin), Metalaxyl-M, 피리벤카브 (pyribencarb), 프로티오코나졸 (prothioconazole), 멧코나졸 (metconazole), 테부코나졸 (tebuconazole), 이프로디온 (iprodione), 플루디옥소닐 (fludioxonil), 베노밀 (benomyl) 및/또는 디페노코나졸 (difenoconazole)일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 양태는, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 균주의 배양물, 배양물의 농축물, 배양물의 건조물 및 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는, 병충 방제용 조성물이다.
본 명세서 상에서 "방제"는 식물체를 병충해로부터 예방하거나 구제하는 모든 행위를 의미한다. 방제는 통상적인 식물 병원균 또는 병충에 대한 방제 방법이라면 한정되지 않고 적용할 수 있다.
본 명세서 상의 용어 "배양"은 미생물을 적당히 인공적으로 조절한 환경 조건에서 생육시키기 위하여 수행하는 모든 행위를 포함한다. 본 발명에서 "발효"를 포함하는 개념으로서 용어 "배양물"은 "발효물"을 포함하는 의미이고, 배지에서 배양한 배양액 자체(즉, 균을 포함하고 있는 배양액 자체), 또는 배양액에 열처리를 가한 가공물 등 배양액 자체로부터 파생되는 가공물을 포함한다.
본 발명에 따른 조성물은 유효성분인 균주, 이의 배양물, 배양물의 농축물, 배양물의 건조물 및/또는 균주의 배양 상등액 외에 균체를 포함하는 배양물, 균체의 추출물, 이들의 농축액, 농축물, 건조물, 또한 필요에 따라서 희석액, 희석물 등을 포함할 수 있으며, 배양액, 배양물을 처리하여 얻어지는 모든 상태의 것을 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서 균주의 배양법, 추출법, 분리법, 농축법, 건조법, 희석법 등은 특별히 한정되지 않는다.
균주를 배양하기 위한 배지에는 통상적으로 탈지유, 훼이, 카제인 등의 우유 단백질, 당류, 효모 엑기스 등이 포함될 수 있다. 배양 방법으로는 일반적인 각종 호기적 또는 혐기적인 방법을 적당히 사용될 수 있고, 균주를 배양한 후에는 필요에 따라 배양물이나 그 상층액을 농축, 건조, 희석할 수도 있다.
또한, 원심분리법이나 막분리법을 사용하여 배양물의 상층액과 균체를 분리하여 균체를 농축한 상태로 회수할 수도 있다. 그리고 균체에 초음파 처리나 효소 처리 등을 행하여 균체 내의 성분을 추출하거나, 배양물이나 그 상층액, 균체나 그 추출물 등을 건조할 수도 있다. 이들은 본 발명의 조성물의 유효 성분으로서 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 병충 방제용 조성물은 공지된 방법을 사용하여 논, 밭, 과수원, 비-경작 황무지, 집 등에 걸쳐서 분무하여, 해충 및 선충이 본 발명의 조성물과 접촉하거나 또는 본 발명의 조성물을 섭취하도록 하여, 해충 및 선충을 근절시킬 수 있다.
본 발명에 따른 병충 방제용 조성물을 일반적인 농약 산포 방법과 동일한 방법을 사용하여 산포될 수 있다. 본 발명의 조성물을 산포하는 시기는, 종자, 씨감자 또는 구근 등의 경우에는 식재 전일 수 있으며, 토양에 처리하는 경우에는 실생 식재 후에 생육 기간 동안에 임의의 시기일 수 있고, 향상된 효능을 위해서는 파종, 육묘 또는 실생 식재일 때일 수 있으며, 경엽 산포 또는 분주의 경우에는 농장에서의 육묘 기간 동안 및 생육 기간 동안이라면 어느 때라도 좋으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 병충 방제용 조성물은 미생물 제제일 수 있고, 미생물 제제는 통상적인 방법으로 제형화할 수 있으며, 건조분말 형태 또는 액상비료 형태로 제조할 수 있다. 구체적으로, 본 발명에 따른 미생물 제제는 액상 형태로 제조될 수 있으며 이에 증량제를 첨가하여 가루분말의 형태로 이용하거나 이를 제형화하여 과립화시킬 수도 있으나, 그 제형에 특별히 한정되지는 않는다.
