KR20220083000A - 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220083000A KR20220083000A KR1020200172525A KR20200172525A KR20220083000A KR 20220083000 A KR20220083000 A KR 20220083000A KR 1020200172525 A KR1020200172525 A KR 1020200172525A KR 20200172525 A KR20200172525 A KR 20200172525A KR 20220083000 A KR20220083000 A KR 20220083000A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- bone
- clemastine
- disease
- treatment
- prevention
- Prior art date
Links
- YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N clemastine Chemical compound CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N 0.000 title claims abstract description 130
- 229960002881 clemastine Drugs 0.000 title claims abstract description 129
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 title claims abstract description 33
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title claims abstract description 26
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 claims abstract description 114
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 claims abstract description 23
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 45
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 31
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 19
- -1 c-FOS Proteins 0.000 claims description 16
- 101150011252 CTSK gene Proteins 0.000 claims description 15
- 101150035730 Mmp9 gene Proteins 0.000 claims description 15
- 101710151542 Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 claims description 15
- 102100034404 Nuclear factor of activated T-cells, cytoplasmic 1 Human genes 0.000 claims description 15
- 101100116205 Mus musculus Dcstamp gene Proteins 0.000 claims description 14
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 13
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 13
- 101150014538 ACP5 gene Proteins 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 101000876610 Dictyostelium discoideum Extracellular signal-regulated kinase 2 Proteins 0.000 claims description 11
- 101001052493 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 1 Proteins 0.000 claims description 11
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 11
- 102100024193 Mitogen-activated protein kinase 1 Human genes 0.000 claims description 11
- 101150001535 SRC gene Proteins 0.000 claims description 11
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 11
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 9
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 8
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 8
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 claims description 7
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 claims description 7
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 6
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 claims description 5
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 claims description 5
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 claims description 5
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 claims description 5
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000028169 periodontal disease Diseases 0.000 claims description 5
- 102000003727 Caveolin 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000026 Caveolin 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 101100366137 Mesembryanthemum crystallinum SODCC.1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101100096142 Panax ginseng SODCC gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101150017120 sod gene Proteins 0.000 claims description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 26
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 13
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 36
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 25
- 208000035896 Twin-reversed arterial perfusion sequence Diseases 0.000 description 23
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 20
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 description 18
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 18
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 17
- 108010018242 Transcription Factor AP-1 Proteins 0.000 description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 16
- 230000006870 function Effects 0.000 description 16
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 15
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 15
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 description 15
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 13
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 13
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 12
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 12
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 12
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 12
- 102100033810 RAC-alpha serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 108010071563 Proto-Oncogene Proteins c-fos Proteins 0.000 description 9
- 102000007568 Proto-Oncogene Proteins c-fos Human genes 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 108010045815 superoxide dismutase 2 Proteins 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 102100032891 Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial Human genes 0.000 description 8
- 102100035100 Transcription factor p65 Human genes 0.000 description 8
- 210000004979 bone marrow derived macrophage Anatomy 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 8
- 108010052419 NF-KappaB Inhibitor alpha Proteins 0.000 description 7
- 102100039337 NF-kappa-B inhibitor alpha Human genes 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 7
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 6
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 6
- 101150006300 CALCR gene Proteins 0.000 description 6
- 108010045171 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Proteins 0.000 description 6
- 102000005636 Cyclic AMP Response Element-Binding Protein Human genes 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- 101150000187 PTGS2 gene Proteins 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 6
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 6
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 6
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 101150027145 ATP6V0D2 gene Proteins 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000019145 JUN kinase activity proteins Human genes 0.000 description 5
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 5
- 210000004268 dentin Anatomy 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 5
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 101150005399 sod2 gene Proteins 0.000 description 5
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 4
- 102100028237 Breast cancer anti-estrogen resistance protein 1 Human genes 0.000 description 4
- 108050007340 Breast cancer anti-estrogen resistance protein 1 Proteins 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 4
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 4
- 101150058540 RAC1 gene Proteins 0.000 description 4
- 102100022122 Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 Human genes 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- QPJVMBTYPHYUOC-UHFFFAOYSA-N methyl benzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1 QPJVMBTYPHYUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010603 microCT Methods 0.000 description 4
- 230000020395 negative regulation of osteoclast differentiation Effects 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 4
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150101999 IL6 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 3
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 3
- 101150053771 MT-CYB gene Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 108010018525 NFATC Transcription Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000002673 NFATC Transcription Factors Human genes 0.000 description 3
- 101150101356 Ppargc1b gene Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 210000005088 multinucleated cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 description 3
- 230000030448 osteoclast fusion Effects 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000004171 Cathepsin K Human genes 0.000 description 2
- 108090000625 Cathepsin K Proteins 0.000 description 2
- 102100030878 Cytochrome c oxidase subunit 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100024230 Dendritic cell-specific transmembrane protein Human genes 0.000 description 2
- 101710190014 Dendritic cell-specific transmembrane protein Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150044523 ITGB3 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 208000030136 Marchiafava-Bignami Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 2
- 102100021506 NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 4 Human genes 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 2
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 2
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229940095102 methyl benzoate Drugs 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 210000001721 multinucleated osteoclast Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005937 nuclear translocation Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 208000001685 postmenopausal osteoporosis Diseases 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 2
- 108091006084 receptor activators Proteins 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCSBTDBGTNZOAB-UHFFFAOYSA-N 2,3-dinitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1[N+]([O-])=O HCSBTDBGTNZOAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 2-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-M 4-hydroxybutyrate Chemical compound OCCCC([O-])=O SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OBKXEAXTFZPCHS-UHFFFAOYSA-N 4-phenylbutyric acid Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=CC=C1 OBKXEAXTFZPCHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N Alendronic Acid Chemical compound NCCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 101100397595 Caenorhabditis elegans jnk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000005417 Crk Associated Substrate Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010031504 Crk Associated Substrate Protein Proteins 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710091265 Cytochrome c oxidase subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102100024347 Dedicator of cytokinesis protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 1
- 101000919849 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000725401 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001052956 Homo sapiens Dedicator of cytokinesis protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000950695 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000605122 Homo sapiens Prostaglandin G/H synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000605127 Homo sapiens Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000749351 Homo sapiens V-type proton ATPase subunit d 2 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101710150402 Mastin Proteins 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037808 Mitogen-activated protein kinase 8 Human genes 0.000 description 1
- 108010035095 NADH dehydrogenase subunit 4 Proteins 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHABMANUFPZXEB-UHFFFAOYSA-N O-demethyl-aloesaponarin I Natural products O=C1C2=CC=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C=C(O)C(C(O)=O)=C2C MHABMANUFPZXEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L Phosphate ion(2-) Chemical compound OP([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 1
- 101710141795 Ribonuclease inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122208 Ribonuclease inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100037968 Ribonuclease inhibitor Human genes 0.000 description 1
- 108060006706 SRC Proteins 0.000 description 1
- 102000001332 SRC Human genes 0.000 description 1
- 238000010818 SYBR green PCR Master Mix Methods 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 102100040566 V-type proton ATPase subunit d 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- ZZXDRXVIRVJQBT-UHFFFAOYSA-M Xylenesulfonate Chemical compound CC1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1C ZZXDRXVIRVJQBT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N acetic acid phenyl ester Natural products CC(=O)OC1=CC=CC=C1 IPBVNPXQWQGGJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YTIVTFGABIZHHX-UHFFFAOYSA-L acetylenedicarboxylate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C#CC([O-])=O YTIVTFGABIZHHX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940062527 alendronate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 230000002308 calcification Effects 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- JOYKCMAPFCSKNO-UHFFFAOYSA-N chloro benzenesulfonate Chemical compound ClOS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 JOYKCMAPFCSKNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVSASDOGYIBWTA-UHFFFAOYSA-N chloro benzoate Chemical compound ClOC(=O)C1=CC=CC=C1 KVSASDOGYIBWTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 1
- 230000003081 coactivator Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC([O-])=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000018823 dietary intake Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 235000020510 functional beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 description 1
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000004349 growth plate Anatomy 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N heptanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000938 histamine H1 antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-M mandelate Chemical compound [O-]C(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005341 metaphosphate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C21 KVBGVZZKJNLNJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- DYUMLJSJISTVPV-UHFFFAOYSA-N phenyl propanoate Chemical compound CCC(=O)OC1=CC=CC=C1 DYUMLJSJISTVPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049953 phenylacetate Drugs 0.000 description 1
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950009215 phenylbutanoic acid Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- KCXFHTAICRTXLI-UHFFFAOYSA-N propane-1-sulfonic acid Chemical compound CCCS(O)(=O)=O KCXFHTAICRTXLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UORVCLMRJXCDCP-UHFFFAOYSA-M propynoate Chemical compound [O-]C(=O)C#C UORVCLMRJXCDCP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000020404 regulation of osteoclast differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000754 repressing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003161 ribonuclease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 229940116351 sebacate Drugs 0.000 description 1
- CXMXRPHRNRROMY-UHFFFAOYSA-L sebacate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCCCCCCCC([O-])=O CXMXRPHRNRROMY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005204 segregation Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- VHYHKZFQXUYNSG-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-1,3-dihydrotetrazol-3-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1[NH+](C=2C=CC(I)=CC=2)N=C(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)N1 VHYHKZFQXUYNSG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N sodium;9,10-dioxoanthracene-2-sulfonic acid Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(=O)C3=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C3C(=O)C2=C1 GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-L suberate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCCCCCC([O-])=O TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 1
- KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-L terephthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 KKEYFWRCBNTPAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ISIJQEHRDSCQIU-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2,7-diazaspiro[4.5]decane-7-carboxylate Chemical compound C1N(C(=O)OC(C)(C)C)CCCC11CNCC1 ISIJQEHRDSCQIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 229940071104 xylenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/306—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/30—Other Organic compounds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
본 발명은 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 파골세포 분화와 관련된 중요한 인자들을 억제함으로써, 파골세포의 분화를 억제하여 골 흡수를 저해하는 효과가 있는 바, 파골세포의 불균형에 의하여 유발되는 골 관련 질환을 치료할 수 있으므로, 골 관련 질환의 예방 또는 치료제 개발에 널리 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
대표적인 대사성 골 질환인 골다공증(osteoporosis)은 골 조직의 석회가 감소되어 뼈의 치밀질이 엷어지고 그로 인해 골수강(骨髓腔)이 넓어지게 되는 질환으로, 증세가 진전됨에 따라 뼈가 약해지기 때문에 작은 충격에도 골절되기가 쉽다.
