KR20230058014A - 급성 호흡곤란 증후군(arda) 및 코로나바이러스로 인한 염증 장애를 치료하기 위한 조성물 및 방법 - Google Patents

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Abstract

SARS-CoV-2 감염 및 관련 COVID-19 질병을 포함하는 SARS(급성 급성 호흡기 증후군) 코로나바이러스 감염의 예방 및 치료를 위해 포르볼 에스테르 또는 포르볼 에스테르의 유도체를 함유하는 방법 및 조성물이 제공된다. 또한 중증 SARS-CoV-2/COVID-19 사례에서 나타나는 급성 호흡곤란 증후군(ARDS) 및 사이토카인 폭풍 증후군(CSS)을 포함하는 급성 염증 병태 및 관련 병원성 상해를 예방하고 치료하기 위한 방법 및 조성물이 제공된다.

Description

급성 호흡곤란 증후군(ARDS) 및 코로나바이러스로 인한 염증 장애를 치료하기 위한 조성물 및 방법
본 발명은 바이러스 감염 및 기타 물질에 의해 매개되는 폐 및 기타 기관의 폐 바이러스 감염 및 관련된 염증 및 면역 질환 병태 를 치료하기 위한 치료 및 예방 조성물 및 방법에 관한 것이다. 특정 구체예에서, 본 발명은 바이러스 병원체, 박테리아 병원체, 부식제, 외상, 화상 또는 폐 또는 면역계의 손상 또는 염증성 손상 또는 자극의 다른 원인에 의해 유발되는 급성 호흡곤란 증후군(ARDS) 또는 중증 급성 호흡기 증후군(SARS)을 치료하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적인 구체예에서, 본 발명은 SARS 코로나바이러스 또는 다른 호흡기 바이러스에 의해 유발되는 폐 바이러스 감염 및 관련된 폐 및 염증성 질환 증상, ARDS/SARS를 치료 및 예방하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다.
급성 호흡곤란 증후군(ARDS)(일명 "성인 호흡곤란 증후군")은 종종 폐부전, 입원 및 중환자 치료로 끝나는 심각한 병리학적 병태이다. ARDS는 바이러스성 또는 박테리아성 폐렴, 위 내용물 흡인, 뜨거운 가스 또는 부식제 흡입, 폐 타박상 또는 기타 폐 외상, 패혈증, 급성 췌장염 및 기타 원인과 같은 다양한 폐 및 비폐 원인에 의해 유발될 수 있다. 현재 ARDS의 가장 강력한 원인은 SARS 코로나바이러스 SARS-CoV-2로 인해 발생하는 진행 중인 COVID-19 질병 팬데믹에서 나타났다.
코로나바이러스는 외피가 있는 포지티브 센스 단일 가닥 RNA 바이러스이다. 이들은 알려진 RNA 바이러스 중에서 가장 큰 게놈(26-32kb)을 가지고 있다. 코로나바이러스는 인간을 포함한 광범위한 조류 및 포유류 종을 감염시킨다. 6종의 알려진 인간 코로나바이러스 중 4종(HCoV-OC43, HCoV-229E, HCoV-HKU1 및 HCoV-NL63)은 수세기 동안 매년 인간 집단에서 순환했으며 일반적으로 경미한 호흡기 질환을 유발하지만 심각성은 유아, 노인 및 면역 저하자에서 더 클 수 있다.
이와 대조적으로, 최근의 여러 코로나 바이러스 발생은 인간에게 심각한 건강 및 경제적 영향을 초래하였다. 이러한 "신종" 코로나바이러스는 중증 사례에서 모두 ARDS를 유발하였다(특히 코로나바이러스 질병과 관련하여 "중증 급성 호흡기 증후군"(SARS)이라고 함). ARDS/SARS를 유발할 수 있는 코로나바이러스에는 2002년 중국 광둥성에서 발생한 원래 "SARS" 바이러스(SARS-CoV)와 우한시에서 처음으로 확인된 COVID-19(SARS-CoV-2) 코로나바이러스(일명 "COVID-19 바이러스") 및 중동호흡기증후군 (MERS) 코로나바이러스(MERS-CoV)가 포함된다. 모든 SARS/MERS 코로나바이러스는 쇠약하게 만드는 기도 감염과 관련된 가장 심각한 질병 사례의 근위 원인으로 ARDS를 유도한다.
각각의 SARS 코로나바이러스(SARS-CoV, MERS-CoV 및 SARS-CoV-2)는 지난 20년 이내에 다른 포유류 종에서 인간에게 인수공통 전이되었으며 높은 치사율로 발생하였다. 말굽박쥐는 이러한 신종 코로나바이러스의 주요 숙주로 간주되며, 인간에게 바이러스를 전염시킨 중간 숙주는 SARS-CoV의 가면사향고양이와 MERS-CoV의 단봉낙타로 확인되었다. SARS-CoV-2의 경우 최근 메타지노믹스 연구 결과 이 최신 SARS 코로나바이러스가 우한의 화난 수산 시장에서 밀수/무역의 대상으로 말레이 천산갑(Manis javanica)에서 인간 집단으로 전염된 것으로 강력히 시사되었다 (램 등, 2020). SARS-CoV 및 MERS-CoV의 높은 병원성과 공기 전염성은 현재 COVID-19 팬데믹이 발생하기 수년 전에 또 다른 코로나바이러스 팬데믹의 가능성에 대한 우려를 불러일으켰다.
2019년 12월부터 COVID-19 발병은 전 세계 인구 사이에서 계속 빠르게 확산되고 있다. COVID-19 바이러스는 공기중(비말) 및 접촉 전파를 통해 전염성이 매우 높으며, 현재는 무증상 보균자와 무증상 보균자에 의해 전파되는 것으로 알려져 있다. 2020년 3월 11일 세계보건기구(WHO)는 COVID-19에 대해 팬데믹을 선언하였다. 2020년 5월 17일 현재 약 213개국에서 475만 건 이상의 COVID-19 사례가 확인되었고 314,000명 이상이 사망하였다.
COVID-19 폐렴의 임상 경과는 광범위한 중증도 및 진행 패턴을 나타낸다. 일부 환자에서는 호흡곤란(숨가쁨)이 발병 후 중앙값 8일(범위 5~13일) 이내에 발생하지만 다른 환자에서는 호흡곤란이 없을 수도 있다. 약 3~30%의 환자가 집중 치료를 받아야 한다. 중증 환자는 다발성 장기 기능 장애 및 심지어 사망까지 급속한 진행을 보일 수 있다. 숨가쁨과 저산소혈증을 보이는 사람들은 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 쇼크를 동반한 중증 패혈증, 심지어는 수일 내, 보통 약 1주 내에 다발성 장기 기능 장애로 빠르게 진행될 수 있다. ARDS는 COVID-19로 입원한 환자의 약 15~30%에서 기록되었으며, 증상 발현 후 평균 8일 후에 나타난다(Tu et al., 2020).
COVID-19 질병은 대부분의 사람들에게 중등도이거나 심지어 무증상일 수 있지만, 감염된 피험자의 약 20%는 중증 증상을 보인다. COVID-19 이환율과 사망률은 노인과 기저 폐 질환, 심장 질환, 당뇨병, 암 또는 기타 심각한 건강 병태가 있는 대상자에서 특히 높다. ARDS/SARS에 걸린 소수의 환자는 치명적인 사례가 발생하여 종종 패혈성 쇼크 및 다기관 부전을 수반하는 호흡 부전으로 절정에 이른다.
ARDS/SARS의 병인은 다른 염증성, 면역학적 및 조직/장기 손상 중에서 폐 실질의 염증, 폐포 공기 공간으로의 호중구 침윤, 산화 스트레스, 내피 및 상피 장벽 파괴, 상피 내막 손상 및 후속 폐 섬유증을 포함한다.
ARDS의 기전과 병인에 관한 상당한 지식에도 불구하고, 20년 이상의 집중적인 임상 연구로도 ARDS를 예방하거나 사망률을 실질적으로 줄이기 위한 효과적인 치료법을 산출하는 데 실패하였다(Fanelli et al., 2013). 1차 ARDS 치료는 환자의 산소 공급 또는 인공 호흡과 환자의 체액 균형에 대한 엄격한 제어로 구성된 기본 지지 요법으로 남아 있다.
COVID-19 질병의 경우, 우리의 조사와 다른 사람들의 조사는 중증 COVID-19 환자에서 ARDS를 유발하는 중요한 염증 메커니즘을 지적한다. 중증 COVID-19 질병의 일반적인 증상은 다음과 같다. 1) 1~2주 후 질병의 급속한 악화; 2) 혈액 내 림프구, 특히 자연 살해(NK) 세포의 현저한 감소; 3) 친염증성(pro-inflammatory) 사이토카인 (IL-6, TNFα, IL-8 등) 및 C 반응성 단백질 (CRP)과 같은 기타 염증 인자 상승; 및 4) 비장 및 림프절의 위축 및 림프계 기관의 림프구 감소로 특징되는 중증 면역 장애. 중증 COVID-19 환자에서 흔히 관찰되는 다른 후유증으로는 림프구 침윤이 최소인 폐 병변으로의 단핵구 및 대식세포 침윤, 과응고 및 다발성 장기 손상이 수반되는 혈관염의 형태가 있다.
COVID-19에 감염된 어린이의 작은 하위 집합에서 현재 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS)이라고 하는 응급 과염증 병태가 확인되었다. 이 가와사키와 유사한 질병은 이탈리아의 초기 보고서와 뉴욕, 뉴저지, 매사추세츠 및 영국의 유사한 사례에 대한 병렬 보고서에서 알 수 있듯이 전 세계적으로 COVID-19 대유행 중에 발생하고 있다. 드물지만 PIMS의 영향은 심각하고 잠재적으로 생명을 위협한다.
최신 데이터에 따르면 PIMS는 SARS-CoV-2 감염에 대한 비정상적인 면역 반응으로 유전적 소인이 있는 소아 환자에서 가와사키 유사 질병을 유발한다. COVID-19 관련 PIMS의 일반적인 증상에는 발열, 발진, 충혈된 눈, 건조하거나 갈라진 입, 손바닥과 발바닥의 발적, 샘 부종 등이 있다. 어린이의 약 1/4은 심장 합병증을 앓는다. COVID-19 관련 PIMS의 비정상적인 면역 반응은 때때로 관상 동맥 동맥류와 함께 혈관의 염증과 부종을 초래한다 .
이탈리아 최초의 관찰 코호트 연구(2020년 5월 13일 Verdoni 등이 Lancet에 게재)에 따르면 2020년 3월 17일부터 4월 14일 사이에 PIMS 진단을 받은 어린이 10명 중 8명이 COVID-19 양성 판정을 받았다(나머지 두 피험자는 강력한 위음성 SARS-CoV-2 검사 가능성이 있었음). 이 이탈리아 연구에서는 COVID-19 코호트의 데이터를 지난 5년 동안 가와사키병 전 유행병 진단을 받은 어린이 19명의 데이터와 비교하였다. 팬데믹 이전에는 평균적으로 동일한 관할 인구에서 3개월마다 1명의 가와사키 환자가 확인되었으며 이는 COVID0-19 발병 기간 동안 연구 기간 동안 PIMS가 30배 증가했음을 나타낸다.
COVID-19 대유행 동안 PIMS 진단을 받은 이탈리아 연구의 어린이는 그 전 5년 동안 고전적인 가와사키병으로 치료받은 어린이보다 더 심각한 증상을 보였습니다. 10명의 새로운 환자 중 6명(60%)이 심장 합병증을 보인 반면, 이전에 치료받은 가와사키 피험자에서는 19명 중 2명(11%)만 나타났다. 이탈리아 연구에서 COVID-19 팬데믹 동안 진단받은 10명의 어린이 중 5명(50%)은 저혈압을 교정하기 위해 수액 소생술이 필요한 독성 쇼크 증후군(TSS) 증상을 보인 반면, COVID-19 발병 이전에 진단받은 19명의 가와사키 피험자 중 누구도 이러한 합병증을 겪지 않았다. TSS는 고열, 저혈압 및 발진을 특징으로 하는 박테리아 감염에 의해 일반적으로 발생하는 희귀하고 생명을 위협하는 질병이다.
이탈리아 연구에서 PIMS 환자의 치료에는 면역글로불린 요법이 포함되었으며, 10명의 환자 중 8명이 스테로이드 치료를 필요로 하였다(이는 COVID-19 이전 가와사키 연구 그룹 19명 중 3명만 이 치료를 필요로 한 것과 대비된다). 이탈리아에서 팬데믹 기간 동안 입원한 어린이들은 또한 이전에 진단받은 어린이들보다 나이가 많았다(평균 연령, 7.5세 대 3세). 10명 중 7명은 남자아이였다.
미국 질병 통제 예방 센터(CDC)는 이제 PIMS와 COVID-19 사이의 연관성을 확인하였다. 뉴욕시 보건부는 현재까지 PIMS(소아 다기관 염증 증후군(MISC)라고도 함)가 있는 어린이 사례 145건을 확인하였다.
PIMS와 관련된 메커니즘을 이해하면 성인과 어린이 모두에 대해 보다 일반적으로 인간 SARS-CoV-2 면역 반응을 설명하고 두 그룹 모두에서 다양한 COVID-19 질병 증상을 완화하는 데 유용한 항염증 치료 도구 및 방법의 조사 및 개발을 안내하는 데 도움이 된다.
COVID-19 질병의 중증 사례에서 유도된 친염증성 사이토카인의 과도한 활동은 일반적으로 "사이토카인 폭풍"으로 불리운다. "사이토카인 폭풍 증후군"(CSS)("사이토카인 방출 증후군" 또는 CRS라고도 함)이라는 용어는 일반적으로 친염증성 사이토카인 및 기타 염증 인자의 과도하고 통제되지 않은 방출을 나타내며, 이는 과도하고 잠재적으로 생명을 위협하는 염증을 유발한다. CSS는 다양한 감염성 질환, 류마티스성 질환, 자가면역 질환 및 종양 면역요법을 받고 있는 일부 대상과 관련이 있다.
감염성 질환의 경우 CSS는 일반적으로 국소 감염 부위에서 발생하지만 빠르게 전신으로 퍼질 수 있다. COVID-19 및 기타 SARS 코로나바이러스(SARS-CoV 및 MERS)는 빠른 바이러스 복제, 광범위한 염증 세포 침윤 및 ARDS/SARS(급성 폐 염증 및 손상, 폐부전으로 가장 심각한 경우에 최고조에 달함)로 이어지는 CSS로 심각한 경우에 나타난다. COVID-19 질병과 관련된 CSS는 또한 전신 염증, 혈관염, 다발성 장기 부전 및 심한 경우 뇌졸중으로 이어지는 응고과다를 유발할 수 있다.
중증 COVID-19 환자는 이전에 SARS-CoV 및 MERS 대상에서 관찰된 CSS 증상과 유사한 친염증성 사이토카인 프로필이 상승한 것으로 나타났다. Huang et al. (2020)은 중증 COVID-19 질병 환자에서 다양한 친염증성 사이토카인 및 기타 염증 인자가 증가한다고 보고하였다. 41명의 COVID-19 입원 환자(13명의 ICU 및 28명의 비 ICU) 중에서 Huang과 동료들은 인터루킨(IL)-1B, IL-1RA, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, 섬유아세포 성장 인자(FGF), 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF), IFNγ, 과립구-콜로니 자극 인자(G-CSF), 인터페론-γ 유도 단백질(IP10), 단핵구 화학유인 단백질(MCP1), 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A), 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 종양 괴사 인자(TNFα) 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF)의 수치 증가를 보고하였다. 더 심각한 ICU 환자에서 Huang과 동료들은 IL-2, IL-7, IL-10, G-CSF, IP10, MCP1, MIP1A, TNFα가 비 ICU 환자보다 높다고 보고하였다(Huang et al. , 2020; Conti et al., 2020] 특히, Huang et al. 연구에서 ICU와 비 ICU 환자 간에 혈청 IL-6 수치에 대해 보고된 차이는 없었다.
인터류킨-1(IL-1)과 같은 친염증성 사이토카인은 국소 및 전신 염증에서 중요한 매개체이다. 바이러스 감염에 의해 자극을 받으면 IL-1은 조직 염증, 발열 및 섬유증에서 근본적인 역할을 한다. IL-1은 감염된 세포와 죽은 세포에서 식세포 활동을 수행하고 다른 염증 인자를 방출하는 대식세포를 활성화한다. 이와 같이 사이토카인 유도 대식세포는 COVID-19의 과도한 염증 및 이에 수반되는 폐 병인에서 중심적인 역할을 한다.
다른 친염증성 사이토카인은 CSS에 의해 매개되는 SARS-CoV 및 COVID-19 질병의 임상 진행과 관련이 있다. 이러한 사이토카인 중에서 인터페론-알파(IFNα), 종양 괴사 인자(TNF) 및 IL-1은 오랫동안 핵심적인 역할을 하는 것으로 여겨져 왔다(Ho et al., 2003, Auyeung et al., 2005, Chousterman et al., 2017). 2, 18-19). SARS 관련 CSS를 매개하는 역할을 할 수 있는 것으로 제안된 다른 친염증성 사이토카인에는 IL-8, IL-6 등이 포함된다.
IL-1은 바이러스 감염으로 인한 질병을 포함하여 염증성 질병과 관련된 특성을 가진 가장 철저하게 연구된 사이토카인이다. IL-1의 제어된 합성 및 방출은 CoV-19가 톨 유사 수용체(TLR)에 결합한 후에 발생한다. 이 수용체의 활성화는 pro-IL-1의 합성으로 시작하여 카스파제-1에 의해 절단된 후 인플라마좀 활성화로 이어지는 친염증성 "캐스케이드"를 유발한다(Chen et al., 2006). 높은 수준의 아데노신 삼인산(ATP)은 인플라마좀 활성화를 매개하는 P2X7 수용체(푸리제닉 2 수용체)의 활성화와 상관관계가 있다. Pro-카스파제-1 및 기타 요인은 리소좀에서 IL-1b의 합성을 유도하고 IL-1b는 대식세포 외부로 분비되어 민감한 COVID-19 환자의 심각한 호흡기 문제와 관련된 폐 염증, 발열 및 섬유증을 매개한다. 면역 세포는 염증 부위에서 생성된 케모카인인 IL-8에 의해 감염 부위로 유인되어 심한 경우 사이토카인 "폭풍"을 더욱 악화시킨다.
염증은 일반적으로 상처와 싸우고 신체에 유입된 이물질과 병원균을 방어하기 위해 진화된 적응 반응이다. 대조적으로, COVID-19 질병 및 기타 염증 병태와 관련된 CSS의 경우 과염증은 통제되지 않으면 매우 해롭다. 친염증성 사이토카인 수준과 COVID-19 및 SARS-CoV 바이러스 복제 및 질병 중증도 사이의 문서화된 연관성은 많은 연구자들이 항염증성 사이토카인이 이러한 질병 및 병태를 퇴치하는 데 유용한 치료제를 제공할 수 있다는 이론을 제시하게 하였다. 이러한 맥락에서 고려되는 주요 "항염증성 사이토카인"은 인터류킨(IL)-1 수용체 길항제(IL-1Ra), IL-4, IL-10, IL-11 및 IL-13을 포함한다. IL-1, 종양 괴사 인자-알파 및 IL-18에 대한 특정 사이토카인 수용체는 또한 염증 유발 사이토카인의 억제제로 기능하는 "항염증" 인자로도 특징지어진다. 따라서 IL-1Ra, IL-37 또는 IL-13은 중증 COVID-19 질환에서 폐 및 전신 염증과 열을 모두 완화하기 위한 후보로 제안되었다.
코로나바이러스의 높은 치사율, 복잡한 병인 및 역학, 그에 대한 백신 또는 치료 도구의 부족으로 인해 이러한 병원체에 의해 매개되는 감염 및 질병을 예방하고 치료하기 위한 효과적인 예방 및 치료 도구가 절실히 필요하다. 백신 및 관련 치료제.
COVID-19 질병을 예방하거나 치료하기 위한 유용한 약물 및 방법을 개발하려는 노력은 부분적으로 SARS 바이러스 게놈의 복잡성과 그 혼란스러운 질병 병인으로 인해 좌절되었다. SARS-CoV, MERS-CoV 및 SARS-CoV-2에는 6~10개의 유전자를 암호화하는 큰 단일 가닥 포지티브 센스 RNA 게놈(27~32kb)이 있다. 유전자 순서 s는 일반적으로 고도로 보존되어 있으며 첫 번째 순서는 복제 및 전사 관련 순서이고 나머지 유전자는 구조적 순서이다. 복제 및 전사 관련 유전자는 리보좀 프레임시프팅에 의해 번역된 ORF(open reading frame)를 중첩하여 두 개의 큰 비구조적 폴리단백질로 번역된다. 바이러스 코트를 구성하는 스파이크(S), 엔벨로프(E) 및 막(M) 단백질을 포함한 구조 단백질과 바이러스 게놈을 포장하는 뉴클레오캡시드(N) 단백질은 모두 서브게놈 RNA에서 번역된다. 이들 단백질 중 일부는 숙주 골지체에서 글리코실화되어 당단백질을 형성한다.
SARS 코로나바이러스 스파이크(S) 당단백질은 숙주 세포에 대한 바이러스의 결합을 매개하여 세포내 콜로니화를 허용한다. S 단백질은 숙주 세포 프로테아제에 의해 프라이밍되고 세포 수용체에 의해 인식된다. 인간 세린 프로테아제 TMPRSS2는 SARS-CoV와 SARS-CoV-2 모두의 S 단백질을 프라이밍하는 역할을 하며, 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)는 두 바이러스의 진입에 대한 수용체 역할을 한다. MERS-CoV는 다른 수용체인 DPP4(디펩티딜 펩티다제 4)에 특이적으로 결합한다.
SARS 코로나바이러스의 다양한 병인 및 역학은 부분적으로 ACE2 발현 수준 측면에서 개인과 집단 간의 차이, 개인 간의 ACE-2 구조적 차이와 관련이 있다. 어린이와 그보다 더 어린 개체는 일반적으로 ACE-2 수치가 낮아 중증 COVID-19 질병에 대한 상대적 저항에 기여할 수 있다. 바이러스 감염 및 병원성에 추가로 영향을 미칠 수 있는 여러 ACE-2 유전자 변이가 인간 인구에서 확인되었지만 SARS-CoV-2 바이러스 S 단백질 결합과 관련된 ACE-2 잔기 간에 이질성이 발견되지 않았는데, 이는, 바이러스가 고도로 보존된 부착/진입 사이트를 이용할 가능성이 높아 대륙 간의 다양한 인구집단에 걸쳐 SARS-CoV-2의 급속한 확산과 관련이 있음을 가리킨다(Cao et al., 2020). 이러한 보고서에 비추어 볼 때 ACE-2는 항-COVID-19 예방 및 치료 도구 개발에 개입할 수 있는 잠재적인 대상으로 널리 고려되어 왔지만 이와 같은 발견 경로를 따라가는 데는 여전히 주요 장애물이 남아 있다.
COVID-19 관리를 위한 혁신을 위한 또 다른 도전적인 경로는 COVID-19 환자의 바이러스 매개 ARDS 및 CSS를 치료하기 위해 항염증성 사이토카인 및 관련 억제제 및 면역 조절제를 사용하는 것과 관련이 있다. 이러한 목표는 유익한 항바이러스 면역 및 염증 기능을 억제하는 것에 대한 우려로 인해 복잡해진다. SARS-CoV 감염 및 병인에 대항하기 위한 수단으로서 사이토카인 조절에 대한 수많은 표적이 고려되었다. 매우 최근의 연구에서 중증 COVID-19 환자가 높은 홍반 침강 속도(ESR)와 지속적으로 높은 수준의 C 반응성 단백질(CRP), IL-6,TNFα, IL-1β, IL-8, IL2R을 나타내는 것으로 확인되었다(Tu 등). 이들 및 기타 친염증성 마커는 임상적으로 ARDS, 과응고 및 파종성 혈관내 응고(DIC)(심각한 경우 사지의 혈전증, 혈소판 감소증 및 괴저로 나타남)와 연관된다. CSS의 이들 및 기타 후유증은 폐 손상을 악화시키고 "폐외 전신 과염증 증후군"(ESHS)이라고 하는 전신 CSS 관련 질병을 유발할 수 있으며, 이는 임산부에서 태아 합병증을 유발할 수 있다.
항염증 요법을 중재하기 위해 CSS를 차단하는 시기와 방법에 대한 질문은 COVID-19 피험자의 사망률을 줄이는 데 중요하다. 이와 관련하여 SARS 코로나바이러스에 의해 매개되는 근본적인 면역 손상을 고려하는 것이 중요하다. 림프구 감소증은 COVID-19의 가장 두드러진 진단 마커 중 하나이다. COVID-19 환자의 T 세포와 NK 세포는 모두 상당히 감소한 반면 백혈구 수는 증가하였다. 중환자의 경우 NK 세포가 극도로 낮고 감지할 수 없으며 기억 보조 T 세포와 조절 T 세포가 크게 감소한다(Hui et al., 2019). 놀라운 COVID-19 부검 결과는 또한 중증의 경우 이차 림프 조직도 파괴된다는 것을 보여준다. 이는 일반적인 CSS 질병과 뚜렷한 차이점이다. 비장 위축은 비장에서 감소된 림프구, 현저한 세포 변성, 국소 출혈성 괴사, 대식세포 증식 및 대식세포 식균 작용과 관련하여 일반적으로 관찰된다. 유사하게, 림프절 위축 및 림프절 수 감소가 관찰되고, 비장 및 림프절에서 CD4 + T 세포 및 CD8 + T 세포 수가 감소한다[ Hui et al., 2019]. 또한 특징적인 확산 폐포 손상(DAD)이 있는 폐에서 주요 침윤 세포는 단핵구와 대식세포, 중등도의 다핵 거대 세포로 림프구가 거의 없었다. 대부분의 침윤성 림프구는 CD4+ T 세포였다. 중요한 것은 PCR 검사가 혈액이나 인후 면봉에서 음성인 경우에 조차도 바이러스 봉입체가 II형 폐포 상피와 대식세포에서 여전히 검출된다는 것이다(Zu et al., 2020; De Wit et al., 2016; Chan et al., 2015B). 이 발견은 바이러스 감염 또는 T 세포 관여 요법의 합병증 말기에 활성화되는 T 림프구의 다른 하위 집합에 의해 유도되는 "2차 사이토카인 폭풍"보다는 주로 폐포 대식세포, 상피 세포 및 내피 세포에 의해 유발되는 바이러스 감염에 의해 유도되는 소위 "1차 사이토카인 폭풍"과 일치한다. (Chan et al., 2012; Kanne et al., 2020).
중증 COVID-19 질병의 또 다른 합병증은 일반적으로 ARDS 중증도와 관련이 있으며, 최근 발표된 여러 COVID-19 부검에서 확인된 바와 같이 호중구 세포외 트랩(NET)의 형성과 함께 폐 모세혈관으로의 호중구 침윤 현상이다. 호중구는 혈류에서 가장 흔한 유형의 백혈구(WBC)이며 염증의 급성기 동안 혈액에서 손상 또는 감염 부위로 이동하는 식세포이다. 호중구는 감염 초기부터 활성화된 내피, 비만 세포 및 대식세포에 의해 발현되는 사이토카인(인터류킨-8(IL-8), C5a, fMLP, 류코트리엔 B4 및 H2O2 등)에 의해 유인되는, 혈관 및 간질 구획을 통해 화학주성에 의해 자유롭게 이동한다. 일단 국소화되면 호중구 자체가 다른 세포 유형의 모집 및 활성화를 통해 염증 반응을 증폭시키는 역할을 하는 사이토카인을 발현 및 방출한다. 호중구는 단핵구/대식세포 식세포 수보다 상당히 많으며 일반적으로 초기 급성 염증의 특징으로 간주된다.
면역 체계의 다른 세포를 모집하고 활성화하는 것 외에도 호중구는 병원체에 대한 최전선 방어에서 중요한 역할을 한다. 호중구는 바이러스 및 박테리아 병원체를 직접 공격하는 세 가지 방법이 있다: 식균 작용(섭취), 탈과립(용해성 항미생물 방출) 및 호중구 세포외 트랩(NET) 생성이 그것이다. 일반적으로 ARDS, 보다 구체적으로 SARS-CoV 감염의 경우 호중구의 일반적으로 유익한 면역/염증 기능 중 적어도 일부가 파괴적으로 잘못되거나 과활성화될 가능성이 점점 더 높아진다.
호중구의 탈과립화는 일반적으로 세 가지 유형의 과립에서 다양한 단백질을 방출한다. 아주로필릭(Azurophilic) 과립(또는 "일차 과립")은 미엘로퍼옥시다제, 살균/투과성 증가 단백질(BPI), 디펜신, 세린 프로테아제 호중구 엘라스타제 및 카텝신 G를 방출한다. 특정 과립(또는 "이차 과립")은 알칼리성 포스파타제, 라이소자임, NADPH 옥시다제, 콜라게나제, 락토페린, 히스타미나제 및 카텔리시딘을 방출한다. 3차 과립은 카텝신, 젤라티나제 및 콜라게나제를 방출한다. 비정상적으로 과발현되거나 과활성화되면 이러한 다양한 효소와 항미생물제는 구조적 완전성, 병원성 저항성 및 기능을 보존하는 혈관, 폐 및 신장에 존재하는 필수 "장벽" 성분의 파괴를 포함하여 조직 및 세포외 성분에 심각한 해로운 영향을 미칠 수 있다.
COVID-19 질병에서 과도한 호중구 수, 침윤 및 활성화의 보다 중요한 병원성 결과는 호중구 세포외 트랩(NET)의 생성과 관련된 것으로 보인다. NET은 감염을 억제하기 위해 보통 호중구에서 방출되는 염색질, 살균 단백질, 산화 효소 및 사이토카인의 웹이다. 그러나 제대로 조절되지 않으면 NET는 염증을 전파하고 미세혈관 혈전증을 유발하여 폐부전/ARDS에 기여하고 CSS 및 PMIS를 보이는 COVID-19 환자의 혈관염 및 이차 장기 부전에서 유사한 역할을 하는 것으로 보인다. NET에 의해 유발되는 것으로 알려진 다양한 다른 질병은 ARDS/SARS에서 볼 수 있는 것과 같이 기도의 두꺼운 점액 분비 및 혈전 발생을 포함하여 유사한 증상을 나타낸다.
혈중 호중구 수치가 높아지면 COVID-19에서 더 나쁜 결과를 예측할 수 있으며 NET의 역할이 가장 중요해 보인다. 최근 연구에서 Zuo와 동료(2020)는 폐 모세혈관으로의 호중구 침윤 증가와 NET의 과발현이 COVID-19 환자의 바이러스성 폐렴/ARDS의 중증도와 강한 상관관계가 있다고 보고하였다. 중증 COVID-19 환자의 혈청은 무세포 DNA, MPO(미엘로퍼옥시다제)-DNA, 시트룰린화 히스톤 H3(Cit-H3) 수치가 높아 NET 수치가 상승했음을 나타낸다. 무세포 DNA 수준은 또한 C-반응성 단백질, D-이량체 및 젖산 탈수소효소를 포함한 급성 염증 단계 반응물과 강한 상관관계가 있었다. MPO-DNA는 무세포 DNA 및 절대 호중구 수 모두와 관련이 있는 반면, Cit-H3는 혈소판 수치와 상관 관계가 있고 NET의 혈전 형성(혈전 형성) 효과가 관찰되었다. 중요하게도 무세포 DNA와 MPO-DNA는 보조 없이 호흡할 수 있는 환자보다 기계 환기를 받는 입원 환자에서 더 높았다. 마지막으로, COVID-19에 걸린 개인의 혈청은 시험관 내 대조군 호중구에서 NET 방출을 유발하였다. 이 데이터는 중증 COVID-19 환자의 높은 수준의 호중구 및 NET가 이러한 환자의 CSS, ARDS, 혈관염 및 혈전 형성에 크게 기여할 가능성이 있음을 보여준다. 다른 연구는 중증 SARS-CoV 감염에 대한 이러한 결과와 필적하게, 보다 일반적으로 ARDS와 NET의 상승을 명확하게 연결시켜준다.
호중구는 바이러스 감염이나 질병의 한 기간 동안 유익하게 작동한 다음 잘못 입력되거나 과활성화된 다른 기간 동안 파괴적으로 작동할 수 있다는 점에 유의하는 것이 중요하다. 알파 1-항트립신 결핍증에서 중요한 호중구 효소 엘라스타제는 일반적으로 병인을 조절하는 데 도움이 되지만 알파 1-항트립신에 의해 적절하게 억제되지 않으므로 정상적인 적응성 염증 반응 동안 과도한 조직 손상을 일으킨다(폐기종에서 일어나는 바와 같이). 분명히 COVID-19 질병을 포함하여 다른 상황에서 호중구의 과도한 활성화는 엘라스타제 및 기타 파괴 효소를 세포외 구획으로 방출하여 폐 장벽 파괴 및 급성 폐 손상에 기여한다. 조절된 기능과 조절되지 않은 기능의 이러한 이중성은 잘못된 적응 과정을 반영하며, 모든 가능성에서 해당 과정이 대상 병원체에 의해 하이잭되거나 오해되었거나 진행성 질병 과정의 새롭고 변화하는 병인으로 인해 잘못되었음을 나타낸다.
바이러스와 박테리아가 숙주의 면역 및 염증 과정을 무력화, 오도 또는 적절하게 하여 병원체에 도움이 되도록 실행하는 숙주 표적 분자 전략의 많은 예가 있다. 중요한 호중구의 경우, 이러한 핵심 이펙터 세포와 표적 병원체 사이의 분자 상호 작용은 호중구 증식과 수명을 근본적으로 변화시킬 수 있다. 바이러스 및 박테리아성 병원균 모두 호중구 수명을 연장하거나 식균 작용 후 호중구 용해를 가속화할 수 있는 것으로 입증되었다. 클라미디아 뉴모니에(Chlamydia pneumoniae)와 네이세리아 고노레아(Neisseria gonorrhoeae)는 둘 다 호중구 아폽토시스을 억제하는 것으로 나타났다. 다른 병원체는 자발적인 아폽토시스을 방해하고 식균 작용으로 유발된 세포 사멸(PICD)을 억제함으로써 호중구 수명을 연장하는 것으로 알려져 있다. 스펙트럼의 다른 쪽 끝에서 일부 병원체는 세포 용해 및/또는 아폽토시스(조직 괴사를 유발하는 일종의 호중구 "과다활성화")을 가속화하여 식균 작용 후 호중구의 운명을 직접 변경한다.
바이러스와 박테리아는 또한 숙주 면역 체계 또는 염증 조절 기계의 요소를 직접 공격하고 파괴할 수 있다. 위에서 언급한 바와 같이 중증 COVID-19 질병은 림프구 수의 현저한 감소를 특징으로 하며, 이 질병에서 손실된 NK 세포 및 기타 중요한 림프구가 SARS-CoV 바이러스에 의해 직접 침범되어 파괴될 가능성이 전적으로 있다. 다른 한편으로, 이러한 세포의 파괴는 CSS의 부수적인 속편으로서 간접적일 수 있다. COVID-19 바이러스는 주로 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)를 통해 표적 세포를 감염시키는 것으로 보이며 ACE2 발현은 림프구에 없기 때문에 이러한 특정 세포는 CSS 파괴 메커니즘의 희생양이 될 가능성이 높다.
이러한 메커니즘과 관련하여 내피 손상과 함께 혈관염 및 혈전증은 중증 COVID-19 환자에서 두드러진 특징이다. 많은 중증 COVID-19 환자는 종종 사지에 괴저가 있는 혈관염과 유사한 증상을 보인다. 부검 결과 폐혈관(폐포 중격과 관련됨)이 혼잡하고 부종이 있으며 혈관 내부 및 주변에 단핵구 및 대식세포 자손이 침윤되어 있음이 밝혀졌다 작은 혈관은 증식, 혈관벽 비후, 내강 협착, 폐색 및 국소 출혈을 나타낸다. 미세혈관의 유리질 혈전은 심한 경우에 발견된다(Zu et al., 2020; Hui et al., 2019; Chan et al., 2015B). 혈관 손상의 기본 메커니즘은 바이러스에 의한 내피 세포의 직접적인 손상 또는 DIC, 항인지질 증후군(APS) 및 혈관염 모방으로 이어지는 다운스트림 CSS 영향을 포함할 수 있다. 항바이러스 면역에 의해 유발되는 병리학적 "자가면역" 반응도 관련될 수 있다.