본 명세서상의 용어 "미생물 제제"는 미생물 자체를 직접 이용하거나 미생물을 포함한 제제를 이용하여 농작물에 피해를 주는 각종 식물 병충해를 효과적으로 방제하는데 쓰이는 생물 제제이다. 본 발명의 구체적인 일 구현예에서, 병충은 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서 미생물 제제는 균주 또는 이의 배양물에 첨가제, 증량제, 영양제등의 부가제를 첨가하여 제조할 수 있다. 이때, 첨가제로는 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬 설포석시네이트, 소듐 알킬 아릴 설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴 포스포릭 에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴 폴리머, 폴리옥시알킬온 알킬 페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐 페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용할 수 있다.
증량제 및 영양제로는 skim milk (배지), 콩가루, 쌀, 밀, 황토, 규조토, 벤토나이트 (bentonite), 덱스트린, 포도당 및 전분으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 또는 둘 이상이 사용될 수 있다.
붕해제로는 벤토나이트 (bentonite), 탈크 (talc), 다이아라이트 (dialite), 카올린 (kaolin) 및 칼슘 카보네이트 (calcium carbonate)로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물에서 조성물에 함유된 미생물의 유효량은 경작지 면적(㎡) 당 1 내지 1 X 10100의 미생물 수로 포함될 수 있다. 조성물이 살포에 의해 처리되는 경우, 조성물에는 균주가 ml 당 1 내지 1X10100의 미생물 농도로 포함될 수 있으며, 침지에 의해 처리되는 경우, 조성물에 함유된 미생물의 유효량은 ml당 1 내지 1 X 10100의 미생물 농도로 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태는 다음 단계를 포함하는 병충 방제 방법이다:
메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 균주의 배양물, 배양물의 농축물, 배양물의 건조물 및 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 조성물을 식물체에 접촉시키는 접촉 단계.
본 명세서 상의 용어 "식물체"는 완전한 식물체 또는 완전한 식물체로부터 분리된 일부를 의미한다.
본 명세서에서 "식물"로 지칭되는 경우, 달리 언급하지 않는 한, 식물세포, 식물조직, 종자 또는 식물체를 모두 포함하는 의미로 해석될 수 있다.
본 명세서 상의 용어 "식물"은 벼, 밀, 보리, 옥수수, 콩, 감자, 팥, 귀리, 수수를 포함하는 식량 작물류; 애기장대, 부추, 청경채, 시금치, 아스파라거스, 배추, 무, 고추, 딸기, 토마토, 수 박, 오이, 양배추, 꽃양배추, 참외, 호박, 파, 양파, 당근, 가지를 포함하는 채소 작물류; 황금, 황기, 인삼, 담배, 목화, 참깨, 사탕수수, 사탕무우, 들깨, 땅콩, 유채를 포함하는 특용 작물류; 도라지, 연근을 포함하는 근채류; 사과나무, 배나무, 대추나무, 복숭아, 양다래, 포도, 감귤, 감, 자두, 살구, 바나 나를 포함하는 과수류; 패랭이꽃, 안개꽃, 과꽃, 장미, 글라디올러스, 거베라, 카네이션, 국화, 백합, 튤립을 포함하는 화훼류; 및 라이그라스, 레드클로버, 오차드그라스, 알팔파, 톨페스큐, 페레니얼라이그라스 등을 포함하는 사료 작물류로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서 상의 용어 "접촉"은 본 발명에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 균주의 배양물, 배양물의 농축물, 배양물의 건조물 및 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 조성물을 식물체 또는 병충에 노출시키는 것을 의미한다. 접촉은 미생물제제를 살포하거나 도포함으로써 이뤄질 수 있고, 살포 또는 도포 방법은 당업계에 알려진 방법이라면 제한되지 않고 사용될 수 있고, 구체적으로는 인간, 동물 등의 주변 또는 식물체, 식물체의 주변에 병충이 서식하는 장소, 병충이 서식할 것으로 예상되는 장소에 방제용 미생물제제를 위치시키는 것일 수 있다.
