KR20230080800A

KR20230080800A - 사이클로스포린의 안정한 나노 현탁액

Info

Publication number: KR20230080800A
Application number: KR1020210168284A
Authority: KR
Inventors: 김민수; 하은솔; 표유진; 임창백; 황성우; 황희경; 지용훈
Original assignee: 대우제약 주식회사
Priority date: 2021-11-30
Filing date: 2021-11-30
Publication date: 2023-06-07
Also published as: WO2023101301A1; KR102640323B1

Abstract

본 발명은 주사 또는 경구투여 시 면역억제제로, 점안제로서 안구건조증에 사용되는 사이클로스포린을, 고분자, 계면활성제와 혼합함으로써 조성물의 안정성을 개선시킨 나노 현탁액 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 나노 현탁액은 습식분쇄 공정 적용 시 외부 힘 (shear force; 전단력)에 의한 약물 분해가 억제되어 약물 함량을 유지시킬 수 있으며, 표면이 개질되어 평균 입자 크기가 500 nm 미만이라는 특징이 있다. 따라서, 점안제 뿐만 아니라 경구투여가 가능한 제형 개발에 적용이 가능하다.

Description

사이클로스포린의 안정한 나노 현탁액{Stable nanosuspension of cyclosporine}

본 발명은 사이클로스포린의 안정한 나노 현탁액을 제공한다.

나노 현탁액은 고분자 및 계면활성제, 또는 이 둘 다가 모두 있는 조건 하에서의 안정화된 약물 입자의 콜로이드성의 분산액을 말한다. 나노 현탁액은 낮은 수용해성과 지질용해성을 나타내는 약물 물질의 물성을 개선하는데 사용된다. 예를 들면 경구투여 제형인 경우 약물의 용해도를 개선하여 장관 흡수율을 높여 생체 이용율을 개선하여 투여 용량을 줄이고, 약효를 개선하고 부작용을 개선할 목적으로 주로 사용된다. 또한 음식물 효과(Food Effect)를 개선하여 식사와 상관없이 투여할수 있는 복용상 편리성도 제공할수 있다. 점안제나 주사제인 경우, 약물을 용해하기 위해 과량으로 사용하는 가용화제, 특히 지질 이나 계면활성제의 용량을 획기적으로 줄일 수 있어, 가용화제에 기인한 부작용을 현저하게 개선할수 있는 점도 나노현탁액의 제형상의 특장점이 될 수 있다. 나노 현탁액의 작은 입자들은 매우 큰 약물 표면적을 제공하여 약물의 용해도를 현저하게 증가시킨다. 나노현탁액은 다양한 제형에 응용이 가능한데 대표적인 제형으로는 경구제제, 경피제제(Transdermal delivery system), 주사제(Injection) 및 흡입제(Pulmonary delivery system) 및 점안제(Ocular delivery system)등이 있다.

사이클로스포린(Cyclosporin)은 1971년 균계 Tolypocladium inflatum로부터 분리된 면역억제제로 1983년부터 의학용으로 사용되기 시작했다. 사이클로스포린은 인체의 면역체계 활성을 줄이거나 억제하는 면역억제제로 이식 후 거부반응의 예방 및 치료에 주로 사용되며, 그 밖에 자가면역질환의 치료에도 사용된다. 점안제로는 건성각결막염(안구건조증)치료제로 사용된다. 사이클로스포린은 물 용해성이 약 20 μg/ml 내지 30 μg/ml로 매우 낮아, 사이클로스포린 경구용 제제, 주사제 및 점안제를 제형화 하는 것은 제제학적으로 매우 어려운 것으로 알려져 있다. 제형화를 위해 경구용 제제에는 SMEDDS (Self-Microemulsifying Drug Delivery System)기술을 적용하여 연질 캡슐로 시판되고 있으며,주사제는 가용화제로 에탄올 및 폴리옥실 35 피마자유 (Polyoxyl 35 Castor Oil)를 사용하고 있다. 다만, 경구제는 과량의 계면활성제를 사용하기 때문에 장기간 복용시 부작용이 문제가 되고, 주사제는 에탄올과 폴리옥실 35 피마자유에 의한 부작용이 문제가 되어 사용이 제한되기도 한다.

