KR20230017163A - 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 세포 및 이의 용도 - Google Patents
미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 세포 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20230017163A KR20230017163A KR1020227033879A KR20227033879A KR20230017163A KR 20230017163 A KR20230017163 A KR 20230017163A KR 1020227033879 A KR1020227033879 A KR 1020227033879A KR 20227033879 A KR20227033879 A KR 20227033879A KR 20230017163 A KR20230017163 A KR 20230017163A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cells
- mitochondria
- cell
- enriched
- genetically engineered
- Prior art date
Links
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 claims abstract description 372
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 312
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 222
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 82
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 41
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 claims description 128
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 86
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 77
- 108010030844 2-methylcitrate synthase Proteins 0.000 claims description 63
- 108010071536 Citrate (Si)-synthase Proteins 0.000 claims description 63
- 102000006732 Citrate synthase Human genes 0.000 claims description 63
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 51
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 50
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 47
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 43
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 42
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 38
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 35
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 35
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 claims description 25
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 21
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 16
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 16
- 102000006404 Mitochondrial Proteins Human genes 0.000 claims description 13
- 108010058682 Mitochondrial Proteins Proteins 0.000 claims description 13
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 8
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 claims description 7
- 101000685323 Homo sapiens Succinate dehydrogenase [ubiquinone] flavoprotein subunit, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 6
- 102100023155 Succinate dehydrogenase [ubiquinone] flavoprotein subunit, mitochondrial Human genes 0.000 claims description 6
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 claims description 6
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 claims description 5
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 5
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 4
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 claims description 3
- 102100030878 Cytochrome c oxidase subunit 1 Human genes 0.000 claims 1
- 101000919849 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101000605122 Homo sapiens Prostaglandin G/H synthase 1 Proteins 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 12
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 abstract description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 34
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 30
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 28
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 25
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 14
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 14
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 12
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 10
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 10
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 10
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 9
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 9
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 8
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000006870 function Effects 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 6
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 6
- 210000003738 lymphoid progenitor cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 4
- 208000012268 mitochondrial disease Diseases 0.000 description 4
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 208000029578 Muscle disease Diseases 0.000 description 3
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 3
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000008437 mitochondrial biogenesis Effects 0.000 description 3
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 230000009258 tissue cross reactivity Effects 0.000 description 3
- 210000003014 totipotent stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 2
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000020446 Cardiac disease Diseases 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 2
- 108090000365 Cytochrome-c oxidases Proteins 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 101000920686 Homo sapiens Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019547 Placental disease Diseases 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 108010001267 Protein Subunits Proteins 0.000 description 2
- 102000002067 Protein Subunits Human genes 0.000 description 2
- VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N Retinol Palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010012901 Succinate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 102000019259 Succinate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 208000031673 T-Cell Cutaneous Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000004098 cellular respiration Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 201000007241 cutaneous T cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 210000002375 erythropoietic cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 2
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 208000007345 glycogen storage disease Diseases 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 2
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 2
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 2
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005868 ontogenesis Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 230000010627 oxidative phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- YIQPUIGJQJDJOS-UHFFFAOYSA-N plerixafor Chemical compound C=1C=C(CN2CCNCCCNCCNCCC2)C=CC=1CN1CCCNCCNCCCNCC1 YIQPUIGJQJDJOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 208000025638 primary cutaneous T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017497 prostate disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 2
- 108010056030 retronectin Proteins 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- -1 tetramethylrhodamine methyl ester Chemical class 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002008 AIDS-Related Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 1
- 102000013925 CD34 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108050003733 CD34 antigen Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150118155 Cd34 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010007953 Central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 1
- 102000003849 Cytochrome P450 Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 206010061819 Disease recurrence Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101710121304 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000998120 Homo sapiens Interleukin-3 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000932478 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102100033493 Interleukin-3 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 201000005099 Langerhans cell histiocytosis Diseases 0.000 description 1
- 206010025312 Lymphoma AIDS related Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000015494 Mitochondrial Uncoupling Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010050258 Mitochondrial Uncoupling Proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- 201000007224 Myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 102100020718 Receptor-type tyrosine-protein kinase FLT3 Human genes 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 210000000173 T-lymphoid precursor cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003486 adipose tissue brown Anatomy 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003911 antiadherent Substances 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 230000014102 antigen processing and presentation of exogenous peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003445 biliary tract Anatomy 0.000 description 1
- 208000020790 biliary tract neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000028956 calcium-mediated signaling Effects 0.000 description 1
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 1
- 210000001736 capillary Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000017455 cell-cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000027721 electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 238000007824 enzymatic assay Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001476 gene delivery Methods 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 1
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000005060 membrane bound organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010852 mitochondrial transfer Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 201000006462 myelodysplastic/myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000003525 myelopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 208000025934 placenta disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010626 plasma cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960002169 plerixafor Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 235000017924 poor diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 208000016800 primary central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035806 respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 235000019172 retinyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011769 retinyl palmitate Substances 0.000 description 1
- 229940108325 retinyl palmitate Drugs 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011649 selenium Nutrition 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/48—Reproductive organs
- A61K35/54—Ovaries; Ova; Ovules; Embryos; Foetal cells; Germ cells
- A61K35/545—Embryonic stem cells; Pluripotent stem cells; Induced pluripotent stem cells; Uncharacterised stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/02—Coculture with; Conditioned medium produced by embryonic cells
- C12N2502/025—Coculture with; Conditioned medium produced by embryonic cells extra-embryonic cells, e.g. amniotic epithelium, placental cells, Wharton's jelly
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/10041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/10043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
Abstract
본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 세포가 질환 및 장애를 치료하는 데 유용하다는 발견을 기반으로 한다. 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 약제학적 조성물 및 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 사용하는 치료 방법이 개시되어 있다.
Description
관련 출원에 대한 상호-참조
본 출원은 35 U.S.C. §119 하에 2020년 3월 31일자로 출원된 미국 특허 출원 일련번호 제63/003,184호의 우선권의 이익을 주장하며, 전체 내용은 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용된다.
발명의 분야
본 발명은 대체적으로 유전자 조작 세포를 사용하는 약제학적 조성물 및 치료 방법, 및 보다 구체적으로는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 림프구에 관한 것이다.
의학 및 치료 접근법의 엄청난 발전에도 불구하고, 암은 산업화된 국가에서 가장 생명을 위협하는 질환 중 하나로 남아 있다. 표준 치료 전략, 예를 들어, 수술, 화학 요법 및 방사선의 조합은 대부분의 경우 원발성 종양의 치료에 효율적일 수 있지만, 이러한 전략은 종종 전이성 종양을 성공적으로 치료하지 못하고 파종성 종양 세포를 통한 질환의 진행을 예방하지 못한다. 최근, 세포-기반 면역 요법, 특히 T 림프구의 입양 전이는 질환의 전이성 확산을 예방하고, 표준 요법에 불응성인 대상체를 포함하여 말기 질환을 갖는 대상체의 삶의 질을 개선시키는 것을 목표로 암 치료에 대한 매우 잠재적인 대체 양식으로 부상하였다. T-세포 기반 면역요법은 T-세포가 조직에 침투하여 활성화되고 표적 세포를 제거할 수 있는 자연적인 능력을 이용한다. 암 세포에 발현된 항원 표적을 특이적으로 인식하는 유전자 조작 T-세포(예를 들어, T-세포 수용체(TCR) 및 키메라 항원 수용체(CAR)-형질도입 T 세포)는 임상 시험에 이용되었으며 유망한 결과를 달성하였다.
T 세포-기반 요법의 스펙트럼은 자가면역 장애를 포함하도록 추가로 확장되고 있다. 전임상 및 임상 연구의 예비 결과는 자가면역에서, 특히 불리한 자가면역 반응을 조절함에 있어서 CAR T 요법의 적용을 뒷받침한다.
T-세포 수용체(TCR)는 주요 조직적합성 복합체(MHC) 분자에 결합된 펩타이드로서 항원의 단편을 인식하는 역할을 하는 T 세포 또는 T 림프구의 표면에서 발견되는 분자이다. TCR과 항원 펩타이드 사이의 결합은 상대적으로 낮은 친화도를 가지고 퇴화하며: 즉, 많은 TCR이 동일한 항원 펩타이드를 인식하고 많은 항원 펩타이드가 동일한 TCR에 의해 인식된다.
TCR은 2가지 상이한 단백질 사슬로 구성된다. 인간에서, T 세포의 95%에서 TCR은 알파(α) 사슬과 베타(β) 사슬(각각, TRA 및 TRB에 의해 인코딩됨)로 이루어지는 반면, T 세포의 5%에서 TCR은 감마 및 델타(γ/δ) 사슬(각각, TRG 및 TRD에 의해 인코딩됨)로 이루어진다. 이 비율은 개체발생 동안 및 질환 상태(예컨대, 백혈병)에서 변경된다. 또한 종에 따라 상이하다. 4개 유전자좌의 오쏠로그(orthologue)가 다양한 종에서 맵핑되었다.
직경이 0.5 내지 1.0 ㎛의 범위인 막 결합 세포소기관인 미토콘드리아는 세포 에너지를 공급하고 세포의 대사 기능에서 중심적인 역할을 한다. 미토콘드리아는 거의 모든 진핵 세포에서 발견되며 세포 유형에 따라 수와 위치가 다르다. 미토콘드리아는 자체 DNA(mtDNA)와, RNA 및 단백질 합성을 위한 자체 기구를 함유한다. mtDNA는 37개의 유전자만 함유하므로, 포유동물 신체의 대부분의 유전자 산물은 핵 DNA에 의해 인코딩된다.
미토콘드리아의 주요 기능은 전자-수송 사슬 및 산화적-인산화 시스템("호흡 사슬")에 의해 아데노신 트라이포스페이트(ATP)로서 에너지를 생성하는 것이다. 추가적으로, 미토콘드리아는 피루베이트 산화, 크렙스 회로 및 아미노산, 지방산 및 스테로이드 대사와 같은 진핵 세포에서 수많은 필수 작업을 수행한다. 미토콘드리아가 관여하는 추가적인 과정은 열 생산, 칼슘 이온 저장, 칼슘 신호 전달, 세포예정사(아폽토시스) 및 세포 증식을 포함한다.
세포 내부의 ATP 농도는 전형적으로 1 내지 10 mM이다. ATP는 단순당 및 복합당(탄수화물) 또는 지질을 에너지원으로 사용하는 산화환원 반응에 의해 생산될 수 있다. 복합 연료가 ATP로 합성되기 위해서는, 상기 연료가 먼저 더 작고 더 단순한 분자로 분해되어야 한다. 복합 탄수화물은 글루코스와 프럭토스와 같은 단순당으로 가수분해된다. 지방(트라이글리세라이드)은 대사되어 지방산과 글리세롤을 제공한다.
글루코스를 이산화탄소로 산화시키는 전체 과정은 세포 호흡으로 알려져 있으며 글루코스 1개 분자로부터 ATP 약 30개 분자를 생산할 수 있다. ATP는 다수의 별개의 세포 과정에 의해 생산될 수 있다. 진핵 생물에서 에너지를 생성하는 데 사용되는 3가지 주요 경로는 해당과정 및 시트르산 회로/산화적 인산화이며, 이들 모두 세포 호흡과 베타-산화의 구성요소이다. 비광합성 진핵생물에 의한 이러한 ATP 생산의 대부분은 미토콘드리아에서 일어나며, 이는 전형적인 세포 총 부피의 거의 25%를 구성할 수 있다.
숙주 세포 또는 조직으로 미토콘드리아의 전달을 유도하려는 시도가 보고되었다. 대부분의 방법은 주사에 의한 미토콘드리아의 적극적인 전달을 필요로 한다. 리포솜과 같은 비히클 내부에 둘러싸인 미토콘드리아의 전달도 또한 알려져 있다. 미토콘드리아 전달은, 온전한 전체 미토콘드리아가 아니라 mtDNA가 전달되었다는 것만 확립되었지만, 시험관내에서 세포 사이에서 자발적으로 발생할 수 있음이 추가로 밝혀졌다. 엔도사이토시스 또는 내재화에 의한 시험관내 미토콘드리아 전달도 또한 입증되었다.
본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 세포가 질환 및 장애를 치료하는 데 유용하다는 획기적인 발견을 기반으로 한다. 본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 사용하는 치료 방법을 제공한다.
일 실시형태에서, 본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아-풍부화된 것이다.
일 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 T 세포를 생산하는 단계; 및 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산되며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 일 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다.
추가적인 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 T 세포에 도입함으로써 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계, 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 및 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산되며; 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 일 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다.
