KR20220041881A - 항-pvrig 항체 제제 및 이의 용도 - Google Patents

항-pvrig 항체 제제 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20220041881A
KR20220041881A KR1020227006619A KR20227006619A KR20220041881A KR 20220041881 A KR20220041881 A KR 20220041881A KR 1020227006619 A KR1020227006619 A KR 1020227006619A KR 20227006619 A KR20227006619 A KR 20227006619A KR 20220041881 A KR20220041881 A KR 20220041881A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cancer
pvrig antibody
pvrig
pharmaceutical formulation
antibody
Prior art date
Application number
KR1020227006619A
Other languages
English (en)
Inventor
마크 화이트
아데보예 헨리 아데워이
마이클 버클리
준 루
존 헌터
다약 아낫 코헨
Original Assignee
컴퓨젠 엘티디.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 컴퓨젠 엘티디. filed Critical 컴퓨젠 엘티디.
Publication of KR20220041881A publication Critical patent/KR20220041881A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 항-PVRIG 항체 및 그의 안정한 액체 약제학적 제제에 관한 것이다.

Description

항-PVRIG 항체 제제 및 이의 용도
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2019년 7월 29일자로 출원된 미국 가특허출원 제62/880,021호, 2019년 8월 28일자로 출원된 미국 가특허출원 제62/893,051호, 2019년 11월 4일자로 출원된 미국 가특허출원 제62/930,206호, 2020년 1월 31일자로 출원된 미국 가특허출원 제62/968,660호, 2020년 3월 5일자로 출원된 미국 가특허출원 제62/985,702호, 및 2020년 4월 13일자로 출원된 미국 가특허출원 제63/009,367호를 우선권으로 주장하며, 상기 출원의 전체 내용이 참조로서 본 출원에 원용된다.
나이브(naive) T 세포는 생산적으로 활성화되기 위해 항원-제시 세포(APC)에서 2개의 독립적인 신호를 수신해야 한다. 먼저, 신호 1은 항원-특이적이며, T 세포 항원 수용체가 APC의 적절한 항원-MHC 복합체를 만날 경우 발생한다. 면역 반응의 운명은 APC-발현 리간드가 관여하는 T 세포 공동자극 분자를 통해 전달되는 제2 항원-독립성 신호(신호 2)에 의해 결정된다. 상기 제2 신호는 자극성(양성 공동자극) 또는 억제성(음성 공동자극 또는 공동억제) 중 하나일 수 있다. 공동자극 신호가 부재하는 또는 공동억제 신호가 존재하는 상태에서, T-세포 활성화는 손상 또는 중단되는데, 이는 항원-특이적 무반응(T-세포 아네르기(anergy)로 공지됨)의 상태로 이어질 수 있거나, 또는 T-세포 세포자멸사로 이어질 수 있다.
공동자극 분자 쌍은 통상적으로 APC 상에서 발현되는 리간드 및 T 세포에서 발현되는 이들의 동족 수용체로 구성된다. 공동자극 분자의 프로토타입 리간드/수용체 쌍은 B7/CD28 및 CD40/CD40L이다. 상기 B7 패밀리는 구조적으로 관련된 세포-표면 단백질 리간드로 구성되며, 이는 면역 반응에 자극성 또는 억제성 정보를 제공할 수 있다. 상기 B7 패밀리의 구성원은 적어도 하나의 가변 또는 불변 면역글로불린 도메인을 함유하는 세포외 도메인과 구조적으로 관련된다.
양성 및 음성 공동자극 신호는 모두 세포-매개 면역 반응의 조절에 결정적인 역할을 하며, 상기 신호를 매개하는 분자는 면역조절에 효과적인 표적인 것으로 입증되어 왔다. 본 지식에 기초하여, 공동자극 분자의 표적화를 수반하는 여러 치료적 접근법이 개발되어 왔고, 이는 암 환자에서 면역 반응을 켜거나(turning on) 면역 반응의 꺼짐(turning off)을 방지하여 암의 예방 및 치료에 유용한 것으로 나타났고, 또한 자가면역 질환 및 염증성 질환뿐만 아니라 동종 이식의 거부의 방지 및 치료에 유용한 것으로 나타났는데, 이들 각각은 통제되지 않은 면역 반응을 끄거나(turning off) 또는 상기 병리학적 병태를 가지는 대상체에서 음성 공동자극(또는 공동억제)에 의한 "신호 차단"의 유도에 의한다.
B7 리간드에 의해 전달된 신호의 조작은 자가면역, 염증성 질환, 및 이식 거부의 치료에서 잠재력을 나타냈다. 치료 전략은 리간드 또는 공동자극 쌍의 수용체에 대한 단일클론 항체를 사용하거나, 적절한 리간드에 결합 및 이를 차단할 수 있는 공동자극 수용체로 구성된 가용성 융합 단백질을 사용하는 공동자극의 차단을 포함한다. 다른 접근법은 억제 리간드의 가용성 융합 단백질을 사용하는 공동억제의 유도이다. 상기 접근법은, 적어도 부분적으로, 자가- 또는 동종-반응성 T 세포 (각각 자가면역 질환 또는 이식에서 병원성 과정을 담당함)의 최종 결실에 의존하는데, 이는 (세포 생존 유전자를 유도하는) 공동자극의 부재에서, T 세포가 세포자멸사의 유도에 매우 민감하게 되기 때문일 가능성이 있다. 따라서, 면역계의 병원균 방어 능력을 손상시키지 않으면서 공동자극 신호를 조절할 수 있는 신규 제제가 그러한 병리학적 병태의 치료 및 방지에 매우 유리하다.
공동자극 경로는 종양 발달에 중요한 역할을 한다. 흥미롭게도, 종양은 상기 B7-CD28 및 TNF 패밀리의 공동자극 인자의 억제를 통한 세포 활성화 방해뿐만 아니라 항-종양 T 세포 반응을 억제하는 조절 T 세포를 공격함으로써 면역 파괴를 회피하는 것으로 나타났다(Wang (2006), "Immune Suppression by Tumor Specific CD4+ Regulatory T cells in Cancer", Semin. Cancer. Biol. 16:73-79; Greenwald, et al. (2005), "The B7 Family Revisited", Ann. Rev. Immunol. 23:515-48; Watts (2005), "TNF/TNFR Family Members in Co-stimulation of T Cell Responses", Ann. Rev. Immunol. 23:23-68; Sadum, et al., (2007) "Immune Signatures of Murine and Human Cancers Reveal Unique Mechanisms of Tumor Escape and New Targets for Cancer Immunotherapy", Clin. Canc. Res. 13(13): 4016-4025 참조). 그러한 종양 발현 공동자극 분자는 매력적인 암 바이오마커가 되었고 종양-관련 항원(TAA)으로서 작용할 수 있다. 또한, 공동자극 경로는 T 세포 의존성 면역 반응을 종양 전이 내의 개시 및 효과기 기능 모두에서 약화시키는 면역학적 관문으로서 확인되었다. 조작된 암 백신이 계속적으로 개선되면서, 그러한 면역학적 관문이 백신의 치료적 항-종양 반응을 유도하는 능력에 대한 주요 장애물이라는 것이 명백해지고 있다. 그러한 점에서, 공동자극 분자는 활성(백신 접종) 및 수동(항체-매개) 암 면역요법을 위한 보조제(adjuvant)로서 작용하여 면역 내성을 훼손하고 면역계를 자극하기 위한 전략을 제공할 수 있다
지난 10년 동안, 다양한 공동자극 단백질에 대한 작용제 및/또는 길항제가 자가면역 질환, 이식 거부, 알레르기 및 암을 치료하기 위해 개발되어 왔다. 예를 들어, CTLA4-Ig(아바타셉트, 오렌시아®(Orencia®))는 RA의 치료를 위해, 돌연변이 CTLA4-Ig(벨라타셉트, 눌로직스®(Nulojix®))는 급성 신장 이식 거부의 방지를 위해 승인되었고, 최근에는 항-CTLA4 항체(이플리무맙, 예르보이®(Yervoy®))가 흑색종의 치료를 위해 승인되었다. 머크(Merck)(키트루다(Keytruda®)) 및 브리스톨-마이어스 스퀴브(BMS)(옵디보(Opdivo®))의 항-PD-1 항체와 같은 다른 공동자극 조절제가 승인되어 암 치료를 위해 승인되었으며, 바이러스성 감염 여부에도 마찬가지로 테스트 중이다.
특히 관심 대상인 표적 중 하나는 PVRIG이다. PVRIG는 326개 아미노산 길이인 막통과 도메인 단백질이고, 신호 펩타이드(아미노산 1번 내지 40번 범위), 세포외 도메인(아미노산 41번 내지 171번 범위), 막통과 도메인(아미노산 172번 내지 190번 범위) 및 세포질 도메인(아미노산 191번 내지 326번 범위)을 가진다. 전장 인간 PVRIG 단백질은 도 1에 도시되어 있다. 개시 코돈일 수 있는 2개의 메티오닌이 존재하지만, 성숙한 단백질은 동일하다.
상기 PVRIG 단백질은 세포외 도메인 내의 면역글로불린(Ig) 도메인을 함유하며, 이는 PVR-유사 Ig 폴드 도메인이다. 상기 PVR-유사 Ig 폴드 도메인은, 다른 B7 패밀리 구성원과 유사하게, 기능적 대응물 결합을 담당할 수 있다. 상기 세포외 도메인의 PVR-유사 Ig 폴드 도메인은, 상기 폴드에 전형적인 바와 같이, 도메인 내 시스테인 잔기 사이에 형성된 1개의 이황화물 결합을 포함하며, 이는 구조-기능에 중요할 수 있다. 상기 시스테인은 잔기 22 및 93(또는 94)에 위치한다. 일 실시예에서, PVRIG 항체의 테스트에 사용될 수 있는 PVRIG의 가용성 단편이 제공된다. PVRIG 단백질의 정의에는 PVRIG ECD 단편이 포함되며, 이는 미국 특허 제9,714,289호에 설명된 것과 같은 ECD 단편을 포함한다.
또한, PVRIG는 CD112를 인식하나 CD155는 인식하지 않는 억제성 수용체로서 식별되며, 이는 DNAM-1에 의해 매개되는 항-종양 기능의 음성 조절에 수반될 수 있다. PVRL2는 PVRIG의 리간드로서 식별되며, 이는 PVRIG를 DNAM/TIGIT 면역수용체 축에 위치시킨다(Liang et al., Journal of Clinical Oncology 2017 35:15_suppl, 3074-3074 참조).
PVRIG에 결합하고 PVRL2에 의한 활성화를 (예를 들어, 가장 통상적으로 PVRIG 및 PVLR2의 상호작용을 차단함으로써) 방지하는 항-PVRIG 항체(항원-결합 단편 포함)는 T 세포 및/또는 NK 세포 활성화를 증진시키고 암 및 병원균 감염과 같은 질환을 치료하는데 사용된다. 이와 같이, 그러한 항체를 투여하기 위한 제제가 필요하다.
따라서, 본 발명의 목적은 항-PVRIG 항체를 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제 및 이의 질환 치료에서의 용도를 제공하는 것이다(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체).
따라서, 본 발명의 목적은 본원에 설명된 바와 같이 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 서열(서열번호:17 또는 서열번호:50)을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 영역을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 중쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 경쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)로부터 유래된다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 인간 카파 2 경쇄의 CL 영역을 포함한다.
상기　안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘, 15mM 내지 70mM 히스티딘, 20mM 내지 60mM 히스티딘, 20mM 내지 50mM 히스티딘, 또는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 25nM 히스티딘을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 30mM 내지 100mM NaCl, 30mM 내지 90mM NaCl, 40mM 내지 80mM NaCl, 30mM 내지 70mM NaCl, 또는 45mM 내지 70mM NaCl을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 60mM NaCl을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌, 30mM 내지 140mM L-아르기닌, 40mM 내지 130mM L-아르기닌, 50mM 내지 120mM L-아르기닌, 60mM 내지 110mM L-아르기닌, 70mM 내지 110mM L-아르기닌, 80mM 내지 110mM L-아르기닌, 또는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 100mM L-아르기닌을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 0.006% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80, 0.007% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.008% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.009% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.01% 내지 0.06% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.009% 내지 0.05% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 0.01% 폴리소르베이트 80을 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6 내지 7.0이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.3 내지 6.8이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.5 +/- 0.2이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 30mg/mL, 10mg/mL 내지 25mg/mL, 또는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 또는 10주 동안 2°C 내지 8°C에서 안정하다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 또는 6주 동안 20°C 내지 25°C에서 안정하다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 또는 5주 동안 35°C 내지 40°C에서 안정하다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체의 농도는 약 20mg/mL이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
a) 중쇄로서,
i) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
b) 경쇄로서,
i) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함한다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다.　
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 매 4주마다 20mg/kg으로 투여된다.　상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 매 4주마다 20mg/kg IV로 투여된다.　
　상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 질병 진행, 허용할 수 없는 독성, 새로운 항암 요법의 개시, 대상 동의 철회 또는 사망까지 최대 24개월 동안 매 4주마다 20mg/kg IV로 투여된다. 일부 실시예에서, 투여는 질병 진행, 허용할 수 없는 독성, 새로운 항암 요법의 개시, 대상 동의 철회 및/또는 사망까지 최대 6개월, 12개월, 18개월 또는 24개월까지이다.　
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 암 치료를 위해 투여된다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 암 치료 방법에서의 용도를 위한 것이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 암은 전립선암, 간암(HCC), 결장직장암(CRC), 결장직장암 MSS(MSS-CRC, 난치성 MSS 결장직장성 포함), CRC(미상의 MSS), 난소암(난소암종 포함), 자궁내막암(자궁내막암종 포함), 유방암, 췌장암, 위암, 자궁경부암, 두경부암, 갑상선암, 고환암, 요로상피암, 폐암, 흑색종, 비흑색종 피부암(편평 및 기저세포암종), 신경교종, 신세포암(RCC), 신세포암종(RCC), 림프종(비호지킨 림프종(NHL) 및 호지킨 림프종(HD)), 급성 골수성 백혈병(AML), T 세포 급성 림프모구 백혈병(T-ALL), 미만성 거대 B 세포림프종, 고환생식세포종양, 중피종, 식도암, 삼중음성유방암, 메르켈세포(Merkel Cell)암, MSI-고(MSI-high)암, KRAS 돌연변이성 종양, 성인 T세포 백혈병/림프종, 흉막중피종, 항문 SCC, 신경내분비 폐암(신경내분비 폐암종 포함), NSC LC, NSCL(대세포), NSCLC 대세포, NSCLC 편평세포, 자궁경부 SSC, 악성 흑색종, 췌장암, 췌장 선암종, 선양낭성암(선양낭성암종 포함), 원발성 복막암, 미세부수체 안정 원발성 복막암, 백금 내성 미세부수체 안정 원발성 복막암, 및/또는 골수이형성 증후군(MDS)으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
본 발명은 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
단락 [0048]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 서열(서열번호:17 또는 서열번호:50)을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0049]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 영역을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0050]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 중쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 경쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)로부터 유래된다.
단락 [0048] 내지 [0051]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 인간 카파 2 경쇄의 CL 영역을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0052]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘, 15mM 내지 70mM 히스티딘, 20mM 내지 60mM 히스티딘, 20mM 내지 50mM 히스티딘, 또는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0053]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 25mM 히스티딘을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0054]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 30mM 내지 100mM NaCl, 30mM 내지 90mM NaCl, 40mM 내지 80mM NaCl, 30mM 내지 70mM NaCl, 또는 45mM 내지 70mM NaCl을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0055]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 60mM NaCl을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0056]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌, 30mM 내지 140mM L-아르기닌, 40mM 내지 130mM L-아르기닌, 50mM 내지 120mM L-아르기닌, 60mM 내지 110mM L-아르기닌, 70mM 내지 110mM L-아르기닌, 80mM 내지 110mM L-아르기닌, 또는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0057]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 100mM L-아르기닌을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0058]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 0.006% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80, 0.007% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.008% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.009% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.01% 내지 0.06% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.009% 또는 0.05% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0059]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 0.01% 폴리소르베이트 80를 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0060]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6 내지 7.0이다.
단락 [0048] 내지 [0061]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.3 내지 6.8이다.
단락 [0048] 내지 [0062]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.5 +/- 0.2이다.
단락 [0048] 내지 [0063]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 30mg/mL, 10mg/mL 내지 25mg/mL, 또는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다.
단락 [0048] 내지 [0064]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 또는 10주 동안 2°C 내지 8°C에서 안정하다.
단락 [0048] 내지 [0065]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 또는 6주 동안 20°C 내지 25°C에서 안정하다.
단락 [0048] 내지 [0066]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 또는 5주 동안 35°C 내지 40°C에서 안정하다.
단락 [0048] 내지 [0067]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 약 20mg/mL의 농도이다.
단락 [0048] 내지 [0068]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
a) 중쇄로서,
i) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
b) 경쇄로서,
i) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0069]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0070]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0071]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함한다.
단락 [0048] 내지 [0072]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
단락 [0048] 내지 [0073]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
단락 [0048] 내지 [0074]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다.　
단락 [0048] 내지 [0075]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 상기-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　
암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기-PVRIG 항체는 매 4주마다 20mg/kg으로 투여된다.　단락 [0048] 내지 [0076]에 따른 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 제제는 매 4주마다 20mg/kg IV로 투여된다.　
단락 [0048] 내지 [0077]에 따른 상기 치료 방법의 일부 실시예에서, 상기 제제는 질병 진행, 허용할 수 없는 독성, 새로운 항암 요법의 개시, 대상 동의 철회 또는 사망까지 최대 24개월 동안 매 4주마다 20mg/kg IV로 투여된다. 일부 실시예에서, 투여는 질병 진행, 허용할 수 없는 독성, 새로운 항암 요법의 개시, 대상 동의 철회 및/또는 사망까지 최대 6개월, 12개월, 18개월 또는 24개월까지이다.　
단락 [0048] 내지 [0078]에 따른 암 치료 방법에서의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 용도의 일부 실시예에서, 상기 암은 전립선암, 간암(HCC), 결장직장암(CRC), 결장직장암 MSS(MSS-CRC, 난치성 MSS 결장직장성 포함), CRC(미상의 MSS), 난소암(난소암종 포함), 자궁내막암(자궁내막암종 포함), 유방암, 췌장암, 위암, 자궁경부암, 두경부암, 갑상선암, 고환암, 요로상피암, 폐암, 흑색종, 비흑색종 피부암(편평 및 기저세포암종), 신경교종, 신세포암(RCC), 신세포암종(RCC), 림프종(비호지킨 림프종(NHL) 및 호지킨 림프종(HD)), 급성 골수성 백혈병(AML), T 세포 급성 림프모구 백혈병(T-ALL), 미만성 거대 B 세포림프종, 고환생식세포종양, 중피종, 식도암, 삼중음성유방암, 메르켈세포(Merkel Cell)암, MSI-고(MSI-high)암, KRAS 돌연변이성 종양, 성인 T세포 백혈병/림프종, 흉막중피종, 항문 SCC, 신경내분비 폐암(신경내분비 폐암종 포함), NSCLC, NSCL(대세포), NSCLC 대세포, NSCLC 편평세포, 자궁경부 SSC, 악성 흑색종, 췌장암, 췌장 선암종, 선양낭성암(선양낭성암종 포함), 원발성 복막암, 미세부수체 안정 원발성 복막암, 백금 내성 미세부수체 안정 원발성 복막암, 및/또는 골수이형성 증후군(MDS)으로 구성되는 군으로부터 선택된다.
도 1은 인간 PVRIG의 전장 서열을 나타낸다.
도 2는 PVRIG의 결합 파트너인 인간 폴리오바이러스 수용체-관련 2 단백질(PVLR2, 또한, 넥틴-2, CD112 또는 헤르페스바이러스 진입 매개체 B(HVEB)로 공지됨)의 서열을 나타낸다. PVLR2는 인간 원형질막 당단백질이다.
도 3은 본 발명의 가변 중쇄 및 경쇄뿐만 아니라 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 vhCDR1, vhCDR2, vhCDR3, vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3 서열을 나타낸다.
도 4는 인간 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4의 서열을 나타낸다.
도 5a 내지 도 5d는 본 발명의 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제에 따라 제제화될 수 있는 다른 PVRIG 항체의 서열을 나타낸다.
도 6은 제제 파라미터를 나타내며, 이는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 항체 제제의 완충제 및 부형제를 포함한다.
도 7a 내지 도 7b는 CHA.7.518.1.H4(S241P)에 대한 데이터를 나타낸다. A) 응력 및 보관 상태를 나타낸다. B) 샘플 및 테스트 일정을 나타낸다.
도 8은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 T=0 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 9는 T=0 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE를 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 10은 T=0 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 11은 T=0 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 12는 T=0 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점 측정을 제공한다.
도 13은 T=0 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징(MFI)에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 14는 T=0 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 15는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 동결/해동 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 16은 동결/해동 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도 측정을 제공한다.
도 17은 동결/해동 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 18은 동결/해동 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 19는 동결/해동 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점 측정을 제공한다.
도 20은 동결/해동 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징(MFI)에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 21은 동결/해동 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 22는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 교반 시각적 외관 평가를 제공한다.
도 23은 교반 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE를 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 24는 교반 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 25는 교반 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 26은 교반 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점의 측정을 제공한다.
도 27은 교반 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 측정을 제공한다.
도 28은 교반 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA을 제공한다.
도 29는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 1주 40°C 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 30은 1주 40°C A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE를 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 31은 1주 40°C LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 32는 1주 40°C SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 33은 1주 40°C cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점의 측정을 제공한다.
도 34는 1 주 40°C MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 35는 1주 40°C 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P)의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 36은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 40°C 2주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 37은 40°C 2주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 38은 40°C 2주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 39는 40°C 2주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 40은 40°C 2주 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 등전점의 측정을 제공한다.
도 41은 40°C 2주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 42는 40°C 2주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 평가를 위한 효능 ELISA을 제공한다.
도 43은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 상온 2주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 44는 상온 2주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 45는 상온 2주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 46은 상온 2주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 47은 상온 2주 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 등전점의 측정을 제공한다.
도 48은 상온 2주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 49는 상온 2주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 평가를 위한 효능 ELISA을 제공한다.
도 50은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 상온 4주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 51은 상온 4주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 52는 상온 4주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 53은 상온 4주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 54는 상온 4주 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점을 제공한다.
도 55은 상온 4주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 56은 4주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA을 제공한다.
도 57은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 2 내지 8°C 2주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 58은 2 내지 8°C 2주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 59는 2 내지 8°C 2주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 60은 2 내지 8°C 2주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 61은 2 내지 8°C 2주 cIEF 결과: 이미지화 cIEF 분석을 사용한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 등전점의 측정을 제공한다.
도 62는 2 내지 8°C 2주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 63은 2 내지 8°C 2주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 64는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 2 내지 8°C 4주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 65는 2 내지 8°C 4주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 66은 2 내지 8°C 4주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 67은 2 내지 8°C 4주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 68은 2 내지 8°C 4주 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점 측정을 제공한다.
도 69는 2 내지 8°C 4주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 70은 2 내지 8°C 4주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 71은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 2 내지 8°C 8주 시각적 외관 결과를 제공한다.
도 72는 2 내지 8°C 8주 A280 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 SoloVPE을 사용한 단백질 농도의 측정을 제공한다.
도 73은 2 내지 8°C 8주 LabChip 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 LabChip(환원 및 비환원)에 의한 IgG 순도의 측정을 제공한다.
도 74는 2 내지 8°C 8주 SEC 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 단백질 응집 측정을 위한 크기 배제 크로마토그래피를 제공한다.
도 75는 2 내지 8°C 8주 cIEF 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 이미지화 cIEF 분석을 사용한 등전점 측정을 제공한다.
도 76은 2 내지 8°C 8주 MFI 결과: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제에 대한 MicroFluid 이미징에 의한 입자 분석을 제공한다.
도 77은 2 내지 8°C 8주 결합 검정: CHA.7.518.1.H4(S241P) 제제의 평가를 위한 효능 ELISA를 제공한다.
도 78은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)의 다양한 투여량에서 수용체 점유율을 나타내는 데이터를 제공한다.
도 79는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)의 다양한 투여량에서 수용체 점유율을 나타내는 데이터를 제공한다.
도 80은 PVRIG가 TIGIT/DNAM-1 AXIS에서 신규 관문임을 나타내는 데이터를 제공한다.
도 81은 PVRIG 억제가 마우스 암 모델에서 종양 성장을 감소시킴을 나타내는 데이터를 제공한다.
도 82는 연구 설계의 개략도를 제공한다.
도 83은 환자 기준선 특징에 관한 정보를 제공한다.
도 84는 환자 치료 배치에 관한 정보를 제공한다.
도 85는 치료 응급 이상 반응에 관한 정보를 제공한다.
도 86은 치료 응급 중증 이상 반응에 관한 정보를 제공한다.
도 87은 환자 데이터의 스위머(Swimmer) 플롯을 제공한다.
도 88은 환자 데이터의 폭포(Waterfall) 플롯을 제공한다.
도 89는 안정 질환 및 용량-반응 관계를 가진 환자에 대한 정보를 제공한다.
도 90은 치료 난치성 질환을 가진 환자에 대한 최상의 치료 시점 반응 정보를 제공한다.
도 91은 치료 투여량 데이터의 그래프를 제공한다.
