KR20210151575A - Composition for Preventing Hair Loss or Promoting Hair Growth Comprising a Culture of Aureobasidium pullulans - Google Patents

Composition for Preventing Hair Loss or Promoting Hair Growth Comprising a Culture of Aureobasidium pullulans Download PDF

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KR20210151575A
KR20210151575A KR1020200068574A KR20200068574A KR20210151575A KR 20210151575 A KR20210151575 A KR 20210151575A KR 1020200068574 A KR1020200068574 A KR 1020200068574A KR 20200068574 A KR20200068574 A KR 20200068574A KR 20210151575 A KR20210151575 A KR 20210151575A
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이용희
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Abstract

The present invention relates to a composition for preventing hair loss or promoting hair growth, comprising a culture of an Aureobasidium pullulans strain. More specifically, the present invention relates to a composition for preventing hair loss or promoting hair growth comprising an Aureobasidium pullulans strain which promotes the growth of dermal papilla cells and promotes vascular endothelial growth factor expression in the dermal papilla cells, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract of the culture or an extract of the lysate, as an active component.

Description

아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물을 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물{Composition for Preventing Hair Loss or Promoting Hair Growth Comprising a Culture of Aureobasidium pullulans}A composition for preventing hair loss or promoting hair growth comprising a culture of Aureobasidium pullulans strain {Composition for Preventing Hair Loss or Promoting Hair Growth Comprising a Culture of Aureobasidium pullulans}

본 발명은 아우레오바시디움 풀루란스(Aureobasidium pullulans) 균주의 배양물을 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 모유두세포의 성장을 촉진시키고, 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현을 촉진시키는 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for preventing hair loss or promoting hair growth, comprising a culture of Aureobasidium pullulans strain, and more specifically, promotes the growth of dermal papilla cells, and vascular endothelial growth factor of dermal papilla cells Aureobasidium pullulans strain that promotes expression, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an active ingredient In a composition for preventing hair loss or promoting hair growth it's about

인체의 각 모발은 독립적인 주기로 활동하며 진행하는데, 구체적인 주기로서 생장기(anagen), 퇴기(catagen), 및 휴지기(telogen)를 거치면서 성장 및 탈락한다. 일반적으로 탈모 현상이라 함은 모발이 휴지기 상태에서 빠지는 일반적인 휴지기 탈모 현상과 비정상적인 탈모 현상인 생장기 탈모 현상으로 구별할 수 있는데, 특히 후자를 탈모증이라 일컫는다. Each hair of the human body operates and proceeds in an independent cycle, and as a specific cycle, it grows and falls out while going through the anagen, catagen, and telogen phases. In general, the hair loss phenomenon can be divided into a general telogen hair loss phenomenon, in which hair falls out in a telogen state, and a growth phase hair loss phenomenon, which is an abnormal hair loss phenomenon, in particular, the latter is referred to as alopecia.

탈모의 원인은 아직까지 명확히 밝혀지지 않았으나 유전적인 원인이 크게 자리하고 있으며, 두피 내 혈액 순환 불량, 남성 호르몬의 과잉 작용, 피지 분비 과잉, 노화, 스트레스 등에 의해서도 발생하는 것으로 알려져 있다. 이러한 다양한 원인에 따라 다양한 탈모 방지 및 발모용제가 개발되고 있으나, 대부분의 양모제들은 탈모 방지에는 어느 정도의 효과를 나타내지만 발모와 관련된 효과는 그리 만족할 만한 것이 아니었으며, 대한민국 등록특허공보 제10-1467568호에는 미녹시딜, 피부연화제 및 피부저류제를 필수적으로 함유하는 조성물의 발모 효과가 기재되어 있으나, 상기 특허를 포함한 종래기술은 어떠한 유효성분으로 인하여 발모 효과가 발휘되는지 여부를 예측하지 못하고 있으며, 여전히 만족할만한 효과를 보이지 못하고 있다는 문제점이 있다. The cause of hair loss is not yet clearly known, but genetic causes are largely located, and it is known that it is caused by poor blood circulation in the scalp, excessive action of male hormones, excessive sebum secretion, aging, stress, etc. Various hair loss prevention and hair growth agents have been developed according to these various causes, but most of the hair growth agents show some effect in preventing hair loss, but the effects related to hair growth were not very satisfactory. No. describes the hair growth effect of a composition essentially containing minoxidil, an emollient and a skin retention agent, but the prior art, including the above patent, cannot predict whether the hair growth effect is exhibited due to any active ingredient, and is still satisfactory. There is a problem in that it does not show an effective effect.

한편, 최근 화학 원료 및 동물성 원료를 지양하게 됨에 따라 환경 유래 친 바이오 효능 소재를 찾을 필요가 대두되고 있다. 미생물 자원은 석유, 물 등과는 달리 재생산할 수 있다는 점에서 지속 가능한 자원으로 분류되며, 다양한 환경에 적응한 미생물 고유의 특성을 이용하므로 연구 및 산업적 적용 가능성이 매우 높다. 이에 따라 미생물로부터 유래한 유효성분을 함유하며, 우수한 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 나타내는 조성물의 개발이 필요한 실정이다.On the other hand, as chemical raw materials and animal raw materials are avoided in recent years, the need to find environmentally friendly bio-efficacious materials is emerging. Unlike petroleum and water, microbial resources are classified as sustainable resources in that they can be reproduced, and since they use the unique characteristics of microorganisms adapted to various environments, research and industrial application possibilities are very high. Accordingly, there is a need to develop a composition containing an active ingredient derived from a microorganism and exhibiting an excellent hair loss prevention or hair growth promoting effect.

아우레오바시디움 풀루란스(Aureobasidium pullulans)는 아우레오바시디움 속의 미생물 중 하나로서, 통칭 흑효모(black yeast)라고도 한다. 아우레오바시디움 속의 미생물은 알파-글루칸(α-glucan) 및 베타-글루칸(β-glucan)을 생산하는 미생물로서, 토양, 공기 중에서 발견되며 낮은 습도, 고온, 높은 태양광 조사, 심지어 방사성 핵종(radionuclides)이 있는 환경에서도 생존/생장할 수 있어 환경 적응력이 뛰어나다. Aureobasidium pullulans ( Aureobasidium pullulans ) is one of the microorganisms of the genus Aureobasidium, commonly referred to as black yeast. Microorganisms of the genus Aureobasidium are microorganisms that produce alpha-glucan (α-glucan) and beta-glucan (β-glucan), and are found in soil and air. radionuclides), so it can survive/grow and has excellent adaptability to the environment.

