KR20210151173A

KR20210151173A - 인간화된 항-폴레이트 수용체 1 키메라 항원 수용체 및 그의 용도

Info

Publication number: KR20210151173A
Application number: KR1020217036671A
Authority: KR
Inventors: 밍한 왕; 휘 저우; 하이춘 지아
Original assignee: 페인스 테라퓨틱스 인코포레이티드
Priority date: 2019-04-12
Filing date: 2020-04-07
Publication date: 2021-12-13
Also published as: AU2020272672A1; JP2022526841A; EP3953392A1; CN113728007A; US20220162301A1; CA3132204A1; BR112021017046A2; WO2020210247A1; SG11202109051PA; IL287156A; MX2021012488A

Abstract

FOLR1 에 특이적인 키메라 항원 수용체 (CAR), FOLR1 CAR 을 인코딩하는 벡터, FOLR1 CAR 을 포함하는 재조합 숙주 세포 (CAR-T 또는 CAR-NK), 및 CAR-T 또는 CAR-NK 를 사용하여 이의 FOLR1 의 발현과 관련된 질환을 치료하는 방법이 기재되어 있다. 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 및 이의 항원-결합 단편이 또한 기재되어 있다.

Description

인간화된 항-폴레이트 수용체 1 키메라 항원 수용체 및 그의 용도

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2019 년 4 월 12 일에 출원한 미국 가출원 제 62/832,975 호; 2019 년 6 월 19 일에 출원한 미국 가출원 제 62/863,330 호; 및 2019 년 11 월 7 일에 출원한 미국 가출원 제 62/931,988 호를 우선권으로 주장한다. 각각의 개시물은 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.

기술 분야

본 발명은 항-폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 키메라 항원 수용체 (CAR), CAR 을 인코딩하는 핵산 및 발현 벡터, CAR 을 발현하도록 조작된 T 세포 (CAR-T) 및 CAR 을 발현하도록 조작된 NK 세포 (CAR-NK) 에 관한 것이다. CAR 의 제조 방법, CAR-T/CAR-NK 의 제조 방법, 및 암을 포함하는 FOLR1 의 발현과 관련되는 질환을 치료하기 위한 CAR-T/CAR-NK 의 사용 방법이 또한 제공된다.

전자적으로 제출된 서열 목록에 대한 참조

본 출원은 파일명이 "065799.21WO1 Sequence Listing" 이고 생성일이 2020년 3월 26일 목요일이며 크기가 140 kb 인 ASCII 포맷의 서열 목록으로서 EFS-Web을 통해 전자 제출된 서열 목록을 포함한다. EFS-Web을 통해 제출된 서열 목록은 본 명세서의 일부이고 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.

표준 항암제는 상당한 이점을 제공한다. 최근, 항-PD-1 mAb, 항-PD-L1 mAb 및 항-CD3 이중특이적 T 세포 계열과 같은 면역-종양학 약물의 이용가능성은 다양한 유형의 암에 대항하기 위해 환자의 면역계를 활용하고 활성화시키는 개념을 발전시켰다. 그러나, 불량한 응답, 불충분한 효능 및/또는 안전성 문제가 여전히 해결되어야 한다. CAR-T (키메라 항원 수용체-T) 세포 요법은 T 세포와 같은 환자 자신의 면역 세포를 유전적으로 조작하고, 이들을 암 세포 상의 적합한 세포 표면 항원으로 재지향시키는 것을 포함한다 (Mayor et al., Immunotherapy. 2016; 8:491-494). 이러한 접근법은 화학요법불응성 B 세포 악성종양 및 다른 암을 앓고 있는 환자에서 성공을 입증했다 (Pettitt et al., Mol Ther. 2018 (26) 342-353). T 세포는 암 세포를 인식하고 사멸시키기 위해 하나 이상의 암 세포 표면 표적/항원에 특이성을 갖도록 조작될 수 있다. 상기 방법은 세포외 항원 특이적 결합 도메인, 예컨대 단일클론 항체 (mAb) 의 하나 이상의 단일사슬 가변 단편 (scFv), 힌지 및 막관통 영역, 및 세포내 신호전달 도메인 (하나 이상의 공자극성 도메인 및 하나 이상의 활성화 도메인을 포함함) 을 포함하는 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 DNA 또는 다른 유전 물질로 T 세포를 형질도입하는 것을 포함한다 (Kochenderfer et al., Nat Rev Clin Oncol. 2013; 10:267-276). T 세포 및 NK 세포와 같은 CAR-발현 면역 세포는 액형 및 고형 종양을 포함하는 다양한 질환을 치료하는데 사용될 수 있다. 성공적인 CAR-T 세포 요법은 표적화된 세포를 특이적으로 인식 및 파괴할 수 있고, 시간이 지남에 따라 지속 및 증식하는 능력을 유지할 수 있다.

폴레이트 수용체 α (FRα) 또는 폴레이트 결합 단백질 (FBP) 로도 공지된 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 은 폴레이트의 활성 형태, 5-메틸테트라히드로폴레이트 (5-MTF), 및 이의 유도체에 대해 높은 친화성을 가지며 이를 세포에 전달하는, 세포 표면 상의 글리코실포스파티딜이노시톨 (GPI)-고정 멤브레인 단백질이다 (Salazarand Ratnam, Cancer Metastasis Rev2007; 26:141-52). FOLR1 은 난소암, 폐암 및 유방암과 같은 특정 고형 종양에서 과발현되기 때문에 종양학 표적이 되었으나 (Toffoli et al., Int J Cancer 1997; 74:193-198 및 Boogerd et al., Oncotarget 2016; 7:17442-17454), 이의 발현은 제한된 정상 인간 조직에서 낮은 수준이다 (Weitman, et al., Cancer Res 1992; 52:3396-3401). 이러한 관찰과 일치하여, 지금까지 FOLR1-표적화 소형 및 대형 분자로 수행된 1 상 임상 시험에서 우수한 약물 내성이 나타났다 (Cheung et al., Oncotarget 2016; 7:52553-52574). 따라서, FOLR1 은 FOLR1-양성 암을 치료 및 치유하기 위한 CAR-T 세포 치료요법에 대한 이상적인 표적이다.

하나의 일반적 양태에서, 본 발명은 T 세포 매개되는 암 사멸을 유도하는 키메라 항원 수용체 (CAR) 구축물에 관한 것이며, 여기에서 CAR 구축물은 인간 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항원 결합 도메인, 힌지 영역, 막관통 영역, 및 세포내 신호전달 도메인을 포함한다.

제공되는 것은 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드이다. CAR 는 (a) 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항원 결합 도메인을 포함하는 세포외 도메인; (b) 힌지 영역; (c) 막관통 영역; 및 (d) 세포내 신호전달 도메인을 포함할 수 있다.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 하기의 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함한다:

(1) SEQ ID NOs: 17, 18, 19, 41, 42 및 43, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 20, 21, 22, 44, 45 및 46, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 23, 24, 25, 47, 48 및 49, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 26, 27, 28, 50, 51 및 52, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 29, 30, 31, 53, 54 및 55, 각각;

(6) SEQ ID NOs: 32, 33, 34, 56, 57 및 58, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 35, 36, 37, 59, 60 및 61, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 38, 39, 40, 62, 63 및 64, 각각;

여기서 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합한다.

(1) SEQ ID NOs: 65, 66, 67, 89, 90 및 91, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 68, 69, 70, 92, 93 및 94, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 71, 72, 73, 95, 96 및 97, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 74, 75, 76, 98, 99 및 100, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 77, 78, 79, 101, 102 및 103, 각각;

(6) SEQ ID NOs: 80, 81, 82, 104, 105 및 106, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 83, 84, 85, 107, 108 및 109, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 86, 87, 88, 110, 111 및 112, 각각;

특정 구체예에서, 항원 결합 도메인이 SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 또는 15 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 또는 16 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

하나의 구현예에서, 항원 결합 도메인은 하기를 포함한다:

(1) SEQ ID NO:1 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:2 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(2) SEQ ID NO:3 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:4 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(3) SEQ ID NO:5 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:6 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(4) SEQ ID NO:7 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:8 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(5) SEQ ID NO:9 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:10 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(6) SEQ ID NO:11 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:12 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(7) SEQ ID NO:13 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:14 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역; 또는

(8) SEQ ID NO:15 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:16 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 인간화되고 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 인간화되고 하기를 포함한다:

(1) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(2) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(3) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(4) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(5) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(6) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(7) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(8) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(9) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(10) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(11) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(12) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(13) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(14) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(15) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:126 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(16) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:127 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(17) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(18) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(19) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(20) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(21) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(22) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(23) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(24) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(25) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(26) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(27) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(28) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(29) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(30) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(31) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(32) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(33) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(34) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(35) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(36) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(37) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(38) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(39) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(40) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(41) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(42) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(43) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(44) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(45) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(46) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(47) SEQ ID NO:148 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:151 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(48) SEQ ID NO:150 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:153 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(49) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(50) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(51) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(52) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(53) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(54) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(55) SEQ ID NO:182 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:190 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(56) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(57) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(58) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(59) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(60) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(61) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

(62) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역; 또는

(63) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다. 특정 구현예에서, 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 은 SEQ ID NOs: 159-170 중 어느 하나와 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 포함한다.

특정 구현예에서, 키메라 항원 수용체 (CAR) 는 하나 이상의 항원 결합 도메인을 포함한다.

특정 구현예에서, 세포내 신호전달 도메인은 하나 이상의 공자극성 도메인 및 하나 이상의 활성화 도메인을 포함한다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 단리된 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩되는 키메라 항원 수용체 (CAR) 이다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터이다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 벡터를 포함하는 숙주 세포이다.

특정 구현예에서, 숙주 세포는 T 세포, 바람직하게는 인간 T 세포이다. 특정 구현예에서, 숙주 세포는 NK 세포, 바람직하게는 인간 NK 세포이다. T 세포 또는 NK 세포는, 예를 들어, 질환 예컨대 암을 치료하기 위해 본 발명의 CAR 를 발현하도록 조작될 수 있다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 발현하는 숙주 세포의 제조 방법이다. 방법은 T 세포 또는 NK 세포를 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터로 형질도입하는 단계를 포함한다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포를 생산하는 방법이다. 방법은 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 T 세포 또는 NK 세포를 CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포를 생산하는 조건 하에 배양하는 단계, 및 CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포를 회수하는 단계를 포함한다.

또한 제공되는 것은 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 포함하는 RNA-조작된 세포의 집단을 생성하는 방법이다. 방법은 세포를 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기에서 단리된 폴리뉴클레오티드는 시험관내 전사된 RNA 또는 합성 RNA 이다.

또한 본 발명의 CAR-T 세포 및/또는 CAR-NK 세포를 대상체에 투여하는 단계를 포함하는, 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이 제공된다. 암은 임의의 액형 또는 고형 암일 수 있으며, 이는 예를 들어 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신장 세포 암종, 방광 요로상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양에서 선택될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

특정 구현예에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 CAR 분자를 발현하는 세포의 효능을 증가시키는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

특정 구현예에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 CAR 분자를 발현하는 세포의 투여와 관련되는 하나 이상의 부작용을 개선하는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

특정 구현예에서, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 FOLR1 과 관련되는 질환을 치료하는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

또한 제공되는 것은 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이고, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 중 임의의 것과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

특정 구현예에서, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 하기를 포함한다:

특정 구현예에서, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편은 FOLR1 에 결합할 수 있고, 효과기-매개 종양 세포 용해를 유도할 수 있고, 접합된 약물의 동원을 매개할 수 있고/있거나 암-사멸 효과를 갖는 또 다른 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편과 이중특이적 항체를 형성할 수 있다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산이 또한 제공된다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터가 또한 제공된다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터를 포함하는 숙주 세포가 또한 제공된다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물이 또한 제공된다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암 세포 표면 상의 FOLR1 을 표적화하는 방법이 또한 제공된다.

본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법이 또한 제공된다. 암은 임의의 액형 또는 고형 암일 수 있으며, 이는 예를 들어 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신장 세포 암종, 방광 요로상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양에서 선택될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 생산하는 조건 하에 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 세포를 배양하고, 세포 또는 배양물로부터 항체 또는 항원-결합 단편을 회수하는 것을 포함하는, 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 생산 방법이 또한 제공된다.

단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 약학적으로 허용가능한 담체와 조합하여 약학 조성물을 수득하는 것을 포함하는, 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물의 제조 방법이 또한 제공된다.

본 출원의 전술한 발명의 개요 뿐만 아니라 하기 바람직한 구현예의 상세한 설명은, 첨부된 도면과 함께 판독시 보다 잘 이해될 것이다. 그러나, 본 출원이 도면에서 나타낸 정확한 구현예에 제한되지 않는다는 것이 이해되어야 한다.
도 1A-1L 는 ELISA 에 의한 고정된 재조합 인간 FOLR1 단백질에 대한 인간화 mAb 의 결합을 나타낸다.
도 2A-2E 는 SK-OV-3 세포에 대한 인간화 mAb 의 결합을 나타낸다. 실험은 FACS 분석에 의해 수행했다.
도 3A-3G 는 ELISA 에 의한 고정된 재조합 인간 FOLR1 단백질에 대한 인간화 scFv 의 결합을 나타낸다.
도 4A-4G 는 SK-OV-3 세포에 대한 인간화 scFv 의 결합을 나타낸다. 실험은 FACS 분석에 의해 수행했다.

다양한 발행물, 논문 및 특허가 배경 및 명세서 전반에 걸쳐 인용되거나 기재되며; 이들 참고문헌 각각은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 본 명세서에 포함된 문헌, 행위, 재료, 장치, 물품 등의 논의는 본 발명의 맥락을 제공하기 위한 것이다. 이러한 논의는 이들 사안 중 임의의 것 또는 전부가 개시되거나 청구된 임의의 발명과 관련하여 종래 기술의 일부를 형성한다는 것을 인정하는 것은 아니다.

달리 정의하지 않는 한, 본원에서 사용되는 모든 기술적 및 과학적 용어는, 본 발명이 적용되는 기술 분야의 당업자에게 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 다르게는, 본원에서 사용되는 특정 용어는 본 명세서에서 나타내는 바와 같은 의미를 갖는다.

본원 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태의 "부정 관사" 및 "정관사" 는, 문맥이 달리 명확하게 지시하지 않는 한, 복수의 대상을 포함한다는 것에 유의해야 한다.

달리 언급되지 않는 한, 본원에 기재된 농도 또는 농도 범위와 같은 임의의 수치는 용어 "약" 에 의해 모든 경우에 변형되는 것으로서 이해되어야한다. 따라서, 수치는 전형적으로 인용된 값의 ±10% 를 포함한다. 예를 들어, 1 mg/mL 의 농도는 0.9 mg/mL 내지 1.1 mg/mL 를 포함한다. 마찬가지로, 1% 내지 10% (w/v) 의 농도 범위는 0.9% (w/v) 내지 11% (w/v) 를 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 수치 범위의 사용은 맥락상 명백하게 달리 나타내지 않는 한, 모든 가능한 하위범위, 그러한 범위 내의 정수 및 값의 분수를 포함하는 그 범위 내의 모든 개별 수치를 명시적으로 포함한다.

달리 나타내지 않는 한, 일련의 요소에 선행하는 용어 "적어도" 는 일련의 모든 요소를 지칭하는 것으로 이해되어야한다. 당업자는 본원에 기재된 본 발명의 특정 구현예에 대한 많은 등가물을, 단지 일상적인 실험을 사용하여 인식하거나, 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 발명에 의해 포괄되는 것으로 의도된다.