도 92는 수용체 점유율 검정을 사용한 항-PVRIG에 의한 PVRIG 진입에 관한 데이터를 제공한다.
도 93은 환자 기준선 특징 데이터를 제공한다.
도 94는 환자 배치 개요를 제공한다.
도 95는 용량 증량 개략도를 도시한다.
도 96은 이상 반응 - 안전 분석 세트의 개요를 제공한다.
도 97은 연구 치료 중단(A군)으로 이어지는 중증 이상 반응의 개요를 제공한다.
도 98은 ≥3의 환자 - 단독요법에서 치료 응급 중증 이상 반응(TEAE)의 발생 정도를 제공한다.
도 99는 ≥3의 환자 - 병용 요법에서 TEAE의 발생 정도를 제공한다.
도 100은 모든 환자 - 단독요법(n　=　18)에서 중증 TEAE의 발생 정도를 제공한다.
도 101은 모든 환자 - 병용요법(n　=　13)에서 중증 TEAE의 발생 정도를 제공한다.
도 102는 1주기 1일에서 IV 주입 후 CHA.7.518.1.H4(S241P) PK 프로파일을 제공한다 - A군 및 B군.
도 103은 A군 및 B군에 대한 조사자 평가 응답(재작성 v1.1 dlt 평가 가능 집단 당)의 개요를 제공한다.
도 104a 내지 도 104b는 A군 및 B군의 데이터에 대한 스위머 플롯(Swimmer) 플롯을 제공한다. 개요 플롯은 도 104c에 제공된다.
도 105는 A군 및 B군 데이터의 폭포(Waterfall) 플롯을 제공한다.
도 106은 CHA.7.518.1.H4(S241P) + 니볼루맙에 관한 데이터를 제공한다 - MSS(미세부수체 안정 상태) 결장직장암 환자에서 확인된 PR(44주 연구 치료 진행 중).
도 107은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법에 관한 데이터를 제공한다 - MSS(미세부수체 안정 상태) 백금 내성 원발성 복막암 환자에서 확인된 PR(25주 연구 치료 진행 중).
I. 도입
암은 환자가 암성 세포를 인식 및 제거할 수 없는 것으로 간주될 수 있다. 많은 경우, 상기 형질전환(예를 들어, 암성) 세포는 면역 감시를 방해한다. 미억제된 T-세포 활성을 방지하기 위해 신체의 T-세포 활성화를 제한하는 자연적인 제어 메커니즘이 있고, 이는 암성 세포가 면역 반응을 회피 또는 억제하는 데 사용될 수 있다. 면역 효과기 세포(특히 T 세포)의 암을 인식 및 제거하는 능력을 회복시키는 것이 면역요법의 목표이다. 때때로, "면역요법"으로 지칭되는 면역항암제 분야는 예르보이(Yervoy), 키트루다(Keytruda) 및 옵디보(Opdivo)와 같은 T 세포 관문 억제 항체에 대한 최근의 여러 승인으로 신속하게 성장하고 있다. 상기 항체는 T 세포 면역력의 정상적인 음성 조절제를 차단하기 때문에 일반적으로 "관문 억제제"라고 지칭된다. 공동자극성 및 공동억제성 둘 모두의 다양한 면역조절 신호가 최적의 항원-특이적 면역 반응을 조율하기 위해 사용될 수 있는 것으로 일반적으로 이해된다. 일반적으로, 상기 항체는 CTLA-4 및 PD-1과 같은 관문 억제제 단백질에 결합하며, 이는 정상적인 환경에서 세포독성 T 세포(CTL)의 활성화를 방지 또는 억제한다. 예를 들어, 상기 단백질에 결합하는 항체의 사용을 통해, 상기 관문 단백질을 억제함으로써, 종양에 대한 증가된 T 세포 반응을 달성할 수 있다. 즉, 상기 암 체크포인트 단백질은 면역 반응을 억제하고; 예를 들어, 상기 관문 단백질에 대한 항체를 사용하여, 상기 단백질이 차단되는 경우, 면역계가 활성화고, 이는 면역 자극으로 이어지며, 이는 암 및 전염병과 같은 병태를 치료한다.
본 발명은 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유 단백질(또는 "PVRIG", 또한, 때때로 "PV 단백질"로 본원에서 지칭됨)에 대한 항체를 포함한 제제에 관한 것이다. PVRIG는 NK 및 T-세포의 세포 표면에서 발현되고 다른 공지된 면역 관문과 여러 유사점을 공유한다.
따라서, 본 발명은 인간 PVRIG 및 이의 펩타이드에 결합하는, 항체 결합 도메인을 포함하는, 항체를 포함하는 제제, 및 암 및 전염병과 같은 질환 및 증가된 면역 활성이 치료를 초래하는 다른 병태를 치료하기 위한 T세포 및/또는 Nk세포를 활성화하는 방법을 제공한다. 특히, 본 발명은 중쇄 및 경쇄뿐만 아니라 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 vhCDR1, vhCDR2, vhCDR3, vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3 서열을 포함하는 항체를 포함하는 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체는 도 3에서 도시한 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함한다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체는 도 5a 내지 도 5d에 도시한 것과 동일한 CDR을 가지는 것뿐만 아니라 도 5a 내지 도 5d에 제공된 바와 동일한 중쇄 및 경쇄를 포함하는 항-PVRIG 항체를 포함한다.
II. PVRIG 단백질
본 발명은 PVRIG 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 제제를 제공한다. 상기 맥락에서 "단백질"은 "폴리펩타이드"와 혼용하여 사용되며, 펩타이드도 포함한다. 본 발명은 PVRIG 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 제공한다. PVRIG는 326개 아미노산 길이의 막통과 도메인 단백질이고, 신호 펩타이드(아미노산 1번 내지 40번 범위), 세포외 도메인(아미노산 41번 내지 171번 범위), 막통과 도메인(아미노산 172번 내지 190번 범위) 및 세포질 도메인(아미노산 191번 내지 326번 범위)을 가진다. 전장 인간 PVRIG 단백질은 도 1에 도시되어 있다. 개시 코돈일 수 있는 2개의 메티오닌이 존재하지만, 성숙한 단백질은 동일하다.
따라서, 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "PVRIG" 또는 "PVRIG 단백질" 또는 "PVRIG 폴리펩타이드"는 선택적으로, 본원에 설명된, 공지된 또는 야생형 PVRIG를 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 그러한 단백질, 또는 이의 변이체, 접합체, 또는 단편뿐만 아니라 PVRIG의 임의의 자연 발생 접합 변이체, 아미노산 변이체 또는 이소형, 및 특히 ECD 단편을 포함할 수 있다. 또한, 용어 PVRIG의 "가용성" 형태는 용어 "가용성 엑토도메인(ECD)" 또는 "엑토도메인" 또는 "세포외도메인(ECD)뿐만 아니라 "PVRIG 폴리펩타이드의 단편"과 혼용하여 사용될 수 있으며, 이는 하나 이상의 하기 선택적인 폴리펩타이드를 광범위하게 지칭할 수 있다:
상기 PVRIG 단백질은 세포외 도메인 내의 면역글로불린(Ig) 도메인을 함유하며, 이는 PVR-유사 Ig 폴드 도메인이다. 상기 PVR-유사 Ig 폴드 도메인은, 다른 B7 패밀리 구성원과 유사하게, 기능적 대응물 결합을 담당할 수 있다. 상기 세포외 도메인의 PVR-유사 Ig 폴드 도메인은, 상기 폴드에 전형적인 바와 같이, 도메인 내 시스테인 잔기 사이에 형성된 1개의 이황화물 결합을 포함하며, 이는 구조-기능에 중요할 수 있다. 상기 시스테인은 잔기 22 및 93(또는 94)에 위치한다. 일 실시예에서, PVRIG 항체의 테스트에 사용될 수 있는 PVRIG의 가용성 단편이 제공된다. PVRIG 단백질의 정의에는 PVRIG ECD 단편이 포함되며, 이는 미국 특허 제9,714,289호에 설명된 것과 같은 ECD 단편을 포함하며, 이의 전문이 모든 목적으로 본원에 참조문헌으로 원용된다.
본원에 공지 및 하기 더 상세하게 설명되는 바와 같이, PVRIG에 결합하여 PVRL2에 의한 활성화를 (예를 들어, 가장 통상적으로 PVRIG 및 PVLR2의 상호작용을 차단함으로써) 방지하는 항-PVRIG 항체(항원-결합 단편 포함)는 T 세포 및/또는 NK 세포 활성화를 증진시키고 암 및 병원균 감염과 같은 질환을 치료하는데 사용된다.
III. 항체
따라서, 본 발명은 본원에 설명된 제제에 따라 제제화될 수 있고 도 3에서 제공되는 항-PVRIG 항체(예를 들어, 도 3에서 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함한 항-PVRIG 항체를 포함함)를 제공한다. 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유 단백질, Q6DKI7 또는 C7orf15로도 불리는 PVRIG는 도 1에 도시된 RefSeq 기탁번호 NP_076975에 나타낸 아미노산 및 핵산 서열과 관련된다. 본 발명의 항체는 상기 PVRIG 세포외 도메인에 대해 특이적이다.
하기 논의된 바와 같이, 용어 "항체"가 일반적으로 사용된다. 본 발명에서 용도를 발견한 항체는 전형적인 항체뿐만 아니라, 하기 설명된, 항체 유도체, 단편 및 모방체를 포함하여 본원에 설명된 바와 같은 다수의 형식을 취할 수 있다. 일반적으로, 용어 "항체"는, 하기 더 상세하게 설명된 바와 같이, 적어도 하나의 항체 결합 도메인을 포함하는 임의의 폴리펩타이드를 포함한다. 항체는, 본원에 설명된 바와 같이, 다중클론, 단일클론, 이종, 동종이계, 동계, 또는 변형 형태일 수 있으며, 단일클론 항체는 많은 실시예에서 특정 용도를 발견한다. 일부 실시예에서, 본원의 항체는 특이적으로 또는 실질적으로 특이적으로 PVRIG 분자에 결합한다. 본원에 사용된 용어 "단일클론 항체" 및 "단일클론 항체 조성물"은 항원의 특정 에피토프와 면역반응할 수 있는 항원 결합 부위의 한 종만을 함유하는 항체 분자의 집단을 지칭하는 반면, 용어 "다중클론 항체" 및 "다중클론 항체 조성물"은 특정 항원과 상호작용할 수 있는 항원 결합 부위의 다중 종을 함유하는 항체 분자의 집단을 지칭한다. 단일클론 항체 조성물은 면역반응을 일으키는 특정 항체에 대한 단일 결합 친화도를 나타낸다.
전통적인 전장 항체 구조 단위는 전형적으로 사량체를 포함한다. 각 사량체는 전형적으로 2개의 동일한 폴리펩타이드 사슬의 쌍으로 구성되어 있으며, 각 쌍은 하나의 "경쇄"(전형적으로 약 25kDa의 분자량을 가짐) 및 하나의 "중쇄"(전형적으로 약 50 내지 70kDa의 분자량을 가짐)를 가진다. 인간 경쇄는 카파 경쇄와 람다 경쇄로 분류된다. 본 발명은 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하나 이에 제한되지 않는 여러 하위부류를 가지는 IgG 부류에 일반적으로 기반하는 항체에 관한 것이다. 따라서, 본원에 사용된 "이소형"은 이의 불변 영역의 화학적 및 항원적 특징에 의해 정의된 면역글로불린의 임의의 하위부류를 의미한다. "CPA"로 지명된 본원의 예시적인 항체가, 도 4에 도시한 바와 같이, IgG1 중쇄 불변 영역에 기반한 반면, 본 발명의 항-PVRIG 항체는 IgG2, IgG3 및 IgG4 서열 또는 그의 조합을 사용한 것을 포함한다. 예를 들어, 당업계에 공지된 바와 같이, 상이한 IgG 이소형은 원할 수 있거나 원하지 않을 수 있는 상이한 효과기 기능을 가진다. 따라서, 본 발명의 CPA 항체는 또한 IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 도메인(도 4에 도시됨)에 대한 상기 IgG1 불변 도메인을 교환(swap out)할 수 있고, IgG2 및 IgG4는, 예를 들어, 제조 용이성을 위해 또는 감소된 효과기 기능이 요구되는 경우, 많은 상황에서 특정 용도를 발견할 수 있으며, 일부 경우 후자가 바람직하다.
각 사슬의 아미노-말단 부분은 주로 항원 인식을 담당하는 약 100개 내지 110개 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함하며, 이는 일반적으로 "Fv 도메인" 또는 "Fv 영역"으로 당업계 및 본원에서 지칭된다. 상기 가변 영역에서, 3개의 루프가 각 중쇄 및 경쇄의 V 도메인에 대해 모여서 항원 결합 부위를 형성한다. 각 상기 루프는 상보성 결정 영역(이하, "CDR"로 지칭됨)으로 지칭되며, 이는 상기 아미노산 서열의 변화가 가장 현저하다. "가변"은 상기 가변 영역의 특정 분절이 항체 간 서열에서 광범위하게 상이하다는 사실을 지칭한다. 상기 가변 영역 내의 가변성은 균일하게 분포되어 있지 않다. 대신, 상기 V 영역은 "초가변 영역"으로 불리는 극단적 가변성의 더 짧은 영역으로 구분된 15 내지 30개 아미노산의 프레임워크 영역(FR)으로 불리는 상대적 불변 스트레치로 구성된다.
각 VH 및 VL은 3개의 초가변 영역("상보성 결정 영역", "CDR") 및 4개의 FR로 구성되며, 이는 FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4의 순서로 아미노-말단에서 카르복시-말단으로 배열된다.
상기 초가변 영역은 일반적으로 상기 경쇄 가변 영역에서 약 아미노산 잔기 24 내지 34(LCDR1; "L"은 경쇄를 나타냄), 50 내지 56(LCDR2) 및 89 내지 97(LCDR3) 및 상기 중쇄 가변 영역에서 약 31 내지 35B(HCDR1; "H"는 중쇄를 나타냄), 50 내지 65(HCDR2), 95 내지 102(HCDR3)의 아미노산 잔기를 포함하지만, 때때로 넘버링은 당업자에 의해 알 수 있는 바와 같이 다소 변화된다; Kabat et al., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5 th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991) 및/또는 하이퍼루프(예를 들어, 상기 경쇄 가변 영역에서 26 내지 32(LCDR1), 50 내지 52(LCDR2) 및 91 내지 96(LCDR3) 및 상기 중쇄 가변 영역에서 26 내지 32(HCDR1), 53 내지 55(HCDR2) 및 96 내지 101(HCDR3))를 형성하는 아미노산 잔기를 포함한다; Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917. 본 발명의 특이적 CDR이 하기 설명 및 도 6a 내지 도 6에 도시된다.
각 사슬의 카르복시-말단 부분은 주로 효과기 기능을 담당하는 불변 영역을 정의한다. 카밧(Kabat) 등은 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 많은 1차 서열을 수집하였다. 상기 서열의 보존 정도에 기반하여, 그들은 개별 1차 염기 서열을 상기 CDR 및 상기 프레임워크로 분류하고 그의 목록을 만들었다(SEQUENCES OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, 5 th edition, NIH publication, No. 91-3242, E. A. Kabat et al. 참조, 본원에 전문이 참조문헌으로 원용됨).
면역글로불린의 IgG 하위부류에는, 상기 중쇄에서 여러 면역글로불린 도메인이 존재한다. 본원에서 "면역글로불린(Ig) 도메인"이란 별개의 3차 구조를 가지는 면역글로불린의 영역을 의미한다. 본 발명의 관심 대상은 불변 중쇄(CH) 도메인 및 힌지 도메인을 포함하는 중쇄 도메인이다. IgG 항체의 맥락에서, 상기 IgG 이소형은 각각 3개의 CH 영역을 가진다. 따라서, IgG의 맥락에서 "CH" 도메인은 "CH1"은 카밧(Kabat)에서와 같이 EU 인덱스에 따라 118번 내지 220번 위치를 지칭하고, "CH2"는 카밧(Kabat)에서와 같이 EU 인덱스에 따라 237번 내지 340번 위치를 지칭하고, "CH3"은 카밧(Kabat)에서와 같이 EU 인덱스에 따라 341번 내지 447번 위치를 지칭한다.
따라서, 본 발명은 본원에서 개략된 바와 같이 사용하기 위해 가변 중쇄 도메인, 가변 경쇄 도메인, 불변 중쇄 도메인, 불변 경쇄 도메인 및 Fc 도메인을 제공한다. 본원에서 사용된 "가변 영역"이란, 카파, 람다, 및 중쇄 면역글로불린 유전자 좌위를 각각 구성하는 임의의 Vκ 또는 Vλ, 및/또는 VH 유전자에 의해 실질적으로 인코딩되는 하나 이상의 Ig 도메인을 포함하는 면역글로불린의 영역을 의미한다. 따라서, 상기 중쇄 가변 도메인은 vhFR1-vhCDR1-vhFR2-vhCDR2-vhFR3-vhCDR3-vhFR4를 포함하고, 상기 경쇄 가변 도메인은 vlFR1-vlCDR1-vlFR2-vlCDR2-vlFR3-vlCDR3-vlFR4를 포함한다. 본원에서 "중쇄 불변 영역"이란, 항체의 CH1-힌지-CH2-CH3 부분을 의미한다. 본원에서 사용된 "Fc" 또는 "Fc 영역" 또는 "Fc 도메인"은 제1 불변 영역 면역글로불린 도메인을 배제한 항체의 불변 영역 및 일부 경우에서 상기 힌지의 일부를 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 따라서, Fc는 IgA, IgD, 및 IgG의 마지막 2개의 불변 영역 면역글로불린 도메인, IgE 및 IgM의 마지막 3개의 불변 영역 면역글로불린 도메인, 및 상기 도메인에 대한 가요성 힌지 N-말단을 지칭한다. IgA 및 IgM의 경우, Fc는 J 사슬을 포함할 수 있다. IgG의 경우, 상기 Fc 도메인은 면역글로불린 도메인 Cγ2 및 Cγ3(Cγ2 및 Cγ3) 및 Cγ1(Cγ1)과 Cγ2(Cγ2) 사이의 하부 힌지 영역을 포함한다. 상기 Fc 영역의 경계는 달라질 수 있지만, 상기 인간 IgG 중쇄 Fc 영역은 통상적으로 이의 카르복실 말단에 잔기 C226 또는 P230을 포함하는 것으로 정의되며, 여기서 넘버링은 카밧(Kabat)에서와 같이 EU 인덱스에 따른다. 일부 실시예에서, 하기 더 상세하게 설명되어 있는 바와 같이, 아미노산 변형이, 예를 들어, 하나 이상의 FcγR 수용체 또는 FcRn 수용체에 대한 결합을 변경시키기 위해, 상기 Fc 영역에 대해 이루어진다.
본원에서 사용되는 "Fc 변이체" 또는 "변이체 Fc"는 Fc 도메인에서 아미노산 변형을 포함하는 단백질을 의미한다. 본 발명의 Fc 변이체는 이를 구성하는 상기 아미노산 변형에 따라 정의된다. 따라서, 예를 들어, N434S 또는 434S는 모 Fc 폴리펩타이드와 비교하여 434번 위치에 세린 치환을 가지는 Fc 변이체이며, 여기서 넘버링은 EU 인덱스에 따른다. 마찬가지로, M428L/N434S는 모 Fc 폴리펩타이드와 비교하여 치환 M428L 및 N434S를 가지는 Fc 변이체로 정의된다. WT 아미노산의 정체가 명시되지 않을 수 있으며, 이 경우 상기 변이체는 428L/434S로 지칭된다. 치환이 제공되는 순서는 임의적이며, 즉, 예를 들어, 428L/434S는 M428L/N434S 등과 동일한 Fc 변이체라는 점에 주목해야 한다. 항체와 관련하여 본 발명에서 논의된 모든 위치에 대해, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 위치 넘버링은 EU 인덱스에 따른다.
본원에서 사용된 "Fab" 또는 "Fab 영역"은 VH, CH1, VL, 및 CL 면역글로불린 도메인을 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. Fab는 분리된 상기 영역, 또는 전장 항체, 항체 단편 또는 Fab 융합 단백질의 맥락에서 상기 영역을 지칭할 수 있다. 본원에서 사용된 "Fv" 또는 "Fv 단편" 또는 "Fv 영역"은 단일 항체의 VL 및 VH 도메인을 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 이는 일반적으로 2개의 사슬로 구성된다.
본 명세서 전반에 걸쳐, IMTG 넘버링 시스템 또는 카밧(Kabat) 넘버링 시스템은 일반적으로 가변 도메인의 잔기(대략, 경쇄 가변 영역의 1번 내지 107번 잔기 및 중쇄 가변 영역의 1번 내지 113번 잔기)를 지칭할 경우 사용된다(예를 들어, Kabat et al. (1991)). 카밧(Kabat)에서와 같이 EU 넘버링은 일반적으로 불변 도메인 및/또는 Fc 영역에 대해 사용된다.
CDR은 항원 결합, 또는, 보다 구체적으로, 항체의 에피토프 결합 부위의 형성에 기여한다. "에피토프"는 파라토프로 공지된 항체 분자의 가변 영역에서 특이적 항원 결합 부위와 상호작용하는 결정기를 지칭한다. 에피토프는 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 그룹이며 통상적으로 특이적 구조 특징뿐만 아니라 특이적 전하 특징을 가진다. 단일 항원은 하나 이상의 에피토프를 가질 수 있다.
상기 에피토프는 상기 결합에 직접 관여하는 아미노산 잔기(상기 에피토프의 면역우세 성분으로도 불림) 및 특이적 항원 결합 펩타이드에 의해 효과적으로 차단되는 아미노산 잔기와 같은 상기 결합에 직접 관련되지 않는 다른 아미노산 잔기(다시 말해서, 상기 아미노산 잔기는 상기 특이적인 항원 결합 펩타이드의 풋프린트(footprint) 내에 있음)를 포함할 수 있다.
에피토프는 입체구조 또는 선형일 수 있다. 입체구조 에피토프는 선형 폴리펩타이드 사슬의 상이한 분절의 공간적으로 병치된 아미노산에 의해 생성된다. 선형 에피토프는 폴리펩타이드 사슬의 인접한 아미노산 잔기에 의해 생성된 것이다. 입체구조 및 비(非)입체구조 에피토프는, 변성 용매의 존재 하에서 비입체구조 에피토프에 대한 결합이 아닌 입체구조 에피토프에 대한 결합이 손실된다는 점에서 구별될 수 있다.
에피토프는 전형적으로 고유한 공간 입체구조에서 적어도 3개, 보다 통상적으로 적어도 5개, 또는 8개 내지 10개의 아미노산을 포함한다. 동일한 에피토프를 인식하는 항체는 하나의 항체가 표적 항원에 대한 또 다른 항체의 결합을 차단하는 능력, 예를 들어 "비닝"을 나타내는 간단한 면역검정법으로 입증될 수 있다. 특이적 빈은 아래에 설명되어 있다.
"항체"의 정의에는 항체의 "항원 결합 부분"(또한 "항원 결합 단편", "항체 단편" 및 "항체 유도체"와 혼용하여 사용됨)이 포함된다. 즉, 발명의 목적을 위해, 발명의 항체는 PVRIG 항원에 결합하는 최소한의 기능적 요건을 가진다. 당업자가 인식하는 바와 같이, 항원에 결합하는 능력을 유지하고 (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 구성되는 Fab 단편, (ii) 상기 VH 및 CH1 도메인으로 구성되는 Fd 단편, (iii) 2개의 연결된 Fab 단편을 포함하는 이가 단편인 F(ab')2 단편 (vii) 단일 사슬 fv 분자(scFv)로, 여기서 VH 도메인 및 VL 도메인은 2개의 도메인이 결합되어 항원 결합 부위를 형성할 수 있는 펩타이드 링커에 의해 연결되어 있음(Bird et al., 1988, Science 242:423-426, Huston et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85:5879-5883, 전체가 참조문헌으로 원용됨), (iv) 유전자 융합에 의해 구성되는 "디아바디(diabody)" 또는 "트리아바디(triabody)", 다가 또는 다중특이적 단편(Tomlinson et. al., 2000, Methods Enzymol. 326:461-479; WO94/13804; Holliger et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-6448, 모두 전체가 참조문헌으로 원용됨), (v) "도메인 항체" 또는 "dAb"(때때로 "면역글로불린 단일 가변 도메인"으로 지칭됨), 이는, 예를 들어, 설치류(예를 들어, WO 제00/29004호에 개시된 바와 같음), 너스샤크 및 Camelid V-HH dAb와 같은 다른 종의 단일 항체 가변 도메인을 포함함, (vi) SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디(camelbody), 나노바디(nanobody) 및 IgNAR을 포함하나 이에 제한되지 않는 대안적인 구조를 가지는 다수의 항체 단편 및 유도체가 있다.
더 추가로, 항체 또는 그의 항원-결합 부분(항원-결합 단편, 항체 단편, 항체 부분)은 더 큰 면역접착 분자(때때로 "융합 단백질"이라고도 지칭됨)의 부분일 수 있으며, 이는 상기 항체 또는 항체 부분과 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타이드의 공유 또는 비공유 결합으로 형성된다. 면역부착 분자의 예는 사량체 scFv 분자를 만들기 위한 스트렙트아비딘 코어 영역의 사용 및 이가 및 비오틴화 scFv 분자를 만들기 위한 시스테인 잔기, 마커 펩타이드 및 C-말단 폴리히스티딘 태그의 사용을 포함한다. Fab 및 F(ab')2 단편과 같은 항체 부분은 각각 전체 항체의 파파인 또는 펩신 분해와 같은 통상적인 기술을 사용하여 전체 항체로부터 제조될 수 있다. 또한, 항체, 항체 부분 및 면역부착 분자는, 본원에 설명된 바와 같이, 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 수득될 수 있다.
