KR20230022582A - 오죽 잎 및 우엉씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
오죽 잎 및 우엉씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 오죽 잎(PHYLLOSTACHYS NIGRA LEAF EXTRACT) 및 우엉 씨(ARCTIUM LAPPA SEED EXTRACT)의 혼합 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부 탄력 개선효과가 우수한 피부 보습용 화장료 조성물을 제공한다.
Description
본 발명은 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 유효 성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 포함하는 피부 노화 개선 효과를 갖는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
화장료 사용의 목적은 아름답고 건강한 피부를 유지하는 것이며, 나이가 들면서 생기는 피부의 노화를 지연시키는 데 있다. 일반적으로 노화는 자유라디칼(free radical)에 의한 생체물질의 산화적 손상에 기인한다. 즉, 과산화수소, 슈퍼옥사이드 라디칼, 일중항산소, 하이드록시 레디칼 등의 활성산소는 세포막을 구성하는 지질을 과산화시켜 세포막을 파괴하고 단백질을 산화, 헥산을 공격하여 산화적 손상을 일으켜 결국 세포를 죽게 한다. 노화로 인해 가장 크게 나타나는 피부 특성은 주름과 탄력저하, 피부의 칙칙함을 들 수 있다.
또한, 사람의 피부는 노화가 진행되면서 다양한 트러블이 일어나며, 피부가 건조해지고, 주름 생성과 탄력 또한 떨어지게 된다. 노화 현상을 사람들에게 나타나는 자연적인 현상이지만, 다양한 방법을 통해 예방하거나 시간을 늦출 수 있으며, 화장품은 이러한 노화 현상을 예방하는데 중점을 두고 있다. 30대가 되면 맑고 투명한 피부에도 잔주름이 생기고 탄력이 떨어지는 현상이 나타난다. 이러한 소비자들의 니즈로 인해 안티에이징 제품 시장이 계속해서 증가하고 있으며, 피부 탄력과 밀접한 관련이 있는 화장품들이 꾸준히 팔리고 있는 실정이다. 이러한 소비자 니즈에 맞춰 각 연구 단체 및 업계에서는 순간적인 주름 은폐 및 장기적인 주름완화, 탄력개선을 목적으로 한 원료 및 천연성분들에 대한 연구를 진행하고 있다.
플라보노이드는 식물에 광범위하게 분포되어 있으며 종류는 4,000여 종으로 매우 다양하며 독성이 낮다. 플라보노이드는 알레르겐, 바이러스 및 발암물질에 대한 반응을 조절할 수 있는 실험적 증거가 있기 때문에 "자연의 생물학적 반응 조절제"로서 불려왔다. 최근 연구 결과에 따르면 플라보노이드 중 일부는 항산화력이 탁월하여 인체 및 동물실험에서 건강을 증진시키는 것으로 보고되고 있으며(Appleton, J.: Evaluating the Bioavailability of Isoquercetin. Nat. Med. J., 2, 1-6 (2010)), 항알레르기 활성, 항염증 활성, 항미생물 활성 및 항암 활성을 나타낸다(Singh JPet al., Protective role of Apigenin on the status of lipid peroxidation and antioxidant defense against hepatocarcinogenesis in Wistar albino rats. Phytomedicine 2004 11:309-314).
또한, 최근 발표된 논문에 따르면 플라보노이드는 활성 산소종(ROS: Reactive Oxygen Species) 유발을 억제시키고 염증 반응에 관여하고 한다고 알려진 사이토카인(Cytokine)으로 알려진 Interleukin-8(IL-8)의 비활성에 영향을 준다고 알려져 있다(Mariusz A. Skiba et al., Central European Journal of Immunology. 2016; 41(3).
한국공개특허 제2014-0103633호는 대나무잎 추출물과 호장근 추출물을 포함하여 항산화 또는 주름 개선 효과를 갖는 화장료 조성물을 개시한다.
