KR20230039601A

KR20230039601A - 장기간 작용하는 펩티드 티로신 티로신(pyy) 유사체 및 사용 방법

Info

Publication number: KR20230039601A
Application number: KR1020227039816A
Authority: KR
Inventors: 윌리엄 블랙웰; 베드 피. 스리바스타바; 제임스 엠. 웨이
Original assignee: 아이투오 테라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2020-04-17
Filing date: 2021-04-16
Publication date: 2023-03-21
Also published as: MX2022013024A; BR112022020956A8; CA3175725A1; JP2023522081A; IL297368A; AU2021257477A1; TW202204390A; US20220002371A1; WO2021212023A1; EP4136102A1; BR112022020956A2; CN115698053A; US11739134B2; US20240166708A1

Abstract

본 발명은 인간 PYY의 장기간 작용 유사체인 단리된 폴리펩티드에 관한 것이다. 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드는 내인성 PYY 및 공지된 합성 PYY 유사체 폴리펩티드에 비해 더 긴(즉, "장기간 작용하는") 제거 반감기(t_1/2) 및 개선된 용해도 및 열 안정성과 같은 유익한 물리화학적 성질을 갖는다. 본 발명은 또한 다양한 치료학적 적응증에서 현재 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드를 사용하는 방법, 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다. 개시된 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병과 같은 대사 질환 또는 장애를 치료하고, 비만을 치료하고, 체중 감소를 제공하는 방법, 및 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 특히 유용하다.

Description

장기간 작용하는 펩티드 티로신 티로신(PYY) 유사체 및 사용 방법

관련 출원

본 출원은 2020년 4월 17일자로 출원된 미국 가특허 출원 제63/011,649호, 및 2020년 9월 10일자로 출원된 미국 가특허 출원 제63/076,459호의 우선권을 주장하고, 상기 우선권의 개시내용은 이들의 전문이 본원에 참조로 포함된다.

분야

본 발명은 펩티드 티로신 티로신(PYY) 유사체인 화합물 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적으로 허용되는 조성물, 및 다양한 장애의 치료에서 상기 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

또한 펩티드 티로신 티로신으로서 공지된 펩티드 YY(PYY)는 인간에서 PYY 유전자에 의해 암호화된 펩티드이다. 펩티드 YY는 영양공급에 반응하여 회장 및 결장에서 세포로부터 방출되는 짧은 (36-아미노산) 펩티드이다. 혈액, 내장 및 기타 말초 요소에서, PYY는 식욕을 감소시키는 작용을 하고; 유사하게, 중추신경계에 직접 주사되는 경우, PYY는 또한 식욕부진, 즉 식욕을 감소시킨다.

발명의 개요

현재 본원 개시내용의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 조성물이 PYY 유사체로서 효과적인 것으로 밝혀졌다. 상기 화합물은 하기와 같은 일반 화학식을 갖는다:

서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

X₀PX₂PX₄X₅PX₇X₈DX₁₀SPX₁₃X₁₄X₁₅X₁₆RX₁₈X₁₉X₂₀DX₂₂X₂₃HX₂₅LX₂₇WLTRX₃₂RX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 90);

여기서, 각각의 변수는 본원에 정의되고 기재된 바와 같다.

상기 예시적인 화합물은 본원에서 표 3에 제공된다.

본 발명의 화합물은 장기간 제거 반감기(t_1/2)를 달성하도록 디자인되었고, 따라서 본원에서는 "장기간 작용하는" PYY 유사체로서 기재된다.

본 발명의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용되는 조성물은 PYY 수용체와 관련된 다양한 질환, 장애 또는 병태를 치료하기 위해 유용하다. 상기 질환, 장애, 또는 병태는 대사 질환 또는 장애, 예를 들어, 2형 당뇨병, 비만 및 체중 감량을 해야할 필요를 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

도 1은 기준선 및 비히클 대조군(△△ %)으로부터 장기간 작용 GLP-1 유사체와 조합된 장기간 작용 PYY 유사체의 평균 체중 감량(%)을 의미한다.
도 2는 기준선 및 비히클 대조군(△△ %)으로부터 장기간 작용 GLP-1 유사체와 조합된 장기간 작용 PYY 유사체의 평균 HbA1c(%)를 도시한다.
도 3은 약물 전달을 위해 대표적인 삼투압 소형 펌프의 단면 다이어그램을 도시한다.
도 4는 볼러스 및 정맥내 주입 후 A13의 혈장 농도에서의 변화를 도시한다.
도 5는 볼러스 및 정맥내 주입 후 A24의 혈장 농도에서의 변화를 도시한다.
도 6은 식이 유도된 비만 래트 비만 모델에서 체중 감량을 도시하고, PYY 유사체 펩티드 A13과 장기간 작용 GLP-1 수용체 작용제의 조합이 산업계 벤치마크인 단독의 엑세나티드 또는 세마글루티드 보다 유의적으로 보다 효과적이고 강력하다는 것을 강조하는 그래프이다.
도 7은 주커(Zucker) 당뇨병 지방(ZDF) 래트 2형 당뇨병 모델에서 항당뇨병 효과를 도시하고, PYY 유사체 펩티드 A13과 장기간 작용 GLP-1 수용체 작용제의 조합이 단독의 트리제파티드 및 세마글루티드 보다 유의적으로 더 효과적이고 강력함을 강조하는 그래프이다.
도 8은 식이-유도 비만 래트 비만 모델에서 상이한 용량(좌측 패널) 및 상응하는 체중 변화(△△g, 우측 패널)에 의한 상이한 치료 기간에 따른 음식 섭취의 변화(△△g)를 도시하는 그래프 패널이다. 상부 패널은 단독의 PYY 유사체 A24의 반복 투여에 상응하는 반면, 하부 패널은 PYY 유사체 A24 및 장기간 작용 GLP-1 수용체 작용제의 조합 투여에 상응한다.
도 9는 XY 축 상의 도 8 로부터의 Y 차원 데이터를 재플롯팅한다. 체중에서의 변화 (△△ g, Y-축)는 음식 섭취에서 변화(△△ g, X-축)의 함수로서 플롯팅한다. 관계의 양호한 적합도(R² 0.82)는 음식 섭취에 대한 효과가 체중에 대한 효과를 매우 잘 예측한다는 것을 지적한다. 상기 관계의 기울기는 이 동물 모델에서 주어진 기간 동안 누적 음식 섭취의 주어진 변화(증가 또는 감소)가 체중의 약 56%만큼 큰 상응하는 변화를 유도함을 지적한다.

본 발명의 특정 구현예의 일반 기재

본 발명의 화합물 및 이의 약제학적 조성물은 PYY 수용체의 작용제, 특히 NPY1R, NPY2R, NPY4R 및 NPY5R을 비롯한 인간 PYY 수용체의 작용제로서 유용하다. 본 발명은 또한 상기 화합물, 즉, PYY 유사체 폴리펩티드를 제조하고 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 장기간 작용 PYY 유사체이다. 이들 PYY 유사체 폴리펩티드는 특히 대사 질환 또는 장애, 예를 들어, 2형 당뇨병, 비만을 치료하는 방법 및 체중 감량을 제공하는 방법에 유용하다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알콜성 지방 간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

특정 구현예에서, 본원의 개시내용은 하기 서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

X₀PX₂PX₄X₅PX₇X₈DX₁₀SPX₁₃X₁₄X₁₅X₁₆RX₁₈X₁₉X₂₀DX₂₂X₂₃HX₂₅LX₂₇WLTRX₃₂RX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 90).

정의

본원에서 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 기재하기 위한 것이고, 한정하려는 의도가 아님을 이해해야 한다. 본원 명세서 및 첨부된 청구항에 사용된 단수 형태 "일(a)", "하나(an)" 및 "그(the)"는 달리 명백하게 언급되지 않는 경우 복수의 언급을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "용매"에 대한 언급은 2개 이상의 이러한 용매의 조합을 포함하고, "펩티드"에 대한 언급은 하나 이상의 펩티드 또는 펩티드의 혼합물을 포함하고, "약물"에 대한 언급은 하나 이상의 약물을 포함하고, "삼투성 전달 장치"에 대한 언급은 하나 이상의 삼투성 전달 장치 등을 포함한다. 구체적으로 언급되거나 문맥상 명백하지 않는 경우, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "또는"은 포괄적인 것으로 이해되며 "또는" 및 "및" 둘 다를 포함한다.

구체적으로 기재되지 않거나 문맥으로부터 명백하지 않은 경우, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "약"은 예를 들어, 평균의 2개 표준 편차 내 당업계에서 정상의 관용성 범위내에 있는 것으로 이해된다. "약"은 기재된 값의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 또는 0.01% 이내에 있는 것으로서 이해될 수 있다. 문맥상 달리 명백하지 않는 한, 여기에 제공된 모든 수치는 "약"이라는 용어로 수식된다.

구체적으로 언급되지 않거나 문맥상 명백하지 않는 한, 본원에 사용된 용어 "실질적으로"는 좁은 범위의 변동 또는 그렇지 않으면 당업계의 정상적인 허용 오차 내로 이해된다. 실질적으로 언급된 값의 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 0.01% 또는 0.001% 내에 있는 것으로서 이해될 수 있다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것들과 유사하거나 등가인 방법 및 재료가 본 발명의 실시에 사용될 수 있지만, 바람직한 재료 및 방법은 본원에 기재되어 있다.

본 발명을 기재하고 청구함에 있어서, 하기 정의에 따라 하기 용어가 사용될 것이다.

용어 "약물", "치료학적 제제" 및 "이로운 제제"는 목적하는 이로운 효과를 생성하기 위해 대상체에게 전달되는 임의의 치료학적 활성 물질을 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다. 본 발명의 하나의 구현예에서, 약물은 폴리펩티드이다. 본 발명의 또 다른 구체예에서, 약물은 소분자, 예를 들어 안드로겐 또는 에스트로겐과 같은 호르몬이다. 본 발명의 장치 및 방법은 단백질, 소분자 및 이들의 조합의 전달에 매우 적합하다.

용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 본원에서 상호교환적으로 사용되고 전형적으로 2개 이상의 아미노산(예를 들어, 가장 전형적으로 L-아미노산이지만, 예를 들어 D-아미노산, 변형된 아미노산, 아미노산 유사체 및 아미노산 모방체를 포함하는)의 쇄를 포함하는 분자를 지칭한다.

일부 구현예에서, 천연적으로 존재하는 L-아미노산은 표 1의 통상적인 3문자 또는 대문자 1문자, 아미노산 명칭으로 표시된다. 다른 구현예에서, 천연적으로 존재하는 L-아미노산 및 D-아미노산은 둘 다 표 1의 통상적인 3문자 또는 대문자 1문자, 아미노산 명칭으로 표시된다. 여전히 다른 구현예에서, D-아미노산은 표 2의 1문자 명칭에 상응하는 소문자 1문자 아미노산 명칭, 즉, a, l, m, f, w, k, q, e, s, p, v, i, c, y, h, r, n, d 및 t에 의해 표시된다.

[표 1] 천연적으로 존재하는 아미노산

[표 2] 소문자 명칭은 아미노산의 D 입체이성질체를 지칭한다

펩티드는 천연적으로 존재하거나, 합성적으로 생산될 수 있거나 재조합으로 발현될 수 있다. 펩티드는 또한 아미노산 쇄를 변형시키는 추가 그룹, 예를 들어 해독후 변형을 통해 부가된 기능성 그룹을 포함할 수 있다. 해독후 변형의 예는 아세틸화, 알킬화(메틸화 포함), 비오티닐화, 글루타밀화, 글리실화, 글리코실화, 이소프레닐화, 리포일화, 포스포판테테이닐화, 인산화, 셀렌화, 및 C-말단 아미드화를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 펩티드는 또한 아미노 말단 및/또는 카복시 말단의 변형을 포함하는 펩티드를 포함한다. 말단 아미노 그룹의 변형은 des-아미노, N-저급 알킬, N-디-저급 알킬, 및 N-아실 변형을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 말단 카복시 그룹의 변형은 아미드, 저급 알킬 아미드, 디알킬 아미드, 및 저급 알킬 에스테르 변형(예를 들어, 여기서, 저급 알킬은 C₁-C₄ 알킬이다)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 펩티드는 또한 아미노 말단과 카복시 말단 사이에 있는 아미노산의 변형, 예를 들어 상기 기재된 것에 제한되지 않는 변형을 포함한다. 하나의 구현예에서, 펩티드는 소분자 약물의 첨가에 의해 변형될 수 있다.

펩티드 쇄의 하나의 말단에 말단 아미노산은 전형적으로 유리된 아미노 그룹(즉, 아미노 말단)을 갖는다. 쇄의 다른 말단에서 말단 아미노산은 일반적으로 유리된 카복실 그룹(즉, 카복시 말단)을 갖는다. 전형적으로, 펩티드를 구성하는 아미노산은 아미노 말단에서 시작하여 펩티드의 카복시 말단 방향으로 증가하는 순서대로 번호가 매겨진다.

본원에 사용된 "아미노산 잔기"라는 문구는 아미드 결합 또는 아미드 결합 모방체에 의해 펩티드에 도입되는 아미노산을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "인슐린분비촉진성(insulinotropic)"은 전형적으로 인슐린의 생성 및/또는 활성을 자극하거나 영향을 미치는 화합물(예를 들어, 인슐린분비촉진성 호르몬), 예를 들어 펩티드의 능력을 지칭한다. 이러한 화합물은 전형적으로 대상체에서 인슐린의 분비 또는 생합성을 자극하거나 다르게 영향을 미친다. 따라서, "인슐린분비촉진성 펩티드"는 인슐린의 분비 또는 생합성을 자극하거나 다르게 영향을 미칠 수 있는 아미노산 함유 분자이다.

기재된 폴리펩티드와 관련하여 본원에 사용된 용어 "아실화된"은 기재된 폴리펩티드가 각각 임의로 스페이서를 통해 하나 이상의 친지성 치환체로 치환됨을 의미하며, 여기서 "친지성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다. 각각 임의로 스페이서를 통해 특정 친지성 치환체는 알부민에 결합할 수 있고 생성된 아실화된 폴리펩티드에 대한 알부민의 친화성을 부여할 수 있다. 그 정도는 가변적이고, 친지성 치환체가 각각 임의로 스페이서를 통해 알부민에 결합하고 생성된 아실화된 폴리펩티드에 대한 알부민의 친화성을 부여하는 다양한 인자에 따라 달라진다. 많은 인자는 친지성 치환체, 임의의 스페이서, 폴리펩티드 및 폴리펩티드에 대한 공유 부착 부위의 정체를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "선형" 또는 "라이너 폴리펩티드"는 "비-아실화된" 폴리펩티드, 다른 말로, 각각 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체가 없는 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드를 지칭하고, 여기서 "친지성 치환체" 및 " 스페이서"는 본원에서 정의된다.

본원에 사용된 용어 "접합된" 또는 접합된 폴리펩티드"는 "아실화된" 폴리펩티드, 즉, 각각 임의로 스페이서를 통해 하나 이상의 친지성 치환체를 갖는 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드를 지칭하고, 여기서 "친지성 치환체" 및 "스페이서 "는 본원에서 정의된다.

본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 존재하는 산 또는 염기 모이어티를 이의 염 형태로 전환시킴으로써 모 폴리펩티드가 변형된 기재된 폴리펩티드의 유도체를 지칭한다. 적합한 염의 목록은 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977))에 기재되어 있고, 이들 각각의 전문은 본원에 참조로 포함된다.

본원에 사용된 용어 "비히클"은 화합물, 예를 들어 약물 또는 약물을 함유하는 입자를 운반하는 데 사용되는 매체를 지칭한다. 본 발명의 비히클은 전형적으로 중합체 및 용매와 같은 성분을 포함한다. 본 발명의 현탁액 비히클은 전형적으로 약물 입자 제형을 추가로 포함하는 현탁액 제형을 제조하는데 사용되는 용매 및 중합체를 포함한다.

본원에 사용된 "상 분리"라는 문구는 현탁액 비히클이 수성 환경과 접촉할 때와 같이 현탁액 비히클에서 다중 상(예를 들어, 액체 및 겔 상)의 형성을 지칭한다. 본 발명의 일부 구현예에서, 현탁액 비히클은 대략 10% 미만의 물을 갖는 수성 환경과 접촉시 상 분리를 나타내도록 제형화된다.

본원에 사용된 "단일 상"이라는 문구는 전체적으로 물리적 및 화학적으로 균일한 고체, 반고체 또는 액체 균질 시스템을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "분산된"은 화합물, 예를 들어, 약물 입자 제형을 현탁액 비히클에 용해, 분산, 현탁 또는 달리 분배하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 "화학적으로 안정한"이라는 문구는 탈아미드화(일반적으로 가수분해에 의한), 응집 또는 산화와 같은 화학적 경로에 의해 한정된 기간에 걸쳐 생성된 분해 생성물의 허용 가능한 퍼센트의 제형에서의 형성을 지칭한다.

본원에 사용된 "물리적으로 안정한"이라는 용어는 허용 가능한 퍼센트의 응집체(예를 들어, 이량체 및 기타 고분자량 생성물)의 제형에서의 형성을 지칭한다. 또한, 물리적으로 안정한 제형은 예를 들어 액체에서 고체로, 또는 무정형에서 결정 형태로 물리적 상태를 변화시키지 않는다.

본원에 사용된 용어 "점도"는 전형적으로 필수적으로 다음과 같이 전단율에 대한 전단 응력의 비율로부터 결정되는 값을 언급한다(참조: 예를 들어, Considine, D. M. & Considine, G. D., Encyclopedia of Chemistry, 4th Edition, Van Nostrand, Reinhold, N.Y., 1984):

F/A=μ*V/L (수학식 1)

여기서, F/A=전단 응력 (유닛 면적 당 힘),

μ=비례 상수 (점도), 및

V/L=층 두께 당 속도 (전단율).

상기 관계에서 전단율에 대한 전단 응력의 비율이 점도를 정의한다. 전단 응력 및 전단율의 측정은 전형적으로 선택된 조건(예를 들어, 약 37℃의 온도) 하에 수행된 평행판 유동 측정법을 사용하여 결정된다. 점도 측정을 위한 다른 방법은 점도계, 예를 들어 캐논-펜세이크(Cannon-Fenske) 점도계, 캐논-팬세이크 불투명 용액용 우벨로데(Ubbelohde) 점도계 또는 오스왈드(Ostwald) 점도계를 사용한 동점도 측정을 포함한다. 일반적으로, 본 발명의 현탁액 비히클은 그 안에 현탁된 입자 제형이 저장 및 전달 방법, 예를 들어 이식 가능한 약물 전달 장치에서 사용하는 동안 침강되는 것을 방지하기에 충분한 점도를 갖는다.

본원에 사용된 용어 "비수성"은 예를 들어, 현탁액 제제의 전체 수분 함량, 전형적으로 약 10 중량 % 이하, 예를 들어 약 7 중량 % 이하, 약 5 중량 % 이하, 및/또는 약 4 중량 % 이하를 지칭한다. 또한, 본 발명의 입자 제형은 약 10 중량 % 미만, 예를 들어 약 5 중량 % 미만의 잔류 수분을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 인간, 및 붉은털원숭이 및 기타 원숭이 종 및 침팬지 및 기타 유인원 종과 같은 비-인간 영장류를 제한 없이 포함하는 코르데이터(Chordata) 아문의 임의의 구성원; 소, 양, 돼지, 염소 및 말과 같은 농장 동물; 개 및 고양이와 같은 가축 포유류; 마우스, 래트 및 기니피그와 같은 설치류를 포함하는 실험 동물; 닭, 칠면조 및 기타 담즙 조류, 오리, 거위 등과 같은 가정, 야생 및 사냥감 조류를 포함하는 조류를 지칭한다. 상기 용어는 특정 연령이나 성별을 나타내지 않는다. 따라서 성인 및 신생아 개체 둘 다가 포함되는 것으로 의도된다.

본원에 사용된 용어 "치료", "치료한다" 및 "치료하는"은 본원에 기재된 바와 같이, 질환 또는 장애, 또는 이의 하나 이상의 증상을 역전시키거나, 완화시키거나, 이의 발병을 지연시키거나 이의 진행을 억제하는 것을 지칭한다. 일부 구현예에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발생한 후에 투여될 수 있다. 다른 구현예에서, 치료는 증상의 부재하에 투여될 수 있다. 예를 들어, 치료제는 증상의 발병 이전에 감수성인 개체에게 투여될 수 있다(예를 들어, 증상의 이력에 비추어 및/또는 유전적 또는 기타 감수성 인자에 비추어). 예를 들어, 증상의 재발을 예방하거나 지연시키기 위해 증상이 해결된 후에도 치료를 계속할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "삼투성 전달 장치"는 전형적으로 대상체에게 약물(예를 들어, 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드)을 전달하기 위해 사용되는 장치를 지칭하고, 여기서, 장치는 예를 들어 약물(예를 들어, 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드) 및 삼투성 제제 제형을 포함하는 현탁액 제형을 함유하는 루멘을 갖는 저장소(예를 들어, 티타늄 합금으로 만들어진)를 포함한다. 루멘에 위치한 피스톤 어셈블리는 삼투성 제제 제형으로부터 현탁액 제형을 단리한다. 반투과성 막은 삼투성 제제 제형에 인접한 저장소의 제1 말단부에 위치하고 확산 조절기(현탁액 제형이 장치를 빠져나가는 전달 오리피스를 한정하는)는 현탁액 제형에 인접한 저장소의 제2 말단부에 위치한다. 전형적으로, 삼투성 전달 장치는 예를 들어, 진피하 또는 피하(예를 들어, 상완의 내부, 외부 또는 후방에 및 복부 영역에)로 대상체 내에 이식된다. 예시적인 삼투성 전달 장치는 DUROS®(제조원: ALZA Corporation, Mountain View, Calif.) 전달 장치이다. "삼투성 전달 장치"와 동의어의 예는 "삼투성 약물 전달 장치", "삼투성 약물 전달 시스템", "삼투성 장치", "삼투성 전달 장치", "삼투성 전달 시스템", "삼투성 펌프", "이식 가능한 약물 전달 장치", "약물 전달 시스템", "약물 전달 장치", "이식 가능한 삼투성 펌프", "이식 가능한 약물 전달 시스템" 및 "이식 가능한 전달 시스템"을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "삼투성 전달 장치"에 대한 다른 용어는 당업계에 공지되어 있다.