특정 양태에서, 유전자 조작 T 세포 및 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 CAR-T 세포이다. 또 다른 양태에서, 유전자 조작 T 세포 및 미토콘드리아-풍부화된 T-세포는 TCR-T 세포이다. 다양한 양태에서, 외인성 미토콘드리아는 인간 세포에서 유래된다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 인간 태반, 인간 혈액 세포, 인간 줄기 세포 또는 인간 체세포 유래의 것이다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 배양물에서 성장된 세포이다. 특정 양태에서, 줄기 세포는 유도 만능 줄기 세포, 배아 줄기 세포 또는 만능 세포이다. 또 다른 양태에서, 외인성 인간 미토콘드리아는 동계 또는 동종이계이다. 추가 양태에서, 외인성 미토콘드리아는 자가 조직이다.
일 양태에서, 약제학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체의 체중 ㎏당 적어도 1×105 내지 5×1010개의 미토콘드리아-풍부화된 T 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포 세포를 갖는다. 일부 실시형태에서, 용량 증량이 수행된다.
특정 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포는 미토콘드리아 풍부화 전 T-세포에서의 상응하는 수준에 비해서 증가된 미토콘드리아 DNA 함량; 증가된 시트레이트 신타제(CS) 활성 수준; 증가된 SDHA 및 COX1로부터 선택되는 적어도 하나의 미토콘드리아 단백질의 함량; 증가된 O2 소비율; 증가된 ATP 생산율; 또는 이들의 임의의 조합 중 적어도 하나를 갖는다.
다양한 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 약 16 내지 37℃ 범위의 온도에서 약 0.5 내지 30시간 범위의 시간 동안 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다. 추가적인 양태에서, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 T 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포에서 총 미토콘드리아 함량의 1% 초과를 구성한다.
일 양태에서, 질환 또는 장애는 암이다. 특정 양태에서, 암은 혈액암이다. 또 다른 양태에서, T 세포는 자가 조직 또는 동종이계이다.
추가적인 실시형태에서, 본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아로 풍부화된다.
일 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 T 세포를 생산하는 단계; 및 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산되며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 일부 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 일 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다.
추가적인 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 T 세포에 도입함으로써 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계, 공여자로부터 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 및 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산되며; 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 일 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다.
일 양태에서, 대상체는 인간 대상체이다. 또 다른 양태에서, 질환 또는 장애는 암이다. 특정 양태에서, 암은 혈액암이다. 특정 양태에서, 투여는 정맥내, 복강내, 동맥내, 척추강내, 및 근육내 투여에 의한다. 일 양태에서, 투여는 정맥내 투여에 의한다.
추가적인 양태에서, 치료 방법은 또한 화학요법제, 방사선 또는 다른 항암 요법을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 추가 양태에서, 약제학적 조성물은 화학요법제, 방사선 또는 다른 항암 요법의 투여와 동시에, 병용하여 또는 투여 후에 투여된다. 특정 양태에서, 외인성 미토콘드리아는 인간 세포에서 유래된다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 인간 태반, 인간 혈액 세포, 줄기 세포 또는 체세포 유래의 것이다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 배양물에서 성장된 세포이다. 특정 양태에서, 줄기 세포는 유도 만능 줄기 세포, 배아 줄기 세포 또는 만능 세포이다. 특정 양태에서, 외인성 미토콘드리아는 동종이계 또는 자가 조직이다. 일 양태에서, 외인성 미토콘드리아에 의한 풍부화 후, 미토콘드리아-풍부화된 T 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포에서 총 미토콘드리아 함량의 적어도 1%는 외인성 미토콘드리아를 포함한다. 다양한 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포, 또는 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 약 16 내지 37℃ 범위의 온도에서 0.5 내지 30시간 범위의 시간 동안 T 세포, 또는 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함한다.
도 1a 내지 도 1c는 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포를 나타내는 도면. 도 1a: 세포 활성화 5일 후 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포의 ATP 수준 및 시트레이트 신타제 활성을 나타낸다. 도 1b는 세포 활성화 10일 후 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포의 ATP 수준 및 시트레이트 신타제 활성을 나타낸다. 도 1c는 세포 활성화 5일째 및 10일째에 4.4 mU 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포에서 측정된 외인성 mtDNA의 백분율을 나타낸다.
도 2는 활성화된 T 세포 및 활성화되지 않은 T 세포의 증식 및 활성화 후 CAR-T %를 나타낸다. A1: 7000 g에서 4.4 mU 태반 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포; A2: 400 g에서 4.4 mU 태반 미토콘드리아가 풍부한 CAR-T 세포; UnT: 형질도입되지 않은 풍부화되지 않은 세포; Tr: 미토콘드리아 풍부화 조건을 거치지 않은 형질도입된 세포; Ctrl: 외인성 미토콘드리아를 풍부화 과정에 도입하지 않고 미토콘드리아 풍부화 조건을 거친 형질도입된 세포.
도 2는 활성화된 T 세포 및 활성화되지 않은 T 세포의 증식 및 활성화 후 CAR-T %를 나타낸다. A1: 7000 g에서 4.4 mU 태반 미토콘드리아-풍부화된 CAR-T 세포; A2: 400 g에서 4.4 mU 태반 미토콘드리아가 풍부한 CAR-T 세포; UnT: 형질도입되지 않은 풍부화되지 않은 세포; Tr: 미토콘드리아 풍부화 조건을 거치지 않은 형질도입된 세포; Ctrl: 외인성 미토콘드리아를 풍부화 과정에 도입하지 않고 미토콘드리아 풍부화 조건을 거친 형질도입된 세포.
본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 세포가 질환 및 장애를 치료하는 데 유용하다는 획기적인 발견을 기반으로 한다. 본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 사용하는 치료 방법을 제공한다.
본 조성물 및 방법을 기재하기 전에, 본 발명은 기재된 특정 조성물, 방법, 및 실험 조건으로 제한되지 않음을 이해하여야 하며, 이는 이와 같은 조성물, 방법, 및 조건이 다양할 수 있기 때문이다. 또한 본 명세서에서 사용되는 용어는 단지 특정 실시형태를 기재하기 위한 것이며, 본 발명의 범주가 첨부된 청구범위에서만 제한될 것이기 때문에 제한하는 것으로 의도되지 않음을 이해하여야 한다.
본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수형 표현은 문맥이 명백하게 달리 표시하지 않는 한 복수 대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "방법"에 대한 지칭은 본 개시내용 등을 읽을 때 당업자에게 명백할 본 명세서에 기재된 유형의 하나 이상의 방법, 및/또는 단계를 포함한다.
본 명세서에 언급된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 각각의 개별 간행물, 특허, 또는 특허 출원이 참조에 의해 원용되는 것으로 구체적이고 개별적으로 표시된 것처럼 동일한 정도로 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본 명세서에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 재료가 본 발명의 실시 또는 테스트에 사용될 수 있지만, 수정 및 변형이 본 개시내용의 사상 및 범주 내에 포함된다는 것이 이해될 것이다. 이제 바람직한 방법 및 재료를 기재한다.
본 발명은 암의 면역요법을 위한 약제학적 조성물 및 이의 용도를 제공하며, 약제학적 조성물은 생체외에서 외인성 미토콘드리아-풍부화된 비유전적으로 변형된 림프구 및 유전적으로 변형된 림프구(예를 들어, CAR T-세포)를 포함하는 인간 성숙 림프구를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "림프구"는 질환으로부터 신체를 방어하는 데 주요 역할을 하는 백혈구를 지칭하며, T-세포, 자연 살해 세포(NK 세포), B 세포 및 이들의 혼합물을 포함한다. 상기 열거된 면역 세포 유형이 추가 하위세트로 나뉠 수 있다는 것을 당업자는 이해할 것이다. 일부 실시형태에서, 림프구는 성숙 림프구이다. 일부 실시형태에서, 림프구는 비유전적으로 변형된 림프구이다. 다른 실시형태에서, 림프구는 유전적으로 변형된 림프구이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "성숙 림프구"는 중심 림프 조직에서 선택 및 성숙으로 이어지는 발달을 경험한 완전히 분화된 또는 최종적으로 분화된 림프구를 지칭한다. 성숙 후, 림프구는 순환 및 말초 림프 기관(예를 들어, 비장 및 림프절)으로 들어간다. 일부 실시형태에 따르면, 용어 "성숙 림프구"는 림프 선조 세포(progenitor cell) 또는 림프구 전구 세포(precursor cell)를 포함하지 않는다. 다른 실시형태에 따르면, 용어 "성숙 림프구"는 또한 림프구 전구 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "림프구 전구 세포"는 림프구로 분화되기 전에 보통 중간 세포를 구성하는 부분적으로 분화된 단일분화성 세포를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "단일분화성"은 단지 하나의 세포 유형으로만 분화할 수 있는 능력을 갖는 세포를 지칭한다. 전구 세포와 달리, 선조 세포는 다능성이어서, 별개의 세포 유형으로 분화할 수 있는 잠재력을 갖는다.
세포의 성숙도는 마커 발현, 기능, 통합 및 비분열과 같은 분석을 기반으로 하여 평가될 수 있다. 예를 들어, T 세포와 관련하여, 성숙한 T 세포는 CD4 또는 CD8 중 하나의 발현(그러나, 둘 모두는 아님, 즉 이들은 단일 양성임), 및 CD3의 발현을 특징으로 한다. 이와 같은 마커의 발현은 당업계에 알려진 방법에 의해, 예를 들어, FACS 분석 또는 면역조직학적 염색 기법에 의해 결정될 수 있다.
T-세포 수용체(TCR)는 주요 조직적합성 복합체(MHC) 분자에 결합된 펩타이드로서 항원의 단편을 인식하는 역할을 하는 T 세포 또는 T 림프구의 표면에서 발견되는 단백질 복합체이다. TCR과 항원 펩타이드 사이의 결합은 상대적으로 낮은 친화도를 가지고 퇴화한다. TCR은 2가지 상이한 단백질 사슬로 구성된다. 인간에서, T 세포의 95%에서 TCR은 알파(α) 사슬과 베타(β) 사슬(각각, TRA 및 TRB에 의해 인코딩됨)로 이루어지는 반면, T 세포의 5%에서 TCR은 감마 및 델타(γ/δ) 사슬(각각, TRG 및 TRD에 의해 인코딩됨)로 이루어진다. 이 비율은 개체발생 동안 및 질환 상태(예컨대, 백혈병)에서 변경된다. γδ T 세포를 활성화시키는 항원 분자는 아직 대부분 알려져 있지 않다. 그러나, γδ T 세포는 MHC-제한이 없으며 APC의 MHC 분자에 의해 제시되는 펩타이드를 필요로 하기 보다는 전체 단백질을 인식할 수 있는 것으로 보인다. Vγ9 및 Vδ2 유전자 단편을 사용하는 인간 γδ T 세포는 말초 혈액에서 주요 γδ T 세포 집단을 구성한다.
본 발명은 부분적으로 T-림프구가 외인성 미토콘드리아로 풍부해지는 것을 수용하고, 외인성 미토콘드리아로 림프구를 풍부화시키는 것이 미토콘드리아 함량, 세포 생존, 지방산 산화(FAO) 및 ATP 생산을 증가시킬 수 있다는 발견을 기반으로 한다. 어떠한 이론이나 메커니즘에 구속되지 않으면서, 외인성 미토콘드리아와 함께 림프구를 공동-인큐베이션하는 것이 온전한 미토콘드리아의 림프구로의 전이를 촉진시킨다고 가정한다. 미토콘드리아 풍부화에 의해 림프구의 미토콘드리아 기능성을 개선시키는 것이 이식 후 림프구의 생체내 기능성을 개선시켜 세포-기반 면역요법을 향상시킬 수 있다고 추가로 가정한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "세포-기반 면역요법"은 유전적으로 변형된 또는 비유전적으로 변형된 면역 세포, 예를 들어, T-세포를 대상체에게 적용하는 것을 포함하는 요법에 관한 것이다. 이러한 치료적 접근법은 광범위한 암 질환뿐만 아니라, 감염성 질환 및 자가면역 장애를 치료하는 데 사용될 수 있다.