본원에서 이용된, "포함하다 (comprise)", "포함하는 (comprising)", "포함하다 (include)", "포함하는 (including)", "갖다", "갖는", "함유하다" 또는 "함유하는"이라는 용어 또는 이의 임의의 다른 변형은, 언급된 정수 또는 정수의 군을 포함하나, 임의의 다른 정수 또는 정수의 군을 배제하지 않는 것을 시사하는 것으로 이해될 것이며, 비-배타적이거나 또는 개방형인 것으로 의도된다. 예를 들어, 요소의 목록을 포함하는 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품 또는 장치는 반드시 이들 요소에만 한정되는 것이 아니라, 이러한 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품 또는 장치에 고유하지 않거나 명백하게 열거되지 않은 다른 요소를 포함할 수 있다. 또한, 반대로 명시적으로 언급되지 않는 한, "또는" 은 포괄적인 것을 나타내거나 배타적이지 않은 것을 나타낸다. 예를 들어, 조건 A 또는 B 는 하기 중 어느 하나에 의해 충족된다: A 가 참 (또는 존재함) 이고 B 가 거짓 (또는 존재하지 않음), A 가 거짓 (또는 존재하지 않음) 이고 B 가 참 (또는 존재함), 그리고 A 와 B 둘 모두가 참 (또는 존재함).

본원에서 사용되는 바와 같은, 다수의 인용된 요소 사이의 결합 용어 "및/또는" 은 개별 및 조합된 옵션 둘 모두를 포함하는 것으로서 이해된다. 예를 들어, 두 요소가 "및/또는" 으로 결합되는 경우, 첫 번째 옵션은, 두 번째 요소가 없는 첫 번째 요소의 적용 가능성을 나타낸다. 두 번째 옵션은, 첫 번째 요소가 없는 두 번째 요소의 적용 가능성을 나타낸다. 세 번째 옵션은, 첫 번째 요소와 두 번째 요소 함께의 적용 가능성을 나타낸다. 이들 옵션 중 임의의 하나는 그 의미에 포함되는 것으로서 이해되며, 따라서 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "및/또는" 의 요건을 충족시킨다. 하나 이상의 옵션의 동시 적용 가능성 또한 그 의미에 속하는 것으로서 이해되며, 따라서 용어 "및/또는" 의 요건을 총족시킨다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 사용된 용어 "이루어지다", 또는 "~로 이루어지다" 또는 "~로 이루어지는" 과 같은 변형은 임의의 언급된 정수 또는 정수의 군을 포함하나, 추가 정수 또는 정수의 군은 명시된 방법, 구조 또는 조성물에 추가될 수 없다는 것을 나타낸다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 명세서 및 청구범위 전반에 걸쳐 사용된 용어 "본질적으로 이루어지다", 또는 "~로 본질적으로 이루어지다" 또는 "~로 본질적으로 이루어지는" 과 같은 변형은 임의의 언급된 정수 또는 정수의 군을 포함하고, 명시된 방법, 구조 또는 조성물의 기본 또는 신규 특성을 실질적으로 변화시키지 않는 임의의 언급된 정수 또는 정수의 군을 선택적으로 포함한다는 것을 나타낸다. M.P.E.P. § 2111.03 을 참조한다.

본원에서 사용되는 바와 같은, "대상" 은 임의의 동물, 바람직하게는 포유동물, 가장 바람직하게는 인간을 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "포유동물" 은 임의의 포유동물을 포함한다. 포유동물의 예는 소, 말, 양, 돼지, 고양이, 개, 마우스, 래트, 토끼, 기니피그, 원숭이, 인간 등, 보다 바람직하게는 인간을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

단어 "우측", "좌측", "하측" 및 "상측" 은 참조하는 도면에서의 방향을 지정한다.

바람직한 발명의 성분의 치수 또는 특징을 나타내는 경우에, 본원에서 이용된 "약", "대략", "일반적으로", "실질적으로" 라는 용어 및 유사한 용어는, 기재된 치수/특징이 엄격한 경계 또는 파라미터가 아니며 당업자가 이해하는 바와 기능적으로 동일하거나 또는 유사한 근소한 변형을 이로부터 배제하지 않는다는 것을 나타낸다는 것이 또한 이해되어야 한다. 최소한, 수치 매개변수를 포함하는 이러한 참조는 당업계에서 허용되는 수학적 및 산업적 원리 (예를 들어, 반올림, 측정 또는 다른 계통 오차, 제작 공차 등) 를 사용하여 최하위 숫자를 변화시키지 않는 변형을 포함할 것이다.

둘 이상의 핵산 또는 폴리펩티드 서열 (예를 들어, FOLR1 에 특이적인 항원 결합 도메인을 포함하는 키메라 항원 수용체 (CAR) 및 이를 인코딩하는 폴리뉴클레오티드, FOLR1 폴리펩티드 및 이를 인코딩하는 FOLR1 폴리뉴클레오티드) 의 맥락에서, "동일한" 또는 백분율 "일치도" 라는 용어는 동일하거나 또는 명시된 백분율의 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드를 갖는 둘 이상의 서열 또는 하위서열을 나타내며, 최대 일치를 위해 비교 및 정렬되는 경우에, 하기의 서열 비교 알고리즘 중 하나를 이용하거나 또는 육안 검사에 의해 측정된다.

서열 비교를 위해, 전형적으로 하나의 서열은 시험 서열을 그에 대해 비교하는 참조 서열로서 역할한다. 서열 비교 알고리즘을 사용하는 경우, 시험 및 참조 서열이 컴퓨터에 입력되고, 필요하다면 하위서열 좌표가 지정되며, 서열 알고리즘 프로그램 매개변수가 지정된다. 이후, 서열 비교 알고리즘은 지정된 프로그램 매개변수를 기반으로 하여, 참조 서열에 대한 시험 서열(들) 의 서열 동일성 % 를 계산한다.

비교를 위한 서열의 최적 정렬은 예를 들어, Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 1981; 2:482 의 국부적 상동성 알고리즘에 의해, Needleman & Wunsch, J. Mol. Biol. 1970; 48:443 의 상동성 정렬 알고리즘에 의해, Pearson & Lipman, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 1988; 85:2444 의 유사성 방법에 대한 검색에 의해, 이들 알고리즘의 컴퓨터화된 실행 (Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI 에서의 GAP, BESTFIT, FASTA 및 TFASTA) 에 의해, 또는 육안 검사에 의해 (일반적으로, Current Protocols in Molecular Biology, F.M. Ausubel et al., eds., Current Protocols, a joint venture between Greene Publishing Associates, Inc. and John Wiley & Sons, Inc., (1995 Supplement) (Ausubel) 참조) 실시할 수 있다.

서열 동일성 % 및 서열 유사성을 결정하기에 적합한 알고리즘의 예는 각각 [Altschul et al., J. Mol. Biol. 1990; 215: 403-410] 및 [Altschul et al., Nucleic Acids Res. 1997; 25: 3389-3402] 에 기재되는 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘이다. BLAST 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는 국립생물정보센터를 통해 공개적으로 입수가능하다. 이 알고리즘은, 첫 번째로, 데이터베이스 서열 중 동일한 길이의 워드 (word) 와 정렬될 때 매칭되거나 일부 양의 값인 역치 스코어 T 를 충족시키는, 질의 서열 내 길이 W 의 짧은 워드를 확인함으로써 고 스코어 서열 쌍 (HSP) 을 확인하는 것을 수반한다. T 는, 인접 워드 스코어 역치로서 지칭된다 (상기 Altschul et al.). 이와 같이 처음에 출현하는 인접 워드 히트 (word hit) 는, 이를 포함하는 더 긴 HSP 를 찾기 위한 검색을 개시하는 시드 (seed) 로서 역할한다. 워드 히트는, 누적 정렬 스코어가 증가할 수 있는 한, 각각의 서열을 따라서 양 방향으로 연장된다.

누적 스코어는, 뉴클레오티드 서열에 대해, 매개변수 M (매칭 잔기 쌍에 대한 보상 스코어; 항상 > 0) 및 N (미스매칭 잔기에 대한 패널티 스코어; 항상 < 0) 을 사용하여 계산된다. 아미노산 서열에 대해, 스코어링 매트릭스가 누적 스코어를 계산하기 위해 사용된다. 각 방향에서 단어 히트의 연장은 누적 정렬 스코어가 이의 최대 획득 값으로부터 X 분량만큼 떨어질 때; 하나 이상의 음-스코어 잔기 정렬의 축적으로 인해 누적 스코어가 0 이하가 될 때; 또는 어느 하나의 서열의 말단에 도달될 때 중단된다. BLAST 알고리즘 매개변수 W, T 및 X 는 정렬의 감도와 속도를 결정한다. (뉴클레오티드 서열용) BLASTN 프로그램은 워드 길이 (W) 11, 예상치 (E) 10, M = 5, N = -4 를 디폴트 값으로 사용하며, 두 가닥 모두를 비교한다. 아미노산 서열에 대해, BLASTP 프로그램은 워드 길이 (W) 3, 예상치 (E) 10 및 BLOSUM62 스코어링 매트릭스 (Henikoff & Henikoff, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1989; 89:10915 참조) 를 디폴트로서 사용한다.

서열 동일성 % 를 계산하는 것에 추가로, BLAST 알고리즘은 또한 2 개 서열 사이의 유사성의 통계적 분석을 수행한다 (예를 들어, Karlin & Altschul, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 1993; 90:5873-5787 참조). BLAST 알고리즘에 의해 제공되는 유사성에 관한 한 척도는 최소 확률 합 (P(N)) 이며, 이는 2 개 뉴클레오티드 또는 아미노산 서열 사이의 매칭이 우연히 일어날 확률의 표시를 제공한다. 예를 들어, 만약 기준 핵산에 대한 시험 핵산 비교시 최소 확률 합이 약 0.1 미만, 보다 바람직하게는 약 0.01 미만, 가장 바람직하게는 약 0.001 미만이라면, 해당 핵산은 기준 서열과 유사한 것으로 간주된다.

2 개의 핵산 서열 또는 폴리펩티드가 실질적으로 동일하다는 추가의 표시는, 하기 기재된 바와 같이, 제 1 핵산에 의해 인코딩된 폴리펩티드가 제 2 핵산에 의해 인코딩된 폴리펩티드와 면역학적으로 교차 반응성이라는 것이다. 따라서, 폴리펩티드는 전형적으로 예를 들어 2 개의 펩티드가 보존적 치환에 의해서만 상이한 제 2 폴리펩티드와 실질적으로 동일하다. 2 개의 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 또 다른 표시는, 2 개의 분자가 엄격한 조건 하에 서로 하이브리드화한다는 것이다.

본원에서 사용되는, 용어 "단리된" 은 생물학적 성분 (예컨대 핵산, 펩티드 또는 단백질) 이 그 성분이 자연적으로 발생하는 유기체의 다른 생물학적 성분, 즉 다른 염색체 및 염색체외 DNA 및 RNA, 및 단백질로부터 실질적으로 분리되거나, 거기에서 생산되거나, 또는 정제된 것을 의미한다. "단리된" 핵산, 펩티드 및 단백질은 따라서 표준 정제 방법에 의해 정제된 핵산 및 단백질을 포함한다. "단리된" 핵산, 펩티드 및 단백질은 조성물의 일부일 수 있고, 조성물이 핵산, 펩티드 또는 단백질의 천연 환경의 일부가 아닌 경우에 여전히 단리될 수 있다. 이 용어는 또한 숙주 세포에서 재조합 발현에 의해 제조된 핵산, 펩티드 및 단백질 뿐만 아니라 화학적으로 합성된 핵산을 포함한다.

본원에서 사용되는, 용어 "폴리뉴클레오티드" 는 동의어로 "핵산 분자", "뉴클레오티드" 또는 "핵산" 으로 언급되며, 변형되지 않은 RNA 또는 DNA 또는 변형된 RNA 또는 DNA 일 수 있는 임의의 폴리리보뉴클레오티드 또는 폴리데옥시리보뉴클레오티드를 언급한다. "폴리뉴클레오티드" 는, 제한 없이 단일- 및 이중-가닥 DNA, 단일- 및 이중-가닥 영역의 혼합물인 DNA, 단일- 및 이중-가닥 RNA, 및 단일- 및 이중-가닥 영역의 혼합물인 RNA, 단일-가닥 또는, 더욱 전형적으로, 이중-가닥 또는 단일- 및 이중-가닥 영역의 혼합물일 수 있는 DNA 및 RNA 를 포함하는 하이브리드 분자를 포함한다. 또한, "폴리뉴클레오티드" 는 RNA 또는 DNA 또는 RNA 와 DNA 둘다를 포함하는 삼중-가닥 영역을 언급한다. 용어 폴리뉴클레오티드는 또한 하나 이상의 변형된 염기를 함유하는 DNA 또는 RNA 및 안정성 또는 다른 이유로 변형된 백본을 갖는 DNA 또는 RNA 를 포함한다. "변형된" 염기는, 예를 들어, 트리틸화된 염기 및 흔치 않은 염기 예컨대 이노신을 포함한다 포함한다. 다양한 변형이 DNA 및 RNA 에 대해 이루어질 수 있고; 따라서, "폴리뉴클레오티드" 는 자연에서 전형적으로 발견되는 바와 같은 폴리뉴클레오티드의 화학적, 효소적 또는 대사적으로 변형된 형태, 뿐만 아니라 바이러스 및 세포에 특징적인 DNA 및 RNA 의 화학적 형태를 포괄한다. "폴리뉴클레오티드" 는 또한 종종 올리고뉴클레오티드로 지칭되는 비교적 짧은 핵산 사슬을 포괄한다.

본원에서 사용되는, 용어 "벡터" 는 세그먼트의 복제 또는 발현을 야기하기 위해 다른 핵산 세그먼트가 작동가능하게 삽입될 수 있는 레플리콘이다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "숙주 세포" 는 본 발명의 핵산 분자를 포함하는 세포를 지칭한다. "숙주 세포" 는 임의 유형의 세포, 예를 들어 1 차 세포, 배양 중인 세포, 또는 세포주로부터의 세포일 수 있다. 한 구현예에서, "숙주 세포" 는 본 발명의 핵산 분자로 트랜스펙션 또는 형질도입된 세포이다. 또 다른 구현예에서, "숙주 세포" 는 이러한 트랜스펙션 또는 형질도입된 세포의 자손 또는 잠재적 자손이다. 세포의 자손은 예를 들어 후속 세대 또는 숙주 세포 게놈 내로의 핵산 분자의 통합에서 발생할 수 있는 돌연변이 또는 환경적 영향으로 인해 부모 세포와 동일할 수 있거나 동일하지 않을 수 있다.

본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "발현" 은, 유전자 산물의 생합성을 지칭한다. 용어는 RNA 로의 유전자의 전사를 포함한다. 용어는 또한 하나 이상의 폴리펩티드로의 RNA 의 번역을 포함하며, 모든 자연적으로 발생하는 전사후 및 번역후 변형을 추가로 포함한다. 발현된 CAR 은 숙주 세포의 세포질 내에 있을 수 있거나, 세포 배양물의 성장 배지와 같은 세포외 환경 내로 있을 수 있거나, 세포 멤브레인에 고정될 수 있다.

본원에서 사용되는, 용어 "면역세포" 또는 "면역 이펙터 세포" 는 면역반응, 예를 들어, 면역 이펙터 반응의 촉진에 관여하는 세포를 의미한다. 면역세포의 예는 T 세포, B 세포, 자연 살해 (NK) 세포, 비만 세포, 및 골수-유래 식세포를 포함한다. 특정 구현예에 따르면, 조작된 면역 세포는 T 세포이고, 이들이 본 발명의 CAR 를 발현하도록 조작되기 때문에 CAR-T 세포로서 지칭된다.

본원에서 사용되는, 용어 "조작된 면역 세포" 는, 면역 이펙터 세포로도 지칭되는, 세포의 전체 유전 물질에 DNA 또는 RNA 형태의 추가의 유전 물질을 첨가함으로써 유전적으로 변형된 면역 세포를 의미한다. 본원의 구현예에 따르면, 조작된 면역 세포는 본 발명에 따른 CAR 구축물을 발현하도록 유전적으로 변형되었다.

키메라 항원 수용체 (CAR)

본원에서 사용되는, 용어 "키메라 항원 수용체" (CAR) 는 항원 또는 표적에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 세포외 도메인, 막관통 도메인 및 세포내 T 세포 수용체-활성화 신호전달 도메인을 포함하는 재조합 폴리펩티드를 의미한다. CAR 의 세포외 도메인과 표적 세포의 표면 상의 표적 항원의 결합은 CAR 의 군집화를 초래하고 CAR-함유 세포에 활성화 자극을 전달한다. CAR 은 면역 이펙터 세포의 특이성을 재지향시키고, 증식, 사이토카인 생산, 식세포작용 및/또는 표적 항원-발현 세포의 세포사를 매개할 수 있는 분자의 생산을 주 조직 적합성 (MHC)-독립적 방식으로 촉발시킨다.