한편, 점안제 시판제품은 현탁점안액 및 나노에멀젼(Nanoemulsion)기술을 적용되는데 현탁점안제는 미용해 주약에 의한 점막자극과 일시적인 시야가림의 문제 때문에 환자 순응성(compliance)이 문제가 되고, 나노에멀전은 지질과 과량의 계면활성제 사용하기 때문에 장기간 투여 시 점막자극에 의한 안구 통증을 호소하는 환자가 많아 다른 약물로 대체되는 경향이 심하다.

따라서, 가용화제인 계면활성제 사용량을 최소화할 수 있는 사이클로스포린 나노 현탁액은 시판제품의 문제점을 해결 할 수 있는 연구가 계속해서 필요한 실정이다.

1. 대한민국 등록특허 10-2015152호.

본 발명의 목적은 사이클로스포린(cyclosporine), 고분자 및 계면활성제를 포함하는 나노 현탁액 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 나노 현탁액 조성물을 유효성분으로 포함하는 안구건조증 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공하는 데에 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 (a) 사이클로스포린 (cyclosporine)을 물에 현탁시킨 후, 균일하게 분산시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계의 혼합물에 습식분쇄 공정을 진행시키는 단계;를 포함하는 상기 나노 현탁액 제조방법을 제공하는 데에 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사이클로스포린 (cyclosporine), 고분자 및 계면활성제를 포함하는 나노 현탁액 조성물에 있어서, 상기 고분자는 카르복시메틸셀룰로스나트륨 (Sodium Carboxymethylcellulose; Sodium CMC) 및 상기 계면활성제는 TPGS (tocopherol polyethylene glycol succinate)인 것을 특징으로 하는 나노 현탁액 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 나노 현탁액 조성물을 유효성분으로 포함하는 안구건조증 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 (a) 사이클로스포린 (cyclosporine)을 물에 현탁시킨 후, 균일하게 분산시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계의 혼합물에 습식분쇄 공정을 진행시키는 단계;를 포함하는 상기 나노 현탁액 제조방법을 제공한다.

본 발명은 경구투여 시 면역억제제 및 점안제로서 안구건조증에 사용되는 사이클로스포린을, 고분자, 계면활성제와 혼합함으로써 조성물의 안정성을 개선시킨 나노 현탁액 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명에 따른 나노 현탁액은 습식분쇄 공정 적용 시 외부 힘에 의한 약물 분해가 억제되어 약물 함량을 유지시킬 수 있으며, 표면이 개질되어 평균 입자 크기가 500nm 이하라는 특징이 있어, 점안제 뿐만 아니라 주사제 및 경구투여가 가능한 제형 개발에 적용이 가능하다.

도 1은 하기 실시예 19의 나노 현탁액의 입자크기 분포를 확인한 결과를 나타낸다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

기존 사이클로스포린이 포함된 나노 현탁액은 외부 힘이나 시간이 지남에 따라 약물이 분해되어 함량이 유지되기 힘든 문제점이 있었으나, 적절한 고분자 및 계면활성제를 혼합함으로써 표면이 개질되어 평균 입자 크기가 500nm인 조성물의 안정성을 개선시킨 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 사이클로스포린 (cyclosporine), 고분자 및 계면활성제를 포함하는 나노 현탁액 조성물을 제공하며, 바람직하게 상기 고분자는 카르복시메틸셀룰로스나트륨 (sodium carboxymethylcellulose; 이하, Sodium CMC라함) 및 상기 계면활성제는 TPGS (tocopherol polyethylene glycol succinate)일 수 있다.

상기 사이클로스포린, 고분자 및 계면활성제의 중량비는 1 : 1 내지 2 : 1 내지 2일 수 있다.

상기 사이클로스포린의 평균 입자크기는 170 내지 500 nm일 수 있다.

