KR20230079875A - 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 화학제의 첨가없이 대추를 비롯한 천연소재들로 구성함으로써 화학제에 의한 피부 트러블을 원천적으로 차단하고, 나아가 개선된 추출법을 활용하여 대추와 천연소재들의 유효성분을 손실없이 완벽하게 보존함으로써 기능성 향상에 적극 기여하며, 피부에 분사하는 방법 외에도 음용이나 입욕제 등 다양하게 활용할 수 있으므로 사용상 편의성과 효율성이 극대화 유도되면서 간소화된 제조과정에 기인한 뛰어난 생산성은 물론 유지와 관리 및 보수가 간편한 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법에 관한 것으로, 대추 추출물과 진피 추출물 및 청포 추출물로 이루어진 복합 조성물을 45~50℃로 가열하는 제1단계(S100);와, 가열된 복합 조성물에 증류수를 넣고 교반한 후 천연 보습제를 첨가하여 35~40℃로 가열하는 제2단계(S200);로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 피부와 두발의 건강을 개선시키는 멀티 미스트의 제조방법에 관하여 개진된 것으로, 더욱 상세하게는 화학제의 첨가없이 대추를 비롯한 천연소재들로 구성함으로써 화학제에 의한 피부 트러블을 원천적으로 차단하고, 나아가 개선된 추출법을 활용하여 대추와 천연소재들의 유효성분을 손실없이 완벽하게 보존함으로써 기능성 향상에 적극 기여하며, 피부에 분사하는 방법 외에도 음용이나 입욕제 등 다양하게 활용할 수 있으므로 사용상 편의성과 효율성이 극대화 유도되면서 간소화된 제조과정에 기인한 뛰어난 생산성은 물론 유지와 관리 및 보수가 간편한 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법에 관한 것이다.
통상적으로 미스트는 안면에 수분을 공급해주는 화장품으로써 주로 피부의 컨디션을 안정시키며 피부가 생기있어 보이도록 유도하기 위한 사용 목적이 있다.
대부분의 미스트는 제조과정에서 재료의 혼합이나 기능 향상 및 향료 첨가 등의 이유로 미량의 화학제가 첨가되며, 이렇게 첨가된 화학제는 오히려 피부 트러블을 발생시키는 경우가 종종 있었다.
이에 따라 화학제의 첨가를 줄인 제품이 개발 및 제공되고 있으며, 일례로 등록특허공보 제10-1981696호 "천연 복합 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 보습용 미스트 조성물"이 게재되어 있으며, 해당 기술은 위치하젤수과 동백 오일, 올리브오일, 산자나무 추출물, 오렌지 오일, 들깨잎 추출물, 접시꽃 추출물, 삼칠 추출물, 캐모마일 추출물, 서양 민들레잎 추출물, 감초 추출물, 병풀 추출물 등의 천연 재료로 이루어지며, 용액이나 미스트액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 사용되는 기술이다.
다른 일례로 등록특허공보 제10-2240580호 " 천연 향료 조성물 및 이를 포함하는 미스트 조성물"이 게재되어 있으며, 해당 기술은 라벤더 오일과 라반딘 오일, 및 캐모마일 꽃오일로 이루어지고, 여기에 베르가모트 오일 또는 오렌지 껍질 오일 또는 메시칸 주니퍼 오일 또는 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 중 어느 하나 또는 둘 이상이 더 첨가된 기술이다. 상기 기술은 기본적으로 향료로 사용될 수 있으며, 이 향료를 미스트에 적용할 경우 수면 유도 및 숙면 시간을 개선할 수 있는 효과가 있다.