하나의 양태에서, CAR 은 항원 결합 도메인, 힌지 영역, 공자극성 도메인, 활성화 도메인 및 막관통 영역을 포함한다. 하나의 양태에서, CAR 은 항원 결합 도메인, 힌지 영역, 두 개의 공자극성 도메인, 활성화 도메인 및 막관통 영역을 포함한다. 하나의 양태에서, CAR 은 두 개의 항원 결합 도메인, 힌지 영역, 공자극성 도메인, 활성화 도메인 및 막관통 영역을 포함한다. 하나의 양태에서, CAR 은 두 개의 항원 결합 도메인, 힌지 영역, 두 개의 공자극성 도메인, 활성화 도메인 및 막관통 영역을 포함한다.

본원에서 사용되는, 용어 "신호 펩티드" 는 신생 CAR 단백질의 아미노-말단 (N-말단) 에서의 리더 서열을 지칭하며, 이는 신생 단백질을 소포체 및 후속 표면 발현으로 동시-번역 또는 후-번역적으로 지향시킨다.

본원에서 사용되는, 용어 "세포외 항원 결합 도메인", "세포외 도메인", 또는 "세포외 리간드 결합 도메인" 은 세포 막 외부에 위치하고 항원, 표적 또는 리간드에 결합할 수 있는 CAR 의 부분을 의미한다.

본원에서 사용되는, 용어 "힌지 영역" 은 CAR 단백질의 두 개의 인접한 도메인, 예를 들어, 세포외 도메인 및 막관통 도메인을 연결하는 CAR 의 부분을 지칭한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "막관통 도메인" 은 세포 멤브레인을 가로질러 연장되며 CAR 를 세포 멤브레인에 고정시키는 CAR 의 부분을 지칭한다. 때때로 이를 "막관통 영역" 으로 지칭한다.

공자극성 도메인

본원에서 사용되는, 키메라 항원 수용체는 그의 효능을 증가시키기 위해 공자극성 (신호전달) 도메인을 포함할 수 있다. 공자극성 (신호전달) 도메인은 공자극성 분자로부터 유래할 수 있다. 공자극성 분자는 효율적인 면역 반응에 요구되는 항원 수용체 이외의 세포 표면 분자 또는 그의 리간드이다. 공자극성 도메인은 CD28, CD28T, OX40, 4-1BB/CD137, CD2, CD3 (알파, 베타, 델타, 엡실론, 감마, 제타), CD4, CD5, CD7, CD9, CD16, CD22, CD27, CD30, CD33, CD37, CD40, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154, 프로그램된 사망-1 (PD-1), 유도성 T 세포 공자극자 (ICOS), 림프구 기능-관련 항원-1 (LFA-1; CD11a 및 CD18), CD247, CD276 (B7-H3), LIGHT (종양 괴사 인자 슈퍼패밀리 일원 14; TNFSF14), NKG2C, Ig 알파 (CD79a), DAP10, Fc 감마 수용체, MHC 클래스 I 분자, TNFR, 인테그린, 신호전달 림프구 활성화 분자, BTLA, 톨 리간드 수용체, ICAM-1, CDS, GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD8 알파, CD8 베타, IL-2R 베타, IL-2R 감마, IL-7R 알파, ITGA4, VLA1, CD49a, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, ITGAE, CD103, ITGAL, CD1a, CD1b, CD1c, CD1d, ITGAM, ITGAX, ITGB1, CD29, ITGB2 (CD18), ITGB7, NKG2D, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD 160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Lyl08), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a, CD83 리간드, 사이토카인 수용체, 활성화 NK 세포 수용체, 또는 단편 또는 이들의 임의의 조합을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는 공자극성 분자로부터 유래될 수 있다.

활성화 도메인

본원에서 사용되는, 키메라 항원 수용체는 활성화 도메인을 포함할 수 있다. 활성화 도메인은 CD3 을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. CD3 은 천연 T 세포 상의 T 세포 수용체의 요소이고, CAR 에서 중요한 세포내 활성화 요소인 것으로 밝혀졌다. 바람직한 구현예에서, CD3 은 CD3 제타이다.

힌지 영역

본원에 기술된 바와 같이, 키메라 항원 수용체는 힌지 영역을 포함할 수 있다. 이는 세포외 도메인의 일부이며, 때때로 "스페이서" 영역으로 지칭된다. 표적 세포로부터 원하는 특별한 거리를 달성하기 위해, 상기 논의된 바와 같은 공자극 분자, 면역글로불린 (Ig) 서열, 또는 다른 적합한 분자를 포함하는 다양한 힌지가 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 전체 세포외 영역은 힌지 영역을 포함한다.

막관통 영역

본원에서 사용되는, 키메라 항원 수용체 (CAR) 는 막관통 영역/도메인을 포함할 수 있다. CAR 은 CAR 의 세포외 도메인에 융합된 막관통 도메인을 포함하도록 디자인될 수 있다. 이는 유사하게 CAR 의 세포내 도메인에 융합될 수 있다. 하나의 구현예에서, CAR 에서 도메인 중 하나와 자연적으로 연합된 막관통 도메인이 사용된다. 어떤 경우에, 막관통 도메인은 동일한 또는 상이한 표면 막 단백질의 막관통 도메인에 대한 이러한 도메인의 결합을 회피하여 수용체 복합체의 다른 구성원과의 상호작용을 최소화하기 위해 아미노산 치환에 의해 선별 또는 변형될 수 있다. 막관통 도메인은 천연 또는 합성 공급원으로부터 유래될 수 있다. 공급원이 자연적인 경우, 도메인은 임의의 막-결합 또는 막관통 단백질로부터 유래될 수 있다. 본 발명에서 특히 사용되는 막관통 영역은 CD28, CD28T, OX40, 4-1BB/CD137, CD2, CD3 (알파, 베타, 델타, 엡실론, 감마, 제타), CD4, CD5, CD7, CD9, CD16, CD22, CD27, CD30, CD33, CD37, CD40, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154, 프로그램된 사망-1 (PD-1), 유도성 T 세포 공자극자 (ICOS), 림프구 기능-관련 항원-1 (LFA-1; CD11a 및 CD18), CD247, CD276 (B7-H3), LIGHT (종양 괴사 인자 슈퍼패밀리 일원 14; TNFSF14), NKG2C, Ig 알파 (CD79a), DAP10, Fc 감마 수용체, MHC 클래스 I 분자, TNFR, 인테그린, 신호전달 림프구 활성화 분자, BTLA, 톨 리간드 수용체, ICAM-1, CDS, GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD8 알파, CD8 베타, IL-2R 베타, IL-2R 감마, IL-7R 알파, ITGA4, VLA1, CD49a, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, ITGAE, CD103, ITGAL, CD1a, CD1b, CD1c, CD1d, ITGAM, ITGAX, ITGB1, CD29, ITGB2 (CD18), ITGB7, NKG2D, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD 160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Lyl08), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a, CD83 리간드, 사이토카인 수용체, 활성화 NK 세포 수용체, 면역글로불린 단백질, 또는 단편 또는 이들의 임의의 조합으로부터 유래될 수 있으나 (즉 이를 포함하거나 또는 이로부터 조작될 수 있으나), 이에 한정되지 않는다.

면역 세포

특정 양태에 따르면, 본 발명은 CAR 을 인코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드 또는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터를 포함하는 면역 세포인 세포를 제공한다. 단리된 폴리뉴클레오티드 및/또는 본 발명의 벡터를 포함하는 면역 세포는 "조작된 면역 세포" 로 지칭될 수 있다. 바람직하게는, 조작된 면역 세포는 인간으로부터 유래된다 (재조합 되기 전의 인간 기원임).

조작된 면역 세포는, 예를 들어, 림프 계통의 세포일 수 있다. 림프계 세포의 비제한적인 예는 T 세포 및 자연 살해 (NK) 세포를 포함할 수 있다. T 세포는 T 세포 수용체 (TCR) 를 발현하며, 대부분의 세포는 α 및 β 사슬을 발현하고, 더 작은 집단은 γ 및 δ 사슬을 발현한다. 본 발명의 조작된 면역 세포로서 유용한 T 세포는 CD4⁺ 또는 CD8⁺ 일 수 있고, T 헬퍼 세포 (CD4⁺), 세포독성 T 세포 (또한 세포독성 T 림프구, CTL 로서 지칭됨; CD8⁺ 세포), 및 기억 T 세포, 이에 포함되는 것으로 중추 기억 T 세포, 줄기-유사 기억 T 세포, 및 이펙터 기억 T 세포, 자연 살해자 T 세포, 점막 결합 불변 T 세포, 및 γδ T 세포를 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 다른 예시적인 면역 세포는 마크로파지, 항원 제시 세포 (APC), 또는 세포-매개되는 면역 반응의 저해인자, 예를 들어, 면역 체크포인트 저해인자 경로 수용체 (예를 들어, PD-1) 를 발현하는 임의의 면역 세포를 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따라 사용될 수 있는 면역 세포의 전구체 세포는 조혈 줄기 및/또는 선조 세포를 포함한다. 조혈 줄기 및/또는 선조 세포는 당업계에 공지된 방법에 의해 사이토카인 동원 후에 골수, 제대혈, 성인 말초 혈액 등으로부터 유래될 수 있다. 면역 세포는 본 발명의 CAR 을 재조합적으로 발현하도록 조작된다.

면역 세포 및 이의 전구체 세포는 상업적으로 이용가능한 방법을 포함하는 당업계에 공지된 방법에 의해 단리될 수 있다 (예를 들어, Rowland Jones et al., Lymphocytes: A Practical Approach, Oxford University Press, NY 1999 참조). 면역 세포 또는 이의 전구체에 대한 공급원은 말초 혈액, 제대혈, 골수, 또는 조혈 세포의 다른 공급원을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 다양한 기술을 이용하여 세포를 분리하여 원하는 면역 세포를 단리 또는 농축할 수 있다. 예를 들어, 음성 선별 방법을 사용하여 원하는 면역 세포가 아닌 세포를 제거할 수 있다. 또한, 양성 선별 방법을 사용하여 원하는 면역 세포 또는 그의 전구체를 단리 또는 농축할 수 있거나, 양성 및 음성 선별 방법의 조합이 이용될 수 있다. 특정 유형의 세포, 예를 들어 특정 T 세포를 단리하고자 하는 경우, 다양한 세포 표면 마커 또는 마커의 조합 (예를 들어, CD3, CD4, CD8, CD34) 을 사용하여 세포를 분리할 수 있다.

면역 세포 또는 이의 전구체 세포는 본 발명의 치료 방법에서 투여되는 대상체에 대해 자가유래 또는 비자가유래일 수 있다. 자가유래 세포는 CAR 을 재조합적으로 발현하는 조작된 면역 세포가 투여될 대상체로부터 단리된다. 임의로, 세포는 백혈구 채혈에 의해 수득될 수 있으며, 여기서 백혈구는 회수된 혈액으로부터 선택적으로 제거되고, 재조합으로 만들어지고, 그 후 공여자 내로 재주입된다. 대안적으로, 대상체가 아닌 비자가유래 공여자로부터의 동종이계 세포를 사용할 수 있다. 비자가유래 공여자의 경우, 적절한 수준의 적합성을 확인하기 위해 세포를 인간 백혈구 항원 (HLA) 에 대해 유형 분류하고 맞춘다. 자가유래 및 비자가유래 세포 모두에 대해, 세포는 사용 준비가 될 때까지 임의로 동결보존될 수 있다.

본 발명의 CAR 의 재조합 발현을 위해 사용될 수 있는 면역 세포를 단리하기 위한 다양한 방법이 이전에 설명되었고, 말초 공여자 림프구를 사용하는 것 (Sadelain et al., Nat. Rev. Cancer 2003; 3:35-45; Morgan et al., Science 2006; 314:126-9), 종양 생검에서 종양 침윤 림프구 (TIL) 로부터 유래된 림프구 배양물을 사용하는 것 (Panelli et al., J. Immunol. 2000; 164:495-504; Panelli et al., J. Immunol. 2000; 164:4382-92) 및 항원-제시 세포 (AAPC) 또는 수지상 세포를 사용하여 선택적으로 시험관 내에서 확장된 항원-특이적 말초 혈액 백혈구를 사용하는 것 (Dupont et al., Cancer Res. 2005; 65:5417-427; Papanicolaou et al., Blood 2003; 102:2498-505) 을 포함하지만 이에 제한되지 않는 것이 사용될 수 있다 줄기 세포를 사용하는 경우, 세포는 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 단리될 수 있다 (예를 들어, Klug et al., Hematopoietic Stem Cell Protocols, Humana Press, NJ 2002; Freshney et al., Culture of Human Stem Cells, John Wiley & Sons 2007 참조).

특정 구현예에 따르면, 조작된 면역 세포의 생성 방법은 개체로부터 단리된 면역 효과기 세포를 트랜스펙션 또는 형질도입하여 면역 효과기 세포가 본 발명의 구현예에 따른 하나 이상의 CAR(들) 을 발현하게 하는 것을 포함한다. 면역요법을 위한 면역 세포의 제조 방법은 예를 들어 본원에 참조로 포함되는 WO2014/130635, WO2013/176916 및 WO2013/176915 에서 기재되어 있다. 조작된 면역 세포를 제조하는데 사용될 수 있는 개별 단계는 예를 들어 본원에 참조로 포함되는 WO2014/039523, WO2014/184741, WO2014/191128, WO2014/184744 및 WO2014/184143 에서 개시되어 있다.

특정 구현예에서, 면역 효과기 세포, 예컨대 T 세포는 본 발명의 CAR 로 유전적으로 변형 (예를 들어, CAR 을 인코딩하는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터로 형질도입) 된 다음, 시험관내 활성화 및 확장된다. 다양한 구현예에서, T 세포는 예를 들어 본원에 참조로 포함되는 US6352694, US6534055, US6905680, US6692964, US5858358, US6887466, US6905681, US7144575, US7067318, US7172869, US7232566, US7175843, US5883223, US6905874, US6797514, US6867041, US2006/121005 에서 기재된 바와 같은 방법을 사용하여, CAR 을 발현하기 위한 유전적 변형 전 또는 후에 활성화 및 확장될 수 있다. T 세포는 시험관내 또는 생체내에서 확장될 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 T 세포는 CD3/TCR 복합체-관련 신호를 자극하는 작용제 및 T 세포의 표면 상의 공자극성 분자를 자극하는 리간드가 부착된 표면과 접촉함으로써 증식될 수 있다. 비제한적인 예로서, T 세포 집단은 본원에 기술된 바와 같이, 예컨대 항-CD3 항체, 또는 그의 항원-결합 단편, 또는 표면 상에 고정된 항-CD3 항체와의 접촉에 의해, 또는 칼슘 이오노포어와 함께 단백질 키나아제 C 활성화제 (예를 들어, 브리오스타틴) 와의 접촉에 의해, 또는 CAR 자체의 활성화에 의해 자극될 수 있다. T 세포의 표면 상에서 부속 분자의 공자극을 위해, 부속 분자에 결합하는 리간드가 사용된다. 예를 들어, T 세포 집단을 T 세포의 증식을 자극하기에 적절한 조건 하에서 항-CD3 항체 및 항-CD28 항체와 접촉시킬 수 있다. T 세포 배양에 적합한 조건은, 예를 들어, 혈청 (예를 들어, 소 태아 또는 인간 혈청), 사이토카인, 예컨대 IL-2, IL-7, IL-15, 및/또는 IL-21, 인슐린, IFN-g, GM-CSF, TGFβ 및/또는 당업자에게 공지된 세포 성장을 위한 임의의 다른 첨가제를 비롯한 증식 및 생존력에 필요한 인자를 함유할 수 있는 적절한 배지 (예를 들어, 최소 필수 배지 또는 RPMI 배지 1640 또는 X-vivo 5 (Lonza)) 를 포함한다. 다른 구현예에서, 본원에 참조로 포함되는 US6040177, US5827642, 및 WO2012129514 에 기재된 바와 같은 방법을 사용하여, 피더 세포 및 적절한 항체 및 사이토카인을 사용하여 T 세포는 증식하도록 활성화 및 자극될 수 있다.