그 중에서도 특히 아우레오바시디움 풀루란스는 알파-글루칸인 풀루란(pullulan)을 생성하는 미생물로서, 생성되는 풀루란은 α-1,4 글리코시딕 결합(α-1,4 glycosidic bond)으로 연결된 세 글루코오스 분자로 구성된 삼당류인 말토트리오스(maltotriose)를 포함할 수 있다(Yurlova et al., Stud Mycol, 61:39-49, 2008; https://en.wikipedia.org/wiki/Pullulan 참조). Among them, Aureobasidium pullulans is a microorganism that produces alpha-glucan, pullulan, and the produced pullulan is linked by an α-1,4 glycosidic bond. may include maltotriose, a trisaccharide composed of three glucose molecules (see Yurlova et al., Stud Mycol , 61:39-49, 2008; https://en.wikipedia.org/wiki/Pullulan ) .

아우레오바시디움 풀루란스 균주가 생성하는 물질인 풀루란의 항산화, 아토피에 대한 피부 보호 효능 등이 알려져 있지만 탈모 방지 또는 발모 촉진 효능은 알려져 있지 않다.Antioxidant and atopy skin protection effects of pullulan, a substance produced by the Aureobasidium pullulans strain, are known, but the hair loss prevention or hair growth promoting effect is not known.

구체적으로, 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 피부 등에 적용하였을 때 발휘되는 혈행 개선 효능에 대한 연구, 및 이를 통한 탈모 방지 또는 발모 촉진 효능을 밝힌 연구는 전무한 실정이다.Specifically, the Aureobasidium pullulans strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate is applied to the skin, etc. A study on the effect of improving blood circulation, And there are no studies on the effect of preventing hair loss or promoting hair growth through this.

이러한 기술적 배경하에서, 본 발명자들은 아우레오바시디움 풀루란스 GJW 균주(수탁번호 KCCM12142P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물이 모유두세포의 성장을 촉진시키는 효능과, 모유두세포의 혈관내피성장인자의 발현을 촉진하는 효능이 있으며, 이러한 효능을 통하여 상기 배양물을 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물의 유효성분으로 사용할 수 있음을 지견하여 본 발명을 완성하였다.Under this technical background, the present inventors Aureobasidium pullulans GJW strain (Accession No. KCCM12142P), the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate of the dermal papilla cells The present invention has the effect of promoting growth and promoting the expression of vascular endothelial growth factor in dermal papilla cells, and discovering that the culture can be used as an active ingredient in a composition for preventing hair loss or promoting hair growth through these effects was completed.

대한민국 등록특허공보 제10-1467568호(공고일자 2014.12.02)Republic of Korea Patent Publication No. 10-1467568 (Announcement date of 2014.12.02)

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 필수적인 유효성분으로 포함함으로써, 모유두세포의 성장을 촉진시키고, 모유두세포의 혈관내피성장인자의 발현을 촉진시켜, 우수한 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 나타내는 조성물을 제공하는 것이다.The present invention has been devised to solve the above problems, and an object of the present invention is an Aureobasidium pullulans strain, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract or lysate of the culture It is to provide a composition that promotes the growth of dermal papilla cells and promotes the expression of vascular endothelial growth factors in dermal papilla cells, thereby exhibiting an excellent effect of preventing hair loss or promoting hair growth by including the extract of as an essential active ingredient.

전술한 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object of the present invention, the present invention is an Aureobasidium pullulans strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an active ingredient It provides a composition for preventing hair loss or promoting hair growth, including.

또한, 본 발명은 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물의 제조에 있어서, 유효성분으로서 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물의 용도를 제공한다.In addition, the present invention provides an Aureobasidium pullulans strain as an active ingredient in the preparation of a composition for preventing hair loss or promoting hair growth, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract or lysate of the culture Provided is a use of the extract of

본 발명에 따르면, 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 필수적인 유효성분으로 포함하는 조성물은 모유두세포의 성장을 촉진시키고 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현을 촉진시켜, 우수한 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과를 제공한다.According to the present invention, the composition comprising the Aureobasidium pullulans strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an essential active ingredient is the growth of dermal papilla cells and promotes the expression of vascular endothelial growth factor in dermal papilla cells, thereby providing an excellent effect of preventing hair loss or promoting hair growth.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물이 인간 모유두세포(Human dermal papilla cell)의 성장(세포 생존율[cell viability])을 증가시키는 효능이 있음을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물이 모유두세포의 혈관내피성장인자(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF) 발현을 증가시키는 효능이 있음을 나타낸 것이다.
1 shows that the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain according to an embodiment of the present invention has the effect of increasing the growth (cell viability) of human dermal papilla cells. will be.
Figure 2 shows that the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain according to an embodiment of the present invention has the effect of increasing the dermal endothelial growth factor (Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF) expression of the dermal papilla cells.

다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.Unless defined otherwise, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. In general, the nomenclature used herein is those well known and commonly used in the art.

이하, 본 발명에 대하여 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the present invention will be specifically described.

본 명세서에서 길이, 면적, 부피, 시간(기간), 농도, 함량, 온도, 개수, 퍼센트(%), 배수 등을 표현하는데 사용된 용어 "약"은 해당 수치 또는 수치 범위에서 최대 10%의 허용오차가 존재한다는 것을 의미한다.As used herein, the term "about" used to express length, area, volume, time (period), concentration, content, temperature, number, percent (%), multiple, etc., means that the numerical value or range of values is allowed to be up to 10%. It means that there is an error.

본 발명은 일 관점에서, 아우레오바시디움 풀루란스(Aureobasidium pullulans) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.The present invention in one aspect, Aureobasidium pullulans ( Aureobasidium pullulans ) strain, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract of the culture or an extract of the lysate as an active ingredient, It relates to a composition for preventing hair loss or promoting hair growth.

상기 조성물은 탈모증의 예방 또는 치료 용도를 갖는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물일 수 있다. The composition may be a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth having a use for preventing or treating alopecia.

