KR20220160507A - Apparatus for separating of particle and method for separating of particle thereuse - Google Patents

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오명열
박상희
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(주)한국바이오셀프
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Abstract

The present invention relates to an apparatus for isolating small particles and a method for isolating small particles by using the same. The apparatus of the present invention comprises: a rotational stage rotatably disposed to transfer a tube to a working position of each module; a container storage module having a first container rack where a plurality of tubes are stored and a first container transfer unit that transfers the tubes; a first capping module and a second capping module opening or closing a lid of the tube transferred by the rotational stage; a fluid handling module having an autopipette; a centrifugation module; a magnet module applying magnetic force to wells where magnetic beads are dispensed, wherein a well plate having a plurality of the wells is placed thereon; and an isolation module having a screening unit that screens particles bigger than a predetermined size from the introduced fluid. Accordingly, a process of isolating small particles including cancer cells in blood is automated to prevent contamination of a sample and allow an isolation process to be rapidly and accurately performed.

Description

미소입자 분리장치 및 이를 이용한 미소입자 분리방법{Apparatus for separating of particle and method for separating of particle thereuse}Microparticle separation device and microparticle separation method using the same {Apparatus for separating of particle and method for separating of particle thereuse}

본 발명은 미소입자 분리장치 및 이를 이용한 미소입자 분리방법에 관한 것이다. 더욱 상세하게 본 발명은 말초 혈액 단핵세포(PBMC: Peripheral Blood Mononuclear Cell), 플라즈마(plasma), 적혈구(RBC: Red Blood Cell), 혈중암세포 등의 미소입자를 분리하는 장치와 이를 이용한 미소입자 분리방법에 관한 것이다.The present invention relates to a microparticle separation device and a microparticle separation method using the same. More specifically, the present invention relates to a device for separating microparticles such as peripheral blood mononuclear cells (PBMC), plasma, red blood cells (RBC), and blood cancer cells, and a microparticle separation method using the same It is about.

바이오 분야에 있어서 일반적으로 일컬어지는 미소입자란 인체 또는 동물로부터 수집되는 조직, 세포, 혈액, 체액, 소변, 분변 등과 이들로부터 분리된 혈청, 혈장, 염색체, DNA, RNA, 단백질 등을 말한다.Microparticles commonly referred to in the bio field refer to tissues, cells, blood, body fluids, urine, feces, etc. collected from human bodies or animals, and serum, plasma, chromosomes, DNA, RNA, proteins, etc. separated therefrom.

종래에는 미소입자를 분리하기 위해 검체를 포함하고 있는 튜브 용기를 원심 분리한 후에 수작업으로 뚜껑을 열어서 PBMC, Plasma, RBC 등을 파이펫으로 흡입하여 다른 튜브 용기로 옮기는 과정을 수행하였다.Conventionally, in order to isolate microparticles, a tube container containing a sample is centrifuged, and then the lid is manually opened, and PBMC, Plasma, RBC, etc. are suctioned with a pipette and transferred to another tube container.

이와 같은 종래의 방식은 작업효율이 좋지 않고, 수작업을 진행하는 과정에서 작업자에 의해 검체 등이 오염될 수 있다는 문제가 있다.Such a conventional method has a problem in that work efficiency is not good and a sample or the like may be contaminated by a worker in the process of performing manual work.

한편, 혈액 속에 있는 혈중암세포를 분리 또는 선별하는 방법은 생물화학적 기반 기술로서 항체를 이용하여 특정 암세포만 선별하는 방법과, 물리적 기반 기술로서 멤브레인 형태의 필터 내로 혈액을 흘려보내서 암세포를 분리하여 선별하는 방법이 있으나, 이러한 종래의 혈중암세포 분리방법들 역시 인력에 의해 수작업으로 진행되기 때문에 분리 과정에서 검체가 오염될 가능성이 있다.On the other hand, methods for isolating or selecting CTCs in the blood include a method of selecting only specific cancer cells using antibodies as a biochemical-based technology, and a method of separating and selecting cancer cells by flowing blood through a membrane-type filter as a physical-based technology. There is a method, but since these conventional CTC separation methods are also performed manually by manpower, there is a possibility that the sample is contaminated during the separation process.

한국공개특허 제10-2021-0014976호(2021.02.10.)Korean Patent Publication No. 10-2021-0014976 (2021.02.10.)

본 발명은 상기한 문제를 해결하기 위해 혈중암세포를 포함하는 미소입자의 분리과정을 자동화함으로써 검체의 오염을 방지하고, 신속하고 정확하게 분리과정을 수행할 수 있는 미소입자 분리장치 및 이를 이용한 미소입자 분리방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.In order to solve the above problems, the present invention is a microparticle separation device capable of preventing sample contamination by automating the separation process of microparticles including CTCs and carrying out the separation process quickly and accurately, and microparticle separation using the same It aims to provide a method.

상기한 목적을 달성하기 위해 본 발명은 튜브가 거치되는 복수의 포켓이 형성되고, 회전가능하도록 구비되어 상기 튜브를 작업 위치로 이송하는 회전스테이지; 복수의 튜브를 보관하는 제1 용기랙과, 상기 포켓 또는 상기 제1 용기랙으로 튜브를 이동시키는 제1 용기 이송부를 구비하는 용기보관 모듈; 상기 회전스테이지에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 개폐시키는 제1 캡핑 모듈과 제2 캡핑 모듈; 상기 튜브에 수용된 유체를 흡입하거나, 상기 튜브에 유체를 분주하는 오토파이펫을 구비하는 유체핸들링 모듈; 상기 튜브 내의 검체를 원심분리하는 원심분리 모듈; 복수의 웰이 구비된 웰플레이트가 거치되고, 자성 비드가 분주된 상기 웰에 자력을 인가하는 마그넷 모듈; 및 투입된 유체로부터 미리 정해진 크기 이상의 입자를 선별하는 선별부를 구비하는 분리 모듈을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention includes a rotation stage having a plurality of pockets in which the tube is mounted and rotatably provided to transport the tube to a working position; A container storage module having a first container rack for storing a plurality of tubes and a first container transfer unit for moving the tubes to the pocket or the first container rack; a first capping module and a second capping module opening and closing the lid of the tube transported by the rotation stage; a fluid handling module having an auto pipette for sucking in the fluid contained in the tube or dispensing the fluid to the tube; a centrifugal separation module for centrifuging the sample in the tube; a magnet module on which a well plate having a plurality of wells is mounted and which applies magnetic force to the wells in which magnetic beads are dispensed; and a separation module including a sorting unit for sorting out particles of a predetermined size or larger from the injected fluid.

이때, 상기 제1 캡핑 모듈은 일측이 상기 회전스테이지의 중심축에 연결되고, 상기 튜브의 몸통을 파지하는 제1 몸통 그립퍼, 상기 제1 몸통 그립퍼에 의해 몸통이 파지된 상기 튜브의 뚜껑을 개폐하는 제1 뚜껑 그립퍼를 구비하고, 상기 제1 뚜껑 그립퍼를 이동시키는 제1 뚜껑 이송부, 및 상기 제1 뚜껑 이송부에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 보관하는 제1 뚜껑랙을 구비하는 것을 특징으로 한다.At this time, the first capping module has one side connected to the central axis of the rotation stage, a first body gripper gripping the body of the tube, and opening and closing the lid of the tube whose body is gripped by the first body gripper. It is characterized in that it includes a first lid gripper, a first lid transfer unit for moving the first lid gripper, and a first lid rack for storing the lid of the tube transported by the first lid transfer unit.

또한, 상기 제2 캡핑 모듈은 상기 튜브의 뚜껑을 개폐하는 제2 뚜껑 그립퍼를 구비하고, 상기 제2 뚜껑 그립퍼를 이동시키는 제2 뚜껑 이송부, 상기 제2 뚜껑 그립퍼에 의해 뚜껑이 파지된 상기 튜브의 몸통을 파지하는 제2 몸통 그립퍼가 전방에 구비되고, 상기 제2 뚜껑 이송부에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 보관하는 제2 뚜껑랙을 구비하는 것을 특징으로 한다.In addition, the second capping module includes a second lid gripper for opening and closing the lid of the tube, a second lid transfer unit for moving the second lid gripper, and a second lid transfer unit for moving the second lid gripper. A second body gripper for gripping the body is provided at the front, and a second lid rack for storing the lid of the tube transported by the second lid transfer unit is provided.

또한, 상기 유체핸들링 모듈은 제1 용기랙 이송부에 의해 이동 가능하도록 구비되고, 복수의 튜브가 수용되는 제2 용기랙을 더 구비하는 것을 특징으로 한다.In addition, the fluid handling module is provided to be movable by the first container rack transfer unit and is characterized in that it further includes a second container rack accommodating a plurality of tubes.

또한, 상기 유체핸들링 모듈은 설정된 온도로 시약을 보관하기 위한 냉각부를 더 구비하는 것을 특징으로 한다.In addition, the fluid handling module is characterized in that it further includes a cooling unit for storing reagents at a set temperature.

또한, 상기 원심분리 모듈은 원심분리 대상 튜브를 이송하는 제2 용기 이송부, 원심분리 대상 튜브를 수용하는 버켓과, 상기 버켓을 회전시키는 모터를 구비하는 원심분리부, 및 원심분리가 완료된 튜브 내의 검체 영상을 촬영하는 카메라와 조명을 구비하고, 상기 영상으로부터 층이 구분된 상기 검체 내용물의 높이를 측정하는 비전부를 구비하는 것을 특징으로 한다.In addition, the centrifugal separation module includes a centrifugal separation unit having a second container transfer unit for transporting the tube to be centrifuged, a bucket for accommodating the tube to be centrifuged, and a motor for rotating the bucket, and a sample in the tube after centrifugation is completed. It is characterized in that it is equipped with a camera and lighting for capturing an image, and a vision unit for measuring the height of the sample contents whose layers are separated from the image.

또한, 상기 마그넷 모듈은 복수의 웰이 구비된 웰플레이트가 거치되고, 제2 용기랙 이송부에 의해 이동되는 제3 용기랙, 상기 웰에 자력을 인가하는 복수의 마그넷바를 구비하는 마그넷부, 및 상기 마그넷바의 외부를 감싸도록 구비되는 복수의 스트립을 구비하는 스트립부를 구비하고, 상기 마그넷부와 상기 스트립부는 승강동작이 가능하도록 구비됨으로써 상기 마그넷이 상기 스트립에 삽입 및 분리되는 것을 특징으로 한다.In addition, the magnet module includes a third container rack on which a well plate having a plurality of wells is mounted and moved by a second container rack transfer unit, a magnet unit having a plurality of magnet bars for applying magnetic force to the wells, and the A strip portion having a plurality of strips provided to surround the outside of the magnet bar is provided, and the magnet portion and the strip portion are provided to enable a lifting operation, so that the magnet is inserted into and separated from the strip.

또한, 상기 선별부는 선별 대상 입자를 포함하는 유체가 투입되는 유체 투입부, 상기 유체 투입부의 하단에 배치되고, 투입된 유체로부터 미리 정해진 크기 보다 작은 크기의 입자를 투과시키는 선별칩이 장착되는 선별칩 고정부, 상기 선별칩 고정부를 지지하고, 내부에 빈 공간이 형성되는 칩셋지지부를 구비하는 것을 특징으로 한다.In addition, the sorting unit includes a fluid inlet into which fluid containing particles to be sorted is injected, and a sorting chip which is disposed at the lower end of the fluid inlet and which transmits particles smaller than a predetermined size from the injected fluid to which a sorting chip is mounted. It is characterized in that it includes a chipset supporting part supporting the government, the sorting chip fixing part, and forming an empty space therein.

또한, 상기 분리 모듈은 상기 칩셋지지부에 연통되어 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하기 위한 시린지를 구비하는 시린지부를 더 구비하는 것을 특징으로 한다.The separation module may further include a syringe unit communicating with the chipset support unit and having a syringe for forming a negative pressure in the chipset support unit.