본 발명은 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 이를 포함하는 병충 방제용 조성물 및 방제 방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 균주 및 조성물은 작물에서 약해를 일으키지 않으면서 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)의해 유발된 병충해를 효과적으로 방제할 수 있는 효과를 나타내어 다양한 병충에 대한 살충제로 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 배양한 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 상추에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 오이에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 배추에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 토마토에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기 (품종: 금실)에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제를 처리하지 않은 무처리구에서 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis)로 인해 병충해가 발생한 딸기 (품종: 금실)를 나타내는 사진이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기 (품종: 설향)에 대한 첫번째 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기 (품종: 설향)에서 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대한 첫번째 약효시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 11은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기 (품종: 설향)에 대한 두번째 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 12는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 딸기 (품종: 설향)에서 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대한 두번째 약효시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 13은 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 대파 (품종: 만추흑금장)에서 고자리파리 (Delia antiqua)에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 14는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 쪽파 (품종: 무안재래종)에서 고자리파리 (Delia antiqua)에 대한 약해시험 결과를 나타내는 사진이다.
도 15는 본 발명의 일 실시예에 따른 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 포함하는 미생물제제의 파 (품종: 만추흑금장)에서 고자리파리 (Delia antiqua)에 대한 약효시험 결과를 나타내는 사진이다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 메타리지움 아니소플리애( Metarhizium anisopliae )의 동정
재단법인 농업기술실용화재단을 통해 수득한 단일 균체를 도 1에서 확인할 수 있듯이 백금이를 이용하여 새로운 PDA (Potato Dextrose Agar) 배지에 접종하여 25℃ 온도에서 4일간 배양하여 단일 균주 확보 후에, 30ml PDB (Potato Dextrose Broth)배지에 접종하여 25℃ 온도에서 4일간 진탕 배양(회전속도 180rpm) 한 30mL 배양액을 1차 배양(3,000ml) 접종원으로 사용하였다. 동일한 배양 조건에서 배양한 3,000mL 배양액을 2차 배양(30,000ml)의 접종원으로 사용하였다. 동일한 배양 조건에서 배양한 30,000mL 배양액을 3차 배양(300,000ml)의 접종원으로 사용하였다. 동일한 배양 조건에서 배양한 300,000mL 배양액을 최종(4차) 배양(3,000,000ml)의 접종원으로 사용하였다.
본 발명자들은 획득한 균주를 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83로 명명하고, 상기 균주를 배양하였다. 배양된 균주의 농도를 1.0 x 106 CFU/mL(g) 농도의 유효성분으로 포함하도록 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae) 방제용 조성물 (미생물제제)을 제조하였다. 제조된 조성물을 1:104 로 희석하고 DifcoTM Potato Dextrose Agar (Becton, Dickinson and Company) 배지에 100 μL씩 접
종하고, 26 ℃에서 7일 동안 배양한 후 우점미생물 콜로니 (Colony)를 선별하였다. 선별된 콜로니 중 대표 유효 미생물과 동일한 형태의 콜로니를 순수 분리하였다. 순수 분리된 콜로니의 유전자 염기서열 (ITS region)를 분석하고 분석된 서열의 상동성을 기존에 알려진 균주와 비교하였다. 배양된 균주의 ITS region의 염기서열을 표 1에, 상동성 분석결과를 표 2에 나타내었다.
서열번호 명명 서열목록 (5'-> 3') 비고
1 ITS_sequence AACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTACCGAGTTATCCAACTCCCAACCCCTGTGAATTATACCTTTAATTGTTGCTTCGGCGGGACTTCGCGCCCGCCGGGGACCCAAACCTTCTGAATTTTTTAATAAGTATCTTCTGAGTGGTTAAAAAAAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCGTCAGTATTCTGGCGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTACGCCCCTCAAGTCCCCTGCGGACTTGGTGTTGGGGATCGGCGAGGCTGGTTTTCCAGCACAGCCGTCCCTTAAATTAATTGGCGGTCTCGCCGTGGCCCTCCTCTGCGCAGTAGTAAAGCACTCGCAACAGGAGCCCGGCGCGGTCCACTGCCGTAAAACCCCCCAACTTTTTATAGTTGACCTCGAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGCATA
Sequences producing significant alignments
Accession Description Max score Total score Query cover E value Ident
AY646393.1 Metarhizium anisopliae strain NHJ6195 18S ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer1, 5.8S ribosomal RNA gene, and internal transcribed spacer2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence 1011 1011 100% 0.0 99.64%
ITS region의 염기서열 및 상동성 분석결과, 배양된 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주는 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) NHJ6195 균주와 99%의 유사성을 가지고 있는 균주로 확인되었다.