상기 조성물은 탈모증 개선 용도를 갖는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물일 수 있다.The composition may be a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth having a use for improving alopecia.

본 발명은 다른 관점에서, 상기 조성물에 포함되는 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물의 탈모 방지 또는 발모 촉진 용도에 관한 것이다. In another aspect, the present invention prevents hair loss or promotes hair growth of the Aureobasidium pullulans strain contained in the composition, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate It's about use.

본 발명은 또 다른 관점에서, 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물(바람직하게는 화장료 조성물 또는 약학 조성물)을 피검체(인간 등의 포유류)에게 (국소적으로) 적용 또는 투여하는 단계를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진 방법에 관한 것이다.In another aspect, the present invention provides a composition comprising an Aureobasidium pullulans strain, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract of the culture or an extract of the lysate as an active ingredient (preferably relates to a method for preventing hair loss or promoting hair growth, comprising the step of (topically) applying or administering a cosmetic composition or pharmaceutical composition) to a subject (a mammal such as a human).

본 발명은 또 다른 관점에서, 탈모증의 예방 또는 치료 효능을 갖는 의약 제제 또는 탈모증의 개선 효능을 갖는 화장품 제제를 생산하기 위한, 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물의 용도(사용)에 관한 것이다.In another aspect, the present invention provides an Aureobasidium pullulans strain, a culture of the strain, a lysate of the strain, for producing a pharmaceutical formulation having an effect of preventing or treating alopecia or a cosmetic formulation having an effect of improving alopecia , it relates to the use (use) of the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate.

상기 의약 제제 또는 화장품 제제는 발모/육모 촉진제(개선제) 또는 탈모 방지제일 수 있다.The pharmaceutical preparation or cosmetic preparation may be a hair growth/hair growth promoter (improving agent) or an agent for preventing hair loss.

본 발명은 또 다른 관점에서, 발모 또는 육모용 약학 조성물 또는 화장료 조성물의 제조에 있어서, 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물의 용도(사용)에 관한 것이다.In another aspect, in the preparation of a pharmaceutical composition or cosmetic composition for hair growth or hair growth, the present invention provides an Aureobasidium pullulans strain, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract of the culture or to the use (use) of the extract of the lysate.

상기 탈모증(또는 탈모 질환)은 형태, 증상, 또는 원인 등에 따라, 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽 탈모증, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 비반흔성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증 중에서 선택된 하나 이상일 수 있다.The alopecia (or hair loss disease) is alopecia areata, hereditary androgenetic alopecia, telogen alopecia, traumatic alopecia, alopecia on the hair, pressure alopecia, genital alopecia, alopecia pityroides, syphilitic alopecia, seborrhea, depending on the form, symptom, or cause. It may be at least one selected from alopecia, symptomatic alopecia, non-scarring alopecia, alopecia scar, and alopecia congenital.

상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주는 통상적으로 알려진 것이라면 어느 것이나 사용할 수 있으나, 본 출원인이 분리하여 기탁한 아우레오바시디움 풀루란스 GJW(Aureobasidium pullulans GJW) 균주를 사용하는 것이 바람직하다. As the Aureobasidium pullulans strain, any commonly known strain can be used, but it is preferable to use the Aureobasidium pullulans GJW (Aureobasidium pullulans GJW) strain isolated and deposited by the present applicant.

구체적으로, 부다페스트 조약 하에 본 출원인이 2017년 10월 31일자로 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms, KCCM)에 기탁하고 KCCM12142P의 수탁번호를 부여 받은 아우레오바시디움 풀루란스 GJW 균주를 사용하는 것이 바람직하다.Specifically, under the Budapest Treaty, the applicant deposited with the Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM) on October 31, 2017 and was given an accession number of KCCM12142P using the Aureobasidium pullulans GJW strain. it is preferable

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물은 배양 배지 또는 배양액을 포함하여, 균주를 배양한 배지 내에 포함되어 있는 일부 물질 또는 모든 물질을 포함하는 배양 산물, 및 이의 농축물을 의미한다. 예컨대, 균주 배양의 결과물인 대사 산물 또는 분비물, 또는 그 파쇄물을 의미할 수 있고, 균주 자체도 배양물 내에 포함되어 있을 수 있다.In one embodiment of the present invention, the culture of the Aureobasidium pullulans strain is a culture product comprising some or all of the substances contained in the culture medium or the culture medium, including the culture medium or culture medium, and means its concentrate. For example, it may refer to a metabolite or secretion resulting from the culture of the strain, or a lysate thereof, and the strain itself may also be included in the culture.