골다공증은 골량의 감소와 미세구조의 이상을 특징으로 갖는데, 노화가 진행되면서 낡은 뼈의 흡수와 새로운 뼈의 형성 사이에 균형이 무너져 새로운 뼈의 대체(bone remodeling)가 원활히 이루어지지 않아 뼈가 엉성해지고, 부러지거나 부서질 위험성이 커지게 된다. 이러한 골량은 유전적 요인, 영양 섭취, 호르몬의 변화, 운동 및 생활 습관의 차이 등 여러 가지 요인들에 의해 영향을 받으며, 노령, 운동 부족, 저체중, 흡연, 저칼슘 식이, 폐경, 난소 절제 등이 골량 감소의 주요한 원인이다.
한편, 개인차는 있지만 대개 골량은 14~18세에 가장 높고 노후에는 1년에 약 1%씩 감소한다. 특히, 여성의 경우 30세 이후부터 골 감소가 지속적으로 진행되며, 폐경기에 이르면 호르몬 변화에 의해 골 감소가 급격히 진행된다. 즉, 폐경기에 이르면 에스트로겐 농도가 급속히 감소하는데, 이때, IL-7(interleukin-7)에 의한 것처럼 B-임파구(B-lymphocyte)가 다량 생성되어 골수(bone marrow)에 B 세포 전구체(pre-B cell)가 축적되고, 이로 인해 IL-6의 양이 증가하여 파골세포의 활성을 증가시키므로 결국 골량이 감소하게 된다.
이와 같이, 골다공증은 정도에 차이는 있으나 노년층, 특히 폐경기 이후의 여성에게 있어서는 피할 수 없는 증상으로, 선진국에서는 인구가 노령화됨에 따라 골다공증 및 그 치료제에 대한 관심이 점차 증가하고 있다. 또한, 전 세계적으로 골질환 치료와 관련되어 약 1,300억 달러의 시장이 형성되어 있으며, 앞으로 더 증가할 것으로 예상되기 때문에 세계적인 각 연구 기관과 제약회사에서는 골질환 치료제 개발에 많은 투자를 하고 있다.
국내에서도 근래에 평균수명이 80세에 육박하면서 골다공증 유병률이 급격하게 증가하고 있는데, 최근 지역 주민을 대상으로 실시된 연구에 의하면 전국 인구로 표준화하였을 경우 남성의 4.5%, 여성의 19.8%가 골다공증을 갖고 있다고 보고되었다. 이는 골다공증이 당뇨병이나 심혈관계 질환보다 더 흔한 질환이며, 골절로 인해 받는 환자들의 고통이나 치료를 위해 들어가는 비용을 추정할 때 골다공증은 매우 중요한 보건 문제임을 시사한다.
지금까지 여러 물질이 골다공증 치료제로 개발되었다. 그 중 골다공증 치료제로 가장 많이 사용되는 에스트로겐은 그 실제적인 효능이 아직 검증되지 않은 상태이며 생애 동안 계속 복용해야 하는 단점이 있으며, 장기간 투여하는 경우 유방암이나 자궁암이 증가하는 부작용이 있다. 알렌드로네이트(alrendronate)도 그 효능이 명확하지 않고 소화관에서의 흡수가 더디며 위장과 식도점막에 염증을 유발하는 문제가 있다. 칼슘제제는 부작용이 적으면서도 효과가 우수한 것으로 알려져 있지만 치료제라기보다는 예방제에 해당한다. 그 외에 칼시토닌과 같은 비타민 D 제제가 알려져 있으나 아직 효능 및 부작용에 대한 연구가 충분히 되어있지 않은 상태이다. 이에, 부작용이 적고 효과가 우수한 새로운 대사성 골 질환 치료제가 요구되고 있는 실정이다.
파골세포는 척추동물의 뼈가 성장하는 과정에서 불필요하게 된 뼈조직을 파괴 또는 흡수하는 대형의 다핵세포로써, 파골세포 전구체(osteoclast precursor)로부터 분화되는 세포이다. 파골세포 전구세포들은 M-CSF 및 RANKL(Receptor activator of nuclear factor kappa-Β ligand)존재 하에서 파골세포로 분화되며, 융합을 통해 다핵 파골세포(multinucleated osteoclast)를 형성한다. 파골세포는 αvβ3 인테그린(integrin)등을 통해 골에 결합하며 산성 환경을 조성하는 한편 각종 콜라게네이즈(collagenase)및 프로테아제(protease)를 분비하여 골 흡수(bone resorption)를 일으키는데, 이러한 파골세포의 억제는 골질환 치료의 효과적인 방법이 될 수 있다.
한편, 클레마스틴은 메클라스틴으로도 알려진 1세대 항히스타민제(selective histamine H1 antagonist)로서, 1967년 의료용으로 승인된 약물이나, 본 발명의 파골세포 분화 조절 효과 및 골질환 치료용도는 현재까지 알려진 바가 없다.
이에 본 발명자들은, 골질환을 치료하기 위한 새로운 물질을 찾고자 파골세포의 활성을 억제하는 물질을 탐색하던 중, 클레마스틴이 파골세포에 의한 골 흡수를 저해하고 파골세포 형성을 억제함을 규명하여, 클레마스틴이 골질환 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 골다공증, 류마티스 관절염 등과 같은 과도한 파골세포 수나 활동에 의해 유발되는 골질환을 예방 또는 치료할 수 있는 신규 약물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명은 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다,
아울러, 본 발명은 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물은 파골세포 분화와 관련된 중요한 인자들을 억제함으로써, 파골세포의 분화를 억제하여 골 흡수를 저해하는 효과가 있는 바, 파골세포의 불균형에 의하여 유발되는 골 관련 질환을 치료할 수 있으므로, 골 관련 질환의 예방 또는 치료제 개발에 널리 활용될 수 있다.
도 1은 10, 15 또는 20μM 농도에서 CM(클레마스틴)의 흡광도 스펙트럼이다.
도 2는 CM(클레마스틴)의 몰 흡광 계수를 나타낸 그래프이다.
도 3은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)및 RANKL(50ng/ml)과 함께 3일 및 4일 동안 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도에서 CM(클레마스틴)의 존재하에 배양하고 TRAP으로 염색 한 후 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일바 100μm).
도 4는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)및 RANKL(50ng/ml)과 함께 3일 및 4일 동안 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도에서 CM(클레마스틴)의 존재하에 배양하고 TRAP으로 염색 한 후 웰당 MNC(multinucleated cell)를 계수하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 클레마스틴의 농도별 세포독성 분석(M: M-CSF/ M+R: M-CSF 및 RANKL)그래프이다(WST-1 시약을 사용하여 세포 생존률 분석, 양성 대조군에 대한 샘플의 450nm에서의 흡광도에 기초하여 계산).
