KR20220091410A

KR20220091410A - 피부 개선용 조성물

Info

Publication number: KR20220091410A
Application number: KR1020210185238A
Authority: KR
Inventors: 이광진; 이소영; 진무현; 민서림; 김영봉
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2020-12-23
Filing date: 2021-12-22
Publication date: 2022-06-30
Also published as: JP2024502775A; WO2022139458A1; CN115297828A

Abstract

본 발명은 세드롤(Cedrol); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상; 또는 페룰산(Ferulic acid); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는 피부 개선용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용; 항산화용; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습용; 화장료, 식품 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.
또한 본 발명의 조성물은 세드롤(Cedrol) 및 페룰산(Ferulic acid)의 낮은 제형 안정성을 보완하였으며, 항산화, 멜라닌 감소, 콜라겐 합성 촉진, 히알루론산 합성 촉진 효과 모두 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid); 단독일때보다 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;과 조합하였을 때 시너지 효과가 발생함을 확인하였다.

Description

피부 개선용 조성물 {Composition for improving skin}

본 발명은 세드롤(Cedrol); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상; 또는 페룰산(Ferulic acid); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는 피부 개선용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용; 항산화용; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습용; 화장료, 식품 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부색은 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 인체 내외의 색소 함유 유무 등 여러 요인들에 의해 결정되며, 특히 멜라노사이트에서 타이로시나제(tyrosinase) 등의 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 중요하다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 하지만, 과잉생산될 경우 색소침착 및 피부노화를 촉진하고 피부암 유발에도 주요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다.

과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서, 이전부터 아스코르빈산(ascorbic acid), 코지산, 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논(hydroquinone), 글루타치온(glutathione), 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하였다. 그러나, 이들은 불충분한 미백 효과, 피부에 대한 안전성 문제, 화장료에 배합시 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

또한, 최근 환경오염으로 인한 자외선 양의 증가, 서구화된 생활습관, 스트레스 등 피부건강을 위협하는 요인들이 증가하고 있다. 이들은 피부 오염, 건조, 트러블, 피부면역체계 이상 등을 유발하며, 결국 피부염, 거칠음, 급격한 노화 등을 야기한다.

특히, 체내 활성 산소종의 농도를 증가시키고, 이러한 활성 산소종은 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당 및 DNA 등을 공격하여 과산화 반응을 일으킴으로써 피부의 노화를 촉진하는 문제가 있다. 이에 따라, 활성 산소종의 생성을 억제하는 항산화 효과, 이를 통한 항노화(피부 노화 방지) 효과를 가지는 화장료 조성물에 대한 개발이 요구되고 있다.

콜라겐은 피부의 섬유아세포(fibroblast)에서 생성되는 주요 기질 단백질로서, 피부의 기계적 견고성과 조직의 결합력을 유지하고, 세포접착의 지탱, 세포 분화의 유도 등의 기능을 한다. 연령 증가 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 콜라겐은 감소하며, 콜라겐을 분해하는 콜라게나제 효소 활성으로 콜라겐 감소가 촉진된다. 이는 피부의 주름 형성과도 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다.

한편 피부에서는, 포유류의 체내에 존재하는 히알루론산의 50% 이상이 피부, 특히 표피의 세포 간 간격과 진피의 결체 조직에 분포한다고 알려져있다. 이러한 히알루론산의 피부 내에서의 양은 노화와 함께 감소되는 것으로 알려져있고, 피부 내 히알루론산의 감소는 피부의 수분 함유량 감소의 직접적인 원인 중 하나라고 여겨지고 있다. 따라서, 피부 보습과 히알루론산은 밀접한 연관이 있다.

현재, 피부 탄력 증진 및 주름 개선 화장료로는 레티놀, 아데노신, 클로렐라 추출물 등이 알려져 있다. 레티놀은 콜라겐 합성을 촉진하며 엘라스타제 효소를 저해하는 물질이지만, 불안정하고 피부 적용시 자극, 발진 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있다.