또 다른 일례로 공개특허공보 제10-2012-0040772호 "천연물을 함유하는 미스트의 제조 방법"이 게재되어 있으며, 해당 기술은 홍삼과 인삼, 장뇌삼, 국화, 솔잎, 율무, 율금, 하수오, 흑축, 루이보스티, 백봉령, 마치현, 병풀, 석류씨, 창포, 천궁, 탱자, 고삼, 닥나무, 애나무, 도라지, 모과, 산수유, 황금, 포도씨, 캐비어, 더덕, 감잎, 풍년화, 장미, 포도, 망고버터, 황금, 아카시아, 센텔라, 헤치니, 세이지, 신선초, 매실, 카모멜라, 쑥, 카보마일, 파파야, 녹차, 감초, 살구씨, 백강잠, 율피, 팥, 토사자, 당귀, 구기자, 오미자, 복분자, 자몽씨, 알로에, 상백피, 스쿠알렌, 마로니에, 황백, 알카넷, 녹두, 진피, 당근, 치자, 백련초, 오트밀, 육두구, 어성초, 적설초, 너도밤나무, 대황, 하마멜리스, 지유, 갈근, 달맞이꽃, 동충하초, 황기, 컴프리, 고추나물, 산사자, 목단피, 금은화, 작약, 사루비아, 참피나무, 연명피, 흑두, 한란, 주목, 해조류, 버섯류, 허브류 중 어느 하나 또는 둘 이상을 함유한 천연물에 글리세린, 내추럴 베타민, 리피튜어, 모이스트24, 베타글루칸, 세라마이드, 솔비톨, 콜라스틴, 판테놀, 히아루론산, 꿀, 황산콘드로이틴황산나트륨 중 어느 하나 또는 둘 이상이 함유된 보습 성분 및 정제수, 천연수, 온천수, 지장수, 해양심층수, 빙하수, 암반수 중 어느 하나 또는 둘 이상으로 이루어진 수분 성분의 혼합으로 이루어지는 기술이다. 상기 기술은 알콜 성분이 첨가되지 않아 피부 자극을 감소시킬 수 있으며 유통 및 사용하는 기간에도 천연물에 함유된 유효 성분들이 서서히 제품에 용출되므로 오랜기간 효능을 유지할 수 있는 기술이다.
한편, 대추는 한방약재로 사용될 정도로 그 효능이 입증된 과일이며, 대추는 칼륨이 100g당 310mg, 인은 42mg, 칼슘과 마그네슘은 14mg으로 칼륨이 풍부하다. 특히 대추는 엽산 100g당 84mcg이며, 티아민이나 리보플라빈, 니아친, 판토텐산 등 비타민B가 풍부하고, 비타민A의 전구체 베타카로틴도 함유하고 있다.
이러한 대추는 마그네슘을 통해 심신 안정, 근육 이완, 불면증 해소 등의 효과를 볼 수 있으며, 당질과 비타민A, B1, B2 등을 통해 빈혈, 신경쇠약, 식욕부진, 무기력, 피부 개선 등의 효과를 볼 수 있다.
이에 따라 본 발명은 대추를 이용한 조성물을 제조하고, 이렇게 제조된 대추 조성물을 활용하여 미스트를 제공함으로써 피부와 두발의 건강 개선에 적극 이바지하고자 한다.
본 발명은 상기의 제반 문제점을 보다 적극적으로 해소하기 위하여 창출된 것으로, 대추의 유효성분이 적극 함유된 미스트를 제공하는 것이 주된 목적이며, 대추만으로 미스트의 부족한 성능을 보완할 수 있도록 진피와 청포 추출물을 포함시킨 기술을 제공하는 것이 해결과제이다.
상기의 해결 과제를 달성하기 위하여 본 발명에서 제안하는 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법은 다음과 같다.
본 발명의 기능성 복합 조성물은 대추 추출물과 진피 추출물 및 창포 추출물의 혼합으로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 대추 추출물은 대추 농축액을 10wt%의 농도가 되도록 희석한 후 필터 페이퍼 방식으로 여과하여 획득된 것을 포함한다.
또한, 상기 진피 추출물은 건조된 귤 껍질을 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 진피 분쇄단계(S11);와, 80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 진피 추출단계(S12);와, 필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 진피 여과단계(S13);와, 여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 진피 냉각단계(S14);를 포함한다.
또한, 상기 창포 추출물은 뿌리가 제거된 창포를 건조 및 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 창포 분쇄단계(S21);와, 80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 창포 추출단계(S22);와, 필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 창포 여과단계(S23);와, 여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 창포 냉각단계(S24);를 포함한다.
본 발명의 멀티 미스트는 대추 추출물과 진피 추출물 및 청포 추출물로 이루어진 복합 조성물을 45~50℃로 가열하는 제1단계(S100);와, 가열된 복합 조성물에 증류수를 넣고 교반한 후 천연 보습제를 첨가하여 35~40℃로 가열하는 제2단계(S200);로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 천연 보습제는 자몽 종자 추출물과 1,2-Hexanediol과, Propylene glycol과, Carpryl giycol의 혼합으로 이루어지는 것을 포함한다.
상술한 구성으로 이루어지는 본 발명에 의하면, 천연 재료들로 구성된 멀티 미스트는 화학제가 첨가된 기존의 미스트와는 달리 피부 트러블을 유발하지 않으며, 대추와 진피 및 청포 등의 재료들로부터 피부와 두발의 건강 개선과 케어를 동시에 구현할 수 있으므로, 사용의 편의성과 효율성 및 실용성을 가진 멀티 미스트를 제공할 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명은 조성물의 제조공정과 미스트의 제조공정이 매우 간소화되어 생산 효율성이 극대화 유도되고, 이로부터 우수한 성능의 미스트를 저렴하게 제공할 수 있어 효과적이다.