상기 배양물은 천연 배지, 합성 배지 또는 선택 배지를 모두 포함하는 배양 배지에서 배양한 것일 수 있으며, 특히 감자 추출물(potato extract) 및 덱스트로스(dextrose)를 포함하는 배양 배지에서 배양한 것일 수 있다. 상기 배양물은 그 형태 또는 제형이 한정되지 아니하며, 일 예로 액체 또는 고체일 수 있다.The culture may be cultured in a culture medium containing all of a natural medium, a synthetic medium, or a selective medium, and in particular, may be cultured in a culture medium containing potato extract and dextrose. The culture is not limited in its form or formulation, and may be, for example, liquid or solid.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물은 배양물을 원심분리한 다음, 멸균된 생리식염수로 세척한 후 용매, 예컨대 멸균유에 분산시키고 동결건조하여 동결건조 분말 형태로 제조하여 사용될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the culture of the Aureobasidium pullulans strain is centrifuged, washed with sterile physiological saline, dispersed in a solvent, such as sterile oil, and lyophilized to freeze-dried powder It can be prepared and used in the form.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 파쇄물은 균주 자체를 화학적 또는 물리적 힘에 의하여 파쇄하여 얻은 산물일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the lysate of the Aureobasidium pullulans strain may be a product obtained by crushing the strain itself by chemical or physical force.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 추출물은, 균주 자체, 균주의 배양물, 균주의 파쇄물 또는 이들의 혼합물을 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고 추출하여 얻어진 산물을 의미할 수 있으며, 추출 후 다른 방법으로 가공 또는 처리하여 얻어질 수 있는 물질을 모두 포함하는 광범위한 개념이다. 구체적으로, 상기 추출물은 에탄올 분획물 또는 에탄올 침전물일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the extract is a product obtained by extracting the strain itself, the culture of the strain, the lysate of the strain, or a mixture thereof regardless of the extraction method, the extraction solvent, the extracted component or the form of the extract. It can mean, and is a broad concept that includes all substances that can be obtained by processing or processing in other ways after extraction. Specifically, the extract may be an ethanol fraction or an ethanol precipitate.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 유효성분으로서 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 조성물의 총 중량을 기준으로 0.001 내지 30중량%로 포함할 수 있다. 구체적으로, 상기 유효성분은 조성물의 총 중량을 기준으로 0.001중량% 이상, 0.01중량% 이상, 0.1중량% 이상, 0.5중량% 이상, 1.0중량% 이상, 1.5중량% 이상 또는 2.0중량% 이상으로 포함할 수 있으며, 30중량% 이하, 25중량% 이하, 20중량% 이하, 15중량% 이하, 10중량% 이하 또는 5.0중량% 이하로 포함할 수 있다. 상기 조성물 중 상기 유효성분의 함량이 0.001중량% 미만이면 탈모 방지 또는 발모 촉진(예컨대, 모유두세포의 성장 촉진 및 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현 촉진) 효과가 거의 없고, 상기 유효성분의 함량이 30중량%를 초과하면 제형 안정성에 영향을 미칠 수 있다.In one embodiment of the present invention, the composition is an Aureobasidium pullulans strain as an active ingredient, a culture of the strain, a lysate of the strain, an extract of the strain, an extract of the culture or an extract of the lysate of the composition It may be included in an amount of 0.001 to 30% by weight based on the total weight. Specifically, the active ingredient is included in an amount of 0.001% by weight or more, 0.01% by weight or more, 0.1% by weight or more, 0.5% by weight or more, 1.0% by weight or more, 1.5% by weight or more, or 2.0% by weight or more, based on the total weight of the composition. and may be included in an amount of 30% by weight or less, 25% by weight or less, 20% by weight or less, 15% by weight or less, 10% by weight or less, or 5.0% by weight or less. If the content of the active ingredient in the composition is less than 0.001% by weight, there is little effect in preventing hair loss or promoting hair growth (eg, promoting growth of dermal papilla cells and promoting vascular endothelial growth factor expression in dermal papilla cells), and the content of the active ingredient is 30 Exceeding the weight percent may affect formulation stability.

한편, 성장인자는 세포의 성장과 증식, 분화를 자극할 수 있는 물질로써 세포에서 분비된다. 성장인자는 단백질이나 스테로이드 호르몬 종류가 많으며 다양한 세포를 조절하는 역할로써 아주 중요하다. 또한 성장인자는 세포 간의 신호 전달 분자(Signaling molecule)로써 작용하여 특정 세포의 표면에 특정 수용체와 결합하기도 한다. 성장인자의 종류로는 각질세포성장인자(Keratinocyte Growth Factor, KGF), 혈관내피성장인자(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF) 등이 있으며 모유두 세포에서도 이러한 성장인자들이 분비되어 세포의 증식과 성장에 도움을 주고 있다.On the other hand, growth factors are secreted from cells as substances that can stimulate the growth, proliferation, and differentiation of cells. There are many types of growth factors and steroid hormones, and they are very important as they play a role in regulating various cells. In addition, growth factors act as signaling molecules between cells and bind to specific receptors on the surface of specific cells. Types of growth factors include Keratinocyte Growth Factor (KGF) and Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). are giving

각질세포성장인자는 섬유아세포성장인자의 하나로 섬유아세포성장인자-7(FGF-7)로도 명명되며, 섬유아세포성장인자(Fibroblast Growth Factor, FGF)는 피부의 혈관신생을 촉진하여 피부의 영양 공급과 피부 탄력을 증진시켜 모발 및 피부세포의 성장을 촉진하고, 모유두세포를 활성화시킨다. 모유두세포는 모낭의 최하부에 위치하고 있는 세포로서 모발의 생성과 성장에 관여하는 세포이다. 이러한 모유두세포의 증식은 48시간을 배가 시간(doubling time)으로 보고 있으며 모유두세포의 증식을 통해 효능 물질의 세포 활성도를 파악하기도 한다. 또한, 각질세포성장인자는 각질세포에서의 히알루론산 합성을 증가시키며, 진피층에 있는 콜라겐, 엘라스틴의 생합성을 촉진시켜 모발 주기를 조절하여 모발 상태를 유지하며 탈모를 방지한다.Keratinocyte growth factor is one of fibroblast growth factors and is also called fibroblast growth factor-7 (FGF-7). It promotes the growth of hair and skin cells by enhancing skin elasticity, and activates dermal papilla cells. The dermal papilla cells are cells located at the bottom of the hair follicle and are involved in the generation and growth of hair. The proliferation of these dermal papilla cells is viewed as a doubling time of 48 hours, and the cell activity of effective substances is also identified through the proliferation of dermal papilla cells. In addition, the keratinocyte growth factor increases the synthesis of hyaluronic acid in the keratinocytes and promotes the biosynthesis of collagen and elastin in the dermal layer to regulate the hair cycle to maintain the hair condition and prevent hair loss.

또한, 혈관내피성장인자는 모세 혈관의 혈장 단백질 투과를 증가시켜 세포의 분열과 이동을 촉진하고, 신 혈관 생성 촉진, 혈관유지에 관여, 모낭의 모세혈관 크기 및 분포도를 증가시켜 모발의 굵기 및 분포도를 증가시키며 모발 성장을 촉진한다.In addition, vascular endothelial growth factor promotes cell division and migration by increasing plasma protein permeation of capillaries, promotes neovascularization, participates in blood vessel maintenance, and increases capillary size and distribution of hair follicles to increase hair thickness and distribution and promotes hair growth.

상기 각질세포성장인자, 섬유아세포성장인자, 및 혈관내피성장인자는 모두 모유두세포의 성장과 관련된 인자들로서, 이들 성장인자의 발현 증가는 모유두세포의 성장을 유지하는 데에 중요하다.The keratinocyte growth factor, fibroblast growth factor, and vascular endothelial growth factor are all factors related to the growth of dermal papilla cells, and increasing the expression of these growth factors is important for maintaining the growth of dermal papilla cells.

