KR20220161316A - Claudin-18.2를 표적화하는 rna 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 Claudin-18.2 폴리펩타이드를 표적화하는 RNA 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 이러한 RNA 기술은 Claudin-18.2의 발현 양성과 관련있는 질환을 치료하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 RNA 기술은 비-제한적으로, 담관계암, 난소암, 위암, 위식도암, 췌장암 등의 Claudin-18.2 양성 암을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 RNA 기술은 조합 요법 (예를 들어, 화학치료제와 조합하여)으로 사용할 수 있다.
Description
암은 전세계적으로 2번째를 차지하는 주요 사망 요인으로, 2018년에 960만건으로 추산되는 사망의 원인인 것으로 예측된다 (Bray et al. 2018). 일반적으로, 고형 종양이 일단 전이되면, 생식 세포와 일부 유암종과 같은 몇가지 예외를 제외하고는 5년 생존율이 25%를 넘는 경우가 거의 없다.
화학요법, 방사선요법, 수술 및 표적 요법과 같은 통례적인 요법과 최근 면역요법의 진보는 진행된 고형 종양을 가진 환자들에서 예후를 개선하였다. 과거 수년간, 식의약청 (FDA) 및 유럽 의약청 (EMA)에서는 여러가지 암 타입들, 주로 고형 종양을 가진 환자를 치료하는 용도로 체크포인트 저해제 8종을 승인하였다 (CTLA-4 경로를 표적화하는 단일클론 항체 1종, 즉 이필리무맵 (ipilimumab), 및 프로그래밍된 사멸 수용체/리간드 [PD/PD-L1]를 표적화하는 항체 7종, 예를 들어, 아테졸리주맵 (atezolizumab), 아벨루맵 (avelumab), 두르발루맵 (durvalumab), 니볼루맵 (nivolumab), 세미플리맵 (cemiplimab) 및 펨브롤리주맵 (pembrolizumab)). 이러한 승인은 암 치료의 판도를 극적으로 바꾸었다. 그러나, 췌장 선암종 또는 전이성 담관암과 같은 일부 암에는 여전히 면역요법 등의 기존 요법이 아직까지 유용하지 않다.
Al-Batran SE, Schuler MH, Zvirbule Z, Manikhas G, Lordick F, Rusyn A, et al. FAST: An international, multicenter, randomized, phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without IMAB362, a first-in-class CLDN-18.2-targeting antibody, as first-line therapy in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction (GEJ) adenocarcinoma. JCO. 2016; 34(Suppl 18): LBA4001-LBA4001. doi: 10.1200/JCO.2016.34.18_suppl.LBA4001
Al-Batran SE, Zvirbule Z, Lordick F, Thuss-Patience P, Just M, Bitzer M, et al. Phase 1 study of IMAB362 with immunomodulation in patients with advanced gastric cancer. Ann Oncol. 2017a; 28(Suppl 5): 664P. doi: 10.1093/annonc/mdx369.048
Alnylam Pharmaceuticals, I. Patisaran FDA approval (2017).
Bray F, Ferla JME, Soerjomataram I, Siegel RL, Jemal A, (2018): Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. First published: 12 September 2018. https://doi.org/10.3322/caac.21492
Cancer Research UK [Accessed February 18, 2020]. Available from www.cancerresearchuk.org/health-professional/cancer-statistics/statistics-by-cancer-type/pancreatic-cancer#heading-Zero)
Cancer.gov Surveillance epidemiology and end results program. 2015 Seer Data. [Accessed February 20, 2019]. Available from: https://seer.cancer.gov/statfacts/html/livibd.html.
Chapman RW. Risk factors for biliary tract carcinogenesis. Ann Oncol. 1999;10(Suppl 4):S308-S311.
Charbel H, Al-Kawas FH. Cholangiocarcinoma: epidemiology, risk factors, pathogenesis, and diagnosis. Curr Gastroenterol Rep. 2011;13(2):182-187.
Cidon EU. Resectable cholangiocarcinoma: reviewing the role of adjuvant strategies. Clin Med Insights Oncol. 2016;10:CMO.S32821.
Coati I, Lotz G, Fanelli GN, Brignola S, Lanza C, Cappellesso R, et al. Claudin-18 expression in oesophagogastric adenocarcinomas: a tissue microarray study of 523 molecularly profiled cases. Br J Cancer. 2019;121(3):257-63. doi: 10.1038/s41416-019-0508-4
Coelho T, Adams D, Silva A, Lozeron P, Hawkins PN, Mant T, et al. Safety and efficacy of RNAi therapy for transthyretin amyloidosis. N Engl J Med. 2013;369(9):819-29. doi: 10.1056/NEJMoa1208760
Conroy T, Desseigne F, Ychou M, Bouche O, Guimbaud R, et al. FOLFIRINOX versus gemcitabine for metastatic pancreatic cancer. N Engl J Med. 2011;364(19):1817-25.
de Groen PC, Gores GJ, Larusso NF, Gunderson LL, Nagorney DM. Biliary tract cancers. N Engl J Med Overseas Ed. 1999;341(18):1368-1378.
Eisenhauer EA, Therasse P, Bogaerts J, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, et al. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1). Eur J Cancer. 2009;45(2):228-47. doi: 10.1016/j.ejca.2008.10.026
England Public Health. National Cancer Intelligence Network: Rare and Less Common Cancers, Incidence and Mortality in England. London: 2015.
Ferlay J, Parkin DM, Steliarova-Foucher E. (2010): Estimates of cancer incidence and mortality in Europe in 2008. In European journal of cancer (Oxford, England: 1990) 46 (4), pp. 765-781. DOI: 10.1016/j.ejca.2009.12.014.
Fitzgerald K, Frank-Kamenetsky M, Shulga-Morskaya S, Liebow A, Bettencourt BR, Sutherland JE, et al. Effect of an RNA interference drug on the synthesis of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) and the concentration of serum LDL cholesterol in healthy volunteers: a randomised, single-blind, placebo-controlled, phase 1 trial. Lancet. 2014;383(9911):60-8; doi: 10.1016/S0140-6736(13)61914-5
Gillen S, Schuster T, Meyer Zum Buschenfelde C, Friess H, Kleeff J. Preoperative/neoadjuvant therapy in pancreatic cancer: a systematic review and meta-analysis of response and resection percentages. PLoS Med. 2010;7(4):e1000267.
Golan T, Raitses-Gurevich M, Kelley RK, et al. Overall survival and clinical characteristics of BRCA-associated cholangiocarcinoma: a multicenter retrospective study. Oncologist. 2017;22(7):804-810.
Gourgou-Bourgade S, Bascoul-Mollevi C, Desseigne F, Ychou M, Bouche O, et al. Impact of FOLFIRINOX compared with gemcitabine on quality of life in patients with metastatic pancreatic cancer: results from the PRODIGE 4/ACCORD 11 randomized trial. J Clin Oncol. 2013;31(1):23-9.
Heinz C, Mitnacht-Kraus R, Kreuzberg M, Woll S, Sahin U, et al. (2017): 376PPreclinical evaluation of the CLDN-18.2-targeting antibody, IMAB362, in pancreatic carcinoma. In annonc 28 (suppl_5). DOI: 10.1093/annonc/mdx367.010.
Hennedige TP, Neo WT, Venkatesh SK. Imaging of malignancies of the biliary tract-an update. Cancer Imaging. 2014;14(1):1470-7330.
Holtkamp S, Kreiter S, Selmi A, Simon P, Koslowski M, Huber C, et al. Modification of antigen-encoding RNA increases stability, translational efficacy, and T-cell stimulatory capacity of dendritic cells. Blood 2006;108(13):4009-17. doi: 10.1182/blood-2006-04-015024
Jemal A, Bray F, Center MM, Ferlay J, Ward E, et al. (2011): Global cancer statistics. In CA: a cancer journal for clinicians 61 (2), pp. 69-90. DOI: 10.3322/caac.20107.
Karanjawala ZE. Illei PB, Ashfaq R, Infante J, Murphy K, et al. (2008): New markers of pancreatic cancer identified through differential gene expression analyses. Claudin 18 and annexin A8. In The American journal of surgical pathology 32 (2), pp. 188-196. DOI: 10.1097/PAS.0b013e31815701f3.
Khan I, Sarker SJ, Hackshaw A. Smaller sample sizes for phase II trials based on exact tests with actual error rates by trading-off their nominal levels of significance and power. Br J Cancer. 2012;107(11):1801-1809. doi:10.1038/bjc.2012.444
Khan SA, Toledano MB, Taylor-Robinson SD. Epidemiology, risk factors, and pathogenesis of cholangiocarcinoma. HPB. 2008;10(2):77-82.
Khan ZR, Neugut AI, Ahsan H, Chabot JA. Risk factors for biliary tract cancers. Am J Gastroenterol. 1999;94(1):149-152.
Kirstein MM, Vogel A. Epidemiology and risk factors of cholangio-carcinoma. Visc Med. 2016;32(6):395-400.
Kleeff J, Korc M, Apte M, La Vecchia C, Johnson CD et al. Pancreatic Cancer. Nat Rev Dis Primers. 2016;2:16022.
Lee SS, Kim MH, Lee SK, et al. Clinicopathologic review of 58 patients with biliary papillomatosis. Cancer. 2004;100(4):783-793.
Lordick F, Schuler M, Al-Batran SE, Zvirbule, Z, Manikhas G, Rusyn A, et al. Claudin 18.2 - a novel treatment target in the multicenter, randomized, phase II FAST study, a trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without the CLDN-18.2-targeting antibody IMAB362 as 1st line therapy in advanced gastric and gastroesophageal junction (GEJ) cancer. Ann Oncol. 2016;27(suppl_9). doi: 10.1093/annonc/mdw582.001
Manji GA, Olive KP, Saenger YM, Oberstein P. Current and Emerging Therapies in Metastatic Pancreatic Cancer. Clin Cancer Res. 2017;23(7):1670-8.
Micke P, Mattsson JS, Edlund K, Lohr M, Jirstrom K, Berglund A, et al. Aberrantly activated claudin 6 and 18.2 as potential therapy targets in non-small-cell lung cancer. Int J Cancer. 2014;135(9):2206-14. doi: 10.1002/ijc.28857
Mitnacht-Kraus R, Kreuzberg M, Utsch M, Sahin U, Tuereci O. (2017): Preclinical characterization of IMAB362 for the treatment of gastric carcinoma. Poster 378. In Annals of Oncology (28).
Morizane C, Okusaka T, Mizusawa J, Katatyama H, Ueno M, et al. Randomized phase III study of gemcitabine plus S-1 combination therapy versus gemcitabine plus cisplatin combination therapy in advanced biliary tract cancer: a Japan Clinical Oncology Group study (JCOG1113, FUGA-BT) J Clin Oncol. 2018;36(4_suppl):205.
Morlock R, Krukas-Hampel MR, Tureci O. Patient reported outcomes (PRO) results from phase II MONO and FAST zolbetuximab (IMAB362) trials in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction adenocarcinoma (GA/GEJA). Ann Oncol. 2018a;29(suppl_8). doi: 10.1093/annonc/mdy282.042
Morlock R, Turnbull J, Blahut S, Krukas-Hampel MR, Hawryluk E, et al. Health-related quality-of-life (HRQoL) results from the FAST study: A phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine with or without IMAB362 in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction adenocarcinoma. JCO 2018b;36(4_suppl):54. doi: 10.1200/JCO.2018.36.4_suppl.54
Niimi T, Nagashima K, Ward JM, Minoo P, Zimonjic DB, Popescu NC, et al. claudin-18, a novel downstream target gene for the T/EBP/NKX2.1 homeodomain transcription factor, encodes lung- and stomach-specific isoforms through alternative splicing. Mol Cell Biol. 2001;21(21):7380-90. doi: 10.1128/MCB.21.21.7380-7390.2001
Orlandini von Niessen AG, Poleganov MA, Rechner C, Plaschke A, Kranz LM, Fesser S, et al. Improving mRNA-Based therapeutic gene delivery by expression-augmenting 3' UTRs identified by cellular library screening. Mol Ther. 2019;27(4):824-36. doi: 10.1016/j.ymthe.2018.12.011
Parkin DM, Srivatanakul P, Khlat M. Liver cancer in Thailand I. A case-control study of cholangiocarcinoma. Int J Cancer. 1991;48(3):323-328.
Primrose JN, Fox R, Palmer DH, Prasad R, Mirza D, et al. Adjuvant capecitabine for biliary tract cancer: The BILCAP randomized study. American Society of Clinical Oncology. 2017;35:4006-4183.
Quante AS, Ming C, Rottmann M, Engel J, Boeck S, Heinemann V, Westphalen CB, Strauch K. Projections of cancer incidence and cancer-related deaths in Germany by 2020 and 2030. Cancer Med. 2016;5(9):2649-56.
Rahib L, Smith BD, Aizenberg R, Rosenzweig AB, Fleshman JM, Matrisian LM. Projecting cancer incidence and deaths to 2030: the unexpected burden of thyroid, liver, and pancreas cancers in the United States. Cancer Res. 2014;74(11):2913-21.
Randi G, Malvezzi M, Levi F, Ferlay J, Negri E, et al. Epidemiology of biliary tract cancers: an update. Ann Oncol. 2009;20(1):146-159.
Rohde C, Yamaguchi R, Mukhina S, Sahin U, Itoh K, et al. (2019): Comparison of Claudin 18.2 expression in primary tumors and lymph node metastases in Japanese patients with gastric adenocarcinoma. In Japanese journal of clinical oncology. DOI: 10.1093/jjco/hyz068.
Sahin U, Koslowski M, Dhaene K, Usener D, Brandenburg G, Seitz G, et al. Claudin-18 splice variant 2 is a pan-cancer target suitable for therapeutic antibody development. Clin Cancer Res. 2008;14(23):7624-34. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-08-1547
Sahin U, Schuler M, Bauer S, Krilova A, Utsch M, Huber C, et al. First-in-human study of IMAB362, an anti-Claudin 18.2 monoclonal antibody, in patients with advanced gastroesophageal cancer. Ann Oncol. 2017;28(suppl_5). doi: 10.1093/annonc/mdx369.044
Sahin U, Schuler M, Richly H, Bauer S, Krilova A, Dechow T, et al. A phase I dose-escalation study of IMAB362 (Zolbetuximab) in patients with advanced gastric and gastro-oesophageal junction cancer. Eur J Cancer. 2018;100:17-26. doi: 10.1016/j.ejca.2018.05.007
Schuler M, Al-Batran S-E, Zvirbule Z, Manikhas G, Lordick F, Rusyn A, et al. Final results of the FAST study, an international, multicenter, randomized, phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without the CLDN-18.2-targeting antibody IMAB362 as first-line therapy in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction (GEJ) adenocarcinoma. Ann Oncol. 2016;27(Suppl 6):vi208. doi: 10.1093/annonc/mdw371.06
Seufferlein T, Bachet JB, van Cutsem E, Rougier P. Pancreatic adenocarcinoma. ESMO-ESDO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol. 2012;23(Suppl 7):vii33-40. doi: 10.1093/annonc/mds224
Shigeyasu K, Tanakaya K, Nagasaka T, Aoki H, Fujiwara T, et al. Early detection of meta-chronous bile duct cancer in Lynch syndrome: report of a case. Surg Today. 2014;44(10):1975-1981.
Shinozaki A, Shibahara J, Noda N, Tanaka M, Aoki T, Kokudo N, et al. Claudin-18 in biliary neoplasms. Its significance in the classification of intrahepatic cholangiocarcinoma. Virchows Arch. 2011;459(1):73-80. doi: 10.1007/s00428-011-1092-z
Shroff RT, Borad MJ, Xiao L, et al. A phase II trial of gemcitabine (G), cisplatin (C), and nab-paclitaxel (N) in advanced biliary tract cancers (aBTCs) J Clin Oncol. 2017;35(15_suppl):4018.
Shroff RT, Xiao L, Kaseb AO. A phase II trial of gemcitabine (G), cispla-tin (C), and nab-paclitaxel (N) in advanced biliary tract cancers (aBTCs): Updated survival analysis. J Clin Oncol. 2018;36(4_suppl):350.
Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2013. CA Cancer J Clin. 2013;63(1):11-30. doi: 10.3322/caac.21166
Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2018. CA Cancer J Clin. 2018;68(1):7-30.
Stadler CR, Bahr-Mahmud H, Celik L, Hebich B, Roth AS, Roth RP. Elimination of large tumors in mice by mRNA-encoded bispecific antibodies. Nat Med. 2017;23(7):815-7. doi: 10.1038/nm.4356
Tabernero J, Shapiro GI, LoRusso PM, Cervantes A, Schwartz GK, Weiss GJ, Paz-Ares L, et al. First-in-humans trial of an RNA interference therapeutic targeting VEGF and KSP in cancer patients with liver involvement. Cancer Discov. 2013;3(4):406-17. doi: 10.1158/2159-8290.CD-12-0429
Tanaka M, Shibahara J, Fukushima N, Shinozaki A, Umeda M, Ishikawa S, et al. Claudin-18 is an early-stage marker of pancreatic carcinogenesis. In The journal of histochemistry and cytochemistry 2011;59(10):942-52. doi: 10.1369/0022155411420569
Teague A, Lim KH, Wang-Gillam A. Advanced pancreatic adenocarcinoma: a review of current treatment strategies and developing therapies. Ther Adv Med Oncol. 2015;7(2):68-84.
Trarbach T, Schuler M, Zvirbule Z, Lordick F, Krilova A, Helbig U, et al. Efficacy and safety of multiple doses of IMAB362 in patients with advanced gastro-esophageal cancer: results of a phase II study. Ann Oncol. 2014;25(suppl_4)iv218-iv218. doi: 10.1093/annonc/mdu334.21
Treci O, Koslowski M, Helftenbein G, Castle J, Rohde C, Dhaene K, et al. Claudin-18 gene structure, regulation, and expression is evolutionary conserved in mammals. Gene. 2011;481(2):83-92. doi: 10.1016/j.gene.2011.04.007
Tureci O, Sahin U, Schulze-Bergkamen H, Zvirbule Z, Lordick F, Koeberle D, et al. A multicentre, phase 2a study of zolbetuximab as a single agent in patients with recurrent or refractory advanced adenocarcinoma of the stomach or lower oesophagus. The MONO study. Ann Oncol. 2019;30(9):1487-95. doi: 10.1093/annonc/mdz199
Tureci O, Mitnacht-Kraus R, Woll S, Yamada T, Sahin U (2019b): Characterization of zolbetuximab in pancreatic cancer models. In Oncoimmunology 8 (1), pp. e1523096. DOI: 10.1080/2162402X.2018.1523096.
Valle J, Wasan H, Palmer DH, Cunningham D, Anthoney A, et al. Cisplatin plus gemcitabine versus gemcitabine for biliary tract cancer. N Engl J Med. 2010;362(14):1273-1281.
Von Hoff DD, Ervin T, Arena FP, Chiorean EG, Infante J, Moore M, Seay T, Tjulandin SA, Ma WW, Saleh MN, et al. Increased survival in pancreatic cancer with nab-paclitaxel plus gemcitabine. N Engl J Med. 2013;369(18):1691-703.
Vos T, Allen C, Arora M, Barber RM, Bhutta ZA, et al. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 310 diseases and injuries, 1990-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015. Lancet. 2016;388(10053):1545-1602.
Werner J, Combs SE, Springfeld C, Hartwig W, Hackert T, et al. Advanced-stage pancreatic cancer: therapy options. Nat Rev Clin Oncol. 2013;10(6):323-33.
Woll S, Schlitter AM, Dhaene K, Roller M, Esposito I, Sahin U, et al. Claudin 18.2 is a target for IMAB362 antibody in pancreatic neoplasms. Int J Cancer. 2014;134(3):731-9. doi: 10.1002/ijc.28400
예를 들어, 췌장암 및 담관계암 유형과 같은 일부 암들의 나쁜 예후는 부가적인 치료 접근법이 필요하다는 사실을 부각시켜준다. 본 발명은 특히 Claudin-18.2 (CLDN-18.2)가 요법이 표적화할 수 있는 특히 유용한 종양-관련 항원이라는 견해를 제시한다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은 CLDN-18.2의 조직 발현 패턴, 예를 들어 특히 비-암성 조직에서의 제한적인 발현이 본원에 기술된 표적으로서 그 유용성에 기여할 수 있다는 점에 주목한다. 지금까지 임의의 암 적응증에 대해 CLDN-18.2 표적 요법이 승인된 적은 없다.
본 발명은, 일부 구현예에서, CLDN-18.2 표적 요법이, 본원에 기술된 바와 같이, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질의 투여를 통상적으로 수반할 수 있다는, 견해를 추가로 제시한다. 아울러, 본 발명은 이러한 항체 물질을 전달하는 특히 유익한 전략이 항체 물질을 암호화하는 핵산을 투여함으로써 이루어질 수 있다는, 구체적인 견해를 제시한다. 또한 추가적으로, 본 발명은 간 세포를 표적화하는 지질 나노입자에 의한 RNA (예를 들어, 항체 물질을 암호화하는 mRNA와 같은 ssRNA)의 전달이 항체 물질을 전달하는데 특히 유익한 전략일 수 있다는, 구체적인 견해를 제시한다.
당해 기술 분야의 당업자라면 급성장 중인 핵산 치료제, 아울러 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA) 치료제 (예를 들어, mRNA-암호화 단백질 및/또는 사이토카인) 분야를 인지하고 있을 것이다. 본원에 제시된 기술들에 대한 다양한 구현예들은 개발된 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA) 치료 기법 및/또는 전달 시스템의 특별한 특징들을 활용할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 하나 이상의 변형된 뉴클레오티드 (예를 들어, 비-제한적으로, 슈도우리딘), 뉴클레오시드 및/또는 연결 (linkage)을 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하는 변형된 폴리A 서열 (예, 파괴된 폴리A 서열)을 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 3' UTR 서열 2개 이상으로 된 특이적인 조합 (예를 들어, 스플릿 RNA의 아미노 말단 인핸서의 서열 인자와 미토콘드리아에서 암호화된 12S RNA로부터 유래한 서열의 조합)을 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 인간 α-글로빈 mRNA로부터 유래한 5' UTR 서열을 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 5' 캡 유사체, 예를 들어, 전사-동시 캡핑을 위한 5' 캡 유사체를 포함할 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)는 암호화된 항체 물질이 발현 및 분비되도록, 면역원성이 낮은 분비 신호-암호화 영역 (예, 인간 분비 신호-암호화 서열)을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여되는 RNA는 하나 이상의 전달 비히클 (예를 들어, 지질 나노입자 등과 같은 나노입자) 안에 또는 이와 함께 제형화될 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, 투여되는 RNA는 간-표적화 지질 나노입자 (예를 들어, 양이온성 지질 나노입자) 안에 또는 이와 함께 제형화될 수 있다.
본 발명은, (예를 들어, 도 13에 예시된 바와 같이) RiboMab 형태가 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 물질 (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 항체 물질)을 전달하는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)에 특히 유용할 수 있다는, 견해를 추가적으로 제시한다.
본 발명은, 특히, 암, 구체적으로 Claudin-18.2 (CLDN-18.2)의 발현과 관련있는 암을 치료하기 위한 기술 및 식견을 제시한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 췌장암, 위암 또는 위식도암, 담관계암, 난소암 등으로 이루어진 군으로부터 선택되는 암을 치료하기 위한 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 국부적으로 진행된 종양에 대해 요법을 실시하기 위한 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 절제할 수 없는 종양을 치료하기 위한 기술을 제공한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 전이성 종양을 치료하기 위한 기술을 제공한다. 즉, 예를 들어, 일부 구현예에서, 제공된 요법은 암 (예를 들어, 췌장암, 위암 또는 위식도암, 담관계암, 난소암으로부터 선택되거나, 및/또는 췌장, 위, 위식도, 담관 및/또는 난소 종양 중 한가지 이상을 수반하는 암)을 앓고 있거나 또는 암에 걸리기 쉬운 개체 또는 개체 집단에 제공될 수 있으며, 암은 하나 이상의 국부적으로 진행된 종양, 하나 이상의 절제불가한 종양 및/또는 하나 이상의 전이이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
졸베툭시맵 (zolbetuximab)(개발 코드 IMAB362)은 Claudin-18의 이소형 2를 표적화하는 단일클론 항체로서, 위장 선암종 및 췌장 종양의 치료와 관련하여 조사 중에 있다. IMAB362 (NCT01197885)를 이용한 2a상 MONO 실험에서, IMAB362 투약 후 발생하는 이상 사례 ("TEAE")가 환자의 82% (n = 44/54)에서 발생하였으며; 가장 빈번한 TEAE는 구역질 (61%), 구토 (50%) 및 피로 (22%)였다. 3등급 구토는 환자 12명 (22%)에서, 3등급 구역질은 환자 8명 (15%)에서 보고되었다. 이들 환자에는 용량 600 mg/m2가 제공되었다. 이러한 IMAB362 연구에서 관찰된 구역질 및 구토는 IMAB362 주입을 멈추거나 또는 느리게 함으로써 대응하였으며, 이는 AE가 Cmax와 관련되어 있다는 것을 의미한다 (Tureci et al. 2019).
본 발명은, 특히, CLDN-18.2-표적화 물질, 구체적으로 CLDN-18.2-표적화 항체 물질, 특히 IMAB362를 암호화하는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)와 같은 핵산의 투여가, CLDN-18.2-표적 요법에 특히 바람직한 전략일 수 있다는, 견해를 제시한다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, 이러한 전달 방식이 대응되는 (예를 들어, 암호화된) 단백질 (예를 들어, 항체) 물질 자체 투여시 관찰되는 바와 비교해 TEAE의 발생 (예를 들어, 빈도 및/또는 중증도) 저하 및/또는 효능 수준과 TEAE 수준 간의 연관성 개선 (예를 들어, 치료학적 윈도우의 개선)과 더불어, 효과적인 투여와 같은 한가지 이상의 개선을 달성할 수 있음을, 제안한다. 구체적으로, 본 발명은 이러한 개선이 핵산, 특히 이를 암호화하는 RNA(들)(예를 들어, mRNA(들)와 같은 ssRNA(들))의 투여를 통해 IMAB362를 전달함으로써 달성될 수 있음을, 교시한다.
일부 구현예에서, 본 발명은, 특히, 정맥내 (IV) 투여용으로 지질 나노입자 (LNP)와 함께 제형화된 항체 물질 (예를 들어, IMAB362) 또는 이의 기능성 부분을 암호화하는 mRNA(들)가, 예를 들어, 본원에 기술된 CLDN-18.2 표적화 RiboMab에 대해 도 14에서 예시된 바와 같이, 암호화된 항체 물질 (예를 들어, IMAB362)을 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 효율적으로 생산하기 위해 표적 세포 (예를 들어, 간세포)에 의해 흡수될 수 있다는, 견해를 제시한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 CLDN-18.2-표적화 물질로서 RiboMab를 이용한다. 일부 구현예에서, 이러한 RiboMab는, 예를 들어, 면역원성이 최소화되도록 조작되거나 및/또는 지질 나노입자 (LNP) 내에 제형화된, mRNA에 의해 암호화된 항체 물질이다.
아울러, 본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 수여 개체의 면역 시스템을 활용하면서 표적 세포 (예를 들어, 종양 세포)에 대항하여 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및/또는 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 유도하는 능력이 화학요법 및/또는 기타 항암 요법의 세포독성 효과(들)를 높일 수 있다는 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 이러한 조합 요법은 예를 들어 단독으로 투여되는 개별 요법 및/또는 다른 적절한 기준과 비교해 무진행 생존 및/또는 전체 생존을 연장할 수 있다.
특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명에서는 예를 들어 겜시타빈, 옥살리플라틴 (oxaliplatin) 및 5-플루오로우라실과 같은 특정 화학치료제가 췌장 암 세포주에 존재하는 CLDN-18.2 발현 수준을 상향 조절하는 것으로 입증되었으며, 이들 물질이 CLDN-18.2-음성 세포주에서 데노보 발현을 증가시키는 것으로는 관찰되지 않았다. 예를 들어, Tureci et al. (2019) "Characterization of zolbetuximab in pancreatic cancer models" In Oncoimmunology 8 (1), pp. e1523096을 참조한다.
본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법이, 종양 세포에서 (예를 들어, 하나 이상의 화학치료제에 노출됨으로써 발생할 수 있거나 또는 발생된) CLDN-18.2 발현의 활성 및/또는 발현 증가를 (예를 들어, 나타내는 것으로 확인된 및/또는 나타낼 것으로 예상되거나 또는 예측되는) 특징으로 하는 종양(들)(예를 들어, 종양 세포, 이러한 종양(들) 및/또는 종양 세포(들)가 의심되거나 및/또는 검출된 개체 등)에 투여시, 특히 유용하거나 및/또는 효과적일 수 있다는, 견해를 제공해준다. 실제, 특히 본 발명은, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법 (예를 들어, RNA와 같은 핵산, 특히 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 mRNA의 투여)이 하나 이상의 CDLN18.2-강화 물질 (예를 들어, 하나 이상의 특정 화학치료제)과 조합하여 (예를 들어, 투여받았거나 및/또는 투여 중이거나 또는 노출된 적 있는 개체에) 투여할 경우에 상승적인 치료를 제공할 수 있음을, 교시한다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법은 종양 세포에서 CLDN-18.2 발현을 상향 조절하는 것으로 예상되거나 및/또는 입증된 다른 항암제와 조합하여 이용가능할 수 있다.
일부 측면들에서, 본 발명은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 (a) Claudin-18.1 (CLDN18.1) 폴리펩타이드에 비해 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질 ("CLDN-18.2-표적화 항체 물질")을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함하는 하나 이상의 단일 가닥 RNA (ssRNA); 및 (b) 지질 나노입자를 포함하고; 여기서, 하나 이상의 단일 가닥 RNA는 지질 나노입자의 하나 이상 안에 캡슐화된다. 일부 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 CLDN-18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체를 암호화하는 하나 이상의 ssRNA를 포함하거나 및/또는 이를 전달할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 CLDN-18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항원 결합 단편을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA를 포함하거나 및/또는 이를 전달할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 (및 ssRNA, 예를 들어 본원에 기술된 바와 같은 mRNA와 같은 RNA에 암호화될 수 있는) 항체 물질은 CLDN-18.2 폴리펩타이드의 제1 세포외 도메인 (ECD1)에 특이적으로 결합한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 암 세포에서 발현된 ECD1의 에피토프에 특이적으로 결합한다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, mRNA)는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 가변성 중쇄 (VH) 도메인 및 항체 물질의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 암호화한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 이러한 VH 도메인(들) 및 VL 도메인(들)은 단일 ssRNA 구조체에 의해 암호화될 수 있으며; 대안적으로, 일부 구현예에서, 이는 2 이상의 ssRNA 구조체에 의해 분리되어 암호화될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 이용되는 ssRNA는 암호화 영역 2 이상을 포함하며, 암호화 영역은 적어도 항체 물질의 VH 도메인을 암호화하는 중쇄-암호화 영역과 적어도 항체 물질의 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 포함한다. 대안적인 구현예에서, 약학적 조성물은 (i) 적어도 항체 물질의 VH 도메인을 암호화하는 중쇄-암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 (ii) 적어도 항체 물질의 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 중쇄-암호화 영역은 불변성 중쇄 (CH) 도메인을 추가로 암호화할 수 있으며; 및/또는 경쇄-암호화 영역은 불변성 경쇄 (CL) 도메인을 추가로 암호화할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 중쇄-암호화 영역은 면역글로불린 G (IgG) 형태로 항체 물질의 VH 도메인, CH1 도메인, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 암호화할 수 있으며; 및/또는 경쇄-암호화 영역은 IgG 형태로 항체 물질의 VL 도메인과 CL 도메인을 암호화할 수 있다. 일부 구현예에서, IgG 형태의 항체 물질은 IgG1이다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄-암호화 영역은 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 전장 중쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄-암호화 영역은 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 전장 경쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 분비 신호-암호화 영역을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 분비 신호-암호화 영역은 하나 이상의 RNA에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 예를 들어 치료할 개체에 존재하는 세포에 의한 분해시 분비되게 허용하므로, 생물학적 활성의 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 혈장 농도로 도달하게 할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 비-암호화 서열 인자 하나 이상을 (예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해) 포함할 수 있다. 비-암호화 서열 인자에 대한 예로는 3' 비-번역 영역 (UTR), 5' UTR, mRNA의 전사-동시 캡핑용 캡 구조, 폴리 아데닌 (polyA) 꼬리 및 이들의 임의 조합 등이 있으나, 이로 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA(들)(예를 들어, 제1 ssRNA 및/또는 제2 ssRNA)는 각각 독립적으로 5'에서 3' 방향으로, (a) 5' UTR-암호화 영역; (b) 분비 신호-암호화 영역; (c) 중쇄-암호화 영역; (d) 3' UTR-암호화 영역; 및 (e) 폴리A 꼬리-암호화 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 폴리A 꼬리-암호화 영역은 변형된 폴리 A 서열이거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 5' 캡을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 하나 이상의 변형된 리보뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA(들)의 A, U, C 및 G 리보뉴클레오티드 중 하나 이상이 변형된 리보뉴클레오티드로 치환될 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 변형된 리보뉴클레오티드는 슈도우리딘이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
약학적 조성물이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 가변성 중쇄 (VH) 도메인을 암호화하는 제1 ssRNA와 항체 물질의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 암호화하는 제2 ssRNA를 포함하는 일부 구현예에서, 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 약 1.5:1 내지 약 1:1.5의 몰 비율로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 3:1 내지 1:1의 중량 비율로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 약 2:1의 중량 비율로 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물의 RNA 함유물 (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA)은 0.5 mg/mL 내지 1.5 mg/mL 농도로 존재한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 제공되는 지질 나노입자는 간-표적화 지질 나노입자이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 제공되는 지질 나노입자는 양이온성 지질 나노입자이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 제공되는 지질 입자는 평균 크기가 약 50-150 nm일 수 있다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자를 형성하는 지질은 폴리머-접합 지질; 양이온성 지질; 및 중성 지질을 포함한다. 일부 이러한 구현예에서, 폴리머-접합 지질은 전체 지질의 약 1-2.5 mol%로 존재하고; 양이온성 지질은 전체 지질의 35-65 mol%로 존재하고; 중성 지질은 전체 지질의 35-65 mol%로 존재한다.
다양한 지질들 (예를 들어, 폴리머-접합 지질, 양이온성 지질 및 중성 지질 등)이 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 이를 본원에서 이용해 지질 나노입자, 예를 들어, 특정 세포 타입 (예를 들어, 간 세포)을 표적화하는 지질 나노입자를 구축할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 함유되는 폴리머-접합 지질은 PEG-접합 지질 (예를 들어, 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드 또는 이의 유도체)일 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 함유되는 양이온성 지질은 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)비스(노난-9,1-다이일) 비스(2-부틸옥타노에이트) 또는 이의 유도체일 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 함유되는 중성 지질은 인지질 또는 이의 유도체 (예를 들어, 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DPSC)) 및/또는 콜레스테롤이거나 또는 이들을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 하나 이상의 첨가제를, 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 조성물의 안정성을 특정 조건에서 강화할 수 있는 첨가제를 하나 이상 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 약학적 조성물은, 일부 구현예에서 하나 이상의 염 (예를 들어, 소듐 염)을 함유할 수 있는, 동결방지제 (예를 들어, 슈크로스) 및/또는 수성 완충화된 용액을 더 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 CLDN-18.2-표적화 물질 (예를 들어, 항체 물질)을 암호화하는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA)와는 다른 하나 이상의 활성 물질을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 다른 활성 물질은 화학치료제이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 예시적인 화학치료제는 췌장암 치료용으로 지정된 화학치료제이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 생산하기 위해 표적 세포에 흡수될 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 본원에 기술된 약학적 조성물은 종양 세포 (예를 들어, 종양 세포)에 대해 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 유도할 수 있다.
이에, 본 발명의 다른 측면은 본원에 기술된 약학적 조성물을 이용하는 방법에 관한 것이다. 예를 들어, 본원에 제공된 일 측면은 제공된 약학적 조성물을 CLDN-18.2-양성 고형 종양을 앓고 있는 개체에 투여하는 것을 포함한다. CLDN-18.2-양성 고형 종양에 대한 예로는 담관 종양, 위 종양, 위-식도 종양, 난소 종양, 췌장 종양 및 CLDN-18.2 폴리펩타이드를 특정 수준으로 발현 또는 나타내는 종양이 있으나, 이들로 제한되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-양성 종양은, 투여할 개체로부터 유래한 포르말린-고정된, 파라핀-포매된 신생물 조직에서 면역조직화학 분석 평가에 따르면, 종양 세포의 ≥ 50%가 CLDN-18.2 단백질 염색 강도 ≥ 2+인 것으로 특정할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-양성 고형 종양을 앓고 있는 개체는 국소 진행된, 절제 불가한 또는 전이성 종양을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성 고형 종양을 앓고 있는 개체는 자신의 고형 종양이 CLDN-18.2-양성 고형 종양으로 특정될 정도로 CLDN-18.2 수준을 증가시키기에 충분한 전처리를 받았을 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 단일 요법으로서 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 이러한 약학적 조성물과 화학치료제로 구성된 조합 요법의 일부로서 투여할 수 있다. 이에, 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 투여 중인 개체는 화학치료제를 투여받은 개체이다. 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 투여 중인 개체는, 개체가 조합 요법으로서 둘다 투여되도록 화학치료제를 투여받는다. 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물 및 화학치료제는 병행하여 또는 순차적으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 화학치료제는 제공된 약학적 조성물을 투여한 후 (예를 들어, 적어도 4시간 후) 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술들은 CLDN-18.2 양성인 췌장 종양을 치료하는데 유용하다. 제공된 약학적 조성물을 CLDN-18.2-양성 췌장 종양을 앓고 있는 개체에 투여하는 것을 수반하는 일부 구현예에서, 이러한 개체는 단일 요법으로서 또는 제공된 약학적 조성물과 췌장 종양의 치료용으로 지정된 화학치료제를 포함하는 조합 요법의 일부로서 이러한 제공된 조성물을 투여 중일 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 겜시타빈 및/또는 파클리탁셀 (예를 들어, nab-파클리탁셀)이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 폴린산 (FOL), 플루오로우라실 (F), 이리노테칸 (IRIN) 및 옥살리파틴 (OX)을 포함하는 암 약물의 조합인 FOLFIRINOX이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술들은 CLDN-18.2 양성의 담관 종양을 치료하는데 유용하다. 제공된 약학적 조성물을 CLDN-18.2-양성 담관 종양을 앓고 있는 개체에 투여하는 것을 수반하는 일부 구현예에서, 이러한 개체는 단일 요법으로서 또는 제공된 약학적 조성물과 담관 종양의 치료용으로 지정된 화학치료제를 포함하는 조합 요법의 일부로서 이러한 제공된 조성물을 투여 중일 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 겜시타빈 및/또는 시스플라틴이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
본원에 기술된 약학적 조성물 및 방법은 CLDN-18.2 양성의 고형 종양을 앓고 있는 임의 연령의 개체에 적용가능할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성의 고형 종양을 앓고 있는 개체는 성인이다.
본원에 기술된 약학적 조성물은 당해 기술 분야에 공지된 적절한 방법에 의해 이를 필요로 하는 개체에 투여할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물은 CLDN-18.2 양성 고형 종양을 앓고 있는 개체에 정맥내 주사에 의해 투여할 수 있다.
본원에 기술된 약학적 조성물의 투여량은, 예를 들어, 비-제한적으로, 치료할 개체의 체중, 암 유형 및/또는 암 병기, 및/또는 단일 요법 또는 조합 요법 등의 다수의 인자들에 따라 달라질 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 CLDN-18.2 양성의 고형 종양을 앓고 있는 개체에 투여 사이클 1회 이상 (예를 들어, 적어도 2회, 적어도 3회, 적어도 4회, 적어도 5회, 적어도 6회, 적어도 7회, 적어도 8회 또는 그보다 많은 횟수 등)으로 투여된다. 일부 구현예에서, 각 투여 사이클은 3주로 이루어진 투여 사이클일 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 투여 사이클 당 1회 이상으로 투여한다. 일부 구현예에서, 투여 사이클은 정해진 투여 횟수 및/또는 패턴의 투여를 수반하며; 일부 구현예에서, 투여 사이클은 정해진 누적 용량을 예를 들어 특정 기간 동안에 걸쳐, 선택적으로 다회 투여를 통해 투여하는 것을 수반할 수 있으며, 이는 예를 들어 정해진 패턴에 따라 및/또는 정해진 간격(들)으로 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물의 각각의 용량 또는 누적 용량은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 (단일 ssRNA 또는 2 이상의 ssRNA에 의해 암호화된) 하나 이상의 ssRNA를 투여받을 개체에 대해 0.1 mg/체중 kg 내지 5 mg/체중 kg의 범위 내 함량으로 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 제공된 약학적 조성물을 암 개체에 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 암 치료를 위해 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 전달하는 방법에 대한 일부 개선에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 대응되는 (예를 들어, 암호화된) 단백질 (예를 들어, 항원) 물질 자체를 투여하는 경우에 관찰되는 것과 비교해 TEAE (예, 빈도 및/또는 중증도)가 저하되거나 및/또는 효능 수준과 TEAE 수준 간의 연관성이 개선된 (예, 개선된 치료학적 윈도우) 효과적인 투여와 같이, 한가지 이상의 개선을 달성할 수 있다. 구체적으로, 본 발명은 핵산, 특히 이를 암호화하는 RNA(들)(예를 들어, mRNA(들)와 같은 ssRNA(들))의 투여를 통해 IMAB362를 전달함으로써 달성할 수 있다.
CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 생산하는 방법 역시 본 발명의 범위에 속한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 생산 방법은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함하는 하나 이상의 ssRNA를 포함하는 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)을 세포에 투여하여, 그 세포가 상기한 ssRNA(들)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 발현 및 분비하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 투여되거나 또는 표적이 되는 세포는 간 세포이거나 또는 간 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 세포는 세포 배양물에 존재한다.
일부 구현예에서, 세포는 개체에 존재한다. 일부 이러한 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 필요한 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은, CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 생산되도록, 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료학적으로 적절한 혈장 농도는 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC)을 통해 암 세포의 사멸을 매개하기에 충분한 농도이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 치료학적으로 적절한 혈장 농도는 0.3-28 ㎍/mL이다.
특히, 본 발명은 또한 ssRNA가 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화하는, ssRNA 또는 이의 조성물의 한가지 이상의 특징을 특정화하는 방법을 제공한다. 일부 구현예에서, 그 방법은 세포에 도입된 mRNA 하나 이상으로부터 발현된 항체 물질의 특징 하나 이상을 확인하는 것을 포함하며, 이러한 mRNA 하나 이상은 Claudin-18.1 폴리펩타이드에 비해 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질을 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 적어도 하나 이상의 ssRNA의 특징을 포함하며, 여기서 이러한 하나 이상의 특징은 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) 항체 물질의 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성; (iii) ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 능력; 및 (iv) 보체 의존적인 세포독성 (CDC)을 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 능력을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 방법을 제공한다. 이러한 방법은 (a) 세포를 (CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화하는) 본원에 기술된 하나 이상의 조성물 또는 약학적 조성물과 접촉시키는 단계; 및 세포에 의해 생산된 항체 물질을 검출하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 세포는 간 세포이거나 또는 간 세포를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 이러한 방법은 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 것을 더 포함할 수 있으며, 여기서 이러한 하나 이상의 특징은 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) 항체 물질의 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 결합 특이성; (iii) ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 능력; 및 (iv) 보체 의존적인 세포독성 (CDC)을 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 능력을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 특징을 CLDN-18.2-를 표적화하는 기준 항체의 특징과 비교하는 것을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 역치 수준 이상의 항체 물질의 단백질 발현 수준을 평가하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 역치 수준은 치료학적으로 적절한 혈장 농도에 해당한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 항체 물질의 결합을 분석하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 결합 분석은 CLDN18.1 폴리펩타이드에 대한 결합과 비교해 CLDN18.2 폴리펩타이드에 대한 결합을 항체 물질에서 확인하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 결합 분석은 적어도 CLDN-18.2-표적화 기준 항체의 프로파일에 필적하는 항체 물질의 결합 선호 프로파일을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 기준 항체는 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵이다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법은, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질이 다음과 같은 특징들을 포함한다면, 그 항체 물질을 CLDN-18.2-표적화 항체 물질로서 특정하는 것을 추가로 포함할 수 있다: (a) 역치 수준 이상의 세포에 의해 발현된 항체 물질의 단백질 수준; (b) CLDN18.1 대비 CLDN18.2에 대한 항체 물질의 선호적인 결합성; 및 (c) ADCC 및/또는 CDC에 의해 매개되는 50% 이상의 종양 세포 (예를 들어, 암 세포) 사멸율.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법은, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질이, 검사 특징상 적어도 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵에 상응한다면, 이를 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵-등가 항체로서 특정하는 것을 더 포함할 수 있다.
본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계를 수반하는 일부 구현예에서, 이러한 단계는 하기 특징들 중 하나 이상을 확인하는 것을 포함할 수 있다:
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접촉 또는 투여 후 48시간에 분석하였을 때, 하나 이상의 ssRNA에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 세포가 발현하는지 여부;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이 CLDN18.1 폴리펩타이드와 비교해 CLDN18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는지 여부;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이 참조물질인 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체를 이용한 유세포 측정 결합 분석에서 관찰되는 바와 같이 CLDN-18.2에 대해 상응하는 표적 특이성을 나타내는지의 여부;
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면역 작동자 세포 (예, PBMC 세포) 및 CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 항체 물질의 존재 하에 인큐베이션한 후 48시간에 분석하였을 때, 대조군 세포는 세포용해되지 않고 CLDN-18.2 양성 세포만 세포용해되는지 여부;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이 참조물질인 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체에서 동일한 농도에서 관찰되는 바와 적어도 비슷한 표적화된 CLDN-18.2 양성 세포의 ADCC 프로파일을 나타내는지 여부; 및
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CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 항체 물질의 존재 하에 인간 혈청과 함께 인큐베이션한 후 2시간 경과시 분석하였을 때, 대조군 세포는 용해되지 않고 CLDN-18.2 양성 세포만 세포용해되는지 여부.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법에서 사용되는 세포는 생체내, 예를 들어, 개체 (예를 들어, 인간이 아닌 포유류 개체와 같은 포유류 개체, 예컨대 마우스 또는 원숭이 개체)에 존재한다. 일부 이러한 구현예들에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 방법은 상기한 개체에서 하나 이상의 조직에서 항체 수준을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 특정화 방법은, 만일 이러한 조성물 또는 약학적 조성물이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질로서 특정된다면, 본원에 기술된 조성물 또는 약학적 조성물을 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식편을 각각 보유한 동물 개체 군에 투여하여, 항-종양 활성을 확인하는 것을 추가로 포함할 수 있다.
또한, 하기 단계들을 포함하는 제조 방법 역시 본 발명의 범위에 포함된다:
(A) 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화하는 ssRNA 또는 이의 조성물의 특징 하나 이상을 확인하는 단계로서, 하나 이상의 특징이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단계:
(i) ssRNA의 길이 및/또는 서열;
(ii) ssRNA의 온전성;
(iii) ssRNA의 하나 이상의 화학적 모이어티의 존재 및/또는 위치;
(iv) ssRNA가 세포에 도입되었을 때 항체 물질의 발현 정도;
(v) ssRNA 또는 이의 조성물의 안정성;
(vi) ssRNA가 도입된 유기체로부터 유래한 생물학적 샘플에서 항체 물질의 수준;
(vii) ssRNA로부터 발현된 항체 물질의, 선택적으로 CLDN-18.2에 대한, 선택적으로 CLDN18.1 대비, 결합 특이성;
(viii) ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 효능;
(ix) 보체 의존적인 세포독성 (CDC)을 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 항체 물질의 효능;
(x) 조성물 내 지질 실체 및 양/농도;
(xi) 조성물 내 지질 나노입자의 크기;
(xii) 조성물 내 지질 나노입자의 다분산성;
(xiii) 조성물 내 ssRNA의 양/농도;
(xiv) 지질 나노입자 내 ssRNA의 캡슐화 정도; 및
(xv) 이들의 조합;
(B) ssRNA 또는 이의 조성물의 상기한 특징 하나 이상을 적절한 기준 표준과 비교하는 단계; 및
(C) (i) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준과 일치하거나 또는 능가하는 것으로 확인된다면, ssRNA 또는 이의 조성물에 대해 제조 및/또는 유통하는 하나 이상의 추가적인 단계를 지정하는 단계; 또는
(ii) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준과 일치하거나 능가하지 않는 것으로 확인된다면, 대안적인 조치를 행하는 단계.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 평가하고 ssRNA의 하나 이상의 특징이 적절한 기준 표준과 일치하거나 또는 능가할 경우, 이러한 ssRNA를 제형화 용도로 지정하고, 예를 들어, 일부 구현예에서 본원에 기술된 지질 입자를 이용한 제형화를 수반한다.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 조성물을 평가하고 조성물의 하나 이상의 특징이 적절한 기준 표준과 일치하거나 또는 능가할 경우, 이러한 조성물은 조성물의 출시 및/또는 유통하도록 할당된다.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)가 제형화로 지정되거나, 및/또는 ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 조성물이 조성물의 출시 및/또는 유통하도록 지정되는 경우에, 이러한 방법은 제형 및/또는 조성물을 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식편 종양을 각각 가진 동물 개체 군에 투여하여, 항-종양 활성을 확인하는 것을 더 포함할 수 있다.
본 발명은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물의 투여 용법을 결정하는 방법을 또한 제공한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 방법은 (A) 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)을 CLDN-18.2 양성 고형 종양을 앓고 있는 개체에 미리 정해진 투여 용법으로 투여하는 단계; (B) 소정의 기간 동안 주기적으로 개체의 종양 크기를 모니터링 및 측정하는 단계; (C) 종양 크기 측정 결과(들)에 기초하여 투여 용법을 평가하는 단계를 포함한다. 예를 들어, 용량 및/또는 투여 빈도는, 만일 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지 않다면, 높일 수 있거나; 또는 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지만 부작용 (예를 들어, 독성 효과)이 개체에서 나타난다면, 용량 및/또는 투여 빈도를 줄일 수 있다. 만일 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 부작용 (예를 들어, 독성 효과)이 개체에서 없다면, 투여 용법을 변경없이 유지한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물의 투여 용법을 결정하는 이러한 방법은 각각 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 가진 동물 개체 군 (예를 들어, 인간이 아닌 포유류 개체)에서 수행할 수 있다. 일부 이러한 구현예에서, 동물 개체의 30% 미만이 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소를 나타내거나, 및/또는 동물 개체에 의해 나타나는 종양 크기의 감소 정도가 치료학적으로 적절하지 않다면, 용량 및/또는 투여 빈도를 높일 수 있거나, 또는 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지만 동물 개체의 적어도 30%에서 유의한 부작용 (예를 들어, 독성 효과)이 발생한다면, 용량 및/또는 투여 빈도를 줄일 수 있다. 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 동물 개체에서 유의한 부작용 (예를 들어, 독성 효과)이 발생하지 않는다면, 투여 용법은 수정하지 않는다.
도 1은 CLDN-18.2-표적화 항체의 중쇄 및 경쇄를 각각 암호화하는 RNA 2종에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 (RiboMab01)가 일차 인간 간세포 및 CHO-K1 세포에서 발현됨을 보여준다. (패널 A) 일차 인간 간세포에 CLDN-18.2-표적화 항체 (RB_RMAB01)의 중쇄 및 경쇄를 각각 암호화하는 RNA 2종 이상을 포함하는 조성물을 0.22-55.50 ㎍/mL로 리포펙션하였다. (좌측) 형질감염 후 48시간 경과 시점에 RiboMab01 농도에 대한 ELISA 분석. (우측) 지정된 리포펙션으로부터 유래한 세포 배양 상층액에 대한 웨스턴 블롯 분석. 웨스턴 블롯 분석의 참조물질로서 이용한 정제한 재조합 IMAB362. 분석은 비-환원 조건에서 HRP-접합된 항-인간 항체를 이용해 수행하였다. Fcγ-단편 특이 항체와 anti-카파 경쇄 특이 항체의 혼합물을 전장 IgG, 유리형 중쇄 (HC) 및 유리형 경쇄 (LC)를 검출하기 위해 사용하였다. 형질감염되지 않은 일차 인간 간세포의 상층액을 모의 대조군으로 이용하였다. (패널 B) CHO-K1 세포에 2.00-182.00 ng/mL RB_RMAB01을 리포펙션하였다. 형질감염 후 48시간 경과시 ELISA를 통해 결정한 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 2는 RiboMab01이 CLDN-18.2에 특이적으로 표적 결합함을 보여준다. RiboMab01의 CLDN-18.2에 대한 표적화된 결합은 인간 IgG의 F(ab')2 (H+L)를 겨냥하는 형광 표지된 항체를 이용해 가시화한 유세포 측정 결합 분석으로 확인하였다. RiboMab01-함유 CHO-K1 세포 배양 상층액 (패널 A 및 B, 좌측) 또는 IMAB362 참조물질 단백질 (패널 A 및 B, 우측)의 희석물을 5 x 105 (패널 A) CLDN-18.2+ 또는 (패널 B) CLDN18.1+ HEK293 형질감염주와 인큐베이션하였다.