또한, 세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid)은 그 미용 효과가 알려져 있으나, 용해도와 같은 물질의 고유 특성으로 인하여 제형을 통해 효과가 충분히 전달되도록 하기에 어려움이 있었다.

상기한 목적을 달성하기 위해, 예의 연구 노력한 결과, 본 발명자들은 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid);을 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상과 조합하였을 때 자유라디칼 소거, 멜라닌 감소, 콜라겐 합성 촉진, 히알루론산 합성 촉진효과가 있으며, 세드롤; 또는 페룰산; 단독으로 제형을 제조하였을 때 보다 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid);을 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid) 으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상과 조합으로 인해 제형 안정성이 확보되는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 화장료, 식품 또는 의약외품을 위한, 세드롤(Cedrol); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 화장료, 식품 또는 의약외품을 위한, 페룰산(Ferulic acid); 및 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 조성물은 자유라디칼 소거, 멜라닌 감소, 콜라겐 합성 촉진, 히알루론산 합성 촉진효과로 피부를 개선할 수 있으며, 본 발명의 조합으로 인해 제형의 안정성이 확보되는 효과가 있는 바, 피부를 개선하기 위한 화장료, 식품 또는 의약외품에 효과적으로 사용될 수 있다.

이하 본 발명을 상세하게 설명한다.

본 발명의 실험예에서 확인한 것처럼, 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid); 단독으로 제형을 제조하였을 때, 제형 안정성이 상당히 낮은 문제점이 있다(실험예 2의 실시예 7 및 실시예 11). 하지만 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid);을 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;과 조합한 실시예 8 내지 10, 실시예 12 내지 14의 경우, 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid);이 석출되지 않는 것을 확인하였다. 따라서, 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid);을 단독으로 사용했을때보다 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)과 조합하였을 때 제형 안정성이 높아짐을 확인하였다.

또한, 항산화, 멜라닌 감소, 콜라겐 합성 촉진, 히알루론산 합성 촉진 효과 모두 세드롤(Cedrol); 또는 페룰산(Ferulic acid); 단독일때보다 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;과 조합하였을 때 시너지 효과가 발생함을 확인하였다.

본 발명은 세드롤(Cedrol); 및

베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 피부 미백, 항산화, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 또는 피부 보습용 화장료, 식품, 의약외품 조성물을 제공한다.

다른 양태로서, 페룰산(Ferulic acid); 및

본 발명의 "피부 미백" 이란 멜라닌 색소의 합성을 저해하여 피부 톤을 밝게 할 뿐만 아니라, 멜라닌의 피부 침착(과색소 침착증)을 억제하거나 방지, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미, 주근깨를 완화 또는 개선하는 모든 작용을 의미한다.

본 발명의 "항산화"란 세포내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유라디칼(free radical) 또는 활성산소종(reactive oxygen species;ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 것을 말하며, 자유라디칼 또는 활성산소종을 제거함으로써 세포의 손상을 감소시켜 피부의 노화 방지 효과를 나타낼 수 있다. 본 발명에서는, 실험에에서 확인한 DPPH 감소 효과를 통해 자유라디칼 소거 효과를 확인하였다.

본 발명의 "자유라디칼(free radical)"이란 1개의 쌍 안 지은 전자를 갖는 원자 혹은 분자. 수소원자, 염소원자 등은 단원자의 유리기인데, 보통 자유라디칼이라 불리는 것은 무기 혹은 유기 화합물 분자에서 프로톤 1개가 탈리하여 잔기에 쌍 안 이룬 전자 1개가 있는 것을 말한다. 활성산소들은 화학적인 반응성이 뛰어나며 이들에 의해 유도되는 자유라디칼은 생체 내의 각종 반응에 영향을 미치고 노화 등을 야기한다. 생물체는 자유라디칼들에 의해 일어나는 유해성에 항상 노출되어 있으며, 세포의 연령증가에 따라 유해성이 점진적으로 축적되어 다양한 질병들을 일으킨다. 따라서, 자유라디칼 소거는 항산화 효과에 중요한 역할을 한다.