또한, 본 발명은 새로운 기능성 식품 개발 등으로 바이오 산업에 이바지할 수 있고, 나아가 대추, 진피, 청포 등의 재료가 사용됨에 따라 농산물 가공기술을 발전시켜 미래 선진형 지역 역량 강화 사업 구축에 기여할 수 있으며, 대추, 진피, 청포의 혼합기술에 기인한 바이오 융합기술 발전에 좋은 영향을 끼치는 등 과학기술적 파급효과가 뛰어나다.
또한, 본 발명은 국내산 재료 수급 증대에 기인한 농가상생에 기여할 수 있고, 대추한방혼합물 개발 후 이를 이용한 6차 산업 프로그램 개발을 통한 지역발전에 새로운 모델을 적용시켜 농촌경제에 활력을 부여할 수 있으며, 해외 수출 판로 개척을 통한 대추 제품의 세계로를 이룩할 수 있는 등 경제적, 사회적 측면에서 파급효과를 기대할 수 있다.
도 1은 본 발명이 제안하는 진피의 추출 공정을 나타낸 플로차트.
도 2는 본 발명이 제안하는 청포의 추출 공정을 나타낸 플로차트.
도 3은 본 발명의 바람직한 실시 예에 의하여 구성되는 멀티 미스트의 제조 공정을 나타낸 플로차트.
도 4는 본 발명의 바람직한 실시 예에 의하여 피부자극 시험결과에 대한 시험결과 확인서
도 2는 본 발명이 제안하는 청포의 추출 공정을 나타낸 플로차트.
도 3은 본 발명의 바람직한 실시 예에 의하여 구성되는 멀티 미스트의 제조 공정을 나타낸 플로차트.
도 4는 본 발명의 바람직한 실시 예에 의하여 피부자극 시험결과에 대한 시험결과 확인서
이하, 첨부도면을 참고하여 본 발명의 구성 및 이로 인한 작용, 효과에 대해 일괄적으로 기술하기로 한다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시 예를 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시 예에 한정되는 것이 아니라, 서로 다른 다양한 형태로 구현될 수 있으며, 단지 본 실시 예는 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다. 그리고 명세서 전문에 걸쳐 동일 참조 부호는 동일 구성요소를 지칭한다.
본 발명은 피부와 두발의 건강을 개선시키는 멀티 미스트의 제조방법에 관하여 개시된다.
무엇보다 본 발명은 화학제의 첨가없이 대추를 비롯한 천연소재들로 구성함으로써 화학제에 의한 피부 트러블을 원천적으로 차단하고, 나아가 개선된 추출법을 활용하여 대추와 천연소재들의 유효성분을 손실없이 완벽하게 보존함으로써 기능성 향상에 적극 기여하며, 피부에 분사하는 방법 외에도 음용이나 입욕제 등 다양하게 활용할 수 있으므로 사용상 편의성과 효율성이 극대화 유도되면서 간소화된 제조과정에 기인한 뛰어난 생산성은 물론 유지와 관리 및 보수가 간편한 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법에 관련됨을 주지한다.
도 1은 본 발명이 제안하는 진피의 추출 공정을 나타낸 플로차트이고, 도 2는 본 발명이 제안하는 청포의 추출 공정을 나타낸 플로차트이며, 도 3은 본 발명의 바람직한 실시 예에 의하여 구성되는 멀티 미스트의 제조 공정을 나타낸 플로차트이다.
본 발명의 기능성 복합 조성물은 대추와 진피, 창포를 알콜 법제와 로스팅 기법으로 가공하여 추출물을 획득하고, 각 추출물들을 일괄 혼합하여 획득할 수 있다.
상기 대추 추출물은 대추 농축액을 사용하며, 대추 농축액을 10wt%의 농도가 되도록 희석한 후 필터 페이퍼 방식으로 여과하여 획득한다. 이러한 대추 추출물은 비타민C, 베타카로틴 성분이 풍부하여 피부 활력 효과로 컨디셔닝을 도와 생기 있는 피부 관리 및 건강하고 윤택한 피부 생성에 도움을 주기 때문에 미스트에 첨가될 기능성 복합 조성물로써 매우 탁월한 성능을 가진다.