도 3은 시험관내 발현된 RiboMab01에 의해 매개되는 표적 특이적인 우수한 세포성 세포독성을 보여준다. RB_RMAB01으로 리포펙션된 CHO-K1으로부터 유래한 RiboMab01-함유 세포 배양물 상층액에 대해 (패널 A) ADCC 및 (패널 B) CDC 분석을 수행하였다. (패널 A) ADCC 분석을 위해, CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 MDA-MB-231 세포는 대조군으로 사용하였다. 건강한 공여자 3명의 인간 PBMC를 작동자 세포로 이용하였다 (E:T 비율 30:1). 표적 또는 대조군 세포 및 작동자 세포는 지정된 RiboMab01 및 IMAB362 기준 단백질 농도와 함께 48시간 동안 인큐베이션하였다. 루시퍼라제-기반의 분석으로 확인한 특이적인 세포 용해를 도시한다. (패널 B) CDC 분석을 위해, CLDN-18.2+ CHO-K1 형질감염주 (실선)는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 CHO-K1 세포 (점선)는 대조군 세포로 이용하였다. 표적 및 대조군 세포는 인간 혈청 및 RiboMab01과 지정된 농도로 2시간 동안 함께 인큐베이션하였다. 루시퍼라제-기반의 분석으로 측정한 CDC를 도시한다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 4는 마우스에서 생성된 RiboMab01에 의해 매개되는 특이적인 종양 세포 용해를 도시한다. RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 및 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 또는 IMAB362 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 5회 반복 주사한 마우스의 혈장을, 5차 주사 후 24시간 경과 시점에 샘플로 채취하고, 루시퍼라제-기반의 생체외 ADCC 분석으로 수행하였다. IMAB362가 접촉된 비-처리 마우스의 혈장을 분석의 참조물질로 사용하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주는 표적으로, 인간 PBMC는 작동자 세포로 사용하였다. (패널 A) 혈장 1%와 48시간 인큐베이션한 후 RiboMab01 매개 NUG-C4 세포의 ADCC를 나타낸다. (패널 B) 표적-음성 MDA-MB-231 세포에서는 비-특이적인 세포용해가 이루어지지 않는다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 5는 인간이 아닌 영장류에 의해 발현된 RiboMab01이 용량-의존적인 ADCC를 매개함을 보여준다. 인간이 아닌 영장류 (NHP)에 RB_RMAB01을 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg 용량으로 매주 1회로 3회 반복 투여하였다. 1차 주사 후 24시간 (검정색 막대) 및 168시간 (백색 막대) 경과시 채취한 모든 원숭이들의 RiboMab01-함유 혈청에 대해 루시퍼라제-기반의 생체 외 ADCC 분석을 수행하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주를 종양 세포로 사용하였다. 건강한 공여자 2명에서 취한 PBMC (공여자 1 24시간, 공여자 2 168시간)를 작동자 세포로 사용하였다. (패널 A) 48시간 인큐베이션한 후 NUG-C4 세포의 RiboMab01-매개 ADCC를 도시한다. (패널 B) 표적-음성 MDA-MB-231 세포에서의 비-특이적인 세포용해를 보여준다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3). (패널 C) 3차 투여 후 48시간 경과 시점에 채취한 NHP 14번 혈청 (1.6 mg/kg RB_RMAB01, RiboMab01 혈청 농도 232 ㎍/mL)을 루시퍼라제-기반의 생체 외 ADCC 분석에 사용하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주 (실선)는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 MDA-MB-231 세포 (점선)은 대조군 세포로 사용하였다. 건강한 공여자의 인간 PBMC는 작동자 세포로 사용하였다. RiboMab01-함유 혈청 (적색 실선) 또는 재조합 - IMAB362 기준 단백질 (검정색 실선) - 각각 EC50 66 pM 및 151 pM - 에 의해 매개된 NUG-C4 세포의 ADCC를 도시한다. 적색 점선 및 검정색 점선은 MDA-MB-231 대조군 세포에서의 약한 비-특이적인 세포용해를 나타낸다. 인큐베이션 시간은 48시간이었다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 6은 전신 이용가능한 RiboMab01이 생체내 종양 증식 저해를 매개함을 보여준다. 피하 CLDN-18.2+ NCI-N87 이종이식 종양을 가진 마우스에 RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 및 30 ㎍ (~1.20 mg/kg), IMAB362 참조 단백질 800 ㎍ (~32 mg/kg), 루시퍼라제 mRNA 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 또는 식염수 단독만 종양 세포 접종 후 검사일 15, 22, 29, 36, 43 및 50일에 IV 주사로 투여하였다. 처리 군 및 대조군의 종양 증식 중앙값을 나타낸다. 점선은 주사를 나타낸다. 유의성은 2원식 ANOVA에 의해 계산하였다. NS는 유의하지 않음을 나타낸다.
도 7은 1회 투여 후 마우스 혈청에서의 RiboMab01의 농도-시간 프로파일을 보여준다. Balb/cJRj 마우스에 RB_RMAB01 약물 산물 1 ㎍ (~0.040 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 및 IMAB362 참조 단백질 40 ㎍ (~1.60 mg/kg)을 1회 IV 주사하였다. 투여 후 6시간, 24시간, 96시간, 168시간, 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장 내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 8은 1회 투여 후 랫 혈청에서의 RiboMab01의 농도-시간 프로파일을 보여준다. RjHan:Wister 랫에 RB_RMAB01 0.04, 0.10, 0.40 또는 1.20 mg/kg 및 IMAB362 참조 단백질 3.60 mg/kg을 1회 IV 주사하였다. 투여 후 2시간, 6시간, 6시간, 8시간, 10시간, 22시간, 24시간, 27시간, 30시간, 48시간, 72시간, 96시간, 168시간, 216시간, 264시간 및 336시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장 내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 9는 매주 주사 후 마우스에서 RB_RMAB01의 발현 카이네틱스를 보여준다. Balb/cJRj 마우스에 RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 및 IMAB362 참조 단백질 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 검사일 1, 8, 15, 21 및 29일에 IV 주사로 투여하였다. 투여 전 24시간 및 투여 후 24시간 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 점선은 주사를 표시한다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 10은 NHP에 반복 투여 후 RB_RMAB01의 발현 카이네틱스를 도시한다. NHP에 RB_RMAB01 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg을 실험일 1, 8 및 15에 IV 주사로 투여하였다. 1차 투여 및 3차 투여 후 6시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간 및 168시간 경과 시점과, 2차 투여 후 48시간, 72시간 및 168시간 경과 시점, 그리고 3차 투여 후 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 11은 LNP 제형의 mRNA의 생체내 간 표적화를 보여준다. 마우스에 LNP 제형의 반딧불이 루시퍼라제 mRNA를 IV 주사로 1회 투여하였다. 투여 후 6시간, 24시간, 48시간, 72시간 및 144시간 경과 시점에 생발광을 모니터링하였다. (패널 A) 투여 후 6시간 경과 시점에 개개 마우스의 복부 위치 (좌측)(n=5)에서, 그리고 1번 및 2번 마우스의 하나의 장기 (우측)에서의 생발광 사진을 도시한다. (패널 B) 루시퍼라제 신호의 정량화 (광자/초)를 모든 분석 시점에 나타낸다 (n=5 또는 3, 평균). LN은 림프절이다.
도 12는 다양한 항체 물질 형태를 암호화하는데 유용한 RNA 기술("RiboMab") 및 이의 제형뿐 아니라 그 활용에 대한 예시적인 구현예들을 예시한다. (패널 A) RiboMab® 플랫폼은 예를 들어 비-제한적으로 단일 특이성 항체 IgG, 이중 특이성 항체 bi-(scFv)2 및 2중 특이성 항체 Fab-(svFv)2 등의 다양한 항체 형태를 암호화하는 RNA 구조체를 제공하기 위해 활용가능하다. (패널 B) 일부 구현예에서, IgG와 같은 치료 항체는 변형된 리보뉴클레오티드 (예를 들어, 우리딘이 슈도우리딘으로 치환) mRNA를 포함하는 정제된 mRNA에 의해 암호화되고, 지질 나노입자 (mRNA/LNP) 안에 캡슐화될 수 있다. 이러한 mRNA 구조체는 (예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해) 하나 이상의 비-암호화 서열 인자를 추가로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 비-암호화 서열에 대한 예로는 캡 구조, 5' UTR, 3' UTR, 폴리아데닐 꼬리 및 이들의 임의 조합 등이 있으나, 이들로 한정되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자는 접합 지질 (예를 들어, PEG-접한된 지질), 양이온성 지질 및 중성 헬퍼 지질을 포함할 수 있다. 이러한 mRNA/LNP 약물 제품 제형은 mRNA가 생체내 번역되어 항체를 발현하도록 개체에 생체내 투여할 수 있다. (패널 C) 본원에 기술된 mRNA/LNP 약물 제품 제형이 투여된 환자 자신의 신체 세포는 mRNA에 의해 암호화된 활성 약물을 생산할 수 있다 (예를 들어, IgG RiboMab). 예를 들어, 일부 구현예에서, IV 주사하면, 항체-암호화 mRNA/LNP가 간 세포에 내재화되고 번역되어, 생물학적으로 활성인 RiboMab가 전신 혈장 농도로 생산된다. 약어: A30L70, 폴리(A) 꼬리, 30번 위치에 링커가 삽입된 아데노신 100개; bi, 이중 특이성; C, C-말단; CDS, 암호화 서열; CH, 중쇄 불변 도메인; CL, 경쇄 불변 도메인; Fab, 항원 결합 단편; IgG, 면역글로불린 G; LNP, 지질 나노입자; m1Ψ, 1-메틸슈도우리딘; N, N-말단; scFv, 단쇄 가변성 단편; TAA, 종양-관련 항원; UTR, 비-번역 영역; VH, 중쇄 가변 도메인; VL, 경쇄 가변 도메인.
도 13은 항체 물질의 중쇄 (HC) 및 경쇄 (LC)를 각각 암호화하는 예시적인 RNA 구조체들을 대략적으로 도시한 것이다. 도 13에 나타낸 바와 같이, 이러한 HC-암호화 RNA 구조체 및 LC-암호화 RNA 구조체는 RNA 조성물 (RB_RMAB01)을 구성하며, 일부 구현예에서 지질 나노입자 안에 제형화되어 RNA/LNP 약물 제품 제형을 형성할 수 있다. 약어: Poly A, 폴리 아데닌 꼬리; CH, 중쇄 불변 도메인; CL, 경쇄 불변 도메인; Sec, 분비 신호; UTR, 비-번역 영역; VH, 중쇄 가변 도메인; VL, 경쇄 가변 도메인.
도 14는 시노몰구스 원숭이에서 tmax에서 RB_RMAB01의 용량-노출 상관성을 나타낸 그래프이다. 시노몰구스 원숭이 (n=3)에 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg으로 RB_RMAB01을 IV 주사로 투여하였다. Cmax에서 RLISA에 의해 측정한 혈장내 용량-의존적인 RiboMab01 농도 (평균, n=3)를 도시한다. 녹색 선은 인간 개체에 투여할 수 있는 용량 및 이의 대응되는 예상되는 혈청내 농도를 표시한다.
도 15는 항체의 중쇄 (HC)를 암호화하는 제1 RNA와 항체의 경쇄 (LC)를 암호화하는 제2 RNA를 포함하는 예시적인 RNA 혼합물에 대한 전기영동 그래프의 예이다. 전기영동 그래프는 LC 및 HC 각각에 대해 피크 2개를 나타낸다. A: 피크 하 면적, h: 피크의 높이.
도 2는 RiboMab01이 CLDN-18.2에 특이적으로 표적 결합함을 보여준다. RiboMab01의 CLDN-18.2에 대한 표적화된 결합은 인간 IgG의 F(ab')2 (H+L)를 겨냥하는 형광 표지된 항체를 이용해 가시화한 유세포 측정 결합 분석으로 확인하였다. RiboMab01-함유 CHO-K1 세포 배양 상층액 (패널 A 및 B, 좌측) 또는 IMAB362 참조물질 단백질 (패널 A 및 B, 우측)의 희석물을 5 x 105 (패널 A) CLDN-18.2+ 또는 (패널 B) CLDN18.1+ HEK293 형질감염주와 인큐베이션하였다.
도 3은 시험관내 발현된 RiboMab01에 의해 매개되는 표적 특이적인 우수한 세포성 세포독성을 보여준다. RB_RMAB01으로 리포펙션된 CHO-K1으로부터 유래한 RiboMab01-함유 세포 배양물 상층액에 대해 (패널 A) ADCC 및 (패널 B) CDC 분석을 수행하였다. (패널 A) ADCC 분석을 위해, CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 MDA-MB-231 세포는 대조군으로 사용하였다. 건강한 공여자 3명의 인간 PBMC를 작동자 세포로 이용하였다 (E:T 비율 30:1). 표적 또는 대조군 세포 및 작동자 세포는 지정된 RiboMab01 및 IMAB362 기준 단백질 농도와 함께 48시간 동안 인큐베이션하였다. 루시퍼라제-기반의 분석으로 확인한 특이적인 세포 용해를 도시한다. (패널 B) CDC 분석을 위해, CLDN-18.2+ CHO-K1 형질감염주 (실선)는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 CHO-K1 세포 (점선)는 대조군 세포로 이용하였다. 표적 및 대조군 세포는 인간 혈청 및 RiboMab01과 지정된 농도로 2시간 동안 함께 인큐베이션하였다. 루시퍼라제-기반의 분석으로 측정한 CDC를 도시한다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 4는 마우스에서 생성된 RiboMab01에 의해 매개되는 특이적인 종양 세포 용해를 도시한다. RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 및 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 또는 IMAB362 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 5회 반복 주사한 마우스의 혈장을, 5차 주사 후 24시간 경과 시점에 샘플로 채취하고, 루시퍼라제-기반의 생체외 ADCC 분석으로 수행하였다. IMAB362가 접촉된 비-처리 마우스의 혈장을 분석의 참조물질로 사용하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주는 표적으로, 인간 PBMC는 작동자 세포로 사용하였다. (패널 A) 혈장 1%와 48시간 인큐베이션한 후 RiboMab01 매개 NUG-C4 세포의 ADCC를 나타낸다. (패널 B) 표적-음성 MDA-MB-231 세포에서는 비-특이적인 세포용해가 이루어지지 않는다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 5는 인간이 아닌 영장류에 의해 발현된 RiboMab01이 용량-의존적인 ADCC를 매개함을 보여준다. 인간이 아닌 영장류 (NHP)에 RB_RMAB01을 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg 용량으로 매주 1회로 3회 반복 투여하였다. 1차 주사 후 24시간 (검정색 막대) 및 168시간 (백색 막대) 경과시 채취한 모든 원숭이들의 RiboMab01-함유 혈청에 대해 루시퍼라제-기반의 생체 외 ADCC 분석을 수행하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주를 종양 세포로 사용하였다. 건강한 공여자 2명에서 취한 PBMC (공여자 1 24시간, 공여자 2 168시간)를 작동자 세포로 사용하였다. (패널 A) 48시간 인큐베이션한 후 NUG-C4 세포의 RiboMab01-매개 ADCC를 도시한다. (패널 B) 표적-음성 MDA-MB-231 세포에서의 비-특이적인 세포용해를 보여준다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3). (패널 C) 3차 투여 후 48시간 경과 시점에 채취한 NHP 14번 혈청 (1.6 mg/kg RB_RMAB01, RiboMab01 혈청 농도 232 ㎍/mL)을 루시퍼라제-기반의 생체 외 ADCC 분석에 사용하였다. CLDN-18.2+ NUG-C4 형질감염주 (실선)는 종양 세포로, CLDN-18.2-음성 MDA-MB-231 세포 (점선)은 대조군 세포로 사용하였다. 건강한 공여자의 인간 PBMC는 작동자 세포로 사용하였다. RiboMab01-함유 혈청 (적색 실선) 또는 재조합 - IMAB362 기준 단백질 (검정색 실선) - 각각 EC50 66 pM 및 151 pM - 에 의해 매개된 NUG-C4 세포의 ADCC를 도시한다. 적색 점선 및 검정색 점선은 MDA-MB-231 대조군 세포에서의 약한 비-특이적인 세포용해를 나타낸다. 인큐베이션 시간은 48시간이었다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 6은 전신 이용가능한 RiboMab01이 생체내 종양 증식 저해를 매개함을 보여준다. 피하 CLDN-18.2+ NCI-N87 이종이식 종양을 가진 마우스에 RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 및 30 ㎍ (~1.20 mg/kg), IMAB362 참조 단백질 800 ㎍ (~32 mg/kg), 루시퍼라제 mRNA 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 또는 식염수 단독만 종양 세포 접종 후 검사일 15, 22, 29, 36, 43 및 50일에 IV 주사로 투여하였다. 처리 군 및 대조군의 종양 증식 중앙값을 나타낸다. 점선은 주사를 나타낸다. 유의성은 2원식 ANOVA에 의해 계산하였다. NS는 유의하지 않음을 나타낸다.
도 7은 1회 투여 후 마우스 혈청에서의 RiboMab01의 농도-시간 프로파일을 보여준다. Balb/cJRj 마우스에 RB_RMAB01 약물 산물 1 ㎍ (~0.040 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 및 IMAB362 참조 단백질 40 ㎍ (~1.60 mg/kg)을 1회 IV 주사하였다. 투여 후 6시간, 24시간, 96시간, 168시간, 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장 내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 8은 1회 투여 후 랫 혈청에서의 RiboMab01의 농도-시간 프로파일을 보여준다. RjHan:Wister 랫에 RB_RMAB01 0.04, 0.10, 0.40 또는 1.20 mg/kg 및 IMAB362 참조 단백질 3.60 mg/kg을 1회 IV 주사하였다. 투여 후 2시간, 6시간, 6시간, 8시간, 10시간, 22시간, 24시간, 27시간, 30시간, 48시간, 72시간, 96시간, 168시간, 216시간, 264시간 및 336시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장 내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 9는 매주 주사 후 마우스에서 RB_RMAB01의 발현 카이네틱스를 보여준다. Balb/cJRj 마우스에 RB_RMAB01 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 및 IMAB362 참조 단백질 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 검사일 1, 8, 15, 21 및 29일에 IV 주사로 투여하였다. 투여 전 24시간 및 투여 후 24시간 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 점선은 주사를 표시한다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 10은 NHP에 반복 투여 후 RB_RMAB01의 발현 카이네틱스를 도시한다. NHP에 RB_RMAB01 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg을 실험일 1, 8 및 15에 IV 주사로 투여하였다. 1차 투여 및 3차 투여 후 6시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간 및 168시간 경과 시점과, 2차 투여 후 48시간, 72시간 및 168시간 경과 시점, 그리고 3차 투여 후 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈장에서 샘플을 채취하였다. ELISA에 의해 측정한 혈장내 RiboMab01 농도를 나타낸다. 오차 막대는 평균의 표준오차이다 (n=3).
도 11은 LNP 제형의 mRNA의 생체내 간 표적화를 보여준다. 마우스에 LNP 제형의 반딧불이 루시퍼라제 mRNA를 IV 주사로 1회 투여하였다. 투여 후 6시간, 24시간, 48시간, 72시간 및 144시간 경과 시점에 생발광을 모니터링하였다. (패널 A) 투여 후 6시간 경과 시점에 개개 마우스의 복부 위치 (좌측)(n=5)에서, 그리고 1번 및 2번 마우스의 하나의 장기 (우측)에서의 생발광 사진을 도시한다. (패널 B) 루시퍼라제 신호의 정량화 (광자/초)를 모든 분석 시점에 나타낸다 (n=5 또는 3, 평균). LN은 림프절이다.
도 12는 다양한 항체 물질 형태를 암호화하는데 유용한 RNA 기술("RiboMab") 및 이의 제형뿐 아니라 그 활용에 대한 예시적인 구현예들을 예시한다. (패널 A) RiboMab® 플랫폼은 예를 들어 비-제한적으로 단일 특이성 항체 IgG, 이중 특이성 항체 bi-(scFv)2 및 2중 특이성 항체 Fab-(svFv)2 등의 다양한 항체 형태를 암호화하는 RNA 구조체를 제공하기 위해 활용가능하다. (패널 B) 일부 구현예에서, IgG와 같은 치료 항체는 변형된 리보뉴클레오티드 (예를 들어, 우리딘이 슈도우리딘으로 치환) mRNA를 포함하는 정제된 mRNA에 의해 암호화되고, 지질 나노입자 (mRNA/LNP) 안에 캡슐화될 수 있다. 이러한 mRNA 구조체는 (예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해) 하나 이상의 비-암호화 서열 인자를 추가로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 비-암호화 서열에 대한 예로는 캡 구조, 5' UTR, 3' UTR, 폴리아데닐 꼬리 및 이들의 임의 조합 등이 있으나, 이들로 한정되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자는 접합 지질 (예를 들어, PEG-접한된 지질), 양이온성 지질 및 중성 헬퍼 지질을 포함할 수 있다. 이러한 mRNA/LNP 약물 제품 제형은 mRNA가 생체내 번역되어 항체를 발현하도록 개체에 생체내 투여할 수 있다. (패널 C) 본원에 기술된 mRNA/LNP 약물 제품 제형이 투여된 환자 자신의 신체 세포는 mRNA에 의해 암호화된 활성 약물을 생산할 수 있다 (예를 들어, IgG RiboMab). 예를 들어, 일부 구현예에서, IV 주사하면, 항체-암호화 mRNA/LNP가 간 세포에 내재화되고 번역되어, 생물학적으로 활성인 RiboMab가 전신 혈장 농도로 생산된다. 약어: A30L70, 폴리(A) 꼬리, 30번 위치에 링커가 삽입된 아데노신 100개; bi, 이중 특이성; C, C-말단; CDS, 암호화 서열; CH, 중쇄 불변 도메인; CL, 경쇄 불변 도메인; Fab, 항원 결합 단편; IgG, 면역글로불린 G; LNP, 지질 나노입자; m1Ψ, 1-메틸슈도우리딘; N, N-말단; scFv, 단쇄 가변성 단편; TAA, 종양-관련 항원; UTR, 비-번역 영역; VH, 중쇄 가변 도메인; VL, 경쇄 가변 도메인.
도 13은 항체 물질의 중쇄 (HC) 및 경쇄 (LC)를 각각 암호화하는 예시적인 RNA 구조체들을 대략적으로 도시한 것이다. 도 13에 나타낸 바와 같이, 이러한 HC-암호화 RNA 구조체 및 LC-암호화 RNA 구조체는 RNA 조성물 (RB_RMAB01)을 구성하며, 일부 구현예에서 지질 나노입자 안에 제형화되어 RNA/LNP 약물 제품 제형을 형성할 수 있다. 약어: Poly A, 폴리 아데닌 꼬리; CH, 중쇄 불변 도메인; CL, 경쇄 불변 도메인; Sec, 분비 신호; UTR, 비-번역 영역; VH, 중쇄 가변 도메인; VL, 경쇄 가변 도메인.
도 14는 시노몰구스 원숭이에서 tmax에서 RB_RMAB01의 용량-노출 상관성을 나타낸 그래프이다. 시노몰구스 원숭이 (n=3)에 0.1, 0.4 또는 1.6 mg/kg으로 RB_RMAB01을 IV 주사로 투여하였다. Cmax에서 RLISA에 의해 측정한 혈장내 용량-의존적인 RiboMab01 농도 (평균, n=3)를 도시한다. 녹색 선은 인간 개체에 투여할 수 있는 용량 및 이의 대응되는 예상되는 혈청내 농도를 표시한다.
도 15는 항체의 중쇄 (HC)를 암호화하는 제1 RNA와 항체의 경쇄 (LC)를 암호화하는 제2 RNA를 포함하는 예시적인 RNA 혼합물에 대한 전기영동 그래프의 예이다. 전기영동 그래프는 LC 및 HC 각각에 대해 피크 2개를 나타낸다. A: 피크 하 면적, h: 피크의 높이.
일부 정의들
약 또는 대략 : 본원에서, 하나 이상의 대상 수치에 적용되는 용어 "대략" 또는 "약"은 명시된 참조 값과 유사한 값을 지칭한다. 일반적으로, 맥락에서 익숙한 당해 기술 분야의 당업자라면 문맥에서 "약" 또는 "대략"에 의해 망라되는 적절한 편차 수준을 알 것이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 용어 "대략" 또는 "약"은 참조된 값에 대해 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 이하에 해당하는 수치 범위를 망라할 수 있다.
투여 : 본원에서, 용어 "투여하는" 또는 "투여"는 전형적으로 조성물이거나 또는 조성물에 함유된 물질을 표적 부위 또는 치료할 부위로 전달을 달성하기 위해 조성물을 개체에 투여하는 것을 의미한다. 당해 기술 분야의 당업자라면 적절한 상황에서 개체, 예를 들어 인간에 투여하기 위해 이용할 수 있는 다양한 경로들을 알 것이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 투여는 눈, 경구, 비경구, 국소 등일 수 있다. 일부 특정 구현예에서, 투여는 기관지 (예를 들어, 기관지 점적 주입에 의한), 볼, 진피 (예를 들어, 진피로의 국소, 진피내, 진피간, 경피 등 중 하나 이상이거나 또는 이를 포함할 수 있음), 장, 동맥내, 진피내, 위내, 수질내, 근육내, 비강내, 복막내, 척수강내, 정맥내, 심실내, 특정 장기내 (예를 들어, 간내), 점막, 코, 경구, 직장, 피하, 설하, 국소, 기도 (예를 들어, 기도내 점적 주입에 의한), 질, 유리체 등일 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 비경구일 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 경구일 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 1회 투여만 수반할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 용량을 고정된 횟수로 적용하는 것을 수반할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 간헐적인 (예를 들어, 시간 간격으로 분리하여 수회 투여) 및/또는 주기적인 (예를 들어, 동일한 시간 간격으로 개별 투여) 투여인 투여를 수반할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 적어도 선정된 기간 동안 연속 투여 (예를 들어, 관류)를 수반할 수 있다.
항체 물질 : 본원에서, 용어 "항체 물질"은 특정 항원에 특이적으로 결합하는 물질을 지칭한다. 일부 구현예에서, 이 용어는 특이적인 결합성을 부여하기에 충분한 면역글로불린 구조 요소를 가진 임의의 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드 복합체를 망라한다. 예시적인 항체 물질로는 단일클론 항체 또는 다클론 항체가 있지만, 이들로 한정되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 항체 물질은 마우스, 토끼, 영장류 또는 인간 항체의 특징적인 하나 이상의 불변부 서열을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 물질은, 당해 기술 분야에 공지된 바와 같이, 인간화된, 영장류화된, 키메라 등인 하나 이상의 서열 요소를 함유할 수 있다. 다수의 구현예들에서, 용어 "항체 물질"은 대안적으로 제시하는데 항체 구조 및 기능적인 특징을 이용하기 위한 당해 기술 분야에서 공지되거나 또는 개발된 구조체 하나 이상을 지칭하기 위해 사용된다. 예를 들어, 구현예들에서, 본 발명에 따라 활용되는 항체 물질은 온전한 IgA, IgG, IgE 또는 IgM 항체; 이중-특이성 또는 다중-특이성 항체 (예를 들어, Zybodies® 등); Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd' 단편, Fd 단편, 및 단리된 상보성 결정 부위 (CDR)와 같은 항체 단편들 또는 이들의 세트; 단쇄 Fv; 폴리펩타이드-Fc 융합체; 단일 도메인 항체 (예를 들어, IgNAR과 같은 상어 단일 도메인 항체 또는 이의 단편); 카멜로이드 항체; 은폐된 항체 (예를 들어, Probodies®); 소형 모듈형 면역약제 (Small Modular ImmunoPharmaceuticals, "SMIPsTM"); 단쇄 또는 탠덤 다이아바디 (TandAb®); VHH; Anticalins®; Nanobodies® minibodies; BiTE®s; 안키린 반복 단백질 또는 DARPINs®; Avimers®; DARTs; TCR-유사 항체; Adnectins®; Affilins®; Trans-bodies®; Affibodies®; TrimerX®; 마이크로단백질; Fynomers®, Centyrins®; 및 KALBITOR®으로부터 선택되는 형태로 존재하지만, 이들로 한정되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 항체가 자연적으로 생성되는 경우에 가지게 되는 공유적인 변형 (예를 들어, 글리칸 부착)이 결핍될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체는 공유적인 변형 (예를 들어, 글리칸 부착, 페이로드 [예컨대, 검출가능한 모이어티, 치료학적 모이어티, 촉매적 모이어티 등] 또는 기타 펜던트 기 [예컨대, 폴리-에틸렌 글리콜 등])을 가질 수 있다. 다수의 구현예들에서, 항체 물질은 아미노산 서열이 당해 기술 분야의 당업자들에게 상보성 결정 영역 (CDR)으로서 인지되는 하나 이상의 구조 요소를 가진 폴리펩타이드이거나 또는 폴리펩타이드를 포함하며; 일부 구현예에서, 항체 물질은 아미노산 서열이 참조 항체에서 발견되는 것과 실질적으로 동일한 하나 이상의 CDR (예를 들어, 하나 이상의 중쇄 CDR 및/또는 하나 이상의 경쇄 CDR)을 함유한 폴리펩타이드이거나 또는 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 참조 CDR과 비교해 아미노산 치환 1-5개가 존재하거나 또는 서열이 동일하다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 참조 CDR과 비교해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 나타낸다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은 참조 CDR과 비교해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 나타낸다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 함유된 CDR에 참조 CDR과 비교해 하나 이상의 아미노산의 결손, 부가 또는 치환이 존재하지만 함유된 CDR이 참조 CDR과 동일한 아미노산 서열을 가진다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 함유된 CDR에 참조 CDR과 비교해 아미노산 1-5개의 결손, 부가 또는 치환이 존재하지만 함유된 CDR이 참조 CDR과 동일한 아미노산 서열을 가진다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일하다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 함유된 CDR에 참조 CDR과 비교해 하나 이상의 아미노산의 치환이 존재하지만 함유된 CDR이 참조 CDR과 동일한 아미노산 서열을 가진다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일한다. 일부 구현예에서, 함유된 CDR은, 함유된 CDR에 참조 CDR과 비교해 아미노산 1-5개의 결손, 부가 또는 치환이 존재하지만 함유된 CDR이 참조 CDR과 동일한 아미노산 서열을 가진다는 점에서, 참조 CDR과 실질적으로 동일한다. 일부 구현예에서, 항체 물질은, 아미노산 서열이 당해 기술 분야의 당업자들에게 면역글로불린 가변성 도메인으로서 인지되는, 구조 요소를 가진 폴리펩타이드이거나 또는 폴리펩타이드를 포함한다. 일부 구현예에서, 항체 물질은 면역글로불린-결합 도메인과 상동적이거나 또는 대체로 상동적인 결합 도메인을 가진 폴리펩타이드 단백질이다.
항체 물질은 당해 기술 분야에서 공지된 방법 및 상업적으로 이용가능한 서비스 및 키트를 이용해 당해 기술 분야의 당업자에 의해 제조할 수 있다. 예를 들어, 단일클론 항체의 제조 방법은 당해 기술 분야에 잘 알려져 있으며, 혼성화 기술 및 파지 디스플레이 기술 등이 있다. 본 발명에서 이용하기 적합한 추가적인 항체들은, 예를 들어, 하기 문헌들에 기술되어 있다: Antibodies A Laboratory Manual, Second edition. Edward A. Greenfield. Cold Spring Harbor Laboratory Press (September 30, 2013); Making and Using Antibodies: A Practical Handbook, Second Edition. Eds. Gary C. Howard and Matthew R. Kaser. CRC Press (July 29, 2013); Antibody Engineering: Methods and Protocols, Second Edition (Methods in Molecular Biology). Patrick Chames. Humana Press (August 21, 2012); Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology). Eds. Vincent Ossipow and Nicolas Fischer. Humana Press (February 12, 2014); 및 Human Monoclonal Antibodies: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology). Michael Steinitz. Humana Press (September 30, 2013)).
항체는 표준 기술에 의해, 예를 들어, 적절한 폴리펩타이드 또는 이의 일부분(들)을 이용한 면역화에 의해 또는 파지 디스플레이 라이브러리를 이용함으로써 생산할 수 있다. 만일 다클론 항체가 바람직하다면, 선택 포유류 (예를 들어, 마우스, 토끼, 염소, 말 등)를 원하는 에피토프(들)를 가지며 선택적으로 다른 폴리펩타이드에 합텐화된, 면역원성 폴리펩타이드로 면역화한다. 숙주 종에 따라 다양한 보강제를 사용해 면역 반응을 높일 수 있다. 이러한 보강제로는 프로인트 보강제, 수산화알루미늄과 같은 미네랄 겔, 및 리소레시틴, 플루로닉 폴리올, 다가음이온, 펩타이드, 오일 유제, 키폴 림페트 헤모시아닌 및 다이니트로페놀과 같은 표면-활성 물질을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 면역화된 동물로부터 공지된 절차에 따라 혈청을 수집하여 가공 처리한다. 만일 원하는 에피토프에 대해 다클론 항체를 함유한 혈청이 다른 항원에 대한 항체를 함유하고 있다면, 이러한 다클론 항체는 면역친화성 크로마토그래피 또는 그외 당해 기술 분야에 공지된 임의 방법에 의해 정제할 수 있다. 다클론 항혈청을 생산 및 가공 처리하는 기술들은 당해 기술 분야에 잘 공지되어 있다.
와 관련있는: 하나의 존재, 수준 및/또는 형태가 다른 것과 상관성을 가진다면, 이 용어가 본원에서 사용되는 바와 같이, 2가지 현상 또는 실체가 서로 관련되어 있는 것이다. 예를 들어, 특정한 생물학적 현상 (예를 들어, CLDN-18.2의 발현)의 존재가 (예를 들어, 관련있는 집단 전체에서) 질환, 장애 또는 병태의 발병 및/또는 감수성 또는 치료에 대한 반응 가능성과 상관성이 존재한다면, 그 현상이 특정 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)와 관련있는 것으로 간주된다.
혈액 유래 샘플: 용어 "혈액 유래 샘플"은, 본원에서, 필요한 개체의 혈액 샘플 (즉, 전혈 샘플)로부터 파생되는 샘플을 지칭한다. 혈액 유래 샘플의 예로는 혈장 (예를 들어, 신선한 냉동 혈장 등), 혈청, 혈액 분획, 혈장 분획, 혈청 분획, 적혈구 세포 (RBC), 혈소판, 백혈구 등을 포함하는 혈액 분획, 및 이들의 분획들을 포함한 세포 용해물 (예를 들어, 적혈구 세포, 백혈구 세포 등과 같은 세포를 회수 및 세포용해하여 세포 용해물을 수득할 수 있음) 등이 있지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 특정화에 이용되는 혈액 유래 샘플은 혈장 샘플이다.
암 : 용어 "암"은 본원에서 일반적으로 대상 조직의 세포가 비교적 비정상적인, 통제되지 않는, 및/또는 자율적인 증식을 나타내어, 세포 증식의 조절이 현저하게 저하된 것을 특징으로 하는 비정상적인 증식 표현형을 나타내는, 질환 또는 병태를 지칭하기 위해 사용된다. 일부 구현예에서, 암은 전암성 (예를 들어, 양성), 악성, 전-전이성, 전이성 및/또는 비-전이성인 세포를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 암은 고형 종양을 특징으로 할 수 있다. 일부 구현예에서, 암은 혈액 종양을 특징으로 할 수 있다. 일반적으로, 당해 기술 분야에 공지된 여러가지 유형의 암에 대한 예로는, 예를 들어, 백혈병, 림프종 (호지킨 및 비-호지킨 림프종), 골수종 및 골수증식성 장애를 비롯한 조혈 암; 육종, 흑색종, 선종, 고형 조직의 암종, 구강, 인후, 후두, 폐의 편평 세포암, 간암, 전립선암, 자궁경부암, 방광암, 자궁암 및 자궁내막암 및 신장 세포 암종과 같은 비뇨생식기암, 골암, 췌장암, 피부암, 피부 흑색종 또는 안내 흑색종, 내분비계의 암, 갑상선 암, 부갑상선 암, 두경부암, 난소암, 유방암, 교모세포종, 결장직장암, 위-장 암 및 신경계 암, 유두종과 같은 양성 병변 등이 있다.
캡: 본원에서, 용어 "캡"은 전형적으로 비-캡핑된 RNA (예를 들어, 5'-다이포스페이트를 가진 비-캡핑된 RNA)의 5'-말단에 연결된 뉴클레오시드-5'-트리포스페이트를 포함하거나 또는 필연적으로 이로 구성되는 구조를 지칭한다. 일부 구현예에서, 캡은 구아닌 뉴클레오티드이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 캡은, 예를 들어, 비-제한적으로, "m7G"로 명명된 구조를 가진 7-메틸구아노신 캡 등의, 자연-생성 RNA 5' 캡이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 캡은, 예를 들어, 비-제한적으로, 당해 기술 분야에 공지된 반-역전 (anti-reverse) 캡 유사체 (ARCA)를 비롯하여, RNA 캡 구조와 비슷하며 이의 부착시 RNA를 안정화하는 능력을 가진, 합성 캡이거나 또는 이를 포함한다. 당해 기술 분야에서 당업자라면, RNA의 5' 말단에 캡을 연결하는 방법들이 당해 기술 분야에 공지되어 있음을 알 것이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 캡핑된 RNA는 5' 트리포스페이트 기를 가진 RNA 또는 5' 다이포스페이트 기를 가진 RNA를 캡핑 효소 시스템 (예를 들어, 비-제한적으로 백시니아 캡핑 효소 시스템 또는 사카로마이세스 세레비지애 캡핑 효소 시스템 등)을 이용해 시험관내 캡핑함으로써 수득할 수 있다. 대안적으로, 캡핑된 RNA는 단일 가닥 DNA 주형의 시험관내 전사 (IVT)에 의해 수득할 수 있으며, 여기서 IVT 시스템은 GTP와 더불어 당해 기술 분야에 공지된 방법을 이용해 다이뉴클레오티드 캡 유사체 (예를 들어, m7GpppG 캡 유사체 또는 N7-메틸, 2'-O 메틸-GpppG ARCA 캡 유사체 또는 N7-메틸, 3'-O-메틸-GpppG ARCA 캡 유사체 등)를 함유할 수 있다.
CLDN-18.2 양성 : 본원에서, 용어 "CLDN-18.2 양성" 또는 "CLDN-18.2+"는, 예를 들어 특정 질환, 장애 또는 병태와 관련있을 수 있거나 및/또는 하나 이상의 세포 또는 조직 샘플이거나 또는 이를 포함할 수 있는 샘플 내 또는 샘플 상에서 검출될 수 있는 바와 같이, 임상적으로 관련있는 CLDN-18.2 발현 및/또는 활성을 지칭한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2+는 임상적으로 관련있는 CLDN-18.2 발현 및/또는 활성과 관련있는 암을 지칭한다. 일부 예시적인 구현예들에서, CLDN-18.2 양성 발현 및/또는 활성은 예를 들어 암 세포에서 데 노보 CLDN-18.2 과다발현이거나 또는 이를 포함할 수 있으며; 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성 발현 및/또는 활성은 하나 이상의 화학치료제 (예를 들어, 겜시타빈 및/또는 시스플라틴 등)와 같은 하나 이상의 물질 또는 조건에의 노출과 관련있을 수 있거나 또는 관련되었을 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2 "양성"은 적절한 기준 (예를 들어, 적절하게 비교가능한 비-암 세포(들) 및/또는 조직(들)에서의 CLDN-18.2 수준 및/또는 활성과 같은 "음성 대조군"; 공지된 CLDN-18.2-양성 세포(들) 및/또는 조직(들)에서 결정된 바와 같을 수 있는 CLDN-18.2 수준 및/또는 활성과 같은 "양성 대조군"; 및/또는 정상 (예를 들어, 건강한, 비-암) 대비 비-정상 (예를 들어, 암) 상태와 관련있는 CLDN-18.2 수준 및/또는 활성에 대해 확립된 역치)과 비교해 평가한다. 일부 구현예에서, 용어 "CLDN-18.2+"는, 적절한 기준 (예를 들어, CLDN-18.2 발현이 음성인 것으로 결정 또는 공지된 샘플에서 관찰되는 수준)과 비교해 검출가능한 CLDN-18.2 단백질 발현의 증가인 것으로 결정된 경우에, 암 환자로부터 유래한 종양 샘플을 지칭하기 위해 사용된다. 일부 구현예에서, 샘플 내 종양 세포의 ≥ 50%가 포르말린-고정되고 파라핀-포매된 (FFPF) 신생물 조직에 대한 면역조직화학 분석에 의해 평가된 바와 같이 CLDN-18.2 단백질 염색-강도 ≥ 2+인 것으로 결정된다면, 그 샘플은 CLDN-18.2+로 간주되며; 당해 기술 분야의 당업자라면, 병리학자들이 종양 샘플(들)에서 수득한 IHC 데이터를 해석하기 위해 상기한 점수 평가 시스템을 통상적으로 이용함을 알 것이다. 예를 들어, 점수 평가 시스템 등의 IHC 분석 결과를 해석 및 기록하는 여러가지 접근 방식을 기술한 Fedchenko and Reifenrath, Diagnostic Pathology (2014) 9:221을 참조한다. 또한, Zimmermann et al., Cancer Cytopathology (2014) 48-58을 참조한다. 따라서, 병리학자는 2+가 등급 점수가 2 이상인 것을 지칭하며, 이는 이러한 면역조직화학 분석 결과가 애매하지 않다는 것을 의미함을, 쉽게 알 것이다. 보다 정확하게는, 2+는 "음성" (0), "약한" (1), "보통" (2), "강한" (3)의 정성 척도에서 보통 또는 강한 염색을 나타낸다.
공동-투여: 본원에서, 용어 "공동-투여"는 본원에 기술된 약학적 조성물을 다른 요법 (예를 들어, 수술, 방사선, 및/또는 본원에 기술된 화학치료제와 같은 다른 치료학적 물질 및/또는 관련 질환, 장애 또는 병태 및/또는 투여된 요법 [예를 들어, 화학요법]의 한가지 이상의 증상 또는 속성을 완화하는 물질)과 조합하여 사용하는, 즉 개체가 둘다를 제공받는 것을 지칭한다. 본원에 기술된 약학적 조성물과 상기한 다른 요법의 조합 투여는 동시에 (예를 들어, 중첩되는 프로토콜을 통해) 또는 분리하여 (예를 들어, 임의의 순서로 순차적으로) 수행할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 한가지 약제학적으로 허용가능한 담체와 조합된 (예를 들어, 하나의 투약 형태인) 2 이상의 활성 물질을 함유할 수 있다. 대안적으로, 일부 구현예에서, 공동-투여는 물리적으로 분리된 약학적 조성물 2종 이상의 투여를 수반하며, 이들 각각은 서로 다른 활성 물질 또는 물질들의 조합을 함유할 수 있으며; 일부 이러한 구현예에서, 이러한 개별 약학적 조성물의 투여량 하나 이상 (및, 일부 구현예에서, 모두)을, 예를 들어 중첩되는 용법 또는 순차적인 용법에 따라 각각 투여할 수 있다. 일반적으로, 2가지 이상의 요법이 실시되는 개체 또는 표적 세포에서 그 각각에 의해 유발되는 생물학적 효과(들)가 적어도 일부 시간적으로 중첩되기에 충분히 근접한 시간에 전달 또는 투여되는 경우, "공동-투여"되는 것으로 간주할 수 있다.
조합 요법: 본원에서, 용어 "조합 요법"은 개체가 2가지 이상의 치료학적 용법 (예를 들어, 2종 이상의 치료학적 물질)에 동시에 노출되는 상황을 의미한다. 일부 구현예에서, 2가지 이상의 용법은 동시에 투여될 수 있으며; 일부 구현예에서, 이러한 용법은 순차적으로 투여될 수 있으며 (예를 들어, 제1 용법의 모든 "투여량"들이 제2 용법의 임의의 투여량을 투여하기 전에 투여됨); 일부 구현예에서, 이러한 물질은 중첩되는 투여 용법으로 투여된다. 일부 구현예에서, 조합 요법의 "투여"는 다른 물질(들) 또는 용법(들)이 시술 중인 개체에 하나 이상의 물질(들) 또는 용법(들)을 조합하여 투여하는 것을 수반할 수 있다. 명확하게 하기 위해, 조합 요법은, 일부 구현예에서, 2 이상의 물질 또는 이의 활성 모이어티가 조합 조성물 형태로 함께 투여될 수 있지만, 개별 물질들이 하나의 조성물로 함께 투여되어야 하는 것은 아니다.
비슷한 : 본원에서, 용어 "비슷한"은, 2가지 이상의 물질, 실체, 상황, 조건 세트 등이 서로 동일하지 않을 수 있지만 비교 대상들 간에 비교를 허용할만큼 충분한 유사성이 존재하여, 당해 기술 분야의 당업자가 관찰된 차이 또는 유사성에 기반하여 합리적으로 결론을 도출할 수 있는 것으로 이해될 수 있는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, 조건, 상황, 개체 또는 집단의 비슷한 세트는 여러가지 실질적으로 동일한 특징들 및 하나 또는 수개의 다양한 특징을 특징으로 한다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 문맥에서, 임의의 주어진 환경에서, 비슷한 것으로 간주되기 위해 2 이상의 상기한 물질, 실체, 상황, 조건 세트 등에 어느 정도의 동일성이 필요한 것인지 알 것이다. 예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자라면, 다른 상황, 개체 또는 집단 세트에서 수득되는 결과 또는 관찰되는 현상에서의 차이가 다양한 특징들에서의 차이에 의해 유발되거나 또는 차이를 의미한다는 합리적인 결론을 도출하기 위해 실질적으로 동일한 특징들이 충분한 개수 및 유형으로 특정되는 경우, 상황, 개체 또는 집단의 세트는 서로 비슷한 것으로, 인지할 것이다.
상보적인: 본원에서, 용어 "상보적인"은 염기쌍 형성 법칙에 따라 관계를 형성한 올리고뉴클레오티드 혼성화에 대해 사용된다. 예를 들어, 서열 "C-A-G-T"는 서열 "G-T-C-A"에 상보적이다. 상보성은 부분적이거나 또는 전체적일 수 있다. 따라서, 임의 수준의 부분적인 상보성은 부분적인 상보성이 올리고뉴클레오티드 혼성화를 허용하는 한 용어 "상보적인"의 범위에 포함되는 것으로 의도된다. 부분적인 상보성은 하나 이상의 핵산 염기가 염기 쌍 형성 법칙에 따라 매칭되지 않는 경우이다. 핵산들 간의 전체적인 또는 완전한 상보성은 각각의 모든 핵산 염기가 염기 쌍 형성 법칙에 따라 다른 염기와 매칭되는 경우이다.
접촉: 본원에서 상호 호환적으로 사용되는 바와 같이, 용어 "전달", "전달하는" 또는 "접촉하는"은 적절한 표적 (예를 들어, 세포, 조직, 유기체 등)을 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA(들) 또는 이를 포함하거나 또는 전달하는 조성물에 노출시켜, ssRNA를 표적 세포 (예를 들어, 표적 세포의 세포질)에 전달하는 것을 의미한다. 표적 세포는 시험관내 또는 생체외 배양할 수 있거나 또는 개체에 (생체내) 존재할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자는, 여러가지 접촉 방법들을 적용해 시험관내, 생체외 또는 생체내 활용으로 표적 세포내 전달을 달성할 수 있음을, 알 것이다. 일부 구현예에서, 배양 중 세포 접촉은 시험관내 형질감염일 수 있거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 접촉은 하나 이상의 전달 비히클 (예를 들어, 본원에 기술된 지질 나노입자)를 활용할 수 있다. 일부 구현예에서, 접촉은 본원에 기술된 약학적 조성물을 개체에 투여하는 것이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
검출: 용어 "검출"은 본원에서 샘플 내 대상 실체의 존재 또는 부재 또는 대상 실체의 임의의 측정 형태를 확인하는 적절한 수단을 망라하는 것으로 널리 사용된다. 즉, "검출"은 대상 실체의 존재 또는 부재, 수준, 양 및/또는 위치를 결정, 측정, 평가 또는 분석하는 것으로 포괄할 수 있다. 반-정량을 비롯한 정성적 및 정량적인 결정, 측정 또는 평가가 포함된다. 이러한 결정, 측정 또는 평가는, 예를 들어, 대상 실체를 대조군 기준에 대하여 검출하는 상대적이거나 또는 절대적일 수 있다. 이와 같이, 대상 실체를 정량하는 맥락에서 사용되는 경우, 용어 "정량하는"은 절대적 또는 상대적 정량화를 지칭할 수 있다. 절대 정량화는 대상 실체의 검출 수준을 공지된 대조군 기준과 (예를 들어, 표준 곡선의 작성을 통해) 연관시킴으로써 달성할 수 있다. 대안적으로, 상대적인 정량화는 2 이상의 서로 다른 대상 실체들 간의 검출된 수준 또는 양을 비교해, 2 이상의 서로 다른 대상 실체들 각각의 상대적인 정량화, 즉 서로에 대한 상대적인 정량화를 제공함으로써, 달성할 수 있다.
질환: 본원에서, 용어 "질환"은 전형적으로 개체 (예를 들어, 인간 개체)에서 조직 또는 시스템의 정상적인 기능을 손상시키며, 전형적으로 특징적인 징후 및/또는 증상에 의해 발현되는 장애 또는 병태를 지칭한다. 일부 구현예에서, 예시적인 질환은 암이다.
암호화: 본원에서, 용어 "암호화한다" 또는 "암호화"는 제1 분자의 서열 정보가 지정된 뉴클레오티드 서열 (예를 들어, mRNA) 또는 지정된 아미노산 서열을 가진 제2 분자의 생성을 안내하는 것을 의미한다. 예를 들어, DNA 분자는 (예를 들어, DNA-의존적인 RNA 중합효소를 수반한 전사 공정에 의해) RNA 분자를 암호화할 수 있다. RNA 분자는 (예를 들어, 번역 공정에 의해) 폴리펩타이드를 암호화할 수 있다. 즉, 유전자에 대응되는 mRNA의 전사 및 번역으로 세포 또는 기타 생물학적 시스템에서 폴리펩타이드가 만들어진다면, 그 유전자, cDNA 또는 ssRNA (예를 들어, mRNA)는 폴리펩타이드를 암호화하는 것이다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA의 암호화 영역은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 mRNA 서열과 동일한 뉴클레오티드 서열인 암호화 가닥을 지칭한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA의 암호화 영역은, 유전자 또는 cDNA를 전사하기 위한 주형으로 이용할 수 있는, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 비-암호화 가닥을 지칭한다.
에피토프: 본원에서, 용어 "에피토프"는 면역글로불린 (예를 들어, 항체 또는 수용체) 결합성 구성성분 또는 앱타머에 의해 특이적으로 인지되는 임의의 모이어티를 포함한다. 일부 구현예에서, 에피토프는 항원 상의 복수의 화학적 원자 또는 기들로 구성된다. 일부 구현예에서, 이러한 화학적 원자 또는 기는, 항원이 적절한 3차원 구조를 취할 경우, 표면으로 노출된다. 일부 구현예에서, 이러한 화학적 원자 또는 기는 항원이 그러한 형태를 취하였을 때 공간적으로 서로 물리적으로 인접하게 된다. 일부 구현예에서, 이러한 화학적 원자 또는 기들 적어도 일부는 항원이 대안적인 형태 (예를 들어, 선형화)를 취하였을 때 서로 물리적으로 이격된다.
발현 : 본원에서, 핵산 서열의 "발현"은 다음과 같은 현상 중 하나 이상을 지칭한다: (1) DNA 서열로부터 (예를 들어, 전사에 의한) mRNA 주형 생성; (2) (예를 들어, 스플라이싱, 편집, 5' 캡 형성 및/또는 3' 말단 형성에 의한) RNA 전사 진행; (3) RNA에서 폴리펩타이드 또는 단백질로 번역; 및/또는 (4) 폴리펩타이드 또는 단백질의 번역 후 수정.
5' 비-번역 영역: 본원에서, 용어 "5' 비-번역 영역" 또는 "5' UTR"은 전사 개시 부위에서 시작해 RNA의 암호화 영역의 시작 코돈 (통상적으로 AUG)으로부터 뉴클레오티드 (nt) 하나 앞에서 끝나는 mRNA 분자 서열을 지칭한다.
상동성: 본원에서, 용어 "상동성" 또는 "상동체"는 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자)들 간의 및/또는 폴리펩타이드 분자들 간의 전체적인 연관성을 나타낸다. 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩타이드 분자는, 이들 서열이 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 동일하다면, 서로 "상동적인" 것으로 간주된다. 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩타이드 분자는, 이들 서열이 적어도 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 99% 유사하다면 (예를 들어, 해당 위치에 비슷한 화학적 특성을 가진 잔기 함유), 서로 "상동적인" 것으로 간주된다. 예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자들에게 잘 알려진 바와 같이, 일부 아미노산은 전형적으로 "소수성" 또는 "친수성" 아미노산으로서 및/또는 "극성" 또는 "비-극성" 측쇄를 가진 것으로 서로 유사한 것으로 분류된다. 아미노산을 동일한 유형의 다른 아미노산으로 치환된 것은 흔히 "상동적인" 치환으로 간주할 수 있다.
동일성: 본원에서, 용어 "동일성"은 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자)들 간의 및/또는 폴리펩타이드 분자들 간의 전체적인 연관성을 나타낸다. 일부 구현예에서, 폴리뉴클레오티드 분자 (예를 들어, DNA 분자 및/또는 RNA 분자) 및/또는 폴리펩타이드 분자는, 이들의 서열이 적어도 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 경우, 서로 "실질적으로 동일한" 것으로 간주된다. 핵산 또는 폴리펩타이드 서열 2종의 동일성 %의 계산은, 예를 들어, 서열 2종을 최적으로 비교하기 위해 정렬함으로써 수행할 수 있다 (예를 들어, 최적으로 정렬하기 위해 제1 서열과 제2 서열 중 하나 또는 양쪽에 갭을 도입할 수 있으며, 비교 목적으로 비-동일 서열은 무시할 수 있음). 특정 구현예에서, 비교 목적으로 정렬하는 서열의 길이는 기준 서열의 길이에 대해 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99%이거나 또는 실질적으로 100%이다. 대응 위치에서 뉴클레오티드를 비교한다. 제1 서열에서 한 위치에 제2 서열의 대응되는 위치에서와 동일한 잔기 (예를 들어, 뉴클레오티드 또는 아미노산)가 존재한다면, 이들 분자들은 그 위치에서 동일한 것이다. 2종의 서열 간의 동일성 %는, 2종의 서열을 최적 정렬하기 위해 도입하여야 하는 갭의 개수와 각 갭의 길이를 감안한, 서열들 간에 공유된 동일한 위치 개수의 함수이다. 서열들의 비교 및 2종의 서열 간의 동일성 % 결정은 수학적 알고리즘을 적용해 달성할 수 있다. 예를 들어, 2종의 뉴클레오티드 서열 간의 동일성 %는 ALIGN 프로그램 (버전 2.0)에 통합된 Meyers and Miller, 1989의 알고리즘을 이용해 결정할 수 있다. 일부 예시적인 구현예들에서, ALIGN 프로그램으로 수행하는 핵산 서열 비교에서는 PAM120 가중 잔기 표, 갭 길이 패널티 12 및 갭 패널티 4를 적용한다. 2종의 뉴클레오티드 서열 간의 동일성 %는 대안적으로 NWSgapdna.CMP 매트릭스를 사용해 GCG 소프트웨어 패키지의 GAP 프로그램으로 결정할 수 있다.