본 발명의 "피부 탄력 증진"이란 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시켜주는 것을 의미한다. 또한, "주름 개선"이란 이란 피부에 주름이 생기는 것을 예방, 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 의미한다. 본 발명에서는 콜라겐 합성 촉진 효과를 확인하여 피부 탄력 증진 및 주름 개선 효과를 확인하였다.

본 발명의 "피부 보습"이란 피부에 수분감을 증가시켜주고, 수분 손실을 억제하여 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다. 본 발명에서는 히알루론산 합성 촉진 효과를 확인하여 피부 보습 효과를 확인하였다.

본 발명의 "화장료 조성물"은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태일 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등과 같은 화장수, 훼이셜 로션, 바디로션 등과 같은 유액, 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등과 같은 크림, 에센스, 화장연고, 밤(balm), 스프레이, 젤, 팩, 선 스크린, 메이크업 베이스, 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션, 파우더, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일과 같은 메이크업 제거제, 클렌징 폼, 비누, 바디 워시 등과 같은 세정제 등의 제형을 가질 수 있다.

또한, 상기 화장품은 본 발명의 조성물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.

상기 화장료 제형은 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워시-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 상기 본 발명의 조성물을 포함할 수 있을 것이다. 반면, 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워시-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 상기 본 발명의 조성물을 포함해도 무방할 것이다. 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 상기 본 발명의 조성물을 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%(바람직하게는 0.0001 중량% 내지 1 중량%)로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물이 상기 본 발명의 조성물을 0.0001 중량% 미만으로 포함할 경우에는 충분한 피부 미백; 항산화; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습 효과를 기대할 수 없고, 10 중량%를 초과하여 포함할 경우에는 알러지 등 원치 않는 반응이 발생하거나 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으므로 이를 방지하기 위한 것이다.

본 발명의 "식품 조성물"은 상기 본 발명의 조성물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품의 조성물을 의미한다.

상기 식품 제형은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 피부 미백; 항산화; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.

상기 본 발명의 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 본 발명의 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.

식품 제형이 음료인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 내지 0.03 g이다.

상기 외에 식품 제형은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 식품 제형은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 "의약외품 조성물"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되나, 의약품 보다 인체에 미치는 작용이 경미한 물품을 의미하고, 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품용 조성물을 의미한다. 약사법에 따른 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외하며, 일 구체예로 피부 외용제, 개인위생용품 또는 내복용 제제를 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며,　의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.

본 발명은 세드롤(Cedrol); 및

베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 피부 미백, 항산화, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 또는 피부 보습용 약학 조성물을 제공한다.

다른 양태로서, 페룰산(Ferulic acid); 및

본 발명의 "약학 조성물"은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 상기 본 발명의 조성물을 약학 조성물로 사용하는 경우, 일반 의약품 제제의 형태, 예를 들어, 임상 투여 시 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 약학 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌 글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 조성물은 화장료 제형 제조를 위해 사용될 수 있다. 이러한 화장료 제형에 대해서는 앞서 본 발명의 조성물을 포함하는 화장료 제형에 관한 설명에 기재된 내용과 동일하다.

본 발명에 따른 조성물에 포함되는 상기 언급된 성분들 각각은 바람직하게는 각 국 정부에 의해 규정된 규범에 명시된 최대 사용량을 초과하지 않는 범위 내에서 본 발명의 조성물에 포함될 수 있다. 예를 들어, 약학 조성물을 제공하는 경우, 대한민국, 미국, 유럽, 독일, 일본, 중국 등에서 규정하는 약전(Pharmacopoeia) 또는 의약품집에 명시된 제법, 성상, 사용량 등의 범위 내에서 본 발명에 포함될 수 있다. 또한, 화장료 조성물을 제공하는 경우 각 국 정부에서 규정하는 화장품 안전에 관한 법률 또는 중국 정부에서 규정하는 《화장품 안전 기술 사양》, 에 명시된 최대 사용량을 초과하지 않는 범위 내에서 본 발명의 화장료 조성물에 포함될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 의해 제한되는 것은 아니다. 또한, 이들 실험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위한 목적일 뿐이므로, 어떤 의미로든 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.

