KR20210142006A

KR20210142006A - 유전성 혈관부종 발작의 치료를 위한 혈장 칼리크레인 저해제 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20210142006A
Application number: KR1020217033056A
Authority: KR
Inventors: 메디나 요한 예시드 멘디빌
Original assignee: 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드
Priority date: 2019-03-14
Filing date: 2020-03-13
Publication date: 2021-11-23
Also published as: CA3133576A1; WO2020186132A8; US20200317815A1; WO2020186132A1; AU2020237259A1; JP2022525164A; MX2021011110A; TW202100561A; EP3938404A1

Abstract

본 명세서는 인간 혈장 칼리크레인에 결합하는 항체를 사용하는 것을 포함하는, 제1 치료 기간 동안 질환이 양호하게 제어되는 특정 인간 환자 하위집단에서 유전성 혈관부종 발작을 치료 및 예방하는 방법이 제공된다. 이러한 환자는 제2 치료 기간 동안 감소된 투여량의 항체 및/또는 연장된 투여 간격에 적용될 수 있다.

Description

유전성 혈관부종 발작의 치료를 위한 혈장 칼리크레인 저해제 및 이의 용도

혈장 칼리크레인은 상이한 염증, 심장혈관, 감염(패혈증) 및 종양 질환에 대한 접촉 시스템 및 잠재적 약물 표적의 세린 프로테아제 성분이다(문헌[Sainz I.M. et al., Thromb Haemost 98, 77-83, 2007]). 접촉 시스템은 외래물질 또는 음으로 하전된 표면에 노출 시 인자 XIIa에 의해 또는 내피 세포 표면 상에서 프롤릴카복시펩티다제에 의해 활성화된다(문헌[Sainz I.M. et al., Thromb Haemost 98, 77-83, 2007]). 혈장 칼리크레인의 활성화는 인자 XII의 피드백 활성화를 통해 내인성 응고를 증폭시키고, 전염증 비펩타이드 브래디키닌의 생성을 통해 염증을 향상시킨다. 순환계에서 주요 키니노게나제로서, 혈장 칼리크레인은 맥관구조 내 브래디키닌의 생성에 큰 책임이 있다. 혈장 칼리크레인의 주된 자연적 저해제인 C1-저해제 단백질(C1-inhibitor protein: C1-INH)의 유전적 결핍은 유전성 혈관부종(hereditary angioedema: HAE)을 야기한다. HAE가 있는 환자는 알려지지 않은 촉발자에 의해 종종 발생이 촉진되는 통증성 부종의 급성 발작(acute attack)을 겪는다(문헌[Zuraw B.L. et al., N Engl J Med 359, 1027-1036, 2008]).

본 명세서에는 유전성 혈관부종(HAE) 발작을 치료하는 요법, HAE 발작률을 감소시키는 요법 또는 활성 형태의 인간 혈장 칼리크레인(pKal)에 결합하여 이를 저해할 수 있는 항체, 예를 들어, DX-2930(SHP643, 라나델루맙이라고도 함)과 동일한 상보성 결정 영역(complementarity determining region: CDR)을 사용하여 HAE 발작을 차단하는 요법이 제공된다.

양상에서, 본 개시내용은 유전성 혈관부종(HAE) 발작을 치료하는 방법 또는 HAE 발작률을 감소시키는 방법을 제공하며, 이 방법은 (i) 약 4 내지 9개월(예를 들어, 6개월)인 제1 치료 기간 동안 약 2주마다 약 300㎎으로 인간 혈장 칼리크레인에 결합하는 항체를 이를 필요로 하는 대상체에게 (예를 들어, 피하로) 투여하는 단계; (ii) 제1 치료 기간 동안 HAE 발작에 대해서 대상체를 모니터링하는 단계; 및 (iii) 항체의 투여량을 제1 치료 기간 동안 HAE 발작이 없는 대상체에서 약 4주마다 약 300㎎으로 감소시키는 단계를 포함한다.

일부 예에서, 본 명세서에 기재된 방법에서 사용된 항체는 DX-2930과 동일한 중쇄 상보성 결정 영역(CDR) 및 동일한 경쇄 CDR을 포함한다. 예를 들어, 항체는 서열번호 3의 중쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_H) 및 서열번호 4의 경쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_L)을 포함할 수 있다. 이러한 항체는 전장 항체(예를 들어, IgG1 분자)일 수 있다. 대안적으로, 항체는 이의 항원-결합 단편일 수 있다. 일례에서, 항체는 서열번호 1의 중쇄 및 서열번호 2의 경쇄를 포함할 수 있다.

본 명세서에 기재된 항체 중 임의의 것은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 제형화될 수 있다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물은 인산나트륨, 시트르산, 히스티딘, 염화나트륨 및 폴리솔베이트 80을 포함할 수 있다. 일부 예에서, 약제학적 조성물은 약 30mM의 농도의 인산나트륨, 약 19mM의 농도의 시트르산, 약 50mM의 농도의 히스티딘, 약 90mM의 농도의 염화나트륨 및 약 0.01%의 폴리솔베이트 80을 포함한다.

본 명세서에 기재된 방법 중 임의의 것으로 치료될 대상체는 예를 들어, 35㎏ 미만의 적은 체중(low body weight)을 갖는 인간 환자일 수 있다. 일부 예에서, 인간 환자는 소아 환자이다. 대상체는 HAE(예를 들어, I형 또는 II형)를 갖거나, 이를 갖는 것으로 의심되거나, 이에 대한 위험이 있는 인간 환자일 수 있다.

본 발명의 하나 이상의 실시형태의 상세 설명은 이하의 설명에서 제시된다. 본 발명의 다른 특징 또는 하기 도면 및 몇몇 실시형태의 상세한 설명 및 또한 첨부된 청구범위로부터 명확하게 될 것이다.

도 1은 간접 치료 비교를 위한 연구를 식별하기 위해서 사용된 체계적인 문헌 검토를 문서화하는 체계적인 검토 및 메타-분석(PRISMA)을 위한 우선 보고 항목(체계적인 검토 및 메타-분석을 위한 우선 보고 항목: PRISMA)다이어그램. 별표(*)는 부적절한 비교자로서 제외되고, 약화된 안드로겐(다나졸, 스타노졸롤, 메틸테스토스테론, 플루옥시메스테론, 옥시메톨론 및 티볼론; n=17), SC C1-INH/재조합 인간 히알루로니다제(n=1)의 병용 요법 및 SC C1-INH n=2)을 포함한, 실제 적용 가능성이 부족한 개입의 사용을 설명하는 연구를 나타낸다. 단검표(†)는 표 2에 요약된 바와 같은 연구 설계, 연구 집단, 개입, 평가변수 및/또는 환자 특징의 차이 및/또는 명확성 부족으로 인해서 제외된 부적절한 연구를 나타낸다. 이중 단검표(‡)는 IV C1-INH(Cinryze^®)에 대한 1건의 무작위 대조군 시험이 NMA에 적절한 것으로 식별되었기 때문에, 4개의 불필요한 비무작위 대조군 시험의 제외를 나타낸다. 이러한 동일한 개입에 대한 4개의 nRCT는 제외되었다. C1-INH, C1 에스테라제 저해제; IV, 정맥내; NMA, 네트워크 메타-분석; nRCT, 비무작위 대조 시험; PRISMA, 체계적인 검토 및 메타-분석을 위한 우선 보고 항목; RCT, 무작위 대조 시험; SC, 피하.
도 2는 라나델루맙(HELP 연구; 문헌[Banerji et al., JAMA. 320(20):2108-21, 2018])와 IV C1-INH(CHANGE 연구; 문헌[Zuraw et al., N Engl J Med. 363(6):513-22, 2010])의 간접 치료 비교를 위한 최종 네트워크 다이어그램. CHANGE 연구는 교차 연구이다. C1-INH, C1 에스터라제 저해제; IV, 정맥내; q2w, 2주마다; q4w, 4주마다; SC, 피하.
도 3은 위약과 비교하여 모든 치료에 대한 발작률 비율(95% 신뢰 구간, CrI)을 포함한다. 라나델루맙 대 위약에 대한 발작률 비율은 HELP 연구 데이터로부터 유래되며, 26주 치료에 기초한다. IV C1-INH 대 위약에 대한 발작률 비율은 CHANGE 연구 데이터로부터 유래되며, 12주 치료에 기초한다. C1-INH, C1 에스터라제 저해제; CrI, 신뢰 구간; IV, 정맥내; q2w, 2주마다; q4w, 4주마다; SC, 피하.
도 4a 및 도 4b는 0일 후(도 4a) 및 70일 후(도 4b) 위약과 비교한 모든 치료에 대한 제1 발작 위험비(95% 신뢰 구간, CrI)까지의 시간을 포함한다. IV C1-INH에 대한 데이터는 CHANGE 시험으로부터 유래된다. C1-INH, C1 에스터라제 저해제; CrI, 신뢰 구간; IV, 정맥내; q2w, 2주마다; q4w, 4주마다; SC, 피하.
도 5a 및 도 5b는 제0일(도 5A) 및 제70일(도 5B) 후 제1 발작까지의 시간 동안 예측된 생존 곡선. 이러한 데이터는 60개월에 발작이 없는 환자의 예측된 중위(95% 신뢰 구간) 백분율로 표시된다. IV C1-INH에 대한 데이터는 CHANGE 시험으로부터 유래된다. 도 5a의 데이터는 다음과 같다: 라나델루맙(300 SC q2w), 26.00%, 라나델루맙(300 SC q4w), 13.70%, 라나델루맙(150 SC q4w), 17.60%, IV C1-저해제, 6.50%, 및 위약, 0.60%. 도 5b의 데이터는 하기와 같다: 라나델루맙(300 SC q2w), 46.20%, 라나델루맙(300 SC q4w), 9.30%, 라나델루맙(150 SC q4w), 16.50%, IV C1-저해제, 0.90%, 및 위약, 0.00%. C1-INH, C1 에스터라제 저해제; IV, 정맥내; q2w, 2주마다; q4w, 4주마다; SC, 피하.
도 6은 HELP(HELP-03) 및 CHANGE 연구에서 비교인자에 대한 증거의 네트워크. Cinryze^®은 C1-INH, C1 에스터라제 저해제이다.
도 7은 HELP(HELP-03) 및 CHANGE 연구에서 위약으로의 치료 0일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.
도 8은 HELP(HELP-03) 및 CHANGE 연구에서 위약으로의 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.
도 9는 CHANGE 연구에서 위약 또는 Cinryze^®(C1-INH)로의 치료 0일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.
도 10은 HELP(HELP-03) 연구에서 위약, 300㎎ 라나델루맙 2주마다(300㎎ q2w) 또는 300㎎ 라나델루맙 4주마다(300㎎ q4w)로의 치료 0일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.
도 11은 HANGE 연구에서 위약 또는 Cinryze^®(C1-INH)로의 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.
도 12는 HELP(HELP-03) 연구에서 위약, 300㎎ 라나델루맙 2주마다(300㎎ q2w) 또는 300㎎ 라나델루맙 4주마다(300㎎ q4w)로의 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간을 비교한 예측 생존 그래프.

정의

편의를 위해, 본 발명의 추가적인 설명 전, 본 명세서, 실시예 및 첨부되는 특허청구범위에서 사용되는 특정 용어를 여기에서 정의한다. 다른 용어는 그것들이 본 명세서에서 나타나는 것으로 정의된다.

단수 형태는 달리 문맥에서 명확하게 표시되지 않는다면 복수의 대상을 포함한다.

용어 "약" 또는 "대략적으로" 당업자에 의해서 결정되는 특정 값에 대한 허용 가능한 오차 범위 이내를 의미하며, 이것은 그 값이 측정되거나 결정되는 방법, 즉, 측정 시스템의 한계치에 부분적으로 좌우될 것이다. 예를 들어, "약"은 당업계의 실시에 따라서, 허용 가능한 표준 편차 이내를 의미할 수 있다. 대안적으로, "약"은 주어진 값의 최대 ±20%, 바람직하게는 최대 ±10%, 보다 바람직하게는 최대 ±5%, 보다 더 바람직하게는 최대 ±1%의 범위를 의미할 수 있다. 대안적으로, 특히 생물학적 시스템 또는 공정과 관련하여, 이 용어는 값의 한자릿수 이내, 바람직하게는 2배 이내를 의미할 수 있다. 특정 값이 출원 및 청구범위에 기재된 경우, 달리 언급되지 않는 한, 용어 "약"은 암시적이며, 그 문맥에서 특정 값에 대한 허용 가능한 오차 범위 이내를 의미한다.

용어 "항체"는 면역글로불린 분자의 가변 영역 내에 위치된 적어도 하나의 항원 인식 부위를 통해서, 표적, 예컨대, 탄수화물, 폴리뉴클레오타이드, 지질, 폴리펩타이드 등에 특이적으로 결합할 수 있는 면역글로불린 분자를 지칭한다. 항체는 중쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_H)을 포함하는 적어도 하나의 중(H)쇄, 경쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_L)을 포함하는 적어도 하나의 경쇄, 또는 둘 다를 포함할 수 있다. 예를 들어, 항체는 중(H)쇄 가변 영역(본 명세서에서 V_H 또는 HV라고 약칭) 및 경(L)쇄 가변 영역(본 명세서에서 V_L 또는 LV이라고 약칭)을 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 항체는 2개의 중(H)쇄 가변 영역 및 2개의 경(L)쇄 가변 영역을 포함한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "항체"는 온전한(즉, 전장) 다클론성 또는 단클론성 항체뿐만 아니라 이의 항원-결합 단편(예컨대, Fab, Fab', F(ab')2, Fv), 단일 쇄(scFv), 도메인 항체(dAb) 단편(문헌[de Wildt et. al., Euro. J. Immunol. (1996) 26(3): 629-639]), 이들의 임의의 돌연변이체, 항체 부분을 포함하는 융합 단백질, 인간화된 항체, 키메라 항체, 다이아바디, 선형 항체, 단일 쇄 항체, 다중특이적 항체(예를 들어, 이중특어적 항체) 및 필요한 특이성의 항원 인식 부위를 포함하는 면역글로불린 분자의 임의의 다른 변형된 구성, 예컨대, 항체의 글리코실화 변이체, 항체의 아미노산 서열 변이체 및 공유 변형된 항체를 포함한다. 항체는 임의의 부류의 항체, 예컨대, IgD, IgE, IgG, IgA 또는 IgM(또는 이의 하위부류)을 포함하고, 항체는 임의의 특정 부류를 가질 필요는 없다. 중쇄의 불변 도메인의 항체 아미노산 서열에 따라서, 면역글로불린은 상이한 부류에 배정될 수 있다. 면역글로불린의 5가지 주요 부류가 존재하고: IgA, IgD, IgE, IgG, 및 IgM, 이들 중 몇몇은 하위부류(아이소타입), 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2로 추가로 나뉠 수 있다. 면역글로불린의 상이한 부류에 상응하는 중쇄 불변 도메인은 각각 알파, 델타, 엡실론, 감마 및 뮤라고 불릴 수 있다. 상이한 부류의 면역글로불린의 소단위 구조 및 3차원 구성이 널리 공지되어 있다. 항체는 임의의 공급원으로부터 유래될 수 있지만, 영장류(인간 및 비-인간 영장류) 및 영장류화가 바람직하다.

V_H 영역 및/또는 V_L 영역은 자연-발생 가변 도메인의 아미노산 서열의 모두 또는 부분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 서열은 1, 2 이상의 N- 또는 C-말단 아미노산, 내부 아미노산을 생략할 수 있고, 하나 이상의 삽입 또는 추가적인 말단 아미노산을 포함할 수 있거나, 또는 다른 변경을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함하는 폴리펩타이드는 항원 결합 부위, 예를 들어 혈장 칼리크레인과 우선적으로 상호작용하는 구조를 형성하는 다른 면역글로불린 가변 도메인 서열과 결합될 수 있다.

V_H 및 V_L 영역은 추가로 "상보적 결정 영역"("CDR")으로 지칭되는 과변이 영역으로 다시 나누어지고, "프레임워크 영역"(framework region: "FR")으로 지칭되는 더 보존된 영역 사이에 배치된다. 프레임워크 영역 및 CDR의 정도는 정의되었다(문헌[Kabat, E.A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242, 및 Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917] 참조). 카바트(Kabat) 정의가 본 명세서에서 사용된다. 각각의 V_H 및 V_L은 전형적으로 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성되고, 다음의 순서로 아미노-말단으로부터 카복시-말단까지 배열된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

V_H 또는 V_L 영역에 더하여, 항체의 중쇄 또는 경쇄는 중쇄 또는 경쇄 불변 영역의 전부 또는 부분을 추가로 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 항체는 2개의 중 면역글로불린 쇄 및 2개의 경 면역글로불린 쇄의 사량체이되, 중 및 경 면역글로불린 쇄는, 예를 들어 이황화 결합에 의해 서로 연결된다. IgG에서, 중쇄 불변 영역은 3개의 면역글로불린 도메인, 즉 CH1, CH2 및 CH3을 포함한다. 경쇄 불변 영역은 CL 도메인을 포함한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역은 항원과 상호작용하는 결합 도메인을 함유한다. 항체의 불변 영역은 전형적으로 면역계의 다양한 세포(예를 들어, 효과기 세포) 및 고전적 보체계의 제1 성분(Clq)을 포함하는 숙주 조직 또는 인자에 항체의 결합을 매개한다. 면역글로불린의 경쇄는 카파 또는 람다 유형을 가질 수 있다. 일 실시형태에서, 항체는 글라이코실화된다. 항체는 항체-의존적 세포독성 및/또는 보체-매개 세포독성에 대한 작용일 수 있다.

항체의 하나 이상의 영역은 인간 또는 효과적인 인간일 수 있다. 예를 들어, 가변 영역 중 하나 이상은 인간 또는 효과적인 인간일 수 있다. 예를 들어, CDR 중 하나 이상은 인간, 예를 들어, HC CDR1, HC CDR2, HC CDR3, LC CDR1, LC CDR2, 및/또는 LC CDR3일 수 있다. 각각의 경쇄(LC) 및/또는 중쇄(HC) CDR은 인간일 수 있다. HC CDR3은 인간일 수 있다. 프레임워크 영역 중 하나 이상은 인간, 예를 들어, HC 및/또는 LC의 FR1, FR2, FR3, 및/또는 FR4일 수 있다. 예를 들어, Fc 영역은 인간일 수 있다. 일 실시형태에서, 모든 프레임워크 영역은 인간이며, 예를 들어 인간 체세포, 예를 들어, 면역글로불린을 생성하는 조혈세포 또는 비-조혈세포로부터 유래된다. 일 실시형태에서, 인간 서열은, 예를 들어 생식계열 핵산에 의해 암호화된 생식계열 서열이다. 일 실시형태에서, 선택된 Fab의 프레임워크(FR) 잔기는 대부분의 유사한 영장류 생식계열 유전자, 특히 인간 생식계열 유전자에서 대응되는 잔기의 아미노산 유형으로 전환될 수 있다. 불변 영역 중 하나 이상은 인간 또는 효과적인 인간일 수 있다. 예를 들어, 면역글로불린 가변 도메인, 불변 영역, 불변 도메인(CH1, CH2, CH3, 및/또는 CL1), 또는 전체 항체의 적어도 70, 75, 80, 85, 90, 92, 95, 98 또는 100%는 인간 또는 효과적인 인간일 수 있다.

항체는 면역글로불린 유전자 또는 이의 세그먼트에 의해 암호화될 수 있다. 대표적인 인간 면역글로불린 유전자는 카파, 람다, 알파(IgA1 및 IgA2), 감마(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), 델타, 엡실론 및 뮤 불변 영역 유전자뿐만 아니라 다수의 면역글로불린 가변 영역 유전자를 포함한다. 전장 면역글로불린 "경쇄"(약 25 KDa 또는 약 214 아미노산)은 NH2-말단(약 110 아미노산)에서 가변 영역 유전자 및 COOH-말단에서 카파 또는 람다 불변 영역 유전자에 의해 암호화된다. 전장 면역글로불린 "중쇄"(약 50 KDa 또는 약 446 아미노산)는 가변 영역 유전자(약 116 아미노산) 및 다른 앞서 언급한 불변 영역 유전자 중 하나, 예를 들어, 감마(약 330개의 아미노산을 암호화)에 의해 유사하게 암호화된다. 인간 HC의 길이는 상당히 다른데, HC CDR3이 35개 아미노산 잔기에 걸쳐 약 3개의 아미노산 잔기에서 벗어나기 때문이다.

용어 전장 항체의 "항원-결합 단편"은 관심의 표적에 특이적으로 결합되는 능력을 보유하는 전장 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 용어 전장 항체의 "항원-결합 단편" 내에 포함되고, 작용기를 보유하는 결합 단편의 예는 (i) Fab 단편, 즉, V_L, V_H, C_L 및 CH1 도메인으로 이루어진 1가 단편; (ii) F(ab')2 단편, 즉, 힌지 영역에서 이황화 브릿지에 의해 연결된 2개의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 단일 암(arm)의 V_L 및 V_H 도메인으로 이루어진 Fv 단편, (v) V_H 도메인으로 이루어진 dAb 단편(Ward et al., (1989) Nature 341:544-546); 및 (vi) 단리된 상보적 결정 영역(CDR)을 포함한다. 더 나아가, Fv 단편, V_L 및 V_H 중 2가지의 도메인이 별개의 유전자에 대해 암호화되지만, 그것들은 재조합 방법을 사용하여 그것들이 단일 단백질 쇄로서 만들어질 수 있게 하는 합성 링커에 의해 결합되는데, 여기서 V_L 및 V_H 영역은 쌍을 이루어서 단일 쇄(단일 쇄 Fv: scFv)로서 알려진 1가 분자를 형성한다. 예를 들어, 미국 특허 제5,260,203호, 제4,946,778호 및 제4,881,175호; 문헌[Bird et al. (1988) Science 242:423-426; 및 Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883] 참조한다. 항체 단편은 당업자에게 공지된 통상적인 기법을 포함하는 임의의 적절한 기법을 사용하여 얻을 수 있다.

용어 "단일특이적 항체"는 특정 표적, 예를 들어 에피토프에 대해 단일 결합 특이성 및 친화도를 나타내는 항체를 지칭한다. 이 용어는 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 "단클론성 항체" 또는 "단클론성 항체 조성물"을 포함하는데, 이는 얼마나 많은 항체가 만들어졌는지와 관계없이 단일 분자 조성물의 항체 또는 이의 단편의 제제를 지칭한다. 항체는 결합 특성이 실질적으로 보유된다면, 항체의 대응되는 생식계열 아미노산에 대해 프레임워크 영역 내 하나 이상의 비-생식계열 아미노산을 복귀시키는 것에 의해 "생식계열화"된다.