국소 진행된 종양: 본원에서, 용어 "국소 진행된 종양" 또는 "국소 진행성 암"은 암의 유형들에 따라 달라질 수 있는 당해 분야에서 인정되는 의미를 지칭한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 국소 진행된 종양은 크지만 신체의 다른 부위로 아직 퍼지지 않은 종양을 지칭한다. 일부 구현예에서, 국소 진행된 종양은 이것이 시작된 조직 또는 장기의 외부에도 증식하지만 개체 신체의 먼 부위로 아직 퍼지지 않은 암을 나타내기 위해 사용된다. 단지 예로서, 일부 구현예에서, 국소 진행성 췌장암은 전형적으로 종양이 인접 장기 (예를 들어, 림프절, 간, 십이지장, 상장간막 동맥 및/또는 복강 동맥)로 퍼졌지만 전이성 질환의 징후는 없는 III기 질환을 지칭하며; 그러나 병리학적으로 음성인 가장자리와 함께 완전한 외과적 절제는 불가능하다.
핵산/ 폴리뉴클레오티드 : 본원에서, 용어 "핵산"은 뉴클레오티드 적어도 10개 이상으로 된 폴리머를 지칭한다. 일부 구현예에서, 핵산은 DNA이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 RNA이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 펩타이드 핵산 (PNA)이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 단일 가닥 핵산이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 이중 가닥 핵산이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 단일 가닥인 부분과 이중 가닥인 부분을 둘다 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 포스포다이에스테르 연결을 하나 이상 포함하는 백본을 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 포스포다이에스테르와 비-포스포다이에스테르 연결을 모두 포함하는 백본을 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 핵산은 하나 이상의 포스포로티오에이트 또는 5'-N-포스포르아미디트 연결 및/또는 하나 이상의 펩타이드 결합을, 예를 들어, "펩타이드 핵산"에서와 같이 포함하는 백본을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 핵산은 천연 잔기 (예를 들어, 아데닌, 시토신, 데옥시아데노신, 데옥시시티딘, 데옥시구아노신, 데옥시티미딘, 구아닌, 티민, 우라실)를 하나 이상 또는 모두 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 비-천연 잔기를 하나 이상 또는 모두 포함한다. 일부 구현예에서, 비-천연 잔기는 뉴클레오시드 유사체 (예를 들어, 2-아미노아데노신, 2-티오티미딘, 이노신, 피롤로-피리미딘, 3 -메틸 아데노신, 5-메틸시티딘, C-5 프로피닐-시티딘, C-5 프로피닐-우리딘, 2-아미노아데노신, C5-브로모우리딘, C5-플루오로우리딘, C5-요오도우리딘, C5-프로피닐-우리딘, C5 -프로피닐-시티딘, C5-메틸시티딘, 2-아미노아데노신, 7-데아자아데노신, 7-데아자구아노신, 8-옥소아데노신, 8-옥소구아노신, 6-O-메틸구아닌, 2-티오시티딘, 메틸화된 염기, 인터칼레이트된 염기, 및 이들의 조합)를 포함한다. 일부 구현예에서, 비-천연 잔기는 천연 잔기의 당과 비교해 하나 이상의 변형된 당 (예를 들어, 2'-플루오로리보스, 리보스, 2'-데옥시리보스, 아라비노스 및 헥소스)을 포함한다. 일부 구현예에서, 핵산은 RNA 또는 폴리펩타이드와 같은 기능성 유전자 산물을 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 가진다. 일부 구현예에서, 핵산은 하나 이상의 인트론을 포함하는 뉴클레오티드 서열을 가진다. 일부 구현예에서, 핵산은 천연 소스, 효소적 합성 (예를 들어, 상보적인 주형에 기반한 중합에 의한, 예를 들어, 재조합 세포 또는 시스템에서의 생체내 또는 시험관내 생산) 또는 화학적 합성으로부터 단리하여 제조할 수 있다. 일부 구현예에서, 핵산은 잔기 또는 뉴클레오티드 적어도 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 1 10, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 20, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10,000, 10,500, 11,000, 11,500, 12,000, 12,500, 13,000, 13,500, 14,000, 14,500, 15,000, 15,500, 16,000, 16,500, 17,000, 17,500, 18,000, 18,500, 19,000, 19,500 또는 20,000개 또는 이보다 더 긴 길이이다.
뉴클레오티드: 본원에서, 용어 "뉴클레오티드"는 당업계에서 인정되는 의미를 의미한다. 뉴클레오티드의 개수가 크기, 예를 들어 폴리뉴클레오티드의 크기 지표로 사용되는 경우, 뉴클레오티드의 구체적인 수는 단일 가닥, 예를 들어 폴리뉴클레오티드 상의 뉴클레오티드의 개수를 나타낸다.
환자 : 본원에서, 용어 "환자"는 질환 또는 장애 또는 병태를 앓고 있거나 또는 위험이 있는 임의 유기체를 지칭한다. 전형적인 환자로는 동물 (예를 들어, 마우스, 랫, 토끼, 인간이 아닌 영장류 및/또는 인간과 같은 포유류)을 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 인간이다. 일부 구현예에서, 환자는 한가지 이상의 질환 또는 장애 또는 병태를 앓고 있거나 또는 걸리기 쉽다. 일부 구현예에서, 환자는 질환 또는 장애 또는 병태의 한가지 이상의 증상을 나타낸다. 일부 구현예에서, 환자는 한가지 이상의 질환 또는 장애 또는 병태로 진단된 적 있다. 일부 구현예에서, 제공된 기술을 적용가능한 질환 또는 장애 또는 병태는 하나 이상의 종양의 존재 또는 암이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 환자는 질환, 장애 또는 병태로 진단 및/또는 치료하기 위해 어떤 요법을 시술 중이거나 또는 시술받은 적 있다. 일부 구현예에서, 환자는 암 환자이다.
폴리펩타이드 : 용어 "폴리펩타이드"는, 본원에서, 전형적으로 아미노산 적어도 3개 이상으로 된 폴리머인 당업계에서 인정되는 의미를 가진다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 용어 "폴리펩타이드"가 본원에 언급된 완전한 서열을 가진 폴리펩타이드뿐 아니라 이러한 완전한 폴리펩타이드의 기능적인, 생물학적으로 활성인 또는 특징적인 단편, 영역 또는 도메인 (예를 들어, 하나 이상의 활성을 가진 단편, 영역 또는 도메인)인 폴리펩타이드를 망라하도록 충분히 포괄적인 것으로 의도됨을 알 것이다. 일부 구현예에서, 폴리펩타이드는 L-아미노산, D-아미노산 또는 이 둘다를 함유할 수 있으며, 및/또는 당해 기술 분야에서 공지된 다양한 임의의 아미노산 변형 또는 유사체를 함유할 수 있다. 이용가능한 변형으로는, 예를 들어, 말단 아세틸화, 아미드화, 메틸화 등이 있다. 일부 구현예에서, 폴리펩타이드는 천연 아미노산, 비-천연 아미노산, 합성 아미노산 및 이들의 조합을 포함할 수 있다 (예를 들어, 펩타이드 모방체이거나 또는 이를 포함할 수 있음).
기준/기준 표준: 본원에서, "기준"은 비교 수행에 기준이 되는 표준 또는 대조군을 지칭한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 대상 물질, 동물, 개체, 집단, 샘플, 서열 또는 값을 기준 또는 대조군 물질, 동물, 개체, 집단, 샘플, 서열 또는 값과 비교한다. 일부 구현예에서, 기준 또는 대조군은 대상 검사 또는 결정과 실질적으로 동시에 검사 및/또는 결정한다. 일부 구현예에서, 기준 또는 대조군은 선택적으로 유형의 매질 중에 구현되는, 역사적 기준 또는 대조군이다. 일부 구현예에서, 기준 또는 대조군은 설정된 사양 (예를 들어, 관련 허용 기준)이거나 또는 이를 포함한다. 전형적으로, 당해 기술 분야의 당업자들이 이해하는 바와 같이, 기준 또는 대조군은 평가시 조건 또는 상황과 비슷한 조건 또는 상황에서 결정 또는 특정된다. 당해 기술 분야의 당업자들은, 특정한 가능성 있는 기준 또는 대조군에 대한 의존성 및/또는 비교를 정당화하기에 충분한 유사성이 존재하는 경우를 알 것이다.
리보뉴클레오티드: 본원에서, 용어 "리보뉴클레오티드"는 비-변형된 리보뉴클레오티드 및 변형된 리보뉴클레오티드를 망라한다. 예를 들어, 비-변형된 리보뉴클레오티드는 퓨린 염기 아데닌 (A)과 구아닌 (G), 그리고 피리미딘 염기 시토신 (C)과 우라실 (U)을 포함한다. 변형된 리보뉴클레오티드는 하나 이상의 변형을 함유할 수 있으며, 그 예로는 (a) 말단 변형, 예를 들어 5' 말단 변형 (예를 들어, 인산화, 탈인산화, 접합, 역위된 연결 등), 3' 말단 변형 (예를 들어, 접합, 역위된 연결 등), (b) 염기 변형, 예를 들어, 변형된 염기, 안정화 염기, 탈안정화 염기 또는 파트너의 연장된 레퍼토리와 염기 쌍을 형성하는 염기 또는 접합된 염기로의 치환, (c) 당 변형 (예를 들어, 2' 위치 또는 4' 위치에서) 또는 당의 치환, 및 (d) 뉴클레오시드 간의 연결 변형, 예를 들어, 포스포다이에스테르 연결의 변형 또는 치환을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 용어 "리보뉴클레오티드"는 또한 변형된 및 비-변형된 리보뉴클레오티드 트리포스페이트를 비롯한 리보뉴클레오티드 트리포스페이트를 망라한다.
리보핵산 (RNA): 본원에서, 용어 "RNA"는 리포뉴클레오티드 폴리머를 지칭한다. 일부 구현예에서, RNA는 단일 가닥이다. 일부 구현예에서, RNA는 이중 가닥이다. 일부 구현예에서, RNA는 단일 가닥 부분과 이중 가닥 부분을 모두 포함한다. 일부 구현예에서, RNA는 상기한 "핵산/폴리뉴클레오티드"의 정의에서 기술된 백본 구조를 포함할 수 있다. RNA는 조절성 RNA (예를 들어, siRNA, microRNA 등) 또는 메신저 RNA (mRNA)일 수 있다. 일부 구현예에서, RNA는 mRNA이다. RNA가 mRNA인 일부 구현예에서, RNA는 전형적으로 이의 3' 말단 폴리(A) 영역을 포함한다. RNA가 mRNA인 일부 구현예에서, RNA는 전형적으로 이의 5' 말단에 당업계에서 인정되는 캡 구조, 예를 들어 mRNA가 리보솜에 의해 인지 및 부착되어 번역을 개시하기 위한 캡 구조를 포함한다. 일부 구현예에서, RNA는 합성 RNA이다. 합성 RNA는 (예를 들어, 효소적 합성 방법 및/또는 화학적 합성 방법에 의해) 시험관내에서 합성된 RNA를 포함한다.
선택적인 또는 특이적인: 용어 "선택적인" 또는 "특이적인"은 활성을 가진 물질에 대해 본원에서 사용되는 바와 같이, 당해 기술 분야의 당업자들라면, 물질이 잠재적인 표적 실체, 상태 또는 세포를 구분하는 것을 의미함을 이해한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 물질이 하나 이상의 경쟁적인 대안 표적의 존재 하에 그 표적에 선호적으로 결합한다면, 그 물질은 이의 표적에 "특이적으로" 결합하는 것으로 말한다. 다수의 구현예들에서, 특이적인 상호작용은 표적 실체의 특별한 구조 특징 (예를 들어, 에피토프, 클리프, 결합부)의 존재에 의존한다. 특이성이 절대적이어야 하는 것은 아닌 것으로 이해되어야 한다. 일부 구현예에서, 특이성은 하나 이상의 다른 잠재적인 표적 실체 (예, 경쟁물질)에 대한 표적-결합 모이어티의 특이성으로 평가할 수 있다. 일부 구현예에서, 특이성은 기준 특이적인 결합성 모이어티에 대한 특이성으로 평가한다. 일부 구현예에서, 특이성은 기준 비-특이적인 결합성 모이어티에 대한 특이성으로 평가한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질은 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 결합하는 조건 하에 경쟁적인 대안적인 표적 (예를 들어, CLDN18.1 폴리펩타이드)에는 검출가능하게 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질은, 예를 들어 CLDN18.1 폴리펩타이드 등의 대안적인 경쟁 표적 (들)과 비교해, 더 높은 결합 속도 (on-rate), 낮은 해리 속도 (off-rate), 증가된 친화성, 감소된 해리 및/또는 증가된 안정성으로 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 결합한다.
특이적인 결합: 본원에서, 용어 "특이적인 결합"은 결합이 이루어지기 위한 환경에서 가능한 결합 파트너들을 구분할 수 있는 능력을 지칭한다. 다른 잠재적인 표적이 존재하는 경우에 하나의 특정한 표적에 상호작용하는 항체 물질은, 상호작용하는 표적에 "특이적으로 결합"하는 것으로 지칭한다. 일부 구현예에서, 특이적인 결합은 항체 물질의 CDR과 이의 파트너 간에 결합 정도를 검출 또는 결정함으로써 평가하며; 일부 구현예에서, 특이적인 결합은 항체 물질-파트너 복합체의 해리성을 검출 또는 결정함으로써 평가하며; 일부 구현예에서, 특이적인 결합은 항체 물질이 이의 파트너와 다른 실체 간의 대안적인 상호작용과 경쟁하는 능력을 검출 또는 결정함으로써 평가한다. 일부 구현예에서, 특이적인 결합은 농도 범위 전체에서 이러한 검출 또는 결정을 수행함으로써 평가한다.
개체 : 본원에서, 용어 "개체"는 예를 들어 실험, 진단, 예방 및/또는 치료 목적으로 본원에 기술된 조성물을 투여받는 유기체를 지칭한다. 전형적인 개체로는 동물 (예를 들어, 마우스, 랫, 토끼, 인간이 아닌 영장류, 애완 동물과 같은 포유류 등) 및 인간을 포함한다. 일부 구현예에서, 개체는 인간 개체이다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)를 앓고 있다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)에 걸리기 쉽다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)의 한가지 이상의 증상 또는 특징을 나타낸다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)의 한가지 이상의 비-특이적인 증상을 나타낸다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)의 임의의 증상 또는 특징을 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 개체는 질환, 장애 또는 병태 (예를 들어, 암)에 대한 감수성 또는 위험의 특징적인 한가지 이상의 특징을 가진 개체이다. 일부 구현예에서, 개체는 환자이다. 일부 구현예에서, 개체는 진단 및/또는 요법이 투여되거나 및/또는 투여된 적 있는 개체이다.
감수성 : 질환, 장애 또는 병태에 감수성인 개체는 질환, 장애 또는 병태가 발생할 위험이 있는 개체이다. 일부 구현예에서, 질환, 장애 또는 병태에 감수성인 개체는 질환, 장애 또는 병태의 어떠한 증상도 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 질환, 장애 또는 병태에 감수성인 개체는 질환, 장애 및/또는 병태로 진단된 적 없다. 일부 구현예에서, 질환, 장애 또는 병태에 감수성인 개체는 질환, 장애 또는 병태의 발생과 관련있는 조건에 노출된 적 있는 개체이다. 일부 구현예에서, 질환, 장애 및/또는 병태의 발생 위험은 집단-기반의 위험 (예를 들어, 질환, 장애 또는 병태를 앓고 있는 개체의 가족 구성원; 질환, 장애 또는 병태와 관련있는 유전자 마커 또는 기타 바이오마커의 보유체)이다.
앓고 있는 : 질환, 장애 및/또는 병태"를 앓고 있는" 개체는 질환, 장애 및/또는 병태로 진단된 적 있거나 및/또는 이에 대한 한가지 이상의 증상을 나타낸다.
합성: 본원에서, 용어 "합성"은 인공적이거나 또는 인간 개입에 의해 만들어지거나 또는 자연 생성보다는 합성에 의해 만들어진, 실체를 지칭한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 합성 핵산 또는 폴리뉴클레오티드는 화학적으로 합성한, 예를 들어, 일부 구현예에서 고상 합성에 의해 합성한 핵산 분자를 지칭한다. 일부 구현예에서, 용어 "합성"은 실체가 생물학적 세포의 외부에서 만들어지는 것을 의미한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 합성 핵산 또는 폴리뉴클레오티드는 주형으로 이용해 시험관내 전사를 통해 만들어진 핵산 분자 (예를 들어, RNA)를 지칭한다.
치료학적 물질: 본원에서 상호 호환적으로 사용되는 바와 같이, 표현 "치료학적 물질" 또는 "요법"은, 개체 또는 환자에 투여시, 요망하는 생물학적 및/또는 약리학적 효과를 유발하거나 및/또는 치료학적 효과를 가지는, 물질 또는 개입을 지칭한다. 일부 구현예에서, 치료학적 물질 또는 요법은 질환, 장애 및/또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 특징을 완화, 개선, 경감, 저해, 방지, 발생 지연, 중증도 저하 및/또는 발생 감소를 달성하기 위해 사용할 수 있는 임의의 물질이다. 일부 구현예에서, 치료학적 물질 또는 요법은 질환, 장애 및/또는 병태의 하나 이상의 증상 또는 특징을 완화, 경감, 저해, 방지, 발생 지연, 중증도 저하 및/또는 발생 감소를 달성하기 위해 수행할 수 있는 의학적 개입 (예를 들어, 수술, 방사선, 광요법)이다.
3' 비-번역 영역 : 본원에서, 용어 "3' 비-번역 영역" 또는 "3' UTR"은 오픈 리딩 프래임 서열의 암호화 영역의 정지 코돈 다음부터 시작되는 mRNA 분자 서열을 지칭한다. 일부 구현예에서, 3' UTR은 오픈 리딩 프래임 서열의 암호화 영역의 정지 코돈 바로 다음부터 시작한다. 다른 구현예들에서, 3' UTR은 오픈 리딩 프래임 서열의 암호화 영역의 정지 코돈 바로 다음부터 시작되지 않는다.
역치 수준 (예를 들어, 허용 기준) : 본원에서, 용어 "역치 수준"은 측정의 결과에 대해 정보를 획득하거나 및/또는 분류하기 위해 기준으로서 사용되는 수준을 의미한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 역치 수준은 집단의 하위 집단 2종 (예를 들어, 품질 관리 기준을 충족하는 배치 대 품질 관리 기준을 충족하지 않는 배치)을 나누는 구분선을 정의하는 분석에서 측정한 값을 의미한다. 따라서, 역치 수준과 동일하거나 또는 높은 값은 집단의 한 하위 집단을 정의하고, 역치 수준보다 낮은 값은 집단의 다른 하위 집단을 정의한다. 역치 수준은 하나 이상의 대조군 샘플에 기반하여 또는 대조군 샘플 집단들에서 결정할 수 있다. 역치 수준은 대상 측정을 수행하기 전, 이와 동시에 또는 측정한 후 결정할 수 있다. 일부 구현예에서, 역치 수준은 값들의 범위일 수 있다.
치료한다: 본원에서, 용어 "치료한다", "치료" 또는 "치료하는"은 질환, 장애 및/또는 병태의 한가지 이상의 증상 또는 특징을 부분적으로 또는 완전히 완화하거나, 개선하거나, 경감하거나, 저해하거나, 방지하거나, 발생을 지연시키거나, 중증도를 낮추거나 및/또는 발생을 감소시키기 위해 사용되는 임의의 방법을 지칭한다. 치료제는 질환, 장애 및/또는 병태의 징후가 없는 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료제는 질환, 장애 및/또는 병태의 초기 징후만 보이는 개체에, 예를 들어 질환, 장애 및/또는 병태와 관련있는 병리가 발생할 위험을 낮추기 위한 목적으로 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료제는 질환, 장애 및/또는 병태의 후기 단계에 개체에 투여할 수 있다.
절제불가한 종양 : 본원에서, 용어 "절제불가한 종양"은, 전형적으로, 적절한 의학적 판단에 따라, 종양을 수술에 의해 안전하게 (예를 들어, 개체에 과도하게 유해하지 않게) 제거할 수 없거나, 및/또는 적절한 의료 전문가의 판단에 따라 개체의 종양 제거 위험성이 이러한 제거와 관련한 이점보다 높다는 의미로 간주되는, 한가지 이상의 특징들에 의해 특정되는 종양을 의미한다. 일부 구현예에서, 절제불가한 종양은 (재건가능하지 않을 수 있는 혈관을 비롯한) 필수 장기 또는 조직을 수반하거나 또는 이에 증식된, 및/또는 하나 이상의 다른 중요한 또는 (혈관을 비롯한) 필수 장기 및/또는 조직에 대한 지나친 손상 위험 없이 외과적으로 쉽게 접근하지 못하는 위치에 존재하는, 종양을 지칭한다. 일부 구현예에서, 종양의 "절제불가성"은 가장자리-음성 (RO) 절제를 달성할 가능성을 나타낸다. 췌장암의 경우, 상장간막동맥 (SMA) 또는 복강 축, 문맥 정맥 폐쇄 및 복강 또는 대동맥 주위 림프절병증의 존재와 같이 주요 혈관이 종양에 의해 덮인 것은 일반적으로 RO 수술 불가능 소견으로서 인정된다. 당해 기술 분야의 당업자는 종양이 절제불가하거나 또는 그렇지 않은 지를 결정하는 매개변수를 이해할 것이다.
당해 기술 분야의 당업자는 본 명세서를 숙지하여, 다수의 구현예들에서, 표준 기술을 이용할 수 있으며, 재조합 DNA, 올리고뉴클레오티드 합성, 조직 배양 및/또는 형질전환 (예를 들어, 전기천공, 리포펙션, 형질감염)을 이용할 수 있음을 알 것이다. 효소 반응 및/또는 정제 기술은 전형적으로 제조사의 명세서에 따라 또는 당해 기술 분야에서 통상적으로 달성되는 바와 같이 또는 본원에 기술된 바와 같이 수행할 수 있다. 다수의 구현예들에서, 전술한 기술 및 절차들은 일반적으로 당해 기술 분야에서 통상적으로 잘 알려진 방법에 따라, 그리고 본 명세서 전체에 인용 및 논의된 다양한 일반적이고 보다 구체적인 참조문헌에 기술된 바와 같이 수행할 수 있다. 예를 들어, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989))를 참조하며, 이는 원용에 의해 임의 목적으로 본 명세서에 포함된다.
구체적인 구현예들에 대한 상세한 설명
표준 치료 (SOC) 요법의 성과는 다수의 암 환자, 특히 재발성 또는 불치성의 진행된 고형 종양을 가진 환자의 경우에는 여전히 좋지 않다. 치료 옵션은 전형적으로 세포독성 화합물 또는 최상의 보조 치유에 이전에 반복 노출된 후 관용성이 낮을 수 있는 고식적인 화학치료, 및 이점이 입증되지 않은 조사 치료제를 추가로 포함한다. 이러한 집단에 대한 요법은 완치성이 아니며, 예상되는 전체 생존 기간은 수개월이다. 면역요법은 미충족된 의학적 요구가 높은 일부 암들에서 유용한 치료 옵션으로서 등장하였다. 구체적으로, 면역 체크포인트 저해제는 다양한 암 적응증들에 대한 치료제로 허가되었으며, 기-존재하는 항-종양-특이적인 T 세포를 활성화함으로써 작용한다. 다양한 암 유형들에 대한 의학적 요구가 여전히 높다. 본 발명은 특히 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 표적화 요법으로 암 (예를 들어, 췌장암 및/또는 담관계 암)을 치료하는 통찰력과 기술을 제공해준다.
일부 구현예에서, 본 발명은, 특히, 강력한 항종양 특징과 탁월한 안전성 프로파일을 겸비한 CLDN-18.2를 표적화하는 단일클론 항체를 전달하여, 느리고 번거러운 항체 제조 공정의 장애를 뛰어넘는, RNA 기술을 제공해준다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, RNA 전달 용법이 대응되는 (예를 들어, 암호화된) 단백질 (예를 들어 항체) 물질 자체 투여시 관찰되는 바와 비교해, 투약 후 이상 사례 ("TEAE")의 발생 (예를 들어, 빈도 및/또는 중증도)이 감소되거나, 및/또는 효능 수준과 TEAE 수준 간의 연관성이 개선된 (예를 들어, 치료학적 윈도우 개선), 효과적인 투여와 같은 하나 이상의 개선을 달성할 수 있음을, 제안한다. 특히, 본 발명은 이러한 개선이 특히 이를 암호화하는 핵산, 특히 RNA(들)(예를 들어, mRNA(들)와 같은 ssRNA(들))의 투여를 통해 IMAB362를 전달함으로써 달성될 수 있음을, 교시한다.
일부 구현예에서, 본 발명은, 특히, 개체 (예를 들어, 인간 환자, 모델 유기체 등)에 정맥내 (IV) 투여하기 위해, 선택적으로 지질 나노입자 (LNP)와 함께 제형화된, 항체 물질 (예를 들어, IMAB362) 또는 이의 기능성 부분을 암호화하는 mRNA(들)가, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질에 대해 도 14에서 예시된 바와 같이, 암호화된 항체 물질 (예를 들어, IMAB362)을 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 효율적으로 생산하기 위해 종양 세포 (예를 들어, 간 세포)에 의해 흡수될 수 있다는, 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 항체 물질은 mRNA, 예를 들어 최소한의 면역원성으로 조작된 mRNA로부터 발현되거나, 및/또는 지질 나노입자 (LNP) 내에 제형화된다. 일부 구현예에서, 항체 물질을 암호화하는 mRNA는 변형된 뉴클레오티드 (예를 들어, 비-제한적으로, 슈도우리딘)를 포함할 수 있다.
아울러, 본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같은 전달되는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 능력이 종양 세포 (예를 들어, 종양 세포)에 대해 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및/또는 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 유도하고 동시에 수여 개체의 면역 시스템을 이용해 화학요법 및/또는 기타 항암 요법의 세포독성 효과(들)를 강화할 수 있다는, 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 이러한 조합 요법은 예를 들어 단독 투여된 개별 요법 및/또는 다른 적절한 기준에 비해 무진행 생존 및/또는 전체 생존을 연장할 수 있다.
특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명에서는, 예를 들어 겜시타빈, 옥살리플라틴 및 5-플루오로우라실과 같은 특정 화학치료제가 췌장 암 세포주에 존재하는 CLDN-18.2 발현 수준을 상향 조절하는 것으로 입증되었으며; 아울러, 이들 물질이 CLDN-18.2-음성 세포주에서 데 노보 발현을 증가시키는 것으로는 관찰되지 않은 것으로, 관찰하였다. 예를 들어, Tureci et al., (2019) "Characterization of Zolbetuximab in pancreatic cancer models." In Oncoimmunology 8 (1), pp. e1523096을 참조한다.
본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법이, (예를 들어, 하나 이상의 화학치료제에 노출 결과일 수 있거나 또는 노출로 인해 발생한 바와 같이) 종양 세포에서 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성 증가에 (예를 들어, 나타내는 것으로 확인된 및/또는 나타낼 것으로 예상 또는 예측) 의해 특정되는 종양(들)(예를 들어, 종양 세포, 종양(들) 및/또는 종양 세포(들)가 의심되거나 및/또는 검출된 적 있는 개체 등)에 투여할 경우, 특히 유용하거나 및/또는 효과적일 수 있다는, 견해를 제시한다. 실제, 특히, 본 발명은, 본원에 기술된 바와 같이 제공된 CLDN-18.2-표적화 요법 (예를 들어, RNA, 특히 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 mRNA와 같은 핵산의 투여)이, 하나 이상의 CLDN-18.2-강화제 (예를 들어, 하나 이상의 특정 화학치료제)와 조합하여 (예를 들어, 제공받은 적 있는, 및/또는 제공받고 있거나 또는 노출된 적 있는 개체에) 투여할 경우, 상승적인 치료 효과를 제공할 수 있음을, 교시한다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법은 종양 세포에서 CLDN-18.2 발현 및/또는 활성을 상향 조절할 것으로 예측되거나 및/또는 입증된 기타 항암제와 조합하여 이용할 수 있다.
이에, 본 발명은, 특히, 암, 구체적으로, CLDN-18.2의 발현과 관련있는 암을 치료하기 위한 통찰력과 기술을 제시한다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 췌장암을 치료하는데 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 위암 또는 위식도암을 치료하는데 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 담관계암을 치료하는데 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 난소암을 치료하는데 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 국소 진행된 종양에 적용할 경우 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 절제불가한 종양에 적용할 경우 효과적이다. 일부 구현예에서, 제공된 기술은 전이성 종양에 적용할 경우 효과적이다.
I. Claudin-18.2 폴리펩타이드
Claudin-18.2 (CLDN-18.2)는 Claudin-18의 암-관련 스플라이스 변이체이다. CLDN-18.2는 상피 및 내피에서 밀착 연접을 형성하는데 참여하는 구조적으로 비슷한 단백질 20종 이상으로 이루어진 클라우딘 패밀리의 구성원이다.
건강한 조직에서 CLDN18 발현. Claudin18.2는 막에 걸쳐있는 도메인 4개와 소형 세포외 루프 2개를 함유한 27.8 kDa의 단백질이다 (Niimi et al. 2001). CLDN-18.2는 위 상피의 밀착 연접 분자이다. 위 밀착 연접은 위 라이닝을 손상시킬 수 있는 위산이 접근하지 못하도록 고도로 특수화되어 있다.
CLDN-18.2는 매우 선택적인 위 계열의 항원이다 (Sahin et al. 2008). 전형적으로, 이의 발현은 위 샘의 소와 및 기저 영역 내 위 상피의 수명이 짧은 분화된 세포들로 제한된다. 위 샘의 분화된 상피 세포를 계속적으로 보충해주는 줄기 세포 구역은 CLDN-18.2-음성이다. 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 통상적으로, 인체의 다른 정상 세포 타입들은 전사 수준 또는 단백질 수준에서 CLDN-18.2를 발현하지 않는 것으로, 보인다.
암에서 CLDN18 발현. CLDN-18.2는 위암, 위식도암 (GE) 및 췌장암 (PC) (Karanjawala et al. 2008; Coati et al. 2019) 등의 다양한 인간 암 및 전암성 병변 (Woll et al. 2014; Tanaka et al. 2011)에서 발현된다. CLDN-18.2의 종양-관련 발현은 또한 난소암 (Sahin et al. 2008), 담도암 (Shinozaki et al. 2011) 및 폐암 (Micke et al. 2014)에서도 검출된 바 있다.
원발성 위 선암종 (GAC)의 약 77%가 CLDN-18.2+이다. GAC의 56%는 종양 세포의 60% 이상에서 면역조직화학적 분석에 따라 염색 강도 ≥ 2+로 정의되는, 강한 CLDN-18.2 발현성을 나타낸다. CLDN-18.2 발현은 장 위암보다는 미만성 위암에서 더 빈번하다. CLDN-18.2 단백질은 또한 위암의 림프절 전이 및 난소로의 원위 전이 (소위 크루켄베르크 종양)에서도 빈번하게 검출된다. 아울러, 식도 선암종의 50%도 CLDN-18.2를 유의하게 발현한다.
췌장암에서 CLDN-18.2는 췌장 도관 선암종 (PDAC)에서 60-90%의 유병률로 발현된다 (Karanjawala et al. 2008; Woll et al. 2014). PDAC는 전체 췌장 신생물의 80% 이상을 차지하는, 유럽에서 7번째로 흔한 암으로서, 유럽 연합에서 암-관련 사망 원인의 4번째를 차지한다 (Ferlay et al. 2010; Jemal et al. 2011; Seufferlein et al. 2012). PDAC 환자의 거의 60%가 막-결합형 CLDN-18.2를 발현하며, 췌장 신경내분비 신생물 환자의 20%에서는 CLDN-18.2가 이소성으로 활성화된다. CLDN-18.2는 원발성 및 전이성 PDAC 병변에서 발현된다 (Woll et al. 2014).
siRNA 기술에 의한 CLDN-18.2의 하향 조절이 위 암 세포의 증식을 저해하는 결과를 달성한 것으로 입증되어 있으며 (Niimi et al. 2001), 이는 CLDN-18.2+ 종양 세포의 증식 참여를 의미한다.
II. Claudin-18.2 폴리펩타이드를 표적화하는 항체 물질의 예
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 CLDN-18.2 폴리펩타이드의 제1 세포외 도메인 (ECD1)에 특이적으로 결합한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 암 세포에서 노출된 ECD1의 에피토프에 특이적으로 결합한다. 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 (예를 들어, 해리 상수에 의해 측정된 바와 같이) CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대해, 예를 들어 CLDN-18.2 폴리펩타이드의 ECD1의 에피토프에 대해, 적어도 약 10-4M, 적어도 약 10-5M, 적어도 약 10-6M, 적어도 약 10-7M, 적어도 약 10-8M, 적어도 약 10-9M 또는 그 이하의 결합 친화성을 가질 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면, 일부 경우에, (예를 들어, 해리 상수에 의해 측정된 바와 같이) 결합 친화성이 분자 2종 간의 수소 결합, 정전기적 상호작용, 소수성 및 반 데르 발스 힘과 같은 분자간 비-공유적인 상호작용에 의해 영향을 받을 수 있음을, 알 것이다. 대안적으로 또는 부가적으로, 리간드와 이의 표적 분자 간의 결합 친화성은 다른 분자의 존재에 의해 영향을 받을 수도 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면 본 발명에 따라 결합 친화성 및/또는 해리 상수를 측정하는 다양한 기술들에 익숙할 것이며, 그 예로는, 비-제한적으로, ELISA, 겔-쉬프트 분석, 풀-다운 분석 (pull-down assay), 평형투석, 분석용 초원심분리, 표면 플라스몬 공명 (SPR), 바이오-층 간섭측정, 격자-커플링된 간섭측정 및 분광측정 분석 등이 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체는 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN18.2 폴리펩타이드에 특이적으로 결합할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체는 조직, 예를 들어 폐에서 대부분 발현되는 Claudin-18 (CLDN18.1)의 매우 밀접한 스플라이스 변이체 1을 비롯한 임의의 다른 클라우딘 패밀리 구성원에는 결합하지 않는다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 WO 2007/059997, WO2008/145338 및 WO2013/174510에 기술된 CLDN-18.2-표적화 항체 어느 하나일 수 있으며, 이들 문헌은 각각의 내용이 본원에 기술된 목적으로 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은, (a)(i) 아미노산 잔기 (GYTFTSYW)에 의해 표시되는 CDR1; (ii) 아미노산 잔기 (IYPSDSYT)에 의해 표시되는 CDR2; 및 (iii) 아미노산 잔기 (TRSWRGNSFDY)에 의해 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개)을 가진 가변성 중쇄 도메인; 및/또는 (b)(i) 아미노산 잔기 (QSLLNSGNQKNY)에 의해 표시되는 CDR1; (ii) 아미노산 잔기 (WAS)에 의해 표시되는 CDR2; 및 (iii) 아미노산 잔기 (QNDYSYPFT)에 의해 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는, 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개)을 가진 가변성 경쇄 도메인을 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은, US 9,751,934에 기술된 바와 같이, 관련 서열 (예를 들어, 가변성 영역 서열, 예컨대, CDR 및/또는 프래임워크 (FR) 서열)이거나 또는 이를 함유한, 중쇄 아미노산 서열 및 경쇄 아미노산 서열을 가진다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 아래 기재된 바와 같이 서열번호 1 (서열번호 1은 US 9,751,934의 서열번호 118에 해당하며, 서열번호 1의 밑줄 친 아미노산 서열은 분비 신호 서열임)의 아미노산 잔기 20-467로 표시되는 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 중쇄와, 아래 기재된 바와 같이 서열번호 2 (서열번호 2는 US 9,751,934의 서열번호 125에 해당하며, 서열번호 2의 밑줄 친 아미노산 서열은 분비 신호 서열임)의 아미노산 잔기 21-240으로 표시되는 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 경쇄를 가진다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 (a)(i) 서열번호 1의 아미노산 잔기 45-52로 표시되는 CDR1; (ii) 서열번호 1의 아미노산 잔기 70-77로 표시되는 CDR2; 및 (iii) 서열번호 1의 아미노산 잔기 116-126로 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개를 비롯한)을 가진 가변성 중쇄 도메인; 및/또는 (b)(i) 서열번호 2의 아미노산 잔기 47-58로 표시되는 CDR1; (ii) 서열번호 2의 아미노산 잔기 76-78로 표시되는 CDR2; 및 (iii) 서열번호 2의 아미노산 잔기 115-123로 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개를 비롯한)을 가진 가변성 경쇄 도메인을 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하거나 또는 이로 구성되는 중쇄와, 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하거나 또는 이로 구성되는 경쇄를 가진다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 잠재적인 면역원성을 낮추거나 및/또는 분비를 개선하도록 조작될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질의 뮤라인 분비 신호 서열은 인간의 분비 신호 서열로 치환할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 아래 기재된 바와 같이 서열번호 3 (밑줄 친 아미노산 서열은 분비 신호 서열임)의 아미노산 잔기 27-474로 표시되는 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 중쇄와, 아래 기재된 바와 같이 서열번호 4 (밑줄 친 아미노산 서열은 분비 신호 서열임)의 아미노산 잔기 27-246으로 표시되는 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 경쇄를 가진다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질은 서열번호 3의 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 중쇄와, 서열번호 4의 아미노산 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 경쇄를 가진다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 항체는 IMAB362 (졸베툭시맵, 클라우딕시맵으로도 알려져 있음)이다. IMAB362는 CLDN-18.2를 표적화하는 항체로서, 임상 개발 중이며 (NCT01630083, NCT03816163, NCT03653507, NCT03505320, NCT03504397), 당해 기술 분야에 공지되어 있다 (예를 들어, Sahin et al. 2018; Sahin et al. 2017; Al-Batran et al. 2017a; Al-Batran et al. 2017b; Tureci et al. 2019; Trarbach et al. 2014; Morlock et al. 2018a; Schuler et al. 2016; Lordick et al. 2016; Morlock et al. 2018b). 이의 표적인 CLDN-18.2는 매우 선택적인 종양-관련 표면 마커이다.
Ganymed Pharmaceuticals GmbH에 의해 개발되었으며 Astellas Pharma Inc.에 인수된 IMAB362는 밀착 연접 단백질 CLDN-18.2를 표적화하는 완전한 IgG1 항체로서, 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 통해 세포 사멸을 매개한다. IMAB362는 CLDN-18.2의 제1 세포외 도메인 (ECD1)을 높은 친화성 및 특이성으로 인지한다 (Sahin et al. 2008; Tureci et al. 2011). 에피토프는 정상적인 상피 장벽에서는 항체가 접근하지 못한다. 밀착 연접의 파괴 및 세포 극성 소실이 암의 초기 홀마크이다. 이 공정으로 IMAB362의 에피토프가 노출된다. IMAB362는 조직, 예를 들어 폐에서 대부분 발현되는 Claudin 18 (CLDN18.1)의 밀접하게 연관된 스플라이스 변이체 1을 비롯한 임의의 기타 클라우딘 패밀리 구성원에는 결합하지 않는다.
IMAB362 + 에피루비신, 옥살리플라틴 및 카페시타빈 (EOX)이 위 및 위식도 암을 앓고 있는 제1선 환자들에서 EOX에 대한 2상 FAST 시험 (NCT01630083)으로 조사되었다 (Morlock et al. 2018a; Schuler et al. 2016; Al-Batran et al. 2016; Lordick et al. 2016; Morlock et al. 2018b). FAST 환자 집단은 종양 세포의 ≥ 40%가 CLDN-18.2를 발현하고 중간 내지 강한 (≥ 2+) 염색 강도를 가진 종양 환자로 구성되었다. 종양 세포의 ≥70%가 CLDN-18.2를 발현하고 염색 강도가 ≥2+인 종양 환자의 서브세트가, 800/600 mg/kg2 용량의 IMAB362 치료시 가장 유익하였으며, 이들의 전체 생존율 (OS) 중앙값이 거의 2배였다 (Al-Batran et al. 2016; Lordick et al. 2016). ≥70%가 CLDN-18.2를 발현하는 경우, IMAB362의 OS 이점 (+33.1주; p < 0.0005)은 중앙 독립 검토 진행에서의 유의한 지연 (+14.5주; p < 0.0005)과 보다 우수한 객관적인 반응 비율 (ORR)(35.1% vs 27.1%)을 동반하였다. EOX에 IMAB362의 추가는 환자-관련 결과에 부정적인 영향을 미치지 않았다. 실험 내내 전반적인 건강 상태 또는 전체 ST022 점수에 대한 혼합 효과 모델 반복 측정에서, 치료군들 간에 유의한 차이는 관찰되지 않았지만, IMAB362 + EOX는 EOX 단독과 비교해 전반적인 건강 점수의 악화를 2.6개월로 유의하게 지연하였다 (p = 0.008).
또한, IMAB362는 Astellas Pharma Inc.에서도 CLDN-18.2+ 위/위식도 암 및 췌장암을 가진 환자를 대상으로 한 2상 및 3상 시험의 글로벌 개발 프로그램으로 조사되었다.
IMAB362는 아래 표 1에 나타낸 바와 같이 다양한 임상 실험들에서 조사되었다.
표 1: IMAB362의 투여를 수반한 일부 임상 실험들에 대한 요약
임상 시험 식별명 | 환자 집단 | 치료 | 참조문헌 |
Ph1 NCT00909025 FIH 시험 |
CLDN-18.2+ 위식도/ 위 선암종; 수술 불가한 국소 진행된, 표준 요법에 대해 난치성 또는 재발성 |
IMAB362, 단일 제제, 1회 투여 | (Sahin et al. 2018; Sahin et al. 2017) |
Ph1/Ph2a NCT01671774 PILOT 시험 |
CLDN-18.2+ 위, 위식도/GEJ 암종 | IMAB362, 반복 투여 + IL-2 + 졸레드론산 |
(Al-Batran et al. 2017b) |
Ph2a NCT01197885 MONO 시험 |
CLDN-18.2+ 위, 위식도/GEJ 선암종; 전이성, 난치성 또는 재발성 | IMAB362 단일 제제, 반복 투여 | (Tureci et al. 2019; Trarbach et al. 2014; Morlock et al. 2018a) |
Ph2 RCT 3-arm NCT01630083 FAST 시험 |
CLDN-18.2+ 위, 위식도/GEJ 선암종; 수술 불가한 국소 진행된, R2 결과의 절제 또는 전이성 질환 - 제1선 | IMAB362, 반복 투여, + EOX 대비 EOX 단독 (에피루비신, 옥살리플라틴, 카페시타빈) | (Morlock et al. 2018a; Schuler et al. 2016; Al-Batran et al. 2016; Lordick et al. 2016; Morlock et al. 2018b) |
Ph1 NCT04086758 | 위 또는 위-식도 연접 (GEJ) 선암종 | IMAB362 단일 제제 | |
Ph1NCT03528629 | 진행된 또는 전이성 CLDN-18.2+ 위 및 위-식도 연접 (GEJ) 암 | IMAB362 단일 제제 | |
Ph2NCT03816163 | 전이성 췌장 암/ 선암종 | IMAB362 + nab-파클리탁셀 + 겜시타빈 | |
Ph2NCT03505320 ILUSTRO 시험 |
CLDN-18.2 양성, 전이성 또는 진행된 절제 불가한 위 및 위식도 연접 (GEJ) 선암종 | IMAB362 단일 제제 vs IMAB362 + mFOLFOX6 |
|
Ph3 RCTNCT03653507 GLOW 시험 |
국소 진행된 절제 불가한 또는 전이성 위 또는 GEJ, 선암종 또는 암; CLDN-18.2+, HER2-음성, 제1선 치료 | IMAB362 + CAPOX (카페시타빈 + 옥살리플라틴); 위약 + CAPOX | |
Ph3NCT03504397 SPOTLIGHT 시험 |
국소 진행된 절제 불가한 또는 전이성 위 또는 GEJ; 선암종 또는 암; CLDN-18.2+, HER2-음성 | IMAB362 + mFOLFOX6; 위약 + mFOLFOX6 |
환자들에서 IMAB362의 안전성 프로파일은 잘 규명되어 있으며, 최대 1000 mg/m2 q3w (Cmax = 최대 603 ㎍/mL)로 반복 투여시 용량 제한 독성 없이 용인되었다 (Sahin et al. 2018; Tureci et al. 2019).
특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 종양 세포 사멸을 달성하기 위한 IMAB362의 주요 약리학적 작용 방식은 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC)을 수반한다. 조사한 시험관내 ADCC에 의해 입수한 용량-반응 곡선에 기반하여, 95%의 반응율을 제공하는 약물의 농도가 혈청내 IMAB362 농도 0.3-28 ㎍/mL에서 관찰되었다 (Sahin et al. 2018). 예를 들어, EC95 0.3-28 ㎍/mL의 ADCC에 의한 CLDN-18.2+ 세포의 효율적인 세포용해가 발표된 바 있다 (Sahin et al. 2018).
다양한 시험들을 통해, IMAB362가 충분히 용인되고, 구역질 및 구토가 주요 이상 사례 (AE)이며, 단일 제제 및 화학요법과의 조합에서 용량-제한 독성 (DLT) 및 임상 활성이 없는 것으로, 관찰되었다.
특히, 본 발명은, IMAB362 또는 이의 변이체 (예를 들어, 하나 이상의 (및 다수의 구현예들에서, 모든) CDR 서열, 하나 이상의 (및 다수의 구현예들에서, 모든) FR 서열, 및/또는 중쇄 및/또는 경쇄 가변성 서열 등을 비롯한, IMAB362의 한가지 이상의 특징을 공유하거나, 및/또는 IgG1, IgM, IgA 등과 같은 클래스 변이체인, 변이체)가 본원에 기술된 바와 같은 리보핵산의 투여를 통해 전달하기 특히 바람직한 항체일 수 있다는 견해를 제시한다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, 이러한 전달 방식이 IMAB362 자체 투여시 관찰되는 바와 비교해 IMAB362 치료-관련 이상 사례 (TEAE)의 발생 (예를 들어, 빈도 및/또는 중증도)이 저하된, 효과적인 투여를 달성할 수 있음을, 제시한다. IMAB362 (NCT01197885)에 대한 2a상 MONO 시험에서, TEAE가 환자의 82% (n = 44/54)에서 발생하였으며; 구역질 (61%), 구토 (50%) 및 피로 (22%)가 가장 빈번한 TEAE였다. 3등급 구토가 환자 12명 (22%)에서, 3등급 구역질이 8명 (15%)에서 보고되었다. 이들 환자는 600 mg/m2 용량을 투여받았다. 이 시험에서 관찰된 구역질 및 구토는 IMAB362를 멈추거나 또는 천천히 주입함으로써 조치하였는데, 이는 AE가 Cmax와 관련있다는 것을 의미한다 (Tureci et al. 2019).
구체적으로, 본 발명은, 특히, 본원에 기술된 리보핵산 ("RiboMab01")로서 전달된 IMAB362의 약동학 (PK) 프로파일에서 항체 농도는 점진적인 증가하였으며, 특히 투여 후 48-72시간에 IMAB362보다 Cmax가 더 낮은 것으로, 입증되었다. RiboMab01의 변형된 PK 프로파일에서는 IMAB362로 치료한 후 환자에서 관찰된 Cmax-관련 AE가 감소될 수 있다. 또한, 본 발명은, 설사와 같은 전신 부작용이 관찰되지 않음을 보여주는, 인간이 아닌 영장류 실험 데이터를 제시한다.
특히, 본 발명에서는 투여된 IMB362 항체에 대해 관찰된 유익한 위험/혜택 프로파일을 특히 의학적 요구가 높은 일부 적응증에서 인지하였으며, 본원에 기술된 바와 같은 전달이 효과적이며, 및/또는 특히 바람직할 수 있음을 제안한다.
III. 항체-기반의 치료제를 전달하기 위한 RNA 기술
재조합 단백질 항체들은 질환 또는 장애 (예를 들어, 암)를 치료하기 위한 생물제제로 널리 사용되고 있지만, 예를 들어 긴 제조 공정 개발, 그리고 항체 유도체의 경우에는 짧은 혈청 반감기 등의 여러가지 문제점을 가지고 있다. 본 발명은, 특히, 예를 들어, 긴 제조 공정 개발, 그리고 항체 유도체의 경우에는 짧은 혈청 반감기 등의, 재조합 항체 기술의 일부 한계를, 항체-기반의 새로운 치료제 계열로서 환자의 세포에서 직접 RiboMab로 지칭되는 항체 물질을 발현시키기 위한 방식으로서 RNA 기술을 활용함으로써, 해결하는 기술을 제공해준다. 일부 구현예에서, 본 발명은, 특히, 정맥내 (IV) 투여용으로 지질 나노입자 (LNP)와 함께 제형화된 RiboMab가 암호화된 RiboMab 항체를 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 효율적으로 생산하기 위해 세포 (예를 들어, 간 세포)에 흡수시킬 수 있다는 견해를 제공해준다 (도 14). 일부 구현예에서, RiboMab는 mRNA에 의해, 예를 들어, 최소 면역원성을 위해 조작된 및/또는 지질 나노입자 (LNP) 내 제형화된 mRNA에 의해 암호화된 항체 물질이다. 일부 구현예에서, 항체 물질을 암호화하는 mRNA는 변형된 뉴클레오티드 (예를 들어, 비-제한적으로, 슈도우리딘)를 포함할 수 있다.
RiboMab 기술은 다양한 항체 형태를 전달하기 위해 활용할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, RiboMab 기술은, 예를 들어, 비-제한적으로, IgG를 비롯한, 전체 면역글로불린 (Ig)를 발현하는데 이용할 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 면역글로불린 (Ig)은 항체의 중쇄를 암호화하는 제1 암호화 영역과 항체의 경쇄 가변성 도메인을 암호화하는 제2 암호화 영역을 포함하는 단일 ssRNA에 의해 암호화될 수 있으며, 여기서 단일 ssRNA는 각각의 중쇄 및 경쇄를 만들기 위해 내부 리보솜 도입 부위 (IRES) 또는 다른 내부 프로모터 또는 펩타이드 서열, 예를 들어, "자가-절단성" 2A 또는 2A-유사 서열을 포함하거나 또는 이를 암호화하며 (예를 들어, Szymczak et al. Nat Biotechnol 22:589, May 2004; ePub April 4 2004 참조), 이후 가공 처리되어 전체 IgG를 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 Ig는 2개의 분리된 ssRNA, 즉 항체의 중쇄를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 항체의 경쇄를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 이후 항체의 해당 체인으로 번역되어, 종양 세포에서 전체 IgG 항체로 조립된다.
일부 구현예에서, RiboMab 기술을 이용해, 이중 특이성 항체 변이체를, 예를 들어, 도 12 (패널 A)에 예시된 바와 같이 또는 Stadler et al. (2016) Oncoimmunology 5(3): e1091555; 및/또는 Stadler et al. (2017) Nature Medicine 23(7): 815-817에 언급된 바와 같이, 발현시킬 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 2가 항체 물질은 제1 표적에 대한 단쇄 가변성 단편 (scFv)을 암호화하는 제1 암호화 영역과 제2 표적에 대한 scFv를 암호화하는 제2 암호화 영역을 포함하는 단일한 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 일부 구현예에서, 2가 항체 물질은 2개의 분리된 ssRNA, 즉 제1 표적에 대한 scFv를 암호화하는 제1 암호화 영역과 제2 표적에 대한 scFv를 암호화하는 제2 암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 동일한 제1 표적에 대한 scFv를 암호화하는 암호화 영역과 동일한 제2 표적에 대한 경쇄 Fab를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 이후 항체의 서브유닛으로 번역되고, 종양 세포에서 이중 특이성 항체로 생성된다.
일부 구현예에서, RNA 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA)은 담체와 함께 전달될 수 있다. 일부 구현예에서, 암호화된 RiboMab 항체를 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 효율적으로 생산하기 위해, RNA/LNP는 정맥내 (IV) 투여되며, 종양 세포 (예를 들어, 간 세포)에 의해 흡수된다.
A.
Claudin-18.2 폴리펩타이드 및 이의 조성물을 겨냥하는 항체 물질을 암호화하는 단일 가닥 RNA (ssRNA) 제공
일부 구현예에서, 하나 이상의 단일 가닥 RNA (ssRNA)는 상기 표제 "Claudin-18.2 폴리펩타이드를 표적화하는 항체 물질의 예"의 섹션에서 기술된 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA는 전술한 또는 본원에 예시된 항체 물질 IMAB362를 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함한다.
임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, 특히, 일부 구현예에서, 항체 물질 IMAB362가 CLDN-18.2에 특이적으로 결합하고, 또한 CLDN18.1에 비해 CLDN-18.2에 선호적으로 결합하므로, 적어도 부분적으로 특히 유용하고 및/또는 효과적일 수 있다는, 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 교시 내용은 CLDN-18.2에 특이적인 다른 항체 물질, 특히 CLDN18.1에 비해 CLDN-18.2에 선호적으로 결합하는 항체에도 적용가능할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 하나 이상의 단일 가닥 RNA (ssRNA)는 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대해 적어도 50% 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 보다 높은 결합 친화성을 가진다. 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대해 적어도 1.1배 또는 그 이상, 예를 들어 적어도 2배, 적어도 5배, 적어도 10배, 적어도 25배, 적어도 50배, 적어도 75배, 적어도 100배, 적어도 500배, 적어도 1000배, 적어도 5000배, 적어도 10,000배 또는 그 보다 높은 결합 친화성을 가진다. 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 CLDN18.1 등의 임의의 다른 claudin 계열의 구성원에는 검출가능하게 결합하지 않는다. 일부 구현예에서, 항체 물질은 항체이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 항체 물질은 항원 결합 단편이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 (그리고 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA, 예를 들어 mRNA와 같은 RNA에 의해 암호화될 수 있는) 항체 물질은 CLDN-18.2 폴리펩타이드의 제1 세포외 도메인 (ECD1)에 특이적으로 결합한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 항체 물질은 암 세포에서 노출된 ECD1의 에피토프에 특이적으로 결합한다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 가변성 중쇄 (VH) 도메인과 항체 물질의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 암호화한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 이러한 VH 도메인(들) 및 VL 도메인(들)은 단일한 ssRNA 구조체에 의해 암호화될 수 있으며; 대안적으로, 일부 구현예에서, 이는 적어도 2개의 개별 ssRNA 구조체들로 분리되어 각각 암호화될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에서 활용되는 바와 같은 ssRNA는, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 적어도 VH 도메인을 암호화하는 중쇄-암호화 영역; 및 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 적어도 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 포함하는 2 이상의 암호화 영역들을 포함한다. 대안적인 구현예에서, 조성물은 (i) CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 적어도 VH 도메인을 암호화하는 중쇄-암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 (ii) CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 적어도 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA를 포함한다.