상기 사이클로스포린의 함량은 95 내지 100 중량%로 유지될 수 있다.

본 발명은 상기 나노 현탁액 조성물을 유효성분으로 포함하는 안구건조증 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공하며, 바람직하게 상기 약학 조성물은 면역 활성 조절을 시킬 수 있다.

상기 약학 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 점안제 및 주사용액으로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 또는 둘 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 다른 구체예에서, 약학 조성물은 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제, 붕해제, 감미제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제, 향미제, 항산화제, 완충액, 정균제, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다.

구체적으로 담체, 부형제 및 희석제는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 사용할 수 있으며, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기재로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 대상체의 상태 및 체중, 질환의 종류 및 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 달라질 수 있으며 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 투여량이 0.01 mg/kg 내지 200 mg/kg, 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 200 mg/kg, 보다 바람직하게는 0.1 mg/kg 내지 100 mg/kg 일 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고 수회로 나누어 투여할 수도 있으며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.

본 발명은 (a) 사이클로스포린 (cyclosporine)을 물에 현탁시킨 후, 균일하게 분산시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계의 혼합물에 습식분쇄 공정을 진행시키는 단계;를 포함하는 상기 나노 현탁액 제조방법을 제공한다.

상기 습식분쇄 공정은 밀링매체 (milling media)를 이용한 밀링 (milling) 또는 고압균질기 (high pressure homogenizer)를 통한 하향식 방법 (Bottom-up)일 수 있다.

상기 밀링은 900 내지 1100 rpm 조건에서 9 내지 11시간동안 밀링 할 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예 등은 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예 등에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예 등은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

[시험예 1] 공정 적용에 따른 약물 함량의 저하 확인

나노현탁액은 습식분쇄 공정 (비드 (bead)와 같은 밀링매체 (milling media)를 이용한 밀링 또는 고압균질기 (High Pressure Homogenizer))을 통한 하향식 방법 (Bottom-up)으로 제조되는데, 표 1에 따를 때, 약물을 주사용수에 현탁한 후, 교반기를 이용하여 약물을 균일하게 분산시켰다. 이어 실시예 1 내지 4를 제조하기 위해서 제조된 현탁상과 지르코니아 비드를 적절한 비율로 넣은 후 Zentrimix 380R를 이용하여 1000 rpm 조건에서 밀링 (milling)하였다. 추가적으로 실시예 5 및 6을 제조하기 위해서 고압균질기 (Nano DeBEE)에 40,000 psi의 압력으로 순환시켰다. 상기의 방법에 따라 제조된 현탁액에서 사이클로스포린의 함량은 High Pressure Liquid Chromatography (HPLC) system (Shimadzu)를 이용하여 표 2의 조건에 따라 분석하였다.

성분(%)		실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
제제조성	Cyclosporine	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
제제조성	주사용수	정용	정용	정용	정용	정용	정용
공정조건	속도(rpm)	1000	1000	1000	1000	1000	-
	시간(hr)	2	4	8	10	12	1
	압력(psi)	-	-	-	-	-	40000
함량(%)		70.45	60.46	54.54	42.87	36.07	36.07

컬럼	HPLC 컬럼, 4.6 X 250 mm
이동상	THF : 0.03 mol/L 인산수용액 = 40 : 60
검출파장	210 nm
유속	1.0 mL/분
주입량	20 μL
컬럼 온도	65 ℃

그 결과, 실시예 1 내지 6의 현탁액 조성물은 습식분쇄 공정을 적용함에 따라 약물 함량이 감소되는 것을 확인하였다. 특히, 실시예 1 내지 4를 비교하였을 때, 공정에 소요되는 시간이 길어질수록 약물 함량이 현저히 감소되는 것을 확인하였다.