이에, 본 발명자들은 이제까지 알려지지 않은 여러 천연물 재료들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 오죽 잎과 우엉 씨를 선정하고 이로부터 추출물을 제조하여 피부 탄력효과를 측정한 결과, 그 효능이 매우 우수하므로 화장품으로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.
이에, 본 발명자들은 여러 천연물들 중에서 오죽 잎 및 우엉 씨를 화장품으로써의 응용가능성을 연구하고 다양한 실험을 실시한 결과, 피부 노화 방지용 및 피부 탄력 개선용 화장품으로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.
본 발명의 목적은 오죽 잎 및 우엉 씨를 포함하여 피부 노화 개선 효과 및 피부 탄력 개선 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 오죽 잎, 우엉 씨의 혼합 추출물의 효능을 극대화하기 위해 초임계, 초음파 및 발효 추출물을 제조하고 정제과정을 거쳐 효능 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
상기한 과제는 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 함유하는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물에 의해 달성된다.
바람직하게는, 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 상기 화장료 조성물의 전체 중량에 대해 0.001 내지 30.0 중량%의 양으로 함유될 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 (a) 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 추출하는 용매 추출법에 의해 추출되는 것을 특징으로 한다.
또한 바람직하게는, 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 1~3:1~3의 혼합 중량비로 함유된 것인, 피부 보습용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 우수한 피부 노화 개선 효과 및 피부 탄력 개선 효과를 나타낸다. 또한, 본 발명에 따른 오죽 잎, 우엉 씨의 혼합 추출물을 화장료로 사용하는 경우 피부 탄력 개선 효과가 우수한 것을 알 수 있다. 본 발명에 따른 오죽 잎 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 온도변화에 대해 변색과 분리 및 침전이 발생하지 않는 우수한 안정성을 갖는다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.
용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, "포함하다" 및 "포함하는"이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.
본 발명은 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물로 피부 노화 개선 효과를 갖는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 오죽(학명: PHYLLOSTACHYS NIGRA)은 벼과에 속하는 상록활엽교목으로 줄기의 색이 검기 때문에 오죽이라 불린다. 높에 2~10m에 달하고 나무껍질이 검은색이며, 잎은 장피침형으로 가지 끝에 5개씩 나고, 길이 6~10cm, 너비 10~15mm이다. 꽃은 6~7월에 피고 영과(穎果: 벼의 열매와 같이 열매의 껍질이 건조하고 씨에 붙어있는 열매)로 가을에 결실한다. 기타 일반적인 특색은 대나무와 같다. 줄기가 첫해에는 녹색이고 솜대와 비슷하지만 2년 째 부터 검은 자색이 짙어져서 검은색으로 된다. 잎은 바소 모양이고 잔톱니가 있으며 어깨털은 5개 내외로써 곧 떨어진다.
우엉(문화어: 우웡, 영어: greater burdock 또는 beggar's buttons)은 국화과에 속하는 두해살이풀이다. 유럽, 중국 북동부, 시베리아 등에 분포하며 현재는 세계 각지에서 재배한다. 곧은 뿌리가 30-60cm 자라고 끝에서 원줄기가 나와 50-150cm 자란다. 잎은 밑에서 무더기로 나오고, 원줄기에서는 어긋나며 심장형이다. 표면은 짙은 녹색이지만 뒷면에 솜 같은 흰털이 밀생한다. 꽃은 7월에 피는데 검은 자줏빛이 돌며, 두화는 가지 끝에 산방상으로 달린다. 총포는 둥글고 포는 침형이며 끝이 갈고리처럼 생긴다. 꽃은 관상화이고 종자는 흑색이며 관모는 갈색이다. 꽃이 진 다음 열매를 맺고 죽는다. 품종으로는 뿌리가 길고 굵은 농야천과 육질이 좋고 단근인 사천 등이 있다. 우엉은 강건하여 병이 거의 없고 내한성이 매우 강하여 토질을 별로 가리지 않는다(위키백과).
