KR20220135998A - 세포 선별 통합 장치 - Google Patents

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Abstract

본 발명의 실시예에 따른 세포 선별 통합 장치는, 작업 스테이지 상에서 다방향으로 이동 가능하게 장착되며, 자동으로 세포 염색을 위한 액체를 분사하는 자동 액체 분사부와, 상기 작업 스테이지에 구비되며, 상기 자동 액체 분사부에 의해 염색된 상기 세포의 이미징(imaging)을 자동으로 재현하는 이미징 재현부 및 상기 작업 스테이지에 구비되며, 이미징 재현된 상기 세포로부터 특정 세포를 선별하는 세포 자동 선별부를 포함할 수 있다.

Description

세포 선별 통합 장치{CELL SORTING INTEGRATED APPARATUS}
본 발명은 세포 선별 통합 장치에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 작업 스테이지 상에 세포 면역 염색을 위한 자동 액체 분사부와, 이미징 자동 재현을 위한 이미징 재현부와, 세포 자동 선별을 위한 세포 자동 선별부가 장착됨으로써 처리의 효율을 높일 수 있을 뿐만 아니라 장치를 간소화할 수 있이 장치 구축을 위한 비용을 절감시킬 수 있는 세포 선별 통합 장치에 관한 것이다.
암의 전이는 혈액을 타고 도는 순환종양세포(CTC, Circulating Tumor Cell)로 인해 발생한다. 처음 암이 발생된 곳에서 떨어져 나와 혈관 내로 침입한 순환종양세포는 혈류와 순환하다가 다른 조직에 침투해 암을 전이시킨다.
이러한 순환종양세포는 암 진단의 대표적인 마커로 최근 다양한 연구가 진행되고 있다.
이 중, 세포면역화학법(Immunocytochemistry, ICC)는 항체가 특이적으로 항원과 결합하는 성질을 이용하여 조직 또는 세포 내 특정 물질의 존재 부위를 연구하고 확인하는 실험 기법으로, 암세포 선별 작업에 활용되고 있다.
세포면역화학법을 통해 예를 들면 순환종양세포를 분리한 후에, 세포 염색 장치를 통해 순환종양세포를 염색하고, 이미징 장치를 통해 이미징을 재현하고, 또한 세포 선별 장치를 통해 세포를 선별하는 작업이 실행되었다.
그런데, 종래의 경우에 있어서는, 세포 염색 장치, 이미징 장치 및 세포 선별 장치가 개별적으로 있었고, 이러한 개별적인 장치에 샘플인 세포를 적용시키는 것이었기 때문에 번거로움이 있었으며 이로 인해 효율성이 저하되는 문제가 있었고, 아울러 세포의 오염과 같은 현상이 발생될 우려도 있었다.
이에, 세포 염색, 이미징 재현 및 세포 선별을 하나의 장치에 의해서 순차적으로 실행할 수 있어 처리 과정의 효율성을 향상시킬 수 있는 새로운 구성의 세포 염색, 이미징 재현 및 세포 선별을 위한 통합 장치의 개발이 요구되는 실정이다.
관련 선행기술로는, 대한민국특허 공개번호 10-2019-0092177(발명의 명칭: 순환종양세포 검출용 미세유체칩) 등이 있다.
본 발명의 실시예는 작업 스테이지 상에 세포 면역 염색을 위한 자동 액체 분사부와, 이미징 자동 재현을 위한 이미징 재현부와, 세포 자동 선별을 위한 세포 자동 선별부가 장착됨으로써 처리의 효율을 높일 수 있을 뿐만 아니라 장치를 간소화할 수 있이 장치 구축을 위한 비용을 절감시킬 수 있는 세포 선별 자동 장치를 제공한다.
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 이상에서 언급한 과제(들)로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제(들)은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 실시예에 따른 세포 선별 통합 장치는, 작업 스테이지 상에서 다방향으로 이동 가능하게 장착되며, 자동으로 세포 염색을 위한 액체를 분사하는 자동 액체 분사부와, 상기 작업 스테이지에 구비되며, 상기 자동 액체 분사부에 의해 염색된 상기 세포의 이미징(imaging)을 자동으로 재현하는 이미징 재현부 및 상기 작업 스테이지에 구비되며, 이미징 재현된 상기 세포로부터 특정 세포를 선별하는 세포 자동 선별부를 포함할 수 있다.