한편, 본 발명은 상기의 미소입자 분리장치를 이용한 미소입자 분리방법을 제공하며, 상기 방법은 A) 혈액이 분주된 제1 튜브를 상기 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계; B) 상기 오토 파이펫으로 원심분리된 상기 제1 튜브 내의 플라즈마를 흡입하여 제2 튜브에 분주하는 단계; C) 상기 오토 파이펫으로 상기 제1 튜브 내의 PBMC를 흡입하여 제3 튜브에 분주하는 단계; D) PBMC가 수용된 상기 제3 튜브를 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계; E) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브 내의 상층액을 흡입하여 제거하는 단계; F) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브에 버퍼 용액을 분주하여 펠렛을 풀고, 풀어진 펠렛을 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계; G) 상기 오토 파이펫으로 CD45 항체를 흡입하여 상기 제1 웰에 분주하는 단계; H) 상기 오토 파이펫으로 PBS를 흡입하여 상기 웰플레이트의 제2 웰에 분주하고, 상기 제1 웰의 용액을 흡입하여 상기 제2 웰에 분주하는 단계; I) 상기 오토 파이펫으로 비드를 흡입하여 상기 제2 웰에 분주하는 단계; J) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰에 자력을 인가하여 상기 비드와 상기 제2 웰의 용액을 혼합하는 단계; 및 K) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰에서 상기 비드를 분리하여 혈액으로부터 플라즈마 및 백혈구가 제거된 세포를 포함한 미소입자를 분리하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 한다. On the other hand, the present invention provides a microparticle separation method using the microparticle separator, the method comprising the steps of: A) transferring the first tube into which the blood is dispensed to the centrifugal separation module and performing centrifugal separation; B) aspirating the centrifuged plasma in the first tube with the auto pipette and dispensing it to a second tube; C) aspirating the PBMCs in the first tube with the auto pipette and dispensing them into a third tube; D) transferring the third tube containing the PBMCs to a centrifugal separation module to perform centrifugation; E) aspirating and removing the supernatant in the third tube with the auto pipette; F) dispensing a buffer solution into the third tube with the auto pipette to release the pellet, and dispensing the released pellet into the first well of the well plate; G) aspirating the CD45 antibody with the auto pipette and dispensing it into the first well; H) aspirating and dispensing PBS to the second well of the well plate with the auto pipette, and aspirating and dispensing the solution from the first well to the second well; I) aspirating beads with the auto pipette and dispensing them into the second well; J) mixing the bead and the solution in the second well by applying magnetic force to the second well with the magnet module; and K) separating the beads from the second well with the magnet module to separate plasma and microparticles including cells from which leukocytes have been removed from the blood.

한편, 본 발명은 상기의 미소입자 분리장치를 이용한 다른 양태의 미소입자 분리방법을 제공하며, 상기 방법은 A) 혈액이 분주된 제1 튜브를 상기 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계; B) 상기 오토 파이펫으로 원심분리된 상기 제1 튜브 내의 플라즈마를 흡입하여 제2 튜브에 분주하는 단계; C) 상기 오토 파이펫으로 상기 제1 튜브 내의 PBMC를 흡입하여 제3 튜브에 분주하는 단계; D) PBMC가 수용된 상기 제3 튜브를 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계; E) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브 내의 상층액을 흡입하여 제거하는 단계; F) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브에 버퍼 용액을 분주하여 펠렛을 풀고, 풀어진 펠렛을 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계; G) 상기 오토 파이펫으로 CD45 항체를 흡입하여 상기 제1 웰에 분주하는 단계; H1) 상기 제1 웰의 용액을 상기 선별칩에 분주하면서 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계; I1) 상기 오토 파이펫으로 PFA 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 반응시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계; J1) 상기 오토 파이펫으로 워싱 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계; K1) 상기 오토 파이펫으로 혈중암소포용 염색시약을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계; 및 L1) 상기 오토 파이펫으로 워싱 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성함으로써 혈액으로부터 플라즈마 및 백혈구가 제거되고 염색된 혈중암세포를 획득하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 한다.On the other hand, the present invention provides a microparticle separation method of another aspect using the microparticle separation device, the method comprising the steps of A) transferring the first tube into which blood is dispensed to the centrifugal separation module and performing centrifugal separation; ; B) aspirating the centrifuged plasma in the first tube with the auto pipette and dispensing it to a second tube; C) aspirating the PBMCs in the first tube with the auto pipette and dispensing them into a third tube; D) transferring the third tube containing the PBMCs to a centrifugal separation module to perform centrifugation; E) aspirating and removing the supernatant in the third tube with the auto pipette; F) dispensing a buffer solution into the third tube with the auto pipette to release the pellet, and dispensing the released pellet into the first well of the well plate; G) aspirating the CD45 antibody with the auto pipette and dispensing it into the first well; H1) forming a negative pressure in the chipset support part using the syringe part while dispensing the solution in the first well to the sorting chip; I1) dispensing the PFA solution to the sorting chip with the auto pipette, reacting for a predetermined time, and then forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part; J1) dispensing a washing solution to the sorting chip with the auto pipette, incubating the sorting chip for a predetermined time, and then forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part; K1) dispensing the staining reagent for cancer follicles into the screening chip using the auto pipette, incubating the screening chip for a predetermined time, and then forming a negative pressure in the chipset supporting part using the syringe part; and L1) dispensing a washing solution to the sorting chip with the auto pipette, incubating the sorting chip for a predetermined time, and then forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part, thereby removing plasma and leukocytes from the blood and staining the blood. It is characterized in that it comprises the step of obtaining cancer cells.

한편, 본 발명은 상기의 미소입자 분리장치를 이용한 또 다른 양태의 미소입자 분리방법을 제공하며, 상기 방법은 A) 상기 오토 파이펫으로 제1 튜브 내의 혈액을 흡입하여 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계; B) 상기 오토 파이펫으로 제2 튜브 내의 라이시스 시약을 흡입하여 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계; C) 상기 마그넷 모듈로 상기 제1 웰 내의 용액을 혼합하는 단계; D) 상기 오토 파이펫으로 상기 웰플레이트의 상기 제1 웰 내에 있는 용액을 흡입하여 비드가 수용된 상기 웰플레이트의 상기 제2 웰에 분주하는 단계; E) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰 내의 용액을 혼합하는 단계; F) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰의 비드를 워싱 용액이 수용된 상기 웰플레이트의 제3 웰로 이동하여 비드를 분리하는 단계; G) 상기 마그넷 모듈로 상기 제3 웰 내의 용액을 혼합하는 단계; H) 상기 마그넷 모듈로 상기 제3 웰의 비드를 일루션 시약이 수용된 상기 웰플레이트의 제4 웰로 이동하여 비드를 분리하는 단계; I) 상기 마그넷 모듈로 상기 제4 웰 내의 용액을 혼합하는 단계; K) 상기 마그넷 모듈로 상기 제4 웰의 비드를 상기 웰플레이트의 제5 웰로 이동하여 상기 비드를 분리함으로써 혈액으로부터 ctDNA를 분리하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 한다.On the other hand, the present invention provides a microparticle separation method of another aspect using the microparticle separation device, the method comprising: A) sucking blood in a first tube with the auto pipette to obtain a first well of the well plate; Dispensing to; B) aspirating the lysis reagent in the second tube with the auto pipette and dispensing it to the first well of the well plate; C) mixing the solution in the first well with the magnet module; D) aspirating the solution in the first well of the well plate with the auto pipette and dispensing the solution into the second well of the well plate containing beads; E) mixing the solution in the second well with the magnet module; F) separating the beads by moving the beads from the second well to the third well of the well plate containing the washing solution with the magnet module; G) mixing the solution in the third well with the magnet module; H) separating the beads by moving the beads from the third well to the fourth well of the well plate containing the elution reagent with the magnet module; I) mixing the solution in the fourth well with the magnet module; K) isolating ctDNA from blood by moving the bead from the fourth well to the fifth well of the well plate with the magnet module and separating the bead.

본 발명은 혈중암세포를 포함하는 미소입자의 분리과정을 자동화함으로써 검체의 오염을 방지하고, 신속하고 정확하게 분리과정을 수행할 수 있는 효과가 있다.The present invention has an effect of preventing specimen contamination and performing the separation process quickly and accurately by automating the separation process of microparticles including CTCs.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 사시도이다.
도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 사시도로서, 프레임을 제거한 상태를 도시한 도면이다.
도 3은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 평면도이다.
도 4 및 도 5는 용기보관 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 6 및 도 7은 제1 캡핑 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 8 및 도 9는 제2 캡핑 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 10 및 도11은 유체핸들링 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 12 및 도 13은 원심분리 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 14는 원심분리 후 층이 분리된 검체를 포함한 튜브의 단면도이다.
도 15 및 도 16은 마그넷 모듈을 설명하기 위한 도면이다.
도 17 내지 도 20은 분리 모듈을 설명하기 위한 도면이다.1 is a perspective view of a microparticle separator according to a preferred embodiment of the present invention.
2 is a perspective view of a microparticle separator according to a preferred embodiment of the present invention, showing a state in which a frame is removed.
3 is a plan view of a microparticle separator according to a preferred embodiment of the present invention.
4 and 5 are views for explaining the container storage module.
6 and 7 are views for explaining the first capping module.
8 and 9 are views for explaining the second capping module.
10 and 11 are views for explaining the fluid handling module.
12 and 13 are views for explaining a centrifugal separation module.
14 is a cross-sectional view of a tube containing a sample whose layers are separated after centrifugation.
15 and 16 are diagrams for explaining the magnet module.
17 to 20 are views for explaining a separation module.

이하, 본 발명의 실시예를 첨부된 도면들을 참조하여 상세하게 설명한다. 우선 각 도면의 구성 요소들에 참조 부호를 첨가함에 있어서, 동일한 구성 요소들에 대해서는 비록 다른 도면상에 표시되더라도 가능한 한 동일한 부호를 가지도록 하고 있음에 유의해야 한다. 또한, 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다. 또한, 이하에서 본 발명의 바람직한 실시예를 설명할 것이나, 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정하거나 제한되지 않고 당업자에 의해 실시될 수 있음은 물론이다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. First, in adding reference numerals to components of each drawing, it should be noted that the same components have the same numerals as much as possible even if they are displayed on different drawings. In addition, if it is determined that the subject matter of the present invention may be obscured, the detailed description thereof will be omitted. In addition, although preferred embodiments of the present invention will be described below, the technical spirit of the present invention is not limited or limited thereto and can be practiced by those skilled in the art, of course.

도 1은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 사시도이고, 도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 사시도로서 프레임을 제거한 상태를 도시한 도면이며, 도 3은 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치의 평면도이다.1 is a perspective view of a micro particle separator according to a preferred embodiment of the present invention, and FIG. 2 is a perspective view of the micro particle separator according to a preferred embodiment of the present invention, showing a state in which a frame is removed. It is a plan view of the microparticle separator according to a preferred embodiment of the present invention.

도 2 및 도 3에 도시된 바와 같이 본원발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치(10)는 회전스테이지(100), 용기보관 모듈(200), 제1 캡핑 모듈(300), 제2 캡핑 모듈(400), 유체핸들링 모듈(500), 원심분리 모듈(600), 마그넷 모듈(700) 및 분리 모듈(800)을 포함하며, 이들 구성(100,200,300,400,500,600,700,800)은 도 1에 도시된 바와 같이 소정의 프레임(F)에 의해 외부와 격리된 내부 공간에 배치될 수 있다.2 and 3, the microparticle separator 10 according to a preferred embodiment of the present invention includes a rotation stage 100, a container storage module 200, a first capping module 300, and a second capping It includes a module 400, a fluid handling module 500, a centrifugal separation module 600, a magnet module 700 and a separation module 800, and these components 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800 are a predetermined frame as shown in FIG. (F) can be placed in an interior space isolated from the outside.

구체적으로 회전스테이지(100)는 도 3에 도시된 바와 같이 원판의 형태로 형성되고, 모터(112)로부터 회전력을 전달받아 중앙의 축을 중심으로 회전가능하도록 구비된다. Specifically, the rotation stage 100 is formed in the shape of a disc as shown in FIG. 3, and is provided to be rotatable around a central axis by receiving rotational force from the motor 112.

또한, 회전스테이지(100)의 테두리 부분에는 다양한 크기의 튜브(T)가 거치되는 복수의 포켓(110)이 형성된다. 예를 들어 튜브(T)는 용량별로 50㎖, 15㎖, 2㎖ 등의 용량을 갖는 튜브이거나 다양한 용량의 혈액 튜브일 수 있으며, 포켓(110)은 이러한 튜브(T)의 외관에 부합하여 튜브(T)를 꽂아놓아 거치할 수 있는 형태로 형성될 수 있다.In addition, a plurality of pockets 110 in which tubes T of various sizes are placed are formed at the rim of the rotation stage 100 . For example, the tube T may be a tube having a capacity of 50 ml, 15 ml, 2 ml, etc. or a blood tube of various capacities, and the pocket 110 conforms to the appearance of the tube T. It can be formed in a form that can be mounted by inserting (T).