오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다. 예를 들어, (a) 용매추출법, (b) 이산화탄소에 의한 감압 및 고온에 의한 초임계 추출법, 또는 (c) 초음파 추출법을 이용하여 추출한다.
본 발명에서 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 다양한 추출용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4 개의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 핵산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 추출 용매를 사용하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 에탄올, 70 %(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70 %(v/v) 에탄올을 사용하여 얻어진 것이다.
한편, 본 발명의 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.
본 발명은 상기 추출물이 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결 건조하여 얻은 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따르면, 상기 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.001 ~ 30.0 중량% 함유되며, 바람직하게는, 0.01 ~ 20 중량% 함유되고, 더욱 바람직하게는 0.1 ~ 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001 중량% 미만인 경우에는 피부 노화 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 노화 개선 효과의 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.
본 발명에 따른 혼합 추출물은 오죽 잎 및 우엉 씨를 1~3:1~3의 혼합 중량비로 포함할 수 있고, 바람직하게는 1:1의 혼합 중량비로 포함할 수 있다.
통상적인 방법으로 제조된 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 화장료 제형에 이용하기 위해 정제과정을 거쳐 불필요한 성분을 제거한 뒤, 효능 효과를 나타내는 화장료 조성물을 포함할 수 있다. 정제 과정은 통상의 어떠한 정제과정도 가능하며, 용해도 차를 이용한 액-액추출법, 침전 및 필터를 이용, 극성도 및 분자량의 크기 등을 이용한 크로마토그래피법 등이 사용될 수 있다. 또한 예를 들면, 오죽 잎, 우엉 씨의 혼합 추출물을 에탄올 수용액(50%, 70% 용액 등)이나 기타수용액에 녹인 뒤, HP-20, sephadex 컬럼이 충진된 컬럼을 이용하여 극성도와 분자량 차를 이용하여 수용성 물질과 유용성 물질을 분리 후 TLC로 유용성 물질을 농축, 동결 건조하여 농축물을 제조할 수도 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제가 함유된 클렌징의 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료는 유연화장수(스킨), 수렴화장수, 영양화장수(로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩 등의 통상의 화장료 형태로 제조될 수 있다.
이하, 제조예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 제조예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 제조예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
제조예 1: 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물
세절하여 음건한 오죽 잎 및 우엉 씨를 각각 60g씩 혼합한 후, 이를 70 %(v/v) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 한외 여과막을 이용하여 염을 제거한 후 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 5.2g을 얻었다. 그 다음, 건조된 오죽 잎, 우엉 씨의 혼합 추출물 파우더를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 2: 오죽 잎 추출물
세절하여 음건한 오죽 잎을 120g 준비한 후 이를 70 %(v/v) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 한외 여과막을 이용하여 염을 제거한 후 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 5.2g을 얻었다. 그 다음, 건조된 오죽 잎 추출물 파우더를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 3: 우엉 씨 추출물
세절하여 음건한 우엉 씨를 120g 준비한 후 이를 70 %(v/v) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 한외 여과막을 이용하여 염을 제거한 후 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 5.2g을 얻었다. 그 다음, 건조된 우엉 씨 추출물 파우더를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 4: 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물
세절하여 음건한 오죽 잎과 우엉 씨를 각각 80g, 40g씩 혼합한 후 이를 70 %(v/v) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 한외 여과막을 이용하여 염을 제거한 후 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 5.2g을 얻었다. 그 다음, 건조된 오죽 잎과 우엉 씨의 혼합 추출물 파우더를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.
제조예 5: 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물
세세절하여 음건한 오죽 잎과 우엉 씨를 각각 40g, 80g씩 혼합한 후 이를 70 %(v/v) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 한외 여과막을 이용하여 염을 제거한 후 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 6.9g을 얻었다. 그 다음, 오죽 잎과 우엉 씨의 혼합 추출물 파우더를 50% 1,3-부틸렌 글리콜에 용해하여 사용하였다.