저해 상수(Ki)는 저해제 효능의 측정을 제공하며; 이는 효소 활성을 절반만큼 감소시키기 위해 저해되거나 또는 필요한 농도이고, 효소 또는 기질 농도에 의존하지 않는다. 겉보기 Ki(K_i,app)는 반응(예를 들어, 효소 활성)의 정도에 대해 상이한 농도의 저해제(예를 들어, 저해적 결합 단백질)의 저해 효과를 측정함으로써 상이한 물질 농도로 얻어지고; 모리슨 식(Morrison equation)(식 1)에 대해 저해제 농도의 함수로서 유사 1차 반응 속도상수의 변화를 적합화시켜 겉보기 Ki값의 추정치를 얻는다. Ki는 Ki,app 대 기질 농도 플롯의 선형 회귀 분석으로부터 추출된 y-절편으로부터 얻어진다.

[식 1]

상기 식에서, v = 측정한 속도; v₀ = 저해제가 없을 때 속도; K_i,app = 겉보기 저해 상수; I = 전체 저해제 농도; 및 E = 전체 효소 농도이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "결합 친화도"는 겉보기 결합 상수 또는 K_A를 지칭한다. K_A는 해리상수(K_D)의 역수이다. 결합 항체는 특정 표적 분자, 예를 들어, 혈장 칼리크레인에 대해 적어도 10⁵, 10⁶, 10⁷, 10⁸, 10⁹, 10¹⁰ 및 10¹¹ M^-1의 결합 친화도를 가질 수 있다. 제2 표적에 비해 제1 표적에 대한 결합 항체의 더 높은 친화도 결합은 제2 표적에 결합을 위한 K_A(또는 수치값 K_D)보다 제1 표적에 결합을 위한 더 높은 K_A(또는 더 작은 수치값 K_D)에 의해 표시될 수 있다. 이러한 경우에, 결합 항체는 제2 표적(예를 들어, 제2 입체구조의 동일 단백질 또는 이의 모방체; 또는 제2 단백질)에 비해 제1 표적(예를 들어, 제1 입체구조의 단백질 또는 이의 모방체)에 대한 특이성을 가진다. 결합 친화도(예를 들어, 특이성 또는 다른 비교에 대해)의 차이는 적어도 1.5, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 70, 80, 90, 100, 500, 1000, 10,000 또는 10⁵배일 수 있다.

결합 친화도는 평형 투석, 평형 결합, 겔 여과, ELISA, 표면 플라스몬 공명 또는 분광학(예를 들어, 형광 검정 사용)을 포함하는 다양한 방법에 의해 결정될 수 있다. 결합 친화도의 평가를 위한 대표적인 조건은 HBS-P 완충제(10mM HEPES pH7.4, 150mM NaCl, 0.005% (v/v) 계면활성제 P20)이다. 이들 기법은 결합 단백질(또는 표적) 농도의 함수로서 결합되고 유리된 결합 단백질의 농도를 측정하기 위해 사용될 수 있다. 결합된 결합 단백질([결합])의 농도는 유리 결합 단백질([유리])의 농도 및 표적 상에서 결합 단백질에 대한 결합 부위의 농도와 관련되는데, (N)은 다음의 식에 의해 표적 분자 당 결합 부위의 수이다:

[결합] = N = [유리]/((1/KA) + [유리]).

그렇지만, 때때로, 예를 들어 ELISA 또는 FACS 분석과 같은 방법을 사용하여 결정되며, K_A에 비례하고, 따라서 비교를 위해 사용될 수 있는 친화도의 정량적 측정을 얻는 것으로 충분하기 때문에, 예를 들어 기능적 검정, 예를 들어 시험관내 또는 생체내 검정에서 활성에 의해 친화도의 정량적 측정을 얻기 위해, 또는 친화도의 추론을 얻기 위해 더 높은 친화도가, 예를 들어 2배 초과가 되는지 여부를 결정하는 것과 같이 K_A의 정확한 결정을 하는 것이 항상 필요한 것은 아니다.

용어 "결합 항체(또는 본 명세서에서 상호 교환 가능하게 사용되는 "결합 단백질")은 표적 분자와 상호작용할 수 있는 항체를 지칭한다. 용어는 "표적 단백질"은 "리간드"와 상호 교환 가능하게 사용된다. "혈장 칼리크레인 결합 항체"는 혈장 칼리크레인과 상호작용할 수 있는(예를 들어, 결합할 수 있는) 항체를 지칭하며, 특히 혈장 칼리크레인과 우선적으로 또는 특이적으로 상호작용하고/하거나 저해하는 항체를 포함한다. 항체는 항체의 부재에서 및 동일 조건 하에서 혈장 칼리크레인의 활성에 비해서 혈장 칼리크레인의 활성의 감소를 야기한다면, 혈장 칼리크레인을 저해한다.

"보존적 아미노산 치환"은 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체된다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 패밀리는 당업계에 정의되었다. 이들 패밀리는 염기성 측쇄(예를 들어, 라이신, 알기닌, 히스티딘), 산성 측쇄(예를 들어, 아스팔트산, 글루탐산), 비전하 극성 측쇄(예를 들어, 글라이신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 티로신, 시스테인), 비극성 측쇄(예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 아이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지 측쇄(예를 들어, 트레오닌, 발린, 아이소류신) 및 방향족 측쇄(예를 들어, 티로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)를 갖는 아미노산을 포함한다.

본 명세서에 기재된 결합 단백질에 대해 결합 단백질의 하나 이상의 프레임워크 및/또는 CDR 아미노산 잔기는 하나 이상의 돌연변이(예를 들어, 치환(예를 들어 보존적 치환 또는 비-필수 아미노산의 치환), 삽입 또는 결실)를 포함하는 것이 가능하다. 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 본 명세서에 기재된 결합 단백질에 대해 돌연변이(예를 들어, 치환(예를 들어 보존적 치환 또는 비-필수 아미노산의 치환), 삽입 또는 결실)(예를 들어, 적어도 1, 2, 3 또는 4 및/또는 15, 12, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 또는 2 미만의 돌연변이), 예를 들어 단백질 기능에 대해 실질적인 효과를 갖지 않는 돌연변이를 가질 수 있다. 돌연변이는 프레임워크 영역, CDR 및/또는 불변 영역에 존재할 수 있다. 일부 실시형태에서, 돌연변이는 프레임워크 영역에 존재한다. 일부 실시형태에서, 돌연변이는 CDR에 존재한다. 일부 실시형태에서, 돌연변이는 불변 영역에 존재한다. 특정 치환이 용인되든 아니든, 즉 결합 활성과 같은 생물학적 특성에 해로운 영향을 미치지 않는지 여부는, 예를 들어 돌연변이가 보존되는지 여부를 평가함으로써 또는 문헌[Bowie, et al. (1990) Science 247:1306-1310]의 방법에 의해 예측될 수 있다.

"효과적인 인간" 면역글로불린 가변 영역은 충분한 수의 인간 프레임워크 아미노산 위치를 포함하는 면역글로불린 가변 영역이므로, 면역글로불린 가변 영역 은 정상 인간에서 면역원성 반응을 유발하지 않는다. "효과적인 인간" 항체는 충분한 수의 인간 아미노산 위치를 포함하는 항체이므로, 항체는 정상 인간에서 면역원성 반응을 유발하지 않는다.

"에피토프"는 결합 단백질(예를 들어, Fab 또는 전장 항체와 같은 항체)에 의해 결합된 표적 화합물 상의 부위를 지칭한다. 표적 화합물이 단백질인 경우에, 부위는 아미노산 성분으로 완전히 구성될 수 있거나, 단백질(예를 들어, 글라이코실 모이어티)의 아미노산의 화학적 변형을 완전히 구성할 수 있거나, 또는 이들의 조합을 구성할 수 있다. 에피토프의 중복은 적어도 하나의 보통의 아미노산 잔기, 글라이코실기, 포스페이트기, 설페이트 기 또는 다른 분자적 특징을 포함한다.

"인간화된" 면역글로불린 가변 영역은 충분한 수의 인간 프레임워크 아미노산 위치를 포함하도록 변형된 면역글로불린 가변 영역이므로, 면역글로불린 가변 영역은 정상 인간에서 면역원성 반응을 유발하지 않는다. "인간화된" 면역글로불린의 설명은, 예를 들어 미국 특허 제6,407,213호 및 미국 특허 제5,693,762호를 포함한다.

"단리된" 항체는 단리된 항체가 얻어질 수 있는 자연 샘플의 적어도 하나의 성분의 적어도 90%가 제거된 항체를 지칭한다. 항체는 관심 종 또는 종의 집단이 중량-중량 기준으로 적어도 5, 10, 25, 50, 75, 80, 90, 92, 95, 98 또는 99% 순수하다면, "적어도" 특정 정도의 순도를 가질 수 있다.

본 명세서에 기재된 방법은 다중 용량의 항체를 이를 필요로 하는 인간 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 용어 "환자," "대상체" 또는 "숙주"는 상호 교환 가능하게 사용될 수 있다. 대상체는 HAE에 대한 사전 치료, 예컨대, 본 명세서에 기재된 항체를 포함하는 치료를 받은 대상체일 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체는 소아 대상체(예를 들어, 영아, 유아 또는 청소년 대상체)이다. 일부 실시형태에서, 인간 대상체는 18세 미만의 청소년이다. 일부 실시형태에서, 인간 대상체는 12세 내지 18세 사이의 청소년이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 40세 내지 65세 미만이다.

일부 실시형태에서, 인간 대상체는 성별에 의해서 의해서 정의된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 대상체는 여성이다.

일부 실시형태에서, 인간 대상체는 체중에 의해서 정의된다. 일부 실시형태에서, 인간 대상체는 체중이 50㎏ 미만이다. 일부 실시형태에서, 인간 대상체는 체중이 50㎏ 내지 75㎏이다. 일부 실시형태에서 인간 대상체는 체중이 75㎏ 내지 100㎏이다. 일부 실시형태에서, 인간 대상체는 체중이 100㎏ 이상이다.

일부 실시형태에서, 인간 대상체는 후두 발작의 사전 이력 또는 이의 부재에 의해서 정의된다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항체의 투여 전에 적어도 1회(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 그 초과)의 후두 발작(즉, 후두 HAE 발작)을 경험한 적이 있다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항체의 투여 이전에 후두 발작을 경험한 적이 없다.

용어 "프레칼리크레인" 및 "전혈장 칼리크레인"은 본 명세서에서 상호 교환 가능하게 사용되며, 프레칼리크레인으로도 알려진 활성 혈장 칼리크레인의 자이모겐 형태를 지칭한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "실질적으로 동일한"(또는 "실질적으로 상동성")은 제1 및 제2 아미노산 또는 핵산 서열이 유사한 활성, 예를 들어 결합 활성, 결합 선호도 또는 생물학적 활성을 가지도록 제2 아미노산 또는 핵산 서열에 대해 충분한 수의 동일하거나 또는 동등한(예를 들어, 유사한 측쇄를 지님, 예를 들어 보존된 아미노산 치환) 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드를 함유하는 제1 아미노산 또는 핵산 서열을 지칭하기 위해 본 명세서에서 사용된다. 항체의 경우에, 제2 항체는 동일한 특이성을 가지며, 동일 항원에 대한 친화도의 적어도 50%, 적어도 25% 또는 적어도 10%를 가진다.

통계학적 유의성은 임의의 공지된 방법에 의해 결정될 수 있다. 대표적인 통계학적 시험은: 스튜던트 T-검정, 맨 휘트니 U 비-모수적 검정 및 윌콕슨(Wilcoxon) 비-모수적 통계 검정을 포함한다. 일부 통계적으로 유의한 관계는 0.05 또는 0.02 미만의 P값을 가진다. 특정 결합 단백질은, 예를 들어 통계적으로 유의한 특이성 또는 결합에서 차이를 나타낼 수 있다(예를 들어, P값 < 0.05 또는 0.02). 예를 들어 두 상태 사이의 구별될 수 있는 정성적 또는 정량적 차이를 정의하는 "유발하다", "저해하다", "강력하게 하다", "상승시키다", "증가시키다", "감소시키다" 등의 용어는 차이, 예를 들어 두 상태 사이의 통계적으로 유의한 차이를 지칭할 수 있다.

"치료적으로 유효한 투여량"은 미처리 피험체에 대해 통계적으로 유의한 정도만큼 또는 적어도 약 20%, 더 바람직하게는 적어도 약 40%만큼, 훨씬 더 바람직하게는 적어도 약 60%만큼, 및 훨씬 더 바람직하게는 적어도 약 80%만큼 측정 가능한 변수, 예를 들어 혈장 칼리크레인 활성을 바람직하게 조절한다. 측정 가능한 변수, 예를 들어 질환-관련 변수를 조절하는 화합물의 능력은 인간 장애 및 병태에서 효능을 예측하는 동물 모델 시스템에서 평가될 수 있다. 대안적으로, 조성물의 이런 특성은 시험관내 변수를 조절하는 화합물을 능력을 시험함으로써 평가될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "치료하는"은 질환 또는 질환의 증상 또는 질환에 대한 소인을 치료하거나, 치유하거나, 향상시키거나, 경감시키거나, 변경하거나, 교정하거나, 완화하거나, 개선하거나, 영향을 미칠 목적으로, HAE를 갖거나, HAE의 증상을 갖거나, HAE 또는 HAE에 대한 소인 또는 HAE를 가질 위험이 있는 것으로 의심되는 대상체에 대한 1종 이상의 활성제를 포함하는 조성물의 적용 또는 투여를 지칭한다. "예방 치료"라고도 공지된 "예방적 치료"는 대상체가 노출되었거나 노출될 수 있는 질환에 대한 위험으로부터 인간을 보호하거나, 이에 대한 위험을 감소시킬 목적인 치료를 지칭한다. 일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 치료 방법은 HAE의 발생 및/또는 재발을 예방하려는 목적이다.

대상체에서 질환을 "예방하는"이라는 용어는 질환이 예방되도록 약제학적 치료, 예를 들어 약물의 투여를 대상체에게 실시하는 것, 즉, 원치 않는 조건(예를 들어, 숙주 동물의 질환 또는 다른 원치 않는 상태)의 임상적 표명 전에 투여되어서, 원치 않는 질환이 발생하는 것에 대해 숙주를 보호하는 것을 지칭한다. 질환을 "예방하는"은 또한 "예방" 또는 "예방적 치료"로서 지칭될 수 있다.

"예방적 유효량"은 원하는 예방적 결과를 달성하기 위해 필요한 시간 기간 동안, 투여량으로 유효한 양을 지칭한다. 전형적으로, 예방적 용량은 질환의 초기 단계 전 또는 초기 단계에서 대상체에서 사용되기 때문에, 예방적 유효량은 치료적 유효량 미만일 수 있다.

혈장 칼리크레인(pKal)에 결합하는 항체

본 명세서에 기재된 방법에 사용하기 위한 혈장 칼리크레인 결합 항체(항-pKal 항체)은 전장(예를 들어, IgG(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 포함), IgM, IgA(IgA1, IgA2), IgD 및 IgE 포함)일 수 있거나 또는 단지 항원-결합 단편(예를 들어, Fab, F(ab')2 또는 scFv 단편만을 포함할 수 있다. 결합 항체는 2개의 중쇄 면역글로불린 및 2개의 경쇄 면역글로불린을 포함할 수 있거나, 또는 단일 쇄 항체일 수 있다. 혈장 칼리크레인 결합 항체는 재조합 단백질, 예컨대 인간화된, CDR 접목된, 키메라, 탈면역화되거나 또는 시험관내에서 만들어진 항체일 수 있고, 선택적으로 인간 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래된 불변 영역을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 항체는 단클론성 항체이다.

일 양상에서, 본 명세서는 혈장 칼리크레인(예를 들어, 인간 혈장 칼리크레인 및/또는 뮤린 칼리크레인)에 결합되고, 적어도 하나의 면역글로불린 가변 영역을 포함하는 항체(예를 들어, 단리된 항체)를 특징으로 한다. 예를 들어, 항체는 중쇄(HC) 면역글로불린 가변 도메인 서열 및/또는 경쇄(LC) 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함한다. 일 실시형태에서, 항체는 혈장 칼리크레인, 예를 들어 인간 혈장 칼리크레인 및/또는 뮤린 칼리크레인에 결합되고, 저해한다.

일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항체는 DX-2930과 동일한 CDR 서열, 예를 들어, 서열번호 5 내지 7에 제시된 바와 같은 중쇄 CDR 서열 및 서열번호 8 내지 10에 제시된 바와 같은 경쇄 CDR 서열을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 DX-2930과 동일한 CDR 서열 및 본 명세서에 기재된 LC 가변 도메인(예를 들어, 전체 또는 프레임워크 영역 내)과 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100% 동일한 LC 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 DX-2930과 동일한 CDR 서열 및 본 명세서에 기재된 HC 가변 도메인(예를 들어, 전체 또는 프레임워크 영역 내)과 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100% 동일한 HC 면역글로불린 가변 도메인 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 DX-2930과 동일한 CDR 서열 및 본 명세서에 기재된 LC 서열(예를 들어, 전체 또는 프레임워크 영역 내)과 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100% 동일한 LC 서열을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 DX-2930과 동일한 CDR 서열 및 본 명세서에 기재된 HC 서열(예를 들어, 전체 또는 프레임워크 영역 내)과 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 또는 100% 동일한 HC 서열을 포함한다.

혈장 칼리크레인 결합 단백질은 단리된 항체(예를 들어, 다른 단백질이 적어도 70, 80, 90, 95 또는 99% 없음)일 수 있다. 일부 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 항체 또는 이의 조성물은 혈장 칼리크레인 결합 항체에 비해서 불활성 또는 부분적으로 활성인(예를 들어, 대략 5000nM 이상의 Ki로 혈장 칼리크레인에 결합하는) 항체 절단 단편(예를 들어, DX-2930)으로부터 단리된다. 예를 들어, 혈장 칼리크레인 결합 항체는 이러한 항체 절단 단편이 적어도 70%가 존재하지 않고; 다른 실시형태에서 결합 항체는 불활성 또는 부분적으로 활성인 항체 절단 단편이 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 99% 또는 심지어는 100% 존재하지 않는다.

혈장 칼리크레인 결합 항체는 혈장 칼리크레인, 예를 들어, 인간 혈장 칼리크레인을 추가로 저해할 수 있다.

일부 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 항체는 프레칼리크레인(예를 들어, 인간 프레칼리크레인 및/또는 뮤린 프레칼리크레인)에 결합되지 않지만, 혈장 칼리크레인(예를 들어, 인간 혈장 칼리크레인 및/또는 뮤린 칼리크레인)의 활성 형태에 결합된다.

특정 실시형태에서, 항체는 혈장 칼리크레인의 촉매 도메인 또는 이의 단편의 활성 부위에서 또는 활성 부위 근처에 결합되거나, 또는 혈장 칼리크레인의 활성 부위와 중첩되는 에피토프와 결합된다.

항체는 적어도 10⁵, 10⁶, 10⁷, 10⁸, 10⁹, 10¹⁰ 및 10¹¹ M^-1의 결합 친화도로 혈장 칼리크레인, 예를 들어, 인간 혈장 칼리크레인에 결합될 수 있다. 일 실시형태에서, 항체는 1×10^-3, 5×10^-4 s^-1 또는 1×10^-4 s^-1보다 느린 K_off로 인간 혈장 칼리크레인에 결합된다. 일 실시형태에서, 항체는 1×10², 1×10³, 또는 5×10³ M^-1s^-1보다 빠른 K_on으로 인간 혈장 칼리크레인에 결합된다. 일 실시형태에서, 단백질은 혈장 칼리크레인에 결합되지만, 조직 칼리크레인 및/또는 혈장 프레칼리크레인에 결합되지 않는다(예를 들어, 항체는 그것이 혈장 칼리크레인에 결합되는 것보다 조직 칼리크레인 및/또는 혈장 프레칼리크레인에 대해 실질적으로 덜(예를 들어, 음성 대조군에 비해서, 5-, 10-, 50-, 100- 또는 1000-배 미만 또는 전혀 없음) 결합된다.

일 실시형태에서, 단백질은, 예를 들어 10^-5, 10^-6, 10^-7, 10^-8, 10^-9 및 10^-10 M 미만의 Ki로 인간 혈장 칼리크레인 활성을 저해한다. 단백질은, 예를 들어 100nM, 10nM, 1, 0.5 또는 0.2nM 미만의 IC₅₀을 가질 수 있다. 예를 들어, 단백질은 혈장 칼리크레인 활성뿐만 아니라 인자 XIIa(예를 들어, 인자 XII로부터 유래됨) 및/또는 브래디키닌(예를 들어, 고분자량 키니노겐(HMWK)으로부터 유래됨)의 생성을 조절할 수 있다. 단백질은 혈장 칼리크레인 활성, 및/또는 인자 XIIa(예를 들어, 인자 XII로부터 유래됨) 및/또는 브래디키닌 (예를 들어, 고분자량 키니노겐(HMWK)으로부터 유래됨)의 생성을 저해할 수 있다. 인간 혈장 칼리크레인에 대한 단백질의 친화도는 100 nm 미만, 10nM 미만, 5nM 미만, 1nM 미만, 0.5nM 미만의 K_D를 특징으로 할 수 있다. 일 실시형태에서, 단백질은 혈장 칼리크레인을 저해하지만, 조직 칼리크레인은 저해하지 않는다(예를 들어, 단백질은 그것이 혈장 칼리크레인을 저해하는 것보다 조직 칼리크레인을 실질적으로 덜(예를 들어, 음성 대조군에 비해서, 5-, 10-, 50-, 100- 또는 1000-배 미만 또는 전혀 없음) 저해한다.

일부 실시형태에서, 단백질은 1000, 500, 100, 5, 1, 0.5 또는 0.2nM 미만의 겉보기 저해 상수(K_i,app)를 가진다.

혈장 칼리크레인 결합 항체는 단일 폴리펩타이드(예를 들어, scFv)에 또는 상이한 폴리펩타이드(예를 들어, IgG 또는 Fab) 상에 포함된 그것의 HC 및 LC 가변 도메인 서열을 가질 수 있다.

일 실시형태에서, HC 및 LC 가변 도메인 서열은 동일한 폴리펩타이드 쇄의 성분이다. 다른 실시형태에서, HC 및 LC 가변 도메인 서열은 상이한 폴리펩타이드 쇄의 성분이다. 예를 들어, 항체는 IgG, 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4이다. 항체는 가용성 Fab일 수 있다. 다른 실시에서, 항체는 Fab2', scFv, 미니바디, scFv::Fc 융합, Fab::HSA 융합, HSA::Fab 융합, Fab::HSA::Fab 융합, 또는 본 명세서의 결합 단백질 중 하나의 항원 결합 부위를 포함하는 다른 분자를 포함한다. 이들 Fab의 V_H 및 V_L 영역은 IgG, Fab, Fab2, Fab2', scFv, 페길화된 Fab, 페길화된 scFv, 페길화된 Fab2, VH::CH1::HSA+LC, HSA::VH::CH1+LC, LC::HSA + VH::CH1, HSA::LC + VH::CH1, 또는 다른 적절한 구성으로 제공될 수 있다.