일측에 따르면, 상기 자동 액체 분사부는 다방향 이동부에 장착되며, 상기 다방향 이동부는, 상기 작업 스테이지 상에 장착되며, 일 방향으로 제1 가이드를 구비한 제1 이동몸체와, 상기 제1 가이드를 따라 이동 가능하며, 상기 제1 가이드에 대해 직교 방향을 가지는 제2 가이드를 구비한 제2 이동몸체 및 상기 제2 가이드를 따라 이동 가능하며, 상기 자동 액체 분사부가 높이 방향으로 이동 가능하게 장착되는 3 가이드를 구비하는 제3 이동몸체를 포함할 수 있다.
일측에 따르면, 상기 자동 액체 분사부는, 세포 염색을 위한 액체가 수용되는 수용몸체 및 상기 수용몸체의 하단부에 장착되어 상기 작업 스테이지 상에 놓이는 피펫팁, 시약병, 폐기물 처리기 또는 시편 스테이지에 상기 수용몸체에 수용된 액체를 분사하여 염색 공정을 실행하도록 하는 적어도 하나의 분사기를 포함할 수 있다.
일측에 따르면, 상기 자동 액체 분사부에 의해서 염색된 세포는 시편 스테이지에 놓인 상태에서 상기 시편 스테이지의 이동에 의해서 상기 이미징 재현부의 촬영 영역으로 이동될 수 있다.
일측에 따르면, 상기 이미징 재현부는 도립형 형광 현미경(Inverted Microscope)일 수 있다.
일측에 따르면, 상기 세포 자동 선별부는 상기 이미징 재현부의 상부에서 이동 가능하도록 선별부 이동 가이드에 장착될 수 있다.
일측에 따르면, 상기 선별부 이동 가이드는, 일 방향으로 이동 가능하도록 장착되는 제1 가이드몸체와, 상기 제1 가이드몸체에 형성된 높이 방향의 경로를 따라 이동 가능한 제2 가이드몸체를 포함하며, 상기 세포 자동 선별부는 상기 제2 가이드몸체에 형성된 수평 방향의 경로를 따라 이동 가능하다.
일측에 따르면, 상기 작업 스테이지 상에는 상기 자동 액체 분사부, 상기 이미징 재현부 또는 상기 세포 자동 선별부에 의해 처리되는 세포를 디스플레이하는 디스플레이부가 구비될 수 있다.
일측에 따르면, 상기 자동 액체 분사부에 의한 상기 세포의 염색, 상기 이미징 재현부에 의한 상기 세포의 이미징 재현 그리고 상기 세포 자동 선별부에 의한 상기 세포의 선별을 위하여 암실 환경 내에서 구비될 수 있다.
본 발명의 실시예에 따르면, 작업 스테이지 상에 세포 면역 염색을 위한 자동 액체 분사부와, 이미징 자동 재현을 위한 이미징 재현부와, 세포 자동 선별을 위한 세포 자동 선별부가 장착됨으로써 처리의 효율을 높일 수 있을 뿐만 아니라 장치를 간소화할 수 있이 장치 구축을 위한 비용을 절감시킬 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 선별 통합 장치의 개략적인 구성을 도시한 도면이다.
도 2는 도 1에서 작업 스테이지와 이에 장착되는 자동 액체 분사부의 구성을 도시한 도면이다.
도 3은 도 2의 자동 액체 분사부를 통해 세포 염색을 실행하는 것을 설명하기 위한 도면이다.
도 4는 도 1의 부분 도면으로서 도 3에서 이미징 재현부가 추가된 도면이다.
도 5는 도 1의 부분 도면으로서 도 4에서 세포 자동 선별부가 추가된 도면이다.
도 6은 도 1의 세포 선별 통합 장치가 암실 환경 내에 배치되는 것을 도시한 도면이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포면역화학법의 과정을 순차적으로 도시한 도면이다.
본 발명의 이점 및/또는 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나, 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다. 명세서 전체에 걸쳐 동일 참조 부호는 동일 구성요소를 지칭한다.
이하에서는 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예들을 상세히 설명하기로 한다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 선별 통합 장치의 개략적인 구성을 도시한 도면이고, 도 2는 도 1에서 작업 스테이지와 이에 장착되는 자동 액체 분사부의 구성을 도시한 도면이고, 도 3은 도 2의 자동 액체 분사부를 통해 세포 염색을 실행하는 것을 설명하기 위한 도면이고, 도 4는 도 1의 부분 도면으로서 도 3에서 이미징 재현부가 추가된 도면이며, 도 5는 도 1의 부분 도면으로서 도 4에서 세포 자동 선별부가 추가된 도면이다.