비교예 1: 녹차 잎 용매 추출물 제조
비교예 1은 플라보노이드의 함량이 높은 것으로 알려진 녹차 잎의 일반 유기용매 추출물을 제조하였다. 1kg의 녹차 잎을 시료를 선별하여 충분히 세척한 뒤 300메시 체를 통과할 수 있도록 하였다. 최종 70%(V/V) 에탄올 수용액이 되도록 에탄올을 첨가, 에탄올 수용액은 최종 시료 중량의 5배를 사용하며 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #2 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 감압농축 후 동결 건조하였다. 이 파우더를 50% 글리세린을 이용하여 2%(v/v)가 되게 녹여 아래 실험에 사용하였다.
비교예 2: 마늘 용매 추출물 제조
비교예 2는 플라보노이드의 함량이 높은 것으로 알려진 마늘의 일반 유기용매 추출물을 제조하였다. 1kg의 마늘 시료를 선별하여 충분히 세척한 뒤 300메시 체를 통과할 수 있도록 하였다. 최종 70%(V/V) 에탄올 수용액이 되도록 에탄올을 첨가, 에탄올 수용액은 최종 시료 중량의 5배를 사용하며 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(whatman) #2 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 감압농축 후 동결 건조하였다. 이 파우더를 50% 글리세린을 이용하여 2%(v/v)가 되게 녹여 아래 실험에 사용하였다.
제형예: 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조
제조예 1 내지 5의 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 각각 포함하는 화장료(제형예 1 내지 5)를 하기 표 1의 조성과 같이 제조하였다. 또한, 효능의 비교를 위해 오죽 잎, 우엉 씨의 혼합 추출물 대신에 보습제로써 녹차 잎 용매 추출물을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1), 마늘 용매 추출물(비교제형예 2), 추출물이나 보습제를 모두 포함하지 않는 화장료 조성물(비교제형예 3)을 하기 표 1에 조성과 같이 제조하였다.
| 성분 (단위:중량%) |
제형예 1 | 제형예 2 | 제형예 3 | 제형예4 | 제형예5 | 비교 제형예 1 |
비교 제형예 2 |
비교 제형예 3 |
| 제조예 1 | 5.0 | - | - | - | - | - | - | - |
| 제조예 2 | - | 5.0 | - | - | - | - | - | - |
| 제조예 3 | - | - | 5.0 | - | - | - | - | - |
| 제조예 4 | - | - | - | 5.0 | - | - | - | - |
| 제조예 5 | - | - | - | - | 5.0 | - | - | - |
| 녹차 | - | - | - | - | - | 5.0 | - | - |
| 마늘 | - | - | - | - | - | - | 5.0 | - |
| EDTA-2Na | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 |
| 세토스테아릴알코올 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
| 글리세릴스테아레이트 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 |
| 마이크로크리스탈린 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 스쿠알란 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 |
| 유동파라핀 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
| 트리옥타노인 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
| 폴리솔베이트 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
| 솔비탄스테아레이트 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 토코페릴아세테이트 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 사이클로메치콘 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
| 향, 방부제 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 | 적량 |
| 정제수 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 | to 100 |
실험예 1: 유효성분 함량 측정
제조예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 2에서 제조된 추출물 대하여 HPLC 분석 기법을 이용하여 플라보노이드 함량을 분석하였으며 그 결과를 아래의 표 2에 나타내었다.
| 구분 | 제조예 1 | 제조예 2 | 제조예 3 | 제조예 4 | 제조예 5 | 비교예1 | 비교예2 |
| 플라보노이드 (Flavonoid) |
3.12 | 2.20 | 2.21 | 2.72 | 2.80 | 2.20 | 2.24 |
제조예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 2의 유효성분 함량 측정 결과, 제조예 1 내지 5의 전반적인 플라보노이드의 함량이 비교예 1 내지 2 에 비하여 높은 것을 확인할 수 있었다. 제조예 1 내지 5를 비교할 때, 제조예 1의 플라보노이드 함량이 높으므로, 각 성분을 1:1의 혼합비로서 혼합하는 것이 가장 바람직한 것을 확인할 수 있었다.