상기 진피 추출물은 건조된 귤 껍질을 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 진피 분쇄단계(S11);와, 80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 진피 추출단계(S12);와, 필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 진피 여과단계(S13);와, 여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 진피 냉각단계(S14);를 거쳐 획득한다. 이러한 진피 추출물은 페르포노이드 성분이 풍부하여 탈취 및 방향 효과를 취할 수 있으며, 대량의 비타민을 함유하고 있어 피부와 두발의 건강을 개선시키기에 탁월하다.
상기 창포 추출물은 뿌리가 제거된 창포를 건조 및 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 창포 분쇄단계(S21);와, 80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 창포 추출단계(S22);와, 필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 창포 여과단계(S23);와, 여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 창포 냉각단계(S24);를 거쳐 획득한다. 이러한 창포 추출물은 아사론과 팔미틴소레 및 페널 등 정유 성분이 대량 함유되어 있어 향미는 두발을 윤택하게 함은 물론 좋은 향기와 땀띠 예방 및 피부 개선에 효과적이다.
이렇게 획득한 대추 추출물과 진피 추출물 및 창포 추출물은 6:2:2의 비율로 혼합함으로써 본 발명이 제안하는 기능성 복합 조성물이 완성된다.
본 발명의 멀티 미스트는 대추 추출물과 진피 추출물 및 청포 추출물이 모두 혼합된 복합 조성물을 45~50℃로 가열하는 제1단계(S100);와, 가열된 복합 조성물에 증류수를 넣고 교반한 후 천연 보습제를 첨가하여 35~40℃로 가열하는 제2단계(S200);로 구성될 수 있다.
여기에서 상기 천연 보습제는 자몽 종자 추출물과 1,2-Hexanediol과, Propylene glycol과, Carpryl giycol로 이루어진 혼합물이며, 자몽 종자 추출물은 전체 100 중량%를 기준으로 0.2 중량%가 첨가되는 것이 바람직하다.
아래 실시예 1은 는 멀티 미스트를 구성하는 조성물과 천연 보습제의 배합비에 따른 안정성을 측정한 과정 및 그 결과를 나타낸 것이다.
| 구분 |
INCI Name | A | B | C |
| 복합 조성물 |
대추 추출물 | 57 | 58.5 | 57.5 |
| 진피 추출물 | 18 | 17 | 19 | |
| 창포 추출물 | 18 | 17 | 19 | |
| 천연 보습제 |
자몽 추출물 | 3.5 | 4 | 2 |
| 1,2-Hexanediol | 0.25 | 0.25 | 0.25 | |
| Propylene glycol | 3 | 3 | 2 | |
| Carpryl giycol | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
상기와 표1과 같이 복합 조성물과 천연 보습제의 배합비를 각기 달리한 시편A와 시편B 및 시편C를 준비하였으며, 실험은 pH 측정, 비중 측정, 온도조건별 경시적 안정도 관찰, 온도 순환에 따른 안정성 검사 순으로 진행하였다.
1. pH 측정
pH 측정은 Thermo(Orion 3-Star, Thermo scientific, Singapore)사의 pH meter를 이용하여 pH를 측정하였다. 측정하기 전에 유리전극은 미리 염기성 완충액이나 증류수에 수 시간 담그어 두고 pH meter는 전원에 연결하고 10분 이상 두었다가 사용하였다. 검출부는 물로 잘 씻어 가볍게 닦아 낸 다음 사용하였다.
<pH measurement of the MIST>
상기 표 2와 같이 0, 1, 3, 5, 7, 14, 28일차로 4주간 25℃에 보관한 시제품의 pH를 측정한 결과, 각 보관 기간 동안 수치상의 큰 차이는 나타나지 않는 것으로 관찰되었다.
2. 비중 측정
비중 측정은 비중컵(50ml)를 이용하여 비중을 측정하였다. 측정하기 전에 비중컵을 깨끗이 세척 후 건조한 다음 비중컵에 시료를 넣어 기포가 남지 않도록 주의하여 뚜껑을 닫고 중량을 측정한다.
<Results of specific gravity of the cosmetics>
상기 표 3과 같이 각 처방별로 4주간 25℃에 보관한 제품의 비중을 측정한 결, 모든 실험품에서 4주간 동안 처방에 따른 수치상의 큰 차이는 나타나지 않는 것으로 관찰되었다.
3. 각 온도조건별(0℃, 25℃, 45℃, 자외선) 경시적 안정도 관찰
시료를 투명 용기에 담아 0℃, 25℃, 45℃에서 각각 4주간 보관하면서 1, 3, 5, 7, 14, 28일차 까지 온도별 안정성을 평가하였다. 처방의 자발적인 경시적 열화(劣化)현상화 화학적, 물리적 변화를 알아보기 위해서 온도 안정성 평가를 하였다. 고온(45℃)에서는 외관의 산패, 변색, 변취, 부유, 침전, 분리 등을 중점 관찰하였고, 저온에서는 응고, 침전, 분리 등의 화학적 물리적 변화를 관찰하였다.