본 발명은 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하며, 여기서 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아-풍부화된 것이다. 본 발명은 또한 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 이를 필요로 하는 대상체의 치료 방법을 제공하며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아-풍부화된 것이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "약제학적 조성물"은 활성 성분, 및 선택적으로 약제학적으로 허용 가능한 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제형을 지칭한다. 용어 "활성 성분"은 "유효 성분"을 호환 가능하게 지칭할 수 있으며, 투여 시 필요로 하는 효과를 유도할 수 있는 임의의 작용제를 지칭하는 것을 의미한다. 활성 성분의 예는 화학적 화합물, 약물, 치료제, 소분자 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
"약제학적으로 허용 가능한"이란, 담체, 희석제 또는 부형제가 제형의 다른 성분과 상용성이고 이의 수용자 또는 제형의 활성 성분의 활성에 유해하지 않아야 함을 의미한다. 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 안정화제는 당업계, 예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)]에 잘 알려져 있다. 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 또는 안정화제는 이용되는 투약량 및 농도에서 수용자에게 무독성이며, 완충제, 예컨대, 인산염, 시트르산염, 및 기타 유기산; 아스코브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 방부제(예컨대, 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤잘코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 알킬 파라벤, 예컨대, 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩타이드; 단백질, 예컨대, 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대, 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대, 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 라이신; 단당류, 이당류, 및 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 포함한 기타 탄수화물; 킬레이트제, 예컨대, EDTA; 당류, 예컨대, 수크로스, 만니톨, 트레할로스 또는 솔비톨; 염-형성 반대 이온, 예컨대, 나트륨; 금속 착물(예를 들어, Zn-단백질 착물); 및/또는 비이온성 계면활성제, 예컨대, TWEEN™, PLURONICS™ 또는 폴리에틸렌 글라이콜(PEG)을 포함할 수 있다. 담체의 예는 리포솜, 나노입자, 연고, 미셀, 마이크로스피어, 마이크로입자, 크림, 에멀션, 및 겔을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 부형제의 예는 부착 방지제, 예컨대, 마그네슘 스테아레이트, 결합제, 예컨대, 당류 및 이의 유도체(수크로스, 락토스, 전분, 셀룰로스, 당 알코올 등), 젤라틴 및 합성 중합체와 같은 단백질, 윤활제, 예컨대, 활석 및 실리카, 및 방부제, 예컨대, 항산화제, 비타민 A, 비타민 E, 비타민 C, 레티닐 팔미테이트, 셀레늄, 시스테인, 메티오닌, 시트르산, 황산나트륨 및 파라벤을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 희석제의 예는 물, 알코올, 식염수, 글리콜, 광유 및 다이메틸 설폭사이드(DMSO)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
용어 "치료"는 본 명세서에서 용어 "치료적 방법"과 호환 가능하게 사용되며, 1) 진단된 병리학적 병태 또는 장애의 증상의 치유, 늦춤, 완화, 및/또는 진단된 병리학적 병태 또는 장애의 진행 중단, 및 2) 예방/방지 조치 둘 모두를 지칭한다. 치료를 필요로 하는 사람은 이미 특정 의학적 장애를 갖는 개체뿐만 아니라, 궁극적으로 장애를 얻을 수 있는 개체(즉, 예방 조치를 필요로 하는 개체)를 포함할 수 있다.
용어 "치료적 유효량", "유효 용량", "치료적 유효 용량", "유효량" 등은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상의가 추구하는 조직, 시스템, 동물 또는 인간의 생물학적 또는 의학적 반응을 이끌어 낼 대상 화합물의 양을 지칭한다. 유효량은 본 명세서에 기재된 바와 같이 결정될 수 있다.
용어 "~의 투여" 및/또는 "투여하는"은 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료적 유효량의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 의미하는 것으로 이해되어야 한다. 투여 경로는 경장, 국소 또는 비경구일 수 있다. 이와 같이, 투여 경로는 정맥내, 복강내, 동맥내, 척추강내, 및 근육내 투여를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 어구 "비경구 투여" 및 "비경구로 투여되는"은 경장 및 국소 투여 이외의 투여 방식을 의미한다. 약제학적 조성물은 투여 방법에 따라 다양한 단위 투약 형태로 투여될 수 있다. 적합한 단위 투약 형태는 캡슐, 주사제, 이식 가능한 지속 방출 제형, 및 지질 복합체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.
특정 양태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 T 세포를 생산하는 단계; 및 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계의 방법에 의해 생산되며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 특정 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시키는 것을 포함한다.
또 다른 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 조혈모세포를 수득하는 단계; 공여자로부터 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아가 조혈모세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 미토콘드리아-풍부화된 조혈모세포를 생산하는 단계; 미토콘드리아-풍부화된 조혈모세포를 미토콘드리아-풍부화된 T 세포로 분화시키는 단계; 및 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계의 방법에 의해 생산되며, 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 외인성 미토콘드리아 함량은 조혈모세포의의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아가 조혈모세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 조혈모세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 조혈모세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시키는 것이다.
추가 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계; 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 T 세포에 도입함으로써 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계, 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계의 방법에 의해 생산되며; 여기서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 특정 양태에서, 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비로 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시키는 것을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 용어 "미토콘드리아 함량"은 기능성 및 비기능성 미토콘드리아 함량을 지칭한다. 일부 실시형태에 따르면, 용어 "미토콘드리아 함량"은 기능성 미토콘드리아 함량을 지칭한다.
용어 "T 세포" 및 "T 림프구"는 본 명세서에서 호환 가능하게 사용된다. T 세포는 다양한 면역-관련 기능을 제공함으로써 면역 반응을 제어하고 형성하는 데 중요한 역할을 하는 특정 유형의 림프구이다. T 세포는 세포 표면에 T-세포 수용체(TCR)의 존재에 의해 다른 림프구와 구별될 수 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "T 세포"는 세포독성 T 세포, T 헬퍼 세포, 조절 T 세포 및 자연 살해 T 세포(NKT)를 포함한다. 일부 실시형태에 따르면, T 세포는 T 세포 전구체이다. 다른 실시형태에 따르면, T 세포는 성숙한 T 세포이다. 일부 실시형태에 따르면, T 세포는 완전히 분화된 T 세포이다. 본 발명의 방법에서, 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 수득된 T 세포는 외인성 미토콘드리아가 풍부화되기 전에 적극적으로 변경되거나 변형되지 않는다(예를 들어, mtDNA 또는 미토콘드리아 기능의 감소). 보다 구체적으로, T 세포의 미토콘드리아 기능 및/또는 미토콘드리아 DNA는 외인성 미토콘드리아와 접촉하기 전에 적극적으로 변경되거나 변형되지 않는다.
일부 실시형태에 따르면, T 세포는 유전자 조작 T 세포이다. 추가 실시형태에 따르면, 유전자 조작 T 세포는 T-세포 수용체(TCR)-형질도입 T 세포 및 키메라 항원 수용체(CAR)-형질도입 T 세포로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 특정 실시형태에 따르면, 유전자 조작 T 세포는 CAR-T 세포이다.
일부 실시형태에서, 유전자 조작 T 세포는 대상체에 대해 자가 조직이다. 일부 실시형태에서, 유전자 조작 T 세포는 대상체에 대해 동종이계이다. 특정 실시형태에서, 동종이계 T 세포는 대상체와 적어도 부분적으로 HLA-일치되는 공여자로부터 수득된다. 특정 실시형태에서, 유전자 조작 T 세포가 대상체에 대해 동종이계일 때, 상기 기재된 방법은 대상체와 미토콘드리아-풍부화된 인간 줄기 세포 사이의 유해한 면역원성 반응을 예방, 지연, 최소화하거나 없애는 작용제를 대상체에게 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 특정 실시형태에서, 유해한 면역원성 반응은 이식편대숙주질환(GvHD)이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "T 세포는 대상체에 대해 자가 조직이다"는 대상체 자신의 세포인 것을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "T 세포는 대상체에 대해 동종이계이다"는 상이한 공여자 개체 유래의 세포를 지칭한다.
용어 "CAR-형질도입 T 세포" 및 용어 "CAR-T 세포"는 본 명세서에서 호환 가능하게 사용되며, 특정 항원을 표적화하는 키메라 항원 수용체(CAR)를 발현하도록 유전적으로 변형된 T 세포를 지칭한다. 특정 실시형태에 따르면, 항원은 암 세포의 표면 상에 존재한다. 일부 실시형태에 따르면, 암 세포는 혈액암 세포이다. 일부 실시형태에 따르면, CAR-T 세포는 CD19, CD30, CD33, CD123, FLT3 및 BCMA로부터 선택되지만 이에 제한되지 않는 항원을 표적화하는 CAR을 발현한다.
당업자에게 알려진 바와 같이, CAR-T 세포는 대상체로부터 단리되고 렌티바이러스 또는 레트로바이러스 벡터 또는 비-바이러스 유전자 전달 시스템을 사용하여 생체외 유전자 조작을 거쳐 특정 종양 표적에 특이적인 조작된 CAR을 발현한다. 그 다음 이러한 재프로그래밍된 CAR-T 세포는 확장되고, 필요한 경우 선택되며, 면역억제 예비 요법을 받은 후 대상체에 주입된다. 본 발명의 원리에 따르면, 단리된 T 세포의 생체외 유전자 조작은 미토콘드리아 풍부화 과정 전 또는 후에 수행될 수 있다.
이식 후, CAR-T 세포는 항원 결합을 겪고 말초 혈액에서 증폭되며, 여기에서 종양 부위로 이동하고 상응하는 항원을 발현하는 종양 세포를 확인하고 살해한다. 이는 CAR-T 세포의 광범위한 증식과 종양 항원의 방출을 촉발할 수 있으며, 이는 대상체의 면역계를 활성화시켜 비-CAR-T 면역 세포를 보충하여, 에피토프 확산으로부터 교차-프라이밍으로 알려진 과정으로 추가 항종양 반응을 유발할 수 있다.
이식 후 CAR-T 세포의 수가 검출 불가능한 수준으로 떨어지면, 질환 재발이 빈번하게 관찰된다. 이제 외인성 미토콘드리아로 CAR-T 세포를 풍부화시키면 생체내에서 CAR-T 세포의 생존과 활성을 향상시켜 세포의 치료 효과를 확장하고 증폭할 수 있다고 제안된다.
용어 "TCR-형질도입 T 세포" 및 용어 "TCR-T 세포"는 본 명세서에서 호환 가능하게 사용되며 T-세포 수용체(TCR)를 발현하도록 유전적으로 변형된 T 세포를 지칭한다. 표면에 발현되는 단백질을 인식하는 CAR-T 세포와 달리, T 세포 수용체(TCR)는 세포 내부에 있는 종양-특이적 단백질을 인식할 수 있다. 종양-특이적 단백질이 단편으로 분해되면, 주요 조직적합성 복합체, 또는 MHC라고 하는 또 다른 단백질과 함께 세포 표면에 나타난다. TCR은 종양-특이적 단백질 단편/MHC 조합물을 인식하도록 조작된다.
일부 실시형태에 따르면, 유전자 조작 T 세포는 포유동물 대상체, 바람직하게는 인간 대상체에서 유래된다.
일부 실시형태에 따르면, 본 발명의 T 세포는 상응하는 T 세포와 비교하여 더 낮은 미토콘드리아 막 전위를 갖는 T 세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포"는 유전자 조작되고(즉, TCR 또는 CAR을 인코딩하는 핵산이 세포 내로 도입됨) 외인성 미토콘드리아가 삽입된 T 세포를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "미토콘드리아-풍부화된 T 세포"는 외인성 미토콘드리아가 삽입된 T 세포를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "유전자 조작 T 세포"는 유전자 조작된(즉, TCR 또는 CAR을 인코딩하는 핵산이 세포 내로 도입됨) T 세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "미토콘드리아-풍부화된 조혈모세포"는 외인성 미토콘드리아가 삽입된 조혈모세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "줄기 세포"는 일반적으로 임의의 포유동물 줄기 세포를 지칭한다. 줄기 세포는 다른 유형의 세포로 분화할 수 있고 분열하여 동일한 유형의 줄기 세포를 더 많이 생산할 수 있는 미분화 세포이다. 줄기 세포는 전능성(totipotent) 또는 만능성일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "인간 줄기 세포"는 일반적으로 인간에서 자연적으로 발견되는 모든 줄기 세포, 및 생체외에서 생산 또는 유래된 모든 줄기 세포를 지칭하며, 인간과 양립 가능하다. "선조 세포"는 줄기 세포와 마찬가지로 특정 유형의 세포로 분화하는 경향이 있지만, 이미 줄기 세포보다 더 특이적이며 "표적" 세포로 분화하도록 강요된다. 줄기 세포와 선조 세포 간의 가장 중요한 차이점은 줄기 세포는 무한정 복제할 수 있는 반면, 선조 세포는 제한된 횟수만 분열할 수 있다는 것이다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "인간 줄기 세포"는 "선조 세포" 및 "완전히 분화되지 않은 줄기 세포"를 추가로 포함한다.