항체 및 항원 결합 도메인

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항체" 는 넓은 의미로 사용되며 인간, 인간화, 복합 및 키메라 항체, 및 항체 단편 (단일클론 또는 다클론) 을 포함하는 면역글로불린 또는 항체 분자를 포함한다. 일반적으로, 항체는 특정 항원에 대한 결합 특이성을 나타내는 단백질 또는 펩티드 사슬이다. 항체 구조는 널리 공지되어 있다. 면역글로불린은 중쇄 불변 도메인 아미노산 서열에 따라 5 개 주요 부류 (즉, IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM) 로 배정될 수 있다. IgA 및 IgG 는 이소타입 IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 로서 추가로 하위분류된다. 따라서, 본 발명의 항체는 5 개의 주요 부류 중 어느 하나 또는 상응하는 하위부류의 것일 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 항체는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 이다. 척추동물 종의 항체 경쇄는 그의 불변 도메인의 아미노산 서열에 기반한, 2 개의 명확히 구별되는 유형, 즉 카파 및 람다 중 하나에 배정될 수 있다. 따라서, 본 발명의 항체는 카파 또는 람다 경쇄 불변 도메인을 함유할 수 있다. 특정 구현예에 따르면, 본 발명의 항체는 래트 또는 인간 항체로부터의 중쇄 및/또는 경쇄 불변부를 포함한다. 중쇄 및 경쇄 불변 도메인에 추가로, 항체는 경쇄 가변부 및 중쇄 가변부로 구성되는 항원-결합 부위를 함유하며, 이의 각각은 3 개의 도메인을 포함한다 (즉, 상보성 결정 영역 1-3; CDR1, CDR2 및 CDR3). 경쇄 가변 영역 도메인은 대안적으로 LCDR1, LCDR2 및 LCDR3 으로 지칭되며, 중쇄 가변 영역 도메인은 대안적으로 HCDR1, HCDR2 및 HCDR3 으로 지칭된다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "단리된 항체" 는 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 나타낸다 (예를 들어, FOLR1 에 특이적으로 결합하는 단리된 항체에는 FOLR1 에 결합하지 않는 항체가 실질적으로 없음). 또한, 단리된 항체에는 다른 세포 물질 및/또는 화학 물질이 실질적으로 없다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "단일클론 항체" 또는 “mAb” 는 실질적으로 균질한 항체의 모집단으로부터 수득되는 항체를 나타내며, 즉, 모집단을 포함하는 개별 항체는 소량으로 존재할 수 있는, 자연적으로 발생할 수 있는 돌연변이를 제외하고는, 동일하다. 본 발명의 단일클론 항체는 하이브리도마 방법, 파지 디스플레이 기술, 단일 림프구 유전자 클로닝 기술 또는 재조합 DNA 방법에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 단일클론 항체는 인간 중쇄 이식 유전자 및 경쇄 이식 유전자를 포함하는 게놈을 갖는 트랜스제닉 마우스 또는 래트와 같은 트랜스제닉 비인간 동물로부터 수득한 B 세포를 포함하는 하이브리도마에 의해 생산될 수 있다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항원-결합 단편" 및/또는 "항원 결합 도메인" 은 항체 단편 예를 들어, 디아바디, Fab, Fab', F(ab')2, Fv 단편, 디술피드 안정화된 Fv 단편 (dsFv), (dsFv)2, 이중특이적 dsFv (dsFv-dsFv'), 디술피드 안정화된 디아바디 (ds 디아바디), 단일 사슬 항체 분자 (scFv), 단일 도메인 항체 (sdab) scFv 이량체 (2 가 디아바디), 하나 이상의 CDR 을 포함하는 항체의 일부로부터 형성된 다중특이적 항체, 카멜화 (camelized) 단일 도메인 항체, 나노바디, 도메인 항체, 2 가 도메인 항체, 또는 항원에 결합하나 전체 항체 구조를 포함하지 않는 임의의 다른 항체 단편을 지칭한다. 항원 결합 도메인은 부모 항체가 결합하는 동일한 항원에 결합할 수 있다. 특정 구현예에 따르면, 항원 결합 도메인은 단일 사슬 항체 분자 (scFv) 를 포함한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "단일 사슬 항체" 는 약 5 내지 약 20 개 아미노산의 짧은 펩티드에 의해 연결된 중쇄 가변부 및 경쇄 가변부를 포함하는, 당해 분야에서의 종래의 단일 사슬 항체를 지칭한다. 본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "단일 도메인 항체" 는 중쇄 가변 영역 및 중쇄 불변부를 포함하거나 중쇄 가변 영역만을 포함하는 당해 분야에서의 종래의 단일 도메인 항체를 나타낸다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "인간 항체" 는 당업계에 공지된 임의의 기술을 사용하여 만들어진 인간에 의해 생성된 항체에 상응하는 아미노산 서열을 갖는 항체 또는 인간에 의해 생성된 항체를 나타낸다. 인간 항체의 이러한 정의는 온전한 또는 전장 항체, 이의 단편, 및/또는 적어도 하나의 인간 중쇄 및/또는 경쇄 폴리펩티드를 포함하는 항체를 포함한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "인간화된 항체" 및/또는 "인간화된 항원 결합 도메인" 은 항원 결합 도메인의 항원-결합 특성이 유지되나 인체 내 그의 항원성이 감소되도록, 인간 항체 및/또는 인간 항원 결합 도메인에 대한 서열 상동성을 증가시키기 위해 변형되는 비-인간 항체 및/또는 비-인간 항원 결합 도메인을 지칭한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "키메라 항체" 및/또는 "키메라 항원 결합 도메인" 은 면역글로불린 분자의 아미노산 서열이 둘 이상의 종으로부터 유래하는 항체 및/또는 항원 결합 도메인을 지칭한다. 경쇄 및 중쇄 둘 모두의 가변 영역는 종종, 원하는 특이성, 친화성 및 능력을 갖는 한 종의 포유동물 (예를 들어, 마우스, 래트, 토끼 등) 로부터 유래한 항체 및/또는 항원 결합 도메인의 가변 영역에 상응하는 한편, 불변부는 또 다른 종의 포유동물 (예를 들어, 인간) 로부터 유래한 항체 및/또는 항원 결합 도메인의 서열에 상응하여, 그 종에서 면역 반응을 유발하는 것을 방지한다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "다중특이적 항체" 는 복수의 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함하는 항체를 지칭하며, 여기서 복수의 제 1 면역글로불린 가변 도메인 서열은 제 1 에피토프에 대한 결합 특이성을 가지고, 복수의 제 2 면역글로불린 가변 도메인 서열은 제 2 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 동일한 항원, 예를 들어 동일한 단백질 (또는 다량체성 단백질의 하위단위) 상에 있다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 중첩되거나 실질적으로 중첩된다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 중첩되지 않거나 실질적으로 중첩되지 않는다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 상이한 항원, 예를 들어 상이한 단백질 (또는 다량체성 단백질의 하위단위) 상에 있다. 한 구현예에서, 다중특이적 항체는 제 3, 제 4 또는 제 5 면역글로불린 가변 도메인을 포함한다. 한 구현예에서, 다중특이적 항체는 이중특이적 항체 분자, 삼중특이적 항체 분자, 또는 사중특이적 항체 분자이다.

본원에서 사용된 바와 같은, 용어 "이중특이적 항체" 는 2 개 이하의 에피토프 또는 2 개의 항원에 결합하는 다중특이적 항체를 나타낸다. 이중특이적 항체는 제 1 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 제 1 면역글로불린 가변 도메인 서열 및 제 2 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 제 2 면역글로불린 가변 도메인 서열을 특징으로 한다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 동일한 항원, 예를 들어 동일한 단백질 (또는 다량체성 단백질의 하위단위) 상에 있다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 중첩되거나 실질적으로 중첩된다. 한 구현예에서, 제 1 및 제 2 에피토프는 상이한 항원, 예를 들어 상이한 단백질 (또는 다량체성 단백질의 하위단위) 상에 있다. 한 구현예에서, 이중특이적 항체는 제 1 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 중쇄 가변 도메인 서열 및 경쇄 가변 도메인 서열, 및 제 2 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 중쇄 가변 도메인 서열 및 경쇄 가변 도메인 서열을 포함한다. 한 구현예에서, 이중특이적 항체는 제 1 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 반-항체 (half antibody) 또는 이의 단편, 및 제 2 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 반-항체 또는 이의 단편을 포함한다. 한 구현예에서, 이중특이적 항체는 제 1 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 scFv 또는 이의 단편, 및 제 2 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 scFv 또는 이의 단편을 포함한다. 한 구현예에서, 제 1 에피토프는 FOLR1 상에 위치하며 제 2 에피토프는 PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, CD73, 아펠린, CTLA-4, EGFR, HER-2, CD3, CD19, CD20, CD33, CD47, TIP-1, CLDN18.2, DLL3 및/또는 다른 종양 관련 면역 저제제 또는 표면 항원 상에 위치한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "FOLR1" 은 폴레이트 수용체 α (FRα) 또는 폴레이트 결합 단백질 (FBP) 로도 공지된 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 을 나타내며, 이는 폴레이트의 활성 형태, 5-메틸테트라히드로폴레이트 (5-MTF), 및 이의 유도체에 대해 높은 친화성을 가지며 이를 세포에 전달하는, 세포 표면 상의 글리코실포스파티딜이노시톨 (GPI)-고정 멤브레인 단백질이다 (Salazarand Ratnam, Cancer Metastasis Rev 2007; 26:141-52). FOLR1 은 난소암, 폐암 및 유방암과 같은 특정 고형 종양에서 과발현되기 때문에 종양학 표적이 되었으나 (Toffoli et al., Int J Cancer 1997; 74:193-198 및 Boogerd et al., Oncotarget 2016; 7:17442-17454), 이의 발현은 제한된 정상 인간 조직에서 낮은 수준이다 (Weitman, et al., Cancer Res 1992; 52:3396-3401). 이러한 관찰과 일치하여, 지금까지 FOLR1-표적화된 소형 및 대형 분자로 수행된 1 상 임상 시험에서 우수한 약물 내성이 나타났다 (Cheung et al., Oncotarget 2016; 7:52553-52574). 따라서, FOLR1 은 FOLR1-양성 암을 치료 및 치유하기 위한 CAR-T 세포 치료요법에 대한 이상적인 표적이다. 인간 FOLR1 의 예시적인 아미노산 서열은 GenBank 등록 번호 NP_057937 (SEQ ID NO:135) 로 표시된다.

본원에서 사용되는, "FOLR1 에 특이적으로 결합하는" 항체 및/또는 항원 결합 도메인은, FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 1×10^-7 M 이하, 바람직하게는 1×10^-8 M 이하, 보다 바람직하게는 5×10^-9 M 이하, 1×10^-9 M 이하, 5×10^-10 M 이하, 또는 1×10^-10 M 이하의 KD 로 결합하는 항체 및/또는 항원 결합 도메인을 나타낸다. 용어 "KD" 는 해리 상수를 나타내고, 이는 Kd 대 Ka 의 비 (즉, Kd/Ka) 로부터 수득되며 몰 농도 (M) 로 표시된다. 항원 결합 도메인에 대한 KD 값은 본 개시물을 고려하여 당업계의 방법을 사용하여 결정될 수 있다. 예를 들어, 항체 및/또는 항원 결합 도메인의 KD 는 표면 플라스몬 공명, 예컨대 바이오센서 시스템, 예를 들어 Biacore® 시스템을 사용하거나, 생체층 간섭계 기술, 예컨대 Octet RED96 시스템을 사용하여 결정될 수 있다.

항체 및/또는 항원 결합 도메인의 KD 값이 작을수록, 항체 및/또는 항원 결합 도메인이 표적 항원에 결합하는 친화성이 높아진다.

특정 양태에 따르면, 본 발명은 항원 결합 도메인을 포함하는 키메라성 항원 수용체 (CAR) 에 관한 것으로, 항원 결합 도메인은 하기 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함한다:

(1) SEQ ID NOs: 17, 18, 19, 41, 42 및 43, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 20, 21, 22, 44, 45 및 46, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 23, 24, 25, 47, 48 및 49, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 26, 27, 28, 50, 51 및 52, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 29, 30, 31, 53, 54 및 55, 각각;

(6) SEQ ID NOs: 32, 33, 34, 56, 57 및 58, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 35, 36, 37, 59, 60 및 61, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 38, 39, 40, 62, 63 및 64, 각각;

또다른 특정 양태에 따르면, 본 발명은 항원 결합 도메인을 포함하는 키메라성 항원 수용체 (CAR) 에 관한 것으로, 항원 결합 도메인은 하기 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함한다:

(1) SEQ ID NOs: 65, 66, 67, 89, 90 및 91, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 68, 69, 70, 92, 93 및 94, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 71, 72, 73, 95, 96 및 97, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 74, 75, 76, 98, 99 및 100, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 77, 78, 79, 101, 102 및 103, 각각;

(6) SEQ ID NOs: 80, 81, 82, 104, 105 및 106, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 83, 84, 85, 107, 108 및 109, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 86, 87, 88, 110, 111 및 112, 각각;

또다른 특정 양태에 따르면, 본 발명은 항원 결합 도메인이 SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 또는 15 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 또는 16 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항원 결합 도메인에 관한 것이다.

또다른 특정 양태에 따르면, 본 발명은 하기를 포함하는 항원 결합 도메인에 관한 것이다:

또다른 특정 양태에 따르면, 항원 결합 도메인은 인간화되고 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

또다른 특정 양태에 따르면, 항원 결합 도메인은 인간화되고 하기를 포함한다:

또다른 특정 양태에 따르면, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다.

특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다. 특정 구현예에서, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다. 특정 구현예에서, 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 은 SEQ ID NOs:159-170 중 어느 하나와 적어도 95%, 적어도 96%, 적어도 97%, 적어도 98%, 또는 적어도 99% 동일한 폴리펩티드 서열을 포함한다. 특정 구현예에서, 인간화된 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 은 SEQ ID NOs:159-170 로 이루어지는 군으로부터 선택되는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드 서열을 포함한다.

또다른 특정 양태에 따르면, 키메라 항원 수용체는 하나 이상의 항원 결합 도메인을 포함한다.

또 다른 특정 양태에 따르면, 세포내 신호전달 도메인은 하나 이상의 공자극성 도메인 및 하나 이상의 활성화 도메인을 포함한다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드에 관한 것이며, 여기서 CAR 은 본 발명의 이의 항원 결합 도메인을 포함한다. 단백질의 아미노산 서열을 변화시키지 않고 단백질의 코딩 서열이 변화 (예를 들어, 대체, 결실, 삽입 등) 될 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해될 것이다. 따라서, 당업자는 본 발명의 이의 항원 결합 도메인을 인코딩하는 핵산 서열이 단백질의 아미노산 서열을 변화시키지 않고 변경될 수 있음을 이해할 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 CAR 을 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터에 관한 것이며, 여기서 CAR 은 본 발명의 이의 항원 결합 도메인을 포함한다. 플라스미드, 코스미드, 파지 벡터 또는 바이러스 벡터와 같은, 본 개시물을 고려하여 당업자에게 공지된 임의의 벡터가 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, 벡터는 플라스미드와 같은 재조합 발현 벡터이다. 벡터는 발현 벡터의 종래의 기능을 확립하기 위한 임의의 요소, 예를 들어 프로모터, 리보솜 결합 요소, 터미네이터, 인핸서, 선택 마커 및 복제 원점을 포함할 수 있다. 프로모터는 항시성, 유도성, 또는 억제성 프로모터일 수 있다. 핵산을 세포에 전달할 수 있는 다수의 발현 벡터는 당업계에 공지되어 있으며, 세포에서 이의 항원-결합 도메인을 생산하기 위해 본원에서 이용될 수 있다. 종래의 클로닝 기법 또는 인공 유전자 합성을 사용하여 본 발명의 구현예에 따른 재조합 발현 벡터를 생성할 수 있다.