실험예 1: 피부 개선 효과 확인

샘플번호	조성물
비교예 1	세드롤(Cedrol)
비교예 2	페룰산(Ferulic acid)
비교예 3	베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)
비교예 4	리놀레산(Linoleic acid)
실시예 1	세드롤(Cedrol) + 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)
실시예 2	세드롤(Cedrol) + 리놀레산(Linoleic acid)
실시예 3	세드롤(Cedrol) + 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) + 리놀레산(Linoleic acid)
실시예 4	페룰산(Ferulic acid) + 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)
실시예 5	페룰산(Ferulic acid) + 리놀레산(Linoleic acid)
실시예 6	페룰산(Ferulic acid) + 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) + 리놀레산(Linoleic acid)

상기와 같이 해당 성분을 메탄올에 용해하여 샘플을 제조하였다. 하기 실험예 1 내지 4의 실험 방법에 따라 샘플의 각 성분의 농도가 조절되었다.

<실험예 1-1> 자유라디칼 소거에 따른 항산화 효과

비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6에서 용액 안의 각 구성성분의 농도가 0.5 mg/mL로 되도록 메탄올을 용매로 하여 용액을 제조하였다. 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6의 항산화 효과를 확인하기 위하여 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl; DPPH) 방법으로 자유라디칼 소거능을 측정하였다. DPPH는 비교적 안정한 자유 라디칼로서 라디칼 상태로 존재시 517 nm에서 최대 흡광을 보이다가 라디칼이 소거되면 흡광 능력을 잃는다. DPPH는 0.12 mM의 농도로 메탄올에 녹여 사용하였다.

비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6과 농도별 Trolox 용액(0.0125, 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 mg/mL)들을 24-웰 플레이트에 각각 100 μL씩 넣고, DPPH 용액을 1,900 μL씩 첨가하였다. 상온에서 빛을 차단하여 1시간 방치하고 마이크로플레이트 리더(BioTek EPOCH)를 이용하여 517 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 7개 농도에서의 Trolox 용액 흡광도 값으로 농도에 따른 검량선(Calibration curve)을 작성하였다. 이 실험에서 Trolox는 시료의 항산화력을 측정하기 위한 하나의 지표이며, 각 비교예 및 실시예의 항산화력은 Trolox 대비한 크기가 된다. 검량선에 실시예 용액의 흡광도를 대입하여 해당 실시예 용액 1 mL가 보여주는 항산화 효과의 정도를 Trolox μmol equivalents/mL로 나타내어 하기 표 2에 정리하였다. 실험은 3회 수행한 후 평균값을 계산하여 나타내었다.

시료	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
Trolox μmol equivalents/mL	0.104	0.981	0.051	0.023	0.163	0.148	0.213	1.051	0.998	1.026

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 실시예에서 모두 충분한 라디칼 소거능이 있음을 확인하였다.

<실험예 1-2> 멜라닌 생성 저해에 따른 미백 효과

MNT-1 멜라노마 세포(MNT-1 Melanoma cell)를 배양하기 위해 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)과 10% FBS(Fetal Bovine Serum)을 혼합한 것을 기본 배지로 하였다. MNT-1 멜라노마 세포를 6-well plate에 1~2 x 10⁵ cells/mL의 농도로 분주하여 24시간 배양하였다. 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6의 각 구성성분의 농도가 최종 3 μg/mL (3 ppm)이 되도록 시료를 처리한 후 72시간 배양하였다. 양성대조군으로 알부틴(Arbutin)은 200 μg/mL (200 ppm)이 되도록 처리하였다(표 3의 양성대조군). 이후, 세포들을 트립신(Trypsin) 처리하여 배양용기로부터 떼어내 13,000 rpm으로 1분간 원심 분리한 후 상층액을 제거하였다. 남아있는 세포에 0.5% Triton X-100 용액 300 μL를 첨가하여 세포를 용해(Lysis)하였다. 이를 다시 13,000 rpm으로 3분간 원심분리하여 침전(Pellet)과 상층액을 따로 회수하였다. 침전 내 멜라닌을 0.5 N 수산화나트륨 용액을 100 μL 첨가하고 12시간 Incubation하여 녹였고, 분광 광도계를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하여 생성된 멜라닌 총량을 측정하였다.