상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 바람직하게는 아우레오바시디움 풀루란스 GJW 균주(수탁번호 KCCM12142P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물은 모유두세포의 성장을 촉진시킬 수 있고, 모유두세포의 성장인자, 바람직하게는 혈관내피성장인자의 발현을 촉진할 수 있으며, 보다 바람직하게는 인간의 피부 조직으로부터 유래된 모유두세포의 혈관내피성장인자의 발현을 촉진한다.The Aureobasidium pullulans strain, preferably the Aureobasidium pullulans GJW strain (Accession No. KCCM12142P), the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate can promote the growth of dermal papilla cells, can promote the expression of growth factors, preferably vascular endothelial growth factors, of dermal papilla cells, more preferably, vascular endothelial growth factors of dermal papilla cells derived from human skin tissue promote the expression of

상술한 바와 같이, 본 발명의 조성물은 약학 조성물일 수 있으며, 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한다. 또한, 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 포함한다.As described above, the composition of the present invention may be a pharmaceutical composition, and the pharmaceutical composition may include a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carrier is lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia gum, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil and the like. It also includes diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, surfactants, and the like.

상기 약학 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제제, 비경구용 제제, 주사 제형, 및 국소 투여 제제의 형태로 제제화될 수 있다. The pharmaceutical composition may be formulated in the form of oral preparations such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups and aerosols, parenteral preparations, injections, and topical administration preparations according to conventional methods.

경구형 제제 중 경구용 고형 제제는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하며, 이러한 고형 제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로오스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 포함할 수 있으며, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제 등을 포함할 수 있다. 경구형 제제 중 경구용 액상 제제는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등을 포함하며, 물, 리퀴드 파라핀 등의 희석제, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다. 비경구용 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제를 포함하며, 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스터류 등을 포함한다.Among oral formulations, oral solid formulations include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., and these solid formulations include at least one excipient, for example, starch, calcium carbonate, sucrose or lactose, gelatin. and the like, and may include a lubricant such as magnesium stearate and talc. Among oral formulations, oral liquid formulations include suspensions, solutions, emulsions, syrups, and the like, and may include water, diluents such as liquid paraffin, wetting agents, sweeteners, fragrances, preservatives, and the like. Parenteral preparations include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, and freeze-dried preparations. Non-aqueous solvents and suspensions include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injections such as ethyl oleate. possible esters and the like.

또한, 상기 약학 조성물은 인간을 포함하거나 포함하지 아니하는 포유류에 다양한 경로로, 예를 들면, 경구, 정맥, 근육, 또는 피하 주사에 의해 투여될 수 있다. In addition, the pharmaceutical composition may be administered to mammals, including or not including humans, by various routes, for example, by oral, intravenous, intramuscular, or subcutaneous injection.

본 발명의 조성물은 국소로 투여될 수 있다. 국소 투여는 피부 및/또는 모발에 대한 유효성분 또는 조성물(피부 외용제 조성물 등)의 직접적인 적용을 의미한다. 본 발명의 국소용 조성물은 용액, 로션, 납고, 크림, 연고제, 리포좀, 스프레이, 젤, 포움(foam), 롤러스틱(roller stick), 또는 피부과에서 일상적으로 사용되는 그 밖의 모든 제형의 형태일 수 있다.The compositions of the present invention may be administered topically. Topical administration means direct application of an active ingredient or composition (such as a composition for external application to the skin) to the skin and/or hair. The topical composition of the present invention may be in the form of a solution, lotion, plaster, cream, ointment, liposome, spray, gel, foam, roller stick, or any other formulation routinely used in dermatology. have.

본 발명의 조성물, 용도 및 방법에 있어서, 유효성분의 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로, 기간 등에 따라 다르지만, 경우에 따라 적절하게 선택될 수 있다. 상기 투여는 하루에 한 번 또는 수회 나누어 투여할 수도 있다.In the composition, use, and method of the present invention, the dosage of the active ingredient varies depending on the patient's condition and weight, the degree of disease, drug form, administration route, period, etc., but may be appropriately selected depending on the case. The administration may be administered once or divided into several times a day.

상술한 바와 같이, 본 발명의 조성물은 화장료 조성물일 수 있으며, 상기 화장료 조성물은 상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 바람직하게는 아우레오바시디움 풀루란스 GJW 균주(수탁번호 KCCM12142P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하여 통상의 화장료 제조방법에 따라, 다양한 형태로 제조될 수 있다. 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 눈썹 발모제, 속눈썹 발모제, 속눈썹 영양제 또는 연고제 등의 제형으로 제조될 수 있다.As described above, the composition of the present invention may be a cosmetic composition, and the cosmetic composition is the Aureobasidium pullulans strain, preferably the Aureobasidium pullulans GJW strain (Accession No. KCCM12142P), and the culture of the strain Water, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an active ingredient, according to a conventional cosmetic preparation method, can be prepared in various forms. Specifically, the cosmetic composition is a hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair conditioner, hair conditioner, hair spray, hair aerosol, pomade, powder, gel, hair pack, hair treatment, eyebrow hair growth agent, eyelash hair growth agent, eyelashes It may be prepared in the form of nutrients or ointments.

또한, 상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 분야에서 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있고 화장품용으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다.In addition, the cosmetic composition may include conventional adjuvants such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances commonly used in the field of cosmetic compositions, and may include a cosmetically acceptable carrier.

화장품용으로 허용 가능한 담체에는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스터, 계면활성제, 흡습제, 증점제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 방부제, 저급 알코올 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 필요에 따라 보습제, 항염증제, 항박테리아제, 항진균제, 비타민, 자외선 차단제, 항생제, 향수, 염료가 포함될 수도 있다.Cosmetically acceptable carriers include, but are not limited to, purified water, oils, waxes, fatty acids, fatty alcohols, fatty acid esters, surfactants, humectants, thickeners, viscosity stabilizers, chelating agents, buffers, preservatives, lower alcohols, and the like. it is not If necessary, a moisturizer, an anti-inflammatory agent, an antibacterial agent, an antifungal agent, a vitamin, a sunscreen, an antibiotic, a perfume, and a dye may be included.