특정 실시형태에서, 줄기 세포는 만능 줄기 세포(PSC)이다. 다른 실시형태에서, PSC는 비-배아 줄기 세포이다. 일부 실시형태에 따르면, 배아 줄기 세포는 본 발명의 범주에서 명시적으로 제외된다. 일부 실시형태에서, 줄기 세포는 유도 PSC(iPSC)이다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 배아 줄기 세포이다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 골수 세포에서 유래된다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 CD34+ 세포이다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 중간엽 줄기 세포이다. 다른 실시형태에서, 줄기 세포는 지방 조직에서 유래된다. 또 다른 실시형태에서, 줄기 세포는 혈액에서 유래된다. 추가 실시형태에서, 줄기 세포는 제대혈에서 유래된다. 추가 실시형태에서 줄기 세포는 구강 점막에서 유래된다. 특정 실시형태에서, 장애의 질환으로 고통받는 대상체 또는 건강한 대상체로부터 수득된 줄기 세포는 골수 세포 또는 골수-유래 줄기 세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "만능 줄기 세포(PSC)"는 무한정 증식할 수 있을 뿐만 아니라, 체내에서 복수의 세포 유형을 생성할 수 있는 세포를 지칭한다. 전능 줄기 세포는 신체의 다른 모든 세포 유형을 생성할 수 있는 세포이다. 배아 줄기 세포(ESC)는 전능 줄기 세포이고 유도 만능 줄기 세포(iPSC)는 만능줄기 세포이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "유도 만능 줄기 세포(iPSC)"는 인간 성인 체세포로부터 생성될 수 있는 만능 줄기 세포의 유형을 지칭한다. 본 명세서에서 iPSC가 생성될 수 있는 체세포의 일부 비제한적인 예는 섬유아세포, 내피 세포, 모세혈관 세포, 각질형성세포, 골수 세포 상피 세포를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "배아 줄기 세포(ESC)"는 배반포의 내부 세포괴에서 유래된 전능 줄기 세포의 종류를 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "골수 세포"는 일반적으로 인간의 골수에서 자연적으로 발견되는 모든 인간 세포, 및 인간의 골수에서 자연적으로 발견되는 모든 세포 집단을 지칭한다. 용어 "골수 줄기 세포" 및 "골수-유래 줄기 세포"는 골수에서 유래한 줄기 세포 집단을 지칭한다.
일부 실시형태에서, 자가 조직 또는 동종이계 인간 줄기 세포는 만능 줄기 세포(PSC) 또는 유도 만능 줄기 세포(iPSC)이다. 추가 실시형태에서, 자가 조직 또는 동종이계 인간 줄기 세포는 중간엽 줄기 세포이다.
여러 실시형태에 따르면, 인간 줄기 세포는 지방 조직, 구강 점막, 혈액, 제대혈 또는 골수에서 유래된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 특정 실시형태에서, 인간 줄기 세포는 골수에서 유래된다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 골수조혈 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "골수조혈 세포"는 골수혈구형성, 예를 들어, 골수의 생산 및 골수에서 발생하는 모든 세포, 즉 모든 혈액 세포의 생산에 관여하는 세포를 지칭한다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 적혈구조혈 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "적혈구조혈 세포"는 적혈구형성, 예를 들어, 적혈구(red blood cell, erythrocyte)의 생산에 관여하는 세포를 지칭한다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 다능성 조혈모세포(HSC)를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "다능성 조혈모세포" 또는 "혈구모세포"는 조혈 과정을 통해 다른 모든 혈액 세포를 생성하는 줄기 세포를 지칭한다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 공통 골수 선조 세포, 공통 림프 선조 세포, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 중간엽 줄기 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "공통 골수 선조체"는 골수 세포를 생성하는 세포를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "공통 림프 선조체"는 림프구를 생성하는 세포를 지칭한다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 거핵구, 적혈구, 비만 세포, 근아세포, 호염기구, 호중구, 호산구, 단핵구, 대식세포, 자연 살해(NK) 세포, 소림프구, T 림프구, B 림프구, 형질 세포, 망상 세포, 또는 이들의 임의의 조합을 추가로 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 중간엽 줄기 세포를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "중간엽 줄기 세포"는 조골세포, 연골세포, 근세포 및 지방세포를 포함하는 다양한 세포 유형으로 분화할 수 있는 다능성 기질 세포를 지칭한다.
특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 골수조혈 세포를 포함한다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 적혈구조혈 세포로 이루어진다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 다능성 조혈모세포(HSC)를 포함한다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 공통 골수 선조 세포, 공통 림프 선조 세포, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 거핵구, 적혈구, 비만 세포, 근아세포, 호염기구, 호중구, 호산구, 단핵구, 대식세포, 자연 살해(NK) 세포, 소림프구, T 림프구, B 림프구, 형질 세포, 망상 세포, 또는 이들의 임의의 조합을 포함한다. 특정 실시형태에서, 골수 유래 줄기 세포는 중간엽 줄기 세포로 이루어진다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 말초 혈액으로부터 수득된 복수의 인간 골수 줄기 세포를 포함한다.
조혈모세포(HSC)는 다른 혈액 세포를 생성하는 줄기 세포이다. 이 과정을 조혈이라고 한다. 조혈모세포는 골수 및 림프라고 하는 계통에서 다양한 유형의 혈액 세포를 생성한다. 골수 및 림프 계통은 둘 모두 수지상 세포 형성에 관여한다. 골수 세포는 단핵구, 대식세포, 호중구, 호염기구, 호산구, 적혈구, 및 거핵구 내지 혈소판을 포함한다. 림프구 세포는 T 세포, B 세포, 및 자연 살해 세포를 포함한다.
CD34 항원으로도 알려진 조혈 선조 세포 항원 CD34는 인간에서 CD34 유전자에 의해 인코딩되는 단백질이다. CD34는 세포 표면 당단백질의 분화 클러스터이며 세포-세포 접착 인자로 기능한다. 특정 실시형태에서, 골수 줄기 세포는 골수 선조 세포 항원 CD34를 발현한다(CD34+임). 특정 실시형태에서, 골수 줄기 세포는 CD34를 발현하지 않는다. 특정 실시형태에서, 골수 줄기 세포는 그의 외막 상에 골수 선조 세포 항원 CD34를 제시한다. 특정 실시형태에서, CD34+ 세포는 제대혈 유래의 것이다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "CD34+ 세포"는 기원에 관계없이 CD34 양성인 것을 특징으로 하는 조혈모세포를 지칭한다. 특정 실시형태에서, CD34+ 세포는 골수, 혈액에 동원된 골수 세포로부터 수득되거나, 제대혈로부터 수득된다.
특정 실시형태에서, 조혈모세포를 포함하는 줄기 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체의 말초 혈액으로부터 수득된다. 특정 실시형태에서, 줄기 세포는 건강한 사람의 말초 혈액으로부터 수득된다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "말초 혈액"은 혈액 시스템에서 순환하는 혈액을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "자가 조직 세포" 또는 "자가 조직인 세포"는 대상체 자신의 세포인 것을 지칭한다. 용어 "자가 조직 미토콘드리아"는 대상체 자신의 세포 또는 모계 관련 세포로부터 수득된 미토콘드리아를 지칭한다. 용어 "동종이계 세포" 또는 "동종이계 미토콘드리아"는 상이한 공여자 개체 유래의 세포 또는 미토콘드리아를 지칭한다.
본 명세서 및 청구범위에서 사용되는 바와 같이 용어 "동계"는 거부 없이 개체 간에 이식을 허용하기에 충분한 유전적으로 동일한 것 또는 유전적으로 거의 동일한 것을 지칭한다. 미토콘드리아의 맥락에서 용어 "동계"는 동일한 모계 혈통을 의미하는 용어 "자가 조직 미토콘드리아"와 호환 가능하게 사용될 수 있다. 동종이계 미토콘드리아-풍부화된 세포는 외인성 미토콘드리아와 내인성 미토콘드리아가 실질적으로 유전적으로 상이한 반면, 동종 미토콘드리아-풍부화된 세포는 외인성 미토콘드리아가 모계의 유전적으로 관련된 세포에서 유래되므로, 외인성 미토콘드리아와 내인성 미토콘드리아가 유전적으로 동일하거나 거의 동일하다는 것을 의미한다.
용어 "질환" 및 "장애"는 정상으로 간주되지 않거나 생리학적 상태와 상이한 임의의 고통을 지칭하는 것을 의미한다. 질환 및 장애는 사실상 체내 임의의 기관, 조직, 또는 기능에 영향을 미칠 수 있다. 질환 및 병태의 비제한적인 예는 암, 근육 질환 및 장애, 글리코겐-축적 질환 및 장애, 혈관 내피 장애 또는 질환, 뇌 장애 또는 뇌 질환, 태반 장애 또는 태반 질환, 흉선 장애 또는 흉선 질환, 자가면역 질환, 신장 질환 또는 장애, 췌장 장애 또는 췌장 질환, 전립선 장애 또는 전립선 질환, 신장 장애 또는 신장 질환, 혈액 장애 또는 혈액 질환, 심장 질환 또는 심장 장애, 피부 장애 또는 피부 질환, 면역 및 염증성 질환 및 장애, 뼈 질환 또는 뼈 장애, 위장 질환 또는 위장 장애, 및 눈 질환 또는 눈 장애를 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "질환 또는 장애로 고통받는 대상체" 또는 "질환 또는 장애를 갖는 대상체"는 특정 병태에 의해 유발된 쇠약 효과를 경험하는 인간 대상체를 지칭한다. 장애는 암, 연령 관련 장애, 신장 질환, 췌장 질환, 간 질환, 근육 장애, 뇌 질환, 1차 미토콘드리아 질환 또는 2차 미토콘드리아 질환뿐만 아니라, 기타 질환 또는 장애를 지칭할 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "공여자"는 외인성 세포 또는 미토콘드리아를 제공하는 공여자를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 공여자는 질환 또는 장애를 앓지 않거나 대상체가 고통받는 동일한 장애의 질환을 앓고 있지 않다. 특정 실시형태에서, 공여자는 대상체이고 세포 및/또는 미토콘드리아는 자가 조직이다.
미토콘드리아와 관련하여 용어 "외인성" 또는 "분리된 외인성"은 수용 세포 외부에 있는 공급원 유래의 미토콘드리아를 지칭한다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 수용 세포의 공여자와 상이한 공여자 세포에서 유래되거나 이로부터 단리된다. 일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 수용 세포와 동일한 대상체 유래의 공여자 세포에서 유래되거나 이로부터 단리된다. 예를 들어, 외인성 미토콘드리아는 공여자 세포로부터 정제, 단리 또는 수득된 후 공여자 세포와 동일한 대상체 또는 상이한 공여자로부터 수용 세포로 도입되어, 외인성 미토콘드리아를 각각 자가 조직 및 동종이계로 만들 수 있다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 전체 미토콘드리아이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 미토콘드리아의 맥락에서 용어 "단리된" 및 "부분적으로 정제된"은 다른 세포 구성요소로부터 정제되거나 적어도 부분적으로 정제된 외인성 미토콘드리아를 포함한다. 외인성의 단리되거나 부분적으로 정제된 미토콘드리아에서 미토콘드리아 단백질의 총량은 샘플 내의 세포 단백질 총량의 10% 내지 90%이다.
특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 세포에서 총 미토콘드리아 함량의 적어도 1%를 구성한다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 세포에서 총 미토콘드리아 함량의 적어도 3%를 구성한다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에서 총 미토콘드리아 함량의 적어도 10%를 구성한다. 일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에서 총 미토콘드리아 함량의 적어도 약 1%, 3%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25% 또는 30%를 구성한다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아에서 미토콘드리아 단백질의 총량은 세포 단백질 총량의 10% 내지 80%, 20 내지 80%, 40 내지 70%, 20 내지 40%, 또는 20 내지 30%이다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아에서 미토콘드리아 단백질의 총량은 샘플 내의 세포 단백질 총량의 10% 내지 80%이다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아에서 미토콘드리아 단백질의 총량은 미토콘드리아와 기타 세포내 분획의 합한 중량의 10% 내지 80%이다. 다른 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아에서 미토콘드리아 단백질의 총량은 미토콘드리아와 다른 세포내 분획의 합한 중량의 80% 초과이다.
특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 인간 세포 또는 인간 조직으로부터 수득된다. 특정 실시형태에서, 세포는 태반, 배양물에서 성장된 태반 세포, 또는 혈액 세포로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시형태에서, 미토콘드리아는 인간 줄기 세포로부터 수득된다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 인간 체세포이다. 일부 실시형태에서, 인간 세포는 배양물에서 성장된 세포이다.