실시예 2: 유식물 약해시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 시용에 따른 작물 (딸기, 배추, 상추, 토마토, 오이) 이식 후 유식물에 미치는 약해를 검정하였다.
시험작물인 딸기, 배추, 상추, 토마토, 오이의 유묘기에 방제용 조성물을 관주처리하였다. 포트의 규격은 Φ 10cm로 설정하고, 시험에 사용된 토성은 토양(양토) + 상토를 5:5 비율로 설정하였고, 하우스 내 평균온도는 22.7 ℃ 였다. 제조된 방제용 조성물은 기준량 (1000배 희석, 100ml/주) 또는 배량 (500배 희석, 100ml/주)을 처리하였다. 그리고, 표 3과 같이 완전임의배치법을 3 반복하여 제조된 방제용 조성물을 딸기, 배추, 상추, 토마토 및 오이의 유묘기에 관주처리하고 7, 14, 21일 후 3회에 거쳐 외관상의 약해 유무 달관 조사를 실시하였다.
구분 작물 수 처리 수 반복 수 총구 수 구당 포트 수 총 소요 포트 수
약해시험 5 3 3 45 5 포트 225 포트
유식물 약해 시험 결과, 표 4 및 도 2 내지 6에서 확인할 수 있듯이, 5종의 시험작물 모두에서 기준량 및 배량에 대해 약해 (약해 판정기준결과: 0)는 나타나지 않았다.
시험작물(품종) 처리내용 약해정도 (0~4) 최종결과
처리 후 7일차 처리 후 14일차 처리 후 21일차
딸기(설향) 기준량 0 0 0 약해없음
배량 0 0 0 약해없음
배추 (불암 플러스) 기준량 0 0 0 약해없음
배량 0 0 0 약해없음
상추 (적치마) 기준량 0 0 0 약해없음
배량 0 0 0 약해없음
오이 (조은백다다기) 기준량 0 0 0 약해없음
배량 0 0 0 약해없음
토마토 (호용) 기준량 0 0 0 약해없음
배량 0 0 0 약해없음
실시예 3: 작은뿌리파리 ( Bradysia agrestis ) 방제 효과 확인
3-1. 약해시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 금실)에 대한 약해를 확인하였다.
시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하여 시설 내에서 고설베드를 이용해 재배하였다. 제조된 방제용 조성물은 1000배 희석한 기준량 (100ml/주) 또는 500배 희석한 배량 (100ml/주)을 처리하였다. 그리고, 표 5와 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 3, 7, 14일 후에 외관상 약해유무를 3회 달관조사하여 제조된 방제용 조성물의 딸기에 대한 약해를 평가하였다. 약해조사는 다음과 같은 기준에서 실시하였다: 0: 육안으로 약해가 인정되지 않음, 1: 작물체의 아주 가벼운 약해가 인정되며 7일 이내에 회복함, 2: 작물체의 생육이 약간 억제되거나 적은 부분에 약해가 인정됨, 3: 작물체의 50% 정도 약해가 인정됨, 4: 상당한 피해를 받고 있으나 아직 건전한 부분이 남아있음, 5: 심한 약해를 받고 고사상태임.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약해시험 3 3 9 5 m2 45 m2 105 m2
약해 시험 결과, 표 6 및 도 7에서 확인할 수 있듯이, 딸기 (품종: 금실)에서 기준량 및 배량에 대해 약해는 나타나지 않았다.
시험작물 약해정도 (0~5) 비 고
기준량 배량
딸기 (금실) 0 0 약해 없음
3-2. 약효시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 금실)에 대한 약효를 확인하였다.
시험작물인 딸기의 유충발생 초기에 7일 간격으로 방제용 조성물을 2회 관주처리하였다. 시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하였다. 처리구와 무처리구에 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis)의 발생을 유도하였다. 제조된 방제용 조성물을 1,000 배 희석하여 주당 100ml씩 처리하였다. 그리고, 표 7과 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 7일 후 구당 10주에 대한 생충수를 1회 조사하였고, 처리구간 유의차 검정은 Duncan's multiple range test (DMRT)로 95% 수준에서 유의성을 검정하였다. 이때, 평가기준으로 무처리구의 최소발생율 50 마리 이상으로 잡아 처리구와 무처리구의 7일 후 생충 수를 비교하였다.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약효시험 2 3 6 10 m2 60 m2 105 m2
표 8 및 도 8에서 확인할 수 있듯이, 시험결과 무처리 평균 발생율은 67.7 마리로 약제를 평가하기에 충분한 조건이었으며, 본 발명에 따른 방제용 조성물의 방제효과는 7일 후 75.3% 나타났고 무처리구 대비 통계적 유의성을 보였다. 결과적으로, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 높은 방제가를 보였으며, 상기 균주 및 조성물은 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis)에 대해서 실용성이 있다고 판단된다.