<온도조건별 경시적 안정도 측정을 위한 시편 분류>
<0℃에서의 경시적 안정도 테스트>
<25℃에서의 경시적 안정도 테스트>
<45℃에서의 경시적 안정도 테스트>
상기 표 4와 같이 각 처방별로 제조된 제품을 투명 용기에 담아 0℃, 25℃, 45℃에서 각각 1주간 보관하면서 1, 3, 5, 7, 14, 28일차 까지 온도별 안정성을 평가하였다. 0℃, 25℃, 45℃에 보관한 시제품의 경우 28일 동안 일부 제품에서 변색, 변취의 현상이 발생하였으나 최종 시제품의 경우 안정한 것으로 관찰되었다.
4. 온도순환 (Cycle chamber)에 따른 안정성 시험
시료를 투명 용기에 담아 -15℃, -10℃, -5℃, 0℃, 5℃, 10℃, 15℃, 25℃, 37.5℃, 40℃에서 각각 24시간 보관한 후 이를 1 cycle로 하여 10회 반복 시행하여 온도 순환에 따른 안정성을 평가한다. 온도순환(Cycle chamber)에 따른 안정성 시험법은 4계절이 분명한 우리나라에서 화장품의 저온 및 고온의 보관조건에 따른 물성변화를 관찰하기 위하여 실시하고 있으며, 또한 온도 변화에 따라 유화·가용화에서의 물성변화를 관찰하기 위하여 실시하였다.
<온도순환에 따른 안정성 테스트>
상기 표 5와 같이 각 처방별로 제조된 제품을 투명 용기에 담아 -15℃, -10℃, -5℃, 0℃, 5℃, 10℃, 15℃, 25℃, 37.5℃, 40℃에서 각각 24시간 보관한 후 이를 1 cycle로 하여 7회 반복 시행하여 온도 순환에 따른 안정성을 평가하였다. 보관 온도별 안정성 관찰한 결과와 같이 최종 시제품의 경우 모두에서 상의 분리와 변색, 변취 없이 안정함을 육안으로 확인할 수 있었다.
아래 실시예 2는 본 발명의 멀티 미스트의 안전성을 실험한 것이다.
실험 종류로는 멀티 미스트의 항염증 테스트와 항산화 테스트 및 모발 테스트를 각 진행하였고, 각 테스트 별로 그 결과를 도출하여 표 내지 그래프로 나타내었다.
1. 항염증 테스트
1) Raw 264.7 세포독성
RAW 264.7 마우스 대식세포 세포주는 한국세포주 은행 (Seoul, Korea)에서 구입하였다. RAW 264.7 세포주는 10% fetal bovine serum (FBS; Life Technologies, Grand Island, NY, USA)과 1% penicillin-streptomycin (P/S; GenDEPOT, Katy, TX, USA)이 첨가된 DMEM (HyClone, San Angelo, TX, USA) 배지를 이용하여 5% CO2가 존재하는 37°C 배양기에서 2∼3일에 한 번씩 계대 배양하였다. RAW 264.7 cell (5×103 cell/mL)를 96 well plate에 200 μL씩 분주하고 12∼16시간 동안 5% CO2 incubator (37°C)에서 안정화 하였다. 그리고 세포의 밀도가 70∼80%에 도달하면 대추혼합물(5∼1000 μg/mL)을 30분 동안 세포에 먼저 처리한 후, 염증 유발 물질로 lipopolysaccharide (LPS) 1 μg/mL를 넣어 24시간 동안 재배양 하였다. 음성 대조군은 LPS 없이 배양 배지만 넣은 그룹이며, 양성 대조군은 다른 물질 없이 LPS 1 μg/mL만 넣은 그룹이다. 세포 독성 평가를 위해 상등액을 제거한 후 serum free media에 용해시킨 10% WST (DoGenBio, Seoul, Korea) 100 μL를 첨가하여 37°C incubator에서 2시간 추가 배양하고 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포 생존율(cell viability, %)은 LPS 처리군에 대한 백분율로 계산하였다.