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터로 형질도입된 세포에 관한 것이다. 용어 "형질도입된" 또는 "형질도입" 은 외인성 핵산이 숙주 세포 내로 전달 또는 도입되는 과정을 의미한다. "형질도입된" 세포는 외인성 핵산으로 형질도입된 것이다. 세포는 일차 대상 세포 및 그의 자손을 포함한다. 특정 구현예에서, 세포는 CAR-T 세포, 바람직하게는 인간 CAR-T 세포이며, 여기에서 T 세포는 질환 예컨대 암을 치료하기 위해 본 발명의 CAR 를 발현하도록 조작된다. 특정 구현예에서, 세포는 CAR-NK 세포, 바람직하게는 인간 CAR-NK 세포이며, 여기에서 본 발명의 CAR 를 발현하도록 조작된 NK 세포가 질환 예컨대 암을 치료하기 위해 사용된다.

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 T 세포에 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터를 형질도입하여 CAR-T 세포를 제조하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 CAR-T 세포를 생산하는 조건 하에 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 T 세포를 배양하고, CAR-T 세포를 회수하는 것을 포함하는, 본 발명의 이의 CAR-T 세포를 생산하는 방법에 관한 것이다.

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 NK 세포에 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터를 형질도입하여 CAR-NK 세포를 제조하는 방법에 관한 것이다.

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 그의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 NK 세포를 CAR-NK 세포를 생산하는 조건 하에 배양하는 단계, 및 CAR-NK 세포를 회수하는 단계를 포함하는, 본 발명의 CAR-NK 세포를 생산하는 방법에 관한 것이다.

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 본 발명의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 포함하는 RNA-조작된 세포의 집단을 생성하는 방법에 관한 것이다. 방법은 세포의 집단을 본 발명의 CAR 을 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드와 접촉시키는 단계를 포함하며, 여기에서 단리된 폴리뉴클레오티드는 시험관내 전사된 RNA 또는 합성 RNA 이다.

또다른 일반적인 양상에서, 본 발명은 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이고, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 중 임의의 것과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

또다른 특정 양상에 따르면, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 하기를 포함한다:

또 다른 특정 양태에 따르면, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 FOLR1 에 결합될 수 있고, 효과기-매개 종양 세포 용해를 유도할 수 있고, 접합된 약물의 동원을 매개할 수 있고/있거나 암-사멸 효과를 갖는 또 다른 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편과 이중특이적 항체를 형성할 수 있다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산을 포함하는 벡터를 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 생산하는 조건 하에 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 세포를 배양하고, 세포 또는 배양물로부터 항체 또는 항원-결합 단편을 회수하는 것을 포함하는, 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 생산하는 방법에 관한 것이다.

약학 조성물

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 단리된 폴리뉴클레오티드, 본 발명의 단리된 폴리펩티드, 본 발명의 숙주 세포, 및/또는 본 발명의 조작된 면역 세포 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

본원에서 사용되는 용어 "약학적 조성물" 은 본 발명의 단리된 폴리뉴클레오티드, 본 발명의 단리된 폴리펩티드, 본 발명의 숙주 세포, 본 발명의 조작된 면역 세포, 및/또는 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 포함하는 제품을 의미한다. 본 발명의 폴리뉴클레오티드, 폴리펩티드, 숙주 세포, 조작된 면역 세포, 및/또는 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편 및 이들을 포함하는 조성물은 또한 본원에서 언급된 치료적 응용을 위한 약제의 제조에서 유용하다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "담체" 는 임의의 부형제, 희석제, 충전제, 염, 완충제, 안정화제, 가용화제, 오일, 지질, 지질 함유 소포, 미소구체, 리포솜 피포, 또는 약학 제형에서의 사용을 위해 당업계에 널리 공지된 다른 물질을 나타낸다. 담체, 부형제 또는 희석제의 특징이 특정 적용을 위한 투여 경로에 의존적일 것임이 이해될 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "약학적으로 허용가능한 담체" 는 본 발명에 따른 조성물의 효과 또는 본 발명에 따른 조성물의 생물학적 활성을 방해하지 않는 비-독성 물질을 나타낸다. 특정 구현예에 따르면, 본 개시물을 고려하여, 폴리뉴클레오티드, 폴리펩티드, 숙주 세포 및/또는 조작된 면역 세포 약학 조성물에서 사용하기에 적합한 임의의 약학적으로 허용가능한 담체가 본 발명에서 사용될 수 있다.

약학적으로 허용가능한 담체를 갖는 약학적 활성 성분의 제형은 예를 들어 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy] (예를 들어 21 판 (2005), 및 임의의 이후 판) 에서와 같이, 당업계에 공지되어있다. 추가적 성분의 비-제한적 예는 완충제, 희석제, 용매, 등장성 조절제, 보존제, 안정화제 및 킬레이트제를 포함한다. 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체가 본 발명의 약학 조성물을 제형화하는데 사용될 수 있다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 약학적으로 허용가능한 담체와 조합하여 약학 조성물을 수득하는 것을 포함하는, 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

사용 방법

또다른 일반적 양태에서, 본 발명은 대상체에게 본 발명의 CAR-T 세포 및/또는 CAR-NK 세포를 투여하는 단계를 포함하는 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 암은 예를 들어, 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신장 세포 암종, 방광 요로상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양에서 비제한적으로 선택될 수 있다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암 세포 표면 상의 FOLR1 을 표적화하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 일반적인 양태에서, 본 발명은 본 발명의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 암은 임의의 액형 또는 고형 암일 수 있으며, 이는 예를 들어 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신장 세포 암종, 방광 요로상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양에서 선택될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 구현예에 따르면, CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포는 치료적 유효량의 본 발명의 발현된 CAR 을 포함하고, 약학 조성물은 치료적 유효량의 인간화 항-DLL 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "치료적 유효량" 은 대상체에서의 원하는 생물학적 또는 의학적 반응을 이끌어내는 활성 성분 또는 성분의 양을 나타낸다. 치료적 유효량은 언급된 목적과 관련하여 경험적으로, 및 정례적 방식으로 결정될 수 있다.

CAR 과 관련하여 본원에 사용되는 바와 같이, 치료적 유효량은 이를 필요로 하는 대상체에서 면역 반응을 조절하는 형질도입된 T 세포 또는 NK 세포에서 발현된 CAR 분자의 양을 의미한다. 또한, CAR 과 관련하여 본원에 사용되는 바와 같이, 치료적 유효량은 질환, 장애 또는 병상의 치료를 초래하고; 질환, 장애 또는 병상의 진행을 방지하거나 늦추거나; 질환, 장애 또는 병상과 관련되는 증상을 감소시키거나 완전히 완화시키는, 형질도입된 T 세포 또는 NK 세포에서 발현된 CAR 분자의 양을 의미한다.

CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포와 관련하여 본원에서 사용되는 바와 같이, 치료적 유효량은 이를 필요로 하는 대상체에서의 면역 반응을 조절하는 CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포의 양을 의미한다. 또한, CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포와 관련하여 본원에서 사용되는, 치료적 유효량은 질환, 장애, 또는 병상의 치료를 초래하거나; 질환, 장애 또는 병상의 진행을 방지 또는 지연시키거나; 또는 질환, 장애, 또는 병상과 연관된 증상을 감소시키거나 또는 완전히 완화하는 CAR-T 세포 또는 CAR-NK 세포의 양을 의미한다.

인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편과 관련하여 본원에서 사용되는 바와 같이, 치료적 유효량은 이를 필요로 하는 대상체에서의 면역 반응을 조절하는 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 양을 의미한다. 또한, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편과 관련하여 본원에서 사용되는 바와 같이, 치료적 유효량은 질환, 장애 또는 병상의 치료를 초래하고; 질환, 장애 또는 병상의 진행을 방지하거나 늦추거나; 질환, 장애 또는 병상과 관련되는 증상을 감소시키거나 완전히 완화시키는, 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 양을 의미한다.

특정 구체예에 따르면, 치료될 질환, 장애 또는 병상은 암, 바람직하게는 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신세포 암종, 방광 요로 상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양으로 이루어지는 군에서 선택되는 암이다.

특정 구현예에 따르면, 치료적 유효량은 하기 효과 중 1 개, 2 개, 3 개, 4 개 또는 그 이상을 달성하기에 충분한 치료요법의 양을 나타낸다: (i) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 중증도를 감소시키거나 완화시킴; (ii) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 지속기간을 감소시킴; (iii) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 진행을 방지함; (iv) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 퇴행을 유발함; (v) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 발전 또는 발병을 방지함; (vi) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상의 재발을 방지함; (vii) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상을 갖는 대상의 입원을 감소시킴; (viii) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상을 갖는 대상의 입원 길이를 감소시킴; (ix) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상을 갖는 대상의 생존을 증가시킴; (xi) 치료할 질환, 장애 또는 병상, 또는 이와 연관된 증상을 억제 또는 감소시킴; 및/또는 (xii) 또 다른 치료요법의 예방 또는 치료 효과(들) 를 향상 또는 개선시킴.

치료적 유효량 또는 투약량은 치료할 질환, 장애 또는 병상, 투여 수단, 표적 부위, 대상의 생리학적 상태 (예를 들어, 연령, 체중, 건강 포함), 대상이 인간 또는 동물인지 여부, 투여되는 다른 약물, 및 치료가 예방 또는 치료인지 여부와 같은 다양한 인자에 따라 가변적일 수 있다. 안전성 및 효능을 최적화하기 위해 치료 투약량을 최적으로 적정한다.

특정 구현예에 따르면, 본원에 기재된 조성물은 대상체에 대해 의도된 투여 경로에 적합한 것으로 제형화된다. 예를 들어, 본원에 기재된 조성물은 정맥내, 피하 또는 근육내 투여에 적합한 것으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 세포는 당업자에게 공지된 임의의 편리한 방식으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 세포는 에어로졸 흡입, 주사, 섭취, 수혈, 이식 및/또는 이식에 의해 대상체에게 투여될 수 있다. 본 발명의 세포를 포함하는 조성물은 경동맥, 피하, 피내, 종양내, 비강내, 골수내, 근육내, 흉막내, 정맥내 (i.v.) 주사에 의해 또는 복강내로 투여될 수 있다. 특정 구현예에서, 본 발명의 세포는 대상체의 림프구 고갈의 존재 또는 부재 하에 투여될 수 있다.

본 발명의 CAR 을 발현하는 본 발명의 세포를 포함하는 약학적 조성물은 멸균 액체 제제, 전형적으로 세포 현탁액을 갖는 등장성 수용액으로, 또는 임의로 선택된 pH 로 전형적으로 완충되는 에멀젼, 분산액 등으로 제공될 수 있다. 조성물은 세포의 완전성 및 생존력에 적합하고 세포 조성물의 투여에 적합한 담체, 예를 들어, 물, 염수, 인산염 완충 염수 등을 포함할 수 있다.

멸균 주사가능한 용액은, 원하는 대로, 다양한 다른 성분들과 함께 적합한 양의 적절한 용매에 본 발명의 세포를 혼입시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 조성물은 세포 조성물과 함께 사용하고 인간과 같은 대상체에 투여하기에 적합한, 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제, 또는 부형제 예컨대 멸균수, 생리식염수, 글루코스, 덱스트로스 등을 포함할 수 있다. 세포 조성물을 제공하기 위한 적합한 완충제는 당업계에 잘 알려져 있다. 사용되는 임의의 비히클, 희석제, 또는 첨가제는 본 발명의 세포의 완전성 및 생존성을 보존하는 것과 양립가능하다.

본 발명의 세포는 임의의 생리학적으로 허용되는 비히클로 투여될 수 있다. 본 발명의 세포를 포함하는 세포 집단은 정제된 세포 집단을 포함할 수 있다. 당업자는 다양한 공지된 방법을 사용하여 세포 집단 내의 세포를 용이하게 결정할 수 있다. 본 발명의 유전적으로 변형된 세포를 포함하는 세포 집단에서 순도의 범위는 약 50% 내지 약 55%, 약 55% 내지 약 60%, 약 60% 내지 약 65%, 약 65% 내지 약 70%, 약 70% 내지 약 75%, 약 75% 내지 약 80%, 약 80% 내지 약 85%, 약 85% 내지 약 90%, 약 90% 내지 약 95%, 또는 약 95% 내지 약 100% 일 수 있다. 투여량은 당업자에 의해 용이하게 조정될 수 있으며, 예를 들어, 순도의 감소는 투여량의 증가를 필요로 할 수 있다.

본 발명의 세포는 일반적으로 세포가 투여되는 대상체의 체중 킬로그램 당 세포 (세포/kg) 를 기준으로 하는 투여량으로 투여된다. 일반적으로, 세포 투여량은 투여 방식 및 위치에 따라 약 10⁴ 내지 약 10¹⁰ 세포/kg 체중, 예를 들어, 약 10⁵ 내지 약 10⁹, 약 10⁵ 내지 약 10⁸, 약 10⁵ 내지 약 10⁷, 또는 약 10⁵ 내지 약 10⁶ 의 범위이다. 일반적으로, 전신 투여의 경우에, 본 발명의 면역 세포가 종양 및/또는 암의 영역에 투여되는 영역 투여에서보다 더 높은 용량이 사용된다. 예시적인 투여량 범위는 1 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 2 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 3 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 4 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 5 x 10⁴ 내지 6 x 10⁸, 7 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 8 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 9 x 10⁴ 내지 1 x 10⁸, 1 x 10⁵ 내지 1 x 10⁸, 1 x 10⁵ 내지 9 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 8 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 7 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 6 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 5 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 4 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 4 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 3 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 2 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 1 x 10⁷, 1 x 10⁵ 내지 9 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 8 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 7 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 6 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 5 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 4 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 4 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 3 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 2 x 10⁶, 1 x 10⁵ 내지 1 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 9 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 8 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 7 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 6 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 5 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 4 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 4 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 3 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 2 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 1 x 10⁷, 2 x 10⁵ 내지 9 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 8 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 7 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 6 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 5 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 4 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 4 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 3 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 2 x 10⁶, 2 x 10⁵ 내지 1 x 10⁶, 3 x 10⁵ 내지 3 x 10⁶ 세포/kg 등을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 또한, 투여량은 단일 투여량이 투여되고 있는지 또는 다중 용량이 투여되고 있는지 여부를 고려하도록 조정될 수 있다. 유효 투여량으로 고려될 것의 정확한 결정은 각각의 대상체에 개별적인 요인에 기초할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료" 는 모두 암과 관련된 적어도 하나의 측정가능한 물리적 매개변수의 개선 또는 반전을 의미하는 것으로 의도되며, 이는 대상체에서 반드시 식별가능한 것은 아니지만 대상체에서 식별될 수 있다. 용어 "치료하다", "치료하는" 및 "치료" 는 또한, 퇴행을 일으키거나, 진행을 예방하거나, 적어도 질환, 장애 또는 병상의 진행을 늦추는 것을 나타낼 수 있다. 특정 구현예에서, "치료", "치료하는" 및 "치료" 는 종양 또는 보다 바람직하게는 암과 같은 질환, 장애 또는 병상과 연관된 하나 이상의 증상의 경감, 발전 또는 발병의 예방, 또는 지속기간의 감소를 나타낸다. 특정 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 및 "치료" 는 질환, 장애 또는 병상의 재발의 예방을 나타낸다. 특정 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 및 "치료" 는 질환, 장애 또는 병상을 갖는 대상의 생존 증가를 나타낸다. 특정 구현예에서, "치료하다", "치료하는" 및 "치료" 는 대상체에서의 질환, 장애 또는 병상의 제거를 나타낸다.