일부 구현예에서, 중쇄-암호화 영역은 불변성 중쇄 (CH) 도메인을 추가로 암호화할 수 있으며; 및/또는 경쇄-암호화 영역은 불변성 경쇄 (CL) 도메인을 추가로 암호화할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 중쇄-암호화 영역은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 VH 도메인, CH1 도메인, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 면역글로불린 형태 (예를 들어, IgG)로 암호화할 수 있으며; 및/또는 경쇄-암호화 영역은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 VL 도메인과 CL 도메인을 Ig 형태 (예를 들어, IgG)로 암호화할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 전체 면역글로불린 (Ig)은 CLDN-18.2 Ig 항체 (예를 들어, IgG)의 중쇄를 암호화하는 제1 암호화 영역과 CLDN-18.2 Ig 항체 (예를 들어, IgG)의 경쇄 가변성 도메인을 암호화하는 제2 암호화 영역을 포함하는 단일한 ssRNA에 의해 암호화될 수 있으며, 단일한 ssRNA는 항체의 중쇄와 경쇄를 포함하는 융합 단백질을 수득하기 위한 단백질 번역, 및 융합 단백질을 적절한 프로테아제에 의해 각각의 중쇄 및 경쇄로 절단하는 번역 후 절단이 필요하며, 이후에 이는 가공 처리되어 전체 Ig (예를 들어, IgG)를 형성할 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 Ig는 2개의 분리된 ssRNA, 즉 CLDN-18.2 Ig 항체 (예를 들어, IgG)의 중쇄를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 CLDN-18.2 Ig 항체 (예를 들어, IgG)의 경쇄를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 이후 항체의 각 체인으로 번역되고, 종양 세포에서 전체 Ig 항체 (예를 들어, IgG)로 만들어진다. 일부 구현예에서, IgG 형태로 하나 이상의 ssRNA에 의해 암호화되는 항체 물질은 IgG1이다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄-암호화 영역은 (i) 아미노산 잔기 (GYTFTSYW)에 의해 표시되는 CDR1; (ii) 아미노산 잔기 (IYPSDSYT)에 의해 표시되는 CDR2; 및 (iii) 아미노산 잔기 (TRSWRGNSFDY)에 의해 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개를 비롯한)을 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하거나 또는 이로 구성된다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄-암호화 영역은 (i) 아미노산 잔기 (QSLLNSGNQKNY)에 의해 표시되는 CDR1; (ii) 아미노산 잔기 (WAS)에 의해 표시되는 CDR2; 및 (iii) 아미노산 잔기 (QNDYSYPFT)에 의해 표시되는 CDR3로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDR (예를 들어, CDR 1개, CDR 2개 및 CDR 3개를 비롯한)을 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함하거나 또는 이로 구성된다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄 암호화 영역은 서열번호 1의 아미노산 잔기 20-467로 표시되는 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 변형 (예를 들어, 안정성 및/또는 면역원성 저하)이 서열번호 1의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 서열번호 1은 적어도 하나 이상의 (예를 들어, 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 15, 적어도 20 또는 그 보다 많은 수의) 아미노산 변형 (예를 들어, 아미노산 삽입, 결손 및/또는 치환 등)을 하나 이상의 비-CDR 영역에 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 50개 이하 (예를 들어, 40개 이하, 30개 이상, 20개 이상, 10개 이상 또는 5개 이하 또는 그보다 적은 수)의 아미노산 변형이 서열번호 1의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄 암호화 영역은 서열번호 2의 아미노산 잔기 21-240로 표시되는 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 변형 (예를 들어, 안정성 및/또는 면역원성 저하)이 서열번호 2의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 서열번호 2는 적어도 하나 이상의 (예를 들어, 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 15, 적어도 20 또는 그 보다 많은 수의) 아미노산 변형 (예를 들어, 아미노산 삽입, 결손 및/또는 치환 등)을 하나 이상의 비-CDR 영역에 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 50개 이하 (예를 들어, 40개 이하, 30개 이상, 20개 이상, 10개 이상 또는 5개 이하 또는 그보다 적은 수)의 아미노산 변형이 서열번호 2의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄 암호화 영역은 서열번호 1의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄 암호화 영역은 서열번호 2의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄 암호화 영역은 서열번호 3의 아미노산 잔기 27-474로 표시되는 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 변형 (예를 들어, 안정성 및/또는 면역원성 저하)이 서열번호 3의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 서열번호 3은 적어도 하나 이상의 (예를 들어, 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 15, 적어도 20 또는 그 보다 많은 수의) 아미노산 변형 (예를 들어, 아미노산 삽입, 결손 및/또는 치환 등)을 하나 이상의 비-CDR 영역에 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 50개 이하 (예를 들어, 40개 이하, 30개 이상, 20개 이상, 10개 이상 또는 5개 이하 또는 그보다 적은 수)의 아미노산 변형이 서열번호 3의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄 암호화 영역은 서열번호 4의 아미노산 잔기 27-246로 표시되는 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 아미노산 변형 (예를 들어, 면역원성 및/또는 안정성 저하)이 서열번호 4의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 서열번호 4는 적어도 하나 이상의 (예를 들어, 적어도 1, 적어도 2, 적어도 3, 적어도 4, 적어도 5, 적어도 6, 적어도 7, 적어도 8, 적어도 9, 적어도 10, 적어도 15, 적어도 20 또는 그 보다 많은 수의) 아미노산 변형 (예를 들어, 아미노산 삽입, 결손 및/또는 치환 등)을 하나 이상의 비-CDR 영역에 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 50개 이하 (예를 들어, 40개 이하, 30개 이상, 20개 이상, 10개 이상 또는 5개 이하 또는 그보다 적은 수)의 아미노산 변형이 서열번호 4의 하나 이상의 비-CDR 영역에 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄 암호화 영역은 서열번호 3의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄 암호화 영역은 서열번호 4의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, ssRNA의 중쇄-암호화 영역은 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵 (예를 들어, 본원에 기술 및/또는 예시된 바와 같이)의 전장 중쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, ssRNA의 경쇄-암호화 영역은 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 전장 경쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA를 이용해, 2 이상의 표적 분자, 예를 들어 이중 하나인 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 결합하는, 이중 특이성 또는 다중 특이성 항체 물질을 암호화할 수 있다. 예를 들어, 도 12A는 하나 이상의 ssRNA에 의해 암호화된 예시적인 이중 특이성 항체를 예시한다. 또한, 예를 들어, Stadler et al. (2016) Oncoimmunology 5(3): e1091555; 및/또는 Stadler et al. (2017) Nature Medicine 23(7): 815-817을 참조한다. 일부 구현예에서, 2가 항체 물질은 (CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해) CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 단쇄 가변성 단편 (scFv)을 암호화하는 제1 암호화 영역과 제2 표적 (예를 들어, 일부 구현예에서, T 세포 수용체일 수 있음)에 대한 scFv를 암호화하는 제2 암호화 영역을 포함하는, 단일한 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 일부 구현예에서, 2가 항체 물질은 2개의 분리된 ssRNA, 즉 (CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해) CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 scFv를 암호화하는 암호화 영역과 제2 표적 (예를 들어, 일부 구현예에서, T 세포 수용체일 수 있음)에 대한 중쇄 항원 결합 단편 (Fab)을 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA 암호화 영역; 및 CLDN-18.2 폴리펩타이드를 표적화하는 scFv를 암호화하는 암호화 영역과 동일한 제2 표적에 대한 경쇄 Fab를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 일부 구현예에서, 2가 항체 물질은 2개의 분리된 ssRNA, 즉 제1 표적 (예를 들어, 일부 구현예에서, T 세포 수용체일 수 있음)에 대한 scFv를 암호화하는 암호화 영역과 (CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해) CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 중쇄 항원 결합 단편 (Fab)을 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제1 ssRNA; 및 동일한 제1 표적에 대한 scFv를 암호화하는 암호화 영역과 CLDN-18.2 폴리펩타이드를 표적화하는 경쇄 Fab를 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 제2 ssRNA에 의해 암호화될 수 있다. 이러한 제1 ssRNA와 제2 ssRNA는 종양 세포에서 항체의 서브유닛으로 이후에 번역되고, 이중 특이성 항체를 형성한다.
분비 신호-암호화 영역: 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 분비 신호-암호화 영역을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 분비 신호-암호화 영역은 하나 이상의 ssRNA에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이, 예를 들어 치료할 개체에 존재하는, 세포에 의한 번역시 분비되게 하며, 따라서 생물학적으로 활성인 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 혈장 농도로 달성된다. 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 분비 신호-암호화 영역은 비-인간 분비 신호를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 비-인간 분비 신호는 뮤라인 분비 신호일 수 있으며, 이는 일부 구현예에서 아미노산 서열 MGWSCIILFLVATATGVHS 또는 MESQTQVLMSLLFWVSGTCG이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 분비 신호-암호화 영역은 인간 분비 신호를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하며, 이는 일부 구현예에서 MRVMAPRTLILLLSGALALTETWAGS의 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 중쇄 도메인을 암호화하는 ssRNA에 함유되는 분비 신호-암호화 영역은, (i) 일부 구현예에서 MGWSCIILFLVATATGVHS의 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있는, 뮤라인 분비 신호 아미노산 서열을 암호화하거나; 또는 (ii) MRVMAPRTLILLLSGALALTETWAGS의 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있는, 인간 분비 신호 아미노산 서열을 암호화하는, 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 경쇄 도메인을 암호화하는 ssRNA에 함유되는 분비 신호-암호화 영역은, (i) 일부 구현예에서 MESQTQVLMSLLFWVSGTCG의 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있는, 뮤라인 분비 신호 아미노산 서열을 암호화하거나; 또는 (ii) MRVMAPRTLILLLSGALALTETWAGS의 아미노산 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있는, 인간 분비 신호 아미노산 서열을 암호화하는, 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는 (예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해) 하나 이상의 비-암호화 서열 요소를 포함할 수 있다. 비-암호화 서열 요소에 대한 예로는 비-제한적으로 3' 비-번역 영역 (UTR), 5' UTR, mRNA의 전사-동시 캡핑을 위한 캡 구조, 폴리 아데닌 (polyA) 꼬리 및 이들의 임의 조합을 포함한다.
UTR (5' UTR 및/또는 3' UTR) : 일부 구현예에서, 제공된 ssRNA는 대상 5' UTR 및/또는 대상 3' UTR을 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면, mRNA 서열의 비-번역 영역 (예를 들어, 3' UTR 및/또는 5' UTR)이 mRNA 안정성, mRNA 위치화 및/또는 번역 효율에 기여할 수 있음을 알 것이다.
일부 구현예에서, 제공된 ssRNA는 5' UTR 뉴클레오티드 서열 및/또는 3' UTR 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 5' UTR 서열은 (예를 들어, 하나 이상의 암호화 영역을 망라한) 코딩 서열의 3'에 작동가능하게 연결될 수 있다. 부가적으로 또는 대안적으로, 일부 구현예에서, 3' UTR 서열은 (예를 들어, 하나 이상의 암호화 영역을 망라한) 코딩 서열의 5'에 작동가능하게 연결될 수 있다.
본원에 기술된 임의의 측면들에 대한 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 5' 및 3' UTR 서열은, 대상 유전자의 오픈 리딩 프래임에 대한 자연 생성 또는 내인성 5' 및 3' UTR 서열을 포함하거나 또는 이로 구성될 수 있다. 대안적으로, 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 5' 및/또는 3' UTR 서열은 (예를 들어, 하나 이상의 암호화 영역을 망라한) 코딩 서열에 대해 내인성이 아니며; 일부 이러한 구현예에서, 이러한 5' 및/또는 3' UTR 서열은 전사되는 RNA 서열의 안정성 및/또는 번역 효율을 수정하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자라면, 3' UTR 서열내 AU-풍부 요소가 mRNA의 안정성을 낮출 수 있음을 알 것이다. 이에, 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, 3' 및/또는 5' UTR은 당해 기술 분야에 잘 공지된 UTR의 특성에 기초하여, 전사된 RNA의 안정성을 높이도록 선택 또는 설계할 수 있다.
예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자라면, 일부 구현예에서, 유전자의 오픈 리딩 프래임 서열의 Kozak 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는 뉴클레오티드 서열 또는 대상 뉴클레오티드 서열을 선택해 5' UTR을 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 이용할 수 있음을 알 것이다. 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, Kozak 서열은 일부 RNA 전사체의 번역 효율을 높이는 것으로 알려져 있지만, 효율적인 번역을 달성하기 위해 모든 RNA에 반드시 필요한 것은 아니다. 일부 구현예에서, 제공된 ssRNA 폴리뉴클레오티드는 RNA 게놈이 세포 안에서 안정적인 RNA 바이러스로부터 유래한 5' UTR을 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이) 다양한 변형된 리보뉴클레오티드들이, 예를 들어 전사된 RNA 서열의 엑소뉴클레아제 분해를 방해하기 위해 3' 및/또는 5' UTR에 이용될 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 5' UTR은 Kozak 영역과 조합된 인간 α-글로빈 mRNA로부터 유래할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA는 하나 이상의 3' UTR을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA는, 예를 들어 α2-글로빈, α1-글로빈, β-글로빈 (예를 들어, 인간 β-글로빈) mRNA와 같은, 글로빈 mRNA로부터 유래한 3'-UTR을 2 카피 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA의 암호화 서열과 폴리(A)-꼬리 사이에 위치할 수는, 인간 β-글로빈 mRNA로부터 유래한 2 카피의 3' UTR을 이용해, 단백질 발현 수준을 개선하고 및/또는 mRNA의 지속성을 연장할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA에 함유되는 3' UTR은 WO 2017/060314에 개시된 3' UTR 서열을 하나 이상 (예를 들어, 1, 2, 3 또는 이보다 많은 개수) 포함할 수 있으며, 이 문헌의 전체 내용은 본원에 기술된 목적으로 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 일부 구현예에서, 3'-UTR은 "스플리트의 아미노 말단 인핸서" (amino terminal enhancer of split, AES) mRNA (F로 지칭됨) 및 미토콘드리아에서 암호화된 12S 리보솜 RNA (I로 지칭됨)로부터 유래한 2 이상의 서열 요소 (FI 요소)의 조합일 수 있다. 이는 생체외 선택 공정에 의해 RNA 안정성을 부여하며 전체 단백질 발현을 높이는 서열로 동정되었다 (WO 2017/060314를 참조하며, 이 문헌은 원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
폴리A 꼬리 : 일부 구현예에서, 제공된 ssRNA는 폴리A 꼬리를 암호화하는 뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 폴리A 꼬리는 일련의 아데노신 뉴클레오티드들을 포함하는 뉴클레오티드 서열로서, 그 길이는 다양할 수 있으며 (예를 들어, 아데닌 뉴클레오티드 5개 이상), 아데노신 뉴클레오티드 최대 수백개일 수 있다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리는 아데노신 뉴클레오티드를 30개 이상, 예를 들어, 아데노신 뉴클레오티드 적어도 35, 적어도 40, 적어도 45, 적어도 50, 적어도 55, 적어도 60, 적어도 65, 적어도 70, 적어도 75, 적어도 80, 적어도 85, 적어도 90, 적어도 95, 적어도 100 또는 그 보다 많은 수로 포함하는 뉴클레오티드 서열이다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리는 폴리A 호모폴리머 꼬리이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리는 하나 이상의 변형된 아데노신 뉴클레오시드, 예를 들어, 비-제한적으로, 코르디오시핀 (cordiocipin) 및 8-아자아데노신을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리는 하나 이상의 비-아데노신 뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리는 WO 2016/005324에 언급된 바와 같이 파괴된 또는 변형된 폴리A 꼬리이거나 또는 이를 포함할 수 있으며, 문헌의 전체 내용은 본원에 기술된 목적을 위해 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA에 함유된 폴리A 꼬리는 하기를 포함하는 변형된 폴리A 서열이거나 또는 이를 포함할 수 있다: 링커 서열; 링커 서열의 5'에 위치한, 20개 이상의 연속적인 A 뉴클레오티드로 이루어진 제1 서열; 및 링커 서열의 3'에 위치한, 20개 이상의 연속적인 A 뉴클레오티드로 이루어진 제2 서열. 일부 구현예에서, 변형된 폴리A 서열은 10개 이상의 비-A 뉴클레오티드 (예를 들어, T, G, 및/또는 C 뉴클레오티드)를 포함하는 링커 서열; 링커 서열의 5'에 위치한, 30개 이상의 연속적인 A 뉴클레오티드로 이루어진 제1 서열; 및 링커 서열의 3'에 위치한, 70개 이상의 연속적인 A 뉴클레오티드로 이루어진 제2 서열을 포함할 수 있다.
5' 캡: 일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA는 5' 캡을 포함할 수 있으며, 이는 전사 중에 ssRNA에 병합되거나, 또는 전사 후 ssRNA에 연결될 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA는 mRNA의 전사-동시 캡핑을 위한 5' 캡 구조를 포함할 수 있다. 전사-동시 캡핑을 위한 캡 구조에 대한 예들은, 예를 들어 WO 2017/053297에 기술된 것을 비롯하여, 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 문헌의 전체 내용이 본원에 기술된 목적으로 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA에 함유된 5' 캡은 m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pG이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA에 함유되는 5' 캡은 캡1 구조 [m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O)ApG]이거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들)는, 하나 이상의 변형된 리보뉴클레오티드를, 예를 들어, 일부 구현예에서 이러한 ssRNA(들)의 안정성을 높이고 및/또는 ssRNA(들)의 세포독성을 낮추기 위해, 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA(들)의 A, U, C 및 G 리보뉴클레오티드 중 하나 이상이 변형된 리보뉴클레오티드로 치환될 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA에 존재하는 시티딘들 중 일부 또는 전부 변형된 시티딘으로 치환될 수 있으며, 이는 일부 구현예에서 예를 들어 5-메틸시티딘일 수 있다. 대안적으로 또는 부가적으로, 일부 구현예에서, ssRNA에 존재하는 우리딘들 중 일부 또는 전부 변형된 우리딘으로 치환될 수 있으며, 이는 일부 구현예에서 예를 들어 슈도우리딘, 예컨대 1-메틸슈도우리딘일 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA에 존재하는 우리딘들 모두 슈도우리딘, 예를 들어 1-메틸슈도우리딘으로 치환된다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 중쇄를 암호화하는 ssRNA는 5'에서 3' 방향으로 (a) 5' UTR-암호화 영역; (b) 분비 신호-암호화 영역; (c) 중쇄-암호화 영역; (d) 3' UTR-암호화 영역; 및 (e) 폴리A 꼬리-암호화 영역을 포함한다. 예를 들어, 도 13 을 참조한다. 일부 구현예에서, 5' UTR-암호화 영역은 Kozak 영역과 조합된 인간 α-글로빈 mRNA로부터 유래한 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 분비 신호-암호화 영역은 MRVMAPRTLILLLSGALALTETWAGS의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄-암호화 영역은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 VH 도메인, CH1 도메인, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 IgG 형태로 포함한다 (예를 들어, 본원에 기술된 형태, 예컨대 IMAB262, 또는 서열번호 3의 아미노산 잔기 27-474로 표시되는 아미노산 서열). 일부 구현예에서, 3' UTR-암호화 영역은 "스플리트의 아미노 말단 인핸서" (AES) mRNA (F로 지칭됨) 및 미토콘드리아에서 암호화된 12S 리보솜 RNA (I로 지칭됨)로부터 유래한 2 이상의 서열 요소 (FI 요소)의 조합이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리-암호화 영역은 변형된 폴리A 서열 (예를 들어, 연속적인 아데노신 30개 다음에 바로 링커 서열이 삽입되어 단절된 아데노신 100개로 된 서열)이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA는 CAP1 구조 또는 m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O)ApG를 포함하는 5' 캡을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA는 모든 우리딘이 N1-메틸슈도우리딘으로 치환된 것을 포함한다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 경쇄를 암호화하는 ssRNA는 5'에서 3' 방향으로 (a) 5' UTR-암호화 영역; (b) 분비 신호-암호화 영역; (c) 경쇄-암호화 영역; (d) 3' UTR-암호화 영역; 및 (e) 폴리A 꼬리-암호화 영역을 포함한다. 예를 들어, 도 13 을 참조한다. 일부 구현예에서, 5' UTR-암호화 영역은 Kozak 영역과 조합된 인간 α-글로빈 mRNA로부터 유래한 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 분비 신호-암호화 영역은 MRVMAPRTLILLLSGALALTETWAGS의 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 경쇄-암호화 영역은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 VL 도메인 및 CL 도메인을 IgG 형태로 포함한다 (예를 들어, 본원에 기술된 형태, 예컨대 IMAB262, 또는 서열번호 4의 아미노산 잔기 27-246로 표시되는 아미노산 서열). 일부 구현예에서, 3' UTR-암호화 영역은 "스플리트의 아미노 말단 인핸서" (AES) mRNA (F로 지칭됨) 및 미토콘드리아에서 암호화된 12S 리보솜 RNA (I로 지칭됨)로부터 유래한 2 이상의 서열 요소 (FI 요소)의 조합이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 폴리A 꼬리-암호화 영역은 변형된 폴리A 서열 (예를 들어, 연속적인 아데노신 30개 다음에 바로 링커 서열이 삽입되어 단절된 아데노신 100개로 된 서열)이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA는 CAP1 구조 또는 m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O)ApG를 포함하는 5' 캡을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA는 모든 우리딘이 N1-메틸슈도우리딘으로 치환된 것을 포함한다.
일부 구현예에서, ssRNA(들)은 하나 이상의 단일 가닥 mRNA이거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 조성물은 CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 중쇄 (예를 들어, 오픈 리딩 프래임, ORF)를 암호화하는 단일 가닥 mRNA 및 CLDN-18.2를 표적화하는 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 경쇄 (예를 들어, 오픈 리딩 프래임, ORF)를 암호화하는 단일 가닥 mRNA를 포함하며, 이는 종양 세포에 도입시, 종양 세포에서 각각의 서브유닛으로 번역된 다음 전체 IgG 항체로 조립된다. 예시적인 약물 물질을 도 13에 개략적으로 제시한다.
일부 구현예에서, RNA 약물 물질은, 각각 IgG CLDN-18.2 표적화 항체의 중쇄 (HC) 및 경쇄 (LC)를 암호화하는, ssRNA 2개의 조합이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 2종의 ssRNA는 각각 분리하여 제조될 수 있으며, RNA 약물 물질은 각각 IgG CLDN-18.2-표적화 항체의 HC 및 LC를 암호화하는 ssRNA들을 적절한 중량 비율, 예를 들어, HC- 및 LC-암호화 단일 가닥 RNA가 적절한 IgG 형성을 위해 약 1.5:1 -1:1.5인 중량 비율로 혼합함으로써, 제조할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 IgG 항체의 HC 및/또는 LC를 암호화하는 단일 가닥 RNA는 하나 이상의 비-암호화 서열 요소를, 예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 단일 가닥 RNA 올리고뉴클레오티드는 캡 구조를, 예를 들어, 세포외 및 세포내 RNase에 의한 분해로부터 RNA 분자 내성을 높일 수 있으며 더 높은 단백질 발현을 유발할 수 있는 캡 구조를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 캡 구조는 (m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O))ApG (cap1)이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 단일 가닥 RNA 올리고뉴클레오티드는 5' 및 3' 비-번역 영역 (UTR) 중 어느 하나 또는 양쪽에 하나 이상의 비-암호화 서열 요소를, 예를 들어, 5' 및 3' UTR에 분자의 번역 효율 및 세포내 반감기를 현저하게 높일 수 있는 자연 생성 서열 요소를 포함할 수 있다 (예, Holtkamp et al. 2006; Orlandini von Niessen et al. 2019). 일부 구현예에서, 예시적인 5' UTR 서열 요소는 인간 α-글로빈 및 Kozak 컨센서스 서열로부터 유래한 특징적인 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 예시적인 3' UTR 서열 요소는 "스플리트의 아미노 말단 인핸서" (AES) mRNA (F로 지칭됨) 및 미토콘드리아에서 암호화된 12S 리보솜 RNA (I로 지칭됨)로부터 유래한 2 이상의 서열 요소 (FI 요소)의 조합이거나 또는 이를 포함한다. 예를 들어, WO 2017/060314를 참조하며, 예시적인 3'UTR 서열 요소의 서열 정보에 대해 이의 전체 내용이 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 일부 구현예에서, 이러한 단일 가닥 RNA 올리고뉴클레오티드는 폴리(A)-꼬리를, 예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하도록 고안된 폴리(A)-꼬리를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 폴리(A)-꼬리는 아데노신 잔기 30개로 된 가닥 다음으로 뉴클레오티드 10개로 된 링커 서열, 그 다음으로 아데노신 잔기 70개로 된 가닥(A30L70)을 비롯하여, 뉴클레오티드 110개로 된 변형된 폴리(A) 서열이거나 또는 이를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 단일 가닥 RNA 올리고뉴클레오티드 하나 이상의 변형된 리보뉴클레오티드를 포함할 수 있다. 단순 예로서, 일부 구현예에서, 단일 가닥 RNA의 우리딘은, 면역-조절 활성을 낮추거나 및/또는 저해하여, 따라서 시험관내 전사된 RNA의 번역을 강화하기 위해, 변형된 유사체 (예를 들어, N1-메틸슈도우리딘)로 변형할 수 있다.
일부 구현예에서, RNA 약물 물질은 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 RNA-HC 구조의 제1 단일 가닥 RNA와 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 RNA-LC 구조의 제2 단일 가닥 RNA의 조합이거나 또는 이를 포함한다. 일부 이러한 구현예에서, RNA 약물 물질은 제1 단일 가닥 RNA와 제2 단일 가닥 RNA를 약 2:1의 중량 비율로 혼합하여 제조할 수 있다.
표 2. CLDN-18.2-표적화 IgG 항체를 암호화하는 단일 가닥 RNA 구조체들의 예
코드 DSI | RNA-HC (m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O)ApG)-hAg-Kozak-aCLDN-18.2_HC-FI-A30L70 |
화학적 계열 | 리보핵산 (RNA) |
암호화 단백질 | IgG CLDN-18.2-표적화 항체 (예를 들어, IMAB362)의 중쇄 (ORF) |
실험실 코드 DSI | RNA-LC (m2 7,3'-OGppp(m1 2'-O))ApG)-hAg-Kozak-aCLDN-18.2_LC -FI-A30L70 |
화학적 계열 | 리보핵산 (RNA) |
암호화 단백질 | IgG CLDN-18.2-표적화 항체 (예를 들어, IMAB362)의 경쇄 (ORF) |
실험실 코드 DS | RB_RMAB01 |
화학적 계열 | 리보핵산 (RNA) |
암호화 단백질 | IgG CLDN-18.2-표적화 RiboMab |
B.
예시적인 제조 공정
개별 단일 가닥 RNA는 당해 기술 분야에 공지된 방법에 의해 제조할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 단일 가닥 RNA는 시험관내 전사에 의해, 예를 들어 DNA 주형을 이용해 제조할 수 있다. 본원에 기술된 ssRNA를 제조하기 위해 시험관내 전사용 주형으로서 사용되는 플라스미드 DNA 역시 본 발명의 범위에 속한다.
DNA 주형은 적절한 RNA 중합효소 (예를 들어, T7 RNA-중합효소와 같은 재조합 RNA-중합효소)의 존재 하에 리보뉴클레오티드 트리포스페이트 (예를 들어, ATP, CTP, GTP, UTP)를 이용한 시험관내 RNA 합성에 이용한다. 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)는 변형된 리보뉴클레오티드 트리포스페이트의 존재 하에 합성할 수 있다. 단순 예로서, 일부 구현예에서, N1-메틸슈도우리딘 트리포스페이트 (m1ΨTP)를 사용해 우리딘 트리포스페이트 (UTP)를 치환할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자에게 자명한 바와 같이, 시험관내 전사 중에, (예를 들어, 본원에 기술 및/또는 예시된) RNA 중합효소는 전형적으로 단일 가닥 DNA 주형의 적어도 일부분을 3'-> 5' 방향으로 이동하여, 5'-> 3' 방향으로 상보적인 단일 가닥 RNA를 만든다.
ssRNA가 폴리A 꼬리를 포함하는 일부 구현예에서, 당해 기술 분야의 당업자라면, DNA 주형에, 예를 들어 적절한 꼬리 PCR 프라이머를 이용함으로써 이러한 폴리A 꼬리를 암호화할 수 있거나, 또는 시험관내 전사 후, 예를 들어 효소적 처리 (예를 들어, E. coli 폴리(A) 중합효소와 같은 폴리(A) 중합 효소를 이용하여)에 의해 ssRNA에 부가할 수 있음을 알 것이다.
일부 구현예에서, 당해 기술 분야의 당업자라면, RNA (예를 들어, mRNA)에 5' 캡 추가가, RNA가 리보솜에 인지 및 부착되어 번역을 용이하게 하고 번역 효율을 강화할 수 있음을, 알 것이다. 또한, 당해 기술 분야의 당업자라면, 5' 캡이 RNA 산물을 5' 엑소뉴클레아제 매개 분해로부터 보호하며, 따라서 반감기를 늘릴 수 있음을 알 것이다. 캡핑 방법은 당해 기술 분야에 공지되어 있으며; 당해 기술 분야의 당업자는, 일부 구현예에서, 캡핑 시스템 (예를 들어, 백시니아 바이러스의 캡핑 효소 등의 효소-기반의 캡핑 시스템)의 존재 하에 시험관내 전사 후 캡핑을 수행할 수 있음을 알 것이다. 일부 구현예에서, 캡이 전사 중에 ssRNA에 병합되도록, 캡을 시험관내 전사 중에, 여러가지 리보뉴클레오티드 트리포스페이트와 더불어 도입할 수 있다 (전사-동시 캡핑으로도 알려져 있음). 일부 구현예에서, 전사-동시 캡핑 (예를 들어, m2 7,3'-OGppp(m2'-O)ApG와 같이 본원에 기술된)은 시험관내 전사 중에 이용할 수 있다. 중합 중에, RNA가 5' 말단에서 5' 캡 유사체 (예를 들어, m2 7,3'-OGppp(m2'-O)ApG)로 캡핑된다. 일부 구현예에서, 반응 경로 중에 여러번 첨가하는 GTP 피드-배치 공정을 이용해 GTP를 저 농도로 유지하여, RNA를 효율적으로 캡핑할 수 있다.
RNA 전사 후, DNA 주형은 분해된다. 일부 구현예에서, 분해는 적절한 조건 하에 DNase I에 의해 달성될 수 있다.
일부 구현예에서, 시험관내 전사된 단일 가닥 RNA는 완충화된 용액 중에, 예를 들어, HEPES, 포스페이트 완충제 용액, 사이트레이트 완충제 용액, 아세테이트 완충제 용액과 같은 완충액 중에 제공될 수 있으며; 일부 구현예에서, 이러한 용액은 예를 들어, 약 6.5 - 약 7.5; 일부 구현예에서 대략 7.0의 범위의 pH로 완충화될 수 있다. 일부 구현예에서, 단일 가닥 RNA의 제조는 다음의 단계: 정제, 혼합, 여과 및/또는 충진 중 하나 이상의 단계를 더 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA는, 예를 들어, 단백질, DNA 단편 및/또는 뉴클레오티드와 같이, 제조 중에 이용되거나 또는 형성된 구성성분들을 제거하기 위해, (예를 들어, 일부 구현예에서, 시험관내 전사 반응 후) 정제할 수 있다. 당해 기술 분야에서 공지된 다양한 핵산 정제 방법을 본원에 따라 이용할 수 있다. 일부 정제 단계들은, 예를 들어, 석출, 컬럼 크로마토그래피 (예를 들어, 비-제한적으로, 음이온성, 양이온성, 소수성 상호작용 크로마토그래피 (HIC)), 고형 기질-기반의 정제 (예를 들어, 자기 비드-기반의 정제 등) 중 하나 이상이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA는 자기 비드-기반의 정제를 이용해 정제할 수 있으며, 이는 예를 들어 자기 비드-기반의 크로마토그래피이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA는 소수성 상호작용 크로마토그래피 (HIC) 및/또는 정용여과를 이용해 정제할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA는 HIC 및 후속적인 정용여과를 이용해 정제할 수 있다.
일부 구현예에서, dsRNA가 시험관내 전사 중에 부산물로서 수득될 수 있다. 일부 이러한 구현예에서, 제2 정제 단계를 수행해, dsRNA 오염물을 제거할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 셀룰로스 물질 (예를 들어, 미세결정 셀룰로스)을 사용해, dsRNA 오염물을, 예를 들어, 일부 구현예에서 크로마토그래피 방식으로 제거할 수 있다. 일부 구현예에서, 셀룰로스 물질 (예를 들어, 미세결정 셀룰로스)은 전처리하여, 잠재적인 RNase 오염물을, 예를 들어 자동멸균 후 염기성 수용액, 예를 들어 NaOH와 인큐베이션함으로써 불활성화할 수 있다. 일부 구현예에서, 셀룰로스 물질을 이용해, WO 2017/182524에 언급된 방법에 따라 ssRNA를 정제할 수 있으며, 이 문헌의 전체 내용은 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
일부 구현예에서, ssRNA 배치는 여과 및/또는 농축 중 하나 이상의 단계에 의해 추가로 처리할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA(들)는, 예를 들어, dsRNA 오염물을 제거한 후, 예를 들어, ssRNA의 농도를 요망하는 RNA 농도로 적정하거나 및/또는 완충제를 약물 물질 완충제로 교체하기 위해, (예를 들어, 일부 구현예에서, 접선 유동 여과에 의해) 정용여과를 추가로 거칠 수 있다.
CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 중쇄를 암호화하는 제1 ssRNA와 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 경쇄를 암호화하는 제2 ssRNA에 의해 암호화되어, 둘다 번역 및 발현되었을 때 전체 항체가 제조되는 일부 구현예에서, 제1 ssRNA 배치와 제2 ssRNA 배치는 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이) 각각 정제한 후, 적정 비율로 혼합할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 제1 ssRNA 배치 및 제2 ssRNA 배치는 약 1:1.5 내지 약 1.5:1, 예를 들어, 일부 구현예에서 약 1:1의 몰 비율로 혼합할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA는 적정 용기에 충진하기 전에 0.2 ㎛ 여과를 통해 처리할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA 및 이의 조성물은 본원에 기술된 바와 같은 공정에 따라 또는 당해 기술 분야에 공지된 바와 같이 제조할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA 및 이의 조성물은 대규모로 제조할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, ssRNA 배치는 1 g 이상, 2 g 이상, 3 g 이상, 4 g 이상, 5 g 이상, 6 g 이상, 7 g 이상, 8 g 이상, 9 g 이상, 10 g 이상, 15 g 이상, 20 g 이상 또는 그보다 높은 규모로 제조할 수 있다.
일부 구현예에서, RNA 정성 관리를 ssRNAs 및/또는 이를 포함하는 조성물의 제조 중 임의 시점에 수행하거나 및/또는 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, RNA 실체 (예를 들어, 서열, 길이 및/또는 RNA 특성), RNA 온전성, RNA 농도, 잔류 DNA 주형 및 잔류 dsRNA 중 하나 이상 등의, RNA 정성 관리 매개변수를, ssRNA 제조 공정의 각 단계 후 또는 특정 단계 후, 예를 들어 시험관내 전사 및/또는 각 정제 단계 후, 분석 및/또는 모니터링할 수 있다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 시험관내 전사에 의해 제조된) ssRNA의 안정성 및/또는 2 이상 (예를 들어, 항체의 HC를 암호화하는 하나와 항체의 LC를 암호화하는 다른 하나)의 RNA를 포함하는 조성물을, 다양한 검사 보관 조건에서, 예를 들어, 실온 대비 냉장고 또는 0℃ 미만의 온도에서 소정의 기간 동안 (예를 들어, 3개월 이상, 6개월 이상, 9개월 이상, 12개월 이상 또는 더 장기간) 평가할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA) 및/또는 이의 조성물은 냉장 온도 (예를 들어, 약 4℃ 내지 약 10℃)에서 적어도 1개월 이상 동안, 예를 들어, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월 또는 적어도 12개월 또는 더 장기간 안정적으로 보관할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA) 및/또는 이의 조성물은 0℃ 미만의 온도 (예를 들어, -20℃ 이하)에서 적어도 1개월 이상, 예를 들어, 적어도 2개월, 적어도 3개월, 적어도 4개월, 적어도 5개월, 적어도 6개월, 적어도 7개월, 적어도 8개월, 적어도 9개월, 적어도 10개월, 적어도 11개월 또는 적어도 12개월 또는 더 장기간 안정적으로 보관할 수 있다. 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA) 및/또는 이의 조성물은 실온 (예를 들어, 약 25℃)에서 적어도 1개월 이상 동안 안정적으로 보관할 수 있다.
일부 구현예에서, 실시예 11에 기술된 하나 이상의 평가를 제조 중에 또는 기타 ssRNA 제조 및 이용 중에 (예를 들어, 방출 검사로서) 활용할 수 있다.
일부 구현예에서, 하나 이상의 정성 관리 매개변수는, 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA는 (예를 들어, 후속적인 제형화 및/또는 유통을 위한 출시를 위해) 허용 기준을 충족하거나 이를 초과하는지를 결정하기 위해, 분석할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 정성 관리 매개변수로는, 비-제한적으로, RNA 온전성, RNA 농도, 잔류 DNA 주형 및/또는 잔류 dsRNA를 포함할 수 있다. RNA 특성을 평가하기 위한 구체적인 방법들은 당해 기술 분야에 공지되어 있으며; 예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자라면, 일부 구현예에서, 한가지 이상의 분석 검사를 RNA 정성 평가에 이용할 수 있음을 알 것이다. 이러한 구체적인 분석 검사에 대한 예로는 비-제한적으로 겔 전기영동, UV 흡수 및/또는 PCR 분석을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, ssRNA 배치는 본원에 기술된 한가지 이상의 특징에 대해 평가해, 다음 행동 단계(들)를 결정할 수 있다. 예를 들어, 단일 가닥 RNA의 배치는, RNA 정성 평가에서 단일 가닥 RNA 배치가 관련한 허용 기준을 충족하거나 또는 초과하는 것으로 확인된다면, 하나 이상의 추가적인 단계, 즉 제조 및/또는 제형화 및/또는 유통하는 것으로 지정할 수 있다. 그렇지 않을 경우, 단일 가닥 RNA 배치가 허용 기준을 충족 또는 초과하지 않는다면, 대안적인 조치 (예를 들어, 배치 폐기)를 수행할 수 있다.
일부 구현예에서, 평가 결과를 총족시키는 ssRNA 배치는 하나 이상의 추가적인 단계, 즉 제조 및/또는 제형화 및/또는 유통에 이용할 수 있다.
IV. RNA 전달 기술
제공된 ssRNA (예를 들어, mRNA)는 본원에 기술된 치료학적 용도로, 예를 들어, 네이키드 RNA로서 전달 또는 바이러스 및/또는 비-바이러스 벡터, 폴리머-기반의 벡터, 지질-기반의 벡터, 나노입자 (예를 들어, 지질 나노입자, 폴리머성 나노입자, 지질-폴리머 하이브리드 나노입자 등), 및/또는 펩타이드-기반의 벡터에 의해 매개한 전달 등의, 당해 기술 분야에 공지된 임의의 적절한 방법을 이용해 전달할 수 있다. 예를 들어, Wadhwa et al. "Opportunities and Challenges in the Delivery of mRNA-Based Vaccines" Pharmaceutics (2020) 102 (27 pages)을 참조하며, 이의 내용은 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA를 전달하는데 유용할 수 있는 다양한 방식에 대한 정보에 대해 원용에 의해 본 명세서에 포함된다,
일부 구현예에서, 하나 이상의 ssRNA는 (예를 들어, 일부 구현예에서, 정맥내 주사에 의해) 전달하기 위해 지질 나노입자를 이용해 제형화할 수 있다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자는 ssRNA (예를 들어, mRNA)를 세포외 RNase로부터 보호하도록 설계할 수 있거나, 및/또는 RNA를 종양 세포 (예를 들어, 간 세포)로 전신 전달하기 위해 조작할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 지질 나노입자는, ssRNA를 필요한 개체에 정맥내 투여하는 경우에, ssRNA (예를 들어, mRNA)를 전달하기에 특히 유용할 수 있다.
A. 지질 나노입자
일부 구현예에서, 제공된 ssRNA (예를 들어, mRNA)는 지질 나노입자를 이용해 제형화할 수 있다. 다양한 구현예들에서, 이러한 지질 나노입자는 약 30 nm 내지 약 150 nm, 약 40 nm 내지 약 150 nm, 약 50 nm 내지 약 150 nm, 약 60 nm 내지 약 130 nm, 약 70 nm 내지 약 110 nm, 약 70 nm 내지 약 100 nm, 약 70 내지 약 90 nm, 또는 약 70 nm 내지 약 80 nm의 평균 크기 (예를 들어, 평균 직경)를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명에 따라 유용할 수 있는 지질 나노입자는 약 50 nm 내지 약 100 nm의 평균 크기 (예를 들어, 평균 직경)를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자는 약 50 nm 내지 약 150 nm의 평균 크기 (예를 들어, 평균 직경)를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자는 약 60 nm 내지 약 120 nm의 평균 크기 (예를 들어, 평균 직경)를 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 본 발명에 따라 유용할 수 있는 지질 나노입자는 약 30 nm, 35 nm, 40 nm, 45 nm, 50 nm, 55 nm, 60 nm, 65 nm, 70 nm, 75 nm, 80 nm, 85 nm, 90 nm, 95 nm, 100 nm, 105 nm, 110 nm, 115 nm, 120 nm, 125 nm, 130 nm, 135 nm, 140 nm, 145 nm 또는 150 nm의 평균 크기 (예를 들어, 평균 직경)를 가질 수 있다.
특정 구현예에서, 핵산 (예를 들어, ssRNA)은, 제공된 지질 나노입자 내에 존재하는 경우, 수용액 중에 뉴클레이즈에 의한 분해에 대해 내성을 나타낸다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자는 간-표적화 지질 나노입자이다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자는 하나 이상의 양이온성 지질 (예를 들어, 본원에 기술된 지질)을 포함하는 양이온성 지질 나노입자이다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질 나노입자는 하나 이상의 양이온성 지질, 하나 이상의 폴리머-접합 지질 및 하나 이상의 헬퍼 지질 (예를 들어, 하나 이상의 중성 지질)을 포함할 수 있다.
1.
헬퍼 지질
일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)를 전달하기 위한 지질 나노입자는, 중성 지질, 양으로 하전된 지질 또는 음으로 하전된 지질일 수 있는, 하나 이상의 헬퍼 지질을 포함한다. 일부 구현예에서, 헬퍼 지질은 양이온성 지질-기반의 입자와 같은 지질-기반의 입자를 표적 세포로 전달하는 효율을 높이는데 유용한 지질이다. 일부 구현예에서, 헬퍼 지질은 LNP 입자 크기, 안정성 및/또는 캡슐화를 최적화하도록 선정된 농도를 가진 구조 지질이거나 또는 구조 지질을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)를 전달하기 위한 지질 나노입자는 중성 헬퍼 지질을 포함한다. 이러한 중성 헬퍼 지질에 대한 예로는, 비-제한적으로 포스포타딜콜린, 예를 들어, 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DSPC), 1,2-다이팔미토일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DPPC), 1,2-다이미리스토일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DMPC), 1-팔미토일-2-올레오일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (POPC), 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DOPC), 포스파티딜에탄올아민, 예를 들어 1,2-다이올레오일-sn-글리세로-3-포스포에탄올아민 (DOPE), 스핑고마이엘린 (SM), 세라마이드, 콜레스테롤, 스테로이드, 예를 들어 스테롤 및 이들의 유도체 등이 있다. 중성 지질은 합성 또는 천연 유래일 수 있다. 당해 기술 분야에서 공지된, 예를 들어, WO 2017/075531 및 WO 2018/081480에 기술된 바와 같은 기타 중성 헬퍼 지질 역시 본원에 기술된 지질 나노입자에 이용할 수 있으며, 이들 각각의 문헌의 전체 내용은 본원에 언급된 목적으로 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)를 전달하기 위한 지질 나노입자는 DSPC 및/또는 콜레스테롤을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)를 전달하기 위한 지질 나노입자는 헬퍼 지질 (예를 들어, 본원에 기술된 것) 2종 이상을 포함한다. 일부 이러한 구현예에서, 지질 나노입자는 DSPC 및 콜레스테롤을 포함할 수 있다.
2.
양이온성 지질
일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)를 전달하기 위한 지질 나노입자는 양이온성 지질을 포함한다. 양이온성 지질은 전형적으로 순 양 전하를 가진 지질이다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질은 양 전하를 가진 아민 기(들)를 하나 이상 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질은 양으로 하전된 것을 의미하는 양이온성 헤드 기를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질은, 양이온성 지질이 순 양 전하를 가지는 한, 소수성 도메인 (예를 들어, 중성 지질 또는 음이온성 지질의 하나 이상의 도메인)을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질은, 일부 구현예에서, 하나 이상의 아민 유도체, 예를 들어, 1차, 2차 및/또는 3차 아민, 4급 암모늄, 다양한 아민 조합, 아미디늄 염 또는 구아니딘 및/또는 이미다졸 기뿐 아니라 피리디늄, 피페리진 및 아미노산 헤드 기, 예를 들어 라이신, 아르기닌, 오르니틴 및/또는 트립토판을 포함할 수 있는, 극성 헤드 기를 포함한다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질의 극성 헤드 기는 하나 이상의 아민 유도체를 포함한다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질의 극성 헤드 기는 4급 암모늄을 포함한다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질의 극성 헤드 기는 복수의 양이온성 전하를 포함한다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질의 헤드 기는 양이온성 전하 하나를 포함한다. 모노 양이온성 지질에 대한 예로는, 비-제한적으로 1,2-다이미리스토일-sn-글리세로-3-에틸포스포콜린 (DMEPC), 1,2-다이-O-옥타데세닐-3-트리메틸암모늄 프로판 (DOTMA) 및/또는 1,2-다이올레오일-3-트리메틸암모늄 프로판 (DOTAP), 1,2-다이미리스토일-3-트리메틸암모늄 프로판 (DMTAP), 2,3-다이(ㅌ테트라데콕시)프로필-(2-하이드록시에틸)-다이메틸아자늄 브로마이드 (DMRIE), 다이도데실(다이메틸)아자늄 브로마이드 (DDAB), 1,2-다이올레일옥시프로필-3-다이메틸-하이드록시에틸 암모늄 브로마이드 (DORIE), 3P-[N-(N/N'-다이메틸아미노-에탄)카바모일]콜레스테롤 (DC-Choi) 및/또는 다이올레일 에테르 포스파티딜콜린 (DOEPC)을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 양으로 하전된 지질 구조는 또한 (예를 들어, 안정화를 위해) 소낭 형성에 전형적으로 사용될 수 있는, 하나 이상의 다른 구성성분을 함유할 수도 있다. 이러한 다른 구성성분에 대한 예로는, 비-제한적으로, 지방 알코올, 지방산 및/또는 콜레스테롤 에스테르, 또는 표면 전하, 막 유연성 및 지질을 지질 조립체로 조립되는 것을 돕는데 영향을 미칠 수 있는 임의의 기타 약제학적으로 허용가능한 부형제 등이 있다. 스테롤의 예로는 콜레스테롤, 콜레스테릴 헤미숙시네이트, 콜레스테릴 설페이트 또는 콜레스테롤의 임의의 기타 유도체를 포함한다. 바람직하게는, 하나 이상의 양이온성 지질은 DMEPC 및/또는 DOTMA를 포함한다.
일부 구현예에서, 양이온성 지질은 pH에 따라 양으로 하전된 형태 또는 중성 형태로 존재할 수 있도록 이온화 가능하다. 양이온성 지질의 이온화는 여러가지 pH 조건에서 지질 입자의 표면 전하에 영향을 미칠 수 있으며, 일부 구현예에서, 이는 혈장 단백질 흡수, 혈액 소거 및/또는 조직 분포뿐 아니라 엔도솜분해성 비-이중층 구조 (endosomolytic non-bilayer structure)를 형성하는 능력에 영향을 미칠 수 있다. 이에, 일부 구현예에서, 양이온성 지질은 pH 응답성 지질이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, pH 응답성 지질은 지방산 유도체, 또는 친액성 (lyotropic) 지질 상을 형성할 수 있으며 pKa 값이 pH 5 내지 pH 7.5인 기타 양친매성 화합물이다. 이는, 지질이 pH가 pKa 값보다 높을 경우에는 하전되지 않고, pKa 값보다 낮을 경우에는 양으로 하전되는 것을 의미한다. 일부 구현예에서, pH 응답성 지질은, 양이온성 지질과 더불어 또는 이 대신, 예를 들어, 하나 이상의 ssRNA를 지질 또는 지질 혼합물에 낮은 pH에서 결합시킴으로써 사용할 수 있다. pH 응답성 지질로는, 비-제한적으로, 1,2-다이올레일옥시-3-다이메틸아미노-프로판 (DODMA)을 포함한다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자는 WO 2017/075531 (예를 들어, 표 1 및 3) 및 WO 2018/081480 (예를 들어, 표 1-4)에 기술된 바와 같이 하나 이상의 양이온성 지질을 포함할 수 있으며, 이들 문헌 각각의 전체 내용은 본원에 기술된 목적을 위해 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따라 유용할 수 있는 양이온성 지질은 2 이상의 포화된 알킬 체인에 에스테르 결합을 통해 연결된 적정가능한 (titratable) 터셔리 아미노 헤드 기를 포함하는 아미노 지질이며, 에스테르 결합은 쉽게 가수분해되어 신속한 분해 및/또는 신장 경로를 통한 배출을 촉진할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노 지질은 겉보기 pKa가 약 6.0-6.5 (예를 들어, 일 구현예에서, 겉보기 pKa 대략 6.25)으로, 산성 pH (예를 들어, pH 5)에서 본질적으로 완전히 양으로 하전된다. 일부 구현예에서, 이러한 아미노 지질은, LNP에 병합되었을 경우, 입자 형성, 세포 흡수, 융합형성성 (fusogenicity) 및/또는 ssRNA(들)의 엔도솜 방출을 조절하는 별개의 물리화학적 특성을 부여할 수 있다. 일부 구현예에서, pH 4.0에서 이러한 아미노 지질을 함유한 지질 혼합물에 RNA 수용액의 투입은 음으로 하전된 RNA 백본과 양으로 하전된 양이온성 지질 간에 정전기적 상호작용을 유발할 수 있다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 이러한 정전기적 상호작용은 RNA 약물 물질의 효율적인 캡슐화와 동시에 입자의 형성을 유도한다. RNA 캡슐화 후, 제조된 LNP를 둘러싼 매질의 pH를 더 중성인 pH (예를 들어, pH 7.4)로 적정하면, LNP의 표면 전하가 중화된다. 다른 모든 변수들을 고정할 경우, 이러한 전하-중성 입자는 하전된 입자와 비교해 더 긴 생체내 순환 수명과 우수한 간세포 전달성을 나타내며, 세망내피 시스템에 의해 빠르게 제거된다. 엔도솜 흡수시, 엔도솜의 낮은 pH는 이러한 아미노 지질을 포함하는 LNP를 융합성이게 만들어, RNA는 표적 세포의 세포질로 방출된다.
일부 구현예에서, 본 발명에 따라 이용가능할 수 있는 양이온성 지질은 아래 표 3에 나타낸 구조들 중 하나를 가진다:
표 3: 예시적인 양이온성 지질
번호 | 구조 |
I-1 | |
I-2 | |
I-3 | |
I-4 | |
I-5 | |
I-6 | |
I-7 | |
I-8 | |
I-9 | |
I-10 | |
I-11 | |
I-12 | |
I-13 | |
I-14 | |
I-15 | |
I-16 | |
I-17 | |
I-18 | |
I-19 | |
I-20 | |
I-21 | |
I-22 | |
I-23 | |
I-24 | |
I-25 | |
I-26 | |
I-27 | |
I-28 | |
I-29 | |
I-30 | |
I-31 | |
I-32 | |
I-33 | |
I-34 | |
I-35 | |
I-36 | |
I-37 | |
I-38 | |
I-39 | |
I-40 | |
I-41 | |
I-42 | |
I-43 | |
I-44 | |
I-45 | |
I-46 | |
I-47 | |
I-48 | |
I-49 |
특정 구현예에서, 본 발명에 따라 이용가능할 수 있는 양이온성 지질은 실시예 14에서 기술한 화학 구조를 가진 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일)bis(2-부틸옥타노에이트)이거나 또는 이를 포함한다.
양이온성 지질은 단독으로 또는 중성 지질, 예를 들어 콜레스테롤 및/또는 중성 인지질과 조합하여 또는 기타 공지된 지질 조립체 구성성분과 조합하여 사용할 수 있다.
3.
폴리머-접합 지질
일부 구현예에서, ssRNA(들)를 전달하는데 이용하기 위한 지질 나노입자는 하나 이상의 폴리머-접합 지질을 포함할 수 있다. 폴리머-접합 지질은 전형적으로 지질 부분과 이에 접합된 폴리머 부분을 포함하는 분자이다.
일부 구현예에서, 폴리머-접합 지질은 PEG-접합 지질이다. 일부 구현예에서, PEG-접합 지질은 소수성 지질 층을 숨기는 보호성 친수성 층을 형성함으로써 지질 입자를 입체적으로 안정화하도록 설계된다. 일부 구현예에서, PEG-접합 지질은, 이러한 지질 입자를 생체내 투여하였을 경우, 혈청 단백질과의 결합 및/또는 달성되는 세망내피 시스템에 의한 흡수를 낮출 수 있다.
다양한 PEG-접합 지질들이 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 비-제한적으로 페길화된 다이아실글리세롤 (PEG-DAG), 예를 들어 1-(모노메톡시-폴리에틸렌글리콜)-2,3-다이미리스토일글리세롤 (PEG-DMG), 페길화된 포스파티딜에탄올로아민 (PEG-PE), PEG 숙시네이트 다이아실글리세롤 (PEG-S-DAG), 예를 들어 4-O-(2',3'-다이(테트라데카노일옥시)프로필-1-O-(ω-메톡시(폴리에톡시)에틸)부탄다이오에이트 (PEG-S-DMG), 페길화된 세라마이드 (PEG-cer) 또는 PEG 다이알콕시프로필카바메이트, 예를 들어 ω-메톡시(폴리에톡시)에틸-N-(2,3-다이(테트라데카녹시)프로필)카바메이트 또는 2,3-다이(테트라데카녹시)프로필-N-(ω-메톡시(폴리에톡시)에틸)카바메이트 등을 포함한다.