시험약제 생충 수 (마리) - 약제처리 후 7일차 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 11.0 22.0 17.0 16.7 b 75.3
무처리구 65.0 58.0 80.0 67.7 A -
C.V.(%) ------------------------------- 23.1
실시예 4: 점박이응애 ( Tetranychus urticae ) 방제 효과 확인 - 1
4-1. 약해시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 설향)에 대한 약해를 확인하였다.
시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하여 시설 내에서 고설베드를 이용하여 재배하였다. 제조된 방제용 조성물은 제조된 조성물을 1000배 희석한 기준량 또는 500배 희석한 배량을 처리하였다. 그리고, 표 9와 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 3, 5, 7일 후에 외관상 약해유무를 3회 달관조사하여 제조된 방제용 조성물의 딸기에 대한 약해를 평가하였다. 약해조사는 다음과 같은 기준에서 실시하였다: 0: 육안으로 약해가 인정되지 않음, 1: 작물체의 아주 가벼운 약해가 인정되며 7일 이내에 회복함, 2: 작물체의 생육이 약간 억제되거나 적은 부분에 약해가 인정됨, 3: 작물체의 50% 정도 약해가 인정됨, 4: 상당한 피해를 받고 있으나 아직 건전한 부분이 남아있음, 5: 심한 약해를 받고 고사상태임.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약해시험 3 3 9 5 m2 45 m2 105 m2
약해 시험 결과, 표 10 및 도 9에서 확인할 수 있듯이, 딸기 (품종: 숙향)에서 기준량 및 배량에 대해 약해는 나타나지 않았다.
시험작물 약해정도 (0~5) 비 고
기준량 배량
딸기 (설향) 0 0 약해 없음
4-2. 약효시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 설향)에 대한 약효를 확인하였다.
시험작물인 딸기에 응애가 발생된 초기에 방제용 조성물을 경엽처리하였다. 시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하였다. 처리구와 무처리구에 점박이응애 (Tetranychus urticae)의 발생을 유도하였다. 제조된 방제용 조성물을 1,000 배 희석하여 처리하였다. 그리고, 표 11과 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 7일 및 14일 후 구당 20엽에 대한 생충률을 3회 조사하였고, 처리구간 유의차 검정은 Duncan's multiple range test (DMRT)로 95% 수준에서 유의성을 검정하였다. 이때, 평가기준으로 무처리구의 최소발생율 100 마리 이상으로 잡아 처리구와 무처리구의 7일 및 14일 후 생충률을 비교하였다. 생충률은 하기 수학식 1에 따라 계산하였다.
[수학식 1]
Figure pat00001
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약효시험 2 3 6 10 m2 60 m2 105 m2
표 12 내지 13 및 도 10에서 확인할 수 있듯이, 시험결과 무처리 평균 발생율은 100마리 이상으로 약제를 평가하기에 충분한 조건이었으며, 본 발명에 따른 방제용 조성물의 방제효과는 7일 후 60.5%, 14일 후 64.9%로 나타났고 무처리구 대비 통계적 유의성을 보였다. 결과적으로, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 높은 방제가를 보였으며, 상기 균주 및 조성물은 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대해서 실용성이 있다고 판단된다.
시험약제 약제처리전
밀도 (마리/구)		 생충률(%)- 약제처리 후 7일차 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 115.7 51.9 42.0 60.4 51.4 b 60.5
무처리구 133.3 143.4 128.1 119.3 130.3 a -
C.V.(%) ------------------------------- 13.6
시험약제 약제처리전
밀도 (마리/구)		 생충률(%)- 약제처리 후 14일차 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 115.7 52.7 70.5 61.3 61.5 b 64.9
무처리구 133.3 159.6 178.9 188.0 175.5 a -
C.V.(%) ------------------------------- 6.6
실시예 5: 점박이응애 ( Tetranychus urticae ) 방제 효과 확인 - 2
5-1. 약해시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 설향)에 대한 약해를 확인하였다.