도 6은 RANKL(50ng/ml)존재 또는 부재 하에 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도의 CM(클레마스틴)처리 후 NFATc1에 대한 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 7은 RANKL(50ng/ml)존재 하에 3μM CM(클레마스틴)처리한 실험군과 그렇지 않은 대조군의 0, 1, 2, 3 또는 4일 경과 시점에 NFATc1에 대한 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 8은 RANKL(50ng/ml)존재 하에 3μM CM(클레마스틴)처리한 실험군과 그렇지 않은 대조군의 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Calcr 및 Dcstamp 타깃 유전자의 mRNA 수준을 RT-PCR 정량하여 나타낸 그래프이다.
도 9는 파골세포 전구세포(BMMs)를 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 RANKL(50ng/ml)과 함께 4일 내지 5일 동안 배양하고, 히스타민을 0, 0.01, 0.1, 1, 10, 50μM 농도로 배양 배지에 처리하여, TRAP 염색 후 광학 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 10은 파골세포 전구세포(BMMs)를 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 RANKL(50ng/ml)과 함께 4일 내지 5일 동안 배양하고, 히스타민을 0, 0.01, 0.1, 1, 10, 50μM 농도로 배양 배지에 처리하고, TRAP 염색 후 3개 이상의 핵을 포함하는 TRAP 양성 MNC를 계수하여 나타낸 그래프이다.
도 11은 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 무처리, 히스타민 10μM 단독, RANKL(50ng/ml)단독, 히스타민 10μM 및 RANKL(50ng/ml)를 5분 또는 10분 동안 처리한 후, p-ERK, ERK2, p-AKT, AKT, p-CREB 및 CREB에 특이적인 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 12는 NF-κB reporter plasmid 또는 AP-1 reporter plasmid으로 형질감염 된 RAW264.7 세포를 3 μM CM(클레마스틴)의 존재 또는 부재하에 24시간 동안 RANKL(50ng/ml)로 처리하여, CM(클레마스틴)에 의한 NF-κB 및 AP-1 활성화 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 13은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 c-fos 발현 변화를 관찰한 면역블롯팅 분석 결과이다
도 14는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 Sod2 발현 변화를 관찰한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 15는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 c-fos, Sod2, Cox2, Il-6 및 Il-1β의 발현 변화를 측정하여 그래프로 도시한 것이다.
도 16은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-IκBα 및 IκBα의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 17은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-p65 및 p65의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 18은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)및 3 μM CM(클레마스틴)처리 여부에 따라 다른 각 세포를 p65와 DAPI로 염색한 후, 공초정 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일바 10μm).
도 19는 3 μM CM(클레마스틴)처리 여부에 따른 p65의 핵 전좌의 colocalization coefficient를 계측하여 나타낸 그래프이다.
도 20은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-JNK, JNK 1, p-ERK, ERK2, p-p38 및 p38의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 21은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-src, src, p-AKT, AKT, p-CREB 및 CREB의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 22는 파골세포 전구세포(BMMs)를 RANKL(50ng/ml)존재하에 3일 동안 배양한 다음, 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 나타난 양상을 TRAP 용액으로 염색하고 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 23은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 관찰 된 TRAP 양성 다핵 세포 (MNC)의 수를 계측하여 나타낸 그래프이다.
도 24는 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)처리 후 0, 6, 9, 18 및 24시간 경과에 따른 변화 양상을 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 25는 파골세포 전구세포(BMMs)를 glass 상에서 RANKL(50ng/ml)존재하에 3일 동안 배양한 다음, 배양 3일 시점에 3 μM CM(클레마스틴)을 12시간 동안 처리하고 Alexa Fluor 488-phalloidin 및 DAPI로 고정 및 염색 한 후 공 초점 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 26은 파골세포 전구세포(BMMs)를 dentin disc 상에서 RANKL(50ng/ml)존재하에 11일 동안 배양한 다음, 배양 시작(0일)또는 5일 시점에 3 μM CM(클레마스틴)을 처리하고 헤마톡실린으로 염색함으로써 resorption pit area를 관찰한 사진(스케일 바, 200μm)과 이를 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 27은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 Cathepsin K 및 ATP6V0D2에 특이적인 항체를 사용한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 28은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 ctsk, Atp6v0d2, Dcstamp 및 Mmp9의 mRNA 수준을 RT-PCR로 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 29는 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 NFATc1, Integrin β3, p130Cas 및 c-Src의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 30은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 itgb3, p130cas 및 Src의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 31은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 Rac1-GTP 및 Rac1의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 32는 LPS 유도 골 파괴에 대한 CM(클레마스틴)의 억제 효과를 나타낸 것으로, LPS 단독 또는 LPS 및 CM 병용 처리 된 마우스 두개골에 대하여 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후 공 초점 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 33은 LPS 단독 또는 LPS 및 CM 병용 처리 된 마우스 두개골에서 확인 된 골강 (왼쪽패널)및 TRAP 양성 파골세포 (오른쪽패널)를 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 34는 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여한 후 관측한 대퇴골의 대표적인 마이크로 CT 이미지이다(upper, sagittal; middle, three-dimensional reconstruction; bottom, transaxial; Scale bar, 0.5mm).
도 35는 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여한 후 관측한 대퇴골의 조직 형태 학적 분석 결과이다(BMD, 골 무기질 밀도; BV/TV, 총 골량의 일부인 골량; Tb.N,: trabecular 수; Tb.Th: trabecular 두께; BS/TV, 골 표면 밀도; Tb.pf, trabecular 패턴 계수).
도 36은 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여하고 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후 관측한 대퇴골 절편 사진이다(Scale bar: 40×100 μm; 100×50 μm).
도 37은 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여하고 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후, 성장판 아래의 TRAP 양성 세포의 영역을 측정하여 나타낸 그래프이다(OcS/BS: osteoclast surface to total volume).
도 2는 CM(클레마스틴)의 몰 흡광 계수를 나타낸 그래프이다.
도 3은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)및 RANKL(50ng/ml)과 함께 3일 및 4일 동안 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도에서 CM(클레마스틴)의 존재하에 배양하고 TRAP으로 염색 한 후 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일바 100μm).
도 4는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)및 RANKL(50ng/ml)과 함께 3일 및 4일 동안 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도에서 CM(클레마스틴)의 존재하에 배양하고 TRAP으로 염색 한 후 웰당 MNC(multinucleated cell)를 계수하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 클레마스틴의 농도별 세포독성 분석(M: M-CSF/ M+R: M-CSF 및 RANKL)그래프이다(WST-1 시약을 사용하여 세포 생존률 분석, 양성 대조군에 대한 샘플의 450nm에서의 흡광도에 기초하여 계산).
도 6은 RANKL(50ng/ml)존재 또는 부재 하에 0, 1, 2, 3 또는 4μM 농도의 CM(클레마스틴)처리 후 NFATc1에 대한 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 7은 RANKL(50ng/ml)존재 하에 3μM CM(클레마스틴)처리한 실험군과 그렇지 않은 대조군의 0, 1, 2, 3 또는 4일 경과 시점에 NFATc1에 대한 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 8은 RANKL(50ng/ml)존재 하에 3μM CM(클레마스틴)처리한 실험군과 그렇지 않은 대조군의 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Calcr 및 Dcstamp 타깃 유전자의 mRNA 수준을 RT-PCR 정량하여 나타낸 그래프이다.
도 9는 파골세포 전구세포(BMMs)를 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 RANKL(50ng/ml)과 함께 4일 내지 5일 동안 배양하고, 히스타민을 0, 0.01, 0.1, 1, 10, 50μM 농도로 배양 배지에 처리하여, TRAP 염색 후 광학 현미경으로 관찰한 사진이다.
도 10은 파골세포 전구세포(BMMs)를 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 RANKL(50ng/ml)과 함께 4일 내지 5일 동안 배양하고, 히스타민을 0, 0.01, 0.1, 1, 10, 50μM 농도로 배양 배지에 처리하고, TRAP 염색 후 3개 이상의 핵을 포함하는 TRAP 양성 MNC를 계수하여 나타낸 그래프이다.
도 11은 3μM 농도의 CM(클레마스틴)존재 또는 부재하에 무처리, 히스타민 10μM 단독, RANKL(50ng/ml)단독, 히스타민 10μM 및 RANKL(50ng/ml)를 5분 또는 10분 동안 처리한 후, p-ERK, ERK2, p-AKT, AKT, p-CREB 및 CREB에 특이적인 항체를 사용한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 12는 NF-κB reporter plasmid 또는 AP-1 reporter plasmid으로 형질감염 된 RAW264.7 세포를 3 μM CM(클레마스틴)의 존재 또는 부재하에 24시간 동안 RANKL(50ng/ml)로 처리하여, CM(클레마스틴)에 의한 NF-κB 및 AP-1 활성화 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 13은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 c-fos 발현 변화를 관찰한 면역블롯팅 분석 결과이다
도 14는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 Sod2 발현 변화를 관찰한 면역블롯팅 분석 결과이다.