일부 PEG-접합 지질 (페길화된 지질로도 알려짐)은 임상적으로 승인받았으며 임상 실험에서 안전성이 입증되었다. PEG-접합 지질은 엔도솜 위치화 및 페이로드 전달의 선행 조건인 세포 흡수에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 본 발명은 특히 PEG-지질 앵커의 알킬 체인 길이를 조정함으로써 예측가능한 방식으로 캡슐화된 핵산의 약리학적 특성을 제어할 수 있다는 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 본 발명은, 특히, ssRNA의 간 전달을 최적화하기 위해 ssRNA/LNP 약물 제품 제형화에 이러한 PEG-접합 지질을 선택할 수 있다는 견해를 제시한다. 일부 구현예에서, 이러한 PEG-접합 지질은 입체적인 장벽 기능을 효과적으로 수행하기 위해 합리적인 용해성 특성 및/또는 이의 분자량에 기초해 설계 및/또는 선택할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 페길화된 지질은 생물학적 막에 대해 인지가능한 계면활성 또는 침투성 강화 또는 교란 효과를 나타내지 않는다. 일부 구현예에서, 이러한 PEG-접합 지질에서 PEG는 생분해성 아미드 결합으로 다이아실 지질 앵커에 연결될 수 있으며, 따라서 신속한 분해 및/또는 배출을 용이하게 할 수 있다. 일부 구현예에서, PEG-접합 지질을 포함하는 LNP는 페길화된 지질의 전체 부속물 (full complement)을 유지한다. 혈액 구획에서 이러한 페길화된 지질은 시간 경과에 따라 입자로부터 해리되어, 세포에 의해 더 쉽게 흡수되는 더욱 융합성인 입자가 드러나며, 궁극적으로 RNA 페이로드가 방출된다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자는 WO 2017/075531 및 WO 2018/081480에 기술된 바와 같이 하나 이상의 PEG-접합 지질 또는 페길화된 지질을 포함할 수 있으며, 이들 각각의 문헌은 본원에 기술된 목적으로 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본 발명에 따라 유용할 수 있는 PEG-접합 지질은 WO 2017/075531에 기술된 구조 를 가질 수 있거나, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 호변이성질체 또는 입체이성질체일 수 있으며, 구조에서 R8 및 R9은 각각 독립적으로 직선형 또는 분지형, 포화 또는 불포화된 탄소수 10-30의 알킬 체인이고, 알킬 체인은 선택적으로 하나 이상의 에스테르 결합이 삽입되어 있으며, w는 30-60 범위의 평균 수치를 가진다. 일부 구현예에서, R8 및 R9은 각각 독립적으로 탄소수 12-16의 포화된 알킬 직쇄이다. 일부 구현예에서, w는 43-53 범위의 평균 수치를 가진다. 다른 구현예들에서, w는 평균적으로 약 45이다. 일부 구현예에서, PEG-접합 지질은 실시예 14에 언급된 화학적 구조를 가진 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드이거나 또는 이를 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 지질 나노입자를 형성하는 지질은 폴리머-접합 지질; 양이온성 지질; 및 헬퍼 중성 지질을 포함한다. 일부 이러한 구현예에서, 전체 지질 중 총 폴리머-접합 지질은 약 0.5-5 mol%, 약 0.7-3.5 mol%, 약 1-2.5 mol%, 약 1.5-2 mol% 또는 약 1.5-1.8 mol%로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 총 폴리머-접합 지질은 전체 지질의 약 1-2.5 mol%로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 양이온성 지질 : 전체 폴리머-접합 지질 (예를 들어, PEG-접합 지질)의 몰 비율은 약 100:1 내지 약 20:1, 또는 약 50:1 내지 약 20:1, 또는 약 40:1 내지 약 20:1, 또는 약 35:1 내지 약 25:1일 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 양이온성 지질 : 전체 폴리머-접합 지질의 몰 비율은 약 35:1 내지 약 25:1일 수 있다.
본원에 기술된 지질 나노입자에 폴리머-접합 지질, 양이온성 지질 및 헬퍼 중성 지질이 수반되는 일부 구현예에서, 전체 양이온성 지질은 전체 지질의 약 35-65 mol%, 약 40-60 mol%, 약 41-49 mol%, 약 41-48 mol%, 약 42-48 mol%, 약 43-48 mol%, 약 44-48 mol%, 약 45-48 mol%, 약 46-48 mol%, 또는 약 47.2-47.8 mol%로 존재한다. 특정 구현예에서, 전체 양이온성 지질은 전체 지질의 약 47.0 mol%, 47.1 mol%, 47.2 mol%, 47.3 mol%, 47.4 mol%, 47.5 mol%, 47.6 mol%, 47.7 mol%, 47.8 mol%, 47.9 mol% 또는 48.0 mol%로 존재한다.
본원에 기술된 지질 나노입자에 폴리머-접합 지질, 양이온성 지질 및 헬퍼 중성 지질이 수반되는 일부 구현예에서, 전체 중성 지질은 전체 지질의 약 35-65 mol%, 약 40-60 mol%, 약 45-55 mol% 또는 약 47-52 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 전체 중성 지질은 전체 지질의 35-65 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 전체 비-스테로이드 중성 지질 (예를 들어, DPSC)은 전체 지질의 약 5-15 mol%, 약 7-13 mol% 또는 9-11 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 전체 비-스테로이드 중성 지질은 전체 지질의 약 9.5 mol%, 10 mol% 또는 10.5 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 전체 양이온성 지질 : 비-스테로이드 중성 지질의 몰 비율은 약 4.1:1.0 내지 약 4.9:1.0, 약 4.5:1.0 내지 약 4.8:1.0, 또는 약 4.7: 1.0 내지 4.8:1.0 범위이다. 일부 구현예에서, 전체 스테로이드 중성 지질 (예를 들어, 콜레스테롤)은 전체 지질의 약 35-50 mol%, 약 39-49 mol%, 약 40-46 mol%, 약 40-44 mol%, 또는 약 40-42 mol%로 존재한다. 특정 구현예에서, 전체 스테로이드 중성 지질 (예를 들어, 콜레스테롤)은 전체 지질의 약 39 mol%, 40 mol%, 41 mol%, 42 mol%, 43 mol%, 44 mol%, 45 mol% 또는 46 mol%로 존재한다. 특정 구현예에서, 전체 양이온성 지질 : 전체 스테로이드 중성 지질의 몰 비율은 약 1.5:1 내지 1:1.2, 또는 약 1.2:1 내지 1:1.2이다.
일부 구현예에서, 양이온성 지질, 폴리머-접합 지질 및 중성 지질을 포함하는 지질 조성물은 WO 2018/081480에 기술된 바와 같이 전체 지질의 특정 몰 %로 또는 특정 몰 비율 (서로에 대해 상대적)로 존재하는 개개 지질을 함유할 수 있으며, 이 문헌은 본원에 기술된 목적으로 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
일부 구현예에서, 지질 나노입자를 형성하는 지질은 폴리머-접합 지질 (예를 들어, PEG-접합 지질); 양이온성 지질; 및 중성 지질을 포함하며, 여기서 폴리머-접합 지질은 전체 지질의 약 1-2.5 mol%로 존재하고; 양이온성 지질은 전체 지질의 35-65 mol%로 존재하고; 중성 지질은 전체 지질의 35-65 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자를 형성하는 지질은 폴리머-접합 지질 (예를 들어, PEG-접합 지질); 양이온성 지질; 및 중성 지질을 포함하며, 여기서 폴리머-접합 지질은 전체 지질의 약 1-2 mol%로 존재하고; 양이온성 지질은 전체 지질의 45-48.5 mol%로 존재하고; 중성 지질은 전체 지질의 45-55 mol%로 존재한다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자를 형성하는 지질은 폴리머-접합 지질 (예를 들어, PEG-접합 지질); 양이온성 지질; 및 비-스테로이드 중성 지질과 스테로이드 중성 지질을 포함하는 중성 지질을 포함하고, 여기서 폴리머-접합 지질은 전체 지질의 약 1-2 mol%로 존재하고; 양이온성 지질은 전체 지질의 45-48.5 mol%로 존재하고; 비-스테로이드 중성 지질은 전체 지질의 9-11 mol%로 존재하고; 스테로이드 중성 지질은 전체 지질의 약 36-44 mol%로 존재한다. 이러한 구현예들 다수에서, PEG-접합 지질은 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드 또는 이의 유도체이거나 또는 이를 포함한다. 이러한 구현예들 다수에서, 양이온성 지질은 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일)bis(2-부틸옥타노에이트) 또는 이의 유도체이거나 또는 이를 포함한다. 이러한 구현예들 다수에서, 중성 지질은 DSPC 및 콜레스테롤을 포함하며, 여기서 DSPC는 비-스테로이드 중성 지질이고 콜레스테롤은스테로이드 중성 지질이다.
B. 지질 나노입자의 제조 방법 예
지질 및 핵산을 포함하는 지질 나노입자 및 이의 제조 방법은, 예를 들어, 미국 특허 8,569,256, 5,965,542 및 미국 특허 공개번호 2016/0199485, 2016/0009637, 2015/0273068, 2015/0265708, 2015/0203446, 2015/0005363, 2014/0308304, 2014/0200257, 2013/086373, 2013/0338210, 2013/0323269, 2013/0245107, 2013/0195920, 2013/0123338, 2013/0022649, 2013/0017223, 2012/0295832, 2012/0183581, 2012/0172411, 2012/0027803, 2012/0058188, 2011/0311583, 2011/0311582, 2011/0262527, 2011/0216622, 2011/0117125, 2011/0091525, 2011/0076335, 2011/0060032, 2010/0130588, 2007/0042031, 2006/0240093, 2006/0083780, 2006/0008910, 2005/0175682, 2005/017054, 2005/0118253, 2005/0064595, 2004/0142025, 2007/0042031, 1999/009076 및 PCT 공개번호 WO 99/39741, WO 2018/081480, WO 2017/004143, WO 2017/075531, WO 2015/199952, WO 2014/008334, WO 2013/086373, WO 2013/086322, WO 2013/016058, WO 2013/086373, W02011/141705 및 WO 2001/07548에 기술된 것을 비롯하여, 당해 기술 분야에 공지되어 있으며, 이들 전체 내용은 본원에 기술된 목적으로 그 전체가 원용에 의해 본 명세서에 포함된다.
예를 들어, 일부 구현예에서, 양이온성 지질, 중성 지질 (예를 들어, DSPC, 및/또는 콜레스테롤) 및 폴리머-접합 지질은 미리 정해진 몰 비율 (예를 들어, 본원에 기술된 몰 비율)로 에탄올에 용해할 수 있다. 일부 구현예에서, 지질 나노입자 (LNP)는 전체 지질:ssRNA 약 10:1 내지 30:1 중량 비율로 존재한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA는 아세테이트 완충제에 0.2 mg/mL로 희석할 수 있다.
일부 구현예에서, 에탄올 주입 기법을 이용해, ssRNA를 포함하는 콜로이드 지질 분산물을 다음과 같이 만들 수 있다: 양이온성 지질, 중성 지질 및 폴리머-접합 지질과 같은 지질을 포함하는 에탄올 용액을 ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 수용액에 투입한다.
일부 구현예에서, 지질 및 ssRNA 용액은 각 용액을 제어된 유동 비율로 혼합 유닛으로, 예를 들어 피스톤 펌프를 사용해 펌핑함으로써 실온에서 혼합할 수 있다. 일부 구현예에서, 지질 용액 및 RNA 용액을 혼합 유닛으로 투입하는 유동 비율은 1:3의 비율로 유지된다. 혼합시, 지질의 에탄올 용액이 ssRNA 수용액으로 희석됨에 따라 핵산-지질 입자가 형성된다. 지질 용해성은 감소되며, 양 전하를 가진 양이온성 지질이 음으로 하전된 RNA와 상호작용한다.
일부 구현예에서, RNA-캡슐화된 지질 나노입자를 포함하는 용액은, 농도 적정, 완충제 교환, 제형화 및/또는 여과 중 하나 이상에 의해 가공 처리될 수 있다.
일부 구현예에서, RNA-캡슐화된 지질 나노입자는 여과를 통해, 예를 들어, 0.2 ㎛ 여과를 통해 처리될 수 있다.
일부 구현예에서, (ssRNA를 함유한 또는 함유하지 않은) 지질 나노입자의 입자 크기 및/또는 내부 구조는 예를 들어, 소각 X선 산란 (SAXS) 및/또는 투사 전자 초저온현미경 검경 (CryoTEM)과 같은 적절한 기법으로 모니터링할 수 있다.
V. Claudin-18.2를 표적화하는 제공된 약학적 조성물
일부 구현예에서, 조성물은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 제공된 ssRNA(들)를 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 ssRNA(들)는 필요로 하는 개체에 투여하기 위해 지질 나노입자 (예를 들어, 본원에 기술된 지질 나노입자)를 이용해 제형화할 수 있다. 이에, 본원에 제공된 일 측면은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 제공된 ssRNA(들)와 지질 나노입자 (예를 들어, 본원에 기술된 지질 나노입자)를 포함하고, ssRNA(들)가 지질 나노입자에 의해 캡슐화된, 약학적 조성물에 관한 것이다.
약학적 조성물이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 가변성 중쇄 (VH) 도메인을 암호화하는 제1 ssRNA와 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 암호화하는 제2 ssRNA를 포함하는 일부 구현예에서, 이러한 제1 ssRNA 및 제2 ssRNA는 약 1.5:1 내지 약 1:1.5, 또는 일부 구현예에서 약 1.2:1 내지 약 1:1.2, 일부 구현예에서 약 1:1의 몰 비율로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 가변성 중쇄 (VH) 도메인을 암호화하는 제1 ssRNA와 항체 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 물질)의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 암호화하는 제2 ssRNA는 3:1 내지 1:1, 또는 일부 구현예에서 약 2:1의 중량 비율로 존재할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물의 RNA 함유물 (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA 하나 이상)은 약 0.5 mg/mL 내지 약 1.5 mg/mL, 또는 약 0.8 mg/mL 내지 약 1.2 mg/mL의 농도로 존재한다.
약학적 제형은 부가적으로 약제학적으로 허용가능한 부형제를 함유할 수 있으며, 본원에서 이러한 부형제는 임의의 모든 용매, 분산 매질, 희석제 또는 기타 액체 비히클, 분산 또는 현탁 보조제, 계면활성제, 등장화제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 고체 결합제, 윤활제 등을 원하는 구체적인 투약 형태에 맞게 함유한다. Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, A. R. Gennaro (Lippincott, Williams & Wilkins, Baltimore, MD, 2006; 원용에 의해 본 명세서에 포함됨)에는 약학적 조성물의 제형화에 사용되며 공지된 제조 기술에서 사용되는 다양한 부형제들이 기술되어 있다. 임의의 통례적인 부형제 매질이 임의의 부적절한 생물학적 효과를 발생시키거나 또는 약학적 조성물의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호작용함으로써 물질 또는 이의 유도체와 혼용가능하지 않은 경우를 제외하고는, 이의 사용 역시 본원의 범위 내인 것으로 고려된다.
일부 구현예에서, 부형제는 인간 및 수의학적 용도로 사용이 승인된 것이다. 일부 구현예에서, 부형제는 미국 식의약청에서 승인된 것이다. 일부 구현예에서, 부형제는 약학 등급이다. 일부 구현예에서, 부형제는 미국 약전 (USP), 유럽 약전 (EP), 영국 약전 및/또는 국제 약전의 표준을 충족한다.
약학적 조성물을 제조하는데 사용되는 약제학적으로 허용가능한 부형제로는, 비-제한적으로, 불활성 희석제, 분산화제 및/또는 과립화제, 계면활성제 및/또는 유화제, 붕해제, 결합제, 보존제, 완충화제, 윤활제 및/또는 오일을 포함한다. 이러한 부형제는 선택적으로 약학적 제형에 함유될 수 있다. 코코아 버터 및 좌제 왁스, 착색제, 코팅제, 감미제, 착향제 및/또는 향제와 같은 부형제가 약사의 판단에 따라 조성물에 존재할 수 있다.
약학적 제제의 제형화 및/또는 제조에 있어 일반적인 고려사항들은 예를 들어 Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005에서 찾아볼 수 있다 (원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제뿐 아니라 임의의 기타 공지된 보조제 및 부형제를 Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, 2005에 기술된 바와 같이 통례적인 기법에 따라 이용해 제형화할 수 있다 (원용에 의해 본 명세서에 포함됨).
본원에 기술된 약학적 조성물은 당해 기술 분야에 공지된 적절한 방법에 의해 투여할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, 투여 경로 및/또는 방식은 예를 들어, 본원에 기술된 약학적 조성물의 안정성 및/또는 약동학 및/또는 약력학 등의 여러가지 인자에 따라 달라질 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 국소 및 장 투여 이외의 다른 투여 방식을 비롯한, 통상적으로 주사에 의한, 비경구 투여용으로 제형화되며, 비-제한적으로, 정맥내, 근육내, 동맥내, 척수강내, 관절낭내, 안와내, 심장내, 진피내, 복막내, 경기관내, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내, 경막외 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 정맥내 투여용으로 제형화된다. 일부 구현예에서, 정맥내 투여에 유용할 수 있는 약제학적으로 허용가능한 담체로는 무균 수성 용액 또는 분산제 및 무균 주사용 용액 또는 분산제를 제조하기 위한 무균 산제를 포함한다.
치료학적 조성물은 전형적으로 무균성이어야 하며, 제조 및 보관 조건에서 안정적이어야 한다. 조성물은 용액, 분산제, 산제 (예를 들어, 동결건조된 산제), 미세유제, 지질 나노입자 또는 높은 약물 농도에 적합한 기타 정렬된 구조로서 제형화할 수 있다. 담체는 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적절한 혼합물을 함유한, 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성을, 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅제를 이용함으로써, 분산물의 경우 필수적인 입자 크기를 유지함으로써, 그리고 계면활성제를 이용함으로써, 유지시킬 수 있다. 다수의 경우에, 등장화제, 예를 들어, 당, 폴리알코올, 예를 들어, 만니톨, 소르비톨 또는 소듐 클로라이드를 조성물에 함유하는 것이 바람직할 것이다. 일부 구현예에서, 주사용 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 물질, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물에 함유시킴으로써, 달성할 수 있다.
무균 주사용 용액은 활성 화합물을 상기 열거된 성분들 중 하나 또는 이들의 조합이 함유된 적절한 용매에 필요한 함량으로 투입함으로써 제조할 수 있으며, 필요에 따라 멸균화 및/또는 정밀여과가 후속될 수 있다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 본원에 기술된 바와 같이 및/또는 당해 기술 분야에 공지된 방법과 같이 제조할 수 있다.
일부 구현예에서, 분산제는 활성 화합물을 염기성 분산 매질과 전술한 것으로부터 유래한 필요한 기타 성분을 함유한 멸균 비히클에 투입함으로써 제조한다. 무균 주사 용액을 제조하기 위한 무균 산제의 경우, 바람직한 제조 방법은 미리 멸균-여과한 용액으로부터 활성 성분과 임의의 부가적인 바람직한 성분의 분말을 수득하는, 진공 건조 및 냉동-건조 (동결건조)이다.
본원에 기술된 약학적 조성물에 채택될 수 있는 적합한 수성 및 비-수성 담체에 대한 예로는 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 이들의 적절한 혼합물, 식물성 오일, 예를 들어 올리브 오일, 및 주사가능한 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올리에이트를 포함한다. 적절한 유동성을, 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅제를 이용함으로써, 분산제의 경우 필수적인 입자 크기를 유지함으로써, 그리고 계면활성제를 이용함으로써, 유지시킬 수 있다.
이들 조성물은 또한 보존제, 습윤제, 유화제 분산화제와 같은 보조제를 함유할 수 있다. 미생물의 존재 방지는 멸균화 공정에 의해, 그리고 다양한 항세균제 및 항진균제, 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 소르브산 등를 포함시킴으로써, 확보할 수 있다. 또한, 당, 소듐 클로라이드 등과 같은 등장화제를 본원에 기술된 약학적 조성물에 함유시키는 것이 바람직할 수 있다. 아울러, 주사용 약학적 형태의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 물질, 예를 들어 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 함유시킴으로써, 달성할 수 있다.
본원에 기술된 약학적 조성물의 제형은 약학 분야에서 공지되거나 향후 개발될 임의 방법에 의해 제조할 수 있다. 일반적으로, 이러한 제조 방법은 활성 성분(들)을 희석제 또는 다른 부형제 및/또는 하나 이상의 보조 성분과 조합하는 단계, 및 이후 필요하거나 및/또는 요망되는 경우, 생산물을 형태로 구현하거나 및/또는 원하는 단일-용량 유닛 또는 다중-용량 유닛으로 패키징하는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 벌크로, 단일 단위 용량 및/또는 복수의 단일 단위 용량으로서 제조, 포장 및/또는 판매할 수 있다. 본원에서, "단위 용량"은 본원에 기술된 시스템 및/또는 방법을 이용해 제조한 하나 이상의 RNA 산물을 지정된 양으로 포함하는 약학적 조성물의 개별 용량이다.
약학적 조성물 내 LNP에 캡슐화된 ssRNA, 약제학적으로 허용가능한 부형제 및/또는 임의의 부가적인 성분들의 상대적인 양은 치료할 개체, 종양 세포, 질환 또는 장애에 따라 달라질 수 있으며, 또한 조성물이 투여되는 경로에 따라 추가로 결정될 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 통례적인 방법에 의해 약제학적으로 허용가능한 투약 형태로 제형화할 수 있다. 본원에 기술된 약학적 조성물 내 활성 성분 (예를 들어, 지질 나노입자에 캡슐화된 ssRNA)의 실제 투여량 수준은, 환자에 유해하지 않으면서, 구체적인 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 요망되는 치료학적 반응을 달성하기에 효과적인 양으로 활성 성분을 수득하도록, 달라질 수 있다. 선택되는 투여량 수준은 채택된 본 발명의 구체적인 조성물의 활성, 투여 경로, 투여 시기, 채택된 구체적인 화합물의 배출율, 치료 기간, 채택된 구체적인 조성물과 조합하여 사용되는 기타 약물, 화합물 및/또는 재료, 치료 중인 환자의 나이, 체중, 성별, 상태, 전반적인 건강 상태 및 이전 병력, 및 의학 분야에서 잘 알려진 유사 인자 등의, 다양한 약동학적 인자에 따라 결정될 것이다.
당해 기술 분야에서 통상적인 기술을 가진 의사 또는 수의사는 필요한 약학적 조성물의 유효량을 쉽게 결정 및 처방할 수 있다. 예를 들어, 의사 또는 수의사는 약학적 조성물에 사용되는 활성 성분 (예, 지질 나노입자에 캡슐화된 ssRNA)을 요망되는 치료학적 효과를 달성하기 위해 요구되는 수준보다 낮은 수준에서 투여를 개시하고, 요망되는 효과가 달성될 때까지 투여량을 점진적으로 높일 수 있다. 예를 들어, 실시예 8에 기술된 바와 같이 예시적인 용량들을 약제학적으로 허용가능한 투약 형태를 제조하는데 이용할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 우세한 작용 방식 ADCC를 통해 약리학적 활성을 매개하는 ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)에 의해 암호화되는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 혈장 농도로 달성하는 활성 용량을 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다. IMAB362의 경우, ADCC에 대한 용량-반응 연관성이 임상적으로 잘 특정화되어 있으며, ADCC를 통한 CLDN-18.2+ 세포의 효율적인 세포용해 및 EC95 0.3-28 ㎍/mL이 보고되어 있다 (Sahin et al. 2018). 따라서, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 우세한 작용 방식 ADCC를 통해 약리학적 활성을 매개하는 ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)에 의해 암호화되는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 혈장 농도 약 0.3-28 ㎍/mL로 달성하는 활성 용량을 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 약 0.1 ㎍/mL 보다 높은; 일부 구현예에서, 약 0.2 ㎍/mL, 0.3 ㎍/mL, 0.4 ㎍/mL, 0.5 ㎍/mL, 0.6 ㎍/mL, 0.7 ㎍/mL, 0.8 ㎍/mL, 0.9 ㎍/mL, 1 ㎍/mL, 1.5 ㎍/mL, 2 ㎍/mL, 5 ㎍/mL, 8 ㎍/mL, 10 ㎍/mL, 15 ㎍/mL, 20 ㎍/mL, 25 ㎍/mL보다 높은 항체 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성하는 것으로 예상되는 수준으로 CLDN-18.2를 겨냥하는 항체 물질을 암호화하는 본원에 기술된 ssRNA (예를 들어, mRNA) 하나 이상을 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로), 또는 항체 투여로 관찰되는 수준 이상의 범위를 가지도록 제형화된다.
일부 구현예에서, 약학적 조성물은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 Cmax 대략 7 ㎍/mL에 해당하는 용량 0.15 mg RNA/kg으로 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다. 도 14는 시노몰구스 원숭이에서 tmax (48시간)에서 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 RNA 약물 물질의 용량-노출 상관성을 보여준다. 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, LNP-형질감염 효율 및 mRNA 번역이 시노몰구스 원숭이와 인간에서 비슷한 것으로 추정하면 (Coelho et al. 2013), 약학적 조성물은 일부 구현예에서 도 14에 나타낸 바와 같이 ssRNA(들)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 바람직한 혈장 수준에 해당하는 적절한 용량으로 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 예를 들어, 0.15 mg/kg, 0.2 mg/kg, 0.225 mg/kg, 0.25 mg/kg, 0.3 mg/kg, 0.35 mg/kg, 0.4 mg/kg, 0.45 mg/kg, 0.5 mg/kg, 0.55 mg/kg, 0.6 mg/kg, 0.65 mg/kg, 0.7 mg/kg, 0.75 mg/kg, 0.80 mg/kg, 0.85 mg/kg, 0.9 mg/kg, 0.95 mg/kg, 1.0 mg/kg, 1.25 mg/kg, 1.5 mg/kg, 1.75 mg/kg, 2.0 mg/kg, 2.25 mg/kg, 2.5 mg/kg, 2.75 mg/kg, 3.0 mg/kg, 3.25 mg/kg, 3.5 mg/kg, 4 mg/kg, 5 mg/kg 또는 그 이상의 용량을 비롯하여, 실시예 8에 기술된 바와 같은 용량으로 CLDN-18.2를 겨냥하는 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, mRNA)의 용량을 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 용량 1.5 mg/kg에서 CLDN-18.2를 겨냥하는 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, mRNA)의 용량을 전달하도록 (예를 들어, 정맥내 투여용으로) 제형화된다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 용량 5 mg/kg에서 CLDN-18.2를 겨냥하는 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, mRNA)의 용량을 전달하도록 제형화된다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 하나 이상의 첨가제, 예를 들어, 일부 구현예에서, 특정 조건에서 이러한 조성물의 안정성을 강화할 수 있는 하나 이상의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 첨가제에 대한 예로는 비-제한적으로 염, 완충제 물질, 보존제 및 담체를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 약학적 조성물은 동결방지제 (예를 들어, 슈크로스) 및/또는 수성 완충화된 용액을 더 포함할 수 있으며, 이는 일부 구현예에서 하나 이상의 염, 예를 들어 알칼리 금속 염 또는 알칼리 토금속 염, 예컨대 소듐 염, 포타슘 염 및/또는 칼슘 염 등을 함유한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 CLDN-18.2-표적화 물질 (예를 들어, 항체 물질)을 암호화하는 RNA (예를 들어, mRNA와 같은 ssRNA) 이외의 다른 하나 이상의 활성 물질을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 다른 활성 물질은 화학치료제이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 화학치료제는, 예를 들어, 비-제한적으로, 겜시타빈, 및/또는 파클리탁셀 (예를 들어, nab-파클리탁셀), 폴린산, 플루오로우라실, 이리노테칸 및/또는 옥살리플라틴 등을 비롯한, 췌장암 치료용으로 지정된 화학치료제이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 화학치료제는 예를 들어 겜시타빈 및/또는 시스플라틴 등을 비롯한 담관암의 치료용으로 지정된 화학치료제이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물에 함유될 수 있는 활성 물질은 본원에 기술된 조합 요법으로 투여되는 치료학적 물질이거나 또는 이를 포함한다. 본원에 기술된 약학적 조성물은 조합 요법으로, 즉 다른 물질과 조합하여 투여할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 조합 요법은 하나 이상의 항염증성 물질 또는 하나 이상의 면역억제 물질과 함께 제공되는 약학적 조성물을 포함할 수 있다. 이러한 치료학적 물질에 대한 예로는 비-제한적으로 하나 이상의 항염증제, 예를 들어, 스테로이드계 약물 또는 NSAID (비-스테로이드계 항염증성 약물), 아스피린 및 기타 살리실레이트, Cox-2 저해제, 예를 들어 로페콕십 (rofecoxib)(Vioxx) 및 셀레콕십 (celecoxib)(Celebrex), NSAID, 예를 들어 이부프로펜 (Motrin, Advil), 페노프로펜 (fenoprofen)(Nalfon), 나프록센 (naproxen)(Naprosyn), 설린닥 (sulindac)(Clinoril), 디클로페낙 (diclofenac)(Voltaren), 피록시캄 (piroxicam)(Feldene), 케토프로펜 (ketoprofen)(Orudis), 디플루니살 (diflunisal)(Dolobid), 나부메톤 (nabumetone)(Relafen), 에토돌락 (etodolac)(Lodine), 옥사프로진 (oxaprozin)(Daypro) 및 인도메타신 (indomethacin)(Indocin)을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 치료학적 물질은 조절성 T 세포의 고갈 또는 기능적인 불활성화를 유도하는 물질, 예를 들어 저 용량 사이클로포스파미드, anti-CTLA4 항체, anti-IL2 또는 anti-IL2-수용체 항체를 포함할 수도 있다.
일부 구현예에서, 이러한 치료학적 물질은 하나 이상의 화학치료제, 예를 들어 탁솔 유도체, 탁소테레, 파클리탁셀 (예를 들어, nab-파클리탁셀), 겜시타빈, 5-플루오르우라실, 독소루비신 (아드리아마이신 (adriamycin)), 시스플라틴 (플라티놀 (Platinol)), 사이클로포스파미드 (사이톡산 (Cytoxan), 프로시톡스 (Procytox), 네오사르 (Neosar)), 폴린산, 이리노테칸, 옥살리플라틴을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 치료할 암 환자의 종양에서 CLDN-18.2 발현 수준을, 예를 들어, 적어도 10% 이상, 예를 들어, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90% 또는 그 이상 등으로 높일 수 있는, 하나 이상의 화학치료제와 조합하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 방사선요법 및/또는 자가 말초 줄기 세포 또는 골수 이식과 병행하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 anti-CD25 항체, anti- EPCAM 항체, anti-EGFR, anti-Her2/neu 및 anti-CD40 항체로부터 선택되는 하나 이상의 항체와 조합하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 보체 활성화를 강화하기 위해 anti-C3b(i) 항체와 조합하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 정맥내 투여를 위한 수성 완충제 내 보존제-무함유, 멸균 RNA-LNP 분산제이다. 일부 구현예에서, 약학적 조성물에 함유된 RNA 약물 물질 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같은 ssRNA)은 0.8 내지 1.2 mg/mL 농도로 명목 충진 부피 5.0 mL로 충진된다. 약학적 조성물은 -80℃ 내지 -60℃에서 보관한다.
본원에 제공된 약학적 조성물에 대한 설명이 기본적으로 인간에 투여하기 적합한 약학적 조성물에 대한 것이지만, 당해 기술 분야의 당업자라면 이러한 조성물들이 일반적으로 모든 종류의 동물에 투여하기에 적합함을 이해할 것이다. 조성물을 다양한 동물에 투여하기 적합하게 만들기 위해 인간에 투여하기 적합한 약학적 조성물에 대한 변형들이 잘 이해되어 있으며, 통상적인 당업계의 수의 약리학자라면 있다면 주로 통상적인 실험으로 이러한 변형을 설계 및/또는 수행할 수 있다.
A. 유용한 구성성분들에 대한 동정 및/또는 특정화
본원에 기술된 약학적 조성물에 유용한 구성성분 (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 ssRNA(들))의 적절한 품질을 보장하기 위해, 한가지 이상의 정성 평가 및/또는 관련 기준 (예를 들어, 실시예 11-12에 기술된 바와 같은)을 수행 및/또는 모니터링할 수 있다.
특히, 본 발명은 ssRNA 또는 이의 조성물의 한가지 이상의 특징을 규명하는 방법을 제공하며, 여기서 ssRNA는 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화한다.
일부 구현예에서, ssRNA(들)(예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 중쇄 또는 경쇄를 각각 암호화하는 ssRNA 2개 이상을 포함하는 조성물)의 RNA 온전성 평가는 모세관 겔 전기영동 분석을 적용함으로써 수행할 수 있다. 일부 구현예에서, 더 긴 HC-암호화 RNA의 면적 비율을 평가하여, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 각 체인을 암호화하는 RNA들의 온전성을 나타낸다. 예를 들어, 2 이상의 RNA를 포함하는 RNA 조성물은 모세관 겔 전기영동에 의해 분석할 수 있으며, 그 결과로 전기영동도를 수득할 수 있다. 단순 예로서, 2종의 서로 다른 RNA 용출물을 포함하는 RNA 조성물은 항체의 개별 체인 (예를 들어, 중쇄 또는 경쇄)을 암호화하는 RNA에 각각 해당하는, 2개의 분리된 피크로 용출된다. 예를 들어, 도 15를 참조한다.
본 발명은, 특히, 분자 비율이 이러한 매개변수에 강하게 영향을 미치고, 혼합물의 사양이 액적 디지털 PCR에 의해 측정된 분자 비율에 따라 정해진다는, 견해를 제시한다. 이러한 사양은 실제 서열 및 중량 비율에 의해 정의되는 소정의 혼합물에 의존한다.
부가적으로 또는 대안적으로, 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 중쇄를 암호화하는 ssRNA : CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 경쇄를 암호화하는 ssRNA의 RNA 비율은 액적 디지털 PCR에 의해 측정할 수 있다.
부가적으로 또는 대안적으로, 일부 구현예에서, 잔류 DNA 주형 및 잔류 dsRNA는 약물 물질에 혼합하기 전, 예를 들어 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 서로 다른 체인들을 암호화하는 ssRNA를 혼합하기 전에, 개개 RNA 품질을 보장하기 위해 약물 물질 중간산물의 수준에 대한 허용 기준을 적용해 공정 중 관리로서 측정한다. 일부 구현예에서, 관련 허용 기준은 개별 ssRNA의 품질을 공정 중에 관리하기 위해 이용한다.
부가적으로 또는 대안적으로, 일부 구현예에서, ssRNA를 포함하는 조성물에서 잔류 숙주 세포 DNA 및/또는 숙주 세포 단백질을 측정할 수 있다.
B. 효과적인 전달에 대한 특정화 (예를 들어, 혈장 농도)
일부 구현예에서, 조성물 및 이의 구성성분은 그 효능을 결정하기 위해 분석할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물의 시험관내 및/또는 생세내 일차 약력학 및/또는 약동학을 결정할 수 있다. 이용가능한 약동학 측정에 대한 예로는 하기 하나 이상의 매개변수를 포함할 수 있다:
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Cmax는 약물 투여 후 및 2차 투여 전, 신체의 특정 구역 또는 검사 부위에서 약물이 도달하는 최고 (또는 피크) 혈장/혈청 농도에 해당한다. 이와 관련한 약동학 매개변수 tmax는 Cmax가 관찰되는 시간이다.
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Cmin은 투여 후 약물이 달성하는 최소 혈장/혈청 농도에 해당한다.
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Ctrough는 정상 상태 (전형적으로, 다음 투여하기 직전에 측정)에서 투여 간격 종료 시점의 최저 혈장 농도에 해당한다.
ㆍ
곡선하 면적 (AUC)은 시간에 경과에 따른 혈장 내 약물 농도의 변화를 나타낸 곡선의 한정 적분 결과이다. AUC (0 -> 무한정)는 전체 시간에 따른 총 약물 노출을 나타낸다.
일부 구현예에서, ssRNA에 의해 암호화되는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 기능성 조립체는 시험관내 및 생체내에서 예를 들어 실시예 6에 기술된 바와 같이 용량-의존적인 방식으로 확인할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 ssRNA(들)에 의해 암호화되는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 결합 특이성, ADCC 및 CDC 매개, 및/또는 항-종양 활성은 예를 들어 실시예 1-4에 기술된 바와 같이 결정할 수 있다.
특히, 본 발명은 세포에 도입된 하나 이상의 mRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계를 포함하는 방법을 제공하며, 이러한 하나 이상의 mRNA는 Claudin-18.1 폴리펩타이드에 비해 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질을 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 적어도 하나 이상의 ssRNA의 하나 이상의 특징을 포함하고, 하나 이상의 특징은 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) 항체 물질의 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성; (iii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능; 및 (iv) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 방법을 제공한다. 이러한 방법은 (a) 본원에 기술된 (CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 일부 또는 전체 암호화하는) 하나 이상의 조성물 또는 약학적 조성물을 세포와 접촉시키는 단계; 및 세포에 의해 생산된 항체 물질을 검출하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 세포는 간 세포이거나 또는 간 세포를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 이러한 방법은 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계를 더 포함할 수 있으며, 이러한 하나 이상의 특징은 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) 항체 물질의 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성; (iii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능; 및 (iv) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 상기한 특징을 기준 CLDN-18.2-표적화 항체의 특징과 비교하는 것을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 역치 수준 이상의 항체 물질의 단백질 발현 수준을 평가하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 역치 수준은 치료학적으로 적절한 혈장 농도에 해당한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 항체 물질의 결합성을 평가하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 결합성 평가는 CLDN18.1 폴리펩타이드 대비 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 항체 물질의 결합성을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 결합성 평가는 기준 CLDN-18.2-표적화 항체와 적어도 비슷한 항체 물질의 결합 선호성 프로파일을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 기준 CLDN-18.2-표적화 항체는 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵이다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법은 항체 물질이 다음과 같은 특징을 포함할 경우, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질을 CLDN-18.2-표적화 항체 물질로 특정화하는 것을 더 포함할 수 있다: (a) 역치 수준 이상의 세포에 의해 발현된 항체 물질의 단백질 수준; (b) CLDN18.1 대비 CLDN-18.2에 대한 항체 물질의 결합 선호성; 및 (c) ADCC 및/또는 CDC에 의해 매개되는 50% 이상의 종양 세포 (예를 들어, 암 세포) 사멸성.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법은 항체의 검사 특징이 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 특징과 적어도 비슷할 경우, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질을 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵-등가 항체로 특정화하는 것을 더 포함할 수 있다.
본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계를 수반하는 일부 구현예에서, 이러한 단계는 하기 특징들 중 하나 이상을 확인하는 것을 포함할 수 있다:
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접촉 또는 투여 후 48시간 경과시 분석하였을 때, 세포가 하나 이상의 ssRNA에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 발현하는지;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는지;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이, 기준 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체를 이용한 유세포 측정 결합 분석에서 관찰되는 바와 같이, CLDN-18.2에 대해 비슷한 표적 특이성을 나타내는지;
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면역 작동자 세포 (예를 들어, PBMC 세포) 및 CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 항체 물질의 존재 하에 인큐베이션한 후 48시간 경과시 분석하였을 때, CLDN-18.2 양성 세포는 세포용해되고, 대조군 세포는 그렇지 않은지;
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세포에 의해 발현된 항체 물질이, 기준 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체를 동일한 농도에서 사용하였을 때 관찰되는 바와 적어도 비슷한 ADCC 프로파일을 CLDN-18.2 양성 세포에 대해 나타내는지; 및
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CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 인간 혈청과 항체 물질의 존재 하에 인큐베이션한 후 2시간 경과시 분석하였을 때, CLDN-18.2 양성 세포는 세포용해되고, 대조군 세포는 그렇지 않은지.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 또는 이의 구성성분을 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 제공된 방법에 이용되는 세포는 생체내, 예를 들어 개체 (예, 인간이 아닌 포유류 개체와 같은 포유류, 예를 들어, 마우스 또는 원숭이 개체) 체내에 존재한다. 일부 이러한 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA로부터 발현된 항체 물질의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계는 이러한 개체에서 하나 이상의 조직 내 항체 수준을 확인하는 것을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 특정화 방법은 본원에 기술된 조성물 또는 약학적 조성물을 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 각각 가진 동물 개체 군에 투여하여, 이러한 조성물 또는 약학적 조성물이 CLDN-18.2-표적화 항체 물질인 것으로 특정된다면 항-종양 활성을 확정하는 것을 더 포함한다.
또한, 본 발명의 범위에는 하기 단계들을 포함하는 제조 방법이 포함된다:
(A) ssRNA 또는 이의 조성물의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계로서, 여기서 ssRNA는 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화하고, 하나 이상의 특징이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단계:
(i) ssRNA의 길이 및/또는 서열;
(ii) ssRNA의 온전성;
(iii) ssRNA의 하나 이상의 화학적 모이어티의 존재 및/또는 위치;
(iv) ssRNA가 세포에 도입되었을 때 항체 물질의 발현 정도;
(v) ssRNA 또는 이의 조성물의 안정성;
(vi) ssRNA가 도입된 유기체로부터 유래한 생물학적 샘플 내 항체 물질의 수준;
(vii) ssRNA로부터 발현된 항체 물질의, 선택적으로 CLDN18.1 대비, 선택적으로 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성;
(viii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능;
(ix) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능;
(x) 조성물 내 지질 실체 및 양/농도;
(xi) 조성물 내 지질 나노입자의 크기;
(xii) 조성물 내 지질 나노입자의 다분산성;
(xiii) 조성물 내 ssRNA의 양/농도;
(xiv) 지질 나노입자 내 ssRNA의 캡슐화 정도; 및
(xv) 이들의 조합;
(B) ssRNA 또는 이의 조성물의 하나 이상의 특징을 적절한 기준 표준의 특징과 비교하는 단계; 및
(C) (i) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준에 부합하거나 또는 초과하는 것으로 확인되면, ssRNA 또는 이의 조성물을 하나 이상의 추가적인 제조 및/또는 유통 단계로 지정하거나; 또는
(ii) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준에 부합 또는 초과하지 않는 것으로 확인되면, 대안적인 조치를 행하는 단계.
일부 구현예에서, 기준 표준은, 예를 들어, 역사적 참조 (historical reference), 설정 사양 등의 임의의 품질 제어 표준일 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, 일부 구현예에서, 직접 비교가 필요한 것은 아니다. 일부 구현예에서, 기준 표준은 예를 들어 물리적 외양, 지질 실체 및/또는 함량, LNP 크기, LNP 다분산성, RNA 캡슐화, RNA 길이, 실체 (RNA로서), 온전성, 서열 및/또는 농도, pH, 오스몰 농도, RNA 비율 (예를 들어, HC RNA : LC RNA의 비율), 효력, 박테리아 내독소, 바이오버든, 잔류 유기 용매, 오스몰 농도, pH, 및 이들의 조합에 기반한 허용 기준이다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 한가지 이상의 효력 분석, 통상, 예를 들어, 비-제한적으로, 시험관내 번역, 효소-연계된 면역흡착 분석 (ELISA) 및/또는 T-세포 활성화 생분석에 의해 확인할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 세포에서 RNA 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체의 발현은 ELISA에 의해 리포펙션 생산 세포의 배양물 상층액에서 측정할 수 있다. 일부 이러한 구현예에서, 리포펙션 생산 세포의 상층액을 작동자 세포로서 FcRIIIa-양성 루시퍼라제 리포터 세포와 CLDN-18.2-발현성 종양 세포의 공배양물에 첨가할 수 있다. CLDN-18.2 및 FcγRIIIa 수용체에 대한 항체의 동시적인 결합은 작동자 세포의 활성화를 유도하여 루시퍼라제 발현이 이루어지며, 이는 발광 판독으로 정량한다.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 분석하여 ssRNA의 하나 이상의 특징이 적절한 기준 표준에 부합되거나 또는 초과할 경우, 이러한 ssRNA는, 예를 들어, 일부 구현예에서 본원에 기술된 지질 입자를 이용한 제형화를 수반하는, 제형화로 지정된다.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 조성물을 분석하여 조성물의 하나 이상의 특징이 적절한 기준 표준에 부합되거나 또는 초과할 경우, 이 조성물은 조성물의 출시 및/또는 유통으로 지정된다.
제조 방법에 대한 일부 구현예에서, ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)가 제형화로 지정되거나, 및/또는 ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 조성물이 조성물의 출시 및/또는 유통으로 지정될 경우, 이러한 방법은 제형 및/또는 조성물을 각각 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 가진 동물 개체 군에 투여하여 항-종양 활성을 확인하는 것을 더 포함할 수 있다.
CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 제조 방법 역시 본 발명의 범위에 속한다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 제조 방법은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함하는 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 포함하는 조성물을 세포에 투여하는 것을 포함하며, 그래서 이러한 세포는 ssRNA(들)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 발현 및 분비하게 된다. 일부 구현예에서, 투여 또는 표적화할 세포는 간 세포이거나 또는 간 세포를 포함한다.
일부 구현예에서, 세포는 세포 배양물에 존재한다.
일부 구현예에서, 세포는 개체에 존재한다. 일부 이러한 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 이를 필요로 하는 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 약학적 조성물은 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 만들어지 되도록 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 치료학적으로 적절한 혈장 농도는 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC)을 통해 암 세포 사멸을 매개하기에 충분하다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 치료학적으로 적절한 혈장 농도는 0.3-28 ㎍/mL이다.
VI. CLDN-18.2의 다량 발현과 관련있는 암에 대한 예
A. 고형 종양
암은 전세계적으로 주요 사망 요인의 2번째를 차지하고 있으며, 2018년에는 약 960만명의 사망의 원인인 것으로 추정된다 (Bray et al. 2018). 일반적으로, 고형 종양이 전이성이 되면, 생식 세포 및 일부 유암종 종양과 같이 몇가지를 제외하고는 5년 생존율이 25%를 초과하는 경우가 드물다.
진행성 고형 종양 및 전이성 고형 종양에 대한 치료
화학요법, 방사선요법, 수술 및 표적 요법과 같은 통례적인 요법의 개선과 최근 면역요법의 진보로 진행성 고형 종양을 가진 환자에서 성과가 개선되었다. 과거 수년간, 식의약청 (FDA) 및 유럽 의약청 (EMA)에서는, 여러가지 암 타입, 주로 고형 종양을 가진 환자를 치료하기 위해, 체크포인트 저해제 8종 (CTLA-4 경로를 표적화하는 단일클론 항체 1종, 이필리무맵, 및 아테졸리주맵, 아벨루맵, 두르발루맵, 니볼루맵, 세미플리맵 및 펨브롤리주맵을 비롯하여, 프로그래밍된 사명 수용체/리간드 [PD/PD-L1]를 표적화하는 항체 7종)을 승인하였다. 이러한 승인은 암 치료의 판도를 극적으로 바꾸었다. 그러나, 췌장 선암종 또는 전이성 담관암과 같은 일부 암은 여전히 현행 면역요법이 유익하지 않다. 이런 현상은 췌관 선암종 (PDAC)의 전이성 및 공격적인 특성, 복잡한 돌연변이 환경, 결합조직형성 기질 및 강력한 면역억제 종양 미세환경 등의 여러가지 요인들로 인한 것이다.
이들 2가지 암 타입의 불량한 예후는 추가적인 치료 방식의 필요성을 가중시킨다. 본 발명은, 특히, CLDN-18.2가 요법이 표적화할 수 있는 특히 유용한 종양-관련 항원이라는 견해를 제시한다. 지금까지, CLDN-18.2를 표적화하는 요법은 임의의 암 적응증에 대해 승인된 바 없다. 그래서, 일부 구현예에서, 본 발명은, RNA-암호화된 CLDN-18.2를 표적화하는 항체가 ADCC 및/또는 CDC를 유도할 수 있으며 및/또는 화학요법 및/또는 기타 항암 요법의 세포독성 효과(들)를 강화해, 예를 들어 이들 요법을 단독 투여한 경우 및/또는 다른 적절한 참조와 비교해, 무진행 생존 및/또는 전체 생존의 연장으로 이어질 수 있다는, 견해를 제시한다.
B. 췌관 선암종
췌관 선암종 (PDAC)은 전체 췌장 악성의 90% 이상을 차지하는 가장 유병률이 높은 췌장 신생물 질환이다 (Kleeff et al. 2016). 지금까지 PDAC는 전세계적으로 암-관련 사망의 가장 흔한 4번째 요인으로, 5년 전체 생존율이 8% 미만에 불과하다 (Siegel et al. 2018). PDAC 발병률은 향후 더 증가될 것으로 예상되며, 새로운 진단 및 PDAC-관련 사망 건수가 미국 및 유럽 국가들에서 향후 10년내 2배 이상 증가할 것으로 추정된다 (Quante et al. 2016; Rahib et al. 2014; Cancer Research UK).
PDAC 치료의 효과 및 결과는 주로 진단 당시의 질환 병기에 의해 좌우된다. 외과 절제한 다음 보조 화학요법을 실시하는 것이 가능한 유일한 치료법이지만, 절제가능한 PDAC 병기인 PDAC 환자는 10-20%에 불과하고, 나머지 80-90%는 국소 진행된, 절제할 수 없는 병기이거나, 또는 사례 대부분이 원위 전이된 상태이다 (Gillen et al. 2010; Werner et al. 2013). 절제할 수 없거나 또는 경계선-절제 가능한 종양을 가진 환자에는 통상적으로 전신 화학요법이 제1선 치료법으로 채택된다. 이는 겜시타빈 및 카페시타빈 등의 뉴클레오시드 유사체, 또는 피리미딘 유사체 5-플루오로우라실을 단일 요법으로서 또는 방사선 요법과 같은 다른 치료 방식과 조합하여 수행된다 (Werner et al. 2013; Manji et al. 2017; Teague et al. 2015). FOLFIRINOX, 즉, 폴린산, 5-플루오로우라실, 이리노테칸 및 옥살리플라틴으로 구성된 다중-화학치료 용법이 겜시타빈 단독 (Conroy et al. 2011) 및 겜시타빈의 조합과 비교해, 전이 단계에서 생존 중앙값이 거의 2배이고, 나노입자 알부민-결합된 파클리탁셀 (nab-파클리탁셀) 역시 전체 생존성을 현저하게 개선하는 것으로 밝혀져 있다 (Von Hoff et al. 2013). 이러한 치료법은 비교적 독성이 높아, 흔히 노령 환자 및/또는 성능 상태가 좋지 않은 환자에서는 이의 사용이 제한되지만, 사용시 전체 삶의 질은 향상되는 것으로 알려져 있다 (Gourgou-Bourgade et al. 2013).
에를로티닙은 상피 성장 인자 수용체 저해제로서, 국소 진행된, 절제 불가한 또는 전이성 췌장암 환자에 대한 제1선 치료법으로서, 겜시타빈과 조합하여 사용되는 미국에서 허가된 유일한 표적 요법이다. 에를로티닙을 위약과 비교한 무작위 대조 시험에서, OS 개선 중앙값 0.4개월, PFS 개선 중앙값 0.3개월이 입증되었다. PDAC의 CLDN-18.2+ 하위집단을 표적화하는 BNT141은 잠재적으로 미충족된 현저하게 높은 의학적 요구성이 있는 집단을 해결할 수 있다. 후원업체는 최초-인간 실험시 SOC (화학요법)와 함께 이행될 안전한 용량을 확립함으로써 이러한 적응증에서 BNT141의 임상 개발을 가속화하는 것을 목표로 하고 있다.
C. 담관암
담관암은 담도계의 상피 악성을 지칭하며, 담낭암, 바터팽대부암, (간-외 및 간-내 담관)을 포함한다. 역사적으로, 이 용어는 담낭암 및 바터팽대부암을 제외한 여타 간 외 및 간 내 담관 암을 망라한다 (de Groen et al. 1999).
담관암은 전체 위장 전이의 약 3%를 차지하며 (Charbel et al. 2011), 간세포암 다음으로 가장 흔한 간담도계 암이다 (Hennedige et al. 2014). 공교롭게도 사망율이 매우 높다 (3.58건/100,000건). 이는 영국에서의 발병률 (3.64건/100,000건)에 상응하며 (National Cancer Intelligence Network 2015), 전이 상태에서 5년 생존율 2%에 맞먹는다 (National Cancer Institute Seer Data 2015; Seer Data 2014). 2015년 BTC의 전체 유병률이 22% 증가하였으며, 환자 150,000명이 BTC로 진단되었다 (Vos et al. 2015). 전반적으로, 유병률이 높은 일부 지역 (예를 들어, 일본 및 한국)에서도 발병률에는 상당한 편차가 존재한다. 이는 담관암이 매우 흔한 지역 (태국 북동부 및 중국)에서 간 흡충 (오피스토르키스 비베리니 (Opisthorchis viverrini) 및 클로노르키아시스 시넨시스 (Clonorchiasis sinensis))에 의한 것으로 볼 수 있다 (Parkin et al. 1991; Kahn et al. 2008). 담석증 유병률이 높은 지역은 인도 및 칠레와 같이 담낭암의 높은 유병률과 일치한다 (Randi et al. 2009; Khan et al. 1999; Kirstein and Vogel. 2016). 전술한 위험 인자가 흔치 않은 지리학적 지역에서는 BTC 사례가 수건에 불과하다 (Kahn et al. 1999).
전술한 위험 인자와는 별도로, 원발성 경화성 담관염, 원발성 담즙성 간경변, 기타 요인으로 인한 간경변, C형 간염 및 선천성 기형, 예를 들어 총담관 낭종 및 다발성 담관 유두종증 역시 BTC 발병 위험 증가와 연관성이 있다 (Kahn et al. 2008; Lee et al. 2004; Chapman 1999). 아울러, 린치 증후군 및 BRCA1과 BRCA2 (유방암 유전자 1 및 2) 유전자 이상을 유발하는 생식계열 돌연변이를 가진 환자 역시 BTC에 걸리기 쉽다. 린치 증후군을 가진 경우 BTC 발병 평생 위험이 2%이고, BRCA2를 가진 환자에서 담관암이 발병할 상대적인 위험은 4.97%이다 (Golan et al. 2017; Shigeyasu et al. 2014).