일 실시형태에서, 항체는 인간 또는 인간화된 항체이거나 또는 인간에서 비-면역원성이다. 예를 들어, 항체는 인간 프레임워크 영역에 대해 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% 동일한 하나 이상의 인간 항체 프레임워크 영역, 예를 들어, 모든 인간 프레임워크 영역 또는 프레임워크 영역을 포함한다. 일 실시형태에서, 항체는 인간 Fc 도메인, 또는 인간 Fc 도메인에 대해 적어도 95, 96, 97, 98 또는 99% 동일한 Fc 도메인을 포함한다.

일 실시형태에서, 항체는 영장류 또는 영장류화된 항체이거나 또는 인간에서 비면역원성이다. 예를 들어, 항체는 하나 이상의 영장류 항체 프레임워크 영역, 예를 들어 모든 영장류 프레임워크 영역 또는 영장류 프레임워크 영역에 대해 적어도 85, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% 동일한 프레임워크 영역을 포함한다. 일 실시형태에서, 항체는 영장류 Fc 도메인에 대해 적어도 95, 96, 97, 98 또는 99% 동일한 Fc 도메인 또는 영장류 Fc 도메인을 포함한다. "영장류"는 인간(호모 사피엔스), 침팬지(판 트로글로다이테스 및 판 파니스쿠스(난쟁이 침팬지)), 고릴라(고릴라 고릴라), 긴팔원숭이, 원숭이, 여우원숭이, 아이아이원숭이(다우벤토니아 마다가스카리엔시스) 및 안경원숭이를 포함한다.

일부 실시형태에서, 인간 혈장 칼리크레인에 대한 영장류 항체의 친화도는 1000, 500, 100, 10, 5, 1, 0.5nM 미만, 예를 들어, 10nM 미만, 1nM 미만, 또는 0.5nM 미만의 K_D를 특징으로 한다.

특정 실시형태에서, 항체는 마우스 또는 토끼로부터의 서열을 포함하지 않는다(예를 들어, 뮤린 또는 토끼 항체는 아님).

일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 방법에서 사용되는 항체는 본 명세서에 기재된 바와 같은 DX-2930 또는 이의 기능성 변이체일 수 있다.

일례에서, DX-2930의 기능성 변이체는 DX-2930과 동일한 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 또 다른 예에서, DX-2930의 기능성 변이체는 DX-2930의 V_H 및 V_L 내의 것과 비교할 때 V_H 또는 V_L의 FR 내에 하나 이상의 돌연변이(예를 들어, 보존적 치환)을 함유할 수 있다. 바람직하게는, 이러한 돌연변이는 CDR의 하나 이상과 상호작용한다고 예측되는 잔기에서 일어나지 않는데, 이것은 일상적인 기법에 의해서 결정될 수 있다. 다른 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 기능성 변이체는 DX-2930의 CDR 영역의 하나 이상 내에 하나 이상의 돌연변이(예를 들어, 1, 2 또는 3개)를 함유한다. 바람직하게는, 이러한 기능한 변이체는 모체와 동일한 항원-결합을 담당하는 영역/잔기를 보유한다. 추가의 다른 실시형태에서, DX-2930의 기능성 변이체는 DX-2930의 V_H의 것과 적어도 85%(예를 들어, 90%, 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 V_H 쇄 및 DX-2930의 V_L의 것과 적어도 85%(예를 들어, 90%, 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 V_L 쇄를 포함할 수 있다. 이들 변이체는 혈장 칼리크레인의 활성 형태에 결합할 수 있고, 바람직하게는 프레칼리크레인에 결합하지 않는다.

두 아미노산 서열의 "백분율 동일성"은 문헌[Karlin and Altschul Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-77, 1993]에서와 같이 변형된 문헌[Karlin and Altschul Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-68, 1990]의 알고리즘을 사용하여 결정된다. 이러한 알고리즘은 문헌[Altschul, et al. J. Mol. Biol. 215:403-10, 1990]의 NBLAST 및 XBLAST 프로그램(버전 2.0)에 포함된다. BLAST 단백질은 관심 단백질 분자 분자와 상동성인 아미노산 서열을 얻기 위해서 XBLAST 프로그램, 점수=50, 문자길이=3을 사용하여 수행될 수 있다. 갭이 2개의 서열 사이에 존재하는 경우, Gapped BLAST는 문헌[Altschul et al., Nucleic Acids Res. 25(17):3389-3402, 1997]에 기재된 바와 같이 사용될 수 있다. BLAST 및 Gapped BLAST 프로그램을 사용하는 경우, 각각의 프로그램(예를 들어, XBLAST 및 NBLAST)의 디폴트 파라미터가 사용될 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 방법 및 조성물에서 사용되는 항체는 DX-2930 항체일 수 있다. DX-2930에 대한 중쇄 및 경쇄 전체 및 가변 서열이 하기에 제공되며, 신호 서열은 이탤릭체이다. CDR은 볼드체이고, 밑줄로 나타낸다.

[표 1A]

항체 제조

본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해서 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Harlow and Lane, (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York and Greenfield, (2013) Antibodies: A Laboratory Manual, Second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press] 참고).

관심 항체, 예를 들어, DX-2930을 암호화하는 서열은 숙주 세포에서 벡터 내에서 유지될 수 있고, 그 다음 숙주 세포는 확장되고, 추후 사용을 위해서 동결될 수 있다. 대안에서, 폴리뉴클레오타이드 서열은 항체를 "인간화"시키거나 친화도를 개선시키거나(친화도 성숙), 항체의 다른 특징을 개선시키기 위해서 유전자 조작을 위해서 사용될 수 있다. 예를 들어, 불변 영역은, 항체가 인간에서 임상 시험 및 치료에 사용되는 경우 면역 반응을 회피하기 위해서 인간 불변 영역을 보다 닮도록 조작될 수 있다. 항체 서열을 유전자 조작하여 표적 항원에 대해서 더 큰 친화도를 얻고, PKal의 활성을 저해하는 데 있어서 더 큰 효능을 얻는 것이 바람직할 수 있다. 하나 이상의 폴리뉴클레오타이드 변화를 항체에 대해서 수행할 수 있고, 표적 항원에 대한 이의 결합 특이성을 여전히 유지할 수 있다는 것이 당업자에게 자명할 것이다.

일부 항체, 예를 들어, Fab는 박테리아 세포, 예를 들어 이콜라이 세포에서 생성될 수 있다(예를 들어, 문헌[Nadkarni, A. et al., 2007 Protein Expr Purif 52(1):219-29] 참조). 예를 들어, Fab가 독립체와 박테리오파지 단백질(또는 이의 단편) 사이의 억제 가능한 정지 코돈을 포함하는 파지 디스플레이 벡터에서 서열에 의해 암호화된다면, 벡터 핵산은 정지 코돈을 억제할 수 없는 박테리아 세포 내로 전달될 수 있다. 이 경우에, Fab는 유전자 III 단백질에 융합되지 않으며, 주변세포질 및/또는 배지 내로 분비된다.

항체는 또한 진핵 세포 내에서 생성될 수 있다. 일 실시형태에서, 항체(예를 들어, scFv의 항체)는 피키아(Pichia)(예를 들어, 문헌[Powers et al., 2001, J. Immunol. Methods. 251:123-35; Schoonooghe S. et al., 2009 BMC Biotechnol. 9:70; Abdel-Salam, HA. et al., 2001 Appl Microbiol Biotechnol 56(1-2):157-64; Takahashi K. et al., 2000 Biosci Biotechnol Biochem 64(10):2138-44; Edqvist, J. et al., 1991 J Biotechnol 20(3):291-300] 참조), 한세뉼라(Hanseula) 또는 사카로마이세스(Saccharomyces)와 같은 효모 세포에서 발현된다. 당업자는, 예를 들어, 산소 조건(예를 들어, 문헌[Baumann K., et al. 2010 BMC Syst. Biol. 4:141] 참조), 오스몰농도(예를 들어, 문헌[Dragosits, M. et al., 2010 BMC Genomics 11:207] 참조), 온도(예를 들어, 문헌[Dragosits, M. et al., 2009 J Proteome Res. 8(3):1380-92] 참조), 발효 조건(예를 들어, 문헌[Ning, D. et al. 2005 J. Biochem. and Mol. Biol. 38(3): 294-299] 참조), 효모 균주(예를 들어, 문헌[Kozyr, AV et al. 2004 Mol Biol (Mosk) 38(6):1067-75; Horwitz, AH. et al., 1988 Proc Natl Acad Sci U S A 85(22):8678-82; Bowdish, K. et al. 1991 J Biol Chem 266(18):11901-8] 참조), 항체 생성을 향상시키는 단백질의 과발현(예를 들어, 문헌[Gasser, B. et al., 2006 Biotechol. Bioeng. 94(2):353-61] 참조), 배양물의 산도 수준(예를 들어, 문헌[Kobayashi H., et al., 1997 FEMS Microbiol Lett 152(2):235-42] 참조), 기질 및/또는 이온의 농도(예를 들어, 문헌[Ko JH. et al., 2996 Appl Biochem Biotechnol 60(1):41-8] 참조)를 최적화함으로써 효모에서 항체 생성을 최적화할 수 있다. 추가로, 효모 시스템은 연장된 반감기를 지니는 항체를 생성하기 위해 사용될 수 있다(예를 들어, 문헌[Smith, BJ. et al. 2001 Bioconjug Chem 12(5):750-756] 참조).

바람직한 일 실시형태에서, 항체는 포유동물 세포에서 생성된다. 클론 항체 또는 이의 항원-결합 단편을 발현시키기 위한 바람직한 포유동물 숙주 세포는 중국 햄스터 난소(Chinese Hamster Ovary: CHO 세포)(예를 들어 문헌[Kaufman and Sharp, 1982, Mol. Biol. 159:601 621]에 기재된 바와 같은, 예를 들어 DHFR 선별 마커와 함께 사용되는 문헌[Urlaub and Chasin, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220]에 기재된 dhfr- CHO 세포를 포함), 림프구 세포주, 예를 들어 NS0 골수종 세포 및 SP2 세포, COS 세포, HEK293T 세포(문헌[J. Immunol. Methods (2004) 289(1-2):65-80]) 및 트랜스제닉 동물, 예를 들어 트랜스제닉 포유동물로부터의 세포를 포함한다. 예를 들어, 세포는 유방 상피 세포이다.

일부 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 식물 또는 무세포 기반 시스템에서 생성된다(예를 들어, 문헌[Galeffi, P., et al., 2006 J Transl Med 4:39] 참조).

다양화된 면역글로불린 도메인을 암호화하는 핵산 서열에 추가로, 재조합 발현 벡터는 추가적인 서열, 예컨대 숙주 세포 내 벡터의 복제를 조절하는 서열(예를 들어, 복제원점) 및 선별 마커 유전자를 운반할 수 있다. 선별 마커 유전자는 벡터가 도입된 숙주 세포의 선별을 가능하게 한다(예를 들어, 미국 특허 제4,399,216호, 제4,634,665호 및 제5,179,017호). 예를 들어, 전형적으로 선별 마커 유전자는 벡터가 도입된 숙주 세포 상에서 G418, 하이그로마이신 또는 메토트렉세이트와 같은 약물에 대한 내성을 부여한다. 바람직한 선별 마커 유전자는 다이하이드로폴레이트 환원효소(dihydrofolate reductase: DHFR) 유전자(메토트렉세이트 선별/증폭에 의한 dhfr ^- 숙주 세포의 사용에 대해) 및 neo 유전자(G418 선별에 대해)를 포함한다.

항체 또는 이의 항원-결합 부분의 재조합 발현을 위한 대표적인 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄를 암호화하는 재조합 발현 벡터는 칼슘 포스페이트-매개 형질감염에 의해 dhfr ^- CHO 세포 내로 도입된다. 재조합 발현 벡터 내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자는 인핸서/프로모터 조절 구성요소(예를 들어, SV40, CMV, 아데노바이러스 등으로부터 유래됨, 예컨대 CMV 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 구성요소 또는 SV40 인핸서/AdMLP 프로모터 조절 구성요소)에 각각 작동적으로 연결되어 고수준의 유전자 전사를 구동한다. 재조합 발현 벡터는 또한 메토트렉세이트 선별/증폭을 사용하여 벡터에 의해 형질감염된 CHO 세포를 선별하도록 하는 DHFR 유전자를 운반한다. 선별된 형질전환체 숙주 세포는 항체 중쇄 및 경쇄를 발현시키기 위해 배양되고, 무결함 항체는 배양 배지로부터 회수된다. 표준 분자 생물학 기법은 재조합 발현 벡터를 제조하고, 숙조 세포를 형질감염시키며, 형질전환체에 대한 선별을 위해, 숙주 세포를 배양하기 위해, 배양 배지로부터 항체를 회수하기 위해 사용된다. 예를 들어, 일부 항체는 단백질 A 또는 단백질 G 결합 매트릭스에 의한 친화도 크로마토그래피에 의해 단리될 수 있다.

Fc 도메인을 포함하는 항체에 대해, 항체 생성 시스템은 Fc 영역이 글라이코실화된 항체를 생성할 수 있다. 예를 들어, IgG 분자의 Fc 도메인은 CH2 도메인의 아스파라긴 297에서 글라이코실화된다. 이 아스파라긴은 바이안테너리(biantennary)형 올리고당에 의한 변형을 위한 부위이다. 이 글라이코실화는 Fcg 수용체 및 보체 C1q에 의해 매개된 효과기 기능을 위해 필요한 것으로 증명되었다(Burton and Woof, 1992, Adv. Immunol. 51:1-84; Jefferis et al., 1998, Immunol. Rev. 163:59-76). 일 실시형태에서, Fc 도메인은 아스파라긴 297에 대응되는 잔기를 적절하게 글라이코실화하는 포유동물 발현 시스템에서 생성된다. Fc 도메인은 또한 다른 진핵생물의 번역 후 변형을 포함할 수 있다.

항체는 또한 트랜스제닉 동물에 의해 생성될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제5,849,992호는 트랜스제닉 동물의 유선에서 항체를 발현시키는 방법을 기재한다. 트랜스젠은 젖-특이적 프로모터 및 관심 항체를 암호화하는 핵산 및 분비를 위한 신호 서열을 포함하도록 구성된다. 이러한 트랜스제닉 동물의 암컷에 의해 생성되는 젖은 내부에서 분비되는 관심 항체를 포함한다. 이러한 항체는 젖으로부터 정제될 수 있거나 또는 일부 응용의 경우에는 직접 사용될 수 있다.

약제학적 조성물

본 명세서에 기재된 바와 같은 항체(예를 들어, DX-2930)는 조성물, 예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 조성물 또는 약제학적 조성물로 존재할 수 있다. 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체(예를 들어, DX-2930)는 약제학적으로 허용 가능한 담체와 함께 제형화될 수 있다. 일부 실시형태에서, 150㎎ 또는 300㎎의 DX-2930 항체가 선택적으로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 갖는 조성물, 예를 들어, 약제학적으로 허용 가능한 조성물 또는 약제학적 조성물로 존재한다.

약제학적으로 허용 가능한 담체는 생리학적으로 상용성인 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항박테리아제 및 항진균제, 등장화 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 바람직하게는, 담체는 피하, 정맥내, 근육내, 비경구, 척추 또는 표피 투여(예를 들어, 주사 또는 주입에 의해서)에 적합하지만, 흡입 및 비내(intranasal) 투여에 적합한 담체가 또한 고려된다.

본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 주으이 약제학적으로 허용 가능한 담체는 완충제, 아미노산 및 긴장성 변형제 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 임의의 적합한 완충제 또는 완충제의 조합물이 조성물의 적절한 pH를 유지하거나 유지하는 것을 돕기 위해서 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물에서 사용될 수 있다. 완충제의 비제한적인 예는 인산나트륨, 인산칼륨, 시트르산, 석신산나트륨, 히스티딘, Tris 및 아세트산나트륨을 포함한다. 일부 실시형태에서, 완충제는 약 5 내지 100mM, 5 내지 50mM, 10 내지 50mM, 15 내지 50mM 또는 약 15 내지 40mM의 농도로 존재할 수 있다. 예를 들어, 1종 이상의 완충제가 약 15mM, 16mM, 17mM, 18mM, 19mM, 20mM, 21mM, 22mM, 23mM, 24mM, 25mM, 26mM, 27mM, 28mM, 29mM, 30mM, 31mM, 32mM, 33mM, 35mM, 36mM, 37mM, 38mM, 39mM 또는 약 40mM의 농도로 존재할 수 있다. 일부 예에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 인산나트륨 및 시트르산나트륨을 포함하며, 이것은 각각 약 30mM 및 약 19mM의 농도로 존재할 수 있다.

일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 투여 전에 저장 동안 항체의 응집을 감소시키고/거나 항체의 안정성을 증가시킬 수 있는 1종 이상의 아미노산을 포함한다. 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물의 제조에 사용하기 위한 예시적인 아미노산은 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파트산, 글리신, 히스티딘, 라이신, 프롤린 또는 세린을 포함하지만 이들로 제한되지 않는다. 일부 예에서, 약제학적 조성물 중의 아미노산의 농도는 약 5 내지 100mM, 10 내지 90mM, 20 내지 80mM, 30 내지 70mM, 40 내지 60mM 또는 약 45 내지 55mM일 수 있다. 일부 예에서, 아미노산(예를 들어, 히스티딘)의 농도는 약 40mM, 41mM, 42mM, 43mM, 44mM, 45mM, 46mM, 47mM, 48mM, 49mM, 50mM, 51mM, 52mM, 53mM, 54mM, 55mM, 56mM, 57mM, 58mM, 59mM 또는 약 60mM일 수 있다. 일례에서, 약제학적 조성물은 약 50mM의 농도의 히스티딘을 함유한다.

임의의 적합한 긴장성 변형제가 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물의 제조를 위해서 사용될 수 있다. 일부 실시형태에서, 등장성 변형제는 염 또는 아미노산이다. 적합한 염의 예는 비제한적으로 염화나트륨, 석신산나트륨, 황산나트륨, 염화칼륨, 염화마그네슘, 황산마그네슘 및 염화칼슘을 포함한다. 일부 실시형태에서, 약제학적 조성물 중의 긴장성 변형제는 약 10 내지 150mM, 50 내지 150mM, 50 내지 100mM, 75 내지 100mM 또는 약 85 내지 95mM의 농도로 존재할 수 있다. 일부 실시형태에서, 등장성 변형제는 약 80mM, 81mM, 82mM, 83mM, 84mM, 85mM, 86mM, 87mM, 88mM, 89mM, 90mM, 91mM, 92mM, 93mM, 94mM, 95mM, 96mM, 97mM, 98mM, 99mM, or 약 100mM의 농도로 존재할 수 있다. 일례에서, 등장성 변형제는 약 90mM의 농도로 존재할 수 있는 염화나트륨일 수 있다.

본 명세서에 기재된 약제학적 조성물 중의 약제학적으로 허용 가능한 담체는 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 일반적으로 약제학적으로 허용 가능한 부형제는 약리학적 불활성 물질이다. 부형제의 비제한적인 예는 락토스, 글리세롤, 자일리톨, 솔비톨, 만니톨, 말토스, 이노시톨, 트레할로서, 글루코스, 소 혈청 알부민(BSA), 덱스트란, 폴리바이닐 아세테이트(PVA), 하이드록시프로필 메틸셀룰로스(HPMC), 폴리에틸렌이민(PEI), 젤라틴, 폴리바이닐프롤리돈(PVP), 하이드록시에틸셀룰로스(HEC), 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 에틸렌 글리콜, 글리세롤, 다이메틸설폭사이드(DMSO), 다이메틸폼아마이드(DMF), 폴리에틸렌 솔비탄 모노라우레이트(Tween-20), 폴리옥시에틸렌 솔비탄 모노올레에이트(Tween-80), 소듐 도데실 설페이트(SDS), 폴리솔베이트, 폴리옥시에틸렌 공중합체, 인산칼륨, 아세트산나트륨, 황산암모늄, 황산마그네슘, 황산나트륨, 트라이메틸아민 N-옥사이드, 베타인, 아연 이온, 구리 이온, 칼슘 이온, 망간 이온, 마그네슘 이온, CHAPS, 수크로스 모노라우레이트 및 2-O-베타-만노글리세레이트를 포함한다. 일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 약 0.001% 내지 0.1%, 0.001% 내지 0.05%, 0.005 내지 0.1%, 0.005% 내지 0.05%, 0.008% 내지 0.05%, 0.008% 내지 0.03% 또는 약 0.009% 내지 0.02%의 부형제를 포함한다. 일부 실시형태에서, 부형제는 약 0.005%, 0.006%, 0.007%, 0.008%, 0.009%, 0.01%, 0.02%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.07%, 0.08%, 0.09% 또는 약 0.1%로 존재한다. 일부 실시형태에서, 부형제는 폴리옥시에틸렌 솔비탄 모노올레이트(Tween-80)이다. 일례에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 0.01%의 Tween-80을 함유한다.

일부 예에서, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은 또한 본 명세서에 기재된 바와 같은 항-pKal 항체(예를 들어, DX-2930), 및 인산나트륨(예를 들어, 인산나트륨 이염기성 이수화물), 시트르산(예를 들어, 시트르산 일수화물), 히스티딘(예를 들어, L-히스티딘), 염화나트륨 및 폴리솔베이트 80 중 1종 이상을 포함한다. 예를 들어, 약제학적 조성물은 항체, 인산나트륨, 시트르산, 히스티딘, 염화나트륨 및 폴리솔베이트 80을 포함할 수 있다. 일부 예에서, 항체는 약 30mM의 인산나트륨, 약 19mM의 시트르산, 약 50mM의 히스티딘, 약 90mM의 염화나트륨 및 약 0.01%의 폴리솔베이트 80 중에 제형화된다. 조성물 중의 항체(예를 들어, DX-2930)의 농도는 약 150㎎/㎖ 또는 300㎎/㎖일 수 있다. 일례에서, 조성물은 1㎖ 용액당 약 150㎎의 DX-2930, 약 30mM의 인산나트륨 이염기성 이수화물, 약 19mM(예를 들어, 19.6 mM)의 시트르산 일수화물, 약 50mM의 L-히스티딘, 약 90mM의 염화나트륨 및 약 0.01%의 폴리솔베이트 80을 포함하거나 이들로 이루어진다. 또 다른 예에서, 조성물은 1㎖ 용액당 약 300㎎의 DX-2930, 약 30mM의 인산나트륨 이염기성 이수화물, 약 19mM(예를 들어, 19.6mM)의 시트르산 일수화물, 약 50mM의 L-히스티딘, 약 90mM의 염화나트륨 및 약 0.01%의 폴리솔베이트 80을 포함하거나 이들로 이루어진다.

약제학적으로 허용가능한 염은 화합물의 원하는 생물학적 활성을 보유하는 염이며, 임의의 원치 않는 독소 효과를 부여하지 않는다(예를 들어, 문헌[Berge, S.M., et al., 1977, J. Pharm. Sci. 66:1-19] 참조). 이러한 염의 예는 산 부가염 및 염기 부가염을 포함한다. 산 부가염은 무기산, 예컨대 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 아인산으로부터 뿐만 아니라 비독성 유기산, 예컨대 지방족 모노- 및 다이카복실산, 페닐-치환된 알칸산, 하이드록시 알칸산, 방향족산, 지방족 및 방향족 설폰산 등으로부터 유래된 것을 포함한다. 염기 부가염은 알칼리토금속, 예컨대 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘 등으로부터 뿐만 아니라 비독성 유기 아민, 예컨대 N,N'-다이벤질에틸렌다이아민, N-메틸글루카민, 클로로프로카인, 콜린, 다이에탄올아민, 에틸렌다이아민, 프로카인 등으로부터 유래된 것을 포함한다.