2) 전 염증성 사이토카인 평가
RAW 264.7 cell (15×103 cell/mL)를 96 well plate에 200 μL씩 분주하고 12∼16시간 정도 5% CO2 incubator (37°C)에서 안정화 하였다. 그리고 세포의 밀도가 70∼80%에 도달하면 대추혼합물(250∼1000 μg/mL)을 30분 동안 세포에 먼저 처리한 후, 염증 유발 물질로 LPS 1 μg/mL를 넣어 24시간 동안 재배양 하였다. 음성 대조군은 LPS 없이 배양 배지만 넣은 그룹이며, 양성 대조군은 다른 물질 없이 LPS 1 μg/mL만 넣은 그룹이다. 전 염증성 사이토카인은 상등액으로 유리된 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 의 함량을 보고자 각각의 sandwich ELISA set (BD bioscience, Vancouver, Canada)로 측정하였다. 이는 ELISA 키트의 사용 설명서에 따라 수행되었다. IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 함량은 제조사에서 제공하는 lyophilized recombinant standard protein을 통해 작성된 표준곡선을 이용하여 각각의 생성량 (pg/mL)을 계산하였다.
2. 항산화 테스트
1) DPPH radical 소거 활성
DPPH 자유 라디칼 소거를 이용하여 대추혼합물의 항산화 활성을 측정하였다. DPPH working solution의 제조를 위해 0.2 mM의 DPPH (Alfa Aesar, Haverhill, USA)를 4°C에서 반응시켰다. 반응액을 514 nm에서 흡광도 값이 약 0.8이 되도록 메탄올로 희석하였다. 희석한 DPPH working solution 200 μL와 추출물 10 μL를 첨가하여 암실에서 30분 반응시키고 514 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로는 trolox를 사용하여 시료와 같은 방법으로 측정하였으며 표준 검량 곡선에 상응하는 시료의 양이온 자유 라디칼 소거능을 구하였다.
2) CCD-986sk 세포 독성
CD-986sk 세포에 대한 시료의 유효농도를 결정하기 위해 세포독성측정(MTT assay)을 진행하였다. 배양된 CCD-986sk 세포를 48 well plate에 각각 1×104 cell/wells로 접종하고 24시간 배양하였다. 동일 배지로 교체한 후 대추혼합물을 농도별(5, 10, 50, 100, 250, 500, 1000 μg/mL)로 희석하여 처리한 후 48시간 CO2 incubator에서 배양하였다. 5 mg/mL MTT 용액과 10 % FBS, 5 % antibiotic-antimyotic을 첨가한 DMEM을 혼합하여 세포에 10 μL씩 처리한 후 3시간 배양하였다. Demethyl sulfoxide 100 μL 넣은 후, 10분간 교반 한 후 microplate reader 로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
3) Pro-collagen 합성 및 MMp-1, MMP-13 발현 측정
CCD-986sk 세포를 배양한 후 6 well plate에 1×105 cell/wells로 접종하고 24시간 배양하였다. 동일 배지로 교체한 후 UVB (20 mJ/cm2)을 조사 한 뒤, 대추혼합물을 250, 500, 1000 μg/mL 희석하여 처리한 후 48시간 배양하였다. Blank와 control group은 sample의 처리없이 배양하였으며 그 후 각 well의 상등액을 이용하여 procollagen type C-peptide assay kit와 MMP-1 hunam ELISA kit을 사용하여 실험을 진행한 뒤, microplate reader로 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. 모발 테스트
1) 모발 인장강도 측정
인장강도 측정은 만능재료시험기(TO-101, Testone, Korea)로 측정하며 측정 속도는 10 mm/min으로 하고 표점 거리는 20 mm로 하였다. 대추혼합물 250, 500, 1000 μg/mL를 처리한 3개 군별 10개의 시료를 10회 반복 측정하여 평균과 표준편차를 구하여 유의성 검증을 하였다.
2) SEM을 이용한 모표피 분석
시료 모발을 5 mm로 자르고, 진공이온코팅기(Ion Sputter: E-1020, Hitachi, Japan)를 사용하여 약 20 mm 두께로 이온코팅(Au, Pt-Pd sputtering) 후 주사전자현미경(JSM-6400, JEOL, Japan)으로 20,000 배율로 촬영하였다.
3) 모발 아미노산 분석
Fluorescence Detector 및 UV/VIS Diode Array Detector가 장착된 고속액체크로마토그라피(HPLC, Ultimate 3000)를 이용하여 무처리 모발, 1일 1회 대추혼합물 1000 μg/mL를 처리한 후 30일이 경과한 모발 등 2 종류의 모발의 구성 아미노산을 정량 분석하였다.
4. 통계처리
통계처리는 SPSS 12.0을 사용하였다. 각 실험군의 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었으며, 각 실험군의 간의 결과는 2-표본 t 검정을 사용하여 분석하고 유의적인 차이가 있는 항목에 대해서만 검정하였다. 실험군 간의 차이는 95 % 수준(*p <0.05, **p <0.01)에서 유의성 있는 것으로 하였다.