특정 실시형태에서, 본 발명에 의해 제공되는 방법 및 약제학적 조성물은 미토콘드리아 생합성을 촉진시키는 작용제를 미토콘드리아 공여자에게 투여하는 단계를 추가로 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "미토콘드리아 생합성"은 미토콘드리아의 성장 및 분열을 지칭한다. 특정 실시형태에서, 미토콘드리아 생합성을 촉진시키는 작용제는 에리스로포이에틴(EPO) 또는 이의 염이다. 특정 실시형태에서, 작용제는 재조합 인간 에리스로포이에틴 및 단리된 인간 에리스로포이에틴으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
미토콘드리아와 관련하여 용어 "내인성"은 세포에 의해 생성/발현/생산되고 외부 공급원으로부터 세포 내로 도입되지 않는 미토콘드리아를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 내인성 미토콘드리아는 세포의 게놈에 의해 인코딩되는 단백질 및/또는 기타 분자를 함유한다. 일부 실시형태에서, 용어 "내인성 미토콘드리아"는 용어 "숙주 미토콘드리아"와 동등하다.
본 발명의 원리에 따르면, 외인성 인간 미토콘드리아가 세포 내로 도입되어 외인성 미토콘드리아로 이들 세포를 풍부화시킨다. 이와 같은 풍부화는 세포의 미토콘드리아 함량을 변화시킨다는 것을 이해하여야 하며: 미경험 인간 세포는 실질적으로 하나의 숙주/자가 조직 미토콘드리아 집단을 갖는 반면, 자가 조직 미토콘드리아가 아닌 외인성 미토콘드리아-풍부화된 세포는 실질적으로 두 미토콘드리아 집단, 즉 숙주/자가 조직/내인성 미토콘드리아의 제1 집단 및 도입된 미토콘드리아(즉, 외인성 미토콘드리아)의 다른 집단을 갖는다. 따라서, 용어 "풍부화된"은 외인성 미토콘드리아를 수용/통합한 후 세포의 상태를 지칭한다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 자가 조직 미토콘드리아이다. 외인성 미토콘드리아가 자가 조직 미토콘드리아인 경우 단 하나의 미토콘드리아 집단이 있고 풍부화는 총 미토콘드리아 함량을 지칭한다. 두 집단이 여러 측면에서, 예를 들어, 이들 집단의 미토콘드리아 DNA에서 다를 수 있으므로, 미토콘드리아의 두 집단 사이의 수 및/또는 비율을 결정하는 것은 간단하다. 예를 들어, 총 미토콘드리아 함량의 적어도 1%의 외인성 미토콘드리아를 포함하는 인간 세포는 99:1의 비율로 숙주/자가 조직/내인성 미토콘드리아 및 외인성 미토콘드리아를 포함하는 것으로 간주된다. 예를 들어, "총 미토콘드리아의 3%"는 풍부화 후 원래(내인성) 미토콘드리아 함량이 총 미토콘드리아 함량의 97%이고 도입된(외인성) 미토콘드리아가 총 미토콘드리아 함량의 3%임을 의미하며, 이는 (3/97=) 3.1% 풍부화와 동등하다. 또 다른 예에서, "총 미토콘드리아의 33%"는 풍부화 후 원래(내인성) 미토콘드리아 함량이 총 미토콘드리아 함량의 67%이고 도입된(외인성) 미토콘드리아가 총 미토콘드리아 함량의 33%임을 의미하며, 이는 (33/67=) 49.2% 풍부화와 동등하다.
일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아가 세포 내로 도입된 후 외인성 미토콘드리아로부터 내인성 미토콘드리아의 확인/식별은, 예를 들어, 내인성 미토콘드리아와 외인성 미토콘드리아 사이의 mtDNA 서열의 차이, 예를 들어, 상이한 일배체형을 확인하는 것, 외인성 미토콘드리아의 공급원 조직에서 비롯된 특정 미토콘드리아 단백질, 예를 들어, 태반 유래의 사이토크롬 p450 콜레스테롤 측쇄 절단(P450SCC), 갈색 지방 조직 유래의 UCP1 등을 확인하는 것, 및 이들의 임의의 조합을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다양한 수단에 의해 수행될 수 있다.
이형세포질성은 세포 또는 개체 내에 하나 초과 유형의 미토콘드리아 DNA가 존재하는 것이다. 이형세포질성 수준은 돌연변이체 mtDNA 분자 대 야생형/기능성 mtDNA 분자의 비율이며 미토콘드리아 질환의 중증도를 고려함에 있어 중요한 요소이다. 더 낮은 수준의 이형세포질성(충분한 양의 미토콘드리아가 기능성임)은 건강한 표현형과 연관이 있는 반면, 더 높은 수준의 이형세포질성(불충분한 양의 미토콘드리아가 기능성임)은 병리와 연관이 있다. 특정 실시형태에서, 풍부화된 세포, 예컨대, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 이형세포질성 수준은 대상체 또는 공여자로부터 수득되거나 이에서 유래된 세포의 이형세포질성 수준보다 적어도 1%, 3%, 5%, 15%, 20%, 25%, 또는 30% 더 낮다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "접촉"은 세포 내로 외인성 미토콘드리아의 진입을 촉진시키기 위해 미토콘드리아와 세포(예를 들어, T 세포 및 유전자 조작 T 세포)를 충분히 근접시키는 것을 지칭한다. 용어 미토콘드리아를 세포(예를 들어, T 세포 및 유전자 조작 T 세포)에 도입 또는 삽입하는 것은 용어 접촉과 호환 가능하게 사용된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 어구 "외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건" 및 "외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건"은 일반적으로 시간, 온도, 원심분리, 배양 배지 및 미토콘드리아와 수용 세포 사이의 근접성과 같은 매개변수를 지칭한다. 예를 들어, 인간 세포와 인간 세포주는 액체 배지에서 일상적으로 인큐베이션되며, 37℃ 및 5% CO2 대기에서 조직 배양 인큐베이터와 같은 멸균 환경에 보관된다. 본 명세서에서 개시되고 예시된 대안적인 실시형태에 따르면, 세포는 인간 혈청 알부민이 보충된 염수 중에서 실온에서 인큐베이션될 수 있다.
특정 실시형태에서, 세포는 약 16 내지 37℃ 범위의 온도에서 0.5 내지 30시간 범위의 시간 동안 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션된다. 특정 실시형태에서, 세포는 약 1 내지 30 또는 약 5 내지 25시간 범위의 시간 동안 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션된다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 약 20 내지 30시간 동안이다. 일부 실시형태에서, 인큐베이션은 적어도 약 1, 5, 10, 15, 20, 21, 22, 23 또는 24시간 동안이다. 다른 실시형태에서, 인큐베이션은 최대 5, 10, 15, 20 또는 30시간이다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 24시간 동안이다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 세포 내의 미토콘드리아 함량이 초기 미토콘드리아 함량과 비교하여 평균 1% 내지 45%만큼 증가될 때까지이다.
일부 실시형태에서, 인큐베이션은 실온(16℃ 내지 30℃)에서 수행된다. 다른 실시형태에서, 인큐베이션은 37℃에서 수행된다. 일부 실시형태에서, 인큐베이션은 5% CO2 분위기에서 수행된다. 다른 실시형태에서, 인큐베이션은 공기에서 발견되는 수준 초과로 추가된 CO2를 포함하지 않는다.
또 다른 실시형태에서, 인큐베이션은 인간 혈청 알부민(HSA)이 보충된 배양 배지에서 수행된다. 추가적인 실시형태에서, 인큐베이션은 HSA가 보충된 염수 중에서 수행된다. 특정 예시적인 실시형태에 따르면, 외인성 미토콘드리아가 인간 줄기 세포에 들어갈 수 있도록 하여 상기 인간 외인성 미토콘드리아로 상기 인간 줄기 세포를 풍부화시키는 조건은 4.5% 인간 혈청 알부민이 보충된 염수 중에서 실온에서의 인큐베이션을 포함한다.
특정 실시형태에서, 인큐베이션은 37℃에서 수행된다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 적어도 6시간 동안 수행된다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 적어도 12시간 동안 수행된다. 특정 실시형태에서, 인큐베이션은 12 내지 24시간 동안 수행된다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "풍부화시키는"은 미토콘드리아 함량, 예를 들어, 온전한 미토콘드리아의 수, 또는 포유동물 세포의 미토콘드리아의 기능성을 증가시키도록 설계된 임의의 작용을 지칭한다. 특히, 외인성 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 풍부화 전의 동일한 T 세포와 비교하여 향상된 기능을 나타낼 것이다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "풍부화키는" 및 "풍부화"는, 인간 세포의, 미토콘드리아 함량, 예를 들어, 온전하거나 기능성이거나 건강한 미토콘드리아의 수를 증가시키는, 생체외에서 수행되는 임의의 작용을 지칭한다. 본 발명의 원리에 따르면, 외인성 미토콘드리아는 인간 T 세포에 도입되어 외인성 미토콘드리아로 이들 세포를 풍부화시킨다. 일부 실시형태에 따르면, 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 T-세포 및 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포에서 총 미토콘드리아의 1% 초과, 2% 초과, 3% 초과, 4% 초과, 5% 초과, 10% 초과, 15% 초과 또는 20% 초과를 구성한다.
시트레이트 신타제(CS)는 미토콘드리아 기질에 국한되지만, 핵 DNA에 의해 인코딩된다. 시트레이트 신타제는 크렙스 회로의 첫 번째 단계에 관여하며, 일반적으로 온전한 미토콘드리아의 존재에 대한 정량적 효소 마커로 사용된다(Larsen S. et al., J. Physiol., 2012, Vol. 590(14), pages 3349-3360; Cook G.A. et al., Biochim. Biophys. Acta., 1983, Vol. 763(4), pages 356-367).
미토콘드리아 용량은 CS 활성 단위 또는 본 명세서에 설명된 미토콘드리아 양의 다른 정량화 가능한 측정의 mtDNA 복제 수에 관하여 표현될 수 있다. "CS 활성의 단위"는 1 ㎖ 반응 부피에서 1분 동안 1마이크로몰 기질의 전환을 가능하게 하는 양으로 정의된다.
일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아로 세포(예를 들어, T 세포 및 유전자 조작 T 세포)를 풍부화시키는 것은 백만 개의 세포당 적어도 0.044 내지 최대 176 밀리단위(mU)의 시트레이트 신타제(CS) 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.088 내지 최대 176 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.2 내지 최대 150 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.4 내지 최대 100 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.6 내지 최대 80 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.7 내지 최대 50 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.8 내지 최대 20 mU의 CS 활성; 백만 개의 세포당 적어도 0.88 내지 최대 17.6 mU의 CS 활성; 또는 백만 개의 세포당 적어도 0.44 내지 최대 17.6 mU의 CS 활성의 미토콘드리아 용량을 세포 내로 도입하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "미토콘드리아 함량"은 세포 내 미토콘드리아의 양, 또는 복수의 세포 내 미토콘드리아의 평균 양을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 미토콘드리아 함량"은 미토콘드리아 풍부화 전 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높은 미토콘드리아 함량을 지칭한다.
특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아로 풍부화된 세포의 미토콘드리아 함량은 미경험 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높다. 다양한 실시형태에 따르면, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 미토콘드리아 풍부화 전 세포의 미토콘드리아 함량보다 적어도 1%, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 25%, 적어도 50%, 적어도 100%, 적어도 200% 또는 그 이상 더 높다. 특정 실시형태에서, T 세포 또는 유전자 조작 T 세포는 신선하게 사용된다. 특정 실시형태에서, T 세포 또는 유전자 조작 T 세포는 동결 및 해동된다.
특정 실시형태에서, 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 시트레이트 신타제의 함량을 결정함으로써 결정된다. 특정 실시형태에서, 미경험 세포 또는 풍부화된 세포의 미토콘드리아 함량은 시트레이트 신타제의 활성 수준을 결정함으로써 결정된다. 특정 실시형태에서, 미경험 세포 또는 풍부화된 세포의 미토콘드리아 함량은 시트레이트 신타제의 함량과 상관관계가 있다. 특정 실시형태에서, 미경험 세포 또는 풍부화된 세포의 미토콘드리아 함량은 시트레이트 신타제의 활성 수준과 상관관계가 있다. CS 활성은 상업적으로 입수 가능한 키트에 의해, 예를 들어, CS 활성 키트 CS0720(Sigma)을 사용하여 측정될 수 있다.
미토콘드리아 DNA 함량은 핵 유전자로 정규화된, 미토콘드리아 풍부화 전후에 미토콘드리아 유전자의 정량적 PCR을 수행함으로써 측정될 수 있다.