조성물은 다양한 형태로 존재할 수 있다. 이들은, 예를 들어 액체, 반-고체 및 고체 투여 형태, 예컨대 액체 용액(예를 들어, 주사 가능하고 주입 가능한 용액), 분산물 또는 현탁액, 정제, 알약, 분말, 리포좀 및 좌약을 포함한다. 형태는 의도되는 투여 방식 및 치료 용도에 의존할 것이다. 다수의 조성물은 주사 가능하고 주입가능한 용액, 예컨대 항체와 함께 인간 투여를 위해 사용되는 것과 유사한 조성물의 형태이다. 대표적인 투여 방식은 비경구이다(예를 들어, 정맥내, 피하, 복강내, 근육내). 일 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 정맥내 주입 또는 주사에 의해 투여된다. 또 다른 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 근육내 주사에 의해서 투여된다. 또 다른 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 피하 주사에 의해서 투여된다. 또 다른 바람직한 실시형태에서, 혈장 칼리크레인 결합 단백질은 복강내 주사에 의해서 투여된다.

본 명세서에서 사용되는 어구 "비경구 투여" 및 "비경구로 투여된"은 장용 및 국소 투여 이외의 보통 주사에 의하는 투여 방식을 의미하며, 제한없이, 정맥내, 근육내, 동맥내, 동맥내, 척추강내, 피막내, 안와내, 심장내, 피내, 복강내, 경기관, 피하, 표피밑, 관절내, 피막하, 경막하, 척추내, 경막위 및 흉골내 주사 및 주입을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항체는 피하로 투여된다.

조성물은 용액, 마이크로에멀전, 분산물, 리포좀 또는 고약물 농도에 적합한 다른 지시되는 구조로서 제형화될 수 있다. 멸균 주사 용액은 필요하다면 상기 열거된 성분 중 하나 또는 조합에 의해 적절한 용매 중에서 필요한 양으로 결합 단백질을 포함하고, 멸균여과시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산물은 염기성 분산 매질 및 상기 열거한 것에서 필요한 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 내로 활성 화합물을 포함시킴으로써 제조된다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은, 이의 사전에 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분 + 임의의 추가적인 원하는 성분의 분말을 수득하는, 진공 건조 및 냉동 건조이다. 용액의 적절한 유동성은, 예를 들어 레시틴과 같은 코팅제의 사용에 의해, 분산물의 경우에 필요한 입자 크기의 유지에 의해 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 주사 가능한 조성물의 장기적 흡수는 조성물에서 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아레이트 및 젤라틴을 포함함으로써 초래될 수 있다.

본 명세서에 기재된 바와 같은 항체(예를 들어, DX-2930)는 정맥내 주사, 피하 주사 또는 주입을 포함하는 다양한 방법에 의해서 투여될 수 있다. 예를 들어, 일부 치료 응용을 위해서, 항체는 약 1 내지 100㎎/㎡ 또는 7 내지 25㎎/㎡의 용량에 도달되도록 30, 20, 10, 5 또는 1㎎/분의 속도로 정맥 주입에 의해 투여될 수 있다. 투여 경로 및/또는 방식은 원하는 결과에 따라서 다를 것이다. 특정 실시형태에서, 활성 화합물은, 예컨대 이식물 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 제어 방출 제형과 같이 신속 방출에 대해서 화합물을 보호할 담체와 함께 제조될 수 있다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글라이콜산, 콜라겐, 폴리오쏘에스터 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제형의 제조를 위한 다수의 방법이 이용 가능하다. 예를 들어, 문헌[Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., 1978, Marcel Dekker, Inc., New York] 참조.

약제학적 조성물은 의료 장치에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어, 일 실시형태에서, 본 명세서에 개시된 약제학적 조성물은 장치, 예를 들어 무바늘 피하 주사 장치, 펌프 또는 이식물에 의해 투여될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 항체(예를 들어, DX-2930)는 생체내 적절한 분포를 보장하기 위해 제형화될 수 있다. 예를 들어, 혈액-뇌 장벽(blood-brain barrier: BBB)은 다수의 고도로 친수성인 화합물을 제외한다. 본 명세서에 개시된 치료 화합물이 BBB(원한다면)를 가로지르는 것을 보장하기 위해, 그것들은, 예를 들어 리포좀으로 제형화될 수 있다. 리포좀의 제조방법에 대해, 예를 들어, 미국 특허 제4,522,811호; 제5,374,548호; 및 제5,399,331호를 참조한다. 리포좀은 특이적 세포 또는 기관에 선택적으로 수송되는 하나 이상의 모이어티를 포함할 수 있고, 따라서 표적화된 약물 전달을 향상시킨다(예를 들어, 문헌[V.V. Ranade, 1989, J. Clin. Pharmacol. 29:685] 참조).

투여 요법은 최적의 원하는 반응(예를 들어, 치료 반응)을 제공하도록 조절된다. 예를 들어, 1회 볼러스가 투여될 수 있으며, 몇 회로 나누어진 용량이 시간에 걸쳐 투여될 수 있거나 또는 용량은 응급의 치료 상황으로 표시되는 것에 따라 비례하여 감소되거나 또는 증가될 수 있다. 투여의 용이함 및 투여의 균일성을 위하여 투여 단위 형태의 비경구 조성물을 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서에서 사용된 투여 단위 형태는 치료되는 대상체에 대해 통일된 투여량으로서 적절한 물리적으로 별개의 단위를 지칭하며; 각각의 단위는 필요한 약제학적 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 사전결정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 투여 단위 형태에 대한 사항은 (a) 활성 화합물의 독특한 특징 및 달성되어야 하는 특정 치료 효과, 및 (b) 개체에서 민감성의 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 조제하는 분야에서 고유한 제한에 직접적으로 의존하고, 지시될 수 있다.

본 명세서에 기재된 바와 같은 항체(예를 들어, DX-2930)의 치료적 또는 예방적 유효량의 예시적인 비제한적인 범위는 약 150㎎ 또는 300㎎이다. 당업자가 이해할 바와 같이, 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 성인 대상체에 대한 것보다 소아 대상체에 대해서 더 낮을 수 있다. 일부 실시형태에서, 소아 대상체에게 투여되는 유효량은 고정된 용량 또는 중량 기준 용량이다. 일부 실시형태에서, 약 150㎎ 또는 300㎎ 미만의 유효량이 소아 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 항체의 치료적 또는 예방적 유효량이 제1 치료 기간 동안 2주마다 또는 4주마다 투여된다. 일부 실시형태에서, 항체는 제2 치료 기간 동안 대상체에게 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 제1 치료 기간에서 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 제2 치료 기간에서의 항체의 치료적 또는 예방적 유효량과 상이하다. 일부 실시형태에서, 제1 치료 기간에서 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 150㎎이고, 제2 치료 기간의 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 300㎎이다. 일 실시형태에서, 제1 치료 기간의 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 제2 치료 기간의 항체의 치료적 또는 예방적 유효량과 같다. 일례에서, 제1 치료 기간 및 제2 치료 기간의 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 300㎎이다.

일부 실시형태에서, 본 명세서에 기술된 항체(예를 들어, DX-2930)의 치료적 또는 예방적 유효량의 예시적인 비제한적 범위는 약 300㎎이다. 일부 실시형태에서, 항체의 치료적 또는 예방적 유효량은 단일 용량으로 투여된다. 대상이 HAE 발작을 경험한 경우, 항체는 2주마다 약 300㎎으로 투여되는 것과 같은 다중 투여로 대상체에게 더 투여될 수 있다.

키트

본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 키트에 예를 들어 키트의 구성 요소로 제공될 수 있다. 예를 들어, 키트는 (a) DX-2930 항체, 예를 들어 항체를 포함하는 조성물(예를 들어, 약제학적 조성물) 및 선택적으로 (b) 정보 자료를 포함한다. 정보 자료는 설명용, 교육용, 마케팅용 또는 본 명세서에 기재된 방법 및/또는 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)의 사용에 관련된, 예를 들어 본 명세서에 기재된 방법을 위한, 다른 자료일 수 있다. 일부 실시형태에서, 키트는 DX-2930의 1종 이상의 1회 투여량을 포함한다. 일부 실시형태에서, 1종 이상의 1회 투여량은 150㎎ 또는 300㎎이다.

키트의 정보 자료는 그 형태가 제한되지 않는다. 일 실시형태에서, 정보 자료는 화합물의 생산, 화합물의 분자량, 농도, 만료 일자, 배치 또는 생산 위치 정보 등에 관한 정보를 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 정보 자료는 장애 및 병태, 예를 들어 혈장 칼리크레인 관련 질환 또는 병태의 치료, 예방 또는 진단을 위한 항체의 사용에 관련된 것이다.

일 실시형태에서, 정보 자료는 본 명세서에 기재된 방법을 수행하기 위한 적합한 방법, 예를 들어 적합한 투여량, 투여 형태, 투여 방식 또는 투여 일정(예를 들어, 본 명세서에 기재된 1회 투여량, 투여 형태, 투여 일정 또는 투여 방식)으로 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 투여하기 위한 설명을 포함할 수 있다. 다른 실시형태에서, 정보 자료는 적합한 대상체, 예를 들어 인간, 예를 들어 혈장 칼리크레인 관련 질환 또는 상태를 갖거나 이의 위험이 있는 인간에 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 투여하기 위한 설명을 포함할 수 있다. 예를 들어, 자료는 예를 들어 본 명세서에 기재된 투여 일정에 따라, 본 명세서에 기재된 장애 또는 상태, 예를 들어 혈장 칼리크레인 관련 질환을 갖는 환자에 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 투여하기 위한 설명을 포함할 수 있다. 키트의 정보 자료는 그 형태가 제한되지 않는다. 많은 경우, 정보 자료, 예를 들어 설명은 인쇄물로 제공되지만 컴퓨터 판독 가능 자료와 같은 다른 구성 방식으로도 제공될 수 있다.

본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 임의의 형태, 예를 들어 액체, 건조 형태 또는 동결 건조 형태로 제공될 수 있다. 항체는 실질적으로 순수하고/순수하거나 무균인 것이 바람직하다. 항체가 액체 용액으로 제공되는 경우, 액체 용액은 바람직하게는 수용액, 바람직하게는 멸균 수용액이다. 항체가 건조된 형태로 제공되는 경우, 일반적으로 적합한 용매의 추가로 재구성한다. 선택적으로 용매, 예를 들어 멸균수 또는 완충액이 키트에 제공될 수 있다.

키트는 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)을 함유하는 조성물을 위한 하나 이상의 용기를 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 키트는 조성물 및 정보 자료를 위한 별도의 용기, 분할기 또는 칸막이를 함유한다. 예를 들어, 조성물은 병, 바이알 또는 주사기에 포함될 수 있고, 정보 자료는 용기와 관련하여 포함될 수 있다. 다른 실시형태에서, 키트의 별도 요소가 단일의 분할되지 않은 용기 내에 포함된다. 예를 들어, 조성물은 라벨의 형태로 정보 자료가 부착된 병, 바이알 또는 주사기에 포함된다. 일부 실시형태에서, 키트는 각각 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)의 하나 이상의 단위 투여 형태(예를 들어, 본 명세서에 기재된 투여 형태)를 함유하는 복수의(예를 들어, 팩) 개별 용기를 포함한다. 예를 들어, 키트는 각각 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)의 단일 단위 투여량을 함유하는 복수의 주사기, 앰플, 포일 패킷 또는 블리스터 팩을 포함한다. 키트의 용기는 기밀, 방수(예를 들어, 수분 변화 또는 증발에 대한 불침투성) 및/또는 빛이 통하지 않는 것일 수 있다.

키트는 선택적으로 조성물의 투여에 적합한 장치, 예를 들어 주사기 또는 임의의 전달 장치를 포함한다. 일 실시형태에서, 장치는 계량된 용량의 항체를 분배하는 이식 가능한 장치이다. 본 개시내용은 또한 본 명세서에 기재된 구성 요소를 조합하여 키트를 제공하는 방법을 특징으로 한다.

치료

일부 양상에서, 본 개시내용은 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 HAE 치료에 사용하는 것을 제공한다. 특히, 본 개시내용은 질환이 양호하게 통제되는(예를 들어, 일정 기간, 예컨대, 4 내지 9개월 동안 발작이 없는) 환자 및/또는 적은 체중을 갖는 환자(예를 들어, 소아 환자)에 대해서 DX-2930의 투여량을 감소시키고/시키거나 투여 스케줄을 연장시키는(예를 들어, 2주마다 1회 내지 4주마다 1회) 것을 허용하는 치료 요법을 제공한다.

(i) 유전성 혈관 부종

유전설 혈관 부종(HAE)는 "퀸케 부종"(Quincke edema), C1 에스테라제 저해제 결핍, C1 저해제 결핍 및 유전성 혈관 신경성 부종(HANE)으로도 알려져 있다. HAE는 예를 들어 팔다리, 얼굴, 생식기, 위장관 및 기도에 영향을 미칠 수 있는 심각한 피하 또는 점막하 종창(혈관부종)의 예측할 수 없는 반복적인 발작이 특징이다(문헌[Zuraw, 2008]). HAE의 증상은 예를 들어 팔, 다리, 입술, 눈, 혀 및/또는 인후의 종창; 인후(후두) 종창, 급성 목쉼 및/또는 질식으로 인한 사망과 연관될 수 있는 기도 막힘을 포함한다(문헌[Bork et al., 2012; Bork et al., 2000]). 모든 HAE 환자 중 약 50%가 생애 중에 후두부 발작을 경험할 것이며, 어떤 환자가 후두부 발작 위험이 있는지 예측할 방법이 없다(문헌[Bork et al., 2003; Bork et al., 2006]). HAE 증상은, 불필요한 수술로 이어질 수 있고, 심각할 수 있으며 복부 경련, 구토, 탈수, 설사, 통증, 쇼크 및/또는 복부 응급 상태와 유사한 장 증상을 유발할 수 있는, 명확한 원인이 없는 복부 경련; 및/또는 장 종창의 반복 발생 또한 포함한다(문헌[Zuraw, 2008]). 종창은 최대 5일 이상 지속될 수 있다. 이 HAE를 갖는 개개인의 약 1/3은 발작 기간 동안 경계 홍반으로 불리는 가렵지 않은 발진이 발생한다. 대부분의 환자는 연간 여러 번의 발작을 겪는다.

HAE는 정확한 유병률을 알 수 없는 희귀 장애이지만, 현재 10,000명당 1명 내지 150,000명당 1명의 범위로 추정되며, 많은 저자들이 50,000명당 1명이 가장 가까운 추정치라는데 동의한다(문헌[Bygum, 2009; Goring et al., 1998; Lei et al., 2011; Nordenfelt et al., 2014; Roche et al., 2005]).

혈장 칼리크레인은 HAE 발작의 발병에 결정적인 역할을 한다(문헌[Davis, 2006; Kaplan and Joseph, 2010]). 정상 생리에서, C1-INH는 혈장 칼리크레인뿐만 아니라 C1r, C1s, 인자 XIa 및 인자 XIIa과 같은 다양한 다른 단백질분해효소의 활성을 조절한다. 혈장 칼리크레인은 고분자량 키니노겐(HMWK)으로부터 브래드키닌의 방출을 조절한다. HAE에서 C1-INH의 결핍에 의해, 조절되지 않은 혈장 칼리크레인 활성이 발생하고 브래디키닌의 과도한 생성이 유발된다. 브래디키닌은 국소적 종창, 염증 및 통증의 특징적인 HAE 증상을 담당하는 것으로 생각되는 혈관확장제이다(문헌[Craig et al., 2012; Zuraw et al., 2013]).

기도의 종창은 생명을 위협할 수 있으며 일부 환자에서 사망을 초래할 수 있다. 사망률은 15 내지 33%로 추정된다. HAE는 연간 약 15,000 내지 30,000명의 응급 환자를 발생시킨다.

외상 또는 스트레스, 예를 들어 치과 시술, 질병(예를 들어, 감기 및 독감과 같은 바이러스성 질병), 월경 및 수술은 혈관부종의 발작을 유발할 수 있다. HAE의 급성 발작을 예방하기 위해, 환자는 이전에 발작을 일으킨 특정 자극을 피하는 것을 시도할 수 있다. 하지만, 많은 경우, 발작은 알려진 계기없이 발생한다. 전형적으로, HAE 증상은 어린 시절에 처음 나타나고 사춘기에 악화된다. 평균적으로, 치료받지 않은 사람에게 1 내지 2주마다 발작이 나타나고 대부분의 발작은 약 3 내지 4일 동안 지속된다(ghr.nlm.nih.gov/condition/hereditary-angioedema). 발작의 빈도와 기간은 유전성 혈관부종이 있는 사람들 사이에, 심지어는 같은 가족에서도 크게 다르다.

I형, II형 및 III형으로 알려진 3가지 유형의 HAE가 있으며, 이들 모두 본 명세서에 기재된 방법으로 치료될 수 있다. HAE는 50,000명 중 1명에 영향을 미치며, I형은 약 85 퍼센트, II형은 약 15 퍼센트, III형은 매우 드문 것으로 추정된다. III형은 가장 최근에 기술된 형태이며 본래는 여성에서만 발생하는 것으로 생각되었지만, 영향을 받은 남성이 있는 가족이 확인되었다.

HAE는 상염색체 우성 경향으로 유전되어, 영향받은 사람은 영향받은 한 부모로부터 돌연변이를 물려받을 수 있다. 유전자의 새로운 돌연변이 또한 발생할 수 있으며, 따라서 HAE는 가족 중에 장애 이력이 없는 사람에게도 발생할 수 있다. 20 내지 25%가 새로운 자연 돌연변이로부터 유발되는 것으로 추정된다.

SERPING1 유전자의 돌연변이는 I형 및 II형 유전성 혈관부종을 유발한다. SERPING1 유전자는 염증 조절에 중요한 C1 저해제 단백질을 만들기 위한 지침을 제공한다. C1 저해제는 염증을 촉진하는 특정 단백질의 활성을 차단한다. I형 유전성 혈관부종을 유발하는 돌연변이는 혈액에서 C1 저해제 수준의 감소를 유발한다. 대조적으로, II형을 유발하는 돌연변이는 비정상적으로 기능하는 C1 저해제의 생산을 초래한다. 환자의 약 85%가 기능적으로 정상인 C1-INH 단백질을 매우 낮게 생산하는 특징을 갖는 I형 HAE인 반면, 나머지 약 15%는 II형 HAE이며 기능적으로 손상된 C1-INH를 정상 또는 증가된 수준으로 생산한다(Zuraw, 2008). 적절한 수준의 기능적 C1 저해제가 없으면, 고분자량 키니노겐(HMWK)로부터 과도한 양의 브래디키닌이 생성되며, 내피 세포의 표면 상 B2 수용체(B2-R)에 브래디키닌이 결합하여 혈관 누출이 증가한다(Zuraw, 2008). 브래디키닌은 혈관벽을 통해 신체 조직으로의 체액 누출을 증가시켜 염증을 촉진한다. 신체 조직 내 체액의 과도한 축적은 I형 및 II형 유전성 혈관부종을 갖는 사람에게 나타나는 종창을 유발한다.

F12 유전자의 돌연변이는 III형 유전성 혈관부종의 일부 경우와 연관된다. F12 유전자는 응고인자 XII를 만들기 위한 지침을 제공한다. 혈액응고(응집)에 결정적인 역할을 하는 것에 더해, 인자 XII는 또한 염증 자극제이며 브래디키닌의 생산에 관여한다. F12 유전자의 특정 돌연변이는 증가된 활성을 갖는 인자 XII의 생산을 유발한다. 결과적으로, 더 많은 브래디키닌이 생성되고 혈관벽은 더 많이 누출되기 쉽게 되어 종창을 유발한다. III형 유전성 혈관부종의 다른 경우의 원인은 알려지지 않은 채로 남아있다. 하나 이상의 아직 확인되지 않은 유전자의 돌연변이가 이러한 경우의 장애의 원인일 수 있다.

HAE는 알레르기 또는 다른 의학적 상태로 인한 다른 혈관부종의 형태와 유사하게 나타날 수 있지만, 원인과 치료에 있어서 크게 다르다. 유전성 혈관부종이 알레르기로 오진되면, 에피네프린은 생명을 위협하는 반응에 사용될 수 있지만, 일반적으로 HAE에 효과가 없는 항히스타민, 스테로이드 및/또는 에피네프린을 처리한다. 오진은 또한 복부 부종이 있는 환자에게 불필요한 예비 수술을 받게 하며, 일부 HAE 환자의 경우 복부 통증이 심신증으로 오진되기도 하였다.

성인과 마찬가지로, HAE를 갖는 어린이는 반복적이며 심신이 쇠약지는 발작을 겪을 수 있다. 증상은 어린 시절에 매우 일찍 발생할 수 있으며, 3세의 어린 HAE 환자에서 상부 기도 혈관부종이 보고되기도 하였다(Bork et al., 2003). 49명의 소아과학적 HAE 환자를 대상체으로 한 하나의 사례 연구에서, 23명이 18세까지 적어도 한 번의 기도 혈관부종을 겪었다(Farkas, 2010). 이 질환은 일반적으로 사춘기 이후 악화되기 때문에, HAE를 갖는 어린이, 특히 청소년에게는 충족되지 않은 중요한 의학적 요구가 있다(문헌[Bennett and Craig, 2015; Zuraw, 2008]).

HAE에 대한 다른 요법뿐만 아니라 C1 저해제 요법이 문헌[Kaplan, A.P., J Allergy Clin Immunol, 2010, 126(5):918-925]에 기술되어 있다.

HAE 발작의 급성기 치료는 가능한 빨리 부종의 진행을 멈추기 위해 제공된다. 정맥내 주사로 투여되는 기증자 혈액의 C1 저해제 농축물이 하나의 급성기 치료에 해당하지만; 이 치료는 많은 국가에서 사용할 수 없다. C1 저해제 농축물을 사용할 수 없는 응급 상황에서, C1 저해제를 함유하는 신선한 냉동 혈장(FFP)이 대안적으로 사용될 수 있다.

인간의 혈액에서 유래한 정제된 C1 저해제가 1979년부터 유럽에서 사용되었다. 몇몇 C1 저해제 치료가 현재 미국에서 사용 가능하고 2종의 C1 저해제 제품이 캐나다에서 사용 가능하다. 저온살균한 Berinert P(CSL Behring)가 급성 발작을 위해 2009년 F.D.A.에 의해 승인되었다. 나노여과한 Cinryze(ViroPharma)은 예방을 위해 2008년에 F.D.A.에 의해 승인되었다. Rhucin(Pharming)은 인간 혈액-매개 병원체로 인한 전염성 질환의 전염 위험을 수반하지 않는 개발 중인 재조합 C1 저해제이다.