[시험예 2] 종래 특허에 명시된 조성에 대한 평가

대한민국등록특허 제10-2015152호에 명시된 실시예 2 (이하, 종래 실시예라함)를 참고로 하여 비교예 1 내지 5를 제조하였다. 비교예 1은 시판제품인 레스타시스 (등록상표)의 조성, 비교예 2는 비교예 1과 동일한 조성에서 약물 농도를 0.1 %로 제조, 비교예 3은 종래 실시예의 B1 조성, 비교예 4는 종래 실시예의 A 조성, 비교예 5는 비교예 4와 동일한 조성에서 약물 농도를 0.1 %로 제조하였다. 또한, 일본공개특허 2018-521117에 명시된 내용을 참고로 하여 비교예 6 내지 8을 제조하였다.

이를 지르코니아 비드와 적절한 비율로 혼합한 후 Zentrimix 380R를 이용하여 1000 rpm 조건에서 10시간 동안 밀링 (milling)하였다. 사이클로스포린의 함량을 측정하기 위해, 상기 시험예 1의 방법과 동일하게 수행하였다.

성분(%)	비교예 1 ( 레스타시스 )	비교예 2	비교예 3 (B1)	비교예 4 (A)	비교예 5	비교예 6	비교예 7	비교예 8
Cyclosporine	0.05	0.1	0.01	0.05	0.1	0.1	0.1	0.1
Sodium CMC	-	-	-	-	-	-	-	-
Carbomer	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	-	-	-
TPGS	-	-	-	-	-	-	-	-
Tween 80	10	10	0.5	0.5	0.5	-	-	-
Castor oil	12.5	12.5	-	-	-	-	-	-
Glycerin	22	22	22	22	22	-	-	-
α-cyclodextrin	-	-	-	-	-	0.1	-	0.1
γ-cyclodextrin	-	-	-	-	-	-	0.1	0.1
주사용수	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용
함량(%)	70.45	60.46	0	0	0	65.24	62.09	66.76

그 결과, 표 3에 따를 때, 종래의 특허에서 명시된 실시예를 이용하여 제조된 비교예 1 내지 8의 조성물들은 습식분쇄 공정을 적용함에 따라 약물 함량이 감소되는 것을 확인했다.

[시험예 3] 고분자의 종류에 따른 사이클로스포린 나노 현탁액의 제조

고분자를 Sodium CMC, HEC (Hydroxyethyl-cellulose), HPMC (Hydroxypropyl Methylcellulose), MC (Methylcellulose), PVP K30, PVP K90, PEG 300 및 PEG 400으로 달리하고 이의 농도를 변화시킨 나노 현탁액 조성물을 제조하였으며, 구체적인 나노 현탁액 조성물의 제조방법은 하기와 같다. 표 4에 명시된 농도로 실시예 7 내지 14를 제조한 후, 교반기를 이용하여 약물을 균일하게 분산시킨다. 이후, 조성물과 지르코니아 비드를 적절한 비율로 넣은 후 Zentrimix 380R를 이용하여 1000 rpm 조건에서 10 시간 동안 밀링 (milling)하였다. 상기의 방법에 따라 제조된 나노 현탁액 점안액의 입자크기를 입자크기 측정 장비인 ELSZ-1000을 사용하여 측정하였으며, 사이클로스포린의 함량은 상기 시험예 1의 방법과 동일하게 수행하였다.

성분(%)	실시예
성분(%)	7	8	9	10	11	12	13	14
Cyclosporine	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Sodium CMC	0.2	-	-	-	-	-	-	-
HEC	-	0.2	-	-	-	-	-	-
HPMC	-	-	0.2	-	-	-	-	-
MC	-	-	-	0.2	-	-	-	-
PVP K30	-	-	-	-	0.2	-	-	-
PVP K90	-	-	-	-	-	0.2	-	-
PEG 300	-	-	-	-	-	-	0.2	-
PEG 400	-	-	-	-	-	-	-	0.2
TPGS	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
주사용수	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용
평균 입자크기(nm)	250.4	499.2	345.5	10 μm 이상	993.4	756	455.2	658
함량(%)	98.97	76.66	80.45	0	13.44	5.28	7.36	4.46

그 결과, 표 4에 따를 때, 실시예 7은 다른 고분자를 사용한 실시예 8 내지 14와 비교하였을 때, 나노 현탁액의 평균 입자크기가 250.4 nm로 가장 작으며, 공정을 적용한 이후에도 약물 함량이 유지되었으므로 Sodium CMC가 사이클로스포린의 나노 현탁액 조성물에 바람직한 고분자인 것을 확인하였다. 반면, 실시예 8 내지 14와 같이, 다른 고분자를 사용하여 제조한 나노 현탁액은 습식분쇄 공정을 적용함에 따라 약물 함량이 저하되는 것을 확인하였다.