과응고 병태를 나타내는 COVID-19 환자에는 PIMS 피험자가 포함된다. 이러한 합병증의 일반적인 후유증에는 연장된 프로트롬빈 시간, D-이량체 및 피브리노겐 수치 상승, 거의 정상에 가까운 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간이 포함된다. 일부 환자는 명백한 파종성 혈관내 응고(DIC)로 진행한다. Tang et al. (2020)은 COVID-19 비생존자의 71.4%와 생존자의 0.6%가 명백한 DIC의 증거를 보였다고 보고하였다. 훨씬 더 많은 비생존 환자가 사후 검사에서 응고과다 병태를 특징으로 하는 잠복 DIC를 나타내었다(피브린 혈전 형성으로 입증됨). COVID-19 악화 환자에서도 높은 비율의 말단 허혈이 관찰되었으며 이는 현성(overt) DIC가 시작되기 전에 응고 과민 병태를 나타낸다.
몇 가지 요인이 COVID-19 환자의 응고 장애에 기여할 수 있다. 중증 및 중증 COVID-19 환자의 지속적인 염증 병태는 응고 캐스케이드의 중요한 트리거 역할을 한다. IL-6를 포함한 특정 사이토카인은 응고 시스템을 활성화하고 섬유소용해 시스템을 억제할 수 있다. COVID-19 상황에서 직접적인 바이러스 공격으로 인한 폐 및 말초 내피 손상이 과응고의 주요 원인일 수 있다. 내피 세포 손상은 조직 인자 및 기타 경로의 노출을 통해 응고 시스템을 강력하게 활성화한다. 공격적인 면역 및 염증 반응은 역기능 응고에 의해 차례로 악화될 수 있으며 두 프로세스는 제어되지 않은 끝점을 향한 일종의 피드백 루프에서 작동한다. 마지막으로, COVID-19 환자에서 항인지질 항체의 출현은 항 카디오리핀 및 항-β2GP1 항체가 COVID-19 환자에서 검출되었기 때문에 응고병증을 심화시킬 수 있다. Zhang et al., 2020).
항바이러스 및 지지 요법은 COVID-19 질병 관리의 중요한 구성 요소이지만 항염증 요법을 사용하여 CSS를 차단하는 것은 COVID-19 질병의 치료 및 관리를 위한 중요하고 충족되지 않은 목표를 나타낸다. COVID-19 치료에 유용할 수 있는 다양한 항염증 약물, 예를 들어 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID), 글루코코르티코이드 및 클로로퀸/히드록시클로로퀸이 당업계에 잘 알려져 있다. 또한 폐 및 전신 염증을 감소시키기 위한 면역억제제, 친염증성 사이토카인 길항제(예컨대 IL-6R 모노클로날 항체, TNF 억제제, IL-1 길항제, 야누스 키나아제(JAK) 억제제 등) 및 기타 면역조절제가 광범위하게 고려된다.
사용 가능한 항염증제의 이러한 대규모 장비에도 불구하고 이들 중 어느 것도 ARDS 및 COVID-19 질병과 관련하여 효능 및 부작용 가능성에 대한 불확실성이 없다. COVID-19 질병 환자를 위한 항염증 요법은 항염증 요법으로 피험자를 치료할지 여부와 시기 측면에서 근본적인 위험/이득 문제를 제시한다. 이러한 근본적인 질문은 합의가 이루어지지 않은 채 격렬한 논쟁 속에 남아 있다. 주된 관심사는 코르티코스테로이드와 같은 항염증 약물이 유익한 항바이러스 방어를 지연시키거나 손상시킬 수 있고/있거나 동시에 특히 기존 면역 체계 손상 또는 바이러스 그 자체에 의해 매개된 면역 체계 손상에 직면한 피험자에서 2차 감염의 위험을 증가시킬 수 있냐는 것이다. 하나의 특정 염증 인자만 억제하여 일반적으로 CSS를 억제하지 못하는 친염증성 사이토카인을 표적으로 하는 생물학적 제제의 경우 다른 질문이 제기된다. 또는 스테로이드와 마찬가지로 항염증제는 유익한 면역 기능을 손상시킬 수 있다. 예를 들어, JAK 억제제는 강력한 항염증 효과를 발휘하는 동시에 INF-a에 의해 매개되는 중요한 면역 메커니즘을 손상시킬 수 있다. 또 다른 근본적인 혼란스러운 질문은 COVID-19 질병의 경우 중요한 것으로 보이는 항염증 치료를 위한 최적의 시간 창과 관련이 있다. 중증 환자는 일반적으로 장기간의 초기 중등도 증상을 보인 후 발병 후 1-2주 후에 갑작스럽게 악화되며, 그 이후에는 항염증 치료가 호의적인 치료 반응을 달성하지 못할 수 있다.
SARS 바이러스 병인을 자세히 조사한 결과 SARS-CoV-2는 상기도 조직에 대해 친화성을 나타내고 활발하게 복제한다. SARS-CoV와 마찬가지로 SARS-CoV-2는 혈관 내피, 호흡기 상피, 폐포 단핵구 및 대식세포 에서 광범위하게 발현되는 세포 진입을 위한 주요 수용체로 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)를 사용한다 (Lu et al., 2020). 주요 전파 경로는 직접 또는 간접 호흡기 노출을 통해 이루어진다(인후 면봉에서 살아있는 바이러스 분리 및 상부 호흡기 세포에서 바이러스 하위 게놈 메신저 RNA(sgRNA) 검출로 입증됨)(Wolfel et al., 2020). 상기도 조직에 대한 향성은 증상이 미미하고 상기도로 제한되는 경우에도 바이러스의 지속적인 인두 배출을 통해 SARS-CoV-2의 더 높은 전염을 촉진한다. 질병 경과 후반에 SARS-CoV-2는 하기도로 진행하는 바이러스 복제 측면에서 SARS-CoV와 유사하며 심각한 경우 폐 및 ACE2를 발현하는 기타 표적 기관에 대한 광범위한 공격이 이어진다(심장, 신장, 위장관 및 말단 맥관 구조 포함). 바이러스 확산의 정도와 기간은 임상적 악화와 관련이 있으며, 주로 질병 발병 후 2주에 발생한다. 그러나 중증의 후기 단계에 걸친 질병 과장은 직접적인 바이러스 손상에만 기인한 것이 아니라 SARS-CoV-2에 의해 유발된 면역 매개 손상을 추가로 포함한다. COVID-19 질병의 이 단계에서 중증 및 중환자의 두 가지 특징은 염증의 점진적인 증가와 비정상적인 과응고 경향이다.
SARS-CoV 사례에서와 같이 면역 매개 염증이 중증 COVID-19 병인의 후기 단계에서 중요한 역할을 한다는 것은 의심의 여지가 없다. COVID-19의 진행은 염증 표지자(C 반응성 단백질, 페리틴, 인터루킨(IL)-6, IP-10, MCP1, MIP1A 및 TNFα 포함)의 광범한 상승과 커플링된, 호중구의 현저한 상승, 침윤 및 과활성화와 함께 림프구 수의 지속적인 감소를 수반한다. 다양한 연구에서 림프구 수 감소와 페리틴, IL-6 및 D-이량체 수치 증가가 COVID-19 환자의 사망률 증가와 직접적인 관련이 있다고 보고되었다. 중증 및 중증 COVID-19 환자의 진행성 림프구 감소증의 기본 메커니즘은 불분명하지만 B 세포, T 세포 및 자연 살해(NK) 세포의 감소는 중증 사례에서 모두 더 두드러진다. 다른 연구에서는 CD8+ T 세포 수의 감소에도 불구하고 CD8+ T 세포 활성화(CD38 및 HLA-DR 발현의 비율로 측정) 수준이 증가한 것으로 보고되었다. 림프구 감소증은 또한 SARS-CoV 질병 진행의 중요한 특징이었으며, CD4+ 및 CD8+ T 림프구의 감소는 종종 병원성 방사선학적 변화와 관련이 있었다. SARS-CoV에 의한 대식세포 및 림프구의 직접적인 감염이 한 연구에서 나타났지만, SARS-C0V-1에서 림프구 수의 급격한 감소는 두 가지 메커니즘, 즉 순환 림프구의 재분배 또는 아폽토시스 또는 파이롭토시스를 통한 림프구 고갈에 기인한다. COVID-19 환자의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에서는 바이러스 유전자 발현이 관찰되지 않았으며 정상 바이러스 수송체인 ACE2는 림프구에서 발현되지 않는다. 그러나 Wang et al. (2020)은 T 림프구가 스파이크 단백질에 의해 유발되는 세포내이입을 통해 SARS-CoV보다 SARS-CoV-2에 더 관대할 수 있다고 제안한다. 다른 보고서는 COVID-19 환자의 PBMC에서 아폽토시스, 자가포식 및 p53 경로의 상향조절이 있음을 나타내며(Xiong et al., 2020), 다른 보고에서는 NK 및 CD8+ T 세포가 NKG2A의 과발현을 통해 COVID-19 환자에서 기능적으로 고갈되었다고 보고한다 (Zheng et al., 2020).
전술한 집합적 결과는 COVID-19 질병 초기에 면역 교란이 직접적인 영향과 방관자 영향의 결합된 결과로 시작된다는 것을 나타낸다. COVID-19의 진행성 병원성 변화는 특히 경증 및 중등도의 경우 시기적절한 개입을 통해 되돌릴 수 있지만 이 질병의 복잡성과 불응성은 많은 장애물을 제시한다. SARS-CoV-2 감염의 임상 경과는 개념적으로 바이러스혈증 단계, 급성기(폐렴기) 및 중증 또는 회복기의 세 단계로 나눌 수 있다. 심각한 위험 요인(고령, 주요 동반 질환 등) 없이 면역 기능이 충분한 환자는 CSS, ARDS 또는 PIMS의 과면역/과염증 증상을 나타내지 않고 1단계 또는 2단계에서 바이러스를 억제하는 효과적이고 적절한 면역 반응을 생성할 수 있다. 이와 대조적으로, 면역 기능 장애가 있는 환자는 초기 단계에 실패하고 이환율과 사망률이 높은 중증 또는 중증 유형이 될 위험이 더 높을 수 있다. 결과적으로, COVID-19의 치료는 잠재적으로 임상적 악화의 관찰에 따라 안내되는 1단계와 2단계 사이의 고위험 피험자에 대한 치료를 효과적으로 하기 위해 환자의 세심한 분류 및 병기 결정을 포함해야 한다(예컨대 돌발적인 과염증, 림프구 감소증 역치, 과응고 병태 등을 감지함으로써).
전술한 관점에서, 코로나바이러스에 의해 매개되는 중증 급성 호흡기 증후군(SARS), 사이토카인 폭풍 증후군(CSS) 및 기타 과염증, 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS), 가와사키병, 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 및 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판감소증 및 괴저를 포함하는 이와 관련된 혈관 울혈성 및 혈전성 병태를 포함하는 질병, 및 이러한 병태에 수반되는 광범위한 세포, 조직 및 장기 손상을 비롯한, 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)을 퇴치하기 위한 보다 효과적인 도구 및 방법에 대한 기술 분야의 중대한 요구가 있다..
지난 20년 동안 세 번이나 새로운 병원체로 등장했으며 다시 등장할 가능성이 높은 COVID-19 및 관련 SARS 코로나바이러스에 의해 매개되는 심각한 파괴와 싸우기 위한 관련 요구가 여전히 충족되지 않은 병태로 남아 있다. COVID -19 질병을 치료하고 관리하기 위한 달성되지 않은 목표는 많고 복잡하며 심각한 경우 ARDS/SARS, CSS, PIMS, ESHS, DIC를 포함하여 COVID-19에 의해 매개되는 엄청난 범위의 병원성, 면역학적 및 염증성 손상에 걸쳐 있다.
이러한 요구 사항을 해결하고 수반되는 장애물을 극복하려면 다중 활성 및 다중 표적 약물 및 요법을 포함하는 강력하고 혁신적인 도구의 발견 및 개발이 필요하다. 최소한 손상되지 않고 유익한 숙주 면역 및 염증 능력 및 반응. 또한 이러한 목표는 유사하게 여러 대상에 도달하고 여러(예컨대 항바이러스, 친면역 및 항염증) 효과를 이끌어내는 보완 약물 및 치료 방법의 새로운 조합을 개발함으로써 가장 수익성 있게 충족될 것이다. COVID-19와 그 다양한 병원성 후유증을 퇴치하기 위한 성공적인 접근 방식은 환자별 기준으로 제시된 질병 병인의 개별 지표와 관련하여 치료 형태, 용량 및 양식을 타이밍 및 측정함으로써 개별 환자에게 더욱 최적화될 것이다.
본 발명의 예시적인 구체예의 요약
본 발명은 COVID-19 및 기타 SARS 코로나바이러스에 의해 매개되는 인간의 중증 급성 증후군(SARS)을 비롯한 포유동물 대상체에서 급성 호흡곤란 증후군(ARDS)을 치료 및/또는 예방하기 위한, "TPA" 화합물 및 관련 조성물의 신규하고 강력한 사용 및 방법을 통해 전술한 목적을 달성하고 추가적인 목적 및 이점을 만족시킨다. 본 발명의 관련 측면은 일반적으로 "사이토카인 폭풍 증후군"(CSS)을 비롯한 과면역 및 과염증성 질환 및 비제한적인 예로서, COVID-19 질병과 관련된 염증성 다기관 증후군(PIMS), 가와사키병으로 알려진 관련 아동기 질환, 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 그리고 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및 괴저와 같은 과염증으로 인한 혈관 울혈 및 혈전성 병태를 비롯한 다수의 다른 과염증 병태를 예방 및/또는 치료하기 위한 임상적으로 효과적인 TPA 화합물, 조성물 및 방법을 사용한다.
본 발명의 추가적인 측면은 ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DIC 및 이들 병태에 수반되는 기타 면역 및 염증성 손상 또는 질병 병태에 수반되는 광범위한 세포, 조직 및 기관 손상을 효과적으로 제한하거나 치료하기 위한 TPA 화합물, 조성물 및 방법을 사용한다.
본 발명의 추가 측면은 SARS 코로나바이러스(예를 들어, SARS-CoV, SARS-CoV-2 (COVID-19) 및 중동 호흡기 증후군 코로나바이러스(MERS-CoV))에 의해 유발된 인간의 COVID-19 질병 및 관련된 불리한 병태 및 증상을 치료 및/또는 예방하기 위해 TPA 화합물을 사용하는 조성물 및 방법에 관한 것이다. 예시적 구체예에서, 본 발명은 중증 COVID-19 질병 대상체에서 ARDS/SARS를 예방 및/또는 치료하는 임상적으로 효과적인 TPA 화합물, 조성물 및 방법을 제공한다. 다른 예시적인 구체예에서, 본 발명의 조성물 및 방법은 TPA 화합물 또는 조성물을 사용하여 과면역 및 과염증 병태, 및 CSS, PIMS, ESHS, DIC 및 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및 괴저를 포함하되 이에 국한되지 않는 혈관 울혈 및 혈전 병태와 같은 이러한 병태에 수반될 수 있는 기타 면역 및 염증성 손상 또는 질병 병태를 포함하는 중증 COVID-19 질병에 수반되는 관련 세포, 조직 및 장기 손상 및 기능 장애를 효과적으로 치료 및/또는 예방한다.
본 발명의 방법 및 조성물에서 효과적인 TPA 화합물은 하기 화학식 I에 따른 포르볼(phorbol) 에스테르 및 유도체를 포함한다:
Figure pct00001
화학식 I
식 중 R1 및 R2는 수소; 히드록실;
Figure pct00002
(여기서 알킬기는 1 내지 15개의 탄소 원자를 포함한다);
Figure pct00003
(여기서, 저급 알케닐기는 1 내지 7개의 탄소 원자를 포함한다);
Figure pct00004
Figure pct00005
;
Figure pct00006
일 수 있고,
여기서 R3은 수소 또는
Figure pct00007
일 수 있다.
또 다른 구체예에서, R1 및 R2 중 적어도 하나는 수소 이외의 것이고
R3은 수소 또는
Figure pct00008
및 이의 치환된 유도체이다. 또 다른 구 체예에서, R1 및 R2 중 하나는
Figure pct00009
이고 R1 및 R2 중 다른 하나는
Figure pct00010
이며, 여기서 저급 알킬은 1 내지 7개의 탄소이고, R3은 수소이다.
본원에서 화학식의 알킬, 알케닐, 페닐 및 벤질 기는 할로겐, 바람직하게는 염소, 불소 또는 브롬, 니트로, 아미노 및/또는 유사한 유형의 라디칼로 치환되거나 비치환될 수 있다.
다른 구체예에서, 본 발명은 하기 화학식 II의 예시적인 포르볼 에스테르를 사용한다:
Figure pct00011
화학식 II.
본 발명의 조성물 및 방법 내에서 사용하기 위한 포르볼 에스테르는 화학식 I 또는 화학식 II 내의 모 화합물 구조 뿐만 아니라 상기 화합물의 염, 이성질체, 거울상이성질체, 다형체, 용매화물, 수화물 및/또는 전구약물에 적용된 관능기의 선택된 치환, 결실 또는 부가를 갖는 합리적으로 설계된 화학적 유사체 및 유도체를 포함하는, 화학식 I 또는 화학식 II 화합물의 약학적으로 허용가능한 활성 유사체 및 유도체를 포함하는 것으로 이해될 것이다.
상세 설명
본 발명의 예시적인 구체예
다음 설명은 예시적인 실시예의 설명을 통해 본 발명의 기본적인 수단 및 원리를 설명하기 위해 제공된다. 본 명세서는 본 발명을 제한하지 않는다. 당업자는 여기에 설명된 대상, 재료 및 원리의 변경, 수정, 대체, 개선 및 추가 적용이 본 개시 및 첨부된 청구범위의 발명적 범위 내에 있음을 이해할 것이다.
본 발명은 약제로서 "TPA 화합물"을 제공하고, 새롭고 다양하며 종종 다기능 치료 효과를 매개하기 위한 약물 조합 및 방법에 사용하기 위한 것이다. 본 발명의 TPA 화합물 및 관련 조성물 및 방법은 인간 및 다른 포유동물에서 이상, 과면역 및 과염증 반응에 의해 매개되는 다양한 난치병 병태를 치료하고 예방하는 데 효과적이다. 본 발명의 TPA 화합물, 조성물 및 방법은 바이러스 및 박테리아 감염, 화상, 외상 및 정상적으로는 유익한 면역 및 염증 메커니즘의 유해한 손상, 잘못된 방향 또는 확대를 유발하는 기타 손상에 의해 유발되는 면역 장애 및 과염증 질환 및 병태를 완화시키기 위한, 항바이러스, 항염증 및 면역 조절 활성을 비롯한 하나 이상의 효과적인 활성을 강력하게 나타낸다.
본원에 기술된 TPA 화합물의 신규하고 강력한 용도 중에서, 본 발명은 급성 호흡곤란 증후군(ARDS)으로 알려진 이전에 다루기 힘든 병태를 예방하고 치료하기 위한 효과적인 임상 도구 및 방법을 제공한다. ARDS는 복잡한 병원성 인자 및 메커니즘에 의해 매개되는 복잡한 면역 기능 장애 및 과염증성 질환이다. ARDS는 폐의 화상이나 화학적 손상, 폐의 외상성 손상 또는 바이러스 또는 박테리아 요인에 의한 폐의 과도한 감염으로 인해 발생할 수 있다. ARDS의 통합 특징에는 폐 실질의 심각한 염증, 과도한 수의 파괴적인 호중구 및 대식세포가 폐 조직 및 폐포 공간으로 침윤, 산화 스트레스, 내피 및 상피 장벽 파괴, 폐 상피 내막 손상 및 폐 섬유증이 포함된다. 환자에 대한 이러한 병원성 발달의 영향은 제한되고 힘든 호흡, 저산소혈증 및 궁극적인 폐부전, 장기 섬유증 및 기타 병적 손상, 그리고 심각한 경우 사망으로 이어진다. 본 발명의 관련 측면 내에서, TPA 방법 및 조성물은 중증 급성 호흡기 증후군(SARS)으로 지칭되는 COVID-19 바이러스를 포함하는 SARS 코로나바이러스에 의해 매개되는 ARDS의 형태를 치료하기 위해 사용된다.
본 발명의 다른 측면에서, 효과적인 TPA 화합물, 조성물 및 방법은 일반적으로 "사이토카인 폭풍 증후군"(CSS), COVID-19 질병과 관련된 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS), 가와사키병, 일반적으로 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 및 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판감소증 및 괴저를 포함하는 과염증에 의해 유발되는 혈관 울혈 및 혈전 병태를 포함하는 과염증 병태를 예방하고 치료하는 데 사용된다.
본 발명의 또 다른 측면은 TPA 화합물 및 방법을 사용하여 코로나바이러스, 특히 SARS 코로나바이러스에 의한 생산적 감염을 직접 예방하거나 억제한다. 본 발명의 TPA 화합물은 COVID-19 질병 피험자에서 항-SARS-CoV-2 면역 조절, 면역 강화 및/또는 항염 반응을 이끌어내는 TPA의 능력에 의해 입증되는 바와 같이, SARS-CoV-2 감염 및 질병을 치료하고 예방하는데 있어 인간 피험자에서 효과적이다. 본원에 기재된 TPA 화합물의 다중 항바이러스 활성은 상기도 및 하기도의 바이러스 부하를 감소시킴으로써; 비호흡기, ACE-2 양성 세포 및 조직에서 바이러스 역가를 저하시킴으로써; 바이러스 부착 및 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직으로의 진입을 방지 또는 감소시킴으로써; 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직에서의 바이러스 복제를 방지 또는 감소시킴으로써; 및/또는 감염된 대상의 상기도로부터의 바이러스 발산을 방지하거나 감소시킴으로써 SARS-CoV-2 감염을 방지 또는 감소시키는데 효과적이다. 이러한 항바이러스 효과는 직접적이거나 간접적일 수 있지만 항바이러스 결과는 치료 대상에서 바이러스 감염, 복제, 병원성, 전염성 및 관련 COVID-19 질병 중증도를 예방하거나 제한하는 데 특이적이다.
본 발명의 보다 상세한 측면은 COVID-19 질병 및/또는 SARS 코로나바이러스(SARS-CoV, SARS-CoV, SARS-CoV, CoV-2(COVID-19) 또는 중동 호흡기 증후군 코로나바이러스(MERS-CoV))에 의해 일어나는 관련된 유해 병태 및 증상을 치료 및/또는 예방하기 위해 TPA 화합물을 사용하는 조성물 및 방법에 관한다.
예시적인 구체예에서, 본 발명은 "항바이러스" 약물로서 기능하는 임상적으로 유효한 TPA 화합물을 제공한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 항바이러스 활성은 예를 들어 표적 세포, 조직 또는 구획에서 바이러스 부하/역가를 감소시키거나 바이러스 기능을 손상시키거나 달리 제한하는 것을 포함한다(예를 들어, 바이러스 부착, 세포로의 바이러스 진입, 바이러스 복제, 바이러스 흘림, 숙주 항바이러스 메카니즘에 대한 바이러스 방어, 숙주 세포 완전성에 대한 바이러스의 병원성 영향, 생리학, 유전자 발현, 면역 활성, 염증 활성, 수명 주기/장수 등). 이들 및 관련 항바이러스 방법 및 조성물은 위험에 처한 바이러스 노출 피험자의 COVID-19 감염 및/또는 수반되는 질병 증상을 예방 및/또는 예방한다. 다른 예시적인 구체예에서, 본 발명의 조성물 및 방법은 TPA 화합물 또는 조성물을 사용하여 과면역 및 과염증 병태, 및 CSS, PIMS, ESHS, DIC 및 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및 괴저를 포함하되 이에 국한되지 않는 혈관 울혈 및 혈전 병태와 같은 이러한 병태에 수반될 수 있는 기타 면역 및 염증성 손상 또는 질병 병태를 포함하는 중증 COVID-19 질병에 수반되는 관련 세포, 조직 및 장기 손상 및 기능 장애를 효과적으로 치료 및/또는 예방한다.
특정 구체예에서 본 발명은 하나 이상의 TPA 또는 TPA-유사 화합물, 모(parent) TPA 화합물(12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트(TPA); 포르볼-12-미리스테이트-13-아세테이트(PMA)로도 알려짐)), 또는 이 모 TPA 화합물과 구조적으로 관련된 기능적 유사체, 유도체, 염 또는 기타 유도체 형태를 이용한다. 본 발명에서 사용되는 TPA 화합물은 다른 임상적- 관련 활동 중에서도 특히, 항바이러스, 항-ARD, 항-CSS, 항 염증, 항세포변성, 면역 및 아폽토시스 조절 효과를 매개하기 위해 대상체에게 투여 되는 조성물 및 방법에 유용하다. 이러한 활동은 다양한 ARDS 및 SARS 바이러스(예컨대 COVID-19) 질병 병태, 증상 및 수반되는 면역학적, 세포, 조직 및 장기 손상 및 기능 장애의 예방 및/또는 치료를 중재하기 위해 별개의 질병 상황에서 개별적으로 또는 협력적으로 효과적이다.
본 발명 내에서 사용하기 위한 TPA 화합물은 본원에 기재된 바와 같은 표적 바이러스 감염, 질병, 병태 또는 증상을 예방 및/또는 치료하기 위해 효과적으로 투여되는 하나 이상의 화학식 I 및/또는 화학식 II의 포르볼 에스테르 화합물(들)을 포함한다. 예시적인 구체예에서, 모 또는 원형 TPA 화합물인 포르볼 12-미리스테이트-13-아세테이트("PMA", 대안적으로 본원에서는 12-O-테트라데카노일-포르볼-13-아세테이트 "TPA"로 지칭됨))가 예시적인 목적을 위해 본 발명의 의약 조성물 및 방법에서 유효 제제로서 임상적으로 이용된다. 그러나, 본 개시내용은 하기 화학식 I 및 화학식 II 화합물에 대해 기재된 구조적 기초에 따른 화합물의 천연 또는 합성 화합물, 착물, 유사체, 유도체, 염, 용매화물, 이성질체, 거울상이성질체, 다형체 및 전구약물의 형태로 많은 추가의 제약상 허용되는 포르볼 에스테르 화합물을 제공한다는 것을 인식할 것이다.
포르볼(Phorbol)은 디테르펜의 티글리안(tigliane) 계열의 천연 식물 유래 다환식 알코올이다. 1934년에 Croton tiglium 의 종자에서 추출한 크로톤 오일의 가수분해 생성물로 처음 분리되었으며 대부분의 극성 유기 용매와 물에 잘 녹는다. 포르볼의 에스테르는 하기 화학식 I의 일반 구조를 갖는다:
Figure pct00012
화학식 I
식 중 R1 및 R2는 수소; 히드록실;
Figure pct00013
(여기서 알킬기는 1 내지 15개의 탄소 원자를 포함한다),
Figure pct00014
Figure pct00015
및 이의 치환된 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되고,
R3은 수소,
Figure pct00016
또는 이의 치환된 유도체일 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "저급 알킬" 또는 "저급 알케닐"은 1-7개의 탄소 원자를 함유하는 모이어티를 의미한다. 화학식 I의 화합물에서, 알킬 또는 알케닐 기는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 일부 구체예에서, R1 또는 R2 중 하나 또는 둘 모두는 장쇄 탄소 모이어티이다(즉, 화학식 I은 데카노에이트 또는 미리스테이트임).
본원에서 화학식의 알킬, 알케닐, 페닐 및 벤질 기는 비치환되거나, 예를 들어 할로겐(예컨대 염소, 불소 또는 브롬), 니트로, 아미노 및 기타 관능기로 치환될 수 있다.
크로톤 티글리움과 같은 허브 공급원으로부터의 임의의 제제 또는 추출물을 포함하는 유기 및 합성 형태의 포르볼 에스테르는 본원의 구체예 내에서 사용하기 위한 포르볼 에스테르(또는 포르볼 에스테르 유사체, 관련 화합물 및/또는 유도체)를 포함하는 유용한 조성물로서 고려된다. 본 발명 내에서 사용하기 위한 유용한 포르볼 에스테르 및/또는 관련 화합물은 일반적으로 화학식 I에 따른 구조를 가질 것이지만, 이러한 화합물의 기능적으로 동등한 유사체, 착물, 접합체 및 유도체역시도 본 기술 분야의 숙련가라면 발명의 범위에 속하는 것으로 이해할 것이다.
보다 상세한 구체예에서, COVID-19 감염 또는 질병, 일반적으로 ARDS, SARS, CSS, PIMS 및 기타 표적 감염, 질병, 병태 및 여기에 설명된 증상을 치료 및/또는 예방하기 위한 유용한 후보 화합물을 제공하기 위해 상기 화학식 I에 따른 예시적인 구조적 변형이 선택될 것이다. 본원에서 고려되는 화학식 I 화합물의 다양한 변형 중에서, 예시적인 유사체 및 유도체가 일상적으로 구성되고 시험될 수 있으며 여기서; R1 및 R2 중 적어도 하나는 수소가 아니며 R3은 수소,
Figure pct00017
및 이의 치환된 유도체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 또 다른 구체예에서, R1 또는 R2 중 하나는
Figure pct00018
이고, R1 또는 R2 중 다른 하나는
Figure pct00019
이며, R3은 수소이다.
별법으로, R1 및 R2가 수소; 히드록실;
Figure pct00020
(여기서 알킬기는 1 내지 15개의 탄소 원자를 포함함);
Figure pct00021
(여기서 알케닐기는 1 내지 7개의 탄소를 포함함);
Figure pct00022
;
Figure pct00023
;
Figure pct00024
및 이의 치환된 유도체일 수 있고, R3는 수소 또는
Figure pct00025
일 수 있는 화학식 II에 따라 합리적으로 설계된 특정 유사체 및 유도체를 구성할 수 있다.
여기에 예시된 본 발명의 다른 예시적인 임상 조성물 및 방법은 하기 화학식 II에 따른 포르볼 12-미리스테이트-13-아세테이트(TPA),
Figure pct00026
화학식 II
제약상 허용되는 이의 활성 염, 활성 이성질체, 거울상이성질체, 다형체, 글리코실화된 유도체, 용매화물, 수화물 및/또는 전구약물을 포함한다 .
조성물 내에서 사용하기 위한 추가의 예시적인 포르볼 에스테르로의 비제한적인 예로는 포르볼 13-부티레이트; 포르볼 12-데카노에이트; 포르볼 13-데카노에이트; 포르볼 12,13-디아세테이트; 포르볼 13,20-디아세테이트; 포르볼 12,13-디벤조에이트; 포르볼 12,13-디부티레이트; 포르볼 12,13-디데카노에이트; 포르볼 12,13-디헥사노에이트; 포르볼 12,13-디프로피오네이트; 포르볼 12-미리스테이트; 포르볼 13-미리스테이트; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트; 포르볼 12-아세테이트; 및 포르볼 13-아세테이트를 들 수 있다.
본 발명의 항바이러스, 항-ARDS, 항-CSS 및 기타 주요 치료 조성물 및 방법에 사용하기 위해, 용해도, 친유성, 생체이용률, 생체내 반감기, 최종 효소에 대한 저항성 또는 감수성, 특정 전달 형태, 방식 및 전달 대상/구획에 대한 제형에 대한 순응성, 저장 수명 안정성 등과 같은 관련 약리학적 특성을 개선하기 위해 합리적 설계 화학에 따라 구현되는 구조적 변형에 의해 추가의 TPA 화합물을 제조할 수 있다. 본 발명의 제형 및 방법 내의 부가적인 유용한 포르볼 에스테르 및 관련 화합물 및 유도체의 비제한적인 예로는, 상기 화합물의 다른 약학적으로 허용가능한 활성 염, 뿐만 아니라 상기 화합물의 활성 이성질체, 거울상이성질체, 다형체, 글리코실화 유도체, 용매화물, 수화물 및/또는 전구약물을 들 수 있다. 본 발명의 조성물 및 방법에 사용하기 위한 포르볼 에스테르의 추가적인 예시 형태의 비제한적인 예로는, 포르볼 13-부티레이트; 포르볼 12-데카노에이트; 포르볼 13-데카노에이트; 포르볼 12,13- 디아세테이트; 포르볼 13,20-디아세테이트; 포르볼 12,13-디벤조에이트; 포르볼 12,13- 디부티레이트; 포르볼 12,13-디데카노에이트; 포르볼 12,13-디헥사노에이트; 포르볼 12,13- 디프로피오네이트; 포르볼 12-미리스테이트; 포르볼 13-미리스테이트; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트; 12- 데옥시포르볼 13-이소부티레이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트; 12- 데옥시포르볼 13-페닐아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트; 포르볼 12-아세테이트; 및 포르볼 13-아세테이트를 들 수 있다. 모 포르볼 에스테르 화합물의 합리적 설계 화학적 변형을 위한 이러한 다양한 표적의 구조예를 표 1에 나타내었다.
표 1 예시적인 포르볼 에스테르
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항바이러스 조성물 및 방법
본 발명은 SARS-CoV-2 감염 및 수반되는 COVID-19 질병의 치료 및 예방을 포함하여 바이러스 감염 및 관련 질병의 치료 및 예방을 위한 새로운 도구 및 방법을 제공한다. 예시적인 구체예에서, SARS-CoV-2에 감염될 위험이 있는 피험자 및 바이러스 양성 반응을 보이는 감염된 피험자는 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스 반응을 유도하고/유도하거나 및/또는 COVID-19 질병의 하나 이상의 임상 증상을 예방하거나 줄이는데 충분한 항바이러스 유효량의 TPA 화합물을 투여받는다. 특정 구체예에서, TPA 화합물은 1) 대상체의 상기도 또는 하기도 세포, 조직 또는 샘플의 바이러스 부하/역가; 2) 피험자의 비호흡기, ACE-2 양성 세포, 조직 또는 샘플, 또는 피험자의 혈장 내 바이러스 부하/역가; 3) 바이러스 부착 및/또는 폐 또는 기타 조직/세포로의 침투; 4) 대상체의 폐 또는 다른 ACE-2 양성 세포, 조직 또는 장기에서의 바이러스 복제; 및/또는 5) 감염된 대상체의 상기도 조직 또는 샘플로부터의 바이러스 발산(shedding)(여기서 처리된 대상체에서 각 지표/값을 측정 및 결정하고, 이를, 유사한, 위약-처리된 대조군 대상체에서 측정 및 결정된 동일한 지표/값과 비교한다)로부터 선택된, 바이러스 감염 위중도의 하나 이상의 지표를 저감 또는 제거하는데 효과적인 양 및 용량 형태로 투여된다.
대상체의 바이러스 "부하(load)"를 결정하기 위해 처리된 대상체와 대조군 대상체의 임상 평가를 통해 TPA의 항바이러스 효능을 입증하는 것은 SARS-CoV-2 비리온의 수 또는 평가된 "역가(titer)", 테스트 샘플 및 대조군 생물학적 샘플(예컨대 비인두 면봉 샘플)의 DNA 또는 다른 정량적 척도를 정량적으로 비교한다. 이러한 목적을 위해 다양한 분석 방법 및 재료가 출판되고 널리 알려져 있으며 일상적으로 구현된다. 본원의 교시에 따르면, 본 발명의 항바이러스성 TPA 조성물 및 방법으로 치료된 환자는 유사하게 SARS-CoV-2에 감염되었거나 위험에 처한 위약 치료 대조군과 비교하여 검출 가능한 바이러스 부하/역가의 적어도 20% 감소, 종종 25-50% 감소, 많은 경우에 75-95% 이상, 최대 100% 제거를 나타낼 것이다. 유사한 임상 효능이 다른 SARS 코로나바이러스(SARS-CoV 및 MERS) 및 사람 대상에서 ARDS, CSS 또는 PIMS를 유발하거나 이에 기여하는 기타 바이러스 및 병원체에 대해서도 마찬가지로 제공된다.
SARS-CoV-2-양성 환자의 항바이러스 치료에 관한 본 발명의 관련 조성물 및 방법, 치료용 TPA 조성물은 치료 후 1-2주 이내에 적어도 상기도로부터 바이러스를 제거하거나 제거할 수 있다. 특히, TPA 치료 전에 SARS-CoV-2 감염에 대해 양성으로 선별된 피험자의 비인두 면봉 샘플에서 SARS-CoV-2 수준의 DNA 또는 기타 정량적 척도는 TPA 치료 후 2주 이내에 100% 감소(상기도에서 검출가능한 SARS-CoV-2 바이러스의 완전한 소거에 해당하며, 비전염 병태를 가리킴), TPA 치료 대상자의 최소 25-50%, 50-75%, 최대 90% 또는 그 이상의 감소를 나타낼 것이다.