시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하여 시설 내에서 고설베드를 이용하여 재배하였다. 제조된 방제용 조성물은 제조된 조성물을 1000배 희석한 기준량 또는 500배 희석한 배량을 처리하였다. 그리고, 표 14와 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 3, 5, 7일 후에 외관상 약해유무를 3회 달관조사하여 제조된 방제용 조성물의 딸기에 대한 약해를 평가하였다. 약해조사는 다음과 같은 기준에서 실시하였다: 0: 육안으로 약해가 인정되지 않음, 1: 작물체의 아주 가벼운 약해가 인정되며 7일 이내에 회복함, 2: 작물체의 생육이 약간 억제되거나 적은 부분에 약해가 인정됨, 3: 작물체의 50% 정도 약해가 인정됨, 4: 상당한 피해를 받고 있으나 아직 건전한 부분이 남아있음, 5: 심한 약해를 받고 고사상태임.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약해시험 3 3 9 5 m2 45 m2 105 m2
약해 시험 결과, 표 15 및 도 11에서 확인할 수 있듯이, 딸기 (품종: 숙향)에서 기준량 및 배량에 대해 약해는 나타나지 않았다.
시험작물 약해정도 (0~5) 비 고
기준량 배량
딸기 (설향) 0 0 약해 없음
5-2. 약효시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 딸기 (품종: 설향)에 대한 약효를 확인하였다.
시험작물인 딸기에 응애가 발생된 초기에 방제용 조성물을 경엽처리하였다. 시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 20 X 15 cm로 설정하였다. 처리구와 무처리구에 점박이응애 (Tetranychus urticae)의 발생을 유도하였다. 제조된 방제용 조성물을 1,000 배 희석하여 처리하였다. 그리고, 표 16과 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 7일 및 14일 후 구당 20엽에 대한 생충률을 3회 조사하였고, 처리구간 유의차 검정은 Duncan's multiple range test (DMRT)로 95% 수준에서 유의성을 검정하였다. 이때, 평가기준으로 무처리구의 최소발생율 100 마리 이상으로 잡아 처리구와 무처리구의 7일 및 14일 후 생충률을 비교하였다. 생충률은 상기 수학식 1에 따라 계산하였다.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약효시험 2 3 6 10 m2 60 m2 105 m2
표 17 내지 18 및 도 12에서 확인할 수 있듯이, 시험결과 무처리 평균 발생율은 100마리 이상으로 약제를 평가하기에 충분한 조건이었으며, 본 발명에 따른 방제용 조성물의 방제효과는 7일 후 64.1%, 14일 후 66.0%로 나타났고 무처리구 대비 통계적 유의성을 보였다. 결과적으로, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 높은 방제가를 보였으며, 상기 균주 및 조성물은 점박이응애 (Tetranychus urticae)에 대해서 실용성이 있다고 판단된다.
시험약제 약제처리전
밀도 (마리/구)		 생충률(%)- 약제처리 후 7일차 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 196.0 42.4 50.7 64.3 52.5 b 64.1
무처리구 208.7 154.7 145.8 137.6 146.0 a -
C.V.(%) ------------------------------- 13.9
시험약제 약제처리전
밀도 (마리/구)		 생충률(%)- 약제처리 후 14일차 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 196.0 57.6 67.7 82.4 69.2 b 66.0
무처리구 208.7 191.5 172.5 246.0 203.3 a -
C.V.(%) ------------------------------- 15.3
실시예 6: 고자리파리 ( Delia antiqua ) 방제 효과 확인
6-1. 약해시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 파 [품종: 만추흑금장 (대파) 및 무안재래종 (쪽파)]에 대한 약해를 확인하였다.
시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 15 X 15 cm로 설정하여 멀칭재배하였다. 제조된 방제용 조성물은 제조된 조성물을 1000배 희석한 기준량 또는 500배 희석한 배량을 처리하였다. 그리고, 표 19와 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 7, 14, 21일 후에 외관상 약해유무를 3회 달관조사하여 제조된 방제용 조성물의 파에 대한 약해를 평가하였다. 약해조사는 다음과 같은 기준에서 실시하였다: 0: 육안으로 약해가 인정되지 않음, 1: 작물체의 아주 가벼운 약해가 인정되며 7일 이내에 회복함, 2: 작물체의 생육이 약간 억제되거나 적은 부분에 약해가 인정됨, 3: 작물체의 50% 정도 약해가 인정됨, 4: 상당한 피해를 받고 있으나 아직 건전한 부분이 남아있음, 5: 심한 약해를 받고 고사상태임.