급성 HAE 발작의 치료는 통증 완화를 위한 약물 및/또는 IV 수액 또한 포함할 수 있다.

다른 치료 방식은 C1 저해제의 합성을 자극하거나 C1 저해제 소비를 줄일 수 있다. 다나졸과 같은 안드로겐 약물은 C1 저해제의 생산을 자극하여 발작의 빈도 및 심각성을 줄일 수 있다.

헬리코박터 파일로리(Helicobacter pylori)는 복부 발작을 촉발할 수 있다. 헬리코박터 파일로리를 치료하기 위한 항생제는 복부 발작을 줄일 것이다.

새로운 치료제는 접촉 캐스케이드를 발작한다. 에칼란타이드(Ecallantide)(KALBITOR^®, DX-88, Dyax)는 혈장 칼리크레인을 저해하며 미국에서 승인되었다. 이카티반트(Icatibant)(FIRAZYR^®, Shire)는 브래디키닌 B2 수용체를 저해하며, 유럽과 미국에서 승인되었다.

HAE의 진단은 예를 들어 가족 이력 및/또는 혈액 검사에 의존할 수 있다. I형, II형 및 III형 HAE와 관련된 실험적 발견이 예를 들어 문헌[Kaplan, A.P., J Allergy Clin Immunol, 2010, 126(5):918-925]에 기술되어 있다. I형 HAE에서, C1 저해제의 수준은 C4의 수준과 같이 감소하는 반면, C1q 수준은 정상이다. II형 HAE에서, C1 저해제의 수준은 정상이거나 증가되지만; C1 저해제의 기능이 비정상적이다. C4 수준은 감소하고 C1q 수준은 정상이다. III형에서, C1 저해제, C4 및 C1q의 수준은 모두 정상일 수 있다.

HAE의 증상은 예를 들어 설문지, 예를 들어 환자, 임상의 또는 가족 구성원이 작성한 설문지를 사용하여 평가할 수 있다. 이러한 설문지는 이 분야에 알려져 있으며 예를 들어 시각적 아날로그 척도를 포함한다. 예를 들어, 문헌[McMillan, C.V. et al. Patient. 2012;5(2):113-26] 참조할 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체는 I형 HAE 또는 II형 HAE를 갖는다. I형 HAE 또는 II형 HAE는 HAE와 일치하는 임상 이력(예를 들어, 피하 또는 점막의 비소양성 종창 발생) 또는 진단 시험(예를 들어, C1-INH의 기능 시험 및 C4 수준 평가)과 같은 이 분야에 알려진 임의의 방법을 사용하여 진단할 수 있다.

(ii) HAE 치료에서의 DX-2930의 투여량 감소

본 개시내용은 예를 들어, 제1 치료 기간(예를 들어, 4 내지 9주) 동안, 제1 투여 스케줄에서, 2주마다 300㎎의 항-pKal 항체, 예컨대, DX-2930를 HAE 환자에게 투여함으로써 유전성 혈관부종(HAE)을 치료(예를 들어, 개선, 안정화 또는 하나 이상의 증상의 제거)하는 방법을 제공한다. HAE 발작의 발생은 표준 의학 실시 이후에 제1 치료 기간에 대해서 환자 대상체에서 모니터링된다. 환자에서 제1 치료 기간 동안 HAE 발작이 없을 때, 항체의 투여량은 감소될 수 있고/있거나 항체의 투여 간격은 연장될 수 있고, 예를 들어, 4주마다 300㎎ 또는 6주마다 300㎎으로 감소될 수 있다.

일부 실시형태에서, 인간 환자는 적은 체중을 가질 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 성인에게 적용될 때, 적은 체중은 매칭된 신체적 특징, 예컨대, 신장, 연령, 성별 등을 갖는 성인의 평균 체중보다 상당히 더 적은 성인의 체중을 지칭한다. 예를 들어, 적은 체중을 갖는 성인 환자는 상기에 언급된 바와 같은 매칭된 신체적 특징을 갖는 성인의 체중의 평균보다 적어도 20%(예를 들어, 30%, 40%, 50% 이상) 적은 체중을 가질 수 있다. 일부 예에서, 인간 환자는 인간 환자는 40㎏보다 더 적은(예를 들어, 35㎏보다 더 적은, 30㎏보다 더 적은, 25㎏보다 더 적은 등) 체중을 갖는 성인 HAE 환자이다. 다른 예에서, 적은 체중을 갖는 인간 환자는 소아 환자(예를 들어, 15세 미만)일 수 있다. 이러한 소아 환자는 30㎏보다 더 적은(예를 들어, 25㎏보다 더 적은, 20㎏보다 더 적은, 15㎏보다 더 적은 또는 10㎏보다 더 적은 등) 체중을 가질 수 있다.

일부 실시형태에서, 대상체는 성별에 의해서 정의될 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 대상체는 여성이다. 다른 실시형태에서, 대상체는 남성이다.

일부 실시형태에서, 인간 대상체는 이전 후두부 발작 이력 또는 이의 부재에 의해 정의된다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항체의 투여 전에 적어도 1회(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 그 이상)의 후두부 발작(즉, 후두부 HAE 발작)을 경험한 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항체의 투여 전에 후두부 발작을 경험하지 않은 대상체이다.

치료는 장애, 장애의 증상 또는 장애에 대한 소인을 완화, 경감, 변경, 구제, 개량 또는 개선하거나 이에 영향을 주기 위해 효과적인 양을 투여하는 것을 포함한다. 치료는 또한 발병을 지연, 예를 들어 발병을 예방하거나 질환 또는 상태의 악화를 예방할 수 있다.

DX-2930 항체를 투여하는 방법은 "Pharmaceutical Compositions."에도 기술되어 있다. 사용되는 항체의 적합한 투여량은 대상체의 연령 및 체중 및 사용되는 특정 약물에 따라 달라질 수 있다. 항체는 예를 들어 혈장 칼리크레인과 이의 기질(예를 들어, 인자 XII 또는 HMWK) 사이의 원치 않는 상호작용을 줄이는, 저해하기 위한 경쟁적 작용제로 사용될 수 있다. 항체의 투여량은 환자에서, 특히 질환 부위에서 혈장 칼리크레인의 활성 중 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% 99% 또는 99.9%를 차단하는데 충분한 양일 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체의 150㎎ 또는 300㎎이 2주마다 또는 4주마다 투여된다. 일부 실시형태에서, 항체는 2주마다 또는 4주마다 항체의 150㎎ 또는 300㎎ 투여를 포함하는 제1 치료 기간에 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 항체는 제1 치료 기간 후 제2 치료 기간에 대상체에게 투여된다. 일부 실시형태에서, 항체의 300㎎이 단일 투여량으로 투여된다. 대상체가 단일 투여 후 HAE 발작을 경험한 경우, 항체를 제1 치료 기간 동안 2주마다 300㎎으로 투여할 수 있다.

일 실시형태에서, 항체는 예를 들어 생체 내 혈장 칼리크레인의 활성을 저해(예를 들어, 혈장 칼리크레인의 적어도 하나의 활성을 저해, 예를 들어 인자 XIIa 및/또는 브래디키닌의 생산 감소)하기 위해 사용된다. 결합 단백질은 그 자체로 또는 작용제, 예를 들어 세포독성 약물, 세포독소 효소 또는 방사성 동위 원소에 접합하여 사용될 수 있다.

항체는 천연 보체-의존성 세포독성(CDC) 또는 항체 의존성 세포독성(ADCC)을 통해 항원-발현 세포를 제거하기 위해 생체 내에 직접적으로 사용될 수 있다. 본 명세서에 기재된 항체는 IgG1, -2 또는 -3로부터의 Fc 부위 또는 보체에 결합하는 IgM의 상응하는 부위와 같은 보체 결합 효과기 도메인을 포함할 수 있다. 일 실시형태에서, 표적 세포 집단은 본 명세서에 기재된 항체 및 적절한 효과기 세포로 생체 외 처리된다. 처리는 보체 또는 보체 함유 혈청의 추가로 보충될 수 있다. 또한, 본 명세서에 기재된 항체로 코팅된 표적 세포의 식세포작용은 보체 단백질의 결합으로 개선될 수 있다. 다른 실시형태에서, 보체 결합 효과기 도메인을 포함하는 항체로 코팅된 표적 세포는 보체에 의해 용해된다.

DX-2930 항체를 투여하는 방법이 "약제학적 조성물"에 기재되어 있다. 사용된 분자의 적합한 투여량은 대상체의 연령 및 체중 및 사용된 특정 약물에 따라 달라질 것이다. 항체는 예를 들어 천연 또는 병리학적 물질과 혈장 칼리크레인 사이의 원치 않는 상호작용을 저해하거나 줄이기 위한 경쟁적 작용제로 사용될 수 있다.

본 명세서에 기재된 항체의 치료적 유효량을 HAE를 갖거나, HAE를 갖는 것으로 의심되거나, HAE의 위험이 있는 대상체에게 투여하여, 장애를 치료(예를 들어, 장애의 증상 또는 특징을 개량 또는 개선하는 것, 질환의 진행을 늦추고/늦추거나 안정화하고/안정화하거나 멈추는 것)할 수 있다.

본 명세서에 기재된 항체는 치료적 유효량으로 투여될 수 있다. 항체의 치료적 유효량은, 대상체에 단일 또는 다중 투여 시, 대상체의 치료, 예를 들어 이러한 치료의 부재에서 예상되는 것을 넘어서는 정도로 대상체의 적어도 하나의 장애 증상을 치유, 완화, 경감 또는 개선하는 것에 효과적인 양이다.

투여 요법은 원하는 최적 반응(예를 들어, 치료적 반응)을 제공하기 위해 조정될 수 있다. 예를 들어, 단일 덩어리를 투여하거나, 분할된 투여량을 시간에 걸쳐 투여하거나, 투여량을 치료 상황의 긴급성에 따라 비례적으로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 다른 예시에서, 덩어리를 투여한 후 시간에 걸쳐 여러번 투여하거나 투여량을 치료 상황의 긴급성에 따라 비례적으로 감소 또는 증가시킬 수 있다. 다른 예시에서, 투여량은 여러 용량으로 나뉘어 시간에 걸쳐 투여될 수 있다. 투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위한 투여 단위 형태의 비경구 조성물로 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본 명세서에 사용된 투여 단위 형태는 치료된 대상체을 위한 단일 투여량으로 적합한 물리적으로 분리된 단위를 의미하며; 각 단위는 필요한 약제학적 담체와 관련하여 원하는 치료 효과를 생산하기 위해 계산된 사전결정된 양의 활성 화합물을 함유한다.

본 명세서에 기재된 임의의 대상체는 사전 HAE 치료, 예를 들어 HAE의 예방적 또는 치료적 치료를 받았을 수 있다. 본 개시내용의 양상은 또한 HAE에 대한 하나 이상의 사전 치료를 받은 대상체에 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 투여하는 방법을 제공한다. 일부 실시형태에서, HAE의 사전 치료는 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)를 포함하는 치료이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 2주마다 또는 4주마다 DX-2930의 다중 용량을 미리 투여받은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 2주마다 150㎎으로 DX-2930을 미리 투여받은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 2주마다 300㎎으로 DX-2930을 미리 투여받은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 4주마다 300㎎으로 DX-2930을 미리 투여받은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 사전 치료의 항체의 다중 용량은 적어도 2회, 적어도 3회, 적어도 4회, 적어도 5회, 적어도 6회, 적어도 7회, 적어도 8회, 적어도 9회, 적어도 10회, 적어도 11회, 적어도 12회, 적어도 13회 투여된다.

일부 실시형태에서, 대상체는, 당업계에 공지된 HAE에 대한 임의의 치료제를 포함할 수 있는, HAE에 대한 하나 이상의 사전 치료를 받은 대상체이다. 예시적인 항-HAE 작용제는 C1-저해제(예를 들어, Cinryze^®, Berinert^® 또는 Ruconest^®), 혈장 칼리크레인 저해제(예를 들어, Kalbitor^®), 브래디키닌 수용체 저해제(예를 들어, Firazyr^®), 약화된 안드로겐(예를 들어, 다나졸) 및 항-섬유소용해제(예를 들어, 트라넥삼산)을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항-pKal 항체 치료를 받기 전에 점차 감소되는 기간을 겪을 수 있다. 점차 감소되는 기간은 항-HAE 치료(예를 들어, C1-INH, 경구 안드로겐 및/또는 경구 항-섬유소용해제) 중인 대상체의 항-HAE 작용제의 투여량, 빈도 또는 이들 모두를 점차 줄여 대상체가 사전 HAE 치료에서 본 명세서에 기재된 항-pKal 항체 치료로 점차 넘어갈 수 있는, 항-pKal 항체 치료 전의, 기간을 의미한다. 일부 실시형태에서, 점진적 감소는 사전 치료의 투여량 및/또는 사전 치료가 투여되는 빈도를 줄이는 점진적 또는 단계적 방법을 포함한다. 점진적 감소 기간은 마지막 2 내지 4주일 수 있고 환자의 인자에 따라 달라질 수 있다. 일부 예시에서, 사전 치료는 항-pKal 항체 치료의 시작 전에 종결된다. 다른 예시에서, 사전 치료는 대상체가 항-pKal 항체의 첫 투여를 받은 후 적합한 기간(예를 들어, 2주, 3주 또는 4주) 내에 종결될 수 있다.

대안적으로, 사전 HAE 치료 중인 대상체는 점진적 감소(tapering) 기간 없이 직접 본 명세서에 기재된 항-pKal 항체 치료로 이동될 수 있다.

다른 실시형태에서, 대상체는 제1 치료, 제1 치료 기간 및/또는 본 명세서에 기재된 후속 단일 및 다중 용량 치료(제2 치료 기간) 전에 HAE의 임의의 사전 치료를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 본 명세서에 기재된 항체 이외의 임의의 치료를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 또는 제1 치료 기간 전에, 제1 치료 또는 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 적어도 2주 동안(예를 들어, 적어도 2, 3, 4, 5주 이상) 임의의 사전 HAE 치료를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 또는 제1 치료 기간 전에, 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 적어도 2주 동안 HAE에 대한 장기간의 예방적 조치(예를 들어, C1 저해제, 약화된 안드로겐, 항-섬유소용해제)를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 또는 제1 치료 기간 전에, 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 적어도 4주 동안 안지오텐신-전환 효소(ACE)를 포함하는 HAE 치료를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 또는 제1 치료 기간 전에, 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 적어도 4주 동안 에스트로겐-함유 약물 치료를 받지 않은 대상체이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 제1 치료 또는 제1 치료 기간 전에, 제1 치료 기간 동안 및/또는 제2 치료 기간 동안 적어도 2주 동안 안드로겐(예를 들어, 스타노졸롤, 다나졸, 옥산드롤론, 메틸테스토스테론, 테스토스테론) 치료를 받지 않은 대상체이다.

본 명세서에 기재된 임의의 방법은 치료 전 및 후 또는 치료 과정 동안 부작용(예를 들어, 크레아틴 인산가수분해 효소의 상승) 및/또는 항체에 의한 pKal의 저해 수준(예를 들어, 항체의 혈청 또는 혈장 농도 또는 pKal 활성 수준)에 대해 환자를 모니터하는 단계를 더 포함할 수 있다. 하나 이상의 부작용이 관찰되는 경우, 항체의 투여량을 줄이거나 치료를 종결할 수 있다. 저해 수준이 최저 치료 수준 미만인 경우, 항체의 추가 투여량을 환자에 투여할 수 있다. 환자는 또한 투여된 항체에 대한 항체의 생성; C1-저해제, C4 및/또는 C1q의 활성; 삶의 질; 임의의 HAE 발작의 빈도, 건강 관련 삶의 질, 불안 및/또는 우울(예를 들어, 병원내 불안 및 우울 척도(HADS)), 업무 생산성(예를 들어, 작업 생산성 및 활동 장애 설문지(WPAI)), 다른 주사 가능한 방식과 비교한 항체(예를 들어, D-2930) 피하 투여의 선호, 삶의 질(예를 들어, 혈관부종-삶의 질(AE-QOL), EuroQoL Group 5-dimension 보고)에 대해 평가받을 수 있다.

일부 실시형태에서, 치료의 효능을 평가하기 위해 항체(예를 들어, D-2930)의 혈장 또는 혈청 농도를 치료 과정 중에(예를 들어, 초기 투여 후에) 측정할 수 있다. 항체의 혈장 또는 혈청 농도가 약 80nM 보다 낮은 경우, 초기 투여량과 같거나 더 높을 수 있는 후속 투여가 필요할 수 있다. 항체의 혈장 또는 혈청 농도는, 예를 들어 면역 검정 또는 MS 검정으로, 대상체로부터 얻은 혈장 또는 혈청 샘플 내 항체의 단백질 수준을 결정하여 측정할 수 있다. 항체의 혈장 또는 혈청 농도는 또한 항체로 치료받은 대상체로부터 얻은 혈장 또는 혈청 샘플 내 pKal의 저해 수준을 결정하여 측정할 수 있다. 이러한 검정은 본 명세서에 기재된 잘린 키니노겐을 측정하기 위한 합성 기질 검정 또는 웨스턴 블롯 검정을 포함할 수 있다.

대안적으로 또는 추가로, 크레아틴 인산화효소의 혈장 또는 혈청 수준 및/또는 하나 이상의 응집 파라미터(예를 들어, 활성화 부분 트롬보플라스틴 시간(aPTT), 프로트롬빈 시간(PT), 출혈 발생)를 치료 과정 동안 모니터할 수 있다. 크레아틴 인산화효소의 혈장 또는 혈청 수준이 치료 과정에서 상승하는 것으로 발견되면, 항체의 투여량을 줄이거나 치료를 종결할 수 있다. 유사하게, 하나 이상의 응집 파라미터가 치료 과정에서 유의적으로 영향을 받는 것이 발견되면, 항체의 투여량을 변경하거나 치료를 종결할 수 있다.

일부 실시형태에서, 항체(예를 들어, D-2930)의 최적 투여량(예를 들어, 최적 예방적 투여량 또는 최적 치료적 투여량)은 다음과 같이 결정할 수 있다. 치료를 필요로 하는 대상체에 초기 투여량으로 항체를 제공한다. 대상체의 항체 혈장 농도를 측정한다. 혈장 농도가 80nM 미만인 경우, 후속 투여에서 항체의 투여량을 증가시킨다. 약 80nM 이상으로 항체 혈장 농도를 유지하는 항체의 투여량을 대상체에 대한 최적 투여량으로 선택할 수 있다. 치료 과정 동안 대상체의 크레아틴 포스포키나제 수준을 모니터할 수 있고 그 대상체에 대한 최적 투여량을 크레아틴 포스포키나제 수준을 기준으로 더 조정할 수 있으며, 예를 들어 치료 중 관찰된 크레아틴 포스포키나제가 상승하면 항체의 투여량을 줄일 수 있다.

(iii) 병용 요법

본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 혈장 칼리크레인 활성과 관련된 질환 또는 상태, 예를 들어 본 명세서에 기재된 질환 또는 상태를 치료하기 위한 하나 이상의 다른 요법과의 조합으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 다른 항-혈장 칼리크레인 Fab 또는 IgG(예를 들어, 본 명세서에 기재된 다른 Fab 또는 IgG), 다른 혈장 칼리크레인 저해제, 펩타이드 저해제, 소분자 저해제 또는 수술과 함께 치료적으로 또는 예방적으로(예를 들어, 치료 과정 전에, 동안에 또는 후에) 사용될 수 있다. 본 명세서에 기재된 혈장 칼리크레인 결합 항체와 조합 요법으로 사용될 수 있는 혈장 칼리크레인 저해제의 예시는 예를 들어 WO 95/21601 또는 WO 2003/103475에 기술된 혈장 칼리크레인 저해제를 포함한다.

하나 이상의 혈장 칼리크레인 저해제는 본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)와 조합으로 사용될 수 있다. 예를 들어, 조합은 부작용이 줄어들도록 필요한 저해제의 더 적은 투여량을 초래할 수 있다.

본 명세서에 기재된 항체(예를 들어, DX-2930)는 HAE를 치료하기 위한 하나 이상의 통상적인 요법과 조합으로 투여될 수 있다. 예를 들어, DX-2930 항체는 에칼란타이드, C1 에스테라제 저해제(예를 들어, CINRYZE^TM), 아프로티닌(TRASYLOL^®) 및/또는 브래디키닌 B2 수용체 저해제(예를 들어, 이카티반트(FIRAZYR^®))와 같은 2차 항-HAE 치료제와 함께 사용될 수 있다.

용어 "병용"은 같은 환자를 치료하기 위해 둘 이상의 작용제 또는 요법을 작용제 또는 요법의 사용 또는 작용이 시기적으로 겹치도록 사용하는 것을 의미한다. 제제 또는 요법은 동시에(예를 들어, 환자에 투여되는 단일 제형으로 또는 동시에 투여되는 2개의 나뉘어진 제형으로) 또는 임의의 순서로 연속적으로 투여될 수 있다. 연속적인 투여는 서로 다른 시기에 제공되는 투여이다. 하나의 작용제와 다른 작용제의 투여 사이의 기간은 수분, 수시간, 수일 또는 수주일 수 있다. 본 명세서에 기재된 혈장 칼리크레인 결합 항체는 또한 다른 요법의 투여량을 줄이기 위해, 예를 들어 투여되는 다른 작용제와 관련된 부작용을 줄이기 위해 사용될 수 있다. 따라서, 병용은 혈장 칼리크레인 결합 항체의 부재 하에서 사용되는 것보다 적어도 10, 20, 30 또는 50% 더 적은 투여량으로 2차 작용제를 투여하는 것을 포함할 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체는 본 명세서에 기재된 항-pKal 항체(예를 들어, DX-2930)의 첫 투여와 동시에 추가 IV 투여 또는 SC 투여로 C1-저해제를 제공받을 수 있다. 대상체는 이후 (C1-저해제의 추가 투여 없이) 항-pKal 항체 치료를 계속할 수 있다.

병용 요법은 다른 요법의 부작용을 줄이는 작용제를 투여하는 것을 포함할 수 있다. 작용제는 질환의 치료와 관련된 혈장 칼리크레인의 부작용을 줄이는 작용제일 수 있다.

(iv) 치료 요법을 평가하기 위한 검정

본 개시내용의 범위 내에는 본 명세서에 기재된 임의의 치료 방법의 효능을 평가하기 위한 검정 방법도 포함된다. 일부 실시형태에서, 치료의 효능을 평가하기 위해 HAE와 관련된 하나 이상의 바이오마커(예를 들어, 2-사슬 HMWK)의 혈장 또는 혈청 농도를 치료 과정 전에 그리고/또는 동안에(예를 들어, 초기 투여 후에) 측정할 수 있다. 일부 실시형태에서, 투여 후 시점에서 얻은 HAE와 관련된 하나 이상의 바이오마커의 혈장 또는 혈청 농도(수준)을 투여 후 이른 시점에 또는 초기 투여 전에 얻은 샘플의 바이오마커 농도와 비교한다. 일부 실시형태에서, 바이오마커는 2-HMWK이다.