BTC에 대한 치료는 질환의 병기에 따라 나눠져 있으며, 초기 병기에는 수술이 주된 치료법이지만, 소수의 환자 (10-40%)만 이에 해당한다 (Cidon 2016). 진행성 질환에 대한 제1선 치료로서, 3상 ABC-02 실험에서 겜시타빈과 시스플라틴의 조합이 겜시타빈 단독 제제에 비해 우수한 것으로 검증되었다. 보고된 OS 중앙값은 각각 11.7개월 vs 8.1개월이었으며 (위험비 [HR] 0.64; 95% 신뢰구간 [CI] 0.52-0.80; p < 0.001) (Valle et al. 2010), 이후 BTC 후기에 대한 글로벌 표준 치료법이 되었다. 이 용법에서 달성된 보통 수준의 생존 이점은 무작위 3상 시험에서 미처 이를 능가하진 못하였지만, 3상 시험의 겜시타빈과 경구 플루오로피리미딘 S-1의 조합에서 OS 중앙값이 겜시타빈 + S-1의 경우 15.1개월 대 겜시타빈/시스플라틴 군의 경우 13.4개월로 보고되었다 (HR 0.95; 90% CI 0.78-1.15; 비-열등성의 경우 p = 0.046)(Morizane et al. 2018). 이 용법은 동반 질환으로 인해 백금 제제의 사용이 제한된 환자에 대한 대체 치료법으로서 고려할 수 있다. 진행성 BTC 환자에서 제1선 치료로서 겜시타빈, 시스플라틴 및 nab-파클리탁셀의 조합을 평가하는 2상 시험에서는, 겜시타빈/시스플라틴 표준 용법과 비교해 더 우수한 PFS 중앙값이 예비 결과로서 (11.4개월 대 8.0개월) 보고되었으며, OS 중앙값은 19.2개월이었다. 이 시험 (NCT02392637)은 2019년에 진행되었다 (Shroff et al. 2017; Shroff et al. 2018).
VII. 환자 집단
본원에 제공된 기술은 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성 증가와 관련있는 질환 또는 병태를 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 CLDN-18.2 양성 고형 종양을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성 고형 종양은 숙련된 병리학자의 관행에 따라 염색 강도가 2점 이상인 것으로 면역조직화학 분석을 통해 결정된다.
본 발명에서는, 특히, 췌장암 및 담관계암에서 전형적으로 CLDN-18.2의 발현이 높다는 것을 인지하였다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 췌장암을 치료하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 췌관 선암종 (PDAC)을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 담관계암을 치료하는데 유용할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 예를 들어 면역조직화학 분석에 의해 CLDN-18.2 양성인 것으로 확인된 위식도 암을 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 예를 들어 면역조직화학 분석에 의해 CLDN-18.2 양성인 것으로 확인된 비-소 세포성 폐암 (NSCLC)을 치료하는데 유용할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 전이성 CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 환자 (예를 들어, 성인 환자)를 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 절제 불가한, 예를 들어, 일부 구현예에서, 외과적 절제가 심각한 이환률을 유발할 가능성이 있는 CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 환자 (예를 들어, 성인 환자)를 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 국소 진행된 CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 환자 (예를 들어, 성인 환자)를 치료하는데 유용할 수 있다. 부가적으로 또는 대안적으로, 일부 구현예에서, 이러한 환자들에서 암은 치료 후 진행된 것일 수 있거나, 또는 이러한 암 환자는 만족할만한 대안 요법이 없는 경우일 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 국소 진행된, 절제 불가한 또는 전이성 CLDN-18.2+ 췌장암을 가진 성인 환자를 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 국소 진행된, 절제 불가한 또는 전이성 CLDN-18.2+ 담관암을 가진 성인 환자를 치료하는데 유용할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 치료를 받는 환자는 다른 암 요법, 예를 들어, 비-제한적으로 화학요법을 받았을 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성 고형 종양을 앓고 있는 환자는, 자신의 고형 종양이 CLDN-18.2-양성 고형 종양 (예를 들어, 본원에 기술된 것)으로 특정될 정도로 CLDN-18.2 수준/활성을 증가시키기에 충분한 전처리를 받았을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 암 환자는 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성을 높일 것으로 예상 또는 예측되는 화학요법을 받았을 수 있거나, 또는 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성을 달성하거나 또는 달성하였을 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 화학요법은 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성을 높이는 것으로 예상 또는 예측될 수 있거나, 또는 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성이, 화학요법을 수행하지 않을 경우의 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성과 비교해, 적어도 50% 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 이상으로 도달되거나 도달되었을 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학요법은 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성을 높이는 것으로 예상 또는 예측될 수 있거나, 또는 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성이, 화학요법을 수행하지 않을 경우의 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성과 비교해, 적어도 2배 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 2.5배, 적어도 3배, 적어도 3.5배, 적어도 4배, 적어도 4.5배, 적어도 5배, 적어도 5.5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 적어도 8배, 적어도 9배, 적어도 10배 또는 그 이상으로 도달되거나 도달되었을 수 있다. 이러한 화학요법에 대한 예로는 nab-파클리탁셀, 겜시타빈, 시스플라틴, 및/또는 FOLFIRINOX 등이 있으나, 이로 한정되는 것은 아니다.
일부 구현예에서, 실시예 16에 기술된 바와 같이 하나 이상의 질환-특이적인 포함 기준을 충족하는 암 환자는 본원에 기술된 치료를 받을 수 있다 (예를 들어, 제공된 약학적 조성물을 단일요법으로서 또는 조합 요법의 일부로서 투여). 일부 구현예에서, 본원에 기술된 치료를 투여받는 암 환자는 실시예 16에 기술된 바와 같이 하나 이상의 다른 포함 기준을 추가로 충족할 수 있다.
일부 구현예에서, 실시예 16에 기술된 하나 이상의 질환-특이적인 포함 기준을 충족하는 암 환자는 본원에 기술된 치료를 받을 수 있다 (예를 들어, 제공된 약학적 조성물을 단일요법으로서 또는 조합 요법의 일부로서 투여). 일부 구현예에서, 본원에 기술된 치료를 투여받는 암 환자는 실시예 16에 기술된 바와 같이 하나 이상의 다른 포함 기준을 추가로 충족할 수 있다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 본원에 기술된 바에 따라) CLDN-18.2를 발현하지 않거나 또는 CLDN-18.2 양성이 아닌 것으로 결정된 종양을 가진 암 환자는 본원에 기술된 치료를 투여받지 않는다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2 양성 종양을 가지고 있지만 실시예 17에 기술된 하나 이상의 제외 기준에 해당되는 암 환자는 본원에 기술된 치료를 투여받지 않는다.
VIII. 치료 (예를 들어, 투여 용법)
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 생산하기 위해 종양 세포에 의해 흡수될 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 본원에 기술된 약학적 조성물은 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 종양 세포 (예를 들어, 종양 세포)에 대해 유도하기에 충분한 혈장 농도로 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 전달할 수 있다.
이에, 본 발명의 다른 측면은 본원에 기술된 약학적 조성물의 이용 방법에 관한 것이다. 예를 들어, 본원에 제공된 일 측면은 제공된 약학적 조성물을 CLDN-18.2-양성 고형 종양을 가진 개체에 투여하는 것을 포함하는 방법이다. 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물은 정맥내 주사 또는 주입에 의해 투여된다. CLDN-18.2-양성 고형 종양에 대한 예로는 비-제한적으로 담관 종양, 위 종양, 위-식도 종양, 난소 종양, 췌장 종양 및 CLDN-18.2 폴리펩타이드 수준을 역치 수준 (예를 들어, 정상 조직에서 관찰되는 CLDN-18.2 수준) 이상, 예를 들어, 일부 구현예에서 적어도 50% 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 이상, 또는 일부 구현예에서 적어도 2배 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 2.5배, 적어도 3배, 적어도 3.5배, 적어도 4배, 적어도 4.5배, 적어도 5배, 적어도 5.5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 적어도 8배, 적어도 9배, 적어도 10배 또는 그 이상으로 발현하거나 또는 나타내는 종양 등이 있다.
본 발명의 다른 측면은 제공된 약학적 조성물을 암 개체에 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 암을 치료하기 위해 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 전달하는 방법에 대한 일부 개선에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 대응되는 (예를 들어, 암호화된) 단백질 (예를 들어, 항체) 물질 자체 투여시 관찰되는 바와 비교해, TEAE의 발생 (예를 들어, 빈도 및/또는 중증도) 감소 및/또는 효능 수준과 TEAE 수준 간의 연관성 개선 (예를 들어, 치료학적 윈도우의 개선)과 더불어 효과적인 투여와 같은 한가지 이상의 개선을 달성할 수 있다. 구체적으로, 본 발명은 이러한 개선이 이를 암호화하는 핵산, 특히 RNA(들)(예를 들어, mRNA(들)와 같은 ssRNA(들))의 투여를 통해 IMAB362를 전달함으로써 달성될 수 있음을, 교시한다.
투여 일정 : 당해 기술 분야의 당업자라면, 암 치료제가 종종 투여 사이클로 투여됨을 알 것이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 투여 사이클 1회 이상으로 투여된다.
일부 구현예에서, 투여 사이클 1회는 적어도 3일 이상 (예를 들어. 적어도 4일, 적어도 5일, 적어도 6일, 적어도 7일, 적어도 8일, 적어도 9일, 적어도 10일, 적어도 11일, 적어도 12일, 적어도 13일, 적어도 14일, 적어도 15일, 적어도 16일, 적어도 17일, 적어도 18일, 적어도 19일, 적어도 20일, 적어도 21일, 적어도 22일, 적어도 23일, 적어도 24일, 적어도 25일, 적어도 26일, 적어도 27일, 적어도 28일, 적어도 29일, 적어도 30일 등)이다. 일부 구현예에서, 투여 사이클 1회는 적어도 21일이다.
일부 구현예에서, 투여 사이클 1회는 예를 들어 용량을 사이클 중에 매일 투여하거나 또는 용량을 사이클 중에 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 7일 간격마다 투여할 수 있는 등의 패턴에 따라, 수차례 투여를 수반할 수 있다.
일부 구현예에서, 사이클을 수회 실시할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 사이클을 적어도 2회 (예를 들어, 사이클 적어도 3회, 적어도 4회, 적어도 5회, 적어도 6회, 적어도 7회, 적어도 8회, 적어도 9회, 적어도 10회, 또는 11회 이상)로 실시할 수 있다. 일부 구현예에서, 실시할 투여 사이클 횟수는 치료 유형 (예를 들어, 단일 요법 대 조합 요법)에 따라 달라질 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 사이클을 적어도 3-8회로 실시할 수 있다.
일부 구현예에서, 사이클 사이에 "휴지 기간"이 존재할 수 있으며; 일부 구현예에서, 사이클 사이에 휴지 기간이 없을 수 있다. 일부 구현예에서, 사이클 사이에 때때로 휴지 기간이 있을 수 있으며, 때때로 휴지 기간이 없을 수 있다.
일부 구현예에서, 휴지 기간은 수일 내지 수개월의 기간일 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 휴지 기간은 예를 들어, 적어도 4일, 적어도 5일, 적어도 6일, 적어도 7일, 적어도 8일, 적어도 9일, 적어도 10일, 적어도 11일, 적어도 12일, 적어도 13일, 적어도 14일 또는 그 이상 등의 적어도 3일 이상의 기간일 수 있다. 일부 구현예에서, 휴지 기간은 예를 들어 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주 또는 그 이상 등의 적어도 1주일 이상의 기간일 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물, 예를 들어, 단일 요법으로 이용하기 위한 약학적 조성물은 사이클 적어도 3회로 투여할 수 있으며, 여기서 일부 구현예에서, 각 사이클은 21일이다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물, 예를 들어, 조합 요법으로 이용하기 위한 약학적 조성물은 사이클 적어도 8회로 투여할 수 있으며, 여기서 일부 구현예에서, 각 사이클은 21일이다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 각각의 3-주 투여 사이클 (21일/Q3W)의 1일차에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 암 환자는 치료 사이클을 최대 3회 제공받을 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 암 환자는 사이클을 최대 8회 제공받을 수 있다.
용량: 본원에 기술된 약학적 조성물의 투여량은, 예를 들어, 비-제한적으로, 치료할 개체의 체중, 암 유형 및/또는 암 병기, 및/또는 단일 요법 또는 조합 요법 등의, 다수의 인자에 따라 달라질 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 사이클은 정해진 투여 횟수 및/또는 패턴을 수반한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 예를 들어, 투여 사이클 당 적어도 2회 투여, 투여 사이클 당 적어도 3회 투여, 투여 사이클 당 적어도 4회 투여 또는 그 이상 등의, 투여 사이클 당 1회 이상의 투여로 투여된다.
일부 구현예에서, 투여 사이클은 설정된 누적 용량의, 예를 들어 특정한 기간에 걸친 투여를, 선택적으로 예를 들어 설정된 간격(들)으로 및/또는 설정된 패턴에 따라 투여될 수 있는, 다회 투여를 통한 투여를 수반한다. 일부 구현예에서, 설정된 누적 용량은, 치료할 개체 또는 표적 세포에서 다회 투여에 의해 발생되는 생물학적 및/또는 약동학 효과가 적어도 일부 시간 동안 중첩되도록, 설정된 간격으로 다회 투여를 통해 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 설정된 누적 용량은, 치료할 개체 또는 표적 세포에서 다회 투여에 의해 발생되는 생물학적 및/또는 약동학 효과가 더해질 수 있도록, 설정된 간격으로 다회 투여를 통해 투여할 수 있다. 단순 예로서, 일부 구현예에서, 설정된 누적 용량 X mg은 각각 X/2 mg으로 2번 나누어 투여할 수 있으며, 이러한 2번의 투여는 치료할 개체 또는 표적 세포에서 각각의 X/2-mg에 의해 발생되는 생물학적 및/또는 약동학 효과가 더해질 수 있도록, 충분히 인접한 시간 안에 이루어진다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량은, 제공된 단일 가닥 RNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 투여 사이클 동안에 종양 세포 (예를 들어, 암 세포)에 대해 항체-의존적인 세포성 세포독성을 촉발하기에 충분히 높은 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성할 것으로 예상되는, 수준으로 투여된다. IMAB362의 경우, ADCC에 대한 용량-반응 상관성은 임상적으로 잘 특정되어 있으며, ADCC에 의한 CLDN-18.2+ 세포의 효율적인 세포용해, 즉 EC95 0.3-28 ㎍/mL이 발표된 바 있다 (Sahin et al. 2018). 따라서, 일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량은, ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 약 0.3-28 ㎍/mL 혈장 농도를 제공하는, 함량으로 투여된다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량은, 제공된 단일 가닥 RNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 IMAB362 투여시 관찰되는 치료학적으로 적절한 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)과 비슷한 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)이 달성될 것으로 예상되는, 수준으로 투여된다. 일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량은, 제공된 단일 가닥 RNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 약 0.05-3 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서, 약 0.1-10 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서 약 0.2-15 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서, 약 0.3-30 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서, 약 0.3-28 ㎍/mL 이상의 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성할 것으로 예상되는, 수준으로 투여된다. 일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량은, 제공된 단일 가닥 RNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 약 5 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서 약 10 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서 약 15 ㎍/mL 이상의 Ctrough 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성할 것으로 예상되는, 수준으로 투여된다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 정맥내 투여용) 각 용량 또는 누적 용량을 투여하여, 약 0.1 ㎍/mL 이상; 일부 구현예에서, 약 0.2 ㎍/mL 이상, 0.3 ㎍/mL 이상, 0.4 ㎍/mL 이상, 0.5 ㎍/mL 이상, 0.6 ㎍/mL 이상, 0.7 ㎍/mL 이상, 0.8 ㎍/mL 이상, 0.9 ㎍/mL 이상, 1 ㎍/mL 이상, 1.5 ㎍/mL 이상, 2 ㎍/mL 이상, 5 ㎍/mL 이상, 8 ㎍/mL 이상, 10 ㎍/mL 이상, 15 ㎍/mL 이상, 20 ㎍/mL 이상, 25 ㎍/mL 이상의 항체의 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성하거나 또는 IMAB362 항체 투여시 관찰되는 최대 및 그 이상의 범위를 가지는 것으로 예상되는 수준으로, CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 본원에 기술된 바와 같은 하나 이상의 ssRNA (예를 들어, mRNA)를 전달한다.
임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은 IMAB362의 AUC가 mRNA 암호화된 항체에 적용할 경우 투여 사이클 동안에 (예를 들어, 21-일 투여 사이클 동안에) 약리학적으로 활성인 농도를 정확하게 나타내는 것은 아닐 수 있다는 인식을 제시한다. 일부 구현예에서, AUC는 적어도 1회 모니터링하거나 또는 측정한다. 일부 구현예에서, AUC는 모니터링 또는 측정하지 않는다. 그럼에도 불구하고, 다수 구현예들에서, 투여 함량 및/또는 빈도는 IMAB362의 AUC와 독립적일 수 있다.
임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, 특히, IMAB362에서 보고된 Cmax에의 도달이 필요하지 않을 수 있으며 본원에 기술된 약학적 조성물 및 이로부터 발현된 각 항체 물질에 의해 유발되는 독성 위험을 높일 수 있다는, 인식을 제시한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 RNA로부터 계속적인 발현으로 인해 연장된 기간 동안에 걸쳐 항체의 생물학적으로 활성인 수준을 유지하는 개선된 약동학 프로파일을 가질 수 있다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 제공된 단일 가닥 RNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2 표적화 RiboMab가 IMAB362에서 보고된 Cmax보다 낮은 수준 (예를 들어, 혈장 수준 및/또는 조직 수준)을 달성할 것으로 예상되는, 수준으로 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여 양 및/또는 빈도는 IMAB362에서 보고된 Cmax와는 독립적일 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물 (예를 들어, 정맥내 투여용)의 각 용량 또는 누적 용량은, (단일 ssRNA 또는 2 이상의 ssRNA에 의해 암호화된) CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 ssRNA를, 투여할 개체의 체중에 대해 0.1 mg RNA/kg 내지 5 mg RNA/kg 범위의 함량으로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 각 용량 또는 누적 용량은 ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 0.1 mg RNA/kg, 0.15 mg RNA/kg, 0.2 mg RNA/kg, 0.225 mg RNA/kg, 0.25 mg RNA/kg, 0.3 mg RNA/kg, 0.35 mg RNA/kg, 0.4 mg RNA/kg, 0.45 mg RNA/kg, 0.5 mg RNA/kg, 0.55 mg RNA/kg, 0.6 mg RNA/kg, 0.65 mg RNA/kg, 0.7 mg RNA/kg, 0.75 mg RNA/kg, 0.80 mg RNA/kg, 0.85 mg RNA/kg, 0.9 mg RNA/kg, 0.95 mg RNA/kg, 1.0 mg RNA/kg, 1.25 mg RNA/kg, 1.5 mg RNA/kg, 1.75 mg RNA/kg, 2.0 mg RNA/kg, 2.25 mg RNA/kg, 2.5 mg RNA/kg, 2.75 mg RNA/kg, 3.0 mg RNA/kg, 3.25 mg RNA/kg, 3.5 mg RNA/kg, 4 mg RNA/kg, 5 mg RNA/kg 또는 이보다 높은 함량으로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 각 용량 또는 누적 용량은 ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 1.5 mg RNA/kg의 함량으로 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 각 용량 또는 누적 용량은 ssRNA(들)(예를 들어, 본원에 기술된 ssRNA)를 5 mg RNA/kg의 함량으로 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물 (예를 들어, 정맥내 투여용)의 각 용량 또는 누적 용량을 투여해, 용량 0.15 mg RNA/kg을 전달하며, 이는 일부 구현예에서 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 Cmax 대략 7 ㎍/mL에 해당할 수 있다. 도 14는 시노몰구스 원숭이에서 tmax (48시간)에서 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 RNA 약물 물질의 용량-노출 상관성을 보여준다. 당해 기술 분야의 당업자에게 이해되는 바와 같이, LNP-형질감염 효율 및 mRNA 번역이 시노몰구스 원숭이와 인간 간에 비슷한 것으로 추정하면 (Coelho et al. 2013), (예를 들어, 정맥내 투여용) 제공된 약학적 조성물은 일부 구현예에서 도 14에 나타낸 바와 같이 ssRNA(들)에 의해 암호화된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 바람직한 혈장 수준에 해당하는 적절한 용량을 전달하도록 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 투여는 요법을 시술받는 개체의 반응에 따라 조정할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, (예를 들어, 실시예 5에 기술된 바와 같이) 안전성 약리학 평가에서 하나 이상의 매개변수가 이전 용량이 의학적 안전성 요건을 충족시키지 못하는 것으로 의사에 의해 확인된다면, 투여는 고 용량을 투여한 후 저 용량을 이후에 투여하는 것을 수반할 수 있다. 일부 구현예에서, 실시예 8의 표 13에 나타낸 하나 이상의 수준으로 용량 증량을 수행할 수 있으며; 일부 구현예에서, 용량 증량은 표 13의 하나 이상의 저 용량을 투여한 후 표 13의 하나 이상의 고 용량을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 임의의 특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명은, 특히, 약제학적으로 안내되는 용량 증량 (pharmaceutically guided dose escalation, PGDE) 방법을 적용해 본원에 기술된 약학적 조성물의 적절한 용량을 결정할 수 있다는 통찰력을 제공해준다. 용량 증량 실험의 예는 실시예 8에 제공된다.
또한, 본 발명은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물의 투여 용법을 결정하는 방법을 개시한다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 방법은 다음 단계들을 포함한다: (A) CLDN-18.2 양성 고형 종양을 앓고 있는 개체에 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)을 미리 지정된 투여 용법으로 투여하는 단계; (B) 소정의 기간 동안 개체의 종양 크기를 모니터링하거나 또는 측정하는 단계; (C) 종양 크기 측정 결과(들)에 기반하여 투여 용법을 평가하는 단계. 예를 들어, 용량 및/또는 투여 빈도는, 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지 않다면, 높일 수 있거나; 또는 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양 크기의 감소가 치료학적으로 적절하지만 부작용 (예, 독성 효과)이 개체에서 발생한다면, 용량 및/또는 투여 빈도를 줄일 수 있다. 만일 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양의 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 부작용 (예, 독성 효과)이 환자에서 발생하지 않는다면, 투여 용법은 수정하지 않는다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물의 투여 용법을 결정하는 이러한 방법은 각각 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 가진 동물 개체 (예를 들어, 인간이 아닌 포유류 개체) 군에서 수행할 수 있다. 일부 이러한 구현예에서, 용량 및/또는 투여 빈도는, 개체의 30% 미만에서 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 관찰되거나 및/또는 동물 개체에 의해 발생한 종양 크기 감소 정도가 치료학적으로 적절하지 않다면, 높일 수 있으며; 또는 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지만 유의한 부작용 (예, 독성 효과)이 동물 개체의 적어도 30%에서 발생한다면, 용량 및/또는 투여 빈도를 줄일 수 있다. 만일 약학적 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물)의 투여 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 유의한 부작용 (예, 독성 효과)이 동물 개체에 발생하지 않는다면, 투여 용법은 수정하지 않아도 된다.
본원에 제공된 투여 용법 (예를 들어, 투여 일정 및/또는 용량)이 원칙적으로 인간에 투여하기에 적합하지만, 당해 기술 분야의 당업자라면, 모든 종류의 동물에 투여하기 위해 용량 당량을 결정할 수 있음을 알 것이다. 통상적으로 숙련된 수의 약리학자라면 있다면 주로 통상적인 실험으로 이러한 결정을 설계 및/또는 수행할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 단일 요법으로서 CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 환자에 투여할 수 있다.
조합 요법: 본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물이 수여 개체의 면역 시스템을 활용하면서도 종양 세포 (예를 들어, 종양 세포)에 대해 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및/또는 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 유도하는 능력으로 화학요법 및/또는 기타 항암 요법의 세포독성 효과(들)를 높일 수 있다는 통찰력을 제공해준다. 일부 구현예에서, 이러한 조합 요법은 예를 들어 단독으로 투여되는 개별 요법 및/또는 다른 적절한 기준과 비교해 무진행 생존 및/또는 전체 생존을 연장할 수 있다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 CLDN-18.2+ 고형 종양을 가진 환자에서 다른 항암제와 조합하여 투여할 수 있다.
특정 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 본 발명에서는 예를 들어 겜시타빈, 옥살리플라틴 및 5-플루오로우라실과 같은 특정 화학치료제가 췌장 암 세포주에서 존재하는 CLDN-18.2 발현 수준을 상향 조절하는 것으로 밝혀졌으며; 아울러, 이들 물질이 CLDN-18.2-음성 세포주에서 데노보 발현을 증가시키는 것으로는 관찰되지 않았다. 예를 들어, Tureci et al. (2019) "Characterization of zolbetuximab in pancreatic cancer models" In Oncoimmunology 8 (1), pp. e1523096을 참조한다.
본 발명은, 특히, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법이, (예를 들어, 하나 이상의 화학치료제에 노출됨으로써 발생할 수 있거나 또는 발생된) 종양 세포에서 CLDN-18.2 발현의 활성 및/또는 발현 증가를 (예를 들어, 나타내는 것으로 확인된 및/또는 나타낼 것으로 예상되거나 또는 예측되는) 특징으로 하는 종양(들)(예를 들어, 종양 세포, 이러한 종양(들) 및/또는 종양 세포(들)가 의심되거나 및/또는 검출된 등의 개체 등)에 투여시, 특히 유용하거나 및/또는 효과적일 수 있다는, 인식을 제시한다. 실제, 특히 본 발명은 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법 (예를 들어, RNA와 같은 핵산, 특히 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 mRNA의 투여)이 하나 이상의 CDLN18.2-강화 물질 (예를 들어, 하나 이상의 특정 화학치료제)과 조합하여 (예를 들어, 투여받았거나 및/또는 투여 중이거나 또는 노출된 적 있는 개체에) 투여할 경우에 상승적인 치료를 제공할 수 있음을 교시한다. 이에, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 바와 같은 CLDN-18.2-표적화 요법은 종양 세포에서 CLDN-18.2 발현 및/또는 활성을 상향 조절하는 것으로 예상되거나 및/또는 입증된 다른 항암제와 조합하여 이용가능할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 이미 효과적이지만, 지속적이진 않은 세포독성 치료제와 조합할 수 있다.
일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물은 이러한 약학적 조성물과 화학치료제로 구성된 조합 요법의 일부로서 투여할 수 있다. 이에, 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물은 화학치료제를 투여받은 CLDN-18.2+ 고형 종양 개체에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물은 CLDN-18.2+ 고형 종양 개체에 화학치료제와 함께 공동-투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물 및 화학치료제는 병행하여 또는 순차적으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 화학치료제의 1차 투여는 제공된 약학적 조성물을 투여한 후 (예를 들어, 적어도 4시간 후) 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 화학치료제 및 제공된 약학적 조성물은 동시에 투여한다.
화학치료제가 암 개체에서 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성을 높일 것으로 예상되는 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 제공된 약학적 조성물을 투여하기 전에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 본원에 기술된 ssRNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 이러한 화학치료제의 투여에 대한 반응으로 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성이 증가하는 동안에 치료학적으로 적절한 혈장 농도 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이)에 도달하는 시점으로 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 본원에 기술된 ssRNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 이러한 화학치료제에 대한 반응으로 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성이 이러한 화학치료제의 비-투여시의 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성과 비교해, 적어도 50% 또는 그 이상, 예를 들어. 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 그 이상으로 증가하는 동안에 치료학적으로 적절한 혈장 농도 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이)에 도달하는 시점으로 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 본원에 기술된 ssRNA(들)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질이 이러한 화학치료제에 대한 반응으로 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성이 이러한 화학치료제의 비-투여시의 CLDN-18.2의 발현 및/또는 활성과 비교해, 적어도 1.5배, 적어도 2배 또는 그 이상, 예를 들어, 적어도 2.5배, 적어도 3배, 적어도 3.5배, 적어도 4배, 적어도 4.5배, 적어도 5배, 적어도 5.5배, 적어도 6배, 적어도 7배, 적어도 8배, 적어도 9배, 적어도 10배 또는 그 이상으로 증가하는 동안에 치료학적으로 적절한 혈장 농도 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이)에 도달하는 시점으로 투여할 수 있다. 이러한 화학치료제에 대한 예로는 비-제한적으로 nab-파클리탁셀, 겜시타빈, 시스플라틴, 및/또는 FOLFIRINOX를 포함한다.
겜시타빈을 포함하는 항암 요법과의 조합 치료: 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 포함하는 요법의 투여는 겜시타빈을 포함하는 항암 요법과 공동-투여되거나 또는 중첩될 수 있다. 겜시타빈은 데옥시리보핵산 (DNA) 합성 중인 세포를 사멸시키며, 세포가 G1에서 S 단계로 진행되는 것을 차단한다. 겜시타빈은 뉴클레오시드 키나제에 의해 다이포스페이트 및 트리포스페이트 (dCTP) 뉴클레오시드로 대사된다. 겜시타빈 다이포스페이트는 DNA 합성을 위한 데옥시뉴클레오시드 트리포스페이트를 생성하는 반응을 촉매하는 효소인 리보뉴클레오티드 리덕타제를 저해하므로, dCTP를 비롯한 데옥시뉴클레오티드의 농도가 감소된다. 겜시타빈 트리포스페이트는 DNA로의 병합에 대해 dCTP와 경쟁한다. 다이포스페이트의 작용에 의한 세포내 dCTP 농도 감소시 DNA내 겜시타빈 트리포스페이트 병합이 강화된다 (자기-강화). 겜시타빈 뉴클레오티드가 DNA에 병합되면, 성장 중인 DNA 가닥에는 뉴클레오티드 단 하나만 부가되고, 궁극적으로 세포자살성 세포 사멸의 개시로 이어지게 된다.
nab-파클리탁셀을 포함하는 항암 요법과의 조합 치료 : 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 포함하는 요법의 투여는 nab-파클리탁셀을 포함하는 항암 요법과 공동-투여되거나 또는 중첩될 수 있다. Nab-파클리탁셀은 평균 입자 크기가 대략 130 nm으로, 파클리탁셀이 알부민에 결합된 형태이다. 이것은 투불린 이량체로부터 미세소관의 조립을 촉진하고 탈중합을 방지함으로써 미세소관을 안정화하는 미세소관 저해제이다. 이러한 안정성은 중요한 간기 및 세포의 유사분열 기능에 필수적인 미세소관 네트워크의 정상적인 동적 재구성을 저해하게 된다. 파클리탁셀은 세포 주기 전체에서 미세소관의 비정상적인 배열 또는 "다발"을 유도하고, 유사분열 중에 미세소관의 다발적인 별 형상을 유도한다.
시스플라틴을 포함하는 항암 요법과의 조합 치료 : 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 포함하는 요법의 투여는 시스플라틴을 포함하는 항암 요법과 공동-투여되거나 또는 중첩될 수 있다. 시스플라틴은 플라티늄 중심 원자가 cis 배열의 클로라이드 원자 2개와 암모니아 분자 2개에 의해 둘러싸인 중금속 착물이다. 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, 시스플라틴은 DNA에 결합하여 복구 기전을 방해하고 궁극적으로 세포 사멸을 유도함으로써, 암 세포를 사멸시키는 것으로 보인다.
FOLFIRINOX을 포함하는 항암 요법과의 조합 치료 : 일부 구현예에서, 제공된 약학적 조성물을 포함하는 요법의 투여는, FOL-폴린산 (루코보린이라고도 함), 칼슘 폴리네이트 또는 FA); F-플루오로우라실 (5-FU); Irin-이리노테칸 (이리노테칸); Ox-옥살리플라틴을 함유한 항암제들의 조합인 FOLFIRINOX를 포함하는 항암 요법과 공동-투여되거나 또는 중첩될 수 있다.
루코보린은 테트라하이드로폴산의 5-포르밀 유도체의 부분입체이성질체들의 혼합물이다. 이 혼합물의 생리학적으로 활성인 화합물은 시트로보럼 인자 또는 (-)-폴린산으로도 알려져 있는 (-)-l-이성질체이다. 루코보린은 "1-탄소" 모이어티의 소스로서 폴레이트를 이용하는 반응에 참여하하기 위해 효소 다이하이드로폴레이트 리덕타제에 의한 환원을 필요로 하지 않는다. l-루코보린 (l-5-포르밀테트라하이드로폴레이트)는 (5,10-메테닐테트라하이드로폴레이트 -> 5,10-메틸렌테트라하이드로폴레이트를 통해) l,5 메틸테트라하이드로폴레이트로 빠르게 대사된다. l,5-메틸테트라하이드로폴레이트는 이후 다른 경로를 통해 다시 5,10-메틸렌테트라하이드로폴레이트로 대사될 수 있으며, 이는 조인자 플라빈 아데닌 다이뉴클레오티드 및 니코틴아미드-아데닌 다이뉴클레오티드 포스페이트를 이용한 비가역적인 효소 촉매화된 환원 반응을 통해 5-메틸테트라하이드로폴레이트로 변환된다.
루코보린은 5-플루오로우라실 등의 암 요법에서 이용되는 플루오로피리미딘의 치료학적 효과 및 독성 효과를 강화할 수 있다. 루코보린의 동시 투여는 5-플루오로우라실의 혈장 PK를 변형시키는 것으로 보이지 않는다. 5-플루오로우라실은 플루오로데옥시우리딜산으로 대사되며, 이는 효소 티미딜레이트 신타제 (DNA 복구 및 복제에 중요한 효소)에 결합하여 이를 저해한다. 루코보린은 다른 환원된 폴레이트, 5,10-메틸렌테트라하이드로폴레이트로 쉽게 변환되며, 이는 티미딜레이트 신타제에 대한 플루오로데옥시리딜산의 결합을 안정화하도록 작용하며, 따라서 이 효소에 대한 저해를 강화한다.
플루오로우라실은 DNA 합성을 간섭하며, 다소 RNA 형성도 저해하는, 뉴클레오시드 대사 저해제로서, 이는 빨리 증식하는 세포에 작용해 세포 사멸을 유도할 수 있다. 플루오로우라실은 주요 활성 대사산물 3종으로 변환된다: 5-플루오로-2'-데옥시우리딘-5'-모노포스페이트, 5-플루오로우리딘-5' 트리포스페이트 및 5-플루오로-2'-데옥시우리딘-5'-트리포스페이트. 이들 대사산물은 5-플루오로-2'-데옥시우리딘-5'-모노포스페이트에 의한 티미딜레이트 신타제 저해, 5-플루오로우리딘-5' 트리포스페이트의 RNA로의 병합, 및 5-플루오로-2'-데옥시우리딘-5'-트리포스페이트의 DNA로의 병합 등의 몇가지 효과를 가진다.
이리노테칸은 캄프토테신의 유도체이다. 캄프토테신은, 가역적인 단일 가닥 절단을 유도함으로써 DNA에 비틀림 변형을 완화하는, 효소 토포이소머라제 I과 특이적으로 상호작용한다. 이리노테칸과 이의 활성 대사산물 SN-38은 토포이소머라제 I-DNA 복합체에 결합해, 이들 단일 가닥 절단의 재연결을 방지한다. 현재의 연구에 따르면, 이리노테칸의 세포독성은 복제 효소가 토포이소머라제 I, DNA 및 이리노테칸 또는 SN-38에 의해 형성된 4중 복합체와 상호작용할 경우 DNA 합성시 생기는 이중 가닥 DNA 손상의 원인인 것으로 보인다. 포유류 세포는 이들 이중 가닥 절단을 효율적으로 복구하지 못한다.
옥살리플라틴은 생리학적 용액에서 불안정한 옥살레이트 리간드의 치환을 통해 활성 유도체로 비-효소적으로 변환된다. 거대분자와 공유 결합된, 모노아쿠오 및 다이아쿠오 DACH 플라티늄 등의, 몇가지 일시적인 반응성 종들이 생성된다. 가닥 간 및 가닥 내 혈장 종양 DNA 가교가 모두 형성된다. 인접한 구아닌 2개의 N7 위치들, 인접한 아데닌-구아닌, 및 사이에 뉴클레오티드가 존재하는 이격된 구아니들 사이에 가교가 형성된다. 이러한 가교는 DNA 복제 및 전사를 저해한다. 세포독성은 세포-주기 비-특이적이다.
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 CLDN-18.2 양성 췌장 종양을 앓고 있는 환자에게 투여하기 유용하다. 일부 구현예에서, 이러한 개체는 제공된 약학적 조성물을 단일 요법으로서, 또는 제공된 약학적 조성물과 췌장 종양의 치료용으로 지정된 화학치료제를 포함하는 조합 요법의 일부로서 투여받을 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 폴린산 (FOL), 플루오로우라실 (F), 이리노테칸 (IRIN) 및 옥살리파틴 (OX)을 포함한 암 약물들의 조합인 FOLFIRINOX이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 겜시타빈 및/또는 파클리탁셀 (예를 들어, nab-파클리탁셀)이거나 또는 이를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은 겜시타빈과 조합하여 실시예 18에 기술된 바와 같이 췌장암 치료용 단일 요법으로서 겜시타빈 (예를 들어, Gemzar)의 승인된 용량 및 치료 일정에 따라 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 전술한 바와 같이 췌장암을 치료하기 위한 단일 요법으로서 겜시타빈 (예를 들어, Gemzar)에 대해 승인된 용량 및 치료 일정보다는, 저 용량으로 (예를 들어, 10% 미만, 20% 미만, 30% 미만 또는 그 이상) 및/또는 덜 공격적인 치료 일정 (예를 들어, 10일 간격 또는 2주 간격 등)으로, 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물은, 겜시타빈 및 nab-파클리탁셀과 조합하여 실시예 18에 기술된 바와 같이 nab-파클리탁셀/겜시타빈 조합 치료의 승인된 용량 및 치료 일정에 따라 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 제공된 약학적 조성물은, 실시예 18에 기술된 바와 같이 nab-파클리탁셀/겜시타빈 조합 치료의 승인된 용량 및 치료 일정보다는, 저 용량으로 (예를 들어, 10% 미만, 20% 미만, 30% 미만 또는 그 이상) 및/또는 덜 공격적인 치료 일정 (예를 들어, 10일 간격 또는 2주 간격 등)으로, nab-파클리탁셀 및 겜시타빈과 조합하여 1회 이상 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 제공된 약학적 조성물은 표 17에 기술된 바와 같은 투여 일정에 따른 nab-파클리탁셀 및 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다 (실시예 18).
일부 구현예에서, 본원에 제공된 기술은 CLDN-18.2 양성 담관 종양을 앓고 있는 개체에 투여하기 유용한다. 일부 구현예에서, 이러한 개체는 제공된 조성물을 단일 요법으로서, 또는 제공된 약학적 조성물과 담관 종양의 치료용으로 지정된 화학치료제를 포함하는 조합 요법의 일부로서 투여받을 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 화학치료제는 겜시타빈 및/또는 시스플라틴이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
효능 모니터링 : 일부 구현예에서, 제공된 치료를 받는 환자는 투여된 치료제의 효능을 평가하기 위해 투여 용법 동안에 주기적으로 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 투여된 치료제의 효능은 주기적인 치료 중 영상화 분석을 통해, 예를 들어 4주 간격, 5주 간격, 6주 간격, 7주 간격, 8주 간격 또는 더 긴 간격으로 평가할 수 있다. 일부 구현예에서, 실시예 19에 기술된 한가지 이상의 효능 평가를 수행할 수 있다.
일부 구현예에서, (예를 들어, 단일 요법으로서 또는 예를 들어 표준 치료와의 조합 요법으로서) 제공된 약학적 조성물의 활성의 항종양 및 안전성 지표로서 사용할 수 있는, (예를 들어, 실시예 6에 기술된 바와 같이) 하나 이상의 다양한 약동학 및 약력학 마커를 평가할 수 있다.
실시예
실시예 1: 하나 이상의 예시적인 mRNA로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질에 대한 시험관내 특징 규명
본 실시예는 세포에 도입시 예시적인 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 mRNA로부터 발현된 예시적인 CLDN-18.2-표적화 항체 물질에 대한 시험관내 특징 규명을 기술한다.
간 세포에 RNA 형질감염 후 전체 IgG의 조립 . 본 실시예는 각 mRNA가 시험관내 세포 흡수된 후, 하나 이상의 예시적인 mRNA (예를 들어, 본원에 기술된 mRNA)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질 (이하, "CLDN-18.2-표적화 RiboMab")의 번역, 조립 및 분비에 대해 설명한다. 본 실시예에서, 2가지 발현 시스템, 즉 간 표적화를 시험관내에서 모방하기 위한 일차 인간 간세포 및 중국 햄스터 난소 세포 (CHO-K1)를 이용하였다. 세포의 리포펙션을 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질을 암호화하는 mRNA를 포함하는 조성물을 이용해 수행하였다. 분비된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab를 함유한 세포 상층액을, 예를 들어 48시간 후 회수하고, 예를 들어 웨스턴 블롯 및 ELISA에 의해 분석하였다. 완전히 조립된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 IgG 항체)를 이들 2가지 발현 시스템으로 구축하였다 (도 1).
예시적인 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 결합 특이성. CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 하나 이상의 예시적인 mRNA (예를 들어, 본원에 기술된 mRNA)로부터 발현된 예시적인 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 표적 특이성을 확인하기 위해, 종양 세포로서 CLDN-18.2+ HEK293 형질감염주 및 CHO-K1 세포에서 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab가 함유된 세포 배양 상층액을 이용해 유세포 측정 결합 분석을 수행하였다. 매우 밀접한 스플라이스 변이체 CLDN18.1에 대한 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 교차 반응성을 분석하기 위해, CLDN18.1 형질감염된 세포에 대한 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 결합성을 조사하였다. 하나 이상의 예시적인 mRNA (예를 들어, 본원에 기술된 mRNA)으로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab은 밀착 연접 폴리펩타이드 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하였다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 예시적인 mRNA (예를 들어, 본원에 기술된 mRNA)로부터 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 CLDN-18.2 폴리펩타이드에만 제한적이거나 또는 특이적이었으며, 기준 단백질 IMAB362 (또는 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵으로 공지됨)과 비슷한 농도 의존성을 나타내었다 (도 2).
작용 방식 분석: 시험관내 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및 보체-의존적인 세포독성 (CDC). CLDN-18.2-표적화 RiboMab (예를 들어, 본원에 기술된 것)를 암호화하는 하나 이상의 mRNA로부터 시험관내 번역을 수행한 후, CHO-K1 세포에 의해 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 생활성을, 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC) 및 보체-의존적인 세포독성 (CDC)을 분석함으로써 평가하였다. 예시적인 ADCC 분석을, 예를 들어 CLDN-18.2+ 위 암종 형질감염주 (예를 들어, NUG-C4) 및 표적-음성 유방 암 세포주 (예를 들어, MDA-MB-231)를 이용해 수행하여, 특이적인 세포용해를 조사하였다. 예시적인 CDC 분석에서는 CLDN-18.2+ 형질감염주 (예를 들어, CHO-K1) 및 CLDN-18.2-음성 (예를 들어, CHO-K1) 세포주를 이용하였다. 생체내 조건을 모방하기 위해, 건강한 공여자 3명으로부터 유래한 인간 PBMC를 ADCC 분석에서 작동자 세포로 작동자 : 표적 (E:T) 30:1 비율로 사용하였으며, 인간 혈청 (예를 들어, 상업적으로 입수가능한 인간 혈청)을 CDC 분석에서 보체 소스로 이용하였다. CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 표적 특이적인 및 용량-의존적인 세포성 세포독성을 기준 단백질 IMAB362와 비슷한 수준으로 ADCC [도 3, 패널 A; EC50 10-127 ng/mL (CLDN-18.2-표적화 RiboMab), 14-265 ng/mL (IMAB362)] 및 CDC 분석 (도 3, 패널 B)에서 효율적으로 매개하였다.
실시예 2: 설치류에서 하나 이상의 예시적인 mRNA로부터 생체내 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 특징 규명
예시적인 mRNA (예를 들어, 본원에 기술된 mRNA)로부터 생체내 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 생활성을 생체외 ADCC 분석으로 조사하였다. ADCC 분석은, CLDN-18.2-표적화 항체 물질 ("CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물")을 암호화하는 적어도 하나 이상의 mRNA를 포함하는 약학적 조성물 1 ㎍ (~0.04 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 및 30 ㎍ (~1.20 mg/kg) 또는 IMAB362 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 5차 IV 투여한 후, 24시간 경과 시점에 샘플 채취한 Balb/cJRj 마우스의 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 또는 IMAB362-함유 혈장을 이용해, 수행하였다. IMAB362 투여한 무처리 마우스의 혈장은 분석 기준물로 사용하였다. CLDN-18.2+ 위 암종 형질감염주 (예를 들어, NUG-C4)는 표적으로, 건강한 공여자로부터 유래한 인간 PBMC는 작동자 세포로 사용하였다. 표적 및 작동자 세포를 E:T (작동자:표적) 비율 30:1로, 1% CLDN-18.2-표적화 RiboMab-함유 혈장을 첨가해 48시간 동안 인큐베이션하였으며, 루시퍼라제에 기반한 분석으로 ADCC를 측정하였다. 설치류에서 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 기준 단백질 IMAB362 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)(도 4, 패널 A)와 비슷한 높은 용량-의존적인 표적 세포용해성을 나타내었다. 대조군으로 사용한 표적-음성 유방암 세포주 MDA-MB-231에서는 비-특이적인 세포용해가 관찰되지 않았으며, 이는 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 표적 특이성을 시사해준다 (도 4, 패널 B). 이들 결과는, 설치류에서 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab가 표적화된 종양 세포에 높은 ADCC를 매개할 수 있음을, 보여준다.
실시예 3: 인간이 아닌 영장류에서 하나 이상의 예시적인 mRNA로부터 생체내 발현된 CLDN-18.2-표적화 항체 물질의 특징 규명
계통발생학적으로 및 생리학적으로 인간과 매우 가까운 유기체에서 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 생활성을 확인하기 위해, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 0.1 mg/kg, 0.4 mg/kg 및 1.6 mg/kg로 IV 투여한 후 24시간 및 168시간 경과시 샘플을 채취하여, 인간이 아닌 영장류 (NHP), 예를 들어 시노몰구스 원숭이의 CLDN-18.2-표적화 RiboMab-함유 혈청으로, ADCC 실험을 수행하였다. ADCC 분석은 실시예 2에 기술된 바와 같이 수행하였다. NHP에서 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 높은 용량-의존적인 표적 세포용해성을 나타내었다 (도 5, 패널 A). 표적-음성 유방 암 세포주 MDA-MB-231에서는 낮은 작동자, 공여체-의존적인 비-특이적인 세포용해가 관찰되었다 (도 5, 패널 B). 가장 높은 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도 (232 ㎍/mL)를 사용한 14번 원숭이에서, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 3차 주사한 후 48시간 경과시 혈청을 수집하고, 10-포인트 연속 희석으로 루시퍼라제-기반의 ADCC 분석을 수행하였다. 정제한 IMAB362를 분석 기준 단백질로 사용하였다. NHP에 의해 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 NUG-C4 종양 세포에 대해 우수한 특이적인 세포용해를 매개하였으며 (도 5, 패널 C), EC50는 10 ng/mL (66 pM)이었다. 이들 결과는, NHP에 의해 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab가 강력하고 표적 특이적인 ADCC를 매개할 수 있음을, 보여준다.
실시예 4: 정맥내 투여된 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 생체내 종양 증식 저해를 매개한다
정맥내 (IV) 투여된 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 항종양 활성을 CLDN-18.2+ 인간 위 암종 이종이식 종양 모델에서 확인하기 위해, Hsd:무흉선 누드-Foxn1 nu/nu 마우스에 5x106- CLDN-18.2+ NCI-N87 형질감염주를 피하 접종하였다. 종양 (평균 ≥ 30mm3)이 확립된 마우스에 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 3 ㎍, 10 ㎍ 및 30 ㎍, 루시퍼라제를 암호화하는 대조군 mRNA 30 ㎍, 식염수 또는 기준 단백질 IMAB362 800 ㎍을 검사일 15일, 22일, 29일, 36일, 43일 및 50일에 단일 IV 볼루스 주사로 6회 투여하였다. 30 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 3차 투여 사이클로 투여한 후 대조군 대비 유의한 종양 증식 저해가 관찰되었다. 30 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 항종양 활성은 기준 단백질 IMAB362 800 ㎍에서 달성되는 종양 증식 지연과 비슷하였다 (도 6).
실시예 5: CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물에 대한 안전성 약리학 평가
CNS 및 호흡기 안정성에 대한 GLP 준수 평가를 마우스에서 반복 투여 후 수행하였다. 반복 투여 후 인간이 아닌 영장류 (NHP)의 혈압에 대한 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 잠재적인 효과를 non-GLP PK/관용성 실험으로 조사하였다. 모든 실험은 ICH S7A-준수 방식으로 설계하였다 (표 4).
표 4: 예시적인 안전성 약리학 실험에 대한 개괄
실험 유형 | 동물 종 | 검사 용량 (mg/kg) | 측정한 매개변수 |
호흡기 안전성 | Balb/c 마우스/ | 1: 식염수 2: 빈 지질 나노입자 (LNP) 3: 1.5 4: 5 |
호흡수 1회 호흡량 분당 호흡량 최대 흡기 유속 (PIF) 최대 호기 유속 (PEF) 흡기 시간 (Ti) 호기 시간 (Te) |
신경 안전성 | Balb/c 마우스/ | 1: 식염수 2: 빈 LNP 3: 1.5 4: 5 |
관찰 스크리닝 (인지, 기분, 운동 활동, CNS 흥분, 자세, 근긴장도, 반사, 자율성) 뒷다리 벌림 기능 시험 (악력, 운동 활동) |
심혈관 안전성 | 시노몰구스 원숭이 | 1: 식염수 2: 빈 LNP 3: 0.1 4: 0.4 5: 1.6 |
수축기 혈압 확장기 혈압 |
중추 신경계 및 호흡기계 안전성 . 암컷 및 수컷 마우스에서 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 정맥내 볼루스로 반복 주사한 효과를 조사하기 위해 GLP-준수 아만성 독성 시험을 수행하였다. 실험에는 아래에 나타낸 바와 같이 (표 5) 새틀라이트 동물의 안전성 약리학 평가를 포함하였다.
표 5: GLP 아만성 반복 투여 독성 실험에서 신경계 및 호흡기계 안전성 평가
검사 항목 | 예시적인 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 | |
검사 시스템 | Balb/c 마우스 | |
투여 | 1일, 8일, 15일 및 22일에 투여한 후 2주간의 회복 기간 | |
군의 크기 | 4/성별/군 1 - 4 (SA2 새틀라이트 동물) | |
경로 | 꼬리 정맥으로 천천히 정맥내 볼루스 | |
투여 군 용량 수준a/동물 |
1. 대조군 (식염수) 2. 대조군 (빈 LNP) 3. 예시적인 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 30 ㎍ (약 1.5 mg/kg에 해함) 4. 예시적인 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 100 ㎍ (약 5 mg/kg에 해당) |
|
시점 [호흡기 안전성] | 검사 일 | 투여 관련 전신 혈량측정 시점 |
8 | - 투여전 | |
9 | - 2차 투여 후 4-8시간 | |
22 | - 투여 전 - 4차 투여 후 4-8시간 |
|
23 | - 4차 투여 후 24-28시간 | |
시점 [신경계 안전성] | 검사 일 | 투여 관련 신경학적 스크리닝 시점 |
1 | - 1차 투여 전 | |
3 | - 1차 투여 후 48시간 | |
22 | - 4차 투여 전 | |
24 | - 4차 투여 후 48시간 | |
a 총 mRNA 용량으로 표시한 용량 수준 |
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 호흡기 안전성을 조사하기 위해, 투여 전, 2차 및 4차 주사 후 4시간 및 24시간 경과시 혈량측정법을 실시하였다. 호흡수, 1회 호흡량, 분당 호흡량, 최대 흡기 유속, 최대 호기 유속, 흡기 시간, 호기 시간 및 기도 저항 지수를, 검사물을 투여한 후 측정하기 위해, (투여 전 및 투여 후) 10분부터 50분까지 10분 간격으로, 그리고 (투여 후) 1시간부터 4시간까지 30분 간격으로 조사하여, 각 기간의 평균 값을 구하였다.
동물은 1차 및 4차 주사하기 전 및 주사한 후 48시간 경과시 신경학적 검사를 수행하였다. 인지, 감정, 운동 활동, CNS 흥분, 자세, 근긴장, 반사 및 자율 체온, 뒷다리 벌림, 악력 및 운동 활동을 검사하였다.
하나의 매개변수에서 통계학적으로 유의한 변화 (p ≤ 0.05)가 관찰되었으며: 100 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물/동물로 투여받은 수컷 마우스는 1차 투여 후 48시간 경과시 악력이 감소하였으며 (p ≤ 0.01); 100 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물/동물로 투여받은 암컷 마우스는 1차 투여 후 악력이 마찬가지로 감소하였다 (p ≤ 0.05).
위 안전성 . 이론으로 결부시키고자 하는 것은 아니지만, CLDN-18.2 표적은 인간 및 뮤라인에서 건강한 위 조직에서 발현된다 (Tureci et al. 2011). 마우스에서 GLP-준수 반복-투여 독성 실험에 위에 대한 육안 및 조직병리학적 평가를 포함하였다 (실시예 7 참조).
심혈관 안전성. PK/관용성 검사에서, 동물에 1차 투여하기 전 및 3차 투여한 후 24시간 경과 시점에 혈압을 측정하였다 (실험 설계는 실시예 7에 기술됨).
검사물 처리 동물에서 말초 동맥 수축기 및 확장기 혈압뿐 아니라 수득되는 평균 혈압은 정상 생리학적 한계 이내였다.
실시예 6: CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물에 대한 약동학 평가
지질 나노입자 (LNP) 제형의 RNA에 대한 약동학적 평가는 2 단계로 나눌 수 있다: 정맥내 주사 후, LNP는 순환계에서 전신으로 퍼지고, RNA가 의도한 표적 장기, 즉 간으로 전달된다. 두번째로, 간 세포는 LNP 제형에 의해 형질감염되어 RNA로 번역된 후 암호화된 단백질로 분비된다.
CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 약동학 프로파일을 1회 투여한 후 3종 [마우스 (도 7) 및 랫 (도 8)] 및 반복 투여한 [마우스 (도 9) 및 인간이 아닌 영장류 (도 10)]에서 규명하였다.