실험예 2: 실시간 RT-PCR 정량
제조예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 비교예 2의 CXCL8 유전자 발현 효과를 평가하였다. 사용된 유전자는 유전자 등록번호(Genebank) NM_000584.3(CXCL8, Homo sapiens C-X-C motif chemokine ligand 8)이다. 시험군으로서 제조예 1 내지 5를 사용하였고 대조군으로는 비교예 1 내지 2의 추출물을 2(v/v) 농도로 첨가하였다.
플라보노이드에 의해 특이적으로 발현이 변화될 것으로 예상한 유전자는 유전자 등록번호(Genebank) NM_000584.3(CXCL8, Homo sapiens C-X-C motif chemokine ligand 8)로서, 제조예 1 내지 5, 비교예 1 내지 2의 추출물의 첨가(2%(w/w)), 비교예 3(아무것도 첨가하지 않은 화장료 조성물)에 따른 발현 변화 정도를 조사 및 정량하기 위해, My IQ 실시간 PCR(My IQ Real-time PCR)(Bio-rad, 미국)을 이용하여 정량적인 실시간 RT-PCR을 실시하였다.
구체적으로, 올리고 dT 프라이머와 Superscript kit(Omniscipt™ kit, Qiagen, Co., 미국)를 이용하여 역전사반응을 수행하여 cDNA를 합성하였다. 상기 cDNA 0.2 ㎕와 물 3.8 ㎕, 센스 프라이머 0.5 ㎕, 안티센스 프라이머 0.5 ㎕, 사이버그린 I 염색 수퍼믹스(Bio-rad, 미국) 5 ㎕를 혼합하여, PCR 튜브에 담아 단계 1: 95℃, 3분; 단계 2(45회 반복): 단계 2-1: 95℃, 10초; 단계 2-2: KIF1A - 57℃, B3GALT4, DHRS9, EMR2, KIAA1199 - 65℃, 45초; 단계 3: 95℃, 1분; 단계 4: 55℃, 1분; 단계 5(반복 80회): 55℃, 10초로 프로그램을 설계한 My IQ 실시간 PCR 기계에서 반응을 수행하였다. PCR 산물을 정량하기 위하여 사이버그린(SYBR Green) I 염색(Bio-rad, 미국)으로 염색하였다. 사이버그린 I 염색은 이중나선 DNA에 결합하는 염색법으로서, PCR 과정 동안 이중나선 DNA가 생성될수록 형광강도(fluroscense intensity)가 증가하게 된다.
먼저, PCR에 이용한 표적 유전자와 내재성(endogenous) 대조군(RPLPO)에 대한 프라이머를 사이버그린 마스터 믹스(Master mix)에 첨가하여 PCR을 실시한 후, 적절한 농도를 선택하는 프라이머 적합화(primer optimization) 과정을 수행하였다. 합성된 cDNA 시료와 하기 표 3에 기재된 각각의 프라이머를 혼합하고, 사이버그린 마스터 믹스를 첨가한 후 PCR를 수행하였고, 정량 소프트웨어(software)를 사용하여 분석하였다.
| 등록번호 | 유전자 약어 | PCR 프라이머 서열 (5'->3') | |
| NM_000584.3 | CXCL8 | 센스 (서열번호1) | ATGACTTCCAAGCTGGCCGT |
| 안티센스 (서열번호2) | GCACTCCTTGGCAAAACTGC | ||
제조예 1 내지 5 및 비교예 1 내지 2의 첨가에 따른 CXCL8 유전자의 발현양을 측정한 결과, 제조예 1 내지 5에 대한 유전자 등록번호(Genebank) NM_000584.3(CXCL8, Homo sapiens C-X-C motif chemokine ligand 8)의 발현량이 비교예 1 내지 2에 비하여 현저히 낮은 것을 확인할 수 있었다(표 4 참조, p<0.5).