메탄올로 처리된 군(음성대조군)에 비해 생성 저해된 멜라닌 총량을 멜라닌 생성 저해율(%)로 계산(하기 식 1)하였으며 실험은 3회 수행한 후 평균값을 계산하여 표 3에 나타내었다.

멜라닌 생성 저해율(%)=(1-(각 샘플로 처리된 군의 생성된 멜라닌 총량 / 메탄올로 처리된 군의 생성된 멜라닌 총량))*100 (식 1)

시료	양성대조군	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
멜라닌 생성 저해율(%)	19.8%	17.5%	16.3%	1.7%	6.7%	18.1%	19.0%	20.1%	15.4%	19.9%	18.5%

상기 표 3에 나타난 바와 같이 본 발명의 실시예에서 모두 충분한 멜라닌 생성 저해 효과가 있음을 확인하였다.

<실험예 1-3> 콜라겐 합성 촉진 효과

인간 유래 섬유아세포(Fibroblast)를 배양하기 위해 DMEM과 10% FBS을 혼합한 것을 기본 배지로 하였다. 피부 섬유아세포를 48-well plate에 2~5 x 10⁴ cells/mL의 농도로 분주하여 24시간 배양하였다. 성장 요인이 있는 기본 배지를 제거하고 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6의 각 구성성분의 농도가 최종 3 μg/mL (3 ppm)인 배지(FBS가 첨가되지 않은 배지)를 가하고 24시간 배양하였다. 콜라겐 합성을 유도하는 양성대조군은 TGF-β로 5 ng/mL (5 ppb)이 되도록 처리하였다(표 4의 양성대조군). 세포배양액을 취하여 Human procollagen 1α1 duoset ELISA Kit(R&D Systems사)와 분광 광도계를 이용하여 합성된 콜라겐을 측정하였다.

분리 정제된 콜라겐을 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8 ng/mL의 농도에서 측정하여 검량선을 작성하였고 이를 바탕으로 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6, 음성대조군, 양성대조군의 콜라겐(Type I collagen) 생성량을 계산하였다. 메탄올로 처리된 군(음성대조군)에 비해 생성된 콜라겐 양을 콜라겐 생성율(%)로 계산(식 2)하였으며 실험은 3회 수행한 후 평균값을 계산하여 표 4에 나타내었다.

콜라겐 생성율(%)=(각 실시예로 처리된 군의 콜라겐 생성량 - 메탄올로 처리된 군의 콜라겐 생성량) / (메탄올로 처리된 군의 콜라겐 생성량)*100 (식 2)

시료	양성대조군	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
콜라겐 생성율(%)	32.1%	27.9%	8.8%	2.4%	-2.5%	27.6%	21.2%	23.5%	6.6%	7.6%	4.1%

상기 표 4에 나타낸 바와 같이 본 발명의 실시예에서 모두 충분한 콜라겐 증진 효과가 확인되었다.

<실험예 1-4> 히알루론산 합성 촉진 효과

인간 피부 각질형성세포(Primary cultured human skin keratinocyte)는 Thermo Fisher Scientific사로부터 구입하여 성장인자인 Epidermal Growth Factor(EGF)와 Bovine Pituitary Extract(BPE)가 첨가된 Keratinocyte-SFM을 이용해 배양하였다. 각질형성세포를 60-mm culture plate에 2~5 x 10⁵ cells/mL의 농도로 분주하여 24시간 배양하였다. 성장 요인이 있는 기본 배지를 제거하고 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6의 각 구성성분의 농도가 최종 3 μg/mL (3 ppm)인 배지(EGF와 BPE가 첨가되지 않은 배지)를 가하고 24시간 배양하였다. 히알루론산 합성을 유도하는 양성대조군은 all-trans-Retinoic acid로 100 nM이 되도록 처리하였다(표 5의 양성대조군). 세포배양액을 취하여 Hyaluronan DuoSet ELISA Kit(R&D Systems사)와 분광 광도계를 이용하여 합성된 히알루론산을 측정하였다.