도 15는 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리에 따른 c-fos, Sod2, Cox2, Il-6 및 Il-1β의 발현 변화를 측정하여 그래프로 도시한 것이다.
도 16은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-IκBα 및 IκBα의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 17은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-p65 및 p65의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 18은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)및 3 μM CM(클레마스틴)처리 여부에 따라 다른 각 세포를 p65와 DAPI로 염색한 후, 공초정 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일바 10μm).
도 19는 3 μM CM(클레마스틴)처리 여부에 따른 p65의 핵 전좌의 colocalization coefficient를 계측하여 나타낸 그래프이다.
도 20은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-JNK, JNK 1, p-ERK, ERK2, p-p38 및 p38의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 21은 파골세포 전구세포(BMMs)를 M-CSF(40ng/ml)의 존재하에 배양하고, RANKL(50ng/ml)을 처리하되, 3 μM CM(클레마스틴)처리와 시간에 따른 p-src, src, p-AKT, AKT, p-CREB 및 CREB의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 22는 파골세포 전구세포(BMMs)를 RANKL(50ng/ml)존재하에 3일 동안 배양한 다음, 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 나타난 양상을 TRAP 용액으로 염색하고 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 23은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 관찰 된 TRAP 양성 다핵 세포 (MNC)의 수를 계측하여 나타낸 그래프이다.
도 24는 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)처리 후 0, 6, 9, 18 및 24시간 경과에 따른 변화 양상을 광학 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 25는 파골세포 전구세포(BMMs)를 glass 상에서 RANKL(50ng/ml)존재하에 3일 동안 배양한 다음, 배양 3일 시점에 3 μM CM(클레마스틴)을 12시간 동안 처리하고 Alexa Fluor 488-phalloidin 및 DAPI로 고정 및 염색 한 후 공 초점 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 26은 파골세포 전구세포(BMMs)를 dentin disc 상에서 RANKL(50ng/ml)존재하에 11일 동안 배양한 다음, 배양 시작(0일)또는 5일 시점에 3 μM CM(클레마스틴)을 처리하고 헤마톡실린으로 염색함으로써 resorption pit area를 관찰한 사진(스케일 바, 200μm)과 이를 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 27은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 Cathepsin K 및 ATP6V0D2에 특이적인 항체를 사용한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 28은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 ctsk, Atp6v0d2, Dcstamp 및 Mmp9의 mRNA 수준을 RT-PCR로 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 29는 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 NFATc1, Integrin β3, p130Cas 및 c-Src의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 30은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 itgb3, p130cas 및 Src의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 31은 파골세포 전구세포(BMMs)에서 분화 된 파골세포에 대하여 3 μM CM(클레마스틴)을 24시간 또는 36시간 동안 처리한 후 Rac1-GTP 및 Rac1의 발현 변화를 확인한 면역블로팅 분석 결과이다.
도 32는 LPS 유도 골 파괴에 대한 CM(클레마스틴)의 억제 효과를 나타낸 것으로, LPS 단독 또는 LPS 및 CM 병용 처리 된 마우스 두개골에 대하여 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후 공 초점 레이저 현미경으로 관찰한 사진이다(스케일 바, 100μm).
도 33은 LPS 단독 또는 LPS 및 CM 병용 처리 된 마우스 두개골에서 확인 된 골강 (왼쪽패널)및 TRAP 양성 파골세포 (오른쪽패널)를 정량화 하여 나타낸 그래프이다.
도 34는 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여한 후 관측한 대퇴골의 대표적인 마이크로 CT 이미지이다(upper, sagittal; middle, three-dimensional reconstruction; bottom, transaxial; Scale bar, 0.5mm).
도 35는 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여한 후 관측한 대퇴골의 조직 형태 학적 분석 결과이다(BMD, 골 무기질 밀도; BV/TV, 총 골량의 일부인 골량; Tb.N,: trabecular 수; Tb.Th: trabecular 두께; BS/TV, 골 표면 밀도; Tb.pf, trabecular 패턴 계수).
도 36은 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여하고 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후 관측한 대퇴골 절편 사진이다(Scale bar: 40×100 μm; 100×50 μm).
도 37은 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에 CM (10 mg / kg)을 3 주 동안 일주일에 6 번 복강 내로 투여하고 TRAP 및 헤마톡실린 염색 후, 성장판 아래의 TRAP 양성 세포의 영역을 측정하여 나타낸 그래프이다(OcS/BS: osteoclast surface to total volume).
이하 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명이 유효성분으로 함유하는 클레마스틴(Clemastine)은 하기 화학식 1로 기재되는 구조를 갖는다:
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 상기 조성물은 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Dcstamp, c-FOS, SOD, JNK, ERK2, Src 및 caveolin-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나 이상의 발현 또는 활성을 감소시킬 수 있다.
또한, 상기 조성물은 염증에 의한 골 손상을 억제할 수 있다. 상기 염증은 염증유도물질인 마우스 모델에 LPS(Lipopolysaccharide)를 주입하여 유도할 수 있다.
아울러, 본 발명의 조성물이 적용될 수 있는 골질환으로는 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증(osteoprosis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 치주질환(periodontal disease), 파제트병(Paget disease)및 전이성 골암(metastatic bone cancers)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명의 구체예에서, 상기 화학식 1로 기재되는 클레마스틴(Clemastine)이 RANKL에 의한 파골세포 전구세포(BMMs)의 분화를 효과적으로 억제함을 확인하였다(도 3, 도 4 및 도 5 참조). 또한 Clemastine을 처리하였을 때, 파골세포 분화에서 가장 중요하게 알려져 있는 transcription factor인 NFATc1 단백질과 그 타겟 유전자들인 Acp5, Mmp9, Ctsk 및 Dcstamp 유전자의 mRNA 발현이 억제되었다(도 6, 도 7 및 도 8 참조).
본 발명의 구체예에서, 클레마스틴(Clemastine)에 의한 파골세포 분화 억제에 대하여 히스타민이 미치는 영향을 조사한 결과, 히스타민 단독 처리에서는 파골세포 분화에 대하여 어떠한 변화도 없는 것으로 확인되며, 파골세포 분화에 관련한 p-ERK, ERK2, p-AKT, AKT, p-CREB 및 CREB에 대해서도 히스타민 단독 처리에 의한 영향은 거의 없고, 클레마스틴에 의하여 발현 변화가 있는 것으로 확인되는 바, 파골세포의 분화 억제는 히스타민과 무관한 클레마스틴의 고유한 효과인 것으로 확인되었다(도 9, 도10 및 도 11 참조).
본 발명의 구체예에서, 클레마스틴이 전사인자인 NF-κB 및 AP-1의 활성을 억제하여 파골세포의 분화를 억제하는지 확인하기 위하여, NF-κB 리포터 또는 AP-1 리포터 플라스미드로 형질 감염시킨 RAW264.7 세포를 RANKL로 처리하고, CM 처리 여부에 따른 NF-κB 활성 및 AP-1 활성 변화를 측정한 결과, RANKL 처리한 경우 NF-κB 및 AP-1의 활성이 증가하는 반면, 클레마스틴을 처리했을 때 NF-κB 및 AP-1의 활성이 억제되는 것을 확인하였다(도 12 참조).
본 발명의 구체예에서, 클레마스틴이 NF-κB 타겟 유전자인 SOD2 및 c-Fos의 발현 변화에 주는 영향을 확인한 결과, 클레마스틴이 SOD2 및 c-Fos의 발현을 억제하고, 그외 Cox2, Il-6 및 Il-1β의 발현을 억제함으로써 파골세포의 분화를 억제는데 기여함을 확인하였다(도 13 및 도 14 참조). 한편, 클레마스틴이 IκBα의 인산화와 p65의 인산화에는 영향이 없고(도 16 및 도 17 참조), JNK, ERK2, p38 및 IκBα의 인산화에도 영향이 없으며(도 20 참조), src, AKT, 및 CREB의 인산화에도 영향이 없으나(도 21 참조), p65의 핵으로의 전좌가 억제되는 것을 확인하였다(도 18 및 19 참조). 이는, 클레마스틴이 전사인자인 NF-κB 및 AP-1의 활성을 억제하여 파골세포의 분화를 억제하는 효과를 나타내므로, 파골세포에 의한 골흡수를 감소시키고, 골밀도를 향상시키는 골다공증의 예방 및 개선 용도로 사용될 수 있음을 시사한다.
본 발명의 구체예에서, 클레마스틴의 파골세포의 성숙 및 골 재흡수 기능 억제에 대하여 확인하기 위해 실험한 결과, 클레마스틴이 파골세포의 성숙을 억제하고(도 22 및 도 23 참조), dentine disc에서 파골세포에 의한 골 흡수를 저해하고(도 24 및 도 26 참조), 액틴링의 형성을 억제하며(도 25 참조), 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 ctsk, Atp6v0d2, Dcstamp 및 Mmp9의 발현을 억제하는 것으로 확인되어, 클레마스틴에 의해 파골세포의 성숙 및 골 재흡수 기능이 억제된을 확인하였다.