일반적으로, 본원의 항-PVRIG 항체는 재조합이다. 본원에 사용된 "재조합"은, 예를 들어, 세포, 또는 핵산, 단백질, 또는 벡터에 대한, 생성물과 관련하여 광범위하게 지칭되며, 세포, 핵산, 단백질 또는 벡터가 이종 핵산 또는 단백질의 도입 또는 천연 핵산 또는 단백질의 변경에 의해 변형되었다는 것, 또는 상기 세포가 그렇게 변형된 세포로부터 유래된다는 것을 나타낸다. 따라서, 예를 들어, 재조합 세포는 상기 세포의 천연(비재조합) 형태 내에서 발견되지 않는 유전자를 발현하거나 또는 달리 비정상적으로 발현, 과소 발현 또는 전혀 발현되지 않는 천연 유전자를 발현한다.
본원에 사용된 용어 "재조합 인간 항체"는 (a) 인간 면역글로불린 유전자에 대한 형질전환 또는 트랜스염색체인 동물 (예를 들어, 마우스)로부터 단리된 항체 또는 그로부터 제조된 하이브리도마 (하기 더 설명됨), (b) 인간 항체를 발현하도록 형질전환된 숙주 세포로부터, 예를 들어, 트랜스펙토마로부터, 단리된 항체, (c) 재조합, 조합 인간 항체 라이브러리로부터 단리된 항체, 및 (d) 다른 DNA 서열에 대한 인간 면역글로불린 유전자 서열의 접합을 수반하는 임의의 다른 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 항체와 같은 재조합 수단에 의해 제조, 발현, 생성 또는 단리된 모든 인간 항체를 포함한다. 그러한 재조합 인간 항체는 프레임워크 및 CDR 영역이 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 영역을 가진다. 그러나, 특정 실시예에서, 그러한 재조합 인간 항체는 시험관내 돌연변이유발 (또는, 인간 Ig 서열에 대해 형질전환된 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이유발)을 거칠 수 있고 따라서 상기 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열은, 인간 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래 및 서열에 관련되지만, 생체 내 인간 항체 생식계열 레퍼토리 내에서 자연적으로 존재할 수 없는 서열이다.
A. 선택적 항체 조작
본원의 항-PVRIG 항체(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가지는 것을 포함한 항-PVRIG 항체)는 변형되어, 또는 조작되어, 아미노산 치환에 의해 아미노산 서열을 변경시킬 수 있다.
본원에서 "아미노산 치환" 또는 "치환"은 모체 폴리펩타이드 서열에서 특정 위치의 아미노산을 상이한 아미노산으로 대체하는 것을 의미한다. 특히, 일부 실시예에서, 상기 치환은 특정 위치에서 자연적으로 발생하지 않거나, 유기체 내에서 또는 임의의 유기체에서 자연적으로 발생하지 않는 아미노산에 대한 것이다. 예를 들어, 치환 E272Y는 변이형 폴리펩타이드로서, 이러한 경우 272번 위치의 글루탐산이 티로신으로 대체된 Fc 변이체를 지칭한다. 명확하게 하기 위해, 핵산 코딩 서열을 변화시키지만 출발 아미노산을 변화시키지 않도록 조작된 단백질(예를 들어, CGG(아르기닌을 인코딩함)을 CGA(여전히 아르기닌을 인코딩함)와 교환하여 숙주 유기체 발현 수준을 증가시킴)은 "아미노산 치환"이 아니며; 즉, 동일한 단백질을 인코딩하는 새로운 유전자의 생성에도 불구하고, 상기 단백질이 시작하는 특정 위치에서 동일한 아미노산을 갖는 경우, 이는 아미노산 치환이 아니다.
본원에서 논의된 바와 같이, 아미노산 치환은 상기 PVRIG 단백질에 대한 상기 CDR의 친화성을 변경(결합의 증가 및 감소를 모두 포함함, 이는 하기 더 상세하게 개략됨)시킬 수 있을 뿐만 아니라 상기 항체의 추가적인 기능적 성질을 변경시킬 수 있다. 예를 들어, 상기 항체는 전형적으로 혈청 반감기, 보체 고정, Fc 수용체 결합, 및/또는 항원-의존성 세포 세포독성과 같은 상기 항체의 하나 이상의 기능적 성질을 변경하기 위해 Fc 영역 내의 변형을 포함하도록 조작될 수 있다. 또한, 본 발명의 적어도 일부 실시예에 따른 항체는 화학적으로 변형될 수 있거나(예를 들어, 하나 이상의 화학적 모이어티가 상기 항체에 부착될 수 있음), 그의 글리코실화를 변경하도록, 다시 말해서 항체의 하나 이상의 기능적 성질을 변경하도록 변형될 수 있다. 그러한 실시예는 하기 더 설명된다. 상기 Fc 영역에서 잔기의 넘버링은 카밧(Kabat)의 EU 인덱스의 넘버링이다.
일 실시예에서, CH1의 힌지 영역은 상기 힌지 영역의 시스테인 잔기의 수가 변경되도록, 예를 들어, 증가되거나 감소되도록, 변형된다. 상기 접근법은 Bodmer 등에 의한 미국 특허출원 제5,677,425호에서 더 설명되어 있다. CH1의 힌지 부위에서 시스테인 잔기의 수가 예를 들어, 경쇄 및 중쇄의 조립을 용이하게 하거나 상기 항체의 안정성을 증가 또는 감소시키도록 변경된다다.
다른 실시예에서, 항체의 Fc 힌지 영역은 돌연변이화되어 상기 항체의 생물학적 반감기를 감소시킨다. 더 구체적으로, 하나 이상의 아미노산 돌연변이는 항체가 포도구균 단백질 A(SpA) 결합이 본래 Fc-힌지 도메인 SpA 결합에 관하여 손상되는 상기 Fc-힌지의 CH2-CH3 도메인 인터페이스 영역에 도입된다. 상기 접근법은 Ward 등에 의한 미국 특허 제6,165,745호에 더 상세히 설명되어 있다.
일부 실시예에서, 일반적으로 FcγR 수용체에 대한 결합을 변경하기 위해, 상기 Fc 영역에서 아미노산 치환이 이루어질 수 있다. 본원에서 사용된 "Fc 감마 수용체", "FcγR" 또는 "Fc감마R"은 IgG 항체 Fc 영역에 결합하고 FcγR 유전자에 의해 인코딩되는 단백질 패밀리의 임의의 구성원을 의미한다. 인간에서 상기 패밀리는 이소형 FcγRIa, FcγRIb, 및 FcγRIc를 포함하는 FcγRI(CD64); 이소형 FcγRIIa(동종이인자형(allotype) H131 및 R131 포함), FcγRIIb(FcγRIIb-1 및 FcγRIIb-2 포함), 및 FcγRIIc를 포함하는 FcγRII (CD32); 및 이소형 FcγRIIIa(동종이인자형 V158 및 F158 포함) 및 FcγRIIIb(동종이인자형 FcγRIIIb-NA1 및 FcγRIIIb-NA2 포함)을 포함하는 FcγRIII(CD16)(Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82:57-65, 이의 전문이 본원에 참조문헌으로 원용됨)뿐만 아니라 임의의 발견되지 않은 인간 FcγR 또는 FcγR 이소형 또는 동종이인자형을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. FcγR은 임의의 유기체로부터 유래될 수 있으며, 이는 인간, 마우스, 래트, 토끼, 및 원숭이를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 마우스 FcγR은 FcγRI(CD64), FcγRII(CD32), FcγRIII-1(CD16), 및 FcγRIII-2 (CD16-2)뿐만 아니라 임의의 발견되지 않은 마우스 FcγR 또는 FcγR 이소형 또는 동종이인자형을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
하나 이상의 상기 FcγR 수용체에 대한 결합을 변경하기 위해 이루어질 수 있는 다수의 유용한 Fc 치환이 존재한다. 증가된 결합뿐만 아니라 감소된 결합을 유도하는 치환이 유용할 수 있다. 예를 들어, FcγRIIIa에 대한 증가된 결합은 일반적으로 증가된 ADCC (항체 의존성 세포-매개 세포독성; FcγR을 발현하는 비특이적 세포독성 세포가 표적 세포 상의 결합된 항체를 인식하고 이어서 표적 세포의 용해를 유발하는 세포-매개 반응)를 유도하는 것으로 공지되어 있다. 유사하게도, FcγRIIb(억제 수용체)에 대한 감소된 결합은 일부 상황에서도 마찬가지로 유익할 수 있다. 본 발명에서 용도를 발견한 아미노산 치환은 미국 특허 제11/124,620호(특히 도 41) 및 미국 특허 제6,737,056호(둘 모두 특히 그에서 개시된 변이체에 대해 전문이 원용에 의해 본원에 명확히 포함됨)에 나열된 것을 포함한다. 용도를 발견한 특정 변이체는 236A, 239D, 239E, 332E, 332D, 239D/332E, 267D, 267E, 328F, 267E/328F, 236A/332E, 239D/332E/330Y, 239D, 332E/330L, 299T 및 297N을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 항체는 변형되어 그의 생물학적 반감기를 증가시킨다. 다양한 접근법이 가능하다. 예를 들어, Ward에 의한 미국 특허 제6,277,375호에서 설명된 바와 같이 T252L, T254S, T256F 돌연변이 중 하나 이상이 도입될 수 있다. 대안적으로, 생물학적 반감기를 증가시키기 위해, 상기 항체는 CH1 또는 CL 영역 내에서 변경되어 프레스타(Presta) 등의 미국 특허 제5,869,046호 및 제6,121,022호에서 설명된 바와 같이, IgG의 Fc 영역의 CH2 영역의 2개의 루프에서 취한 구제 수용체 결합 에피토프를 함유할 수 있다. 혈청 반감기를 증가시키기 위한 추가적인 돌연변이는 미국 특허 제8,883,973호, 제6,737,056호 및 제7,371,826호에서 개시되어 있으며, 428L, 434A, 434S, 및 428L/434S를 포함한다.
다른 실시예에서, 상기 Fc 영역은 적어도 1개의 아미노산 잔기를 상이한 아미노산 잔기로 대체함으로써 변경되어 상기 항체의 효과기 기능을 변경시킨다. 예를 들어, 아미노산 잔기 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 및 322번에서 선택된 하나 이상의 아미노산은 상기 항체가 효과기 리간드에 대해 변경된 친화성을 가지지만 모체 항체의 항원-결합 능력을 유지하도록 상이한 아미노산 잔기로 대체된다. 친화성이 변경된 상기 효과기 리간드는 예를 들어, Fc 수용체 또는 보체의 C1 성분일 수 있다. 상기 접근법은 미국 특허 제5,624,821호 및 제5,648,260호(둘 모두 Winter 등에 의함)에 더 상세히 설명되어 있다.
다른 예에서, 아미노산 잔기 329, 331 및 322번에서 선택된 하나 이상의 아미노산은 상기 항체가 변경된 C1q 결합을 가지도록 및/또는 감소 또는 제거된 보체 의존성 세포독성(CDC)을 가지도록 상이한 아미노산 잔기로 대체된다. 상기 접근법은 Idusogie 등에 의한 미국 특허 제6,194,551호에 더 상세히 설명되어 있다.
다른 예에서, 아미노산 위치 231 및 239번 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 변경되어 그에 의해 보체에 고정하는 상기 항체의 능력을 변경시킨다. 상기 접근법은 Bodmer 등에 의한 PCT 공보 제WO 94/29351호에 추가로 설명되어 있다.
또 다른 예에서, 상기 Fc 영역은 항체 의존성 세포독성(ADCC)을 매개하는 항체의 능력을 증가시키도록, 및/또는 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 또는 439번의 위치에서 하나 이상의 아미노산을 변형시킴으로써 Fcγ 수용체에 대한 상기 항체의 친화성을 증가시키도록 변형된다. 상기 접근법은 Presta에 의한 PCT 공보 제WO 00/42072호에서 더 설명되어 있다. 또한, FcγRI, FcγRII, FcγRIII 및 FcγRn에 대한 인간 IgG1의 결합 부위가 매핑되었고 개선된 결합을 가지는 변이체가 설명되어 있다(Shields, R. L. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276:6591-6604 참조). 위치 256, 290, 298, 333, 334 및 339번에서 특이적 돌연변이는 FcγRIII에 대한 결합을 개선하는 것으로 나타난다. 추가적으로, T256A/S298A, S298A/E333A, S298A/K224A 및 S298A/E333A/K334A 조합 돌연변이체는 FcγRIII 결합을 개선시키는 것으로 나타났다. 또한, M252Y/S254T/T256E 또는 M428L/N434S와 같은 돌연변이는 FcRn과의 결합을 개선시키고 항체 순환 반감기를 증가시킨다(Chan CA 및 Carter PJ (2010) Nature Rev Immunol 10:301-316 참조).
다른 실시예에서, 상기 항체는 변형되어 생체내 Fab군 교환을 배제할 수 있다. 구체적으로, 상기 과정은 기능적으로 일가인 이중특이적 항체를 효과적으로 생성하는 다른 IgG4 항체들 사이에 IgG4 절반-분자(1개의 중쇄 및 1개의 경쇄)의 교환을 수반한다. 상기 중쇄의 힌지 영역 및 불변 도메인의 돌연변이는 상기 교환을 막을 수 있다(Aalberse, RC, Schuurman J., 2002, Immunology 105:9-19 참조).
다른 실시예에서, 항체의 글리코실화가 변형된다. 예를 들어, 미글리코실화 항체가 만들어질 수 있다(즉, 상기 항체는 글리코실화가 결여됨). 글리코실화는 변경되어, 예를 들어, 항원에 대한 상기 항체의 친화성을 증가시키거나 ADCC와 같은 효과기 기능을 감소시킬 수 있다. 그러한 탄수화물 변형은 예를 들어, 항체 서열 내의 하나 이상의 글리코실화 부위, 예를 들어, N297을 변경시킴으로써 달성될 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 아미노산 치환은 하나 이상의 가변 영역 프레임워크 글리코실화 부위의 제거를 초래하여 그에 의해 그 부위에서 글리코실화를 제거할 수 있다.
추가로 또는 대안적으로, 푸코실 잔기의 양이 감소된 저푸코실화(hypofucosylated) 항체 또는 증가된 이등분 GlcNac 구조를 갖는 항체와 같은 변경된 유형의 글리코실화를 가지는 항체가 만들어질 수 있다. 그러한 변경된 글리코실화 양상은 항체의 ADCC 능력을 증가시키는 것으로 입증되었다. 그러한 탄수화물 변형은 예를 들어, 변경된 글리코실화 메커니즘을 가지는 숙주 세포에서 상기 항체를 발현시킴으로써 달성될 수 있다. 변경된 글리코실화 기작을 갖는 세포는 당업계에서 설명되어 왔으며 본 발명의 적어도 일부 실시예에 따라 재조합 항체를 발현하여 그에 의해 변경된 글리코실화를 가지는 항체를 생산하는 숙주 세포로서 사용될 수 있다. 예를 들어, 세포주 Ms704, Ms705, 및 Ms709는 푸코실트랜스페라제 유전자인 FUT8(α (1,6) 푸코실트랜스페라제)이 결여되어, 상기 Ms704, Ms705, 및 Ms709 세포주에서 발현된 항체는 그들의 탄수화물에 푸코스가 결여되어 있다. 상기 Ms704, Ms705, 및 Ms709 FUT8 세포주는 2개의 대체 벡터를 사용하여 CHO/DG44 세포에서 상기 FUT8 유전자의 표적화된 파괴에 의해 생성된다(Yamane 등에 의한 미국 특허 공보 제20040110704호, 및 Yamane-Ohnuki et al. (2004) Biotechnol Bioeng 87:614-22 참조). 다른 예로서, Hanai 등에 의한 유럽 특허 제1,176,195호는 기능적으로 파괴된 FUT8 유전자를 가지는 세포주를 설명하고 있으며, 그러한 세포주에서 발현된 항체가 상기 α 1,6 결합-관련 효소를 감소 또는 제거함으로써 저푸코실화를 나타내도록, 푸코실트랜스페라제를 인코딩한다. 또한, Hanai 등은 상기 항체의 Fc 영역에 결합하는 N-아세틸글루코사민에 푸코스를 첨가하기 위한 낮은 효소 활성을 가지거나 또는 상기 효소 활성을 가지지 않는 세포주, 예를 들어, 래트 골수종 세포주 YB2/0(ATCC CRL 1662)를 설명하고 있다. 프레스타(Presta)에 의한 PCT 공보 제WO 03/035835호는 Asn (297)-연결 탄수화물에 푸코스를 부착시키는 능력이 감소되어 있어서, 또한 숙주 세포에서 발현된 항체의 저푸코실화를 초래하는, 변이체 CHO 세포주인 Lec13 세포를 설명하고 있다(또한, Shields, R. L. et al. (2002) J. Biol. Chem. 277:26733-26740 참조). Umana 등에 의한 PCT 공보 제WO 99/54342호는 조작된 세포주에서 발현된 항체가 증가된 이등분 GlcNac 구조를 나타내어 항체의 ADCC 활성이 증가하도록 당단백질-변형 글리코실 트랜스페라제(예를 들어, β(1,4) -N-아세틸글루코사미닐트랜스페라제 III(GnTIII))를 발현하도록 조작된 세포주를 기술하고 있다(또한, Umana et al. (1999) Nat. Biotech. 17:176-180 참조). 대안적으로, 상기 항체의 푸코스 잔기는 푸코시다제 효소를 사용하여 절단될 수 있다. 예를 들어, 푸코시다제인 α-L-푸코시다제는 항체에서 푸코실 잔기를 제거한다(Tarentino, A. L. et al. (1975) Biochem. 14:5516-23).
본 발명에 의해 고려되는 본원의 항체의 다른 변형은 예를 들어, 반감기를 증진시키기 위한 PEG화 또는 다른 수용성 분체, 전형적으로 중합체의 첨가이다. 항체는 예를 들어, 상기 항체의 생물학적(예를 들어, 혈청) 반감기를 증가시키기 위해 PEG화될 수 있다. 항체를 PEG화하기 위해, 전형적으로, 상기 항체를, 또는 그의 단편을, PEG의 반응성 에스테르 또는 알데히드 유도체와 같은, 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 하나 이상의 PEG 기가 상기 항체 또는 항체 단편에 부착되는 조건 하에서 반응시킨다. 바람직하게는, 상기 PEG화는 반응성 PEG 분자(또는 유사한 반응성 수용성 중합체)와의 아실화 반응 또는 알킬화 반응을 통해 수행된다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "폴리에틸렌 글리콜"은 모노 (C1-C10) 알콕시- 또는 아릴옥시-폴리에틸렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜-말레이미드와 같이 다른 단백질을 유도체화하는 데 사용된 임의의 PEG 형태를 포함하도록 의도된다. 특정 실시예에서, PEG화될 항체는 비글리코실화된 항체이다. 단백질을 PEG화하는 방법은 당업계에 공지되어 있으며 본 발명의 적어도 일부 실시예에 따른 항체에 적용될 수 있다. 예를 들어, Nishimura 등에 의한 유럽 특허 제0 154 316호 및 Ishikawa 등에 의한 유럽 특허 제0 401 384호 참조.
FcγR 및/또는 FcRn에 대한 결합 친화성을 변경시키고/시키거나 생체내 혈청 반감기를 증가시키기 위해 이루어진 치환에 추가하여, 하기 더 자세히 설명되는 바와 같이, 추가적인 항체 변형이 이루어질 수 있다.
일부 경우, 친화성 성숙이 수행된다. CDR의 아미노산 변형은 때때로 "친화성 성숙"으로 지칭된다. "친화성 성숙된" 항체는 하나 이상의 CDR에서 하나 이상의 변경(들)을 가지고 이로 인해 상기 변경(들)을 소유하지 않는 모체 항체와 비교하여 항원에 대한 항체의 친화성의 개선을 가지는 항체이다. 일부 경우, 드물지만, 항체의 그의 항원에 대한 친화성을 감소시키는 것이 바람직할 수 있으나, 이는 일반적으로 바람직하지 않다.
일부 실시예에서, 하나 이상의 아미노산 변형이 본 발명의 PVRIG 항체의 CDR 중 하나 이상에서 이루어진다. 일반적으로, 단지 1 또는 2 또는 3개 아미노산이 임의의 단일한 CDR에서 치환되고, 일반적으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개 변경이 CDR의 세트 내에서 이루어진다. 그러나, 임의의 CDR에서 치환 없음, 1, 2 또는 3개 치환의 임의의 조합은 독립적으로 및 선택적으로 임의의 다른 치환과 조합될 수 있는 것으로 이해되어야 한다.
친화성 성숙은 PVRIG 항원에 대한 PVRIG 항체의 결합 친화성을 "모체" 항체와 비교하여 적어도 약 10% 내지 50 내지 100 내지 150% 또는 그 이상, 또는 1 내지 5배로 증가시키도록 수행될 수 있다. 바람직한 친화성 성숙된 항체는 상기 PVRIG 항원에 대해 나노몰(nanomolar) 또는 피코몰(picomolar) 수준의 친화성을 가질 것이다. 친화성 성숙된 항체는 공지된 절차에 의해 생산된다. 예를 들어, 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VL) 도메인 셔플링(domain shuffling)에 의한 친화성 성숙을 설명하고 있는 Marks et al., 1992, Biotechnology 10:779-783 참조. CDR 및/또는 프레임워크 잔기의 무작위 돌연변이 유발은, 예를 들어, Barbas, et al. 1994, Proc. Nat. Acad. Sci, USA 91:3809-3813; Shier et al., 1995, Gene 169:147-155; Yelton et al., 1995, J. Immunol. 155:1994-2004; Jackson et al., 1995, J. Immunol. 154(7):3310-9; and Hawkins et al, 1992, J. Mol. Biol. 226:889-896에 설명되어 있다.
대안적으로, 아미노산 변형은 "침묵(silent)"하는, 예를 들어, 상기 항원에 대한 상기 항체의 친화성을 현저하게 변경시키지 않는, 본 발명의 항체의 CDR 중 하나 이상에서 이루어질 수 있다. 이는 (본 발명의 항체를 인코딩하는 핵산에 대해 수행될 수 있는 바와 같이) 발현의 최적화를 포함한 다수의 이유를 위해 이루어질 수 있다.
따라서, 본 발명의 CDR 및 항체의 정의에는 변이체 CDR 및 항체가 포함되고; 즉, 본 발명의 항체는 본 발명의 열거된 항체의 CDR의 하나 이상에서 아미노산 변형을 포함할 수 있다. 또한, 하기 개략된 바와 같이, 아미노산 변형은 또한 CDR 외부의 임의의 영역에서 독립적으로 및 선택적으로 이루어질 수 있으며, 이는 프레임워크 및 불변 영역을 포함한다.
IV. PVRIG 항체
본 발명은 항-PVRIG 항체를 제공한다. (편의상, "항-PVRIG 항체" 및 "PVRIG 항체"는 혼용하여 사용된다). 본 발명의 항-PVRIG 항체는, 도 3에 도시된 바와 같이, 인간 PVRIG에, 바람직하게는, 인간 PVRIG1의 ECD에 특이적으로 결합하며, 이는 예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 것을 포함하는 항-PVRIG 항체를 포함한다.
PVRIG 또는 PVRIG 에피토프에 대한 특이적 결합은 예를 들어, 적어도 약 10-4M, 적어도 약 10-5M, 적어도 약 10-6M, 적어도 약 10-7M, 적어도 약 10-8M, 적어도 약 10-9M, 대안적으로 적어도 약 10-10M, 적어도 약 10-11M, 적어도 약 10-12M, 또는 그 초과의 KD를 가지는 항체에 의해 나타날 수 있고, 여기서 KD는 특이적 항체-항원 상호작용의 해리 속도를 지칭한다. 전형적으로, 항원에 특이적으로 결합하는 항체는 PVRIG 항원 또는 에피토프와 비교하여 대조군 분자에 대해 20-, 50-, 100-, 500-, 1000-, 5,000-, 10,000배 또는 그 초과의 KD를 가질 것이다.
그러나, 실험예에 나타낸 바와 같이, NK 및 T-세포의 표면에서 발현된 PVRIG에 대한 최적의 결합의 경우, 상기 항체는 바람직하게는 50nM보다 더 적은, 가장 바람직하게는, 1nM 미만의 KD를 가지고, 0.1nM 미만 및 1pM 미만 및 0.1pM이 본 발명의 방법에서 용도를 발견한다.
또한, 특정 항원 또는 에피토프에 대한 특이적 결합은, 예를 들어, PVRIG 항원 또는 에피토프에 대해 대조군과 비교하여 적어도 20-, 50-, 100-, 500-, 1000-, 5,000- 또는 10,000배 이상의 KA 또는 Ka를 가지는 항체에 의해 나타날 수 있고, 여기서 KA 또는 Ka는 특정 항체-항원 상호작용의 해리 속도를 지칭한다.