관련 구체예에서, SARS-CoV-2에 대해 양성 반응을 보인 환자 또는 COVID-19 질환에 대해 알려진 상승된 위험 인자를 나타내는 환자는 그 대상체에서 1) 2일 이상 지속되는 발열; 2) 폐울혈, 조임, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증을 포함하는 심각한 하부 호흡기 증상; 및/또는 3) 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 사이토카인 폭풍 증후군(CSS)의 임의의 증상; 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 및/또는 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 및/또는 또는 혈소판 감소증으로부터 선택되는, 중증 COVID-19 질환의 하나 이상의 지표(들)이 발달되기 전에(또는 가능한 그러한 발달 직후), 항-COVID-19 TPA 치료가 시작되도록 주의 깊게 모니터링된다(예컨대 사이토카인에 대한 혈액 검사, 폐 기능 및 저산소혈증 검사, 폐 병원성 병변에 대한 스캔, 등).
이론에 얽매이지 않고, 본 발명의 TPA 화합물은 치료된 대상체에서 예방적(즉, 실제 감염의 발생률 또는 정도를 예방하거나 감소시키기 위한) 및 치료적(바이러스 부하를 감소 또는 제거하여 질병 중증도를 낮추기 위한) 효과와 반응을 직접 및 간접적으로 매개하는 데 효과적인 다수의 항바이러스 활성을 치료된 대상체에서 발휘한다.
TPA 화합물의 특정 항바이러스 효과는 단백질 키나아제와의 면역 및 항염증 상호작용을 포함한다. 단백질 키나아제는 바이러스 및 기타 병원체에 대한 면역 및 염증 반응을 "조절"하는 생물학적 신호 반응 경로의 주요 구성 요소이다. 본 발명의 한 측면에서, TPA 화합물과 면역 조절 및 염증에 관여하는 하나 이상의 단백질 키나아제 사이의 상호작용은 SARS-CoV-2 감염을 예방 및 치료하기 위해 강력한 항바이러스 효과를 매개한다.
단백질 키나아제 C(PKC)는 인간의 면역 기능과 염증을 조절하는 중요한 키나아제이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "조절하다"라 함은 특정 면역 또는 염증 신호 또는 트리거(예를 들어, 사이토카인 또는 화학유인 물질 신호), 세포, 메커니즘 또는 경로의 활성화, 억제 및/또는 선택에 의해 유익하게 제어하는 것을 의미한다. PKC와 관련하여, 본 발명의 TPA 화합물은 PKC에 결합하고 이를 활성화하며, PKC는 SARS-CoV-2 환자의 결합 및 활성화가 전면역 신호전달 및 면역 이펙터 기능의 다운스트림 활성화에 관여하는 인터페론 자극 유전자(ISG)의 전사 활성화를 매개한다. 예시적인 구체예에서, TPA-활성화된 PKC는 세포 대사를 늦추고 적응 면역을 활성화하는 것을 포함하여 바이러스 복제 및 확산을 방해할 수 있는 ISG 인코딩 산물 을 자극한다. TPA에 의해 활성화될 수 있는 다른 ISG에는 세포를 병원체에 더욱 민감하게 만드는 패턴 인식 수용체(PRR), 막 유동성 및 투과성을 감소시키는 단백질(막 융합을 억제하고 바이러스 진입 및 배출을 손상), 바이러스 세포 진입, 복제 및 방출/발산 주기에 관련된 특정 표적을 억제하는 기타 항바이러스 인자가 포함된다(Schneider et al., 2014; Totura et al.)
인간 인터페론은 면역 체계의 활동을 조절하는 데 도움이 되는 많은 단백질 그룹으로 구성된다. 일반적으로 유형 인터페론(IFN-1)은 강력한 항바이러스 효과를 제공한다. COVID-19 감염에서 IFN-1은 바이러스 감염에 대한 초기 반응으로 면역 세포, 상피 세포 및 내피 세포에 의해 생성된다. COVID-19 치료를 위한 1형 인터페론(IFN-I)의 가능한 사용은 최근 Sallard et al(2020)에 의해 조사되었다. 패턴 인식 수용체(PRR)에 의한 바이러스 성분의 인식 시, IFN-1은 대부분의 바이러스 감염 동안 생성되는 최초의 면역 이펙터 분자 중 하나이다. IFN-1은 다양한 세포 유형의 원형질막에 존재하는 IFNAR 수용체에 의해 인식된다. IFNAR과 결합하는 IFN-1은 STAT1 및 STAT2와 같은 전사 인자의 인산화를 유도하고 인터페론 자극 유전자(ISG)를 활성화시키는 핵으로의 위치를 지시한다.
ISG는 염증, 사이토카인 신호전달 및 면역 조절을 비롯한 다양한 면역 반응을 조절하는 중요한 분자 배열을 암호화한다. 특정 ISG는 다양한 메커니즘을 통해 바이러스 복제 및 확산을 방해한다(Schneider et al., 2014; Totura et al.). 동시에 IFN-1 활성화는 다운스트림, 친염증성 사이토카인을 자극하여 사이토카인 폭풍 증후군(CSS)을 유도하거나 이에 기여하는 IFN-s와 같은 가능성에 대한 우려를 제기한다.
본 발명은 (PKC의 TPA-활성화를 통해) IFN-1 활성화를 조절하여 안전하고 개별적인 항바이러스 효과를 생성한다. 특히, TPA 조성물 및 방법은 염증을 증가시키거나 다른 유익한 면역 기능을 억제하지 않으면서 IFN에 의해 매개되는 항바이러스 보호를 향상시킨다.
IFN-I 치료는 MERS-CoV 및 SARS-CoV(Stockman et al., 2006에서 검토됨) 단독 및 다음과의 조합, 즉 로피나비르/리토나비르과의 조합(Chan et al., 2015; Sheahan et al., 2020), 리바비린과의 조합(Chen et al., 2004; Morgenstern et al., 2005; Omrani et al., 2014), 렘데시비르, 코르티코스테로이드와의 조합(Loutfy et al., 2003) 또는 IFNγ와의 조합(Sainz et al., 2004; Scagnolari et al., 2004)에 대해 조사되었다. IFNα 및 β는 보고된 바에 따르면 시험관 내 및 특정 동물 모델에서 항바이러스 활성을 보였지만(Chan et al., 2015), 인간에서 질병을 유의하게 개선하지 못하였다(Stockman et al., 2006). MERS-CoV에 대한 IFNβ와 로피나비르/리토나비르의 조합은 폐 기능을 개선했지만 바이러스 복제 또는 폐 병인을 유의하게 감소시키지는 못하였다(Sheahan et al., 2020). IFNα2a와 리바비린의 조합은 궁극적인 사망률을 지연시켰지만 유의하게 감소시키지는 못하였다(Omrani et al., 2014). IFNα2b와 리바비린의 조합은 붉은털원숭이에서 긍정적인 결과를 나타냈지만(Falzarano et al., 2013), 인간에서는 결정적이지 않았다(Arabi et al., 2017).
이러한 이전 연구에서 IFN-I 치료로 실질적인 질병 개선을 입증하지 못한 것은 MERS-CoV 및 SARS-CoV에 의한 IFN 신호전달 경로의 바이러스 억제, 연구에 사용된 제한된 수의 피험자 또는 어려움 때문일 수 있다. 다른 약물과 병용할 때 IFN-I의 개별 효과를 분별한다(Sallard et al., 2020). IFN이 동반 질환이 없는 환자에게 더 효과적일 수도 있다(Al-Tawfiq et al., 2014; Shalhoub et al., 2015). IFN 하위 유형의 다양성은 이러한 연구 간의 불일치에 대한 또 다른 설명일 수 있다. IFNβ가 IFNα보다 더 강력한 코로나바이러스 억제제임이 반복적으로 밝혀졌다(Scagnolari et al., 2004; Stockman et al., 2006). 이 하위 유형의 우월성은 폐에서 IFNβ1의 보호 활성과 관련이 있을 수 있으며, 여기서 IFNβ1은 폐 내피 세포에서 분화 클러스터 73(CD73)을 상향조절하여 항염증성 아데노신의 분비를 촉진하고 내피 장벽 기능의 유지를 지원한다. 이러한 유익한 효과는 IFNβ1a로 치료받은 ARDS 환자에서 관찰된 혈관 누출 감소와 관련이 있지만(Bellingan et al., 2014), 이 효과만으로는 ARDS 사망률을 감소시키기에는 불충분하였다(Ranieri et al., 2020).
최근 연구는 SARS 코로나바이러스 질병 발생 중 IFN-I 투여 시기가 치료 결과를 결정하는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 시사한다. 한 연구에서 감염 직후에 IFN-I를 투여하면 긍정적인 효과가 관찰되었지만 IFN-I를 나중에 투여하면 바이러스 복제를 억제하지 못하고 부정적인 부작용을 유발하였다(Channappanavar et al., 2019).
본 발명자들에 의한 파일럿 연구는 TPA의 초기 투여가 SARS-CoV-2에 대해 임상적으로 유익한 항바이러스 효과를 가져올 것임을 나타낸다. 일반적으로 TPA 치료는 환자가 양성 진단을 받고 치료를 의뢰하는 즉시 시작된다. 그러나 진단 및 의뢰가 매우 일찍 발생하는 경우 상당한 증상이 나타날 때까지 치료를 보류하는 것이 바람직할 수 있다. 예를 들어 환자가 상기도에서 바이러스에 대해 양성이지만 심각한 감염 징후(예컨대 발열, 호흡곤란/저산소혈증)가 없는 경우 이러한 징후가 처음 나타날 때까지 치료를 연기할 수 있다(보통 증상 시작부터 7~ 8일). 이러한 지연은 면역 기계, 특히 림프구 비축량을 너무 일찍 소진하지 않으면서 질병 확대에 대응하기 위해 최적의 치료 시기를 맞추기 위해 유익할 수 있다.
PKC 및 IFN-1을 자극하기 위한 본원에 기술된 TPA 화합물의 사용은 이러한 메커니즘이 SARS 바이러스 반면역 전략을 회피해야 한다는 미덕에 의해 특히 유망하다. SARS-CoV는 숙주의 특정 면역 신호 경로를 방해할 수 있는 것으로 보고되었다. 예를 들어, SARS-CoV의 Orf6 단백질은 카리오페린 수송을 방해하고 결과적으로 STAT1을 포함한 전사 인자의 핵으로의 유입을 억제하여 숙주 STAT-1 매개 인터페론 반응을 손상시킨다. 유사하게, SARS-CoV의 Orf3b 단백질은 IFN 활성화에 관여하는 또 다른 인자인 IRF3의 인산화를 억제한다(Frieman et al., 2007; Kopecky-Bromberg et al., 2007). 그러나 SARS-CoV-2의 Orf6 및 Orf3b 단백질은 절단(truncated)되는데, 이는 SARS-CoV-2가 시험관 내에서 IFNα에 상당한 민감성을 보이는 이유를 설명할 수 있다(Lokugamage et al., 2020). SARS-CoV-2는 SARS-CoV보다 IFN-I에 훨씬 더 민감하여 IFN-I 치료가 COVID-19 질병에 더 효과적일 수 있음을 시사한다. 이 가설을 뒷받침하는 것으로, IFNα2b 스프레이가 SARS-CoV-2의 감염률을 감소시킬 수 있다고 보고되었다 (Shen and Yang, 2020). SARS-CoV-2에 대한 IFN-I 예방에 대한 이 보고서는 SARS-CoV-2 바이러스에 대한 인터페론 전처리의 체외 효능에 대해 보고된 데이터와 일치한다(Lokugamage et al., 2020).
SARS-CoV-2에 대한 조기 TPA 치료에 찬성하면서 우리는 COVID-19의 병리학이 심각한 경우 광범위한 폐 병변을 포함한다는 점을 강조한다. 일부 연구자들은 이러한 병변을 IFN 약물 요법의 과도한 사용(예컨대 다발성 경화증 환자에서)과 관련된 특정 "인터페론 병증(interferonopathies)"과 비교하였다. 또한 SARS-CoV-2 바이러스가 보다 일반적인 "사이토카인 폭풍" 반응 내에서 과도한 IFN 반응을 유도하여 심한 경우 CSS 및 폐 손상에 기여할 수 있다(Siddiqi and Mehra, 2020; Zhang et al. , 2020). 따라서, 본 발명에 따른 TPA 치료는 사이토카인을 CSS, ARDS 및 PIMS와 관련된 수준으로 과도하게(과염증성) 자극하지 않고 IFN-1 및 ISG를 활성화시키는 것으로 여겨지지만, TPA 치료는 종종 SARS-CoV-2 감염의 초기 단계로 향할 것이다. 일반적으로 TPA 치료는 진단 후 7-10일 이내에 시작된다. ARDS 및 CSS 위험이 증가하거나 증상이 관찰되는 특정한 경우에, TPA 치료는 동시에 또는 그 직후(예를 들어, 친염증성 사이토카인 수준이 상당히 상승한 시점 및/또는 상당한 ARDS가 관찰되는 시점)에 종료될 수 있다. 본 발명의 다른 측면에서, TPA 화합물은 SARS-CoV-2 감염의 제1 단계 동안 선택된 시점(예를 들어, 상기도 증상이 나타난 후 3-7일, 양성 비인두 SARSCoV-2에 의해 확인됨)에 투여되며, 그 후 1~5일 동안 유지된 다음, 증상이 시작된 후 10~12일(또는 친염증성 사이토카인 수치가 상당히 상승할 때 및/또는 실질적인 ARDS 증상이 관찰될 때 시작)에 항인터페론 약물과 병용하여 사용된다.
본 발명의 신규한 TPA 조성물 및 방법은 또한 SARS-CoV-2 및 다른 SARS 코로나바이러스에 의해 매개되는 중대한 림프구 감소증을 감소시키기 위해 림프구의 전면역 활성화 및 구제를 통해 간접적인 항바이러스 효과를 매개한다. 아마도 COVID-19 질병 피험자에게서 관찰된 가장 해로운 영향은 T 세포, B 세포 및 NK 세포를 포함한 림프구의 급격한 충돌일 것이다. 가장 중증 COVID-19 환자의 경우 NK 세포가 극히 적거나 없으며 기억 보조 T 세포와 조절 T 세포가 크게 감소한다(Hui et al., 2019). 이는 치명적인 COVID-19 사례에서 이차 림프 조직이 파괴되고 비장 위축이 관찰된다는 부검 증거와 관련이 있다. 이러한 발달과 함께 중증 COVID-19 환자는 비장에서 출혈성 괴사, 대식세포 증식 및 대식세포 식균작용의 증거와 함께 심각한 림프구 감소를 보인다. 중증 COVID-19 환자의 폐에서도 유사한 병원성 변화가 관찰되며, 극도로 적은 수의 림프구, 눈에 띄는 대식세포 및 호중구 침윤, 상피 및 내피 장벽 파괴, 폐 실질의 미만성 폐포 손상(DAD)으로 표시된 ARDS를 나타낸다. 이는 PCR 검사가 혈액이나 인후 면봉에서 음성인 경우에도 폐 상피에서 바이러스 봉입체가 여전히 검출되는 동안 발생한다(Zu et al., 2020; De Wit et al., 2016; Chan et al., 2015B). 이러한 병원성 징후는 마찬가지로 "사이토카인 폭풍 증후군"(CSS)으로 알려진 병태를 집합적으로 나타내는 상승된 사이토카인 수치와 상관관계가 있다.
대식세포 및 호중구의 과염증 활성을 최소화하는 것 외에도, 본 발명의 TPA 조성물 및 방법은 림프구의 보호(수명 연장)를 매개하고 또한 림프구 증식 및 분화를 직접 자극한다. 우리의 파일럿 연구는 말초 혈액 림프구(주로 T 세포)에 대한 TPA의 직접적이고 임상적으로 효과적인 분열 촉진 효과를 보여준다. SARS-CoV-2가 T, B 및 NK 세포를 압도하고 고갈시키는 것으로 나타나므로 이러한 증거는 TPA 화합물 및 방법이 COVID-19 환자의 림프구 감소증을 효과적으로 감소시키거나 예방할 것임을 가리킨다. 이 활동은 림프구 수를 보호하고 확장하여 강력한 항바이러스 효과를 중재한다.
전술한 관점에서, 본 발명은 SARS-CoV-2 및 기타 바이러스에 걸릴 위험이 있거나 이를 나타내는 대상에서 임상적 항바이러스 이점을 매개하는 신규한 TPA 조성물 및 방법을 제공한다. 대상 조성물 및 방법은 상기도 또는 하기도에서 바이러스 부하/역가를 감소시킴으로써; 비호흡기 조직 및 장기(예를 들어, 여러 장기에 영향을 미치는 CSS 또는 PIMS를 나타내는 대상체에서)에서 바이러스 부하/역가 감소를 감소시킴으로써; 바이러스 부착 및 세포로의 유입을 감소 또는 방지시킴으로써; 감염된 세포에서 바이러스 복제를 손상시킴으로써, 및/또는 5) 호흡기로부터의 바이러스 발산을 억제 또는 차단시킴으로써, 전체 바이러스 수를 실질적으로 감소시키고 치료 대상체에서 부수적인 부작용을 감소시킬 것다
항-ARDS 조성물 및 방법
본 발명의 또 다른 측면에서, 인간 SARS(hSARS) 코로나바이러스에 의해 매개되는 중증 급성 호흡기 증후군(SARS)을 나타내는 대상체를 포함하는 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)에 걸린 대상체에서 항-ARDS 반응을 유도하기 위해 포유류 대상체에게 항-ARDS 유효량의 TPA 화합물을 투여한다. 예시적인 구체예에서, TPA 항-ARDS 치료에 순응하는 피험자는 양성 SARS-CoV-2 비인두 또는 활동성 SARS-CoV-2 감염을 나타내는 다른 테스트 결과를 나타낼 것이며, 치료는 초기 COVID-19 질병 증상(기침, 재채기, 인후통 또는 가려움증 및/또는 열과 같은 상기도 증상)이 나타난지 1-8일 후, 심각한 하기도 COVID-19 질병이 발생하기 전에 시작될 것이다. 대상 조성물 및 방법은 치료군 대상체와 대조군 대상체에서: 1) 호흡곤란(숨가쁨); 2) 저산소혈증; 3) 폐 실질에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인 또는 기타 염증 인자의 상승된 수준(폐 실질은 폐포, 폐포관 및 호흡 세기관지 조직 중 기체 전달에 관여하는 부분이다) 또는; 2) 폐 실질 및/또는 폐포 공기공간에서 단핵구, 대식세포 및/또는 호중구의 침윤 증가 및/또는 상승된 수준(들); 3) 폐 내피 및/또는 상피 장벽의 파괴; 4) 폐에서 면역원성 또는 과염증성 질환 손상의 병원성 섬유증 및/또는 기타 조직병리학적 징후; 5) 피험자로부터의 폐 조직 또는 기타 조직, 장기 또는 생물학적 샘플에서 산화 스트레스의 상승된 지표(여기서 처리된 대상체에서 각 지표/값을 측정 및 결정하고, 이를, 유사한, 위약-처리된 대조군 대상체에서 측정 및 결정된 동일한 지표/값과 비교한다)로부터 선택된, ARDS의 하나 이상의 지표를 감소시키거나 제거하는 데 효과적이다.
본 발명의 특정 구체예에서, 본원의 TPA 화합물 및 방법은 활성화된 B 세포(NFkB)의 핵 인자 카파-경쇄-인핸서의 활성화를 통해 COVID-19, ARDS 및 CSS에 대한 항바이러스 및 기타 예방 및 치료 활성을 발휘한다. NFkB는 DNA 전사를 조절하는 단백질 복합체이며 면역 및 염증 기능의 중요한 조절자이다. NFkB 경로는 스트레스 반응, 염증, 적응 및 선천 면역과 같은 중요한 세포 과정을 중재한다. NFkB에 의한 비정상적인 전사 조절은 암 및 자가면역 질환과 관련되어 있다. 이제 NFkB의 적절한 조절이 중요한 면역 및 염증 효과 세포의 균형 잡힌 활성화, 세포 결정(수용체 발현 및 기능, 세포 수명 및 아폽토시스를 비롯한, 면역 세포 분화의 시기 및 과정, 세포 운명, 세포 프로그래밍, 신호-반응 능력)을 결정함으로써, 전체적으로 건강하고 균형 잡힌 면역 및 염증 기능에 필수적임이 분명하다.
잠재적인, 비활성 NFkB 이량체는 대부분의 세포의 세포질에 항상 존재한다. 이를 통해 NFkB는 바이러스 및 기타 자극에 반응하는 주요 전사 인자이자 인플라마좀 캐스케이드의 핵심 구성 요소가 될 수 있다(Oeckinghaus et al., 2009). 일단 활성화되면 NFkB는 IL-1 베타 및 NLRP3 발현을 유도하여 활성화를 위해 NLRP3-인플라마좀을 프라이밍한다. NFkB 활성화를 통한 신호 어댑터 p62/SQSTM1은 Ras 유도 염증 및 종양 형성의 양성 매개체로 확인되어(Duran et al., 2008) 암 치료의 흥미로운 표적이 되었다(Zhang et al., 2016). 연구자들은 이제 NFkB가 p62/SQSTM1 매개 mitophagy 과정을 통해 과도한 염증을 방지한다는 사실을 발견하였다. 구체적으로, NFkB는 손상된 미토콘드리아의 p62/SQSTM1 매개 제거를 촉진하여 대식세포에서 자체 염증 촉진 활동을 제한한다(Zhong et al., 2016). 이것은 염증 반응을 제어하고 조직 손상을 방지하는 부정적인 피드백 루프 역할을 할 가능성이 있다.
본원의 교시에 따르면, TPA 화합물은 COVID-19, ARDS 및 CSS 치료 피험자에서 과염증 효과를 하향조절하면서 하류 항바이러스 효과를 유지하는 신규한 방식으로 NFκB의 활성제로서 기능한다. NFkB는 처음에는 염증의 초기 프라이머로 기능하지만, 돌이킬 수 없는 과염증 단계 이전의 시점(즉, CSS 발병 전)에서 TPA를 적시에 개입하면 NFkB를 "활성화"하여 대식세포 및 호중구의 과염증을 하향조절한다. 새로운 미토파지(mitophagy) 경로를 통해. NFkB는 손상된 미토콘드리아의 p62/SQSTM1 매개 제거를 촉진함으로써 대식세포에서 자체 염증 유발 활동을 피드백 제한하는 이러한 능력으로 작동한다(Zhong et al., 2016). 여기서의 파일럿 연구 결과 TPA 매개 NFkB 활성화가 COVID-19 및 ARDS의 적절한 단계(예컨대 대식세포 및 호중구가 활성화되었지만 아직 과활성화되지는 않고, 대식세포 및 호중구에 의해 매개되는 COVID-19 및 ARDS-관련 조직 손상이 발생하기 전)에서 적용될 경우, 이러한 조절이 CSS를 포함한 과염증 및 수반되는 조직 손상을 임상적으로 감소시키거나 차단하는 것으로 나타났다.
인간 SARS 바이러스 감염, ARDS, CSS, PIMS 및 기타 바이러스 유발 과염증 및 병원성 병태(예컨대 COVID-19 피험자에서)를 치료하는 데 있어 TPA 효능의 또 다른 중요한 측면은 면역- 및 염증-조절 키나아제 활성화, 신호전달 및 하류 염증 및 병원성 메카니즘에 대한 TPA의 효과와 관련이 있다. ACE2는 SARS-CoV-2의 부착에 의해 하향조절되고 이는 NFκB 및 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK) 신호전달 경로를 과도하게 활성화시켜, 폐 염증 및 손상을 초래한다. 바이러스와 숙주 사이의 이러한 상호작용 및 기타 상호작용은 MAPK 활성화 및 MAPK 친염증성 신호 캐스케이드의 또 다른 조절자인 PKC의 비정상적인 조절과 관련이 있다. 일반적으로 TPA는 PKC와 상호 작용하고 PKC를 활성화하여 기질 인산화를 일으켜 MAPK 염증 캐스케이드와 관련된 신호를 전파할 수 있다.
MAPK 경로에 대한 TPA의 보다 복잡한 효과는 면역 세포 분화 및 아폽토시스의 TPA 조절을 포함한다. 우리의 연구는 예시적인 TPA 화합물인 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트가 PKC를 활성화할 뿐만 아니라 안정화시켜 MAPK 과다 자극의 임상적으로 유익한 감소를 초래한다는 것을 보여준다(감소된 MAPK 활성화 및 인산화 활성, 다운스트림 MAPK 매개된 친염증성 신호전달 전파의 약화).
본 발명의 특정 측면에서, TPA 화합물의 프로-아폽토시스 효과는 MAPK 자극된 표적 세포(대식세포 및 호중구 포함)에서 증가된 아폽토시스를 매개하여, 이들 표적 세포의 MAPK-매개 과염증 활성을 추가로 제한한다.
관련된 구체예에서, TPA 화합물의 아폽토시스 촉진(pro-apoptotic) 효과는 형질전환 성장 인자 베타(TGF-β)의 바이러스 조절이상을 통해 과도하게 자극되고 재프로그래밍되는 병원성 염증 세포에서 증가된 아폽토시스을 매개한다. TGF-β는 3개의 포유동물 이소폼(TGF-β 1 내지 3, HGNC 기호 TGFB1, TGFB2, TGFB3) 및 다른 많은 신호 단백질을 포함하는 형질전환 성장 인자 수퍼패밀리에 속하는 다기능 사이토카인이다. TGF-β 단백질은 모든 백혈구 계통에서 생성된다. 바이러스에 감염되면, 활성화된 TGF-β는 다른 면역/염증 보조 인자와 함께 세린/트레오닌 키나아제 복합체를 형성하며, 이 복합체는 TGF-β 수용체에 결합한다. TGF-β 수용체는 1형 및 2형 수용체 소단위로 구성된다. TGF-β의 수용체 결합 후, 2형 수용체 키나아제는 1형 수용체 키나아제를 인산화하고 활성화하여 면역/염증 신호 캐스케이드를 활성화한다. 이는 면역 및 염증 세포의 분화, 화학주성, 증식, 활성화, 프로그래밍 및 아폽토시스에서 기능하는 다양한 표적 유전자 및 유전자 산물의 합성 및/또는 활성화를 강화한다.
TGF-β는 2개의 다른 폴리펩티드(잠재성 TGF-베타 결합 단백질(LTBP) 및 잠복기 관련 펩티드(LAP))와 복합된 잠재형 형태로 대식세포를 비롯한 많은 세포 유형에 의해 분비된다. 플라스민과 같은 혈청 단백질분해효소는 복합체로부터 활성 TGF-β의 방출을 촉매한다. 이것은 잠재적인 TGF-β 복합체가 리간드인 트롬보스폰딘-1(TSP-1)을 통해 CD36에 결합하는 대식세포의 표면에서 발생한다. 대식세포를 활성화시키는 바이러스 감염과 같은 염증 자극은 플라스민의 활성화를 촉진하여 활성 TGF-β의 방출을 향상시킨다. 대식세포는 또한 형질 세포에 의해 분비되는 IgG 결합 잠재성 TGF-β 복합체를 엔도사이토시스한 다음 활성 TGF-β를 세포외로 방출한다.
따라서 TGF-β의 주요 기능은 친염증성 사이토카인이다. 그러나 TGF-β는 또한 면역 및 염증 세포 결정 및 분화에서 뚜렷한 역할을 한다. TGF-β 활성화 경로는 현재 몇 가지만 알려져 있으며 TGF-β 활성화 이면의 더 광범위한 메커니즘은 잘 알려져 있지 않다. TGF-β의 알려진 활성제에는 프로테아제, 인테그린, pH 및 활성산소종(ROS)이 포함된다.
TGF-β 활성화 및 신호전달의 조절 장애를 유발하는 교란이 과염증, 자가면역 질환, 섬유증 및 암을 매개할 수 있다는 것은 잘 알려져 있다. 이것은 TGF-β가 없는 트랜스제닉 마우스의 만연한 과염증에 의해 잘 입증된다. 위에서 설명한 바와 같이 COVID-19 질병 및 기타 SARS 바이러스 감염은 심각한 경우 심각한 폐 염증, 섬유증 및 미만성 폐포 손상(DAD)을 유발한다. 대식세포와 호중구는 폐 실질과 폐포 공간에 많은 수로 침투하며, 이는 중증 COVID-19 환자의 ARDS와 관련이 있다. 이 병리학은 종종 폐 모세혈관으로의 호중구 침윤, 폐 섬유증, 혈전증 및 혈관염과 관련된 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착을 포함하도록 확장된다. CSS로 나타나는 유사한 과염증 메커니즘은 PIMS와 CSS 과염증 및 병인이 여러 장기 침범 및 부전으로 이어질 수 있는 말기 COVID-19에서 명백하다.
원래 SARS-CoV 코로나바이러스를 연구하면서, Zhao et al. (2008)은 SARS-CoV 뉴클레오캡시드(N) 단백질이 특정 경로에 의해 실제로 TGF-β를 중재된 과염증으로 강화하는 한편, 성숙한 면역/염증 세포에서 아폽토시스을 유도하는 데 관여하는 TGF-β의 중요한 경로/활성을 비활성화한다고 보고하였다. SARS N 단백질은 인간 말초 폐 상피(HPL) 세포의 Smad3/Smad4 매개 아폽토시스을 약화시키면서 특히 플라스미노겐 활성제 억제제-1의 발현을 유도한다. TGF-β 염증 캐스케이드에 대한 SARS N 단백질의 과활성화 효과는 Smad3-특이적이다. N 단백질은 Smad3와 결합하여 Smad3-p300 복합체 형성을 촉진하는 반면 Smad3와 Smad4 사이의 복합체 형성을 방해한다(Zhao et al., 2008). 이러한 발견은 SARS 바이러스 N 단백질이 TGF-β 활성화 및 신호전달의 특정 경로를 방해하고 지휘하여 정상적인 세포 사멸을 유해하게 차단하고 SARS-CoV에 감염된 병원성 염증 숙주 세포의 수명을 연장시킨다(동시에 TGF-β-매개 과염증의 다른 메커니즘을 활성화)는 놀라운 메커니즘을 의미한다.
본 발명의 중요한 목적은 심각한 경우에 폐 실질 및 폐포 공간으로의 활성화된 대식세포 및 호중구의 대규모 유입에 의해 매개되는 COVID-19 피험자의 폐 섬유증 및 기타 손상을 예방하고 줄이는 것이다. 본 발명의 TPA 조성물 및 방법은 부분적으로 TGF-β-매개 아폽토시스의 SARS N 단백질 차단을 역전시킴으로써 이러한 임상적 목적을 달성한다. 바이러스의 이러한 "재프로그래밍" 메커니즘은 심각한 CSS 및 ARDS 증상이 있는 COVID-19 피험자에서 활성화된 대식세포 및 호중구 수가 극도로 증가한 원인으로 여겨진다. 이러한 염증/면역 세포는 일반적으로 항바이러스 기능(식균 작용 및 탈과립)을 수행한 후 아폽토시스를 겪는 반면, COVID-19는 수명을 연장하여 이러한 세포를 모집함으로써(TGF-β 유도 아폽토시스의 N 단백질 억제를 통해), 지속적인 과염증을 오조절(mis-regulating)하고 바이러스 복제 및 확산을 강화한다. SARS 코로나바이러스에 의한 병원성 대식세포 및 호중구의 모집 및 보호는 분명히 바이러스의 병인 및 진화 전략의 일부이다. 순환하는 림프구(T, B 및 NK 세포)에는 분명히 ACE-2 수용체가 결여되어 있는 반면, ACE2를 발현하는 CD68+CD169+ 대식세포는 COVID-19 환자, 특히 비장 변연부와 림프절 변연 부비동에서 발견되었다. 대식세포는 SARS-CoV-2 핵단백질 항원을 함유하고 IL-6의 상향조절을 보였다 Feng et al., 2020). 이는 대식세포가 "트로이 목마" 방식으로 COVID-19에 감염되어 취약한 조직과 기관에 바이러스를 전달하고 근본적으로 SARS-CoV-2 감염 시 과염증 및 활성화 유도 림프구 세포 사멸에 기여할 수 있음을 나타낸다.
호중구가 ACE-2 수용체를 발현하고 hSARS 바이러스에 직접 감염될 수 있는지 여부는 불분명하지만 SARS-CoV-2 과염증 활성화 및 호중구 강화에서 ACE-2의 역할은 분명하다. Li 등의 연구(2020)는 ACE2가 SARS-CoV-2 세포 진입 및 복제를 촉진하는 수용체일 뿐만 아니라 숙주 면역 반응, 사이토카인 발현 및 염증의 감염 후 바이러스 매개 조절 장애에도 관여한다는 것을 보여준다. 감염된 세포 및 조직의 ACE-2 수치는 SARS-CoV-2에 의해 유도된 ARDS의 중증도와 상관관계가 있으며 CSS 및 ARDS를 매개하는 친염증성 사이토카인의 과상승과 직접적으로 관련이 있다. 보다 구체적으로, Li와 동료들은 ACE2의 높은 발현이 IL-1, IL-10, IL-6 및 IL-8에 의해 유도된 과염증 반응 뿐만 아니라 선천 면역 반응, 적응 면역 반응, B 세포 조절 및 사이토카인 분비 의 강도와 관련이 있다고 보고한다. 즉, CSS를 매개하는 면역 체계 기능 장애는 ACE2의 높은 발현과 광범위하게 연결되어 있다. 또한 ACE2의 높은 발현은 바이러스 복제와 관련된 유전자의 발현 증가 및 SARS-CoV-2에 감염된 상피 세포의 전사체 변형과 관련이 있어 바이러스 진입, 복제 및 조립을 강화한다. T 세포 활성화 및 T 세포에 의해 매개되는 염증 반응은 또한 감염된 세포에서 전사체의 SARS-CoV-2 변형에 의해 유도된다. SARS-CoV-2에 감염된 환자의 IL1β, IFN-γ, IP10 및 MCP1 수치 증가는 T-helper-1(Th1) 세포 반응의 과활성화와 관련이 있는 것으로 보인다. ACE2는 또한 호중구, NK 세포, Th17 세포, Th2 세포, Th1 세포, 수지상 세포 및 TNFα 분비 세포의 활성화를 매개하여 심각한 과염증 반응을 일으킨다. 폐 조직에서 높은 ACE2 발현, 특히 대식세포의 세포독성 활성화, 호중구 염증 및 Th2 지배 면역 반응(Li et al., 2020). 흥미롭게도 ACE2 발현은 SARS-CoV 감염 후 시간에 따라 달라진다.
숙주 대식세포와 호중구의 SARS-CoV-2 바이러스 "모집 및 재프로그래밍"의 결과로, 하이잭되고 "불멸화된" 염증 이펙터 세포는 숙주의 순환을 혼잡 및 손상시키고 간질 및 폐포 구획(폐 섬유증, NET 침착, 상피 및 내피 장벽 파괴, 혈관염 및 혈전증을 통한 것을 포함)을 분해 및 혼잡화시켜, 숙주가 성공적인 면역 반응을 시작하는 능력을 근본적으로 제한한다(예컨대 면역 이펙터 세포 및 분비된 항체가 폐 및 다른 장기의 바이러스 생육 위치에 도달하는 것을 방해함으로써). 이러한 조절 장애 및 하이잭 과정으로 인한 영향의 정점에는 ARDS/SARS로, 극심한 폐 염증 병인, 순환 및 가스 교환 차단, 저산소혈증 및 궁극적인 폐/심부전이 수반된다. 이것은 숙주와 오랫동안 공진화한 특수 바이러스의 미세 조정되고 약화된 영향이 아니라 새로운(예컨대 인수공통 감염) 일반 바이러스의 특징적인 영향이다.
본 발명의 TPA 조성물 및 방법을 사용함으로써 SARS-CoV-2 감염 및 병원성 메커니즘이 효과적으로 차단되거나 실질적으로 감소된다. 예시적인 구체예에서, TPA 화합물을 사용하는 항염증 방법은 SARS-CoV-2 유도된 과염증, CSS, ARDS, PIMS 및 이러한 병원성 병태에 수반되는 관련 조직 및 기관 손상을 감소시킨다. 특정 구체예에서, 본 발명의 TPA 화합물은 숙주 대식세포 및 호중구에서 SARS-CoV-2 활성화 및 수명 연장(정상 아폽토시스의 N 단백질 파괴)을 방지 또는 감소시켜 CSS, ARDS, DAD, PIMS 및 ESHS, 결과적으로 바이러스 복제, 숙주 내 바이러스 확산, 바이러스 발산 및 바이러스 전파를 제한한다. 이론에 구애됨이 없이, 본 발명의 TPA 화합물 및 방법의 이러한 항염증 및 "프로-아폽토시스" 효과는 PKC, MAPK, NFkB 및/또는 TGF-β-표적, 메카니즘 및 경로, 또는 완전히 독립적이다.