본 발명의 구체예에서, 클레마스틴에 의한 인테그린 발현 억제를 확인한 결과, NFATc1 발현, (integrin β3)의 인산화, 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 itgb3, p130cas, src의 발현 모두 클레마스틴에 의해 억제되는 것을 확인하였으며(도 29 및 도 30 참조), 또한 클레마스틴은 Rac1 활성을 감소시키는 것으로 확인되었다(도 31 참조). 이는 클레마스틴이 NF-κB를 조절하여 파골세포 분화를 억제하고 인테그린 신호를 조절하여 파골세포의 성숙과 기능을 약화시킨다는 것을 시사한다.
본 발명의 구체예에서, LPS 유도 골 파괴에 대한 CM(클레마스틴)의 억제 효과를 확인한 결과, 클레마스틴에 의해 골강 형성이 감소되는 것을 확인하였다(도 32 및 도 33 참조). 또한 난소 절제 마우스 (OVX model mice)에서 클레마스틴에 의해 대퇴골의 BMD(골 무기질 밀도)이 증가하고, BV/TV(총 골량)이 증가하며, Tb.N,(trabecular 수)가 증가하고, Tb.Th(trabecular 두께)회복되고, Tb.pf(trabecular 패턴 계수)가 감소하는 것을 확인하고(도 34 및 도 35 참조), 대퇴골 사진(도 36 참조)과 OcS/BS(osteoclast surface to total volume)의 결과와 같이, 클레마스틴이 골 손상에 대한 보호 효과와 골 파괴를 회복시키는 효과가 있음을 확인하였다.
과도한 파골세포는 골다공증 및 류마티스 관절염과 같은 다양한 골 질환을 유발하는 바, 파골세포 분화의 조절은 임상적 의미를 갖는데, 클레마스틴은 본 명세서의 실험들에 의해 확인되는 바와 같이, 효과적인 파골세포 분화, 성숙 및 형성 억제제임을 확인하였다. 클레마스틴은 골수 유래 대식세포(파골세포 전구세포)의 파골세포로의 분화를 억제하며, NF-κB 및 AP-1 활성화를 억제하고, c-Fos 발현을 약화시키면서 NFATc1 발현을 감소시키고, NF-κB의 핵 전좌를 억제하는 것으로 밝혀졌다. 나아가 분화된 파골세포에서도 파골세포 형성과 골 흡수를 억제하고 인테그린 β3 및 p130cas 발현과 Rac1 활성을 감소시키는 것을 확인하여, 클레마스틴이 NF-κB를 조절하여 파골세포 분화를 억제하고 인테그린 신호를 조절하여 파골세포 성숙과 기능을 약화시키는 기전을 확인하였다. 또한 클레마스틴은 LPS 및 난소 절제술로 유도된 골 분해 마우스 모델에서 골 파괴를 효과적으로 방지하였으며, 이는 염증 유발 골 질환 및 폐경기 후 골다공증과 같은 골질환 치료에 클레마스틴이 효과적인 약물임을 시사한다.
따라서, 본 발명의 클레마스틴을 유효성분으로 함유하는 조성물은 골질환의 예방 또는 치료를 위해 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물뿐만 아니라, 이의 약학적으로 허용되는 염, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물, 수화물, 라세이체 또는 입체이성질체를 모두 포함한다.
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸이도에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트,니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면 상기 화학식 1로 표시되는 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다. 또한, 동량의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 및 산 수용액 또는 알코올을 가열하고, 이어서 이 혼합물을 증발시켜서 건조하거나 또는 석출된 염을 흡입 여과시켜 제조할 수도 있다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능 한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조 시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
상기 조성물을 제제화할 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조된다.
경구 투여를 위한 고형제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 트로키제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 하나 이상의 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스(sucrose)또는 락토오스(lactose)또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함된다.
비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween)81, 카카오지, 타우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 kg 당 0.1 mg 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 mg 내지 10 mg을 매일 또는 격일 투여하거나, 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 질환의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
또한, 상기 조성물은 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Dcstamp, c-FOS, SOD, JNK, ERK2, Src 및 caveolin-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나 이상의 발현 또는 활성을 감소시킬 수 있다. 또한, 상기 조성물은 염증에 의한 골 손상을 억제할 수 있다.
아울러, 본 발명의 조성물이 적용될 수 있는 골질환으로는 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증(osteoprosis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 치주질환(periodontal disease), 파제트병(Paget disease)및 전이성 골암(metastatic bone cancers)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지는 않는다.
상기의 골질환은 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증(osteoprosis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 치주질환(periodontal disease), 파제트병(Paget disease)및 전이성 골암(metastatic bone cancers)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지는 않는다.
본 명세서의 "건강기능식품"이란 일상 식사에서 결핍되기 쉬운 영양소나 인체에 유용한 기능을 가진 원료나 성분 (기능성 원료)을 사용하여 제조한 것으로, 인체의 정상적인 기능을 유지하거나 생리기능 활성화를 통하여 건강을 유지하고 개선하는 식품으로 식품의약품안전처장이 정한 것을 의미하나, 이에 한정되지 않으며 통상적인 의미의 건강식품을 배제하는 의미로 사용된 것이 아니다.
본 발명의 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강기능식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취 시에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 조성물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 단당류, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 이당류, 예를 들어 말토스, 수크로스 등; 및 다당류, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제{타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)} 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 g 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 실험예에 의해서 상세히 설명한다.
단, 하기 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 의해서 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 클레마스틴의 준비
클레마스틴은 Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, USA)에서 구매하여 준비하였다.
<실험예 1> 클레마스틴의 파골세포 분화 억제
본 발명자들은 클레마스틴의 파골세포 분화 억제 효과를 확인하기 위하여, BMM(Bone Marrow-Derived Macrophages)세포를 대상으로 하여 다음의 실험을 수행하였다.
BMM 세포는 파골세포(osteoclast)로 분화할 수 있는 전구체 세포(precursor cell)로써, 본 실험에서는 8주령 C57BL/6 수컷 마우스의 대퇴골과 경골의 골수(Bone marrow)에서 추출한 세포를 사용하였다.
다양한 농도(0, 1, 2, 3 또는 4μM)의 클레마스틴 존재 하에서 BMM(Bone Marrow-Derived Macrophages)세포에 40ng/ml의 M-CSF(대식세포콜로니자극인자)와 50ng/ml의 RANKL(Receptor activator of nuclear factor kappa-Β ligand)을 3일 또는 4일 동안 처리하여 파골세포로 분화시키고 PBS 워싱처리 후 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)로 고정한 뒤 leukocyte acid phosphatase cytochemistry kit (SigmaAldrich)를 사용하여 TRAP 염색한 후, TRAP 염색된 3개 이상의 다핵을 가진 파골세포의 수를 현미경으로 분석하였다.
그 결과, RANKL을 3일 또는 4일 동안 처리하여 파골세포로 분화시켰을 때 파골세포 분화가 유의적으로 억제되었다(도 3 및 도 4).
또한, 클레마스틴의 파골세포 분화 억제효과가 세포독성에 의한 것임을 배제하기 위하여, EASY Cytox (WST-1)assay kit로 세포독성을 분석하였다. BMM 세포를 각각 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium monosodium salt (WST-1)reagent (Roche Applied Science)를 10μl씩 넣어주고 37 ℃에서 2-4시간 배양한 뒤, 450nm에서의 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 다양한 농도의 클레마스틴(0, 1, 2, 3, 4 및 5μM)을 처리하였을 때 5μM 농도 까지 클레마스틴에 의한 세포독성이 나타나지 않는 것을 확인하였다(도 5). 이는 클레마스틴의 파골세포 분화 억제효과가 세포사멸에 의한 것이 아님을 보여준다.
<실험예 2> 클레마스틴에 의한 NFATc1 발현 억제
클레마스틴의 파골세포 분화 억제 효과를 확인하기 위하여, 다양한 농도(0, 1, 2, 3 및 4μM)의 클레마스틴 존재 하에서 BMM 세포에 4일 동안 50ng/ml의 RANKL을 처리하여 파골세포로 분화시키고, 파골세포의 분화에서 가장 중요하게 알려져 있는 전사 인자(transcription factor)인 NFATc1 단백질의 발현을 확인하기 위해 NFATc1에 대한 항체를 사용한 면역 블롯(immunoblot)을 수행하였다.