본원에 사용된 용어 "연속 전달"은 전형적으로 삼투성 전달 장치로부터 이식 부위 근처의 조직, 예를 들어, 진피하 및 피하 조직으로의 실질적으로 연속적인 약물의 방출을 지칭한다. 예를 들어, 삼투성 전달 장치는 필수적으로 삼투성의 원리를 기준으로 미리 결정된 속도로 약물을 방출한다. 세포외 체액은 반투과성 막을 통해 삼투성 전달 장치로 진입하고 삼투성 엔진으로 직접 진입하여, 상기 엔진은 피스톤을 느리고 일관된 이동 속도로 구동하기 위해 팽창한다. 피스톤의 이동은 약물 제형이 확산 조정기의 오리피스를 통해 방출되도록 한다. 따라서, 삼투성 전달 장치로부터 약물은 느리고 제어되고 일관된 속도로 방출된다.

본원에 사용된 용어 "실질적인 정상 상태 전달"은 전형적으로 한정된 기간에 걸쳐 표적 농도 또는 그 근처에서 약물의 전달을 지칭하고, 여기서, 삼투성 전달 장치로부터 전달되는 약물의 양은 실질적으로 0차 전달이다. 활성제(예를 들어, 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드)의 실질적인 0차 전달은 전달되는 약물의 속도가 일정하고 전달 시스템에서 가용한 약물과 무관함을 의미하고; 예를 들어, 0차 전달의 경우 전달된 약물의 비율이 시간에 대해 그래프로 표시되고 선이 데이터에 피팅되면, 상기 선은 표준 방법(예를 들어, 선형 회귀)에 의해 결정된 바와 같이 대략 0의 기울기를 갖는다.

본원에 사용된 "약물 반감기"라는 문구는 약물이 혈장에서 농도의 1/2만큼 제거되는 데 얼마나 소요되는지를 지칭한다. 약물의 반감기는 일반적으로 주사 또는 정맥 주사를 통해 투여될 때 약물이 얼마나 분해되는지를 모니터링하여 측정된다. 약물은 일반적으로 예를 들어 방사선면역검정(RIA), 크로마토그래피 방법, 전기화학발광(ECL) 검정, 효소 결합 면역흡착 검정(ELISA) 또는 면역효소 샌드위치 검정(IEMA)을 사용하여 검출된다.

용어 "μg" 및 "mcg" 및 "ug"은 "마이크로그램"을 의미하는 것으로 이해된다. 유사하게, 용어 "μl" 및 "uL"는 "마이크로리터"를 의미하는 것으로 이해되고, 용어 "μM" 및 "uM"은 "마이크로몰"을 의미하는 것으로 이해된다.

용어 "혈청"은 물질이 검출될 수 있는 임의의 혈액 생성물을 의미한다. 따라서, 용어 혈청은 적어도 전혈, 혈청 및 혈장을 포함한다. 예를 들어, "대상체의 혈청에서 [물질]의 양"은 "대상체의 혈장에서 [상기 물질]의 양을 포함한다.

기준선은 삼투성 전달 장치(약물 또는 위약 포함)의 초기 배치일 또는 그 이전의 마지막 평가로 정의된다.

펩티드 YY(PYY)는 (YPIKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNLVTRQRY-NH₂), 서열번호 800의 아미노산 서열을 갖는 36개 아미노산 잔기 펩티드 아미드이다. PYY는 내장 이동성과 혈류를 억제하고(참조: Laburthe, M., Trends Endocrinol Metab. 1(3):168-74 (1990), 장 분비를 매개하고(참조: Cox, H. M.,　et　al., Br J Pharmacol 101(2):247-52 (1990); Playford, R. J.,　et　al., Lancet 335(8705):1555-7 (1990)), 총 흡수를 자극한다(참조: MacFayden, R. J.,　et　al., Neuropeptides 7(3):219-27 (1986)). 2개의 주요 생체내 변이체인 PYY(1-36) 및 PYY(3-36)가 동정되었다(참조: 예를 들어, Eberlein, G. A.,　et　al., Peptides 10(4), 797-803 (1989)). 펩티드 유사체 및 이의 펩티드 유도체 뿐만 아니라 PYY의 서열은 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, 미국 특허 제5,574,010호 및 제5,552,520호).

예시적인 화합물: PYY 유사체 폴리펩티드

하기 표 3의 것들을 비롯한 특정 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드는 내인성 PYY 및 공지된 PYY 유사체에 대한 것보다 우수한 용해도, 안정성, 생체이용률, 생물학적 활성 및 특이성, 및 보다 긴 반감기 중 하나 이상을 나타낸다. 특정 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드는 공지된 PYY 유사체에 필요한 것보다 덜 빈번한 투여를 수용하도록 개발되었다. 특정 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드는 매주 또는 매월 주사를 통한 투여를 위해 개발되었다. 특정 기재된 PYY 유사체 폴리펩티드는 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 전달 장치의 이식을 통한 투여를 위해 개발되었고, 여기서, 전달 장치는 최대 3개월, 6개월, 9개월, 1년, 18개월 또는 2년의 PYY 유사체 폴리펩티드 용량을 포함한다.

일부 구현예에서, 본원 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 3에 열거된 하기 펩티드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다:

[표 3] 예시적인 화합물: 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 PYY 유사체 폴리펩티드.

표 3의 특정 펩티드의 구조적 표시는 하기 표 4에 제공된다:

[표 4] 예시적인 펩티드의 화학적 구조: 스페이서를 통한 친지성 치환체를 포함하는 PYY 유사체 폴리펩티드, 이들 2개의 펩티드는 브릿징 모이어티를 추가로 포함한다.

주지사항:

K^*와 E^*의 각 쌍 형성과 K^*와 D^*의 각 쌍 형성은 K^*의 아미노 측쇄와 E^*의 카복시 측쇄 또는 D^*의 카복시 측쇄로부터 유도된 공유 아미드 연결(물 분자 상실과 함께)을 나타낸다. 예를 들어, 분절-WD^*RYYK^*D-는 하기를 나타낸다:

본원에 사용된 바와 같이, dpeg는 -COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-을 나타내고; dpeg-dpeg는 -COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-를 나타내고;

카복시 말단 아미노산, 즉, -F₃₄-(NH₂)로 나타낸 F₃₄는 -NH-CH(CH₂Ph)-CONH₂를 도시한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 1 내지 78로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13, 24, 42 및 43으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 3에 제시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 서열번호 1 내지 78로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산(TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일부 구현예에서, 본원 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 5에 열거된 하기 펩티드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다:

[표 5] 예시적인 화합물: 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체를 임의로 포함하고; 임의로 브릿징 모이어티를 추가로 포함하는 PYY 유사체 폴리펩티드.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 181로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 113, 124, 및 143으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 5에 제시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 서열번호 101 내지 181로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산(TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 113의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 124의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 143의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일부 구현예에서, 본원 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 6에 열거된 하기 펩티드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다:

[표 6] 예시적인 화합물: 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합된 PYY 유사체 폴리펩티드

주지사항:

K^*와 E^*의 각 쌍 형성과 K^*와 D^*의 각 쌍 형성은 K^*의 아미노 측쇄와 E^*의 카복시 측쇄 또는 D^*의 카복시 측쇄로부터 유도된 공유 아미드 연결(물 분자 상실과 함께)을 나타낸다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 239의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 240의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 241의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 242의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 243의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 244의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 245의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 246의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 247의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 248의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 280의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 281의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산 (TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 242의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 242의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 242의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 242의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

하나의 구현예에서, 화합물은 서열번호 243의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 243의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 243의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호 243의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

예시적인 구현예의 기재

X₀PX₂PX₄X₅PX₇X₈X₉X₁₀SPX₁₃X₁₄X₁₅X₁₆RX₁₈X₁₉X₂₀DX₂₂X₂₃HX₂₅X₂₆X₂₇WLTRX₃₂RX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 90), 여기서:

X₀은 부재이거나 K이고;

X₂는 K이고;

X₄는 E 또는 K이고;

X₅는 A 또는 K이고;

X₇은 G 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₉는 D 또는 K이고;

X₁₀는 A 또는 K이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₄는 E 또는 K이고;

X₁₅는 L 또는 W이고;

X₁₆은 D, E, K, N, Q, S, T, α-메틸세린 또는 호모세린이고;

X₁₈은 K 또는 Y이고;

X₁₉는 K 또는 Y이고;

X₂₀은 A, D, E, K, k, 또는 Dap이고,

X₂₂는 A, D, K, 또는 L이고;

X₂₃은 K 또는 R이고;

X₂₅는 K 또는 Y이고;

X₂₆은 E, K, 또는 L이고;

X₂₇은 K 또는 N이고;

X₃₂는 K 또는 Q이고;

X₃₄는 F, y, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;

여기서, X₀, X₂, X₄, X₅, X₇, X₈, X₁₃, X₂₀, X₂₃, X₂₅, X₂₇, 또는 X₃₂이 K인 경우, 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;

여기서, 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₉ 및 X₁₃ 또는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 또는 위치 X₂₂ 및 X₂₆에 위치한다.

일부 구현예에서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂는 A이다.

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, X₈이 E인 경우, X₅는 K이고, X₂₀은 K이고, X₅ 또는 X₂₀ 중 어느 하나의 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 임의로 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₈은 K이다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드 서열의 8번 위치에서 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₉ 및 X₁₃ 각각에서 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₉ 및 X₁₃ 각각에서 아스파르트산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다.

일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 아스파르트산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 글루탐산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₂₂ 및 X₂₆ 각각에서 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₂₂ 및 X₂₆ 각각에서 아스파르트산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다.

일부 구현예에서, X₀은 부재이다. 일부 구현예에서, X₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₂는 K이다. 일부 구현예에서, X₂는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₄는 E이다. 일부 구현예에서, X₄는 K이다. 일부 구현예에서, X₄는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₇은 G이다. 일부 구현예에서, X₇은 K이다. 일부 구현예에서, X₇은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₈는 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 k이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다.

본원에 사용된 바와 같이, k는 D-라이신을 지칭한다.

일부 구현예에서, X₉는 D이다. 일부 구현예에서, X₉는 K이다.

일부 구현예에서, X₁₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₃은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₃은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₃은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₄는 E이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 K이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 L이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 T이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 α-메틸세린이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 호모세린이다.

일부 구현예에서, X₁₈은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₈은 Y이다.

일부 구현예에서, X₁₉는 K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는 Y이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 Dap이다.

본원에 사용된 바와 같이, Dap는 디아미노피멜산을 지칭한다.

일부 구현예에서, X₂₂는 A이다. 일부 구현예에서, X₂₂는 D이다. 일부 구현예에서, X₂₂는 K이다. 일부 구현예에서, X₂₂는 L이다.

일부 구현예에서, X₂₃은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₃은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₃은 R이다.

일부 구현예에서, X₂₅는 K이다. 일부 구현예에서, X₂₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₅는 Y이다.

일부 구현예에서, X₂₆은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₆은 L이다.

일부 구현예에서, X₂₇은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₇는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₇은 N이다.

일부 구현예에서, X₃₂는 K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는 Q이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 y이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 3-피리디닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-피리디닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-카복시페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-플루오로페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-메틸페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 N-메틸페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 호모페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 β-호모티로신이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 호모티로신이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 N-메틸티로신이다.

본원에 사용된 바와 같이, y는 D-티로신을 지칭한다.

일부 구현예에서, 카복시 말단 아미노산, 즉, X₃₄는 -X₃₄-(NH₂)이다. 일부 구현예에서, 카복시 말단 아미노산 X₃₄는 -X₃₄-(OH)이다.

일부 구현예에서, 서열번호 90의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 D이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅은 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이고, X₃₄은 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₃₄은 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₃₄은 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 A이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

특정 구현예에서, 본원의 개시내용은 하기 서열번호 91의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 91), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₇은 G 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₅는 L 또는 W이고;

X₁₆은 D, E, K, N, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;

X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고,

X₂₂는 A 또는 L이고;

X₃₄는 F, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;

여기서, X₅, X₇, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치한다.

일부 구현예에서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂는 A이다.

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, X₈는 K이다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드 서열의 8번 위치에서 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 아스파르트산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다. 일부 구현예에서, 펩티드는 추가로 위치 X₁₆ 및 X₂₀ 각각에서 글루탐산과 라이신의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성되는 락탐 브릿지를 포함한다.

일부 구현예에서, X₅은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₇은 G이다. 일부 구현예에서, X₇은 K이다. 일부 구현예에서, X₇는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 k이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 α-메틸세린이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 호모세린이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, X₂₂는 A이다. 일부 구현예에서, X₂₂는 L이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 3-피리디닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-피리디닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-카복시페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-플루오로페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 4-메틸페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 N-메틸페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 호모페닐알라닌이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 β-호모티로신이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 호모티로신이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 N-메틸티로신이다.

일부 구현예에서, 서열번호 91의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₁₆는 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆는 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅은 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

특정 구현예에서, 본원의 개시내용은 하기 서열번호 92의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 92), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₇은 G 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₅는 L 또는 W이고;

X₁₆은 D, E, K, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;

X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고,

X₂₂는 A 또는 L이고;

일부 구현예에서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂는 A이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 α-메틸세린이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 호모세린이다.

일부 구현예에서, 서열번호 92의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅은 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 A이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

특정 구현예에서, 본원의 개시내용은 하기 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 93), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₇은 G 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₅는 L 또는 W이고;

X₁₆은 D, E, K, N, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;

X₂₀은 D, E, K, 또는 k이고,

X₂₂는 A 또는 L이고;

일부 구현예에서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂는 A이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, 서열번호 93의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅은 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₅는 W이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₅는 W이고, X₁₆은 N이고, X₃₄는 F이다.

특정 구현예에서, 본 발명은 하기 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

PKPEX₅PGX₈DASPX₁₃EWX₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 94), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₆은 D, E, K, 또는 N이고;

X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;

X₂₂는 A 또는 L이고;

X₃₄는 F 또는 N-메틸티로신이고;

여기서, X₅, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이다.

일부 구현예에서, X₂₀는 A이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다. 일부 구현예에서, X₃₄는 N-메틸티로신이다.

일부 구현예에서, 서열번호 94의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅은 A이고, X₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₈은 E이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅은 K이고, X₈은 E이고, X₃₄는 F이다.

특정 구현예에서, 본원의 개시내용은 하기 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

PKPEX₅PGK₈DASPX₁₃EWX₁₆RYYX₂₀DLRHYLNWLTRQRF-(OH/NH₂) (서열번호 95), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₆은 D, E, K, 또는 N이고;

X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;

여기서, X₅, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, K는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, K₈은 비치환된다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, 카복시 말단 아미노산, 즉, F₃₄는 -F₃₄-(NH₂)이다. 일부 구현예에서, 카복시 말단 아미노산 F₃₄는 -F₃₄-(OH)이다.

일부 구현예에서, 서열번호 95의 컨센서스 서열로 나타낸 특정 아미노산은 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₂₀은 A이다.

일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이고, X₂₀은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 A이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 D이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 N이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₂₀은 A이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 A이고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 D이다.

일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 N이고, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합되고, X₁₆은 D이고, X₂₀은 K이다.

임의로 스페이서를 통해 임의의 펩티드에 친지성 치환체의 접합.

일부 구현예에서, 임의의 기재된 폴리펩티드는 임의로 각각 임의로 스페이서를 통해 하나 이상의 친지성 치환체로 치환되고, 여기서 "친지성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다. 일부 구현예에서, 서열번호 1 내지 서열번호 78의 임의의 컨센서스 서열로 나타내는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 임의의 기재된 폴리펩티드는 각각 임의로 스페이서를 통해 하나 이상의 친지성 친환체를 포함하거나 변형될 수 있거나 추가로 각각 임의로 스페이서를 통한 하나 이상의 친지성 치환체의 공유 부착에 의해 추가로 변형될 수 있다. 일부 구현예에서, 서열번호 101 내지 서열번호 181의 임의의 컨센서스 서열로 나타내는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 임의의 기재된 폴리펩티드는 각각 임의로 스페이서를 통한 하나 이상의 친지성 친환체의 공유 부착에 의해 변형될 수 있다. 일부 구현예에서, 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 또는 281의 임의의 컨센서스 서열로 나타내는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 임의의 기재된 폴리펩티드는 각각 임의로 스페이서를 통한 하나 이상의 친지성 친환체의 공유 부착에 의해 변형될 수 있다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 친지성 치환체의 카복실 그룹, 또는 임의로 스페이서의 아미노 그룹에 의해 폴리펩티드의 아미노 그룹(예를 들어, 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹)에 부착될 수 있고, 여기서, 스페이서의 카복실 그룹은 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹와 아미드 결합을 형성한다.

친지성 치환체

각각 임의로 "스페이서"를 통한 본 발명의 임의의 기재된 폴리펩티드로의 하나 이상의 "친지성 치환체"의 접합은 접합된 폴리펩티드의 혈청 알부민으로의 결합 및 지연된 신장 제거를 촉진함으로써 폴리펩티드의 작용을 연장하기 위해 의도된다. 본원에 사용된 "친지성 치환체"는 4 내지 40개의 탄소 원자, 8 내지 25개의 탄소 원자, 12 내지 22개의 탄소 원자, 또는 6 내지 20개의 탄소 원자를 포함하는 치환체를 포함한다. 친지성 치환체는 친지성 치환체의 카복실 그룹, 또는 임의로 스페이서의 아미노 그룹에 의해 폴리펩티드의 아미노 그룹(예를 들어, 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹)에 부착될 수 있고, 여기서, 스페이서의 카복실 그룹은 이어서 이것이 부착된 아미노산 (예를 들어, 라이신) 잔기의 아미노 그룹과의 아미드 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드는 3개, 2개, 또는 바람직하게는 1개의 친지성 치환체를 각각 포함하며, 이는 하기에 보다 상세히 정의되는 임의의 스페이서가 있거나 없다.

일부 구현예에서, 친지성 치환체는 직쇄 또는 분지된 알킬 그룹을 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 직쇄 또는 분지된 지방산의 아실 그룹이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 하나 이상의 카복실산 및/또는 히드록삼산 그룹으로 추가로 치환된 직쇄 또는 분지된 지방산의 아실 그룹이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 임의의 스페이서 없이 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO(CH₂)₁₆CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO(CH₂)₁₈CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO(CH₂)₂₀CO₂H이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 임의의 스페이서 없이 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 화학식 I의 1가 그룹이다:

화학식 I

-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고,

상기 친지성 치환체는 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹 (예를 들어, 라이신의 ε-아미노 그룹)과 친지성 치환체의 CO- 그룹 간의 아미드 결합을 형성한다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체, -CO-(CH₂)_m-Z는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹에 연결되고, 여기서, 상기 스페이서는 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 CO- 그룹 사이에 브릿지를 형성한다.

일부 구현예에서, m은 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18, 및 20으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이고, 친지성 치환체는 화학식 -CO-(CH₂)_m-CO₂H를 갖는다. 일부 구현예에서, -CO-(CH₂)_m-Z는 -CO-(CH₂)₄-CO₂H, -CO-(CH₂)₅-CO₂H, -CO-(CH₂)₆-CO₂H, -CO-(CH₂)₇-CO₂H, -CO-(CH₂)₈-CO₂H, -CO-(CH₂)₉-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₀-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₁-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₂-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₃-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₄-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₅-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₆-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₇-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₉-CO₂H, -CO-(CH₂)₂₀-CO₂H로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₄-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₆-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체는 -CO-(CH₂)₂₀-CO₂H이다.

일부 구현예에서, Z는 -CH₃이고, 친지성 치환체는 화학식 -CO-(CH₂)_m-CH₃을 갖는다. 일부 구현예에서, -CO-(CH₂)_m-Z는 -CO-(CH₂)₄-CH₃, -CO-(CH₂)₅-CH₃, -CO-(CH₂)₆-CH₃, -CO-(CH₂)₇-CH₃, -CO-(CH₂)₈-CH₃, -CO-(CH₂)₉-CH₃, -CO-(CH₂)₁₀-CH₃, -CO-(CH₂)₁₁-CH₃, -CO-(CH₂)₁₂-CH₃, -CO-(CH₂)₁₃-CH₃, -CO-(CH₂)₁₄-CH₃, -CO-(CH₂)₁₅-CH₃, -CO-(CH₂)₁₆-CH₃, -CO-(CH₂)₁₇-CH₃, -CO-(CH₂)₁₈-CH₃, -CO-(CH₂)₁₉-CH₃, 및 -CO-(CH₂)₂₀-CH₃로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

친지성 치환체 및 스페이서

일부 구현예에서, 친지성 치환체는 "스페이서"에 의해 모 펩티드에 부착된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 서열번호 1 내지 서열번호 143의 임의의 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 기재된 폴리펩티드 중 임의의 것이 제공되고, 여기서, 친지성 치환체는 스페이서를 통해 라이신의 ε-아미노 그룹에 연결되고, 상기 스페이서는 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 CO-그룹 사이에 브릿지를 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 하나 이상의 아미노산, 예를 들어, 단일 아미노산, 예를 들어, Glu, Asp, Gly 또는 Lys, 디펩티드, 예를 들어, 2(Glu), Glu-Gly, 또는 폴리펩티드, 예를 들어, 3(Glu), 4(Glu) (서열번호 814), 2(Glu)-Gly 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 스페이서가 하나 이상의 아미노산, 예를 들어, Glu, Asp, Gly 또는 Lys를 포함하는 경우, 스페이서의 하나의 카복실 그룹은 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있고, 스페이서의 아미노 그룹은 친지성 치환체의 카복실 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있다.

일부 구현예에서, 스페이서가 카복실산-말단화 측쇄를 추가로 포함하는 Glu 또는 Asp를 포함하는 경우, Glu 또는 Asp-함유 스페이서의 측쇄의 말단 카복실 그룹은 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있고, Glu 또는 Asp-함유 스페이서의 아미노 그룹은 친지성 치환체, 즉, γGlu 또는 βAsp의 카복실 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있다.

일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-γGlu-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-γGlu-dpeg-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -dpeg-dpeg-γGlu-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-dpeg-dpeg-γGlu-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-γGlu-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)₂NH]₂-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 비제한적인 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 표 7에 열거된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1가 그룹을 형성한다:

[표 7] 대표적인 친지성 치환체 및 스페이서 모이어티

바람직하게, 친지성 치환체 및 스페이서는 폴리펩티드의 아미노 그룹에 부착된다. 특히, 친지성 치환체의 카복실 그룹, 또는 임의로 스페이서의 카복실 그룹은 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹과 아미드 결합을 형성한다. 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 결합된 라이신 잔기는 L-라이신 또는 D-라이신일 수 있다. 대표적인 스페이서 모이어티 및 친지성 치환체의 구조적 표시는 표 8에 제공된다:

[표 8] 라이신에 결합된 대표적인 스페이서 모이어티 및 친지성 치환체의 구조

일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 II의 1가 그룹을 형성한다:

화학식 II

-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다. 일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, n은 1 내지 5이다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y는 Gly이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 III의 1가 그룹이다:

화학식 III

-(V)_r-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이고;

r은 1 내지 6이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, Z는 -CH₃이다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y는 Asp이다. 일부 구현예에서, Y는 Gly이다.