이와 같은 회전스테이지(100)를 가운데 두고 방사상으로 용기보관 모듈(200), 제1 캡핑 모듈(300), 제2 캡핑 모듈(400), 유체핸들링 모듈(500), 원심분리 모듈(600), 마그넷 모듈(700) 및 분리 모듈(800)이 배치되고, 회전스테이지(100)는 각 모듈(200,300,400,500,600,700,800)의 작업 위치로 튜브(T)를 이송한다. The container storage module 200, the first capping module 300, the second capping module 400, the fluid handling module 500, the centrifugal separation module 600, and the magnet are formed radially with the rotation stage 100 in the center. The module 700 and the separation module 800 are disposed, and the rotation stage 100 transfers the tube T to the working position of each module 200, 300, 400, 500, 600, 700, and 800.

도 4 및 도 5는 용기보관 모듈을 설명하기 위한 도면이다.4 and 5 are views for explaining the container storage module.

용기보관 모듈(200)은 복수의 튜브를 보관하는 제1 용기랙(210)과, 포켓(110) 또는 제1 용기랙(210)으로 튜브(T)를 이동시키는 제1 용기 이송부(220)를 구비한다.The container storage module 200 includes a first container rack 210 for storing a plurality of tubes and a first container transfer unit 220 for moving the tube T to the pocket 110 or the first container rack 210. provide

제1 용기랙(210)은 복수의 튜브가 삽입되는 홀을 구비하며, 모터 및 스크류에 의해 X축 방향으로 왕복운동이 가능하도록 구성된다.The first container rack 210 has holes into which a plurality of tubes are inserted, and is configured to be reciprocating in the X-axis direction by a motor and a screw.

제1 용기 이송부(220)는 튜브(T)를 파지하는 용기 그립퍼(222)를 구비하며, 용기 그립퍼(222)는 Y축 및 Z축 방향으로 이동 가능하도록 구성된다.The first container transfer unit 220 includes a container gripper 222 that grips the tube T, and the container gripper 222 is configured to be movable in the Y-axis and Z-axis directions.

이와 같이 구성되는 제1 용기 이송부(220)는 회전스테이지(100)의 포켓(110)에 거치된 튜브(T)를 제1 용기랙(210)으로 이송시키거나, 반대로 제1 용기랙(210)의 튜브(T)를 포켓(110)에 거치시키는 역할을 한다.The first container transfer unit 220 configured as described above transfers the tube T mounted in the pocket 110 of the rotation stage 100 to the first container rack 210, or conversely, the first container rack 210 It serves to mount the tube (T) of the pocket 110.

참고로, 방향을 설명함에 있어서 Y축이라 함은 해당 구성으로부터 대략적으로 회전스테이지(100)의 중심을 향하는 방향으로써 반경방향과 유사한 방향이고, X축 방향은 상기 Y축 방향에 대해 수직한 방향이며, Z축 방향은 상하방향을 의미한다. 이와 같은 X축, Y축, Z축 방향은 이하에서도 동일하게 적용됨을 유의하여야 한다.For reference, in describing the direction, the Y-axis is a direction from the corresponding configuration toward the center of the rotation stage 100, which is similar to the radial direction, and the X-axis direction is a direction perpendicular to the Y-axis direction. , the Z-axis direction means the up-down direction. It should be noted that the X-axis, Y-axis, and Z-axis directions are equally applied below.

도 6 및 도 7은 제1 캡핑 모듈을 설명하기 위한 도면이다.6 and 7 are views for explaining the first capping module.

제1 캡핑 모듈(300)은 제1 뚜껑랙(310), 제1 뚜껑 이송부(320) 및 제1 몸통 그립퍼(330)를 구비한다.The first capping module 300 includes a first lid rack 310, a first lid transfer unit 320 and a first body gripper 330.

구체적으로 제1 뚜껑랙(310)은 제1 뚜껑 이송부(320)에 의해 이송된 튜브(T)의 뚜껑(C)을 보관하는 역할을 하며, 모터 또는 실린더 등에 의해 X축 방향으로 왕복운동이 가능하도록 구성된다.Specifically, the first lid rack 310 serves to store the lid C of the tube T transported by the first lid transfer unit 320, and can be reciprocated in the X-axis direction by a motor or cylinder. is configured to

제1 뚜껑 이송부(320)는 제1 몸통 그립퍼(330)에 의해 몸통이 파지된 튜브(T)의 뚜껑(C)을 파지하고 Z축 방향으로 이동하여 뚜껑(C)을 개폐하는 제1 뚜껑 그립퍼(322)를 구비한다. 이러한 제1 뚜껑 이송부(320)는 Y축 방향으로 제1 뚜껑 그립퍼(322)를 이동시키는 역할을 한다.The first lid transfer unit 320 grips the lid C of the tube T whose body is gripped by the first body gripper 330 and moves in the Z-axis direction to open and close the lid C. (322). The first lid transfer unit 320 serves to move the first lid gripper 322 in the Y-axis direction.

제1 몸통 그립퍼(330)는 튜브(T)의 몸통을 파지함으로써 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 뚜껑(C)을 개폐할 수 있도록 한다.The first body gripper 330 grips the body of the tube T so that the first lid gripper 322 can open and close the lid C.

이러한 제1 몸통 그립퍼(330)는 일측이 회전스테이지(100)의 중심축에 연결되도록 설치되며, 이로 인해 회전스테이지(100)가 회전하는 경우에도 제1 몸통 그립퍼(330)의 위치는 일정하게 유지될 수 있다.One side of the first torso gripper 330 is installed to be connected to the central axis of the rotating stage 100, and thus the position of the first torso gripper 330 remains constant even when the rotating stage 100 rotates. It can be.

도 8 및 도 9는 제2 캡핑 모듈을 설명하기 위한 도면이다.8 and 9 are views for explaining the second capping module.

제2 캡핑 모듈(400)은 제2 뚜껑랙(410)과 제2 뚜껑 이송부(420)를 구비한다.The second capping module 400 includes a second lid rack 410 and a second lid transfer unit 420 .

구체적으로 제2 뚜껑랙(410)은 제2 뚜껑 이송부(420)에 의해 이송된 튜브(T)의 뚜껑(C)을 보관하는 역할을 하며, 전방에는 튜브(T)의 몸통을 파지하는 제2 몸통 그립퍼(412)가 구비된다.Specifically, the second cover rack 410 serves to store the cover (C) of the tube (T) transported by the second cover transfer unit 420, the front of the second cover for gripping the body of the tube (T) A torso gripper 412 is provided.

제2 뚜껑 이송부(420)는 Z축 방향으로 이동하여 튜브(T)의 뚜껑을 개폐하는 제2 뚜껑 그립퍼(422)를 구비한다. 이러한 제2 뚜껑 이송부(420)는 제2 뚜껑 그립퍼(422)를 Y축 방향으로 이동시킨다.The second lid transfer unit 420 includes a second lid gripper 422 that opens and closes the lid of the tube T by moving in the Z-axis direction. The second lid transfer unit 420 moves the second lid gripper 422 in the Y-axis direction.

도 10 및 도11은 유체핸들링 모듈을 설명하기 위한 도면이다.10 and 11 are views for explaining the fluid handling module.

유체핸들링 모듈(500)은 튜브(T)에 수용된 유체를 흡입하거나 튜브(T)에 유체를 분주하는 오토파이펫(510)과, 제1 용기랙 이송부(522)에 의해 X축 방향으로 이동 가능하도록 구비되고 복수의 튜브(T)가 수용되는 제2 용기랙(520)을 구비한다.The fluid handling module 500 is movable in the X-axis direction by the auto pipette 510 for sucking in the fluid contained in the tube T or dispensing the fluid to the tube T, and the first container rack transfer unit 522. It is provided so as to have a plurality of tubes (T) is provided with a second container rack 520 is accommodated.

이때, 오토파이펫(510)은 모터 또는 엑츄에이터 등의 구동수단에 의해 Y축 및 Z축 방향으로 이동가능하도록 구비되어, 제2 용기랙(520)에 보관된 튜브(T)나 용기 또는 회전스테이지(100)에 거치된 튜브(T)의 용액을 흡입하거나 분주할 수 있다.At this time, the auto pipette 510 is provided to be movable in the Y-axis and Z-axis directions by a driving means such as a motor or an actuator, and the tube T stored in the second container rack 520 or the container or the rotating stage The solution of the tube (T) mounted on (100) can be sucked or dispensed.

또한, 제2 용기랙(520)은 50㎖, 15㎖ 등의 다양한 용량을 갖는 튜브 및 저장용기와 1㎖, 5㎖ 등 다양한 용량의 일회용 팁을 보관할 수 있도록 구비된다.In addition, the second container rack 520 is provided to store tubes and storage containers having various capacities such as 50 ml and 15 ml, and disposable tips of various capacities such as 1 ml and 5 ml.

한편, 유체핸들링 모듈(500)은 미리 설정된 온도로 시약을 보관하기 위한 냉각부(530)를 더 구비할 수 있다. Meanwhile, the fluid handling module 500 may further include a cooling unit 530 for storing reagents at a preset temperature.

냉각부(530)는 제2 용기랙(520)에 연결되어 제2 용기랙(520)에 보관된 튜브(T) 또는 용기에 보관된 시약이나 검체 등을 미리 설정된 온도(예를 들어 4℃)로 냉장 보관할 수 있도록 한다.The cooling unit 530 is connected to the second container rack 520, and the tube T stored in the second container rack 520 or the reagent or sample stored in the container is stored at a preset temperature (eg 4 ° C). to keep refrigerated.

또는 냉각부(530)는 별도의 냉장 공간을 구비하고 상기 냉장 공간에 보관된 시약이나 검체 등을 미리 설정된 온도로 냉장 보관하도록 구비될 수 있다.Alternatively, the cooling unit 530 may have a separate refrigerating space and refrigerate reagents or specimens stored in the refrigerating space at a preset temperature.

유체핸들링 모듈(500)은 오토파이펫(510)의 이동경로 상에 수거통(540)을 구비할 수 있으며, 수거통(540)에는 사용이 완료된 일회용 팁이 버려진다.The fluid handling module 500 may include a collection container 540 on the movement path of the auto pipette 510, and used disposable tips are discarded in the collection container 540.

도 12 및 도 13은 원심분리 모듈을 설명하기 위한 도면이고, 도 14는 원심분리 후 층이 분리된 검체를 포함한 튜브의 단면도이다.12 and 13 are views for explaining the centrifugal separation module, and FIG. 14 is a cross-sectional view of a tube containing a sample whose layers are separated after centrifugation.

원심분리 모듈(600)은 제2 용기 이송부(610), 원심분리부(620) 및 비전부(640)를 구비한다.The centrifugal separation module 600 includes a second container transfer unit 610 , a centrifugal separation unit 620 and a vision unit 640 .

구체적으로 제2 용기 이송부(610)는 회전스테이지(100), 원심분리부(620) 및 비전부(640) 사이에서 원심분리 대상 튜브(T) 또는 원심분리가 완료된 튜브(T)를 이송하는 역할을 한다. 이러한 제2 용기 이송부(610)는 튜브(T)를 파지하는 그립퍼를 구비하며, Y축 및 Z축 방향으로 움직여 튜브(T)를 이송시킨다.Specifically, the second container transfer unit 610 serves to transfer the centrifugal separation target tube T or the centrifuged tube T between the rotation stage 100, the centrifugal separation unit 620, and the vision unit 640. do The second container transfer unit 610 includes a gripper for gripping the tube T, and transfers the tube T by moving in the Y-axis and Z-axis directions.

원심분리부(620)는 원심분리 대상 튜브(T)를 수용하는 버켓(626)과 버켓(626)을 회전시키는 모터(628)를 구비하고, 버켓(626)은 외부와 격리된 내부 공간을 형성하는 하우징(622)의 내부에 배치된다.The centrifugal separator 620 includes a bucket 626 accommodating the tube T to be centrifuged and a motor 628 rotating the bucket 626, and the bucket 626 forms an inner space isolated from the outside. It is disposed inside the housing 622 to be.