10% 폴리아크릴아미드 겔(polyacrylamide gel)을 이용하여 단백질을 분리하고, 분리된 단백질을 니트로 셀룰로오스 막(nitrocellulose membranes)에 옮겨주었다. TBST(0.05% Tween-20 in Tris-buffered saline, pH 7.4)에 녹인 5% 탈지유를 이용하여 막에 있는 비특이적 결합부위를 모두 블로킹하였다. 일차항체(mouse monoclonal antibodies, Santa Cruz Biotechnology Inc)를 14시간 동안 4℃에서 처리한 후 이차항체를 1시간 동안 상온에서 처리하여 West save Up (Ab Frontier)으로 분석하였다.
그 결과, NFATc1 단백질은 클레마스틴 농도 구배적으로 억제되었다(도 6 참조). 4일까지 억제효과가 지속되는 것을 확인하였다(도 7 참조).
또한, NFATc1의 타겟 유전자인 Nfatc1, Acp5, Mmp9 및 Ctsk와 파골세포 융합과 관련되어 있는 Calcr 및 Dcstamp의 유전자의 mRNA 발현 변화를 RT-PCR로 확인하였다.
real time-PCR을 위해, Trizol reagent (Invitrogen)을 사용하여 총 RNA를 추출하여 260nm의 흡광도에서 정량 분석하였으며, 총 RNA를 0.5mg의 oligo(dT)primers를 포함, 총 15ml가 되게 하여 70℃에서 5분간 인큐베이션한 후, 얼음에서 바로 식혀주었다. cDNA 처음 가닥은 M-MLV reverse transcriptase (Promega)200 units, ribonuclease inhibitor 24 units 및 각각의 dNTP 0.25mM를 포함한 최종볼륨 25μl에서 42℃에서 1시간, 70℃에서 10분 간 합성하였다. 희석 cDNA template의 0.8μl씩(1:2.5)을 2X SYBR Green PCR Master Mix(M Biotech)10μl, 각 gene-specific primer(제노텍)10μM 의 1μl씩을 포함한 최종 20μl 볼륨에서 ABI 7300 real time PCR System(Applied Biosystems)을 사용하여 증폭시켰으며, 증폭은 50℃에서 2분간, 95℃에서 2분간, 다음으로 95℃에서 15초간, 60℃에서 1분간 40 사이클을 수행하여 실험하였다. 실험에서 사용한 Primer의 서열은 하기 표 1과 같다.
Gene | Primer (sense & antisence) | 서열번호 | Amplicon size (bp) |
Nfatc1 | 5′-CTTCAGCTGGAGGACACC-3′ 5′-CCAATGAACAGCTGTAGCG-3′ |
서열번호 1 서열번호 2 |
79 |
Ctsk | 5′-ACCACTGCCTTCCAATACG-3′ 5′-CGTGGCGTTATACATACAAC-3′ |
서열번호 3 서열번호 4 |
99 |
Mmp9 | 5′-AGACGACATAGACGGCATC-3′ 5′-TGCTGTCGGCTGTGGTTC-3′ |
서열번호 5 서열번호 6 |
97 |
Acp5 | 5′-CCAGCGACAAGAGGTTCC-3′ 5′-AGAGACGTTGCCAAGGTGAT-3′ |
서열번호 7 서열번호 8 |
113 |
Calcr | 5′-TGATGACTCTCAGGACAATG-3′ 5′-ACTGGATCAATCTGTAGGAG-3′ |
서열번호 9 서열번호 10 |
87 |
Dcstamp | 5′-TTATGTGTTTCCACGAAGCCCTA-3′ 5′-ACAGAAGAGAGCAGGGCAACG-3′ |
서열번호 11 서열번호 12 |
141 |
Dock5 | 5′-TGGTGACACAGGGACAGTGG-3′ 5′-CACCCCAACTATGCACGTGG-3 |
서열번호 13 서열번호 14 |
168 |
cFos | 5′-GAGAAACGGAGAATCCGAAG-3′ 5′-GAGAAACGGAGAATCCGAAG-3′ |
서열번호 15 서열번호 16 |
97 |
Sod2 | 5′-ATTAACGCGCAGATCATGCA-3′ 5′-TGTCCCCCACCATTGAACTT-3 |
서열번호 17 서열번호 18 |
161 |
Cox2 | 5′-GATCATAAGCGAGGACCTG-3′ 5′-GTCTGTCCAGAGTTTCACC-3′ |
서열번호 19 서열번호 20 |
85 |
Itgb3 | 5′-GGAGTGGCTGATCCAGATGT-3′ 5′-TCTGACCATCTTCCCTGTCC-3′ |
서열번호 21 서열번호 22 |
138 |
Atp6v0d2 | 5′-CAGAGATGGAAGCTGT-3′ 5′-TGCCAAATGAGTTCAG-3′ |
서열번호 23 서열번호 24 |
282 |
Ppargc1b | 5′-CTCCAGGCAGGTTCAACCC-3′ 5′-GGGCCAGAAGTTCCCTTAGG-3′ |
서열번호 25 서열번호 26 |
83 |
Mt-cyb | 5′-GCCACCTTGACCCGATTCT-3′ 5′-TTGCTAGGGCCGCGATAAT-3 |
서열번호 27 서열번호 28 |
64 |
Mt-nd4 | 5′-CATCACTCCTATTCTGCCTAGCAA-3′ 5′-TCCTCGGGCCATGATTATAGTAC-3′ |
서열번호 29 서열번호 30 |
74 |
Mt-co1 | 5′-TTTTCAGGCTTCACCCTAGATGA-3′ 5′-GAAGAATGTTATGTTTACTCCTACGAATATG-3′ |
서열번호 31 서열번호 32 |
81 |
Mt-co3 | 5′-CGGAAGTATTTTTCTTTGCAGGAT-3′ 5′-CAGCAGCCTCCTAGATCATGTG-3′ |
서열번호 33 서열번호 34 |
82 |
b-actin | 5′-ACCCTAAGGCCAACCGTG-3′ 5′-GCCTGGATGGCTACGTAC-3′ |
서열번호 35 서열번호 36 |
81 |
Ctsk, Cathepsin K; Mmp9, matirx metalloprotease 9; Acp5, acid phosphatase 5, tartrat-resistant ; CR, Calcitonim receptor; DC-STAMP, Dendritic cell-specifictransmembrane protein; Dock5, dedicator of cytokinesis 5; SOD2, superoxide dismutase 2; COX2, cyclooxygenase 2; PGC-1βperoxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator 1β; ND4, NADH dehydrogenase subunit 4; COX1, cytochrome c oxidase subunit 1; |
그 결과, 3μM 클레마스틴 존재 하에서 50ng/ml RANKL을 처리하였을 때 NFATc1와 이의 타겟 유전자인 Nfatc1, Acp5, Mmp9 및 Ctsk와 파골세포 융합과 관련되어 있는 Calcr 및 Dcstamp의 유전자의 mRNA 발현이 현저히 억제되는 것을 확인하였다(도 8).
<실험예 3> 클레마스틴에 의한 파골세포 분화 억제에 대한 히스타민에 영향
또한, 클레마스틴의 파골세포 분화 억제효과가 히스타민에 의한 기전에 기인하는 것이 아님을 확인하기 위해, 다음과 같이 실험하였다.
BMM은 고정 된 3uM CM의 부재 또는 존재하에 4-5 일 동안 RANKL과 함께 배양되었다. 용량 의존적 히스타민의 표시된 농도를 동시에 배양 배지에 처리하였다.
세포를 고정하고 TRAP 염색을 한 후 광학 현미경으로 검사하고, 3 개 이상의 핵을 포함하는 TRAP 양성 MNC를 계수한 결과, 클레마스틴의 파골세포 분화 억제효과에 히스타민에 의한 영향은 없는 것으로 확인되었다(도 9 및 도 10).
또한, 세포 용해물을 phosphor p-ERK 및 ERK2, p-AKT 및 AKT, p-CREB 및 CREB에 특이적인 항체를 사용하여 면역블롯팅 분석한 결과에서도, 클레마스틴의 파골세포 분화 억제효과에 히스타민에 의한 영향은 없는 것으로 확인되었다(도 11).
<실험예 4> 클레마스틴에 의한 NF-κB 및 AP-1 조절
클레마스틴이 NF-κB 및 AP-1의 활성을 조절하는지 확인하기 위하여, NF-κB 리포터 또는 AP-1 리포터 플라스미드로 형질 감염시킨 RAW264.7 세포를 24시간 동안 RANKL로 처리하고, 3μM CM 처리 여부에 따른 NF-κB 활성 및 AP-1 활성 변화를 측정하였다.
그 결과, RANKL 처리한 경우 NF-κB 및 AP-1의 활성이 증가하는 반면, 클레마스틴을 처리했을 때 NF-κB 및 AP-1의 활성이 억제되는 것을 확인할 수 있었다(도 12).