일부 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 항체는 인간 PVRIG에 100nM 이하, 50nM 이하, 10nM 이하, 또는 1nM 이하(즉, 높은 결합 친화성), 또는 1pM 이하의 KD로 결합하고, 상기 KD는 공지된 방법 예를 들어, 표면 플라즈몬 공명(SPR, 예를 들어, 비아코어(Biacore) 검정), ELISA, KINEXA, 및 가장 전형적으로는 25°C 또는 37°C에서의 SPR에 의해 결정된다.
본 발명은, 도 3에서 제공된 바와 같이, 6개 CDR의 다수의 특이적인 열거된 세트를 함유하는 전장 항체를 포함하는 항원 결합 도메인을 제공한다. 본 발명은, 도 3에서 제공된 바와 같이, 6개 CDR의 다수의 특이적인 열거된 세트를 함유하는 전장 항체를 포함하는 항원 결합 도메인을 제공한다.
본 발명은 가변 중쇄 및 경쇄 도메인뿐만 아니라 전장 중쇄 및 경쇄를 더 제공한다.
본원에서 논의된 바와 같이, 본 발명은, 상기 개략된 바와 같이, CDR의 변이체를 포함한 상기 성분의 변이체를 더 제공한다. 또한, 가변 중쇄는 본원의 "VH" 서열과 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일하고/하거나, Fc 변이체가 사용되는 경우 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 아미노산 변화, 또는 그 이상을 함유할 수 있다. 본원의 "VL" 서열과 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일하고/하거나, Fc 변이체가 사용되는 경우 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 아미노산 변화, 또는 그 이상을 함유할 수 있는 가변 경쇄가 제공된다. 유사하게, 본원의 "HC" 및 "LC" 서열과 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99% 동일하고/하거나, Fc 변이체가 사용되는 경우 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 아미노산 변화, 또는 그 이상을 함유하는 중쇄 및 경쇄가 제공된다.
따라서, 본 발명은 다음의 CDR의 CHA 집합을 포함하는, 통상적으로 전장 또는 scFv 도메인인, 항체를 제공하며, 이의 서열은 도 3에 도시되어 있다:
CHA.7.518.1.H4(S241P)vhCDR1, CHA.7.518.1.H4(S241P)vhCDR2, CHA.7.518.1.H4(S241P)vhCDR3, CHA.7.518.1.H4(S241P)vlCDR1, CHA.7.518.1.H4(S241P)vlCDR2, 및 CHA.7.518.1.H4(S241P)vlCDR3.
또한, 상기 가변 중쇄 및 가변 경쇄의 프레임워크 영역은 당업계에 공지된 바와 같이 인간화될 수 있고 (필요에 따라 상기 CDR에서 생성된 변이체를 때때로 포함함), 따라서 도 3의 VH 및 VL 사슬의 인간화 변이체가 생성될 수 있다. 또한, 상기 인간화 가변 중쇄 및 경쇄 도메인은 그 후, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4의 불변 영역과 같은, 인간 불변 영역과 융합될 수 있다.
또한, 동일한 CDR을 가지지만 상기 가변 도메인(또는 전체 중쇄 또는 경쇄)에서 변화를 가질 수 있는 서열 또한 포함된다. 예를 들어, PVRIG 항체는 도 3 또는 도 5a 내지 도 5d에 도시된 것과 동일한 CDR을 가지지만 상기 가변 영역을 따라 동일성이 더 낮을 수 있는, 예를 들어 95 또는 98% 동일한 항체를 포함한다. 예를 들어, PVRIG 항체는 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가지지만 상기 가변 영역을 따라 동일성이 더 낮을 수 있는, 예를 들어 95 또는 98% 동일한, 일부 실시예에서는, 적어도 95% 또는 적어도 98%인 동일한 항체를 포함한다.
2개의 아미노산 서열 사이의 백분율 동일성은 ALIGN 프로그램(버전 2.0)에 포함되어 있는 E. Meyers 및 W. Miller (Comput. Appl. Biosci., 4:11-17 (1988))의 알고리즘을 사용하여 측정될 수 있고, 이는 PAM120 중량 잔기 표, 12의 갭 길이 페널티 및 4의 갭 페널티를 사용한다. 또한, 2개의 아미노산 서열 사이의 동일성 백분율은, GCG 소프트웨어 패키지(상업적으로 입수가능함)의 GAP 프로그램에 포함되어 있는 Needleman 및 Wunsch(J. Mol. Biol. 48:444-453 (1970))의 알고리즘을 사용하여 측정될 수 있고, 이는 Blossum 62 매트릭스 또는 PAM250 매트릭스, 및 6, 14, 12, 10, 8, 6의 갭 중량, 또는 4 및 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6의 길이 무게를 사용한다.
추가적으로 또는 대안적으로, 본 발명의 단백질 서열은, 예를 들어 관련 서열을 식별하기 위해, 공개 데이터베이스에 대한 검색을 수행하기 위한 "질문 서열"로서 더 사용될 수 있다. 그러한 검색은 Altschul, et al. (1990) J Mol. Biol. 215:403-10의 XBLAST 프로그램(버전 2.0)을 사용하여 수행될 수 있다. BLAST 단백질 검색은 XBLAST 프로그램, 점수=50, 단어 길이=3으로 수행되어 본 발명의 적어도 일부 실시예에 따른 항체 분자와 상동적인 아미노산 서열을 획득할 수 있다. 비교 목적으로 갭 정렬(gapped alignment)을 얻기 위해, Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25(17):3389-3402에서 설명된 바와 같이 Gapped BLAST가 사용될 수 있다. BLAST 및 Gapped BLAST 프로그램을 사용할 경우, 각 프로그램(예를 들어, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 매개 변수가 사용될 수 있다
일반적으로, PVRIG 항체 사이를 비교하기 위한 동일성 백분율은 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 90%이며, 적어도 약 95, 96, 97, 98 또는 99% 동일성이 바람직하다. 상기 동일성 백분율은 전체 아미노산 서열, 예를 들어 전체 중쇄 또는 경쇄를 따라, 또는 사슬의 부분을 따라 공유되는 동일성 백분율일 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 항-PVRIG 항체의 정의에는 전체 가변 영역(예를 들어, 여기서 동일성이 상기 가변 영역을 따라 95% 또는 98%, 일부 실시예에서는, 적어도 95% 또는 적어도 98% 동일함)을 따라, 또는 전체 불변 영역을 따라, 또는 단지 Fc 도메인을 따라 동일성을 공유하는 것이 포함된다.
V. 항-PVRIG 항체의 제조
상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함한 항-PVRIG 항체)은 상기 원하는 전달 방법에 적합한 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 제제화될 수 있다. 적합한 담체는, 상기 치료용 조성물과 조합될 경우 상기 치료용 조성물의 항종양 기능을 유지하고 일반적으로 환자의 면역계와 비반응성인 임의의 물질을 포함한다. 예는 멸균 인산염 완충 식염수, 정균수 등과 같은 임의의 다수의 표준 약학적 담체를 포함하나 이에 제한되지 않는다(일반적으로, Remington's Pharmaceutical Sciences 16th Edition, A. Osal., Ed., 1980 참조). 허용 가능한 담체, 부형제, 또는 안정화제는 이용되는 투여량 및 농도에서 수용자에게 비독성이며, 이는 포스페이트, 시트레이트, 아세테이트 및 다른 유기산과 같은 완충제; 아스코르브산 및 메티오닌을 포함하는 항산화제; 보존제(예를 들어, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알코올; 메틸 또는 프로필 파라벤과 같은 알킬 파라벤; 카테콜; 레조르시놀; 시클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 미만의 잔기) 폴리펩타이드; 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌, 또는 리신과 같은 아미노산; 단당류, 이당류, 및 글루코오스, 만노오스, 또는 덱스트린을 포함하는 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이트제; 자당, 만니톨, 트레할로오스 또는 소르비톨과 같은 당류; 감미료 및 기타 향미제; 미정질 셀룰로오스, 유당, 옥수수 및 기타 전분과 같은 충전제; 결합제; 첨가제; 착색제; 나트륨과 같은 염 형성 반대 이온; 금속 복합체(예를 들어, Zn-단백질 복합체); 및/또는 TWEENTM, PLURONICSTM, 또는 폴리에틸렌글리콜(PEG)과 같은 비이온성 계면활성제를 포함한다.
바람직한 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 항체(도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함함)를 포함하는 약제학적 조성물은, 약제학적으로 허용가능한 염으로서 존재하는 것과 같은, 수용성 형태일 수 있으며, 이는 산 및 염기 부가염 모두를 포함하도록 의미한다. "약제학적으로 허용되는 산 부가염"은 유리 염기의 생물학적 유효성을 유지하고 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 염을 지칭하며, 이는 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기 산, 및 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 살리실산 등과 같은 유기산과 함께 형성된다. "약제학적으로 허용되는 염기 부가염"은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등과 같은 무기 염기로부터 유도된 것을 포함한다. 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘, 및 마그네슘 염이 특히 바람직하다. 약제학적으로 허용되는 유기 무독성 염기에서 유도된 염은 1차, 2차, 및 3차 아민의 염, 자연 발생 치환 아민을 포함하는 치환 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 및 에탄올아민을 포함한다. 생체내 투여에 사용되는 제제는 바람직하게는 멸균이다. 이는 멸균 여과막 또는 다른 방법을 통한 여과에 의해 쉽게 달성된다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "활성"은 기능적 활성 또는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 활성을 지칭한다. 기능적 활성은 생물학적 활성 또는 결합 친화도를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본원에 사용된 용어 "안정성"은 구조적 맥락에서, 예를 들어, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 구조적 무결성과 관련하여, 또는 기능적 맥락에서, 예를 들어, 시간이 지남에 따라 기능 및/또는 활성을 유지하는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 능력(예를 들어, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 안정성 또는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제 안정성을 포함하며, 여기서 상기 항-PVRIG 항체는 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가지는 것을 포함)에서 사용된다. 주지하는 바와 같이, 논의 중인 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분은 본원에 설명된 방법 및 조성물에 따라 제제 내에 함유될 수 있고, 해당 단백질의 안정성은 해당 제제의 안정성을 지칭한다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물의 안정성은 예를 들어, 본 출원 및 본원과 함께 제공된 도면에서 설명된 검정뿐만 아니라 당업계에 공지된 다른 적용가능한 검정을 이용하는 것을 포함하여, 상기 조성물의 결합 활성 측정에 의해 측정된다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 안정성은 본원에 기술된 바와 같이, 당, 당 알코올, 및/또는 비이온성 계면활성제와 함께 제제화되고, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제 없이 및/또는 상이한 성분들의 조합에 의해 제제화된 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분과 비교된다. 일부 실시예에서, 상기 제제는 당 및/또는 당 알코올을 포함하지 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, "보관 안정성" 수성 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물은 주어진 보관 기간 동안 용액에서 단백질 안정성을, 예를 들어 적어도 10%까지, 상승시키기 위해 제제화되는 용액을 포함하는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분을 지칭한다. 본 개시의 맥락에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분은 안정화제로서 적어도 하나의 아미노산, 염, 또는 비이온성 계면활성제의 첨가에 의해 "보관 안정성"으로 만들어질 수 있다. 일부 실시예에서, 임의의 주어진 제제에서 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 안정성은 일정 기간 동안, 예를 들어, 응집체 형성, 벌크 결합 활성 손실, 또는 분해 산물 형성의 모니터링에 의해, 측정될 수 있다. 제제의 절대 안정성, 및 당, 당 알코올, 또는 비이온성 계면활성제의 안정화 효과는 안정화되는 특정 조성물에 따라 달라질 것이다. 일 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물의 안정성은 상기 조성물의 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 결합 활성화의 측정에 의해 측정된다. 예를 들어, ELISA 또는 다른 결합 활성 검정의 사용에 의해서일 수 있다. 일 실시예에서, 본원에 설명된 바와 같이 당, 당 알코올, 및/또는 비이온성 계면활성제로 제제화된 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물의 안정성은 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제를 사용하지 않고/않거나 성분의 상이한 조합을 사용하여 제제화되는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물과 비교된다. 일부 실시예에서, 상기 제제는 당 및/또는 당 알코올을 포함하지 않는다.
본원에 사용된 "보관 기간(shelf-life)"은 제제가 사전결정 온도에서 사전결정 수준의 안정성을 유지하는 기간을 지칭한다. 특정 실시예에서, 상기 사전측정 온도는 냉동(예를 들어, -80°C, -25°C, 0°C), 냉장(예를 들어, 0° 내지 10°C), 또는 실온(예를 들어, 18°C 내지 32°C) 보관을 지칭한다.
본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "안정성 시간"은 제제가 안정하다고 간주되는 시간의 길이를 지칭한다. 예를 들어, 제제의 안정성의 시간은 상기 제제에서 단백질 응집 및/또는 분해의 수준이 보관 기간 시작 시 상기 제제에 존재하는 활동량(예를 들어, 결합 활동량 포함)의 특정한 임계(예를 들어, 1 %, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11 %, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% 등) 이하를 유지하는 시간의 길이, 및/또는 제제가 보관 기간 시작 시 제제에 존재하는 활동량(예를 들어, 결합 활동량 포함)의 특정한 임계(예를 들어, 100%, 95%, 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65%, 60%, 55%, 50% 등) 이상의 생물학적 활성을 유지하는 시간의 길이를 지칭한다.
본 개시의 맥락에서, 당, 당 알코올, 및/또는 비이온성 계면활성제로 제제화된 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 보관 안정성 수성 조성물은 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제를 사용하지 않고 제제화된 동일한 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 조성물보다 긴 안정성 시간을 가질 것이다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 보관 안정성 수성 조성물은 예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제의 부재 하에 제제화된 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물에 대한 안정성 기간에 비하여 적어도 10% 이상인, 또는 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제의 부재에서 제제화된 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물에 대한 안정성 시간에 비하여 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 110%, 120%, 130%, 140%, 150%, 160%, 170%, 180%, 190% 이상, 또는 적어도 2배 이상, 또는 적어도 2.5배, 3.0배, 3.5배, 4.0배, 4.5배, 5.0배, 5.5배, 6.0배, 6.5배, 7.0배, 7.5배, 8.0배, 8.5배, 9.0배, 9.5배, 10배, 또는 그 이상인 안정성 기간을 가질 것이다.
본원에서 사용된 바와 같이 "BDS"는 "대량 약물 물질(Bulk Drug Substance)"을 지칭한다.
A. 안정화 액체 제제
일부 실시예에서, 본 개시는 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 안정화 수성 제제를 제공한다(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체). 하기 실시예는 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제가 결여된 조성물과 비교하여, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제의 포함이 상기 액체 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분을 안정화시킨다는 발견에 부분적으로 기초한다. 일부 실시예에서, 상기 제제는 당 및/또는 당 알코올을 포함하지 않는다.
당업자에 의해 인식되는 바와 같이, 본원에 제공된 실시예에 따라 제제화된 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분은 용액 성분 또는 pH 조절제의 포함에 의해 기여되는 반대 이온, 예를 들어, 아세트산염에 의해 기여되는 나트륨 또는 칼륨, 수산화나트륨, 또는 염화칼슘 또는 염산에 의해 기여되는 칼륨 수산화물 또는 염화물을, 명시적으로 개시된 구성 요소에 더하여, 함유할 수 있다. 본 개시의 맥락에서 주어진 제제로 구성되거나 또는 본질적으로 구성되는 보관 안정성 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 단편 조성물은, 특정 pH에서 상기 제제화 공정에 의한 필요에 따라, 하나 이상의 반대 이온을 더 포함한다.
일 실시예에서, 본원에 제공된 보관 안정한 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 부분은 일정한 기간 동안 냉장 온도(즉, 2℃내지 10℃에서 안정화될 것이다. 예를 들어, 일 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 안정한 액체 약제학적 제제는 적어도 4일 동안 냉장 온도에서 보관되는 경우 안정할 것이다. 다른 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 21, 28일, 또는 그 이상 동안 냉장 온도에서 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 10주, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1개월 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48개월, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 2°C와 8°C 사이의 온도에서 보관되는 경우 일정한 연장된 시간 동안 안정할 것이다.
일 실시예에서, 본원에 제공된 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 안정한 액체 약제학적 제제는 일정한 기간 동안 실온(즉, 18°C 내지 32°C에서 안정화될 것이다. 예를 들어, 일 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 안정한 액체 약제학적 제제는 적어도 4일 동안 실온에서 보관되는 경우 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 21, 28일, 또는 그 이상 동안 실온에서 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1개월 동안 안정할 것이다. 다른 실시예에서, 상기 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48개월, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 실온은 20°C와 30°C 사이, 21°C와 29°C 사이, 22°C와 28°C 사이, 23°C와 27°C 사이, 24°C와 26°C 사이, 또는 약 25°C를 지칭한다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 20°C와 25°C 사이의 온도에서 보관되는 경우 일정한 연장된 시간 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 약 25°C의 온도에서 보관되는 경우 일정한 연장된 시간 동안 안정할 것이다.
일 실시예에서, 본원의 보관 안정한 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분은 일정한 기간 동안 고온(즉, 32°C와 42°C 사이)에서 안정화될 것이다. 예를 들어, 일 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 안정한 액체 약제학적 제제는 적어도 4일 동안 고온에서 보관되는 경우 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 21, 28일, 또는 그 이상 동안 고온에서 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 1개월 동안 안정할 것이다. 다른 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48개월, 또는 그 이상 동안 안정할 것이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 35°C와 40°C 사이의 온도에서 보관되는 경우 일정한 연장된 시간 동안 안정할 것이다.
일 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 상기 조성물이 보관 기간의 시작에서(예를 들어, 시간 = 0에서) 존재하는 항체 결합 활성의 적어도 40%를 유지하는 한 보관 안정한 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 보관 조성물은 상기 조성물이 상기 보관 기간 시작에서(예를 들어, 시간 = 0에서) 상기 항체 결합 활성의 적어도 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 그 이상을 유지하는 경우 보관 안정한 것으로 간주된다. 일 실시예에서, 항체 결합 활성은 당업계에 공지된 임의의 검정을 사용하여 측정된다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물이 일정한 기간 동안 보관 후 적어도 10% 더 많은 항체 결합 활성을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 일정한 기간 동안 보관 후 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 또는 그 이상의 백분율로 더 많은 항-PVRIG 항체 및/또는 항체 결합 활성을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다.
일 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 항원 응집된 상태에서 존재하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분의 백분율이 50% 이하로 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다. 일부 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 조성물은 항원 응집된 상태에서 존재하는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분의 백분율이 45%이하, 40%, 35%, 30%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% 또는 그 미만을 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 일정한 기간 동안 보관 후 응집된 상태에서 존재하는 적어도 10% 더 적은 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정된 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 일정한 기간 동안 보관 후 응집된 상태에서 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 또는 그 이상의 백분율로 더 적은 항-PVRIG 항체 및/또는 항체 결합 부분을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다.
일부 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 상기 조성물이 기계적 응력을 받은 후 (예를 들어, 시간 = 0에서) 상기 시작 결합 활성의 적어도 40%를 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 보관 조성물은 상기 조성물이 기계적 응력을 받은 후 (예를 들어, 시간 = 0에서) 상기 시작 결합 활성의 적어도 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 그 이상을 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다. 일부 실시예에서, 상기 기계적 응력은 교반(예를 들어, 진탕(shaking))이다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물이 기계적 응력을 받은 후 적어도 10% 더 많은 결합 활성을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 기계적 응력을 받은 후 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 또는 그 이상의 백분율로 더 많은 푸린(furin) 활성을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 당, 당 알코올, 또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다. 특정 실시예에서, 상기 기계적 응력은 교반(예를 들어, 진탕(shaking))이다.
일부 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 응집된 상태에서 존재하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분의 백분율이 기계적 응력을 받은 후 50% 이하를 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다. 다른 실시예에서, 보관 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은 응집된 상태에서 존재하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분의 백분율이 기계적 응력을 받은 후 45%이하, 40%, 35%, 30%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21 %, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 또는 그 미만을 유지하는 한 안정한 것으로 간주된다. 일부 실시예에서, 상기 기계적 응력은 교반(예를 들어, 진탕(shaking))이다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 기계적 응력을 받은 후 응집된 상태로 존재하는 적어도 10% 더 적은 항-PVRIG 항체 및/또는 항체 결합 부분을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물은, 상기 안정화제를 함유하지 않는 또는 상기 안정화제의 적은 양을 함유하는 항-PVRIG 항체 및/또는 항원 결합 부분 조성물과 비교하여, 상기 조성물이 기계적 응력을 받은 후 응집된 상태로 존재하는 적어도 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100%, 또는 그 이상의 백분율로 더 적은 항-PVRIG 항체 및/또는 항체 결합 부분을 함유하는 경우 안정화제(예를 들어, 적어도 하나의 아미노산, 염, 및/또는 비이온성 계면활성제)의 첨가에 의해 안정화된 것으로 간주된다. 특정 실시예에서, 상기 기계적 응력은 교반(예를 들어, 진탕(shaking))이다.
일부 실시예에서, 본 발명의 상기 고안정화 제제는 적어도 6개월의 보관 기간을 가진다. 이해되는 바와 같이, 상기 보관 기간(shelf life)은 액체 또는 동결 건조 형태에서 냉동 온도(즉, -80°C, -25°C, 0°C), 냉장(0°C 내지 10°C), 또는 실온(20°C 내지 32°C)에서 일 수 있다. 추가적인 양태에서, 본 발명의 고안정화 제제는 적어도 12, 18, 24, 30, 36, 42, 48, 54, 또는 60개월의 보관 기간을 가진다.
일부 실시양태에서, 보관 기간은 임의의 상기 일정한 기간 동안 임의의 상기 온도에서 보관 후 유지되는 활성 백분율에 의해 결정된다. 일부 실시예에서, 보관 기간은 상기 제제가 상기 온도에서 상기 시간 동안 보관하기 전의 활성과 비교하여 본원에 설명된 또는 당업계에 공지된 임의의 상기 검정에 의해 측정될 때 푸린 활성의 적어도 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%를 유지하는 것을 의미한다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 항체를 포함함;
(b) 25mM 히스티딘;
(c) 60mM NaCl;
(d) 100mM L-아르기닌, 및
(e) 0.01% w/v 폴리소르베이트 80,를 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 30mg/mL, 10mg/mL 내지 25mg/mL, 또는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 40mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 15mg/mL 내지 40mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 15mg/mL 내지 30mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체는 20mg/mL 내지 25mg/mL의 농도이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체의 농도는 약 20mg/mL이다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 항체를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌, 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
B. 아미노산
일부 실시예에서, 본 발명은 적어도 하나의 아미노산을 포함하는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 상기 적어도 하나의 아미노산은 히스티딘이다. 일부 실시예에서, 상기 적어도 하나의 아미노산은 아르기닌이다. 일부 실시예에서, 본 발명은 적어도 2개의 아미노산을 포함하는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 상기 적어도 2개의 아미노산은 히스티딘 및 아르기닌이다.
일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘, 15mM 내지 70mM 히스티딘, 20mM 내지 60mM 히스티딘, 20mM 내지 50mM 히스티딘, 또는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 15mM 내지 70mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 60mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 50mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 25mM 히스티딘을 포함한다.
일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 15mM 내지 70mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 60mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 50mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 25mM 히스티딘을 포함한다.
일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌, 30mM 내지 140mM L-아르기닌, 40mM 내지 130mM L-아르기닌, 50mM 내지 120mM L-아르기닌, 60mM 내지 110mM L-아르기닌, 70mM 내지 110mM L-아르기닌, 80mM 내지 110mM L-아르기닌, 또는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌, 30mM 내지 140mM L-아르기닌, 40mM 내지 130mM L-아르기닌, 50mM 내지 120mM L-아르기닌, 60mM 내지 110mM L-아르기닌, 70mM 내지 110mM L-아르기닌, 80mM 내지 110mM L-아르기닌, 또는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다.
일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 30mM 내지 140mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 40mM 내지 130mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 50mM 내지 120mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 60mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 70mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 80mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다.
일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적 제제는 약 100mM L-아르기닌을 포함한다.
C. 당 및/또는 당 알코올
일부 실시예에서, 본 발명은 당 및/또는 당 알코올을 포함하지 않는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 본 발명은 당을 포함하지 않는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 본 발명은 당 알코올을 포함하지 않는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다.
일부 실시예에서, 본 발명은 당 및/또는 당 알코올을 포함하는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다 일부 실시예에서, 상기 당은 트레할로스 또는 자당이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 트레할로스이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 자당이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 트레할로스 또는 자당 중 단 하나이며 둘 모두가 아니다.
일부 실시예에서, 상기 당은 약 0.5% 내지 10%, 1% 내지 9.5%, 1.5% 내지 9%, 2.0% 내지 8.5%, 2.5% 내지 8%, 3.0% 내지 7.5%, 3.5% 내지 7%, 4.0% 내지 6.5%, 4.5% 내지 6%, 및/또는 4.5% 내지 5.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 0.5% 내지 10%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 1% 내지 9.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 1.5% 내지 9%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 2.0% 내지 8.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 2.5% 내지 8%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 3.0% 내지 7.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 3.5% 내지 7%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 4.0% 내지 6.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 4.5% 내지 6%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 4.5% 내지 5.5%의 양이다. 일부 실시예에서, 상기 당은 약 5%의 양이다.