표 6: 예시적인 약동학 실험들에 대한 개괄
종 | 타입 | 결과 |
마우스 | 혈중 카이네틱스 (1회 투여) | CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 용량-의존적인 방식으로 발현되며, 투여 후 24시간 경과시 최고 용량에서 Cmax는 약 450 ㎍/mL이다. CLDN-18.2-표적화 항체 물질은 투여 후 최대 504시간까지 검출가능하였다. |
랫 | 혈중 카이네틱스 (1회 투여) | 마우스와 마찬가지로, 최고 용량에서 피크 농도 약 450 ㎍/mL에 도달하였으며, CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 모든 용량 군들에서 투여 후 336시간까지 실험을 종료할때까지 검출가능하였다 |
마우스 | 혈중 카이네틱스 (반복 투여) | 마우스에서 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 매주 투여시 지속적인 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도가 달성되었다. |
인간이 아닌 영장류 (NHP) | 혈중 카이네틱스 (반복 투여) | CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 매주 투여 후 NHP에서 지속적으로 발현된다 (마지막 투여 후 최대 35일간 검출됨, 48-72시간 후 Cmax). |
마우스 | LNP 장기 표적화 | LNP에 캡슐화된 mRNA는 간으로 표적화되어 주로 간에서 발현되며, 지속 기간은 최대 72시간이다. |
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물로부터 번역된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 PK를 평가하기 위해, Balb/c JRj 마우스에서 1회 투여 PK 실험을 수행하였다. 처리 군에는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 1 ㎍ (~0.040 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg)으로, 내부 대조군으로 IMAB362 기준 단백질 40 ㎍ (~1.60 mg/kg)을 IV 볼루스로 주사하였다. 투여 후 6시간, 24시간, 96시간, 168시간, 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈장 샘플을 채취하고, ELISA에 의해 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도를 평가하였다. CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 농도-의존적인 발현 향상을 나타내었으며, 투여 후 24시간에 최고 수준에 도달한 후 점차 감소하였다. 최고 용량의 경우 최고 수준 대략 450 ㎍/mL에 도달하였으며, CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도는 투여 후 최대 504시간까지 검출가능하였다 (도 7). 그 결과, CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 1회 투여 후 마우스에서 용량-의존적인 방식으로 발현되는 것으로, 확인된다.
큰 설치류 유기체에서 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물로부터 번역된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 PK를 평가하기 위해, 1회 투여 실험을 RjHan:Wister 랫에서 수행하였다. 처리 군에는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 0.04 mg/kg, 0.10 mg/kg, 0.40 mg/kg 또는 1.20 mg/kg으로, IMAB362 기준 단백질을 3.60 mg/kg으로 IV 볼루스 투여로 제공하였다. 투여 후 2시간, 6시간, 8시간, 10시간, 22시간, 24시간, 27시간, 30시간, 48시간, 72시간, 96시간, 168시간, 216시간, 264시간 및 336시간 경과 시점에 혈장 샘플을 채취하고, ELISA에 의해 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도를 평가하였다. CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 농도-의존적인 발현 양상을 나타내었으며, 투여 후 24시간에 최고 수준에 도달한 후 점차 감소하였다. 마우스 (도 7)와 비슷하게, 최고 용량에서 최대 농도 대략 450 ㎍/mL에 도달하였으며, CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도는 모든 용량 군들에서 투여 후 336시간까지 실험을 종료할 때까지 검출가능하였다 (도 8). 이들 결과는, 랫에서 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 발현 수준이 마우스와 비슷할 수 있다는 것을, 보여준다.
CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도가 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 매주 투여에 의해 유지되는지를 조사하기 위해, Balb/cJRj 마우스에서 반복 투여 PK 실험을 수행하였다. 처리 군에는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 1 ㎍ (~0.040 mg/kg), 3 ㎍ (~0.10 mg/kg), 10 ㎍ (~0.40 mg/kg) 또는 30 ㎍ (~1.20 mg/kg)으로, 내부 대조군으로 IMAB362 기준 단백질 80 ㎍ (~3.20 mg/kg)을 IV 볼루스로 5회 매주 주사하였다. 투여 전 24시간 및 투여 후 24시간 경과시 (Cmax) 각각 혈장 샘플을 수집하여, ELISA에 의해 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도를 평가하였다. CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 반복 투여 결과, CLDN-18.2-표적화 RiboMab 수준이 지속적으로 유지되었으며, 최대 농도는 ~1000 ㎍/mL (30 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물)이었으며, 번역 감소는 없었다 (도 9). 이들 결과는, 지속적인 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 농도가 마우스에서 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 매주 투여에 의해 달성될 수 있음을, 보여준다.
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 반복 투여 PK 실험을 계통발생학적으로 생리학적으로 인간과 매우 비슷한 유기체로서 NHP에서 수행하였다 (예시적인 실험 설계에 대한 설명은 표 7 참조).
표 7: NHP에서 PK/관용성 실험에 대한 예시적인 실험 설계
검사 항목 | CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 |
검사 시스템 | 마카카 파시쿨라리스 (M. fascicularis) |
투여 | 1일, 8일 및 15일에 투여한 후 3주간의 회복 기간 |
군의 크기 | 암컷 3마리/군 |
경로 | 정맥내 볼루스 |
투여 군 -
용량 수준 a /동물 |
대조군 (식염수) - 1.6 mL/kg 대조군 (빈 LNP) - 1.6 mL/kg RB_RMAB01 0.1 mg/kg - 0.1 mL/kg RB_RMAB01 0.4 mg/kg - 0.4 mL/kg RB_RMAB01 1.6 mg/kg - 1.6 mL/kg |
안전성 판독 | 사망률, 임상 관찰, 케이지 사이드 관찰, 체중, 사료 섭취 및 국소 관용성 안과 (투여 전, 3차 투여 후 +24h 및 3주 회복 기간 종료시) 혈액, 응고 및 임상 화학 (투여 전, 3차 투여 후 +24h 및 3주 회복 기간 종료시) 사이토카인 IFNα, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-8 IL-10, IL-12p70 및 TNFα (투여 전, 1차 및 3차 투여 후 +6h, +24h 및 +48h) 뇨 검사 (투여 전, 마지막 투여 후 +48 h 및 3주 회복 기간 종료시) |
PK 샘플링 | 1차 투여 후 +6h, +24h, +48h, +72h, +96h 및 +7d (2차 투여 전) 2차 투여 후 +48h, +72h 및 +7d (3차 투여 전) 3차 투여 후 +6h, +24h, +48h, +72h, +96h, +7d, +11d, +14d 및 +21d |
시기 [심혈관 안전성] | 1차 투여 전, 3차 투여 후 +24h 및 3주 관찰 기간 종료시 |
a 총 mRNA 용량으로 표시한 용량 수준 |
처리 군에는 매주 간격으로 0.1 mg/kg, 0.4 mg/kg 또는 1.6 mg/kg으로 3회 IV 볼루스 주사하였다. 대조군으로서 식염수 또는 빈 LNP를 마찬가지로 투여하였다. 1차 및 3차 투여 후 6시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간 및 168시간 경과 시점, 2차 투여 후 48시간, 72시간 및 168시간 경과 시점, 그리고 3차 투여 후 264시간, 336시간 및 504시간 경과 시점에 혈청 샘플을 수집하였다. CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 농도를 ELISA에 의해 분석하였다. CLDN-18.2-표적화 RiboMab는 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 용량-의존적인 발현 양상을 나타내었으며, 투여 후 48-72시간 사이에 최고 수준에 도달한 후 점차 감소하였다. CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 3차 투여한 후 48-72시간에 최고 용량의 경우에 최대 혈청 농도 231.7 ㎍/mL에 도달하였으며, 1차 투여 후 840시간까지 실험 종료시까지 CLDN-18.2-표적화 RiboMab가 검출가능하였다 (도 10). 이들 결과는, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 매주 투여가 NHP에서 지속적인 CLDN-18.2-표적화 RiboMab 발현을 달성할 수 있음을, 보여준다.
분포: CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 생체내 분포를 1회 IV 주사 후 마우스에서 조사하였다. 뮤라인 조직에서 메신저 RNA 및 지질 나노입자 (LNP)를 디지털 액적 PCR (mRNA) 또는 액체 신틸레이션 분광측정 (방사선 표지된 LNP) 각각으로 정량하였다. 루시퍼라제-암호화 mRNA를 캡슐화한 LNP의 장기 표적화 및 발현을 생발광 이미징으로 조사하였다.
mRNA 분포: Balb/c 마우스에 100 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물/동물로 1회 IV 투여하고 (3마리/성별/시점), 투여 후 0.083시간 (5분), 0.5시간, 6시간, 24시간, 72시간 및 168시간 경과 시점에 혈액과 조직 (비장, 폐, 간, 신장, 심장 및 뇌)으로부터 샘플을 채취하였다.
표 8: mRNA 생체내 분포 실험에 대한 설계 예
군 번호 | 검사 항목 |
용량
a
(mg/kg) |
동물 수 | 시점 | |
M | F | [h] | |||
1 | PBS | 0 | 4 | 4 | N/A |
2 | RB_RMAB01 | 5 | 21 | 21 | 0.083 [5분], 0.5, 6, 24, 72, 168 |
조직 | 혈액, 비장, 간, 신장, 심장, 흉선, 폐, 뇌 | ||||
a 전체 mRNA의 양으로 나타낸 용량 수준 |
LNP 분포: 지질 나노입자 (LNP)의 생체내 분포를 지질 나노입자 (LNP) 제형의 반딧불이 루시퍼라제를 암호화하는 변형된 mRNA를 이용해 조사하여, 생체내 번역된 mRNA의 간 표적성 및 카이네틱스를 분석하였다. IV 투여 후, 루시퍼라제 단백질은 시간-의존적인 번역을 보였으며, 생발광 신호는 주로 간에 위치하였다 (도 11). 이들 결과는, mRNA를 캡슐화한 LNP가 간으로 표적화되어 이를 발현할 수 있음을, 보여준다.
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 LNP의 조직 분포 프로파일을 1 mg/kg으로 1회 IV 볼루스 주사한 후 CD-1 마우스에서 조사하였다 (4마리/성별/시점). 분석에 [3H]-CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 이용하였으며, 입자에 비-교환성, 비-대사성 LNP 마커, [3H]-콜레스테릴 헥사데실 에테르 ([3H]-CHE)를 충진하였다. 예시적인 실험 설계를 아래 표 9에 나타낸다.
표 9: LNP 생체내 분포 실험에 대한 실험 설계 예
군 번호 | 검사 항목 |
용량
a
(mg/kg) |
동물 수 | 시기 | |
M | F | [h] | |||
1 | PBS | 0 | 4 | 4 | N/A |
2 | [3H]-CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 | 1 | 32 | 32 | 0.083, 0.25 b , 0.5, 1 b , 2, 4 b , 8, 24 b |
조직 | 혈액, 혈장, 비장, 췌장, 간, 신장, 부신, 난소/고환, 소장, 대장, 림프절 [상완/서혜부/장간막], 심장, 흉선, 폐, 근육, 뇌 [뇌간 제외], 골수 | ||||
a 전체 mRNA의 양으로 나타낸 용량 수준 b 진하게 표시한 시기에는 조직을 혈액 및 혈장과 함께 채취함 |
마우스를 안락사시키고, 혈액 및 혈장을 투여 후 0.083시간 (5분), 0.25시간, 0.5시간, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간 및 24시간에 수집하였다. 조직은 투여 후 0.25시간, 1시간, 4시간 및 24시간 경과시에만 샘플 채취하였다. 모든 샘플을 대상으로 표준 액체 신틸레이션 카운팅 (LSC)에 의해 방사성을 측정하였으며, 수득한 값을 이용해 전체 및 상대적인 지질 농도를 계산하였다.
[3H]-CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 마우스에서 혈액 및 혈장에서 2-단계 카이네틱스를 나타내었으며, 혈액/혈장 농도가 처음에 빠르게 감소한 다음 느리게 제거되는 단계로 진행되었다. 조직으로의 [3H]-CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 분포는 빠르게 이루어졌으며, 투여 후 0.5-2시간까지 모든 조직들에서 최고 수준에 도달하였다. [3H]- CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물이 분포되는 주요 조직/장기는 간 및 비장이었으며 (주사 후 4시간 경과시, 주사한 용량의 ~70-74% 및 ~0.8-1.2%가 각각 간 및 비장에 존재함), 기타 조직들에서는 최소한의 분포가 관찰되었다. 다양한 조직들에서 계산한 [3H]- CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 총 지질 농도 (즉, 투여한 지질 4종 모두) 및 [3H]- CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 주사 용량에 대한 % 계산값을 표 10에 나타낸다.
표 10: CD-1 마우스에서 IV 볼루스 주사 후 4시간 경과 시점에, 조직내 (CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물로부터 유래한) 총 지질 수준
조직 | CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 | |||
㎍ 지질/g 조직 a | 주사 용량의 % | |||
암컷 | 수컷 | 암컷 | 수컷 | |
간 | 355.19 | 282.43 | 70.12 | 74.12 |
비장 | 77.08 | 61.67 | 1.15 | 0.84 |
혈장 | 28.54 | 26.24 | 4.18 | 4.06 |
부신 | 17.64 | 6.65 | 0.03 | 0.02 |
림프절 | 7.66 | 5.24 | 0.06 | 0.04 |
흉선 | 4.80 | 3.86 | 0.07 | 0.04 |
소장 | 4.23 | 3.72 | 0.65 | 0.53 |
폐 | 3.81 | 3.58 | 0.10 | 0.10 |
심장 | 2.90 | 2.71 | 0.05 | 0.05 |
소장 | 1.68 | 2.36 | 0.06 | 0.07 |
췌장 | 3.51 | 1.91 | 0.07 | 0.04 |
난소/고환 | 5.88 | 1.53 | 0.03 | 0.04 |
신장 | 2.40 | 1.52 | 0.12 | 0.10 |
근육 | 0.55 | 0.69 | 0.03 | 0.05 |
뇌 | 0.04 | 0.03 | 0.00 | 0.00 |
골수 | NC | NC | 0.09d | 0.06d |
a 주사 후 4시간 경과 시점에 수컷 마우스에서 순위-순서 평균 농도 (최고에서 최저순)에 따라 열거한 조직 b NC, 계산 안함; 전체 장기 무게를 이용할 수 없음 c BLQ, 정량화 한계 미만 d 양쪽 대퇴골 기준 |
대사 및 배출: 슈도우리딘 변형된 mRNA 등의 메신저 RNA는 일반적으로 세포 RNase에 의한 분해에 민감하며, 핵산 대사를 거친다. 뉴클레오티드 대사는 세포 안에서 계속적으로 이루어지며, 뉴클레오시드는 부산물로 분해되어 배출되거나 또는 뉴클레오티드 합성에 재이용된다.
본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물에 대한 일부 구현예에서, 이러한 조성물은 복수의 지질을 포함하며, 이중 일부는 자연 생성된 것 (예를 들어, 일부 구현예에서, 콜레스테롤 및 DSPC와 같은 중성 지질)일 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면 본 발명의 내용을 숙지하여, 자연 생성 지질의 대사 및 배출이 내인성 지질과 유사할 수 있음을 예상할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자라면 본 발명의 내용을 숙지하여, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 내 기타 지질 (예를 들어, 접합 지질 및 양이온성 지질)의 대사 및 배출을 당해 기술 분야에 공지된 방법을 이용해 특정할 수 있음을 알 것이다.
일부 구현예에서, 발현된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab의 구조는 IgG1 항체를 기반으로 한다. 일부 이러한 구현예에서, 이의 대사는 내인성 IgG1 분자와 비슷할 수 있다. 예시적인 대사로는 소형 펩타이드 및 아미노산 분해를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.
실시예 7: CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 독성 평가
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 독성 평가는 인간 혈액 성분을 이용한 시험관내 실험 및 마우스 및 시노몰구스 원숭이에서의 생체내 실험을 포함할 수 있다. 인간 혈액과 약물 제품의 혈액 적합성을 시험관내에서 조사할 수 있으며, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 (RNA 및 LNP)에 의해, 뿐만 아니라 번역된 CLDN-18.2-표적화 RiboMab (단백질)에 의해 매개되는 독성은 선택한 생체내 모델에서 검출할 수 있다. 비-임상 실험에서 평가한 특정 특징들을 요약하여 아래 표 11에 나타낸다.
표 11: CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 및 암호화된 항체의 예시적인 비-임상 안전성 및 독성 실험
항목 | 종 | 유형 | 결과/관찰 결과 | 참조 |
면역독성 | 인간 (혈청) - 시험관내 | 비-GLP 보체 활성화 | C3a, C4a, C5a 및 말단 보체 복합체 SC5b-9의 정량화를 통한 표준화된 인간 보체의 활성화는 관찰되지 않음 | 실시예 7 |
면역독성 | 인간 (전혈) - 시험관내 | 비-GLP 사이토카인 분비 | 사이토카인 분비는 약물 제품을 인간 전혈과 시험관내 인큐베이션하였을 때 측정가능하지 않음 | 실시예 7 |
독성/PK | 시노몰구스- 생체내 | 비-GLP PK/관용성 실험 | 혈액 파라미터 (혈액, 임상 화학)에서 검사물 매개 변화는 없으며, 약물 제품의 반복 투여시 사이토카인은 관찰되지 않음 | 실시예 7 |
안전성 약리학 | 마우스 - 생체내 | GLP 단일-투여 CNS 안전성 실험 | 약물 제품 적용 후 신경약리학적 매개변수 40종 분석 | 실시예 5 |
안전성 약리학 | 마우스 - 생체내 | GLP 단일-투여 호흡 안전성 실험 | 전신 혈량 측정을 이용한 약물 제품 적용 후 호흡기 매개변수 8종 측정 | 실시예 5 |
안전성 약리학 | 시노몰구스- 생체내 | Non-GLP PK/관용성 실험 | 약물 제훔의 혈압에 대한 효과는 반복 투여 후 관찰되지 않음 | 실시예 5 |
독성 |
마우스
- 생체내 |
비-GLP 1회 투여 독성 실험 | 약물 제품 1회 적용 후 독성 평가 (최종 보고서 보류) | 실시예 7 |
독성 | 마우스 - 생체내 | GLP 3주 반복 투여 독성 실험 | 약물 제품 매주 적용에 대한 독성 평가 | 실시예 7 |
일부 구현예에서, 항체 (CLDN-18.2-표적화 RiboMab) 매개 독성 평가에 적합한 종은 마우스 및 시노몰구스 원숭이인데, 그 이유는 이들 종에서 CLDN-18.2의 발현 패턴이 동일하고 단백질 서열이 고도로 보존되어 있기 때문이다 (Tureci et al. 2011).
단일 투여 독성. 단일 투여 독성 실험을 CD-1 암컷 및 수컷 마우스에서 수행하였다: i) CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 잠재적인 독성 규명, ii) CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물과 대응되는 대조군 (예를 들어, 빈 지질 나노입자)의 독성 비교, 및 iii) 4주 관찰 기간 (28일 종료) 후 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 가역성, 진행 및/또는 잠재적인 지연 효과 평가.
마우스에 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 (총 mRNA 용량 수준 1, 2 또는 4 mg/kg) 또는 대조군 (예를 들어, 빈 나노입자 또는 식염수 대조군)을 1일에 IV 투여에 의해 단일 IV 용량으로 투여하였다. 동물을 3일 (동물 대부분) 및 29일 (회복/지연 관찰)에 안락사시켰다. 실험 엔드포인트는 사망률, 임상 관찰 결과, 체중 변화, 임상 화학, 부검 관찰, 장기 무게 및 조직병리학 (간, 비장 및 위)을 포함하였다.
1, 2 및 4 mg/kg의 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 또는 빈 LNP의 단일 IV 용량은 일반적으로 CD-1 마우스 암컷 및 수컷에서 충분히 용인되었다. 28일 관찰 기간 동안 사망은 관찰되지 않았다. 3일에 간 매개변수 및 비장 무게 증가와 관련하여 미미한 관찰 결과가 확인되었다. 간 및 비장에서 현미경 검경에서 관찰된 미미한 결과는 불리한 것으로 간주되지 않았다. 모든 관찰 결과들은 28일에 회복 기간 종료 후 해소되었다.
반복 투여 독성. CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 매주 정맥내 볼루스 투여한 후 2주 회복 기간을 거쳐, Balb/c 마우스에서 21일 GLP-준수 반복 투여 독성 실험을 수행하였다 (예시적인 실험 설계는 표 12 참조). 실험 데이터는, 비-제한적으로, 불내성의 임상 신호 (예, 안검하수, 입모, 운동성 감소 및/또는 냉감), 사망률, 체중 및 사료 섭취, 국소 허용성, 혈액, 임상 화학 (예, 글로불린, 알부민, 콜레스테롤, 크레아티닌, 총 단백질, 혈액 글루코스, 알칼라인 포스파타제 (aP), 락테이트 데하이드로게나제 (LDH), 및 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (ALAP), 및 글루타메이트 데하이드로게나제 (GLDH) 혈액 수준), 뇨 분석, 안과 및 청각 시스템, 육안 사후 검사, 장기 무게, 골수, 조직병리학 및 사이토카인 (예를 들어, IL-6, TNF-α, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL-2, IL-10 및/또는 IL-12p70)을 포함한다.
표 12: GLP-준수 반복 투여 독성 실험에 대한 설계 예
검사 항목 | CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물 |
검사 시스템 | Balb/c 마우스 |
투여 | 1일, 8일, 15일 및 22일에 투여한 후 2주간의 회복 기간 |
경로 | 꼬리 정맥으로 천천히 정맥내 볼루스 |
투여 군 용량 수준/동물 |
1.
대조군(식염수) 2. 대조군 (빈 LNP) 3. RB_RMAB01 30 ㎍ (약 1.5 mg/kg과 등가) 4. RB_RMAB01 100 ㎍ (약 5 mg/kg과 등가) |
새틀라이트 군 | SA1: 사이클린 및 용량 노출 샘플링 SA2: 안전성 약리학 평가 (호흡기 및 신경 안전성) |
군의 크기 | 군 1-4:
10 + 5마리 회복/성별/군 SA1: 9마리/성별/군 1 - 4 SA2: 4마리/성별/군 1 - 4 |
면역독성: 약물 제품 매개 보체 활성화 및 사이토카인 방출을 각각 검사해, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 혈액 적합성을 인간 혈청 및 혈액에서 시험관내에서 확인하였다. 아울러, 생체내 면역독성을 시노몰구스 원숭이에서 약동학 실험으로, 그리고 마우스에서 반복 투여 독성 실험의 일부로서 조사하였다. 모든 실험은 ICH S8 지침 (Immunotoxicity studies for human pharmaceuticals)에 따라 설계하였다.
독성 실험의 예비 결과, IL-6 및 TNF-α는 빈 LNP 대조군 및 투여 군 (30 및 100 ㎍ CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물/동물)에서 투여 후 6시간에 일시적으로 증가하였고, IFN-α 및 IFN-γ는 양쪽 투여 군에서 일시적으로 상승하였다. 혈장 수준은 투여 후 48시간까지 베이스라인으로 회복되었다. 어느 군에서도 IL-1β, IL-2, IL-10 또는 IL-12p70의 상승은 관찰되지 않았다.
실시예 6에 기술한 바와 같이 시노몰구스 원숭이에서의 PK/관용성 실험에서, 어느 군에서도 사이토카인 상승은 관찰되지 않았다.
인간 혈청의 시험관내 보체 활성화 . CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물이 인간 보체를 시험관내에서 활성화할 가능성을, 인간에 투여되는 비슷한 지질 나노입자 제품 (예를 들어, siRNA 함유)의 독성 관련 용량에서 혈장 Cmax 수준에 기반하여 선정한 약물 제품 농도를 정상 인간 혈청과 인큐베이션하여, 조사하였다 (Fitzgerald et al. 2014; Coelho et al. 2013; Tabernero et al. 2013; Patisaran FDA approval 2017). 보체 활성화는 보체 스플릿 산물 C3a, C4a, C5a의 수준을 다중 세포측정 비드 어레이를 이용해, 그리고 말단 보체 복합체 SC5b-9를 효소 면역분석을 이용해 측정함으로써 평가하였다.
CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물을 인간 혈청 보체와 시험관내 인큐베이션한 결과, 음성 대조군과 비교해 보체 스플릿 산물 또는 말단 보체 복합체는 증가되지 않은 반면, 양성 대조군에서는 예상한 활성화가 유도되었다. 요컨대, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 검사 조건에서 인간 보체를 시험관내에서 활성화하지 않는다.
전혈 사이토카인 분비. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 비경구로 투여할 수 있다. 이러한 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물은 혈액 순환 중에 말초혈 단핵 세포 (PBMC)와 접촉할 수 있다. 당해 기술 분야의 당업자는 본 발명의 내용을 숙지하여, 약물 제품과 혈액 성분 간의 상호작용이 사이토카인 분비 유도를 유발할 수 있음을 알 것이다. 이에, 예시적인 CLDN-18.2-표적화 RNA 조성물의 시험관내 관용성을 인간 전혈을 이용해 조사하였다. 예를 들어, 전-염증성 사이토카인 (예를 들어, 비-제한적으로, IFN-α, IFN-γ, IL-1β, IL 2, IL-6, IL-8, IL-12p70, IP-10, 및/또는 TNF-α)의 분비를 인간 혈액에서 예상된 농도를 나타내는 희석 범위에서 인큐베이션한 후 평가하였다. 본 분석에서 검사물-관련 사이토카인 분비 유도는 검출되지 않았으며, 시험관내 관용성을 확인할 수 있었다.
실시예 8: 투여 예 (예를 들어, 용량 증량)
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 CLDN-18.2 양성 암 환자에 단일 요법으로 및/또는 다른 항암 요법과 조합하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 투여는 사이클 1회 이상을 포함한다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 사이클 3-8회 이상으로 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 투여 용법, 특히 단일 요법 투여 용법은 21일 (Q3W) 투여이거나 또는 이를 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 용량 증량을 수행할 수 있다. 일부 이러한 구현예에서, 투여는 아래 표 13에 나타낸 하나 이상의 농도로 수행할 수 있으며; 일부 구현예에서, 용량 증량은 표 13의 하나 이상의 저용량의 투여 후 표 13의 하나 이상의 고용량의 투여를 수반할 수 있다.
표 13: 투여 예
용량 수준 | 용량 1 | 용량 증량 2 |
1 | 0.15 mg/kg | 개시 용량 예 |
2 | 0.30 mg/kg | 100% |
3 | 0.60 mg/kg | 100% |
4 | 1.0 mg/kg | 66.7% |
5 | 1.5 mg/kg | 50% |
6 | 2.0 mg/kg | 33.3% |
7 | 2.5 mg/kg | 25% |
8 | 3.0 mg/kg | 20% |
1 표 13에 제시된 바와 같이, "용량"은 총 RNA 양을 지칭한다. 2 지정된 개시 용량 예에서 시작하여, 바로 위 용량에 대한 표 13에 제시된 용량 증량 |
일부 구현예에서, 추가적인 또는 대안적인 용량 수준을, 예를 들어, 0.2 mg/kg, 0.225 mg/kg, 0.25 mg/kg, 0.35 mg/kg, 0.4 mg/kg, 0.45 mg/kg, 0.5 mg/kg, 0.55 mg/kg, 0.65 mg/kg, 0.7 mg/kg, 0.75 mg/kg, 0.80 mg/kg, 0.85 mg/kg, 0.9 mg/kg, 0.95 mg/kg, 1.25 mg/kg, 1.75 mg/kg, 2.25 mg/kg, 2.75 mg/kg, 3.25 mg/kg, 3.5 mg/kg 및 4 mg/kg에서 용량 수준을 비롯하여, 평가할 수 있다.
치료 효과를 치료 중에, 예를 들어, 6주 (+7일), 24주간 6주 간격 (±7일), 이후 12주 간격 (±7일)으로 영상 평가로 분석할 수 있다.
실시예 9: 특정 암에 대한 치료로 승인된 요법
승인된 요법들은 CLDN-18.2 발현과 관련있는 특정 암에 이용가능하다. 예를 들어, 상피 성장 인자 수용체 (EGFR) 저해제인 에를로티닙은 겜시타빈과 조합하여 국소 진행된, 절제불가한 또는 전이성 췌장암 환자에 대한 제1선 치료로 미국에서 승인된 유일한 표적 요법이다. 에를로티닙과 위약을 비교한 무작위 대조 실험 (RCT) 결과, 전체 생존 (OS) 개선은 중앙값 0.4개월로, 무진행 생존 (PFS) 개선은 중앙값 0.3개월로 확인되었다.
일부 구현예에서, 췌장암 치료용으로 에를로티닙 (예를 들어, 에를로티닙 하이드로클로라이드)의 권고된 매일 용량은 약 109 mg으로, 식사 후 2시간 이내에 1회 이상으로, 겜시타빈과 조합하여 복용한다. 일부 구현예에서, 췌장암 치료용 겜시타빈의 권고 용량은 30분 동안 1000 mg/m2으로, 처음 7주 동안에는 매주 1회로 투여한 다음 1주일 중단한 후 다시 3주간 매주 1회로 투여하는 28일 사이클로 이루어진다.
실시예 10: 이상 사례의 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 약학적 조성물을 투여한 개체에서 잠재적인 이상 사례의 한가지 이상의 지표에 대해 치료 용법의 기간 동안 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 개체에서 한가지 이상의 혈액 독성 (예, 호중구 감소증, 혈소판 감소증 및/또는 빈혈 발생 등) 및/또는 비-혈액 독성 (예, 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT), 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 및/또는 빌리루빈 상승 등)을 모니터링할 수 있다.
실시예 11: 본원에 기술된 단일 가닥 RNA에 대한 평가 및/또는 기준 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 한가지 이상의 평가를 단일 가닥 RNA의 제조 또는 기타 조제 또는 사용시 (예를 들어, 방출 검사로서) 이용할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 단일 가닥 RNA가 허용 기준 (예를 들어, 후속 제형화 및/또는 유통을 위한 출시)을 충족하거나 또는 능가하는지를 확인하기 위해, 정성 관리 매개변수 하나 이상을 평가할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 정성 관리 매개변수로는, 비-제한적으로, RNA 완전성, RNA 농도, 잔류 DNA 주형 및/또는 잔류 dsRNA를 포함할 수 있다. RNA를 정성 평가하는 방법들은 당해 기술 분야에 공지되어 있으며; 예를 들어, 당해 기술 분야의 당업자라면, 일부 구현예에서, 표 14에 언급된 한가지 이상의 분석 검사를 RNA 정성 평가에 이용할 수 있음을 알 것이다.
일부 구현예에서, 단일 가닥 RNA 배치를 표 14에 열거된 특징들에 대해 평가하여, 다음 행위 단계 (들)를 정할 수 있다. 예를 들어, 만일 RNA 정성 평가에서 단일 가닥 RNA 배치가 표 14에 열거된 허용 기준에 충족하거나 또는 능가하는 것으로 확인되면, 단일 가닥 RNA 배치는 하나 이상의 추가적인 단계, 즉 제조 및/또는 제형화 및/또는 유통용으로 지정할 수 있다. 그렇지 않다면, 만일 단일 가닥 RNA 배치가 허용 기준에 부합 또는 능가하지 않는다면, 대안적인 조치를 취할 수 있다 (예를 들어, 배치 폐기).
일부 구현예에서, 표 14에 나타낸 예시적인 평가 결과를 나타내는 단일 가닥 RNA 배치는 하나 이상의 추가적인 단계, 즉 제조 및/또는 제형화 및/또는 유통에 이용할 수 있다.
표 14: 개별 RNA들에 대한 검사 및 사양의 예
매개변수 | 분석 검사 예 | 허용 기준 | 단일 가닥 RNA 배치에 대한 결과 예 |
RNA 온전성 | 모세관 겔 전기영동 | 피크 중 ≥90.0%가 온전한 RNA | 100% |
대조군 (RNA 농도) | UV 흡광 분광광도측정 (Ph. Eur. 2.2.25); A260 nm | 바람직한 농도 (예, 1-2 mg/mL) | 1.72 mg/mL |
잔류 DNA 주형 | 정량적인 PCR | ≤50 ng / mg RNA | 0.09 - 0.68 ng DNA/mg RNA |
잔류 dsRNA | 면역-기반 분석 | ≤100 pg dsRNA/㎍ RNA | ≤100 pg dsRNA/㎍ RNA |
단백질 발현 | 번역된 단백질의 검출 | 준수 | 준수 |
실시예 12: RNA 2종 이상을 함유한 조성물에 대한 평가 및/또는 기준 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 한가지 이상의 평가를 약물 물질의 제조 또는 기타 조제 또는 사용시 (예를 들어, 방출 검사로서) 이용할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 항체의 중쇄를 암호화하는 제1 단일 가닥 RNA 배치와 CLDN-18.2-표적화 항체의 경쇄를 암호화하는 제2 단일 가닥 RNA 배치에 대해, 실시예 11에 기술된 바와 같이 한가지 이상의 특징을 조사한다. 일부 이러한 구현예에서, 표 14에 열거된 허용 기준을 충족하거나 또는 능가하는 제1 ssRNA 배치 및 제2 ssRNA 배치는, 예를 들어, 약 1.5:1 내지 약 1:1.5의 몰 비율로 혼합해, RNA 약물 제품을 제조한다. 일부 구현예에서, 이러한 RNA 약물 제품은, 비-제한적으로, 물리적 외양, RNA 길이, 실체 (RNA로서). 온전성, 서열 및/또는 농도, pH, 오스몰 농도, RNA 비율 (예를 들어, HC RNA : LC RNA 비율), 효력, 박테리아 내독소, 바이오버든 및 이들의 조합 등의, 하나 이상의 정성 관리 매개변수 (예, 출시 및/또는 제조를 위한)에 대해 평가할 수 있다. 이러한 정성 관리 매개변수는 예를 들어 육안 검사, 겔 전기영동 (예를 들어, 아가로스 겔 전기영동, 모세관 겔 전기영동), 효소 분해, 서열분석, UV 흡광 분광광도법, PCR 방법, 박테리아 내독소 검사 (예를 들어, 리물루스 아메보사이트 라이세이트 (limulus amebocyte lysate, LAL) 검사)와 같이, 당해 기술 분야에 공지된 하나 이상의 특징 분석 방법에 의해 평가할 수 있다.
실시예 13: RNA 제품 제형의 예
일부 구현예에서, RNA 제품 제형의 예는, 예를 들어, 정맥내 투여를 위한, 수성 완충제 중의 무균 RNA-지질 나노입자 (RNA-LNP) 분산제이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 이러한 RNA 제품 제형은 약 0.8 내지 약 1.2 mg/mL로, 명목 충진 부피 5.0 mL로 충진할 수 있다. 일부 구현예에서, 각 바이얼은 1회용으로 의도된다. 일부 구현예에서, RNA 제품 제형 (예를 들어, 본원에 기술된 바와 같이)은 -80 내지 -60℃에서 냉동 보관할 수 있다.
일부 구현예에서, 이러한 예시적인 RNA 제품 제형은 CLDN-18.2-표적화 항체의 일부를 각각 암호화하는 2종 이상의 별개의 RNA (예를 들어, CLDN-18.2-표적화 항체의 중쇄를 암호화하는 RNA, 및 CLDN-18.2-표적화 항체의 경쇄를 암호화하는 RNA), 하나 이상의 양이온성 지질, 하나 이상의 접합 지질, 하나 이상의 중성 지질 및 하나 이상의 염을 함유한 수성 완충제를 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 폴리머-접합 지질 (예를 들어, PEG-접합 지질, 예컨대 일부 구현예에서, PEG-접합 지질은 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드이거나 또는 이를 포함함)은 전체 지질의 약 1-2.5 mol%로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 양이온성 지질 (예를 들어, 일부 구현예에서, 양이온성 지질은 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일) bis(2-부틸옥타노에이트)이거나 또는 이를 포함함)은 전체 지질의 약 35-65 mol%로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 중성 지질 (예를 들어, 일부 구현예에서, 중성 지질은 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 및/또는 합성 콜레스테롤이거나 또는 이를 포함함)은 전체 지질의 약 35-65 mol%로 존재할 수 있다. 일부 구현예에서, 예시적인 RNA 제품 제형의 조성물은 표 15에 나타낸 바와 같이 특정될 수 있다.
표 15. 예시적인 RNA 제품 제형에 대한 정량적인 구성
구성성분 | 기능 |
농도
(mg/mL) |
양/단위
(mg/바이얼) |
각각 CLDN-18.2-표적화 항체의 개별 체인을 암호화하는 2종 이상의 RNA를 포함하는 조성물 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물) | 활성 물질 | 1.0 | 5.0 |
양이온성 지질 A[1] | 기능성 액체 | 13.56 | 67.80 |
PEG-접합 지질 A [2] | 기능성 액체 | 1.77 | 8.85 |
DSPC [3] | 구조용 액체 | 3.11 | 15.55 |
콜레스테롤, 합성 | 구조용 액체 | 6.20 | 31.00 |
슈크로스 또는 균등물 | 동결방지제 | 102.69 | 513.45 |
NaCl | 완충제 | 6.00 | 30.00 |
KCl | 완충제 | 0.15 | 0.75 |
Na2HPO4 | 완충제 | 1.08 | 5.40 |
KH2PO4 | 완충제 | 0.18 | 0.90 |
주사용수 | 용매/비히클 | q.s. | 총 부피 5.0 mL가 되도록 첨가 |
[1] 양이온성 지질 A = ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일) bis(2-부틸옥타노에이트) [2] PEG-접합 지질 A = 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드 [3] DSPC = 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 q.s. = 적당량 (충분량) |
실시예 14: 본원에 기술된 RNA/LNP 약물 제품 제형에 대한 지질 부형제의 예
약물 제품의 제조 공정에 사용되는 재료들은 인증 업체로부터 구입하여, 검역, 샘플링, 식별, 검사 및 출시할 수 있다. 부형제에 대한 검사는 유럽/미국 약전에 따라 또는 미리 결정된 사양에 따라 수행한다.
일부 구현예에서, RNA/LNP 약물 제품 제형은 지질 부형제에 대한 추가적인 정보를 제공하는 표 16에 열거된 지질 부형제 4종을 포함한다. 부형제들 모두 GMP-등급의 물질로 구입한다.
표 16: 본원에 기술된 예시적인 RNA/LNP 약물 제품의 지질 부형제
지질 | 분자량 | 화합물 명 및 구조 |
양이온성 지질 A | 724 Da | ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일) bis(2-부틸옥타노에이트) |
PEG-접합 지질 A | 2500 Da | 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드 |
중성 지질: DSPC | 790 Da | 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 |
중성 지질: 콜레스테롤 | 387 Da | 콜레스트-5-en-3β-올 |
양이온성 지질 A: ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일)bis(2-부틸옥타노에이트)
일부 구현예에서, 아미노 지질 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일)bis(2-부틸옥타노에이트)은 본원에 기술된 RNA/LNP 약물 제품 제형의 기능성 양이온성 지질 성분이다. 이는 생체내 생분해, 대사 및 소거를 촉진하도록 설계되었다. 아미노 지질은 포화된 알킬 체인 2개에 에스테르 결합을 통해 연결된 적정가능한 터셔리 아미노 헤드 기를 가지고 있으며, LNP에 병합시 입자 형성, 세포 흡수, 융합성 및/또는 RNA의 엔도솜 방출을 조절하는 뚜렷한 생리화학적 특성을 부여한다. 에스테르 결합은 쉽게 가수분해되어, 빠른 분해 및 신장 경로를 통한 배출을 촉진할 수 있다. 아미노 지질은 겉보기 pKa가 대략 6.25로, pH 5에서 본질적으로 완전히 양으로 하전된 분자가 형성된다. pH 4.0에서 아미노 지질을 함유한 에탄올 지질 혼합물에 RNA 수용액의 투입은 음으로 하전된 RNA 백본과 양으로 하전된 양이온성 지질 간에 정전기적 상호작용을 유발한다. 이러한 정전기적 상호작용은 RNA 약물 물질의 효율적인 캡슐화와 동시에 입자 형성을 유도한다. RNA 캡슐화 후, 제조된 LNP를 둘러싼 매질의 pH를 pH 7.4로 적정하면, LNP의 표면 전하가 중화된다. 다른 모든 변수들을 고정할 경우, 전하-중성 입자는 하전된 입자와 비교해 더 긴 생체내 순환 수명과 우수한 간세포로의 전달을 나타내며, 세망내피 시스템에 의해 빨리 제거된다. 엔도솜 흡수시, 엔도솜의 낮은 pH는 LNP를 융합성이게 만들어, RNA가 표적 세포의 세포질로 방출되게 한다.
PEG-접합 지질 A: 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드
일부 구현예에서, 본원에 기술된 RNA/LNP 약물 제품 제형은 기능성 액체 부형제, 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드를 함유한다. 이 페길화된 지질은 임상 실험에서 안전성이 입증된 다른 임상적으로 승인된 페길화된 지질과 구조적으로 비슷하다. 페길화된 지질의 일차적인 기능은 소수성 지질 층을 차폐하는 보호성 친수성 층을 형성함으로써 입자를 입체 구조적으로 안정화하는 것이다. 아울러, 페길화된 지질은, 입자가 생체내 투여되었을 때, 혈청 단백질과의 결합과 이로 인한 세망내피 시스템에 의한 흡수를 감소시킨다. PEG 지질은 엔도솜 위치화 및 페이로드 전달의 선행 조건인 세포 흡수에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. PEG-지질 앵커의 알킬 체인 길이를 조정함으로써 예측가능한 방식으로 캡슐화된 핵산의 약리학적 특성을 제어할 수 있는 것으로 밝혀져 있다. 일부 구현예에서, RNA의 간 전달을 최적화하기 위해 RNA/LNP 약물 제품 제형에 이러한 페길화된 지질을 선택한다. 일부 구현예에서, 이러한 선택은 또한 입체적인 장벽의 기능을 효과적으로 수행하기 위해 합리적인 용해성 특징 및 이의 분자량에 기초한다. 이러한 페길화된 지질은 생물학적 막에 대해 인지가능한 계면활성 또는 침투성 강화 또는 교란 효과를 나타내지 않는다. 아울러, 이러한 페길화된 지질에서 PEG는 생분해성 아미드 결합으로 다이아실 지질 앵커에 연결되어, 신속한 분해 및/또는 배출을 촉진한다. 바이얼 안에서, 입자는 페길화된 지질의 전체 부속물을 유지한다. 혈액 구획에서는 페길화된 지질이 입자로부터 시간 경과에 따라 해리되고, 세포에 의해 더 쉽게 흡수되는 더욱 융합성인 입자가 드러나게 되며, 궁극적으로 RNA 페이로드가 방출된다.
중성 지질: DSPC 및 콜레스테롤
일부 구현예에서, RNA/LNP 약물 제품 제형은 2종 이상의 중성 지질을 포함한다. 일부 이러한 구현예에서, RNA/LNP 약물 제품 제형은, DSPC 및/또는 콜레스테롤을 함유한 중성 지질을 2종 이상 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이러한 중성 지질 (예를 들어, DSPC 및/또는 콜레스테롤)은 구조 지질로 지칭할 수 있으며, 그 농도는 LNP 입자 크기, 안정성 및 캡슐화를 최적화하도록 선택된다. 예를 들어, DSPC 및 콜레스테롤은 이미 승인된 약물 제품이며, 예를 들어, DSPC는 DaunoXome®, TOBI® Podhaler® 및 Lipo-Dox®에서 부형제로 사용되고 있다. 콜레스테롤은 Marqibo®, Doxil® 및 AmBisome®에서 부형제로 사용되고 있다. Onpattro®는 DSPC와 콜레스테롤 둘다 함유한다.
실시예 15: 본원에 언급된 RNA/LNP 약물 제품 제형에 대한 평가 및/또는 기준에 대한 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 한가지 이상의 평가를 약물 제품의 제조 또는 기타 조제 또는 사용시 (예를 들어, 방출 검사로서) 이용할 수 있다.
일부 구현예에서, RNA/LNP 약물 제품은, 예를 들어, 비-제한적으로, 물리적 외양, 지질 실체 및/또는 내용물, LNP 크기, LNP 다분산성, RNA 캡슐화, RNA 길이, 실체 (RNA로서). 온전성, 서열 및/또는 농도, pH, 오스몰 농도, RNA 비율 (예를 들어, HC RNA : LC RNA 비율), 효력, 박테리아 내독소, 바이오버든, 잔류 유기 용매, 오스몰 농도, pH, 및 이들의 조합 등의, 하나 이상의 정성 관리 매개변수 (예, 출시 및/또는 제조를 위한)를 평가할 수 있다. 이러한 정성 관리 매개변수는 예를 들어 육안 검사, 겔 전기영동 (예를 들어, 아가로스 겔 전기영동, 모세관 겔 전기영동), 효소 분해, 서열분석, UV 흡광 분광광도법, RNA 표지 염색, PCR 방법, 박테리아 내독소 검사 (예를 들어, 리물루스 아메보사이트 라이세이트 (LAL) 검사), 동적 광 산란, 하전된 에어로졸 검출기(들)를 이용한 액체 크로마토그래피, 기체 크로마토그래피, 및/또는 시험관내 번역 시스템 (예를 들어, 토끼 망상 적혈구 세포용해물 번역 시스템 및 35S-메티오닌)와 같이, 당해 기술 분야에 공지된 하나 이상의 특정 분석 방법에 의해 평가할 수 있다.
일부 구현예에서, RNA/LNP 약물 제품 제형 (예를 들어, 본원에 기술된 것)의 배치는 다음 행위 단계(들)를 결정하기 위해 정성 관리 매개변수 (예를 들어, 본원에 기술된 것)를 평가할 수 있다. 예를 들어, 만일 정성 평가에서 배치가 관련 허용 기준에 충족하거나 또는 능가하는 것으로 확인되면, RNA/LNP 약물 제품 제형 (예를 들어, 본원에 기술된 것)의 RNA 배치는 하나 이상의 추가적인 단계, 제조 및/또는 유통용으로 지정할 수 있다. 그렇지 않다면, 만일 RNA 배치가 허용 기준에 부합 또는 능가하지 않는다면, 대안적인 조치를 취할 수 있다 (예를 들어, 배치 폐기).
실시예 16: 포함 기준의 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 조성물 및/또는 방법을 이용한 치료를 위해 CLDN-18.2를 발현하는 종양을 가진 암 환자를 선별할 수 있다. 일부 구현예에서, 암 환자는 췌장암 환자이다. 일부 구현예에서, 암 환자는 담관계암 환자이다.
일부 구현예에서, 아래 질환-특이 포함 기준 하나 이상에 해당하는 암 환자를 본원에 기술된 조성물 및/또는 방법을 이용한 치료 대상으로 선정한다:
1.
포르말린-고정되고 파라핀-포매된 (FFPF) 신생물 조직에 대해 검증된 면역조직화학 분석을 이용한 주요 검사로 분석한 바, 종양 세포의 ≥ 50%가 CLDN-18.2-양성 종양 (종양 조직학에 상관없이)이고, CLDN-18.2 단백질 염색-강도가 ≥ 2+임;
2.
CLDN-18.2 검사용 FFPF 종양 조직 샘플이 입수가능함. 새로운 생검 및 보관된 생체 샘플도 허용된다. 여러 시점에 수득한 보관 조직 샘플을 이용가능할 경우에는 가장 최근 샘플이 바람직하다;
3.
병리학 보고서에서 오리지널 원발성 종양에 대한 조직학적 기록 존재.
a.
전이성이거나 또는 절제 불가하며 임상적인 이점을 부여할 가능성이 있는 이용가능한 표준 치료법이 없는 조직학적으로 검증된 고형 종양, 또는 환자가 이러한 이용가능한 치료법에 대한 후보에 해당하지 않으며; 선택적으로 RECIST 1.1에 따라, 측정가능하거나 또는 평가가능한 질환; 또는
b.
이전에 고식적인 화학요법을 받은 적 없는 조직학적으로 검증된 절제 불가한 국소 진행된 또는 전이성 췌관 선암종; 및 선택적으로 RECIST 1.1에 따른 측정가능하거나 또는 평가가능한 질환; 또는
c.
nab-파클리탁셀 + 겜시타빈 또는 FOLFIRINOX를 이용한 치료에 대해 적절한 고식적인 화학요법을 이전에 받은 적 없는 조직학적으로 검증된 절제 불가한 국소 진행된 또는 전이성 PDAC; 및 선택적으로 RECIST 1.1에 따른 측정가능하거나 또는 평가가능한 질환; 또는
d.
시스플라틴 + 겜시타빈을 이용한 치료에 대해 적절한 고식적인 화학요법을 이전에 받은 적 없는 조직학적으로 검증된 국소 진행된 또는 전이성 BTC; 및 선택적으로 RECIST 1.1에 따른 측정가능하거나 또는 평가가능한 질환
일부 구현예에서, 전술한 질환-특이 포함 기준 하나 이상에 해당하고 아래 기타 포함 기준 하나 이상에 추가적으로 해당하는 암 환자를 본원에 기술된 조성물 및/또는 방법을 이용한 치료 대상으로 선정한다:
1.
≥ 18세.
2.
동부협력종양학회 (ECOG) 성능 상태 0-1.
3.
하기에 의해 결정되는, 스크리닝 시점에 적절한 응고 기능:
a.
국제 표준화 비율 (INR) 또는 프로트롬빈 시간이 정상 상한 (upper limit normal)의 ≤ 1.5 x (치료학적 윈도우 내 수치를 가진 치료학적 항-응고제는 제외).
b.
활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간 (aPTT) ≤ 1.5 x ULN (치료학적 윈도우 내 수치를 가진 치료학적 항-응고제는 제외).
4.
다음과 같이 결정되는, 스크리닝 시점에 적절한 혈액학적 성능:
a.
백혈구 수치 (WBC) ≥ 3 x 109/L.
b.
절대 호중구 수치 (ANC) ≥ 1.5 x 109/L (환자는 과거 7일간 WBC 및 ANC 수준을 달성하기 위해 과립구-콜로니 자극 인자 또는 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자를 이용하지 않을 수 있음).
c.
혈소판 수치 ≥ 100 x 109/L.
d.
헤모글로빈 ≥ 9.0 g/dL (과거 7일간 이러한 수준을 달성하기 위해 수혈하거나 또는 에리트로포이에틴을 이용하지 않을 수 있음).
5.
다음과 같이 결정되는, 스크리닝 시점에 적절한 간 성능:
a.
총 빌리루빈 ≤ 1.5 mg/dL (또는 길버트 증후군 또는 간 전이가 확인된 환자의 경우에는 ≤ 2.0mg/dL).
b.
아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제 (AST) 및 알라닌 아미노트랜스퍼라제 (ALT) ≤ 2.5 x ULN; 간 전이 환자의 경우, ≤ 3 ULN.
6.
다음과 같이 결정되는, 스크리닝 시점에 적절한 신장 성능:
a.
사구체 여과율 ≥ 45 mL/min/1.73 m² - 간이 MDRD (Modification of Diet in Renal Disease) 등식: GFR = 186 Х (S크레아티닌 -1.154) Х (나이-0.203)
(혈청 크레아티닌 수준은 mg/dL로 표시되고; 환자가 여성일 경우 0.742을 곱하고; 환자가 아프리카계-미국인일 경우 1.212를 곱한다)(Levey et al. 1999).
7.
가임 여성 (WOCBP)은 스크리닝 시점에 (β-인간 융모막 고나도트로핀) 혈청 검사/값이 음성이어야 한다. 폐경 후 또는 영구 불인 환자는 생식 능력이 없는 것으로 간주할 수 있다.
8.
가임 여성은 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 마지막으로 받은 후 6개월까지 치료 용법 중에 보조 생식술을 위한 난자 (난세포, 난모세포) 기증에 동의하여야 한다.
9.
WOCBP와 성 생활을 하며 정관 절제술을 받지 않은 남성은, 실험 동안에 그리고 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 치료를 마지막 투여받은 후 6개월간, 차단 피임법의 사용, 예를 들어 살정자제 폼/겔/필름/크림/좌제가 함유된 콘돔 사용 또는 파트너가 살정자제 폼/겔/필름/크림/좌제가 함유된 차단 캡 (페서리 또는 경부/궁 캡) 사용에 동의하여야 한다.
10.
남성은 치료 용법 동안에 그리고 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 치료를 마지막 투여받은 후 6개월간 정자를 기증하지 않을 것에 동의하여야 한다.
실시예 17: 제외 기준의 예
일부 구현예에서, CLDN-18.2를 발현하지 않는 암 환자는 본원에 기술 및/또는 이용되는 조성물 및/또는 방법을 이용할 수 없다.
일부 구현예에서, (i) 최근에 암 치료를 받았거나; (ii) 전신 스테로이드 요법을 동시에 받고 있거나; (iii) 최근에 대수술을 받았거나; (iv) 활성 감염을 앓고 있으며 항-감염 요법으로 치료 중이거나; 및/또는 (v) 뇌 또는 연수막 전이 진행으로 진단된 암 환자는, 본원에 기술 및/또는 이용되는 조성물 및/또는 방법을 이용할 수 없다.
일부 구현예에서, 다음과 같은 암 환자는 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료 (예를 들어, 본원에 기술된 조성물 투여 및/또는 본원에 기술된 치료 방법 수행)가 권장되지 않을 수 있다.
이전 및 병행 요법
1.
시술 중: 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 개시하기 전 2주 또는 5 반감기 (이중 더 긴 기간) 이내에 방사선요법, 화학요법 또는 분자-표적 제제 또는 티로신 키나제 저해제; 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 개시하기 전 3주 이내에 면역요법/단일클론 항체; 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 개시하기 전 6주 이내에 니트로소우레아, 항체-약물 접합체 또는 방사성 동위원소.
2.
전신 (경구 또는 IV) 스테로이드 요법 병행 시술, 기저 질환에 대해 프레드니손 또는 이의 균등물 매일 > 10 mg.
3.
본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 1차 투여하기 전 4주 이내에 대수술.
4.
본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료를 1차 투여하기 전 최대 2주 이내에, 항-감염 요법으로 IV 처리를 요하는 진행 중이거나 또는 활성인 감염.
5.
국립 암 연구소의 AE에 대한 공통 용어 기준 (NCI CTCAE) v.5 ≤ 1 등급으로 회복되지 않는, 임의의 의학적 상태에 대한 임의의 이전 요법 또는 시술의 부작용. 말초 신경병증 등급 ≤ 2는 허용되며; 모든 등급의 탈모도 허용됨에 유념한다.
의학적인 상태
6.
스크리닝 중에 뇌 또는 연수막 전이가 진행 중이거나 또는 새롭게 발생한 증거가 현재 있음. 알려진 뇌 또는 연수막 전이를 가진 환자는 다음과 같을 경우에는 적합할 수 있다:
a.
뇌 또는 연수막 전이에 대한 방사선요법, 수술 또는 정위 수술.
b.
신경계 증상이 없음 (≤ 2 등급의 신경병증은 제외).
c.
고지에 입각한 동의서에 사인하기 전 4주 이내에 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 또는 자기 공명 영상 촬영 (MRI) 스캔에서 뇌 또는 연수막의 안정형 질환.
d.
급성 코르티코스테로이드 요법 또는 스테로이드 테이퍼 (steroid taper)을 받지 않음.
중추 신경계 증상을 가진 환자는 뇌에서 새로운 전이 또는 진이 진행을 배제하기 위해 뇌 CT 스캔 또는 MRI를 수행해야 함에 유념한다. 척수 압박으로 인한 임박 골절이 예상되지 않은 한, 척수 전이는 허용한다.