이들 도면에 도시된 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 세포 선별 통합 장치(100)는, 작업 스테이지(110)와, 작업 스테이지(110) 상에서 공간좌표 상의 다방향으로 이동 가능하게 장착되며 자동으로 세포 염색을 위한 액체를 분사하는 자동 액체 분사부(130)와, 작업 스테이지(110)에 구비되며 자동 액체 분사부(130)에 의해 염색된 세포의 이미징을 재현하는 이미징 재현부(140)와, 작업 스테이지(110)에 구비되며 이미징 재현된 세포로부터 특정 세포를 선별하는 세포 자동 선별부(160)를 포함할 수 있다.
본 실시예의 세포 선별 통합 장치(100)는, 작업 스테이지(110) 상에 자동 액체 분사부(130)와, 이미징 재현부(140)와, 세포 자동 선별부(160)가 통합적으로 장착되어 예를 들면 순환종양세포와 같은 암세포의 면역 염색과, 염색된 암세포의 이미징 자동화와, 특정 암세포의 선별을 자동으로 수행할 수 있다.
도 1 및 도 2를 참조하면, 먼저 본 실시예의 작업 스테이지(110)는 세포 염색을 위한 작업 영역을 제공하는 것으로, 자동 액체 분사부(130)의 위치 조절을 위한 다방향 이동부(120)가 장착될 수 있다.
본 실시예의 다방향 이동부(120)는, 작업 스테이지(110) 상에서 자동 액체 분사부(130)가 공간좌표 상의 x축 방향, y축 방향 및 z축 방향으로 이동할 수 있도록 하여, 자동 액체 분사부(130)에 의한 세포의 염색 과정이 자동으로 이루어질 수 있도록 한다.
이러한 다방향 이동부(120)는, 작업 스테이지(110) 상에 장착되며 일 방향(x축 방향)으로 제1 가이드(122)를 구비하는 제1 이동몸체(121)와, 제1 가이드(122)를 따라 이동 가능하며 제1 가이드(122)에 대해 직교 방향(y 축 방향)으로 제2 가이드(124)를 구비하는 제2 이동몸체(123)와, 제2 가이드(124)를 따라 이동 가능하며 자동 액체 분사부(130)가 높이 방향(z축 방향)으로 이동 가능하게 장착되는 제3 가이드(126)를 구비하는 제3 이동몸체(125)를 포함할 수 있다.
본 실시예의 자동 액체 분사부(130)는, 도 2 및 도 3에 도시된 것처럼, 다방향 이동부(120)에 의해 위치 조절되며 따라서 세포 염색을 자동으로 실행할 수 있다. 도 3을 참조하면, 작업 스테이지(110) 상에는 작업 방향, 즉 x축 방향으로 피펫팁(111), 시약병(112), 폐기물 처리기(113) 및 시편 스테이지(114)가 놓여지는데, 자동 액체 분사부(130)는 다방향 이동부의 위치 조절에 의해서 각각의 위치로 이동하여 세포 염색을 위한 과정을 실행할 수 있는 것이다.
이러한 자동 액체 분사부(130)는, 세포 염색을 위한 액체가 수용되는 수용몸체(131)와, 수용몸체(131)의 하단부에 장착되어 작업 스테이지(110) 상에 놓이는 피펫팁(111), 시약병(112), 폐기물 처리기(113) 및 시편 스테이지(114)에 수용몸체(131)에 수용된 액체를 분사하여 염색 공정을 실행하도록 하는 복수 개의 분사기(135)를 포함할 수 있다.
도 1 및 도 2를 참조하면, 자동 액체 분사부(130)가 위치되는 작업 스테이지(110)의 일측에는 자동 액체 분사부(130)의 위치 제어 및 액체 분사를 모니터링할 수 있는 모니터(181)가 장착될 수 있다.
한편, 도 4에 도시된 바와 같이, 자동 액체 분사부(130)에 의해서 염색된 세포는 시편 스테이지(114)에 놓인 상태에서 시편 스테이지(114)의 선형 이동에 의해서 이미징 재현부(140)의 촬영 영역으로 이동될 수 있다. 즉, 작업 스테이지(110) 상에는 이미징 재현부(140)와 시편 스테이지(114) 상을 연결하는 선형 가이드(115)가 구비됨으로써, 시편 스테이지(114)가 이미징 재현부(140)의 상부로 이동될 수 있는 것이다.