본원의 교시에 따르면, 본 발명의 항-ARDS 조성물 및 방법으로 치료된 환자는, 예를 들어 호흡곤란, 폐의 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 상승된 수준(들), 폐 실질 및/또는 폐포 공극의 단핵구, 대식세포 및/또는 호중구의 상승된 수준(들), 폐 내피 및/또는 상피 장벽 파괴, 폐 조직의 산화 스트레스 지표 상승(예컨대 폐의 활성 산소종(ROS) 수치 상승) 및/또는 폐 손상의 하나 이상의 병원성 증상(들)(예컨대 ARDA 손상과 관련된 다른 병리학적 징후 중에서도, 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 폐 실질로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 모세혈관으로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질에서의 집중적인 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증 및 혈관염)으로부터 선택된, ARDS 중증도와 관련된 하나 이상의 지표, 병태 또는 증상을 적어도 20% 감소, 종종 25-50% 감소, 많은 경우에 75-95% 또는 그 이상 감소, 최대 100% 감소시킬 것이다. 청구된 조성물 및 방법의 효능은 유사한 위약-치료된 대조군 대상체에서 측정되고 결정된 동일한 지표/값과 비교하여, 치료된 대상체에서의 대상 지표에 대한 임상 진단 값을 측정하고 결정함으로써 상기 ARDS 지표 각각에 대해 결정된다.
본 명세서에 기술된 항-ARDS 조성물 방법 및 조성물은 바이러스 병원체(예를 들어, SARS), 박테리아 병원체, 부식제, 폐 손상 또는 외상, 화상 및 기타 원인에 의해 유발된 ARDS를 포함하는 치료된 ARDS 대상의 범위에서 하나 이상의 ARDS 증상을 치료하거나 예방하는 데 효과적이다.
항-CSS 조성물 및 방법
추가의 예시적인 실시예에서, 포유동물 대상체는 SARS 바이러스에 감염되었거나, COVID-19 질병을 나타내거나, 그렇지 않으면 사이토카인 폭풍 증후군(CSS)의 증상을 나타내는 대상체에서 항-CSS 반응을 유도하기 위해 항-CSS 유효량의 TPA 화합물을 투여받는다. COVID-19 질환 및 기타 과염증 병태에서 CSS를 치료 및 예방하기 위해 TPA 화합물을 사용하는 근거, 전략 및 활성 메커니즘은 일반적으로 항-ARDS 조성물 및 방법에 대한 전술한 설명을 따른다.
본 발명의 이들 측면에 따르면, 본 발명의 항-CSS 조성물 및 방법으로 치료받은 환자는 예컨대: CSS-영향을 받은 세포 또는 조직에서 과도하게 상승된 친염증성 사이토카인 활성화, 발현 및/또는 수준; 폐 실질, 폐포 영공, 또는 다른 CSS-영향을 받는 조직 또는 장기에서 증가된 침윤 및/또는 대식세포 및/또는 호중구 수 증가; 림프구 감소증(림프구의 수치적 충돌(T, B 및 NK 세포)); 상승된 산화 스트레스 마커; 폐 또는 다른 CSS-영향을 받는 조직 또는 장기의 내피 및/또는 상피 장벽에 대한 염증성 손상; 폐 또는 기타 CSS-영향을 받은 조직 또는 장기/장기에 대한 병원성 섬유증 및 기타 병적 염증성 손상; 림프절의 염증성 손상, 손실 또는 위축; 비장의 염증성 손상 또는 위축; 패혈증; 독성 쇼크 증후군(TSS); 및/또는 산화 스트레스 증상(여기서 각 지표/값은 유사한 위약 처리된 대조군 대상체에서 측정 및 결정된 동일한 지표/값과 비교하여 치료된 대상채에서 측정 및 결정됨)와 같은, CSS 발병률 및/또는 중증도와 관련된 하나 이상의 지표, 병태 또는 증상의 적어도 20% 감소, 종종 25-50% 감소, 많은 경우에 75-95% 또는 그 이상의 감소, 최대 100% 제거를 나타낼 것이다.
더 상세한 측면에서, 본 발명의 항-CSS 방법 및 조성물은 CSS의 주요 원인 인자, 즉 일반적으로 유익한 염증 반응과 관련된 수준을 넘어서는 친염증성 사이토카인의 조절 장애 및 과상승을 감소시키거나 제거하는 데 놀랍게도 효과적이다. 본원의 교시에 따르면, 본 발명의 항-CSS 조성물 및 방법으로 치료된 환자는 SS와 관련된 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과도하게 상승된 수준의 적어도 20% 감소, 종종 25-50% 감소, 많은 경우에 75-95% 또는 그 이상 감소, 최대 100% 감소를 보일 것이다.
예시적인 실시예에서, TPA 치료를 받은 피험자는 COVID-19 유발 CSS와 관련된 주요 친염증성 사이토카인 IL-6의 수준이 상당히 감소할 것이다. 예시적인 실시 예에서, COVID-19 질병 치료 초기에 본원에 기술된 바와 같이 친염증성 사이토카인 상승 및 기타 CSS 증상을 나타내는 TPA 처리 대상체의 IL-6 수준은, 유사한 사이토카인 수준 및 CSS 증상을 나타내는 위약 처리된 대조군 대상체와 비교할 때, 표적 조직 또는 샘플(예컨대 순환 혈액 샘플 또는 생검 또는 부검의 폐 조직)에서 IL-6 수준의 최소 20% 감소, 25-50% 감소, 최대 75-95% 감소에 해당하는 IL-6의 치료적 하향조절을 나타낼 것이다. 예방적 효능을 입증하기 위해 필적할 만한 CSS 위험 요인에 대해 환자의 시험군과 대조군을 선택하고(예컨대 모두 COVID-19 질병에 걸린 것으로 조기 진단된) 치료 완료 후, CSS 양성, 위약 치료 대조군 피험자에서 CSS의 발생률 및 중증도 및 IL-6의 과다 자극 수준과 비교하여 TPA 치료군에서는 상승된 IL-6 수준을 비롯한 CSS 증상이 발병된 환자가 더 적고, 실질적으로 더 낮은 IL-6 수준을 비롯하여, 중증 증상을 가진 환자가 더 적을 것이다.
비제한적인 예로서 (IL)-1B; IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF)를 비롯하여, IL-6에 더해 광범위한 친염증성 사이토카인 표적의 표적 혈장, 세포 또는 조직에서의 감소된 발현 또는 수준을 매개하기 위해 TPA 요법을 이용하여 CSS와 연관된 과다 상승된 친염증성 사이토카인 수준을 예방 및 감소시키기 위한 필적할만한 효과가 달성될 것이다. TPA-매개 감쇠를 위한 이들 친염증성 사이토카인 표적 각각은 Huang et al. (2020)에 의해 중증 COVID-19 질병 환자에서 비정상적으로 증가하는 것으로 보고되었다. 중증 ICU 환자에서 Huang과 동료들은 IL-2, IL-7, IL-10, G-CSF, IP10, MCP1, MIP1A, TNFα가 비-ICU 환자보다 높다고 보고하였다(Huang et al., 2020; 콘티 외, 2020). 본 발명의 예시적인 구체예에서, TPA 요법은: IL-10(염증성 사이토카인 생산을 억제하여 단핵구/대식세포 및 호중구, TH1 유형 림프구 반응 억제); IL-11(단핵구/대식세포에 의한 친염증성 사이토카인 반응을 억제하고 추가로 Th2 림프구 반응을 촉진함); IL-13(단핵구/대식세포 기능을 약화시킴), IL-37 및 CSS와 관련된 기타 친염증성 사이토카인 및 케모카인으로부터 선택된 하나 이상의 CSS-관련된 친염증성 사이토카인(들)의 발현, 활성화, 반감기 및/또는 수준을 감소하도록 표적화된다.
이론에 구애됨이 없이, 본 발명의 TPA 조성물 및 방법은 간접적으로 CSS에 관여하는 친염증성 사이토카인의 과활성화 및 과발현을, 세포 수준에서 (예를 들어, 활성화-유도 림프구 감소증의 감소를 통해, 정상 T, B 및 NK 세포 기능의 약화를 초래함) 및 PKC, MAPK, NFkB, TGF-β 및 기타 표적, 정상적인 면역 및 염증 조절과 관련된 메커니즘 및 경로를 비롯한 전술한 신호-반응 경로를 통해 강력하게 약화시킨다.
다른 예시적인 구체예에서, TPA-치료된 대상체는 실질적으로 상승된 수준의 항염증성 사이토카인을 나타낼 것이며, 이 새로운 효과는 COVID-19 질병 대상체를 포함하여 CSS 증상 및 병리학의 추가 감소를 매개한다. 예시적인 실시예에서, COVID-19 질병 및 관련 친염증성 사이토카인 상승 및 본원에 기술된 기타 CSS 증상으로 치료 초기에 나타나는 TPA 처리 대상체의 항염증성 사이토카인 수준은, 필적할만한 친염증성 사이토카인 수준과 CSS 증상을 나타내는 위약 처리된 대조군 대상체와 비교하여, 표적 조직 또는 샘플(예컨대 순환하는 혈액 샘플, 또는 생검 또는 부검의 폐 조직)에서 사이토카인(들) 수준(들)의 20% 증가, 25=50% 증가, 최대 75-95% 증가에 대응하는, 하나 이상의 항염증성 사이토카인의 치료적 상향조절을 나타낼 것이다. 예방적 효능을 입증하기 위해 필적할만한 CSS 위험 요인에 대해 시험관 및 대조군 환자(예컨대 모두 COVID-19 질병에 걸린 것으로 조기 진단됨)를 선택하며, 여기서, TPA 치료군에서 더 적은 수의 환자가 후 친염증성 사이토카인 수준을 비롯한 CSS 증상을 나타낼 것이고, 위약으로 처리된 대조군 대상체에서 CSS의 발병률과 중증도 및 항염증성 및 친염증성 사이토카인 프로파일 값과 비교하여, 실질적으로 상승된 항염증성 사이토카인 수준 및 실질적으로 감소된 친염증성 사이토카인 수준과 상관관계가 있는 중증 증상을 덜 갖는 환자가 선택된다.
항염증성 사이토카인을 상향조절하여 과도하게 상승된 친염증성 사이토카인 수치를 포함하여 CSS 증상을 예방 및 감소시키기 위한 유사한 효능은, 비제한적인 예로서 다음과 같은 광범위한 항염증성 사이토카인 표적에 대한 TPA 요법을 사용하여 달성될 것이다: IL-1RA(IL1β의 친염증 효과를 억제하고 다양한 인터루킨 1 관련 면역 및 염증 반응을 조절하는 면역 촉진 세포 및 상피 세포에 의해 분비되는 인터류킨); sTNFR1 (순환계의 TNF 삼량체에 결합하여 막 결합 TNF 수용체-TNF 리간드 상호작용을 방지하는 막 결합 TNFR1(mTNFR1)의 순환 카운터파트) 및 sTNFR2(순환계의 TNF 삼량체에 결합하여 막 결합 TNF 수용체-TNF 리간드 상호작용을 방지하는 mTNFR2의 카운터파트)를 비롯한, 가용성 TNF 수용체(sTNFR); 가용성 IL-1 수용체 유형 2(sIL-1RII)(혈장 내 순환 IL-1 리간드에 결합하여 IL-1β가 IL-1 수용체 유형 1에 결합하는 것을 방지함); 막 결합 IL-1 수용체 유형 2(mIL-1RII)(세포내 신호전달 기능이 없지만 세포막에서 IL-1 리간드 결합을 두고 유형 1 IL-1R과 경쟁하는 "미끼" 수용체로서 기능함); IL-10(IL-2 및 IFN-g를 포함하는 Th1 사이토카인을 억제, 단핵구/대식세포 친염증성 사이토카인 합성을 비활성화, 단핵구/대식세포 유래 TNF-α, IL-1, IL-6, IL- 8, IL-12, 과립구 콜로니 자극 인자, MIP-1a, MIP-2a, IL-18BP를 하향조절 또는 억제함); IL-11(NF-kB의 핵 전위를 차단하여 친염증성 사이토카인의 전사 활성화를 손상시키는 억제성 NF-kB(억제성 NF-kB)를 상향조절하여 대식세포에서 IL-1 및 TNF 합성을 약화시키고, CD41 T 세포에 의해 IFN-g 및 IL-2의 합성을 억제하며, Th2 유형 사이토카인으로서 기능하고, Th1 림프구에 의한 사이토카인 발현을 억제함); IL-13(단핵구/대식세포에 의한 TNF, IL-1, IL-8 및 MIP-1α의 생성을 하향조절함); 및 TGF-β(친염증 및 항염증 효과를 모두 가지며, 다른 사이토카인 및 성장 인자의 작용을 길항, 강화 또는 수정하기 위한 생물학적 스위치 역할을 함, 염증의 활성 부위를 분해 및 복구가 지배하는 부위로 전환할 수 있음, 국소적으로는 면역 증강제, 전신 순환계에서는 면역 억제제로 기능할 수 있으며 T 세포와 B 세포의 증식과 분화를 억제하고 IL-2, IFN-g 및 TNF를 하향조절함; IL-10과 유사한 방식으로 단핵구/대식세포 불활성화제로서 기능하고, 성숙한 면역/염증 세포에서 아폽토시스을 유도함).
CSS의 치료 및 예방에 관한 본 발명의 관련 구체예에서, 본원에 기술된 TPA 조성물 및 방법은 폐 실질, 폐포 공기, 또는 다른 CSS-영향 조직 또는 장기에서 대식세포 및/또는 호중구의 침윤 및 수치 증가를 효과적으로 차단하거나 감소시킨다. TPA 화합물의 이러한 효과는 다음과 같은 다양한 메커니즘을 포함할 수 있다: 대식세포 및/또는 호중구의 전염증성 사이토카인 및/또는 케모카인 신호 차단 또는 감소(활성화, 이동/침투); 대식세포 및/또는 호중구 전염증성 사이토카인 발현, 세포독성, 상피 및 내피 세포 및 구조적 성분의 파괴를 차단 또는 감소; 활성화된 호중구에 의한 NET 침착 차단 또는 감소; 및 대식세포 및/또는 호중구의 친혈전 활성 및 관련 병원성 효과의 차단 또는 감소. 또한, 본 발명의 TPA 조성물 및 방법은 대식세포 및 호중구에 대한 아폽토시스 촉진 효과를 매개하여 이들의 정상적인 염증 활성 및 시기적절한 아폽토시스를 긍정적으로 조절한다(그리고 COVID-19 질병의 경우 SARS-CoV-2 모집 및 TGF-β에 대한 SARS N 단백질 효과에 의해 매개되는 이들 세포의 세포 사멸 정상적인 세포 사멸을 일으켜 수명을 연장하고 이러한 세포의 과염증 효과).
CSS 치료 및 예방에 관한 본 발명의 추가 측면에서, 본 발명의 TPA 화합물 및 방법은 또한 림프구 감소증을 치료 또는 예방하는데 임상적으로 효과적이다. 림프구 감소증은 적어도 부분적으로 활성화 유도 림프구 세포 사멸에 의해 매개되는 중증 CSS 사례(즉, 조직/기관 병인, 손상 및 기능 장애로 진행되는 사례)에서 간찰되는 혈액, 비장 및/또는 림프절에서의 림프구(T, B 및 NK 세포) 수의 심각한 감소이다.
다른 구체예에서, 본 발명의 TPA 조성물 및 방법은 예를 들어 폐 조직 또는 다른 CSS에 영향을 받은 조직 또는 장기에서 산화 스트레스 마커의 감소(예를 들어, 상승된 /ROS 수준)에 의해 결정되는 CSS와 관련된 산화 스트레스를 치료하거나 예방하는 데 효과적이다.
CSS와 관련된 본 발명의 다른 치료 표적은 폐 또는 다른 CSS-영향을 받은 조직 또는 장기에서 내피 및/또는 상피 장벽에 대한 염증성 손상의 방지 또는 감소를 포함한다. 이들 실시예에서 효능의 진단 지표는 공지된 조직학적 검사 및 CSS 피험자의 치료군과 대조군 사이의 생검 및/또는 부검 결과를 평가하는 조직화학적 검정을 포함한다.
본 발명의 관련 TPA 치료 방법 및 조성물은 폐 또는 다른 CSS-영향을 받은 조직 또는 장기/기관에서의 병원성 섬유증 및/또는 면역원성 또는 과염증성 질환 손상의 다른 조직병리학적 징후, 소실 및/또는 위축의 예방 및 치료에 관한 것이다. 림프절 및 비장의 염증 및/또는 위축 - 이들 모두는 통상적인 병리학적 검사, 조직학 및 조직화학적 방법을 사용하여 효능에 대해 평가된다.
본 발명의 추가 구체예는 패혈증, 독성 쇼크 증후군(TSS), 및/또는 CSS와 관련된 산화 스트레스 증상의 감소 또는 차단을 포함하는 CSS 예방 및 치료에 관한 것이다. 여기서도, 치료/예방 효능의 평가를 위한 진단 파라미터를 측정하기 위한 종래의 검정 방법이 당업계에 널리 알려져 있다. 증상.
항염증 및 면역 조절 조성물 및 방법
COVID-19 질병, 가와사키병, 폐외 전신 과염증 증후군과 관련된 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS)을 포함하나 이에 제한되지 않는 과면역 또는 과염증 병태를 예방하거나 치료하는 본 발명의 TPA 조성물 및 방법의 추가 구체예 (ESHS), 또는 과염증으로 인한 혈관 울혈 또는 혈전 병태. 혈관 울혈 또는 혈전 병태는 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및/또는 괴저를 포함할 수 있지만 이에 제한되지 않는다. 이들 조성물 및 방법이 과면역 또는 과염증 병태 또는 장애 위험이 높거나 이를 나타내는 인간 대상체에게 투여되는 경우, 임상적 효능은 다음에서 선택된 하나 이상의 표적화된 과면역 또는 과염증 병태 또는 증상의 실질적인 감소(즉, 적어도 20% 감소, 25-50% 감소, 75-95% 감소, 최대 100% 예방/제거)에 의해 입증된다: 1) 피험자의 감염된 조직, 장기 또는 혈장에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들) 또는 기타 염증 인자(들)의 상승된 수준; 2) 대상체의 감염된 조직, 장기 또는 구획(예를 들어, 폐포, 신장 또는 혈관 내강)에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 증가된 수준 및/또는 침윤 증가; 3) 대상체에서 감염된 조직 또는 장기의 내피 및/또는 상피 장벽의 파괴; 4) 대상체의 감염된 조직 또는 장기에서 면역원성 또는 과염증성 질환 손상의 병원성 섬유증 및/또는 기타 조직병리학적 징후; 5) 독성 쇼크 증후군(TSS) 증상; 6) 대상체의 감염된 조직, 장기 또는 생물학적 샘플에서 산화 스트레스의 상승된 징후; 및/또는 7) 갑작스러운 발병 발열, 발진, 충혈된 눈, 건조하거나 갈라진 입, 손바닥 및/또는 발바닥의 충혈, 샘 부종, 팽창된 혈관, 및/또는 관상 동맥류로부터 선택된 하나 이상의 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS)-관련 증상(각각의 지표/값은 유사하고 위약 처리된 대조군 대상체에서 측정되고 결정된 동일한 지표/값과 비교하여 치료된 대상체에서 측정되고 결정됨).
본 발명의 관련 측면 내에서, TPA는 COVID-19 질병, 가와사키병, 폐외 전신 과염증 증후군과 관련된 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS)을 포함하나 이에 제한되지 않는 과면역 또는 과염증 병태를 예방하거나 치료하는 본 발명의 TPA 조성물 및 방법의 추가 구체예 (ESHS), 또는 과염증으로 인한 혈관 울혈 또는 혈전 병태. 혈관 울혈 또는 혈전 병태는 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및/또는 괴저를 예방하거나 치료하기 위해 인간 대상체에게 투여된다. 이러한 측면에 따라, 과면역 또는 과염증 병태 또는 장애 위험이 높거나 이를 나타내는 인간 대상체에게 다음에서 선택된 표적화된 과면역 또는 과염증 병태 또는 증상을 감소 또는 예방하는데 충분한 면역조절 또는 항염 유효량의 TPA 화합물이 투여된다: 1) 피험자의 감염된 조직, 장기 또는 혈장에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들) 또는 기타 염증 인자(들)의 상승된 수준; 2) 대상체의 감염된 조직, 장기 또는 구획(예를 들어, 폐포, 신장 또는 혈관 내강)에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 증가된 수준 및/또는 침윤 증가; 3) 대상체에서 감염된 조직 또는 장기의 내피 및/또는 상피 장벽의 파괴; 4) 대상체의 감염된 조직 또는 장기에서 면역원성 또는 과염증성 질환 손상의 병원성 섬유증 및/또는 기타 조직병리학적 징후; 5) 독성 쇼크 증후군(TSS) 증상; 6) 대상체의 감염된 조직, 장기 또는 생물학적 샘플에서 산화 스트레스의 상승된 징후; 및/또는 7) 발진, 충혈된 눈, 건조하거나 갈라진 입, 손바닥 및/또는 발바닥의 충혈, 샘 부종, 팽창된 혈관, 및/또는 관상 동맥류로부터 선택된 하나 이상의 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS)-관련 증상(각각의 지표/값은 유사하고 위약 처리된 대조군 대상체에서 측정되고 결정된 동일한 지표/값과 비교하여 치료된 대상체에서 측정되고 결정됨).
병용 약물 요법 및 조율 치료(coordinate treatment) 방법
본 발명의 추가 측면 내에서, 유효량의 TPA 화합물 및 하나 이상의 "2차 제제(들)"를 사용하는 조합 제형 및 조율 치료 방법이 제공된다. 2차 제제는 "2차 치료제" 또는 "2차 예방제"일 수 있고, TPA 화합물과 공동 제제화되거나 조율 투여되어 표적 COVID-19 감염 또는 질병, 일반적으로 ARDS, SARS, CSS, PIMS 또는 여기에 설명된 기타 표적 감염, 질병, 병태 및/또는 증상을 치료하거나 예방하는 데 효과적인, 조합 제제, 병용 약물 요법 또는 조율 치료 또는 예방 방법을 산출할 수 있다. 예를 들어, ARDS에 대한 예시 적인 조합 제형 및 공동 치료/예방 방법은 ARDS 또는 표적화된 동반이환 질환, 병태 또는 증상을 치료 및/또는 예방하는데 효과적인 하나 이상의 2차 또는 보조 치료 또는 예방제와 조합된 항-ARDS 효과적인 TPA 화합물을 포함한다. 대안적 측면에서, 2차 제제는 표적 또는 동시이환 병태를 치료 및/또는 예방하기 위해 TPA 화합물과 동일하거나 유사하거나 별개의 약리학적 활성을 가질 수 있다.
관련 구체예에서 감염, 질병, 병태 및/또는 증상을 치료 및/또는 예방하기 위해 본 발명에 개시된 임의의 TPA 화합물을 약물 병용 또는 하나 이상의 2차 치료제 또는 예방제와의 병용 요법에 사용할 수 있다. 예시적인 실시예에서, 항바이러스에 효과적인 TPA 화합물은 종래의 항바이러스 약물과 조합되거나 조율 투여된다. 다른 예시적인 구체예에서, 항-ARDS, 항-CSS, 항-PIMS, 항-ESHS, 항-DAD, 항염증, 면역-촉진, 항-세포변성 및/또는 아폽토시스-촉진 TPA 화합물은, 바이러스 감염, 과염증, ARDs, CSS, PIMS, ESHS, DAD, 증가된 세포 변성 활성, 면역억제, 면역 및/또는 염증 세포의 정상적인 아폽토시스 활성의 기능장애, 및/또는 치료된 대상체에서 본원에 기술된 임의의 다른 표적 증상(들), 병태(들) 또는 지표(들)을 갖는 선택된 환자에서, 임의의 질병, 병태, 이와 관련되거나 동반이환되는 증상을 예방하거나 치료하는 데 상당한 임상적 이점을 매개하는 2차 제제와 조합되거나 함께 조율 투여된다.
본 발명의 TPA 화합물은 2차 제제와 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있고, 2차 제제는 동일하거나 상이한 질병, 병태(들) 또는 증상(들)을 치료 및/또는 예방하기 위해 상가적으로, 상승적으로 또는 뚜렷하게 작용할 것이다. TPA 화합물이 투여된다. TPA 화합물 및 2차 제제는 단일 제형으로 조합되거나 동시에 또는 다른 시간에 개별적으로 투여될 수 있다. 따라서, TPA 화합물 및 2차 치료제의 투여는 동시에 또는 어느 순서로든 순차적으로 수행될 수 있고, 치료 간격은 TPA 화합물과 2차 치료제 중 어느 하나만 또는 둘 모두(또는 모두)가 개별적으로 및/또는 또는 집단적으로 치료 효과를 발휘하는 시간(들)을 포함할 수 있다. 이러한 모든 조율 치료 방법의 구별되는 측면은 선택된 TPA 화합물이 본원에 기술된 바와 같이 표적 질병, 병태(들) 또는 증상(들)을 완화 또는 예방하기 위해 적어도 일부 검출가능한 치료 활성을 발휘하고, 2차 치료제에 의해 매개되는 별도의 또는 강화된 임상 반응과 관련되거나 관련되지 않을 수 있는 호의적인 임상 반응을 유도한다는 것이다. 다른 예시적 구체예에서, 2차 치료제와 함께 TPA 화합물의 조율 투여는 감소된 부작용과 함께 동일한 용량으로 TPA 화합물 또는 2차 제제 단독 투여 후에 관찰되는 임상 반응과 비교하여 전형적으로 더 큰 치료 반응을 산출할 것이다. 예를 들어, 항바이러스 효과적인 TPA 화합물을 종래의 항바이러스 약물과 조합하여 사용하는 조율 치료는 TPA 화합물 및 종래의 항바이러스 약물 둘 모두의 개별적으로 준치료 용량이 투여되는 경우에도 실질적인 치료 효과를 산출할 수 있어 관련 부작용을 피하거나 감소시킬 수 있다(즉, 동일한 치료 용량의 TPA 화합물 또는 통상적인 항바이러스 약물 단독을 사용하여 관찰된 부작용에 비해). 이러한 방식으로, TPA 화합물과 기존의 항바이러스 약물은 서로에 대해 "강화"되어 약물 단독으로는 감지할 수 있는 치료 효과를 나타내지 않는 용량에서 조합 치료 효능을 이끌어낸다. 일반적으로(즉, 단독으로 투여할 때) 준치료 용량의 보완 또는 강화 2차 치료 약물과 TPA의 놀라운 조합 효능은 TPA 또는 2차 치료제의 전체 치료 용량의 개별 투여에 수반될 수 있는 부작용을 제거하거나 실질적으로 감소시키는 측면에서 중요한 이점을 제공한다. 여기에 사용된 이러한 조정된 투여량 요법은 예를 들어 잘 알려진 임상 및 환자 특정 매개변수에 따라 달라질 수 있는 반면, 용어 "치료 용량" 및 "준치료 용량"은 당업자에게 일반적이고 명확한 의미를 갖는다(그리고 여기에서 표적 질병, 병태 및 증상과 관련된 증상 중 하나 또는 조합에 적용 가능하다).
TPA와 항바이러스 약물 조합
2차 제제가 항바이러스 약물인 본 발명의 조율 요법에서, 2차 제제는 통상적인 항바이러스제일 수 있다. 예를 들어, 항바이러스 약물은 임상용으로 알려져 있고 쉽게 구할 수 있는 다른 많은 안전하고 효과적인 항바이러스제 중에서도: 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암플리젠, 암프레나비르(아제너라제), 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 발록사비르 마르복실(조플루자), 빅타비, 보세프레비르(빅트렐리스), 시도포비르, 코비시스타트(티보스트), 콤비비르, 다클라타스비르(다클린자), 다루나비르, 델라비르딘, 데스코비, 디다노신, 도코사놀, 돌루테그라비르, 도라비린(피펠트로), 에콜리에버, 에독수딘, 에파비렌즈, 엘비테그라비르, 엠트리시타빈, 엔푸비르티드, 엔테카비르, 에트라비린(인텔렌스), 팜시클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르넷, 포르포넷, 융합 억제제, 간시클로비르(시토벤), 이바시타빈, 이발리주맙(트로가르조), 이독수리딘, 이미퀴모드, 이무노비르, 인디나비르, 이노신, 인테그라제 억제제, I형 인터페론, II형 인터페론, III형 인터페론, 라미부딘, 레터모비어(프레비미스), 로피나비르, 로비리드, 마라비록, 메티사존, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 니타족사니드, 노르비르, 뉴클레오시드 유사체, 오셀타미비르(타미플루), 페그 인터페론 알파-2a, 페그인터페론 알파-2b, 펜시클로비르, 페라미비르(라피밥), 플레코나릴, 포도필로톡신, 피라미딘, 랄테그라비르, 렘데시비르, 역전사효소 억제제, 리바비린, 릴피비린(에듀란트), 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르, 시메프레비르(올리시오), 소포스부비르, 스타부딘, 텔라프레비르, 텔비부딘(티제카), 테노포비르 알라페나미드, 테노포비르 디소프록실, 테노포비르, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르(발트렉스), 발간시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르(릴렌자) 및/또는 지도부딘 중 어느 하나이거나 이의 조합으로부터 선택될 수 있다. 항바이러스제는 또한 모노클로날 항체 및 표적 바이러스에 면역특이적으로 결합하거나 그렇지 않으면 표적 바이러스를 무력화시키는 다른 생물학적 제제, 및 스테로이드 및 코르티코스테로이드, 예컨대 프레드니손, 코르티손, 플루티카손 및 글루코코르티코이드로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 렘데시비르와 함께 공동 제형화되고 전달되거나(예를 들어, 다중 약물 iv 주입으로) 또는 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 렘데시비르(GS-5734)는 현재 유망한 항COVID-19 약물로 RNA 바이러스에 대한 광범위한 항바이러스 활성을 나타낸다. 이것은 구조가 아데노신과 유사한 전구약물이다. 렘데시비르는 초기 바이러스 RNA에 통합되며 RNA 의존성 RNA 중합효소도 억제한다. 이것은 바이러스 RNA 사슬의 조기 종료를 초래하고 결과적으로 바이러스 게놈의 복제를 정지시킨다. 렘데시비르는 원래 미국 길리어드 사이언스(Gilead Sciences)에서 에볼라 바이러스에 대항하여 개발했으며 최근 콩고민주공화국에서 에볼라 발병 당시 임상시험을 거쳤다. 이 시험에서 에볼라에 대한 효과가 입증되지는 않았지만 인간에 대한 안전성이 확립되어 COVID-19 질병에 대한 렘데시비르 효능을 결정하기 위해 진행 중인 임상 시험에 대한 항목을 허용하였다. 중요한 것은 렘데시비르가 이전에 시험관 내 및 생체 내에서 SARS-CoV 및 MERS-CoV를 포함한 다양한 코로나바이러스에 대해 항바이러스 활성을 나타내는 것으로 나타났다는 것이다. 최근 시험관 내 연구에서 렘데시비르도 SARS-CoV-2를 억제하는 것으로 보고되었다(Wang et al., 2020). 렘데시비르는 현재 중국에서 2건의 무작위 3상 임상시험(NCT04252664 및 NCT04257656)을 포함하여 여러 국가에서 여러 임상시험을 진행하고 있다.
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 파비피라비르와 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 렘데시비르와 마찬가지로 파비피라비르는 내인성 구아닌을 구조적으로 모방하여 바이러스 RNA 의존성 RNA 중합효소를 억제한다. 경쟁적 억제를 통해 바이러스 복제의 효능이 상당히 손상될 수 있다. 파비피라비르는 인플루엔자 치료제로 승인되었지만 파비피라비르가 렘데시비르보다 SARS-CoV-2를 치료하기 위한 전임상 지원이 덜 확립되었다. 중국의 한 임상 연구에서 SARS-CoV-2(ChiCTR2000029600)를 치료하기 위한 파비피라비르와 인터페론-α의 효능을 평가했으며, 2020년 3월에 파비피라비르는 중국 국가 의약품 관리국(National Medical Products Administration of China)에 의해 최초의 안전하고 효과적인 항COVID-19 약물로 승인되었다.
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 이버멕틴과 함께 공동 제형화되고 전달되거나, 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 이버멕틴은 FDA 승인 구충제로서 인간 면역결핍 바이러스(HIV)와 뎅기열 바이러스 모두에 대해 항바이러스 활성을 발휘하는 것으로 입증되었다. 이버멕틴은 미리 형성된 IMPα/β1 이종이량체를 분리할 수 있으며, 이는 바이러스 단백질 화물의 핵 수송을 담당한다. 바이러스 단백질의 핵 수송은 복제 주기와 숙주의 항바이러스 반응 억제에 필수적이기 때문에 핵 수송 과정을 표적으로 삼는 것은 RNA 바이러스에 대한 실행 가능한 치료적 접근이 될 수 있다. 최근 생체 내 연구에서 이버멕틴이 SARS-CoV-2 감염 48시간 후 바이러스 RNA를 최대 5,000배 감소시키는 능력을 입증하였다(Caly et al., 2020). 구충제 사용에 대한 안전성 프로파일이 확립된 병태에서 COVID-19 치료에 대한 이버멕틴의 효능을 입증하기 위한 다음 단계에는 최적의 용량을 결정하기 위한 시험이 포함될 것이다.
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 로피나비르 및 리토나비르와 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 인간 면역결핍 바이러스(HIV) 프로테아제 억제제 로피나비르 및 리토나비르는 COVID-19 대상체의 항바이러스 치료를 위한 본 발명의 TPA 방법 및 조성물 내의 후보일 가능성이 있다. 아스파르틸 프로테아제는 HIV의 전구체 폴리펩티드를 절단하는 HIV의 pol 유전자에 의해 암호화된 효소로, 복제 주기에서 필수적인 역할을 한다. 코로나바이러스는 다른 효소 부류의 프로테아제 (시스테인 프로테아제)를 암호화하지만 로피나비르와 리토나비르가 코로나바이러스 3CL1pro 프로테아제도 억제한다는 증거가 있다. SARS 및 MERS에 대해 수행된 다수의 임상, 동물 및 체외 모델 연구에서 프로테아제 억제제의 로피나비르/리토나비르 조합이 이들 각각의 바이러스에 대한 것임을 확립하였다. 로피나비르/리토나비르 조합은 현재 COVID-19 환자(NCT04252885; ChiCTR2000029308)에서 사용하기 위한 임상 시험에 있지만 Clay 표준 치료 이외의 명확한 이점은 아직 보고되지 않았다.
TPA와 항-ACE2 약물 조합
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 재조합 인간 안지오텐신 전환 효소 2(APN01)와 함께 공동 제형화되고 전달되거나 이와 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 수용성 재조합 인간 안지오텐신 전환 효소 2(rhACE2)는 S 단백질이 세포의 ACE2와 상호작용하는 것을 차단함으로써 SARS-CoV-2의 진입을 차단할 것으로 예상된다. 실제로 최근 연구에서 rhACE2가 세포 및 배아 줄기 세포 유래 오가노이드에서 SARS-CoV-2 복제를 1,000~5,000배 억제할 수 있다고 보고되었다(Monteil et al., 2020). rhACE2는 관련 효소인 ACE로부터 기질을 멀어지게 하여 혈청 안지오텐신 II를 감소시키는 것 같다. 이는 ACE2 수용체의 추가 활성화를 방지하여 폐 혈관 무결성을 보존하고 ARDS를 예방할 수 있다. 원래 아페이론 바이올로직스(Apeiron Biologics)에서 개발한 APN01은 이미 ARDS에 대한 2상 시험을 거쳤다. 중국의 소규모 파일럿 연구(NCT04287686)는 현재 특히 ARDS의 치료로서 COVID-19 폐렴에서 rhACE2의 생물학적 및 생리학적 역할을 평가하고 있다. 아페이론 바이올로직스는 또한 정맥 APN01의 안전성과 내약성에 접근하기 위해 위약 대조, 이중 맹검, 용량 증량 연구를 시작하였다. 안지오텐신 II와 안지오텐신 1-7의 혈장 수치를 측정함으로써 약물에 의해 방해받는 바이오산물과 COVID-19 폐렴에서 rhACE2의 생물학적 및 생리학적 역할이 더 밝혀질 것이다.