바이오마커의 수준은, 예를 들어 바이오마커를 특이적으로 검출하는 항체를 사용한, 웨스턴 블롯 검정 또는 ELISA와 같은, 면역검정으로, 대상체로부터 얻은 혈장 또는 혈청 샘플의 바이오마커를 검출하여 측정할 수 있다. 일부 실시형태에서, 대상체로부터 얻은 혈장 또는 혈청 샘플의 2-HWMK 수준을 면역검정으로 평가한다. 2-HWMK의 검출을 위한 면역검정에 사용하기 위한 항체가 이 분야에 알려져 있으며 본 명세서에 기재된 방법에 사용하기 위한 이러한 항체의 선택은 이 분야의 당업자에게 자명할 것이다.

추가의 노력 없이, 이 분야의 당업자는, 상기 설명에 기초하여, 본 발명을 이의 가장 완전한 정도로 이용할 수 있다고 믿는다. 따라서, 다음의 구체적인 실시형태는 단지 예시적인 것으로 해석되어야 하며, 임의의 어떠한 방식으로든 본 개시내용의 나머지를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물은 본 명세서에 언급된 목적 또는 주제를 위해 참조에 의해 포함된다.

실시예

실시예 1 : 유전성 혈관부종 발작의 장기간 예방을 위한 DX-2930과 정맥내 C1 에스터라제 저해제 치료의 간접 치료 비교

연구 개요

간접 치료 비교(indirect treatment comparison: ITC)를 위해서 I형 및 II형 유전성 혈관부종(HAE)을 갖는 환자의 장기간 예방적 치료의 효능 및 안전성에 대한 기존 증거를 확인하고 요약하기 위해서 체계적인 문헌 검토를 수행하였다. 추가로, HELP 연구(문헌[Banerji et al., JAMA 320(20):2108-21, 2018])로부터의 데이터를 분석하여 체계적인 문헌 검토에 의해 확인된 증거와 함께 ITC에서 사용하기 위한 최적의 파라미터 생존 모델을 확립하였다. 모든 분석은 R(R Core Team, 2018, www.R-project.org)을 사용하여 수행하였다.

HELP 연구는 I형 및 II형 HAE에서 급성 혈관부종 발작의 예방에서의 피하 라나델루맙(DX-2930)의 효능 및 안정성을 평가하였는데, 여기서 3개의 라나델루맙 투여 요법(2주마다[q2w] 300㎎, 4주마다[q4w] 300㎎ 및 q4w 150㎎)을 조사하였고, 위약과 비교하였다(문헌[Banerji et al., JAMA 320(20):2108-21, 2018]).

물질 및 방법

2017년 6월까지의 체계적인 문헌 검색을 MEDLINE, Embase, MEDLINE In-Process 및 Cochrane Library 데이터베이스를 사용하여 수행하였다. 2016년과 2017년 동안 회의 절차 검색을 수행하였고, EAACI; 미국 알레르기, 천식 및 면역학 대학(American College of Allergy, Asthma and Immunology); 세계 알레르기 총회(World Allergy Congress); 및 유럽 면역결핍 학회(European Society for Immunodeficiency)를 포함하였다. 주요 건강 기술 평가 기관의 추가 검색은 국립 보건 및 의료 우수성 연구소(National Institute for Health and Care Excellence: NICE), 캐나다 의약품 및 기술 건강 일반 의약품 검토 기관(Canadian Agency for Drugs and Technologies in Health Common Drug Review), 스코틀랜드 의약품 컨소시엄(Scottish Medicines Consortium) 및 모든 웨일즈 의약품 전략 그룹(All Wales Medicines Strategy Group)을 포함하였다. 이 검색은 표 1B에 기재된 기준에 따라 12세 이상인 I형 또는 II형 HAE 환자에서 혈관부종 발작의 장기간 예방에 대한 연구에 초점을 맞췄다.

[표 1B]

이러한 분석의 개발 및 보고는 체계적인 검토 및 메타-분석을 위한 우선 보고 항목(PRISMA) 가이드라인을 따랐다(문헌[Moher et al., PLoS Med. 6(7):e1000097, 2009]). 무작위 대조 시험은 ITC에 대한 가장 높은 증거 표준으로 간주되었고, 무작위 대조 시험 데이터가 입수 가능하지 않은 경우 무작위 연구로부터의 데이터를 또한 고려하였다.

2명의 독립적인 리뷰어가 포함에 대해서 초록 및 전체 논문을 평가하였고, 선택된 문헌으로부터의 데이터 추출을 1명의 리뷰어가 수행하였고, 제2 리뷰어가 독립적으로 검증하였으며; 제3 리뷰어가 임의의 불활식성을 해결하였다. 포함된 무작위 대조 시험의 기술 평가는 NICE 제조사의 제출 템플레이트(Single technology appraisal (STA): user guide for company evidence submission template. UK: National Institute for Health and Care Excellence;www.nice.org.uk/process/pmg24/chapter/ instructions-for- companies#quality-assessment-of-the-relevant-randomised-controlled-trials, 2015)에서의 권고사항을 기반으로 하는 포괄적인 평가 기준을 사용하여 2명의 독립적인 리뷰어에 의해서 수행하였다.

파라미터 생존 모델

HELP 연구(문헌[Banerji et al., JAMA 320(20):2108-21, 2018])로부터의 환자-수준 데이터를 사용한 각각의 라나델루맙 투여 요법 및 위약에 대해서 제0일 및 제70일 후 제1 HAE 발작(모든 연구자-확인된 발작으로서 정의됨)까지의 시간에 대해서 카플란-마이어 곡선(Kaplan-Meier curve)을 유도하였다. 유일한 공변량으로 치료를 사용하는 단변량(univariate) Cox 비례 위험 모델을 피팅하여 위약과 비교하여 각각의 라나델루맙 용량에 대한 상대적인 치료 효과(즉, HR)를 추정하였다.

NMA에서 사용될 장기간 생존 곡선을 외삽하기 위해서, 표준 파라미터 생존 모델(지수, 바이벌, 로그 정규, 로그 로지스틱, 곰퍼츠 및 일반화 감마 생존 모델(Exponential, Weibull, log-normal, log-logistic, Gompertz, and generalized gamma survival model))(Latimer, Decision Support Unit, National Institute for Health and Clinical Excellence; nicedsu.org.uk/wp-content/uploads/2016/03/NICE-DSU-TSD-Survival-analysis.updated-March-2013.v2.pdf, 2011)을 카플란-마이어 데이터에 피팅하였다. 표준 모델이 관찰된 데이터에 피팅되지 않으면, 로그 누적 위험을 로그 시간의 자연 3차 스플라인 함수로 모델링하는 표준 바이벌 모델의 확장인 보다 유연한 비례 위험 스플라인 모델을 고려하였다(문헌[Royston et al., Stat Med. 21(15):2175-97, 2002]). 모델의 적합성을 평가하기 위해서 사용된 방법은 외삽의 임상적 타당성, 적합도 측정 및 관찰된 생존 데이터와 피팅된 생존 곡선을 겹쳐서 육안으로 검사하는 것이었다.

발작률 및 제1 HAE 발작까지의 시간

이러한 ITC에 대한 관심 결과는 이벤트(HAE 발작) 비율 및 이벤트까지의 시간(제1 HAE 발작)이었다. 발작률은 28일 주기 동안 경험한 발작 횟수로 정의되었고, 상대적인 치료 효과는 비율 비(rate ratio: RR)로 추정되었다. 제1 발작까지의 시간은 HAE를 갖는 환자가 제0일(예방 요법의 제1 용량 투여일) 또는 제70일(정상 상태 혈장 라나델루맙 농도에 도달한 대략적인 날짜) 이후에 첫 번째 발작이 일어난 시간으로 정의되었다. 제1 발작까지의 시간에 대해서, 상대적인 치료 효과는 위험비(hazard ratio: HR)로 추정되었다.

마코프 체인 몬테 칼로 방법(Markov chain Monte Carlo method)에 의존한 베이시안(Bayesian) NMA를 개발하여 발작률 및 제1 발작까지의 시간의 결과를 평가하였다. 멀티-아암 시험(문헌[Dias et al., Decision Support Unit, National Institute for Health and Clinical Excellence; nicedsu.org.uk/wp-content/uploads/2017/05/TSD2-General-meta-analysis-corrected-2Sep2016v2.pdf, 2011])으로부터 발생한 상관관계를 고려하면서 하나의 분석에서 직접 증거 및 간접 증거의 합성을 허용하는 치료 효과 모델을 사용하여 상대적인 효능을 추정하였다. 증거 네트워크의 일부 연구는 제1 발작까지의 시간을 보고하지 않았다. 그러나, HAE 발작을 경험하지 않은 환자의 비율을 모든 연구에 대해서 보고하였기 때문에, NMA 방법의 확장을 사용하여 동일한 분석에서 카운트 데이터 및 이벤트까지의 시간 데이터를 합성하였다(문헌[Woods et al., BMC Med Res Methodol. 10:54, 2010]). 신뢰 구간(CrI)을 사용하여 치료 효과를 비교하였고; 치료제 대 위약에 대한 CrI가 값 1을 포함하지 않는 경우, 그 결과는 통계학적으로 유의한 것으로 간주되었다. HELP 및 CHANGE 둘 다는 확인된 HAE를 갖는 환자에서의 무작위 이중-맹검 시험이었다(문헌[Banerji et al., JAMA. 320(20):2108-21, 2018; Zuraw et al., N Engl J Med. 363(6):513-22, 2010]). 고정 및 무작위 효과 모델을 NMA에 대해서 고려하였고, 모델 선택은 연구 설계, 포함 기준 및 환자 특정의 평가에 기초하였다.

예측된 생존 곡선

ITC로부터의 HR과 HELP 연구로부터의 위약 데이터에 피팅된 스플라인 생존 곡선을 조합함으로써 제0일 및 제70일 후 제1 발작까지의 시간에 대해서 별개로 각각의 치료 아암을 위해서 예측된 생존 곡선을 도출하였다. 이들 곡선을 사용하여 ITC에서 각각의 비교자에 대해서 예방적 치료 시작(제0일 및 제70일) 후 60개월에 발작이 없는 환자의 비율 및 95% 신뢰 구간(CI)을 추정하였다.

결과

체계적인 문헌 검토

체계적인 문헌 검토를 수행하였다. 도 1에 확인된 보고의 요약을 제공한다. 검색은 1299건의 보고를 확인하였고, 이들 중 52건(7건의 무작위 대조 시험[RCT]으로부터의 22건의 보고 및 23건의 비무작위 대조 시험[nRCT]으로부터의 30건의 보고)이 적격성 기준을 충족하였고, HELP 연구로부터의 라나델루맙 결과와 함께, 이를 ITC에서 가능한 포함에 대한 상세한 타당성 평가를 위해서 선택하였다. 22건의 보고는 적격성 기준을 충족하는 52건의 보고 중에서 1차 간행물이 이미 식별된 2차 간행물이었기 때문에 제외시켰다. 타당성 평가에서의 나머지 보고 중, 20건은 실제 적용 가능성이 부족하였기 때문에, 부적절한 비교자로서 제외시켰다. 이들 중에는 2건의 RCT(문헌[Gelfand et al., N Engl J Med. 295(26):1444-8, 1976; Sheffer et al., Ann Int Med. 86(3):306-8, 1977) 및 약화된 안드로겐의 사용을 기재하는 15건의 nRCT(문헌[Fuest et al., Eur J Clin Invest. 41(3):256-62, 2011; Agostoni et al., Medicine (Baltimore).71(4):206-15, 1992; Bork et al., Ann Allergy Asthma Immunol. 100(2):153-61, 2008; Caminoa et al., Allergy. 68(suppl 97):61, 2013; Cicardi et al., J Allergy Clin Immunol. 99(2):194-6, 1997; Davis et al., Johns Hopkins Med J. 135(6):391-8, 1974; Farkas et al., J Oral Maxillofac Surg. 57(4):404-8, 1999; Kreuz et al., Transfusion.49(9):1987-95, 2009; Obtulowicz et al., Int Rev Allergol Clin Immunol. 3(3):163-6, 1997; Ott et al., Clin Endocrinol (Oxf). 66(2):180-4, 2007; Psarros et al., Int Arch Allergy Immunol. 164(4):326-32, 2014; Rosen et al., Birth Defects: Orig Artic Ser. 16(1):499-507; 1980; Steiner et al., Orphanet J Rare Dis. 11:43; 2016; Winnewisser et al., J Int Med. 241(1):39-46, 1997; Zotter et al., Orphanet J Rare Dis. 9:205, 2014) 및 HAE 환자에서 SC C1-INH/재조합 인간 히알루로니다제의 병용 요법의 사용(장기간 예방법으로서 HAE 관리를 위한 WAO/EAACI 가이드라인에 의해서 이러한 개입이 권고되지 않기 때문(문헌[Maurer et al., Allergy. 73(8):1575-96, 2018]))을 기재하는 1건의 RCT(문헌[Riedl et al., Allergy Asthma Proc. 37(6):489-500, 2016]); 미국 및 캐나다 외부에서 상업적으로 입수 가능하지 않기 때문에(CSL Behring. Global product list; www.cslbehring.com/products/global-products-list; retrieved 2019 Feb. 20) SC C1-INH의 사용을 제외한 것을 기재한 2건의 RCT(문헌[Longhurst et al., N Engl J Med. 376(12):1131-40, 2017; Zuraw et al., Allergy. 70(10):1319-28, 2015])(임의의 비교의 실제 적용 가능성을 제한함)이 존재하였다.

1개의 보고는 IV C1-INH의 3상 연구로부터의 결과를 보고하였고(문헌[Zuraw et al., N Engl J Med. 363(6):513-22, 2010]), HELP 연구로부터의 라나델루맙 결과와 함께 ITC에 적절한 것으로 간주되었다. 이러한 RCT가 ITC에 적절하기 때문에, 그리고 주어진 개입에 대해서 어떠한 nRCT도 확인될 수 없는 경우에만 고려되었기 때문에, 이러한 개입에 대한 4건의 nRCT(문헌[Bernstein et al., J Allergy Clin Immunol Pract. 2(1):77-84 2014; Aygoeren-Puersun et al., J Allergy Clin Immunol. 137(2):AB251, 2016; Rasmussen et al., Ann Allergy Asthma Immunol. 116(5):476-7, 2016; Zuraw et al., Am J Med. 125(9):938.e1-.e7, 2012])를 그 다음에 제외시켰다. 나머지 5건의 연구(문헌[Banerji et al., N Engl J Med. 376(8):717-28, 2017; Bork et al., Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 112(1):58-64, 2011; Bouillet et al., Allergy. 72(Suppl 103):593, 2017; Farkas et al., Allergy. 67(12):1586-93, 2012; Levi et al., J Allergy Clin Immunol. 117(4):904-8, 2006])는 연구 설계, 연구 집단, 개입, 평가변수 및/또는 환자 특징에서의 차이 및/또는 명확성 부족으로 인해서 제외시켰다(표 2). ITC에 포함된 2건의 연구에 대한 네트워크 다이어그램을 도 2에 도시한다. 각각의 연구에 대한 설계를 표 3에 요약하고, 두 연구에 대한 1차 결과에 대한 기준선 인구통계학 특징 및 결과를 표 4에 제시한다.

제1 발작까지의 시간(HELP 연구)

HELP 연구에서 입증된 바와 같이, 제1 HAE 발작까지의 시간은 모든 3개의 라나델루맙 투여 요법에 대해서 각각의 시점 후에 위약에 비해서 증가되었는데, 이것은 치료 시작으로부터 제0일 및 제70일 후에 제1 발작을 겪는 위험 감소에 상응한다. 제0일 후, 제1 발작까지의 중위 일수는, 위약을 제공받은 환자의 경우 8(95% CI: 6-18)인 것과 비교하여, 라나델루맙 300㎎ q2w를 제공받은 환자의 경우 59일(95% CI: 28-추정 불가[not estimable: NE]); 라나델루맙 300㎎ q4w의 경우 28(95% CI: 10-101); 그리고 라나델루맙 150㎎ q4w의 경우 26(95% CI: 11-NE)이었다. 70일 후, 라나델루맙 300㎎ q2w를 제공받은 환자 및 150㎎ q4w를 제공받은 환자 중 50% 초과가 6개월 치료 기간 후에 발작을 받지 않았고; 따라서 제1 발작까지의 중위 일수는 NE였다. 위약을 제공받은 환자의 경우 12일(95% CI: 6-16)인 것과 비교하여 라나델루맙 300㎎ q4w를 제공받은 환자에서 제70일 후 제1 발작까지의 중위 시간은 61일(95% CI: 25-NE)이었다.

HELP 연구에서 관찰된 바와 같이, 위약을 제공받은 환자 중 2.4%가 제0일에서부터 치료 기간 이후까지 발작이 없었고, 이러한 비율은 라나델루맙 300㎎ q2w, 300㎎ q4w 및 라나델루맙 150㎎ q4w를 제공받은 환자의 경우 각각 44%, 31% 및 39%였다(표 5). 발작이 없는 환자의 유사하거나 더 높은 백분율이 제70일에서부터 치료 기간 후까지 라나델루맙 치료에서 관찰되었다. 발작이 없는 라나델루맙-치료된 환자의 비율을 또한 치료 후 제1 발작까지의 시간의 카플란-마이어 추정치로부터 도출하여 카플란-마이어 생존 분석의 타당성을 확인하였다. 발작이 없는 환자의 이러한 추정된 백분율은 일반적으로 각각 제0일 및 제70일에서부터 6개월 치료 기간까지 관찰된 결과와 일반적으로 일관되었다(표 5).

제1 발작 종점까지의 시간에 대한 모델 선택

다양한 파라미터 생존 모델을 0일 및 70일 후 제1 발작까지의 시간에 대한 데이터에 적용하였다. 6개의 표준 파라미터 모델 중에서, 아카이케 정보 기준(Akaike information criterion: AIC) 값은, 곰퍼츠 모델이 연구 기간(제0일 및 제70일 동안) 카플란-마이어 데이터에 가장 양호하게 피팅된다는 것을 나타내었다. 곰퍼츠 모델은 제0일에서부터 연구 종료 시까지 발작을 받지 않은 환자가 연구 종료 후 발작 없이 무기한으로 유지될 것이라는 것을 예측하였다. 그러나, 약물학적 내약성의 가능성 및 치료 효과가 연장된 노출로 인해서 줄어들 수 있는 반응 손실(문헌[Roda et al., Clin Transl Gastroenterol. 7:e135, 2016; Salva Lacombe et al., Drugs. 51(4):552-70, 1996])에 기초하여 보수적으로, 곰퍼츠 모델은 임상적으로 타당하지 않다고 간주되었다.

따라서, 파라미터 생존 분석에 대한 표준 분포 중 어느 것도 관찰된 데이터에 양호하게 피팅되지 않기 때문에, 비례 위험 스플라인의 보다 유연한 파라미터 모델이 데이터에 적합하였다. 내부 노트(internal knot)가 하나(k=1)인 스플라인 모델이 데이터에 가장 잘 양호하게 피팅되는 것을 발견하였고, 이는 카플란-마이어 데이터와의 육안 비교 및 위약 대비 각각의 라나델루맙 용량의 상대적 효과의 시간 경과에 따른 감소의 임상적 타당성에 기초하여 확인되었다. 스플라인 모델에 더 많은 내부 노트(k=2 내지 5)를 추가해도 모델 피팅이 개선되지 않았다.

네트워크 메타-분석을 통한 간접 치료 비교

고정-효과 모델을 NMA를 위해서 선택하였는데, 그 이유는 어떠한 체계적인 차이도 HELP 연구 및 CHANGE 시험에서 환자 집단 사이에서 식별되지 않았기 때문이었고; 두 환자 집단 모두는 연령, 성별 및 I형 또는 II형 HAE를 갖는 환자의 백분율이 유사하였다(상기 표 3 및 표 4). 따라서 각각의 시험은 동일한 치료 효과를 추정하고, 연구 간의 임의의 변화는 단지 샘플링 변화로 인한 것이었다고 예측하였다.

발작률

RR은 위약에 비해서 라나델루맙(모든 투여 요법) 또는 IV C1-INH를 제공받은 환자에 대해서 발작률의 상당한 감소를 나타내었다(도 3). 발작률의 감소(4주 주기당)는 위약과 비교하여 각각 라나델루맙 300㎎ q2w, 300㎎ q4w 및 150㎎ q4w 치료 아암의 경우 87%, 73% 및 76%(위약과 비교하여 각각의 중위 RR[95% CrI] 0.13[0.07-0.24], 0.27[0.18-0.40] 및 0.24[0.15-0.39]에 상응함) 및 IV C1-INH의 경우 51%(중위 RR[95% CrI] 0.49[0.40-0.60]에 상응함)였다.

제1 발작까지의 시간

치료제를 위약과 비교하는 경우, 제0일 후 제1 발작의 상당하게 더 낮은 위험이 모든 라나델루맙 투여 요법에 대해서 관찰되었고(중위 HR[95% CrI]: 300㎎ q2w, 0.27[0.13 내지 0.55]; 300㎎ q4w, 0.39[0.21 내지 0.74]; 150㎎ q4w, 0.34 [0.17 내지 0.66]), 이는 제0일 후 제1 발작 위험에서 61% 내지 73% 감소에 상응하였다(도 4a). 결과는 제70일 후 제1 발작 위험에 대해서 유사하였고(중위 HR[95% CrI]: 300㎎ q2w, 0.09[0.04 내지 0.22]; 300㎎ q4w, 0.27[0.14 내지 0.53]; 150㎎ q4w, 0.20[0.10 내지 0.41]), 이는 73% 내지 91%의 감소에 상응하였다(도 4b). 이에 반해서, 제1 발작의 위험 감소가 위약과 비교하여 IV C1-INH 치료에서 관찰되었지만, 이러한 감소는 통계학적으로 유의하지 않았다(중위 HR[95% CrI]: 제0일, 0.54 [0.23 내지 1.19]; 제70일, 0.53 [0.23 내지 1.19]).

60개월 기간 동안 예측된 생존 곡선

ITC로부터의 HR과 HELP 연구 위약 데이터에 대한 스플라인 생존 피팅을 조합함으로써 제1 발작까지의 시간에 기초하여 60개월 기간 동안 예측된 생존 곡선을 제0일 후 및 제70일 후에 각각의 치료에 대해서 도출하였다(도 5A 및 도 5B). 발작이 없는 환자의 가장 높은 예측 비율이 두 시점에 걸쳐서 라나델루맙 300㎎ q2w에서 관찰되었다. 제0일 후에 제1 발작까지의 시간에 대한 데이터를 60개월에 외삽하는 경우, 발작이 없는 환자의 예측 백분율은 라나델루맙 300㎎ q2w, IV C1-INH 및 위약으로의 치료에 대해서 각각 26%, 6.5% 및 0.6%였다. 제1 발작까지의 시간 데이터를 60개월에 외삽하는 경우, 발작이 없는 환자의 예측 백분율은 라나델루맙 300㎎ q2w, IV C1-INH 및 위약의 경우 제70일 후 각각 46%, 0.9% 및 0%였다.