7.
소아기에 단독 열성 발작을 제외한 기타 발작 병력; 스크리닝하기 전 최대 6개월 이내에 뇌혈관 사례 또는 일과성 허혈성 발작 병력이 있는 경우.
8.
배액을 요하는 삼출액 (흉막, 심장막 또는 복수).
9.
비-제한적으로, 염증성 장 질환, 전신성 홍반성 루푸스, 강직성 척추염, 경피증 또는 다발성 경화증을 비롯한, 활동기 또는 과거 자가면역 질환 병력.
10.
스테로이드 또는 기타 면역억제제 (예를 들어, 아자티오프린, 사이클로스포린 A)를 이용한 면역억제를 요하는 활성 면역 장애, 단, 단독 백반증 (isolated vitiligo), 해소된 소아기 천식 또는 아토피성 피부염, 통제된 부신저하증 또는 뇌하수체기능저하증, 및 그레이브 질환의 병력을 가진 갑상선기능 정상 (euthyroid)인 환자는 제외.
11.
인간 면역결핍 바이러스에 대한 혈청양성 병력이 있으며, CD4+ T-세포 수치가 < 350 세포/㎕이고, 후천성 면역결핍 증후군을 정의하는 기회 감염 병력이 확인된 경우.
12.
활성 항바이러스 요법을 요하는 B형 간염 병력/혈청 양성인 경우 (백신 접종 또는 해소된 자연 감염으로 인한 면역 또는 면역글로불린 요법으로 인한 수동 면역화는 제외). 혈청 양성인 환자는 B형 간염 바이러스의 부하가 정량 한계 미만이어야 한다.
13.
활동성 C형 간염 바이러스 (HCV) 감염; HCV 부하가 정량 한계 미만인 항바이러스 치료를 완료한 환자는 허용한다.
14.
본원에 기술된 CLDN-18.2-표적 치료제의 성분에 대해 과민성이 확인된 경우.
15.
전이 또는 사망 위험성이 매우 낮은 경우를 제외한, 적어도 2년간 관해 상태가 아닌 다른 원발성 악성 종양 (예를 들어, 적절하게 치료된 경부의 상피내암종 (제자리 암종), 기저 또는 편평 세포 피부암, 국소 전립선암 또는 유방상피내암 (제자리 암종)).
기타 동반질병
16.
프리데리시아-보정한 QT 연장 > 480 ms와 같이, 임상적으로 유의한 비정상적인 심전도.
17.
치료 의사의 소견 상, 과도한 의학적 위험을 제기하거나 또는 치료 결과를 해석하는데 방해가 될 수 있는 임의의 병태가 공존하며; 이러한 병태로는 비-제한적으로 하기를 포함함:
a.
항생제/항바이러스제/항진균제 요법을 요하는 진행 중이거나 또는 활성 감염.
b.
울혈성 심부전 (뉴욕 심장 협회 분류 계열 III 또는 IV) 공존.
c.
불안정 협심증 공존.
d.
치료를 요하는 심부정맥 (무증상 심방세동 제외) 공존.
e.
과거 6개월 이내에 급성 관상동맥 증후군.
f.
예를 들어, 중증 폐색성 폐 질환 동반으로 인한, 유의한 폐 질환 (휴식하거나 가벼운 운동시 숨가쁨).
18.
환자가 프로토콜에 따라 치료 받을 능력을 손상시키거나 또는 환자가 고지에 입각한 동의 절차를 준수하고 프로토콜에서 요구하는 방문 및 절차를 이행하는 능력에 부정적으로 영향을 미칠 수 있는, 인지, 심리 또는 사회심리적 장애.
19.
임신 또는 수유.
실시예 18: 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물을 nab-파클리탁셀 및/또는 겜시타빈과 조합하여 사용하는 투여 일정의 예
일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 CLDN-18.2 양성 암 환자에게 다른 항암 요법과 조합하여 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 투여는 사이클 1회 이상을 수반한다. 일부 구현예에서, 본원에 제공된 약학적 조성물은 사이클 적어도 3-8회로 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물의 투여는 상기 표 13에 나타낸 하나 이상의 수준으로 수행할 수 있으며 (실시예 8 참조); 일부 구현예에서, 투여는 표 13에 기술된 하나 이상의 저용량으로 투여한 다음 표 13에 나타낸 하나 이상의 고용량으로 투여하는 것을 수반할 수 있다.
일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 조성물은, nab-파클리탁셀 및 겜시타빈과 조합하여 제공할 경우, 세포독성 요법의 1차 주입 전에 투여할 수 있다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 조성물은 세포독성 요법 (예를 들어, nab-파클리탁셀 및 겜시타빈)의 1차 주입 최소 4시간 전에 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 조성물은 Q3W로 투여할 수 있으며, 화학요법은 지역 지침에 따라 승인된 일정에 따를 것이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, CLDN-18.2-표적화 조성물과 nab-파클리탁셀 및/또는 겜시타빈을 포함하는 조합 치료는 사이클 8회 이상으로, 예를 들어, 일부 구현예에서, 표 17에 나타낸 일정에 따라 투여할 수 있다.
표 17. CLDN-18.2-표적화 조성물과 nab-파클리탁셀 및 겜시타빈의 투여 일정의 예
사이클 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | ||||||||||||||||
일 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 | 1 | 8 | 15 |
CLDN-18.2-표적화 조성물 | x | x | x | x | x | x | x | x | ||||||||||||||||
Nab-파클리탁셀 | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | ||||||
겜시타빈 | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x | x |
표 17에 제시한 바와 같이, CLDN-18.2-표적 치료의 사이클 길이는 21일 (q3w)로 정의되며, CLDN-18.2-표적화 조성물은 각 사이클의 1일차에 제공된다. Nab-파클리탁셀과 겜시타빈은 28일 동안 1일, 8일 및 15일차에 제공된다. 진하게 강조 표시한 "x"는, nab-파클리탁셀/겜시타빈의 1일차 투여가 anti-CLDN18.1 조성물의 투여와 매칭되는 경우를 표시한다.
겜시타빈 단독은 췌장암 치료용으로 사용되고 있다. 예를 들어, 겜시타빈 (예를 들어, Gemzar)의 권장되는 용량은 30분간 정맥내 1000 mg/m2이다. 일부 구현예에서, 권장되는 치료 일정은 다음과 같다:
일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물은, 전술한 바와 같이 췌장암 치료용 단일 요법으로서 겜시타빈 (예를 들어, Gemzar)에 대해 승인된 용량 및 치료 일정에 따라, 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물은, 전술한 바와 같이 췌장암을 치료하기 위한 단일 요법으로서 겜시타빈 (예를 들어, Gemzar)에 대해 승인된 용량 및 치료 일정보다는, 저 용량으로 (예를 들어, 10% 미만, 20% 미만, 30% 미만 또는 그 이상) 및/또는 덜 공격적인 치료 일정 (예를 들어, 10일 간격 또는 2주 간격 등)으로, 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다.
Nab-파클리탁셀은 전이성 췌장 선암종을 치료하기 위해 겜시타빈과 조합하여 사용하는 것으로 알려져 있다. 예를 들어, nab-파클리탁셀 (Abraxane®)의 권장되는 용량은 125 mg/m2로, 28일 사이클 각각에서 1일, 8일 및 15일에 30-40분에 걸쳐 IV 주입으로 투여하고, 겜시타빈은 nab-파클리탁셀을 28일 사이클 각각에서 1일, 8일 및 15일에 투여한 직후에 투여하여야 한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물은, 전술한 바와 같이 nab-파클리탁셀/겜시타빈 조합 치료의 승인된 용량 및 치료 일정에 따라, nab-파클리탁셀 및 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다. 일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물은, 전술한 바와 같이 nab-파클리탁셀/겜시타빈 조합 치료의 승인된 용량 및 치료 일정보다는 저 용량으로 (예를 들어, 10% 미만, 20% 미만, 30% 미만 또는 그 이상) 및/또는 덜 공격적인 치료 일정 (예를 들어, 10일 간격 또는 2주 간격 등)으로, nab-파클리탁셀 및 겜시타빈과 조합하여 투여할 수 있다.
일부 구현예에서, 약물/규제 지침에 따라 해열제 (예를 들어, 아세트아미노펜, 비스테로이드계 항염증제), 항구토제, 프로톤-펌프 저해제 및 항불안제의 사전 및 사후 약물 치료는 허용될 수 있다. 일부 구현예에서, 환자는 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물을 투여하기 전에 적절히 미리 수분을 보충하여야 한다. 일부 구현예에서, 코르티코스테로이드는 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물에 대한 사전 약물로 이용할 수 없다.
실시예 19: 효능 평가 및/또는 모니터링에 대한 예
일부 구현예에서, 본원에 기술된 CLDN-18.2-표적화 조성물을 단일 요법으로 또는 부가적인 항암 요법과 조합하여 투여받는 암 환자는 치료 효과 및/또는 치료 투여량/일정의 조정을 위해 주기적으로 모니터링할 수 있다.
일부 구현예에서, 치료 효과는 컴퓨터 단층촬영술 및/또는 자기 공명 영상 스캔에 의해 분석할 수 있다. 일부 구현예에서, MRI 스캔은 3 테슬라 전신 장치로 수행할 수 있다. 일부 구현예에서, 효능 측정을 위해 병변을 평가하는 경우, 다음과 같은 기준 하나 이상을 적용할 수 있다:
o
완전 반응: 모든 표적 병변이 없어짐. 임의의 병리학적 (표적 또는 비-표적) 림프절은 단축 감소가 < 10 mm이어야 한다.
o
부분 반응: 표적 병변들의 직경의 합이, 베이스라인 직경 합에 대해, 적어도 30% 감소.
o
진행성 질환: 표적 병변들의 직경의 합이, 실험에서 최소 합 (이 수치가 실험에서 가장 최소값일 경우 베이스라인 합으로 함)을 기준으로, 적어도 20% 증가. 상대적인 증가율이 20%인 것 외에도, 합에 대한 절대 증가 수치가 적어도 5 mm이어야 한다. 하나 이상의 신생 병변의 발생 역시 진행 중인 것으로 간주한다.
o
안정형 질환: 실험 중에 최소 직경의 합을 기준으로 하여, PR에 해당하도록 충분히 감소되지도 진행성 질환에 해당하도록 충분히 증가되지도 않는다.
균등물
당해 기술 분야의 당업자라면, 일상적인 실험만으로도 본원에 기술된 본 발명의 구체적인 구현예들에 대한 여러가지 균등물을 인지 또는 확인할 수 있을 것이다. 본 발명은, 당해 기술 분야의 당업자들에게 모순되거나 또는 불일치가 발생할 것으로 자명하지 않은 한, 열거된 청구항 하나 이상에 기술된 하나 이상의 제한, 요소, 조합, 기술 용어 등이 동일한 기본 청구항에 대한 다른 종속항 (또는 적절한 경우 임의의 다른 청구항)에도 인용되는, 모든 변형, 조합 및 순열을 망라하는 것으로 이해되어야 한다. 아울러, 본 발명의 임의 구현예 또는 측면이, 명세서에 구체적으로 배제되는 것으로 언급되는지와 무관하게 청구범위에서 명시적으로 배제될 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명으로 제한되지 않으며 첨부된 청구항에 기술된 바에 따른 것으로 의도된다.
SEQUENCE LISTING
<110> BioNTech RNA Pharmaceuticals GmbH
<120> RNA COMPOSTIONS TARGETING CLAUDIN-18.2
<130> 674-358 PCT
<150> US 63/002,287
<151> 2020-03-30
<160> 13
<170> PatentIn version 3.5
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Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
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Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
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Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Met Arg Val Met Ala Pro Arg Thr Leu Ile Leu Leu Leu Ser Gly Ala
1 5 10 15
Leu Ala Leu Thr Glu Thr Trp Ala Gly Ser
20 25
Claims (88)
- 약학적 조성물로서,
a. Claudin-18.1 폴리펩타이드에 비해 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질을 암호화하는 하나 이상의 암호화 영역을 포함하는 하나 이상의 단일 가닥 RNA; 및
b. 지질 나노입자를 포함하고,
상기 하나 이상의 단일 가닥 RNA가 상기 지질 나노입자 하나 이상에 의해 캡슐화된, 약학적 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 항체 물질이 CLDN-18.2 폴리펩타이드의 제1 세포외 도메인 (ECD1)에 특이적으로 결합하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 항체 물질이 암 세포에서 노출된 ECD1의 에피토프에 특이적으로 결합하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 물질이 항체 또는 이의 항원 결합 단편이거나 또는 이를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하나 이상의 단일 가닥 RNA가 항체 물질의 가변성 중쇄 (VH) 도메인과 항체 물질의 가변성 경쇄 (VL) 도메인을 둘다 암호화하는, 약학적 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 하나 이상의 단일 가닥 RNA이 적어도 항체 물질의 VH 도메인을 암호화하는 중쇄-암호화 영역을 포함하는 제1 단일 가닥 RNA이고,
a. 상기 제1 단일 가닥 RNA가 적어도 항체 물질의 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 더 포함하거나; 또는
b. 상기 약학적 조성물이 적어도 항체 물질의 VL 도메인을 암호화하는 경쇄-암호화 영역을 암호화하는 제2 단일 가닥 RNA를 더 포함하는, 약학적 조성물. - 제6항에 있어서, 상기 중쇄-암호화 영역이 불변성 중쇄 (CH) 도메인을 추가로 암호화하고; 및/또는 상기 경쇄-암호화 영역이 불변성 경쇄 (CL) 도메인을 추가로 암호화하는, 약학적 조성물.
- 제6항에 있어서, 상기 중쇄-암호화 영역이 면역글로불린 G (IgG) 형태로 항체 물질의 VH 도메인, CH1 도메인, CH2 도메인 및 CH3 도메인을 암호화하고; 및/또는 상기 경쇄-암호화 영역이 IgG 형태로 항체 물질의 VL 도메인 및 CL 도메인을 암호화하는, 약학적 조성물.
- 제8항에 있어서, 상기 IgG가 IgG1인, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄-암호화 영역이 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 전장 중쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제9 중 어느 한 항에 있어서, 상기 경쇄-암호화 영역이 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 전장 경쇄를 암호화하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나 또는 이를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 및/또는 제2 단일 가닥 RNA가 각각 독립적으로 분비 신호-암호화 영역을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 및/또는 제2 단일 가닥 RNA가 각각 독립적으로 (예를 들어, RNA 안정성 및/또는 번역 효율을 강화하기 위해) 하나 이상의 비-암호화 서열 요소를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제13항에 있어서, 상기 하나 이상의 비-암호화 서열 요소가 3' 비-번역 영역 (UTR), 5' UTR, mRNA의 전사-동시 캡핑용 캡 구조 및/또는 폴리아데닌 (polyA) 꼬리를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 RNA가 5'에서 3' 방향으로
a. 5' UTR-암호화 영역;
b. 분비 신호-암호화 영역;
c. 중쇄-암호화 영역;
d. 3' UTR-암호화 영역; 및
e. 폴리A 꼬리-암호화 영역을 포함하는, 약학적 조성물. - 제6항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제2 단일 가닥 RNA가 5'에서 3' 방향으로
a. 5' UTR-암호화 영역;
b. 분비 신호-암호화 영역;
c. 경쇄-암호화 영역;
d. 3' UTR-암호화 영역; 및
e. 폴리A 꼬리-암호화 영역을 포함하는, 약학적 조성물. - 제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 폴리A 꼬리가 변형된 폴리A 서열이거나 또는 이를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 및/또는 제2 단일 가닥 RNA가 5' 캡을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 및/또는 제2 단일 가닥 RNA가 하나 이상의 변형된 리보뉴클레오티드를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제19항에 있어서, 상기 변형된 리보뉴클레오티드가 슈도우리딘을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하나 이상의 단일 가닥 RNA가 제1 단일 가닥 RNA 및 제2 단일 가닥 RNA를 포함하는, 약학적 조성물.
- 제6항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제1 단일 가닥 RNA 및 제2 단일 가닥 RNA가 3:1 내지 1:1의 중량 비율로 존재하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지질 나노입자가 간-표적화 지질 나노입자인, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지질 나노입자가 양이온성 지질 나노입자인, 약학적 조성물.
- 제24항에 있어서, 지질 나노입자를 형성하는 지질이
- 폴리머-접합 지질;
- 양이온성 지질; 및
- 중성 지질을 포함하는, 약학적 조성물. - 제25항에 있어서,
a. 폴리머-접합 지질이 전체 지질의 약 1-2.5 mol%로 존재하고;
b. 양이온성 지질이 전체 지질의 35-65 mol%로 존재하고; 및
c. 중성 지질이 전체 지질의 35-65 mol%로 존재하는, 약학적 조성물. - 제25항 또는 제26항에 있어서, 상기 폴리머-접합 지질이 PEG-접합 지질 (예를 들어, 2-[(폴리에틸렌 글리콜)-2000]-N,N-다이테트라데실아세트아미드)인, 약학적 조성물.
- 제25항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 양이온성 지질이 ((3-하이드록시프로필)아잔다이일)bis(노난-9,1-다이일)bis(2-부틸옥타노에이트)인, 약학적 조성물.
- 제25항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중성 지질이 1,2-다이스테아로일-sn-글리세로-3-포스포콜린 (DPSC) 및/또는 콜레스테롤을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 지질 나노입자가 약 50-150 nm의 평균 크기를 가지는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 동결방지제 (예를 들어, 슈크로스)를 더 포함하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 수성 완충화된 용액을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제32항에 있어서, 상기 수성 완충화된 용액이 소듐 이온을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 화학치료제를 더 포함하는, 약학적 조성물.
- 제34항에 있어서, 상기 화학치료제가 췌장암 치료용으로 지정된 화학치료제인, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하나 이상의 단일 가닥 RNA가 0.5 mg/mL 내지 1.5 mg/mL의 농도로 존재하는, 약학적 조성물.
- 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 CLDN-18.2-양성 고형 종양을 앓고 있는 개체에 투여하는 것을 포함하는 방법.
- 제37항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-양성 종양이 췌장 종양인, 방법.
- 제37항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-양성 종양이 위 종양인, 방법.
- 제37항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-양성 종양이 담관 종양인, 방법.
- 제37항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-양성 고형 종양이 국소 진행된, 절제 불가한 또는 전이성인, 방법.
- 제37항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체는 개체가 앓고 있는 고형 종양이 CLDN-18.2-양성 고형 종양으로서 특정될 정도로 CLDN-18.2 수준을 높이기에 충분한 사전-처리를 제공받은, 방법.
- 제37항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-양성 종양은, 개체 유래의 포르말린-고정된 파라핀-포매된 신생물 조직에 대한 면역조직화학 분석에 따라 종양 세포의 ≥ 50%가 CLDN-18.2 단백질 염색 강도 ≥ 2+인 것으로 특정되는, 방법.
- 제37항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약학적 조성물이 단일 요법으로서 투여되는, 방법.
- 제37항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약학적 조성물이 약학적 조성물과 화학치료제를 포함하는 조합 요법의 일부로서 투여되는, 방법.
- 제37항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체는 화학치료제를 투여받은 적 있는, 방법.
- 제45항에 있어서, 개체에 조합 요법이 제공되도록 개체에 화학치료제를 투여하는 것을 더 포함하는, 방법.
- 제47항에 있어서, 상기 화학치료제는 약학적 조성물의 투여 후 적어도 4시간 경과시 투여되는, 방법.
- 제45항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학치료제가 CLDN-18.2-양성 췌장 종양을 앓고 있는 개체를 위한 겜시타빈 및/또는 파클리탁셀 (예를 들어, nab-파클리탁셀)이거나 또는 이를 포함하는, 방법.
- 제45항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학치료제가 CLDN-18.2-양성 췌장 종양을 앓고 있는 개체에 대한 FOLFIRINOX이거나 또는 이를 포함하는, 방법.
- 제45항 내지 제48항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학치료제가 CLDN-18.2-양성 담관암을 앓고 있는 개체에 대한 겜시타빈 및/또는 시스플라틴이거나 또는 이를 포함하는, 방법.
- 제37항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 개체가 성인 개체인, 방법.
- 제37항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여가 정맥내 주사에 의해 수행되는, 방법.
- 제37항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약학적 조성물이 투여 사이클 1회 이상, 2회 이상, 3회 이상 또는 그보다 많은 횟수로 투여되는, 방법.
- 제54항에 있어서, 상기 약학적 조성물이 투여 사이클 당 1회 이상의 투여로 투여되는, 방법.
- 제55항에 있어서, 각각의 투여 사이클이 3주 투여 사이클인, 방법.
- 제55항 또는 제56항에 있어서, 하나 이상의 투여가 단일 가닥 RNA 하나 이상을 개체의 체중에 대해 0.1 mg/kg 내지 5 mg/kg 범위로 포함하는, 방법.
- 개체에 제1항 내지 제36항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 개체에서 암을 치료하기 위해 CLDN-18.2-표적화 항체를 전달하는 방법.
- 세포에 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 투여하여, 세포가 약학적 조성물의 하나 이상의 단일 가닥 RNA에 의해 암호화되는 CLDN-18.2-표적화 항체를 발현 및 분비하는 것을 포함하는, CLDN-18.2-표적화 항체를 제조하는 방법.
- 제59항에 있어서, 상기 세포가 간 세포인, 방법.
- 제59항 또는 제60항에 있어서, 상기 세포가 개체에 존재하는, 방법.
- 제61항에 있어서, 상기 CLDN-18.2-표적화 항체가 치료학적으로 적절한 혈장 농도로 생산되는, 방법.
- 제62항에 있어서, 상기 치료학적으로 적절한 혈장 농도가 항체-의존적인 세포성 세포독성 (ADCC)을 통해 암 세포의 사멸을 매개하기에 충분한, 방법.
- 제63항에 있어서, 상기 치료학적으로 적절한 혈장 농도가 0.3-28 ㎍/mL인, 방법.
- 방법으로서,
세포에 도입된 하나 이상의 mRNA로부터 발현된 항체 물질의 한가지 이상의 특징을 확인하는 단계를 포함하고,
상기 하나 이상의 mRNA가 Claudin-18.1 폴리펩타이드에 비해 Claudin-18.2 (CLDN-18.2) 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는 항체 물질을 암호화하는 암호화 영역을 포함하는 적어도 하나 이상의 단일 가닥 RNA의 한가지 이상의 특징을 포함하고,
상기 한가지 이상의 특징이 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) CLDN-18.2에 대한 항체 물질의 결합 특이성; (iii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능; 및 (iv) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능을 포함하는, 방법. - CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물을 특정화하는 방법으로서,
세포를 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물 하나 이상과 접촉시키는 단계; 및
상기 세포에 의해 생산된 항체 물질을 검출하는 단계를 포함하는, 방법. - 제66항에 있어서, 상기 항체 물질의 한가지 이상의 특징을 확인하는 단계를 더 포함하고, 상기 한가지 이상의 특징이 (i) 항체 물질의 단백질 발현 수준; (ii) 항체 물질의 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성; (iii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능; 및 (iv) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능을 포함하는, 방법.
- 제65항 내지 제67항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포가 간 세포인, 방법.
- 제65항 또는 제67항에 있어서, 상기 확인하는 단계가 항체 물질의 한가지 이상의 특징을 기준물질인 CLDN-18.2-표적화 항체의 특징과 비교하는 것을 포함하는, 방법.
- 제65항 또는 제67항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 확인하는 단계가 역치 수준 이상의 항체 물질의 단백질 발현 수준을 평가하는 것을 포함하는, 방법.
- 제70항에 있어서, 상기 역치 수준이 ADCC를 유도하기에 충분한 수준인, 방법.
- 제65항 또는 제67항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 확인하는 단계가 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 상기 항체 물질의 결합성을 평가하는 것을 포함하는, 방법.
- 제72항에 있어서, 상기 평가가 CLDN18.1 폴리펩타이드에 대한 결합성과 비교해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 대한 항체 물질의 결합성을 확인하는 것을 포함하는, 방법.
- 제72항 또는 제73항에 있어서, 상기 평가가 상기 항체 물질에서 기준물질인 CLDN-18.2-표적화 항체과 비슷한 결합 선호 프로파일을 확인하는 것을 포함하는, 방법.
- 제69항 또는 제74항에 있어서, 상기 기준물질인 CLDN-18.2-표적화 항체가 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵인, 방법.
- 제65항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 항체 물질이 하기 특징을 포함하는 경우, 그 항체 물질을 CLDN-18.2-표적화 항체 물질인 것으로 추가로 특정하는, 방법:
a. ADCC를 유도하기에 충분한 역치 수준 이상의, 세포에 의해 발현된 항체 물질의 단백질 수준;
b. CLDN18.1 대비 CLDN-18.2에 대한 항체 물질의 결합 선호성; 및
c. ADCC 및/또는 CDC에 의해 매개되는 50% 이상의 종양 세포의 사멸성. - 제76항에 있어서, 항체의 특징이 적어도 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵의 특징과 비슷할 경우 그 항체 물질을 졸베툭시맵 또는 클라우딕시맵-등가 항체인 것으로 추가로 특정하는, 방법.
- 제65항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 종양 세포가 암 세포인, 방법.
- 제65항 또는 제66항 내지 제78항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 확인하는 단계가 접촉한 후 48시간 경과 시점에 평가하였을 때 세포가 하나 이상의 단일 가닥 RNA에 의해 암호화된 anti-CLDN18-2 항체 물질을 발현하는지를 확인하는 것을 포함하는, 방법.
- 제65항 또는 제66항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 확인하는 단계가 하기 특징들 중 하나 이상을 확인하는 것을 포함하는, 방법:
- 세포에 의해 발현된 항체 물질이 CLDN18.1 폴리펩타이드에 비해 CLDN-18.2 폴리펩타이드에 선호적으로 결합하는지;
- 세포에 의해 발현된 항체 물질이 기준물질인 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체를 이용한 유세포 측정 결합 분석에서 관찰되는 바와 비슷한 CLDN-18.2에 대한 표적 특이성을 나타내는지;
- 면역 작동자 세포 (예를 들어, PBMC 세포) 및 CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 항체 물질의 존재 하에 인큐베이션한 후 48시간 경과시 분석하였을 때, CLDN-18.2 양성 세포는 세포용해되고, 대조군 세포는 세포용해되지 않는지;
- 세포에 의해 발현된 항체 물질이, 기준물질인 CLDN-18.2-표적화 단일클론 항체를 동일한 농도에서 사용하였을 때 관찰되는 바와 적어도 비슷한 ADCC 프로파일을 CLDN-18.2 양성 세포에 대해 나타내는지; 및
- CLDN-18.2 양성 세포 또는 CLDN-18.2 음성 대조군 세포를 인간 혈청과 항체 물질의 존재 하에 인큐베이션한 후 2시간 경과시 분석하였을 때, CLDN-18.2 양성 세포는 세포용해되고, 대조군 세포는 세포용해되지 않는지. - 제66항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포가 개체 (예를 들어, 마우스 또는 원숭이 개체)에 존재하는, 방법.
- 제81항에 있어서, 상기 한가지 이상의 특징이 개체에서 하나 이상의 조직 내 항체 수준을 포함하는, 방법.
- 제66항 내지 제82항 중 어느 한 항에 있어서,
약학적 조성물을 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 각각 가진 동물 개체 군에 투여하여, 약학적 조성물이 CLDN-18.2-표적성인 것으로 특정되면 항-종양 활성을 확인하는 것을 더 포함하는, 방법. - 하기 단계들을 포함하는, 제조 방법:
(A) 단일 가닥 RNA (ssRNA) 또는 이의 조성물의 하나 이상의 특징을 확인하는 단계로서, ssRNA는 항체 물질의 일부 또는 전체를 암호화하고, 하나 이상의 특징이 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는, 단계:
(i) ssRNA의 길이 및/또는 서열;
(ii) ssRNA의 온전성;
(iii) ssRNA의 하나 이상의 화학적 모이어티의 존재 및/또는 위치;
(iv) ssRNA가 세포에 도입되었을 때 항체 물질의 발현 정도;
(v) ssRNA 또는 이의 조성물의 안정성;
(vi) ssRNA가 도입된 유기체로부터 유래한 생물학적 샘플 내 항체 물질의 수준;
(vii) ssRNA로부터 발현된 항체 물질의, 선택적으로 CLDN18.1 대비, 선택적으로 CLDN-18.2에 대한 결합 특이성;
(viii) 항체 물질이 ADCC를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능;
(ix) 항체 물질이 보체 의존적인 세포독성 (CDC)를 통해 표적 세포의 사멸을 매개하는 효능;
(x) 조성물 내 지질 실체 및 양/농도;
(xi) 조성물 내 지질 나노입자의 크기;
(xii) 조성물 내 지질 나노입자의 다분산성;
(xiii) 조성물 내 ssRNA의 양/농도;
(xiv) 지질 나노입자 내 ssRNA의 캡슐화 정도; 및
(xv) 이들의 조합;
(B) ssRNA 또는 이의 조성물의 하나 이상의 특징을 적절한 기준 표준의 특징과 비교하는 단계; 및
(C) (i) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준에 부합하거나 또는 초과하는 것으로 확인되면, ssRNA 또는 이의 조성물을 제조 및/또는 유통인 하나 이상의 추가적인 단계로 지정하거나; 또는
(ii) 비교에서 ssRNA 또는 이의 조성물이 기준 표준에 부합 또는 초과하지 않는 것으로 확인되면, 대안적인 조치를 행하는 단계. - 제84항에 있어서, 상기 ssRNA를 분석하고, 단계 (C)(i)의 하나 이상의 추가적인 단계가 적어도 ssRNA의 제형화이거나 또는 이를 포함하는, 방법.
- 제84항 또는 제85항에 있어서, 상기 조성물을 분석하고, 상기 조성물이 지질 나노입자를 포함하며, 단계 (C)(i)의 하나 이상의 추가적인 단계가 조성물의 출시 및 유통이거나 또는 이를 포함하는, 방법.
- 제85항에 있어서, 제형을 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 각각 가진 동물 개체의 군에 투여하여 항-종양 활성을 확인하는 것을 더 포함하는, 방법.
- 하기 단계를 포함하는, CLDN-18.2를 표적화하는 약학적 조성물의 투여 용법을 결정하는 방법:
(A) 제1항 내지 제35항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 각각 인간 CLDN-18.2 양성 이종이식 종양을 가진 동물 개체의 군에 미리 정해진 투여 용법으로 투여하는 단계;
(B) 동물 개체의 종양 크기를 주기적으로 측정하는 단계;
(C) (i) 약학적 조성물을 투여한 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하지 않을 경우, 용량 및/또는 투여 빈도를 높이거나; 또는
(ii) 약학적 조성물을 투여한 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 동물 개체의 적어도 30%에서 독성 효과가 발생하는 경우, 용량 및/또는 투여 빈도를 낮추거나; 또는
(iii) 약학적 조성물을 투여한 후 종양 크기 감소가 치료학적으로 적절하고 동물 개체에서 독성 효과가 발생하지 않을 경우, 투여 용법을 수정하지 않는 단계.
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US6410328B1 (en) | 1998-02-03 | 2002-06-25 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Sensitizing cells to compounds using lipid-mediated gene and compound delivery |
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WO2004002453A1 (en) | 2002-06-28 | 2004-01-08 | Protiva Biotherapeutics Ltd. | Method and apparatus for producing liposomes |
AU2004257373B2 (en) | 2003-07-16 | 2011-03-24 | Arbutus Biopharma Corporation | Lipid encapsulated interfering RNA |
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NZ592917A (en) | 2003-09-15 | 2012-12-21 | Protiva Biotherapeutics Inc | Stable polyethyleneglycol (PEG) dialkyloxypropyl (DAA) lipid conjugates |
ATE536418T1 (de) | 2004-06-07 | 2011-12-15 | Protiva Biotherapeutics Inc | Lipidverkapselte interferenz-rna |
EP1781593B1 (en) | 2004-06-07 | 2011-12-14 | Protiva Biotherapeutics Inc. | Cationic lipids and methods of use |
CA2616877C (en) | 2005-07-27 | 2014-01-28 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Systems and methods for manufacturing liposomes |
EP1790664A1 (en) | 2005-11-24 | 2007-05-30 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Monoclonal antibodies against claudin-18 for treatment of cancer |
DE102007001370A1 (de) * | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
EP1997832A1 (en) | 2007-05-29 | 2008-12-03 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Monoclonal antibodies against Claudin-18 for treatment of cancer |
JP5749494B2 (ja) | 2008-01-02 | 2015-07-15 | テクミラ ファーマシューティカルズ コーポレイション | 核酸の送達のための改善された組成物および方法 |
AU2009238175C1 (en) | 2008-04-15 | 2023-11-30 | Arbutus Biopharma Corporation | Novel lipid formulations for nucleic acid delivery |
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EP2506879A4 (en) | 2009-12-01 | 2014-03-19 | Protiva Biotherapeutics Inc | PREPARATIONS OF SNALP CONTAINING ANTIOXIDANTS |
US9687550B2 (en) | 2009-12-07 | 2017-06-27 | Arbutus Biopharma Corporation | Compositions for nucleic acid delivery |
ES2749426T3 (es) | 2009-12-18 | 2020-03-20 | Univ British Columbia | Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos |
JP2013527856A (ja) | 2010-05-12 | 2013-07-04 | プロチバ バイオセラピューティクス インコーポレイティッド | 陽イオン性脂質およびその使用方法 |
NZ605079A (en) | 2010-06-03 | 2015-08-28 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Biodegradable lipids for the delivery of active agents |
WO2012016184A2 (en) | 2010-07-30 | 2012-02-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for delivery of active agents |
US8466122B2 (en) | 2010-09-17 | 2013-06-18 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Trialkyl cationic lipids and methods of use thereof |
AU2012207606B2 (en) | 2011-01-11 | 2017-02-23 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Pegylated lipids and their use for drug delivery |
US8691750B2 (en) | 2011-05-17 | 2014-04-08 | Axolabs Gmbh | Lipids and compositions for intracellular delivery of biologically active compounds |
WO2013016058A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel bis-nitrogen containing cationic lipids for oligonucleotide delivery |
US9701623B2 (en) | 2011-09-27 | 2017-07-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Di-aliphatic substituted pegylated lipids |
US8762704B2 (en) | 2011-09-29 | 2014-06-24 | Apple Inc. | Customized content for electronic devices |
EP2788316B1 (en) | 2011-12-07 | 2019-04-24 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Branched alkyl and cycloalkyl terminated biodegradable lipids for the delivery of active agents |
WO2013086373A1 (en) | 2011-12-07 | 2013-06-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Lipids for the delivery of active agents |
ES2921724T1 (es) | 2011-12-07 | 2022-08-31 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Lípidos biodegradables para la administración de agentes activos |
KR20140102759A (ko) | 2011-12-16 | 2014-08-22 | 모더나 세라퓨틱스, 인코포레이티드 | 변형된 뉴클레오사이드, 뉴클레오타이드 및 핵산 조성물 |
WO2013167153A1 (en) * | 2012-05-09 | 2013-11-14 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Antibodies useful in cancer diagnosis |
WO2013174403A1 (en) | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Ganymed Pharmaceuticals Ag | Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 for treatment of cancer |
US9415109B2 (en) | 2012-07-06 | 2016-08-16 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Stable non-aggregating nucleic acid lipid particle formulations |
SI3766916T1 (sl) | 2014-06-25 | 2023-01-31 | Acuitas Therapeutics Inc. | Formulacije novih lipidov in lipidnih nanodelcev za dostavo nukleinskih kislin |
WO2016005004A1 (en) | 2014-07-11 | 2016-01-14 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stabilization of poly(a) sequence encoding dna sequences |
WO2017004143A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Acuitas Therapeutics Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
EP4276189A3 (en) | 2015-09-21 | 2024-01-17 | TriLink BioTechnologies, LLC | Initiating capped oligonucleotide primers for synthesizing 5'-capped rnas |
WO2017059902A1 (en) | 2015-10-07 | 2017-04-13 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | 3' utr sequences for stabilization of rna |
CN113636947A (zh) | 2015-10-28 | 2021-11-12 | 爱康泰生治疗公司 | 用于递送核酸的新型脂质和脂质纳米颗粒制剂 |
SI3445850T1 (sl) | 2016-04-22 | 2021-12-31 | BioNTech SE | Postopki za zagotavljanje enoverižne RNA |
EP3532103A1 (en) | 2016-10-26 | 2019-09-04 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipid nanoparticle formulations |
KR102421427B1 (ko) * | 2018-05-18 | 2022-07-18 | 라노바 메디신즈 리미티드 컴파니 | 항-클라우딘 18.2 항체 및 이의 사용 |
-
2021
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Non-Patent Citations (70)
Title |
---|
Al-Batran SE, Schuler MH, Zvirbule Z, Manikhas G, Lordick F, Rusyn A, et al. FAST: An international, multicenter, randomized, phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without IMAB362, a first-in-class CLDN-18.2-targeting antibody, as first-line therapy in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction (GEJ) adenocarcinoma. JCO. 2016; 34(Suppl 18): LBA4001-LBA4001. doi: 10.1200/JCO.2016.34.18_suppl.LBA4001 |
Al-Batran SE, Zvirbule Z, Lordick F, Thuss-Patience P, Just M, Bitzer M, et al. Phase 1 study of IMAB362 with immunomodulation in patients with advanced gastric cancer. Ann Oncol. 2017a; 28(Suppl 5): 664P. doi: 10.1093/annonc/mdx369.048 |
Alnylam Pharmaceuticals, I. Patisaran FDA approval (2017). |
Bray F, Ferla JME, Soerjomataram I, Siegel RL, Jemal A, (2018): Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. First published: 12 September 2018. https://doi.org/10.3322/caac.21492 |
Cancer Research UK [Accessed February 18, 2020]. Available from www.cancerresearchuk.org/health-professional/cancer-statistics/statistics-by-cancer-type/pancreatic-cancer#heading-Zero) |
Cancer.gov Surveillance epidemiology and end results program. 2015 Seer Data. [Accessed February 20, 2019]. Available from: https://seer.cancer.gov/statfacts/html/livibd.html. |
Chapman RW. Risk factors for biliary tract carcinogenesis. Ann Oncol. 1999;10(Suppl 4):S308-S311. |
Charbel H, Al-Kawas FH. Cholangiocarcinoma: epidemiology, risk factors, pathogenesis, and diagnosis. Curr Gastroenterol Rep. 2011;13(2):182-187. |
Cidon EU. Resectable cholangiocarcinoma: reviewing the role of adjuvant strategies. Clin Med Insights Oncol. 2016;10:CMO.S32821. |
Coati I, Lotz G, Fanelli GN, Brignola S, Lanza C, Cappellesso R, et al. Claudin-18 expression in oesophagogastric adenocarcinomas: a tissue microarray study of 523 molecularly profiled cases. Br J Cancer. 2019;121(3):257-63. doi: 10.1038/s41416-019-0508-4 |
Coelho T, Adams D, Silva A, Lozeron P, Hawkins PN, Mant T, et al. Safety and efficacy of RNAi therapy for transthyretin amyloidosis. N Engl J Med. 2013;369(9):819-29. doi: 10.1056/NEJMoa1208760 |
Conroy T, Desseigne F, Ychou M, Bouche O, Guimbaud R, et al. FOLFIRINOX versus gemcitabine for metastatic pancreatic cancer. N Engl J Med. 2011;364(19):1817-25. |
de Groen PC, Gores GJ, Larusso NF, Gunderson LL, Nagorney DM. Biliary tract cancers. N Engl J Med Overseas Ed. 1999;341(18):1368-1378. |
Eisenhauer EA, Therasse P, Bogaerts J, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, et al. New response evaluation criteria in solid tumours: revised RECIST guideline (version 1.1). Eur J Cancer. 2009;45(2):228-47. doi: 10.1016/j.ejca.2008.10.026 |
England Public Health. National Cancer Intelligence Network: Rare and Less Common Cancers, Incidence and Mortality in England. London: 2015. |
Ferlay J, Parkin DM, Steliarova-Foucher E. (2010): Estimates of cancer incidence and mortality in Europe in 2008. In European journal of cancer (Oxford, England: 1990) 46 (4), pp. 765-781. DOI: 10.1016/j.ejca.2009.12.014. |
Fitzgerald K, Frank-Kamenetsky M, Shulga-Morskaya S, Liebow A, Bettencourt BR, Sutherland JE, et al. Effect of an RNA interference drug on the synthesis of proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) and the concentration of serum LDL cholesterol in healthy volunteers: a randomised, single-blind, placebo-controlled, phase 1 trial. Lancet. 2014;383(9911):60-8; doi: 10.1016/S0140-6736(13)61914-5 |
Gillen S, Schuster T, Meyer Zum Buschenfelde C, Friess H, Kleeff J. Preoperative/neoadjuvant therapy in pancreatic cancer: a systematic review and meta-analysis of response and resection percentages. PLoS Med. 2010;7(4):e1000267. |
Golan T, Raitses-Gurevich M, Kelley RK, et al. Overall survival and clinical characteristics of BRCA-associated cholangiocarcinoma: a multicenter retrospective study. Oncologist. 2017;22(7):804-810. |
Gourgou-Bourgade S, Bascoul-Mollevi C, Desseigne F, Ychou M, Bouche O, et al. Impact of FOLFIRINOX compared with gemcitabine on quality of life in patients with metastatic pancreatic cancer: results from the PRODIGE 4/ACCORD 11 randomized trial. J Clin Oncol. 2013;31(1):23-9. |
Heinz C, Mitnacht-Kraus R, Kreuzberg M, Woll S, Sahin U, et al. (2017): 376PPreclinical evaluation of the CLDN-18.2-targeting antibody, IMAB362, in pancreatic carcinoma. In annonc 28 (suppl_5). DOI: 10.1093/annonc/mdx367.010. |
Hennedige TP, Neo WT, Venkatesh SK. Imaging of malignancies of the biliary tract-an update. Cancer Imaging. 2014;14(1):1470-7330. |
Holtkamp S, Kreiter S, Selmi A, Simon P, Koslowski M, Huber C, et al. Modification of antigen-encoding RNA increases stability, translational efficacy, and T-cell stimulatory capacity of dendritic cells. Blood 2006;108(13):4009-17. doi: 10.1182/blood-2006-04-015024 |
Jemal A, Bray F, Center MM, Ferlay J, Ward E, et al. (2011): Global cancer statistics. In CA: a cancer journal for clinicians 61 (2), pp. 69-90. DOI: 10.3322/caac.20107. |
Karanjawala ZE. Illei PB, Ashfaq R, Infante J, Murphy K, et al. (2008): New markers of pancreatic cancer identified through differential gene expression analyses. Claudin 18 and annexin A8. In The American journal of surgical pathology 32 (2), pp. 188-196. DOI: 10.1097/PAS.0b013e31815701f3. |
Khan I, Sarker SJ, Hackshaw A. Smaller sample sizes for phase II trials based on exact tests with actual error rates by trading-off their nominal levels of significance and power. Br J Cancer. 2012;107(11):1801-1809. doi:10.1038/bjc.2012.444 |
Khan SA, Toledano MB, Taylor-Robinson SD. Epidemiology, risk factors, and pathogenesis of cholangiocarcinoma. HPB. 2008;10(2):77-82. |
Khan ZR, Neugut AI, Ahsan H, Chabot JA. Risk factors for biliary tract cancers. Am J Gastroenterol. 1999;94(1):149-152. |
Kirstein MM, Vogel A. Epidemiology and risk factors of cholangio-carcinoma. Visc Med. 2016;32(6):395-400. |
Kleeff J, Korc M, Apte M, La Vecchia C, Johnson CD et al. Pancreatic Cancer. Nat Rev Dis Primers. 2016;2:16022. |
Lee SS, Kim MH, Lee SK, et al. Clinicopathologic review of 58 patients with biliary papillomatosis. Cancer. 2004;100(4):783-793. |
Lordick F, Schuler M, Al-Batran SE, Zvirbule, Z, Manikhas G, Rusyn A, et al. Claudin 18.2 - a novel treatment target in the multicenter, randomized, phase II FAST study, a trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without the CLDN-18.2-targeting antibody IMAB362 as 1st line therapy in advanced gastric and gastroesophageal junction (GEJ) cancer. Ann Oncol. 2016;27(suppl_9). doi: 10.1093/annonc/mdw582.001 |
Manji GA, Olive KP, Saenger YM, Oberstein P. Current and Emerging Therapies in Metastatic Pancreatic Cancer. Clin Cancer Res. 2017;23(7):1670-8. |
Micke P, Mattsson JS, Edlund K, Lohr M, Jirstrom K, Berglund A, et al. Aberrantly activated claudin 6 and 18.2 as potential therapy targets in non-small-cell lung cancer. Int J Cancer. 2014;135(9):2206-14. doi: 10.1002/ijc.28857 |
Mitnacht-Kraus R, Kreuzberg M, Utsch M, Sahin U, Tuereci O. (2017): Preclinical characterization of IMAB362 for the treatment of gastric carcinoma. Poster 378. In Annals of Oncology (28). |
Morizane C, Okusaka T, Mizusawa J, Katatyama H, Ueno M, et al. Randomized phase III study of gemcitabine plus S-1 combination therapy versus gemcitabine plus cisplatin combination therapy in advanced biliary tract cancer: a Japan Clinical Oncology Group study (JCOG1113, FUGA-BT) J Clin Oncol. 2018;36(4_suppl):205. |
Morlock R, Krukas-Hampel MR, Tureci O. Patient reported outcomes (PRO) results from phase II MONO and FAST zolbetuximab (IMAB362) trials in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction adenocarcinoma (GA/GEJA). Ann Oncol. 2018a;29(suppl_8). doi: 10.1093/annonc/mdy282.042 |
Morlock R, Turnbull J, Blahut S, Krukas-Hampel MR, Hawryluk E, et al. Health-related quality-of-life (HRQoL) results from the FAST study: A phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine with or without IMAB362 in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction adenocarcinoma. JCO 2018b;36(4_suppl):54. doi: 10.1200/JCO.2018.36.4_suppl.54 |
Niimi T, Nagashima K, Ward JM, Minoo P, Zimonjic DB, Popescu NC, et al. claudin-18, a novel downstream target gene for the T/EBP/NKX2.1 homeodomain transcription factor, encodes lung- and stomach-specific isoforms through alternative splicing. Mol Cell Biol. 2001;21(21):7380-90. doi: 10.1128/MCB.21.21.7380-7390.2001 |
Orlandini von Niessen AG, Poleganov MA, Rechner C, Plaschke A, Kranz LM, Fesser S, et al. Improving mRNA-Based therapeutic gene delivery by expression-augmenting 3' UTRs identified by cellular library screening. Mol Ther. 2019;27(4):824-36. doi: 10.1016/j.ymthe.2018.12.011 |
Parkin DM, Srivatanakul P, Khlat M. Liver cancer in Thailand I. A case-control study of cholangiocarcinoma. Int J Cancer. 1991;48(3):323-328. |
Primrose JN, Fox R, Palmer DH, Prasad R, Mirza D, et al. Adjuvant capecitabine for biliary tract cancer: The BILCAP randomized study. American Society of Clinical Oncology. 2017;35:4006-4183. |
Quante AS, Ming C, Rottmann M, Engel J, Boeck S, Heinemann V, Westphalen CB, Strauch K. Projections of cancer incidence and cancer-related deaths in Germany by 2020 and 2030. Cancer Med. 2016;5(9):2649-56. |
Rahib L, Smith BD, Aizenberg R, Rosenzweig AB, Fleshman JM, Matrisian LM. Projecting cancer incidence and deaths to 2030: the unexpected burden of thyroid, liver, and pancreas cancers in the United States. Cancer Res. 2014;74(11):2913-21. |
Randi G, Malvezzi M, Levi F, Ferlay J, Negri E, et al. Epidemiology of biliary tract cancers: an update. Ann Oncol. 2009;20(1):146-159. |
Rohde C, Yamaguchi R, Mukhina S, Sahin U, Itoh K, et al. (2019): Comparison of Claudin 18.2 expression in primary tumors and lymph node metastases in Japanese patients with gastric adenocarcinoma. In Japanese journal of clinical oncology. DOI: 10.1093/jjco/hyz068. |
Sahin U, Koslowski M, Dhaene K, Usener D, Brandenburg G, Seitz G, et al. Claudin-18 splice variant 2 is a pan-cancer target suitable for therapeutic antibody development. Clin Cancer Res. 2008;14(23):7624-34. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-08-1547 |
Sahin U, Schuler M, Bauer S, Krilova A, Utsch M, Huber C, et al. First-in-human study of IMAB362, an anti-Claudin 18.2 monoclonal antibody, in patients with advanced gastroesophageal cancer. Ann Oncol. 2017;28(suppl_5). doi: 10.1093/annonc/mdx369.044 |
Sahin U, Schuler M, Richly H, Bauer S, Krilova A, Dechow T, et al. A phase I dose-escalation study of IMAB362 (Zolbetuximab) in patients with advanced gastric and gastro-oesophageal junction cancer. Eur J Cancer. 2018;100:17-26. doi: 10.1016/j.ejca.2018.05.007 |
Schuler M, Al-Batran S-E, Zvirbule Z, Manikhas G, Lordick F, Rusyn A, et al. Final results of the FAST study, an international, multicenter, randomized, phase II trial of epirubicin, oxaliplatin, and capecitabine (EOX) with or without the CLDN-18.2-targeting antibody IMAB362 as first-line therapy in patients with advanced CLDN-18.2+ gastric and gastroesophageal junction (GEJ) adenocarcinoma. Ann Oncol. 2016;27(Suppl 6):vi208. doi: 10.1093/annonc/mdw371.06 |
Seufferlein T, Bachet JB, van Cutsem E, Rougier P. Pancreatic adenocarcinoma. ESMO-ESDO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol. 2012;23(Suppl 7):vii33-40. doi: 10.1093/annonc/mds224 |
Shigeyasu K, Tanakaya K, Nagasaka T, Aoki H, Fujiwara T, et al. Early detection of meta-chronous bile duct cancer in Lynch syndrome: report of a case. Surg Today. 2014;44(10):1975-1981. |
Shinozaki A, Shibahara J, Noda N, Tanaka M, Aoki T, Kokudo N, et al. Claudin-18 in biliary neoplasms. Its significance in the classification of intrahepatic cholangiocarcinoma. Virchows Arch. 2011;459(1):73-80. doi: 10.1007/s00428-011-1092-z |
Shroff RT, Borad MJ, Xiao L, et al. A phase II trial of gemcitabine (G), cisplatin (C), and nab-paclitaxel (N) in advanced biliary tract cancers (aBTCs) J Clin Oncol. 2017;35(15_suppl):4018. |
Shroff RT, Xiao L, Kaseb AO. A phase II trial of gemcitabine (G), cispla-tin (C), and nab-paclitaxel (N) in advanced biliary tract cancers (aBTCs): Updated survival analysis. J Clin Oncol. 2018;36(4_suppl):350. |
Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2013. CA Cancer J Clin. 2013;63(1):11-30. doi: 10.3322/caac.21166 |
Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Cancer statistics, 2018. CA Cancer J Clin. 2018;68(1):7-30. |
Stadler CR, Bahr-Mahmud H, Celik L, Hebich B, Roth AS, Roth RP. Elimination of large tumors in mice by mRNA-encoded bispecific antibodies. Nat Med. 2017;23(7):815-7. doi: 10.1038/nm.4356 |
Tabernero J, Shapiro GI, LoRusso PM, Cervantes A, Schwartz GK, Weiss GJ, Paz-Ares L, et al. First-in-humans trial of an RNA interference therapeutic targeting VEGF and KSP in cancer patients with liver involvement. Cancer Discov. 2013;3(4):406-17. doi: 10.1158/2159-8290.CD-12-0429 |
Tanaka M, Shibahara J, Fukushima N, Shinozaki A, Umeda M, Ishikawa S, et al. Claudin-18 is an early-stage marker of pancreatic carcinogenesis. In The journal of histochemistry and cytochemistry 2011;59(10):942-52. doi: 10.1369/0022155411420569 |
Teague A, Lim KH, Wang-Gillam A. Advanced pancreatic adenocarcinoma: a review of current treatment strategies and developing therapies. Ther Adv Med Oncol. 2015;7(2):68-84. |
Trarbach T, Schuler M, Zvirbule Z, Lordick F, Krilova A, Helbig U, et al. Efficacy and safety of multiple doses of IMAB362 in patients with advanced gastro-esophageal cancer: results of a phase II study. Ann Oncol. 2014;25(suppl_4)iv218-iv218. doi: 10.1093/annonc/mdu334.21 |
Treci O, Koslowski M, Helftenbein G, Castle J, Rohde C, Dhaene K, et al. Claudin-18 gene structure, regulation, and expression is evolutionary conserved in mammals. Gene. 2011;481(2):83-92. doi: 10.1016/j.gene.2011.04.007 |
Tureci O, Mitnacht-Kraus R, Woll S, Yamada T, Sahin U (2019b): Characterization of zolbetuximab in pancreatic cancer models. In Oncoimmunology 8 (1), pp. e1523096. DOI: 10.1080/2162402X.2018.1523096. |
Tureci O, Sahin U, Schulze-Bergkamen H, Zvirbule Z, Lordick F, Koeberle D, et al. A multicentre, phase 2a study of zolbetuximab as a single agent in patients with recurrent or refractory advanced adenocarcinoma of the stomach or lower oesophagus. The MONO study. Ann Oncol. 2019;30(9):1487-95. doi: 10.1093/annonc/mdz199 |
Valle J, Wasan H, Palmer DH, Cunningham D, Anthoney A, et al. Cisplatin plus gemcitabine versus gemcitabine for biliary tract cancer. N Engl J Med. 2010;362(14):1273-1281. |
Von Hoff DD, Ervin T, Arena FP, Chiorean EG, Infante J, Moore M, Seay T, Tjulandin SA, Ma WW, Saleh MN, et al. Increased survival in pancreatic cancer with nab-paclitaxel plus gemcitabine. N Engl J Med. 2013;369(18):1691-703. |
Vos T, Allen C, Arora M, Barber RM, Bhutta ZA, et al. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 310 diseases and injuries, 1990-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015. Lancet. 2016;388(10053):1545-1602. |
Werner J, Combs SE, Springfeld C, Hartwig W, Hackert T, et al. Advanced-stage pancreatic cancer: therapy options. Nat Rev Clin Oncol. 2013;10(6):323-33. |
Woll S, Schlitter AM, Dhaene K, Roller M, Esposito I, Sahin U, et al. Claudin 18.2 is a target for IMAB362 antibody in pancreatic neoplasms. Int J Cancer. 2014;134(3):731-9. doi: 10.1002/ijc.28400 |
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