바이러스 유입 억제제
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 아르비돌과 함께 공동 제형화되고 전달되거나, 아르비돌과 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 아르비돌은 인플루엔자 및 아르보바이러스에 대해 개발된 바이러스 유입 억제제이다. 이 약물은 인플루엔자 바이러스 표면의 주요 당단백질인 헤마글루티닌(HA)을 표적으로 한다. 아르비돌은 엔도사이토시스 후 바이러스 막과 엔도솜의 융합을 방지한다. 이것은 현재 SARS-CoV-2에 대한 단일 제제로사 임상시험 중이다(NCT04260594, NCT04255017). 또 다른 임상 시험은 SARS-CoV-2에 대해 아르비돌과 파비피라비르를 비교하는 방향으로 진행 중이다(ChiCTR2000030254).
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 인터페론과 함께 공동 제형화되고 전달되거나 인터페론과 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. COVID-19 치료를 위해 로피나비르/리토나비르와 IFNα2b의 조합(ChiCTR2000029387) 또는 로피나비르/리토나비르와 리바비린 및 IFNβ1b의 조합(NCT04276688)을 평가하기 위한 임상 시험이 최근 등록되었다. 증기 흡입에 의한 IFN 투여는 현재 중국에서 표준 치료 COVID-19 치료의 일부이며 특히 호흡기를 표적으로 삼는 이점을 제공한다. IFN 투여의 정맥 및 피하 방식은 잘 설명되어 있으며 여러 임상 시험에서 안전한 것으로 입증되었다. IFN-I와 로피나비르/리토나비르, 리바비린 또는 렘데시비르의 조합은 다른 코로나바이러스에 대해 보고된 이러한 조합의 향상된 효능을 기반으로 효능을 향상시킬 수 있다(Sheahan et al., 2020). III형 IFN은 또한 호흡기에서 알려진 보호 효과 덕분에 COVID-19 치료 후보이다(Lokugamage et al., 2020). WHO Solidarity 컨소시엄 임상시험의 첫 번째 임상시험인 DisCoVeRy 시험(NCT04315948)에서 피하 IFNβ1a와 로피나비르/리토나비르 병용요법을 로피나비르/리토나비르 단독요법, 히드록시클로로퀸, 렘데시비르와 비교하고 있다.
TPA와 항염증 약물 조합
항바이러스 약물 조합 및 조율 치료 방법에 더하여, TPA 화합물은 치료 개입을 위한 표적으로서 본원에 기술된 모든 다른 질병, 병태 및 증상을 치료 및/또는 예방하기 위해 2차 치료제 및/또는 예방제와 유리하게 조합될 것이다. 예를 들어, "항염증" 약물 및 생물학적 제제는 항-ARDS, 항-CSS, 항-PIMS, 항-ESHS, 항-DAD, 항염증, 면역 촉진, 항-세포변성에서 TPA 화합물과 유익하게 결합될 것이다. 및/또는 아폽토시스 촉진 약물 혼합물, 조율 투여 프로토콜 및 : 보완적, 부가적, 상승적, 강화) 보완적인 다중 약물 치료 방법
바이러스 감염, 과염증, ARDs, CSS, PIMS, ESHS, DAD, 상승된 세포변성 활성, 면역억제, 면역 및/또는 염증의 정상적인 아폽토시스 활성 기능장애 세포, 및/또는 본원에 기재된 임의의 다른 표적 증상(들), 병태(들) 또는 지표(들)을 갖는 치료 환자에서 하나 이상의 질병(들), 벙태(들)를 조정적으로 치료하기 위해 조합적으로 효과적인(예컨대, 상보적, 부가적, 상승적, 강화적), 항-ARDS, 항-CSS, 항-PIMS, 항-ESHS, 항-DAD, 항염증, 면역 촉진, 항-세포변성 및/또는 아폽토시스 촉진 약물 혼합물, 조율 투여 프로토콜 akc 보완적 다제 치료법에서 TPA 화합물과 유익하게 결합될 것이다.
본 발명의 다양한 양태 내에서, 다른 항염증제들 중에서도, 비제한적인 예로서: 항염증 사이토카인, 스테로이드, 코르티코스테로이드, 글루코코르티코이드, 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID), 항산화제, 프로스타글란딘, 및 항생제를 비롯한 광범한 항염증 제제가 유용할 것이다.
본 발명의 예시적인 조합 조성복 및 방법에서, 항염 효과적인 TPA 화합물은 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)과 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 이들 구체예에서 사용하기 위한 비제한적인, 예시적인 NSAID 후보로는 아스피린, 셀레콕시브(셀레브렉스), 디클로페낙(캄비아, 카타플람, 볼타렌-XR, 집소르, 조르볼렉스), 디플루니살, 에토돌락, 이부프로펜(모트린, 애드빌), 인도메타신(인도신), 셀레콕시브(셀레브렉스), 피록시캄(펠덴), 인도메타신(인도신), 멜록시캄(모빅 비블로덱스), 케노프로펜(오르디스, 케토프로펜 ER, 오루바일, 액트론), 설린닥(클리노릴), 디플루니살(돌로비드), 나부메론(릴라펜), 옥사프로진(데이프로), 톨메틴(톨메틴 나트륨, 톨렉틴), 살사레이트(디살시드), 페노프로펜(날폰), 플루디프로펜(안사이드), 케토롤락(토라바돌), 메클로페나메이트, 메페남산(폰스텔), 기타 안전하고 효과적인 NSAID 항염제 - 널리 알려지고 임상용으로 사용 가능한 염증성 약물을 들 수 있다
TPA와 사이토카인 억제제 약물 조합
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항염증 효과적인 TPA 화합물은 SARS-CoV-2 감염, COVID-19 질병, ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DAD 또는 본원에 기술된 임의의 다른 과염증 병태 또는 증상과 관련하여 과도하게 상승된 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 직접적으로 또는 간접적으로 억제/저하시키는 항염증 약물 또는 제제와 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 예시적인 구체예에서, 항염증에 효과적인 TPA 화합물은: (IL)-1B ; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 집락 자극 인자 (G-CSF); 인터페론-γ-유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF)으로부터 선택된, 하나 이상의 친염증성 사이노카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 억제/저하시키는 하나 이상의 2차 치료제와 함께 공동-제형화되거나 조율 투여된다. 본 발명의 이들 측면에서, TPA 화합물 및 2차 치료제는 하나 이상의 표적화된 친염증성 사이토카인(들)의 발현, 활성화, 반감기 및/또는 수준을 감소시키는데 조합적으로 효과적이며, 개별 약물의 필적가능한 치료 용량을 투여하는 것에 비해, 종종 부작용이 감소된다.
이들 구체예에서 2차 치료제로 사용하기 위한 예시적인 항염증 약물 후보에는 전술한 항염증 사이토카인 뿐만 아니라 하나 이상의 친염증성 사이토카인의 합성 또는 그의 활성을 특이적으로, 그리고 직간접적으로, 표적화, 결합, 차단, 불활성화 및/또는 억제하는, 다양한 약물 및 생물학적 제제가 포함된다.
항-Il-6 생물제제 및 TPA와의 약물 조합
본 발명의 이러한 측면을 예시하면, TPA 화합물은 IL-6의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 실질적으로 감소시키기 위해 항-IL-6 약물 또는 생물제제와 함께 사용될 때 조합적으로 효과적이다. IL-6는 오랫동안 TNF-α 및 IL-1과 함께 치료제와 함께 친염증성 캐스케이드에 관여하는 핵심 친염증성 사이토카인으로 간주되었다. IL-6의 경우, 이 사이토카인은 염증 이펙터의 전신 활성화에 대한 마커로 간주된다. 다른 많은 사이토카인과 마찬가지로 IL-6는 친염증 및 항염증 특성을 모두 가지고 있다. 특히 중요한 것은 IL-6가 급성기 염증 반응의 강력한 유도제이며 IL-6 수치 상승은 ARDS가 있는 COVID-19 환자의 불량한 예후와 밀접한 관련이 있다는 것이다(IL-6의 과상승은 기계적 환기가 필요함). IL-6 신호전달의 고전적 경로는 호중구, 단핵구, 대식세포 및 기타 백혈구 집단에서 발현되는 IL-6 수용체를 통해 발생한다. 막 결합된 IL-6 수용체(mIL-6R, CD126)에 결합하는 것 외에도, IL-6은 mIL-6R의 단백질 분해 절단 또는 mRNA의 선택적 스플라이싱에 의해 생성된 가용성 형태의 IL-6 수용체에도 결합할 수 있다. 순환하는 IL-6의 상승된 수준은 폐 탄력의 빠른 감소 및 더 심각한 기관지 폐포 염증과 관련이 있다. 따라서 IL-6 조절 신호 경로의 특정 차단은 COVID-19 질병 대상자의 폐 손상과 관련된 급성 염증을 약화시키는 유망한 접근법을 나타낸다.
다제 TPA 전략으로 IL-6을 표적으로 하는 하나의 예시적인 구체예에서, TPA 화합물은 항-IL 억제제, 결합제 또는 불활성화제, 예컨대 특이적 항-IL-6 모노클로날 항체 또는 Fab 단편 또는 가용성 IL-6 수용체 또는 수용체 유사체, 및 그의 동족 항-IL-6 결합 또는 비활성화 도메인을 포함하는 관련 생물학적 제제와 공동으로 투여된다.
특정 구체예에서, 유사 파마(EUSA Pharma)에서 제조한 항-IL-6 모노클로날 항체인 실툭시맙은 TPA 화합물과 함께 항염증 치료 방법을 조정하는데 사용된다. 실툭시맙은 ARDS가 있는 COVID-19 환자 치료에 사용하기 위해 현재 임상 연구 중이다.
다른 구체예에서, IL-6 수용체 길항제인 사릴루맙(케브자라)은 항염증성 TPA 화합물과 함께 사용되어 IL-6 활성을 비활성화하거나 손상시켜 COVID-19, ARDS, CSS 및 기타 과염증 병태에서 임상적 이점을 중재한다. 케브자라는 관절염 치료에효능이 입증되었으며 리제네론 파마슈티컬스(Regeneron Pharmaceuticals)와 사노피(Sanofi)는 현재 중증 및 중증 COVID-19 환자(NCT04315298)를 대상으로 케브자라에 대한 2상 및 3상 시험을 진행하고 있다.
다른 구체예에서, 재조합 인간 항-IL-6 모노클로날 항체인 토실리주맙(TCZ)은 항염증성 TPA 화합물과 함께 사용되어 IL-6 활성을 비활성화하거나 손상시키고 COVID-19, ARDS, CSS 및 기타 과염증성 병태를 가진 대상체에서 임상적 이점을 초래한다. TCZ는 가용성 및 막 결합 IL-6 수용체(IL-6R)에 특이적으로 결합하여 IL-6 신호 및 IL-6 매개 염증 반응을 차단한다. TCZ는 류마티스 관절염과 같은 류마티스 질환에 널리 사용되었다. 2017년 TCZ는 미국에서 키메라 항원 수용체 T 세포(CART) 면역 요법으로 인한 심각한 생명을 위협하는 CSS에 대해 승인되었다. 현재 연구에서는 중증 및 중증 COVID-19 환자 치료에서 TCZ의 효과를 평가하고 있다. 예비 보고서에 따르면 TCZ는 발열 및 기타 ARDS 증상을 감소시키고 치료 대상자의 75.0%가 산소 공급이 개선된 것으로 나타났다. 90.5% 환자에서 혼탁한 폐 병변이 CT 스캔 상에서 흡수되었다. 또한 52.6%의 환자에서 말초 림프구 수치가 정상으로 돌아왔다. 토실리주맙의 효능 및 안전성에 대한 다기관 무작위 통제 시험을 포함하여 성인 입원 환자의 중증 COVID-19 폐렴 치료에서 토실리주맙의 안전성 및 효능을 평가하기 위해 현재 여러 임상 시험이 등록되어 있으며, 여기에는 신규 관상 동맥 폐렴(NCP) 특허(ChiCTR2000029765), 토실리주맙에 대한 단일 암 개방형 다기관 연구(ChiCTR2000030796), 항바이러스제와 병용한 토실리주맙에 대한 연구(ChiCTR2000030442 및 ChiCTR2000030894)가 포함된다.
관련 구체예에서, 항염증 효과적인 TPA 화합물은 IL-6을 직접 차단 또는 억제하거나 IL-6의 친염증성 활성을 간접적으로 억제, 저감 또는 변경하는 항-IL6 약물과 함께 공동 제형화되고 전달되거나 이와 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다 그러한 약물 중 하나는 Andrographis paniculata 식물에서 원래 확인된 안드로그라폴라이드(Andrographolide)이다. 안드로그라폴라이드는 감염, 염증, 감기, 발열, 폐렴 및 기타 병태, 설사를 치료하기 위해 중국과 인도에서 널리 사용되는 전통적인 약용 식물인 Andrographis paniculata 에서 발견되는 주요 생리 활성 성분인 디테르페노이드 랍데인 화합물이다. 안드로그라폴라이드는 항균, 항염증, 항말라리아 및 항암 활성을 포함하여 치료적으로 중요한 광범위한 생물학적 활성을 나타낸다. 안드로그라폴라이드는 NF-κB 신호전달 억제를 통해 강력한 항염증 활성을 나타낸다. 안드로그라폴라이드는 또한 유도성 산화질소 신타제 및 과염증과 관련된 활성산소종의 생성을 억제한다. 안드로그라폴라이드는 추가로 p27의 발현을 증가시키고 시클린-의존성 키나아제의 발현을 감소시켜 세포 주기 정지를 유도할 수 있으며 카스파제-8 의존 경로를 통해 세포 사멸을 유발할 수 있다. 마우스 복막 대식세포에서 안드로그라폴라이드는 ERK1/2 신호 억제를 통해 TNF-α 및 인터류킨-12의 생성을 억제한다.
TPA와 결합된 안드로그라폴라이드 약물
IL-6 매개 염증과 관련하여 안드로그라폴라이드는 또한 IL-6 매개 과염증 기전 및 경로에 영향을 미치는 강력한 항염증 활성을 갖는 것으로 나타났다. 안드로그라폴라이드는 IL-6 생성을 억제하고 IL-6 과염증 신호를 시험관 내 및 생체 내(Stat3, Akt 및 ERK1/2 경로 내 포함)에서 용량 의존 방식으로 억제한다(Chun, 2010). 본 발명의 예시적인 구체예에 따르면, 항염증에 효과적인 TPA 화합물과 안드로그라폴라이드의 조율 투여는 IL-6의 친염증 활성을 직접 또는 간접적으로 억제, 저하 또는 변경하거나, IL-6의 과염증성 또는 면역 조절 장애(예컨대 림프구, 단핵구/대식세포 및 호중구와 같은 면역 및/또는 염증 이펙터 세포의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 면역 및/또는 아폽토시스 활성의 조절 장애) 효과를 수정하는, 다중 경로 및/또는 메카니즘에 의해 IL-6 활성을 차단 또는 억제하는데 조합적으로 효과적이다.
TPA와 키나아제 조절제 약물 조합
본 발명의 또 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항염증에 효과적인 TPA 화합물은, 과염증 반응을 매개 또는 억제하거나, 또는 면역 및/또는 염증 이펙터 세포(예컨대 림프구, 단핵구/대식세포 및 호중구)의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 아폽토시스 활성을 조절하는데 관여하는 하나 이상의 키나아제의 면역 또는 염증 활성을 직간접적으로 억제, 감소, 활성화 또는 변경시키는 키나아제 조절제 약물 또는 제제와 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 본 발명의 이러한 측면의 예시적인 표적 키나아제는 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK) 및 야누스 키나아제(JAK)를 포함한다. 예시적 구체예 내에서, TPA 및 JAK 억제제를 이용한 COVID-19 질병 피험자의 조율 치료는 ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DAD 또는 본원에 기술된 다른 과염증 병태 또는 증상과 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 임상적으로 감소시킨다. 일 실시예에서, 항염증에 효과적인 TPA 화합물은 JAK 억제제인 자코티닙 하이드로클로라이드 또는 또 다른 JAK 억제제인 바리시티닙과 함께 공동 제형화되거나 함께 투여된다.
JAK 억제 항-COVID-19 치료 전략은 위에서 자세히 논의된 SARS-CoV-2 병인에서 ACE2의 역할을 기반으로 한다. ACE2는 심장, 신장, 혈관, 특히 폐포 상피에서 널리 발현되는 세포 표면 단백질이다. SARS-CoV-2는 분명히 ACE2 매개 세포내이입을 통해 세포에 결합하고 침투한다. 세포내이입의 알려진 조절자 중 하나는 AP2 관련 단백질 키나아제 1(AAK1)이다. AAK1 억제제는 바이러스가 세포로 이동하는 것을 방해하여 바이러스 감염 및 복제를 손상시킬 수 있다. 바리시티닙은 JAK 억제제이자 AAK1 억제제로 이미 COVID-19 피험자에게 안전한 것으로 입증되었다. 매일 2mg 또는 4mg의 바리시티닙을 사용한 치료 용량은 측정 가능한 SARS-CoV2 억제를 이끌어내기에 충분하였다. JAK 억제제 사용에 대한 우려는 JAK가 항바이러스 면역 반응을 매개하는 INF-a를 비롯한 다양한 사이토카인을 억제한다는 보고에 근거한다. 현재 JAK 억제제 자코티닙 염산염에 대한 임상 시험이 있다("신종 코로나바이러스 폐렴(COVID-19)의 중증 및 급성 악화 환자 치료에서 자코티닙 염산염 정제의 안전성과 효능에 대한 연구" (ChiCTR2000030170) 및 "중증 신종 코로나바이러스 폐렴 (COVID-19) 중간엽 줄기세포와 병용하여 룩솔리티닙으로 치료받은 환자: 전향적, 단일 맹검, 무작위 대조 임상 시험”(ChiCTR2000029580)).
TPA와 항-SARS-CoV-2 백신 조합
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항바이러스 또는 항염증에 효과적인 TPA 화합물은 항-SARS-CoV-2 백신 제제와 함께 공동 제제화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여되어 바이러스 감염을 방지 또는 감소시켜 COVID-19 질병 병태 및 증상을 방지 또는 감소시킨다. 전 세계가 SARS-CoV-2 및 기타 과거 및 잠재적인 미래 hSARS 바이러스에 대한 효과적인 예방을 위해 분투하고 있기 때문에 이러한 공동 치료 방법 내에서 사용할 수 있는 예시적인 후보 백신은 현재 매우 많다. 특정 구체예에서, 항-hSARS 바이러스 백신 형태의 2차 치료제는, 현재 연구 진행 중인 다른 많은 다양한 항 hSARS 백신 도구 중에서도, 살아있는 약독화 재조합 hSARS 바이러스 또는 재조합 키메라 hSARS 바이러스, 불활성화 또는 사멸된 hSARS 바이러스, hSARS 바이러스의 면역원성 서브유닛, 예를 들어 hSARS 스파이크(S) 단백질의 전부 또는 일부로 구성된 서브유닛 백신을 포함할 수 있다. 백신은 본 발명의 조합 TPA 치료 방법 및 조성물 내에서 특히 중요한데, 이는, 부분적으로는 현존하는 항바이러스 약물(단일 요법으로 투여됨)이 COVID-19 폐렴을 효율적으로 치료할 것이라는 증거가 불충분하기 때문이다.
백신 개발은 향후 COVID-19 재발을 방지하기 위한 핵심 장기 전략이다. SARS-CoV-2 게놈의 시퀀싱으로 S 단백질 코딩 서열을 기반으로 하는 여러 핵산 기반 백신 후보가 제안되었다.
mRNA-1273 백신
2020년 1월 초, COVID-19 폐렴 발생 직후 SARS-CoV-2의 게놈이 시퀀싱되었다. 모더나(Moderna)의 mRNA-1273 백신 후보는 융합 전 안정화된 바이러스 스파이크(S) 단백질을 암호화하는 mRNA의 합성 가닥이다. 인체에 근육주사 후 SARS-CoV-2의 스파이크 단백질에 특이적으로 항바이러스 면역반응을 유도할 것으로 예측된다. 불활성화되거나 사멸한 병원체, 살아있는 약독화된 바이러스 또는 작은 면역원성 바이러스 서브유닛으로 만든 기존 백신과 달리 모더나의 지질 나노입자 캡슐화 mRNA 백신은 SARS-CoV-2 바이러스에 대한 사용, 취급 또는 환자 노출이 필요하지 않다. 따라서 비교적 안전하고 테스트할 준비가 되어 있다. mRNA-1273이 인체에 안전한 것으로 입증되어 1상을 통과하면 즉각 후속 효능 평가가 진행될 예정이다(NCT04283461). 이 백신 후보는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
INO-4800
INO-4800은 이노비오 파마슈티컬스(Inovio Pharmaceuticals)에서 만든 DNA 백신 후보인다. 모더나의 mRNA-1273과 마찬가지로 INO-4800도 인간 세포에 전달되어 단백질로 번역되어 면역 반응을 유도할 수 있는 유전자 백신이다. 기존 백신에 비해 유전자 백신은 생산 비용이 낮고 생산 및 관리가 더 쉽고 안전하다. 핵산의 단순한 구조는 또한 재조합 단백질 기반 백신에서 발생할 수 있는 잘못된 폴딩의 위험을 방지한다. 그러나 전달되는 플라스미드의 양과 적절한 투여 간격 및 경로는 유전자 백신의 면역원성에 영향을 미칠 수 있는 불확실한 요소이다. 이 백신 후보는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
ChAdOx1 nCoV-19
옥스포드 대학에서 만든 ChAdOx1 nCoV-19 백신은 비복제 아데노바이러스 벡터와 SARS-CoV-2 S 단백질의 유전자 서열로 구성되어 있으며 현재 임상 1/2상 시험(NCT04324606)에 있다. 숙주에서 아데노바이러스의 비복제 특성은 기저 질환이 있는 어린이 및 개인에게 상대적으로 안전하다. 아데노바이러스 기반 벡터는 SARS-CoV-2의 ACE-2 수용체를 발현하는 두 가지 주요 부위인 호흡기 및 위장 상피를 모두 포괄하는 광범위한 조직 향성을 특징으로 한다. 이 백신 후보는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
안정화된 서브유닛 백신
외피 바이러스는 감염을 위해 바이러스 막과 숙주 세포막의 융합이 필요하다. 이 과정은 융합전 형태에서 융합후 형태로의 바이러스 당단백질의 구조적 변화를 수반한다. 융합전 당단백질은 상대적으로 불안정하지만 여전히 강력한 면역 반응을 이끌어낼 수 있다. 퀸즐랜드 대학교는 분자 클램프 기술을 기반으로 SARS-CoV-2에 대한 안정화된 서브유닛 백신을 개발하고 있으며, 이를 통해 재조합 바이러스 단백질이 융합 전 형태로 안정적으로 유지될 수 있다. 이전에 인플루엔자 바이러스와 에볼라 바이러스에 적용된 분자 클램프 백신은 중화 항체 생산을 유도하는 능력이 입증되었다. 또한 37℃에서 2주 후에도 효능이 있는 것으로 보고되었다. 이 백신 후보는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
나노입자 기반 백신
나노입자 기반 백신은 위험에 처한 피험자에게 백신을 접종하기 위해 항원을 통합하고 예방하는 대안 전략을 나타낸다. 캡슐화 또는 공유 결합 기능화를 통해 나노입자는 항원 에피토프, 모방 바이러스와 접합될 수 있으며 항원 특이적 림프구 증식 및 사이토카인 생성을 유발할 수 있다. 또한, 비강내 또는 경구 스프레이를 통한 점막 백신접종은 점막 표면의 면역 반응을 자극할 뿐만 아니라 전신 반응을 유발할 수 있다. 이는 전신 증상을 유발하는 호흡기 바이러스로부터 인간을 보호하는 나노입자 기반 백신의 가능성을 보여준다. 노바박스 인코포레이티드(Novavax, Inc.)는 바이러스 S 단백질에서 파생된 항원을 사용하여 나노입자 기반 항-SARS-CoV-2 백신을 생산하고 있다. 이 단백질은 바큘로바이러스 시스템에서 안정적으로 발현되며 올 여름 임상 1상 진입이 기대된다. 이 백신 후보는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
병원체 특이적 인공 항원 제시 세포
항원 특이적 T 세포가 바이러스 감염뿐만 아니라 암세포를 근절할 수 있다는 지식을 기반으로 바이러스 항원 특이성을 가진 대량의 T 세포를 생성하면 SARS-CoV-2 감염에 대한 저항력이 향상될 수 있다. 대량의 T 세포를 생산하는 효율적인 방법에는 이펙터 T 세포를 활성화할 수 있는 적절한 항원 제시 세포와 해당 이펙터인 세포독성 T 세포의 분화 및 증식이 포함된다. 렌티바이러스 벡터에 의해 전달되는 바이러스 구조 단백질의 보존된 도메인을 발현하는 유전자 변형된 인공 항원 제시 세포(aAPC)는 나이브 T 세포가 분화 및 증식하도록 유도할 수 있다. aAPC 단독 및 항원 특이적 세포독성 T 세포(NCT04299724, NCT04276896)와 조합하여 안전성과 면역원성을 평가하는 여러 시험이 진행 중이다. aAPC는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
자연 살해 세포
COVID-19로 인한 가장 높은 사망률은 노인 환자에서 관찰되는데, 적어도 부분적으로는 나이가 들어감에 따라 면역 체계가 약화되기 때문이다. SARS-CoV-2에 대한 선천적 항바이러스 면역 반응을 강화하는 것을 목표로 하는 접근법은 큰 잠재력을 가지고 있다. 자연 살해(NK) 세포는 바이러스 감염에 대한 신속한 반응을 중재하는 선천 면역 체계의 중요한 구성 요소이다. 이전 연구에서는 NK 세포와 대식세포의 폐 이동이 SARS-CoV 제거에 중요한 역할을 한다는 것을 보여주었다(Chen et al., 2009). 선천적 반응 자체는 CD8+ T 세포와 항체의 도움 없이 사이토카인과 케모카인 생산을 증가시켜 SARS-CoV 감염을 제어할 수 있다. NK 세포 추가가 COVID-19 폐렴에서 바이러스 제거를 매개할 수 있는지 여부는 2020년 말까지 완료될 것으로 예상되는 중국에서 1상 시험(NCT04280224)에서 밝혀질 것이다. 여러 회사가 COVID-19 치료를 위해 항암 NK 기반 제품의 용도 변경을 목표로 하고 있다. 이들 회사 중에는 한국의 녹십자 랩셀(Green Cross LabCell)과 미국의 클레오 파마슈티컬스(Kleo Pharmaceuticals)가 공동개발한 제품도 있다. 또한 미국에 기반을 둔 셀룰라리티(Celularity)는 태반조혈줄기세포 유래 NK세포인 CYNK-001을 개발했다. NK 세포 부스팅 방법 및 조성물은 본원에 기술된 바와 같이 조합 제형 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
재조합 인터페론
I형 인터페론은 바이러스에 감염된 세포에서 분비된다. 단독으로 사용하거나 다른 약물과 함께 사용하면 HCV, 호흡기 세포 융합 바이러스, SARS-CoV 및 MERS-CoV에 대해 광범위한 항바이러스 효과를 발휘한다. 임상시험은 현재 COVID-19 폐렴(NCT04293887) 치료에 대한 안전성과 효능에 초점을 맞추고 있다. I형 인터페론은 본원에 기술된 바와 같이 TPA와 병용 제형 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
중간엽 줄기세포
중간엽 줄기 세포(MSC)는 친염증성 사이토카인을 감소시키고 조직을 복구하기 위해 측분비 인자를 생성함으로써 항염증 기능을 발휘하는 것으로 입증되었다. 전임상 증거는 MSC가 내피 투과성을 회복할 수 있을 뿐만 아니라 염증 침윤을 감소시킬 수 있음을 보여주었다. 중간엽 줄기세포의 면역 조절 효과는 조류 인플루엔자 바이러스에 대해 입증되었으며 COVID-19 폐렴 치료에서 MSC의 역할은 유망하다. 현재 탯줄과 치수(dental pulp)의 MSC는 COVID-19 연구(NCT04293692, NCT04269525, NCT04288102, NCT04302519)에서 임상적으로 테스트되고 있다. MSC는 본원에 기술된 바와 같이 TPA와 함께 조합 제형 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
정맥 면역글로불린
IVIG(정맥 면역글로불린)는 신경학, 피부과 및 류마티스학 분야에서 광범위하게 적용되었다. IVIG는 면역계에 다양한 용량 의존적 효과를 발휘한다. 저용량(0.2-0.4g/kg)에서 IVIG는 항체 결핍에 대한 대체 요법으로 유용하다. 고용량(최대 2g/kg)에서 IVIG는 염증 세포 증식 억제, 식균 작용 억제, 항체 의존성 세포 독성 간섭을 포함하여 강력한 면역 조절 기능을 나타낸다(Jolles et al., 2005). 현재 임상시험은 COVID-19 피험자(NCT04261426)에서 IVIG의 안전성과 효능을 평가하고 있다. IVIG 조성물은 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
SARS-CoV-2 특정 중화 항체
항체에 의해 매개되는 체액성 면역 반응은 바이러스 감염을 예방하는 데 중요하다. 특정 바이러스 표면 에피토프 표적 중화 항체의 개발은 COVID-19를 표적으로 삼는 유망한 접근 방식이다. 앱셀레라(AbCellera, 캐나다)와 일라이 릴리 앤드 컴퍼니(Eli Lilly and Company, 미국)는 감염된 환자의 SARS-CoV-2를 중화시킬 수 있는 기능성 항체를 공동 개발하고 있다. 이를 위해 그들은 COVID-19에서 회복한 최초의 미국 환자 중 한 명으로부터 500만 개 이상의 면역 세포를 통해 스크리닝하고 500개 이상의 유망한 항-SARS-CoV-2 항체 서열을 식별하였으며, 가장 효과적인 것을 찾기 위해 현재 스크리닝이 진행 중이다. 이 접근법은 웨스트 나일 바이러스에 대한 특정 기능적 항체를 제조하는 데 성공적으로 적용되었다. 비르 바이오테크놀로지 인코포레이티드(Vir Biotechnology, Inc.), 임뮤노프리사이스(ImmunoPrecise), 마운트 시나이 헬스 시스템(Mount Sinai Health System), 하버 바이오메드(Harbor BioMed, HBM)도 SARS-CoV-2에 결합하여 중화시키는 모노클로날 항체를 찾기 위해 스크리닝하고 있다. 이들 및 기타 SARS-CoV-2 특이적 중화 항체는 조합 제형에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공하고 본원에 기술된 바와 같이 TPA와 함께 치료 방법을 조정한다.
항-C5a 모노클로날 항체
보체 활성화는 급성 폐 손상과 관련이 있으며, 사이토카인 C5a(C5에서 절단된 생체 활성 분자)는 조직 손상을 매개하는 핵심 이펙터로 관련된다. C5a의 역할에는 호중구 및 T-림프구 모집 및 폐 혈관 투과성 증가가 포함된다. 항-C5a 치료는 폐 간질 및 폐포 공간 으로의 혈관 누출 및 호중구 유입을 감소시켜 폐 손상을 감소 시키는 것으로 나타났다(Guo et al., 2005). TPA와 병용 제형 및 조율 치료 방법에서 2차 제제로 사용하기 위한 예시적인 항-C5a 약물은 베이징 데펭그레이 바이오테크놀로지 컴퍼니(Beijing Defengrei Biotechnology Co.)에서 출시한 BDB-1 및 베이징 스테이드슨 바이오파마(Beijing Staidson Biopharma) 및 인플라알엑스(InflaRx)에서 생산한 IFX-1을 포함한다.
탈리도마이드
최근 탈리도마이드가 다양한 치료적 용도를 위한 항혈관신생, 항염증 및 항섬유화 약물 제제로 다시 등장하였다. 탈리도마이드는 TNF-알파의 합성을 감소시킴으로써 크론병 및 베체트병과 같은 다양한 과염증성 질환의 치료제로 사용되었다. 탈리도마이드는 염증 세포의 침윤을 줄이고 친염증성 사이토카인의 생성을 억제하거나 차단함으로써 H1N1에 감염된 마우스를 치료하는 데 효과적이다(Zhu et al., 2014). 현재 SARS-CoV-2에 대한 과도한 면역/염증 반응으로 인한 폐 손상을 줄이기 위한 탈리도마이드의 면역 조절 효과를 조사하기 위한 연구가 진행 중이다(NCT04273529, NCT04273581). 탈리도마이드는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제제 및 TPA와의 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
핑골리모드
핑골리모드는 난치성 다발성 경화증 치료에 주로 사용되는 경구 면역 조절제이다. 구조적으로 지질 스핑고신-1-인산(S1P)과 유사하며 림프절 T 세포에서 S1P1 수용체의 매우 강력한 길항제 역할을 할 수 있다. 효과적인 결합을 통해 S1P1 수용체가 내재화되고 림프절 T 세포가 차후 격리된다. T 림프구의 폐 유입 감소는 현재 임상 시험(NCT04280588)에서 연구되고 있는 제어되지 않은 면역 병인을 약화시키는 또 다른 접근법이다. 핑골리모드는 본원에 기술된 바와 같이 특정 조합 제제 및 TPA와의 조화 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제이다.
TPA와 항혈관신생 약물 조합
혈관 내피 성장 인자(VEGF) 수치 상승이 급성 호흡곤란 증후군 환자에게서 관찰된다. VEGF는 내피 손상을 유도하고 혈관 투과성을 증가시킬 수 있는 염증 매개체로서 기능한다(Thickett et al., 2001). 다양한 항-VEGF 약물 및 생물학적 제제가 임상용으로 개발되었다. 이 중 베바시주맙은 VEGF 기능(혈관신생 차단 포함)에 결합 및 중화 할 수 있는 재조합 인간화 모노클로날 항체로 현재 미국에서 여러 유형의 암 치료에 승인되어 널리 사용되고 있다. 현재 진행 중인 시험(NCT04275414)에서 SARS-CoV-2 감염을 치료하기 위한 베바시주맙의 효과를 평가하고 있다. 항-VEGF 약물 및 생물제제를 포함하는 항혈관신생 약물 및 생물제제는 조합 제형에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공하고 본원에 기술된 바와 같이 TPA와 함께 치료 방법을 조정할 것이다.
히드록시클로로퀸
본 발명의 다른 예시적인 조합 조성물 및 방법에서, 항-SARS-CoV-2 효과적인 TPA 화합물은 클로로퀸 또는 히드록시클로로퀸과 함께 공동 제형화되고 전달되거나 동시에 또는 순차적으로 공동 투여된다. 이전에 항말라리아 및 항자가면역 약물로 오랫동안 사용된 히드록시클로로퀸은 또한 바이러스와 숙주 세포 사이의 막 융합에 필요한 엔도솜 pH를 증가시켜 바이러스 감염성을 제한하는 것으로 보인다. 한 연구에서 히드록시클로로퀸은 세포 수용체인 ACE2의 글리코실화를 방해하여 SARS-CoV의 복제를 특별히 억제하는 것으로 보고되었다. 최근 시험관 내 연구에 따르면 히드록시클로로퀸은 COVID-19 피험자에서 SARS-CoV-2의 바이러스 부하/역가를 효과적으로 감소시키는 것으로 나타났다(Lan et al., 2020). 중국에서는 히드록시클로로퀸이 COVID-19 관련 폐렴 치료에 다양한 정도로 효과적이라고 보고한 다수의 임상 시험이 신속하게 진행되었다. 프랑스의 소규모 오픈 라벨 비무작위 임상 시험에서 히드록시클로로퀸은 아지스로마이신과 병용 시 긍정적인 효과가 있는 것으로 보고되었다. 미국 FDA는 미국에서 COVID-19를 치료하기 위해 히드록시클로로퀸에 대한 긴급 사용 승인을 발표했으며, 그 이후로 이 약물은 이 목적을 위해 국내에서 오프라벨로 널리 사용되었다. 보다 최근의 연구에서는 COVID-19 질병 치료에 대한 히드록시클로로퀸의 실질적인 임상적 이점에 대한 제한된 증거를 발견했으며 이 약물에 대한 심장 안전 문제로 인해 적어도 하나의 주요 임상 시험이 조기 종료되었다.
글루코코르티코이드
수많은 임상 연구에서 코로나바이러스 및 인플루엔자 폐렴 치료에 대한 글루코코르티코이드의 효능이 보고되었다. 2003년 SARS 전염병 동안 글루코코르티코이드는 면역 조절 요법의 주요 약물이었다. 글루코코르티코이드를 적시에 사용하면 초기 열을 개선하고 폐렴 및 관련 저산소혈증의 중증도를 줄일 수 있다. 그러나 일부 연구에서는 글루코코르티코이드의 유익한 효과를 발견하지 못했고 일부 보고에서는 면역억제, 바이러스 제거 지연 및 부작용이 보고되었다. 패혈증 및 패혈성 쇼크 관리에 대한 국제 지침에 따르면 글루코코르티코이드를 사용하는 경우 적절한 수액 및 승압제 요법으로 혈역학적 안정성이 회복되지 않는 환자에게만 소량 및 단기간 적용해야 한다 .