내부 노트가 1(k=1)인 비례 위험 스플라인 모델이 HELP 연구로부터의 관찰된 제1 발작까지의 시간 데이터에 가장 잘 피팅된다는 것을 발견하였다. 이러한 데이터는, HAE 발작의 예방법에 대한 위약과 비교하여 라나델루맙을 제공하는 것의 주요 이점은 발작이 없는 기간의 증가였다는 것을 입증하였다. 발작이 없는 환자의 가장 높은 예측 비율이 모든 시점에 걸쳐서 라나델루맙 300㎎ q2w에서 관찰된 반면, 발작이 없는 환자의 가장 낮은 예측 비율은 IV C1-INH 및 위약에서 관찰되었다. 라나델루맙의 대략 14일 반감기(범위, 13.8 내지 15.0일에 기초하여), 라나델루맙의 정상 상태 농도까지의 시간은 대략 70일인 것으로 예측되었다. 70일 후, 라나델루맙이 정상 상태 농도에 도달한 경우, 라나델루맙 300㎎ q2w 치료 아암에서의 환자 중 50% 초과는 6개월 연구 기간의 나머지 기간 동안 발작이 없었고, 300㎎ q4w 아암에서 70일 후 제1 발작까지의 중위 일수는 61일이었고, 위약 아암은 12일이었다. 예측 생존 곡선에 기초하여, 제1 발작까지의 시간을 추후에 평가할 때(각각 제0일 및 제70일 후), 라나델루맙 300㎎ q2w로의 치료의 첫 번째 6개월 후에 발작이 없는 환자의 비율이 증가하였다(45% 및 72%); 유사한 패턴이 라나델루맙 300㎎ q4w(각각 31% 및 37%) 및 150㎎ q4w(각각 36% 및 47%) 치료 아암에서 관찰되었지만, C1-INH를 제공받은 환자는 후속 평가에서 반대 패턴의 감소를 나타내었다(각각 20% 및 13%). 이러한 발견은 일반적으로 이러한 데이터를 60개월에 외삽할 때 일관되게 유지되었다.

따라서, 일정 기간(예를 들어, 6개월) 동안 라나델루맙 치료 중인 HAE 환자는 HAE 발작이 없음을 나타내었고, 라나델루맙의 감소된 투여량, 예를 들어, 300㎎/2주에서부터 300㎎/4주로의 감소를 제공받을 수 있다.

실시예 2: HELP-03 및 CHANGE 연구로부터의 개별 환자 데이터를 사용한 DX-2930과 정맥내 C1 에스터라제 저해제의 간접 치료 비교

목적

목적은 HELP-03(HELP) 및 CHANGE 연구로부터의 개별 환자 데이터(IPD)를 사용하여 라나델루맙(300㎎ 피하 2주마다(300㎎ SC q2w), 300㎎ 피하 4주마다(300㎎ SC q 2w)) 및 Cinryze^®(C1-INH) 1000단위 정맥내(1000U IV)의 간접 치료 비교(ITC)를 수행하는 것이었다. 집계된 데이터 대신 IPD가 몇몇 이유로 인해서 이롭다. 먼저, IPD는 네트워크 전반의 이질성을 줄이고, 잠재적인 불일치 문제를 해결하는 더 많은 정보를 제공한다. 추가로, IPD는 하위군 효과의 추정을 용이하게 하고, 수렴을 돕고, 전반적으로 보다 정확한 추정치를 산출한다. 추가로, IPD는 연구내 연관성을 연구간 연관성으로부터 구별되게 한다. IPD를 사용하여, 소수의 연구에서도 증거가 희박하고 샘플 크기가 작을 때 종종 문제가 되는 생태학적 편향을 줄일 수 있다.

관심 결과

HELP 및 CHANGE 연구 둘 다는 28일당 HAE 발작 횟수를 인용하였다. BresMed의 이전 연구는, HELP 연구에서 제0일 및 제70일의 치료 후 첫 번째 HAE 발작까지의 시간을 보고하였다. 이러한 결과는 CHANGE 연구에서 보고된 IPD를 사용하여 추정하였다. HELP 연구만 발작 횟수의 50% 이상의 감소를 겪은 환자의 비율을 개시하였다. CHANGE 연구는 이러한 결과 측정치를 보고하지 않았지만, 그것은 ITC에 관련된 것으로 간주되지 않았다.

결론

총괄적으로, 유사성 가정은 28일당 기준선 HAE 발작률과 관련하여 HELP 연구와 CHANGE 연구 간에 유지되는 것으로 간주되지 않았다. 이것은 전문 임상의 소견에 의해서 확인되었다. 다른 관심 공변량(예를 들어, 연령, 성별 및 체중)이 또한 연구 사이에서 달라졌지만, 이것은 결과에 대해서 더 적은 영향을 갖는 것으로 간주되었다. 따라서, 기본 사례 분석인 기준선에서 28일당 HAE 발작률을 설명하는 반면, 민감도 분석의 회귀 모델은 치료 효과를 잠재적으로 변형할 수 있는 다른 주요 공변량을 포함할 것이라고 결정되었다. 기본 사례와 민감도 분석 결과 간의 임의의 차이는 기본 사례의 결과가 강력하지 않고, 연구 차이에 의해 가능하게 유도될 수 있음을 나타낼 수 있다. 이러한 경우, 제2 민감도 분석은 환자당 또는 조사자당 발작의 평가가 28일당 발작률의 결과에 영향을 미치는지를 평가하기 위해서 계획된다. 이를 설명하기 위해서, 분석은 두 연구에서 환자 보고 HAE 발작만을 포함할 것이다.

공통 비교자

도 6에서의 증거 네트워크에 나타난 바와 같이, HELP 연구 및 CHANGE 연구에서 Cinryze^®(C1-INH) 및 라나델루맙에 대한 공통 비교자는 위약이었다. HELP 연구는 3종의 상이한 라나델루맙 투여 요법을 위약과 비교한 반면, CHANGE 연구는 Cinryze^®를 위약과 비교한 교차 연구였다. 라나델루맙 150㎎ 용량(이 적응증에 대해서 승인되지 않음)을 제외시키는 것은 비교 수를 감소시켰고, 다중성 문제(예를 들어, 다중 가설 시험)를 우회하였다. 다중 가설을 동시에 시험한 경우, 알파 오류가 증가하고, 따라서 유의성 수준의 조정이 필요하다(예를 들어, 본페로니(Bonferroni)). 5% 미만의 유의성 수준에서의 통계학적으로 유의한 차이를 식별하는 것은 어려울 수 있다. 따라서, 다중 가설 시험이 회피되도록 권고된다.

방법

증거 합성에 대한 통계학적 접근법은 프리퀀티스트(frequentist) 방법 또는 베이시안(Bayesian) 방법을 주로 특징으로 할 수 있다. 프리퀀티스트 방법, 예컨대, 조정 간접 비교(예를 들어, 부처(Bucher) 방법, 매칭-조정 간접 비교(matched-adjusted indirect comparison: MAIC) 및 모의 처리 비교(simulated treatment comparison: STC))는 단일 단계에서 2개의 개입의 간접 비교를 허용한다. 용어 네트워크 메타-분석(NMA)은 개입의 더 큰 네트워크의 동시 비교를 지칭한다. 베이시안 방법에서, 최소 정보의 프라이어가 보통 치료 효과에 할당된다.

이러한 ITC의 목적을 위해서, 제한된 증거 기준(N=2 연구)으로 인해서 프리퀀티스트 접근법이 베이시안 접근법보다 선호되었다. 현재, 증거 합성에 대한 통계학적 모델에서 IPD를 포함하기 위해서 다양한 프리퀀티스트 접근법이 존재한다. 이러한 방법은 공통 비교자 아암("앵커(anchor)")의 포함 또는 제외 기준에 주로 기초하여 상이하다.

제2 단계로서, 부처 방법을 종종 사용하여 최종 ITC 결과를 얻기 위한 고정된 비교에서 상대적인 치료 효과를 조합한다. 2개의 개입만을 한번에 비교할 수 있다. 다중 비교가 관심 대상인 경우, 다중 분석을 수행해야 한다. 상응하는 지점 추정치는 베이시안 분석을 통해서 얻은 것과 매우 유사하다고 예측된다. 그러나, 95% 신뢰 구간은 통상적으로 베이시안 분석의 신뢰 구간만큼 넓지 않다.

광범위한 타당성 평가 후에, 본 발명의 ITC를 프리퀀티스트-기반 고정 접근법을 사용하여 수행하였다. 중요하게는, 이러한 접근법은 무작위를 보존하였다. 기본 사례 분석에서, 회귀 모델은 기준선에서 28일당 HAE 발작률을 포함하였다. 다른 관심 공변량(예를 들어, 연령, 성별 및 체중)을 민감도 분석에 추가하여 결과에 대한 이러한 변수의 전체 효과를 조사하였다. 제2 민감도 분석은 기본 사례 결과에 대해서 조사자에 의해서 확인되지 않은 환자-보고된 HAE 발작의 영향을 평가하였다.

프아송 회귀 - 28일당 HAE 발작률

프아송 회귀 분석을 수행하여 28일당 HAE 발작률에 대한 비율 비(RR)를 추정하였다. 프아송 회귀는 하기 기준을 충족할 필요가 있다: (1) 관찰은 독립적임, (2) 계수치는 프아송 분포를 따름, 및 (3) 모델의 조건화 평균 및 분산은 동일함.

관심 결과(28일당 HAE 발작률)가 계수치 데이터로서 표현된다는 것을 고려하여, 프아송 회귀가 적절하다고 간주되고, 치료 기간당 발작 횟수가 모델에서 고려된다. Banjeri 등에 따라서, 추적 시간에서 차이를 조정하기 위해서 모델은 오프셋 변수를 포함하였다. 오프셋은 치료 기간 동안 환자를 관찰한 날짜의 로그값으로서 정의되었다.

치료 효과 측정치(모델 입력값)는 28일당 예측된 발작 RR로서 표현되었다. 라나델루맙 요법(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w)의 경우, 이러한 측정치는 위약에서의 발작률에 대한 각각의 치료 동안 28일당 발작률의 비로서 표현되었다. Cinryze^®(C1-INH)의 경우, RR은 위약에서의 발작률에 대한 Cinryze^®로의 치료 동안 28일당 발작률의 비를 나타내었다. 그 다음 프아송 모델에 의해서 생성된 예측된 RR을 ITC에 삽입하였다.

비-파라미터 추정 및 Cox 회귀

결과 "제1 발작까지의 시간"에 대해서, Cox 회귀 분석을 수행하여 위약에 비해서 라나델루맙 요법(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w) 각각에서의 제1 발작의 위험비(HR) 및 위약에 비해서 Cinryze^®의 제1 발작의 HR을 예측하였다. 기재된 바와 같이, 그 다음 예측 HR을 (부처 방법을 통해서) ITC에 삽입하여 라나델루맙 투여 요법 및 Cinryze^®를 비교하였다. Cox 휘기는 반-파라미터적이고, 따라서 용량은 기준선 위험 형태와 관련된 요건을 명시하지 않지만, 하기 가정이 충족되어야 한다: (1) 비례 위험, (2) 공변량 간의 선형 관계 및 (3) 독립적인 관찰.

카플란-마이어 곡선을 비-파라미터 추정을 통해서 도출하여 "0일 및 70일 후 제1 발작까지의 시간"의 결과를 모델링하였다. 환자를 마지막 데이터 수집일에 관찰하였다. 그래프는 위험 함수가 시간에 따라서 비례하고, 따라서 비-비례 위험을 고려하기 위한 통계학적 측정치가 필요하지 않았음을 나타내었다.

기본 사례에서, 기준선에서 28일당 HAE 발작 횟수에 대해서 모델을 조정하였다. 민감도 분석을 위해서, 모델은 또한 관련 공변량(연령, 성별 및 체중)을 포함하였다. CHANGE 연구에서 작은 샘플 크기로 인해서, 정규 변수 선택을 수행하지 않았다. 이러한 조정된 모델로부터 얻은 추정치를 공변령을 제외한 모델로부터의 조정되지 않은 추정치와 비교하였다.

CHANGE 연구는 교차 연구였기 때문에, (위약 및 Cinryze^® 치료 하에서) 2회 관찰된 개체는 독립적이 아니었다. 기재된 바와 같이, 치료, 기간 및 순서에 대한 고정 인자 및 연구 대상체에 대한 무작위 효과를 포함하는 혼합 모델을 사용하여 연구에서 반복 측정을 설명하였다.

결과

1. 28일당 HAE 발작률

표 6은 위약 및 Cinryze^® 치료에 대한 각각의 기준선 발작률이 동일하였다는 것을 나타낸다. CHANGE 교차 연구는 치료전 기간(run-in period)을 포함하지 않았다. 28일당 발작률은 Cinryze^® 치료에서의 기준선 발작률에 비해서 치료 기간 동안 위약에서 더 높았다. 치료 기간당 평균 발작 횟수는 위약보다 Cinryze^®에서 상당히 더 낮았다. 치료 기간은 두 개입 사이에서 대등하였다. 0일 및 70일 치료 후 제1 발작까지의 시간은 Cinryze^® 치료보다 위약에서 상당히 더 짧았다.

표 7에 제시된 바와 같이, 라나델루맙 300㎎ q2w 및 300㎎ q4w는 위약에 비해서 치료 기간당 평균 발작 횟수를 감소시켰다. 평균 기준선 발작률은 3개의 연구 아암에 걸쳐서 대등하였다. 치료 기간은 위약 아암에서 가장 짧았지만, 제1 발작까지의 시간은 위약에 비해서 라나델루맙 치료(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w)에서 가장 길었다.

28일당 HAE 발작률 - 프아송 회귀

추가로, 28일당 예측 평균 HAE 발작률은 Cinryze^® 치료의 경우 1.99(95% CI: 1.56; 2.52)였고, 위약은 4.03(95% CI: 3.31; 4.91)이었다. 상응하는 RR(0.49)은 Cinryze^®로 치료된 환자가 위약으로 치료된 환자에 비해서 HAE 발작률이 0.49배라는 것을 나타내었다. 이러한 차이는 통계학적으로 유의하였다(상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문). 평균 발작률에 대한 결과적인 백분율 변화는 위약에 비해서 Cinryze^®로 치료된 환자의 경우 -51%였다.

표 9에 제시된 바와 같이, 28일당 예측 평균 HAE 발작률은 라나델루맙 300㎎ q2w의 경우 0.26(95% CI: 0.15; 0.45), 라나델루맙 q2w의 경우 0.54(95% CI: 0.37, 0.77) 및 위약 치료의 경우 2.0(95% CI: 1.69; 2.38)이었다. 상응하는 RR은 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 q4w로 치료된 환자가 위약으로 치료된 환자와 비교할 때 각각 0.13배 및 0.27배의 HAE 발작률을 가졌다는 것을 나타내었다. 이러한 추정치는 상응하는 95% CI에서 값 "1"의 제외에 의해서 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의하였다. 평균 발작률의 결과적인 백분율 변화는 위약에 비해서 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자의 경우 -87% 그리고 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자의 경우 -73%였다.

부처 방법을 사용한 간접 비교(표 10)는, 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자가 Cinryze^®로 치료된 환자에 비해서 각각 0.27배 및 0.54배의 HAE 발작률을 가졌다는 것을 나타내었다. 이러한 결과는 상응하는 95% CI에서 값 "1"의 제외에 의해서 입증되는 바와 같이 통계학적으로 유의하였다. Cinryze^®와 비교한 평균 발작률의 결과적인 백분율 감소는 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자의 경우 각각 73% 및 -46%였다. 이러한 IPD의 ITC에서 생성된 지점 예측치 및 신뢰할 만한/신뢰 구간은 베이시안 NMA에서의 발견과 일관된 것으로 보였다.

HELP 연구에서 환자-보고된 HAE 발작을 설명한 민감도 분석

표 11에 제시된 바와 같이, 28일당 예측 평균 HAE 발작률은 라나델루맙 300㎎ q2w는 0.27(CI: 0.16; 0.46)이고, 라나델루맙 300㎎ q4w는 0.55(CI: 0.38; 0.78)이며, 위약은 2.02(95% CI: 1.71; 2.39)였다. 상응하는 RR은 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자가 위약으로 치료된 환자에 비해서 각각 0.13배 및 0.27배의 HAE 발작률을 가졌다는 것을 나타내었다. 이러한 추정치는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다. 위약에 대한 평균 발작률에서의 백분율 변화는 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자에 대해서 각각 -87% 및 -73%였다.

기본 사례에서, 부처 방법을 통한 간접 비교는, 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자가 Cinryze^®로 치료된 환자에 비해서 0.27배의 HAE 발작률을 가진 반면(표 12), 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자는 Cinryze^®로 치료된 환자에 비해서 0.55배의 HAE 발작률을 경험하였다는 것을 나타내었다. 이러한 추정치는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다. Cinryze^®에 대한 평균 발작률의 백분율 변화는 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료의 경우 각각 -73% 및 45%였다. 대등한 민감도 분석을 베이시안 NMA에서 수행하지 않았다.

모든 공변량(정규화된 기준선 발작률, 연령, 성별, 체중)을 설명하는 민감도 분석

표 13에 제시된 바와 같이, 28일당 예측 평균 HAE 발작률은 Cinryze^®의 경우 2.21(95% CI: 1.43; 3.41)이었고, 위약의 경우 4.37(95% CI: 2.89; 6.60)이었다. 0.51의 상응하는 RR은 Cinryze^®로 치료된 환자가 위약으로 치료된 환자에 비해서 0.51배의 평균 HAE 발작률을 가졌다는 것을 나타내었다. 이러한 결과는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다. 위약에 대한 Cinryze^® 치료에서의 평균 발작률의 결과적인 백분율 변화는 -49%였다.

표 14에 제시된 바와 같이, 28일당 예측 평균 HAE 발작률은 라나델루맙 300㎎ q2w의 경우 0.27(95% CI; 0.16; 0.46), 라나델루맙 300㎎ q4w의 경우 0.54(95% CI; 0.37; 0.78) 및 위약의 경우 2.00(95% CI; 1.63; 2.45)이었다. 상응하는 RR은 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자가 위약을 제공받은 환자에 비해서 각각 0.14 및 0.27배의 HAE 발작률을 가졌다는 것을 나타내었다. 이러한 결과는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다. 위약에 대한 평균 발작률의 결과적인 변화는 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w의 경우 각각 -86% 및 -73%였다.

기본 사례의 경우, 부처 방법을 통한 간접 비교는 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자가 Cinryze^®로 치료된 환자에 비해 각각 0.27배 및 0.53배의 HAE 발작률을 경험하였다는 것을 나타내었다(표 15). 이러한 결과는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다. Cinryze^®에 대한 평균 발작률의 결과적인 변화는 라나델루맙 300㎎ q2w 및라나델루맙 300㎎ q4w로 치료된 환자의 경우 각각 -73% 및 -47%였다. 어떠한 베이시안 NMA 결과도 이러한 민감도 분석에서 사용 가능하지 않았다.

본 섹션은 라나델루맙(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w) 및 Cinryze^®의 ITC 결과를 요약한다. 기본 사례 및 2개의 민감도 분석은 라나델루맙(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w)과 Cinryze^® 사이에 28일당 HAE 발작률에서 통계학적으로 유의한 차이를 입증하였다.

2개의 독립적인 프아송 회귀 모델은 라나델루맙(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w) 대 위약 및 Cinryze^® 대 위약의 상대적인 치료 효과를 식별하는 RR 추정치를 생성하였다. 기본 사례는 기준선에서 정규화된 28일당 HAE 발작률을 설명하였지만, 혼합 모델을 사용하여 CHANGE 연구의 교차 설계를 설명하였다. 부처 방법을 사용하여, 상응하는 결과를 ITC에 대한 입력값으로서 적용하였다.

첫 번째 민감도 분석은 발작이 조사자에 의해서 확인되었는지 확인되지 않았는지에 관계 없이, HELP 연구에서 보고된 모든 HAE 발작을 포함하였다. 두 번째 민감도 분석에 대한 회귀 모델은 먼저 연령, 성별 및 체중을 포함하였다. 2개의 민감도 분석은 기본 사례와 일관된 결과를 산출하였고, 결론을 변화시키지 않았다. 이러한 발견은 또한 결과에 대해서 공변량(정규화된 기준선 발작률과 별개로)에 대한 통계학적으로 유의한 효과의 결여를 확인해 주었다.

2. CHANGE 연구 및 HELP 연구에서 위약 효과의 비교 가능성

비-파라미터 추정의 결과는 위약 0일 후 제1 발작까지의 평균 시간(일수)이 HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 상당히 더 짧았다는 것을 나타내었다(4.773일[SE 1.673] 대 19.634일[SE 4.212]). 도 7에서, 치료 0일 후에 "제1 발작 없음"의 가능성을 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. CHANGE 연구 및 HELP 연구에서 위약 치료는 동등하게 효과적이지 않았고; CHANGE 연구에서의 환자는 HELP 연구에서의 제1 발작보다 상당히 더 빨리 제1 발작을 경험하였고, 상응하는 관찰 시간 시야는 훨씬 더 짧았다.

비-파라미터 추정 결과는 위약 70일 후 제1 발작까지의 평균 시간이 HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 상당히 더 짧았다는 것을 나타내었다(3.143일[SE 0.563] 대 21.378일[SE 4.687]). 도 8에서, 치료 70일 후 "제1 발작 없음"의 가능성을 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. CHANGE 연구 및 HELP 연구에서의 위약 치료는 동등하게 효과적이지 않았고; CHANGE 연구에서 환자는 HELP 연구에서의 환자보다 상당히 더 빨리 제1 발작을 경험하였고, 상응하는 관찰 시간 시야는 훨씬 더 짧았다.

본 섹션은 CHANGE 연구와 HELP 연구 사이에서 위약 효과를 비교하는 분석의 소견을 요약한다. 치료 0일 후 제1 발작까지의 시간 및 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간과 관련하여 위약 효과는 두 연구 사이에서 대등하지 않았다. 이는 카플란-마이어 그래프, 다양한 통계학적 시험(로그-순위, 윌콕슨, 우도 비 검정(likelihood ratio test)) 및 Cox 회귀 모델을 통해서 평가되었는데, 이것은 공변량으로서 기준선에서의 정규화된 발작, 연령, 성별 및 체중을 포함하고, 연구 설계에서 차이를 설명하였다. CHANGE 연구에서는 위약 효과가 없었는데, 여기서 개인은 기준선에서 그 다음 위약 치료 동안 더 적은 발작을 경험하였다. 위약 효과를 HELP 연구에서 관찰하였다.

무작위 대조 시험에서, 환자를 치료 아암에 무작위 배정하여 군 사이에서 관련 공변량의 비교 가능성을 보장한다. ITC는 헤드-투-헤드 치료 비교(head-to-head treatment comparison)가 결여된 사례에서 수행한다. 연구들 간의 유사성 가정을 유지하여 ITC의 결과가 타당하다는 것을 보장해야 한다. 따라서, 관심 공변량은 상응하는 연구 아암 간에 대등해야 한다. 이것은 보통 타당성 평가의 과정 동안 확인된다.