[시험예 4] 계면활성제의 종류에 따른 사이클로스포린 나노 현탁액의 제조

고분자로 Sodium CMC를 고정한 후, 계면활성제의 종류 및 함량을 달리하여 시험예 3과 동일한 방법으로 실시예 15 내지 19를 제조 및 평가하였다.

성분(%)	실시예
성분(%)	15	16	17	18	19
Cyclosporine	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Sodium CMC	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Kolliphor HS 15	0.2	-	-	-	-
Kolliphor RH 40	-	0.2	-	-	-
Tween 20	-	-	0.2	-	-
Tween 80	-	-	-	0.2	-
TPGS	-	-	-	-	0.2
주사용수	정용	정용	정용	정용	정용
평균 입자크기(nm)	168.8	197.6	379.0	229.5	202.4
함량(%)	90.71	94.08	93.63	43.49	100.54

그 결과, 표 5에 따를 때, 실시예 19는 다른 계면활성제들을 사용한 실시예 15 내지 18과 비교하였을 때, 공정을 적용한 이후에도 약물 함량이 유지되었으므로 TPGS가 사이클로스포린 나노 현탁액 조성물에 바람직한 계면활성제인 것을 확인하였다. 반면, 실시예 15 내지 18과 같이 다른 계면활성제를 사용하여 제조한 나노 현탁액은 습식분쇄 공정을 적용함에 따라 약물 함량이 저하되는 것을 확인하였다.

[시험예 5] 사이클로스포린 나노 현탁액 조성물 성분의 최적 양 도출

사이클로스포린 나노 현탁액 중 고분자 및 계면활성제의 최적의 농도를 결정하기 위하여, Sodium CMC 및 TPGS의 함량을 달리하여 시험예 3과 동일한 방법으로 실시예 19, 20, 21 및 7을 제조 및 평가하였다.

성분(%)	실시예
성분(%)	20	21	19	7
Cyclosporine	0.1	0.1	0.1	0.1
Sodium CMC	0.1	0.1	0.1	0.2
TPGS	0.1	0.15	0.2	0.2
주사용수	정용	정용	정용	정용
평균 입자크기(nm)	281.3	252.8	202.4	250.4
함량(%)	96.22	96.69	100.54	97.97

그 결과, 표 6에 따를 때, Sodium CMC와 TPGS의 농도에 따라 함량 저하의 효과가 달라짐을 확인하였다. 특히 실시예 19의 조성은 습식분쇄 공정에서 발생하는 외부힘 (shear force; 전단력)에 의해 발생하는 함량저하가 가장 효과적으로 억제됨을 확인하였다. 따라서 사이클로스포린 나노 현탁액을 제조하기 위해서는 Sodium CMC와 TPGS가 각각 0.1 내지 0.2 %의 농도로 포함하는 것이 가장 바람직함을 확인하였다.

[ 시험예 6] 고분자 및 계면활성제의 조합에 따른 사이클로스포린 나노현탁액의 제조

Sodium CMC 및 TPGS가 각각 0.1 % 또는 0.2 %의 농도로 조성물을 제조한 다음 추가적으로 고분자 또는 계면활성제를 조합하여 시험예 3과 동일한 방법으로 나노 현탁액 조성물을 제조 및 평가하였다.