또한, 하우징(622)의 상부에는 개폐가능한 도어(624)가 설치되어 원심분리가 진행되는 동안 하우징(622) 내부가 밀폐된 상태가 유지되도록 한다.In addition, an openable and openable door 624 is installed on the top of the housing 622 so that the inside of the housing 622 remains sealed while centrifugation is in progress.

비전부(640)는 원심분리가 완료된 튜브(T)가 거치되고 거치된 튜브(T)를 회전시키는 튜브 회전부(642)와, 원심분리가 완료된 튜브(T) 내의 검체 영상을 촬영하는 카메라(646) 및 조명(644)을 구비한다.The vision unit 640 includes a tube rotating unit 642 that rotates the tube T after centrifugal separation is placed and a camera 646 that captures an image of a sample in the tube T after centrifugation. ) and lighting 644.

원심분리부(620)에 원심분리가 완료된 튜브(T) 내의 검체 내용물은 도 14에 도시된 바와 같이 구분된 층을 형성하게 되는데, 비전부(640)는 튜브 회전부(642)에 거치된 튜브(T)를 회전시키면서 카메라(646)로 튜브(T) 내의 검체 영상을 획득하고, 획득한 영상으로부터 층이 구분된 검체 내용물의 높이를 측정한다.The sample contents in the tube T after centrifugation in the centrifugal separation unit 620 form separated layers as shown in FIG. 14, and the vision unit 640 is a tube ( T) is rotated, the camera 646 acquires an image of the specimen in the tube T, and from the obtained image, the height of the contents of the specimen divided into layers is measured.

비전부(640)에 의해 측정된 튜브(T) 내의 검체 내용물 높이에 대한 정보는 유체핸들링 모듈(500)로 전달되고, 오토 파이펫(510)은 상기 정보를 기초로 원심분리가 완료된 튜브(T) 내의 구분된 내용물 즉, 말초 혈액 단핵세포(PBMC: Peripheral Blood Mononuclear Cell), 플라즈마(plasma), 적혈구(RBC: Red Blood Cell)를 따로 흡입하여 처리하게 된다.Information on the height of the sample contents in the tube T measured by the vision unit 640 is transmitted to the fluid handling module 500, and the auto pipette 510, based on the information, the centrifuged tube T ), that is, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), plasmas, and red blood cells (RBCs) are separately inhaled and processed.

도 15 및 도 16은 마그넷 모듈을 설명하기 위한 도면이다.15 and 16 are diagrams for explaining the magnet module.

마그넷 모듈(700)은 제3 용기랙(710), 마그넷부(720) 및 스트립부(740)를 구비하며, 유체핸들링 모듈(500)에 인접하여 배치된다.The magnet module 700 includes a third container rack 710, a magnet part 720 and a strip part 740, and is disposed adjacent to the fluid handling module 500.

구체적으로 제3 용기랙(710)은 복수의 웰이 구비된 웰플레이트(712)가 거치되고, 제2 용기랙 이송부(714)에 의해 직선왕복운동하도록 구비된다.Specifically, in the third container rack 710, a well plate 712 having a plurality of wells is mounted thereon, and linearly reciprocated by the second container rack transfer unit 714.

이때, 웰플레이트(712)는 24 딥 웰 플레이트(24 Deep Well Plate) 일 수 있으나, 웰플레이트(712)의 종류나 형태는 이에 국한되지 않고 필요에 따라 변경될 수 있다.In this case, the well plate 712 may be a 24 deep well plate, but the type or shape of the well plate 712 is not limited thereto and may be changed as needed.

이때, 제2 용기랙 이송부(714)는 오토파이펫(510)의 Y축 방향으로의 동선에 대해 수직한 방향으로 제3 용기랙(710)을 이동시키도록 구비된다.At this time, the second container rack transfer unit 714 is provided to move the third container rack 710 in a direction perpendicular to the movement line of the auto pipette 510 in the Y-axis direction.

제2 용기랙 이송부(714)에 의해 오토파이펫(510)의 작업 영역으로 제3 용기랙(710)이 이송되면, 오토파이펫(510)에 의해 웰플레이트(712)의 웰로 검체 및 시약 등의 용액이 분주된다.When the third container rack 710 is transferred to the working area of the auto pipette 510 by the second container rack transfer unit 714, samples and reagents, etc. are transferred to the wells of the well plate 712 by the auto pipette 510. solution is dispensed.

마그넷부(720)는 하부에 상하방향으로 길게 형성된 복수의 마그넷바(722)를 구비하며, Z축 방향으로 승강동작이 가능하도록 구비된다.The magnet part 720 has a plurality of magnet bars 722 formed long in the vertical direction at the bottom, and is provided to enable a lifting operation in the Z-axis direction.

스트립부(740)는 마그넷바(722)의 외부를 감싸도록 구비되는 복수의 스트립(742)을 구비하고, Z축 방향으로 승강동작이 가능하도록 구비된다.The strip unit 740 includes a plurality of strips 742 provided to cover the outside of the magnet bar 722, and is provided to enable a lifting operation in the Z-axis direction.

이처럼 마그넷부(720)와 스트립부(740)는 승강동작이 가능하도록 구비됨으로써 마그넷(722)이 스트립(742)에 삽입 및 분리되도록 작동된다.As described above, the magnet part 720 and the strip part 740 are provided to enable a lifting operation, so that the magnet 722 is inserted into and separated from the strip 742 .

마그넷부(720)는 하강한 상태에서 웰플레이트(712)의 웰에 자력을 인가하도록 구성되며, 이때 마그넷바(722)는 스트립(742)에 삽입된 상태에 있게 된다.The magnet part 720 is configured to apply magnetic force to the well of the well plate 712 in a lowered state, and at this time, the magnet bar 722 is inserted into the strip 742.

도 17 내지 도 20은 분리 모듈을 설명하기 위한 도면이다.17 to 20 are views for explaining a separation module.

분리모듈(800)은 유체핸들링 모듈(500)에 인접하게 배치되며, 오토파이펫(510)에 의해 투입된 유체로부터 분리대상 입자를 분리하는 역할을 한다.The separation module 800 is disposed adjacent to the fluid handling module 500 and serves to separate particles to be separated from the fluid introduced by the auto pipette 510 .

이러한 분리모듈(800)은 투입된 유체로부터 미리 정해진 크기 이상의 입자, 예를 들어 혈중암세포와 같은 분리대상 입자를 선별하는 선별부(810)와, 선별부(810)에 음압을 가하여 투입된 유체가 투과될 수 있도록하는 시린지부(830)를 구비한다.The separation module 800 includes a sorting unit 810 that selects particles of a predetermined size or larger from the injected fluid, for example, particles to be separated, such as blood cancer cells, and a negative pressure applied to the sorting unit 810 so that the injected fluid can pass through. It is provided with a syringe unit 830 to enable.

구체적으로 선별부(810)는 선별 대상 입자를 포함하는 유체가 투입되는 유체 투입부(812)와, 유체 투입부(812)의 하단에 배치되고 투입된 유체로부터 미리 정해진 크기보다 작은 크기의 입자를 투과시키는 선별칩(816)이 장착되는 선별칩 고정부(818), 및 선별칩 고정부(818)를 지지하고 내부에 유체가 수용될 수 있도록 빈 공간이 형성되는 칩셋지지부(820)를 구비한다.Specifically, the sorting unit 810 is disposed at the lower end of the fluid inlet 812 into which the fluid containing the particles to be sorted is injected, and particles having a size smaller than a predetermined size from the injected fluid permeate the fluid inlet 812 A sorting chip fixing part 818 to which the sorting chip 816 is mounted, and a chipset support part 820 supporting the sorting chip fixing part 818 and forming an empty space therein to accommodate fluid.

이때, 선별칩(816)은 도 19에 도시된 바와 같이 얇은 박막 구조물의 형태를 가지며, 1~20㎛ 크기의 홀이 복수개 천공되어 특정 크기 이상의 입자만을 선별할 수 있도록 구성된다.At this time, the sorting chip 816 has the form of a thin film structure as shown in FIG. 19, and is configured to select only particles of a specific size or larger by punching a plurality of holes having a size of 1 to 20 μm.

또한, 칩셋지지부(820)에는 시린지부(830)에 연통되는 배관용 아답터(814)가 설치된다. 또한, 칩셋지지부(820)에는 유체투입부(812)를 탈착시키기 위한 칩셋고정부(822)가 구비된다.In addition, a pipe adapter 814 communicating with the syringe unit 830 is installed in the chipset support unit 820 . In addition, a chipset fixing part 822 for attaching and detaching the fluid inlet 812 is provided in the chipset support part 820 .

시린지부(830)는 칩셋지지부(820)에 연통되어 칩셋지지부(820)에 음압을 형성하기 위한 시린지(832)를 구비한다. 시린지(832)에는 배관용 아답터(834)가 설치되고, 이는 칩셋지지부(820)의 배관용 아답터(814)에 연통된다.The syringe unit 830 communicates with the chipset support unit 820 and includes a syringe 832 for forming a negative pressure in the chipset support unit 820 . A pipe adapter 834 is installed in the syringe 832 and communicates with the pipe adapter 814 of the chipset support 820 .

시린지부(830)는 시린지(832)의 내부에 배치되는 피스톤을 승강시키는 모터 또는 액추에이터를 구비할 수 있으며, 피스톤의 하강 동작에 의해 시린지(832)에 음압이 형성되고 그 결과 시린지(832)에 연통되는 칩셋지지부(820)에 음압이 가해지게 된다.The syringe unit 830 may include a motor or an actuator that lifts a piston disposed inside the syringe 832, and a negative pressure is formed in the syringe 832 by the lowering operation of the piston, resulting in a negative pressure in the syringe 832. A negative pressure is applied to the communicating chipset support 820 .

이하, 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치(10)를 이용하여 미소입자를 분리하는 방법에 대해 설명한다.Hereinafter, a method for separating microparticles using the microparticle separator 10 according to a preferred embodiment of the present invention will be described.

1) 용기보관 모듈(200)의 제1 용기랙(210)에 있는 혈액이 수용된 혈액 튜브를 제1 용기 이송부(220)의 그립퍼(222)로 파지하여 회전스테이지(100)의 혈액 튜브용 포켓(110)에 거치시킨다.1) The blood tube containing the blood in the first container rack 210 of the container storage module 200 is gripped by the gripper 222 of the first container transfer unit 220, and the blood tube pocket of the rotation stage 100 ( 110).

2) 용기보관 모듈(200)의 제1 용기랙(210)에 있는 50㎖ 튜브를 제1 용기 이송부(220)의 그립퍼(222)로 파지하여 상기 혈액 튜브와 동일한 작업 선상에 있는 회전스테이지(100)의 50㎖ 튜브용 포켓(110)에 거치시킨다.2) The 50 ml tube in the first container rack 210 of the container storage module 200 is gripped by the gripper 222 of the first container transfer unit 220, and the rotation stage 100 on the same working line as the blood tube ) in the pocket 110 for a 50 ml tube.

3) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 이동하고, 제1 몸통 그립퍼(330)에 의해 몸통이 파지된 50㎖ 튜브의 뚜껑을 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 개방시킨다. 이때, 개방된 뚜껑은 제1 뚜껑 이송부(320)에 의해 옮겨져 제1 뚜껑랙(310)에 보관될 수 있다.3) The rotating stage 100 is rotated to move to the working position of the first capping module 300, and the lid of the 50 ml tube whose body is gripped by the first body gripper 330 is held by the first lid gripper 322. opens up At this time, the opened lid may be moved by the first lid transfer unit 320 and stored in the first lid rack 310.

4) 회전스테이지(100)가 회전하여 제2 캡핑 모듈(400)의 작업 위치로 이동하고, 제2 몸통 그립퍼(412)에 의해 몸통이 파지된 혈액 튜브의 뚜껑을 제2 뚜껑 그립퍼(422)가 개방시킨다. 이때, 개방된 뚜껑은 제2 뚜껑 이송부(420)에 의해 옮겨져 제2 뚜껑랙(410)에 보관될 수 있다.4) The rotating stage 100 rotates and moves to the working position of the second capping module 400, and the second lid gripper 422 holds the lid of the blood tube whose body is gripped by the second body gripper 412. open up At this time, the opened lid may be moved by the second lid transfer unit 420 and stored in the second lid rack 410.