표준 히알루론산을 1.1, 3.3, 10, 30, 90 ng/mL의 농도에서 측정하여 검량선을 작성하였고 이를 바탕으로 비교예 1 내지 4 및 실시예 1 내지 6, 음성대조군, 비교예 3의 히알루론산 생성량을 계산하였다. 메탄올로 처리된 군 (음성대조군)에 비해 생성된 히알루론산 양을 히알루론산 생성율(%)로 계산하였으며(식 3) 실험은 3회 수행한 후 평균값을 계산하여 표 5에 나타내었다.

히알루론산 생성율(%)=(실시예로 처리된 군의 히알루론산 생성량 - 메탄올로 처리된 군의 히알루론산 생성량)/(메탄올로 처리된 군의 히알루론산 생성량)*100 (식 3)

시료	양성대조군	비교예 1	비교예 2	비교예 3	비교예 4	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6
히알루론산 생성율(%)	45.9%	5.6%	32.2%	-3.0%	4.1%	3.9%	4.4%	2.8%	36.3%	42.2%	42.9%

상기 표 5에 나타난 바와 같이 본 발명의 실시예에서 모두 충분한 히알루론산 생성효과가 있음을 확인하였다.

실험예 2: 제형 안정성 개선 확인

<실험예 2-1> 세드롤(Cedrol)을 함유한 화장료 조성물 제조(실시예 7-10)

실시예 7은 하기 표 6에 기재된 조성비(단위 중량%)로, 원료 2에 원료 3,4를 분산시킨 후 원료 5를 투입하여 용해하였다. 용해 확인 후 원료 6-8을 용해한 후 균일하게 교반하였다. 원료 1에 원료 9-11을 순차적으로 투입하여 균일하게 교반하고, 에탄올상을 수상에 서서히 투입하여 10분간 균일하게 교반하여 미용액을 제조하였다. 실시예 8-10은 실시예 7과 같은 방법으로 제조하였다.

원료	성분명	실시예 7	실시예 8	실시예 9	실시예 10
1	정제수	To 100	To 100	To 100	To 100
2	에탄올	2	2	2	2
3	베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)	-	0.1	-	0.1
4	리놀레산(Linoleic acid)	-	-	0.1	0.1
5	세드롤(Cedrol)	0.05	0.05	0.05	0.05
6	가용화제	1	1	1	1
7	향료	적량	적량	적량	적량
8	하이드로제네이티드폴리데센	0.3	0.3	0.3	0.3
9	카보머	0.15	0.15	0.15	0.15
10	중화제	적량	적량	적량	적량
11	방부제	적량	적량	적량	적량

<실험예 2-2> 페룰산(Ferulic acid)를 함유한 화장료 조성물 제조(실시예 11-14)

실시예 11은 하기 표 7에 기재된 조성비(단위 중량%)로, 원료 2에 원료 3,4를 분산시킨 후 원료 5를 투입하여 용해하였다. 용해 확인 후 원료 6-8을 용해한 후 균일하게 교반하였다. 원료 1에 원료 9-11을 순차적으로 투입하여 균일하게 교반하고, 에탄올상을 수상에 서서히 투입하여 10분간 균일하게 교반하여 미용액을 제조하였다. 실시예 12-14는 실시예 11과 같은 방법으로 제조하였다.

	성분명	실시예 11	실시예 12	실시예 13	실시예 14
1	정제수	To 100	To 100	To 100	To 100
2	에탄올	2	2	2	2
3	베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)	-	0.2	-	0.2
4	리놀레산(Linoleic acid)	-	-	0.2	0.2
5	페룰산(Ferulic acid)	0.1	0.1	0.1	0.1
6	가용화제	1	1	1	1
7	향료	적량	적량	적량	적량
8	하이드로제네이티드폴리데센	0.3	0.3	0.3	0.3
9	카보머	0.15	0.15	0.15	0.15
10	중화제	적량	적량	적량	적량
11	방부제	적량	적량	적량	적량

<실험예 2-3> 용해도 및 상용성 평가

상기 실시예 7 내지 14의 화장료 조성물에 대하여 용해도와 상용성을 평가하였다. 25℃에서 4주, 4℃에서 4주, 45℃에서 4주 동안 보관하면서 상(phase)의 분리 여부 및 석출 여부를 육안으로 관찰하여 하기 표 8 및 표 9에 나타내었다.