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약해시험 대파 3 3 9 5 m2 45 m2 105 m2
쪽파 3 3 9 5 Pot 45 Pot 45 Pot
약해 시험 결과, 표 20 및 도 13 내지 도 14에서 확인할 수 있듯이, 파 [품종: 만추흑금장 (대파) 및 무안재래종 (쪽파)]에서 기준량 및 배량에 대해 약해는 나타나지 않았다.
시험작물 약해정도 (0~5) 비 고
기준량 배량
대파 (만추흑금장) 0 0 약해 없음
쪽파 (무안재래종) 0 0 약해 없음
6-2. 약효시험
실시예 1에서 배양한 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 방제용 조성물의 파 (품종: 만추흑금장)에 대한 약효를 확인하였다.
시험작물인 파의 정식 후 방제용 조성물을 토양관주처리하였다. 시험기간 중 혼용 및 타 약제의 처리는 하지 않았으며, 재식거리는 15 X 15 cm로 설정하였다. 처리구와 무처리구에 고자리파리 (Delia antiqua)의 발생을 유도하였다. 제조된 방제용 조성물을 1,000 배 희석하여 처리하였다. 그리고, 표 21과 같이 난괴법 3 반복을 통해 약제처리 후 21일 후 구당 200주에 대한 피해주수를 조사하였고, 처리구간 유의차 검정은 Duncan's multiple range test (DMRT)로 95% 수준에서 유의성을 검정하였다. 이때, 평가기준으로 무처리 피해주율 5% 이상으로 약제처리 후 21일차 처리구의 피해주율을 무처리구와 비교하여 효과를 평가하였다. 피해주율은 하기 수학식 2에 따라 계산하였다.
[수학식 2]
Figure pat00002
구분 처리 수 반복 수 총구 수 구당면적 소요면적 총소요면적
약효시험 2 3 6 10 m2 60 m2 105 m2
표 22 및 도 15에서 확인할 수 있듯이, 시험결과 무처리구의 평균 피해주율은 9.2%로 약제를 평가하기에 충분한 조건이었으며, 본 발명에 따른 방제용 조성물의 방제효과는 21일 후 67.4%로 나타났고 무처리구 대비 통계적 유의성을 보였다. 결과적으로, 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주를 유효성분으로 포함하는 조성물은 높은 방제가를 보였으며, 상기 균주 및 조성물은 고자리파리 (Delia antiqua)에 대해서 실용성이 있다고 판단된다.
시험약제 피해주율 (%) 유의차 (DMRT) 방제가 (%)
1 반복 2 반복 3 반복 평균
처리구 2.0 2.5 4.5 3.0 b 67.4
무처리구 11.5 6.5 9.5 9.2 a -
C.V.(%) ------------------------------- 34.1
농촌진흥청 국립농업과학원 미생물은행(KACC) KACC83042BP 20210305

Claims (12)

  1. 살충활성을 갖는 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주.
  2. 제1항에 있어서, 상기 균주의 ITS (Internal transcribed spacer) 서열은 서열번호 1의 염기 서열을 포함하는 것인, 균주.
  3. 제1항에 있어서, 상기 균주는 수탁번호 KACC 83042BP로 기탁된 것인, 균주.
  4. 메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 상기 배양물의 건조물 및 상기 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는, 병충 방제용 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 병충은 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)인 것인, 조성물.
  6. 제4항에 있어서, 상기 균주의 ITS (Internal transcribed spacer) 서열은 서열번호 1의 염기 서열을 포함하는 것인, 조성물.
  7. 제4항에 있어서, 상기 균주는 수탁번호 KACC 83042BP로 기탁된 것인, 조성물.
  8. 다음 단계를 포함하는 병충 방제 방법:
    메타리지움 아니소플리애 (Metarhizium anisopliae) FT83 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 상기 배양물의 건조물 및 상기 균주의 배양 상등액으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 포함하는 조성물을 식물체에 접촉시키는 접촉 단계.
  9. 제8항에 있어서, 상기 병충은 작은뿌리파리 (Bradysia agrestis), 고자리파리 (Delia antiqua) 또는 점박이응애 (Tetranychus urticae)인 것인, 방법.