전신 글루코코르티코이드 투여는 ARDS, 급성 심장 손상, 급성 신장 합병증 및 혈전 형성과 관련된 D-이량체 수치 상승 환자를 포함하여 COVID-19 환자의 CSS 발현을 억제하기 위한 심각한 합병증에 사용되었다. 추가 증거가 없으면 WHO의 임시 지침은 COVID-19 질병과 관련된 바이러스성 폐렴 및 ARDS를 치료하기 위한 전신 코르티코스테로이드 사용을 지원하지 않는다.
전신성 글루코코르티코이드는 현재 SARS-CoV-2 치료에 의심스러운 용도로 사용되고 있지만(잠재적인 면역억제 효과, 바이러스 제거 연장에 기반) 그럼에도 불구하고 COVID-19 질병의 특정 측면을 치료하는 데 이러한 약물의 전향적 치료 용도가 있다. COVID-19 폐렴의 근본적인 병인은 바이러스로 인한 직접적인 손상과 숙주의 과면역 및 과염증 반응으로 인한 실질적인 병원성 영향으로 구성된다. 메틸프레드니솔론 투여는 과도한 면역 및 염증 반응을 억제하는 데 도움이 되는 예시적인 글루코코르티코이드로서 고려되며, COVID-19 피험자에서 그 효과와 안전성을 탐구하기 위한 연구가 진행 중이다(NCT04273321, NCT04263402). 특정 COVID-19 및 ARDS 치료 맥락에서, 그리고 표적 및 단계적 치료 프로토콜에서, 글루코코르티코이드는 본원에 기술된 바와 같이 조합 제형 및 조율 치료 방법에서 전향적으로 유용한 2차 제제를 제공할 것이다.
의약 조성물, 투약, 전달 및 제형
본 발명의 전술한 각각의 예시적 측면과 관련하여, 특정 구체예에서 하나 또는 복수의 TPA 또는 TPA 유사 화합물, 예를 들어 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트(공식적으로 "TPA"; 포르볼-12-미리스테이트-13-아세테이트(PMA)라고도 함)와 같은 상기 화학식 I 또는 화학식 II의 모 TPA 화합물, 또는 모 TPA 화합물의 구조적으로 관련된 기능적 유사체, 접합체, 전구약물, 염 또는 기타 변형 또는 유도체 형태가 사용될 것이다. 본 발명에서 사용되는 TPA 화합물은 다른 임상 관련 활동 중에서도, 항바이러스(예컨대 항-SARS-CoV-2), 항염증, 항-ARD, 항-CSS, 항-PIMS, 항-ESHS, 항-DAD, 항-세포변성, 면역 촉진 및/또는 아폽토시스 촉진 효과를 매개하기 위해 대상체에 투여되는 조성물과 방법에 유용하다. 이러한 조성물 및 방법의 강력하고 다양한 임상 효과는 다양한 범위의 ARDS 및 COVID-19 질병 병태, 증상 및 수반되는 면역학적, 세포, 조직 및 기관 손상 및 기능 장애를 치료 및/또는 예방하는 데 개별적으로 그리고 집합적으로 효과적이다.
일반적으로, 치료된 대상체에서 항바이러스, 항염증, 항-ARD, 항-CSS, 항-PIMS, 항-ESHS, 항-DAD, 항-세포 변성, 면역 촉진 및/또는 아폽토시스 촉진 반응을 효과적으로 이끌어내기 위해, 화학식 I 또는 II의 TPA 화합물의 임상적 유효량 또는 용량(들)이 TPA 치료에 우호적인 대상체에 투여된다. 전술한 바와 같이, 임상 효능은 테스트 및 위약 처리된 대조군 대상체에서 치료 전 및 후 치료 지수를 비교함으로써 입증된다. 예시적 구체예에서, 유효량의 활성 TPA 화합물은 투약 빈도 및 선택된 치료 개입 기간에 걸쳐 단일 또는 다중 단위 투여 형태로 양적 또는 질적으로 유의미한 치료적 이점을 제공하여 치료 대상체에서 다음 중 하나 이상의 증상(들)을 완화시킬 것이다: 바이러스 감염, 과염증, ARD, CSS, PIMS, ESHS, DAD, 상승된 세포변성 활성, 면역억제, 면역 및/또는 염증 세포의 정상적인 아폽토시스 활성 기능 장애, 및/또는 기타 표적 증상(들), 병태(들) 또는 지표(들).
본 발명의 조성물은 전형적으로 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제, 비히클, 유화제, 안정화제, 방부제, 완충제, 및/또는 안정성, 전달, 흡수, 반감기, 효능, 약동학 및/또는 약력학을 향상시키고, 불리한 부작용을 감소시키거나, 약학적 용도를 위한 다른 장점을 제공하는 다른 첨가제와 함께 제형화된 화학식 I 또는 II의 TPA 화합물의 유효량 또는 단위 투여량을 포함한다. 효과적인 투여량은 표적 조건과 임상 및 환자별 요인에 따라 임상의가 쉽게 결정할 수 있다. 인간을 포함하는 포유동물 대상체에게 투여하기 위한 활성 TPA 화합물의 적합한 유효 단위 투여량은 약 10 내지 약 1500 μg, 약 20 내지 약 1000 μg, 약 25 내지 약 750 μg, 약 50 내지 약 500 μg, 약 150 내지 약 500 μg, 약 125 μg 내지 약 500 μg, 약 180 내지 약 500 μg, 약 190 내지 약 500 μg, 약 220 내지 약 500 μg, 약 240 내지 약 500 μg, 약 260 내지 약 500 μg, 약 290 내지 약 500 μg의 범위일 수 있다. 특정 구체예에서, 화학식 I의 포르볼 에스테르 화합물 또는 관련 또는 유도체 화합물의 질병 치료 유효 투여량은 더 좁은 범위, 예를 들어 10 내지 25㎍, 30 내지 50㎍, 75 내지 100㎍, 100 내지 100㎍, 300μg 또는 150~500μg의 더 좁은 범위로부터 선택될 수 있다. 이들 및 다른 유효 단위 투여량은 단일 투여량으로, 또는 다중 일일, 주간 또는 월간 투여량의 형태로, 예를 들어 1일, 1주일 또는 1개월에 1 내지 5회 또는 2 내지 3회 투여량을 포함하는 투여 요법으로 투여될 수 있다. 하나의 예시적인 구체예에서, 10 내지 30㎍, 30 내지 50㎍, 50 내지 100㎍, 100 내지 300㎍, 또는 300 내지 500㎍의 용량이 1일 1회, 2회, 3회, 4회 또는 5회 투여된다. 더 상세한 구체예에서, 50-100㎍, 100-300㎍, 300-400㎍, 또는 400-600㎍의 용량이 1일 1회 또는 2회 투여된다. 추가의 구체예에서, 50-100㎍, 100-300㎍, 300-400㎍, 또는 400-600㎍의 투여량이 격일로 투여된다. 대안적인 구체예에서, 투여량은 체중을 기준으로 계산되며, 예를 들어 1일 약 0.5μg/m2 내지 약 300μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 약 200 μg/m2, 약 1 μg/m2 내지 약 187.5 μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 1일 약 175 μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 1일 약 157 μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 약 1일 125 μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 약 75 μg/m2, 1일 1 μg/m2 내지 약 50 μg/m2, 1일2 μg/m2 내지 약 50 μg/m2, 1일 2 μg/m2 내지 약 30 μg/m2 또는 1일 3 μg/m2 내지 약 30 μg/m2의 양으로 투여될 수 있다.
다른 구체예에서, 투여량은 덜 빈번하게, 예를 들어 격일로0.5μg/m2 내지 약 300μg/m2, 약 1 μg/m2 내지 약 200 μg/m2, 격일로 약 1 μg/m2 내지 약 187.5 μg/m2, 격일로 약 1 μg/m2 내지 약 175 μg/m2, 1일 약 1 μg/m2 내지 격일로 약 157 μg/m2, 격일로 약 1 μg/m2 내지 약 125 μg/m2, 격일로 약 1μg/m2 내지 약 75 μg/m2, 격일로 1 μg/m2 내지 약 50μg/m2, 격일로 2 μg/m2 내지 약 50 μg/m2, 1일 2 μg/m2 내지 약 30 μg/m2 또는 1일 3 μg/m2 내지 약 30 μg/m2의 양으로 투여될 수 있다. 추가 구체예에서, 투여량은 주중에만 주 3회, 주 4회, 주 5회, 다른 치료 요법과 함께, 연속일에, 또는 임상 및 환자-특이적 요인에 따라 임의의 적절한 투여량 요법으로 투여될 수 있다.
본 발명의 치료 조성물의 양, 투여 시기 및 전달 방식은 개인의 체중, 연령, 성별 및 병태, 표적 질병 또는 병태의 급성도 및 중증도와 같은 인자에 따라 개별적으로 일상적으로, 그리고 투여가 예방적 또는 치료적인지, 그리고 약물 전달, 흡수, 약동학 및 효능에 영향을 미치는 것으로 알려진 다른 요인에 기초하여 조정될 것이다. 효과적인 투여량 및 투여 프로토콜은 종종 수일, 1주 이상, 수개월 또는 심지어 수년에 걸친 반복 투여를 포함할 것이다. 효과적인 치료 섭생은 또한 며칠, 몇 주, 몇 달 또는 몇 년 동안 지속되는 하루 또는 하루에 여러 번 투여되는 예방적 투여량을 포함할 수 있다.
본 발명의 의약 조성물은 의도된 치료 또는 예방 목적을 달성하는 임의의 임상적으로 허용되는 경로 및 수단에 의해 투여될 수 있다. 적절한 투여 경로는 모든 효과적인 기존 전달 경로, 장치 및 방법을 포함한다. 현재 시행되고 있는 전달 방법은 정맥 주사 및 주입, 근육 내, 복강 내, 척수 내, 척수강 내, 뇌실 내, 동맥 내 및 피하 주사와 같은 주사 가능한 방법을 포함한다. 또한 경구 및 점막 고체 및 액체 투여 형태, 및 비강내 및 폐내 에어로졸 전달이 고려된다.
본 발명 의 효과적인 투여 형태는 종종 투여 단위의 제조에 적합한 것으로 약제 배합 분야에서 인식되는 부형제를 포함할 것이다. 이러한 부형제는 결합제, 충전제, 윤활제, 유화제, 현탁제, 감미제, 향료, 방부제, 완충제, 습윤제, 붕해제, 발포제 및 기타 통상적인 부형제 및 첨가제를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 치료 조성물은 예를 들어 서방형 담체 또는 부형제, 또는 서방형, 지연형 또는 제어형 방출 중합체의 사용에 의해 지속형, 지연형 또는 다른 제어형 방출 형태로 추가로 투여될 수 있다.
본 발명의 특정 TPA 조성물은 비경구 투여, 예를 들어 정맥내, 근육내, 피하 또는 복강내 투여에 의해 유익하게 전달된다. 이들 투여 형태는 전형적으로 수성 또는 비수성 멸균 주사 용액의 형태로 제공될 것이며, 임의로 항산화제, 완충제, 정균제 및/또는 제형이 포유동물 피험자의 혈액과 등장성이 되게 하는 용질과 같은 첨가제를 함유할 것이다. 수성 및 비수성 멸균 현탁액에는 현탁제 및/또는 증점제가 포함될 수 있다. 제제는 단위 용량 또는 다중 용량 용기로 제공될 수 있다. 본 발명의 추가 조성물 및 제제는 중합체, 리포솜, 미셀, 접합체 및 특정 표적(예를 들어, 폐)에서의 생체이용률을 개선하고/하거나 비경구 투여 후 방출을 연장하기 위한 다른 제제를 포함할 수 있다. 유용한 비경구 제제는 이러한 투여에 적합한 용액, 분산액 또는 에멀젼일 수 있다. 즉석 주사 및 주입 용액, 에멀젼 및 현탁액은 통상적인 관행에 따라 멸균 분말, 과립 및 정제 또는 기타 출발 형태로부터 제조될 수 있다. 유용한 단위 투여 형태는 1일 용량 또는 단위, 1일 하위 용량(sub-dose), 또는 수일에 걸쳐 효과적인 치료 용량일 것이다.
특정 구체예에서, 본 발명의 조성물은 예를 들어 코아세르베이션 기술 또는 계면 중합에 의해, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예를 들어, 리포솜, 알부민 마이크로스피어, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 또는 매크로에멀젼 내에 각각 예를 들어 히드록시 메틸셀룰로오스 또는 젤라틴 마이크로캡슐 및 폴리(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐과 같이 마이크로캡슐, 마이크로입자 또는 마이크로구체에 전달하기 위해 캡슐화된 화학식 I 또는 II의 TPA 화합물을 포함할 수 있다. 마이크로캡슐화 공정은 잘 알려져 있으며 본 명세서에 기재된 활성 암파카인을 함유하는 마이크로 입자를 제조하기 위해 일상적으로 구현될 수 있다.
상기 언급된 바와 같이, 특정 구체예에서 본 발명의 방법 및 조성물은 용해도, 생체이용률 또는 다른 성능 기준을 향상시키기 위해 제약상 허용되는 염, 예를 들어 상기 기술된 TPA 화합물의 산 부가 또는 염기 염을 사용한다. 약제학적으로 허용되는 부가염의 예는 무기산 및 유기산 부가염을 포함한다. 적합한 산 부가염은 무독성 염, 예를 들어 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 황산염, 황산수소염, 질산염, 인산염 및 인산수소염을 형성하는 산으로부터 형성된다. 추가의 약제학적으로 허용되는 염의 비제한적인 예로는 나트륨염, 칼륨염, 세슘염 등과 같은 금속염; 칼슘염, 마그네슘염 등의 알칼리 토금속; 트리에틸아민염, 피리딘염, 피콜린염, 에탄올아민염, 트리에탄올아민염, 디시클로헥실아민염, N,N'-디벤질에틸렌디아민염 등의 유기 아민염; 아세테이트, 시트레이트, 락테이트, 숙시네이트, 타르트레이트, 말레이트, 푸마레이트, 만델레이트, 아세테이트, 디클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 옥살레이트 및 포름산염과 같은 유기산염; 메탄설포네이트, 벤젠설포네이트 및 p-톨루엔설포네이트 염과 같은 설포네이트; 및 아르기네이트, 아스파르기네이트, 글루타메이트, 타르트레이트 및 글루코네이트 염과 같은 아미노산 염을 들 수 있다. 적합한 염기성 염은 무독성 염, 예를 들어 알루미늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨, 나트륨, 아연 및 디에탄올아민 염을 형성하는 염기로부터 형성된다.
다른 구체예에서, 본 발명의 방법 및 조성물은 화학식 I 또는 II의 포르볼 에스테르의 전구약물을 사용한다. 전구약물은 활성 모약물을 생체 내에서 방출하는 임의의 공유결합 캐리어로 간주된다. 본 발명에서 유용한 전구약물의 예는 치환기로서 히드록시알킬 또는 아미노알킬을 갖는 에스테르 또는 아미드를 포함하고, 이들은 상술한 바와 같은 화합물을 무수 숙신산과 같은 무수물과 반응시켜 제조할 수 있다. 본 발명의 관련 측면은 또한 상기 화합물의 생체내 대사 산물을 사용하는 화학식 I 또는 II의 포르볼 에스테르를 포함하는 방법 및 조성물을 포함하는 것으로 이해될 것이다 (대상 전구체 화합물의 투여 후 생체내에서 생성되거나, 대사 산물 자체의 형태로 직접 투여됨). 이러한 생성물은 예를 들어 주로 효소 과정으로 인해 전구체 약물 또는 투여된 화합물의 산화, 환원, 가수분해, 아미드화, 에스테르화 등으로부터 생성될 수 있다. 따라서, 본 발명은 TPA 화합물의 대사 산물을 생성하기에 충분한 기간 동안 화학식 I 또는 II의 포르볼 에스테르 화합물을 포유동물 체액, 세포, 조직 샘플 또는 대상체와 접촉시키는 것을 포함하는 공정에 의해 생성된 TPA 화합물, 유도체 및 대사물의 제조 및 사용을 위한 방법 및 조성물을 포함한다. 함(예를 들어, 포유동물에게 검출 가능한 용량으로 비경구적으로 투여된 방사성 표지 화합물로 시작하여, 대사가 일어나도록 충분한 시간을 허용하고 표지 화합물의 전환 산물을 소변, 혈액 또는 다른 생물학적 샘플로부터 분리).
본 명세서에 개시된 발명은 또한 비제한적인 예로서 포유동물 대상체에서, 바이러스 감염, 과염증, ARD, CSS, PIMS, ESHS, DAD, 증가된 세포변성 활성, 면역억제, 면역 및/또는 염증 세포의 정상적인 아폽토시스 활성의 기능장애, 및/또는 본원에 기재된 임의의 다른 표적 증상(들), 병태(들) 또는 지표(들)를 포함하는 질병의 위험 수준, 존재, 중증도 또는 치료 지표를 진단하거나 달리 관리하기 위한 진단 조성물을 포함하는 것으로 이해될 것이다. 예시적인 진단 방법은 표지된(예를 들어, 동위원소 표지된, 형광 표지된 또는 통상적인 방법을 사용하여 표지된 화합물의 검출을 허용하도록 달리 표지된) 화학식 I 또는 II의 TPA 화합물을, 하나 이상의 표적 증상(들)을 나타낼 위험에 처하거나 나타내는 포유동물 대상체(예를 들어, 세포, 조직, 혈장, 장기 또는 개체)에 접촉시키는 것을 포함하는 예시적인 진단 방법 , 기관 또는 개인)와 접촉시킨 후, 임의의 광범위한 공지된 분석법 및 라벨링/검출 방법을 이용하여 표지된 TPA 화합물의 존재여부, 위치, 대사 및/또는 결합 병태를 탐지하는 것을 포함한다. 특정 구체예에서, TPA 화합물은 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된 하나 이상의 원자를 가짐으로써 동위원소-표지된다. 개시된 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 각각 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F 및 36Cl과 같은 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소를 포함한다. 그 다음 동위원소 표지된 화합물은 개인 또는 다른 피험자에게 투여되고 후속적으로 전술한 바와 같이 검출되어 종래의 기술에 따라 유용한 진단 및/또는 치료 관리 데이터를 산출한다.
숙련된 기술자가 이해하는 바와 같이, 본 발명은 예시 목적으로만 제공되는 상기 본원에 개시된 특정 화합물, 제제, 공정 단계 및 물질에 제한되지 않는다. 전체적으로 본 발명의 발견 및 교시에 따라, 이러한 화합물, 제형, 공정 단계 및 재료는 과도한 실험 없이 동등한 형태 및 목적으로 변경, 확장 또는 대체될 수 있다. 마찬가지로, 본 명세서에서 사용된 용어는 예시적인 실시예를 설명하기 위한 예시일 뿐이며, 본 발명의 범위를 제한하려는 의도가 아니다. 다음 예는 동일하고 예시적이며 비제한적인 목적으로 제공된다.
실시예 I
TPA 화합물은 중증 COVID-19 바이러스 질병에 수반되는 갑작스러운 급성 호흡기 증후군(SARS)을 포함하여 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)을 예방하고 치료하는 데 효과적이다.
본 발명자들은, ARDS, COVID-19 질병 및 위에 자세히 설명된 기타 과염증 및 면역 조절 장애 병태를 앓고 있는 환자의 신규하고 위중한 항바이러스, 면역 조절 및 항과염증 임상 이점을 매개하기 위해, 본 발명의 활성 TPA 화합물에 의해 영향을 받는 별개의 세포, 분자, 유전자 조절, 생화학적, 생리학적 및 병원성 이펙터, 메카니즘, 표적, 경로 및 반응을 상세히 기술하였다. 이 광범위한 임상적 유용성 내에서 TPA의 모든 대상과 활동을 예시하려는 시도는 기술자의 실질적인 요구와 기대를 초과할 것이다. 설명의 경제성과 명료성을 위해, 본 발명자들은 본원에 개시된 TPA 화합물의 활성 및 임상 메카니즘 및 방법의 전 범위를 실질적으로 실행하는 것과 관련된 세포, 분자, 유전자 조절, 생화학적, 생리학적 및 병리학적 연구 및 임상 진단 분석 기술, 도구 및 방법의 모든 방식과 형태를 참조로 통합하였다.
ARDS와 관련된 본 발명의 특정 구체예는 일반적으로 TPA 화합물의 광범위한 활성 및 임상적 이점을 예시한다. 인간 SARS 코로나바이러스, SARS-CoV-2(COVID-19)에 의해 유발된 ARDS의 특정 사례에서, ARDS의 치료 및 예방을 위한 TPA의 관련 조성물 및 용도는 그러한 활동 및 이점의 폭넓은 호흡을 사용하고 유도한다. 예를 들어, TPS 화합물의 임상적 최적화와 ARDS 치료 방법을 조사하기 위한 본 발명자들의 파일럿 연구는 TPA 화합물이 비정상적인 이펙터 세포, 분자 및 생화학적 이펙터 및 면역 기능 장애 및 과염증을 유발하는 다운스트림 영향을 표적으로 삼아 제거 또는 감소시키는 다수의 중요한 면역-촉진 및 항염증성 표적, 메커니즘 및 경로를 밝혀내는 한편, 다른 측면에서, 본 발명의 TPA 화합물 및 방법은 유익한 면역 조절 세포 및 이들과 관련된 분자 및 생화학적 이펙터와 상호작용하고 이를 유도하거나 촉진하여 유익하게 변형시키는 것으로 밝혀졌다. 마찬가지로 TPA 화합물은 사이토카인 폭풍 증후군(CSS), 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS), 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 및 중증 COVID-19 관련 ARDS에 수반되는 혈관 울혈 및 혈전 병태(예컨대 이들 병태에 수반되는 다른 세포, 조직 및 장기 손상 중에서도 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증, 및 괴저)와 같은, 관련된 면역장애 및 과염증성 병태를 매개하는 것으로 알려진 다른 면역 및 염증 표적을 억제, 예방, 촉진 및/또는 변형한다.
본 발명자들에 의해 진행 중인 파일럿 연구와 함께 본 발명은 ARDS 병태 및 증상뿐만 아니라 중증 COVID-19 질병과 관련된 다른 병리학적 병태 및 증상의 감소 및/또는 예방을 강력하게 매개할 TPA의 광범위한 면역 및 항염증 효과를 예시한다. 이러한 맥락에서 TPA 화합물은 주요 면역 및 염증 조절 세포, 유전자 표적 및 사이토카인, 케모카인 및 키나아제와 같은 분자 및 생화학적 표적을 통해 매개되는 다수의 입증된 면역 및 항염증 활성을 가지고 있다. 예시적인 파일럿 연구는 TPA 화합물이 림프구의 활성화, 증식 및 생존과 관련된 모든 범위의 면역 효과를 촉진함으로써 림프구 감소증을 효과적으로 치료하고 예방할 것임을 보여주었다. 추가 교시에 따르면, ARDS를 나타내는 SARS-CoV-2 피험자에게 투여된 TPA 화합물은 임상적으로 정상적인 건강, 기능 및 림프구(T 및 B 세포 포함)의 생존을 지원하고 중증 COVID-19/ARDS 사례에서 심각하게 손상되고 수치적으로 감소하는 것으로 알려진 NK 세포를 지원한다. 관련 측면에서, TPA는 MAPK 및 JAK와 같은 면역 조절 키나아제와의 상호작용을 통해 프로-아폽토시스 효과를 발휘하는 것으로 나타났다. 이는 비정상적인 프로그래밍 및 병인 또는 ARDS, CSS, PIMS, ESHS 및 중증 COVID-19 질병과 관련된 기타 병태의 주요 이펙터로 연루된 호중구의 활성화를 강력하게 교정할 것이다. 호중구는 SARS-CoV-2 단백질(및 COVID-19 질병 발달 과정에서 나타나는 기타 긴급한 염증 유발 요인)에 의해 명백히 "하이잭"되고 재프로그래밍되어 호중구 면역 및 염증 활동의 심각한 조절 장애로 이어진다. 여기에는 호중구의 다양한 과염증 활동과 그 상류 조절 세포 및 신호가 포함되며, 여기에는: 친염증성 사이토카인 및 케모카인의 과상승(hyper-elevation); 폐 및 폐포 구획으로의 증가된 호중구 및 대식세포 이동(유출)(혈관 및 내피 장벽의 파괴에 의해 보조됨); 병원성 호중구 및 대식세포 활성의 과상승(조직 및 세포외 기질 파괴적 탈과립화, 세포 및 조직의 산화 스트레스 증가(예컨대 과산화물 및 기타 ROS의 과대 방출을 통해), 과도한 식작용 및 폐포 및 혈관 울혈 및 혈전 형성과 관련된 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착); 및 정상적인 호중구 및 대식세포 아폽토시스의 조절 장애(자발적 아폽토시스을 방해하고 식균작용 유발 세포사(PICD)를 억제함으로써 부분적으로 SARS-CoV-2 N 단백질에 의해 매개될 가능성이 있음; 이는 호중구 및 대식세포 수명을 비정상적으로 연장하고 그렇지 않으면 염증 활동을 조절하지 않아 COVID-19 조직 및 장기 발병에 크게 기여한다)이 포함된다.
파일럿 조사를 통해 확립된 TPA의 추가 활동은 중증 COVID-19 질병에 걸리는 CSS 및 ARDS와 결정적으로 관련된 과도하게 상승된 친염증성 사이토카인 활성화를 차단하고 감소시키기 위한 TPA의 집중적인 활동을 입증한다. TPA 화합물은 기술된 바와 같이 다양한 표적, 메커니즘 및 경로를 통해 CSS 및 ARDS에 직접적으로 연루된 친염증성 사이토카인의 과유도, 과합성 및 과활성을 차단하거나 손상시킨다. 이러한 활동을 통해 우리의 증거는 본 발명의 항염증 TPA 화합물 및 방법이 림프구 감소증(예를 들어, T, B 및 NK 림프구의 친염증성 과활성화를 차단하거나 억제함으로써 활성화 유도 림프구 세포 사멸을 감소시킴), 및 폐 실질, 폐포 공기 공간 및 기타 CSS에 영향을 받는 조직 및 장기에서 과침윤, 과활성화 및 파괴적인 식세포 및 호중구의 수치 상승과 같은, SARS-CoV-2 감염의 과염증 후유증을 추가로 차단하고 손상시킬 것임을 보여준다. 친염증성 사이토카인 발현 및 활동을 제한하는 TPA의 이러한 항염증 효과는 산화 스트레스; 내피 및 상피 장벽 파괴; 폐 및 기타 CSS에 영향을 받는 조직 및 기관에 대한 섬유증 및 기타 염증성 손상; 림프절의 염증성 손상, 손실 및 위축; 비장의 염증성 손상 및 위축; 패혈증; 독성 쇼크 증후군(TSS) 및 기타 병리를 비롯한, COVID-19/CSS/ARDS-관련된 병리학적 병태의 감소를 매개할 것이다.
경제적인 서술 목적상, 본 발명자들은 독자에게 공지의, 이용가능한 연구 및 진단 분석 도구 및 방법(시험관 내 세포 기반, 생화학, 분자 및 유전자 조절 분석, 생체 내 조사 및 진단 임상 분석의 전 범위를 망라함)을 소개하는 문헌들과 함께, 명세서 전반에 걸쳐 대표적인 과학적 실시예, 설명 및 분석법을 제시한다. 이러한 연구 분석 및 임상 진단 도구 및 방법은 제시된 지원 학습 기사에 대한 자세한 설명 및 상호 참조 인용을 따른다. 본원에 인용된 각각의 간행물은 연구 및 임상 프로토콜 및 당업계에 알려지고 용이하게 실행되는 목적을 목표로 하는 기술 자료 및 방법으로 이 설명을 보충하는 것을 포함하여 모든 목적을 위해 포함된다.
본 명세서에서 본 발명의 이해 및 실시를 더욱 명확하게 하기 위해, 본 발명자들은 현재 동물 및 인간 대상체에서의 전임상 및 임상 시험으로 파일럿 연구를 확장하고 있으며, SARS-CoV-2 감염과 관련된 ARDS 및 CSS를 감소 또는 예방하기 위해 항바이러스 및 항염증 TPA 화합물의 임상적 사용에 초점을 맞춘다.
ARDS 치료 및 예방을 위한 TPA 화합물의 전임상 연구
ARDS를 치료하고 예방하기 위해 다중의 광범위한 면역-촉진 및 항염증 효과를 매개하기 위한 본 발명의 TPA 화합물 및 방법의 효능은 잘 알려진 ARDS의 내독소-유도된 쥐(murine) 모델을 사용하는 연구에 의해 추가로 입증될 것이다. 이 모델을 사용하면 TPA 화합물이 폐 조직병리학적 변화(호중구의 혈관외 유출, 폐 실질 및 폐포 기공에서 혈관 외부로 유출되고 응고된 적혈구에 의해 표시되는 혈전증 및 폐포 벽의 비후를 포함)를 감소시키는 것으로 나타날 것이다. TPA 화합물은 또한 연구 대상자의 기관지 폐포 세척(BALF) 샘플에서 발견된 단백질 함량의 내독소-유도된 증가를 억제할 것인데, 이는 내피 및 상피 장벽의 파괴에 대한 TPA의 보호 기능을 확인해준다. 예를 들어 TNFα(종양 괴사 인자-알파)의 문서화된 내독소 유발 과다 자극에 의해 확인되는 바와 같이, 친염증성 사이토카인의 내독소-유도된 방출 역시도 TPA로 처리된 연구 대상체에서 감소될 것이다. 이러한 연구에서 TPA 처리된 피험자로부터 세척된 호중구는 또한 활성 산소 종(ROS)을 더 낮은 수준으로 생성하는 것으로 나타날 것인데, 이는 호중구-조절 및 다른 면역-영향 신호-캐스케이드 표적 및 본원에 설명된 경로를 통해 매개되는 TPA 화합물의 항염, 면역-촉진(림프구 보호 포함) 및 장벽-보호 효과를 추가로 입증한다. 여기에 제공된 광범위한 참고문헌에 따른 관련 검정은 과산화물 유도 장벽 기능 장애에 저항하는 시험관 내피 단일층의 능력에 대한 TPA 화합물의 보호 효과를 확인할 것이다. 이러한 데이터는 TPA가 특히 중증 COVID-19/ARDS 발병기전에서 핵심 역할을 하는 것으로 추정되는 면역 및 염증 이펙터 세포에 대한, 그리고 분화, 활성화, 사이토카인 및 수용체 합성/반응 활동, 이동 및 장수(longevity)/아폽토시스를 프로그래밍하고 구동하는 상위 신호 및 분자/유전 조절 및 "스위치" 이펙터에 대한, 직접적인 영향을 통해, 면역-촉진 기능을 광범위하게 조절하고 과염증성 기능을 억제하거나 "재프로그램"한다는 것을 확인시켜준다.
내독소-유도된 ARDS의 마우스 모델에서, TPA iv 조성물은 폐에 내독소 점적 4시간 후 마우스 꼬리 정맥에 주사된다. 이 시점에서 마우스는 저체온 쇼크를 나타내고 폐는 이미 호중구 침윤(염증) 징후를 보인다. 따라서, 이 모델은 진행 중인 ARDS 병원성 발달에 대한 TPA의 효과를 입증한다. 주사 후 24시간 및 48시간 모두에서, 폐의 조직병리학적 변화는 TPA 화합물을 투여받은 마우스에서 현저하게 억제될 것이다. 48시간에 TPA의 면역 및 항염 효과는 BALF 샘플에서 TNFα 함량의 감소를 포함하여 BALF 샘플에서 단백질 유출의 감소에 의해 추가로 입증될 것이다. TPA를 투여받은 연구 마우스의 기관지 폐포 구획으로부터의 세척된 호중구는 48시간 후에 ROS 생성에서 현저한 감소를 나타낼 것이며, TPA와 함께 사전 배양된 내피 단층은 마찬가지로 과산화물 유도 장벽 기능 장애에 대한 증가된 저항성을 나타낼 것이다.
연구 설계 내독소 유발 폐 손상에 대한 TPA 효과를 평가하기 위해 LPS 내독소 또는 식염수를 이전에 설명된 대로(Zhang et al., 2013), 이소플루란으로 마취된 20-25g C57Bl/6 마우스의 폐로 전달한다. 용량 의존적 안전성 및 효능을 평가하기 위해 상이한 연구 그룹에 대해 상기 설명에 따라 중첩된 범위의 다중 TPA 용량을 선택하고, LPS 투여 4시간 후 꼬리 정맥에 주사하였다. 동물의 체온은 2시간마다 결정된다. 24-48시간 후 분석을 위해 동물을 희생시킨다.
누출 및 폐 염증 평가를 위해 Evans Blue Dye(EBD)-알부민 접합체(4% BSA 용액 중 0.5% EBD)를 실험 종료 1시간 전에 꼬리 정맥(30mg/kg)에 투여한다. 마취된 동물에서 흉강을 열고 혈액을 심장 천자에 의해 샘플링하여 순환하는 EBD 수준을 결정한다. 전체 병리학적 검사, 조직병리학 및 세척 샘플 수집을 위해 폐를 세척한다.
이 연구 디자인은 ARDS의 첫 번째 임상 징후에 따라 치료 개입이 시작될 때 TPA 효능을 추적할 수 있게 한다. 연구 포인트를 인간 ARDS 병태 및 반응과 추가로 연관시키기 위해 BALF에서 동물 온도 및 호중구 침윤을 면밀히 모니터링한다. 마우스는 LPS 투여 후 4-6시간에 정점에 달하는 저체온 반응을 경험한다. 식염수 또는 LPS를 투여한 후 BALF의 백혈구(WBC) 및 호중구의 총 세포 수를 측정한다. LPS 투여 후 4시간 이내에, TPA 처리된 피험자의 BALF에 있는 호중구의 존재는 식염수 주입 대조군 피험자와 비교하여 이미 상당히 감소할 것이다.
이 모델에서 ARDS 발병기전을 추가로 평가하기 위해, 폐 절편의 헤마톡실린 및 에오신 염색은 또한 과염증성 폐 발병기전의 TPA 억제를 입증할 것이다. LPS로 유발된 폐 염증이 48시간에 더 심각한 단계로 진행됨에 따라 TPA 치료를 받은 피험자는 호중구와 RBC가 폐 간질 공간과 폐포 공기 공간으로 현저하게 감소하고 폐포 벽의 부종이 감소한다.
폐 투과성 및 호중구 침윤에 대한 TPA 효과는 LPS-유도 EBD 혈관외 유출의 TPA 억제에 의해 표시되는 바와 같이 처리된 피험자에서 혈관외 유출 단백질 및 사이토카인의 감소 수준과 상관관계가 있을 뿐만 아니라 BALF 및 폐 간질 및 폐포 영공의 조직학적 샘플에서 단핵구/대식세포 및 호중구 수의 감소와도 관련이 있다. BALF TPA 처리 마우스에서 대식세포, 림프구 및 호중구 사이의 균형은 또한 림프구에 대한 TPA의 상당한 보호 활성(ARDS에서 관찰된 림프구 감소증을 개선하기 위해)과 대식세포 및 호중구 집단의 과도한 자극 및 아폽토시스-촉진 조절의 억제를 보여줄 것이다(이에 의해 WBC에 대한 이들 세포의 총 수와 비율이 감소한다).
ARDS에 대한 TPA 효능을 추가로 특성화하기 위해 ROS를 생성하는 TPA 및 대조군 마우스의 BALF WBC의 능력을 측정한다. WBC ROS 생산은 TPA를 받은 마우스에서 상당히 낮을 것이다.
이 모델은 ARDS 질병 발달 및 보호와 관련된 친염증, 면역-촉진, 항염증 및 기타 사이토카인 효과에 대한 TPA 효과의 설명을 추가로 제공한다. 이 모델에서 내독소 유발 ARDS 피험자는 IL-10을 포함하여 친염증성 사이토카인에서 심대한 과염증성 증가를 나타낸다. TPA는 BALF 및 이들 피험자의 조직학적 샘플에서 측정된 IL-6, IL-10, TNFα, MIP2 및 기타 친염증성 사이토카인의 과상승을 차단하거나 감소시킨다.