*결과
1. 항염증 테스트
1) 세포독성
대추혼합물이 세포 생존에 미치는 영향을 확인하기 위해 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 독성을 확인하였다.
<세포독성 테스트>
그 결과 상기 표 6과 같이 대추혼합물의 전 농도에서 LPS 1 μg/mL 단독처리군 대비 90% 이상의 세포 생존율을 나타내었다.
2) 전 염증성 사이토카인 평가
LPS로 염증이 유도된 RAW 264.7 세포에서 대추혼합물은 모두 통계적으로 유의한 염증매개인자 억제 활성을 나타내었다.
<IL-1β 함량 테스트>
<IL-6 함량 테스트>
<TNF-α함량 테스트>
2. 항산화 테스트
1) DPPH radical 소거 활성
<소거 활성 테스트>
상기 표 8과 같이 Trolox를 표준물질로 분석한 대추혼합물의 소거 활성은 10 mg/ml 까지는 농도의존적인 결과를 나타내었다. 즉, DPPH는 10 mg/mL 농도에서 86.4%의 억제율을 보였다. 하지만 50과 100 mg/ml 농도에서는 추출물의 색상의 영향으로 값이 낮아지는 것으로 판단된다.
2) CCD-986sk 세포 독성
<세포 독성 테스트>
상기 표 9와 같이 대추혼합물의 세포 독성측정과 실험에 사용될 농도 범위 결정을 위해 MTT assay를 수행하였다. CCD-986sk 세포에 대추혼합물을 5, 10, 50, 100, 250, 500, 1000 μg/mL 농도로 처리한 결과, 전 농도에서 세포생존율이 90 % 이상으로 나타내어 CCD-986sk 세포의 생존율에 큰 영향을 나타내지 않음을 확인할 수 있었다.
3) Pro-collagen 합성 및 MMP-1, MMP-13 발현 측정
<Pro-collagen 합성 및 MMP-1, MMP-13 발현 측정>
상기 표 10과 같이 피부 세포의 주름과 관련된 collagens은 pro-collagen이라는 전구물질의 형태로 합성된다. 따라서 pro-peptide의 양을 측정함으로써 세포내에서의 collagen의 합성 정도를 파악할 수 있다(Parfitt 등, 1987). Pro-collagen의 합성을 촉진 시킬 수 있는 소재는 탄력 있는 피부를 만들어 주는 화장품 원료로서 사용 가능성이 높다고 생각되며 이에 대추혼합물을 이용하여 procollagen 합성 실험을 수행하였다. 그 결과, 대추혼합물은 농도 의존적으로 pro-collagen 생성을 증가 시켰으며, 특히 최고 농도인 1000 μg/mL의 농도에서는 대조군에 비해 20 % 이상의 높은 생성률을 나타내었다. 또한 MMP-1과 MMP-13은 type collagen을 분해하는 인자로 알려져 있으므로(Talwar 등, 1995; Nagase와 Woessner 1999) 이 인자의 발현을 저해하는 것이 피부의 탄력유지에 효과를 줄 수 있을 것으로 예측되며 대추혼합물의 MMP-1와 MMP-13의 발현 저해율 측정하였다. 그 결과, MMP-1과 MMP-13을 control과 비교하였을 때 대추혼합물이 농도 의존적으로 발현을 저해하는 것을 확인하였다.
3. 모발 테스트
1) 모발 인장강도 측정
<Tensile Strength Measurement>
상기 표 11과 같이 대추혼합물 250, 500, 1000 μg/mL로 30일간 처리한 뒤 인장 강도 측정 결과 농도 의존적으로 유의한 차이가 있는 것으로 나타났다.
2) 모발 SEM 분석
<Surface Change of Hair Treated with CJD 1000>
상기 표 12와 같이 대추혼합물 1000 μg/mL로 30일간 처리한 뒤 모발의 형태학적 변화 양상을 주사전자현미경(SEM)을 이용해 10일 간격으로 관찰한 결과이다. 시간이 경과되면서 겉 표면이 매끄럽고 규칙적인 큐티클 층의 경계선이 뚜렷하고 큐티클층 간에 서로 견고하게 부착되는 것을 볼 수 있었다.
3) 모발 아미노산 분석
<모발 아미노산 분석>
상기 표 13과 같이 대추혼합물 1000 μg/mL로 30일간 처리한 뒤 모발의 아미노산을 분석한 결과 통계적으로 유의미한 변화를 보이지 않았다.
아래 실시예 3은 본 발명이 제안하는 기능성 복합 조성물의 시험 성적서이다.