5) 회전스테이지(100)가 회전하여 혈액 튜브와 50㎖ 튜브를 유체핸들링 모듈(500)의 작업 위치로 이동시킨다.5) The rotation stage 100 rotates to move the blood tube and the 50 ml tube to the working position of the fluid handling module 500.

6) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 혈액 튜브 내의 혈액을 흡입하여 50㎖ 튜브에 분주한다.6) The blood in the blood tube is sucked with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500 and dispensed into a 50 ml tube.

7) 회전스테이지(100)가 회전하여 제2 캡핑 모듈(400)의 작업 위치로 이동하고, 제2 몸통 그립퍼(412)가 혈액 튜브의 몸통을 파지한 상태에서 제2 뚜껑 그립퍼(422)가 뚜껑으로 혈액 튜브를 폐쇄시킨다.7) The rotation stage 100 rotates and moves to the working position of the second capping module 400, and the second lid gripper 422 moves the lid while the second body gripper 412 grips the body of the blood tube. close the blood tube.

8) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 이동하고, 제1 몸통 그립퍼(330)가 50㎖ 튜브의 몸통을 파지한 상태에서 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 뚜껑으로 50㎖ 튜브를 폐쇄시킨다.8) The rotation stage 100 rotates and moves to the working position of the first capping module 300, and the first lid gripper 322 moves in a state where the first body gripper 330 grips the body of the 50 ml tube. Close the 50 ml tube with a cap.

9) 회전스테이지(100)가 회전하여 용기보관 모듈(200)로 이동하고, 제1 용기 이송부(220)가 혈액 튜브를 제1 용기랙(210)의 원래의 위치로 이동시킨다.9) The rotating stage 100 rotates and moves to the container storage module 200, and the first container transfer unit 220 moves the blood tube to the original position of the first container rack 210.

10) 회전스테이지(100)가 회전하여 혈액이 수용된 50㎖ 튜브를 원심분리 모듈(600)의 작업 위치로 이동시킨다.10) The rotating stage 100 rotates to move the 50 ml tube containing the blood to the working position of the centrifugal separation module 600.

11) 원심분리 모듈(600)의 제2 용기 이송부(610)가 혈액이 수용된 50㎖ 튜브를 이동시켜 버켓(626)에 배치시킨다.11) The second container transfer unit 610 of the centrifugal separation module 600 moves the 50 ml tube containing the blood and places it in the bucket 626.

12) 하우징(622)의 도어(624)를 폐쇄한 다음 모터(628)를 작동시켜 50㎖ 튜브에 수용된 혈액에 대한 원심분리를 진행한다.12) After closing the door 624 of the housing 622, the motor 628 is operated to centrifuge the blood contained in the 50 ml tube.

13) 원심분리 후, 제2 용기 이송부(610)가 50㎖ 튜브를 파지하고, 50㎖ 튜브를 버켓(626)에서 꺼내어 비전부(640)의 튜브 회전부(642)에 거치시킨다.13) After centrifugation, the second container transfer unit 610 holds the 50 ml tube, takes the 50 ml tube out of the bucket 626, and places it on the tube rotation unit 642 of the vision unit 640.

14) 비전부(640)의 조명(644)을 켜고 튜브 회전부(642)를 통해 50㎖ 튜브를 회전시키면서 카메라(646)로 50㎖ 튜브의 영상을 획득하여, 50㎖ 튜브 내에서 층상으로 구분된 검체 위치 및 높이를 측정한다.14) Turn on the illumination 644 of the vision unit 640 and acquire an image of the 50ml tube with the camera 646 while rotating the 50ml tube through the tube rotation unit 642, and separate layers within the 50ml tube. Measure the position and height of the specimen.

15) 원심분리 모듈(600)의 제2 용기 이송부(610)가 50㎖ 튜브를 회전스테이지(100)의 50㎖ 튜브용 포켓(110)에 거치시키고, 회전스테이지(100)가 회전하여 50㎖ 튜브를 용기보관 모듈(200)의 작업 위치로 이동시킨다.15) The second vessel transfer unit 610 of the centrifugal separation module 600 places the 50 ml tube in the 50 ml tube pocket 110 of the rotation stage 100, and the rotation stage 100 rotates to remove the 50 ml tube. is moved to the working position of the container storage module 200.

16) 용기보관 모듈(200)의 제1 용기랙(210)에 있는 2㎖ 튜브를 제1 용기 이송부(220)로 파지하여, 혈액이 수용된 50㎖ 튜브와 동일한 작업 선상에 있는 회전스테이지(100)의 2㎖ 튜브용 포켓(110)에 거치시킨다.16) The 2ml tube in the first container rack 210 of the container storage module 200 is gripped by the first container transfer unit 220, and the rotation stage 100 is on the same working line as the 50ml tube containing blood It is placed in the pocket 110 for a 2 ml tube of

17) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 이동하고, 제1 몸통 그립퍼(330)에 의해 몸통이 파지된 50㎖ 튜브의 뚜껑을 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 개방시킨다. 17) The rotation stage 100 rotates and moves to the working position of the first capping module 300, and the cap of the 50 ml tube whose body is gripped by the first body gripper 330 is moved to the first capping module 322. opens up

18) 회전스테이지(100)가 회전하여 제2 캡핑 모듈(400)의 작업 위치로 이동하고, 제2 몸통 그립퍼(412)에 의해 몸통이 파지된 2㎖ 튜브의 뚜껑을 제2 뚜껑 그립퍼(422)가 개방시킨다. 18) The rotation stage 100 rotates and moves to the working position of the second capping module 400, and the lid of the 2 ml tube whose body is gripped by the second body gripper 412 is held by the second lid gripper 422. opens up

19) 회전스테이지(100)가 회전하여 50㎖ 튜브와 2㎖ 튜브를 유체핸들링 모듈(500)의 작업 위치로 이동시킨다.19) The rotating stage 100 rotates to move the 50 ml tube and the 2 ml tube to the working position of the fluid handling module 500.

20) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 50㎖ 튜브 내의 플라즈마를 흡입하여 2㎖ 튜브에 분주한다.20) Aspirate the plasma in the 50 ml tube with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500 and dispense it into the 2 ml tube.

21) 회전스테이지(100)가 회전하여 제2 캡핑 모듈(400)의 위치로 이동하고, 제2 몸통 그립퍼(412)가 2㎖ 튜브의 몸통을 파지한 상태에서 제2 뚜껑 그립퍼(422)가 뚜껑으로 2㎖ 튜브를 폐쇄시킨다.21) The rotation stage 100 rotates and moves to the position of the second capping module 400, and the second lid gripper 422 holds the lid while the second body gripper 412 grips the body of the 2 ml tube. Close the 2 ml tube with

22) 회전스테이지(100)가 회전하여 용기보관 모듈(200)의 작업 위치로 플라즈마가 수용된 2㎖ 튜브와 50㎖ 튜브를 이동시키고, 제1 용기 이송부(220)가 2㎖ 튜브를 제1 용기랙(210)으로 이송한다(혈액으로부터 플라즈마를 분리하여 별도 보관).22) The rotating stage 100 rotates to move the 2ml tube and the 50ml tube containing the plasma to the working position of the container storage module 200, and the first container transfer unit 220 moves the 2ml tube to the first container rack Transfer to 210 (separate plasma from blood and store separately).

23) 용기보관 모듈(200)의 제1 용기랙(210)에 있는 15㎖ 튜브를 제1 용기 이송부(220)로 파지하여, 혈액이 수용된 50㎖ 튜브와 동일한 작업 선상에 있는 회전스테이지(100)의 15㎖ 튜브용 포켓(110)에 거치시킨다.23) The 15 ml tube in the first container rack 210 of the container storage module 200 is gripped by the first container transfer unit 220, and the rotation stage 100 is on the same working line as the 50 ml tube containing blood It is placed in the pocket 110 for a 15 ml tube of

24) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 이동하고, 제1 몸통 그립퍼(330)에 의해 몸통이 파지된 15㎖ 튜브의 뚜껑을 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 개방시킨다. 이때, 개방된 뚜껑은 제1 뚜껑 이송부(320)에 의해 옮겨져 제1 뚜껑랙(310)에 보관될 수 있다.24) The rotating stage 100 is rotated to move to the working position of the first capping module 300, and the lid of the 15 ml tube whose body is gripped by the first body gripper 330 is held by the first lid gripper 322. opens up At this time, the opened lid may be moved by the first lid transfer unit 320 and stored in the first lid rack 310.

25) 회전스테이지(100)가 회전하여 혈액이 수용된 50㎖ 튜브와 15㎖ 튜브를 유체핸들링 모듈(500)의 작업 위치로 이동시킨다.25) The rotation stage 100 rotates to move the 50 ml tube and the 15 ml tube containing blood to the working position of the fluid handling module 500.

26) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 혈액을 담고 있는 50㎖ 튜브 내의 PBMC를 흡입하여 15㎖ 튜브에 분주한다.26) The PBMC in the 50 ml tube containing blood is aspirated with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500 and dispensed into a 15 ml tube.

27) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 15㎖ 튜브를 이동시키고, 제1 몸통 그립퍼(330)가 15㎖ 튜브의 몸통을 파지한 상태에서 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 뚜껑으로 15㎖ 튜브를 폐쇄시킨다.27) The rotation stage 100 rotates to move the 15 ml tube to the working position of the first capping module 300, and the first lid gripper while the first body gripper 330 grips the body of the 15 ml tube 322 closes the 15 ml tube with a lid.

28) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 50㎖ 튜브를 이동시키고, 제1 몸통 그립퍼(330)가 50㎖ 튜브의 몸통을 파지한 상태에서 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 뚜껑으로 50㎖ 튜브를 폐쇄시킨다.28) The rotation stage 100 rotates to move the 50 ml tube to the working position of the first capping module 300, and the first cap gripper 330 grips the body of the 50 ml tube while the first body gripper 330 holds the body of the 50 ml tube. 322 closes the 50 ml tube with a cap.

29) 회전스테이지(100)가 회전하여 용기보관 모듈(200)의 작업 위치로 50㎖ 튜브를 이동시키고, 제1 용기 이송부(220)가 혈액이 수용된 50㎖ 튜브를 파지하여 제1 용기랙(210)의 원래 위치로 이송한다.29) The rotation stage 100 rotates to move the 50 ml tube to the working position of the container storage module 200, and the first container transfer unit 220 grips the 50 ml tube in which the blood is accommodated so that the first container rack 210 ) to its original position.

30) 회전스테이지(100)가 회전하여 PBMC 가 수용된 15㎖ 튜브를 원심분리 모듈(600)의 작업 위치로 이동시킨다.30) The rotation stage 100 rotates to move the 15 ml tube containing the PBMCs to the working position of the centrifugal separation module 600.

31) 원심분리 모듈(600)의 제2 용기 이송부(610)가 PBMC가 수용된 15㎖ 튜브를 이동시켜 버켓(626)에 배치시킨다.31) The second container transfer unit 610 of the centrifugal separation module 600 moves the 15 ml tube containing the PBMC and places it in the bucket 626.

32) 하우징(622)의 도어(624)를 폐쇄한 다음 모터(628)를 작동시켜 15㎖ 튜브에 수용된 PBMC에 대한 원심분리를 진행한다.32) Close the door 624 of the housing 622 and operate the motor 628 to centrifuge the PBMCs contained in the 15 ml tube.

33) 원심분리 후, 제2 용기 이송부(610)가 15㎖ 튜브를 파지하고, 15㎖ 튜브를 버켓(626)에서 꺼내어 비전부(640)의 튜브 회전부(642)에 거치시킨다.33) After centrifugation, the second container transfer unit 610 holds the 15 ml tube, takes the 15 ml tube out of the bucket 626, and places it on the tube rotation unit 642 of the vision unit 640.

34) 비전부(640)의 조명(644)을 켜고 튜브 회전부(642)를 통해 15㎖ 튜브를 회전시키면서 카메라(646)로 15㎖ 튜브의 영상을 획득하여, 15㎖ 튜브 내에서 층상으로 구분된 검체 위치 및 높이를 측정한다.34) Turn on the illumination 644 of the vision unit 640 and acquire an image of the 15 ml tube with the camera 646 while rotating the 15 ml tube through the tube rotation unit 642, and Measure the position and height of the specimen.