내피 및 상피 장벽 무결성에 대한 TPA 보호 효과와 산화 스트레스에 대한 보호를 평가하기 위해 내피 및 상피 단층 장벽 기능을 직접 평가한다. 하나의 프로토콜에서, 인간 폐동맥 내피 세포(HPAECs)는 하부 챔버에서 TPA의 존재 하에 콜라겐화된 폴리에스터 인서트 상의 단층에서 성장된다. 분석 전에 인서트는 직접적인 ROS 소거를 피하기 위해 신선한 웰로 옮겨진다. 상단 챔버에는 FITC-덱스트란이 로드되고 단층은 호중구 산화 버스트 250 μM H2O2의 부종 유발 제품으로 자극된다. 표시된 HPAEC 장벽 기능 장애(경내피 전기 저항(TER) 연구에 의해 입증됨)는 H202에 대한 반응으로 대조군 대상에서 관찰되며, 이 반응은 ASC의 TPA 처리에 의해 상당히 약화되거나 차단될 것이다.
다음의 예시적인 프로토콜 및 자료는 본 발명의 예시적인 측면을 발전시키기 위해 현재 구현되고 있다.
평생 작업 범위: 마우스에서 TPA/ARDS 연구
1. 목표
1.1. 성인 호흡곤란 증후군(ARDS) 마우스 모델에서 폐 과염증을 예방하기 위한 염증 조절 약물 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트(TPA)의 효능을 확인하기 위함.
2. 재료 및 상세
2.1. 즉시 투여할 수 있는 형식 또는 스톡 농도의 시험군 및 대조군 물품/세포
2.2. 세포 제품의 해동 및 희석; 보관 및 안정성 정보에 대한 지침
2.3. 연구 프로토콜은 연구 시작 전에 스폰서의 승인을 받아야 한다.
표적 데이터/전달물
3.1. 모든 연구 데이터를 포함하는 평생(In-Life) 리포트 초안
o 개별적으로 표로 작성되고 QC된 생동물 관찰 데이터, 평생 관찰, 용량 그룹 지정, 체중 및 부작용
o 부검 소견 및 육안 평가
3.2 조직병리학 보고서
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TPA 치료가 Th1 대 Th2 활성화에 대한 이러한 반응을 편향시키는 것을 포함하여 면역/염증 반응을 조절하고 약화시킨다는 입증
TPA는 염증 신호 및 세포의 과잉 활성화와 관련된 친염증성 사이토카인의 과발현을 차단하거나 감소시킴으로써 CSS를 포함한 바이러스로 유도된 과면역 및 과염증 활성화를 조절하고 약화시켜 중증 COVID-19 질병의 가능성을 최소화한다(염증 신호 및 세포 반응의 과활성화와 관련된 전 염증성 사이토카인의 과발현을 차단하거나 감소시킴으로써). 특정 구체예에서 TPA는 과면역 및 과염증 활성과 관련된 Th2 T 세포 반응의 감쇠된 면역-선택적 감쇠를 매개할 것이고, 유익한 Th1 편향 T 보조 T 세포 분화 및 마커 발현에 대한 중성 또는 강화 효과를 매개할 것이다. 동물 또는 인간 대상체에 대한 TPA 투여가 일반적으로 Th1 대 Th2 특이적 사이토카인/케모카인/성장 인자 발현 패턴으로 편향된 조절된/감쇠된 면역 반응을 매개할 것임을 입증하는 데 다양한 분석이 유용할 것이다(비처리 대조군 대상체에서 구해진 패턴에 비해). 하나의 예시적인 분석에서, TPA 치료를 받거나 받지 않은 ARDS 유도, SARS-CoV-2 감염 또는 hCoV 슈도바이러스 노출 피험자(즉, ARDS 유도 전, 또는 바이러스 또는 슈도바이러스 노출/활성화 전, 도중 또는 후의 치료)로부터의 말초 혈액 단핵 세포를 분석하여 마커 발현, 조직학, 조직화학 및 TPA 처리 대 비처리 대조군 샘플에서 면역 세포의 분화를 평가한다. 특정 분석에서 PBMC 샘플은 ARDS 유도(예컨대 내독소 유도 사용) 후 바이러스 없이 동물 피험자로부터 분리되는 반면, 다른 유용한 분석에서는 Th1 편향 대 Th2 편향 T 세포 분화 및 마커 발현을 평가하기 위해, hCoV-2에 노출된 피험자 또는 CoV 슈도바이러스에 노출된 동물 또는 인간 대상체의 샘플을 사용한다. 예시적인 연구에서, TPA-처리된 시험 대상체 및 비처리된 대조군 모델 대상체에서의 세포성 면역 반응은 다색 T-세포 ELISpot(예를 들어, CTL Laboratories에 의해 제공됨)을 사용하여 평가될 수 있다. CD4+ Th1 반응은 예를 들어 IFN-γ를 측정하여 식별되는 반면 CD4+ Th2 반응은 다른 유용한 활성화/분화 마커 중에서 IL-5를 측정하여 식별할 수 있다. TPA는 Th1 T 세포 활성화/분화 쪽으로 편향된 규제되고 약화된 면역/염증 반응을 중재하고 컨트롤에 비해 Th2 활성화/분화를 약화시켜 CSS 및 ARDS와 관련된 과면역 및 과염증 활성화를 낮춘다.
효소면역흡수점(ELISpot)은 단일 세포에 의한 사이토카인 또는 면역글로불린 분비 빈도를 정량적으로 측정하는 매우 민감하고 특이적인 검사이다. ELISpot은 감염, 암, 알레르기 및 자가면역 질환의 특정 면역 반응을 조사하기 위해 널리 적용되어왔다. ELISpot은 100,000개 세포 중 1개를 검출할 정도로 낮은 현재 사용 가능한 가장 민감한 세포 분석법 중 하나이다. FluoroSpot 분석은 ELISpot 분석의 변형으로, 단일 웰에서 여러 사이토카인을 분석하기 위해 형광을 사용한다. ELISpot 분석은 96-웰 플레이트에서 수행되며 자동 ELISpot 판독기가 분석에 사용된다. 따라서 분석은 견고하고 수행하기 쉬우며 대규모 시험에 적합한다. T 세포 ELISpot은 전염병, 암, 알레르기 및 자가면역 질환의 특정 면역 반응 연구에 널리 적용된다. 본 발명 내에서, T-세포 ELISpot 분석은 ARDS 및 본원에 기술된 기타 관련 병태(예컨대 폐렴, 혈관염, 혈전 형성 등)의 위험 및 발생을 낮추기 위해, SARS-CoV-2 및 기타 호흡기 바이러스 감염에 대한 건강하고 균형 잡히고 약화된 면역 및 염증 반응을 매개하기 위해 개발을 안내하고 TPA 및 관련 화합물 의 효능 및 안전성을 모니터링하는 데 특히 유용하다.
CSS 분석
추가 분석은 COVID-I9 환자의 ARDS에 기여하는 CSS 및 이와 관련된 유해한 과면역 및/또는 과염증 반응을 예방하기 위한 TPA의 강력한 활성을 규명한다. 아직 완전히 이해되지 않은 SARS-CoV-2 감염 및 COVID-19 질병에 수반되는 복잡하고 불확실한 면역 및 염증 상호작용을 고려할 때 이러한 분석의 대상은 근본적이며 - CSS와 관련된 친염증성 사이토카인의 발현을 유도하는 Ii-Key-SARS-CoV-2 펩타이드의 가능성에 초점을 맞춘다.
예시적인 사이토카인 검정은 예를 들어 세포 배양 상청액(SN)에서 또는 혈청 또는 혈장과 같은 생물학적 유체에서 동시에 여러 사이토카인을 정량화하도록 적응된 유동 세포측정 시스템을 사용하는 변형된 세포측정 비드 어레이(CBA) 스크린을 사용한다. CBA 시스템은 분석물을 효율적으로 포착하기 위해 항체 코팅된 비드와 함께 유세포 분석법이 제공하는 광범위한 형광 검출 범위를 사용한다. 어레이의 각 비드는 고유한 형광 강도를 가지므로 서로 다른 분석물을 캡처하는 비드가 혼합되어 단일 튜브에서 동시에 실행될 수 있다. 이 방법은 기존의 ELISA 및 웨스턴 블롯 기술과 비교하여 결과를 얻기까지의 시간과 샘플 양을 크게 감소시켜준다.
간략하게 설명하면, 표적 사이토카인은 비드에 접합된 포획 항체에 의해 용해물, 혈청 또는 상청액으로부터 포획된다. 형광색소로 표지된 검출기 항체는 다양한 포획된 사이토카인에 결합하고 형광 신호는 유세포 분석기에 의해 샘플을 수집하는 동안 기록된다. 신호의 강도는 각 사이토카인의 농도에 따라 다르며 단백질 표준 곡선을 사용하여 특정 사이토카인의 농도를 계산하는 데 사용할 수 있다. 서로 다른 포획 사이토카인에 대해 서로 다른 크기와 비드의 형광을 사용하여 서로 다른 사이토카인에 대해 기록된 신호는 하나의 테스트 샘플에서 여러 분석물에 대한 유세포 분석으로 구별할 수 있다.
항체 코팅된 비드에 포획되고 검출 항체로 표지된 각 사이토카인에 의해 제공되는 형광 신호는 평균 형광 강도(MFI)로 정의된다. 이 값은 표품(주어진 분석물의 알려진 농도를 가진 샘플)에서 MFI를 측정하여 생성된 표준 곡선을 사용하여 테스트 샘플의 각 사이토카인에 대한 농도로 변환될 수 있다. 세포가 ARDS 유도 또는 바이러스 또는 슈도바이러스 노출 후 사이토카인을 분비할 경우 증가된 사이토카인 농도가 세포 배양 상청액에서 검출되어, TPA 처리 값이 ARDS 유도 및/또는 자연 또는 인공 바이러스 감염에 대한 반응으로 대조군 값을 비교할 수 있게 한다.(예를 들어, TPA가 대조군 대상/샘플에서 그렇지 않으면 활성화되거나 상승된 여러 염증 유발 사이토카인의 활성화/발현을 실질적으로 감소시킨다는 것을 입증하기 위해).
TPA 화합물의 효능과 최적 투여량을 입증하기 위한 이러한 스크리닝 분석의 유용성은 인간의 SARS-CoV-2 및 기타 바이러스 감염에 대한 과면역 및 과염증 반응을 예방하거나 줄이기 위한 정기적인 예방 및 치료 치료를 허용할 것이다. 이러한 분석은 TPA가 SARS-CoV 백신 프로그램과 함께 백신에 의해 유도된 과면역 또는 염증 반응의 위험을 줄이기 위해 유용할 것이라는 점을 더욱 입증할 것으로 기대된다. 특히 TPA는 SARS-CoV-2 백신 접종자의 "항원 의존적 증강"(ADE)을 줄이는 데 효과적일 것이다. ADE는 이후에 백신의 표적 바이러스에 자연적으로 노출될 때 백신을 접종하지 않은 대상체에 비해 백신 접종자에서 과면역 및 과염증 반응의 더 큰 위험에 기여하는 것으로 나타났다. 이는 백신 접종자 중 뎅기열 및 기타 바이러스에 대해 입증되었으며 ADE는 코로나바이러스 백신 프로그램에서 합병증이 될 가능성이 있는 것으로 예측된다. 더 중증인 COVID-19 사례는 고령의, 노출이 더 많은 성인에서, ADE에 기여하는 SARS-CoV-2와 교차 반응할 가능성이 있는 일반 감기를 유발하는 4가지 풍토성 hCoV 중 하나에 의한 성인의 정기적인 2~3년 주기 감염을 포함하여 이전 풍토성 hCoV 바이러스 감염에 대한 노출 증가와 관련이 있다는 점이 주목된다. 나중에 야생형 바이러스 공격 시 과면역 및 과염증 반응에 대한 동일한 소인은 백신 효능이 약해진 후 Covid-19 백신 접종을 따를 가능성이 높다. (백신 접종자의 중화 항-SARS-CoV-2 항체가 감소할 것으로 예측된 후) 추가 백신 접종에 참석할 수도 있다. TPA 치료는 이러한 비정상적인 ADE 반응을 약화시켜, 추가 접종시, 그리고 자연 SARS-CoV-2 감염 위험에 다시 처하게 된 면역 감소를 보이는 백신 접종자의 ADE 위험 또는 심각성을 완화한다.
친염증성 사이토카인 및 케모카인(CSS)의 증가되고 조절되지 않는 발현이 중증 COVID-19 질병을 포함하여 ARDS에서 장기 및 조직의 과도한 손상을 매개한다는 것은 잘 알려져 있다. CSS는 염증 및 전염병 의 급성기에 자주 관찰된다. 중증 COVID-19 질환 환자에서 상향조절되고 장기 및 조직 손상에 기여할 가능성이 있는 사이토카인에는 특히 IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15, IL-17, CCL2(MCP-1), CXCL9(Mig) 및 CXCL10(IP-10) 등이 있다. 예를 들어, CSS 및 조직/장기 손상에서 친염증성 사이토카인의 기능적 역할에는 다음이 포함된다:
IL-6, IL-8, CCL2 - 호중구 및 단핵구의 활성화/모집
IL-17 - 자가면역 질환(MS, IBD)에서 조직 염증
CXCL 케모카인(예컨대 Mig, IP-10) - 장기/조직으로의 NK 및 T 세포 모집
본 발명에서 사용하기 위한 CBA 검정의 결과를 보정하고 명확히 하기 위해(예를 들어, CSS 잠재성을 감소시키기 위한 미세 조율 TPA 효능 및 투여량을 규명하기 위해), 중증 COVID-19 환자를 테스트하고 설명된 대로 시험군과 대조군을 비교한다(예컨대 ARDS 유도 동물, SARS-CoV-2 또는 슈도바이러스 감염 동물 또는 인간 세포 또는 개별 대상체 이용). 시험된 친염증성 사이토카인의 패널은 예를 들어 인간 IL-6, IL-8, IL-10, IL-17, IFN-γ, TNF, MCP-1(CCL2) 및 Mig(CXCL9)를 포함할 것이다. 건강한 대조군 샘플에서 측정된 친염증성 사이토카인에 대한 기준선의 확립 및 치료되지 않은 시험 대상에서 측정된 대상 염증성 사이토카인 각각에 대한 상승된 발현 수준의 예시적 프로파일을 종종 포함하는 잘 알려진 공개된 방법에 따라 검정을 수행한다.
인간의 ARDS 치료 및 예방을 위한 TPA 화합물의 임상 연구
인간에서 TPA 조성물 및 방법의 항바이러스 및 항-ARDS 효능에 관한 임상 연구는 연구 개시 무렵, 전술한 바와 같은 과염증, CSS 및/또는 ARDS 중 하나 이상의 증상에 대한 위험이 높거나 이러한 증상을 나타내는 SARS-CoV-2 양성 대상체에 직접 초점을 맞출 것이다. 미국 질병통제예방센터(CDC)는 상기도(예컨대 비인두 또는 구인두 면봉 사용) 및 하기도(기관내관 또는 기관지폐포 세척)의 검체를 사용하여 SARS-CoV-2 감염을 진단할 것을 권고한다. COVID-19 관련 ARDS 진단은 주로 검체의 RT-PCR 분석을 기반으로 한다. RT-PCR을 사용할 수 없는 경우 혈청 검사가 사용된다. 현재 미국 식품의약국(FDA)은 Roche의 SARS-CoV-2 상용 테스트 시스템(cobas® SARS-CoV-2)을 승인하였다. 이 정성적 테스트는 비인두 또는 구인두 면봉 샘플 이 필요하며 결과를 산출하는 데 3.5시간이 걸린다. RT-PCR 방법론을 기반으로 하는 cobas SARS-CoV-2 테스트는 이중 표적 분석으로 특정 SARS-CoV-2 RNA와 사르베코바이러스 아속의 모든 구성원에서 고도로 보존된 E 유전자 불변 단편을 모두 검출한다. 이 분석에는 특이성과 정확성을 보장하기 위한 전체 프로세스 음성 대조군, 양성 대조군 및 내부 대조군이 있다. 2020년 3월 21일, FDA는 세페이드 인코포레이티드(Cepheid Inc, 미국)의 Xpert® Xpress SARS-CoV-2에 대해 45분 이내에 결과를 산출할 수 있는 정성 테스트인 또 다른 긴급 사용 승인을 부여하였다. 이 테스트는 비인두 면봉, 비강 세척액 또는 흡인 표본의 샘플을 활용할 수 있으며 자동 샘플 처리를 강조한다. 하나 이상의 표적 유전자가 존재하는 경우 시험 결과는 양성으로 간주되어야 한다.
현재 SARS-CoV-2 스크리닝 방법은 샘플의 풍부한 바이러스 게놈에 의존하지만, 연구에 따르면 IgM 항체 수치는 질병 발병 5일 후 유증상 환자와 무증상 환자 모두에서 높은 것으로 나타났다. 따라서, IgM ELISA 검정은 PCR과 결합되어 검출 민감도를 향상시키고, 연구 방법 및 본원에 기술된 실제 임상 방법을 모두 개선할 수 있다(예를 들어, 환자별로 TPA 투여 시기를 최적화하기 위한 결정을 개선하기 위해).
인간 TPA 임상 연구 프로토콜에 대한 환자 관리 기준은 지지 요법의 중요성, 합병증 예방 및 병원내 전파를 강조한다. 환자가 호흡곤란을 경험하면 즉시 산소 또는 인공호흡기 지원이 제공된다. 조직 저관류의 징후가 없는 한, 폐부종과 저산소혈증의 악화를 피하기 위해 수액 소생술이 제한된다. 호흡기 및 눈 보호를 포함한 표준 예방 조치가 모든 연구 직원에게 권장된다. 이러한 예방 조치의 제거는 특정 연구 대상이 최소 24시간 간격으로 2회 연속 RT-PCR 검사에서 음성을 보여 SARS-CoV-2 바이러스의 임상 회복/제거를 나타내는 경우에만 허용된다.
SARS-2에 의해 매개되는 ARDS에서 TPA에 대한 인간 임상 시험의 초기 초점은 COVID-19 질병 중증도와 관련된 방사선학적 특징을 포함하여 일관되고 쉽게 평가되는 진단 지표에 있다. COVID-19, SARS-CoV, 및 MERS-CoV 관련 폐렴에 대한 영상 소견을 비롯한, 흉부 X선(CXR) 및 흉부 컴퓨터 단층 촬영 스캔을 포함하여 COVID-19/ARDS 중증도를 평가하기 위한 방사선 검사 절차 및 해석 프로토콜은 잘 알려져 있다. SARS-CoV-2 ARDS 피험자의 많은 수(최대 75%)가 양측성 폐렴을 나타내고 나머지는 일측성이다. 약 14%의 환자에서 여러 가지 반점 및 간유리 혼탁이 나타난다. 이러한 비정상이 우세한 패턴은 말초(54%)이지만 하부엽에서 발생하거나 명확하지 않을 수 있다. 양측 다발성 경화는 일반적으로 더 심한 경우에 발생한다.
흉부 CT는 COVID-19의 초기 단계에서 폐렴을 감지하는 데 더 효율적이다. 흉부 CT 스캔에서 COVID-19의 가장 흔한 패턴은 여러 개의 GGO 병변(56.4%)과 양측의 반점 그림자(51.8%)를 포함한다. 다른 패턴은 국지적인 반점 음영(28.1%)과 중간 이상(4.4%)으로 구성된다. 중증인 경우는 흉부 CT 스캔에서 심하지 않은 경우보다 더 많은 양측성 반점 음영(82%), 더 많은 GGO 병변(60%) 및 더 많은 국소 반점 음영(55.1%)과 같은 더 두드러진 방사선 소견을 나타낸다. 중증이 아닌 경우의 17.9%, 중증의 경우 2.9%에서 CXR 또는 흉부 CT 이상이 확인되지 않았다. 순수한 GGO 병변은 초기 단계에서 찾을 수 있다. 국소 또는 다초점 GGO 병변은 경화로 진행되거나 질병 진행 동안 크레이지 포장 패턴으로 겹쳐진 소엽간/소엽내 중격 비후가 있는 GGO 병변으로 진행될 수 있으며 경화의 확장은 질병 진행을 나타낸다. 순수한 경화성 병변은 상대적으로 덜 일반적이다. 드물지만 폐강 병변, 흉막삼출, 림프절병증도 보고된다.
이러한 폐 병원성 데이터는 추가 인간 임상 연구가 진행됨에 따라 위에 명시된 COVID-19/ARDS 심각도 및 TPA 효능의 각 지표에 대한 병렬 데이터와 함께 TPA 치료 및 제어 COVID-19/ARDS 대상에 대해 수집된다.
비록 명확한 이해를 본 발명을 예를 들어 상세하게 설명하엿지만, 특정 변경 및 변형이 첨부된 청구범위의 범위 내에서 실시될 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다. 이러한 맥락에서, 설명의 경제성을 위해 전술한 개시와 함께 다양한 간행물 및 기타 참고문헌이 인용되었다. 이들 각각의 참고문헌은 모든 목적을 위해 그 전체가 참고문헌으로 본 명세서에 포함된다.
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Claims (156)

  1. 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(SARS) 코로나바이러스 감염을 치료 또는 예방하는 방법으로서: 대상체에서 SARS 바이러스 감염을 방지 또는 감소시키고/감소시키거나 검출가능한 SARS 바이러스 부하를 감소 또는 제거하기에 충분한, 유의한 임상적 치료적 또는 예방적 항바이러스 반응을 대상체에서 유도하기 위해, SARS 코로나바이러스 감염 위험이 높거나 SARS 코로나바이러스에 감염된 대상체에게 항바이러스 유효량의 TPA 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, SARS 코로나바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19), SARS-CoV 및 중동 호흡기 증후군(MERS) 코로나바이러스로부터 선택되는 인간 SARS(hSARS) 코로나바이러스인 방법.
  3. 제2항에 있어서, hSARS 코로나바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19)인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 항바이러스성 TPA 화합물은 SARS-CoV-2 바이러스 감염을 예방하거나 감소시키고/시키거나 SARS 바이러스 부하 화합물을 감소 또는 제거하기에 충분한 대상체에서 항바이러스 반응을 이끌어내고, 동시에 COVID-19 질병의 하나 이상의 임상 증상을 예방하거나 감소시키는데 효과적인 방법.
  5. 제1항에 있어서, TPA 화합물은 1) 대상체의 상기도 또는 하기도 세포, 조직 또는 샘플의 바이러스 부하 또는 역가; 2) 피험자의 비호흡기, ACE-2 양성 세포, 조직 또는 샘플, 또는 피험자의 혈장의 바이러스 부하 또는 역가; 3) 폐 또는 다른 조직/세포로의 바이러스 침투 및/또는 부착; 4) 대상체의 폐 또는 다른 ACE-2 양성 세포, 조직 또는 장기에서의 바이러스 복제; 및/또는 5) 감염된 대상체의 상기도 조직 또는 샘플로부터의 바이러스 발산(shedding)으로부터 선택된 SARS 코로나바이러스 감염의 하나 이상의 지표를 감소 또는 제거하는데 유효한 양 및 투여 형태로 투여되고, 상기 각 지표는 한 병 이상의 TPA-처리된 대상체에서의 발생율과 대상 지표의 값을, 한 명 이상의 필적하는 위약-처리된 대조군 대상체(들)의 발병율 또는 지료 값과 비교하여, hrksckf 또는 측정함으로써 결정가능한 것인 방법.
  6. 제1항에 있어서, SARS 코로나바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19), SARS-CoV 및 중동 호흡기 증후군(MERS) 코로나바이러스로부터 선택된 인간 SARS(hSARS) 코로나바이러스이고, TPA 화합물은 대상체의 상기도 및/또는 하기도에서 hSARS 바이러스 부하 또는 역가를 감소시키는데 효과적인 방법.
  7. 제1항에 있어서, SARS 바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19), SARS-CoV 및 중동 호흡기 증후군(MERS) 코로나바이러스로부터 선택된 인간 SARS(hSARS) 코로나바이러스이고, TPA 화합물은 대상체의 비호흡기, ACE-2 양성 세포, 조직 또는 장기에서 hSARS 바이러스 부하 또는 역가를 감소시키는 데 효과적인 방법.
  8. 제1항에 있어서, SARS 바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19)이고, 항바이러스성 TPA 화합물은 감염된 피험자로부터 치료 전후에 채취된 비인두 면봉 샘플의 SARS-CoV-2 DNA 또는 SARS-CoV-2 수준의 기타 정량적 척도에 의해, 또는 적절한 시험군 및 대조군 샘플의 비교에 의해 결정되는 바와 같이, SARS-CoV-2 바이러스 감염을 방지 또는 감소시키고/감소시키거나 SAS 바이러스 부하를 감소 또는 제거하는 항바이러스 반응을 대상체에서 이끌어내는데 효과적인 방법.
  9. 제8항에 있어서, 비인두 면봉 샘플에서 SARS-CoV-2 DNA 또는 SARS-CoV-2 바이러스 부하의 다른 정량적 측정에 의해 결정된 바이러스 부하는, 치료된 환자(들)의 개인 또는 그룹의 치료 전 및 치료 후 샘플 사이에서, 또는 치료된 환자(들)의 치료된 피험자와 위약-치료된 대조군 피험자 사이에서 비교시, 치료된 피험자 사이에서 평균 25-50% 또는 그 이상 감소하는 방법.
  10. 제8항에 있어서, 비인두 면봉 샘플에서 SARS-CoV-2 DNA 또는 SARS-CoV-2 바이러스 부하의 다른 정량적 측정에 의해 결정된 바이러스 부하는, 치료된 환자(들)의 개인 또는 그룹의 치료 전 및 치료 후 샘플 사이에서, 또는 치료된 환자(들)의 치료된 피험자와 위약-치료된 대조군 피험자 사이에서 비교시, 치료된 피험자 사이에서 평균 75-95% 또는 그 이상 감소하는 방법.
  11. 제8항에 있어서, TPA 치료 전 SARS-CoV-2 감염에 대해 양성으로 스크리닝된 피험자의 비인두 면봉 샘플에서 SARS-CoV-2 DNA 또는 SARS-CoV-2 부하의 다른 정량적 척도에 의해 결정된 바이러스 부하는, TPA 치료 후 2주 이내에 TPA 치료 대상자의 최소 50%에서 100% 감소(상기도에서 검출가능한 SARS-CoV-2 바이러스의 총 제거에 해당, 비 전염성 상태를 나타냄) 하는 것인 방법.
  12. 제1항에 있어서, 항바이러스 TPA 화합물은 하기 화학식 I의 화합물, 및 그의 항바이러스 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택되는 것인 방법:


    Figure pct00041

    화학식 I
    식 중 R1 및 R2는 수소; 히드록실;
    Figure pct00042
    (여기서 알킬기는 1 내지 15개의 탄소 원자를 포함한다),
    Figure pct00043
    Figure pct00044
    및 이의 치환된 유도체로 이루어진 군으로부터 선택되고,
    R3은 수소,
    Figure pct00045
    또는 이의 치환된 유도체일 수 있으며,
    여기서 "저급 알킬" 또는 "저급 알케닐"은 1-7개의 탄소 원자를 함유할 수 있고 직쇄 또는 분지쇄일 수 있으며, 선택적으로 염소, 불소 또는 기타 할로겐, 또는 니트로, 아미노 또는 기타 활성 관능기에 의해 치환되거나 또는 비치환되는 것인 방법.
  13. 제1항에 있어서, 항바이러스 TPA 화합물은 하기 화학식 I의 화합물 및 이의 항바이러스 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택되는 것인 방법.
    Figure pct00046

    화학식 II
  14. 제1항에 있어서, 항바이러스성 TPA 화합물은: 포르볼 13-부티레이트; 포르볼 12-데카노에이트; 포르볼 13-데카노에이트; 포르볼 12,13-디아세테이트; 포르볼 13,20-디아세테이트; 포르볼 12,13-디벤조에이트; 포르볼 12,13-디부티레이트; 포르볼 12,13-디데카노에이트; 포르볼 12,13-디헥사노에이트; 포르볼 12,13-디프로피오네이트; 포르볼 12-미리스테이트; 포르볼 13-미리스테이트; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트; 포르볼 12-아세테이트; 포르볼 13-아세테이트; 및 이의 항바이러스 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택된 포르볼 에스테르인 방법.
  15. 제1항에 있어서, 항바이러스성 TPA 화합물은 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트인 방법.
  16. 제1항에 있어서, SARS 바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19)이고, 항바이러스성 TPA 화합물은 SARS-CoV-2 감염이 처음 진단된 대상체에 2주 이내에 처음 투여되는 것인 방법.
  17. 제1항에 있어서, SARS 바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19)이고, 항바이러스성 TPA 화합물은 피험자가 SARS-CoV-2(COVID-19) 감염으로 최초 진단된 후 7-10일에 처음 투여되는 것인 방법.
  18. 제1항에 있어서, SARS 바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19)이고, 항바이러스성 TPA 화합물은 감염 위험이 높거나 감염된 것으로 알려진 대상체가 1) 2일 이상 지속되는 발열; 2) 폐울혈, 답답함, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증의 하부 호흡기 증상; 3) 사이토카인 폭풍 증후군(CSS)을 포함하는 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)과 관련된 병태 또는 증상; 폐외 전신성 과염증 증후군(ESHS), 및/또는 4) 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중 및/또는 혈소판 감소증을 포함하여 대상체에서 중증 과면역 또는 과염증 반응과 관련된 다른 병태 또는 증상으로부터 선택된 중증 COVID-19 질병의 하나 이상의 증상(들)을 나타내기 전에 투여되는 것인 방법.
  19. 제1항에 있어서, 항바이러스성 TPA 화합물은 제형화되고 1) 통상적인 항바이러스 약물 또는 제제; 2) 항-ARDS 약물 또는 제제; 3) 항-CSS 약물 또는 제제, 4) 항-PIMS 약물 또는 제제; 5) 항-ESHS 약물 또는 제제; 6) 항-DAD 약물 또는 제제; 및/또는 7) 항염증, 면역-촉진성, 항세포변성 및/또는 아폽토시스-촉진 촉진 약물 또는 제제; 및 이들의 조합으로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  20. 제8항에 있어서, 항-SARS-CoV2 TPA 화합물은 제형화되고 2차 항바이러스 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  21. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암플리젠, 암프레나비르(아제너라제), 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 발록사비르 마르복실(조플루자), 빅타비, 보세프레비르(빅트렐리스), 시도포비르, 코비시스타트(티보스트), 콤비비르, 다클라타스비르(다클린자), 다루나비르, 델라비르딘, 데스코비, 디다노신, 도코사놀, 돌루테그라비르, 도라비린(피펠트로), 에콜리에버, 에독수딘, 에파비렌즈, 엘비테그라비르, 엠트리시타빈, 엔푸비르티드, 엔테카비르, 에트라비린(인텔렌스), 팜시클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르넷, 포르포넷, 융합 억제제, 간시클로비르(시토벤), 이바시타빈, 이발리주맙(트로가르조), 이독수리딘, 이미퀴모드, 이무노비르, 인디나비르, 이노신, 인테그라제 억제제, I형 인터페론, II형 인터페론, III형 인터페론, 라미부딘, 레터모비어(프레비미스), 로피나비르, 로비리드, 마라비록, 메티사존, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 니타족사니드, 노르비르, 뉴클레오시드 유사체, 오셀타미비르(타미플루), 페그 인터페론 알파-2a, 페그인터페론 알파-2b, 펜시클로비르, 페라미비르(라피밥), 플레코나릴, 포도필로톡신, 피라미딘, 랄테그라비르, 렘데시비르, 역전사효소 억제제, 리바비린, 릴피비린(에듀란트), 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르, 시메프레비르(올리시오), 소포스부비르, 스타부딘, 텔라프레비르, 텔비부딘(티제카), 테노포비르 알라페나미드, 테노포비르 디소프록실, 테노포비르, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르(발트렉스), 발간시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르(릴렌자) 및 지도부딘, 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  22. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 항-ACE2 약물 또는 제제인 방법.
  23. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 항염증 약물 또는 제제인 방법.
  24. 제23항에 있어서, 항염증 약물 또는 제제는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)로부터 선택되는 방법.
  25. 제24항에 있어서, NSAID는 아스피린, 셀레콕시브(셀레브렉스), 디클로페낙(캄비아, 카타플람, 볼타렌-XR, 집소르, 조르볼렉스), 디플루니살, 에토돌락, 이부프로펜(모트린, 애드빌), 인도메타신(인도신), 셀레콕시브(셀레브렉스), 피록시캄(펠덴), 인도메타신(인도신), 멜록시캄(모빅 비블로덱스), 케노프로펜(오르디스, 케토프로펜 ER, 오루바일, 액트론), 설린닥(클리노릴), 디플루니살(돌로비드), 나부메론(릴라펜), 옥사프로진(데이프로), 톨메틴(톨메틴 나트륨, 톨렉틴), 살사레이트(디살시드), 페노프로펜(날폰), 플루디프로펜(안사이드), 케토롤락(토라바돌), 메클로페나메이트, 메페남산(폰스텔) 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  26. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 사이토카인 억제제 약물 또는 제제인 방법.
  27. 제26항에 있어서, 사이토킨 억제제 약물 또는 제제는 (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 이들의 조합.으로부터 선택되는 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 억제 또는 저하시키는데 효과적인 방법.
  28. 제27항에 있어서, TPA 화합물 및 사이토카인 억제제 약물과의 조율적인 다제 요법은 SARS-CoV-2 감염, COVID-19 질병, ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DAD 또는 SARS-CoV-2 감염에 의해 매개되거나 악화되는 다른 과염증 병태와 관련되어 과도하게 상승된 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 감소시키는데 있어 향상된, 상가적, 상승적 및/또는 잠재적 치료 이점(약물/제제를 동일 투여량으로 단독 투여하여 얻어지는 이점에 비해)을 달성하는데 조합적으로 효과적인 방법.
  29. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제인 방법.
  30. 제29항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 항-IL-6 모노클로날 항체 또는 Fab 단편, 가용성 IL-6 수용체 또는 수용체 유사체, 또는 그의 동족 항-IL-6 특이적 결합 도메인 또는 불활성화 도메인인 방법.
  31. 제30항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 실툭시맙, 사릴루맙(케브자라) 및 토실리주맙(TCZ)으로부터 선택되는 것인 방법.
  32. 제29항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 IL-6을 직접적으로 차단 또는 억제하거나 IL-6의 전염증 활성을 간접적으로 억제, 저하 또는 변경하는 항-IL-6 약물인 방법.
  33. 제32항에 있어서, 항-IL-6 약물은 안드로그라폴라이드인 방법.
  34. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  35. 제34항에 있어서, 키나아제 억제제는 림프구, 단핵구/대식세포 세포 및/또는 호중구를 포함하는 면역 및/또는 염증 이펙터 세포의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 아폽토시스 활성의 조절, 또는 염증 반응의 매개 또는 억제에 관련된 하나 이상의 키나아제의 면역 또는 염증 활성을 직간접적으로 억제, 저하, 활성화 또는 변경하는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  36. 제35항에 있어서, 키나아제 조절제 약물은 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK), 야누스 키나아제(JAK) 및/또는 단백질 키나아제 C(PKC)를 조절하는 방법.
  37. 제36항에 있어서, TPA 화합물 및 키나아제 조절제 약물에 의한 COVID-19 질병 대상체의 조율 치료는 ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS 및 DAD와 관련된 하나 이상의 병태(들) 또는 증상(들)을 포함하는, 중증 SARS-CoV-2 감염과 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 임상적으로 감소시키는 방법.
  38. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 항-SARS-CoV-2 백신 제제인 방법.
  39. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 자연 살해(NK) 세포를 포함하는 조성물인 방법.
  40. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 중간엽 줄기 세포(MSC)를 포함하는 조성물인 방법.
  41. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 재조합 인터페론인 방법.
  42. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 정맥내 제형화된 면역글로불린인 방법.
  43. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 SARS-CoV-2-특이적 중화 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 방법.
  44. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 C5a-특이적 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 것인 방법.
  45. 제20항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 탈리도마이드, 핀골리모드, 항혈관신생 약물, 히드록시클로로퀸 및 글루코코르티코이드로부터 선택되는 것인 방법.
    제1항에 있어서, 1) 상기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 2) 하기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 3) 비호흡기의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 4) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직으로의 바이러스 부착 및 유입의 방지 또는 감소; 5) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직에서의 바이러스 복제 방지 또는 감소; 및/또는 7) 감염된 대상체의 상기도로부터의 바이러스 발산의 방지 또는 감소로부터 선택된, SARS-CoV-2 바이러스 감염의 예방 및/또는 치료와 관련한 하나 이상의 유의한 임상적 이점을 매개하는데 항 바이러스적으로 효과적인 방법.