일부 구현예에서, m은 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18, 및 20으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다.

일부 구현예에서, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n은 1 내지 5이다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다.

일부 구현예에서, r은 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, r은 1이다. 일부 구현예에서, r은 2이다. 일부 구현예에서, r은 3이다. 일부 구현예에서, r은 4이다. 일부 구현예에서, r은 5이다.

일부 구현예에서, t는 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, t는 1, 2, 3, 4, 5, 및 6으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu이고; Z는 -CO₂H이고; m은 16이고; n은 1이고; r은 2이고; t는 2이다.

하나의 구현예에서, -(V)_r-(Y)_n-는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)₂NH]₂-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 IV의 1가 그룹이다:

화학식 IV

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y1은 Asp이다. 일부 구현예에서, Y1은 Gly이다.

일부 구현예에서, Y2는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y2는 Asp이다. 일부 구현예에서, Y2는 Gly이다.

일부 구현예에서, n1은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n1은 0 내지 3이다. 일부 구현에에서, n1은 0이다. 일부 구현에에서, n1은 1이다. 일부 구현에에서, n1은 2이다. 일부 구현에에서, n1은 3이다. 일부 구현에에서, n1은 4이다. 일부 구현에에서, n1은 5이다.

일부 구현예에서, n2는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n2는 0 내지 3이다. 일부 구현예에서, n2는 0이다. 일부 구현예에서, n2는 1이다. 일부 구현예에서, n2는 2이다. 일부 구현예에서, n2는 3이다. 일부 구현예에서, n2는 4이다. 일부 구현예에서, n2는 5이다.

일부 구현예에서, r은 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, r은 1이다. 일부 구현예에서, r은 2이다. 일부 구현예에서, r은 3이다. 일부 구현예에서, r은 4이다. 일부 구현예에서, r은 5이다. 일부 구현예에서, r은 6이다. 일부 구현예에서, r은 7이다. 일부 구현예에서, r은 8이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, Y2는 γGlu이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, -(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 -γGlu-γGlu-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-γGlu-, -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-γGlu-, -dpeg-dpeg-γGlu-, -γGlu-γGlu-γGlu-dpeg-, 및 -γGlu-dpeg-로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 V의 1가 그룹이다:

화학식 V

-(γGlu)_n-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다.

일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다.

일부 구현예에서, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 VI의 1가 그룹이다:

화학식 VI

-(γGlu)_n-(Gly)-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, (γGlu)_n은 γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu) (서열번호 810); 및 5(γGlu) (서열번호 811)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, -(γGlu)_n-(Gly)-는 2(γGlu),Gly; 및 3(γGlu),Gly (서열번호 812)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 VII의 1가 그룹이다:

화학식 VII

-(Gly)-(γGlu)_n-(CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 특정의 선행 화학식으로 나타낸 특정 변수는 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이다.

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 VIII의 1가 그룹이다:

화학식 VIII

-(Y1)_n1-(V)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 IX의 1가 그룹이다:

화학식 IX

-(Y)_n-(V)_r-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n은 1 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 X의 1가 그룹이다:

화학식 X

-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

r은 1 내지 8이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, -(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 dpeg,γGlu; 및 dpeg,dpeg,γGlu로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

하나의 구현예에서, -(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 -dpeg-dpeg-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친지성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친지성 치환체 및 스페이서는 화학식 XI의 1가 그룹이다:

화학식 XI

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-CO-(CH₂)_m-Z

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, r은 1이고, n1은 2이다.

일부 구현예에서, -(Y1)_n1-(dpeg)_r-은 -γGlu-γGlu-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-, -γGlu-γGlu-γGlu-dpeg-, 및 -γGlu-dpeg-로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

추가의 예시적 스페이서

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XII의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XII

-N(R₁)(CHR₂)_pCO―[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r

여기서,

각각의 R₁ 및 R₃은 수소 또는 C₁-C₄ 알킬이고;

각각의 R₂는 H 또는 CO₂H이고;

p는 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;

q는 1, 2 또는 3이고;

r은 0 또는 1이며,

상기 스페이서는 개시된 폴리펩티드의 아미노 기와 친지성 치환체의 CO- 기 사이에 브릿지를 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIII의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XIII

[-N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r

여기서,

각각의 R₃은 수소 또는 C₁-C₄ 알킬이고;

q는 1, 2 또는 3이고;

r은 0 또는 1이다.

상기 스페이서는 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 CO- 그룹 사이에 브릿지를 형성한다.

일부 구현예에서, 특정 화학식으로 나타낸 특정 변수는 하기를 포함한다:

일부 구현예에서, 각각의 R₁은 수소이다. 일부 구현예에서, 각각의 R₃은 수소이다. 일부 구현예에서, 각각의 R₁ 및 각각의 R₃은 수소이다.

일부 구현예에서, 적어도 하나의 R₂는 CO₂H이다. 일부 구현예에서, 하나의 R₂는 CO₂H이다.

일부 구현예에서, p는 1이다. 일부 구현예에서, p는 2이다. 일부 구현예에서, p는 3이다. 일부 구현예에서, p는 4이다. 일부 구현예에서, p는 5이다. 일부 구현예에서, p는 6이다.

일부 구현예에서, q는 1이다. 일부 구현예에서, q는 2이다. 일부 구현예에서, q는 3이다.

일부 구현예에서, r은 0이다. 일부 구현예에서, r은 1이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 γ-글루타밀, 즉, -NH(CHCO₂H)(CH₂)₂CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 γ-아미노부타노일, 즉, -NH(CH₂)₃CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 β-아스파라길, 즉, -NH(CHCO₂H)(CH₂)CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₂CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 글라이실이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 β-알라닐이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO-- [N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₃CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)₂O)₂(CH₂)CO-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₃CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)2O)₂(CH₂)CO-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)CH₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIV의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XIV

-(Y)_n-

여기서

Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 상기 스페이서는 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 CO- 그룹 사이에 브릿지를 형성한다. 일부 구현예에서, 스페이서의 한쪽 말단은 기재된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 공유 결합을 형성하고, 스페이서의 다른 말단은 수소 원자 또는 보호 그룹과 공유 결합을 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XV의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XV

-(γGlu)_n-

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVI의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XVI

-(γGlu)_n-(Gly)-

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, (γGlu)_n은 γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu); 및 5(γGlu)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, -(γGlu)_n-(Gly)-는 2(γGlu),Gly; 및 3(γGlu),Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVII의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XVII

-(Gly)-(γGlu)_n-

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVIII의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XVIII

-(V)_r-(Y)_n-

여기서,

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[ COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n은 1 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIX의 2가 그룹을 포함한다:

화학식 XIX

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-

여기서,

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, Y2는 γGlu이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, n2는 0이다.

따라서, 일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 친지성 치환체를 추가로 포함하고, 임의로 스페이서를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 I의 친지성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 I의 친지성 치환체 및 화학식 XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XVIII, 및 XIX에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 157 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, 및 XI에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 친지성 치환체 및 스페이서를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 I에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 친지성 치환체 및 스페이서를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 II에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 친지성 치환체 및 스페이서를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 III에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 친지성 치환체 및 스페이서를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 101 내지 서열번호 181 및 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 나타낸 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 단리된 펩티드는 화학식 IV에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 친지성 치환체 및 스페이서를 추가로 포함한다. 본원에 사용된 바와 같이, (γGlu)₂및 2(γGlu) 둘 다는 -(γGlu)-(γGlu)- 또는 -CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-를 의미하고; (γGlu)₃및 3(γGlu) 둘 다는 -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)- 또는 -CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH- 등을 의미하고; 여기서 변수는 소정의 화학식에서 1회 초과로 존재하고, 상기 변수의 각각의 위치는 독립적으로 결정된다. 예를 들어, 그룹 -(Y)₃-에 대해, 여기서 Y는 γGlu, Asp, Lys, 또는 Gly일 수 있고, 각각의 Y는 독립적으로 4개의 아미노산 중 하나인 것으로 선택된다. 따라서, 비제한적인 예로서, -(Y)₃-는 -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)-, -(γGlu)-(Asp)-(γGlu)-, -(Gly)-(Asp)-(γGlu)-, 또는 -(Gly)-(γGlu)-(γGlu)-일 수 있다.

결합 모이어티

일부 구현예에서, 임의의 기재된 폴리펩티드는 임의로 하나 이상의 결합 모이어티로 치환된다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "브릿징 모이어티"는 공유 결합 또는 2개의 개별 아미노산 잔기의 2개의 측쇄를 연결하는 임의의 2가 링커 또는 모이어티를 의미한다. 일부 구현예에서, 임의의 기재된 폴리펩티드는 임의로 하나 이상의 락탐 브릿징 모이어티로 치환된다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "락탐 브릿징 모이어티"는 2개의 개별 아미노산 잔기의 아미노 함유 측쇄 및 카복시 함유 측쇄를 연결하는 락탐 브릿지 또는 락탐 결합을 의미한다. 일부 구현예에서, 락탐 브릿징 모이어티가 라이신 잔기와 아스파르트산 잔기 사이에 형성되고 라이신의 아미노 함유 측쇄와 아스파르트산의 카복시 함유 측쇄가 공유 결합되어 물이 손실되어 락탐 브릿징 모이어티를 형성한다. 일부 구현예에서, 락탐 브릿징 모이어티가 라이신 잔기와 글루탐산 잔기 사이에 형성되고 라이신의 아미노 함유 측쇄와 글루탐산의 카복시 함유 측쇄가 공유 결합되어 물이 손실되어 락탐 브릿징 모이어티를 형성한다. 일부 구현예에서, 락탐 브릿징 모이어티는 펩티드 상에서 3개, 4개 또는 5개 잔기로 이격되어 있는 2개의 아미노산 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 브릿징 모이어티는 펩티드 상에서 4개 잔기로 이격되어 있는 2개의 아미노산 사이에 형성된다.

폴리펩티드 중간체 및 본 발명의 화합물을 제공하는 일반적인 방법

본 발명의 화합물은 일반적으로 유사한 화합물에 대해 당업자에게 공지된 합성 및/또는 반합성 방법 및 본원의 실시예에 상세히 기재된 방법에 의해 제조 또는 단리될 수 있다.

특정 보호 그룹("PG"), 이탈기("LG"), 또는 변환 조건이 도시된 하기 반응식에서, 당업자는 다른 보호 그룹, 이탈기, 및 변환 조건이 또한 적합하고 고려됨을 이해할 것이다. 상기 그룹 및 변환은 문헌(참조: March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, M. B. Smith and J. March, 5^th Edition, John Wiley & Sons, 2001, Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, 2^nd Edition, John Wiley & Sons, 1999, and Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999, 이의 각각의 전문은 본원에 참조로 포함됨)에 상세히 기재되어 있다.

본원에 사용된 바와 같은 문구 "이탈기" (LG)는 할로겐(예를 들어, 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드), 설포네이트 (예를 들어, 메실레이트, 토실레이트, 벤젠설포네이트, 브로실레이트, 노실레이트, 트리플레이트), 디아조늄 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 문구 "산소 보호 그룹"은 예를 들어, 카보닐 보호 그룹, 하이드록실 보호 그룹 등을 포함한다. 하이드록실 보호 그룹은 당업계에 널리 공지되어 있고, 문헌(참조: Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999, 이의 전문은 본원에 참조로 포함됨)에 상세히 기재된 것들을 포함한다. 적합한 하이드록실 보호 그룹의 예는 에스테르(예를 들어, 아세틸, 벤질), 알릴 에테르, 에테르, 실릴 에테르, 알킬 에테르, 아릴알킬 에테르, 벤질 에테르 및 알콕시알킬 에테르를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 상기 에스테르의 예는 포르메이트, 아세테이트, 카보네이트, 및 설포네이트를 포함한다. 구체적인 예는 포르메이트, 벤조일 포르메이트, 클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트리페닐메톡시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트, 4,4-(에틸렌디티오)펜타노에이트, 피발로에이트(트리메틸아세틸), 크로토네이트, 4-메톡시-크로토네이트, 벤조에이트, p-베닐벤조에이트, 2,4,6-트리메틸벤조에이트, 카보네이트, 예를 들어, 메틸, 9-플루오레닐메틸, 에틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-(페닐설포닐)에틸, 비닐, 알릴 및 p-니트로벤질을 포함한다. 이러한 실릴 에테르의 예는 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴, 트리이소프로필실릴 및 기타 트리알킬실릴 에테르를 포함한다. 알킬 에테르는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 트리틸, t-부틸, 알릴, 및 알릴옥시카보닐 에테르 또는 유도체를 포함한다. 알콕시알킬 에테르는 메톡시메틸, 메틸티오메틸, (2-메톡시에톡시)메틸, 벤질옥시메틸, 베타-(트리메틸실릴)에톡시메틸, 및 테트라하이드로피라닐 에테르와 같은 아세탈을 포함한다. 아릴알킬 에테르의 예는 벤질, p-메톡시벤질 (MPM), 3,4-디메톡시벤질, O-니트로벤질, p-니트로벤질, p-할로벤질, 2,6-디클로로벤질, p-시아노벤질, 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.

아미노 보호 그룹은 당업계에 널리 공지되어 있고, 문헌(참조:Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999, 이의 전문은 본원에 참조로 포함됨)에 상세히 기재된 것들을 포함한다. 적합한 아미노 보호 그룹은 아르알킬아민, 카바메이트, 사이클릭 이미드, 알릴 아민, 아미드 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 그룹의 예는 t-부틸옥시카보닐(Boc), 에틸옥시카보닐, 메틸옥시카보닐, 트리클로로에틸옥시카보닐, 알릴옥시카보닐(Alloc), 벤질옥소카보닐(Cbz), 알릴, 프탈이미드, 벤질(Bn), 디메틸-2,6-디옥소시클로헥스-1-일리덴)에틸 (Dmb), 1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소시클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸(ivDde), 플루오레닐메틸카보닐(Fmoc), 포르밀, 아세틸, 클로로아세틸, 디클로로아세틸, 트리클로로아세틸, 페닐아세틸, 트리플루오로아세틸, 벤조일 등을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 또한 기재된 PYY 유사체의 합성 펩티드 중간체에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 폴리펩티드 중간체는 서열번호 101 내지 서열번호 181 또는 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드이고, 여기서, 적어도 하나의 아미노산은 보호 그룹에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 폴리펩티드 중간체는 서열번호 101 내지 서열번호 181 또는 서열번호 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 280, 및 281 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드이고, 여기서, 적어도 하나의 아미노산은 본원에 정의된 바와 같은 스페이서에 공유적으로 결합되어 있고, 스페이서는 추가로 보호 그룹 또는 수소 원자에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드 중간체는 이의 측쇄의 아미노 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 라이신 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 라이신 잔기는 Alloc 또는 ivDde에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 아스파르트산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 아스파르트산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 글루탐산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 글루탐산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다.

예시적인 폴리펩티드 중간체

특정 구현예에서, 본 발명은 또한 기재된 PYY 유사체의 합성 펩티드 중간체에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 본원의 폴리펩티드 중간체는 서열번호 390의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:

X₀PX₂PX₄X₅PX₇X₈X₉X₁₀SPX₁₃X₁₄X₁₅X₁₆RX₁₈X₁₉X₂₀DX₂₂X₂₃HX₂₅X₂₆X₂₇WLTRX₃₂RX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 390), 여기서:

X₀은 부재이거나 K이고;

X₂는 K이고;

X₄는 E 또는 K이고;

X₅는 A 또는 K이고;

X₇은 G 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₉는 D 또는 K이고;

X₁₀는 A 또는 K이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₄는 E 또는 K이고;

X₁₅는 L 또는 W이고;

X₁₆은 D, E, K, N, Q, S, T, α-메틸세린 또는 호모세린이고;

X₁₈은 K 또는 Y이고;

X₁₉는 K 또는 Y이고;

X₂₀은 A, D, E, K, k, 또는 Dap이고,

X₂₂는 A, D, K, 또는 L이고;

X₂₃은 K 또는 R이고;

X₂₅는 K 또는 Y이고;

X₂₆은 E, K, 또는 L이고;

X₂₇은 K 또는 N이고;

X₃₂는 K 또는 Q이고;

여기서, X₀, X₂, X₄, X₅, X₇, X₈, X₁₃, X₂₀, X₂₃, X₂₅, X₂₇, 또는 X₃₂가 K인 경우, 라이신 잔기는 보호 그룹 또는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 보호 그룹 또는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 임의로 공유적으로 결합되고,

일부 구현예에서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂는 A이다.

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, X₈은 E인 경우, X₅는 K이고, X₂₀은 K이다.

일부 구현예에서, X₈은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₅는 W이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₀은 부재이다. 일부 구현예에서, X₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₂는 K이다. 일부 구현예에서, X₂는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₄는 E이다. 일부 구현예에서, X₄는 K이다. 일부 구현예에서, X₄는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₄는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₅는 A이다. 일부 구현예에서, X₅는 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₅는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₇은 G이다. 일부 구현예에서, X₇은 K이다. 일부 구현예에서, X₇은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₇은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₈은 E이다. 일부 구현예에서, X₈은 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈은 k이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₈은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, X₁₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₃은 E이다. 일부 구현예에서, X₁₃은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₃은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₃은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 Dap이다.

일부 구현예에서, X₂₃은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₃은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₃은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₃은 R이다.

일부 구현예에서, X₂₅는 K이다. 일부 구현예에서, X₂₅는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₅는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₅는 Y이다.

일부 구현예에서, X₂₇은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₇은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₇는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₇은 N이다.

일부 구현예에서, X₃₂는 K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는 Q이다.

일부 구현예에서, 본원의 폴리펩티드 중간체는 서열번호 394의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:

PKPEX₅PGX₈DASPX₁₃EWX₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 394), 여기서:

X₅는 A 또는 K이고;

X₈은 E, K, 또는 k이고;

X₁₃은 E 또는 K이고;

X₁₆은 D, E, K, 또는 N이고;

X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;

X₂₂는 A 또는 L이고;

X₃₄는 F 또는 N-메틸티로신이고;

여기서, X₅, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 라이신 잔기는 보호 그룹 또는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 임의로 공유적으로 결합되고,

여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 보호 그룹 또는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 임의로 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀은 A가 아니다.

일부 구현예에서, X₈는 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₈는 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₃₄는 F이다.

일부 구현예에서, X₂₀은 A이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 D이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₂₀은 보호 그룹에 임의로 결합된 스페이서에 공유적으로 결합된 k이다.

일부 구현예에서, 본원 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 9, 10, 11 및 12에 열거된 하기 펩티드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다.

[표 9] 서열번호 24, 42 및 43의 예시적인 폴리펩티드 중간체.

[표 10] 화합물 A24 및 이의 예시적인 폴리펩티드 중간체

주지사항:

alloc = 알릴옥시카보닐 보호 그룹

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 A24의 펩티드 중간체 (서열번호 24)를 제공한다. 일부 구현예에서, 화합물 A24의 펩티드 중간체는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함한다. 일부 구현예에서, 화합물 A24의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 아미노 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 라이신 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 라이신 잔기는 Alloc 또는 ivDde에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A24의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 아스파르트산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 아스파르트산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A24의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 글루탐산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 글루탐산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A24의 펩티드 중간체는 본원에 정의된 바와 같은 스페이서에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함하고, 여기서, 상기 스페이서는 추가로 보호 그룹 또는 수소 원자에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 10에 제시된 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 324의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 424의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 124의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 524의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다.

일부 구현예에서, 본 발명은 하기 반응식 1에 예시된 바와 같이 화합물 D24 (서열번호 324)와 같은 폴리펩티드 중간체를 활성화된 아실 그룹, (LG)CO(CH₂)_zzCO₂H로 아실화시키는 단계를 포함하는, 화합물 A24 (서열번호 24)와 같은 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 방법을 제공하고, 여기서, ZZ는 14 내지 22이고, LG는 이탈기이다:

반응식 1:

[표 11] 화합물 A42 및 이의 예시적인 폴리펩티드 중간체.

주지사항:

K^*와 D^*의 각 쌍 형성은 K^*의 아미노 측쇄 및 D^*의 카복시 측쇄로부터 유도된 공유 아미드 연결(물 분자 상실과 함께)을 나타낸다.

alloc = 알릴옥시카보닐 보호 그룹

allyl = 알릴 (CH₂=CH-CH₂-) 보호 그룹

ivDde = 1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸 보호 그룹

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 A42의 펩티드 중간체 (서열번호 42)를 제공한다. 일부 구현예에서, 화합물 A42의 펩티드 중간체는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함한다. 일부 구현예에서, 화합물 A42의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 아미노 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 라이신 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 라이신 잔기는 Alloc 또는 ivDde에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A42의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 아스파르트산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 아스파르트산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A42의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 글루탐산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 글루탐산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A42의 펩티드 중간체는 본원에 정의된 바와 같은 스페이서에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함하고, 여기서, 상기 스페이서는 추가로 보호 그룹 또는 수소 원자에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 11에 제시된 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 342의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 442의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 242의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 542의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 642의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 742의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다.

일부 구현예에서, 본 발명은 하기 반응식 2에 예시된 바와 같이 화합물 D42 (서열번호 342)와 같은 폴리펩티드 중간체를 활성화된 아실 그룹, (LG)CO(CH₂)_zzCO₂H로 아실화시키는 단계를 포함하는, 화합물 A42 (서열번호 42)와 같은 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 방법을 제공하고, 여기서, ZZ는 14 내지 22이고, LG는 이탈기이다:

반응식 2:

[표 12] 화합물 A43 및 이의 예시적인 폴리펩티드 중간체.