  10. 제8항에 있어서, 상기 균주의 ITS (Internal transcribed spacer) 서열은 서열번호 1의 염기 서열을 포함하는 것인, 방법.
  11. 제8항에 있어서, 상기 균주는 수탁번호 KACC 83042BP로 기탁된 것인, 방법.
  12. 제8항에 있어서, 상기 식물체는 딸기 또는 파인 것인, 방법.
KR1020220184585A 2021-12-27 2022-12-26 메타리지움 아니소플리애 ft83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법 KR20230101722A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210189039 2021-12-27
KR20210189039 2021-12-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20230101722A true KR20230101722A (ko) 2023-07-06

Family

ID=86999932

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020220184585A KR20230101722A (ko) 2021-12-27 2022-12-26 메타리지움 아니소플리애 ft83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR20230101722A (ko)
WO (1) WO2023128524A1 (ko)

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101570776B1 (ko) * 2013-11-18 2015-11-20 대한민국 신규미생물 메타리지움 아니소플리애 ft83와 이를 함유하는 파밤나방 유충 방제용 미생물제제
KR101836007B1 (ko) * 2016-11-29 2018-04-19 충북대학교 산학협력단 해충방제 및 항균활성을 가지는 곤충병원성 곰팡이 메타리지움 아니소플리애 sd4-2 균주
KR102207732B1 (ko) * 2018-12-11 2021-01-26 대한민국 메타리지움 아니소플리애 ft319 균주 또는 이를 함유하는 배추좀나방 유충 방제용 미생물제제

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023128524A1 (ko) 2023-07-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101010762B1 (ko) 연작 오이와 수박의 시들음병에 대한 생물학적 방제 균주 및 그것의 미생물 유기질 비료
CN107299069B (zh) 农用微生物制剂及其在防治瓜类根结线虫和西瓜枯萎病方面的应用
EP2255660B1 (en) Biocontrol agent against soil-borne diseases
CN107318452B (zh) 一种大豆栽培方法
Babytskiy et al. New findings of pest sciarid species (Diptera, Sciaridae) in Ukraine, with the first record of Bradysia difformis
Abdet-Sattar et al. Occurrence of soilborne diseases and root knot nematodes in strawberry plants grown on compacted rice straw bales compared with naturally infested soils
KR20230100670A (ko) 바실러스 벨레젠시스 nb066 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법
Cheramgoi et al. Efficacy and mode of application of local Beauveria bassiana isolates in the control of the tea weevil
Guerena Cole crops and other Brassicas: Organic production
CN107567967A (zh) 一种羌活的培育方法
KR20230101722A (ko) 메타리지움 아니소플리애 ft83 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법
Saha et al. Major insect pests of vegetable crops in bihar and their management
EP1384405B1 (en) Bactericidal, bacteriostatic and fungicidal composition comprising two or more live species of trichoderma
Dandin et al. Mulberry (Morus sps.) cultivation for sustainable sericulture
Umoetok et al. Effects of Azadirachta indica products on the management of Ootheca mutabilis on Telfairia occidentalis in Calabar, Southeast Nigeria
Kuepper et al. Companion planting & botanical pesticides: concepts & resources
Zakka et al. Effectiveness of maize as an intercrop in the management of insect pests of okra: Is there a better intercrop pattern than random intercrop practiced by farmers?
KR20230099553A (ko) 패실로마이세스 리라시너스 nb265 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법
Appiagyei Effects of two neem kernel extracts in the control of whitefly (Bemisia tabaci) on tomato
WO2024136542A1 (ko) 포토랍두스 시네리아 nb-yg4-3 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법
Siguna Cultural and botanical methods for the management of thrips on french beans Phaseolus Vulgaris
KR102672296B1 (ko) 바실러스 벨레젠시스 ce100 균주, 이를 포함하는 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법
Wagnitz Biopesticide use in IPM for low desert vegetable and fruit production
RANI MANAGEMENT OF VEGETABLE LEAF MINER IN TOMATO USING BIOPESTICIDES AND CHEMICAL INSECTICIDES
KR20240046398A (ko) 헤테로랍디티스 메기디스 nb-gj1-2 선충, 이를 포함하는 병해충 방제용 조성물 및 이를 이용한 방제 방법