  46. 포유동물 대상체에서 급성 호흡곤란 증후군(ARDS)를 치료하는 방법으로서: 상기 대상체에게 필적할만한 위약-처리 대조군 대상체에서 측정 및 결정된 동일한 ARDS 질병 지표(들)/값(들)과 비교하여 치료된 대상체에서의 1) 호흡곤란; 2) 폐에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과상승 수준(들); 3) 폐 실질 및/또는 폐포 구획에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 과상승 수준(들); 4) 폐 내피 및/또는 상피 장벽(들)의 분해 또는 파괴; 5) 폐에서 활성산소종(ROS)의 상승된 수준에 의해 결정 가능한, 폐 조직에서의 산화 스트레스의 상승된 지표; 및/또는 6) 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 폐 실질로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 모세혈관으로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질 또는 실질에의 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증, 및 혈관염으로부터 선택된 폐 손상의 하나 이상의 병원성 증상(들)로부터 선택된 하나 이상의 ARDS 질병 병태(들) 및/또는 증상(들)을 예방, 감소, 또는 제거하는데 충분한 항-ARDS 유효량의 TPA 조성물을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  47. 제46항에 있어서, ARDS는 호흡기 바이러스 또는 박테리아 감염, 폐에 대한 발열 또는 화학적 화상 손상, 폐 외상, 또는 면역 장애 또는 광범위한 폐 손상 및 기능장애를 매개하는 과염증 반응 및 면역 기능장애를 유발하는 다른 질병 또는 손상에 의해 유발되는 방법.
  48. 제46항에 있어서, ARDS는 갑작스런 급성 호흡기 증후군(SARS) 코로나바이러스에 의해 유발되는 방법.
  49. 제48항에 있어서, SARS 코로나바이러스는 SARS-CoV-2(COVID-19), SARS-CoV 및 중동 호흡기 증후군(MERS) 코로나바이러스로부터 선택되는 인간 SARS(hSARS) 코로나바이러스인 방법.
  50. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 ARDS에 걸린 대상체에서 호흡곤란(힘든, 짧거나 부적절한 호흡), 저산소혈증 및/또는 필요한 호흡기 지지의 발생률 또는 중증도를 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  51. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 폐, 혈장 또는 ARDS 관련 과염증에 연결된 다른 세포, 조직 또는 구획에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과상승된 수준 및/또는 활성을 방지하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  52. 제46항에 있어서, 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)은: (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 및 이들의 조합으로부터 선택되는 방법.
  53. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 ARDS에 걸린 대상체의 폐 실질 및/또는 폐포 구획에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 과상승 수준(들)을 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  54. 제53항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 ARDS에 걸린 대상체의 폐 실질, 폐포 구획 및/또는 폐혈관에서 호중구의 과상승 수준 및 관련 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착을 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  55. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 ARDS에 걸린 대상체의 폐 내피 및/또는 상피 장벽(들)의 분해 또는 파괴를 예방하거나 감소시키는데 효과적인 방법.
  56. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 폐에서 반응성 산소종(ROS)을 감소시키는 것을 포함하여 ARDS에 걸린 대상체의 폐 조직에서 산화 스트레스를 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  57. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 ARDS에 걸린 대상체에서 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 폐 실질로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 모세혈관으로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질 또는 실질에의 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증, 및 혈관염으로부터 선택된 광범위한 폐 손상을 예방 또는 감소시키는데 효과적인 것인 방법.
  58. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 하기 화학식 I 및 이의 항-ARDS 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택되는 것인 방법.
    Figure pct00047

    화학식 II
  59. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은: 포르볼 13-부티레이트; 포르볼 12-데카노에이트; 포르볼 13-데카노에이트; 포르볼 12,13-디아세테이트; 포르볼 13,20-디아세테이트; 포르볼 12,13-디벤조에이트; 포르볼 12,13-디부티레이트; 포르볼 12,13-디데카노에이트; 포르볼 12,13-디헥사노에이트; 포르볼 12,13-디프로피오네이트; 포르볼 12-미리스테이트; 포르볼 13-미리스테이트; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트; 포르볼 12-아세테이트; 포르볼 13-아세테이트; 및 이의 항-ARDS 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택된 포르볼 에스테르인 방법.
  60. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트인 방법.
  61. 제46항에 있어서, ARDS는 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 항-ARDS TPA 화합물은 피험자가 SARS-CoV-2 감염으로 처음 진단받은 후 2주 이내에 최초로 투여되는 방법.
  62. 제46항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 항-ARDS TPA 화합물은 피험자가 SARS-CoV-2 감염으로 처음 진단받은 후 7-10일 이내에 최초로 투여되는 방법.
  63. 제46항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고 항-ARDS TPA 화합물은 감염 위험이 높거나 감염된 것으로 알려진 대상체가 1) 2일 이상 지속되는 발열; 2) 폐울혈, 답답함, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증의 하부 호흡기 증상; 3) 사이토카인 폭풍 증후군(CSS); 폐외 전신성 과염증 증후군(ESHS)으로부터 선택된 ARDS와 관련된 병태 또는 증상, 및/또는 4) 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중 및/또는 혈소판 감소증을 포함하여 대상체에서 중증 과면역 또는 과염증 반응에 의해 매개되는 임의의 다른 병태 또는 증상으로부터 선택된 중증 COVID-19 질병의 하나 이상의 증상(들)을 나타내기 전에 투여되는 것인 방법.
  64. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 1) 폐울혈, 답답함, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증의 하부 호흡기 증상; 2) 사이토카인 폭풍 증후군(CSS); 3) 폐외 전신성 과염증 증후군(ESHS), 및/또는 4) 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중 및/또는 혈소판 감소증을 포함하여 대상체에서 중증 과면역 또는 과염증 반응에 의해 매개되는 다른 병태 또는 증상으로부터 선택된 ARDS와 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 치료하는데 효과적인 방법.
  65. 제46항에 있어서, 항-ARDS TPA 화합물은 제형화되고 1) 통상적인 항바이러스 약물 또는 제제; 2) 2차 항-ARDS 약물 또는 제제; 3) 항-CSS 약물 또는 제제, 4) 항-PIMS 약물 또는 제제; 5) 항-ESHS 약물 또는 제제; 6) 항-DAD 약물 또는 제제; 및/또는 7) 항염증, 면역-촉진성, 항세포변성 및/또는 아폽토시스-촉진 촉진 약물 또는 제제; 및 이들의 조합으로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  66. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, ARDS TPA 화합물은 제형화되고 2차 항바이러스 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  67. 제66항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암플리젠, 암프레나비르(아제너라제), 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 발록사비르 마르복실(조플루자), 빅타비, 보세프레비르(빅트렐리스), 시도포비르, 코비시스타트(티보스트), 콤비비르, 다클라타스비르(다클린자), 다루나비르, 델라비르딘, 데스코비, 디다노신, 도코사놀, 돌루테그라비르, 도라비린(피펠트로), 에콜리에버, 에독수딘, 에파비렌즈, 엘비테그라비르, 엠트리시타빈, 엔푸비르티드, 엔테카비르, 에트라비린(인텔렌스), 팜시클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르넷, 포르포넷, 융합 억제제, 간시클로비르(시토벤), 이바시타빈, 이발리주맙(트로가르조), 이독수리딘, 이미퀴모드, 이무노비르, 인디나비르, 이노신, 인테그라제 억제제, I형 인터페론, II형 인터페론, III형 인터페론, 라미부딘, 레터모비어(프레비미스), 로피나비르, 로비리드, 마라비록, 메티사존, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 니타족사니드, 노르비르, 뉴클레오시드 유사체, 오셀타미비르(타미플루), 페그 인터페론 알파-2a, 페그인터페론 알파-2b, 펜시클로비르, 페라미비르(라피밥), 플레코나릴, 포도필로톡신, 피라미딘, 랄테그라비르, 렘데시비르, 역전사효소 억제제, 리바비린, 릴피비린(에듀란트), 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르, 시메프레비르(올리시오), 소포스부비르, 스타부딘, 텔라프레비르, 텔비부딘(티제카), 테노포비르 알라페나미드, 테노포비르 디소프록실, 테노포비르, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르(발트렉스), 발간시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르(릴렌자) 및 지도부딘, 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  68. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항-ACE2 약물 또는 제제인 방법.
  69. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항염증 약물 또는 제제인 방법.
  70. 제69항에 있어서, 항염증 약물 또는 제제는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)로부터 선택되는 방법.
  71. 제70항에 있어서, NSAID는 아스피린, 셀레콕시브(셀레브렉스), 디클로페낙(캄비아, 카타플람, 볼타렌-XR, 집소르, 조르볼렉스), 디플루니살, 에토돌락, 이부프로펜(모트린, 애드빌), 인도메타신(인도신), 셀레콕시브(셀레브렉스), 피록시캄(펠덴), 인도메타신(인도신), 멜록시캄(모빅 비블로덱스), 케노프로펜(오르디스, 케토프로펜 ER, 오루바일, 액트론), 설린닥(클리노릴), 디플루니살(돌로비드), 나부메론(릴라펜), 옥사프로진(데이프로), 톨메틴(톨메틴 나트륨, 톨렉틴), 살사레이트(디살시드), 페노프로펜(날폰), 플루디프로펜(안사이드), 케토롤락(토라바돌), 메클로페나메이트, 메페남산(폰스텔) 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  72. 제65항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제눈 사이토카인 억제제 약물 또는 제제인 방법.
  73. 제72항에 있어서, 사이토킨 억제제 약물 또는 제제는 (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 이들의 조합으로부터 선택되는 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 억제 또는 저하시키는데 효과적인 방법.
  74. 제72항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, TPA 화합물 및 사이토카인 억제제 약물과의 조율적인 다제 요법은 SARS-CoV-2 감염, COVID-19 질병, ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DAD 또는 SARS-CoV-2 감염에 의해 매개되거나 악화되는 다른 과염증 병태와 관련되어 과도하게 상승된 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 감소시키는데 있어 향상된, 상가적, 상승적 및/또는 잠재적 치료 이점(약물/제제를 동일 투여량으로 단독 투여하여 얻어지는 이점에 비해)을 달성하는데 조합적으로 효과적인 방법.
  75. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제인 방법.
  76. 제75항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 항-IL-6 모노클로날 항체 또는 Fab 단편, 가용성 IL-6 수용체 또는 수용체 유사체, 또는 그의 동족 항-IL-6 특이적 결합 도메인 또는 불활성화 도메인인 방법.
  77. 제75항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 실툭시맙, 사릴루맙(케브자라) 및 토실리주맙(TCZ)으로부터 선택되는 것인 방법.
  78. 제75항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 IL-6을 직접적으로 차단 또는 억제하거나 IL-6의 전염증 활성을 간접적으로 억제, 저하 또는 변경하는 항-IL-6 약물인 방법.
  79. 제78항에 있어서, 항-IL-6 약물은 안드로그라폴라이드인 방법.
  80. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  81. 제80항에 있어서, 키나아제 억제제는 림프구, 단핵구/대식세포 세포 및/또는 호중구를 포함하는 면역 및/또는 염증 이펙터 세포의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 아폽토시스 활성의 조절, 또는 염증 반응의 매개 또는 억제에 관련된 하나 이상의 키나아제의 면역 또는 염증 활성을 직간접적으로 억제, 저하, 활성화 또는 변경하는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  82. 제81항에 있어서, 키나아제 조절제 약물 또는 제제는 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK), 야누스 키나아제(JAK) 및/또는 단백질 키나아제 C(PKC)를 조절하는 방법.
  83. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, TPA 화합물 및 키나아제 조절제 약물에 의한 COVID-19 질병 대상체의 조율 치료는 ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS 및 DAD와 관련된 하나 이상의 병태(들) 또는 증상(들)을 포함하는, 중증 SARS-CoV-2 감염과 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 임상적으로 감소시키는 방법.
  84. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 2차 약물 또는 제제는 항-SARS-CoV-2 백신 제제인 방법.
  85. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 자연 살해(NK) 세포를 포함하는 조성물인 방법.
  86. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 중간엽 줄기 세포(MSC)를 포함하는 조성물인 방법.
  87. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 재조합 인터페론인 방법.
  88. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 2차 약물 또는 제제는 정맥내 제형화된 면역글로불린인 방법.
  89. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 2차 약물 또는 제제는 SARS-CoV-2-특이적 중화 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 방법.
  90. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 C5a-특이적 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 것인 방법.
  91. 제65항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 탈리도마이드, 핀골리모드, 항혈관신생 약물, 히드록시클로로퀸 및 글루코코르티코이드로부터 선택되는 것인 방법.
  92. 제65항에 있어서, ARDS는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 의해 유발되고, 항-ARDS TPA 화합물 및 2차 약물 또는 제제는
    1) 상기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 2) 하기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 3) 비호흡기의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 4) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직으로의 바이러스 부착 및 유입의 방지 또는 감소; 5) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직에서의 바이러스 복제 방지 또는 감소; 및/또는 7) 감염된 대상체의 상기도로부터의 바이러스 발산의 방지 또는 감소로부터 선택된, COVID-19 질병 및 SARS-CoV-2 바이러스 감염의 예방 및/또는 치료와 관련한 하나 이상의 유의한 임상적 이점을 매개하는데 항 바이러스적으로 효과적인 방법.
  93. 일반적으로 사이토카인 폭풍 증후군(CSS), 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS), 폐외 전신 과염증 증후군(ESHS), 또는 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중, 혈소판 감소증 및/또는 괴저를 포함하는 과염증에 의해 유발되는 혈관 울혈 또는 혈전 병태를 앓고 있는 포유동물 대상체에서 면역 기능 장애 또는 과염증 병태를 치료하는 방법으로서; 상기 대상체에게 항염증 유효량의 TPA 화합물을 투여하는 단계를 포함하는 것인 방법.
  94. 제93항에 있어서, 대상체는 급성 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스에 대해 고위험에 처해 있거나 이에 감염되어 있고, 항염증성 TPA 화합물은 대상체에서 항-CSS 반응을 매개하는데 효과적인 것인 방법.
  95. 제94항에 있어서, 상기 항-CSS 반응은 치료 대상체에서 1) 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서의 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과도하게 상승된 수준; 2) 폐 실질, 폐포 구획 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 과상승 수준(들); 3) 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서의 내피 및/또는 상피 장벽(들)의 분해 또는 파괴; 4) 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서의 활성산소종(ROS)의 상승된 수준에 의해 결정 가능한, 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서의 산화 스트레스의 상승된 징후; 및/또는 5) 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 대식세포 및/또는 호중구의 폐 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 침윤, 폐의 모세혈관 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질 또는 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증, 및/또는 혈관염으로부터 선택된 조직 또는 장기 손상의 하나 이상의 병리학적 증상(들)로부터 선택된 하나 이상의 CSS-관련 병태(들) 또는 증상(들)의 예방 또는 감소를 포함하는 것인 방법.
  96. 제93항에 있어서, 대상체는 CSS를 나타내고 TPA 화합물은 1) CSS-영향을 받은 세포 또는 조직에서 과도하게 상승된 친염증성 사이토카인 활성화, 발현 및/또는 수준; 2) 폐 실질, 폐포 공기 공간 또는 다른 CSS-영향을 받는 조직 또는 장기에서 침윤 증가 및/또는 대식세포 및/또는 호중구 수 증가; 3) 림프구 수 감소로 표시되는 림프구 감소증; 4) 상승된 산화 스트레스 마커; 5) 폐 또는 다른 CSS-영향을 받은 조직 또는 장기의 내피 및/또는 상피 장벽에 대한 염증성 손상; 6) 폐 또는 다른 CSS-영향을 받은 조직 또는 장기/기관에 대한 병원성 섬유증 또는 기타 병적 염증성 손상; 7) 림프절의 염증성 손상, 손실 또는 위축; 8) 비장 염증 손상 또는 위축; 9) 패혈증; 10) 독성 쇼크 증후군(TSS); 11) 산화 스트레스 증상; 및/또는 12) 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 대식세포 및/또는 호중구의 폐 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 침윤, 폐의 모세혈관 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질 또는 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증, 및/또는 혈관염으로부터 선택된 조직 또는 장기 손상의 하나 이상의 병리학적 증상(들)로부터 선택된 CSS와 관련된 하나 이상의 병태(들), 증상(들) 또는 진단 지표(들)의 적어도 25% 감소를 유도하는 항-CSS-효과적인 TPA 화합물인 방법.
  97. 제96항에 있어서, 항-CSS TPA 화합물은 CSS와 관련된 친염증성 사이토카인의 조절 장애 및 과상승을 방지 또는 감소시키는데 효과적이며, 치료된 대상체는 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과상승된 수준의 적어도 25% 감소를 나타내는 방법.
  98. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 폐, 혈장 또는 ARDS 관련 과염증에 연결된 다른 세포, 조직 또는 구획에서 하나 이상의 친염증성 사이토카인(들)의 과상승된 수준 및/또는 활성을 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  99. 제98항에 있어서, 하나 이상의 염증 유발 사이토카인(들)은 (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 방법.
  100. 제94항에 있어서, 항-염증성 TPA 화합물은 CSS에 걸린 피험자의 폐 실질, 폐포 구획 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서 단핵구/대식세포 및/또는 호중구의 과상승된 수준(들)을 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  101. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 CSS에 걸린 피험자의 폐 실질, 폐포 구획, 폐 혈관 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서 호중구의 과상승된 수준 및 관련 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착을 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 것인 방법.
  102. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 CSS에 걸린 피험자의 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서 내피 및/또는 상피 장벽(들)의 분해 또는 파괴를 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  103. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 CSS에 걸린 대상체의 폐 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에서 산화 스트레스를 예방하거나 감소시키는 데 효과적인 방법.
  104. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 CSS에 걸린 대상체에서 과염증, 섬유증, 미만성 폐포 손상(DAD), 대식세포 및/또는 호중구의 폐 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 침윤, 폐의 모세혈관 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위로의 대식세포 및/또는 호중구 침윤, 폐 간질 또는 실질 또는 다른 과염증 조직 또는 장기 부위에 광범위한 호중구 세포외 트랩(NET)의 침착, 폐 및/또는 관상 혈관 혈전증, 및 혈관염으로부터 선택된 과염증 조직 또는 장기 손상 정도를 방지 또는 감소시키는데 효과적인 방법.
  105. 제94항에 있어서, 항염증성 TPA 화합물은 하기 화학식 I 및 그의 항염증 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택되는 것인 방법.
    Figure pct00048

    화학식 II
  106. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은: 포르볼 13-부티레이트; 포르볼 12-데카노에이트; 포르볼 13-데카노에이트; 포르볼 12,13-디아세테이트; 포르볼 13,20-디아세테이트; 포르볼 12,13-디벤조에이트; 포르볼 12,13-디부티레이트; 포르볼 12,13-디데카노에이트; 포르볼 12,13-디헥사노에이트; 포르볼 12,13-디프로피오네이트; 포르볼 12-미리스테이트; 포르볼 13-미리스테이트; 포르볼 12,13,20-트리아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트; 12-데옥시포르볼 13-안젤레이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트; 12-데옥시포르볼 13-이소부티레이트-20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-페닐아세테이트 20-아세테이트; 12-데옥시포르볼 13-테트라데카노에이트; 포르볼 12-티글리에이트 13-데카노에이트; 12-데옥시포르볼 13-아세테이트; 포르볼 12-아세테이트; 포르볼 13-아세테이트; 및 이의 항염 활성 유사체, 유도체, 복합체, 접합체, 염, 거울상이성질체 및 혼합물로부터 선택된 포르볼 에스테르인 방법.
  107. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트인 방법.
  108. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 SARS-CoV-2 감염이 처음 진단된 대상체에 2주 이내에 처음 투여되는 것인 방법.
  109. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 피험자가 SARS-CoV-2(COVID-19) 감염으로 최초 진단된 후 7-10일에 처음 투여되는 것인 방법.
  110. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 감염 위험이 높거나 감염된 것으로 알려진 대상체가 1) 2일 이상 지속되는 발열; 2) 폐울혈, 답답함, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증의 하부 호흡기 증상; 3) 사이토카인 폭풍 증후군(CSS); 폐외 전신성 과염증 증후군(ESHS)으로부터 선택된 ARDS과 관련된 병태 또는 증상, 및/또는 4) 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중 및/또는 혈소판 감소증을 포함하여 대상체에서 중증 과면역 또는 과염증 반응에 의해 매개되는 임의의 다른 병태 또는 증상으로부터 선택된 중증 COVID-19 질병의 하나 이상의 증상(들)을 나타내기 전에 투여되는 것인 방법.
  111. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 1) 폐울혈, 답답함, 숨가쁨 및/또는 저산소혈증의 하부 호흡기 증상; 2) 폐외 전신성 과염증 증후군(ESHS), 및/또는 3) 소아 염증성 다기관 증후군(PIMS); 혈관 울혈 및 혈전 병태, 파종성 혈관내 응고(DIC), 혈전증, 뇌졸중 및/또는 혈소판 감소증을 포함하여 대상체에서 중증 과면역 또는 과염증 반응에 의해 매개되는 다른 병태 또는 증상으로부터 선택된 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)와 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 치료하는데 효과적인 방법.
  112. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 제형화되고 1) 통상적인 항바이러스 약물 또는 제제; 2) 2차 항-CSS 약물 또는 제제; 3) 항-ARDS 약물 또는 제제, 4) 항-PIMS 약물 또는 제제; 5) 항-ESHS 약물 또는 제제; 6) 항-DAD 약물 또는 제제; 및/또는 7) 항염증, 면역-촉진성, 항세포변성 및/또는 아폽토시스-촉진 촉진 약물 또는 제제; 및 이들의 조합으로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  113. 제94항에 있어서, 항염 TPA 화합물은 제형화되고 2차 항바이러스 약물 또는 제제와 동시에 투여되거나, 동시에 조율적으로 투여되거나 또는 조율적으로 순차 투여되거나, 다약물 예방 또는 치료 프로토콜로 함께 투여되는 것인 방법.
  114. 제113항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암플리젠, 암프레나비르(아제너라제), 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 발록사비르 마르복실(조플루자), 빅타비, 보세프레비르(빅트렐리스), 시도포비르, 코비시스타트(티보스트), 콤비비르, 다클라타스비르(다클린자), 다루나비르, 델라비르딘, 데스코비, 디다노신, 도코사놀, 돌루테그라비르, 도라비린(피펠트로), 에콜리에버, 에독수딘, 에파비렌즈, 엘비테그라비르, 엠트리시타빈, 엔푸비르티드, 엔테카비르, 에트라비린(인텔렌스), 팜시클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르넷, 포르포넷, 융합 억제제, 간시클로비르(시토벤), 이바시타빈, 이발리주맙(트로가르조), 이독수리딘, 이미퀴모드, 이무노비르, 인디나비르, 이노신, 인테그라제 억제제, I형 인터페론, II형 인터페론, III형 인터페론, 라미부딘, 레터모비어(프레비미스), 로피나비르, 로비리드, 마라비록, 메티사존, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 니타족사니드, 노르비르, 뉴클레오시드 유사체, 오셀타미비르(타미플루), 페그 인터페론 알파-2a, 페그인터페론 알파-2b, 펜시클로비르, 페라미비르(라피밥), 플레코나릴, 포도필로톡신, 피라미딘, 랄테그라비르, 렘데시비르, 역전사효소 억제제, 리바비린, 릴피비린(에듀란트), 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르, 시메프레비르(올리시오), 소포스부비르, 스타부딘, 텔라프레비르, 텔비부딘(티제카), 테노포비르 알라페나미드, 테노포비르 디소프록실, 테노포비르, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르(발트렉스), 발간시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르(릴렌자) 및 지도부딘, 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  115. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항-ACE2 약물 또는 제제인 방법.
  116. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항염증 약물 또는 제제인 방법.
  117. 제116항에 있어서, 항염증 약물 또는 제제는 비스테로이드성 항염증 약물(NSAID)로부터 선택되는 방법.
  118. 제117항에 있어서, NSAID는 아스피린, 셀레콕시브(셀레브렉스), 디클로페낙(캄비아, 카타플람, 볼타렌-XR, 집소르, 조르볼렉스), 디플루니살, 에토돌락, 이부프로펜(모트린, 애드빌), 인도메타신(인도신), 셀레콕시브(셀레브렉스), 피록시캄(펠덴), 인도메타신(인도신), 멜록시캄(모빅 비블로덱스), 케노프로펜(오르디스, 케토프로펜 ER, 오루바일, 액트론), 설린닥(클리노릴), 디플루니살(돌로비드), 나부메론(릴라펜), 옥사프로진(데이프로), 톨메틴(톨메틴 나트륨, 톨렉틴), 살사레이트(디살시드), 페노프로펜(날폰), 플루디프로펜(안사이드), 케토롤락(토라바돌), 메클로페나메이트, 메페남산(폰스텔) 및 이의 조합으로부터 선택되는 방법.
  119. 제112항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제눈 사이토카인 억제제 약물 또는 제제인 방법.
  120. 제119항에 있어서, 사이토킨 억제제 약물 또는 제제는 (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 이들의 조합으로부터 선택되는 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 억제 또는 저하시키는데 효과적인 방법.
  121. 제111항에 있어서, TPA 화합물 및 사이토카인 억제제 약물과의 조율적인 다제 요법은 SARS-CoV-2 감염, COVID-19 질병, ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS, DAD 또는 SARS-CoV-2 감염에 의해 매개되거나 악화되는 다른 과염증 병태와 관련되어 과도하게 상승된 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 감소시키는데 있어 향상된, 상가적, 상승적 및/또는 잠재적 치료 이점(약물/제제를 동일 투여량으로 단독 투여하여 얻어지는 이점에 비해)을 달성하는데 조합적으로 효과적인 방법.
  122. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제인 방법.
  123. 제122항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 항-IL-6 모노클로날 항체 또는 Fab 단편, 가용성 IL-6 수용체 또는 수용체 유사체, 또는 그의 동족 항-IL-6 특이적 결합 도메인 또는 불활성화 도메인인 방법.
  124. 제122항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 실툭시맙, 사릴루맙(케브자라) 및 토실리주맙(TCZ)으로부터 선택되는 것인 방법.
  125. 제122항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 IL-6을 직접적으로 차단 또는 억제하거나 IL-6의 전염증 활성을 간접적으로 억제, 저하 또는 변경하는 항-IL-6 약물인 방법.
  126. 제125항에 있어서, 항-IL-6 약물은 안드로그라폴라이드인 방법.
  127. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  128. 제127항에 있어서, 키나아제 억제제는 림프구, 단핵구/대식세포 세포 및/또는 호중구를 포함하는 면역 및/또는 염증 이펙터 세포의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 아폽토시스 활성의 조절, 또는 염증 반응의 매개 또는 억제에 관련된 하나 이상의 키나아제의 면역 또는 염증 활성을 직간접적으로 억제, 저하, 활성화 또는 변경하는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 방법.
  129. 제127항에 있어서, 키나아제 조절제 약물 또는 제제는 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK), 야누스 키나아제(JAK) 및/또는 단백질 키나아제 C(PKC)를 조절하는 방법.
  130. 제117항에 있어서, TPA 화합물 및 키나아제 조절제 약물에 의한 COVID-19 질병 대상체의 조율 치료는 ARDS, SARS, CSS, PIMS, ESHS 및 DAD와 관련된 하나 이상의 병태(들) 또는 증상(들)을 포함하는, 중증 SARS-CoV-2 감염과 관련된 하나 이상의 질병 병태(들) 또는 증상(들)을 임상적으로 감소시키는 방법.
  131. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 항-SARS-CoV-2 백신 제제인 방법.
  132. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 자연 살해(NK) 세포를 포함하는 조성물인 방법.
  133. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 컨디셔닝된 중간엽 줄기 세포(MSC)를 포함하는 조성물인 방법.
  134. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 재조합 인터페론인 방법.
  135. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 정맥내 제형화된 면역글로불린인 방법.
  136. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 SARS-CoV-2-특이적 중화 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 방법.
  137. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 C5a-특이적 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인을 포함하는 것인 방법.
  138. 제112항에 있어서, 2차 약물 또는 제제는 탈리도마이드, 핀골리모드, 항혈관신생 약물, 히드록시클로로퀸 및 글루코코르티코이드로부터 선택되는 것인 방법.
  139. 제112항에 있어서, 항염 TPA 화합물 및 2차 약물 또는 제제는 1) 상기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 2) 하기도의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 3) 비호흡기의 바이러스 감염 또는 역가의 방지 또는 감소; 4) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직으로의 바이러스 부착 및 유입의 방지 또는 감소; 5) 폐 및 기타 ACE-2 양성 세포 및 조직에서의 바이러스 복제 방지 또는 감소; 및/또는 7) 감염된 대상체의 상기도로부터의 바이러스 발산의 방지 또는 감소로부터 선택된, COVID-19 질병 및 SARS-CoV-2 바이러스 감염의 예방 및/또는 치료와 관련한 하나 이상의 유의한 임상적 이점을 매개하는데 항 바이러스적으로 효과적인 방법.
  140. SARS-CoV-2 바이러스에 의해 매개되는 COVID-19 질병에 대한 의학적 위험 요소가 있는 인간 피험자 또는 SARS-CoV-2 바이러스 감염에 대해 양성 진단을 받은 환자에게 사용하기 위한 항바이러스 조성물 또는 키트로서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제와 함께 제형화 또는 포장된 항바이러스 유효 TPA 화합물을 포함하는 항바이러스 조성물 또는 키트.
  141. 제140 항에 있어서, 2차 항바이러스 약물 또는 제제는 아바카비르, 아시클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 암플리젠, 암프레나비르(아제너라제), 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 발록사비르 마르복실(조플루자), 빅타비, 보세프레비르(빅트렐리스), 시도포비르, 코비시스타트(티보스트), 콤비비르, 다클라타스비르(다클린자), 다루나비르, 델라비르딘, 데스코비, 디다노신, 도코사놀, 돌루테그라비르, 도라비린(피펠트로), 에콜리에버, 에독수딘, 에파비렌즈, 엘비테그라비르, 엠트리시타빈, 엔푸비르티드, 엔테카비르, 에트라비린(인텔렌스), 팜시클로비르, 포미비르센, 포삼프레나비르, 포스카르넷, 포르포넷, 융합 억제제, 간시클로비르(시토벤), 이바시타빈, 이발리주맙(트로가르조), 이독수리딘, 이미퀴모드, 이무노비르, 인디나비르, 이노신, 인테그라제 억제제, I형 인터페론, II형 인터페론, III형 인터페론, 라미부딘, 레터모비어(프레비미스), 로피나비르, 로비리드, 마라비록, 메티사존, 모록시딘, 넬피나비르, 네비라핀, 넥사비르, 니타족사니드, 노르비르, 뉴클레오시드 유사체, 오셀타미비르(타미플루), 페그 인터페론 알파-2a, 페그인터페론 알파-2b, 펜시클로비르, 페라미비르(라피밥), 플레코나릴, 포도필로톡신, 피라미딘, 랄테그라비르, 렘데시비르, 역전사효소 억제제, 리바비린, 릴피비린(에듀란트), 리만타딘, 리토나비르, 사퀴나비르, 시메프레비르(올리시오), 소포스부비르, 스타부딘, 텔라프레비르, 텔비부딘(티제카), 테노포비르 알라페나미드, 테노포비르 디소프록실, 테노포비르, 티프라나비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르(발트렉스), 발간시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르(릴렌자), 지도부딘 및 이들의 조합으로부터 선택되는 것인 항바이러스 의약 조성물.
  142. 1) 통상적인 항바이러스 약물 또는 제제; 2) 2차 항-ARDS 약물 또는 제제; 3) 항-CSS 약물 또는 제제, 4) 항-PIMS 약물 또는 제제; 5) 항-ESHS 약물 또는 제제; 6) 항-DAD 약물 또는 제제; 및/또는 7) 항염증, 면역-촉진성, 항세포변성 및/또는 아폽토시스-촉진 촉진 약물 또는 제제; 및 이들의 조합으로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제제와 함께 제형화되거나 포장되는 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료를 위해 사용되는, 의약 조성물 또는 키트.
  143. 비스테로이드계 항염 약물(NSAID)로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 도는 제제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)를 예방 또는 치료하기 위해 사용되는, 의약 조성물 또는 키트.
  144. 제143항에 있어서, NSAID는 아스피린, 셀레콕시브(셀레브렉스), 디클로페낙(캄비아, 카타플람, 볼타렌-XR, 집소르, 조르볼렉스), 디플루니살, 에토돌락, 이부프로펜(모트린, 애드빌), 인도메타신(인도신), 셀레콕시브(셀레브렉스), 피록시캄(펠덴), 인도메타신(인도신), 멜록시캄(모빅 비블로덱스), 케노프로펜(오르디스, 케토프로펜 ER, 오루바일, 액트론), 설린닥(클리노릴), 디플루니살(돌로비드), 나부메론(릴라펜), 옥사프로진(데이프로), 톨메틴(톨메틴 나트륨, 톨렉틴), 살사레이트(디살시드), 페노프로펜(날폰), 플루디프로펜(안사이드), 케토롤락(토라바돌), 메클로페나메이트, 메페남산(폰스텔) 및 이의 조합으로부터 선택되는 것인 의약 조성물.
  145. 사이토카인 억제제 약물 및 제제로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 의약 조성물 또는 키트.
  146. 제145항에 있어서, 사이토카인 억제제 약물 또는 제제는 (IL)-1B; IL-2; IL-6, IL-7; IL-8; IL-9; IL-10; 섬유아세포 성장 인자(FGF); 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CSF); IFNγ; 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF); 인터페론-γ 유도 단백질(IP10); 단핵구 화학유인 단백질(MCP1); 대식세포 염증 단백질 1 알파(MIP1A); 혈소판 유래 성장 인자(PDGF); 종양 괴사 인자(TNFα); 및 혈관 내피 성장 인자(VEGF), 및 이들의 조합으로부터 선택된 하나 이상의 친염증성 사이토카인 표적의 유도, 합성, 활성화 및/또는 순환 수준(들)을 억제 또는 저하시키는데 효과적인 것인 의약 조성물 또는 키트.
  147. 항-IL-6 약물 및 생물학적 제제로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 의약 조성물 또는 키트.
  148. 제147항에 있어서, 상기 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 항-IL-6 모노클로날 항체 또는 Fab 단편, 가용성 IL-6 수용체 또는 수용체 유사체, 또는 그의 동족 항-IL-6 특이적 결합 또는 불활성화 도메인인 의약 조성물 또는 키트.
  149. 제147항에 있어서, 상기 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 실툭시맙, 사릴루맙(케브자라) 및 토실리주맙(TCZ)으로부터 선택되는 의약 조성물 또는 키트.
  150. 제147항에 있어서, 항-IL-6 약물 또는 생물학적 제제는 IL-6을 직접적으로 차단 또는 억제하거나 IL-6의 친염증성 활성을 간접적으로 억제, 저하 또는 변경하는 항-IL-6 약물인 의약 조성물 또는 키트.
  151. 제150항에 있어서, 항-IL-6 약물이 안드로그라폴라이드인 의약 조성물 또는 키트.
  152. 키나아제 조절 약물 및 제제로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 의약 조성물 또는 키트.
  153. 제152항에 있어서, 키나아제 억제제는 림프구, 단핵구/대식세포 세포 및/또는 호중구를 포함하는 면역 및/또는 염증 이펙터 세포의 분화, 증식, 활성화, 염증성 사이토카인 합성 및/또는 아폽토시스 활성의 조절, 또는 염증 반응의 매개 또는 억제에 관련된 하나 이상의 키나아제의 면역 또는 염증 활성을 직간접적으로 억제, 저하, 활성화 또는 변경하는 키나아제 조절 약물 또는 제제인 의약 조성물 또는 키트.
  154. 제152항에 있어서, 키나아제 조절제 약물은 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK), 야누스 키나아제(JAK) 및/또는 단백질 키나아제 C(PKC)를 조절하는 의약 조성물 또는 키트.
  155. 급성 호흡기 증후군(SARS)-2(SARS-CoV-2 또는 COVID-19) 코로나바이러스 백신 제제로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 의약 조성물 또는 키트.
  156. 인터페론 약물 또는 제제; 정맥내 제형화된 면역글로불린; SARS-CoV-2 특이적 중화 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인; C5a-특이적 항체, Fab 단편 또는 항체 결합 도메인; 탈리도마이드; 핀골리모드; 항혈관신생 약물; 히드록시클로로퀸; 및 글루코코르티코이드, 및 이들의 조합으로부터 선택된 2차 치료 또는 예방 약물 또는 제와 함께 제형화되거나 포장된 항-ARDS 유효 TPA 화합물을 포함하는, 포유동물 대상체에서 급성 호흡기 증후군(ARDS)의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 의약 조성물 또는 키트.
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