상기와 같은 구성으로 이루어지는 본 발명의 기능성 복합 조성물과 멀티 미스트는 화학제가 첨가된 기존의 미스트와는 달리 피부 트러블을 유발하지 않으며, 대추와 진피 및 청포 등의 재료들로부터 피부와 두발의 건강 개선과 케어를 동시에 구현할 수 있으므로, 사용의 편의성과 효율성 및 실용성을 가진다.
이는 도면 4에 도시된 바와같이 피부첩포에 의한 일차자극 테스트를 통해 피부 자극 지수에 따른 자극성 평가를 통해 비자극적임을 알 수 있다.
또한,조성물의 제조공정과 미스트의 제조공정이 매우 간소화되어 생산 효율성이 극대화 유도되고, 이로부터 우수한 성능의 미스트를 저렴하게 제공할 수 있다.
또한, 새로운 기능성 식품 개발 등으로 바이오 산업에 이바지할 수 있고, 나아가 대추, 진피, 청포 등의 재료가 사용됨에 따라 농산물 가공기술을 발전시켜 미래 선진형 지역 역량 강화 사업 구축에 기여할 수 있으며, 대추, 진피, 청포의 혼합기술에 기인한 바이오 융합기술 발전에 좋은 영향을 끼치는 등 과학기술적 파급효과가 뛰어나다.
또한, 국내산 재료 수급 증대에 기인한 농가상생에 기여할 수 있고, 대추한방혼합물 개발 후 이를 이용한 6차 산업 프로그램 개발을 통한 지역발전에 새로운 모델을 적용시켜 농촌경제에 활력을 부여할 수 있으며, 해외 수출 판로 개척을 통한 대추 제품의 세계로를 이룩할 수 있는 등 경제적, 사회적 측면에서 파급효과를 기대할 수 있다.
이상에서 설명한 본 발명은, 도면에 도시된 일실시 예를 참고로 설명되었으나 이는 예시적인 것에 불과하며, 본 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자라면 이로부터 다양한 변형 및 균등한 타 실시 예가 가능하다는 점을 명확히 하여야 할 것이다. 따라서, 본 발명의 진정한 기술적 보호 범위는 첨부된 청구범위에 의하여 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술적 사상은 본 발명의 권리범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.
S100. 제1단계
S200. 제2단계
S200. 제2단계
Claims (6)
- 대추 추출물과 진피 추출물 및 창포 추출물의 혼합으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물의 제조방법.
- 제1항에 있어서,
상기 대추 추출물은 대추 농축액을 10wt%의 농도가 되도록 희석한 후 필터 페이퍼 방식으로 여과하여 획득된 것을 포함하는 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물의 제조방법.
- 제1항에 있어서,
상기 진피 추출물은,
건조된 귤 껍질을 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 진피 분쇄단계(S11);
80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 진피 추출단계(S12);
필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 진피 여과단계(S13);
여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 진피 냉각단계(S14);
를 포함하는 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물의 제조방법.
- 제1항에 있어서,
상기 창포 추출물은,
뿌리가 제거된 창포를 건조 및 분쇄하여 분말 형태로 가공하는 창포 분쇄단계(S21);
80~85℃의 온도에서 3~4시간 동안 가열하고, 상등액과 침전물을 3회 분리하는 창포 추출단계(S22);
필터 페이퍼 방식을 활용하여 추출물을 여과하는 창포 여과단계(S23);
여과된 추출물을 3~4℃의 온도에서 냉장 보관하는 창포 냉각단계(S24);
를 포함하는 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물의 제조방법.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 의해 제조되는 복합 조성물을 45~50℃로 가열하는 제1단계(S100);
가열된 복합 조성물에 증류수를 넣고 교반한 후 천연 보습제를 첨가하여 35~40℃로 가열하는 제2단계(S200);
로 이루어지는 것을 특징으로 하는 대추 추출물이 함유된 멀티 미스트의 제조방법.
- 제5항에 있어서,
상기 천연 보습제는 자몽 종자 추출물과 1,2-Hexanediol과, Propylene glycol과, Carpryl giycol의 혼합으로 이루어지는 것을 포함하는 대추 추출물이 함유된 멀티 미스트의 제조방법.
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| KR1020210167067A KR20230079875A (ko) | 2021-11-29 | 2021-11-29 | 대추 추출물이 함유된 기능성 복합 조성물 및 이를 이용한 멀티 미스트의 제조방법 |
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| KR20120040772A (ko) | 2010-10-20 | 2012-04-30 | 김희래 | 천연물을 함유하는 미스트의 제조 방법 |
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