주지사항:

K^*와 E^*의 각 쌍 형성은 K^*의 아미노 측쇄 및 E^*의 카복시 측쇄로부터 유도된 공유 아미드 연결(물 분자 상실과 함께)을 나타낸다.

alloc = 알릴옥시카보닐 보호 그룹

allyl = 알릴 (CH₂=CH-CH₂-) 보호 그룹

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 A43의 펩티드 중간체 (서열번호 43)를 제공한다. 일부 구현예에서, 화합물 A43의 펩티드 중간체는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함한다. 일부 구현예에서, 화합물 A43의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 아미노 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 라이신 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 라이신 잔기는 Alloc 또는 ivDde에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A43의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 아스파르트산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 아스파르트산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A43의 펩티드 중간체는 이의 측쇄의 카복실 그룹을 통해 보호 그룹에 결합된 글루탐산 잔기를 포함한다. 일부 구현예에서, 글루탐산 잔기는 알릴 그룹에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 화합물 A43의 펩티드 중간체는 본원에 정의된 바와 같은 스페이서에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 아미노산을 포함하고, 여기서, 상기 스페이서는 추가로 보호 그룹 또는 수소 원자에 공유적으로 결합되어 있다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 12에 제시된 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 343의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 443의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 243의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 543의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 643의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호 743의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다.

일부 구현예에서, 본 발명은 하기 반응식 3에 예시된 바와 같이 화합물 D43 (서열번호 343)와 같은 폴리펩티드 중간체를 활성화된 아실 그룹, (LG)CO(CH₂)_zzCO₂H로 아실화시키는 단계를 포함하는, 화합물 A43 (서열번호 43)와 같은 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 방법을 제공하고, 여기서, ZZ는 14 내지 22이고, LG는 이탈기룹이다:

반응식 3:

사용 방법

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 유효량의 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 대상체에 제공하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서 대사 질환 또는 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다. 대사 질환 또는 장애는 1형 당뇨병, 2형 당뇨병 및 비만을 포함한다. 추가로, 본 발명은 대상체에게 유효량의 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드를 제공하는 것을 포함하는, 당뇨병 대상체를 포함하는 대상체에서 체중 감량을 일으키는 방법에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에게 체중 감랴을 제공하거나 인간 대상체에서 식욕을 억제하는, 인간 대상체에서 비만을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 본원 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 당뇨병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 상기 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 당뇨병은 1형 당뇨병이다. 일부 구현예에서, 당뇨병은 2형 당뇨병이다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD)를 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 본원 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 비알콜성 지방간염(NASH) 당뇨병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드, 상기 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 본원에 기재된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 당뇨병 치료에 특히 유용하고, 상기 방법은 당뇨병 환자에게 유효량의 PYY 유사체 폴리펩티드를 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 대상체에서 혈당 농도를 제어하거나 감소시키기 위해 1형 또는 2형 당뇨병을 가진 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 혈당 수준은 당화된 헤모글로빈(헤모글로빈 A1c, HbA1c)의 측정된 혈중 농도를 기반으로 모니터링되거나 근사치가 될 수 있다.

(i) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고;

(ii) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고;

(iii) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 비만의 치료를 위해 사용되고;

(iv) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 당뇨병 대상체와 같은 대상체에게 체중 감량을 제공하기 위해 사용되고,

(v) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD)의 치료를 위해 사용되고,

(vi) 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 비알콜성 지방간염(NASH)의 치료를 위해 사용되고,

여기서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드가 서열번호 1 내지 서열번호 78의 임의의 컨센서스 서열로 나타낸 것들을 포함하는 본원 개시내용의 임의의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드는 서열번호 13, 24, 42 및 43로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것들을 포함하는 본원 개시내용의 임의의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드는 서열번호 13의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드는 서열번호 24의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드는 서열번호 42의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 PYY 유사체 폴리펩티드는 서열번호 43의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13으로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 24로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43으로 나타낸다.

일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13으로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 24로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43으로 나타낸다.

일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13으로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 24로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43으로 나타낸다.

일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 체중 감량을 대상체에게 제공하기 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 체중 감량을 대상체에게 제공하기 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 23로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 체중 감량을 대상체에게 제공하기 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 체중 감량을 대상체에게 제공하기 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43로 나타낸다.

일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 13으로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 24로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 42로 나타낸다. 일부 구현예에서, 상기 PYY 유사체 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고, 여기서 상기 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호 43으로 나타낸다.

본원 개시내용의 특정 PYY 유사체 폴리펩티드는 GLP-1 수용체 작용제와 조합하여 투여되는 경우 식욕부진 및 체중 감량 효과를 유발할 수 있지만, 단독으로 투여되는 경우 용량 의존적 식욕증진 및 체중 증가 효과를 유도할 수 있다. 본원 개시내용의 선택된 PYY 유사체 폴리펩티드의 이러한 성질은 다양한 소모성 장애의 치료에 유용하다. 따라서, 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 신경성 식욕부진, 근육감소증, 노쇠, 악액질 등의 치료에 사용된다. 일부 구현예에서, PYY 유사체는 서열번호 13이다. 일부 구현예에서, PYY 유사체는 서열번호 24이다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "환자" 또는 "대상체"는 설치류 또는 동물, 바람직하게 포유류 및 가장 바람직하게는 인간을 지칭한다.

조합

일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 제2 제제와 함께 공동 제형화된다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 제2 제제와 함께 공동 제형화되고, 여기서 제2 제제는 인크레틴 모방체이다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 제2 제제와 함께 공동 제형화되고, 여기서 제2 제제는 인슐린분비촉진성 화합물이다.

본원에 사용된 바와 같은 문구 "인크레틴 모방체"는 GLP-1 펩티드; GLP-l (7-36); GLP-1 수용체 작용제; GLP-1의 펩티드 유도체; GLP-1의 펩티드 유사체; 엑세나티드; 엑센딘-4의 아미노산 서열을 갖는 엑세나티드(엑세나티드의 천연적으로 존재하는 형태); 엑세나티드-LAR; 릭시세나티드; 리라글루티드; 세마글루티드; 둘라글루티드; 알비글루티드; 타스포글루티드; 티르제파티드(엘리 릴리(Eli Lilly)의 LY3298176 또는 Y-(Aib)-EGTFTSDYSI-(Aib)-LDKIAQ-[디아시드-감마-Glu-(AEEA)₂-Lys]-AFVQWLIAGGPSSGAPPPS-NH2) 서열번호 805); 글루카곤 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체; 글루카곤 유사 폴리펩티드-2 (GLP-2); PYY 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체; PYY(3-36); 옥신토모둘린 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체); 아밀린 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체; 및 위 억제 펩티드(GIP)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 인크레틴 모방체는 또한 "인슐린분비촉진성 펩티드"로서 지칭된다. GLP-1 수용체를 표적화하는 인크레틴 모방체는 또한 문헌에서 "GLP-1 수용체 작용제" 또는 "GLP-1 작용제"로서 공지되어 있고," 상기 용어 둘 다는 본원에서 상호교환적으로 사용된다.

본 발명의 일부 구현예는 본 발명의 개시된 PYY 유사체 폴리펩티드를 제2 치료학적 제제, 예를 들어 비제한적인 예로서 인슐린분비 촉진 펩티드와 같은 제2 폴리펩티드와 조합하여 사용하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 제제와 조합된 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물은 2형 당뇨병을 치료하기 위해 사용된다.

일부 구현예에서, 본원에서는 본원에 기재된 바와 같이 임의의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 본원에 기재된 바와 같이 임의의 단리된 폴리펩티드를 포함하고 추가로 제2 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 글루카곤 유사체이다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 아밀린 유사체이다. 바람직한 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 GLP-1 수용체 작용제이다.

용어 "GLP-1"은 폴리펩티드, 글루카곤 유사 펩티드-1(7-36)아미드, 영양물 소비 후 장 L 세포로부터 방출되는 30-잔기 펩티드 호르몬을 지칭한다. GLP-1은 (HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH₂), 서열번호 801의 아미노산 서열을 갖는다. GLP-1은 β 세포 상의 G-커플링된 단백질 수용체인 GLP-1 수용체(GLP-1R)의 세포외 영역에 결합하고 아데닐 사이클라제 활성과 cAMP의 생산을 통해 장으로부터 흡수되는 영양물에 대한 인슐린 반응을 자극하는 조절 펩티드이다[참조: Baggio 2007, "Biology of incretins: GLP-1 and GIP," Gastroenterology, vol. 132(6):2131-57; Holst 2008, "The incretin system and its role in type 2 diabetes mellitus," Mol Cell Endocrinology, vol. 297(1-2):127-36]. GLP-1R의 효능작용의 효과는 다중이다. GLP-1은 내인성 글루코스 의존성 인슐린 분비를 증진시키고, β 세포를 글루코스 적격이고 GLP-1에 대해 민감하게 하고, 글루카곤 방출을 억제하고, 1단계 및 2단계 인슐린 분비를 회복하고, 위 공복을 늦추고, 음식 섭취를 감소시키고, 포만감을 증가시켜 글루코스 항상성을 유지한다[참조: Holst 2008 Mol. Cell Endocrinology; Kjems 2003 "The influence of GLP-1 on glucose-stimulated insulin secretion: effects on beta-cell sensitivity in type 2 and nondiabetic subjects," Diabetes, vol. 52(2): 380-86; Holst 2013 "Incretin hormones and the satiation signal," Int J Obes (Lond), vol. 37(9):1161-69; Seufert 2014, "The extra-pancreatic effects of GLP-1 receptor agonists: a focus on the cardiovascular, gastrointestinal and central nervous systems," Diabetes Obes Metab, vol. 16(8): 673-88]. GLP-1의 작용 방식을 고려할 때 저혈당의 위험은 최소화된다.

글루카곤 유사 펩티드-1(7-36) 아미드(GLP-1)는 영양물 소비 후 장 L 세포로부터 방출되는 30-잔기 펩티드 호르몬이다. 이것은 췌장 베타 세포로부터 인슐린의 글루코스 유도 분비를 강화하고, 인슐린 발현을 증가시키고, 베타 세포 아폽토시스를 억제하고, 베타 세포 신생을 촉진하고, 글루카곤 분비를 감소시키고, 위 공복을 지연시키고, 포만감을 촉진하고 말초 글루코스 처리를 증가시킨다. 이들 다중 효과는 2형 당뇨병을 치료하기 위한 GLP-1 수용체(GLP-1R)의 오래 지속되는 작용제의 발견에 많은 관심을 불러일으켰다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "엑세나티드"는 (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH₂), 서열번호 802의 아미노산 서열을 갖는 엑세나티드, 고유 엑센딘-4, 엑세나티드 펩티드, 엑세나티드 펩티드 유사체 및 엑세나티드 펩티드 유도체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

내인성 GLP-1은 영양물 소화에 응답하여 장으로부터 방출된다. 음식 섭취 및 소화 후, 탄수화물 및 지방은 장의 탄수화물과 지방은 장의 내강에 나타내고, 이는 소위 인크레틴 효과, 즉 장의 L-세포에서 GLP-1과 같은 인크레틴의 방출을 자극한다. GLP-1이 방출되면 췌장을 표적화하고 이는 "글루코스 의존성 방식"으로 인슐린의 분비를 증진시킨다. 다른 말로, 인슐린에 대한 상기 GLP-1 매개 효과는 글루코스 수준이 높을 때 지속되지만 글루코스 수준이 떨어지면 안전하게 소멸된다. 따라서 GLP-1 활성은 자가 조절되어 저혈당(글루코스 수준이 위험할정도로 낮게 저하되는 상태)의 위험을 감소시킨다. GLP-1은 5분 미만의 짧은 제거 반감기(t_1/2)를 가지므로 상기 내인성 펩티드는 치료제로 사용하기에는 부적절하게 단명이다.

GLP-1의 합성 유사체는 2형 당뇨병의 치료에 사용하고, 체중 감량을 제공하기 위해 보다 긴 반감기를 갖고 유사하게 내인성 GLP-1과 같은 글루코스 의존적 방식으로 인슐린의 분비를 증진시키도록 디자인되었다.

인슐린분비촉진 작용을 입증하는 수많은 GLP-1 수용체 작용제(예를 들어, GLP-1 펩티드 유도체 및 펩티드 유사체)는 당업계(참조: 예를 들어, 미국 특허 제5,118,666호; 제5,120,712호; 제5,512,549호; 제5,545,618호; 제5,574,008호; 제5,574,008호; 제5,614,492호; 제5,958,909호; 제6,191,102호; 제6,268,343호; 제6,329,336호; 제6,451,974호; 제6,458,924호; 제6,514,500호; 제6,593,295호; 제6,703,359호; 제6,706,689호; 제6,720,407호; 제6,821,949호; 제6,849,708호; 제6,849,714호; 제6,887,470호; 제6,887,849호; 제6,903,186호; 제7,022,674호; 제7,041,646호; 제7,084,243호; 제7,101,843호; 제7,138,486호; 제7,141,547호; 제7,144,863호; 및 제7,199,217호를 참조한다), 및 임상 시험(예를 들어, 타스포글루티드 및 알비글루티드)에 공지되어 있다.

제조사(AstraZeneca of Cambridge, U.K)에 의해 시판되는 Bydureon^® (엑세나티드); 제조사(Eli Lilly and Co., of Indianapolis, IN, U.S.A.)에 의해 시판되는 Trulicity^® (둘라글루티드); 및 제조사(Novo Nordisk A/S of Bagsvζrd, Denmark)에 의해 시판되는 Victoza^® (리라글루티드), Ozempic^® (주사가능한 세마글루티드) & Rybelsus^® (경구적으로 투여되는 세마글루티드)를 포함하는 특정 GLP-1 수용체 작용제는 각각 2형 당뇨병을 앓고 있는 환자의 치료를 위해 미국 식품의약국(U.S. FDA) 및 유럽 의약 기관(EMA)을 포함하는 수많은 규체 기관에 의해 승인되었다. 이들 시판되는 GLP-1 수용체 작용제는 환자에 대한 주사 및/또는 경구 투여를 위해 개발 및 제형화되었다. 그러나, 2형 당뇨병에 대한 주사 및 경구 투여 요법에 대한 환자 순응도는 악명 높기 때문에 많은 환자가 GLP-1 수용체 작용제의 완전하고 지속적인 치료학적 잠재력을 실현하는 것을 방해한다. 많은 환자들은 처방된 주사 및 경구 투여된 GLP-1 수용체 작용제의 주기적인 자가 투여를 건너뛰거나 중단하여 자신의 2형 당뇨병 상태를 적절하게 치료하고 조절하는데 실패한다.

GLP-1 수용체 작용제와 조합된 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드는 체중 감량을 위한 비만 수술 유사 효능을 전달하는 것으로 밝혀졌다. 비만 또는 비만 T2D 환자에서 Roux-en-Y 위 우회 수술(RYGB) 후 개선된 혈당 조절이 RYGB 후 나타나는 체중 감량을 선행한다는 관찰은 장의 외과적 재배열이 체중 감량만으로 유도되는 것 이상으로 생리학적 적응으로 이어진다는 것을 시사한다. 실제로, RYGB는 GLP-1과 PYY의 식후 분비를 증진시키고, 둘 다 원위 장을 감싸는 L-세포에서 방출된다. 장 펩티드 호르몬 GLP-1과 펩티드 티로신-티로신(PYY)은 각각 에너지 인풋에 대한 여러 중복 생물학적 반응을 통해 전신 에너지 균형에서 역할을 수행한다. 이들 반응은 주로 글루코스 유도된 인슐린 분비 강화, 위 공복 억제, 포만 유도 및 음식 섭취 억제를 포함한다.

따라서, GLP-1 수용체 작용제와 함께 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드의 조합은 본원에 기재된 질환 및 장애의 치료에 적합하다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제는 장기간 작용하는 GLP-1 수용체 작용제이다.

옥신토모둘린은 식욕을 억제하고 체중 감량을 촉진하는 것으로 밝혀진 결장에서 발견되는 천연적으로 존재하는 37개 아미노산 펩티드 호르몬이다(참조: Wynne K,　et　al., Int J Obes (Lond) 30(12):1729-36(2006)). 옥신토모둘린의 서열, 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체는 당업계에 공지되어 있다(참조: 예를 들어, Bataille D,　et　al., Peptides 2(Suppl 2):41-44 (1981); 및 미국 특허 공개 공보 제2005/0070469호 및 제2006/0094652호).

위 억제 펩티드 (GIP)는 인슐린분비촉진성 펩티드 호르몬이고(참조: Efendic, S.,　et　al., Horm Metab Res. 36:742-6 (2004)) 인슐린을 분비하도록 췌장을 자극하는 흡수된 지방 및 탄수화물에 반응하여 십이지장 및 공장의 점막에 의해 분비된다. GIP는 생물학적으로 활성인 42-아미노산 펩티드로 순환한다. GIP는 또한 글루코스-의존성 인슐린분비촉진성 단백질로서 공지되어 있다. GIP는 글루코스의 존재하에 췌장 베타 세포로부터 인슐린 분비를 자극하는 42-아미노산의 위장 조절 펩티드이다(참조: Tseng, C.,　et　al., PNAS 90:1992-1996 (1993)). GIP, 및 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체의 서열은 당업계에 공지되어 있다(참조: 예를 들어, Meier J. J., Diabetes Metab Res Rev. 21(2):91-117 (2005) and Efendic S., Horm Metab Res. 36(11-12):742-6 (2004)).

글루카콘은 췌장의 알파 세포에 의해 생성되는 펩티드 호르몬이고, 이는 혈류에서 글루코스의 농도를 상승시킨다. 이의 효과는 글루코스 농도를 저하시키는 인슐린의 반대 효과이다. 췌장은 혈류 중에 글루코스 농도가 너무 낮게 떨어지는 경우 글루카곤을 방출시킨다. 글루카곤은 간이 저장된 글리코겐을 글루코스로 전환하도록 유발하고, 글루코스는 혈류로 방출된다. 고혈당 수준은 인슐린의 방출을 자극한다. 인슐린은 글루코스가 흡수되도록하고 인슐린-의존성 조직에 의해 사용된다. 따라서, 글루카곤 및 인슐린은 혈당 수준을 안정한 수준으로 유지시키는 피드백 시스템의 일부이다.

인간 아밀린 또는 섬 아밀로이드 폴리펩티드(IAPP)는 37-잔기의 폴리펩티드 호르몬이다. 아밀린은 약 100:1(인슐린:아밀린)의 비율로 췌장 β-세포로부터 인슐린과 함께 공동분비된다. 프로-섬 아밀로이드 폴리펩티드(즉, 프로-IAPP)는 67개 아미노산, 7404 달톤 프로-펩티드로서 췌장 β-세포에서 생성되고, 이는 37-잔기 아밀린을 생성하기 위해 프로테아제 절단을 포함하는 해독 후 변형을 겪는다. 1형 당뇨병에서 초기에 발생하고 2형 당뇨병에서 후기에 발생할 수 있는 β-세포 기능의 상실은 인슐린 및 아밀린의 분비 결핍으로 이어진다.

아밀린은 호르몬을 합성하고 분비하는 췌장 내 세포인 내분비 췌장의 일부로서 기능한다. 아밀린은 혈당 제어에 기여하고; 이것은 췌장 섬으로부터 혈액 순환계로 분비되고 콩팥 내 펩티다제에 의해 제거된다. 아밀린의 대사 기능은 혈장에서 글루코스와 같은 영양물의 출현의 억제제로서 잘 알려져 있다. 따라서 혈당 수준을 조절하고 신체의 글루코스 분포 및 흡수를 조정하는 펩티드인 인슐린에 대한 상승작용 파트너로서 기능한다. 신체에서 인슐린의 역할은 무엇 보다 혈당 수준이 특히 식후 너무 높게 상승하는 것을 방지하는 것이다.

아밀린은 위 공복을 늦추고 포만감(충만함)을 촉진하여 식후(즉, 식사 후) 혈당 수준의 급상승을 방지함으로써 혈당 조절에 역할을 하는 것으로 사료된다. 전반적인 효과는 식사 후 혈액에 글루코스의 출현 속도를 늦추는 것이다. 아밀린은 또한 췌장에 의한 글루카곤의 분비를 저하시킨다. 신체에서 글루카곤의 역할은 무엇보다도 혈당 수준이 너무 낮게 떨어지는 것을 방지하는 것이다. 예를 들어, 특정 1형 당뇨병은 식사 직후에 혈당을 상승시키는 글루카곤을 과도하게 분비하는 경향이 있기 때문에 이것은 중요하다.

여러 가지 이유로 혈청 내 반감기가 약 13분인 인간 아밀린은 치료학적 제제로서 사용하기에 적합하지 않다. 차라리, 프람린티드(제조사(Amylin Pharmaceuticals, Inc., San Diego, CA, USA)에 의해 개발되고, 제조사(AstraZeneca plc, Cambridge, Uk)에 의해 시판되는 Symlin®)는 식사 시간 인슐린을 사용하지만 최적의 인슐린 치료요법에도 불구하고 목적하는 혈당 제어를 성취할 수 없는 1형 또는 2형 당뇨병을 갖는 환자의 치료를 위한 인간 아밀린의 합성 유사체로서 개발되었다. 프람린티드는 이의 37개 아미노산 중 3개에서 인간 아밀린과 상이하다. 이러한 변형은 인간에서 대략 48분의 더 긴 반감기를 프람린티드에 제공하고 인간 아밀린에서 밝혀진 특징인 응집 경향을 감소시킨다. 둘 다 2019년 10월 10일에 출원된 미국 특허 출원 번호 제16/598,915호(PCT 국제 출원 번호 제PCT/US2019/055696호에 상응하는)에 기재된 것들과 같이, 인간 아밀린의 추가의 유사체가 기재되었다.

이식형 전달

일부 구현예에서, 본원에서는 기재된 바와 같은 임의의 장기간 작용하는 PYY 유사체 폴리펩티드, 또는 임의의 장기간 작용하는 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 삼투성 전달 장치가 제공된다.

일부 구현예에서, 삼투성 전달 장치는 내부 및 외부 표면과 제1 및 제2 개방 단부를 포함하는 불투과성 저장소; 저장소의 제1 개방 단부와 밀봉 관계에 있는 반투과성 막; 저장소 내부 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진; 삼투 엔진에 인접하여 피스톤이 저장소의 내부 표면과 가동 밀봉을 형성하고, 피스톤이 저장소를 삼투성 엔진을 포함하는 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하는 피스톤; 제2 챔버가 현탁 제제를 포함하고 현탁 제제가 유동성이고 단리된 폴리펩티드를 포함하는 현탁 제제; 및 저장소의 제2 개방 단부에 삽입되고 현탁액 제형에 인접해 있는 확산 조절기를 포함한다.