{실시예}{Example}

이하, 본 발명을 실시예에 의하여 상세히 설명한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 전반적인 이해를 돕기 위한 예시일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of Examples. However, the following examples are only examples to help the overall understanding of the present invention, and the content of the present invention is not limited to the following examples.

<실시예 1> 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물 제조<Example 1> Preparation of culture extract of Aureobasidium pullulans strain

본 출원인이 동정하여 기탁하였던 아우레오바시디움 풀루란스 GJW (Aureobasidium pullulans GJW) 균주[수탁번호 KCCM12142P]를 기탁기관인 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms, KCCM)로부터 입수하였다. Aureobasidium pullulans GJW (Aureobasidium pullulans GJW) strain [Accession No. KCCM12142P] identified and deposited by the present applicant was obtained from the Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM), a depository institution.

상기 입수한 균주를 배양 배지(potato extract 4g/L, dextrose 20g/L)에 1%(v/v)의 부피(PBS[phosphate buffered saline]에 현탁한 균주의 농도: 1.0 x 106 cfu(colony forming unit)/ml)로 접종하고, 진탕 배양기(shaking incubator)를 사용하여 5일 동안 30℃/120rpm 조건하에서 진탕 배양하여 배양물을 획득하였다. 이후, 상기 배양물을 원심분리하여 균체와 배양액(상등액[supernatant])으로 분리하고, 배양액만 수집하였다. 수집한 배양액에 배양액과 동량의 부피로 에탄올을 넣어 반응시키고 4℃에서 1일 간 정치시킨 후, 원심분리를 통해 형성되는 에탄올 상층액을 제거하고 침전물을 동결 건조시켜 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물(Black Yeast Culture Extract)을 수득하였다. The obtained strain was suspended in a culture medium (potato extract 4g/L, dextrose 20g/L) in a volume of 1% (v/v) (PBS [phosphate buffered saline] concentration: 1.0 x 10 6 cfu (colony) forming unit)/ml), and cultured with shaking at 30° C./120 rpm for 5 days using a shaking incubator to obtain a culture. Thereafter, the culture was centrifuged to separate cells and a culture solution (supernatant), and only the culture solution was collected. Ethanol was added to the collected culture solution in the same volume as the culture solution and allowed to react for 1 day at 4 ° C. A Black Yeast Culture Extract was obtained.

<시험예 1> 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물을 처리한 인간 모유두세포의 성장 효과 확인<Test Example 1> Confirmation of the growth effect of human dermal papilla cells treated with the culture extract of Aureobasidium pullulans strain

실시예 1에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물(Black Yeast Culture Extract)이 인간 모유두세포의 성장에 미치는 효과를 확인하기 위해, 단국대학교 피부과로부터 제공받은 인간 모유두세포에 상기 추출물을 처리한 후 세포 생존율을 확인하였다.In order to confirm the effect of the culture extract (Black Yeast Culture Extract) of the Aureobasidium pullulans strain according to Example 1 on the growth of human dermal papilla cells, the extract was treated on human dermal papilla cells provided from the Department of Dermatology, Dankook University. After that, the cell viability was checked.

구체적으로, 10% FBS(Fetal Bovine Serum, Cambrex), 1% 항생제(antibiotics), 및 0.1% 펑자이존(fungizone)을 포함하는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Media, HyClone GE Healthcare) 배지를 이용하여 인간 모유두세포를 웰(well) 당 2 × 102 cells/100㎕이 되도록 96 웰 플레이트에 시딩(seeding)하여, 72시간 동안, 37℃, 5% CO2 습윤 조건 하에서 배양(인큐베이터 배양)하였다. 24시간 후 상기 96 웰 플레이트의 각 웰에서 배양에 사용되었던 배지를 제거하고, 각 웰에 DPBS(Dulbecco's Phosphate Buffer Saline, Sigma Aldrich, USA)를 첨가하여 2회 세척한 다음, FBS가 부재한 배지(serum free DMEM)를 첨가하였다. Specifically, using DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Media, HyClone GE Healthcare) medium containing 10% Fetal Bovine Serum (Cambrex), 1% antibiotics, and 0.1% fungizone, human dermal papilla Cells were seeded in a 96-well plate in a volume of 2 × 10 2 cells/100 μl per well, and cultured (incubator culture) at 37° C. and 5% CO 2 humid conditions for 72 hours. After 24 hours, the medium used for culture was removed from each well of the 96-well plate, DPBS (Dulbecco's Phosphate Buffer Saline, Sigma Aldrich, USA) was added to each well and washed twice, and then the medium without FBS ( serum free DMEM) was added.

그다음, 상기 96 웰 플레이트의 웰 당 최종 농도가 10ppm, 20ppm이 되도록 실시예 1에 따른 추출물을 첨가하여 처리군을 준비한 다음, 인큐베이터(37℃/5% CO2 습윤 조건)에서 72시간 동안 배양한 후, CCK-8 시약(Cell Counting Kit-8, CK04-11, Dojindo Molecular Technologies, Inc, MA, USA)을 2시간 동안 처리한 후, 450nm의 파장에서 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)로 측정하여 세포 생존율을 확인하였다.Then, a treatment group was prepared by adding the extract according to Example 1 so that the final concentrations per well of the 96-well plate were 10ppm, 20ppm, and then cultured in an incubator (37°C/5% CO 2 wet condition) for 72 hours. Then, after treatment with CCK-8 reagent (Cell Counting Kit-8, CK04-11, Dojindo Molecular Technologies, Inc, MA, USA) for 2 hours, absorbance at a wavelength of 450 nm was measured with a microplate reader. to confirm the cell viability.

양성대조군에서는 실시예 1에 따른 추출물 대신 5%(v/v)의 FBS를 함유하는 DMEM('5% FBS')을 사용하였다. 또, 실시예 1에 따른 추출물 또는 FBS로 처리되지 않은 무처리군은 대조군(Control)으로 준비하였다.In the positive control group, DMEM ('5% FBS') containing 5% (v/v) FBS was used instead of the extract according to Example 1. In addition, the untreated group not treated with the extract or FBS according to Example 1 was prepared as a control group.

상기 시험은 3회 반복하였으며, 얻어진 시험결과는 통계처리하여 도 1에 나타내었다.The test was repeated three times, and the obtained test results were statistically processed and shown in FIG. 1 .