<평가 기준>

이상 없음 : ○, 약한 석출 : △, 분리 및 석출 : X

	실시예 7	실시예 8	실시예 9	실시예 10
실온 (25℃)	X	△	○	○
냉장 (4℃)	△	○	○	○
고온 (45℃)	X	○	○	○

상기 표 8에 나타난 바와 같이 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)를 사용한 실시예 8 내지 10의 경우 세드롤(Cedrol)이 물에서 용해됨이 확인되었다. 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)을 사용하지 않은 실시예 7의 경우 파우더 형태 그대로 분산되며 용해되지 않음이 확인되었다.

	실시예 11	실시예 12	실시예 13	실시예 14
실온 (25℃)	X	○	○	○
냉장 (4℃)	X	△	△	○
고온 (45℃)	X	○	○	○

상기 표 9에 나타난 바와 같이 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)를 사용한 실시예 12 내지 14의 경우 페룰산(Ferulic acid)이 물에서 용해됨이 확인되었다. 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)을 동시에 사용한 실시예 14에서는 냉장조건에서도 석출현상이 없이 안정한 제형이 유지됨을 확인하였다. 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)을 사용하지 않은 실시예 11의 경우 파우더 형태 그대로 분산되며 용해되지 않음이 확인되었다.

상기 실험 결과를 통해서, 본 발명의 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)은 세드롤(Cedrol)과 페룰산(Ferulic acid)의 용해도에 영향을 주어 화장료 내에 안정적으로 분산될 수 있도록 돕는다는 사실을 확인하였다.

뿐만 아니라, 본 발명의 세드롤(Cedrol)과 페룰산(Ferulic acid)은 각각 베타-시토스테롤(Beta-sitosterol)과 리놀레산(Linoleic acid)을 함께 처리하였을 때 화장료 내에서 안정적으로 분산될 수 있다는 사실을 확인할 수 있었다.

Claims

세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 피부 미백용 화장료 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 화장료는 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 파우더, 파운데이션, 밤(balm), 연고 또는 세정제의 제형인, 피부 미백용 화장료 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 조성물은 멜라닌 감소 효과를 갖는, 피부 미백용 화장료 조성물.
세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 항산화용 화장료 조성물.
제 4항에 있어서,
상기 화장료는 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 파우더, 파운데이션, 밤(balm), 연고 또는 세정제의 제형인, 항산화용 화장료 조성물.
제 4항에 있어서,
상기 조성물은 자유라디칼 소거 효과를 갖는, 항산화용 화장료 조성물.
세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물.
제 7항에 있어서,
상기 화장료는 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 파우더, 파운데이션, 밤(balm), 연고 또는 세정제의 제형인, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물.
제 7항에 있어서,
상기 조성물은 콜라겐 합성 촉진 효과를 갖는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물.
세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 피부 보습용 화장료 조성물.
제 10항에 있어서,
상기 화장료는 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 젤, 파우더, 파운데이션, 밤(balm), 연고 또는 세정제의 제형인, 피부 보습용 화장료 조성물.
제 10항에 있어서,
상기 조성물은 히알루론산 합성 촉진 효과를 갖는, 피부 보습용 화장료 조성물.
세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 식품 조성물.
제 13항에 있어서,
상기 조성물은 피부 미백용; 항산화용; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습용; 식품 조성물.
세드롤(Cedrol) 또는 페룰산(Ferulic acid); 및
베타-시토스테롤(Beta-sitosterol) 및 리놀레산(Linoleic acid)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 그 이상;을 포함하는, 의약외품 조성물.
제 15항에 있어서,
상기 조성물은 피부 미백용; 항산화용; 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용; 또는 피부 보습용; 의약외품 조성물.