이식형 삼투성 전달 장치는 전형적으로 현탁 제제가 전달되는 적어도 하나의 오리피스를 갖는 저장소를 포함한다. 현탁 제제는 저장소 내에 저장될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 이식형 약물 전달 장치는 삼투성 전달 장치이고, 여기서, 상기 약물의 전달은 삼투압으로 구동된다. 일부 삼투성 전달 장치 및 이들의 성분 부품들은 기재되었고 예를 들어, DUROS® 전달 장치 또는 유사 장치이다(참조: 예를 들어, 미국 특허 제5,609,885호; 제5,728,396호; 제5,985,305호; 제5,997,527호; 제6,113,938호; 제6,132,420호; 제6,156,331호; 제6,217,906호; 제6,261,584호; 제6,270,787호; 제6,287,295호; 제6,375,978호; 제6,395,292호; 제6,508,808호; 제6,544,252호; 제6,635,268호; 제6,682,522호; 제6,923,800호; 제6,939,556호; 제6,976,981호; 제6,997,922호; 제7,014,636호; 제7,207,982호; 및 제7,112,335호; 제7,163,688호; 미국 특허 공개 공보 제2005/0175701호, 제2007/0281024호, 제2008/0091176호, 및 제2009/0202608호).

삼투성 전달 장치는 일반적으로 삼투성 엔진, 피스톤 및 약물 제제를 함유하는 실린더형 저장소로 이루어진다. 저장소는 한쪽 말단은 제어된 속도의 반투과성 막으로 캡핑되고, 다른 말단은 약물을 포함하는 현탁 제제가 약물 저장소로부터 방출되는 확산 조절기에 의해 캡핑되어 있다. 피스톤은 삼투성 엔진에서 약물 제제를 분리하고 밀봉을 사용하여 삼투성 엔진 구획의 물이 약물 저장소로 진입하는 것을 방지한다. 확산 조절기는 약물 제제와 함께 디자인되어 체액이 오리피스를 통해 약물 저장소로 진입하는 것을 방지한다.

삼투성 장치는 삼투압 원리에 따라 정해진 속도로 약물을 방출한다. 세포외 체액은 반투과성 막을 통해 삼투성 전달 장치에 진입하고 삼투성 엔진으로 직접 진입하여, 상기 엔진은 피스톤을 느리고 일관된 이동 속도로 구동하기 위해 팽창한다. 피스톤의 이동은 약물 제제가 소정의 전단률로 오리피스 또는 출구 포트를 통해 방출되도록 한다. 본 발명의 하나의 구현예에서, 삼투성 장치의 저장소에는 현탁 제제가 로딩되어 있고, 여기서 장치는 연장된 기간(예를 들어, 약 1, 약 3, 약 6, 약 9, 약 10, 및 약 12개월)에 걸쳐 대상체에게 현탁 제제를 미리 결정된 치료학적으로 효과적인 전달 속도로 전달할 수 있다.

삼투성 전달 장치로부터의 약물의 방출 속도는 전형적으로 대상체에게 미리 결정된 약물의 표적 용량, 예를 들어 하루 동안 전달되는 치료학적 유효 1일 용량을 제공하고; 즉, 장치로부터의 약물 방출 속도는 대상체에게 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 정상 상태 전달을 제공한다.

전형적으로, 삼투성 전달 장치의 경우, 이로운 제제를 포함하는 이로운 제제 챔버의 용적은 약 100 μl 내지 약 1000 μl, 보다 바람직하게는 약 120 μl 내지 약 500 μl, 보다 바람직하게는 약 150 μl 내지 약 200μl이다.

전형적으로, 삼투성 전달 장치는 피하 약물 전달을 제공하기 위해 예를 들어 피부하 또는 피하로 대상체 내에 이식된다. 장치(들)는 한쪽 또는 양쪽 팔(예를 들어, 팔 위쪽의 안쪽, 바깥쪽 또는 뒤쪽) 또는 복부에 피부하 또는 피하로 이식될 수 있다. 복부 영역에서 바람직한 위치는 늑골 아래 및 벨트 라인 위로 연장되는 영역의 복부 피부 아래이다. 복부 내에 하나 이상의 삼투성 전달 장치를 이식하기 위한 다수의 위치를 제공하기 위해 복벽은 다음과 같이 4개의 사분면으로 나눌 수 있다: 오른쪽 늑골 아래로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 오른쪽 늑골 아래 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 오른쪽으로 적어도 2-3센티미터, 예를 들어, 정중선의 오른쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터 연장하는 상부 오른쪽 사분면; 벨트 라인 위로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 벨트 라인 위로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 오른쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 적어도 약 5-8 센티미터 연장되는 보다 하부의 오른쪽 사분면; 왼쪽 늑골 아래로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어, 왼쪽 늑골 아래로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 왼쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어, 정중선의 왼쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터 연장되는 상부 왼쪽 사분면; 및 벨트 라인 위로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 벨트 라인 위로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 왼쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 정중선의 왼쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터로 연장되는 보다 하부의 좌측 사분면. 이것은 하나 이상의 경우에 하나 이상의 장치를 이식하기 위한 다수의 가용한 위치를 제공한다. 삼투성 전달 장치의 이식 및 제거는 일반적으로 국소 마취(예를 들어, 리도카인)를 사용하여 의료 전문가에 의해 수행된다.

대상체로부터 삼투성 전달 장치를 제거하여 치료를 종료하는 것은 간단하고, 대상체에게 약물 전달을 즉시 중단한다는 중요한 이점을 제공한다.

바람직하게는, 삼투성 전달 장치는 약물 제형이 전달되는 출구(확산 조절기)의 플러깅(plugging) 또는 클로깅(clogging)과 같은 이론적 상황에서 약물의 부주의한 과잉 또는 일시 전달을 방지하는 안전 장치(fail-safe) 기전을 갖는다. 약물의 의도하지 않은 과잉 또는 일시 전달을 방지하기 위해 삼투성 전달 장치는 저장소에서 확산 조절기를 부분적으로 또는 전체적으로 이탈시키거나 축출하는 데 필요한 압력이 저장소를 감압하는데 필요한 정도로 반투과성 막을 부분적으로 또는 완전히 이탈시키거나 축출하는 데 필요한 압력을 초과하도록 디자인되고 구성된다. 이러한 시나리오에서 다른 쪽 끝의 반투과성 막을 바깥쪽으로 밀어 삼투압이 해제될 때까지 장치 내부에 압력이 가해진다. 이어서, 삼투성 전달 장치는 정적이 되어 피스톤이 저장소와 밀봉 관계에 있는 경우 더 이상 약물 제형을 전달하지 않는다.

용량 및 전달 속도는 일반적으로 장치 이식 후 대상체 내에서 약물의 약 6 반감기 미만 내에서 약물의 목적하는 혈액 농도를 달성하도록 선택될 수 있다. 약물의 혈액 농도는 약물의 과잉 농도에 의해 유도될 수 있는 바람직하지 않은 부작용을 피하면서 동시에 약물의 최대 또는 최저 혈장 농도와 관련된 부작용을 유도할 수 있는 최대 및 최저를 피하면서 약물의 최적의 치료학적 효과를 제공하도록 선택된다.

현탁 제제는 또한 주입 펌프, 예를 들어 실험 동물(예를 들어, 마우스 및 래트)의 연속 투여를 위한 소형 주입 펌프인 ALZET®(DURECT Corporation, Cupertino, Calif.) 삼투압 펌프에 사용될 수 있다.

투여 방식

일부 구현예에서, 상기 방법은 주사를 통해 치료를 필요로 하는 대상체에게 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 치료를 필요로 하는 대상체에게 경구 투여용으로 제형화된 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다.

일부 구현예에서, 상기 방법은 이식을 통해 치료를 필요로 하는 대상체에게 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 방법은 삼투성 전달 장치로부터 치료를 필요로 하는 대상체에게 PYY 유사체 폴리펩티드의 연속적인 전달을 제공하는 것을 포함한다. 삼투성 전달 장치와 같은 전달 장치는 최대 3개월, 6개월, 9개월, 12개월, 18개월 또는 24개월 동안 연속 투여를 위해 본원 개시내용의 충분한 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함한다. 이와 같이, 삼투성 전달 장치를 통한 본원 개시내용의 PYY 유사체 폴리펩티드의 연속 투여는 시판되는 PYY 유사체 폴리펩티드의 일일 또는 다중 일일 투여를 제거한다.

삼투성 전달 장치로부터 PYY 유사체 폴리펩티드의 실질적인 정상 상태 전달은 투여 기간 동안 계속된다. 일부 구현예에서, 대상체 또는 환자는 인간 대상체 또는 인간 환자이다.

본 발명의 일부 구현예에서, 투여 기간은, 예를 들어, 적어도 약 3개월, 적어도 약 3개월 내지 약 1년, 적어도 약 4개월 내지 약 1년, 적어도 약 5개월 내지 약 1년, 적어도 약 6개월 내지 약 1년, 적어도 약 8개월 내지 약 1년, 적어도 약 9개월 내지 약 1년, 적어도 약 10개월 내지 약 1년, 적어도 약 1년 내지 약 2년, 적어도 약 2년 내지 약 3년이다.

추가의 구현예에서, 본 발명의 치료 방법은 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도(삼투성 전달 장치의 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해)의 현저한 감소를 제공하고, 이는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 7일, 6일, 5일, 4일, 3일, 2일, 1일 이내에 달성된다. 공복 혈장 글루코스의 유의적인 감소는 일반적으로 적절한 통계학적 시험의 적용에 의해 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의적이거나 의료 종사자에 의해 대상체에 대해 유의적인 것으로 간주된다. 이식 전 기준선에 비해 공복 혈장 글루코스의 상당한 감소는 일반적으로 투여 기간 동안 유지된다.

일부 구현예에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 삼투성 전달 장치로부터 약물의 연속 전달을 제공하는 것을 포함하고, 여기서. 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 정상 상태 전달이 대상체에서 달성된다. 삼투성 전달 장치로부터 약물의 실질적인 정상 상태 전달은 적어도 약 3개월의 투여 기간 동안 계속된다. 약물은 전형적인 대상체에서 공지되거나 결정된 반감기를 갖는다. 인간은 본 발명의 수행을 위해 바람직한 대상체이다. 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 본 발명의 방법에 사용하기 위한 약물을 포함하는 삼투성 전달 장치 뿐만 아니라 질환 또는 병태의 치료에 효과적인 약물을 포함한다. 본 발명의 이점은 최대점 관련 약물 독성의 완화 및 최저점과 관련된 차선의 약물 치료요법의 약화를 포함한다.

일부 구현예에서, 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 안정 상태의 전달은 대상체에서 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 1개월, 7일, 5일, 3일 또는 1일의 기간 내에 달성된다.

본 발명은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 체중 감량을 촉진하는 방법, 이를 필요로 하는 대상체에서 과체중 또는 비만을 치료하는 방법, 및/또는 이를 필요로 하는 대상체에서 식욕을 억제하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 단리된 PYY 유사체 폴리펩티드의 전달을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 PYY 유사체 폴리펩티드는 이식가능한 삼투성 전달 장치로부터 연속으로 전달된다. 일부 구현예에서, 삼투성 전달 장치로부터 PYY 유사체 폴리펩티드의 실질적인 정상 상태 전달이 달성되고 실질적으로 투여 기간 동안 계속된다. 일부 구현예에서, 대상체는 인간이다.

본 발명은 치료가 필요한 대상체에서 본 방법에 사용하기 위한 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 포함한다. 대상체는 2형 당뇨병을 가질 수 있다. 이를 필요로 하는 대상체는 10.0% 초과의 기준선 HbA1c%, 즉 높은 기준선(HBL) 대상체를 가질 수 있다. 대상체는 이전에 2형 진성 당뇨병 치료를 위한 약물을 투여 받은적이 없을 수 있다.

추가 구현예에서, 본 발명의 치료 방법은 대상체에서 삼투성 전달 장치를 이식한 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도(삼투성 전달 장치 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해)의 유의적인 감소를 제공하고, 이는 대상체에 삼투 전달 장치를 이식한 후 약 7일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 6일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 5일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 4일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 3일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 2일 이내, 또는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 1일 이내에 달성된다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해 삼투성 전달 장치의 이식 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도의 상당한 감소는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 2일 이내, 바람직하게는 약 1일 이내 또는 보다 바람직하게 약 1일 이내, 또는 보다 바람직하게는 약 1일 이내에 달성된다. 공복 혈장 글루코스의 유의적인 감소는 일반적으로 적절한 통계학적 시험의 적용에 의해 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의적이거나 의료 종사자에 의해 대상체에 대해 유의적인 것으로 간주된다. 이식 전 기준선에 비해 공복 혈장 글루코스의 상당한 감소는 일반적으로 투여 기간 동안 유지된다.

대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 예시적인 삼투성 전달 장치는 하기를 포함한다: 내부 및 외부 표면과 제1 및 제2 개방 단부를 포함하는 불투과성 저장소; 저장소의 제1 개방 단부와 밀봉 관계에 있는 반투과성 막; 저장소 내부 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진; 삼투성 엔진에 인접하여 피스톤이 저장소의 내부 표면과 가동 밀봉을 형성하고, 피스톤이 저장소를 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하고, 제1 챔버가 삼투성 엔진을 포함하는 피스톤; 제2 챔버가 약물 제제 또는 현탁 제제를 포함하고 약물 제제 또는 현탁 제제가 유동성인, 약물 제제 또는 현탁 제제; 및 저장소의 제2 개방 단부에 삽입되고 현탁 제제에 인접해 있는 확산 조절기. 바람직한 구현예에서, 저장소는 티타늄 또는 티타늄 합금을 포함한다.

대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 약물 제제는 약물 및 비히클 제제를 포함할 수 있다. 대안적으로, 현탁 제제가 방법에 사용되고, 예를 들어 약물 및 비히클 제제를 포함하는 입자 제형을 포함할 수 있다. 본 발명의 현탁 제제를 형성하는데 사용하기 위한 비히클 제제는 예를 들어, 용매 및 중합체를 포함할 수 있다.

삼투성 전달 장치의 저장소는 예를 들어, 티타늄 또는 티타늄 합금을 포함할 수 있다.

본 발명의 모는 양상의 구현예에서, 이식된 삼투성 전달 장치를 사용하여 피하 전달을 제공할 수 있다.

본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 연속 전달은 예를 들어, 0차, 제어된 연속 전달일 수 있다.

약제학적 조성물

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 본 발명의 화합물, 즉, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염, 아세테이트 염 또는 하이드로클로라이드 염과 같은 이의 약제학적으로 허용되는 염으로서 제형화된 임의의 기재된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염으로서 제형화된 임의의 기재된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 아세테이트 염으로서 제형화된 임의의 기재된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 하이드로클로라이드 염으로서 제형화된 임의의 기재된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

용어 "약제학적으로 허용되는 담체, 보조제, 또는 비히클"은 이것이 제형화된 화합물의 약리학적 활성을 파괴하지 않는 비독성 담체, 보조제 또는 비히클을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 약제학적 투여에 적합한 임의의 및 모든 용매, 중합체, 분산 매질, 코팅, 항세균 및 항진균 제제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 담체는 가장 최근 판의 당해 분야에서 표준 참조 텍스트인 문헌(참조: Remington’s Pharmaceutical Sciences)에 기재되어 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다. 이러한 담체 또는 희석제의 바람직한 예는 물, 식염수, 링거 용액, 덱스트로스 용액, 및 5% 인간 혈청 알부민을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 리포좀 및 고정유와 같은 비수성 비히클도 사용될 수 있다. 약제학적 활성물질에 대한 상기 매질 및 제제의 사용은 당업계에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 화합물과 상용될 수 없는 경우를 제외하고, 조성물에서의 이의 사용이 고려된다. 보충 활성 화합물은 또한 조성물에 혼입될 수 있다.

본 발명의 조성물에 사용될 수 있는 대표적인 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 또는 비히클은 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예를 들어, 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예를 들어, 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예를 들어 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연염, 콜로이드 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스 기반 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염, 아세테이트 염 또는 하이드로클로라이드 염과 같은 이의 약제학적으로 허용되는 염으로서 제형화된 임의의 기재된 폴리펩티드의 약제학적으로 허용되는 유도체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. "약제학적으로 허용되는 유도체"는 수용자에게 투여 시 직접 또는 간접적으로 본 발명의 화합물 또는 이의 활성 대사물 또는 잔기를 제공할 수 있는 본 발명의 화합물의 비독성 염, 에스테르, 에스테르 염 또는 기타 유도체를 의미한다.

약제학적 조성물은 약물을 포함하고 하기에 더 상세히 기재된 바와 같이 "입자 제형"으로서 제형화될 수 있다. 약제학적 조성물 및/또는 입자 제형은 안정화 성분(본원에서 "부형제"로도 지칭됨)을 포함할 수 있다. 안정화 성분의 예는 탄수화물, 항산화제, 아미노산, 완충제, 무기 화합물 및 계면활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 하나 이상의 PYY 수용체(예를 들어, 인간, 래트, 원숭이 등)를 측정가능하게 활성화하는데 효과적인 양이다. 특정 구현예에서, 본 발명의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 인간 혈청 알부민의 부재 또는 존재 하에 인간 PYY 수용체를 측정가능하게 활성화시키는 데 효과적인 양이다. 특정 구현예에서, 본 발명의 조성물은 상기 조성물을 필요로 하는 환자에게 투여하기 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 조성물은 환자에게 주사가능한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 조성물은 삼투성 전달 장치와 같은 이식 가능한 전달 장치를 통해 환자에게 투여하기 위해 제형화된다.

본 개시내용의 단리된 폴리펩티드(본원에서 "활성 화합물"로도 지칭됨), 및 이의 유도체, 단편, 유사체 및 동족체는 투여에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 이러한 조성물은 전형적으로 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.

본 발명의 약제학적 조성물은 이의 의도된 투여 경로와 상용성이도록 제형화된다. 투여 경로의 예는 비경구(예를 들어, 정맥내, 피내, 피부하, 피하), 경구(예를 들어, 흡입), 경피(즉, 국소), 경점막, 직장, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 약제학적 조성물 또는 단리된 폴리펩티드는 국소 투여에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본원 개시내용의 약제학적 조성물 또는 단리된 폴리펩티드는 흡입 투여에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 피부하 또는 피하 이식을 위해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 장치 또는 다른 적합한 전달 기전에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 피부하 또는 피하 이식을 위해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 이식 장치에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 피부하 또는 피하 배치 또는 다른 이식을 위해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 삼투성 전달 장치, 예를 들어, 이식가능한 삼투성 전달 장치에 의한 투여를 위해 제형화된다. 비경구 적용, 피내 적용, 피부하 적용, 피하 적용 또는 이들의 조합을 위해 사용되는 용액 또는 현탁액은 다음 성분을 포함할 수 있다: 주사용수, 식염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매와 같은 멸균 희석제; 벤질알콜, 메틸파라벤과 같은 항세균제; 아스코르브산 또는 아황산수소나트륨과 같은 항산화제; 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)과 같은 킬레이팅제; 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트와 같은 완충제 및 염화나트륨 또는 덱스트로스와 같은 장성 조정을 위한 제제. pH는 산 또는 염기, 예컨대, 염산 또는 수산화나트륨으로 조절될 수 있다. 비경구 제제는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 앰플, 일회용 주사기 또는 다용량 바이알 중에 봉입될 수 있다.

주사용으로 적합한 약학 조성물은 멸균 수용액(수용성인 경우) 또는 분산액, 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 피하 투여를 위해 적합한 담체는 생리학적 식염수, 정균수, Cremophor EL (BASF, Parsippany, N.J.) 또는 포스페이트 완충 식염수 (PBS)를 포함한다. 모든 경우에 있어서, 상기 조성물은 멸균되어야 하며, 용이한 주사가능성이 존재하는 정도로 유동성이 있어야 한다. 조성물은 제조 및 저장 조건 하에서 안정하여야 하며, 미생물, 예컨대, 박테리아 및 진균의 오염 작용에 대해서 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예컨대, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 이들의 적절한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은, 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅제의 사용에 의하여, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의하여, 그리고 계면활성제의 사용에 의하여 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산 및 티메로살 등에 의하여 달성될 수 있다. 대부분의 경우에, 조성물 중에 등장화제, 예를 들어 당, 폴리알콜, 예컨대, 만니톨, 소르비톨, 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사가능한 조성물의 흡수 지연은 해당 조성물 중에 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 모노스테아르산알루미늄 및 젤라틴을 포함하여 유발될 수 있다.

멸균 주사 용액은 필요에 따라 상기 열거된 성분 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 필요한 양의 활성 화합물을 혼입한 후 여과 멸균하여 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산액은 활성 성분을 염기성 분산 매질 및 상기 열거된 성분에서 필요한 기타 성분들을 함유하는 멸균 비히클 내에 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 제조 방법은 사전에 멸균 여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가의 목적하는 성분의 분말을 생성하는 진공 건조 및 동결 건조이다.

경구 조성물은 일반적으로 불활성 희석제 또는 식용 담체를 포함한다. 이들은 젤라틴 캡슐제 내로 봉입되거나, 정제로 압축될 수 있다. 치료적 경구 투여를 위해서는, 활성 성분이 부형제와 함께 혼입되어, 정제, 트로키 또는 캡슐제의 형태로 사용될 수 있다. 또한, 경구 조성물은 구강 세척제로 사용하기 위한 유체 담체를 사용하여 제조될 수도 있는데, 이 경우, 유체 담체 중의 화합물은 입으로 먹고, 입을 헹구어 뱉거나 삼키게 된다. 약학적으로 상용성인 결합제 및/또는 보조제 물질은 조성물의 일부로 포함될 수 있다. 정제, 환제, 캡슐제, 트로키 등은 하기 성분들 또는 이와 유사한 성질을 가진 화합물들 중 임의의 것을 함유할 수 있다: 결합제, 예를 들어 미세결정질 셀룰로스, 트라가칸트 검 또는 젤라틴; 부형제, 예를 들어, 전분 또는 락토스; 붕해제, 예를 들어, 알킨산, 프리모겔(Primogel) 또는 옥수수 전분; 윤활제, 예를 들어, 스테아르산마그네슘 또는 스테로트(Sterote); 활택제, 예를 들어 콜로이드성 이산화규소; 감미제, 예를 들어 수크로스 또는 사카린; 또는 향미제, 예를 들어 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 향미제.

흡입에 의한 투여의 경우, 화합물은 적합한 추진제, 예를 들어, 이산화탄소와 같은 가스 또는 분무기를 함유하는 가압 컨테이너 또는 분배기로부터 에어로졸 분무 형태로 전달된다.