D. 비이온성 계면활성제
일부 실시예에서, 본 발명은 비이온성 계면활성제를 포함하는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 항원 결합 단편의 보관 안정성 조성물은 비이온성 수용성 모노글리세라이드, 비이온성 수용성 디글리세라이드, 비이온성 수용성 트리글리세라이드, 폴리에틸렌 글리콜의 비이온성 수용성 단일지방산 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜의 비이온성 수용성 이지방산 에스테르, 비이온성 수용성 소르비탄 지방산 에스테르, 비이온성 폴리글리콜화 글리세라이드, 비이온성 수용성 트리블록 공중합체, 및 그의 조합을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 비이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (폴리옥시에틸렌 (20) 소르비탄 모노올레에이트)이다.
일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.006% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80, 0.007% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.008% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.009% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.01% 내지 0.06% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.009% 내지 0.05% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.006% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.007% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.008% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.009% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.01% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.01% 내지 0.06% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 0.009% 내지 0.05% w/v 폴리소르베이트 80을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 0.01% 폴리소르베이트 80을 포함한다.
E. 약제학적으로 허용가능한 염
일부 실시예에서, 본 발명은 염, 예를 들어, 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다.
일부 실시예에서, 본원에 제공된 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 보관 동안 상기 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편에 의해 허용되는 농도에서 약제학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 염화염이다. 일부 실시예에서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 일가 염화염이다. 더 구체적인 실시예에서, 상기 약제학적으로 허용가능한 염은 염화나트륨, 염화칼륨, 또는 그의 조합이다.
일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 30mM 내지 100mM NaCl, 30mM 내지 90mM NaCl, 40mM 내지 80mM NaCl, 30mM 내지 70mM 히스티딘, 또는 45mM 내지 70mM NaCl을 포함한다.
일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 30mM 내지 100mM NaCl를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 30mM 내지 90mM NaCl를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 40mM 내지 80mM NaCl을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 30mM 내지 70mM 히스티딘을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 45mM 내지 70mM NaCl을 포함한다. 일부 실시예에서, 약제학적 제제는 약 60mM NaCl를 포함한다.
F. 완충제
일부 실시예에서, 본 발명은 생리학적으로 허용가능한 pH에서 완충되는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공한다. 일부 실시예에서, 상기 생리학적으로 허용가능한 pH는 약 6.0 내지 약 7.0이다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 안정한 액체 약제학적 제제는 6 내지 7.0의 pH를 가진다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 안정한 액체 약제학적 제제는 6, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 또는 7.0의 pH를 가진다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.1 내지 6.9이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.2 내지 6.9이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.3 내지 6.8이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.3 내지 6.7이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.4 내지 6.8이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.5 내지 6.8이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.6 내지 6.8이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 또는 6.7이다. 일부 실시예에서, 상기 pH는 6.5 +/- 0.2이다.
G. 수성 조성물을 희석하는 방법
일부 실시예에서, 상기 방법은 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)을 포함하는 희석된 안정한 액체 약제학적 제제를 형성하는 희석 완충제를 첨가하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 1000:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다. 다른 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 500:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다. 다른 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 250:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다. 다른 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 200:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다. 다른 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 100:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다. 다른 실시예에서, 상기 희석 완충제는 1:1(희석 완충제:제제) 내지 50:1(희석 완충제:제제)의 비율로 투여된다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 1배 내지 1000배, 1배 내지 500배, 1배 내지 250배, 1배 내지 200배, 1배 내지 100배, 1배 내지 50배, 1배 내지 10배, 10배 내지 1000배, 10배 내지 500배, 10배 내지 250배, 10배 내지 200배, 10배 내지 100배, 10배 내지 50배, 50배 내지 1000배, 50배 내지 500배, 50배 내지 250배, 50배 내지 200배, 50배 내지 100배, 100배 내지 1000배, 100배 내지 500배, 100배 내지 250배, 100배 내지 200배, 200배 내지 1000배, 200배 내지 500배, 또는 200배 내지 250배로 희석된다.
H. 안정성 검정
본원에 논의된 바와 같이, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 대조군 제제와 비교하여 향상된 안정성을 나타낸다. 일 실시예에서, 향상된 안정성은 다양한 안정성 검정에서 대조군 제제와 비교하여 더 높은 백분율의 결합 활성의 유지 및/또는 결합 활성의 감소 없음을 포함한다. 그러한 검정은 제제가 고안정화 제제일 경우 측정하기 위해 사용된다. 일부 실시예에서, 상기 고안정화 제제는 본원에 논의된 또는 당업계에 공지된 임의의 안정성 검정에 의해 평가되는 경우 대조군 제제보다 적어도 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 이상의 활성을 가진다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 액체 약제학적 제제는 고온에서의 보관, 교반, 동결/해동 주기 또는 그의 일부 조합과 같은 응력 조건 하에서 테스트된다. 그러한 응력 후에, 상기 제제는 본원에 설명 또는 당업자에게 공지된 임의의 방법을 사용하여 검정되어 상기 조건 하에서 안정성을 측정하였다.
A280 및 외관 분석
일부 실시예에서, SoloVPE 검정에 의한 A280은 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 외관을 조사하기 위해 사용될 수 있다.
일부 실시예에서, 상기 SoloVPE 검정은 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제에 대한 농도를 조사하기 위해 사용될 수 있다.
A280: 방향족 측쇄를 함유하는 아미노산은 280nm의 파장에서 강한 자외선 흡수를 나타낸다. 흡수 계수가 주어진 단백질에 대해 설정되면, 용액 내 단백질 농도는 흡광도에서 계산될 수 있다. 상기 방법은 희석 없이 상기 SoloVPE 기기를 사용하여 280nm에서 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 결정하도록 설계되었다(https://www.ctechnologiesinc.com/products/solovpe).
외관: 샘플 외관 결정은 상기 샘플을 제어된 광원 내에 있게 하고 상기 물질의 외관을 관찰하여 평가된다. 상기 용액을 부드럽게 교반하고 흑백 배경에서 관찰할 경우 외관 변화 여부를 확인한다. "맑음", "탁함" 또는 "다소 탁함"과 같은 형용사를 사용하여 투명도를 평가한다. 상기 물질의 색상과 관련하여 구체적이어야 한다. 상기 물질이 무색인 경우, 이를 결과로서(즉, 투명, 무색 용액) 명시한다. 상기 샘플의 물리적 상태(즉, 액체 또는 냉동 액체)를 특정한다.
결합 검정 분석
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 활성을 조사하기 위해 결합 검정이 수행될 수 있다.
LabChip 분석
일부 실시예에서, LabChip 분석은, 예를 들어, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제에 대한 IgG 순도뿐만 아니라 HC + LC 백분율을 포함하는, 순도를 조사하기 위해 사용된다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 94% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 또는 98%이상의 IgG 순도 백분율을 나타낸다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 95% 내지 98%의 IgG 순도 백분율을 나타낸다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 96% 내지 97%의 IgG 순도 백분율을 나타낸다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 96% 내지 100%의 HC+LC 백분율을 나타낸다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 97% 내지 100%의 HC+LC 백분율을 나타낸다. 일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함하는 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 약 98% 내지 100%의 HC+LC 백분율을 나타낸다.
cIEF 분석
일부 실시예에서, 모세관 등전 집중(cIEF)은, 예를 들어, 미량 산성 종을 포함한, 추가적인 종의 존재에 대해 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 분석하기 위해 사용될 수 있다.
MFI 분석
항체는 가열, 동결/해동 주기, 및 교반과 같은 응력 조건에 대한 반응에서 육안으로 보이지 않는 입자를 형성할 수 있다. 일부 실시예에서, 미세유동 이미지화(MFI) 분석은 응력 조건에 대한 반응에서 입자 형성에 대한 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 상기 안정한 액체 약제학적 조성물을 분석하기 위해 사용될 수 있다. 일부 실시예에서. 상기 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편의 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 상기 응력 조건에 대한 상기 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 안정화하고 입자의 형성을 방지 가능한 제제를 제공한다. MFI는 응력 조건 하에서 상이한 제제에서 상이한 크기 범위(< 2μm, < 5μm, < 10μm, 및 < 25μm)에서 입자 수를 평가하기 위해 사용될 수 있다. 전형적으로, MFI 데이터는 모든 시점, 조건, 및 제제에 걸쳐 모든 크기의 입자에 대해 가장 낮은 양의 입자/mL 생성을 기반으로 적절한 제제를 선택하기 위해 평가될 수 있다.
SEC 분석
일부 실시예에서, 크기 배제 크로마토그래피(SEC)는 항-PVRIG 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한 상기 안정한 액체 약제학적 제제를 분석하기 위해 사용될 수 있다. 상기 SEC 데이터는 모든 시점 및 조건에서 HMW를 나타냈다; 그러나, 이는 약 1%에서 안정성을 유지했다. LMW는 가속 조건 및 2 내지 8°C 8주 시점에서 존재되었다. 40°C 조건 내에서, 상기 LMW는 1주 내지 2주에서 약 1% 내지 3%로 증가했다.
I. 특정 제제 실시예
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(a) 항-PVRIG 항체;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 안정한 액체 약제학적 제제를 제공하며, 상기 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
VI. 항-PVRIG 항체의 제제의 투여
본원의 항-PVRIG 항체(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)를 포함하는 상기 약제학적 조성물의 투여는, 바람직하게는 멸균 수용액의 형태로, 다양한 방법으로 수행된다. 당업계에 공지된 바와 같이, 단백질 치료제는 종종 IV 주입으로 전달된다. 또한, 본원의 항체는 이러한 방법을 사용하여 전달될 수 있다. 예를 들어, 주입 비어클(vehicle)로서 0.9% 염화나트륨을 정맥내 주입에 의하여 정맥 투여할 수 있다. 그러한 기법은 Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed., 1980에서 개시되어 있다.
투여량 및 투여 빈도는, 일부 실시예에서, 치료적으로 또는 예방적으로 유효하도록 선택된다. 당업계에 공지된 바와 같이, 단백질 분해, 전신 대 국소 전달, 및 새로운 프로테아제 합성 속도뿐만 아니라 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 식이, 투여시간, 약물 상호작용 및 병태의 중증도에 대한 조정이 필요할 수 있고, 당업자에 의한 통상적인 실험법으로 확인가능할 것이다. 환자를 치료하기 위해, 본 발명의 Fc 변이체의 치료적 유효 용량이 투여될 수 있다. 본원에서 "치료적 유효 용량"은 투여가 목적하는 효과를 생성하는 용량을 의미한다.
VII. 투여
일부 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 단위 투여량 제제로서를 포함한 투여를 위해 제제화될 수 있다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.01mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.02mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.03mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.04mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.05mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.06mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.07mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.08mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.09mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.1mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.2mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.3mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.5mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 0.8mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 1mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 2mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 3mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 4mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 5mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 6mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 7mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 8mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 9mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 10mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분의 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.
일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 각 4주마다 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 항체 및/또는 그의 항원 결합 부분 제제는 각 4주마다 약 20mg/kg IV의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.1mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 1mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 2mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 3mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 4mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 5mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 5mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 7mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 8mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 9mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 20mg/kg의 투여량으로 투여된다. 일부 실시예에서, 제제는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여된다.　
A. 제제 실시예를 사용한 선택된 투여
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(a) 항-PVRIG 항체;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제약 제제의 투여를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 제제는 항-PD-1 항체와 함께 투여된다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙 및 니볼루맙으로 구성되는 군으로부터 선택된 항체이다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 약 360mg 또는 480mg의 투여량으로 투여된다. 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 약 360mg 투여량으로 투여된다. 상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 약 480mg 투여량으로 투여된다.
상기 안정한 액체 약제학적 제제의 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다.
VIII. 상기 항-PVRIG 항체 제제 사용 방법
A. 치료적 용도
상기 항-PVRIG 항체(예를 들어, 도 3에 도시된 것과 동일한 CDR을 가진 것을 포함하는 항-PVRIG 항체)는, 일반적으로 PVRIG와 관련된 병태를 가진, 인간 대상체와 같은, 환자 치료에서의 용도를 발견한다. 본원에 사용된 용어 "치료"는 치료적 치료 및 예방적 또는 방지적 조치 둘 모두를 지칭하며, 이는 본 예에서 암의 치료에 관한 것이고; 그러나, 또한 하기 설명된 바와 같이, 항체 및 약제학적 조성물의 용도는 또한 전염병, 패혈증, 및/또는 자가면역 병태의 치료, 및/또는 유전자 요법에 따른 바람직하지 않은 면역 활성화의 억제를 위해 제공된다. 치료를 필요로 하는 것은 이미 암에 걸린 것과 암을 방지해야 하는 것을 포함한다. 따라서, 본원에서 치료될 상기 포유동물은 암을 가진 것으로서 진단되었을 수 있거나 또는 암에 걸리기 쉽거나 또는 취약할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "치료"는 상기 설명된 암성 질환, 장애 또는 병태의 식별 가능한 증상의 방지, 발병 지연, 치유, 역전, 약화, 경감, 최소화, 억제, 유해 효과의 정지 또는 안정화를 지칭한다. 또한, 이는 상기 설명된 바와 같이 암을 관리하는 단계를 포함한다. "관리"는 질환의 중증도 감소, 질환의 에피소드의 빈도 감소, 그러한 에피소드의 지속 기간 감소, 그러한 에피소드의 중증도 감소, 암세포 성장 또는 증식을 둔화/감소, 적어도 하나의 증상의 진행 둔화, 적어도 하나의 측정 가능한 물리적 매개변수의 개선 등을 의미한다. 예를 들어, 면역자극성 항-PVRIG 면역 분자는 표적 세포, 예를 들어, 암, 감염 세포 또는 병원체 세포에 대한 T 세포 또는 NK 또는 사이토카인 면역을 촉진하고 그에 의해 질환 병태에 관련된 상기 세포를 고갈시킴으로써 암 또는 감염성 질병을 치료해야 한다. 역으로, 면역억제성 항-PVRIG 면역 분자는 자가면역, 염증성 또는 알레르기 병태와 같은 일부 면역 질환의 질환 병리와 관련된 T 세포 또는 NK 활성 및/또는 전염증성 사이토카인의 분비를 감소시켜 그에 의해 그러한 병태와 관련될 수 있는 질환 병리 및 조직 파괴(예를 들어, 류마티스 관절염 상태와 관련된 관절 파괴)를 치료 또는 개선해야 한다.
본 발명의 PVRIG 항체는 치료적으로 유효한 투여량으로 제공된다. 본 발명의 적어도 일부 실시예에 따른 항-PVRIG 면역 분자의 "치료적으로 유효한 투여량"은 바람직하게는 질환 증상의 중증도 감소, 질환 무증상 기간의 빈도 및 기간 증가, 수명 증가, 질환 완화, 질환으로 인한 손상 또는 장애의 방지 또는 감소를 초래한다. 예를 들어, PVRIG 양성 종양의 치료를 위해, "치료적으로 유효한 투여량"은 바람직하게는 세포 성장 또는 종양 성장을, 치료되지 않은 대상체와 비교하여 적어도 약 20%까지, 더 바람직하게는 적어도 약 40%까지, 보다 더 바람직하게는 적어도 약 60%까지, 및 훨씬 보다 더 바람직하게는 적어도 약 80%까지 억제한다. 종양 성장을 억제하는 화합물의 능력은 인간 종양에서의 효능을 예측하는 동물 모델 시스템에서 평가될 수 있다. 대안적으로, 조성물의 특성은 숙련된 의사에게 공지된 검정에 의해 시험관내 억제와 같은 억제하는 화합물의 능력을 조사함으로써 평가될 수 있다. 치료적 화합물의 치료적 유효량은 종양 크기를 감소, 또는 달리 대상체에서 증상을 개선시킬 수 있다.
당업자는 대상체의 크기, 대상체의 증상의 중증도, 및 선택된 특정 조성물 또는 투여 경로와 같은 요인을 기반으로 치료적 유효량을 결정할 수 있을 것이다.
1. 암 치료
본 발명의 PVRIG 항체는 특히 암 치료에서 용도를 발견한다. 일반적으로, 본 발명의 항체는, 암세포를 직접 공격하는 것이 아니라, 일반적으로 PVRIG의 작용을 억제함으로써, 본 발명의 항-PVRIG 항체가 면역계를 자극한다는 점에서, 면역조절성이다. 따라서, 종양 성장 및 발달에 중요한 분자 경로를 억제, 및/또는 종양 세포를 고갈시키는 것을 목표로 하는 종양 표적 요법과 달리, 암 면역 요법은 환자 자신의 면역 체계를 자극하여 암세포를 제거하는 것을 목표로 하며, 이는 장기간 지속되는 종양 파괴를 제공한다. 다양한 접근법이 암 면역요법에서 사용될 수 있고, 이 중 종양-특이적 T 세포 반응을 유도하는 치료용 암 백신, 및 면역억제 경로를 제거하는 면역자극성 항체(즉, 억제 수용체의 길항제 = 면역 관문)가 있다.
표적 요법 또는 통상적인 항암 요법의 임상 반응은 암세포가 저항성을 나타내고 종양 재발이 일어나기 때문에 일시적인 경향이 있다. 그러나, 지난 수년 동안 암 면역요법의 임상적 사용은 상기 유형의 요법이 지속적인 임상 반응을 가질 수 있음을 나타냈으며, 이는 장기적인 생존에 극적인 영향을 나타낸다. 그러나, 반응이 장기적이기는 하지만 단지 소수의 환자만이 반응한다 (통상적인 요법 또는 표적 요법과 대조적이며, 여기서 매우 많은 수의 환자가 반응하지만, 반응이 일시적임).
종양이 임상적으로 검출될 시점에는, 종양은 이미 면역저항성 및 면역억제성 성질을 획득하고 다양한 메커니즘 및 다양한 면역 세포를 통해 면역억제성 종양 미세환경을 생성함으로써 면역 방어계를 회피하였다.
따라서, 본 발명의 항-PVRIG 항체는 암을 치료하는데 유용하다. 면역-종양학 작용 메커니즘의 특성으로 인해, PVRIG는 반드시 특정 암 유형에서 과다발현되거나 이와 상관될 필요는 없고; 즉, 목표는 항-PVRIG 항체가 T 세포 및 NK 세포 활성화를 탈억제하게 하여, 면역계가 암을 따르게 하는 것이다.
본원에서 사용되는 "암"은 악성 성장 또는 종양(예를 들어, 조절되지 않은 세포 성장)을 유발하는 비정상 및 비제어 세포 분열에 의해 특징화되는 임의의 신생물 질환(침윤성 또는 전이성)을 광범위하게 지칭한다. 본원에서 사용된 용어 "암" 또는 "암성" 은 악성 성장 또는 종양을 유발하는 비정상적 및 비제어 세포 분열에 의해 특징화되는 임의의 신생물 질환(침습성, 비침습성 또는 전이성)을 포함하는 것으로 이해되어야 하며, 이의 비제한적인 예는 본원에 설명되어 있다. 이는 전형적으로 조절되지 않은 세포 성장에 의해 특징화되는 포유동물의 임의의 생리학적 병태를 포함한다.
일부 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 제제는 고형 종양(예를 들어, 폐, 간, 유방, 뇌, 위장관의 암을 포함), 혈액암(예를 들어, 백혈병 및 전백혈병 장애, 림프종, 형질 세포 장애 포함), 암종, 림프종, 모세포종, 육종 및 백혈병 또는 림프성 악성종양의 치료에서 사용될 수 있다. 일부 실시예에서, 상기 암은 초기이다. 일부 실시예에서, 상기 암은 진행성(전이성 포함)이다. 일부 실시예에서, 본 발명의 치료 가능한 암은 PVRIG를 발현 또는 발현하지 않는 암을 포함하며 비전이성 또는 비침습성뿐만 아니라 침습성 및 전이성 암을 더 포함하며, 이는 면역, 기질, 또는 병든 세포에 의한 PVRIG 발현이 항종양 반응 및 항-침습성 면역 반응을 억제하는 암을 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 항-PVRIG 제제는 혈관화 종양의 치료를 위해 사용될 수 있다. 일부 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 제제를 사용하여 치료하기 위한 상기 암은 암종, 림프종, 육종, 및/또는 백혈병을 포함한다. 일부 실시예에서, 본 발명의 항-PVRIG 제제를 사용하여 치료하기 위한 상기 암은 흑색종, 비흑색종 피부암(편평 및 기저세포암종), 중피종, 편평세포암, 폐암(소세포폐암, 비소세포폐암, 연조직육종, 카포시육종, 폐선암종, 폐의 편평암종 포함), 복막암, 식도암, 간세포암, 간암(HCC 포함), 위암, 위암(위장관암 포함), 췌장암, 교모세포종, 자궁경부암, 난소암, 요로상피암, 방광암, 간암, 신경교종, 뇌암(뇌종양과 관련된 부종 등), 유방암(예를 들어, 삼중 음성 유방암 포함), 고환암, 고환 생식 세포 종양, 결장암, 결장직장암(CRC), 결장직장암 MSS(MSS-CRC; 난치성 MSS 결장직장성 포함; MSS =미세부수체 안정 상태), 원발성 복막암, 미세부수체 안정 원발성 복막암, 백금 내성 미세부수체 안정 원발성 복막암, CRC(미상의 MSS), 직장암, 자궁내막암(자궁내막암종 포함), 자궁암종, 침샘암종, 신장암, 신세포암(RCC), 신세포암종(RCC), 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 간암종, 카르시노이드암종, 두경부암, B-세포 림프종(비호지킨 림프종뿐만 아니라 저등급/여포성 비호지킨 림프종(NHL), 소림프구성(SL) NHL, 중간 등급/여포성 NHL, 중간 등급 미만성 NHL, 미만성 거대 B 세포 림프종, 고급 면역모세포성 NHL, 고급 림프모구 NHL, 고급 소형 비절단성 세포 NHL, 부피가 큰 질환 NHL, 외투 세포 림프종, AIDS 관련 림프종 및 발덴스트롬(Waldenstrφm) 마크로글로불린혈증 포함), 호지킨 림프종(HD), 만성 림프구성 백혈병(CLL), 급성 림프구성 백혈병(ALL), T 세포 급성 림프구성 백혈병(T-ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 털 세포 백혈병, 만성 골수모구성 백혈병, 다발성 골수종, 이식 후 림프증식성 장애(PTLD), 모반증과 관련된 비정상적인 혈관 증식, 메이그(Meigs) 증후군, 메르켈 세포(Merkel Cell) 암, MSI-고(high) 암, KRAS 돌연변이 종양, 성인 T 세포 백혈병/림프종, 선양낭성암 (선양낭성암종 포함), 악성흑색종, 췌장암, 췌장선암종, 난소암(난소암종 포함), 흉막중피종, 신경내분비폐암(흉막중피종, 신경내분비폐암종 포함), NSCL(대세포), NSCLC 대세포선암종, 비소세포폐암종(NSCLC), NSCLC 편평세포, 자궁경부 편평세포암종(자궁경부 SCC), 항문편평세포암종(항문 SCC), 신경내분비폐암종, 미상의 원발성 암종, 담낭암, 악성 흑색종, 흉막중피종 및/또는 골수이형성 증후군(MDS)을 포함한다.
일부 실시예에서, 본원의 항-PVRIG 제제를 사용한 치료를 위한 상기 암은 전립선암, 간암(HCC), 결장직장암(CRC), 결장직장암 MSS(MSS-CRC, 난치성 MSS 결장직장성 포함), CRC(미상의 MSS), 난소암(난소암종 포함), 자궁내막암(자궁내막암종 포함), 유방암, 췌장암, 위암, 자궁경부암, 두경부암, 갑상선암, 고환암, 요로상피암, 폐암, 흑색종, 비흑색종 피부암(편평 및 기저세포암종), 신경교종, 신세포암(RCC), 신세포암종(RCC), 림프종(비호지킨 림프종(NHL) 및 호지킨 림프종(HD)), 급성 골수성 백혈병(AML), T 세포 급성 림프모구 백혈병(T-ALL), 미만성 거대 B 세포림프종, 고환생식세포종양, 중피종, 식도암, 삼중음성유방암, 메르켈세포(Merkel Cell)암, MSI-고(MSI-high)암, KRAS 돌연변이성 종양, 성인 T세포 백혈병/림프종, 흉막중피종, 항문 SCC, 신경내분비 폐암(신경내분비 폐암종 포함), NSCLC, NSCL(대세포), NSCLC 대세포, NSCLC 편평세포, 자궁경부 SSC, 악성 흑색종, 췌장암, 췌장 선암종, 선양낭성암(선양낭성암종 포함), 원발성 복막암, 미세부수체 안정 원발성 복막암, 백금 내성 미세부수체 안정 원발성 복막암, 및/또는 골수이형성 증후군(MDS)으로 구성되는 군으로부터 선택되는 암이다.
본원에서 "암 요법"은 암을 방지 또는 치료하거나 또는 암 증상 중 하나 이상을 개선하는 임의의 방법을 지칭한다. 전형적으로, 그러한 요법은, 단독, 또는 화학요법 또는 방사선요법 또는 다른 생물의약품과 병용한 면역자극성 항-PVRIG 항체(항원-결합 단편을 포함)의 투여를 포함하고, 이의 활성을 향상시키기 위해, 즉, 개체에서 PVRIG의 발현이 항종양 반응을 억제하고 화학요법 또는 방사선 요법의 효능 또는 생물학적 효능을 증강시키는 것을 포함한다.