성분(%)	실시예
성분(%)	22	23	24	25	26	27	28	29	30	31	32	33	34	35	36
Cyclosporine	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
Sodium CMC	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
HEC	0.01	0.02	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
HPMC	-	-	0.01	0.02	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
PVP K90	-	-	-	-	0.01	0.02	-	-	-	-	-	-	-	-	-
PEG 300	-	-	-	-	-	-	0.01	0.02	-	-	-	-	-	-	-
Kolliphor HS 15	-	-	-	-	-	-	-	-	0.05	0.1	-	-	-	-	-
Kolliphor RH 40	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	0.05	0.01	-	-	0.1
Tween 20	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
Tween 80	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
Cremopohr EL	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	0.05	0.01	-
TPGS	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.1	0.2	0.2	0.2	0.2	0.1
주사용수	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용	정용
평균 입자크기(nm)	191.1	201.8	199.0	203.4	405.1	703.2	331.8	385.0	175.7	171	178.6	173.7	182.7	226.8	269.9

그 결과, 표 7에 따를 때, 실시예 22 내지 36과 같이 다른 고분자 또는 계면활성제를 조합하여 사용하였을 때, 평균 입자크기가 상대적으로 감소함을 확인하였다.

[시험예 7] 사이클로스포린 나노 현탁액의 안정성 확인

제조된 나노 현탁액의 안정성을 확인하기 위해서 실시예 19의 나노 현탁액 조성물을 실온에서 보관하고, 0, 1, 2 및 4개월 경과시점에서 평균 입자크기 및 함량을 측정하였다. 사이클로스포린의 함량 및 입자 크기 측정 방법은 상기 시험예 3의 방법과 동일하게 수행하였다.

성분(%)		실시예 19
Cyclosporine		0.1
Sodium CMC		0.1
TPGS		0.2
주사용수		정용
평균 입자크기(nm)	초기	212.1
	1개월	247.3
	2개월	268.7
	4개월	279.3
함량(%)	초기	99.78
	1개월	99.65
	2개월	99.11
	4개월	98.96

그 결과, 표 8에 의할 때, 실시예 19는 실온조건에서 4개월 동안 평균 입자크기 및 함량의 변화가 적어 매우 안정한 것으로 나타나는 것을 확인했다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

사이클로스포린 (cyclosporine), 고분자 및 계면활성제를 포함하는 나노 현탁액 조성물에 있어서,
상기 고분자는 카르복시메틸셀룰로스나트륨 (Sodium Carboxy -methylcellulose; Sodium CMC) 및 상기 계면활성제는 TPGS (Tocopherol polyethy lene glycol succinate)인 것을 특징으로 하는 나노 현탁액 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 사이클로스포린, 고분자 및 계면활성제의 중량비는 1 : 1 내지 2 : 1 내지 2인 것을 특징으로 하는 나노 현탁액 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 사이클로스포린의 평균 입자크기는 170 내지 500 nm인 것을 특징으로 하는 나노 현탁액 조성물.
청구항 1에 있어서, 상기 사이클로스포린의 함량은 95 내지 100 %로 유지되는 것을 특징으로 하는 나노 현탁액 조성물.
청구항 1의 나노 현탁액 조성물을 유효성분으로 포함하는 안구건조증 치료 또는 예방용 약학 조성물.
청구항 5에 있어서, 상기 약학 조성물은 면역 활성 조절을 시키는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
청구항 5에 있어서, 상기 약학 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 점안제 및 주사용액으로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 또는 둘 이상의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
(a) 사이클로스포린 (cyclosporine)을 물에 현탁시킨 후, 균일하게 분산시키는 단계; 및
(b) 상기 (a)단계의 혼합물에 습식분쇄 공정을 진행시키는 단계;를 포함하는 청구항 1의 나노 현탁액 제조방법.
청구항 8에 있어서, 상기 습식분쇄 공정은 밀링매체 (milling media)를 이용한 밀링 (milling) 또는 고압균질기 (high pressure homogenizer)를 통한 하향식 방법 (Bottom-up)인 것을 특징으로 하는 제조방법.
청구항 9에 있어서, 상기 밀링은 900 내지 1100 rpm 조건에서 9 내지 11시간동안 밀링하는 것을 특징으로 하는 제조방법.