또한, IκBα와 p-IκBα에 대한 항체(rabbit polyclonal antibodies, Cell Signaling Technology)를 사용한 면역 블롯(immunoblot)으로 IκBα의 인산화 정도를 확인하였고, SOD2 및 c-FOS 단백질의 발현도 이들의 항체(SOD2/rabbit polyclonal antibody, Upstate; c-FOS/rabbit polyclonal antibody, Santa Cruz Biotechnology, Inc)를 이용한 면역 블롯(immunoblot)으로 확인하였으며, SOD2 및 c-Fos mRNA의 발현을 상기 실험예 2에 기재된 방법으로 RT-PCR로 분석하였다(표 1 primer 서열 참조).
그 결과, 클레마스틴(3μM)은 RANKL(50 ng/ml)의 존재 하에서 NF-κB 타겟 유전자인 SOD2 및 c-Fos의 단백질 및 mRNA 발현을 유의적으로 억제하였고(도 13 및 도 14). 또한 클레마스틴이 SOD2 및 c-Fos의 발현을 억제하고, 그외 Cox2, Il-6 및 Il-1β의 발현을 억제함으로써 파골세포의 분화를 억제는데 기여함을 확인하였다(도 13 및 도 14). 한편, 클레마스틴이 IκBα의 인산화와 p65의 인산화에는 영향이 없었다(도 16 및 도 17).
이는, 클레마스틴이 전사인자인 NF-κB 및 AP-1의 활성을 억제하여 파골세포의 분화를 억제하는 효과를 나타내므로, 파골세포에 의한 골흡수를 감소시키고, 골밀도를 향상시키는 골다공증의 예방 및 개선 용도로 사용될 수 있음을 시사한다.
<실험예 5> 클레마스틴에 의한 MAPKs 및 AKT 활성 억제
RANKL에 의해 활성화되는 MAPKs와 AKT에 대한 클레마스틴의 효과를 보기 위하여, 이들의 항체(phospho-JNK, phospho-ERK, phospho-p38, phospho-Src, phospho-AKT에 대한 Rabbit polyclonal antibodies, AKT에 대한 rabbit monoclonal antibodies, Cell Signaling Technology; JNK1, p38에 대한 Rabbit polyclonal antibodies, ERK2 mouse monoclonal antibody, Santa Cruz Biotechnology, Inc.)를 이용한 면역 블롯(immunoblot)으로 MAPKs와 AKT 관련 단백질의 인산화 정도를 비교해 보았다.
그 결과, 클레마스틴에 의해 JNK, ERK2 및 p38의 인산화는 영향을 받지 않음을 확인하였고(도 20), src, AKT, 및 CREB의 인산화에도 영향이 없으나(도 21), p65의 핵으로의 전좌가 억제되는 것을 확인하였다(도 18 및 19).
<실험예 6> 클레마스틴에 의한 파골세포의 성숙 및 골 흡수 억제
클레마스틴의 파골세포의 분화억제 작용시점을 알아보기 위하여, RANKL을 처리하여 BMM 세포를 파골세포로 분화시키는 동안, 여러 시점에서 클레마스틴에 노출시키고 TRAP 염색된 다핵의 파골세포의 수를 분석하였다.
그 결과, 클레마스틴(3μM)을 RANKL(50ng/ml)과 함께 처리하였을 때 파골세포의 형성이 유의적으로 억제되었고, 성숙된 파골세포에 클레마스틴을 처리한 경우에서도 3핵 이상의 파골세포 수는 유의적으로 억제되었다(도 22 및 도 23 참조).
또한 유사한 실험조건에서 클레마스틴이 액틴링(acting ring)의 형성과 골 흡수에 미치는 영향을 보기 위하여, BMM 세포에 3일 동안 RANKL을 처리하여 파골세포로 분화시킨 후 클레마스틴을 처리한 세포와, 클레마스틴을 RANKL과 함께 처리한 세포를 고정하고 액틴링과 핵을 염색하거나 dentine disc에서 골 흡수 정도를 분석하였다. 3.7 % formaldehyde가 첨가된 PBS에서 세포를 고정하여 0.1 % Triton X-100 처리를 한 뒤, Alexa Fluor 488-phalloidin(Invitrogen)을 30분간 처리하고, 다시 DAPI(4', 6-diamidino-2-phenylindole, Roche)로 염색하여 형광 현미경을 통해 관찰하였다. 또한 골 흡수 정도는 dentine disc(Immunodiagnostic Systems Ltd)에 배양된 세포들을 cotton tip을 사용하여 제거한 뒤 재흡수 구멍(resorption pit)을 hematoxylin으로 염색하여 현미경 100배율로 촬영한 사진을 Image-Pro Plus 4.5 software (Media Cybernetics)로 분석하였다.
그 결과, 클레마스틴은 액틴링의 형성과 dentine disc에서의 파골세포에 의한 골 흡수를 완전히 억제하였고, 3일 동안 RANKL을 처리하여 파골세포로 분화시킨 후 클레마스틴을 처리한 경우에는 액틴링의 크기가 감소되었고 골 흡수도 상당히 저해되는 것을 확인하였다(도 24, 도 25 및 도 26). 이러한 결과는 클레마스틴이 파골세포의 융합과 골 흡수 기능을 저해할 수 있음을 나타낸다.
한편, 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 ctsk, Atp6v0d2, Dcstamp 및 Mmp9의 발현 역시 클레마스틴에 의해 억제되는 것으로 확인하여(도 28), 클레마스틴에 의해 파골세포의 성숙 및 골 재흡수 기능이 억제됨을 확인하였다.
<실험예 7> 클레마스틴의 인테그린 신호 경로 조절을 이용한 파골세포 성숙 조절
파골세포는 세포-세포 융합(cell-cell fusion)및 이동(migration)에 의해 다핵 세포를 형성하고, 골흡수가 발생하는 밀봉 구역을 형성하기 위해 액틴링을 개발한다. 따라서, 세포 이동 또는 융합에 관여하는 유전자를 억제하거나 액틴링을 형성하는 것은 파골세포 성숙 또는 기능에 상당한 영향을 미친다. 클레마스틴의 파골세포 생성 관련 유전자의 발현이 감소되는지 여부를 확인하기 위해, 실험예 2의 실험방법과 동일한 RT PCR 방법을 이용하여 실험을 수행하였고, 이 때, 표 1의 Primer를 사용하였다.
그 결과, 클레마스틴에 의한 인테그린 발현 억제를 확인한 결과, NFATc1 발현, (integrin β3)의 인산화, 파골세포 성숙 및 기능에 관여하는 유전자인 itgb3, p130cas, src의 발현 모두 클레마스틴에 의해 억제되는 것을 확인하였으며(도 29 및 도 30), 또한 클레마스틴은 Rac1 활성을 감소시키는 것으로 확인되었다(도 31).
이는 클레마스틴이 NF-κB를 조절하여 파골세포 분화를 억제하고 인테그린 신호를 조절하여 파골세포의 성숙과 기능을 약화시킨다는 것을 시사한다.
<실험예 8> 클레마스틴의 염증 및 난소 절제술에 의한 골 손상 억제
클레마스틴의 염증에 의해 유발되는 골 손상 억제효능을 동물모델에서 확인하기 위해, 마우스 두개골에 염증유도물질인 LPS(Lipopolysaccharide, 12.5 mg/kg body weight)를 하루 간격을 두고 2회 주입하였다. 이 때 Vehicle (10% DMAC + 10% Tween 80 + 80% distilled water)또는 클레마스틴(10 mg/kg)이 함께 투여되었고, 첫 주입 5일 후에 두개골을 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)로 고정 후, PBS 워싱하여 TRAP 염색 후 관찰하였다. 또한 0.5M ethylenediaminetetraacetic acid로 7일간 석회질을 제거하고, 파라핀 블록을 만든 후 절단하여 TRAP과 Hematoxylin으로 염색한 뒤 관찰하였다.
그 결과, LPS만 처리한 두개골에서는 TRAP 염색된 부분이 많았으나, 클레마스틴을 함께 처리한 두개골에서는 TRAP 염색된 부분이 현저히 감소된 것을 확인하여, 클레마스틴에 의해 골강 형성이 감소되는 것을 확인하였다(도 32 및 도 33 참조).
또한, 폐경기 골다공증의 OVX-유도 모델을 사용하여 클레마스틴의 치료 가능성을 확인하기 위해, 난소 절제술(OVX)과 마이크로 컴퓨터 단층 촬영(μCT)을 수행하였다. 암컷 12주령 마우스는 모의 수술 또는 OVX를 받았고, 클레마스틴(5mg/kg)을 주당 6회 복강 내 주사하였다. 수술 3주 후 마우스를 안락사시키고, 대퇴골을 μCT를 사용하여 평가하였다.