또한, 전신 투여는 경점막 또는 경피 수단에 의하여 이루어질 수도 있다. 경점막 또는 경피 투여에 있어서, 투과되는 장벽에 적절한 투과제가 제제화에 사용된다. 이러한 투과제는 일반적으로 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어, 경점막 투과의 경우, 계면활성제, 담즙산염 및 후시딘산 유도체를 포함한다. 경점막 투여는 비강 스프레이 또는 좌제의 사용을 통해서 수행될 수 있다. 경피 투여에 있어서, 활성 성분은 일반적으로 당해 분야에 공지된 연고, 고약, 겔제 또는 크림제로 제제화된다.

하나의 구현예에서, 활성 화합물은 이식체 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 제어 방출 제제와 같이 신체로부터의 신속한 제거에 대해 화합물을 보호할 담체와 함께 제조된다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예를 들어, 에틸렌 비닐 아세테이트, 다가무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르쏘에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제제의 제조 방법은 당업자에게는 명백할 것이다. 물질은 또한 제조사(Alza Corporation 및 Nova Pharmaceuticals, Inc.)로부터 상업적으로 수득될 수 있다. 리포좀 현탁액은 또한 약제학적으로 허용되는 담체로서 사용될 수 있다. 이들은 예를 들어, 미국 특허 제4,522,811호에 기재된 바와 같이 당업자에게 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다.

투여의 용이성 및 용량의 균일도를 위해 단위 제형으로 경구 또는 비경구 조성물을 제제화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 단위 제형은 치료될 대상체를 위한 단일 용량으로 맞춰진 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며; 각 단위는 필요한 약학적 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 나타내도록 계산된 소정량의 활성 성분을 함유한다. 본 발명의 투여 단위 형태에 대한 사양은 활성 화합물의 고유한 특성 및 달성하고자 하는 특정 치료 효과, 및 개체의 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 배합하는 기술 분야 고유의 한계에 의해 지시되고 이에 직접적으로 의존한다.

약제학적 조성물은 투여에 대한 사용설명서와 함께 용기, 팩 또는 디스펜서 중에 포함될 수 있다.

약물 입자 제형

본 발명의 실시에 사용하기 위한 화합물, 즉, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 전형적으로 입자 제형에 첨가되고, 이는 현탁액 비히클에 균일하게 현탁, 용해 또는 분산되어 현탁 제제를 형성하는 폴리펩티드 함유 입자를 제조하기 위해 사용된다. 일부 구현예에서, PYY 유사체 폴리펩티드는 입자 제형으로 제형화되고 입자로 전환(예를 들어, 분무 건조)된다. 일부 구현예에서, PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 입자는 비히클 제제에 현탁되어, 비히클 및 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 현탁 입자의 현탁 제제가 생성된다.

바람직하게, 입자 제형은 분무 건조, 동결건조, 건조, 동결 건조, 분쇄, 과립화, 초음파 액적 생성, 결정화, 침전 또는 성분 혼합물로부터 입자를 형성하기 위해 당해 분야에서 가용한 기타 기술과 같은 공정을 사용하여 입자로 형성될 수 있다. 본 발명의 하나의 구현예에서, 입자는 분무 건조시킨다. 입자는 모양 및 크기가 실질적으로 균일한 것이 바람직하다.

일부 구현예에서, 본 발명은 약제학적 사용을 위한 약물 입자 제형을 제공한다. 입자 제형은 전형적으로 약물을 포함하고 하나 이상의 안정화 성분 (또한 본원에서 "부형제"로서 지칭됨)을 포함한다. 안정화 성분의 예는 탄수화물, 항산화제, 아미노산, 완충제, 무기 화합물 및 계면활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 입자 제형에서 안정화제의 양은 본 명세서의 교시를 고려하여 안정화제의 활성 및 제형의 목적하는 특성에 기초하여 실험적으로 결정될 수 있다.

임의의 구현예에서, 입자 제형은 약 50 중량 % 내지 약 90 중량 % 약물, 약 50 중량 % 내지 약 85 중량 % 약물, 약 55 중량 % 내지 약 90 중량 % 약물, 약 60 중량 % 내지 약 90 중량 % 약물, 약 65 중량 % 내지 약 85 중량 % 약물, 약 65 중량 % 내지 약 90 중량 % 약물, 약 70 중량 % 내지 약 90 중량 % 약물, 약 70 중량 % 내지 약 85 중량 % 약물, 약 70 중량 % 내지 약 80 중량 % 약물 또는 약 70 중량 % 내지 약 75 중량 % 약물을 포함할 수 있다.

일반적으로 입자 제형에서 탄수화물의 양은 응집 문제에 의해 결정된다. 일반적으로, 탄수화물 양은 약물에 결합되지 않은 과량의 탄수화물로 인해 물의 존재하에서 결정 성장을 촉진하는 것을 피하기 위해 너무 높아서는 안 된다.

전형적으로, 입자 제형 내의 항산화제의 양은 산화 문제에 의해 결정되는 반면, 제형 내 아미노산의 양은 분무 건조 동안의 산화 문제 및/또는 입자의 성형성에 의해 결정된다.

전형적으로 입자 제형 중에 완충액의 양은 전처리 문제, 안정성 문제 및 분무 건조 중 입자의 성형성에 의해 결정된다. 모든 안정화제가 가용화될 때 용액 제조 및 분무 건조와 같은 가공 중 약물을 안정화하기 위해 완충제가 필요할 수 있다.

입자 제형에 포함될 수 있는 탄수화물의 예는 모노사카라이드(예를 들어, 프럭토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스 및 소르보스), 디사카라이드(예를 들어, 락토스, 수크로스, 트레할로스 및 셀로비오스), 폴리사카라이드(예를 들어, 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란 및 전분), 및 알디톨(비환형 폴리올; 예를 들어, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨 소르비톨, 피라노실 소르비톨 및 미오인시톨)을 포함한다. 적합한 탄수화물은 디사카라이드 및/또는 비-환원 당, 예를 들어, 슈크로스, 트레할로스 및 라피노스를 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 항산화제의 예는 메티오닌, 아스코르브산, 티오황산나트륨, 카탈라제, 백금, 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA), 시트르산, 시스테인, 티오글리세롤, 티오글리콜산, 티오소르비톨, 부틸화 하이드록실톨루엔 및 프로필 갈레이트를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 추가로, 용이하게 산화하는 아미노산은 항산화제로서 사용될 수 있고, 예를 들어, 시스테인, 메티오닌 및 트립토판이 있다.

입자 제형에 포함될 수 있는 아미노산의 예는 아르기닌, 메티오닌, 글리신, 히스티딘, 알라닌, 류신, 글루탐산, 이소-류신, L-트레오닌, 2-페닐아민, 발린, 노르발린, 프롤린, 페닐알라닌, 트립토판, 세린, 아스파라긴, 시스테인, 티로신, 라이신 및 노르류신을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 아미노산은 용이하게 산화하는 것들, 예를 들어, 시스테인, 메티오닌, 및 트립토판을 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 완충제의 예는 시트레이트, 히스티딘, 숙시네이트, 포스페이트, 말레에이트, 트리스, 아세테이트, 탄수화물, 및 gly-gly를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 완충제는 시트레이트, 히스티딘, 숙시네이트 및 트리스를 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 무기 화합물의 예는 NaCl, Na₂SO₄, NaHCO₃, KCl, KH₂PO₄, CaCl₂, 및 MgCl₂를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

또한, 입자 제형은 계면활성제 및 염과 같은 다른 안정화제/부형제를 포함할 수 있다. 계면활성제의 예는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, PLURONIC® (BASF Corporation, Mount Olive, N.J.) F68, 및 나트륨 도데실 설페이트(SDS)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 염의 예는 염화나트륨, 염화칼슘 및 염화마그네슘을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

입자는 전형적으로 이들이 이식가능한 삼투성 전달 장치를 통해 전달될 수 있도록 하는 크기를 갖는다. 입자의 균일한 형태 및 크기는 전형적으로 이러한 전달 장치로부터 일관되고 균일한 방출 속도를 제공하는 데 도움이 되지만, 비정규 입자 크기 분포 프로필을 갖는 입자 제제가 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 전달 오리피스를 갖는 전형적인 이식가능한 삼투성 전달 장치에서, 입자의 크기는 전달 오리피스의 직경의 약 30% 미만, 보다 바람직하게는 약 20% 미만, 더욱 바람직하게는 약 10% 미만이다. 이식체의 전달 오리피스 직경이 약 0.5 mm인 삼투성 전달 시스템과 함께 사용하기 위한 입자 제형의 구현예에서, 입자 크기는 예를 들어 약 150 미크론 내지 약 50 미크론 미만일 수 있다. 이식체의 전달 오리피스 직경이 약 0.1 mm인 삼투성 전달 시스템과 함께 사용하기 위한 입자 제형의 구현예에서, 입자 크기는 예를 들어 약 30 미크론 내지 약 10 미크론 미만일 수 있다. 하나의 구현예에서, 오리피스는 약 0.25 mm(250 미크론)이고 입자 크기는 약 2 미크론 내지 약 5 미크론이다.

당업자는 입자 집단이 입자 크기 분포의 원리를 따른다는 것을 이해할 것이다. 입자 크기 분포를 기재하는 널리 사용되는 당업계에서 인정하는 방법은 예를 들어 주어진 샘플의 입자 크기 범위의 평균 직경을 나타내는 데 일반적으로 사용되는 D50 값과 같은 평균 직경 및 D 값을 포함한다.

입자 제형의 입자는 직경 약 2 미크론 내지 약 150 미크론, 예를 들어 직경 150 미크론 미만, 직경 100 미크론 미만, 직경 50 미크론 미만, 직경 30 미크론 미만, 직경 10 미크론 미만, 직경 5 미크론 미만 및 직경 약 2 미크론의 직경을 갖는다. 바람직하게, 입자는 약 2 미크론 내지 약 50 미크론의 직경을 갖는다.

단리된 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 입자 제형의 입자는 약 0.3 미크론 내지 약 150 미크론의 평균 직경을 갖는다. 단리된 PYY 유사체 폴리펩티드를 포함하는 입자 제형의 입자는 직경 약 2 미크론 내지 약 150 미크론, 예를 들어 평균 직경 150 미크론 미만, 평균 직경 100 미크론 미만, 평균 직경 50 미크론 미만, 평균 직경 30 미크론 미만, 평균 직경 10 미크론 미만, 평균 직경 5 미크론 미만 및 평균 직경 약 2 미크론의 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 약 0.3 미크론 내지 50 미크론, 예를 들어 약 2 미크론 내지 약 50 미크론의 평균 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 평균 직경이 0.3 미크론 내지 50 미크론, 예를 들어 약 2 미크론 내지 약 50 미크론이고, 여기서 각각의 입자는 직경이 약 50 미크론 미만이다.

전형적으로, 입자 제형의 입자는 현탁액 비히클에 혼입되는 경우, 약 3개월 이내에 침강하지 않고, 바람직하게는 전달 온도에서, 약 6개월 이내에 침강하지 않으며, 보다 바람직하게는 약 12개월 이내에 침강하지 않고, 보다 바람직하게는 약 24개월 이내에 침강하지 않고, 가장 바람직하게는 전달 온도에서 약 36개월 미만에 침강하지 않는다. 현탁액 비히클은 전형적으로 약 5,000 내지 약 30,000포아즈, 바람직하게는 약 8,000 내지 약 25,000포아즈, 보다 바람직하게는 약 10,000 내지 약 20,000포아즈의 점도를 갖는다. 하나의 구현예에서, 현탁액 비히클은 약 15,000 포이즈, 플러스 또는 마이너스 약 3,000 포이즈의 점도를 갖는다. 일반적으로 말해서, 보다 작은 입자는 더 큰 입자보다 점성 현탁액 비히클에서 더 낮은 침강 속도를 갖는 경향이 있다. 따라서 미크론 내지 나노 크기의 입자가 전형적으로 바람직할 수 있다. 점성 현탁액 제형에서, 본 발명의 약 2 미크론 내지 약 7 미크론의 입자는 시뮬레이션 모델링 연구에 기초하여 실온에서 적어도 20년 동안 침강하지 않을 것이다. 본 발명의 입자 제형의 한 구현예에서, 이식가능한 삼투성 전달 장치에 사용하기 위한 크기는 약 50 미크론 미만, 보다 바람직하게는 약 10 미크론 미만, 보다 바람직하게는 약 2 미크론 내지 약 7 미크론 범위의 입자를 포함한다.

요약하면, 기재된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 약물의 최대 화학적 및 생물학적 안정성을 보존하는 고체 상태 입자의 건조 분말로 제형화된다. 입자는 고온에서 장기간 보관 안정성을 제공하므로 연장된 기간 동안 안정적이고 생물학적으로 효과적인 약물을 대상체에게 전달할 수 있다. 입자는 환자에게 투여하기 위해 현탁액 비히클에 현탁된다.

비히클 중에 입자 현탁액

하나의 양상에서, 현탁액 비히클은 약물 입자 제형이 분산되는 안정한 환경을 제공한다. 약물 입자 제형은 현탁액 비히클에서 화학적으로 및 물리적으로 안정하다(상기된 바와 같이). 현탁액 비히클은 전형적으로 약물을 포함하는 입자를 균일하게 현탁시키기에 충분한 점도의 용액을 형성하는 하나 이상의 중합체 및 하나 이상의 용매를 포함한다. 현탁액 비히클은 비히클 내의 계면활성제, 항산화제, 및/또는 기타 가용성 화합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는 추가 성분을 포함할 수 있다.

현탁액 비히클의 점도는 전형적으로 약물 입자 제형이 저장 및 전달 방법, 예를 들어 이식가능한 삼투성 전달 장치에서 사용하는 동안 침강되는 것을 방지하기에 충분하다. 현탁액 비히클은 생물학적 환경에 반응하여 일정 시간 동안 현탁액 비히클이 붕해 또는 분해되는 반면, 약물 입자는 생물학적 환경에 용해되고 입자 내의 활성 약제학적 성분(즉, 약물)이 흡수된다는 점에서 생분해성이다.

구현예에서, 현탁액 비히클은 "단일-상" 현탁액 비히클이고, 이는 고체, 반고체 또는 전체적으로 물리적으로 및 화학적으로 균일한 액체 균질의 시스템이다.

중합체가 용해되는 용매는 저장 동안에 약물 입자 제제의 거동과 같은 현탁액 제제의 특징에 영향을 미칠 수 있다. 생성된 현탁액 비히클이 수성 환경과 접촉시 상 분리를 나타내도록 용매를 중합체와 조합하여 선택할 수 있다. 본 발명의 일부 구현예에서, 생성된 현탁액 비히클이 약 10% 미만의 물을 갖는 수성 환경과 접촉시 상 분리를 나타내도록 용매를 중합체와 조합하여 선택할 수 있다.

용매는 물과 혼화되지 않는 허용가능한 용매일 수 있다. 용매는 또한 중합체가 약 30% 초과의 중합체 농도와 같은 고농도에서 용매에 용해되도록 선택될 수 있다. 본 발명의 실시에 유용한 용매의 예는 라우릴 알콜, 벤질 벤조에이트, 벤질 알콜, 라우릴 락테이트, 데칸올(데실 알콜로도 불림), 에틸 헥실 락테이트, 및 장쇄(C8 내지 C24) 지방족 알콜, 에스테르, 또는 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 현탁액 비히클에 사용되는 용매는 수분 함량이 낮다는 점에서 "건조"할 수 있다. 현탁 비히클의 제형화에 사용하기에 바람직한 용매는 라우릴 락테이트, 라우릴 알콜, 벤질 벤조에이트, 및 이들의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 현탁액 비히클의 제형화를 위한 중합체의 예는 폴리에스테르(예를 들어, 폴리락트산 및 폴리락틱폴리글리콜산), 피롤리돈을 포함하는 중합체(예를 들어, 대략 2,000 내지 대략 1,000,000 범위의 분자량을 갖는 폴리비닐피롤리돈), 불포화 알콜의 에스테르 또는 에테르(예를 들어, 비닐 아세테이트), 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌 블록 공중합체, 또는 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 폴리비닐피롤리돈은 점도 지수인 이의 K-값(예를 들어, K-17)을 특징으로 할 수 있다. 하나의 구현예에서, 중합체는 2,000 내지 1,000,000의 분자량을 갖는 폴리비닐피롤리돈이다. 바람직한 구현예에서, 중합체는 폴리비닐피롤리돈 K-17(전형적으로 7,900-10,800의 대략적 평균 분자량 범위를 갖는)이다. 현탁액 비히클에 사용되는 중합체는 하나 이상의 상이한 중합체를 포함할 수 있거나 상이한 등급의 단일 중합체를 포함할 수 있다. 현탁액 비히클에 사용되는 중합체는 수분 함량이 낮다는 점에서 "건조"할 수 있다.

일반적으로 말해서, 본 발명에 사용하기 위한 현탁액 비히클은 목적하는 수행능 특성징에 기초하여 조성이 변할 수 있다. 하나의 구현예에서, 현탁액 비히클은 약 40 중량 % 내지 약 80 중량 %의 중합체(들) 및 약 20 중량 % 내지 약 60 중량 %의 용매(들)을 포함할 수 있다. 현탁액 비히클의 바람직한 구현예는 중합체(들) 및 용매(들)가 하기 비율로 조합되어 형성된 비히클을 포함한다: 약 25 중량 %의 용매 및 약 75 중량 %의 중합체; 약 50 중량 %의 용매 및 약 50 중량 %의 중합체; 약 75 중량 %의 용매 및 약 25 중량 %의 중합체. 따라서, 일부 구현예에서 현탁액 비히클은 선택된 성분을 포함할 수 있고 다른 구현예서는 본질적으로 선택된 성분으로 이루어질 수 있다.

현탁액 비히클은 뉴턴식 거동을 나타낼 수 있다. 현탁액 비히클은 전형적으로 미리 결정된 기간 동안 입자 제형의 균일한 분산을 유지하는 점도를 제공하도록 제형화된다. 이는 약물 입자 제형에 함유된 약물의 제어된 전달을 제공하도록 맞춤화된 현탁액 제형의 제조를 용이하게 하는 데 도움이 된다. 현탁액 비히클의 점도는 목적하는 적용, 입자 제형의 크기 및 유형, 및 현탁액 비히클에서 입자 제형의 부하에 따라 다양할 수 있다. 현탁 비히클의 점도는 사용되는 용매 또는 중합체의 유형 또는 상대적인 양을 변경함으로써 변화될 수 있다.

현탁액 비히클은 약 100 포이즈 내지 약 1,000,000 포이즈, 바람직하게는 약 1,000 포이즈 내지 약 100,000 포이즈 범위의 점도를 가질 수 있다. 바람직한 구현예에서, 현탁액 비히클은 전형적으로 33℃에서 약 5,000 내지 약 30,000 포이즈, 바람직하게는 약 8,000 내지 약 25,000 포이즈, 보다 바람직하게는 약 10,000 내지 약 20,000 포이즈의 점도를 갖는다. 하나의 구현예에서, 현탁액 비히클은 33℃에서 약 15,000 포이즈, 플러스 또는 마이너스 약 3,000 포이즈의 점도를 갖는다. 점도는 평행판 레오미터(parallel plate rheometer)를 사용하여 33℃에서 10-4/sec의 전단 속도에서 측정할 수 있다.

현탁액 비히클은 수성 환경과 접촉할 때 상 분리를 나타낼 수 있지만; 전형적으로 현탁액 비히클은 온도의 함수로서 실질적으로 상 분리를 나타내지 않는다. 예를 들어, 대략 0℃ 내지 대략 70℃의 온도 범위에서 및 온도 사이클링시, 예를 들어, 4℃로부터 37℃로 이어서 4℃로 사이클링시, 현탁액 비히클은 전형적으로 상 분리를 나타내지 않는다.

현탁 비히클은 건조 상자와 같은 건조 조건 하에 중합체와 용매를 조합함으로써 제조될 수 있다. 중합체 및 용매는 대략 40℃ 내지 대략 70℃와 같은 승온에서 조합될 수 있고, 액화되어 단일상을 형성할 수 있다. 건조 성분으로부터 생성된 기포를 제거하기 위해 성분을 진공하에 블렌딩할 수 있다. 성분들은 대략 40 rpm의 속도로 설정된 이중 나선 블레이드 또는 유사한 믹서와 같은 통상적인 믹서를 사용하여 조합될 수 있다. 그러나 성분을 혼합하는 데 보다 높은 속도를 사용할 수도 있다. 일단 성분의 액체 용액이 얻어지면, 현탁액 비히클은 실온으로 냉각될 수 있다. 현탁액 비히클이 단일상인지 확인하기 위해 시차 주사 열량계(DSC)를 사용할 수 있다. 또한, 비히클의 성분(예를 들어, 용매 및/또는 중합체)은 과산화물을 실질적으로 감소시키거나 실질적으로 제거하도록 처리될 수 있다(예를 들어, 메티오닌으로 처리함으로써; 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 번호 2007-0027105 참조).

약물 입자 제형을 현탁액 비히클에 첨가하여 현탁액 제형을 형성한다. 일부 구현예에서, 현탁액 제형은 약물 입자 제형 및 현탁액 비히클을 포함할 수 있고, 다른 구현예에서는 본질적으로 약물 입자 제형 및 현탁액 비히클로 이루어진다.

현탁액 제형은 입자 제형을 현탁액 비히클에 분산시켜 제조할 수 있다. 현탁액 비히클은 가열될 수 있고, 입자 제형은 건조 조건 하에 현탁액 비히클에 첨가될 수 있다. 성분들은 약 40℃ 내지 약 70℃와 같은 승온에서 진공 하에 혼합될 수 있다. 성분들은 현탁액 비히클에서 입자 제형의 균일한 분산을 달성하기 위해 약 40 rpm 내지 약 120 rpm과 같은 충분한 속도로 그리고 약 15분과 같은 충분한 시간 동안 혼합될 수 있다. 믹서는 이중 나선 블레이드 또는 기타 적절한 믹서일 수 있다. 생성된 혼합물을 믹서로부터 제거하고, 물이 현탁액 제형을 오염시키는 것을 방지하기 위해 건조 컨테이너에 밀봉시키고, 추가 사용, 예를 들어 이식 가능한 약물 전달 장치, 단위 용량 컨테이너 또는 다중 용량 컨테이너에 부하하기 전에 실온으로 냉각되도록 할 수 있다.

현탁액 제형은 전형적으로 약 10 중량 % 미만, 바람직하게는 약 5 중량 % 미만, 보다 바람직하게는 약 4 중량 % 미만의 전체 수분 함량을 갖는다.

바람직한 구현예에서, 본 발명의 현탁액 제형은 삼투성 전달 장치로부터 대상체로 약물 입자 제제의 전달을 제공하기 위해 실질적으로 균질하고 유동성이 있다.