특정 상황에서, 미토콘드리아 풍부화 전의 동일한 세포는 CS 및 ATP 활성을 측정하고 풍부화 수준을 결정하기 위한 대조군의 역할을 한다.
특정 실시형태에서, 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "검출 가능하게 더 높은"은 정상 값 및 증가된 값 사이의 통계적으로 유의한 증가를 지칭한다. 특정 실시형태에서, 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "검출 가능하게 더 높은"은 비병리학적 증가, 즉 실질적으로 더 높은 값과 연관된 병리학적 증상이 명백하게 되지 않는 수준을 지칭한다. 특정 실시형태에서, 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된"은 미토콘드리아 풍부화 전의 상응하는 세포 또는 건강한 대상체 또는 복수의 건강한 대상체 또는 상응하는 세포(예를 들어, T 세포 및 유전자 조작 T 세포)에서의 상응하는 미토콘드리아에서 발견되는 상응하는 값보다 1.05배, 1.1배, 1.25배, 1.5배, 2배, 3배, 4배, 5배, 6배, 7배 또는 그 이상인 값을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 미토콘드리아 DNA 함량"은 미토콘드리아 풍부화 전 세포에서의 미토콘드리아 DNA 함량보다 검출 가능하게 더 높은 미토콘드리아 DNA의 함량을 지칭한다. 미토콘드리아 함량은 SDHA 또는 COX1 함량을 측정함으로써 결정될 수 있다. 명세서 및 청구범위의 맥락에서 "정상 미토콘드리아 DNA"는 미토콘드리아 질환과 연관된 것으로 알려진 돌연변이 또는 결실을 보유하고/가지고 있지 않은 미토콘드리아 DNA를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "정상적인 산소(O2) 소비율"은 건강한 개체 유래의 세포에서 평균 O2 소비량을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "시트레이트 신타제의 정상 활성 수준"은 건강한 개체 유래 세포에서 시트레이트 신타제의 평균 활성 수준을 지칭한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이 용어 "정상적인 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율"은 건강한 개체 유래의 세포에서 평균 ATP 생산율을 지칭한다.
외인성 미토콘드리아에 의한 세포의 풍부화 정도는 산소(O2) 소비율, 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준, 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율을 포함하지만 이에 제한되지 않는 기능성 및/또는 효소 분석에 의해 결정될 수 있다. 대안적으로, 외인성 미토콘드리아에 의한 세포의 풍부화는 공여자의 미토콘드리아 DNA의 검출에 의해 확인될 수 있다. 일부 실시형태에 따르면, 외인성 미토콘드리아에 의한 세포의 풍부화 정도는 이형세포질성의 변화 수준 및/또는 세포당 mtDNA의 복제 수에 의해 결정될 수 있다.
TMRM(테트라메틸로다민 메틸 에스터) 또는 관련 TMRE(테트라메틸로다민 에틸 에스터)는 미토콘드리아 막 전위의 변화를 확인함으로써 살아있는 세포에서 미토콘드리아 기능을 평가하는 데 일반적으로 사용되는 세포-투과성 형광 염료이다. 일부 실시형태에 따르면, 풍부화 수준은 TMRE 또는 TMRM을 이용하여 염색함으로써 결정될 수 있다.
일부 실시형태에 따르면, 미토콘드리아는 온전한 미토콘드리아, 파열된 미토콘드리아 및/또는 미토콘드리아 단백질, 미토콘드리아 핵산, 미토콘드리아 지질 및 미토콘드리아 당류로 이루어진 군으로부터 선택되는 미토콘드리아 구성성분을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 미토콘드리아 막의 온전성은 당업계에 알려진 임의의 방법에 의해 결정될 수 있다. 비제한적인 예에서, 미토콘드리아 막의 온전성은 테트라메틸로다민 메틸 에스터(TMRM) 또는 테트라메틸로다민 에틸 에스터(TMRE) 형광 프로브를 사용하여 측정된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 현미경 하에 관찰되고 TMRM 또는 TMRE 염색을 나타내는 미토콘드리아는 온전한 미토콘드리아 외막을 갖는다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "미토콘드리아 막"은 미토콘드리아 내막, 미토콘드리아 외막, 및 이들 모두로 이루어진 군으로부터 선택되는 미토콘드리아 막을 지칭한다.
특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포에서 미토콘드리아 풍부화의 수준은 세포에서 총 미토콘드리아 DNA의 적어도 통계적으로 대표되는 부분을 서열결정하고 숙주/내인성 미토콘드리아 DNA 및 외인성 미토콘드리아 DNA의 상대적 수준을 결정함으로써 결정된다. 특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포에서 미토콘드리아 풍부화의 수준은 단일 뉴클레오타이드 다형성(SNP) 분석에 의해 결정된다. 특정 실시형태에서, 가장 큰 미토콘드리아 집단 및/또는 가장 큰 미토콘드리아 DNA 집단은 숙주/내인성 미토콘드리아 집단 및/또는 숙주/내인성 미토콘드리아 DNA 집단이고/거나; 두 번째로 큰 미토콘드리아 집단 및/또는 두 번째로 큰 미토콘드리아 DNA 집단은 외인성 미토콘드리아 집단 및/또는 외인성 미토콘드리아 DNA 집단이다.
특정 실시형태에 따르면, 외인성 미토콘드리아로 세포를 풍부화시키는 것은 당업계에서 인식되는 통상적인 분석에 의해 결정될 수 있다. 특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 인간 유전자 조작 T 세포에서 미토콘드리아 풍부화의 수준은 (i) 숙주/내인성 미토콘드리아 DNA 및 외인성 미토콘드리아 DNA의 수준; (ii) 시트레이트 신타제(CS), 사이토크롬 C 산화효소(COX1), 석시네이트 탈수소효소 복합체 플라빈단백질 서브유닛 A(SDHA) 및 이들의 임의의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 미토콘드리아 단백질의 수준; (iii) CS 활성의 수준; 또는 (iv) (i), (ii) 및 (iii)의 임의의 조합에 의해 결정된다. 이들 다양한 매개변수를 결정하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있다.
특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포에서 미토콘드리아 풍부화의 수준은 (i) 숙주 미토콘드리아 DNA 및 외인성 미토콘드리아 DNA의 수준; (ii) 시트레이트 신타제 활성의 수준; (iii) 석시네이트 탈수소효소 복합체 플라빈단백질 서브유닛 A(SDHA) 또는 사이토크롬 C 산화효소(COX1)의 수준; (iv) 산소(O2) 소비율; (v) 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율 또는 (vi) 이들의 임의의 조합 중 적어도 하나에 의해 결정된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 이러한 다양한 매개변수를 측정하는 방법은 당업계에 잘 알려져 있다.
일부 실시형태에서, 외인성 인간 미토콘드리아로 세포를 풍부화시키는 것은 세포를 외인성 인간 미토콘드리아와 함께 인큐베이션한 후에 미토콘드리아-풍부화된 세포(예를 들어, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포)를 세척하는 것을 포함한다. 이 단계는 줄기 세포에 들어가지 않은 세포 파편이나 미토콘드리아 막 잔여물 및 미토콘드리아가 실질적으로 없는 미토콘드리아-풍부화된 세포를 제공한다. 일부 실시형태에서, 세척은 인간 세포를 상기 외인성 인간 미토콘드리아와 함께 인큐베이션한 후 미토콘드리아-풍부화된 세포를 원심분리하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에 따르면, 방법은 유리 미토콘드리아, 즉 세포에 들어가지 않은 미토콘드리아, 또는 다른 세포 파편으로부터 분리된 미토콘드리아-풍부화된 세포를 생산하고, 약제학적 조성물은 유리 미토콘드리아로부터 분리된 미토콘드리아-풍부화된 세포를 함유한다. 일부 실시형태에 따르면, 방법은 검출 가능한 양의 유리 미토콘드리아를 포함하지 않는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하고 약제학적 조성물은 검출 가능한 양의 유리 미토콘드리아를 포함하지 않는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 포함한다.
특정 실시형태에서, 상기 기재된 방법은 인큐베이션 및/또는 접촉 전 또는 동안 외인성 미토콘드리아와 함께 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포를 농축시키는 것을 추가로 포함한다. 특정 실시형태에서, 상기 기재된 방법은 인큐베이션 또는 접촉 전, 동안 또는 후에 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 원심분리하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시형태에서, 다양한 실시형태에서 상기 기재된 방법은 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하기 전, 동안 또는 후에 단일 원심분리 단계를 포함한다.
특정 실시형태에서, 원심분리 속도는 7,000 g 또는 8,000 g이다. 추가 실시형태에 따르면, 원심분리는 300 g 내지 8000 g; 500 g 내지 6000 g; 1000 g 내지 5000 g; 2000 g 내지 4000 g; 2500 g 내지 8500 g; 3000 g 내지 8000 g; 4000 g 내지 8000 g; 5,000 내지 l0,000 g 7000 g 내지 8000 g 또는 2500 g 초과의 속도로 수행된다. 일부 실시형태에서, 원심분리는 2분 내지 30분; 3분 내지 25분; 5분 내지 20분; 또는 8분 내지 15분 범위의 시간 동안 수행된다.
일부 실시형태에서, 원심분리는 2 내지 6℃; 4 내지 37℃; 4 내지 10℃ 또는 16 내지 30℃ 범위의 온도에서 수행된다. 특정 실시형태에서, 원심분리는 4℃에서 수행된다. 일부 실시형태에서, 다양한 실시형태에서 상기 기재된 방법은 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하기 전, 동안 또는 후에 단일 원심분리한 다음, 세포를 30℃ 미만의 온도에서 휴지시키는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아가 인간 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하기 전, 동안 또는 후에 단일 원심분리한 다음, 세포를 16 내지 28℃ 범위의 온도에서 휴지시키는 것을 포함한다.
일부 실시형태에서, 방법은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 105 내지 1010; 5×105 내지 1.5×107; 또는 5×105 내지 4×107개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 105 내지 1010; 5×105 내지 1.5×107; 또는 5×105 내지 4×107개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 함유한다. 일부 실시형태에서, 방법은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 106 내지 107개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 106 내지 107개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 함유한다. 다른 실시형태에서, 방법은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 105 또는 적어도 106개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 대상체의 체중 킬로그램당 적어도 105 또는 적어도 106개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 함유한다. 일부 실시형태에서, 방법은 총 적어도 5×105 내지 최대 5×109개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 총 적어도 5×105 내지 최대 5×109개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 함유한다. 일부 실시형태에서, 방법은 총 적어도 106 내지 최대 109개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 총 적어도 106 내지 최대 109개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 농도로 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 포함한다. 다른 실시형태에서, 방법은 총 적어도 2×106 내지 최대 5×108개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생성하고/거나 약제학적 조성물은 총 적어도 2×106 내지 최대 5×108개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 포함한다.
특정 실시형태에서, T 세포는 신선하다. 특정 실시형태에서, T 세포는 동결된 다음 인큐베이션 전에 해동된다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 신선하다. 특정 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 동결된 다음 인큐베이션 전에 해동된다. 특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 신선하다. 특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 동결된 다음 투여 전에 해동된다.
특정 실시형태에서, 그 다음 T 세포는 저장되고 해동 후에 사용된다. 추가 실시형태에서, 외인성 미토콘드리아는 동결된 다음, 저장되고 사용 전에 해동된다. 추가 실시형태에서 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 동결 및 저장 없이 사용된다. 또 다른 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 동결, 저장 및 해동 후에 사용된다. 생존력을 보존하기 위해 세포 제제의 동결 및 해동에 적합한 방법은 당업계에 잘 알려져 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "동결-해동 주기"는 외인성 미토콘드리아를 0℃ 미만의 온도로 동결시키고, 미토콘드리아를 정의된 기간 동안 0℃ 미만의 온도에서 유지하며, 외인성 미토콘드리아를 실온 또는 체온 또는 외인성 미토콘드리아로 세포를 치료할 수 있는 0℃ 초과의 임의의 온도로 해동시키는 것을 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "실온"은 전형적으로 18℃ 내지 25℃의 온도를 지칭한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "체온"은 35.5℃ 내지 37.5℃, 바람직하게는 37℃의 온도를 지칭한다.
다른 실시형태에서, 동결-해동 주기를 거친 미토콘드리아는 -20℃ 이하; -4℃ 이하 또는 -70℃ 이하의 온도에서 동결되었다. 다른 실시형태에 따르면, 미토콘드리아의 동결은 점진적이다. 일부 실시형태에 따르면, 미토콘드리아의 동결은 급속-동결을 통한 것이다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 용어 "급속-동결"은 미토콘드리아에 극저온 온도를 가함으로써 미토콘드리아를 빠르게 동결시키는 것을 지칭한다.