특정 구현예에 따르면, 암 치료에 사용되는 조성물이 제공된다. 암 요법을 위해, 제공된 조성물이 화학요법, 항-CD20 mAb, 항-TIM-3 mAb, 항-LAG-3 mAb, 항-EGFR mAb, 항-HER-2 mAb, 항-CD19 mAb, 항-CD33 mAb, 항-CD47 mAb, 항-CD73 mAb, 항-DLL-3 mAb, 항-아펠린 mAb, 항-TIP-1 mAb, 항-Claudin18.2 mAb, 항-CTLA-4 mAb, 항-PD-L1 mAb, 항-PD-1 mAb, 기타 면역-항암 약물, 항-혈관신생제, 방사선 요법, 항체-약물 컨쥬게이트 (ADC), 표적화 요법 또는 기타 항암 약물을 포함하나, 이들에 한정되는 것은 아닌 또다른 치료와 조합으로 사용될 수 있다.

특정 구현예에 따르면, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 본 발명의 CAR-T 세포 및/또는 CAR-NK 세포를 CAR 분자를 발현하는 세포의 효능을 증가시키는 작용제와 조합으로 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 그러한 제제는 CD73, CD39, PD1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3 또는 LAG3, 또는 아데노신 A2a 수용체 안타고니스트에 결합하는 항체 단편을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

특정 구현예에 따르면, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 본 발명의 CAR-T 세포 및/또는 CAR-NK 세포를 CAR 분자를 발현하는 세포의 투여와 관련된 하나 이상의 부작용을 개선시키는 작용제와 조합으로 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 그러한 제제는 스테로이드, TNFα 의 저해인자, 또는 IL-6 의 저해인자를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

특정 구현예에 따르면, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법은 본 발명의 CAR-T 세포 및/또는 CAR-NK 세포를 FOLR1 과 관련된 질환을 치료하는 작용제와 조합으로 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 이러한 작용제는 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이중특이적 항체를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본원에서 사용되는 바와 같은, 대상체에게 둘 이상의 치료요법을 투여하는 맥락에서 용어 "조합으로" 는 하나 초과의 치료요법의 사용을 나타낸다. 용어 "조합으로" 의 사용은 치료요법이 대상체에게 투여되는 순서를 제한하지 않는다. 예를 들어, 제 1 치료요법 (예를 들어, 본원에 기재된 조성물) 은 제 2 치료요법을 대상체에게 투여하기 전 (예를 들어, 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 12 시간, 16 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 8 주 또는 12 주 전), 제 2 치료요법을 대상체에게 투여하는 것과 동시에, 또는 제 2 치료요법을 대상체에게 투여한 후 (예를 들어, 5 분, 15 분, 30 분, 45 분, 1 시간, 2 시간, 4 시간, 6 시간, 12 시간, 16 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 96 시간, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 8 주 또는 12 주 후) 에 투여될 수 있다.

구현예

본 발명은 또한 하기 비제한적 구현예를 제공한다.

구현예 1 은 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드이고, CAR 은 하기를 포함한다: (a) 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항원 결합 도메인을 포함하는 세포외 도메인; (b) 힌지 영역; (c) 막관통 영역; 및 (d) 세포내 신호전달 도메인.

구현예 2 는 구현예 1 의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인은 하기의 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함한다:

(1) SEQ ID NOs: 17, 18, 19, 41, 42 및 43, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 20, 21, 22, 44, 45 및 46, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 23, 24, 25, 47, 48 및 49, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 26, 27, 28, 50, 51 및 52, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 29, 30, 31, 53, 54 및 55, 각각;

(6) EQ ID NOs: 32, 33, 34, 56, 57 및 58, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 35, 36, 37, 59, 60 및 61, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 38, 39, 40, 62, 63 및 64, 각각;

구현예 3 는 구현예 1 의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인은 하기의 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함한다:

(1) SEQ ID NOs: 65, 66, 67, 89, 90 및 91, 각각;

(2) SEQ ID NOs: 68, 69, 70, 92, 93 및 94, 각각;

(3) SEQ ID NOs: 71, 72, 73, 95, 96 및 97, 각각;

(4) SEQ ID NOs: 74, 75, 76, 98, 99 및 100, 각각;

(5) SEQ ID NOs: 77, 78, 79, 101, 102 및 103, 각각;

(6) SEQ ID NOs: 80, 81, 82, 104, 105 및 106, 각각;

(7) SEQ ID NOs: 83, 84, 85, 107, 108 및 109, 각각; 또는

(8) SEQ ID NOs: 86, 87, 88, 110, 111 및 112, 각각;

구현예 4 는 구현예 1-3 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인이 SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 또는 15 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 또는 16 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

구현예 5 는 구현예 1-4 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인이 다음을 포함한다:

구현예 6 은 구현예 1-4 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인은 인간화되고 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 에 대해서 적어도 95%, 적어도 96 %, 적어도 97 %, 적어도 98 %, 또는 적어도 99 % 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

구현예 7 은 구현예 6 의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인은 인간화되고 다음을 포함한다:

구현예 8 은 구현예 1-7 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이다.

구현예 9 는 구현예 8 의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 은 인간화된다.

구현예 10 은 구현예 8 또는 9 의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 은 SEQ ID NOs: 159-170 중 어느 하나와 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 포함한다.

구현예 11 은 구현예 1-10 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, 키메라 항원 수용체 (CAR) 는 하나 이상의 항원 결합 도메인을 포함한다.

구현예 12 은 구현예 1-11 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드이고, CAR 의 세포내 신호 도메인은 하나 이상의 공자극성 도메인 및 하나 이상의 활성화 도메인을 포함한다.

구현예 13 은 구현예 1-12 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩된 키메라 항원 수용체 (CAR) 이다.

구현예 14 는 구현예 1-12 중 어느 하나의 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터이다.

구현예 15 은 구현예 14 의 벡터를 포함하는 숙주 세포이다.

구현예 16 은 구현예 15 의 숙주 세포이고, 세포는 CAR-T 세포, 바람직하게는 인간 CAR-T 세포이다.

구현예 17 은 구현예 15 의 숙주 세포이고, 세포는 CAR-NK 세포, 바람직하게는 인간 CAR-NK 세포이다.

구현예 18 은 구현예 14 의 벡터로 T 세포를 형질도입시키는 것을 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 발현하는 숙주 세포의 제조 방법이다.

구현예 19 는 구현예 1-12 중 어느 하나의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 T 세포를 CAR-T 세포를 생산하기 위한 조건하에서 배양하는 단계 및 상기 CAR-T 세포를 회수하는 단계를 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR)-T 세포의 생산 방법이다.

구현예 20 은 구현예 14 의 벡터로 NK 세포를 형질도입시키는 것을 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 발현하는 숙주 세포의 제조 방법이다.

구현예 21 은 구현예 1-12 중 어느 하나의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 NK 세포를 CAR-NK 세포를 생산하기 위한 조건하에서 배양하는 단계 및 상기 CAR-NK 세포를 회수하는 단계를 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR)-NK 세포의 생산 방법이다.

구현예 22 는 구현예 1-12 중 어느 하나의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 세포와 접촉시키는 단계를 포함하고, 단리된 폴리뉴클레오티드는 시험관 내에서 전사된 RNA 또는 합성 RNA 인, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 포함하는 세포의 생산 방법이다.

구현예 23 은 구현예 15-17 중 어느 하나의 숙주 세포를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 암의 치료를 필요로 하는 대상체에서 암을 치료하는 방법이다.

구현예 24 는 구현예 23 의 방법이고, 암은 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신세포 암종, 방광 요로 상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁 경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양으로부터 선택된다.

구현예 25 는 구현예 23 또는 24 의 방법이고, CAR 를 발현하는 세포의 효능을 증가시키는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

구현예 26 는 구현예 23 또는 24 의 방법이고, CAR 를 발현하는 세포의 투여와 연관된 하나 이상의 부작용을 경감시키는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

구현예 27 은 구현예 23 또는 24 의 방법이고, FOLR1 과 연관된 질환을 치료하는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함한다.

구현예 28 은 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이고, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 중 임의의 것과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

구현예 29 은 구현예 28 의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이며, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 하기를 포함한다:

(57) EQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;

구현예 30 은 구현예 28 또는 29 의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이고, 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 FOLR1 에 결합할 수 있고, 효과기-매개 종양 세포 용해를 유도할 수 있고, 접합된 약물의 동원을 매개할 수 있고/있거나 암-사멸 효과를 갖는 또 다른 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편과 이중특이적 항체를 형성할 수 있다.

구현예 31 은 구현예 28-30 중 어느 하나의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산이다.

구현예 32 는 구현예 31 의 단리된 핵산을 포함하는 벡터이다.

구현예 33 은 구현예 32 의 벡터를 포함하는 숙주 세포이다.

구현예 34 는 구현예 28-30 중 어느 하나의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물이다.

구현예 35 는 구현예 28-30 중 어느 하나의 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서의 암 세포 표면 상의 FOLR1 을 표적화하는 방법이다.

구현예 36 은 구현예 34 의 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암을 치료하는 방법이다.

구현예 37 는 구현예 36 의 방법이고, 암은 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신세포 암종, 방광 요로 상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁 경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양으로부터 선택된다.

구현예 38 은 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 생산하기 위한 조건 하에 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 세포를 배양하고, 세포 또는 배양물로부터 항체 또는 항원-결합 단편을 회수하는 것을 포함하는, 구현예 28-30 중 어느 하나의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 생산하는 방법이다.

구현예 39 은 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편과 약학적으로 허용가능한 담체를 조합하여 약학 조성물을 수득하는 것을 포함하는, 구현예 34 의 약학 조성물을 생산하는 방법이다.

실시예

실시예 1: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인의 확인

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인은 전문이 본원에 참조로 포함되는 2019 년 3 월 7 일에 출원된 PCT/US2019/021084 에 기재된 바와 같이 단리 및 서열분석된 항-FOLR1 mAb 이다.

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 서열은 표 1 및 2 에 제공되고, FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 CDR 영역은 표 3-6 에 제공된다.

표 1: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 중쇄 가변 영역의 서열

표 2: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 중쇄 가변 영역의 서열

표 3: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 중쇄의 CDR 영역 1-3

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 HC CDR 은 IMGT 방법 (Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res. 1999; 27:209-212) 을 이용하여 확인했다.

표 4: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 경쇄의 CDR 영역 1-3

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 LC CDR 은 IMGT 방법 (Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Res. 1999; 27:209-212) 을 이용하여 확인했다.

표 5: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 중쇄의 CDR 영역 1-3

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 대한 HC CDR 은 IMGT (Lefranc, M.-P. et al.,　Nucleic Acids Res. 1999; 27:209-212) 및 Kabat (Elvin A. Kabat et al, Sequences of Proteins of Immunological Interest 5th ed. 1991) 방법의 조합을 이용하여 결정하였다.

표 6: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 관한 경쇄의 CDR 영역 1-3

FOLR1 에 특이적으로 결합하는 항원 결합 도메인에 대한 LC CDR 은 IMGT (Lefranc, M.-P. et al.,　Nucleic Acids Res. 1999; 27:209-212) 및 Kabat (Elvin A. Kabat et al, Sequences of Proteins of Immunological Interest 5th ed. 1991) 방법의 조합을 이용하여 결정하였다.

실시예 2: 마우스 항-FOLR1 mAb 의 인간화

마우스 항-FOLR1 mAb 은 전문이 본원에 참조로 포함되는 2019 년 3 월 7 일에 출원된 PCT/US2019/021084 에 기재된 바와 같이 인간 환자에서 사용될 때 면역원성의 잠재성을 감소시키도록 인간화시켰다. 인간화된 VH 및 VL 영역의 서열은 표 7 에 제시되어 있다. 인간화된 VH 및 VL 은 다음과 같이 명명되었다: F5-H1 은 마우스 mAb F5 에 대한 인간화 VH 의 H1 서열을 지칭하고; F5-L1 은 마우스 mAb F5 에 대한 인간화 VL 의 L1 서열을 지칭한다. 모든 다른 인간화 VH 및 VL 부위는 동일한 명명 규칙을 채택한다.

표 7: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 인간화된 항원 결합 도메인의 중쇄 및 경쇄 가변 영역의 서열

인간화된 VH 및 VL 영역을 각각 인간 IgG1 중쇄 및 카파 경쇄의 불변 영역에 융합시켰다. 인간화된 mAb 는 다음과 같이 명명되었다: F5-H1L1 은 F5-H1 중쇄 가변 영역 및 F5-L1 경쇄 가변 영역을 갖는 mAb 를 지칭한다; 모든 다른 인간화된 mAb 는 동일한 명명 규칙을 채택한다.

실시예 3: 인간화된 mAb 의, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 으로의 전환

인간화된 mAb 를 scFv 로 전환시켰으며, 이들 각각은 (G₄S)_n 링커가 사이에 있는 (여기에서 "n" 은 G₄S 반복체의 수를 나타낸다) 하나의 VH 및 하나의 VL 로 이루어진다. VH 또는 VL 영역을 융합 단백질의 N-말단에 배치하여 가장 효과적인 scFv 디자인을 확인했다. 디자인된 scFv 의 서열이 표 8 에 나타나 있다. scFv 는 다음과 같이 명명되었다: F5-H2(G₄S)₃L2 는 F5-H2 중쇄 가변 영역, (G₄S)₃ 링커 및 F5-L2 경쇄 가변 영역이 있는 scFv 를 지칭한다; 모든 다른 scFv 는 동일한 명명 규칙을 채택했다.

표 9: FOLR1 에 특이적으로 결합하는 인간화된 scFv 의 서열

실시예 4: 인간화된 mAb 및 scFv 의 ELISA 결합 분석

인간 FOLR1 에 대한 mAb 및 scFv 의 결합을 시험하기 위해, mAb 및 하나의 G4S 링커 및 인간 IgG4 Fc 에 융합된 scFv 의 융합 단백질 (N-말단으로부터 C-말단으로의 scFv, G₄S 링커 및 Fc 의 순서) 을 ExpiCHO 또는 Expi293 세포에서 일시적 발현에 의해 생성하였다. mAb 또는 인간화 scFv 의 ELISA 결합 분석 방법은 2019 년 3 월 7 일에 출원된 PCT/US2019/021084 호에 기재되어 있다. ELISA 어세이의 결과를 도 1A-1L 및 도 3A-3G 에 나타낸다.

실시예 5: mAb 및 인간화된 scFv 의 FACS 분석

mAb 및 scFv 융합 단백질을 또한 내인성 FOLR1 을 발현하는 SK-OV-3 세포에 결합하는 능력에 대해 시험하였다. mAb 또는 인간화된 scFv 의 FACS 분석 방법은, 약간 변경되어, 2019 년 3 월 7 일에 출원된 PCT/US2019/021084 호에 기재되어 있다. SK-OV-3 세포는 웰 당 100,000 세포로 플레이팅하였다. 플레이트의 각각의 웰에서, 프로피디움 아이오다이드를 2 차 항체와 함께 인큐베이션하여 죽은 세포를 표지했다. 결합 결과를 도 2A-2E 및 도 4A-4G 에 나타낸다.

실시예 6: 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 키메라 항원 수용체 구성체의 제작

CAR 를 구축하기 위해, 각각의 mAb 를 VH, VL 및 (G₄S)n 링커를 사용하여 scFv 로 전환시키고, scFv 를 인간 CD8α 로부터 유래된 힌지 및 막관통 도메인 (aa 114-188, Boursier JP et al., J Biol Chem. 1993;268(3):2013-20) 의 N-말단에 융합시킨다. CAR 의 C-말단 세포내 신호전달 도메인은 CD28 의 세포내 공자극성 도메인 (aa 162-202, Aruffo A and Seed B, Proc Natl Acad Sci USA. 1987;84(23):8573-7) 이어서 CD3 제타 사슬로부터의 활성화 도메인 (aa 52-162, Letourneur F and Klausner RD, Proc Natl Acad Sci USA. 1991;88(20):8905-9) 을 융합시킴으로써 구축된다. CAR 을 인코딩하는 DNA 서열을 표준 분자 생물학 클로닝 기술을 사용하여 조립하고, 레트로바이러스 벡터에 클로닝하여 CAR 구축물을 생성했다.

당업계의 숙련자는 본 발명의 광범위한 개념을 벗어나지 않고 상기 기재한 구현예를 변경할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 따라서, 본 발명이 개시된 특정 구현예에 제한되는 것이 아니라, 상세한 설명에 의해 정의되는 바와 같이 본 발명의 취지 및 범주 내의 변형을 포함하는 것으로 의도된다는 것이 이해된다.