요약하면, 현탁액 비히클의 성분은 생체적합성을 제공한다. 현탁액 비히클의 성분들은 약물 입자 제형의 안정한 현탁액을 형성하기에 적합한 화학-물리적 성질을 제공한다. 이들 성질은 다음을 포함되지만 이에 제한되지 않는다: 현탁액의 점도; 비히클의 순도; 비히클의 잔류 수분; 비히클의 밀도; 건조 분말과의 상용성; 이식 가능한 장치와의 상용성; 중합체의 분자량; 비히클의 안정성; 및 비히클의 소수성 및 친수성. 이들 성질은 예를 들어 비히클 조성을 변경하고 현탁액 비히클에 사용되는 성분들의 비율을 조정하여 조작 및 제어할 수 있다.

본원에 기재된 현탁액 제형은 연장된 기간, 예를 들어, 수주, 수개월 또는 최대 약 1년 이상에 걸쳐 화합물의 0차, 연속, 제어 및 지속적인 전달을 제공하기 위해 이식 가능한 삼투성 전달 장치에 사용될 수 있다. 이러한 이식가능한 삼투성 전달 장치는 전형적으로 약물을 포함하는 현탁액 제형을 목적하는 시간 동안 목적하는 유속으로 전달할 수 있다. 현탁액 제형은 통상적인 기술에 의해 이식가능한 삼투성 전달 장치에 부하될 수 있다.

실시예

하기 실시예는 당업자에게 본 발명을 실시하는 방법의 완전한 개시 및 기재를 제공하기 위해 제시되는 것이고, 본 발명자가 본 발명으로 간주하는 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 농도 및 퍼센트 변화)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력했지만 일부 실험 오류 및 편차를 고려해야 한다. 달리 지적되지 않는 경우, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압 또는 대기압 부근이다.

실시예 1: 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드의 생성

표 3에 제공된 바와 같은 본 발명의 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드는 염기로서 사용되는 N,N-디메틸포름아미드(DMF) 및 N'N-디이소프로필에틸아민(DIEA) 중에서 N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로-[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥사이드(HATU) 또는 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1- 일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트(HCTU) 활성화(아미노산에 대해 5배 몰 과량)과 함께 Fmoc 전략을 사용하는 고체상에 의해 프렐루드 펩티드 합성기 (Protein Technologies Inc., Tucson, AZ) 상에서 합성하였다. Fmoc 탈보호를 위해 20% 피페리딘/DMF 용액을 사용하였다. 사용된 수지는 (20-400) μmol 스케일상에서 (0.30 - 0.40) mmol/g의 부하를 갖는 Rink Amide MBHA LL(Novabiochem)이었다.

선형 폴리펩티드의 고체상 합성이 완료되면, 수지를 디클로로메탄(DCM)으로 세척하고 진공 하에 30분 동안 건조시켰다. 알릴옥시카보닐(Alloc) 보호 그룹을 함유하는 유사체의 경우, (클로로포름/아세트산/n-메틸-모르폴린, 37:2:1) 중 Pd(PPh₃)₃의 용액을 통해 제거를 성취하였다. 3급-부틸옥시카보닐 (BOC)-Lys-플루오레닐메틸옥시카보닐 (Fmoc)-OH를 함유하는 유사체의 경우, 상기 Fmoc 보호 그룹은 20% 피페리딘/DMF를 사용하여 제거하였다. 수득한 Fmoc-탈보호된 수지는 DMF (6 x 30 초)로 세척하였다. 이어서, 사전 활성화 조건에서 각 빌딩 블록을 수동으로 추가하여 스페이서 영역의 연장을 단계적으로 수행하였다. 친지성 치환체(또한 "아실 쇄"로 지칭됨)의 첨가는 사전 활성화 단계 없이 고체상 펩터드 합성 (SPPS)하에 수행하였다. 고체 지지체로부터 펩티드의 최종 탈보호 및 절단은 수지를 (95% TFA, 2% 물, 2% 티오아니솔, 및 1% 트리이소프로필실란)으로 2-3시간 동안 처리하여 수행하였다. 절단된 펩티드는 냉각 디에틸 에테르를 사용하여 침전시켰다. 디에틸 에테르 층을 따라내고, 고체를 냉각 디에틸 에테르로 다시 분쇄하고 원심분리에 의해 펠렛화하였다.

락탐 브릿지를 함유하는 유사체의 경우, 적절한 알릴 보호된 아미노산 빌딩 블록은 위에 기재된 바와 같이 정상적인 고체상 조건하에서 위치시켰다. 또한, Fmoc-Lys-ε-1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸(ivDde)-OH는 이후에 아실 스페이서 및 측쇄를 혼입하기 위한 핸들로서 위치시켰다. 선형 펩티드의 완료시 아릴-보호 그룹은 상기된 바와 같이 제거하였다. 락탐-브릿지 형성은 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP, .5M) 활성화 및 염기로 DIEA를 사용하여 고체상 프로토콜을 통해 수행되었다. Fmoc & ivDde 그룹의 탈보호는 DMF 중에 4%의 히드라진의 용액을 통해 수행되었다. 수득한 탈보호된 수지는 DMF(6 x 30 초)로 세척하였다. 스페이서 영역의 연장 및 친지성 치환체의 첨가는 이전의 문단에 기재된 바와 같이 수행되었다. 고체 지지체로부터 펩티드의 최종 탈보호 및 절단은 수지를 (95% TFA, 2% 물, 2% 티오아니솔, 및 1% 트리이소프로필실란)으로 2-3시간 동안 처리하여 수행하였다. 절단된 펩티드는 냉각 디에틸 에테르를 사용하여 침전시켰다. 디에틸 에테르를 따라내고, 고체를 냉각 디에틸 에테르로 다시 분쇄하고 원심분리에 의해 펠렛화하였다.

이어서, 조 생성물을 아세토니트릴(ACN)/H₂O, 0.1% TFA의 용액에 용해시켰다. 10%의 아세트산 용액을 각각의 펩티드 생성물의 용액에 첨가하고 LC/MS를 통한 분석이 임의의 CO₂ 부가물의 제거를 지적할때까지 교반되도록 방치하였다. 용액을 동결시키고 동결건조시켰다. 정제는 실시예 2에 기재된 방법을 통해 수행하였다.

실시예 2: 임의의 친지성 치환체 및 임의의 스페이서 없이 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드, 즉 선형 폴리펩티드의 정제 및 특징 분석

실시예 1의 생성물을 동결건조시키고 전기분무 이온화- 액체 크로마토그래피/질량 분광측정 (ESI-LC/MS) 및 분석학적 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 분석하고, 순수한(>98%) 것으로 입증되었다. 질량 결과는 계산된 값과 일치하였다.

펩티드 유사체의 특징 분석은 C18 HPLC 및 LC/MS 분석(Acquity SQD Waters Corp, Milford, MA) 및 방법 A, 방법 B, 방법 C 또는 방법 D 중 하나를 사용하여 215 nm 및 280 nm에서 이중 흡광도 신호에 의해 제공되는 UV 검출을 통해 수행되었다.

방법 A, LC/MS 조건: Phenomenex HPLC Aeris™ 펩티드 XB C18 35 컬럼, 1.7 pm, 2.1 X 100 mm 또는 Acquity BEH300 또는 BEH130 CT8 컬럼, 1.77 pm을 사용하여 수행. 30분에 걸쳐 5- 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA를 사용하여 2.1 X 100 mm, 유속 0.5 mL/min, λ - 215 nm, 280 nm.

방법 B, C18 HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7 μm, 100 X 2.10 mm 컬럼, 30분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/min, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다.

방법 C, HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7 μm, 100 X 2.10 mm 컬럼, 20분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/min, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다.

방법 D, HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7 μm, 100 X 2.10 mm 컬럼, 10분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/min, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다. PLNO(부분 루프 w/니들 오버필) 주사 모드를 사용하여 5.0 μL의 샘플을 주사하였다.

친지성 치환체 및 임의의 스페이서가 없는 폴리펩티드 유사체는 때로 "선형 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다. 적어도 하나의 공유적으로 결합된 친지성 치환체 및 임의의 스페이서를 갖는 폴리펩티드는 때로는 "접합된 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다. 표 13은 본원 개시내용의 예시적인 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드에 대한 특징 분석 데이터를 제공한다.

친지성 치환체 및 임의의 스페이서가 없는 폴리펩티드 유사체는 때로 "선형 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다. 적어도 하나의 공유적으로 결합된 친지성 치환체 및 임의의 스페이서를 갖는 폴리펩티드는 때로는 "접합된 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다.

[표 13] 예시적인 화합물: PYY 유사체 폴리펩티드

실시예 3: 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드의 안정성 및 용해도

본원에 기재된 유사체 폴리펩티드는 실온에서 식염수 또는 수성(DI 수)에서의 용해도에 대해 시험되었다. 샘플의 투명도, 탁도 또는 탁함의 외관에 대해 샘플을 육안으로 검사하였다. 상기 분석 결과는 표 14에 나타낸다.

본원에 기재된 여러 장기간 작용PYY 유사체는 수성 (즉, DI 수 중에서) 또는 식염수(1 mg/kg의 용액) 중에서 트리플루오로 아세테이트 염으로서 시험하였다. 이들 유사체 폴리펩티드를 37℃에서 항온처리하고, 샘플을 다양한 시간 간격으로 회수하고 모 펩티드의 순도 및 질량 및 임의의 분해 생성물의 정도에 대한 LC/MS 및 HPLC 결정에 의해 분석하였다. 이들 분석의 순도 결과는 표 14에 나타내고 안정성을 지적하는 것으로 고려된다.

[표 14] 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드의 용해도 및 안정성

실시예 4: 인간 및 래트 NPY 수용체 기능성 검정

G-단백질 커플링된 수용체의 NPY 계열은 인간 및 래트에서 Y1, Y2, Y4 및 Y5를 포함한다. 각 수용체는 NPY 계열에 속하는 내인성 펩티드 작용제 호르몬 또는 신경전달물질의 약리학적으로 구별되는 세트에 결합하고, 신경펩티드 Y(NPY), 펩티드 티로신-티로신(PYY) 및 췌장 폴리펩티드(PP)를 포함한다. NPY 및 PYY(1-36)는 상대적으로 높은 친화도로 Y1, Y2 및 Y5 수용체에 결합하는 반면, PYY(3-36)는 Y2 수용체에 선택적으로 결합하고 PP는 Y4 수용체에 선택적이다. 작용제 결합 후, 수용체-G 단백질 복합체는 아데닐레이트 사이클라제의 억제 및 세포내 cAMP 수준의 감소를 유도하는 다운스트림 세포내 신호전달 캐스케이드를 활성화시킨다.

세포 취급 및 cAMP 축적 검정

인간 또는 래트 Y1, Y2, Y4 또는 Y5 수용체를 안정적으로 발현하는 HEK-CNG 세포(Codex Biosolutions)를 사용하여 ActOne™ 막 전위 염료 키트(Codex Biosolutions)를 사용하여 펩티드 작용제의 기능적 효능을 특징분석하였다. 각 NPY 수용체 외에도 각 세포주는 독점적인 외인성 사이클릭 뉴클레오티드 게이팅 (Cyclic Nucleotide-Gated(CNG)) 채널(Codex Biosolutions)을 암호화한다. 채널은 상승된 세포내 cAMP 수준에 의해 활성화되어 칼슘 민감성 염료 또는 형광성 막 전위(MP) 염료로 검출할 수 있는 이온 플럭스와 세포막 탈분극을 유발한다. 세포는 15회 이하의 계대를 위해 90% DMEM, 10% FBS, 250 mcg/mL G418 및 1mcg/mL 퓨로마이신을 포함하는 성장 배지에 옮겼다.

시험 전에 세포를 계수하고 웰당 14,000개 세포(Y1, Y4 및 Y5) 또는 웰당 28,000개 세포(Y2)로 검정 384웰 폴리-D-라이신 플레이트에 웰당 20 mcL로 분배하였다. 이어서 커버된 플레이트를 실온에서 30분 동안 항온처리하고 이어서 37^oC에서 5% CO2에서 밤새 항온처리하였다. 다음 날, 배지를 제거하고 웰을 40 mcL 둘베코(Dulbecco)의 포스페이트 완충 식염수로 1회 세척하였다. 20 마이크로리터의 DMEM에 이어서 1X ACTOne™ 막 전위 염료 희석 완충액, 1X ACTOne™ 막 전위 염료 용액(Codex Biosolutions) 및 50 mcM의 포스포디에스테라제 억제제 Ro20-1724를 함유하는 20 mcL의 염료 로딩 용액을 각 웰에 첨가하고, 커버하고 암실에서 2시간 동안 실온에서 사전 항온처리하였다. 상기 사전 항온처리 동안 실험 펩티드 및 표준물(Y1 및 Y5의 경우 NPY, Y2의 경우 PYY(3-36), Y4의 경우 PP)을 12가지 농도에서 5X 농도(5 x 10-7 M 내지 5 x 10-13 M 범위)로 b1/b2-아드레날린 수용체 매개 cAMP 생산을 자극하기 위해 1X DPBS, 0.5% 카제인, 125mcM Ro20-1724 및 1.5mcM 이소프로테레놀을 포함하는 작용제 희석 완충액에서 연속 희석하였다. 사전 항온처리 후, Flexstation 3 형광성 플레이트 판독기(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)상에서 초기 판독(Ex530/Em590)을 수행하였다. 10 마이크로리터의 실험 펩티드 또는 펩티드 표준물을 웰에 3중으로 첨가하고 암실에서 실온에서 50분 동안 항온처리하였다. 항온처리 단계 후, 플레이트는 다시 전과 같이 판독하였다(최종 판독).

데이터 분석 및 해석

세포내 cAMP 수준의 감소를 유도하는 NPY 수용체 활성화는 이소프로테라놀 유도 형광성 신호의 감소로서 검출된다. 펩티드 표준 및 실험 값은 최종 판독/초기 판독 수학식을 사용하여 엑셀(Excel)에서 초기에 변환되었다. 변환된 값은 다음 수학식을 사용하여 수용체 특이적 표준 값(1 x 10-13 M 최소 및 1 x 10-7 M 최대)으로 정규화하였다: (시험 값 - 표준 minavg) / (표준 maxavg - 표준 minavg)*100. 정규화된 실험 값은 각 검정(Y1R 및 Y5R의 경우 NPY, Y2R의 경우 PYY(3-36), Y4R의 경우 PP)에 대해 대조군 펩티드에 의해 생성된 수용체 시스템 최대 반응의 기준선 보정 퍼센트를 나타낸다. 활성이 대조군 펩티드 최대값의 ≤ 70%인 유사체는 부분 작용제로서 동정된다. 정규화된 데이터를 3중 시험에서 분석하고 각 수용체 상의 각 시험 펩티드에 대한 EC50을 추정하는 데 사용하였다. 데이터는 3-매개변수 로지스틱 곡선 모델을 사용하여 GraphPad 프리즘 소프트웨어(v8.2.1)에 피팅하였다. Y=하부　+　(상부-하부)/(1+10^((LogEC50-X))). EC50 값은 하기 수학식을 사용하여 pEC50 값으로 전환하였다: pEC50 = - Log (EC50). 모든 보고된 값은 곡선 피팅 파라미터 r² ≥ 0.8을 충족하였다.

이들 분석 결과는 표 15에 보고된다.

[표 15] PYY 수용체에 대한 PYY 유사체 폴리펩티드의 활성

실시예 5: PYY 유사체의 시험관내 대사 안정성 약동학적 연구 (T1/2)

래트 및 인간 콩팥 브러시 경계 막

콩팥 브러시 경계 막(kBBM) 제제에서 시험관 내 항온처리를 사용하여 전신 순환계에서 프로테아제 및 펩티다제에 의한 분해에 저항하는 펩티드의 능력을 특징 분석하였다. kBBM은 신체 전체에 존재하는 많은 다양한 프로테아제와 펩티다제 세트를 고농축으로 함유하고 있기 때문에 선택되었다. 일반적으로, 생체내 CL이 낮은 펩티드는 상기 검정에서 안정한 반면, 생체내 CL이 높은 펩티드는 상기 검정에서 불안정하다.

래트와 인간의 콩팥 조직으로부터의 브러시 경계 막을 원심분리를 통해 제조하고 -70℃에서 보관하였다. 래트 또는 인간 kBBM의 해동된 스톡을 1% 카제인을 함유하는 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에서 적절한 농도로 희석하고 96웰 플레이트에 분취하였다. kBBM 용액은 37℃에서 10분 동안 예열하였다. 반응은 1% 카제인을 함유하는 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에도 용해된 시험 펩티드(1 mcM 최종 농도)를 첨가하여 개시하였다. 각 항온처리에서 kBBM의 최종 농도는 50 mcg 단백질/mL이었다. 진탕 수조에서 반응을 37℃에서 유지하였다. 개시 후 0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 및 4.0시간에, 30 mcL의 반응 혼합물을 제거하고 2.5% 포름산을 함유하는 빙냉 메탄올 120 mcL을 함유하는 96웰 플레이트에 넣었다. 켄칭된 샘플을 2178 x g에서 10분 동안 원심분리한 다음 상층액의 일부를 깨끗한 96웰 플레이트로 옮기고 물로 1:1 희석하였다. 샘플은 UPLC-MS/MS에 의해 분석하였다. 이들 분석 결과는 표 16, 17, 및 18에 나타낸다.

인간 피하 조직 균질물

피하(SC) 조직 균질물에서의 시험관내 항온처리는 SC 투여 후 프로테아제 및 펩티다제에 의한 프레-전신 분해에 저항하는 펩티드의 능력을 특징분석하는 데 사용되었다. 생체내 비임상 연구는 SC 공간에서 펩티다제 활성이 SC 투여 후 펩티드의 생체이용률을 제한할 수 있음을 보여주었다. SC 생체이용률이 높은 펩티드는 이 분석에서 안정적이지만 SC 생체이용률이 낮은 펩티드는 이 분석에서 불안정하다.

인간 SC 조직을 냉각 25mM HEPES 완충액(pH 7.4, 샘플 중량을 기준으로 하여 10배 용적)에서 균질화시킨 다음, 무명천의 이중층을 통해 여과하였다. 여액을 분취하고 메탄올/드라이 아이스 욕조에서 급속 동결하고 -80℃에서 보관하였다. 각각의 풀링된 욕조의 단백질 농도는 BCA 단백질 검정을 사용하여 결정하였다. 인간 SC 조직 균질물의 해동된 스톡을 25mM HEPES 완충액(pH 7.4)에서 1.0 mg 단백질/mL로 희석하고 96웰 플레이트에 분취하였다. 희석된 SC 균질물을 37℃에서 10분 동안 예열하였다. 반응은 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에도 용해된 시험 펩티드(10mcM 최종 농도)를 첨가하여 개시하였다. 진탕 수조에서 반응을 37℃에서 유지하였다. 개시 후 0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 및 4.0시간에, 50 mcL의 반응 혼합물을 제거하고 2.5% 포름산을 함유하는 빙냉 메탄올 150 mcL을 함유하는 96웰 플레이트에 넣었다. 켄칭된 샘플을 2178 x g에서 10분 동안 원심분리한 다음 상층액의 일부를 깨끗한 96웰 플레이트로 옮기고 물로 1:10 희석하였다. 샘플은 UPLC-MS/MS에 의해 분석하였다. 이들 분석 결과는 표 16, 17, 및 18에 나타낸다.

혈장에서 미결합된 분획(f _u )

평형 투석, 한외여과 및 초원심분리와 같은 혈장 단백질 결합을 측정하는 통상적인 방법은 플라스틱 튜브, 투석 막 및 분자량 컷-오프 필터의 표면에 흡착되는 경향이 있기 때문에 펩티드에 대해 신뢰할 수 없다. 결과로서, 표면 플라즈몬 공명(SPR)을 사용하여 아실화된 펩티드가 혈청 알부민에 결합하는 정도를 평가하였다. 혈장 단백질에 결합된 약물의 분획의 합리적인 추정을 제공하기 위한 상기 기술의 유용성은 문헌에서 입증되었다. 화합물 A13 (서열번호 24) 및 A24 (서열번호 24)에 대한 상기 분석 결과는 표 17 및 18에 나타낸다. 상기 데이터를 기반으로 한 인간에서 화합물 A13 및 A24의 추정 반감기는 각각 대략 4일이다.

[표 16] PYY 유사체 폴리펩티드의 대사 안정성 약동학

[표 17] PYY 유사체 화합물 A13의 대사 안정성 약동학 및 비결합 분획

[표 18] PYY 유사체 화합물 A24의 대사 안정성 약동학 및 비결합 분획

실시예 6: PYY 유사체 폴리펩티드의 약동학적 분석

펩티드의 제거율(CL)을 평가하기 위한 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드의 정맥내 주입

펩티드를 PBS(pH 7.4) 중에 0.05% Tween-20에 용해시키고 0.033 mg/kg의 최종 용량으로 대퇴 정맥 캐뉼러를 통해 금식하지 않은 수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 래트(그룹당 n=3)에게 1시간 정맥내 주입으로 투여하였다. 제형은 0.150 mL/h/kg의 속도로 투여하였다. 항응고제로서 K₂EDTA와 25 μL의 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 마이크로테이너 튜브에 주입 개시 후 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.17, 1.33, 1.5, 2, 4, 8, 24, 48, 72 및 120시간에 경정맥 캐뉼러를 통해 약동학적 분석을 위해 혈액 샘플(대략 250μL)을 수거하였다. 혈장은 원심분리에 의해 제조하고 분석때까지 -80℃에서 저장하였다.

폴리펩티드의 생체이용률 (F)를 평가하기 위한 장기간 작용 PYY 유사체 폴리펩티드의 피하 볼러스 주사

펩티드를 멸균 식염수에 용해시키고 견갑골 사이의 피하 공간에 단일 볼러스 주사를 통해 0.1 mg/kg의 용량으로 금식하지 않은 수컷 스프라그-돌리 래트(그룹당 n=3)에 투여하였다. 항응고제로서 K₂EDTA와 25 μL의 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 마이크로테이너 튜브에 투여 후 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 96, 및 120시간에 경정맥 캐뉼러를 통해 약동학적 분석을 위해 혈액 샘플(대략 250 μL)을 수거하였다. 혈장은 원심분리에 의해 제조하고 분석때까지 -80℃에서 저장하였다.