도 1에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1에 따른 추출물 처리군은 10ppm, 20ppm의 추출물 농도에서 대조군보다 인간 모유두세포의 성장을 25.91%, 26.87%의 수준으로 향상시켰다. As can be seen in Figure 1, the extract treatment group according to Example 1 improved the growth of human dermal papilla cells compared to the control group at extract concentrations of 10ppm and 20ppm to the level of 25.91% and 26.87%.

결국, 도 1의 시험결과에 따르면, 실시예 1에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물은 뛰어난 모유두세포 성장 촉진 활성을 나타내어, 우수한 탈모 방지 또는 발모 촉진 효과가 있음을 알 수 있었다.As a result, according to the test results of FIG. 1, the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain according to Example 1 exhibited excellent dermal papilla cell growth promoting activity, and it was found that there was an excellent hair loss prevention or hair growth promoting effect.

<시험예 2> 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물에 의한 인간 모유두세포의 혈관내피성장인자의 발현 증가 효과 확인<Test Example 2> Confirmation of the effect of increasing the expression of vascular endothelial growth factor in human dermal papilla cells by the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain

실시예 1에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물이 피부의 혈관내피성장인자(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF) 발현에 미치는 영향을 확인하기 위해, 인간 모유두세포에 상기 추출물을 처리한 후 혈관내피성장인자의 발현 정도를 확인하였다. In order to determine the effect of the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain according to Example 1 on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the skin, human dermal papilla cells were treated with the extract The expression level of vascular endothelial growth factor was confirmed.

인간 모유두세포를 3 × 105 cells/㎖이 되도록 6 웰 플레이트의 웰에 10% FBS, 1% 항생제 및 0.1% 펑자이존를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 시딩한 후, 실시예 1에 따른 추출물을 20ppm의 농도로 6 웰 플레이트에 시딩된 인간 모유두세포에 처리하여 처리군을 준비한 다음, 48시간 동안 배양 후 혈관내피성장인자의 발현량(pg/ml)을 Human VEGF Quantikine ELISA Kit(R&D Systems, USA)를 사용하여 확인하였다. After seeding human dermal papilla cells using DMEM medium containing 10% FBS, 1% antibiotics and 0.1% fungal zone in the wells of a 6-well plate so as to become 3 × 10 5 cells/ml, the extract according to Example 1 was added A treatment group was prepared by treating human dermal papilla cells seeded in a 6-well plate at a concentration of 20 ppm, and then cultured for 48 hours. ) was used to confirm.

양성대조군에서는 실시예 1에 따른 추출물 대신 10μM Minoxidil(MNX)을 사용하였다. 또, 실시예 1에 따른 추출물 또는 Minoxidil로 처리되지 않은 무처리군은 대조군(Control)으로 준비하였다.In the positive control group, 10 μM Minoxidil (MNX) was used instead of the extract according to Example 1. In addition, the untreated group that was not treated with the extract according to Example 1 or Minoxidil was prepared as a control group.

상기 시험은 3회 반복하였으며, 얻어진 시험결과는 통계처리하여 도 2에 나타내었다.The test was repeated three times, and the obtained test results were statistically processed and shown in FIG. 2 .

도 2에서 확인되는 바와 같이, 실시예 1에 따른 추출물 처리군(20ppm의 농도)은 대조군보다 약 1.94배의 수준으로 인간 모유두세포의 혈관내피성장인자를 발현시켰고, 양성대조군인 10μM Minoxidil 처리군보다 약 2.28배의 수준으로 인간 모유두세포의 혈관내피성장인자를 발현시켰다.As can be seen in Figure 2, the extract-treated group according to Example 1 (concentration of 20 ppm) expressed the vascular endothelial growth factor of human dermal papilla cells at a level about 1.94 times higher than that of the control group, and compared to the 10 μM Minoxidil-treated group, which is a positive control group. The vascular endothelial growth factor of human dermal papilla cells was expressed at a level of about 2.28 times.

결국, 도 2의 시험결과에 따르면, 실시예 1에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주의 배양물 추출물은 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현 수준을 현저하게 증가시키는 효과를 가짐으로써, 모세 혈관의 혈장 단백질 투과를 증가시켜 세포의 분열과 이동을 촉진하고, 신 혈관 생성 촉진, 혈관유지에 관여, 모낭의 모세혈관 크기 및 분포도를 증가시켜 모발의 굵기 및 분포도를 증가시키며 모발 성장을 촉진할 수 있음을 알 수 있었다.As a result, according to the test results of FIG. 2 , the culture extract of the Aureobasidium pullulans strain according to Example 1 had the effect of significantly increasing the vascular endothelial growth factor expression level of dermal papilla cells, and thus the plasma of capillary blood Increases protein permeability to promote cell division and migration, promotes new blood vessel formation, participates in blood vessel maintenance, and increases the size and distribution of capillaries in hair follicles to increase hair thickness and distribution and promote hair growth Could know.

통계처리Statistical processing

통계분석은 두 그룹 간 유의성 검사로 t-test 검정법을 이용하였고, 대조군과 비교하여 *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001인 경우 유효한 차이로 간주하였다.For statistical analysis, the t-test test method was used to test the significance between the two groups, and compared with the control group, * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001 was considered a valid difference.

본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 다양한 외용제/화장품/약품 제형으로 제품화될 수 있으며, 구현하고자 하는 제품의 기능성, 비용 및 기타 조건을 고려하여 적정 함량 비율로 제어할 수 있다.Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the composition comprising the extract of the lysate as an active ingredient are various external preparations/cosmetics/medicines It can be commercialized as a formulation, and an appropriate content ratio can be controlled in consideration of the functionality, cost, and other conditions of the product to be implemented.

[제형예 1] 정제[Formulation Example 1] Tablet

표 1에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로, 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 정제를 제조하였다.According to the composition shown in Table 1, in a conventional manner, the Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate are effective Tablets containing as an ingredient were prepared.