일부 실시예에서, 항-PVRIG 항체는, 예를 들어 니볼루맙 및/또는 펨브롤리주맙을 포함하나 이에 제한되지 않는, PD-1을 표적화하는 길항성 항체(예를 들어, 항-PD-1 항체)와 병용으로 사용된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙 및 펨브롤리주맙으로 구성되는 군으로부터 선택된 항체이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이다. 일부 구현예에서, 상기 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙이다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 360mg로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 360mg IV로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 360mg IV 3주(예를 들어, 360mg IV Q3 주)로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 480mg로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 480mg IV로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체는 니볼루맙이며 480mg IV 3주(예를 들어, 480mg IV Q3 주)로 투여된다. 일부 실시예에서, 상기 항-PD-1 항체와 병용으로 항-PVRIG 항체를 투여받은 대상체는, 예를 들어, ECOG 0-1, 이전 항-PD-1, 이전 항-PD-L1, 이전 항-CTLA-4, 이전 OX-40, 및/또는 이전 CD137 요법을 포함하나 이에 제한되지 않는 모든 이용가능한 표준 요법을 소진하였다.
2. 제제 실시예를 사용한 선택된 단독요법 치료
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(a) 항-PVRIG 항체;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
3. 제제 실시예를 사용한 선택된 병용요법 치료
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(a) 항-PVRIG 항체;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 360mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 중쇄 가변 도메인, 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 경쇄 가변 도메인을 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) 중쇄로서,
a) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
ii) 경쇄로서,
a) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 상기 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
(c) 30mM 내지 100mM NaCl;
(d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
(e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가진다.
일부 실시예에서, 본 발명은 480mg 니볼루맙 및 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제의 투여에 의한 암 치료를 필요로 하는 대상체에서 암 치료를 제공하며, 상기 항-PVRIG 항체는 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되고, 상기 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 제제는
(a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
(b) 약 25mM 히스티딘;
(c) 약 60mM NaCl;
(d) 약 100mM L-아르기닌; 및
(e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가진다.
실험예
실험예 1: PVRIG 항체 제제 테스트
각 완충제(A 및 B)에서 제제화되는 상기 PVRIG 항체는 상기 해당 부형제를 첨가하여 도 6에 나열된 20개 조건을 생성했다. 각 제제는 제제 ID로 지칭되었다.
상기 제제화 물질은 도 7a 내지 도 7b의 응력 및 보관 조건을 거쳤다.
제제 연구 절차 단계
샘플링 요건
각 조건에 대해, 총 2개의 바이알이 하나의 추가 예비 바이알과 함께 테스트를 위해 필요했다. 하나의 바이알이 CPS에서 LabChip(환원 및 비환원), cIEF, 농도(A280nm), 상기 효능 검정 및 SEC-HPLC 분석을 위해 필요했다. 다른 바이알은 시각적 외관 및 MFI 분석에 필요했다. MFI 및 외관 테스트를 위한 샘플을 제외하고, 적절한 샘플을 표시된 시점에서 제거하고 분석 개시까지 < -60°C에서 동결했다. MFI 및 외관 테스트가 풀(pull) 후 즉시 수행되었다.
상기 20개의 제제화 샘플의 시간 0(T0) 샘플은 2 내지 8°C에 보관된 바이알에서 취하여 분석(또는 외관 및 MFI 테스트의 경우 즉시 분석)까지 < -60°C에서 동결되었다.
<-60°C에서 동결/해동 연구 보관
각 주기에 대해, 제제 당 3개의 바이알(총 60개 바이알)을 < -60°C에서 위치시켰다. 최소 16시간 후, 모든 제제 당 3개의 바이알을 < -60°C 보관 조건(총 60개 바이알)에서 꺼내고 해동까지 3 내지 5시간 동안 실온으로 가온하였다.
3주기를 위해 냉동고에서 위치시킨 후, 테스트를 개시할 준비가 될 때까지 3개의 바이알을 실온에서 해동하지 않았다. 그 후, 샘플을 분석 전에 실온으로 가져왔다.
샘플은 본 실험예에 설명된 대로 검정되었다.
교반
각 상기 20개의 제제에서 3개의 바이알(총 60개의 바이알)을 위치시키고 실온에서 ~200rpm으로 회전하는 진탕기(sharker)에 고정했다. 바이알이 24시간 이상 48시간 이하 동안 교반되었다. 즉시 수행된 MFI 및 외관 테스트를 제외하고 모든 바이알은 분석까지 < -60°C에서 냉동 보관되었다. 샘플을 분석 전에 실온으로 평형화했다.
샘플은 본 실험예에 설명된 대로 검정되었다.
8주 동안 2 내지 8°C 보관(0, 2, 4 및 8주에서 테스트)
각 상기 20개의 제제에서 12개의 바이알(T0 바이알을 포함한 총 240개의 바이알)을 취하여 2 내지 8°C에서 보관했다. T0에서 2개의 바이알을 MFI 및 외관에 대해 즉시 분석했다. 다른 모든 샘플은 온도 및 시점으로 표지하고 분석까지 < -60°C에서 냉동 보관했다. 샘플을 분석 전에 실온으로 가져왔다.
각 후속 시점에서, 2 내지 8°C 보관 조건에서 제제 당 3개의 바이알을 취하여, 온도 및 시점으로 표지하고 즉시 수행된 MFI 및 외관 테스트를 제외하고 분석까지 < -60°C에서 냉동 보관했다. 샘플을 분석 전에 실온으로 가져왔다.
샘플은 본 실험예에 설명된 대로 검정되었다.
4주 동안 상온 보관(25 °C)(2 및 4주에서 테스트)
각 상기 20개의 제제에서 6개의 바이알(총 120개의 바이알)을 취하여 상온(25°C)에서 보관했다.
각 시점에서, 제제 당 3개의 바이알을 상온 보관 장소에서 취하여 온도 및 시점으로 표지하고 즉시 수행된 MFI 및 외관 테스트를 제외하고 분석까지 < -60°C에서 동결시켰다. 샘플을 분석 전에 실온으로 가져왔다.
샘플은 본 실험예에 설명된 대로 검정되었다.
2주 동안 40°C 보관(1 및 2주에서 테스트)
각 상기 20개의 제제에서 6개의 바이알(총 120개의 바이알)을 취하여 40°C에서 보관하였다.
각 시점에서 제제 당 3개의 바이알을 40°C 보관 장소에서 취하여, 온도 및 시점으로 표지하고 즉시 수행된 MFI 외관 테스트를 제외하고 분석까지 < -60°C에서 냉동 보관했다. 샘플을 분석 전에 실온으로 가져왔다.
샘플은 본 실험예에 설명된 대로 검정되었다.
테스트 게획 및 일정
각 제제 조건에 대해, 샘플 및 테스트를 수행하였다.
결과
각 제제 및 시점의 모든 데이터는 본 연구 전반에 걸쳐 제공되었으며 도 8 내지 도 78에서 제시되었다. 그 결과는 본 실험예에서 논의된다. 각 제제는 연구된 조건에 대해 평가 및 비교되었다.
도면은 수집 및 분석되는 중요 검정 결과의 그래픽 표현을 제공한다. 적절한 제제를 결정하기 위해 분석된 중요 검정은 SEC, cIEF 및 MFI이었다. SEC 고분자량 및 저분자량 종은 연구 전반에 걸쳐 모니터링되었다(도 11, 도 18, 도 25, 도 32, 도 39, 도 46, 도 53, 도 60, 도 67, 및 도 74). cIEF 결과가 연구 전반에 걸쳐 얻어졌다(도 12, 도 19, 도 26, 도 33, 도 40, 도 47, 도 54, 도 61, 도 68, 및 도 75). 최종적으로 상기 다양한 크기에 걸친 MFI 분자/mL가 모니터링되었다(도 13, 도 20, 도 27, 도 34, 도 41, 도 48, 도 55, 도 62, 도 69, 및 도 76).
논의
A280 및 외관 분석
SoloVPE에 의한 A280 및 외관 테스트는 시점 및 제제에 걸쳐 현저한 변화를 나타내지 않았으며 최종 제제를 결정하는 데 사용되지 않았다.
동결/해동 분석 동안, 상기 SoloVPE는 상기 기기 사양을 넘어서는 모든 상이한 제제에 걸쳐 다양한 농도를 수득했다. 상기 예비 바이알을 꺼내어 분석을 반복했다. 그러나, 상기 분석은 여전히 다양한 결과를 나타냈다. 따라서, 광산란에 대해 320nm 보정을 사용하여 동일한 샘플을 반복했다. A280 결과는 훨씬 적은 변동성을 나타냈다(도 34). 동결/해동 데이터는 동결/해동을 반복한 후 상기 생성물에 대해 320nm 보정이 필요할 수 있음을 나타냈다. 다른 조건은 상기 변동성을 수득하지 않았다. 상기 생성물은 장기간의 안정성 연구를 거치게 되므로, 농도 측정을 위해 상기 SoloVPE이 사용될 경우, 상기 제품은 320nm 보정을 사용해야 한다.
결합 검정 분석
상기 결합 검정의 평가가 수행되었지만, 상기 결합 검정은 조건 또는 제제 전반에 걸쳐 활성에서 현저한 변화를 나타내지 않았다. 관찰된 변화는 상기 방법 변동성 내에서 있었다. 따라서, 상기 방법은 상기 분자가 결합 활성 측면에서 안정함을 나타낸다. 상기 방법은 제제 결정을 내리는 데 있어서 중요한 검정이 아니었다.
LabChip 분석
상기 LabChip 데이터의 평가는 IgG 순도 및 HC + LC 백분율이 시점 및 조건에 걸쳐 상당히 안정적인 것으로 나타났다. IgG 순도 백분율은 96 내지 97% 범위이고 HC+LC 백분율은 98 내지 100%이다. 시점에 걸쳐 상기 결과에 현저한 변화가 없었기 때문에, 상기 방법은 제제를 결정하는 데 사용되지 않았다.
cIEF 분석
상기 cIEF 분석으로부터 40℃ 1주 결과의 생성 시, 추가 미량 산성 종이 제제 A, B9, 및 B10에 존재하는 것으로 발견되었다. 이는 상기 연구의 상기 시점에서 권장 사항에서 상기 제제의 제거로 이어졌다. 그러나, 상기 시점 이후에, 모든 가속 조건 및 2 내지 8 °C 4주 이상의 시점은 다양한 양으로 상기 미량 종의 존재를 나타냈다. 따라서, 적절한 제제를 결정할 경우, 상기 미량 종이 상기 가속 조건 전반에 걸쳐 안정성에 대해 모니터링되었다.
MFI 분석
단백질은 가열, 동결/해동 주기, 및 교반과 같은 응력 조건에 대한 반응에서 보이지 않는 입자를 형성할 수 있다. 최적의 제제는 상기 응력 조건에 대해 상기 단백질을 안정화하고 입자 형성을 방지할 수 있다. MFI가 사용되어 응력 조건 하에서 상이한 제제에서 상이한 크기 범위(< 2μm, < 5μm, < 10μm, 및 < 25μm)에서 입자 수를 평가했다. 상기 MFI 데이터는 모든 시점, 조건, 및 제제에 걸쳐 모든 크기의 입자에 대해 가장 낮은 양의 입자/mL 생성을 기반으로 적절한 제제를 선택하기 위해 평가되었다.
SEC 분석
상기 SEC 데이터는 모든 시점 및 조건에 걸쳐 HMW를 나타냈다. 그러나, 약 1%에서 안정성을 유지했다. LMW는 가속 조건 및 2 내지 8°C 8주 시점에서 존재되었다. 40°C 조건 내에서, 상기 LMW는 1주 내지 2주에서 약 1% 내지 3%로 증가했다. 상기 종은 상기 프로그램 전반에 걸쳐 모니터링되며 추후에 추가 특성 분석을 통해 식별되어야 한다. 적절한 제제를 결정할 경우, 상기 LMW 및 HMW가 상기 시점 및 조건 전반에 걸쳐 안정성에 대해 평가되었다.
결론
상기 데이터를 사용하여, B4(25mM 히스티딘, 60mM NaCl, 100mM L-아르기닌, 0.01% PS 80, pH 6.5)로서 지정된 완충제가 최종 제제가 될 것으로 결정되었다. 상기 제제는 낮은 HMW 및 LMW로 일관된 SEC 결과를 나타냈다. 또한, 상기 MFI 데이터는 모든 입자 크기에 대해 더 낮은 양의 입자/mL를 나타냈다. LabChip 데이터는 상기 IgG 순도 및 HC + LC 백분율이 T0와 비교할 경우 제제 B4에서 안정함을 나타냈다. 따라서 상기 독성학 배치가 상기 완충제에서 제제화되었다.
실험예 2: PVRIG 항체 제제
주입용 용액의 설명 및 구성
상기 제제는 회색 브로모부틸 고무 마개 및 알루미늄 플립 캡 크림프(flip cap crimp)가 장착된 10R 유형 I 투명 붕규산 유리 바이알에서 20mg/mL 농도에서 멸균 방부제가 없는 액체 투여 형태로 제공된다. 상기 바이알은 10mL의 표적 부피로 충전된다. 상기 제제는 -20C에서 냉동 보관 및 배송된다. 사용하기 전에, 상기 바이알은 상온에서 해동되고, 이는 부드럽게 휘젓는 방식으로 혼합된다. 환자에게 투여하기 위해, 상기 제제는 0.9% 염화나트륨으로 희석된다.
용기 폐쇄 시스템
상기 제제를 위한 단일 용기 폐쇄 시스템이 존재하며 10R 유형 I 투명 붕규산 유리 바이알, 20mm 브로모부틸 고무 마개 및 20mm 알루미늄 플립 캡 크림프(flip cap crimp)로 구성된다.
상기 제제는 상기 약물 물질을 해동 및 풀링하여 생성된 후, 이어서 0.22mm 멸균 여과 및 베터(Vetter)에서 멸균 10R 유리 바이알에 충전하였다.
바이알 단위(10mL)당 공칭량에 대한 상기 제제 성분 및 상기 의약 생성물의 정량적 조성은 하기 표 1에 제시된다(또한, 도 6 내지 도 77의 B4 참조).
조성
성분 기능 제시
10R 유리 바이알 		공칭
량
[mg/바이알]
V = 10.0mL
CHA.7.518.1.H4(S241P) mAb 활성
성분		 액체 투여
형태로 20mg/ml
 200
25mM
히스티딘		 완충제
성분 -
pH 안정화		 액체
제제로 25mL		 39
60mM NaCl 완충제
성분-
이온 강도
조절		 액체
제제로 60mM		 35
100mM L-
아르기닌		 제제
부형제-
안정화제		 액체
제제로
100mM		 174
폴리소르베이트　80 제제
부형제
계면활성제		 액체
제제로
0.01% w/v		 1
10mL의 회수 가능한 부피를 보장하기 위해 순충전 중량을 기반하여 충분한 부피가 바이알에 충전된다. 실험예 3: 진행성 고형 종양이 있는 환자에서 항-PVRIG 항체를 평가하는 1상 연구.
배경:
관문 억제제를 사용한 치료에 난치성 또는 치료 후 재발하는 환자(pt)의 치료(tx)에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 높다. 상기 사전치료(pre-treatment) 환자 집단에서 T 세포를 활성화하고 항종양 활성을 입증할 수 있는 신규 메커니즘을 가진 새로운 관문 요법이 시급히 필요하다. CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)는 그의 리간드인 PVRL2와의 상호작용을 차단하는 PVRIG(폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유)에 높은 친화성으로 결합하는 신규 혁신 신약 인간화 IgG4 단일클론 항체이다. PVRIG 및 PVRL2는 모두 TIGIT 및 PD1과 마찬가지로 DNAM 축의 일부이다. PVRIG의 억제는 T 및 NK 세포의 활성화를 향상시키고 PVRIG는 마우스 종양 모델에서 종양 성장 억제로 이어진다. CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)가 관문 억제제 치료전인 pt에서 항종양 활성을 나타낼 것이라고 가정한다.
방법:
본 실험예는 진행성 고형 종양 환자를 가진 환자를 대상으로 진행 중인 공개 최초 인간 임상 1상 연구를 설명한다. 본 연구의 개시 부분(A군)은 개시 4개 및 그 후 3+3개 설계에 대한 단일 pt 코호트로 CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13) 단독요법 IV Q3 주의 용량의 증가를 평가할 것이다. 주요 포함 기준: 연령 ≥18세, 조직학적으로 국소 진행성/전이성 고형 악성 종양이 확인되고 이용 가능한 표준 요법을 소진함, 허용된 ECOG 0-1, 이전의 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-CTLA-4, OX- 40, CD137.
주요 배제 기준: 지난 2년 동안 전신 요법이 필요한 활동성 자가면역 질환, 증상이 있는 간질 또는 염증성 폐 질환, untx 또는 증상이 있는 중추 신경계 전이. 1 차 목적은 이상 반응(AE) 및 용량 제한 독성(21일 DLT 윈도우)의 발생률에 의해 측정된 바와 같은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)의 안전성 및 내약성, CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)의 약동학, 및 최대 허용 용량 및/또는 확장을 위한 권장 용량을 식별하는 것이다. 2차 목적은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(중쇄: 서열번호:8; 경쇄: 서열번호:13)의 면역원성 및 예비 항종양 활성을 특성화하는 것이다.
통계적 고려 사항: CTCAE v4.03에 따라 등급이 매겨진 AE, RECIST v1.1에 따른 응답. 모든 연구 목표에 대한 분석은 서술적이며 가설을 생성한다. 상기 단일 pt 코호트에서는 DLT가 관찰되지 않았다. 상기 제출 시점에 코호트 5에 등록된 환자의 평가가 진행 중이다.
실험예 4: 진행성 고형 종양을 가진 환자에서 항-PVRIG 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법을 평가하는 1상 연구
배경:
CHA.7.518.1.H4(S241P)는 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인(PVRIG)의 신규 혁신 신약 관문 억제제이다. 이는 PVRIG와 그의 리간드 PVRL2의 결합을 억제한다. 니볼루맙 항-PD-1은 진행성 악성 종양 환자에서 승인되었다(Nvolumab package insert. http://packageinserts.bms.com/pi/pi_opdivo.pdf. 2019년 7월 22일 접속). PVRL2, TIGIT 및 DNAM으로 구성되는 DNAM 신호 축이 T/NK 세포의 활성을 조절하는 역할을 한다는 것이 입증되었다. 또한, PD-1 억제제는 DNAM 활성화를 조절하여 상기 축에서 중요한 역할을 한다. 전임상 실험에서 PVRIG를 단독으로 차단하고 PD-1 억제를 사용한 병용요법에서 차단하면 종양 미세 환경에서 T 세포의 활성화로 이어져 그에 의해 종양 면역 반응 및 종양 성장 억제가 발생한다는 것이 입증되었다. 승인된 ICI로 치료한 후 재발한 환자에서 단독요법으로서 신규 면역 관문 억제제(ICI)에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 높고 임상 반응을 심화하기 위해 승인된 ICI와 병용해야 한다. 이론에 의해 구속되지는 않지만, CHA.7.518.1.H4(S241P)는 R/R 고형 종양을 가진 환자에서 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 안전하고 내약성이 있으며 예비 항종양 활성을 입증할 것이라고 가정된다. 이전에 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법에서 용량 수준 6까지 DLT가 보고되지 않은 것으로 보고되었다(진행성 고형 종양을 가진 환자에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)를 평가하는 1상 연구). J Clin Oncol 37, 2019 (suppl; abstr TPS2657)).
방법:
단독요법 IV Q3 주 및 니볼루맙 360mg IV Q3 주의 병용요법으로 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 단일 pt 코호트 및 3+3 연구 설계를 사용한 진행 중인 P1 용량 증량 연구. 주요 포함 기준: 연령 ≥18세, 조직학적으로 진행성 고형 종양이 확인되고 이용 가능한 모든 표준 요법을 소진함, ECOG 0-1, 허용된 이전 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-CTLA-4, OX-40, CD137. 주요 배제 기준: 지난 2년 동안 전신 요법을 필요로 하는 활동성 자가면역 질환, 증상이 있는 간질 또는 염증성 폐 질환, untx 또는 증상이 있는 CNS 전이. 1차 목적은 이상 반응(AE) 및 용량 제한 독성(21일 DLT 윈도우)의 발생률에 의해 측정된 바와 같은 단독요법 및 리볼루맙과의 병용요법의 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 안전성 및 내약성, CHA.7.518.1.H4(S241P)의 약동학, 및 최대 허용 용량 및/또는 확장을 위한 권장 용량 식별. 2차 목적: 니볼루맙과의 병용요법에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 면역원성 및 예비 항종양 활성을 특성화. 통계적 고려 사항: CTCAE v4.03에 따른 AE, RECIST v1.1에 따른 응답. 연구 목표에 대한 분석은 서술적이며 가설을 생성한다.
결과:
본 제출 날짜에서 DLT은 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 용량 수준 7 및 니볼루맙과의 병용요법 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 용량 수준 1까지 관찰되지 않았다.
결론:
모든 pt에 대한 안전성 및 내약성 평가가 진행 중이다. 업데이트된 결과는 임상 시험 전반에 걸쳐 분석된다.
실험예 5: 진행성 고형 종양 환자에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 안전성, 내약성 및 예비 항종양 활성에 대한 1상 연구
배경:
CHA.7.518.1.H4(S241P)는 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인(PVRIG)의 신규 혁신 신약 면역 관문 억제제(ICI)이다[1]. 이는 PVRIG와 그의 리간드 PVRL2의 결합을 억제한다. PVRIG는 T/NK 세포의 활성을 조절하는 상기 DNAM/TIGIT 신호 축의 구성원이다. 전임상 실험에서 PVRIG 억제 단독 및 항-PD-1 및/또는 TIGIT 차단제와의 병용요법에서 항종양 면역 반응 및 종양 성장 억제를 생성하는 종양 미세 환경에서 T 세포의 활성화로 이어진다는 것을 입증했다[1]. ICI가 암 치료에 혁명을 일으켰지만, ICI로 치료한 후 난치성 또는 재발하는 환자를 위한 치료제 개발이 시급하다. 본 연구는 CHA.7.518.1.H4(S241P)가 안전하고 내약성이 있음을 나타내고 예비 항종양 활성을 입증하도록 설계되었다.
방법:
하이브리드 가속 및 3+3 연구 설계를 활용한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 용량 증량인 1a상은 안전성, 내약성을 결정하고, 약동학(PK), 약력학을 평가하고, 권장되는 2상 용량을 결정하고, CHA.7.518.1.H4(S241P)의 예비 종양 활성을 평가하기 위해 수행되었다. 수행 상태 ECOG 0-1 및 표준 치료 치료에 실패한 진행성 고형 종양을 가지는 환자가 포함될 자격이 있었다. 이전 ICI는 허용되었다. CHA.7.518.1.H4(S241P) 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3 및 10mg/kg IV는 진행, 내약불가능한 독성 또는 조사자 또는 환자의 재량까지 매 3주마다 투여되었다. 이상 반응이 CTCAE v4.03에 따라 보고되었으며 항종양 활성을 RECIST v1.1을 사용하여 평가했다. 용량 제한 독성(DLT)은 21일 윈도우 내에서 평가되었다.
결과:
전이성 결장직장암(CRC) 환자 6명, 미세부수체 안정 상태(MSS) 환자 5명 및 미상의 1명을 포함하여 총 13명의 환자가 등록되어 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 용량 증량 동안 치료를 받았다. 환자들은 7개의 이전 항암 요법(범위 2 내지 15)의 중앙값으로 과도하게 사전 치료를 받았다. 최대 10mg/kg CHA.7.518.1.H4(S241P) 용량 수준까지 DLT가 보고되지 않았다. 가장 흔한 독성은 피로(8%), 복통(6%)이었다. 가능한 면역 관련 이상 반응 : 2명의 환자에서 TSH 상승 및 발진이 관찰되었다. 전체 환자 7/13(54%)은 CRC를 가진 환자의 5/6(83%)를 포함하여 12주 이상(13.6 내지 43주)의 안정 질환(SD)에서 최상의 반응을 유지했다. 5명의 환자가 연구 치료를 계속한다. 말초 PVRIG 수용체 점유율(≥0%)은 ≥1mg/kg 용량의 CHA.7.518.1.H4(S241P)에서 입증되었으며 PK 프로파일은 IV Q3 주 투여를 뒷받침한다.
결론:
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법은 이전 여러 항암 요법을 받은 환자 집단에서 예비 항종양 활성과 함께 허용 가능한 안전성 및 내약성 프로파일을 입증했다.
참조문헌:
1. Spencer L, Ofer L et al, Discovery of COM701, a therapeutic antibody targeting the novel immune checkpoint PVRIG, for the treatment of cancer. J Clin Oncol. 2017; (suppl; abstr 3074).
실험예 6: 진행성 고형 종양을 가진 환자에 대한 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 진행 중인 1상 시험의 데이터
CHA.7.518.1.H4(S241P)은 용량 제한 독성이 관찰되지 않고 내약성이 우수했다.
연구의 용량 증량 치료군에서 과도하게 사전 치료된 환자군에서 관찰된 항종양 활성의 초기 신호.
진행성 고형암을 가진 환자를 대상으로 한, 혁신 신약 항-PVRIG 항체인 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 진행 중인 1상 용량 증량 연구의 예비 결과. CHA.7.518.1.H4(S241P)은 용량 제한 독성 없이 내약성이 우수했다. 또한 CHA.7.518.1.H4(S241P)는 연구에 등록된 과도하게 사전 치료된 환자 집단에서 항종양 활성의 초기 신호를 입증했다.