| 실험제품 | CXCL8 (Fold Change) | Regulation |
| 제조예 1 | 0.11 | down |
| 제조예 2 | 0.31 | down |
| 제조예 3 | 0.30 | down |
| 제조예 4 | 0.25 | down |
| 제조예 5 | 0.27 | down |
| 비교예 1 | 0.34 | down |
| 비교예 2 | 0.37 | down |
| 비교예 3 | 1.01 | - |
(displayed ≥1.5-fold)
상기의 결과로부터 본 발명의 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 다른 식물의 추출물(비교예 1 내지 2), 비교예 3(아무것도 첨가하지 않은 화장료 조성물)과 비교하여 유전자 CXCL8 발현량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다. 제형예 1 내지 5를 비교할 때, 제형예 1이 유전자 CXCL8 발현량을 가장 많이 감소시키므로, 각 성분을 1:1의 혼합비로서 혼합하는 것이 가장 바람직한 것을 확인할 수 있었다.
실험예 3: 피부탄력 개선 효과의 평가
제형예 1 내지 5 및 비교제형예 1 내지 3의 피부탄력 개선 효과를 다음과 같이 평가하였다. 실험자(20세~35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴에 제형예 1 내지 5 및 비교제형예 1 내지 3의 크림을 각각 1일 2회씩 연속 3개월간 도포하였다.
실험완료 후 피부 탄력 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 실험결과는 하기 표 5에 Cutometer SEM 575의 ΔR8값으로 기재하였는데 R8값은 피부의 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.
| 실험제품 | 피부탄력효과(ΔR8, n=15, p＜0.05) | |
| 사용전 | 사용후 | |
| 제조예 1 | 0.11 | 0.46 |
| 제조예 2 | 0.10 | 0.26 |
| 제조예 3 | 0.10 | 0.27 |
| 제조예 4 | 0.10 | 0.40 |
| 제조예 5 | 0.10 | 0.39 |
| 비교예 2 | 0.12 | 0.28 |
| 비교예 3 | 0.11 | 0.26 |
표 5에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 피부 탄력개선 효과가 가장 우수함을 알 수 있다. 제형예 1 내지 5를 비교할 때, 제형예 1의 효능이 우수하므로, 각 성분을 1:1의 혼합비로서 혼합하는 것이 가장 바람직한 것을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (4)
- 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물을 함유하는 피부 탄력 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 화장료 조성물 총 중량 대비 0.001 내지 30.0 중량%로 함유되는, 피부 보습용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 오죽 잎 및 우엉 씨의 혼합 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4 개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 핵산 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법, (b) 초임계추출법 및 (c) 초음파 추출법로 이루어진 군에서 선택된 방법에 의해 추출된 것인, 피부 탄력 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 혼합 추출물은 오죽 잎 및 우엉 씨가 1~3:1~3의 혼합 중량비로 포함된 것인, 피부 탄력 개선용 화장료 조성물.
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH1072336A (ja) * | 1996-06-28 | 1998-03-17 | Kao Corp | コラーゲンゲル収縮促進剤 |
| KR20090080153A (ko) * | 2008-01-21 | 2009-07-24 | 주식회사 엘지생활건강 | 피부 주름개선 또는 피부 미백용 조성물 |
| KR101736716B1 (ko) * | 2016-12-12 | 2017-05-17 | 박지영 | 식물 추출물을 포함하는 피부 탄력 및 주름 개선용 화장료 조성물 |
-
2021
- 2021-08-09 KR KR1020210104541A patent/KR102583415B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH1072336A (ja) * | 1996-06-28 | 1998-03-17 | Kao Corp | コラーゲンゲル収縮促進剤 |
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| Publication number | Publication date |
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