35) 원심분리 모듈(600)의 제2 용기 이송부(610)가 15㎖ 튜브를 회전스테이지(100)의 15㎖ 튜브용 포켓(110)에 거치시킨다.35) The second container transfer unit 610 of the centrifugal separation module 600 places the 15 ml tube in the pocket 110 for the 15 ml tube of the rotation stage 100.

36) 회전스테이지(100)가 회전하여 제1 캡핑 모듈(300)의 작업 위치로 이동하고, 제1 몸통 그립퍼(330)에 의해 몸통이 파지된 15㎖ 튜브의 뚜껑을 제1 뚜껑 그립퍼(322)가 개방시킨다. 이때, 개방된 뚜껑은 제1 뚜껑 이송부(320)에 의해 옮겨져 제1 뚜껑랙(310)에 보관될 수 있다.36) The rotating stage 100 rotates and moves to the working position of the first capping module 300, and the lid of the 15 ml tube whose body is gripped by the first body gripper 330 is held by the first lid gripper 322. opens up At this time, the opened lid may be moved by the first lid transfer unit 320 and stored in the first lid rack 310.

37) 회전스테이지(100)가 회전하여 15㎖ 튜브를 유체핸들링 모듈(500)의 작업 위치로 이동시킨다.37) The rotation stage 100 rotates to move the 15 ml tube to the working position of the fluid handling module 500.

38) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 세포 등을 포함하는 펠렛(pellet)을 제외한 상층액을 모두 흡입하여 제거한다.38) All of the supernatant except for the pellet containing cells is aspirated and removed with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500.

39) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 제2 용기랙(520)의 용기에 보관된 버퍼 용액을 흡입하여 15㎖ 튜브에 분주하여 펠렛을 풀어준다.39) With the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, the buffer solution stored in the container of the second container rack 520 is sucked and dispensed into a 15 ml tube to release the pellet.

40) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 풀어진 펠렛을 흡입하여40) Suction the released pellet with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500

마그넷 모듈(700)에 구비된 웰플레이트(712)의 제1 웰에 분주한다.It is dispensed into the first well of the well plate 712 provided in the magnet module 700.

41) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 제2 용기랙(520)의 용기에 보관된 CD45 항체를 흡입하여 웰플레이트(712)의 제1 웰에 분주한다.41) With the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, the CD45 antibody stored in the container of the second container rack 520 is aspirated and dispensed into the first well of the well plate 712.

42) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 제2 용기랙(520)의 용기에 보관된 PBS를 흡입하여 웰플레이트(712)의 제2 웰에 분주한다.42) With the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, the PBS stored in the container of the second container rack 520 is aspirated and dispensed into the second well of the well plate 712.

43) 동일한 파이펫 팁이 장착된 상태에서 오토파이펫(510)이 웰플레이트(712)의 제1 웰에 수용된 용액을 흡입하여 웰플레이트(712)의 제2 웰에 분주 및 혼합하고, 일정 시간동안 반응시킨다.43) With the same pipette tip attached, the auto pipette 510 aspirates the solution contained in the first well of the well plate 712, dispenses and mixes it into the second well of the well plate 712, and mixes it for a certain time react while

44) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 제2 용기랙(520)의 용기에 보관된 자성 비드를 흡입하여 웰플레이트(712)의 제2 웰에 분주하고 일정 시간동안 반응 시킨다.44) Suck the magnetic beads stored in the container of the second container rack 520 with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, dispense them into the second well of the well plate 712, and react for a certain period of time. .

45) 마그넷 모듈(700)의 마그넷바(722)를 스트립(742) 내부로 이동하고, 마그넷바(722)와 스트립(742)을 동시에 업/다운시키는 동작을 반복하여, 자성 비드와 제2 웰 내부의 용액을 혼합시킨다.45) Move the magnet bar 722 of the magnet module 700 to the inside of the strip 742, and repeat the operation of simultaneously raising and lowering the magnet bar 722 and the strip 742 to obtain a magnetic bead and a second well. Mix the solution inside.

46) 마그넷 모듈(700)의 마그넷바(722)와 스트립(742)을 들어올려서 웰플레이트(712)의 제3 웰로 이동하고, 마그넷바(722)를 스트립(742)으로부터 분리시킨 후 스트립(742)만을 반복적으로 업/다운시켜 스트립(742)에 붙어 있는 자성 비드가 제3 웰 내부로 분리되어 떨어지도록 한다.46) The magnet bar 722 and the strip 742 of the magnet module 700 are lifted up and moved to the third well of the well plate 712, the magnet bar 722 is separated from the strip 742, and then the strip 742 ) is repeatedly up/down so that the magnetic beads attached to the strip 742 are separated and fall into the third well.

이와 같은 과정을 수행함으로써 혈액에서 플라즈마와 백혈구가 제거된 세포를 포함하는 미소입자만을 분리할 수 있다. 바람직하게 상기 41) 내지 46) 단계는 3~5회 반복함으로써 미소입자의 분리효율을 높일 수 있다.By performing such a process, only microparticles including cells from which plasma and leukocytes have been removed can be separated from blood. Preferably, the separation efficiency of the microparticles can be increased by repeating the steps 41) to 46) 3 to 5 times.

한편, 상기 41) 단계를 수행한 후 웰플레이트(712)의 제1 웰에 남아있는 용액은 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 흡입하여 15㎖ 튜브에 분주하고 보관용 배지를 추가로 분주하여 보관용으로 사용할 수 있다. 이렇게 보관된 용액은 혈중암세포 배양 또는 NGS 분석을 통해 다양한 연구 및 실험에 사용할 수 있다.Meanwhile, after performing step 41), the solution remaining in the first well of the well plate 712 is sucked into the auto pipette 510 of the fluid handling module 500 and dispensed into a 15 ml tube, and a medium for storage is collected. It can be further aliquoted and used for storage. The stored solution can be used for various studies and experiments through CTC culture or NGS analysis.

또는 상기 41) 단계를 수행한 후 웰플레이트(712)의 제1 웰에 남아있는 용액을 활용하여 혈중암세포를 분리하는 절차를 수행할 수 있다. 혈중암세포를 분리하는 절차는 다음과 같이 수행될 수 있다.Alternatively, after performing step 41), a procedure for separating CTCs may be performed using the solution remaining in the first well of the well plate 712. The procedure for isolating CTCs can be performed as follows.

47) 상기 41) 단계를 수행한 후, 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 웰플레이트(712)의 제1 웰에 수용된 용액을 흡입하고 분리 모듈(800)에 구비된 선별부(810)의 선별칩(816)에 분주한다. 이어서, 시린지부(830)를 통해 칩셋지지부(820)에 음압을 가하여 선별 대상인 혈중암세포만이 선별칩(816)에 남도록 하고 나머지 액체는 선별칩(816)을 투과하여 아래로 빠져나가게 한다.47) After performing step 41), the solution contained in the first well of the well plate 712 is sucked with the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, and the sorting unit provided in the separation module 800 Dispensing to the sorting chip 816 of (810). Next, negative pressure is applied to the chipset support 820 through the syringe 830 so that only CTCs to be sorted remain on the sorting chip 816 and the remaining liquid passes through the sorting chip 816 and escapes downward.

48) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 파라포름알데히드(PFA: Paraformaldehyde) 용액을 흡입하고 선별칩(816)에 분주하여 일정 시간 동안 파라포름알데히드 용액과 혈중암세포를 반응시킨다. 일정 시간 후에 시린지부(830)를 통해 칩셋지지부(820)에 음압을 가하여 파라포름알데히드 용액에 반응된 혈중암세포는 선별칩(816)에 남도록 하고 나머지 액체는 선별칩(816)을 투과하여 아래로 빠져나가게 한다.48) The paraformaldehyde (PFA) solution is sucked into the auto pipette 510 of the fluid handling module 500 and dispensed to the sorting chip 816 to react the paraformaldehyde solution with the CTCs for a certain period of time. After a certain period of time, negative pressure is applied to the chipset support part 820 through the syringe part 830 so that the CTCs reacted with the paraformaldehyde solution remain on the sorting chip 816, and the remaining liquid passes through the sorting chip 816 and goes down. let it go out

49) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 TBS-T 워싱(washing) 용액을 흡입하고 선별칩(816)에 분주하여 일정 시간 동안 인큐베이션(incubation)시킨다. 일정 시간 후에 시린지부(830)를 통해 칩셋지지부(820)에 음압을 가하여 워싱된 혈중암세포는 선별칩(816)에 남도록 하고 나머지 액체는 선별칩(816)을 투과하여 아래로 빠져나가게 한다.49) The TBS-T washing solution is sucked into the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, dispensed onto the sorting chip 816, and incubated for a certain period of time. After a certain period of time, negative pressure is applied to the chipset support 820 through the syringe 830 so that the washed CTCs remain on the sorting chip 816, and the remaining liquid passes through the sorting chip 816 and escapes downward.

50) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 제2 용기랙(520)의 용기에 보관된 혈중암세포용 염색시약을 흡입하고 선별칩(816)에 분주하여 일정 시간 동안 인큐베이션시킨다. 일정 시간 후에 시린지부(830)를 통해 칩셋지지부(820)에 음압을 가하여 염색된 혈중암세포는 선별칩(816)에 남도록 하고 나머지 액체는 선별칩(816)을 투과하여 아래로 빠져나가게 한다.50) With the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, the staining reagent for CTCs stored in the container of the second container rack 520 is aspirated, dispensed onto the sorting chip 816, and incubated for a certain period of time. After a certain period of time, negative pressure is applied to the chipset support 820 through the syringe 830 so that the stained CTCs remain on the sorting chip 816 and the remaining liquid passes through the sorting chip 816 and escapes downward.

51) 유체핸들링 모듈(500)의 오토파이펫(510)으로 TBS-T 워싱 용액을 흡입하고 선별칩(816)에 분주하여 일정 시간 동안 인큐베이션시킨다. 일정 시간 후에 시린지부(830)를 통해 칩셋지지부(820)에 음압을 가하여 워싱된 혈중암세포는 선별칩(816)에 남도록 하고 나머지 액체는 선별칩(816)을 투과하여 아래로 빠져나가게 한다.51) The TBS-T washing solution is sucked into the auto pipette 510 of the fluid handling module 500, dispensed onto the sorting chip 816, and incubated for a certain period of time. After a certain period of time, negative pressure is applied to the chipset support 820 through the syringe 830 so that the washed CTCs remain on the sorting chip 816, and the remaining liquid passes through the sorting chip 816 and escapes downward.

상기와 같이 47) 단계 내지 51) 단계를 수행함으로써 혈액에서 플라즈마, 백혈구 등이 제거되고 선별을 목표로하는 미소입자인 혈중암세포가 염색된 상태로 선별칩(816)에 남아있게 된다.As described above, by performing steps 47) to 51), plasma, leukocytes, etc. are removed from the blood, and CTCs, which are microparticles targeted for selection, remain on the sorting chip 816 in a stained state.

이러한 선별칩(816)을 별도의 형광 현미경으로 관찰하면, 혈액 속에 포함되어 있는 혈중암세포를 계수할 수 있다.When the sorting chip 816 is observed under a separate fluorescence microscope, CTCs contained in the blood can be counted.

상기한 47) 단계 내지 51) 단계를 통한 혈중암세포의 분리 절차는 플라즈마 및 백혈구가 제거된 미소입자를 분리하기 위한 42) 단계 내지 46) 단계를 수행한 후에 이어서 진행할 수 있고, 경우에 따라서는 42) 단계 내지 46) 단계를 생략하고 41) 단계에 이어서 수행하는 것도 가능하다.The procedure for separating CTCs through steps 47) to 51) described above may proceed after steps 42) to 46) for separating microparticles from which plasma and leukocytes have been removed, and in some cases 42) to 46). ) to 46) may be omitted and performed following step 41).

한편, 본 발명의 미소입자 분리장치(10)를 이용하여 다음과 같이 혈액으로부터 ctDNA를 분리하는 것도 가능하다.Meanwhile, it is also possible to separate ctDNA from blood using the microparticle separation device 10 of the present invention as follows.