그 결과, OVX-유도 모델은 골 무기질 밀도, 골 표면, 골 뼈 수 및 골 부피가 감소하였고, 골 패턴 인자 및 골 분리가 OVX에 의해 증가되었으나, 클레마스틴에 의해 대퇴골의 BMD(골 무기질 밀도)이 증가하고, BV/TV(총 골량)이 증가하며, Tb.N,(trabecular 수)가 증가하고, Tb.Th(trabecular 두께)회복되고, Tb.pf(trabecular 패턴 계수)가 감소하는 것을 확인하고(도 34 및 도 35 참조), 대퇴골 사진(도 36 참조)과 OcS/BS(osteoclast surface to total volume)의 결과와 같이, 클레마스틴이 골 손상에 대한 보호 효과와 골 파괴를 회복시키는 효과가 있음을 확인하였다. 따라서, 클레마스틴은 골다공증과 같은 병리학적 골질환을 치료할 수 있는 치료 가능성이 있음을 나타낸다.
<110> Ewha University - Industry Collaboration Foundation
<120> Pharmaceutical composition for prevention or treatment of bone
disease containing Clemastine or pharmaceutically acceptable
salts thereof as an active ingredient
<130> 2020P-11-058
<160> 36
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nfatc1 sense primer
<400> 1
cttcagctgg aggacacc 18
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Nfatc1 antisense primer
<400> 2
ccaatgaaca gctgtagcg 19
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ctsk sense primer
<400> 3
accactgcct tccaatacg 19
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ctsk antisense primer
<400> 4
cgtggcgtta tacatacaac 20
<210> 5
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mmp9 sense primer
<400> 5
agacgacata gacggcatc 19
<210> 6
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mmp9 antisense primer
<400> 6
tgctgtcggc tgtggttc 18
<210> 7
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Acp5 sense primer
<400> 7
ccagcgacaa gaggttcc 18
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Acp5 antisense primer
<400> 8
agagacgttg ccaaggtgat 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Calcr sense primer
<400> 9
tgatgactct caggacaatg 20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Calcr antisense primer
<400> 10
actggatcaa tctgtaggag 20
<210> 11
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Dcstamp sense primer
<400> 11
ttatgtgttt ccacgaagcc cta 23
<210> 12
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Dcstamp antisense primer
<400> 12
acagaagaga gcagggcaac g 21
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Dock5 sense primer
<400> 13
tggtgacaca gggacagtgg 20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Dock5 antisense primer
<400> 14
caccccaact atgcacgtgg 20
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cFos sense primer
<400> 15
gagaaacgga gaatccgaag 20
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> cFos antisense primer
<400> 16
gagaaacgga gaatccgaag 20
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Sod2 sense primer
<400> 17
attaacgcgc agatcatgca 20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Sod2 antisense primer
<400> 18
tgtcccccac cattgaactt 20
<210> 19
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Cox2 sense primer
<400> 19
gatcataagc gaggacctg 19
<210> 20
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Cox2 antisense primer
<400> 20
gtctgtccag agtttcacc 19
<210> 21
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Itgb3 sense primer
<400> 21
ggagtggctg atccagatgt 20
<210> 22
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Itgb3 antisense primer
<400> 22
tctgaccatc ttccctgtcc 20
<210> 23
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Atp6v0d2 sense primer
<400> 23
cagagatgga agctgt 16
<210> 24
<211> 16
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Atp6v0d2 antisense primer
<400> 24
tgccaaatga gttcag 16
<210> 25
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ppargc1b sense primer
<400> 25
ctccaggcag gttcaaccc 19
<210> 26
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Ppargc1b antisense primer
<400> 26
gggccagaag ttcccttagg 20
<210> 27
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-cyb sense primer
<400> 27
gccaccttga cccgattct 19
<210> 28
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-cyb antisense primer
<400> 28
ttgctagggc cgcgataat 19
<210> 29
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-nd4 sense primer
<400> 29
catcactcct attctgccta gcaa 24
<210> 30
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-nd4 antisense primer
<400> 30
tcctcgggcc atgattatag tac 23
<210> 31
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-co1 sense primer
<400> 31
ttttcaggct tcaccctaga tga 23
<210> 32
<211> 31
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-co1 antisense primer
<400> 32
gaagaatgtt atgtttactc ctacgaatat g 31
<210> 33
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-co3 sense primer
<400> 33
cggaagtatt tttctttgca ggat 24
<210> 34
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Mt-co3 antisense primer
<400> 34
cagcagcctc ctagatcatg tg 22
<210> 35
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> b-actin sense primer
<400> 35
accctaaggc caaccgtg 18
<210> 36
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> b-actin antisense primer
<400> 36
gcctggatgg ctacgtac 18
Claims (10)
- 제1항에 있어서,
상기 클레마스틴은 0.1 내지 10μM 농도인 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Dcstamp, c-FOS, SOD, JNK, ERK2, Src 및 caveolin-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나 이상의 발현 또는 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 조성물은 염증에 의한 골 손상을 억제하는 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 골질환은 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증(osteoprosis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 치주질환(periodontal disease), 파제트병(Paget disease)및 전이성 골암(metastatic bone cancers)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 클레마스틴은 0.1 내지 10μM 농도인 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 조성물은 NFATc1, Acp5, Mmp9, Ctsk, Dcstamp, c-FOS, SOD, JNK, ERK2, Src 및 caveolin-1로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 어느 하나 이상의 발현 또는 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 조성물은 염증에 의한 골 손상을 억제하는 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 제6항에 있어서,
상기 골질환은 성장기 발육부진, 골절, 과도한 파골세포의 골 흡수에 의한 골다공증(osteoprosis), 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 치주질환(periodontal disease), 파제트병(Paget disease)및 전이성 골암(metastatic bone cancers)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 골질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020200172525A KR20220083000A (ko) | 2020-12-10 | 2020-12-10 | 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020200172525A KR20220083000A (ko) | 2020-12-10 | 2020-12-10 | 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20220083000A true KR20220083000A (ko) | 2022-06-20 |
Family
ID=82250075
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020200172525A KR20220083000A (ko) | 2020-12-10 | 2020-12-10 | 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR20220083000A (ko) |
-
2020
- 2020-12-10 KR KR1020200172525A patent/KR20220083000A/ko not_active Application Discontinuation
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20230301934A1 (en) | Use of cannabidiol in the treatment of tuberous sclerosis complex | |
KR101934328B1 (ko) | 아모디아퀸 및 항당뇨 약물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR101747775B1 (ko) | 유포비아 인자 l1 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
US20230321056A1 (en) | Methods for Treating Metastasis with Cathepsin C Inhibitors | |
KR101804852B1 (ko) | 사멸화된 세포를 이용한 암 전이 억제용 조성물 | |
RU2727142C2 (ru) | Бисамидное производное дикарбоновой кислоты в качестве средства, стимулирующего регенерацию тканей и восстановление сниженных функций тканей | |
KR101765141B1 (ko) | 스컬캅플라본 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR20220083000A (ko) | 클레마스틴 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR102414285B1 (ko) | 플루나리진 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
CN110022880B (zh) | 包含胆汁酸的用于预防或治疗缺血性再灌注损伤的药学组合物 | |
KR102568872B1 (ko) | 피조티펜 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
CN109771411A (zh) | 二氢槲皮素用于制备治疗脂肪肝的药物中的用途 | |
KR102152659B1 (ko) | 편도 유래 중간엽 줄기세포의 조정 배지를 포함하는 암 전이 억제용 조성물 | |
CN106727603A (zh) | 去甲泽拉木醛在制备治疗胰腺癌的药物中的应用 | |
KR101832351B1 (ko) | 신코닌 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 골질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
US20040101584A1 (en) | Control of cancer with annonaceous extracts | |
KR102122970B1 (ko) | 금제제를 유효성분으로 포함하는 파골세포 분화 억제용 조성물 | |
KR20200132550A (ko) | 편도 유래 중간엽 줄기세포 또는 이의 조정 배지를 포함하는 혈관질환 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20200063443A (ko) | Plk1의 활성 억제제를 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR20190015942A (ko) | 골 질환 예방 또는 치료용 화합물 및 이의 용도 | |
US11219613B2 (en) | Pharmaceutical composition for preventing and treating liver diseases, containing, as active ingredient, cromolyn or pharmaceutically acceptable salt thereof | |
CN113769096B (zh) | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶抑制剂的医药用途 | |
US11878003B2 (en) | Composition comprising organoselenium compound for treatment of skeletal muscle atrophy | |
CN114191450B (zh) | 普鲁士蓝及其类似物在制备预防、延缓或治疗骨质疏松症药物中的应用 | |
US20230190682A1 (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating metabolic diseases |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E601 | Decision to refuse application |