CHA.7.518.1.H4(S241P)의 새로운 안전성 프로파일과 초기 항종양 활성은 고무적이었다. 상기 시험의 본 부분의 주요 목적은 모든 참가자 집단에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 안전성과 내약성 및 미세부수체 안정 결장직장암(MSS-CRC)을 가진 환자를 포함하여 치료가 어려운 환자에서 항종양 활성의 초기 신호를 테스트하는 것이었다. 난소암, 자궁내막암, 유방암 및 폐암 환자를 대상으로 바이오마커 기반 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 확장 코호트를 개시하기를 기다리고 있다. CHA.7.518.1.H4(S241P)는 상기 증상에서 상기 관문 억제제 환경을 확장할 수 있으며, 이를 상기 PVRIG 생물학적 경로에 대한 이해를 기반으로 선택하였다.
더 광범위한 환자 집단에 대한 암 면역치료 약제 도달의 확장은 현재 이용가능한 요법에 대해 비반응성 또는 난치성인 진행성 암을 가지는 환자들의 수를 고려할 필요가 있다. CHA.7.518.1.H4(S241P)의 항종양 활성의 초기 신호는, 특히 사전치료를 많이 받은 모든 환자 집단을 고려할 경우 고무적이며 대다수의 환자는 이전 요법에 불응성이다. 상기 치료하기 어려운 환자 집단에서 용량-반응 관계의 경향이 관찰되었으며, 또한, 전형적으로 현재 면역 관문 억제제에 반응하지 않는, 난치 증상인, MSS 결장직장을 가진 환자 6명 중 5명에서 항종양 활성의 고무적인 신호가 나타났다.
상기 보고된 데이터는 진행 중인 1상, 공개, 용량 증량 연구의 단독요법군에서 왔으며 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 및 10mg/kg IV 매 3주 마다의 용량 수준에서 처음 6개 코호트(n=13)를 포함한다.
주요 발견:
CHA.7.518.1.H4(S241P)는 용량 제한 독성이 관찰되지 않고 10 mg/kg을 통해 잘 내약되었다.
13명의 환자 중 9명(69%)에서 보고된 안정 질환(SD)/질병 통제율의 가장 좋은 시점 반응은 7개의 이전 항암 요법(2 내지 15 범위)의 중앙값이다.
CRC를 가진 모든 환자(N=6)는 미세부수체 안정 상태를 가졌고, 5/6 pt(83%)가 안정 질환의 가장 좋은 시점 반응을 가졌다.
약동학적 프로파일은 IV Q3 주 투여를 뒷받침한다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) ≥1mg/kg에서 90% 이상의 말초 PVRIG 수용체 점유율이 입증되었다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법을 사용한 연구 치료에 3명의 환자가 남아 있다.
20Mg/kg Q4 주에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 용량에 대한 등록이 진행 중이다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) 1상 연구 정보
CHA.7.518.1.H4(S241P)의 1상 공개 임상 시험은 진행성 고형 종양 환자를 가진 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 증량 투여 및 브리스톨-마이어스 스퀴브(Bristol-Myers Squibb)의 옵디보(Opdivo®)와의 병용요법 투여의 안전성 및 내약성을 평가하도록 설계되었다. 또한 2차 평가변수는 비소세포폐암, 난소암, 유방암 및 자궁내막암을 포함한 특정 종양 유형을 가진 환자를 대상으로 한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법뿐만 아니라 CHA.7.518.1.H4(S241P) 및 옵디보(Opdivo)와의 병용요법의 예비 항종양 활성, 약동학 및 약력학을 포함한다. 약 140명의 환자를 등록할 것으로 예상되는 1상 연구는 현재 미국에서 모집 중이다. 추가 정보는 www.clinicaltrials.gov(NTC03667716)에서 이용가능하다.
실험예 7: 진행성 고형 종양을 가진 환자에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 안전성, 내약성 및 예비 항종양 활성에 대한 1상 연구
배경기술
CHA.7.518.1.H4(S241P)는 컴퓨젠의 컴퓨터 발견 프로그램[1]에 의해 발견된 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인(PVRIG)의 신규 혁신 신약 면역 관문 억제제(ICI)이다. 이는 PVRIG와 그의 리간드 PVRL2의 결합을 억제한다.
PVRIG는 TMK 세포의 활성을 조절하는 DNAM/TIGIT 신호 축의 구성원이다.
전임상 실험에서 PVRIG 억제가 항종양 면역 반응과 종양 성장 억제를 생성하는 종양 미세 환경에서 T 세포의 활성화로 이어진다는 것을 입증했다[2].
ICI를 사용한 치료 후 난치성 또는 재발성 환자에 대한 치료제 개발이 시급하다.
CHA.7.518.1.H4(S241P)이 안전하고 내약성이 있으며 진행성 고형 종양을 가진 환자에서 단독요법으로 예비 항종양 활성을 입증할 것이라고 가정했다.
주요 자격 기준
포함
● 연령 ≥18세
● 조직학적 또는 세포학적으로, 확인된 국소 진행성 또는 전이성 고형 악성 종양으로 이용가능한 모든 표준 요법을 소진했거나 이용가능한 표준 요법의 후보가 아님.
● ECOG 수행 상태 0 내지 1
● 허용된 이전 면역 관문 억제제
● 적절한 혈액, 간 및 신장 기능
배제
● 증상이 있는 간질성 폐질환 또는 염증성 폐렴
● 치료되지 않거나 증상이 있는 중추신경계 전이
● 면역 요법 치료 중단을 초래한 면역 관련 사건의 이력
결과
평가된 CHA.7.518.1.H4(S241P) 용량 범위(0.01 내지 10mg/kg)에서 보고된 용량 제한 독성은 없다.
이상 반응으로 인한 치료 중단은 보고되지 않았다.
TEAE의 대부분은 G1 내지 2였다.
● 빈번한 TEAE는 피로(46%), 메스꺼움(31%) 및 불안(23%)―모두 G1 내지 2; 질병 진행 G5(23%)이었다.
● 가능한 면역 관련 이상 반응은 발진(G1) 및 TSH 상승(G1)의 실험실 소견이었다.
5/13명의 pt에서 심각한 이상 반응이 보고되었다.
● 3명의 pt에서, SAE는 질병 진행으로 인한 것이었다.
모든 pt는 연구 참가 시 IV 질환이 있었고 8/13(62%)이 본 연구에 등록하기 전에 최후 이전 요법(즉, 난치성 질환)에 대한 PD의 최상의 반응을 보였다.
● 5/8 pt(63%)에서 SD의 최상의 시점 반응, SD가 확인된 1/5 pt 및 2 pts가 연구 치료에 대해 진행 중이다.
9/13 pt(69%)에서 보고된 SD/질병 통제율의 최상의 시점 반응
결장직장암은 6/13 pt로 등록된 가장 통상적인 종양 유형이었고, 6 pt 모두 미세부수체 안정 상태(MSS-CRC)를 가졌다.
● CRC를 가진 5/6 pt(83%)의 질병 통제율(SD)
● CRC를 가진 4/6 pt(67%)에서 SD(12주) 확인
● 이력 데이터 11% DCR 및 MSS-CRC를 가진 pt에서 펨브롤리주맙을 사용한 12주 SD의 최상의 시점 반응[3]
CRC-kras 돌연변이를 가진 등록된 3명의 모든 환자는 SD의 가장 좋은 시점 반응을 가졌다; 확인된 SD를 가진 2/3
반복 투여에 비례하는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 노출량
말초 CHA.7.518.1.H4(S241P) 수용체 점유 mg/kg IV Q3 주
결론
CHA.7.518.1.H4(S241P)가 단독요법으로서 내약성이 우수
질병 통제율 ― 9/13 pt(69%)
난치성 MSS-CRC 및 KRAS 돌연변이를 가진 CR를 가진 환자에서 항종양 활성 신호
● 4/6 pt(67%)에서 SD 확인 - MSS-CRC
● CRC-kras 돌연변이가 있는 2/3 pt에서 SD 확인
항종양 반응 신호:
● 이전 치료 난치성이 질환이 있는 pt
● 이전에 ICI로 치료한 pt
용량-반응 관계의 경향
CHA.7.518.1.H4(S241P) 노출 용량 비례 허용 IV Q3 주 투여
mg/kg CHA.7.518.1.H4(S241P) IV Q3 주 사용 시 말초 수용체 점유율 90%
2명의 환자가 연구 치료를 계속한다.
연구 등록은 A군(CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법) 및 B군(니볼루맙과 병용요법에서 CHA.7.518.1.H4(S241P))에서 진행 중이다.
연구 NCT03667716은 브리스톨-마이어스 스퀴브(Bristol-Myers Squibb)와 공동으로 진행된다.
참조문헌
1. Whelan S, Ophir E, et al. PVRIG and PVRL2 Are Induced in Cancer and Inhibit CD8+ T-cell Function. Cancer Immunol Res. 2019 Feb;7(2):257-268.
2. Murter B, Pan X, et al. Mouse PVRIG Has CD8+ T Cell-Specific Contributory Functions and Dampens Antitumor Immunity. Cancer Immunol Res. 2019 Feb;7(2):244-256.
3. Le DT, Uram JN, Wang H, et al. N Engl J Med. PD-1 Blockade in Tumors with Mismatch-Repair Deficiency.2015 Jun 25;372(26):2509-20.
실험예 8: 진행성 고형 종양을 가진 환자에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에 대한 1상 연구.
배경기술
CHA.7.518.1.H4(S241P)은 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유(PVRIG)에 높은 친화력으로 결합하여 그의 리간드인 PVRL2와의 상호작용을 차단하는 신규 혁신 신약 인간화 IgG4 단일클론 항체이다[1].
니볼루맙은 여러 악성 종양 환자에서 승인된 항 PD-1 항체이다[2].
PD-1 억제제는 DNAM 활성화를 조절하여 상기 축에서 중요한 역할을 한다[3].
전임상 실험에서 PVRIG 억제 단독 및 항-PD-1과의 병용요법에서 항종양 면역 반응 및 종양 성장 억제를 생성하는 종양 미세 환경에서 T 세포의 활성화로 이어진다는 것을 입증했다[1].
ICI가 암 치료에 혁명을 일으켰지만 ICI를 사용한 치료 후 난치성 또는 재발하는 환자를 위한 치료제 개발이 시급하다.
CHA.7.518.1.H4(S241P)이 안전하고 내약가능할 것이라고 가정하고 R/R 고형 종양 pt에서 항종양 활성을 입증한다.
방법
NCT03667716은 R/R 고형 종양 환자를 대상으로 진행 중인 공개 최초 인간 대상 1상 연구이다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 IV Q3 주 및 니볼루맙 360mg IV Q3 주의 병용요법에서 용량 증량의 안전성 및 내약성을 평가하는 이 연구의 초기 부분에 대해 보고한다.
1차 결과 척도
진행성 고형암을 가진 환자에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 안전성 프로파일을 평가하기 위함
CTCAE v4.03에 따라 등급이 매겨진 이상 반응 및 용량 제한 독성(21일 DLT 윈도우)의 발생률
최대 허용 투여량 및/또는 확장 권장 용량을 확인하기 위함
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 PK 프로파일을 특성화하기 위함
2차 결과 척도
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독 및 니볼루맙과의 병용요법에서 면역원성을 특성화하기 위함
RECIST v1.1에 따라 니볼루맙과의 병용요법에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)(1b상에만 해당) 반응의 예비 항종양 활성을 평가하기 위함
탐색적 결과 척도
단독요법으로서 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 예비 항종양 활성을 평가하기 위함
DNAM 축 구성원과 임상 결과의 연관성 평가
단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 혈액에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)-매개 PD 효과의 증거 조사
주요 포함 기준
연령 ≥18세
조직학적 또는 세포학적으로, 확인된 국소 진행성 또는 전이성 고형 악성 종양으로 이용가능한 모든 표준 요법을 소진했거나 이용가능한 표준 요법의 후보가 아님.
ECOG 수행 상태 0 내지 1
허용된 이전 항-PD-1, 항-PD-L1, 항-CTLA-4, OX-40, CD137
적절한 혈액, 간 및 신장 기능
주요 배제 기준
CHA.7.518.1.H4(S241P) 첫 투여 전 지난 2년 동안 전신 요법이 필요한 활동성 자가면역 질환
증상이 있는 간질성 폐질환 또는 염증성 폐렴
치료되지 않거나 증상이 있는 중추신경계 전이
면역요법 치료 중단으로 이어지는 면역 관련 사건의 이력
배경 정보
7차 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 용량 수준 및 이전 용량 수준(적색 상자)에서 용량 제한 독성이 관찰되지 않았다.
3차 CHA.7.518.1.H4(S241P) + 니볼루맙 용량 수준 및 이전 용량 수준(녹색 상자)에서 용량 제한 독성이 관찰되지 않았다.
본 제시 날짜를 기준으로 8차 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단일 용량 및 4차 CHA.7.518.1.H4(S241P) + 니볼루맙 용량 수준은 IV Q4 주 일정에 등록할 수 있다.
연구 NCT03667716은 브리스톨-마이어스 스퀴브(Bristol-Myers Squibb)와 공동으로 진행된다.
참조문헌
Spencer L, Ofer L et al, Discovery of COM701, a therapeutic antibody targeting the novel immune checkpoint PVRIG, for the treatment of cancer. J Clin Oncol. 2017; (suppl; abstr 3074)
Nivolumab package insert. http://packageinserts.bms.com/pi/pi_opdivo.pdf. Accessed 07/22/2019.
Wang B, Zhang W et al., Combination cancer immunotherapy targeting PD-1 and GITR can rescue CD8+ T cell dysfunction and maintain memory phenotype. Sci. Immunol. 2018; Nov 2:3(29).
실험예 9: CHA.7.518.1.H4(S241P)은 진행성 악성종양을 가진 환자에서 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 항종양 활성을 입증한다.
배경기술
서론:
CHA.7.518.1.H4(S241P)은 폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유(PVRIG)에 높은 친화력으로 결합하여 그의 리간드인 PVRL2와의 상호작용을 차단하고 DNAM/TIGIT 축을 통해 T/NK 세포의 활성을 조절하는 신규 혁신 신약 면역 관문 억제제(ICI)이다. 전임상 실험에서 PVRIG 단독 및 항-PD1 및/또는 TIGIT와의 병용요법에서 억제는 종양 성장 억제 및 항종양 반응을 생성하는 미세 환경에서 T 세포의 활성화로 이어진다.
방법:
다양한 암 유형을 가진 총 28명의 환자(A/B군 16/12)가 등록되었다(이용가능한 모든 표준 요법에 실패한 다양한 종양 유형을 가진 환자 포함). A군 환자 16명(CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 용량 증량) 및 B군 환자 12명(니볼루맙을 사용한 CHA.7.518.1.H4(S241P) 투여량 증량). 혼성 가속(A군의 처음 4개 용량 코호트) 및 3+3 연구 설계(A군의 코호트 5 내지 8 및 B군의 모든 코호트). 수행 상태 ECOG 0-1 및 표준 치료에 실패한 진행성 또는 전이성 고형 종양이 있는 환자가 적격이었다. 이전 ICI는 허용되었다. A군에서 pt는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10mg/kg(모든 IV Q3 주(주)) 및 20mg/kg(IV Q4 주)을 받았다. B군에서 pt는 0.3, 1 또는 3mg/kg의 CHA.7.518.1.H4(S241P) 및 니볼루맙 360mg IV Q3 주(3명/용량 코호트)를 받았고 3명의 pt는 10mg/kg 및 니볼루맙 480mg IV Q4 주를 받았다. 치료 응급 이상 반응(TEAE)은 CTCAE v4.03에 따라 보고되었고 반응은 RECIST v1.1에 따라 보고되었다. 용량-제한 독성(DLT)은 (각각 3주 또는 4주 투여 일정에 대해) 21일 또는 28일 윈도우 내로 평가되었다. 데이터 마감일은 2020년 1월 23일이다.
결과:
이전 항암 요법의 중앙값 수: A군 7(범위 2 내지 15), B군 5(범위 2 내지 9). 어떤 용량 코호트에서도 DLT가 보고되지 않았다. 치료는 독성으로 인해 치료를 중단한 대상이 없었고, A군에서 가장 빈번한 TEAE는 피로(46%), 메스꺼움(31%) 및 불안(23%)이었다(모두 G1 내지 2). B군 ≥4pt에서 - 빈혈, 하지 부종, 발진 및 피로가 대부분 1 내지 2등급(88%)이다. A군+B군: 부분 반응(PR) + 안정 질환(SD)은 57%(16/28)였다. 참고 사항: A군(CHA.7.518.1.H4(S241P) 20mg/kg IV q4 주: > 15주의 치료 진행 중에 원발성 복막암을 가진 환자에서 확인된 PR. B군: CHA.7.518.1.H4(S241P) 0.3mg/kg + 니볼루맙에 대한 MSS-CRC를 사용한 환자에서 확인되지 않은 PR. A군의 제8 및 마지막 용량 코호트에 등록된 미세부수체 안정 원발성 복막암을 가진 환자에서 확인된 부분 반응; 상기 환자는 연구 치료를 계속하고 있다(15주 이상).
360mg IV Q 3주, >34주 치료에서 진행 중.
전체 11/28 환자는 제1 이미지 평가에 도달하지 못한 3명의 환자를 포함하여 연구 치료에 남아 있다. 두 치료군 모두에 대해, 28명의 환자 중 16명(57%)에서 부분 반응 및 안정 질환/질환 통제율의 시점 반응이 보고되었다.
결론:
CHA.7.518.1.H4(S241P)은 진행성 또는 전이성 고형 종양을 가진 과도하게 사전 치료된 다양한 환자에서 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법으로 내약성이 우수하다. CHA.7.518.1.H4(S241P)는 종양 유형(원발성 복막성, 미세부수체 안정 원발성 복막암(MSS 원발성 복막암 또는 MSS-PPC), 및 미세부수체 안정 대장암(MSS-CRC))을 치료하기 위해 단독요법 및 경질의 니볼루맙과의 병용요법에서 객관적 반응과 함께 예비 항종양 활성을 촉진하는 것을 입증한다.
실험예 10: CHA.7.518.1.H4(S241P)은 진행성 악성 종양을 가진 환자에서 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 항종양 활성을 나타낸다.
서론:
관문 억제제를 사용한 치료에 난치성 또는 치료 후 재발하는 환자의 치료에 대한 충족되지 않은 의학적 요구가 높다.
폴리오바이러스 수용체 관련 면역글로불린 도메인 함유(PVRIG)의 억제는 T 및 NK 세포의 활성화를 향상시키고 마우스 종양 모델에서 종양 성장 억제로 이어진다(Spencer L, Ofer L et al, Discovery of COM701, a therapeutic antibody targeting the novel. immune checkpoint PVRIG, for the treatment of cancer. J Clin Oncol. 2017; (suppl; abstr 3074)).
CHA.7.518.1.H4(S241P)은 고친화성 PVRIG와 결합하여 그의 리간드인 PVRL2와의 상호작용을 차단하는 신규 혁신 신약 인간화 IgG4 단일클론 항체이다.
이전 데이터는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 예비 항종양 활성을 뒷받침했다(Dumbrava E, Fleming G, Hamilton E et al. Journal for ImmunoTherapy of Cancer 2019, 7(Suppl 1):P421. SITC Nov 2019.)
현재 데이터는 니볼루맙과의 병용요법(B군)에서 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 예비 안전성 및 항종양 활성과 관련된 데이터를 제공하고 우리는 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 용량 코호트(A군)에서 데이터 업데이트를 제공한다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 및 니볼루맙과의 병용요법에서 내약성이 우수하고 관리 가능한 안전성 프로파일:
a. 니볼루맙과의 병용요법에서 독성 증가가 없었다.
b. 임의의 연구 약물의 독성으로 인해 연구 치료를 중단한 대상은 없었다.
단일제제 MTD CHA.7.518.1.H4(S241P) 20mg/kg IV Q4주; 병용 용량 증량은 계속된다.
2명의 환자에서 확인된 부분 반응.
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 20mg/kg IV Q4주 - 원발성 복막암(연구 치료 25주 진행 중).
CHA.7.518.1.H4(S241P), (CHA.7.518.1.H4(S241P) 0.3mg/kg IV Q3 주) + 니볼루맙(480mg IV Q3 주) - MSS-CRC(연구 치료 44주 진행 중).
CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법의 질병 통제율은 다양한 종양 유형에서 11/16[69%]이었다.
CHA.7.518.1.H4(S241P) + 니볼루맙의 질병 통제율은 다양한 종양 유형에서 9/12[75%]였다.
6/28 pt 및 다양한 종양 유형에서 지속 가능한 안정 질환(SD > 6개월).
A군(CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법): 아데노이드 낭성 CA, CRC-MSS.
B군(CHA.7.518.1.H4(S241P) + 니볼루맙): 항문 SCC, CRC-MSS, 자궁내막, NSCLC(편평).
예비 CHA.7.518.1.H4(S241P) PK 프로파일은 4주 투여를 뒷받침한다.
RDFE에서 CHA.7.518.1.H4(S241P) 단독요법 용량 확장이 계획되어 있다(NSCLC, OVCA, 유방, 자궁내막, MSS-CRC).
모든 표제 및 섹션 지정은 명확성 및 참조 목적으로만 사용되며 어떠한 방식으로든 제한하는 것으로 고려되어서는 안 된다. 예를 들어, 당업자는 본원에 설명된 본 발명의 사상 및 범주에 따라 적절하게 상이한 표제 및 섹션의 다양한 양태를 조합하는 유용성을 인식할 것이다.
본원에 인용된 모든 참조문헌은, 각 개별 공보 또는 특허 또는 특허 출원이 모든 목적을 위해 이의 전문이 참조문헌으로 원용되는 것으로 구체적 및 개별적으로 표시된 것과 동일한 정도로, 이의 전문이 모든 목적으로 본원에 참조문헌으로 원용된다.
당업자에게 자명한 바와 같이, 본 출원의 많은 변형 및 변경이 본 발명의 사상 및 범주를 벗어나지 않고 이루어질 수 있다. 본원에 설명된 특정 실시예 및 실험예는 단지 예로서 제공되며, 본 출원은 청구범위가 부여된 균등물의 전체 범위와 함께, 첨부된 청구범위의 용어에 의해서만 제한되어야 한다.