본 실시예의 이미징 재현부(140)는 도립형 형광 현미경(Inverted Microscope)으로 마련될 수 있다. 다만, 이미징 재현부(140)의 종류가 이에 한정되는 것은 아니다.
이러한 이미징 재현부(140)는 시편 스테이지(114)의 이동 경로 상에서 하부에 위치되어 그 상부에 놓이는 세포에 대하여 이미징을 자동으로 재현할 수 있다.
이미징 재현부(140)에 의해 획득된 세포의 이미지는, 도 4에 도시된 것처럼, 세포 이미징 모니터(183)를 통해서 모니터링될 수 있다.
한편, 이미징 재현부(140)에 의해서 세포의 이미징을 재현한 다음에 그 위치에서 세포에 대한 자동 선별이 이루어질 수 있다. 본 실시예의 세포 자동 선별부(160)는, 도 5에 도시된 것처럼, 이미징 재현부(140)의 상부에서 다방향으로 이동 가능하도록 선별부 이동 가이드(150)에 장착됨으로써 세포에 대한 자동 선별을 할 수 있다.
본 실시예의 선별부 이동 가이드(150)는, 도 5에 도시된 것처럼, 일 방향(x축 방향), 즉 작업 방향으로 이동 가능하도록 고정몸체에 장착되는 제1 가이드몸체(151)와, 제1 가이드몸체(151)에 형성된 수직 방향(z축 방향)의 경로를 따라 이동 가능한 제2 가이드몸체(153)를 포함하며, 세포 자동 선별부(160)는 제2 가이드몸체(153)에 형성된 수평 방향(y축 방향)의 경로를 따라 이동 가능하다.
따라서, 세포 자동 선별부(160)는 선별부 이동 가이드(150)의 위치 조절로 인해 원하는 위치로 용이하게 이동될 수 있다. 그리고 이미징 재현된 세포로부터 특정 세포를 자동으로 선별할 수 있다.
이렇게 세포 자동 선별부(160)에 의해 획득된 정보는, 도 5에 도시된 것처럼, 모니터(183)를 이용하여 확인할 수 있다.
이와 같이 본 발명의 일 실시예에 따르면, 작업 스테이지(110) 상에 세포 면역 염색을 위한 자동 액체 분사부(130)와, 이미징 자동 재현을 위한 이미징 재현부(140)와, 세포 자동 선별을 위한 세포 자동 선별부(160)가 장착됨으로써 처리의 효율을 높일 수 있을 뿐만 아니라 장치를 간소화할 수 있이 장치 구축을 위한 비용을 절감시킬 수 있다.
또한, 세포의 이동 경로를 최소로 함으로써 세포의 오염도 방지할 수 있다.
한편, 도 6은 도 1의 세포 선별 통합 장치가 암실 환경 내에 배치되는 것을 도시한 도면이다.
이에 도시된 것처럼, 본 실시예의 세포 선별 통합 장치(100)는 암실(200)의 환경이 필요한 경우 그 환경 내에 배치될 수 있으며, 암실 환경 내에서 세포 염색, 이미징 재현 및 세포 선별이 이루어질 수 있다.
한편, 이하에서는 도면을 참조하여, 본 실시예의 세포 선별 통합 장치(100)에 따른 세포면역화학법의 과정에 대해서 개략적으로 설명하기로 한다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 세포면역화학법의 과정을 순차적으로 도시한 도면이다.
본 실시예의 세포면역화학법에 있어서는, 먼저 PEGDA(polyethylene glycol diacrylate)를 젤레이션(gelation)한 다음에 석션(suction)을 실행한다. 이후, 4%의 PFA를 넣어서 픽세이션(fixation)을 하고, 다시 석션을 한다. 이후 PBS(Phosphate Buffered Saline)와 석션을 이용하여 워싱(washing)을 3회 수행하고, 0.05%의 트리톤 엑스-100(Triton X-100)을 투입하여 퍼미빌리제이션(permeabilization)을 한 다음 석션을 실행한다.
이후 전술한 것과 같은 워싱을 3회 수행한 후, 2%의 BSA를 넣고 블로킹(blocking)을 한 다음 석션을 실행한 후 항체 칵테일들을 넣어 1차 항체 바인딩(antibody binding)을 한 다음 전술한 워싱을 3회 실행한다.