<110> Phanes Therapeutics, Inc. <120> Humanized Anti-Folate Receptor 1 Chimeric Antigen Receptors and Uses Thereof <130> 065799.21WO1 <150> US 62/832,975 <151> 2019-04-12 <150> US 62/863,330 <151> 2019-06-19 <150> US 62/931,988 <151> 2019-11-07 <160> 198 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 Heavy Chain Variable Region <400> 1 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ile Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Ala Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 2 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 Light Chain Variable Region <400> 2 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ile Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile Asn Gly Val Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Arg Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 3 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 Heavy Chain Variable Region <400> 3 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Glu Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 4 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 Light Chain Variable Region <400> 4 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Phe Leu Gly 1 5 10 15 Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Gly Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser Asn Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 5 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 Heavy Chain Variable Region <400> 5 Glu Phe Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Met Asn Trp Val Lys Gln Ser Asn Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Val Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Val Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Gln Ser Ser Ile Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ala Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 6 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 Light Chain Variable Region <400> 6 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln His Glu Pro Gly Lys Gly Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Arg Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser Asn Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 7 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 Heavy Chain Variable Region <400> 7 Glu Val Met Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr His Leu Asp Thr Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 8 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 Light Chain Variable Region <400> 8 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Glu Ile Val Thr Ile Ile Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Arg Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Asp Ile Lys 100 105 <210> 9 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 Heavy Chain Variable Region <400> 9 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe 50 55 60 Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Thr 100 105 110 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 10 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 Light Chain Variable Region <400> 10 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Glu Ser Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Thr Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Arg Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 11 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 Heavy Chain Variable Region <400> 11 Asp Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Arg Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30 Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Glu Arg Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Phe Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 12 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 Light Chain Variable Region <400> 12 Asp Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Asp Ser Val Ser Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Ser His Glu Ser Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Asn Asn Val Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys 100 105 <210> 13 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 Heavy Chain Variable Region <400> 13 Glu Val Lys Leu Asp Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Pro Met Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Asp Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Gln Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ser Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Gly Ile Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 14 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 Light Chain Variable Region <400> 14 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Leu Asn Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Phe Gln Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 15 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 Heavy Chain Variable Region <400> 15 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Gln Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Lys Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 16 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 Light Chain Variable Region <400> 16 Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Val Ser Val Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR1 <400> 17 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly 1 5 <210> 18 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR2 <400> 18 Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile 1 5 <210> 19 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR3 <400> 19 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr 1 5 10 <210> 20 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR1 <400> 20 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly 1 5 <210> 21 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR2 <400> 21 Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr 1 5 <210> 22 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR3 <400> 22 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr 1 5 10 <210> 23 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR1 <400> 23 Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr Asn 1 5 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR2 <400> 24 Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr 1 5 <210> 25 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR3 <400> 25 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr 1 5 10 <210> 26 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR1 <400> 26 Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr Ala 1 5 <210> 27 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR2 <400> 27 Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr 1 5 <210> 28 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR3 <400> 28 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn 1 5 10 <210> 29 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR1 <400> 29 Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser Trp 1 5 <210> 30 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR2 <400> 30 Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr 1 5 <210> 31 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR3 <400> 31 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 32 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR1 <400> 32 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe Gly 1 5 <210> 33 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR2 <400> 33 Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe 1 5 <210> 34 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR3 <400> 34 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr 1 5 10 <210> 35 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR1 <400> 35 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Trp 1 5 <210> 36 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR2 <400> 36 Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr 1 5 10 <210> 37 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR3 <400> 37 Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 38 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR1 <400> 38 Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr Tyr 1 5 <210> 39 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR2 <400> 39 Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr 1 5 <210> 40 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR3 <400> 40 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 41 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR1 <400> 41 Gln Asn Ile Asn Asn Asn 1 5 <210> 42 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR2 <400> 42 Phe Ala Ser 1 <210> 43 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR3 <400> 43 Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln Leu Thr 1 5 10 <210> 44 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR1 <400> 44 Gln Asp Ile Thr Asn Phe 1 5 <210> 45 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR2 <400> 45 Tyr Thr Ser 1 <210> 46 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR3 <400> 46 Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 1 5 <210> 47 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR1 <400> 47 Gln Asp Ile Asn Lys Tyr 1 5 <210> 48 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR2 <400> 48 Tyr Thr Ser 1 <210> 49 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR3 <400> 49 Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 1 5 <210> 50 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR1 <400> 50 Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 1 5 <210> 51 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR2 <400> 51 Ala Ala Thr 1 <210> 52 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR3 <400> 52 Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Thr 1 5 <210> 53 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR1 <400> 53 Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 1 5 <210> 54 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR2 <400> 54 Ala Ala Thr 1 <210> 55 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR3 <400> 55 Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr 1 5 <210> 56 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR1 <400> 56 Gln Asn Ile Asn Asn Asn 1 5 <210> 57 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR2 <400> 57 Tyr Ala Ser 1 <210> 58 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR3 <400> 58 Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala Leu Thr 1 5 10 <210> 59 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR1 <400> 59 Gln Asp Ile Thr Asn His 1 5 <210> 60 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR2 <400> 60 Tyr Thr Ser 1 <210> 61 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR3 <400> 61 Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp Thr 1 5 <210> 62 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR1 <400> 62 Glu Asn Val Gly Ser Tyr 1 5 <210> 63 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR2 <400> 63 Gly Ala Ser 1 <210> 64 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR3 <400> 64 Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 1 5 <210> 65 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR1 <400> 65 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Gly Met His 1 5 10 <210> 66 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR2 <400> 66 Phe Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ile Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 67 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 HCDR3 <400> 67 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr 1 5 10 <210> 68 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR1 <400> 68 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser 1 5 10 <210> 69 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR2 <400> 69 Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 70 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 HCDR3 <400> 70 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr 1 5 10 <210> 71 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR1 <400> 71 Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr Asn Met Asn 1 5 10 <210> 72 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR2 <400> 72 Val Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Val 1 5 10 15 Gly <210> 73 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 HCDR3 <400> 73 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr 1 5 10 <210> 74 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR1 <400> 74 Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr Ala Met Ser 1 5 10 <210> 75 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR2 <400> 75 Thr Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr His Leu Asp Thr Val Lys 1 5 10 15 Gly <210> 76 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 HCDR3 <400> 76 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn 1 5 10 <210> 77 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR1 <400> 77 Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser Trp Met Asn 1 5 10 <210> 78 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR2 <400> 78 Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe Lys 1 5 10 15 Gly <210> 79 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 HCDR3 <400> 79 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 80 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR1 <400> 80 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe Gly Met His 1 5 10 <210> 81 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR2 <400> 81 Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val Lys 1 5 10 15 Asp <210> 82 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 HCDR3 <400> 82 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr 1 5 10 <210> 83 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR1 <400> 83 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Trp Met Asn 1 5 10 <210> 84 <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR2 <400> 84 Gln Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ser Asp Ser 1 5 10 15 Val Lys Gly <210> 85 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 HCDR3 <400> 85 Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 86 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR1 <400> 86 Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr Tyr Leu Tyr 1 5 10 <210> 87 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR2 <400> 87 Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Ser <210> 88 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 HCDR3 <400> 88 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 89 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR1 <400> 89 Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn Leu His 1 5 10 <210> 90 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR2 <400> 90 Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser 1 5 <210> 91 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4 LCDR3 <400> 91 Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln Leu Thr 1 5 10 <210> 92 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR1 <400> 92 Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe Ile Gly 1 5 10 <210> 93 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR2 <400> 93 Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser 1 5 <210> 94 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5 LCDR3 <400> 94 Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 1 5 <210> 95 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR1 <400> 95 Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 96 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR2 <400> 96 Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser 1 5 <210> 97 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7 LCDR3 <400> 97 Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 1 5 <210> 98 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR1 <400> 98 Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 99 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR2 <400> 99 Ala Ala Thr Asn Leu Ala Asp 1 5 <210> 100 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8 LCDR3 <400> 100 Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro Thr 1 5 <210> 101 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR1 <400> 101 Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 102 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR2 <400> 102 Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val 1 5 <210> 103 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10 LCDR3 <400> 103 Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr 1 5 <210> 104 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR1 <400> 104 Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn Leu His 1 5 10 <210> 105 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR2 <400> 105 Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser 1 5 <210> 106 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17 LCDR3 <400> 106 Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala Leu Thr 1 5 10 <210> 107 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR1 <400> 107 Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His Leu Asn 1 5 10 <210> 108 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR2 <400> 108 Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser 1 5 <210> 109 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19 LCDR3 <400> 109 Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp Thr 1 5 <210> 110 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR1 <400> 110 Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr Val Ser 1 5 10 <210> 111 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR2 <400> 111 Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr 1 5 <210> 112 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20 LCDR3 <400> 112 Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 1 5 <210> 113 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 113 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 114 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 114 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 115 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 115 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 116 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H4 Heavy Chain Variable Region <400> 116 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 117 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L1 Light Chain Variable Region <400> 117 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 118 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L2 Light Chain Variable Region <400> 118 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 119 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 119 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Ser Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Phe Cys 85 90 95 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Arg 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Pro 115 120 <210> 120 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 120 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Ser Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Phe Cys 85 90 95 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Arg 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 121 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-L1 Light Chain Variable Region <400> 121 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 122 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-L2 Light Chain Variable Region <400> 122 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 123 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-L3 Light Chain Variable Region <400> 123 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 124 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 124 Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30 Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 125 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 125 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30 Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 126 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-L1 Light Chain Variable Region <400> 126 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 127 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-L2 Light Chain Variable Region <400> 127 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 128 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 128 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Arg Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 129 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 129 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Arg Ala Thr Val Thr Val Asp Ala Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 130 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 130 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Lys Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 131 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-L1 Light Chain Variable Region <400> 131 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 132 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-L2 Light Chain Variable Region <400> 132 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 133 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-L3 Light Chain Variable Region <400> 133 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Val Lys 100 105 <210> 134 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-L4 Light Chain Variable Region <400> 134 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Val Lys 100 105 <210> 135 <211> 257 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 135 Met Ala Gln Arg Met Thr Thr Gln Leu Leu Leu Leu Leu Val Trp Val 1 5 10 15 Ala Val Val Gly Glu Ala Gln Thr Arg Ile Ala Trp Ala Arg Thr Glu 20 25 30 Leu Leu Asn Val Cys Met Asn Ala Lys His His Lys Glu Lys Pro Gly 35 40 45 Pro Glu Asp Lys Leu His Glu Gln Cys Arg Pro Trp Arg Lys Asn Ala 50 55 60 Cys Cys Ser Thr Asn Thr Ser Gln Glu Ala His Lys Asp Val Ser Tyr 65 70 75 80 Leu Tyr Arg Phe Asn Trp Asn His Cys Gly Glu Met Ala Pro Ala Cys 85 90 95 Lys Arg His Phe Ile Gln Asp Thr Cys Leu Tyr Glu Cys Ser Pro Asn 100 105 110 Leu Gly Pro Trp Ile Gln Gln Val Asp Gln Ser Trp Arg Lys Glu Arg 115 120 125 Val Leu Asn Val Pro Leu Cys Lys Glu Asp Cys Glu Gln Trp Trp Glu 130 135 140 Asp Cys Arg Thr Ser Tyr Thr Cys Lys Ser Asn Trp His Lys Gly Trp 145 150 155 160 Asn Trp Thr Ser Gly Phe Asn Lys Cys Ala Val Gly Ala Ala Cys Gln 165 170 175 Pro Phe His Phe Tyr Phe Pro Thr Pro Thr Val Leu Cys Asn Glu Ile 180 185 190 Trp Thr His Ser Tyr Lys Val Ser Asn Tyr Ser Arg Gly Ser Gly Arg 195 200 205 Cys Ile Gln Met Trp Phe Asp Pro Ala Gln Gly Asn Pro Asn Glu Glu 210 215 220 Val Ala Arg Phe Tyr Ala Ala Ala Met Ser Gly Ala Gly Pro Trp Ala 225 230 235 240 Ala Trp Pro Phe Leu Leu Ser Leu Ala Leu Met Leu Leu Trp Leu Leu 245 250 255 Ser <210> 136 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 136 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ile Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asn Asn Ser Thr Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr Trp Gly Ala Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 137 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 137 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ile Val 50 55 60 Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Arg Asn Asn Ser Thr Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr Trp Gly Ala Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 138 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 138 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Gly Ile Ser Ser Gly Ser Asn Thr Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Gly Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Ala Glu Trp Asp Val Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Met 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 139 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-L1 Light Chain Variable Region <400> 139 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Ile Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ala Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 140 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-L2 Light Chain Variable Region <400> 140 Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 141 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F4-L3 Light Chain Variable Region <400> 141 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Phe Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ile Tyr Ser Trp Pro Gln 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 142 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 142 Gln Phe Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Gln Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 143 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 143 Glu Phe Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Phe Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr His Tyr Ala Pro His Leu 50 55 60 Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Gln Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Asn Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 144 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 144 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Asn Phe Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Asp Pro Asn Tyr Gly Thr Thr His Tyr Ala Pro His Leu 50 55 60 Gln Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Gln Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Leu Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Ile Lys Gly Tyr Gly Asn Pro Ala Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 145 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-L1 Light Chain Variable Region <400> 145 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Arg Tyr Thr Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 146 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-L2 Light Chain Variable Region <400> 146 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Arg Tyr Thr Ser Thr Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 147 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F7-L3 Light Chain Variable Region <400> 147 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Arg Tyr Thr Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 148 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 148 Leu Val Asn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Phe Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 149 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 149 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Ala Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ile Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 150 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 150 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Ala Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ile Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 151 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L1 Light Chain Variable Region <400> 151 Glu Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 152 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L2 Light Chain Variable Region <400> 152 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala 65 70 75 80 Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 153 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L3 Light Chain Variable Region <400> 153 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala 65 70 75 80 Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 154 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H1 Heavy Chain Variable Region <400> 154 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Arg Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Glu Tyr Asn Pro 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Leu Arg Asp Asp Ser Lys Asn Gln 65 70 75 80 Val Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Ser Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 155 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H2 Heavy Chain Variable Region <400> 155 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Glu Tyr Asn Pro 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Leu Arg Asp Asp Ser Lys Asn Gln 65 70 75 80 Val Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Ser Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 156 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H3 Heavy Chain Variable Region <400> 156 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ile Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 157 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L1 Light Chain Variable Region <400> 157 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 158 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L2 Light Chain Variable Region <400> 158 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala 65 70 75 80 Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 159 <211> 239 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H2(G4S)3L2 <400> 159 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val 130 135 140 Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln 145 150 155 160 Asp Ile Thr Asn Phe Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala 165 170 175 Pro Lys Leu Leu Ile Ser Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro 180 185 190 Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile 195 200 205 Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr 210 215 220 Tyr Asn Leu Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 225 230 235 <210> 160 <211> 244 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H2(G4S)4L2 <400> 160 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln 130 135 140 Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr 145 150 155 160 Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe Ile Gly Trp Tyr Gln His 165 170 175 Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Tyr Thr Ser Ile Leu 180 185 190 Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 195 200 205 Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr 210 215 220 Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240 Val Glu Ile Lys <210> 161 <211> 239 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L2(G4S)3H2 <400> 161 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Ile Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 100 105 110 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala 130 135 140 Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gln 145 150 155 160 Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly 165 170 175 Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser 180 185 190 Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg 195 200 205 Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly 210 215 220 Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 225 230 235 <210> 162 <211> 242 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-H1(G4S)3L2 <400> 162 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Ser Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Phe Cys 85 90 95 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Arg 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser 130 135 140 Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala 145 150 155 160 Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 165 170 175 Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly 180 185 190 Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu 195 200 205 Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln 210 215 220 His His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu 225 230 235 240 Ile Lys <210> 163 <211> 247 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-H1(G4S)4L2 <400> 163 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe 50 55 60 Lys Gly Arg Ala Ser Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Gly Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Phe Cys 85 90 95 Thr Arg His Gly Asp Phe Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Arg 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 115 120 125 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met 130 135 140 Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr 145 150 155 160 Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr 165 170 175 Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val Tyr Ala Ala Thr 180 185 190 Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 195 200 205 Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala 210 215 220 Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro Thr Phe Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 245 <210> 164 <211> 242 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F10-L2(G4S)3H1 <400> 164 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Val Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly Ser 100 105 110 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Gln 115 120 125 Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys 130 135 140 Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Ser Trp Met Asn Trp Val Arg 145 150 155 160 Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Arg Ile Tyr Pro Gly 165 170 175 Asp Gly Tyr Thr His Tyr Asn Gly Met Phe Lys Gly Arg Ala Ser Leu 180 185 190 Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Gly Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu 195 200 205 Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Phe Phe Cys Thr Arg His Gly Asp Phe 210 215 220 Pro Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val 225 230 235 240 Ser Pro <210> 165 <211> 240 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-H1(G4S)3L2 <400> 165 Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30 Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 130 135 140 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn 145 150 155 160 Ile Asn Asn Asn Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 165 170 175 Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ala 180 185 190 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 195 200 205 Ser Leu Glu Thr Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn 210 215 220 Ser Trp Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 225 230 235 240 <210> 166 <211> 245 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-H1(G4S)4L2 <400> 166 Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30 Gly Met His Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Met Ser Tyr Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val 50 55 60 Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Val His Val Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Val Leu Thr Gln Ser 130 135 140 Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 145 150 155 160 Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn Leu His Trp Phe Gln Gln Lys 165 170 175 Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile 180 185 190 Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 195 200 205 Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Thr Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe 210 215 220 Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr 225 230 235 240 Lys Val Glu Ile Lys 245 <210> 167 <211> 240 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F17-L2(G4S)3H1 <400> 167 Glu Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Asn Asn Asn 20 25 30 Leu His Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Thr 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Asn Ser Trp Pro Ala 85 90 95 Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Gly Gly Gly Gly 100 105 110 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val 115 120 125 Glu Thr Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser 130 135 140 Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe Gly Met His Trp Ile 145 150 155 160 Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr Met Ser Tyr 165 170 175 Thr Pro Gly Thr Phe His Tyr Ala Asp Thr Val Lys Asp Arg Phe Thr 180 185 190 Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser 195 200 205 Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Val His Val 210 215 220 Gly Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 225 230 235 240 <210> 168 <211> 242 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-H1(G4S)3L3 <400> 168 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Arg Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 130 135 140 Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys 145 150 155 160 Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 165 170 175 Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr 180 185 190 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Ala Thr Glu Phe Thr 195 200 205 Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 210 215 220 Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu 225 230 235 240 Val Lys <210> 169 <211> 247 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-H1(G4S)4L3 <400> 169 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr 20 25 30 Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Ser Arg Ala Thr Val Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln 130 135 140 Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val 145 150 155 160 Thr Ile Thr Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr Val Ser Trp 165 170 175 Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala 180 185 190 Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser 195 200 205 Ala Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe 210 215 220 Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr Phe Gly Gln 225 230 235 240 Gly Thr Lys Val Glu Val Lys 245 <210> 170 <211> 242 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F20-L3(G4S)3H1 <400> 170 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Gly Glu Asn Val Gly Ser Tyr 20 25 30 Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Ala Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gly Gln Thr Tyr Arg Phe Leu Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Val Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 100 105 110 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser 115 120 125 Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys 130 135 140 Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Ser Tyr Tyr Leu Tyr Trp Val Arg Gln 145 150 155 160 Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Asn Pro Arg Ser 165 170 175 Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys Ser Arg Ala Thr Val Thr 180 185 190 Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg 195 200 205 Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ser Arg Ser Gly Arg Leu Arg 210 215 220 Gly Phe Tyr Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 225 230 235 240 Ser Ser <210> 171 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H4 Heavy Chain Variable Region <400> 171 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 172 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H5 Heavy Chain Variable Region <400> 172 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ala Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr His Leu Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 173 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-H6 Heavy Chain Variable Region <400> 173 Glu Val Gln Leu Val Val Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Gly Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Val Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Ser His Tyr Gly Ser Ser Tyr Tyr Phe Asp Asn Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 174 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H4 Heavy Chain Variable Region <400> 174 Glu Val Val Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala His Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Asp Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 175 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H5 Heavy Chain Variable Region <400> 175 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala His Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Asp Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 176 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H6 Heavy Chain Variable Region <400> 176 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 177 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H7 Heavy Chain Variable Region <400> 177 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala His Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Asp Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 178 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H8 Heavy Chain Variable Region <400> 178 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Thr Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Thr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 179 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H9 Heavy Chain Variable Region <400> 179 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Thr Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 180 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H10 Heavy Chain Variable Region <400> 180 Gln Val Val Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Phe Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 181 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H11 Heavy Chain Variable Region <400> 181 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Phe Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 182 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-H12 Heavy Chain Variable Region <400> 182 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Gln Ile Gly Asn Lys Phe His Asn Tyr Glu Thr Tyr Tyr Ser Asp 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Lys Leu Gly Arg Gly Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 183 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H5 Heavy Chain Variable Region <400> 183 Gln Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 184 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-H6 Heavy Chain Variable Region <400> 184 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Lys Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ser Thr Gln Gly Ser Ser Gly Tyr Val Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 185 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L4 Light Chain Variable Region <400> 185 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Asp Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 186 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L5 Light Chain Variable Region <400> 186 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Asp Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 187 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F8-L6 Light Chain Variable Region <400> 187 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Val Ser Glu Asn Ile Asp Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ala Ala Thr Ser Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Thr Thr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 188 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L3 Light Chain Variable Region <400> 188 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Arg Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 189 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L4 Light Chain Variable Region <400> 189 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 190 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L5 Light Chain Variable Region <400> 190 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 191 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L8 Light Chain Variable Region <400> 191 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Phe Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 192 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L9 Light Chain Variable Region <400> 192 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 193 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L10 Light Chain Variable Region <400> 193 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Phe Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 194 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F19-L11 Light Chain Variable Region <400> 194 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn His 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Ser Gln His Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 195 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L3 Light Chain Variable Region <400> 195 Ala Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Glu Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Val Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 196 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L4 Light Chain Variable Region <400> 196 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Ile Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Asn Ser Leu Glu Ala 65 70 75 80 Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105 <210> 197 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L5 Light Chain Variable Region <400> 197 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 198 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> F5-L6 Light Chain Variable Region <400> 198 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Thr Asn Phe 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Ser Tyr Thr Ser Ile Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Tyr Asn Leu Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105