이때, 캡핑 모듈(300,400)을 이용하여 각 튜브의 뚜껑을 오픈하거나 폐쇄하는 과정과, 유체핸들링 모듈(500)을 이용하여 각 튜브에 혈액이나 시약 등을 분주하는 절차, 및 마그넷 모듈(700)을 이용한 용액의 혼합에 대한 절차는 상술한 바와 동일하게 이루어짐으로 이에 대한 상세한 설명은 생략하기로 한다.At this time, the process of opening or closing the lid of each tube using the capping module (300, 400), the process of dispensing blood or reagents, etc. into each tube using the fluid handling module 500, and the magnet module 700 Since the procedure for mixing the used solution is the same as described above, a detailed description thereof will be omitted.

1) 오토 파이펫(510)으로 미리 혈액이 분주된 제1 튜브 내의 혈액을 흡입하여 웰플레이트(712)의 제1 웰 내에 분주한다.1) The auto pipette 510 sucks the blood in the first tube in which the blood has been dispensed in advance, and dispenses blood into the first well of the well plate 712 .

2) 오토 파이펫(510)으로 제2 튜브 내의 라이시스 시약을 흡입하여 웰플레이트(712)의 제1 웰에 분주한다.2) The lysis reagent in the second tube is aspirated by the auto pipette 510 and dispensed into the first well of the well plate 712.

3) 마그넷 모듈(700)의 스트립(742)으로 제1 웰 내의 용액을 혼합한다.3) The solution in the first well is mixed with the strip 742 of the magnet module 700.

4) 오토 파이펫(510)으로 웰플레이트(712)의 제1 웰 내에 있는 용액을 흡입하여 비드가 수용된 웰플레이트(712)의 제2 웰 내에 있는 비드에 분주한다.4) The solution in the first well of the well plate 712 is aspirated by the auto pipette 510 and dispensed to the beads in the second well of the well plate 712 containing the beads.

5) 마그넷 모듈(700)의 스트립(742)으로 제2 웰 내의 용액을 혼합한다.5) The solution in the second well is mixed with the strip 742 of the magnet module 700.

6) 마그넷 모듈(700)로 제2 웰에 자력을 인가하여 비드를 모은 후, 제3 웰의 워싱 시약 내로 이동하여 비드를 분리한다.6) After collecting beads by applying magnetic force to the second well with the magnet module 700, the beads are moved into the washing reagent of the third well to separate the beads.

7) 마그넷 모듈(700)의 스트립(742)로 제3 웰 내의 용액을 혼합한다.7) The solution in the third well is mixed with the strip 742 of the magnet module 700.

8) 마그넷 모듈(700)로 제3 웰에 자력을 인가하여 비드를 모은 후, 일루션 시약이 수용된 웰플레이트(712)의 제4 웰로 이동하여 비드를 분리한다.8) After collecting the beads by applying magnetic force to the third well with the magnet module 700, the beads are separated by moving to the fourth well of the well plate 712 containing the elution reagent.

9) 마그넷 모듈(700)의 스트립(742)으로 제4 웰 내의 용액을 혼합한다.9) The solution in the fourth well is mixed with the strip 742 of the magnet module 700.

10) 마그넷 모듈(700)로 제4 웰에 자력을 인가하여 비드를 모은 후, 웰플레이트(712)의 제5 웰로 이동하여 비드를 분리한다.10) After collecting beads by applying magnetic force to the fourth well with the magnet module 700, the beads are moved to the fifth well of the well plate 712 to separate the beads.

상기와 같이 본 발명의 미소입자 분리장치(10)를 이용하여 혈액으로부터 ctDNA를 용이하게 분리할 수 있다.As described above, ctDNA can be easily separated from blood using the microparticle separation device 10 of the present invention.

상술한 바와 같이 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 미소입자 분리장치(10)와 이를 이용한 미소입자 분리방법은 혈액 내의 미소입자 분리, 특히 혈중암세포와 ctDNA의 분리를 자동화하여 신속하고 용이하게 수행할 수 있고, 이로 인해 검체의 오염을 방지할 수 있다는 점에서 매우 유용한 것이다. As described above, the microparticle separation device 10 and the microparticle separation method using the microparticle separation apparatus 10 according to a preferred embodiment of the present invention can separate microparticles from blood, particularly blood cancer cells and ctDNA, by automating and quickly and easily performing the separation. This is very useful in that it can prevent contamination of the sample.

이상의 설명은 본 발명의 기술 사상을 예시적으로 설명한 것에 불과한 것으로서, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정, 변경 및 치환이 가능할 것이다. 따라서 본 발명에 개시된 실시예 및 첨부된 도면들은 본 발명의 기술 사상을 한정하기 위한 것이 아니라 설명하기 위한 것이고, 이러한 실시예 및 첨부된 도면에 의하여 본 발명의 기술 사상의 범위가 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 보호범위는 청구 범위에 의해서 해석되어야 하며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 기술 사상은 본 발명의 권리 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 할 것이다.The above description is merely an example of the technical idea of the present invention, and those skilled in the art can make various modifications, changes, and substitutions without departing from the essential characteristics of the present invention. will be. Therefore, the embodiments disclosed in the present invention and the accompanying drawings are not intended to limit the technical idea of the present invention, but to explain, and the scope of the technical idea of the present invention is not limited by these embodiments and the accompanying drawings. The protection scope of the present invention should be construed by the claims, and all technical ideas within the equivalent range should be interpreted as being included in the scope of the present invention.

F: 프레임 T: 튜브
C: 뚜껑
10: 미소입자 분리장치
100: 회전스테이지 110: 포켓
112: 모터
200: 용기보관 모듈 210: 제1 용기랙
220: 제1 용기 이송부 222: 용기 그립퍼
300: 제1 캡핑 모듈 310: 제1 뚜껑랙
320: 제1 뚜껑 이송부 322: 제1 뚜껑 그립퍼
330: 제1 몸통 그립퍼
400: 제2 캡핑 모듈 410: 제2 뚜껑랙
412: 제2 몸통 그립퍼 420: 제2 뚜껑 이송부
422: 제2 뚜껑 그립퍼
500: 유체핸들링 모듈 510: 오토 파이펫
520: 제2 용기랙 522: 제1 용기랙 이송부
530: 냉각부 540: 수거통
600: 원심분리 모듈 610: 제2 용기 이송부
620: 원심분리부 622: 하우징
624: 도어 626: 버켓
628: 모터 640: 비전부
642: 튜브 회전부 644: 조명
646: 카메라
700: 마그넷 모듈 710: 제3 용기랙
712: 웰플레이트 714: 제2 용기랙 이송부
720: 마그넷부 722: 마그넷바
740: 스트립부 742: 스트립
800: 분리 모듈 810: 선별부
812: 유체 투입부 814: 배관용 아답터
816: 선별칩 818: 선별칩 고정부
820: 칩셋지지부 822: 칩셋고정부
830: 시린지부 832: 시린지
834: 배관용 아답터F: frame T: tube
C: Lid
10: microparticle separator
100: rotation stage 110: pocket
112: motor
200: container storage module 210: first container rack
220: first container transfer unit 222: container gripper
300: first capping module 310: first lid rack
320: first lid transfer unit 322: first lid gripper
330: first torso gripper
400: second capping module 410: second lid rack
412: second body gripper 420: second lid transfer unit
422: second lid gripper
500: fluid handling module 510: auto pipette
520: second container rack 522: first container rack transfer unit
530: cooling unit 540: collection box
600: centrifugal separation module 610: second vessel transfer unit
620: centrifuge 622: housing
624: door 626: bucket
628: motor 640: vision part
642: tube rotating part 644: lighting
646: camera
700: magnet module 710: third container rack
712: well plate 714: second container rack transfer unit
720: magnet part 722: magnet bar
740: strip portion 742: strip
800: separation module 810: sorting unit
812: fluid inlet 814: adapter for piping
816: sorting chip 818: sorting chip fixing part
820: chipset support part 822: chipset fixing part
830: syringe branch 832: syringe
834: adapter for piping

Claims (12)