배합성분Ingredients 함량(중량%)content (wt%) 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate 0.001~300.001 to 30 비타민 Cvitamin C 22 스테아린산 마그네슘magnesium stearate 1One 카복시메틸셀룰로오스칼슘Carboxymethylcellulose calcium 22 이산화규소silicon dioxide 1One 결정 셀룰로오스crystalline cellulose 잔량remaining amount

[제형예 2] 연고제[Formulation Example 2] Ointment

표 2에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로, 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 연고제를 제조하였다.According to the composition described in Table 2, the Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate according to the present invention are effective according to the composition described in Table 2 An ointment containing as a component was prepared.

배합성분Ingredients 함량(중량%)content (wt%) 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate 0.001~300.001 to 30 솔비톨sorbitol 99 카프린/카프릴트리글릭세리드Caprin/Caprylic Triglyceride 99 액상파라핀liquid paraffin 99 솔비탄세스퀴올리에이트Sorbitan Sesquioleate 66 옥틸도데세스-25Octyldodeces-25 99 세틸에틸헥사노에이트Cetylethylhexanoate 99 스쿠알란squalane 1One 살리실산salicylic acid 1One 글리세린glycerin 1515 정제수Purified water 잔량remaining amount

[제형예 3] 로션[Formulation Example 3] Lotion

표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로, 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 로션을 제조하였다.According to the composition described in Table 3, the Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate according to the present invention are effective according to the composition described in Table 3 A lotion containing as an ingredient was prepared.

배합성분Ingredients 함량(중량%)content (wt%) 본 발명에 따른 아우레오바시디움 풀루란스 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물Aureobasidium pullulans strain according to the present invention, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate 0.001~300.001 to 30 EDTA 2NaEDTA 2Na 0.20.2 히드록시에틸셀룰로오스Hydroxyethyl Cellulose 0.50.5 미네랄 오일mineral oil 55 세토스테아릴알코올cetostearyl alcohol 22 방부제, 향료 및 색소Preservatives, Flavors and Colors 적량appropriate amount 정제수Purified water 잔량remaining amount

본 발명이 상기 언급된 바람직한 실시예와 관련하여 설명되었지만, 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다양한 수정이나 변형을 하는 것이 가능하다. 따라서 첨부된 청구범위에는 본 발명의 요지에 속하는 한 이러한 수정이나 변형을 포함할 것이다.Although the present invention has been described with reference to the above-mentioned preferred embodiments, various modifications and variations are possible without departing from the spirit and scope of the invention. Accordingly, it is intended that the appended claims cover such modifications and variations as fall within the scope of the present invention.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (Overseas) KCCM12142PKCCM12142P 2017103120171031

Claims (13)

아우레오바시디움 풀루란스(Aureobasidium pullulans) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물. Aureobasidium pullulans ( Aureobasidium pullulans ) strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an active ingredient, preventing hair loss or promoting hair growth composition. 제1항에 있어서,
상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주는 수탁번호 KCCM12142P로 기탁된 아우레오바시디움 풀루란스 GJW(Aureobasidium pullulans GJW) 균주인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
According to claim 1,
The Aureobasidium pullulans strain is an Aureobasidium pullulans GJW (Aureobasidium pullulans GJW) strain deposited with accession number KCCM12142P, a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 탈모증의 예방 또는 치료용인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
According to claim 1,
The composition is a pharmaceutical composition for preventing or treating alopecia, preventing hair loss or promoting hair growth.
제3항에 있어서,
상기 탈모증은 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽 탈모증, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 비반흔성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증 중에서 선택된 하나 이상인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
4. The method of claim 3,
The alopecia is alopecia areata, hereditary androgenetic alopecia, telogen alopecia, traumatic alopecia, alopecia on the hair, pressure alopecia, genital alopecia, alopecia pityroides, syphilitic alopecia, seborrheic alopecia, symptomatic alopecia, non-scarring alopecia, scar alopecia And at least one selected from congenital alopecia, a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 모유두세포의 성장을 촉진시키는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
According to claim 1,
The composition is a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth, which promotes the growth of dermal papilla cells.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현을 촉진시키는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
According to claim 1,
The composition promotes the expression of vascular endothelial growth factor in dermal papilla cells, a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 피부 외용제 조성물인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 약학 조성물.
7. The method according to any one of claims 1 to 6,
The composition is a composition for external application to the skin, a pharmaceutical composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
아우레오바시디움 풀루란스(Aureobasidium pullulans) 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 균주의 파쇄물, 상기 균주의 추출물, 상기 배양물의 추출물 또는 파쇄물의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물. Aureobasidium pullulans ( Aureobasidium pullulans ) strain, the culture of the strain, the lysate of the strain, the extract of the strain, the extract of the culture or the extract of the lysate as an active ingredient, a cosmetic for preventing hair loss or promoting hair growth composition. 제8항에 있어서,
상기 아우레오바시디움 풀루란스 균주는 수탁번호 KCCM12142P로 기탁된 아우레오바시디움 풀루란스 GJW(Aureobasidium pullulans GJW) 균주인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
9. The method of claim 8,
The Aureobasidium pullulans strain is an Aureobasidium pullulans GJW (Aureobasidium pullulans GJW) strain deposited with accession number KCCM12142P, a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제8항에 있어서,
상기 조성물은 모유두세포의 성장을 촉진시키는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
9. The method of claim 8,
The composition promotes the growth of dermal papilla cells, a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제8항에 있어서,
상기 조성물은 모유두세포의 혈관내피성장인자 발현을 촉진시키는, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
9. The method of claim 8,
The composition promotes the expression of vascular endothelial growth factor in dermal papilla cells, a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제8항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은 피부 외용제 조성물인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
12. The method according to any one of claims 8 to 11,
The composition is a composition for external application to the skin, a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
제12항에 있어서,
상기 조성물의 제형은 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 눈썹 발모제, 속눈썹 발모제, 속눈썹 영양제 또는 연고제인, 탈모 방지 또는 발모 촉진용 화장료 조성물.
13. The method of claim 12,
The formulation of the composition includes hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair conditioner, hair conditioner, hair spray, hair aerosol, pomade, powder, gel, hair pack, hair treatment, eyebrow hair growth agent, eyelash hair growth agent, eyelash nutrition agent or An ointment, a cosmetic composition for preventing hair loss or promoting hair growth.
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KR101467568B1 (en) 2008-02-14 2014-12-02 동아제약 주식회사 Pharmaceutical solution containing minoxidil with enhanced dermal retention and hair growing effect

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