이어서, 염색체를 이용하여 카운터 염색(counter staining)을 한 후 석션을 한다. 이후 워싱을 실행함으로써 원하는 세포를 얻을 수 있다.
지금까지 본 발명에 따른 구체적인 실시예에 관하여 설명하였으나, 본 발명의 범위에서 벗어나지 않는 한도 내에서는 여러 가지 변형이 가능함은 물론이다. 그러므로, 본 발명의 범위는 설명된 실시예에 국한되어 정해져서는 안 되며, 후술하는 특허 청구의 범위뿐 아니라 이 특허 청구의 범위와 균등한 것들에 의해 정해져야 한다.
이상과 같이 본 발명은 비록 한정된 실시예와 도면에 의해 설명되었으나, 본 발명은 상기의 실시예에 한정되는 것은 아니며, 이는 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 이러한 기재로부터 다양한 수정 및 변형이 가능하다. 따라서, 본 발명 사상은 아래에 기재된 특허청구범위에 의해서만 파악되어야 하고, 이의 균등 또는 등가적 변형 모두는 본 발명 사상의 범주에 속한다고 할 것이다.
100: 세포 선별 통합 장치
110: 작업 스테이지
120: 다방향 이동부
130: 자동 액체 분사부
140: 이미징 재현부
150: 선별부 이동 가이드
160: 세포 자동 선별부
181, 183: 모니터
200: 암실

Claims (9)

  1. 작업 스테이지 상에서 다방향으로 이동 가능하게 장착되며, 자동으로 세포 염색을 위한 액체를 분사하는 자동 액체 분사부;
    상기 작업 스테이지에 구비되며, 상기 자동 액체 분사부에 의해 염색된 상기 세포의 이미징(imaging)을 자동으로 재현하는 이미징 재현부; 및
    상기 작업 스테이지에 구비되며, 이미징 재현된 상기 세포로부터 특정 세포를 선별하는 세포 자동 선별부;
    를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 자동 액체 분사부는 다방향 이동부에 장착되며,
    상기 다방향 이동부는,
    상기 작업 스테이지 상에 장착되며, 일 방향으로 제1 가이드를 구비한 제1 이동몸체;
    상기 제1 가이드를 따라 이동 가능하며, 상기 제1 가이드에 대해 직교 방향을 가지는 제2 가이드를 구비한 제2 이동몸체; 및
    상기 제2 가이드를 따라 이동 가능하며, 상기 자동 액체 분사부가 높이 방향으로 이동 가능하게 장착되는 3 가이드를 구비하는 제3 이동몸체를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 자동 액체 분사부는,
    세포 염색을 위한 액체가 수용되는 수용몸체; 및
    상기 수용몸체의 하단부에 장착되어 상기 작업 스테이지 상에 놓이는 피펫팁, 시약병, 폐기물 처리기 또는 시편 스테이지에 상기 수용몸체에 수용된 액체를 분사하여 염색 공정을 실행하도록 하는 적어도 하나의 분사기를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 자동 액체 분사부에 의해서 염색된 세포는 시편 스테이지에 놓인 상태에서 상기 시편 스테이지의 이동에 의해서 상기 이미징 재현부의 촬영 영역으로 이동되는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 이미징 재현부는 도립형 형광 현미경(Inverted Microscope)인 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 세포 자동 선별부는 상기 이미징 재현부의 상부에서 이동 가능하도록 선별부 이동 가이드에 장착되는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 선별부 이동 가이드는,
    일 방향으로 이동 가능하도록 장착되는 제1 가이드몸체;
    상기 제1 가이드몸체에 형성된 높이 방향의 경로를 따라 이동 가능한 제2 가이드몸체를 포함하며,
    상기 세포 자동 선별부는 상기 제2 가이드몸체에 형성된 수평 방향의 경로를 따라 이동 가능한 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 작업 스테이지 상에는 상기 자동 액체 분사부, 상기 이미징 재현부 또는 상기 세포 자동 선별부에 의해 처리되는 세포를 디스플레이하는 디스플레이부가 구비되는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 자동 액체 분사부에 의한 상기 세포의 염색, 상기 이미징 재현부에 의한 상기 세포의 이미징 재현 그리고 상기 세포 자동 선별부에 의한 상기 세포의 선별을 위하여 암실 환경 내에서 구비되는 것을 특징으로 하는 세포 선별 통합 장치.
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