<110> COMPUGEN LTD. <120> ANTI-PVRIG ANTIBODIES FORMULATIONS AND USES THEREOF <130> 114386-5012-WO <140> PCT/US2020/043921 <141> 2020-07-28 <150> US 62/880,021 <151> 2019-07-29 <150> US 62/893,051 <151> 2019-08-28 <150> US 62/930,206 <151> 2019-11-04 <150> US 62/968,660 <151> 2020-01-31 <150> US 62/985,702 <151> 2020-03-05 <150> US 63/009,367 <151> 2020-04-13 <160> 50 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 326 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Arg Thr Glu Ala Gln Val Pro Ala Leu Gln Pro Pro Glu Pro Gly 1 5 10 15 Leu Glu Gly Ala Met Gly His Arg Thr Leu Val Leu Pro Trp Val Leu 20 25 30 Leu Thr Leu Cys Val Thr Ala Gly Thr Pro Glu Val Trp Val Gln Val 35 40 45 Arg Met Glu Ala Thr Glu Leu Ser Ser Phe Thr Ile Arg Cys Gly Phe 50 55 60 Leu Gly Ser Gly Ser Ile Ser Leu Val Thr Val Ser Trp Gly Gly Pro 65 70 75 80 Asn Gly Ala Gly Gly Thr Thr Leu Ala Val Leu His Pro Glu Arg Gly 85 90 95 Ile Arg Gln Trp Ala Pro Ala Arg Gln Ala Arg Trp Glu Thr Gln Ser 100 105 110 Ser Ile Ser Leu Ile Leu Glu Gly Ser Gly Ala Ser Ser Pro Cys Ala 115 120 125 Asn Thr Thr Phe Cys Cys Lys Phe Ala Ser Phe Pro Glu Gly Ser Trp 130 135 140 Glu Ala Cys Gly Ser Leu Pro Pro Ser Ser Asp Pro Gly Leu Ser Ala 145 150 155 160 Pro Pro Thr Pro Ala Pro Ile Leu Arg Ala Asp Leu Ala Gly Ile Leu 165 170 175 Gly Val Ser Gly Val Leu Leu Phe Gly Cys Val Tyr Leu Leu His Leu 180 185 190 Leu Arg Arg His Lys His Arg Pro Ala Pro Arg Leu Gln Pro Ser Arg 195 200 205 Thr Ser Pro Gln Ala Pro Arg Ala Arg Ala Trp Ala Pro Ser Gln Ala 210 215 220 Ser Gln Ala Ala Leu His Val Pro Tyr Ala Thr Ile Asn Thr Ser Cys 225 230 235 240 Arg Pro Ala Thr Leu Asp Thr Ala His Pro His Gly Gly Pro Ser Trp 245 250 255 Trp Ala Ser Leu Pro Thr His Ala Ala His Arg Pro Gln Gly Pro Ala 260 265 270 Ala Trp Ala Ser Thr Pro Ile Pro Ala Arg Gly Ser Phe Val Ser Val 275 280 285 Glu Asn Gly Leu Tyr Ala Gln Ala Gly Glu Arg Pro Pro His Thr Gly 290 295 300 Pro Gly Leu Thr Leu Phe Pro Asp Pro Arg Gly Pro Arg Ala Met Glu 305 310 315 320 Gly Pro Leu Gly Val Arg 325 <210> 2 <211> 479 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Ala Arg Ala Ala Ala Leu Leu Pro Ser Arg Ser Pro Pro Thr Pro 1 5 10 15 Leu Leu Trp Pro Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Glu Thr Gly Ala Gln 20 25 30 Asp Val Arg Val Gln Val Leu Pro Glu Val Arg Gly Gln Leu Gly Gly 35 40 45 Thr Val Glu Leu Pro Cys His Leu Leu Pro Pro Val Pro Gly Leu Tyr 50 55 60 Ile Ser Leu Val Thr Trp Gln Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn His Gln 65 70 75 80 Asn Val Ala Ala Phe His Pro Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro Ser Pro 85 90 95 Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu Ser Phe Val Ser Ala Lys Gln Ser Thr 100 105 110 Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu Leu Gln Asp Ala Thr Leu Ala Leu His 115 120 125 Gly Leu Thr Val Glu Asp Glu Gly Asn Tyr Thr Cys Glu Phe Ala Thr 130 135 140 Phe Pro Lys Gly Ser Val Arg Gly Met Thr Trp Leu Arg Val Ile Ala 145 150 155 160 Lys Pro Lys Asn Gln Ala Glu Ala Gln Lys Val Thr Phe Ser Gln Asp 165 170 175 Pro Thr Thr Val Ala Leu Cys Ile Ser Lys Glu Gly Arg Pro Pro Ala 180 185 190 Arg Ile Ser Trp Leu Ser Ser Leu Asp Trp Glu Ala Lys Glu Thr Gln 195 200 205 Val Ser Gly Thr Leu Ala Gly Thr Val Thr Val Thr Ser Arg Phe Thr 210 215 220 Leu Val Pro Ser Gly Arg Ala Asp Gly Val Thr Val Thr Cys Lys Val 225 230 235 240 Glu His Glu Ser Phe Glu Glu Pro Ala Leu Ile Pro Val Thr Leu Ser 245 250 255 Val Arg Tyr Pro Pro Glu Val Ser Ile Ser Gly Tyr Asp Asp Asn Trp 260 265 270 Tyr Leu Gly Arg Thr Asp Ala Thr Leu Ser Cys Asp Val Arg Ser Asn 275 280 285 Pro Glu Pro Thr Gly Tyr Asp Trp Ser Thr Thr Ser Gly Thr Phe Pro 290 295 300 Thr Ser Ala Val Ala Gln Gly Ser Gln Leu Val Ile His Ala Val Asp 305 310 315 320 Ser Leu Phe Asn Thr Thr Phe Val Cys Thr Val Thr Asn Ala Val Gly 325 330 335 Met Gly Arg Ala Glu Gln Val Ile Phe Val Arg Glu Thr Pro Arg Ala 340 345 350 Ser Pro Arg Asp Val Gly Pro Leu Val Trp Gly Ala Val Gly Gly Thr 355 360 365 Leu Leu Val Leu Leu Leu Leu Ala Gly Gly Ser Leu Ala Phe Ile Leu 370 375 380 Leu Arg Val Arg Arg Arg Arg Lys Ser Pro Gly Gly Ala Gly Gly Gly 385 390 395 400 Ala Ser Gly Asp Gly Gly Phe Tyr Asp Pro Lys Ala Gln Val Leu Gly 405 410 415 Asn Gly Asp Pro Val Phe Trp Thr Pro Val Val Pro Gly Pro Met Glu 420 425 430 Pro Asp Gly Lys Asp Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Lys Ala Glu 435 440 445 Lys Gly Leu Met Leu Pro Pro Pro Pro Ala Leu Glu Asp Asp Met Glu 450 455 460 Ser Gln Leu Asp Gly Ser Leu Ile Ser Arg Arg Ala Val Tyr Val 465 470 475 <210> 3 <211> 518 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Met Ala Arg Ala Ala Ala Leu Leu Pro Ser Arg Ser Pro Pro Thr Pro 1 5 10 15 Leu Leu Trp Pro Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Glu Thr Gly Ala Gln 20 25 30 Asp Val Arg Val Gln Val Leu Pro Glu Val Arg Gly Gln Leu Gly Gly 35 40 45 Thr Val Glu Leu Pro Cys His Leu Leu Pro Pro Val Pro Gly Leu Tyr 50 55 60 Ile Ser Leu Val Thr Trp Gln Arg Pro Asp Ala Pro Ala Asn His Gln 65 70 75 80 Asn Val Ala Ala Phe His Pro Lys Met Gly Pro Ser Phe Pro Ser Pro 85 90 95 Lys Pro Gly Ser Glu Arg Leu Ser Phe Val Ser Ala Lys Gln Ser Thr 100 105 110 Gly Gln Asp Thr Glu Ala Glu Leu Gln Asp Ala Thr Leu Ala Leu His 115 120 125 Gly Leu Thr Val Glu Asp Glu Gly Asn Tyr Thr Cys Glu Phe Ala Thr 130 135 140 Phe Pro Lys Gly Ser Val Arg Gly Met Thr Trp Leu Arg Val Ile Ala 145 150 155 160 Lys Pro Lys Asn Gln Ala Glu Ala Gln Lys Val Thr Phe Ser Gln Asp 165 170 175 Pro Thr Thr Val Ala Leu Cys Ile Ser Lys Glu Gly Arg Pro Pro Ala 180 185 190 Arg Ile Ser Trp Leu Ser Ser Leu Asp Trp Glu Ala Lys Glu Thr Gln 195 200 205 Val Ser Gly Thr Leu Ala Gly Thr Val Thr Val Thr Ser Arg Phe Thr 210 215 220 Leu Val Pro Ser Gly Arg Ala Asp Gly Val Thr Val Thr Cys Lys Val 225 230 235 240 Glu His Glu Ser Phe Glu Glu Pro Ala Leu Ile Pro Val Thr Leu Ser 245 250 255 Val Arg Tyr Pro Pro Glu Val Ser Ile Ser Gly Tyr Asp Asp Asn Trp 260 265 270 Tyr Leu Gly Arg Thr Asp Ala Thr Leu Ser Cys Asp Val Arg Ser Asn 275 280 285 Pro Glu Pro Thr Gly Tyr Asp Trp Ser Thr Thr Ser Gly Thr Phe Pro 290 295 300 Thr Ser Ala Val Ala Gln Gly Ser Gln Leu Val Ile His Ala Val Asp 305 310 315 320 Ser Leu Phe Asn Thr Thr Phe Val Cys Thr Val Thr Asn Ala Val Gly 325 330 335 Met Gly Arg Ala Glu Gln Val Ile Phe Val Arg Glu Thr Pro Asn Thr 340 345 350 Ala Gly Ala Gly Ala Thr Gly Gly Ile Ile Gly Gly Ile Ile Ala Ala 355 360 365 Ile Ile Ala Thr Ala Val Ala Ala Thr Gly Ile Leu Ile Cys Arg Gln 370 375 380 Gln Arg Lys Glu Gln Thr Leu Gln Gly Ala Glu Glu Asp Glu Asp Leu 385 390 395 400 Glu Gly Pro Pro Ser Tyr Lys Pro Pro Thr Pro Lys Ala Lys Leu Glu 405 410 415 Ala Gln Glu Met Pro Ser Gln Leu Phe Thr Leu Gly Ala Ser Glu His 420 425 430 Ser Pro Leu Lys Thr Pro Tyr Phe Asp Ala Gly Ala Ser Cys Thr Glu 435 440 445 Gln Glu Met Pro Arg Tyr His Glu Leu Pro Thr Leu Glu Glu Arg Ser 450 455 460 Gly Pro Leu His Pro Gly Ala Thr Ser Leu Gly Ser Pro Ile Pro Val 465 470 475 480 Pro Pro Gly Pro Pro Ala Val Glu Asp Val Ser Leu Asp Leu Glu Asp 485 490 495 Glu Glu Gly Glu Glu Glu Glu Glu Tyr Leu Asp Lys Ile Asn Pro Ile 500 505 510 Tyr Asp Ala Leu Ser Tyr 515 <210> 4 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Tyr Pro Tyr Ile Gly Gly Ser Gly Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Asp Lys Thr Ala Arg Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Asn 1 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Ile Tyr Pro Tyr Ile Gly Gly Ser 1 5 <210> 7 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 7 Ala Arg Glu Asp Lys Thr Ala Arg Asn Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 8 <211> 447 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Tyr Pro Tyr Ile Gly Gly Ser Gly Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Asp Lys Thr Ala Arg Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 9 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 9 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Glu Ala Thr Asn Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Gly Thr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 10 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Glu Asn Ile Tyr Ser Asn 1 5 <210> 11 <211> 3 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Glu Ala Thr 1 <210> 12 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Gln His Phe Trp Gly Thr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 13 <211> 214 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Glu Ala Thr Asn Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Phe Trp Gly Thr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 14 <211> 330 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 225 230 235 240 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330 <210> 15 <211> 326 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 115 120 125 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 130 135 140 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 145 150 155 160 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 165 170 175 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 180 185 190 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 195 200 205 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 210 215 220 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 225 230 235 240 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 245 250 255 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 260 265 270 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 275 280 285 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 290 295 300 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 305 310 315 320 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 <210> 16 <211> 377 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro 100 105 110 Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg 115 120 125 Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys 130 135 140 Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro 145 150 155 160 Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 165 170 175 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 180 185 190 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Lys Trp Tyr 195 200 205 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 210 215 220 Gln Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 225 230 235 240 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 245 250 255 Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln 260 265 270 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met 275 280 285 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 290 295 300 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gln Pro Glu Asn Asn 305 310 315 320 Tyr Asn Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 325 330 335 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Ile 340 345 350 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln 355 360 365 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 370 375 <210> 17 <211> 327 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 <210> 18 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Ser Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Val Asn Asp Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Asn Met His Trp Leu Arg Gln Thr Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Ile Ile Ser Leu Thr Ser Glu Asp Pro Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Gly Ile His Tyr Tyr Tyr Ile Asp Val Trp Gly Ala Gly 100 105 110 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly 115 120 <210> 19 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Asp Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Asn Met His 1 5 10 <210> 20 <211> 13 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Tyr Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gln 1 5 10 <210> 21 <211> 10 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Gln Gly Ile His Tyr Tyr Tyr Ile Asp Val 1 5 10 <210> 22 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Asp Ile Glu Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Arg Asp Tyr 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Val Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Glu Phe Thr Leu Ser Ile Asn Ser Val Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Asn Gly His Ser Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val 100 105 110 <210> 23 <211> 11 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Arg Ala Ser Gln Ser Ile Arg Asp Tyr Leu His 1 5 10 <210> 24 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Tyr Val Ser Gln Ser Ile Ser 1 5 <210> 25 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 Gln Asn Gly His Ser Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 26 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Asp 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Thr Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 27 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Ser Asp Trp Met His 1 5 <210> 28 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Tyr Ile Asn Pro Ser Thr Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 29 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Gly Ser Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 30 <211> 111 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser 20 25 30 Ser Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp 85 90 95 Glu Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 31 <211> 15 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Thr Ser Ser Tyr Ser Tyr Met His 1 5 10 15 <210> 32 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Tyr Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 33 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Gln His Ser Trp Glu Ile Pro Tyr Thr 1 5 <210> 34 <211> 118 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Asp 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Thr Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 35 <211> 5 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Ser Asp Trp Met His 1 5 <210> 36 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Tyr Ile Asn Pro Ser Thr Gly Tyr Thr Glu Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 37 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Gly Ser Ser Gly Ser Trp Phe Ala Tyr 1 5 <210> 38 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Trp Gln Gly 85 90 95 Thr His Phe Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 39 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn 1 5 10 15 <210> 40 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 40 Leu Val Ser Lys Leu Asp Ser 1 5 <210> 41 <211> 9 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 41 Trp Gln Gly Thr His Phe Pro Arg Thr 1 5 <210> 42 <211> 114 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 42 Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Val Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr 1 5 10 15 Ser Val Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 Trp Leu Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Asp Ile Phe Pro Gly Gly Asp Tyr Pro Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ser Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg Gly Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 43 <211> 6 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 43 Thr Asn Tyr Trp Leu Gly 1 5 <210> 44 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Asp Ile Phe Pro Gly Gly Asp Tyr Pro Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 45 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Thr Arg Gly Tyr Phe Asp Val 1 5 <210> 46 <211> 114 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 20 25 30 Glu Asn Gln Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Met Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp His Ser Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile 100 105 110 Lys Arg <210> 47 <211> 17 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Glu Asn Gln Lys Asn Tyr Leu 1 5 10 15 Ala <210> 48 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 48 Gly Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 49 <211> 7 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro 1 5 <210> 50 <211> 327 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140 Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe 165 170 175 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 180 185 190 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 210 215 220 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285 Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 305 310 315 320 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325

Claims (33)

  1. 항-PVRIG 항체의 안정한 액체 약제학적 제제에 있어서, 상기 제제는
    (a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
    i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
    ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
    (b) 10mM 내지 100mM 히스티딘;
    (c) 30mM 내지 100mM NaCl;
    (d) 20mM 내지 150mM L-아르기닌; 및
    (e) 0.005% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
    상기 조성물은 5.5 내지 7.0의 pH를 가지는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 서열(서열번호:17 또는 서열번호:50)을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4의 CH1-힌지-CH2-CH3 영역을 포함하며, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 중쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)에서 유래되고 상기 경쇄 가변 도메인은 CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)에서 유래되는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 인간 카파 2 경쇄의 CL 영역을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 10mM 내지 80mM 히스티딘, 15mM 내지 70mM 히스티딘, 20mM 내지 60mM 히스티딘, 20mM 내지 50mM 히스티딘, 또는 20mM 내지 30mM 히스티딘을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 약 25nM 히스티딘을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 30mM 내지 100mM NaCl, 30mM 내지 90mM NaCl, 40mM 내지 80mM NaCl, 30mM 내지 70mM NaCl, 또는 45mM 내지 70mM NaCl을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 약 60mM NaCl을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 20mM 내지 140mM L-아르기닌, 30mM 내지 140mM L-아르기닌, 40mM 내지 130mM L-아르기닌, 50mM 내지 120mM L-아르기닌, 60mM 내지 110mM L-아르기닌, 70mM 내지 110mM L-아르기닌, 80mM 내지 110mM L-아르기닌, 또는 90mM 내지 110mM L-아르기닌을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 약 100mM L-아르기닌을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 0.006% 내지 0.1% w/v 폴리소르베이트 80, 0.007% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.008% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.009% 내지 0.09% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.08% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 0.01% 내지 0.07% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.01% 내지 0.06% w/v 폴리소르베이트 80, 또는 0.009% 내지 0.05% w/v 폴리소르베이트 80을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 제제는 약 0.01% 폴리소르베이트 80을 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 pH는 6 내지 7.0인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 pH는 6.3 내지 6.8인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 pH는 6.5 +/- 0.2인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 10mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 40mg/mL, 15mg/mL 내지 30mg/mL, 10mg/mL 내지 25mg/mL, 또는 15mg/mL 내지 25mg/mL의 농도인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주, 9주, 또는 10주 동안 2°C 내지 8°C에서 안정한, 안정한 액체 약제학적 제제.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 또는 6주 동안 20°C 내지 25°C에서 안정한, 안정한 액체 약제학적 제제.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제제는 적어도 1주, 2주, 3주, 4주, 또는 5주 동안 35°C 내지 40°C에서 안정한, 안정한 액체 약제학적 제제.
  21. 제1항 내지 제 20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체의 농도는 약 20mg/mL인, 안정한 액체 약제학적 제제.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
    a) 중쇄로서,
    i) VH-CH1-힌지-CH2-CH3를 포함하고, 상기 VH는 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:4)로부터 유래되고 상기 CH1-힌지-CH2-CH3 영역은 IgG4로부터 유래되는, 중쇄; 및
    b) 경쇄로서,
    i) VL-CL를 포함하고, 상기 VL은 CHA.7.518.1.H4(S241P)(서열번호:9)로부터 유래되고 CL 영역은 인간 카파 2 경쇄로부터 유래되는, 경쇄를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  23. 제24항에 있어서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  24. 제23항에 있어서, 상기 힌지 영역은 돌연변이를 선택적으로 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  25. 제1항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
    i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄; 및
    ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄를 포함하는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
    (a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
    i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:4)의 vhCDR1, vhCDR2, 및 vhCDR3을 포함하는 중쇄 가변 도메인, 및
    ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:9)의 vlCDR1, vlCDR2, 및 vlCDR3을 포함하는 경쇄 가변 도메인을 포함함;
    (b) 약 25mM 히스티딘;
    (c) 약 60mM NaCl;
    (d) 약 100mM L-아르기닌; 및
    (e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
    상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가지는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  27. 제1항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체 제제는
    (a) 항-PVRIG 항체, 상기 항-PVRIG 항체는
    i) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 중쇄(서열번호:8)를 포함하는 중쇄, 및
    ii) CHA.7.518.1.H4(S241P)의 경쇄(서열번호:13)를 포함하는 경쇄;를 포함함;
    (b) 약 25mM 히스티딘;
    (c) 약 60mM NaCl;
    (d) 약 100mM L-아르기닌; 및
    (e) 약 0.01% % w/v 폴리소르베이트 80;을 포함하며,
    상기 조성물은 6.5 +/- 0.2의 pH를 가지는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  28. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 20mg/kg 또는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg 내지 약 10mg/kg의 투여량으로 투여되는, 안정한 액체 약제학적 제제.　
  29. 제1항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 상기 항-PVRIG 항체의 약 0.01mg/kg, 0.03mg/kg, 0.1mg/kg, 0.3mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 또는 20mg/kg의 투여량으로 투여되는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  30. 제1항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항-PVRIG 항체는 매 4주마다 20mg/kg으로 투여되는, 안정한 액체 약제학적 제제.　
  31. 제1항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 안정한 액체 약제학적 제제는 암 치료를 위해 투여되는, 안정한 액체 약제학적 제제.
  32. 제1항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 암 치료 방법에서의 용도를 위한, 안정한 액체 약제학적 제제.
  33. 제31항 또는 제32항에 있어서, 상기 암은 전립선암, 간암(HCC), 결장직장암(CRC), 결장직장암 MSS(MSS-CRC, 난치성 MSS 결장직장성 포함), CRC(미상의 MSS), 난소암(난소암종 포함), 자궁내막암(자궁내막암종 포함), 유방암, 췌장암, 위암, 자궁경부암, 두경부암, 갑상선암, 고환암, 요로상피암, 폐암, 흑색종, 비흑색종 피부암(편평 및 기저세포암종), 신경교종, 신세포암(RCC), 신세포암종(RCC), 림프종(비호지킨 림프종(NHL) 및 호지킨 림프종(HD)), 급성 골수성 백혈병(AML), T 세포 급성 림프모구 백혈병(T-ALL), 미만성 거대 B 세포림프종, 고환생식세포종양, 중피종, 식도암, 삼중음성유방암, 메르켈세포(Merkel Cell)암, MSI-고(MSI-high)암, KRAS 돌연변이성 종양, 성인 T세포 백혈병/림프종, 흉막중피종, 항문 SCC, 신경내분비 폐암(신경내분비 폐암종 포함), NSC LC, NSCL(대세포), NSCLC 대세포, NSCLC 편평세포, 자궁경부 SSC, 악성 흑색종, 췌장암, 췌장 선암종, 선양낭성암(선양낭성암종 포함), 원발성 복막암, 미세부수체 안정 원발성 복막암, 백금 내성 미세부수체 안정 원발성 복막암, 및/또는 골수이형성 증후군(MDS)으로 구성되는 군으로부터 선택되는, 안정한 액체 약제학적 제제.
KR1020227006619A 2019-07-29 2020-07-28 항-pvrig 항체 제제 및 이의 용도 KR20220041881A (ko)

Applications Claiming Priority (13)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962880021P 2019-07-29 2019-07-29
US62/880,021 2019-07-29
US201962893051P 2019-08-28 2019-08-28
US62/893,051 2019-08-28
US201962930206P 2019-11-04 2019-11-04
US62/930,206 2019-11-04
US202062968660P 2020-01-31 2020-01-31
US62/968,660 2020-01-31
US202062985702P 2020-03-05 2020-03-05
US62/985,702 2020-03-05
US202063009367P 2020-04-13 2020-04-13
US63/009,367 2020-04-13
PCT/US2020/043921 WO2021021837A2 (en) 2019-07-29 2020-07-28 Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220041881A true KR20220041881A (ko) 2022-04-01

Family

ID=72243187

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227006619A KR20220041881A (ko) 2019-07-29 2020-07-28 항-pvrig 항체 제제 및 이의 용도

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20220280643A1 (ko)
EP (1) EP4003417A2 (ko)
JP (1) JP2022542505A (ko)
KR (1) KR20220041881A (ko)
CN (1) CN114615993A (ko)
AU (1) AU2020323926A1 (ko)
BR (1) BR112022001575A2 (ko)
CA (1) CA3149093A1 (ko)
IL (1) IL290141A (ko)
MX (1) MX2022001146A (ko)
WO (1) WO2021021837A2 (ko)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW202216778A (zh) 2020-07-15 2022-05-01 美商安進公司 Ｔｉｇｉｔ及ｃｄ１１２ｒ阻斷
US20230365680A1 (en) * 2020-09-30 2023-11-16 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
EP4292611A1 (en) * 2021-02-09 2023-12-20 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-cd112r antibody and use thereof
CA3231320A1 (en) 2021-09-15 2023-03-23 Zhiliang CAO Protein specifically binding to pd-1 and pharmaceutical use thereof
WO2024027824A1 (zh) * 2022-08-05 2024-02-08 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗cd112r抗体药物组合物及其用途
WO2024032700A1 (en) * 2022-08-10 2024-02-15 Beigene, Ltd. Anti-pvrig antibodies and methods of use
CN117957254A (zh) * 2022-08-31 2024-04-30 石药集团巨石生物制药有限公司 抗pvrig抗体及其应用

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9714A (en) 1853-05-10 Machine fob making hook-headed spikes
US289A (en) 1837-07-19 Cooking-stove
DE3572982D1 (en) 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2 Inc Geänderte antikörper.
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
CA2006596C (en) 1988-12-22 2000-09-05 Rika Ishikawa Chemically-modified g-csf
AU4116793A (en) 1992-04-24 1993-11-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5837242A (en) 1992-12-04 1998-11-17 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
CA2163345A1 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Susan Adrienne Morgan Antibodies
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
DK2180007T4 (da) 1998-04-20 2017-11-27 Roche Glycart Ag Glycosyleringsteknik for antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellecytotoxicitet
IL127127A0 (en) 1998-11-18 1999-09-22 Peptor Ltd Small functional units of antibody heavy chain variable regions
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
KR101077001B1 (ko) 1999-01-15 2011-10-26 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
PT1176195E (pt) 1999-04-09 2013-07-18 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Processo para controlar a actividade de uma molécula funcional sob o ponto de vista imunológico
KR100988949B1 (ko) 2001-10-25 2010-10-20 제넨테크, 인크. 당단백질 조성물
PL373256A1 (en) 2002-04-09 2005-08-22 Kyowa Hakko Kogyo Co, Ltd. Cells with modified genome
ZA200507757B (en) * 2003-04-04 2007-01-31 Genentech Inc High concentration antibody and protein formulations
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
DK3259597T3 (da) * 2015-02-19 2022-05-09 Compugen Ltd Pvrig-polypeptider og fremgangsmåder til behandling
WO2016134333A1 (en) 2015-02-19 2016-08-25 Compugen Ltd. Anti-pvrig antibodies and methods of use
EP3347379B9 (en) * 2016-08-17 2020-03-25 Compugen Ltd. Anti-tigit antibodies, anti-pvrig antibodies and combinations thereof
CA3047530A1 (en) * 2016-12-23 2018-06-28 Serum Institute Of India Private Limited Improved methods for enhancing antibody productivity in mammalian cell culture and minimizing aggregation during downstream, formulation processes and stable antibody formulationsobtained thereof

Also Published As

Publication number Publication date
WO2021021837A3 (en) 2021-03-11
US20220280643A1 (en) 2022-09-08
BR112022001575A2 (pt) 2022-04-19
WO2021021837A2 (en) 2021-02-04
CA3149093A1 (en) 2021-02-04
MX2022001146A (es) 2022-03-17
JP2022542505A (ja) 2022-10-04
AU2020323926A1 (en) 2022-03-10
CN114615993A (zh) 2022-06-10
IL290141A (en) 2022-03-01
EP4003417A2 (en) 2022-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021201231B2 (en) Antibodies to tigit
CN110072890B (zh) 可活化的抗ctla-4抗体及其用途
US20220280643A1 (en) Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
TWI693232B (zh) 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
JP2023123462A (ja) 三重併用抗体療法
US20200385480A1 (en) Anti-ox40 binding proteins
US20220378742A1 (en) Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
JP7351845B2 (ja) Ｍｉｃａおよび／またはｍｉｃｂに対する抗体ならびにそれらの使用
US20220193237A1 (en) Ipilimumab variants with enhanced specificity for binding at low ph
US10196445B1 (en) Ipilimumab variant with enhanced ADCC
IL307425A (en) CD40 antibodies with increased agonistic activity
US20230365680A1 (en) Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
KR20230003081A (ko) 암을 위한 항-cd40 항체 조합물 치료
US20240076373A1 (en) Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
US20240082397A1 (en) Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
WO2023064958A1 (en) Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
EP4363450A1 (en) Anti-tigit and anti-pvrig in monotherapy and combination treatments
WO2023175614A1 (en) Anti glucocorticoid-induced tnfr-related (gitr) protein antibodies and uses thereof
WO2023230532A1 (en) Anti-tigit antibody formulation