다른 실시형태에서, 동결-해동 주기를 거친 미토콘드리아는 해동 전에 적어도 30분 동안 동결되었다. 다른 실시형태에 따르면, 동결-해동 주기는 해동 전 적어도 30, 60, 90, 120, 180, 210분 동안 외인성 미토콘드리아를 동결시키는 것을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 다른 실시형태에서, 동결-해동 주기를 거친 미토콘드리아는 해동 전 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 24, 48, 72, 96 또는 120시간 동안 동결되었다. 다른 실시형태에서, 동결-해동 주기를 거친 미토콘드리아는 해동 전 적어도 4, 5, 6, 7, 30, 60, 120, 365일 동안 동결되었다. 다른 실시형태에 따르면, 동결-해동 주기는 해동 전 적어도 1, 2, 3주 동안 외인성 미토콘드리아를 동결시키는 것을 포함한다. 다른 실시형태에 따르면, 동결-해동 주기는 해동 전 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6개월 동안 외인성 미토콘드리아를 동결시키는 것을 포함한다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다. 다른 구체예에 따르면, 동결-해동 주기 후 외인성 미토콘드리아의 산소 소비량은 동결-해동 주기 전 외인성 미토콘드리아의 산소 소비량과 동일하거나 더 높다.
특정 실시형태예에 따르면, 해동은 실온에서 수행된다. 다른 실시형태에서, 해동은 체온에서 수행된다. 다른 실시형태에 따르면, 해동은 본 발명의 방법에 따라 미토콘드리아를 투여할 수 있는 온도에서 수행된다. 다른 실시형태에 따르면, 해동은 점진적으로 수행된다.
특정 실시형태에서, 상기 기재된 방법은 골수 세포의 말초 혈액으로의 동원을 유도하는 작용제를 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자에게 투여하는 선행 단계를 추가로 포함한다.
특정 실시형태에서, 골수에서 생산된 골수 세포/줄기 세포의 말초 혈액으로의 동원을 유도하는 작용제는 과립구-집락 자극 인자(G-CSF), 과립구-대식세포 집락 자극 인자(GM-CSF), 1,1'-[1,4-페닐렌비스(메틸렌)]비스[1,4,8,11-테트라아자사이클로테트라데칸](Plerixafor, CAS 번호 155148-31-5), CXCR4 저해제, 이들의 염, 및 이들의 임의의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된다. 각각의 가능성은 본 발명의 별개의 실시형태를 나타낸다.
특정 실시형태에서, 상기 기재된 방법은 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 및/또는 공여자의 말초 혈액으로부터 세포를 단리하는 것을 추가로 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "말초 혈액으로부터 단리하는 것"은 혈액의 다른 구성성분으로부터 T 세포 또는 조혈모세포를 단리하는 것을 지칭한다.
성분채집 동안, 대상체 또는 공여자의 혈액은 하나의 특정 구성성분을 분리하고 나머지를 순환계로 되돌리는 장치를 통과한다. 따라서 신체 외부에서 수행되는 의료 절차이다. 특정 실시형태에서, 단리는 성분채집에 의해 수행된다.
특정 실시형태에서, 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 수득되고, 세포는 (i) 정상적인 산소(O2) 소비율; (ii) 정상적인 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준; (iii) 정상적인 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율; 또는 (iv) (i), (ii) 및 (iii)의 임의의 조합을 갖는다.
특정 실시형태에서, T 세포일 수 있는 세포는 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 수득되고, T 세포는 질환 또는 장애로 고통받지 않는 대상체와 비교하여 (i) 감소된 산소(O2) 소비율; (ii) 감소된 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준; (iii) 감소된 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율; 또는 (iv) (i), (ii) 및 (iii)의 임의의 조합을 갖는다.
특정 실시형태에서, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 미토콘드리아 풍부화를 거치지 않은 상응하는 T 세포와 비교하여 (i) 증가된 산소(O2) 소비율; (ii) 증가된 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준; (iii) 증가된 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율; (iv) 증가된 미토콘드리아 DNA 함량 또는 (v) (i), (ii), (iii) 및 (iv)의 임의의 조합을 갖는다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 산소(O2) 소비율"은 미토콘드리아 풍부화 전 산소(O2) 소비율보다 검출 가능하게 더 높은 산소(O2) 소비율을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 적어도 하나의 미토콘드리아 단백질의 함량"은 미토콘드리아 풍부화 전 세포에서 핵-인코딩 또는 미토콘드리아-인코딩 미토콘드리아 단백질, 예를 들어, CS, COX1 및 SDHA의 함량보다 검출 가능하게 더 높은 상기 미토콘드리아 단백질의 함량을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준"은 미토콘드리아 풍부화 전 시트레이트 신타제의 함량 값 또는 활성 수준보다 검출 가능하게 더 높은 시트레이트 신타제의 함량 또는 활성 수준을 지칭한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "증가된 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율"은 미토콘드리아 풍부화 전 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율보다 검출 가능하게 더 높은 아데노신 트라이포스페이트(ATP) 생산율을 지칭한다.
또 다른 양태에 따르면, 본 발명은 암, 감염성 질환 또는 자가면역 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 복수의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 포함하는 치료적 유효량의 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 실시형태에 따르면, 질환은 암이다. 용어 "암"은 한 부위(일차 부위)에서 시작하여 암(악성 종양)을 양성 종양과 구별하는 다른 부위(이차 부위, 전이)로 침범하여 퍼질 가능성이 있는 비정상적이고 제어되지 않는 세포 증식을 특징으로 하는 군 질환을 지칭한다. 거의 모든 장기가 영향을 받을 수 있으며, 인간에게 영향을 미칠 수 있는 100가지 초과 유형의 암을 야기한다. 암은 유전적 소인, 바이러스 감염, 이온화 방사선에의 노출, 환경 오염 물질 노출, 담배 및/또는 알코올 사용, 비만, 잘못된 식단, 신체 활동 부족 또는 이들의 임의의 조합을 포함한 많은 원인으로 인해 발생할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "신생물" 또는 "종양"(이의 문법적 변형을 포함함)은 양성 또는 암성일 수 있는 조직의 새롭고 비정상적인 성장을 의미한다. 관련된 양태에서, 신생물은 다양한 암을 포함하지만 이에 제한되지 않는 신생물성 질환 또는 장애를 나타낸다. 예를 들어, 이와 같은 암은 전립선, 췌장, 담도, 결장, 직장, 간, 신장, 폐, 고환, 유방, 난소, 췌장, 뇌 및 두경부 암, 흑색종, 육종, 다발성 골수종, 백혈병, 림프종 등을 포함할 수 있다.
골수와 같은 혈액-형성 조직, 또는 면역계의 세포에서 시작되는 암은 혈액암(hematologic cancer, 또는 blood cancer)으로 지칭된다. 혈액암은 혈액 세포의 생산과 기능에 영향을 미치며, 백혈병, 림프종, 및 다발성 골수종의 3가지 주요 유형으로 분류된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "백혈병"은 비정상적인 백혈구의 급속한 생산에 의해 유발되는 혈액을 지칭한다. 백혈병의 예는 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML) 및 털세포 백혈병을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "림프종"은 림프계에 영향을 미치는 혈액암의 유형을 지칭한다. 림프종의 예는 AIDS-관련 림프종, 피부 T-세포 림프종, 호지킨 림프종, 균상 식육종, 비호지킨 림프종, 원발성 중추신경계 림프종, 세자리 증후군, 피부 T-세포 림프종, 및 발텐스트롬 마크로글로불린혈증을 포함한다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이, "골수종"은 형질 세포의 암이다. 골수종의 예는 만성 골수증식성 신생물, 랑게르한스 세포 조직구증, 다발성 골수종, 형질 세포 신생물, 골수이형성 증후군, 및 골수이형성/골수증식성 신생물을 포함한다.
일부 실시형태에서, 암은 혈액암이다. 특정 실시형태에서, 암은 급성 림프모구성 백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 만성 골수성 백혈병(CML), 털세포 백혈병, 호지킨 림프종, 비호지킨 림프종 또는 다발성 골수종을 포함한다.
일부 양태에서, 투여는 하나 이상의 추가적인 치료제와 조합될 수 있다. 어구 "병용 요법", "~와 함께" 등은 반응을 증가시키기 위해 하나 초과의 약물 또는 치료를 동시에 사용하는 것을 지칭한다. 본 발명의 조성물은, 예를 들어, 암을 치료하기 위해 사용되는 다른 약물 또는 치료와 조합하여 사용될 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 조성물을 대상체에게 투여하는 것은 임의의 항암 요법과 조합될 수 있다. 이와 같은 요법은 본 발명의 조성물의 투여 전, 투여와 동시에, 또는 투여 후에 투여될 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 바와 같이 용어 "항암 요법" 또는 "항암 치료"는 암을 치료하는 데 사용될 수 있는 임의의 치료법, 예컨대, 수술, 방사선요법, 화학요법, 면역요법, 및 면역관문 저해제 요법을 지칭하는 것을 의미한다.
다음 실시예는 본 발명의 실시형태를 추가로 예시하기 위해 제공되지만, 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 다음 실시예는 사용될 수 있는 것들의 전형이지만, 당업자에게 알려진 다른 절차, 방법 또는 기법이 대안적으로 사용될 수 있다.
실시예
실시예 1
일 양태에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 바와 같은 대상체를 치료하는 다음 방법을 제공한다:
동결/해동 주기를 사용하여 미토콘드리아가 동결/해동된 본 명세서에 기재된 바와 같이 미토콘드리아로 단리된 T-세포를 풍부화시킨다.
키메라 T 세포 수용체 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산 중합체를 세포에 도입한다.
미토콘드리아-풍부화된 세포를 대상체에게 투여한다.
실시예 2
일 양태에서, 본 발명은 본 명세서에 기재된 바와 같은 대상체를 치료하는 다음 방법을 제공한다:
키메라 T 세포 수용체 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산 중합체를 단리된 T 세포에 도입한다.
미토콘드리아로 세포를 풍부화시킨다.
풍부화된 세포를 대상체에게 투여한다.
실시예 3
건강한 인간 공여자 유래의 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 해동하고 인터루킨 2와 함께 배양하였다. 회수 2일 후, 세포를 OKT3(50 ng/㎖)를 사용하여 활성화시켰다(즉, 프로토콜의 0일째).
CD28 공동자극 도메인이 있는 CD19-CAR을 인코딩하는 레트로바이러스를 이용한 형질도입을 위해 비조직 배양 플레이트를 2일째에 실온에서 밤새 레트로넥틴으로 코팅하였다. 3일째에 바이러스를 해동하고, 레트로넥틴-코팅 플레이트에 첨가한 다음, 32℃에서 2시간 동안 회전시켰다. 그 다음, 바이러스를 플레이트로부터 제거하고 활성화된 공여자 세포를 도말하고(0.5×106/㎖), 인큐베이터에 두었다. 대조군으로서, 형질도입되지 않은 세포를 바이러스가 없는 플레이트에 도말하였다. 세포를 10% 소 태아 혈청(FBS), 및 IL-2(100 IU/㎖)가 보충된 RPMI 배지에서 성장시키고 배지를 2 내지 3일마다 교체하였다.
미토콘드리아 풍부화를 위해, 건강한 개체의 태반으로부터 단리된 동결보존된 미토콘드리아(MNV-PLC)를 해동하고 세포 활성화 5일째 또는 10일째에 1×106개 세포당 0.88 mU 또는 4.4 mU CS 활성으로 세포에 첨가하였다. 미토콘드리아-풍부화된 세포뿐만 아니라, 비풍부화 세포를 4℃에서 5분 동안 7000 g(A1) 또는 400 g(A2)에서 원심분리하였다. 원심분리 후, 세포를 동일한 배지(100 U/ml IL-2가 보충된 RPMI-10% FCS)에 현탁시키고 37℃에서 22시간 동안 인큐베이션하였다. 22시간 후, 세포를 수확하고, 세척한 다음, RPMI에 재현탁시켰다. 서열결정 분석에 의해 세포에서 외인성 태반 미토콘드리아의 존재를 확인함으로써 미토콘드리아 풍부화를 검증하였다. 동일한 절차를 거치고 외인성 미토콘드리아 없이 37℃에서 22시간 동안 인큐베이션된 CAR-T 세포가 대조군의 역할을 하였다.