약동학 연구를 위한 혈장 샘플 제조

각 혈장 샘플의 70 μL 분취량을 96웰 플레이트에 넣었다. 각각의 웰에 적절한 내부 표준물을 포함하는 2:1 에탄올:아세토니트릴 중 0.1% TFA 210μL를 첨가하였다. 플레이트를 1300 rpm에서 10분 동안 볼텍스 혼합한 다음, 500 x g에서 10분 동안 원심분리하였다. 상층액(210 μL)을 깨끗한 96웰 플레이트에 넣고 45℃에서 질소 기류 하에 증발시켰다. 잔류물은 0.1% 포름산을 포함하는 20% 아세토니트릴(aq) 80μL에서 재구성하였다.

혈장에서 PYY 폴리펩티드의 LC/MS 정량

모든 보정 표준물은 K₂ EDTA 및 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 대조군 래트 혈장에서 제조하였다.

샘플 및 표준물은 CTC HTS PAL 자동-주사기(Leap, Carrboro, NC), 컬럼 오븐(Palo Alto, Ca)과 함께 Agilent Infinity 1290 시스템, Valco 스위칭 밸브 (Houston, TX), 및 Sciex TripleTOF® 5600 질량 분광측정기(Framingham, Ma)로 이루어진 시스템을 사용하여 전기분무 이온화(ESI) UPLC-MS/MS에 의해 분석하였다. 샘플을 2.1 × 50 mm 역상 C18 분석학적 컬럼, 전형적으로 Waters CORTECS UPLC C18+, 1.6 μm(Waters Corporation, Milford, MA) 또는 이와 유사한 컬럼에 주입하였다. 크로마토그래피 분리는 0.1% 포름산(A)을 포함하는 물과 0.1% 포름산(B)을 포함하는 아세토니트릴을 이동상으로 사용하는 구배 방법으로 달성되었다. 초기 조건은 95% A와 5% B로 이루어져 있다. 유기 성분은 펩티드에 의존하여 3-4분 동안 95% B로 증가하였다. 전형적인 유속은 550 μL/min이었다. 컬럼 온도는 45℃에서 일정하게 유지되었다. 다중 하전된 모 이온으로부터 생성된 하나 이상의 생성물 이온을 모니터링하여 펩티드를 정량하였다. 이들 분석 결과는 표 19에 제공된다. 화합물 A13(서열번호 13) 및 A24(서열번호 24)에 대한 포괄적 약동학적 및 ADME 프로필은 각각 표 20 및 21에 나타낸다. 볼러스 및 정맥내 주입 후 A13 및 A24의 혈장 농도에서의 변화는 도 4 및 5에 제공된다.

[표 19] 혈장 중에 PYY의 정량

[표 20] 래트 모델에서 화합물 A13의 약동학 및 ADME 프로필

[표 21] 래트 모델에서 화합물 A24의 약동학 및 ADME 프로필

실시예 7a:　LE DIO 래트에서 장기간 작용 GLP-1 수용체 작용제와 조합된 PYY 유사체의 체중 감량 효능

만성 체중 감량 효능 연구는 비만에 대한 설치류 모델로서 롱 에반스(Long Evans) (LE) 식이-유도된 비만(DIO) 래트에서 수행하여 단독으로 및 장기간 작용 GLP-1 유사체 (LA GLP-1)와 조합된 장기간 작용 PYY 유사체(들)의 효능 및 지속성을 조사하였다. 수컷 LE DIO 래트를 사용하였고(Envigo Laboratories, Inc., Indianapolis, IN), 젖떼기 개시 시점에, 래트에 고지방 음식물을 공급하였다(참조: Teklad TD 95217, 40%kcal from fat, Harlan Laboratories, Madison, WI). 래트를 케이지당 1마리씩 수용하고 고지방 음식(Harlan TD.95217)과 물에 자유롭게 접근할 수 있도록 하였고, 21℃ 및 50% 상대 습도에서 오전 5시부터 오후 5시까지 12시간 명암 주기로 유지하였고, 사용 전 배송 후 적어도 10일 동안 적응하도록 방치하였다. 래트는 연구 개시 시점에 16 내지 18주령이었다. 모든 절차는 동물 복지법, USDA 규정에 따라 수행되었고, 미스프로 연구 동물 케어 및 사용 위원회(Mispro Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았다. 동물을 체중 및 지방량에 따라 치료 그룹으로 무작위 배정하였다(n=8 래트/그룹). DIO LE 래트에 피하(SC) 주사에 의해 격일 마다(eod) 특정 용량의 장기 작용 PYY 및/또는 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 비히클 대조군(식염수)을 투여하였다. 화합물 A13(서열번호 13)과 LA GLP-1의 만성 조합 연구로부터 기준선 및 비히클 대조군 결과로부터 평균 체중 감량(%) ± SEM(△△)은 도 1에 나타낸다. 엑세나티드와 세마글루티드와 관련된 비교 데이터는 도 6에 제공된다.

실시예 7b:　LE DIO 래트에서 단독으로 투여된 PYY 유사체의 체중 증가 효능

장기간 작용 GLP-1 작용제와 조합된 장기간 작용 PYY 효능제에 대한 반응이 분석되는 실시예 7a에 기재된 실험은 단독의 장기간 작용 PYY 작용제 (화합물 A24; 서열번호 24)를 투여받은 LE DIO에서 별도로 분석하였다. 놀랍게도, 도 8에서 하부 패널에서와 같이 나타낸 화합물 A24(서열번호 24)와 장기간 작용 GLP-1 수용체 작용제의 조합물의 음식 섭취에서 상승작용적 감소 및 상승작용적 체중 감량과는 대조적으로, 단독의 PYY 작용제는 도 8의 상부 패널에 나타낸 바와 같이 음식 섭취에서 용량-의존적 증가 및 체중 증가를 유발하였다. 음식 섭취 증가 및 체중 증가의 유사한 패턴이 단독으로 투여된 경우 또 다른 장기간 작용 PYY 작용제(화합물 A13; 서열 번호 13)에서도 관찰되었다. 단독으로 투여된 PYY 작용제(A13 및 A24) 둘 다의 식욕증진 (음식 섭취 자극) 및 체중 증가 효과는 유사 선택적(Y2) PYY 작용제를 사용한 이전에 기재된 체중 변화 패턴과 대조적이다. 이것은 GLP-1 작용제와 조합되는 경우, GLP-1 작용제 단독으로 관찰되는 것보다 더 심오한 식욕 부진 효과를 촉진하는 그 자체로 식욕증진 제제의 첫 번째 예이다.

서열번호 13 및 서열번호 24의 식욕증진 효과는 이들 펩티드 자체의 장기간 효과에 쉽게 기인하지 않는다. 예를 들어, PEG화 또는 Fmoc로의 연결에 의해 효과 지속 기간이 증진된 다른 선택적 PYY 작용제는 식욕 부진 효과만 나타내었고 식욕증진 효과는 나타내지 않았다. 유사하게, PYY-알부민 접합체는 이러한 효과를 나타내지 않고 식욕 부진 효과를 나타내기 때문에 이들 펩티드의 식욕증진 효과는 알부민 결합 자체에 쉽게 기인하지 않는다. 또한 알부민에 가역적으로 결합하는 아실화된 PYY 작용제는 음식 섭취와 체중 증가를 자극하는 것으로 이전에 보고된 바 없다.

화합물 A13 및 A24로 대표되는 PYY 작용제 부류의 식욕증진 효과(도 8의 상부 좌측 패널 참조)는 병원성 체중 감량 또는 신체 에너지 함량 손실의 특정 조건에서 유용할 것이다. 이러한 병태의 예로는 약리학적 옵션이 거의 없고 주로 젊은 인간들에서 ~10% 사망률과 관련된 병태인 신경성 식욕부진을 포함한다. 다른 예는 악성 종양의 치료와 관련되고 이를 복잡하게 하는 악액질의 형태를 포함한다. 또 다른 예는 "노쇠" 또는 노화로 인한 영양실조이다. 근감소증(sarcopenia)으로 호칭되는 근육량 손실로 대표되는 상기 병태의 구성 요소는 이동성 상실, 주요 골절 경향 및 이러한 골절의 느린 회복을 포함하여 다양한 연령 관련 사망률 및 삶의 질 저하와 관련이 있다.

화합물 A13 및 A24(도 8의 우측 상단 패널 및 도 9의 우측 상단 사분면 참조)로 대표되는 PYY 작용제의 부류의 치료학적으로 유용한 체중 증가 효과는 단독으로 투여되거나 별도의 기전을 통해 유익한 효과를 유발하는 다른 제제와 조합하여 투여되는 경우 유발될 수 있다. 별도의 유익한 제제의 예는 그렐린 및/또는 모틸린 작용제와 같은 식욕증진 제제, 또는 근육 성장을 촉진하는 제제, 예를 들어 동화작용 스테로이드 및 성장 호르몬/이눌린 유사 성장 인자 축의 활성화제를 포함한다. 위에서 언급한 조건에 유익한 조합은 GLP-1 수용체 작용제와 관련된 화합물 A13 및 A24로 대표되는 PYY 작용제를 포함하지 않고, 그 이유는 상기 조합이 체중 감량과 관련되기 때문이다(도 8의 하단 패널 및 도 9의 하단 좌측 사분면).

실시예 8: ZDF 래트에서 GLP-1 효능제와 조합된 항당뇨병성 효능 PYY 유사체

ZDF(죽커 당뇨병성 지방(Zucker Diabetic Fatty)) 래트에서 치료 27일 후 HbA1c(1차 항당뇨병성 파라미터)에 대한 GLP-1 수용체 작용제와 함께 PYY 유사체 폴리펩티드를 지속적으로 투여했을 때의 항당뇨병성 효과를 결정하기 위해 만성 연구를 수행하였다. 수컷 ZDF 래트는 6주령(Charles River, Raleigh, NC)에 얻었고 8주령에 연구에 사용되었다. 수령 시, 래트는 21℃ 및 50% 상대 습도에서 전 5시부터 오후 5시까지 12시간 명암 사이클로 유지되는 Purina 5008 음식(Lab Diet, St. Louis, MO)과 물에 자유롭게 접근할 수 있는 케이지당 한 마리의 동물을 수용하였고 연구 개시 전 9일 동안 적응하도록 방치하였다. 글루코스 수준과 HbA1c를 측정하기 위해 꼬리 정맥을 통해 혈액 샘플을 사전 채혈(-3일차)로 취득하였다. ZDF 래트를 유사한 균 HbA1c 및 글루코스를 갖는 치료 그룹(n=10/그룹)으로 무작위 배정하였다. 특정 용량의 PYY 유사체 폴리펩티드 및/또는 GLP-1 수용체 작용제(10 mcg/kg/일) 또는 비히클(물 중 20% DMSO)을 함유하는 Alzet 삼투성 소형 펌프(2개의 펌프/동물)를 피하(SC)에 이식하였다(n=10마리 동물/치료 그룹). PK가 격일 투여를 지원하는 PYY 유사체를 소형 펌프 투여 대신 SC 주사로 투여하였다. 모든 다른 절차는 이전의 실시예에서 기재된 바와 동일하였다. 글루코스 수준과 HbA1c를 측정하기 위해 14일과 27일(연구 종료)에 혈액 샘플을 다시 채취하였다. 최종 전혈 샘플은 이소플루란 마취 하에 심장 천자에 의해 수집하였다(27일차). HbA1c 분석은 제조사에 의해 기재된 바와 같은 프로토콜 및 방법 파라미터와 함께 Carolina Chemistries CLC720i 임상 화학 분석기(Mindray Inc., Mahwah, NY)를 사용하여 수행되었다. 화합물 A13(서열번호 13)과 GLP-1 수용체 작용제의 만성 조합 연구로부터 기준선 및 비히클 대조군으로부터 평균 % 변화(△△)로서 표현되는 HIbA1c 결과를 도 2에 나타낸다. 엑세나티드와 세마글루티드와 관련된 비교 데이터는 도 7에 제공된다.

다른 구현예

본 발명이 상세한 설명과 관련하여 기재되었지만, 전술한 기재는 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 범위를 예시하기 위한 것이지 제한하기 위한 것이 아니다. 다른 양상, 이점 및 변형은 하기의 청구범위 내에 있다.

Claims

서열번호 90의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
X₀PX₂PX₄X₅PX₇X₈X₉X₁₀SPX₁₃X₁₄X₁₅X₁₆RX₁₈X₁₉X₂₀DX₂₂X₂₃HX₂₅X₂₆X₂₇WLTRX₃₂RX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 90), 여기서:
X₀은 부재이거나 K이고;
X₂는 K이고;
X₄는 E 또는 K이고;
X₅는 A 또는 K이고;
X₇은 G 또는 K이고;
X₈은 E, K, 또는 k이고;
X₉는 D 또는 K이고;
X₁₀은 A 또는 K이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₄는 E 또는 K이고;
X₁₅는 L 또는 W이고;
X₁₆은 D, E, K, N, Q, S, T, α-메틸세린 또는 호모세린이고;
X₁₈은 K 또는 Y이고;
X₁₉는 K 또는 Y이고;
X₂₀은 A, D, E, K, k, 또는 Dap이고,
X₂₂는 A, D, K, 또는 L이고;
X₂₃은 K 또는 R이고;
X₂₅은 K 또는 Y이고;
X₂₆은 E, K, 또는 L이고;
X₂₇은 K 또는 N이고;
X₃₂는 K 또는 Q이고;
X₃₄는 F, y, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;
여기서, X₀, X₂, X₄, X₅, X₇, X₈, X₁₃, X₂₀, X₂₃, X₂₅, X₂₇, 또는 X₃₂가 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₉ 및 X₁₃ 또는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 또는 위치 X₂₂ 및 X₂₆에 위치함.
청구항 1에 있어서, 서열번호 91의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 91), 여기서:
X₅는 A 또는 K이고;
X₇은 G 또는 K이고;
X₈은 E, K, 또는 k이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₅는 L 또는 W이고;
X₁₆은 D, E, K, N, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;
X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;
X₂₂는 A 또는 L이고;
X₃₄는 F, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;
여기서, X₅, X₇, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치함.
청구항 1 또는 2에 있어서, 서열번호 92의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 92), 여기서:
X₅는 A 또는 K이고;
X₇은 G 또는 K이고;
X₈은 E, K, 또는 k이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₅는 L 또는 W이고;
X₁₆은 D, E, K, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;
X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;
X₂₂는 A 또는 L이고;
X₃₄는 F, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;
여기서, X₅, X₇, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치함.
청구항 1 또는 2에 있어서, 서열번호 93의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
PKPEX₅PX₇X₈DASPX₁₃EX₁₅X₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 93), 여기서:
X₅는 A 또는 K이고;
X₇은 G 또는 K이고;
X₈은 E, K, 또는 k이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₅는 L 또는 W이고;
X₁₆은 D, E, K, N, S, α-메틸세린 또는 호모세린이고;
X₂₀은 D, E, K, 또는 k이고,
X₂₂는 A 또는 L이고;
X₃₄는 F, 3-피리디닐알라닌, 4-피리디닐알라닌, 4-카복시페닐알라닌, 4-플루오로페닐알라닌, 4-메틸페닐알라닌, N-메틸페닐알라닌, 호모페닐알라닌, β-호모티로신, 호모티로신, 또는 N-메틸티로신이고;
여기서, X₅, X₇, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치함.
청구항 1 또는 2에 있어서, 서열번호 94의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
PKPEX₅PGX₈DASPX₁₃EWX₁₆RYYX₂₀DX₂₂RHYLNWLTRQRX₃₄-(OH/NH₂) (서열번호 94), 여기서:
X₅는 A 또는 K이고;
X₈은 E, K, 또는 k이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₆은 D, E, K, 또는 N이고;
X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;
X₂₂는 A 또는 L이고;
X₃₄는 F 또는 N-메틸티로신이고;
여기서, X₅, X₈, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₈ 또는 X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치함.
청구항 1, 2 또는 5 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호 95의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
PKPEX₅PGK₈DASPX₁₃EWX₁₆RYYX₂₀DLRHYLNWLTRQRF-(OH/NH₂) (서열번호 95), 여기서:
X₅는 A 또는 K이고;
X₁₃은 E 또는 K이고;
X₁₆은 D, E, K, 또는 N이고;
X₂₀은 A, D, E, K, 또는 k이고;
여기서, X₅, X₁₃, 또는 X₂₀이 K인 경우, 상기 라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, K₈은 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
여기서, X₂₀이 k인 경우, D-라이신 잔기는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 임의로 공유적으로 결합되고,
단, 상기 폴리펩티드는 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된 적어도 하나의 잔기를 포함하고;
여기서, 상기 폴리펩티드는 임의로 라이신과 아스파르트산의 측쇄 사이 또는 라이신과 글루탐산의 측쇄 사이에 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 추가로 포함하고, 여기서, 상기 락탐 브릿지를 형성하는 잔기는 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치함.
청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, X₁₅가 L인 경우, X₂₂가 A인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1, 2, 또는 5 내지 7 중 어느 한 항에 있어서, X₁₆이 N인 경우, X₂₀이 A가 아닌, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 5, 7 또는 8 중 어느 한 항에 있어서, X₈이 E인 경우, X₅은 K이고, X₂₀은 K이고, X₅ 또는 X₂₀ 중 어느 하나에서 라이신 잔기가 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 5 또는 7 내지 9 중 어느 한 항에 있어서, X₃₄가 F인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 5, 7, 8 또는 10 중 어느 한 항에 있어서, X₈이 K인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 6 또는 11에 있어서, 상기 폴리펩티드 서열의 8번 위치에서 라이신 잔기가 임의로 스페이서를 통해 친지성 치환체에 공유적으로 결합된, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 7 또는 10 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, X₁₆이 K이고, X₂₀이 D 또는 E이고, 상기 폴리펩티드가 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치한 잔기들의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 7 또는 10 내지 12 중 어느 한 항에 있어서, X₁₆이 D 또는 E이고, X₂₀이 K이고, 상기 폴리펩티드가 위치 X₁₆ 및 X₂₀에 위치한 잔기들의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 브릿지를 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 14 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친지성 치환체가 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 CO- 그룹 사이에 아미드 결합을 형성하는, 단리된 폴리펩티드.
청구항 15에 있어서, 상기 친지성 치환체가 화학식 I를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
화학식 I
-CO-(CH₂)_m-Z
여기서,
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 16에 있어서, Z가 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 16 또는 17에 있어서, m이 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 16 내지 18 중 어느 한 항에 있어서, m이 16, 17, 또는 18인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 14 중 어느 한 항에 있어서, 상기 친지성 치환체가 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드에 공유적으로 결합된, 단리된 폴리펩티드.
청구항 20에 있어서, 상기 친지성 치환체, -CO-(CH₂)_m-Z가 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹에 연결되고, 상기 스페이서가 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친지성 치환체의 -CO- 그룹 사이에 브릿지를 형성하는, 단리된 폴리펩티드.
청구항 20 또는 21에 있어서, 상기 친지성 치환체 및 스페이서가 화학식 II를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
화학식 II
-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z
여기서,
Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24이고;
n은 1 내지 10임.
청구항 22에 있어서, Z가 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 22 또는 23에 있어서, m이 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 22 내지 24 중 어느 한 항에 있어서, m이 16, 17, 또는 18인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 22 내지 25 중 어느 한 항에 있어서, Y가 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 22 내지 26 중 어느 한 항에 있어서, n이 1 내지 5인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 22 내지 27 중 어느 한 항에 있어서, n이 2인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 20 또는 21에 있어서, 상기 친지성 치환체 및 스페이서가 화학식 IV를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
화학식 IV
-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z
여기서
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24이고;
Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;
r은 1 내지 8이고;
n1은 0 내지 10이고;
n2는 0 내지 10임.
청구항 29에 있어서, Z가 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 또는 30에 있어서, m이 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 31 중 어느 한 항에 있어서, m이 16, 17, 또는 18인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 32 중 어느 한 항에 있어서, Y1이 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 33 중 어느 한 항에 있어서, n1이 0 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 34 중 어느 한 항에 있어서, Y2가 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 35 중 어느 한 항에 있어서, n2가 0 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 29 내지 36 중 어느 한 항에 있어서, r이 1 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
청구항 1 내지 37 중 어느 한 항에 있어서, 상기 카복시 말단 아미노산, X₃₄가 -X₃₄-(NH₂)인, 단리된 폴리펩티드.
서열번호 1 내지 78 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
청구항 39에 있어서, 서열번호 13, 24, 42, 및 43로 나타낸 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
청구항 39에 있어서, 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
청구항 39에 있어서, 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
청구항 39에 있어서, 서열번호 42의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
청구항 39에 있어서, 서열번호 43의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 보조제, 담체 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 GLP-1 수용체 작용제를 포함하는 약제학적 조합물.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드, 청구항 45의 약제학적 조성물 또는 청구항 46의 약제학적 조합물을 포함하는, 삼투성 전달 장치.
청구항 47에 있어서,
내부 및 외부 표면 및 제1 및 제2 개방 말단을 포함하는 불투과성 저장소;
상기 저장소의 제1 개방 말단과 밀봉 관계에 있는 반투과성 막;
상기 저장소 내 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진;
삼투성 엔진에 인접한 피스톤으로서, 상기 피스톤이 저장소의 내부 표면과 이동가능한 밀봉을 형성하고, 상기 피스톤이 상기 저장소를 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하고, 상기 제1 챔버가 삼투성 엔진을 포함하는, 피스톤;
현탁액 제제로서, 상기 제2 챔버가 현탁액 제제를 포함하고, 상기 현탁액 제제가 유동성이고 단리된 폴리펩티드를 포함하는, 현탁액 제제; 및
상기 현탁액 제제에 인접하고, 저장소의 제2 개방 말단에 삽입된 확산 조절기를 포함하는 삼투성 전달 장치.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 청구항 45의 약제학적 조성물, 청구항 46의 약제학적 조합물 또는 청구항 47 또는 48의 삼투성 전달 장치를 인간 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체의 비만을 치료하거나, 인간 대상체에 체중 감량을 제공하거나, 인간 대상체에서 식욕을 억제하는 방법.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 청구항 45의 약제학적 조성물, 청구항 46의 약제학적 조합물 또는 청구항 47 또는 48의 삼투성 전달 장치를 인간 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체의 당뇨병을 치료하는 방법.
청구항 50에 있어서, 당뇨병이 1형 당뇨병인, 방법.
청구항 50에 있어서, 당뇨병이 2형 당뇨병인, 방법.
청구항 1 내지 44 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 청구항 45의 약제학적 조성물, 청구항 46의 약제학적 조합물 또는 청구항 47 또는 48의 삼투성 전달 장치를 인간 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체의 비알콜성 지방간 질환 (NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법.