Claims

키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드로서, CAR 은 하기:
(a) 폴레이트 수용체 1 (FOLR1) 에 특이적으로 결합하는 적어도 하나의 항원 결합 도메인을 포함하는 세포외 도메인;
(b) 힌지 영역;
(c) 막통과 영역; 및
(d) 세포내 신호전달 도메인
을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 1 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 하기의 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드:
(1) SEQ ID NOs: 17, 18, 19, 41, 42 및 43, 각각;
(2) SEQ ID NOs: 20, 21, 22, 44, 45 및 46, 각각;
(3) SEQ ID NOs: 23, 24, 25, 47, 48 및 49, 각각;
(4) SEQ ID NOs: 26, 27, 28, 50, 51 및 52, 각각;
(5) SEQ ID NOs: 29, 30, 31, 53, 54 및 55, 각각;
(6) SEQ ID NOs: 32, 33, 34, 56, 57 및 58, 각각;
(7) SEQ ID NOs: 35, 36, 37, 59, 60 및 61, 각각; 또는
(8) SEQ ID NOs: 38, 39, 40, 62, 63 및 64, 각각;
여기서 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합한다.
제 1 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 하기의 폴리펩티드 서열을 갖는, 중쇄 상보성 결정 영역 1 (HCDR1), HCDR2, HCDR3, 경쇄 상보성 결정 영역 1 (LCDR1), LCDR2 및 LCDR3 을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드:
(1) SEQ ID NOs: 65, 66, 67, 89, 90 및 91, 각각;
(2) SEQ ID NOs: 68, 69, 70, 92, 93 및 94, 각각;
(3) SEQ ID NOs: 71, 72, 73, 95, 96 및 97, 각각;
(4) SEQ ID NOs: 74, 75, 76, 98, 99 및 100, 각각;
(5) SEQ ID NOs: 77, 78, 79, 101, 102 및 103, 각각;
(6) SEQ ID NOs: 80, 81, 82, 104, 105 및 106, 각각;
(7) SEQ ID NOs: 83, 84, 85, 107, 108 및 109, 각각; 또는
(8) SEQ ID NOs: 86, 87, 88, 110, 111 및 112, 각각;
여기서 항원 결합 도메인은 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합한다.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 또는 15 에 대해서 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 또는 16 에 대해서 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 다음을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드:
(1) SEQ ID NO:1 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:2 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(2) SEQ ID NO:3 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:4 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(3) SEQ ID NO:5 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:6 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(4) SEQ ID NO:7 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:8 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(5) SEQ ID NO:9 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:10 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(6) SEQ ID NO:11 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:12 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(7) SEQ ID NO:13 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:14 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역; 또는
(8) SEQ ID NO:15 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:16 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 인간화되고 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 6 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 인간화되고 다음을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드:
(1) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(2) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(3) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(4) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(5) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(6) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(7) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(8) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(9) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(10) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(11) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(12) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(13) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(14) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(15) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:126 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(16) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:127 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(17) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(18) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(19) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(20) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(21) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(22) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(23) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(24) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(25) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(26) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(27) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(28) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(29) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(30) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(31) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(32) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(33) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(34) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(35) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(36) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(37) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(38) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(39) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(40) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(41) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(42) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(43) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(44) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(45) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(46) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(47) SEQ ID NO:148 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:151 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(48) SEQ ID NO:150 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:153 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(49) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(50) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(51) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(52) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(53) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(54) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(55) SEQ ID NO:182 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:190 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(56) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(57) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(58) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(59) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(60) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(61) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(62) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역; 또는
(63) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 항원 결합 도메인이 FOLR1, 바람직하게는 인간 FOLR1 에 특이적으로 결합하는 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 인 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 8 항에 있어서, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이 인간화되는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 단일 사슬 가변 단편 (scFv) 이 SEQ ID NO: 159-170 중 어느 하나와 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 키메라 항원 수용체 (CAR) 가 하나 이상의 항원 결합 도메인을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서, 세포내 신호전달 도메인이 하나 이상의 공자극성 도메인 및 하나 이상의 활성화 도메인을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 단리된 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩된 키메라 항원 수용체 (CAR).
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
제 14 항의 벡터를 포함하는 숙주 세포.
제 15 항에 있어서, 숙주 세포가 T 세포, 바람직하게는 인간 T 세포인 숙주 세포.
제 15 항에 있어서, 숙주 세포가 NK 세포, 바람직하게는 인간 NK 세포인 숙주 세포.
제 14 항의 벡터로 T 세포를 형질도입시키는 것을 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 발현하는 숙주 세포의 제조 방법.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 T 세포를 CAR-T 세포를 생산하기 위한 조건하에서 배양하는 단계 및 상기 CAR-T 세포를 회수하는 단계를 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR)-T 세포의 생산 방법.
제 14 항의 벡터로 NK 세포를 형질도입시키는 것을 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 발현하는 숙주 세포의 제조 방법.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 포함하는 NK 세포를 CAR-NK 세포를 생산하기 위한 조건하에서 배양하는 단계 및 상기 CAR-NK 세포를 회수하는 단계를 포함하는, 키메라 항원 수용체 (CAR)-NK 세포의 생산 방법.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항의 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 인코딩하는 핵산을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오티드를 세포와 접촉시키는 단계를 포함하고, 단리된 폴리뉴클레오티드는 시험관 내에서 전사된 RNA 또는 합성 RNA 인, 키메라 항원 수용체 (CAR) 를 포함하는 세포의 생성 방법.
제 15 항 내지 제 17 항의 숙주 세포를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암의 치료 방법.
제 23 항에 있어서, 암이 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신세포 암종, 방광 요로 상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁 경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양으로부터 선택되는 치료 방법.
제 23 항 또는 제 24 항에 있어서, CAR 를 발현하는 세포의 효능을 증가시키는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 치료 방법.
제 23 항 또는 제 24 항에 있어서, CAR 를 발현하는 세포의 투여와 연관된 하나 이상의 부작용을 경감시키는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 치료 방법.
제 23 항 또는 제 24 항에 있어서, FOLR1 과 연관된 질환을 치료하는 작용제를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는 치료 방법.
인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편으로서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편은 SEQ ID NO: 113, 114, 115, 116, 119, 120, 124, 125, 128, 129, 130, 136, 137, 138, 142, 143, 144, 148, 149, 150, 154, 155, 156 또는 171-184 중 임의의 것과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 또는 SEQ ID NO: 117, 118, 121, 122, 123, 126, 127, 131, 132, 133, 134, 139, 140, 141, 145, 146, 147, 151, 152, 153, 157, 158 또는 185-198 과 적어도 95% 동일한 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함하는 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
제 28 항에 있어서, 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 하기를 포함하는 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편:
(1) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(2) SEQ ID NO:113 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(3) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(4) SEQ ID NO:114 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(5) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(6) SEQ ID NO:115 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(7) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:117 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(8) SEQ ID NO:116 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:118 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(9) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(10) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(11) SEQ ID NO:119 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(12) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:121 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(13) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:122 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(14) SEQ ID NO:120 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:123 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(15) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:126 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(16) SEQ ID NO:124 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:127 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(17) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(18) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(19) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(20) SEQ ID NO:128 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(21) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(22) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(23) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(24) SEQ ID NO:129 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(25) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:131 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(26) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:132 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(27) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:133 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(28) SEQ ID NO:130 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:134 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(29) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(30) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(31) SEQ ID NO:136 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(32) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(33) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(34) SEQ ID NO:137 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(35) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:139 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(36) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:140 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(37) SEQ ID NO:138 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:141 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(38) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(39) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(40) SEQ ID NO:142 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(41) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(42) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(43) SEQ ID NO:143 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(44) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:145 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(45) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:146 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(46) SEQ ID NO:144 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:147 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(47) SEQ ID NO:148 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:151 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(48) SEQ ID NO:150 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:153 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(49) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(50) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(51) SEQ ID NO:171 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(52) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:185 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(53) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:186 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(54) SEQ ID NO:173 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:187 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(55) SEQ ID NO:182 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:190 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(56) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(57) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(58) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(59) SEQ ID NO:183 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(60) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:195 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(61) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:196 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역;
(62) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:197 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역; 또는
(63) SEQ ID NO:184 의 폴리펩티드 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 SEQ ID NO:198 의 폴리펩티드 서열을 갖는 경쇄 가변 영역.
제 28 항 또는 제 29 항에 있어서, 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편이 FOLR1 에 결합할 수 있고, 효과기-매개 종양 세포 용해를 유도할 수 있고, 접합된 약물의 동원을 매개할 수 있고/있거나 암-사멸 효과를 갖는 또 다른 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편과 이중특이적 항체를 형성할 수 있는 인간화된 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편.
제 28 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 인코딩하는 단리된 핵산.
제 31 항의 단리된 핵산을 포함하는 벡터.
제 32 항의 벡터를 포함하는 숙주 세포.
제 28 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
제 28 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 포함하는 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암 세포 표면 상의 FOLR1 의 표적화 방법.
제 34 항의 약학 조성물을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상체에서의 암의 치료 방법.
제 36 항에 있어서, 암이 폐암, 위암, 결장암, 간세포 암종, 신세포 암종, 방광 요로 상피세포 암종, 전이성 흑색종, 유방암, 난소암, 자궁 경부암, 두경부암, 췌장암, 신경교종, 교모세포종, 및 기타 고형 종양, 및 비-호지킨 림프종 (NHL), 급성 림프구성 백혈병 (ALL), 만성 림프구성 백혈병 (CLL), 만성 골수성 백혈병 (CML), 다발성 골수종 (MM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 및 기타 액형 종양으로부터 선택되는 치료 방법.
단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 생산하기 위한 조건 하에 단일클론 항체 또는 항원-결합 단편을 인코딩하는 핵산을 포함하는 세포를 배양하는 단계, 및 세포 또는 배양물로부터 항체 또는 항원-결합 단편을 회수하는 단계를 포함하는, 제 28 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항의 항-FOLR1 단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편의 생산 방법.
단일클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편과 약학적으로 허용가능한 담체를 조합하여 약학 조성물을 수득하는 단계를 포함하는, 제 34 항의 약학 조성물의 생산 방법.