4.4 mU 또는 0.88 mU의 MNV-PLC를 이용한 CAR-T 세포의 처리는 서열 분석에 의해 검증된 바와 같이 미토콘드리아 풍부화를 초래하였다. CAR-T 세포의 미토콘드리아 풍부화는 세포 활성화로부터 5일째 또는 10일째에 실현 가능하였다. 5일째에 수행된 미토콘드리아 풍부화는 90.3 내지 95.5% 생존력, 대조군 세포와 비교하여 ATP 함량에서 1.05 내지 1.21배 증가 및 대조군 세포와 비교하여 정규화된 CS 활성에서 1.7 내지 2.6배 증가를 초래하였다. 10일째에 수행된 미토콘드리아 풍부화는 88.5 내지 92.7%의 생존력, 대조군 세포와 비교하여 ATP 함량에서 1.02 내지 1.53배 증가 및 대조군 세포와 비교하여 정규화된 CS 활성에서 1.7 내지 2.13배 증가를 초래하였다. 대조군 세포는 외인성 미토콘드리아를 과정에 도입하지 않고 증대 조건을 거친 형질도입된 세포였다. (도 1b). 10일째에 수행된 미토콘드리아 풍부화는 5일째에 수행된 미토콘드리아 풍부화와 비교하여 외인성 미토콘드리아 통합에서 2배 또는 3배 증가하였다(A1에서 8.14% 대 4.03%, A2에서 6.34% 대 2.7%)(도 1c). T-세포 증식 능력과 형질도입 효능은 미토콘드리아 풍부화에 의해 손상되지 않았다(도 2).
본 발명이 상기 실시예를 참조하여 기재되었지만, 수정 및 변형이 본 발명의 사상 및 범주 내에 포함된다는 것이 이해될 것이다. 따라서, 본 발명은 다음 청구범위에 의해서만 제한된다.
Claims (35)
- 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하되, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아-풍부화된, 약제학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는,
a) 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계;
b) 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계;
c) 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 T 세포를 생산하는 단계; 및
d) 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 생산되되, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높은, 약제학적 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는,
a) 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계;
b) 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 T 세포에 도입함으로써 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계,
c) 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계;
d) 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 생산되되, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높은, 약제학적 조성물. - 제2항 또는 제3항에 있어서, 상기 유전자 조작 T 세포 및 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 CAR-T 세포인, 약제학적 조성물.
- 제2항 또는 제3항에 있어서, 상기 유전자 조작 T 세포 및 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 TCR-T 세포인, 약제학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 인간 세포에서 유래된, 약제학적 조성물.
- 제6항에 있어서, 상기 인간 세포는 인간 태반, 배양물에서 성장된 인간 태반 세포, 인간 혈액 세포, 줄기 세포 및 체세포로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 줄기 세포는 유도 만능 줄기 세포, 배아 줄기 세포 및 만능 줄기 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 동계 또는 동종이계인, 약제학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 자가 조직인, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 대상체의 체중 ㎏당 적어도 5×105 내지 5×1010개의 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 포함하는, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포는, 미토콘드리아 풍부화 전 T-세포에서의 상응하는 수준에 비해서,
(a) 증가된 미토콘드리아 DNA 함량;
(b) 증가된 시트레이트 신타제(CS) 활성 수준;
(c) 증가된 SDHA 및 COX1로부터 선택되는 적어도 하나의 미토콘드리아 단백질의 함량;
(d) 증가된 O2 소비율;
(e) 증가된 ATP 생산율; 또는
(f) 이들의 임의의 조합
중 적어도 하나를 갖는, 약제학적 조성물. - 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아가 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 약 16 내지 37℃ 범위의 온도에서 0.5 내지 30시간 범위의 시간 동안 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함하는, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 미토콘드리아-풍부화된 T 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포에서 총 미토콘드리아의 적어도 1%를 구성하는, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 암인, 약제학적 조성물.
- 제15항에 있어서, 상기 암은 혈액암인, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 T 세포는 자가 조직 또는 동종이계인, 약제학적 조성물.
- 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 T 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비를 포함하는, 약제학적 조성물.
- 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 이를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 장애를 치료하는 방법이되, 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는 외인성 미토콘드리아가 풍부화되어 대상체를 치료하는, 방법.
- 제19항에 있어서, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는,
a) 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 T 세포를 수득하는 단계;
b) 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계;
c) 외인성 미토콘드리아가 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 T 세포를 생산하는 단계; 및
d) 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 미토콘드리아-풍부화된 T 세포에 도입함으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 생산되되, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높은, 방법. - 제19항 또는 제20항에 있어서, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포는,
a) 키메라 T 세포 수용체(TCR) 또는 키메라 항원 수용체(CAR)를 인코딩하는 핵산을 질환 또는 장애로 고통받는 대상체 또는 공여자로부터 수득된 T 세포에 도입함으로써 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계;
b) 외인성 미토콘드리아를 수득하는 단계; 및
c) 외인성 미토콘드리아가 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건 하에 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 접촉시킴으로써 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포를 생산하는 단계
를 포함하는 방법에 의해 생산되되, 상기 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T 세포의 미토콘드리아 함량은 T 세포의 미토콘드리아 함량보다 검출 가능하게 더 높은, 방법. - 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 인간 대상체인, 방법.
- 제19항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애는 암인, 방법.
- 제23항에 있어서, 상기 암은 혈액암인, 방법.
- 제19항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 투여는 정맥내, 복강내, 동맥내, 척추강내, 및 근육내 투여에 의하는 것인, 방법.
- 제19항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여는 정맥내 투여에 의하는 것인, 방법.
- 제19항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 화학요법제, 방사선 또는 다른 항암 요법을 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는, 방법.
- 제19항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 화학요법제, 방사선 또는 다른 항암 요법의 투여와 동시에, 병용하여 또는 투여 후에 투여되는, 방법.
- 제19항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 인간 세포 또는 조직에서 유래된, 방법.
- 제29항에 있어서, 상기 인간 세포는 태반, 배양물에서 성장된 태반 세포, 혈액 세포 및 줄기 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
- 제30항에 있어서, 상기 줄기 세포는 유도 만능 줄기 세포, 배아 줄기 세포 및 만능 줄기 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
- 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아는 동종이계 또는 자가 조직인, 방법.
- 제19항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 외인성 미토콘드리아에 의한 풍부화 후, 미토콘드리아-풍부화된 T 세포 또는 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 T-세포에서 총 미토콘드리아의 적어도 1%는 외인성 미토콘드리아를 포함하는, 방법.
- 제19항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아가 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 약 16 내지 37℃ 범위의 온도에서 0.5 내지 30시간 범위의 시간 동안 T 세포 또는 유전자 조작 T 세포를 외인성 미토콘드리아와 함께 인큐베이션하는 것을 포함하는, 방법.
- 제19항 내지 제34항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 외인성 미토콘드리아가 세포에 들어갈 수 있도록 하는 조건은 106개 세포당 약 0.088 내지 176 mU 시트레이트 신타제(CS) 활성의 비를 포함하는, 방법.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US202063003184P | 2020-03-31 | 2020-03-31 | |
| US63/003,184 | 2020-03-31 | ||
| PCT/IL2021/050358 WO2021199040A1 (en) | 2020-03-31 | 2021-03-30 | Mitochondria-enriched genetically engineered cells and uses thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230017163A true KR20230017163A (ko) | 2023-02-03 |
Family
ID=77930147
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020227033879A KR20230017163A (ko) | 2020-03-31 | 2021-03-30 | 미토콘드리아-풍부화된 유전자 조작 세포 및 이의 용도 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20230123731A1 (ko) |
| EP (1) | EP4125948A4 (ko) |
| JP (1) | JP2023520502A (ko) |
| KR (1) | KR20230017163A (ko) |
| CN (1) | CN115605220A (ko) |
| AU (1) | AU2021249553A1 (ko) |
| BR (1) | BR112022019609A2 (ko) |
| CA (1) | CA3172402A1 (ko) |
| CO (1) | CO2022015278A2 (ko) |
| IL (1) | IL296735A (ko) |
| MX (1) | MX2022012157A (ko) |
| WO (1) | WO2021199040A1 (ko) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2741757B1 (en) | 2011-09-11 | 2018-05-16 | Minovia Therapeutics Ltd. | Compositions of functional mitochondria and uses thereof |
| EP3823640A4 (en) | 2018-07-22 | 2022-05-18 | Minovia Therapeutics Ltd. | MITOCHONDRIAL AUGMENTATION THERAPY OF MUSCULAR DISEASES |
| US20240076711A1 (en) * | 2021-01-25 | 2024-03-07 | Minovia Therapeutics Ltd. | Identification of mitochondria-enriched cells |
| WO2024030441A1 (en) * | 2022-08-02 | 2024-02-08 | National University Corporation Hokkaido University | Methods of improving cellular therapy with organelle complexes |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3102609A4 (en) * | 2014-02-04 | 2017-08-23 | The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services | Methods for producing autologous t cells useful to treat b cell malignancies and other cancers and compositions thereof |
| JP7113618B2 (ja) * | 2014-07-15 | 2022-08-05 | ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド | 養子細胞療法用の操作された細胞 |
| JP7015169B2 (ja) * | 2015-02-26 | 2022-02-02 | ミノヴィア セラピューティクス リミテッド | 機能性ミトコンドリアで富化された哺乳動物細胞 |
| EP3823643A4 (en) * | 2018-07-22 | 2022-06-08 | Minovia Therapeutics Ltd. | MITOCHONDRIAL AUGMENTATION THERAPY OF LIVER DISEASES |
| AU2019321556A1 (en) * | 2018-08-14 | 2021-03-25 | Imel Biotherapeutics, Inc. | Methods and compositions for treating mitochondrial disease or disorders and heteroplasmy |
-
2021
- 2021-03-30 KR KR1020227033879A patent/KR20230017163A/ko unknown
- 2021-03-30 MX MX2022012157A patent/MX2022012157A/es unknown
- 2021-03-30 AU AU2021249553A patent/AU2021249553A1/en active Pending
- 2021-03-30 CN CN202180020356.XA patent/CN115605220A/zh active Pending
- 2021-03-30 WO PCT/IL2021/050358 patent/WO2021199040A1/en unknown
- 2021-03-30 EP EP21782146.1A patent/EP4125948A4/en active Pending
- 2021-03-30 US US17/910,304 patent/US20230123731A1/en active Pending
- 2021-03-30 IL IL296735A patent/IL296735A/en unknown
- 2021-03-30 BR BR112022019609A patent/BR112022019609A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2021-03-30 JP JP2022560149A patent/JP2023520502A/ja active Pending
- 2021-03-30 CA CA3172402A patent/CA3172402A1/en active Pending
-
2022
- 2022-10-26 CO CONC2022/0015278A patent/CO2022015278A2/es unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3172402A1 (en) | 2021-10-07 |
| JP2023520502A (ja) | 2023-05-17 |
| EP4125948A1 (en) | 2023-02-08 |
| AU2021249553A1 (en) | 2022-11-03 |
| WO2021199040A1 (en) | 2021-10-07 |
| EP4125948A4 (en) | 2024-05-29 |
| US20230123731A1 (en) | 2023-04-20 |
| CO2022015278A2 (es) | 2022-10-31 |
| MX2022012157A (es) | 2023-02-15 |
| BR112022019609A2 (pt) | 2022-11-29 |
| CN115605220A (zh) | 2023-01-13 |
| IL296735A (en) | 2022-11-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230123731A1 (en) | Mitochondria-enriched genetically engineered cells and uses thereof | |
| KR102073901B1 (ko) | 항 제3자 중심 기억 ｔ 세포, 이의 제조 방법, 및 이식 및 질환 치료에서의 이의 용도 | |
| US20210322485A1 (en) | Mitochondrial augmentation therapy with stem cells enriched with functional mitochondria | |
| KR20210035212A (ko) | 원발성 미토콘드리아 질환을 위한 미토콘드리아 확대 요법 | |
| JP2021532095A (ja) | 肝臓疾患のミトコンドリア増強療法 | |
| JP2021532091A (ja) | 膵臓疾患のミトコンドリア増強療法 | |
| JP2021532094A (ja) | 筋疾患のミトコンドリア増強療法 | |
| US20230149523A1 (en) | Treatment of autoimmunity and transplant rejection through establishment and/or promotion of tolerogenic processes by fibroblast-mediated reprogramming of antigen presenting cells | |
| US20230338427A1 (en) | Mitochondrial augmentation therapy | |
| WO2001032841A9 (en) | Method of in vitro t cell differentiation of cd34+ progenitor cells | |
| WO2023112018A1 (en) | Mitochondrial augmentation therapy for myelodysplastic syndrome | |
| Frizell | Investigating Potential Novel Angiogenic and Immunogenic Properties of Heme Oxygenase-1 |