튜브가 거치되는 복수의 포켓이 형성되고, 회전가능하도록 구비되어 상기 튜브를 작업 위치로 이송하는 회전스테이지;
복수의 튜브를 보관하는 제1 용기랙과, 상기 포켓 또는 상기 제1 용기랙으로 튜브를 이동시키는 제1 용기 이송부를 구비하는 용기보관 모듈;
상기 회전스테이지에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 개폐시키는 제1 캡핑 모듈과 제2 캡핑 모듈;
상기 튜브에 수용된 유체를 흡입하거나, 상기 튜브에 유체를 분주하는 오토파이펫을 구비하는 유체핸들링 모듈;
상기 튜브 내의 검체를 원심분리하는 원심분리 모듈;
복수의 웰이 구비된 웰플레이트가 거치되고, 자성 비드가 분주된 상기 웰에 자력을 인가하는 마그넷 모듈; 및
투입된 유체로부터 미리 정해진 크기 이상의 입자를 선별하는 선별부를 구비하는 분리 모듈을 포함하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.a rotation stage having a plurality of pockets in which tubes are placed and being rotatably provided to transport the tubes to a working position;
A container storage module having a first container rack for storing a plurality of tubes and a first container transfer unit for moving the tubes to the pocket or the first container rack;
a first capping module and a second capping module opening and closing the lid of the tube transported by the rotation stage;
a fluid handling module having an auto pipette for sucking in the fluid contained in the tube or dispensing the fluid to the tube;
a centrifugal separation module for centrifuging the sample in the tube;
a magnet module on which a well plate having a plurality of wells is mounted and which applies magnetic force to the wells in which magnetic beads are dispensed; and
A microparticle separator comprising a separation module having a sorting unit for sorting out particles of a predetermined size or larger from the injected fluid. 제 1 항에 있어서,
상기 제1 캡핑 모듈은
일측이 상기 회전스테이지의 중심축에 연결되고, 상기 튜브의 몸통을 파지하는 제1 몸통 그립퍼,
상기 제1 몸통 그립퍼에 의해 몸통이 파지된 상기 튜브의 뚜껑을 개폐하는 제1 뚜껑 그립퍼를 구비하고, 상기 제1 뚜껑 그립퍼를 이동시키는 제1 뚜껑 이송부, 및
상기 제1 뚜껑 이송부에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 보관하는 제1 뚜껑랙을 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The first capping module
A first body gripper having one side connected to the central axis of the rotation stage and gripping the body of the tube;
A first lid transfer unit having a first lid gripper for opening and closing the lid of the tube whose body is gripped by the first body gripper, and moving the first lid gripper; and
The microparticle separation device characterized in that it comprises a first lid rack for storing the lid of the tube transported by the first lid transfer unit. 제 1 항에 있어서,
상기 제2 캡핑 모듈은
상기 튜브의 뚜껑을 개폐하는 제2 뚜껑 그립퍼를 구비하고, 상기 제2 뚜껑 그립퍼를 이동시키는 제2 뚜껑 이송부,
상기 제2 뚜껑 그립퍼에 의해 뚜껑이 파지된 상기 튜브의 몸통을 파지하는 제2 몸통 그립퍼가 전방에 구비되고, 상기 제2 뚜껑 이송부에 의해 이송된 상기 튜브의 뚜껑을 보관하는 제2 뚜껑랙을 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The second capping module
A second lid transfer unit having a second lid gripper for opening and closing the lid of the tube and moving the second lid gripper;
A second body gripper for gripping the body of the tube whose lid is gripped by the second lid gripper is provided at the front, and a second lid rack for storing the lid of the tube transported by the second lid transfer unit Microparticle separator, characterized in that for doing. 제 1 항에 있어서,
상기 유체핸들링 모듈은
제1 용기랙 이송부에 의해 이동 가능하도록 구비되고, 복수의 튜브가 수용되는 제2 용기랙을 더 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The fluid handling module
The microparticle separator further comprising a second container rack provided to be movable by the first container rack transfer unit and accommodating a plurality of tubes. 제 1 항에 있어서,
상기 유체핸들링 모듈은
설정된 온도로 시약을 보관하기 위한 냉각부를 더 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The fluid handling module
A microparticle separation device further comprising a cooling unit for storing reagents at a set temperature. 제 1 항에 있어서,
상기 원심분리 모듈은
원심분리 대상 튜브를 이송하는 제2 용기 이송부,
원심분리 대상 튜브를 수용하는 버켓과, 상기 버켓을 회전시키는 모터를 구비하는 원심분리부, 및
원심분리가 완료된 튜브 내의 검체 영상을 촬영하는 카메라와 조명을 구비하고, 상기 영상으로부터 층이 구분된 상기 검체 내용물의 높이를 측정하는 비전부를 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The centrifugal separation module
A second container transfer unit for transferring the tube to be centrifuged;
A centrifugal separator having a bucket accommodating a tube to be centrifuged and a motor rotating the bucket; and
An apparatus for separating microparticles, characterized in that it includes a camera and lighting that captures an image of the sample in the tube after centrifugation, and a vision unit that measures the height of the sample contents separated into layers from the image. 제 1 항에 있어서,
상기 마그넷 모듈은
복수의 웰이 구비된 웰플레이트가 거치되고, 제2 용기랙 이송부에 의해 이동되는 제3 용기랙,
상기 웰에 자력을 인가하는 복수의 마그넷바를 구비하는 마그넷부, 및
상기 마그넷바의 외부를 감싸도록 구비되는 복수의 스트립을 구비하는 스트립부를 구비하고,
상기 마그넷부와 상기 스트립부는 승강동작이 가능하도록 구비됨으로써 상기 마그넷이 상기 스트립에 삽입 및 분리되는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The magnet module is
A third container rack on which a well plate having a plurality of wells is mounted and moved by the second container rack transfer unit;
A magnet unit having a plurality of magnet bars for applying magnetic force to the well, and
A strip portion having a plurality of strips provided to surround the outside of the magnet bar,
The magnet part and the strip part are provided to enable a lifting operation, so that the magnet is inserted into and separated from the strip. 제 1 항에 있어서,
상기 선별부는
선별 대상 입자를 포함하는 유체가 투입되는 유체 투입부,
상기 유체 투입부의 하단에 배치되고, 투입된 유체로부터 미리 정해진 크기 보다 작은 크기의 입자를 투과시키는 선별칩이 장착되는 선별칩 고정부,
상기 선별칩 고정부를 지지하고, 내부에 빈 공간이 형성되는 칩셋지지부를 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 1,
The selection unit
A fluid input unit into which fluid containing particles to be screened is injected;
A sorting chip fixing part disposed at the lower end of the fluid inlet and equipped with a sorting chip that transmits particles smaller than a predetermined size from the injected fluid;
The microparticle separator, characterized in that it comprises a chipset supporting part supporting the sorting chip fixing part and forming an empty space therein. 제 8 항에 있어서,
상기 분리 모듈은
상기 칩셋지지부에 연통되어 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하기 위한 시린지를 구비하는 시린지부를 더 구비하는 것을 특징으로 하는 미소입자 분리장치.According to claim 8,
The separation module
and a syringe unit communicating with the chipset support unit to form a negative pressure at the chipset support unit. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 따른 미소입자 분리장치를 이용한 미소입자 분리방법에 있어서,
A) 혈액이 분주된 제1 튜브를 상기 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계;
B) 상기 오토 파이펫으로 원심분리된 상기 제1 튜브 내의 플라즈마를 흡입하여 제2 튜브에 분주하는 단계;
C) 상기 오토 파이펫으로 상기 제1 튜브 내의 PBMC를 흡입하여 제3 튜브에 분주하는 단계;
D) PBMC가 수용된 상기 제3 튜브를 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계;
E) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브 내의 상층액을 흡입하여 제거하는 단계;
F) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브에 버퍼 용액을 분주하여 펠렛을 풀고, 풀어진 펠렛을 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계;
G) 상기 오토 파이펫으로 CD45 항체를 흡입하여 상기 제1 웰에 분주하는 단계;
H) 상기 오토 파이펫으로 PBS를 흡입하여 상기 웰플레이트의 제2 웰에 분주하고, 상기 제1 웰의 용액을 흡입하여 상기 제2 웰에 분주하는 단계;
I) 상기 오토 파이펫으로 비드를 흡입하여 상기 제2 웰에 분주하는 단계;
J) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰에 자력을 인가하여 상기 비드와 상기 제2 웰의 용액을 혼합하는 단계; 및
K) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰에서 상기 비드를 분리하여 혈액으로부터 플라즈마 및 백혈구가 제거된 세포를 포함한 미소입자를 분리하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 하는 미소입자 분리방법.In the microparticle separation method using the microparticle separator according to any one of claims 1 to 7,
A) transferring the first tube into which the blood is dispensed to the centrifugal separation module and performing centrifugation;
B) aspirating the centrifuged plasma in the first tube with the auto pipette and dispensing it to a second tube;
C) aspirating the PBMCs in the first tube with the auto pipette and dispensing them into a third tube;
D) transferring the third tube containing the PBMCs to a centrifugal separation module to perform centrifugation;
E) aspirating and removing the supernatant in the third tube with the auto pipette;
F) dispensing a buffer solution into the third tube with the auto pipette to release the pellet, and dispensing the released pellet into the first well of the well plate;
G) aspirating the CD45 antibody with the auto pipette and dispensing it into the first well;
H) aspirating and dispensing PBS to the second well of the well plate with the auto pipette, and aspirating and dispensing the solution from the first well to the second well;
I) aspirating beads with the auto pipette and dispensing them into the second well;
J) mixing the bead and the solution in the second well by applying magnetic force to the second well with the magnet module; and
K) separating microparticles including plasma and cells from which leukocytes are removed from blood by separating the beads from the second well with the magnet module. 제 9 항에 따른 미소입자 분리장치를 이용한 미소입자 분리방법에 있어서,
A) 혈액이 분주된 제1 튜브를 상기 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계;
B) 상기 오토 파이펫으로 원심분리된 상기 제1 튜브 내의 플라즈마를 흡입하여 제2 튜브에 분주하는 단계;
C) 상기 오토 파이펫으로 상기 제1 튜브 내의 PBMC를 흡입하여 제3 튜브에 분주하는 단계;
D) PBMC가 수용된 상기 제3 튜브를 원심분리 모듈로 이송하여 원심분리를 진행하는 단계;
E) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브 내의 상층액을 흡입하여 제거하는 단계;
F) 상기 오토 파이펫으로 상기 제3 튜브에 버퍼 용액을 분주하여 펠렛을 풀고, 풀어진 펠렛을 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계;
G) 상기 오토 파이펫으로 CD45 항체를 흡입하여 상기 제1 웰에 분주하는 단계;
H1) 상기 제1 웰의 용액을 상기 선별칩에 분주하면서 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계;
I1) 상기 오토 파이펫으로 PFA 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 반응시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계;
J1) 상기 오토 파이펫으로 워싱 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계;
K1) 상기 오토 파이펫으로 혈중암소포용 염색시약을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성하는 단계; 및
L1) 상기 오토 파이펫으로 워싱 용액을 상기 선별칩에 분주하여 미리 정해진 시간 동안 인큐베이션시킨 후, 상기 시린지부를 이용하여 상기 칩셋지지부에 음압을 형성함으로써 혈액으로부터 플라즈마 및 백혈구가 제거되고 염색된 혈중암세포를 획득하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 하는 미소입자 분리방법.In the microparticle separation method using the microparticle separator according to claim 9,
A) transferring the first tube into which the blood is dispensed to the centrifugal separation module and performing centrifugation;
B) aspirating the centrifuged plasma in the first tube with the auto pipette and dispensing it to a second tube;
C) aspirating the PBMCs in the first tube with the auto pipette and dispensing them into a third tube;
D) transferring the third tube containing the PBMCs to a centrifugal separation module to perform centrifugation;
E) aspirating and removing the supernatant in the third tube with the auto pipette;
F) dispensing a buffer solution into the third tube with the auto pipette to release the pellet, and dispensing the released pellet into the first well of the well plate;
G) aspirating the CD45 antibody with the auto pipette and dispensing it into the first well;
H1) forming a negative pressure in the chipset support part using the syringe part while dispensing the solution in the first well to the sorting chip;
I1) dispensing the PFA solution to the sorting chip with the auto pipette, reacting for a predetermined time, and then forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part;
J1) dispensing a washing solution to the sorting chip with the auto pipette, incubating the sorting chip for a predetermined time, and then forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part;
K1) dispensing the staining reagent for cancer follicles into the screening chip using the auto pipette, incubating the screening chip for a predetermined time, and then forming a negative pressure in the chipset supporting part using the syringe part; and
L1) After dispensing the washing solution to the sorting chip with the auto pipette and incubating it for a predetermined time, plasma and leukocytes are removed from the blood and stained CTCs by forming a negative pressure on the chipset support part using the syringe part A microparticle separation method comprising the step of obtaining a. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 따른 미소입자 분리장치를 이용한 미소입자 분리방법에 있어서,
A) 상기 오토 파이펫으로 제1 튜브 내의 혈액을 흡입하여 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계;
B) 상기 오토 파이펫으로 제2 튜브 내의 라이시스 시약을 흡입하여 상기 웰플레이트의 제1 웰에 분주하는 단계;
C) 상기 마그넷 모듈로 상기 제1 웰 내의 용액을 혼합하는 단계;
D) 상기 오토 파이펫으로 상기 웰플레이트의 상기 제1 웰 내에 있는 용액을 흡입하여 비드가 수용된 상기 웰플레이트의 상기 제2 웰에 분주하는 단계;
E) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰 내의 용액을 혼합하는 단계;
F) 상기 마그넷 모듈로 상기 제2 웰의 비드를 워싱 용액이 수용된 상기 웰플레이트의 제3 웰로 이동하여 비드를 분리하는 단계;
G) 상기 마그넷 모듈로 상기 제3 웰 내의 용액을 혼합하는 단계;
H) 상기 마그넷 모듈로 상기 제3 웰의 비드를 일루션 시약이 수용된 상기 웰플레이트의 제4 웰로 이동하여 비드를 분리하는 단계;
I) 상기 마그넷 모듈로 상기 제4 웰 내의 용액을 혼합하는 단계;
K) 상기 마그넷 모듈로 상기 제4 웰의 비드를 상기 웰플레이트의 제5 웰로 이동하여 상기 비드를 분리함으로써 혈액으로부터 ctDNA를 분리하는 단계를 포함하는 것으로 특징으로 하는 미소입자 분리방법.
In the microparticle separation method using the microparticle separator according to any one of claims 1 to 7,
A) suctioning the blood in the first tube with the auto pipette and dispensing it into the first well of the well plate;
B) aspirating the lysis reagent in the second tube with the auto pipette and dispensing it to the first well of the well plate;
C) mixing the solution in the first well with the magnet module;
D) aspirating the solution in the first well of the well plate with the auto pipette and dispensing the solution into the second well of the well plate containing beads;
E) mixing the solution in the second well with the magnet module;
F) separating the beads by moving the beads from the second well to the third well of the well plate containing the washing solution with the magnet module;
G) mixing the solution in the third well with the magnet module;
H) separating the beads by moving the beads from the third well to the fourth well of the well plate containing the elution reagent with the magnet module;
I) mixing the solution in the fourth well with the magnet module;
K) separating ctDNA from blood by moving the bead from the fourth well to the fifth well of the well plate with the magnet module and separating the bead.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117706087B (en) * 2024-02-01 2024-04-16 山东益生种畜禽股份有限公司 Portable detection device for bursa mycoplasma MS-ONE

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210014976A (en) 2019-07-31 2021-02-10 주식회사 피디젠 Platform based on analysis of circulating tumor cell for the prediction of cancer progression

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102040996B1 (en) * 2011-11-07 2019-11-05 베크만 컬터, 인코포레이티드 Robotic arm
KR101511217B1 (en) * 2014-10-01 2015-04-13 에이티아이 주식회사 Automated system for adipose tussue processing
TWI616526B (en) * 2017-05-15 2018-03-01 Cell separation and purification device
KR102252029B1 (en) * 2019-07-26 2021-05-14 주식회사 한국바이오 셀프 Apparatus for micro particle treatment
KR102298299B1 (en) * 2019-08-08 2021-09-07 광운대학교 산학협력단 Integrated cell separation device capable of centrifugation and magnetic separation
KR102168826B1 (en) * 2019-11-29 2020-10-22 주식회사 한국바이오 셀프 Apparatus and method for separating sample

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210014976A (en) 2019-07-31 2021-02-10 주식회사 피디젠 Platform based on analysis of circulating tumor cell for the prediction of cancer progression

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116190284A (en) * 2023-04-27 2023-05-30 厦门柯尔自动化设备有限公司 Full-automatic film pouring and laser integrated equipment for crystal grains and application method

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