위약 효과는 종종 ITC에 포함된 연구 사이에서 대등하지 않다. 그러나, 이러한 차이의 영향을 평가하는 것은 간단하지 않다. 본 발명의 ITC와 관련하여, 위약 효과 간의 차이는 Cinryze^® 또는 라나델루맙보다 선호될 수 있다. CHANGE 연구에서의 위약 효과의 부재는 C1-INH 치료 동안 환자가 추가의 위약 효과 없이 직접적인 치료의 효과로부터만 이익을 얻을 수 있다는 것을 의미하였다. 이것은 Cinryze^®가 효능이 없더라도 일어날 것이라고 예측될 것이다. 이에 반해서, HELP 연구에서 위약 효과가 관찰되었다. 따라서, 라나델루맙으로 치료된 환자는 추가 위약 효과뿐만 아니라 직접적인 치료의 효능으로부터 이익을 얻을 수 있다. 이러한 차이는 본 발명의 분석에서 Cinryze^®보다 라나델루맙을 선호할 수 있다.

28일당 HAE 발작률에 대한 기준선으로부터의 변화에 대한 선형 회귀에서, 관심 결과 측정치는 발작률 차이이다. 위약과 비교하여 기준선으로부터의 변화의 발작률 차이는 HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 더 높았는데, 그 이유는 전자에서는 위약 효과가 관찰되지 않았기 때문이며, 이것이 Cinryze^®를 선호하는 ITC 결과로 이어진다.

그러나, 프아송 회귀에서, 상대 치료 효과는 추적 관찰 시의 RR로서 정의되며, 기준선 발작률이 공변량으로서 포함된다. 선형 회귀에 비해서, 분석은 상이한 결과 측정치를 사용한다. 그 결과, 두 연구 간의 위약 효과에 대한 차이는 분석에 거의 영향을 갖지 않았고, 이는 Cinryze^®보다 라나델루맙을 선호하는 통계학적으로 유의한 차이가 실현 가능함을 입증한다.

치료 0일 및 70일 후 제1 발작까지의 시간에 대해서, HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 위약 치료 동안 발작이 더 빈번하게 그리고 상당히 더 빨리 일어났다. 논의된 바와 같이, 이러한 소견의 영향은 간단하지 않았다.

3. 제1 발작까지의 시간 - 비-파라미터 추정 및 Cox 회귀

비-파라미터 추정에서, 위dior 치료 0일 후 제1 발작까지의 평균 시간(일수)은 HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 상당히 더 짧았다(4.773일[SE 1.673] 대 19.634일[SE 4.212]).

도 9에 도시된 바와 같이, 치료 0일 후 "제1 발작 없음"의 가능성을 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. 위약은 CHANGE 연구에서 Cinryze^® 치료보다 덜 효과적이었다. 위약을 제공받은 환자는 Cinryze^® 치료 동안 보다 상당히 더 빨리 제1 발작을 경험하였다. 두 곡선이 교차하지 않는다는 것을 고려할 때, 비례 위험 추정이 유지된다고 생각될 수 있다. Cox 회귀가 ITC에 대한 예측 위험비(HR)를 추정하기 위한 타당한 방법이라는 것을 확인해 준다.

도 10에 도시된 바와 같이, 치료 0일 후 "제1 발작 없음"의 가능성을 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. HELP 연구에서, 위약은 2개의 라나델루맙 투여 요법보다 덜 효과적이었다. 위약을 제공받은 환자는 라나델루맙 치료 동안의 제1 발작보다 상당히 더 빨리 제1 발작을 경험하였다. 두 곡선이 교차하지 않는다는 것을 고려할 때, 비례 위험 추정이 유지된다고 생각될 수 있다. 이는 Cox 회귀가 ITC에 대한 HR를 추정하기 위한 타당한 방법이라는 것을 확인해 준다.

사용된 상이한 분석 방법은 모순된 발견에 기여할 수 있다. 본 발명의 ITC는 프리퀀티스트 Cox 회귀 모델을 사용하였는데, 이것은 반복 측정(치료 기간 및 순서에 대한 고정 효과 및 연구 대상체에 대한 무작위 효과 포함)을 설명하였고, 기준선 HAE 발작률을 정규화하였다. 베이시안 접근법을 사용한 사전 NMA에서, 이러한 접근법을 취하지 않았고, 비교를 위해서 사용된 무작위 효과 모델의 결과만 보고하였다.

라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w를 위약과 비교할 때, Cox 회귀는 각각 0.27(95% CI: 0.15; 0.50) 및 0.38(95% CI: 0.22; 0.67)의 HR을 생성하였다(표 16). 베이시안 NMA는 각각 (0.13; 0.55)의 95% 신뢰 구간(Crl)에 상응하는 대등한 0.27의 HR 및 (0.21; 0.74)의 95% Crl에 상응하는 0.39의 HR을 생성하였다.

부처 방법을 통한 간접 비교는 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 개체가 Cinryze^®로 치료된 개체에 비해서 치료 0일 후 0.73배의 제1 HAE 발작의 위험을 가졌다는 것을 나타내었다(표 18). 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료는 Cinryze^®에 비해서 1.05배만큼 발작 위험을 증가시켰다. 이러한 발견은 상응하는 95% CI에서 값 "1"의 포함에 의해서 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의하지 않았다. IPD를 사용하여 ITC에서 생성된 지점 추정치는 주로 적용된 상이한 방법론(이미 기재된 바와 같음)으로 인해서 베이시안 NMA의 결과와 상이하였다. 간격 경계가 유사해 보이기 때문에, 결론은 변하지 않았다

Cinryze^®와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 0.37(95% CI; 0.18; 0.76)의 HR을 생성하였다(표 19). 이러한 결과는 기본 사례와 일관되었다.

라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 각각 0.27(95% CI: 0.14; 0.51) 및 0.37(95% CI: 0.21; 0.66)의 HR을 생성하였다(표 20). 이들 추정치는 이전 발견과 일관되었다. 추가 공변량의 포함은 주요 발견에 영향을 미치지 않았다.

부처 방법을 통한 간접 비교는 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자가 Cinryze^® 치료로 치료된 환자에 비해 0일 치료 후에 0.72배의 제1 HAE 발작의 위험을 가졌다고 예측하였다(표 21). 라나델루맙 300㎎ q4w 치료는 Cinryze^®와 비교할 때 거의 동일한 HAE 발작 위험을 초래하였다. 이러한 발견은 상응하는 95% CI에서 값 "1"의 포함에 의해서 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의하지 않았다. 이 결과는 기본 사례와 일관되었다.

비-파라미터 추정에서, 위약 치료 70일 후 제1 발작까지의 평균 시간(일수)은 HELP 연구에서보다 CHANGE 연구에서 상당히 더 짧았다(3.1429일[SE 0.5625] 대 21.378일[SE 4.687]). 치료 70일 후 "제1 발작 없음"의 가능성을 도 11의 그래프의 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. CHANGE 연구에서 위약은 Cinryze^® 치료보다 덜 효과적이었다. 위약으로 치료된 환자는 Cinryze^®로의 치료 동안 보다 상당히 더 빨리 제1 발작을 경험하였다. 두 곡선이 교차하지 않는다는 것을 고려할 때, Cox 회귀는 ITC에 대한 HR을 추정하기 위한 타당한 방법이라고 결론 내릴 수 있다.

도 12에 도시된 바와 같이, 치료 70일 후 "제1 발작 없음"의 가능성을 y축에 플로팅하고, 관찰 시간 시야를 x축에 플로팅한다. HELP 연구에서 위약 치료는 라나델루맙 치료(300㎎ q2w 및 300㎎ q4w)보다 덜 효과적이었다. 두 곡선이 교차하지 않는다는 것을 고려할 때, Cox가 ITC에 대한 HR를 추정하기 위한 타당한 방법이라고 결론 내릴 수 있다.

Cinryze^®와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 0.34(95% CI: 0.16; 0.72)의 HR을 생성하였다. 베이시안 NMA에서, 상응하는 HR은 0.53(0.00; 318.88)이었다(표 22).

라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 각각 0.07(95% CI; 0.03; 0.16) 및 0.21(95% CI; 0.11; 0.40)의 HR을 산출하였다(표 23). 베이시안 NMA에서, 상응하는 HR은 각각 0.09(95% CI; 0.04; 0.22) 및 0.27(95% CI; 0.14; 0.53)이었다.

부처 방법을 통한 간접 비교는 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자가 Cinryze^®로 치료된 환자에 비해 치료 70일 후 0.19배의 제1 HAE 발작의 위험을 가졌다는 것을 나타내었다(표 24). 이러한 결과는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다(95% CI: 0.0584; 0.6200). 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료 동안 HAE 발작의 위험은 Cinryze^® 치료 동안 발작 위험의 0.62배였다. 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료를 Cinryze^®로의 치료와 비교한 이러한 결과는 상응하는 95% CI(95% CI: 0.2336, 1.6381)에서 "1"의 포함에 의해서 입증되는 바와 같이 통계학적으로 유의하지 않았다. IPD를 사용한 ITC에서 생성된 지점 추정치는 베이시안 NMA의 결과와 상이하였다. 간격 경계가 유사해 보이기 때문에, 결론은 변하지 않았다

라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 각각 0.05(95% CI; 0.02; 0.14) 및 0.19(95% CI; 0.10; 0.38)의 HR을 산출하였다(표 25). 공변량의 포함 부가는 영향을 미치지 않았다.

Cinryze^®와 위약의 비교에서, Cox 회귀는 0.32(95% CI: 0.14; 0.71)의 HR을 생성하였다(표 26). 이 결과는 기본 사례 발견과 일관되었다.

부처 방법을 통한 간접 비교는 라나델루맙 300㎎ q2w로 치료된 환자가 Cinryze^® 치료로 치료된 환자에 비해 치료 70일 후에 0.15배의 제1 HAE 발작의 우험을 가졌다는 것을 나타내었다(표 27). 이러한 결과는 상응하는 95% CI가 1을 포함하지 않기 때문에 통계학적으로 유의하였다(95% CI: 0.0431; 0.5286). 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료는 Cinryze^®와 비교할 때 0.56배의 HAE 발작 위험을 초래하였다. 라나델루맙 300㎎ q4w로의 치료와 Cinryze^®로의 치료를 비교한 이러한 결과는 상응하는 95% CI(95% CI: 0.2086, 1.5262)에서 "1"의 포함에 의해서 입증되는 바와 같이 통계학적으로 유의하지 않았다.

결론

집계된 데이터를 사용한 베이시안 NMA의 결과와 일관되게, 본 발명의 회귀-기반 프리퀀티스트 ITC는, 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w가 28일당 HAE 발작률 감소에서 Cinryze^®보다 통계학적으로 더 효과적이었다는 것을 입증하였다(각각 RR 0.27, 95% CI[0.15; 0.49] 및 RR 0.54, 95% CI[0.35; 0.85]). HELP 연구에서 환자-보고된 HAE 발작을 포함한 민감도 분석은, 1차 결과와 일치하는 이러한 발견 및 산출된 RR 지점 추정치 및 95% Ci를 확인해 주었다. 공변량 연령, 성별 및 체중을 포함하는 제2 민감도 분석은 유사한 발견을 나타내었고, 기본 사례 분석의 결과를 추가로 뒷받침하였다.

치료 0일 후 제1 발작까지의 시간 및 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간과 관련하여, 본 발명의 ITC는 베이시안 NMA에서 주목된 것과 유사한 결론을 도출하였다. 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나나델루맙 300㎎ q4w는 치료 0일 후 제1 발작까지의 시간의 연장에서 Cinryze^®에 비해서 통계학적으로 더 효과적이지 않았다(각각 HR 0.73, 95% CI [0.29; 1.84] 및 HR 1.05, 95% CI [0.43, 2.52]). 그러나, 라나델루맙 300㎎ q2w 및 라나델루맙 300㎎ q4w는 Cinryze^®에 비해서 치료 70일 후 제1 발작까지의 시간 증가에서 더 큰 효능을 나타내는 것으로 보였다(각각 HR 0.19, 95% CI [0.06; 0.62] 및 HR 0.62, 95% CI [0.23; 1.64]). 라나델루맙 300㎎ q2w와 Cinryze^® 간의 차이만 통계학적으로 유의하였다. 치료 0일 및 70일 후 제1 발작까지의 시간에 대한 민감도 분석에서, 연령, 성별 및 체중을 포함하는 모델은 더 낮은 HR 지점 추정치를 산출하였지만; 이러한 발견은 기본 사례 결론 중 어느 것도 변화시키지 않았다.

본 발명의 ITC의 결론은 베이시안 NMA의 것과 일치하였지만, 상응하는 지점 추정치 및 불확실성 간격은 상이하였다. 이는 아마도 (CHANGE 교차 연구와 관련하여) 베이시안 NMA에서의 반복 측정 설명의 결여뿐만 아니라 데이터 입력값 유형에서의 차이로 인한 것으로 추정되었다.

다른 실시형태

본 명세서에 개시된 모든 특징은 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 명세서에 개시된 각 특징은 같은, 등가의 또는 유사한 목적을 제공하는 대안적인 특징에 의해 대체될 수 있다. 따라서, 달리 명시되지 않는 한, 개시된 각 특징은 등가의 또는 유사한 특징의 포괄적인 시리즈의 예시일 뿐이다.

상기 설명으로부터, 당업자는 본 발명의 필수적인 특징을 쉽게 확인할 수 있으며, 본 발명의 정신 및 범위를 벗어나지 않고, 다양한 용도 및 상태에 적합하도록 발명의 다양한 변화 및 변형을 만들 수 있다. 따라서, 다른 실시형태도 청구범위에 포함된다.

등가물

몇몇 발명의 실시형태가 본 명세서에 기술되어 있고 예시되어 있지만, 이 분야의 당업자는 본 명세서에 기술된 결과 및/또는 하나 이상의 이점을 얻기 위한 및/또는 기능을 수행하기 위한 다양한 다른 수단 및/또는 구조를 쉽게 구상할 것이며, 각각의 이러한 변화 및/또는 변형은 본 명세서에 기술된 발명의 실시형태의 범위 내에 있는 것으로 간주된다. 보다 일반적으로, 당업자는 본 명세서에 기술된 모든 파라미터, 치수, 재료 및 형태가 예시적인 것을 의미하며 실제 파라미터, 치수, 재료 및/또는 형태가 특정 적용 또는 본 발명의 교시가 사용되는 적용에 따를 수 있음을 쉽게 이해할 것이다. 당업자는 단지 일반적인 실험을 사용하여 본 명세서에 기술된 특정 발명의 실시형태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 따라서, 전술한 실시형태는 단지 예시의 방식으로 제공되며, 첨부된 청구범위 및 이와 대등한 범위 내에서, 본 발명의 실시형태는 구체적으로 기술되고 청구된 것과 다르게 실시될 수 있음을 이해해야 한다. 본 개시내용의 발명의 실시형태는 본 명세서에 기술된 각각의 개별적인 특징, 시스템, 물건, 재료, 키트 및/또는 방법에 관한 것이다. 추가로, 이러한 특징, 시스템, 물건, 재료, 키트 및/또는 방법이 서로 일치하지 않는 경우, 둘 이상의 이러한 특징, 시스템, 물건, 재료, 키트 및/또는 방법의 임의의 조합이 본 개시내용의 발명의 범위 내에 포함된다.

본 명세서에서 정의되고 사용된 모든 정의는 사전적 정의, 참조에 의해 원용된 문헌의 정의 및/또는 정의된 용어의 통상적인 의미를 조절하는 것으로 이해되어야 한다.

본 명세서 및 청구범위에서 사용된 단수 표현은, 명확하게 반대로 나타내지 않는 한, "적어도 하나"를 의미하는 것으로 이해되어야 한다.

본 명세서 및 청구범위에서 사용된 "및/또는"은, 그렇게 결합된 요소, 즉 일부의 경우에는 결합적으로 존재하고 다른 경우에는 분리적으로 존재하는 요소의 "하나 또는 둘 모두"를 의미하는 것으로 이해되어야 한다. "및/또는"으로 나열된 복수의 요소는 같은 방식, 즉 그렇게 결합된 요소의 "하나 이상"으로 해석되어야 한다. 구체적으로 식별되는 요소와 관련이 있든 무관하든, "및/또는" 절에 의해 구체적으로 식별되는 요소 이외의 다른 요소가 선택적으로 존재할 수 있다. 따라서, 비-제한적 예시로서, "포함하는"과 같은 개방형 언어와 결합하여 사용될 때 "A 및/또는 B"에 대한 언급은, 일 실시형태에서, A만(선택적으로 B 이외의 다른 요소를 포함하는); 다른 실시형태에서, B만(선택적으로 A 이외의 다른 요소를 포함하는); 또 다른 실시형태에서, A 및 B 둘 다(선택적으로 다른 요소를 포함하는); 등을 의미할 수 있다.

본 명세서 및 청구범위에 사용된 "또는"은 상기 정의된 "및/또는"과 같은 의미를 갖는 것으로 이해되어야 한다. 예를 들어, 목록에서 항목을 구분할 때, "또는" 또는 "및/또는"은 포괄적인 것으로, 즉 요소의 수 또는 목록, 및, 선택적으로, 추가적으로 나열되지 않은 항목 중 적어도 하나를 포함, 그러나 하나 이상도 포함하는 것으로 해석되어야 한다. "중에 단 하나" 또는 "중에 정확히 하나"와 같은, 반대로 명확하게 표시된 용어만, 또는 청구범위에 사용된 "이루어지는"은 요소의 수 또는 목록 중 정확히 하나의 요소를 포함하는 것을 의미할 것이다. 일반적으로, 본 명세서에 사용된 용어 "또는"은, "둘 중 하나", "중 하나", "중 단 하나" 또는 "중에 정확히 하나"와 같은, 배타성 용어에 의해 선행될 때 배타적 대안(즉, "하나 또는 다른 것이지만 둘 다는 아닌")을 가리키는 것으로만 이해될 것이다. 청구범위에서 사용될 때, "본질적으로 이루어지는"은 특허법의 분야에서 사용되는 이의 통상적인 의미를 가질 것이다.

본 명세서 및 청구범위에 사용된, 하나 이상의 요소의 목록에 대한 언급에서 문구 "적어도 하나"는 요소의 목록 내 하나 이상의 임의의 요소로부터 선택된 적어도 하나의 요소를 의미하는 것으로, 하지만 요소의 목록 내에 구체적으로 나열된 각각의 및 모든 요소 중 적어도 하나를 반드시 포함하는 것은 아니며 요소의 목록 내 요소의 임의의 조합을 제외하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 이러한 정의는 또한, 구체적으로 식별되는 요소에 관련이 있든 없든, 문구 "적어도 하나"가 의미하는 요소의 목록 내에 구체적으로 식별되는 요소 이외의 요소가 선택적으로 존재할 수 있음을 허용한다. 따라서, 비-제한적 예시로, "A 및 B 중 적어도 하나"(또는 대등하게 "A 또는 B 중 적어도 하나" 또는 대등하게 "A 및/또는 B 중 적어도 하나")는, 일 실시형태에서, B 없는(및 선택적으로 B 이외의 요소를 포함하는), 적어도 하나의, 선택적으로 둘 이상을 포함하는, A; 다른 실시형태에서, A 없는(및 선택적으로 A 이외의 요소를 포함하는), 적어도 하나의, 선택적으로 둘 이상을 포함하는, B; 또 다른 실시형태에서, 적어도 하나의 , 선택적으로 둘 이상을 포함하는, A 및 적어도 하나의, 선택적으로 둘 이상을 포함하는, B(및 선택적으로 다른 요소를 포함하는); 등을 의미할 수 있다.

또한, 반대로 명확하게 표시되지 않는 한, 둘 이상의 단계 또는 행위를 포함하는 본 명세서에 청구된 임의의 방법에서, 방법의 단계 또는 행위의 순서가 언급된 방법의 단계 또는 행위의 순서로 반드시 제한되지 않음이 이해되어야 한다.

상기 명세서에서뿐만 아니라 청구범위에서, "포함하는", "보유하는", "가지는", "함유하는", "수반하는", "갖는", "구성된" 등과 같은 모든 접속구는 개방형, 즉 포함하지만 제한되지 않는 것으로 이해되어야 한다. 접속구 "이루어지는" 및 "본질적으로 이루어지는" 만이, 특허 심사 절차의 미국 특허청 매뉴얼, 섹션 2111.03에 제시된 바와 같이, 각각 폐쇄형 또는 반-폐쇄형 접속구일 것이다.

SEQUENCE LISTING <110> TAKEDA PHARMACEUTICAL COMPANY LIMITED <120> PLASMA KALLIKREIN INHIBITORS AND USES THEREOF FOR TREATING HEREDITARY ANGIOEDEMA ATTACK <130> WO/2020/186132 <140> PCT/US2020/022535 <141> 2020-03-13 <150> US 62/818,189 <151> 2019-03-14 <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 469 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Polypeptide <400> 1 Met Gly Trp Ser Cys Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly Ala 1 5 10 15 His Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro 20 25 30 Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 35 40 45 His Tyr Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 50 55 60 Trp Val Ser Gly Ile Tyr Ser Ser Gly Gly Ile Thr Val Tyr Ala Asp 65 70 75 80 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr 85 90 95 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Tyr Arg Arg Ile Gly Val Pro Arg Arg Asp Glu Phe Asp 115 120 125 Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 145 150 155 160 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 210 215 220 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro 225 230 235 240 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 245 250 255 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 305 310 315 320 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly 465 <210> 2 <211> 231 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic Polypeptide <400> 2 Met Gly Trp Ser Cys Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly Ala 1 5 10 15 His Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser 20 25 30 Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser 35 40 45 Ser Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 50 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Claims

유전성 혈관부종(hereditary angioedema: HAE) 발작(attack)의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법으로서,
유전성 혈관부종 발작의 치료 또는 HAE 발작률의 감소를 필요로 하는 대상체에게 인간 혈장 칼리크레인에 결합하는 항체를 약 4 내지 9개월인 제1 치료 기간 동안 약 2주마다 약 300㎎ 투여하는 단계;
상기 대상체를 상기 제1 치료 기간 동안 HAE 발작에 대해서 모니터링하는 단계; 및
상기 제1 치료 기간 동안 HAE 발작이 없는 상기 대상체에서 상기 항체의 투여량을 약 4주마다 약 300㎎으로 감소시키는 단계
를 포함하되,
상기 항체는 DX-2930과 동일한 중쇄 상보성 결정 영역(CDR) 및 동일한 경쇄 CDR을 포함하는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항에 있어서, 상기 제1 치료 기간은 약 6개월인, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 환자는 적은 체중(low body weight)을 갖는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제3항에 있어서, 상기 환자는 35㎏ 미만의 체중을 갖는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 소아 환자인, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 3의 중쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_H) 및 서열번호 4의 경쇄 면역글로불린 가변 도메인(V_L)을 포함하는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 전장 항체 또는 이의 항원-결합 단편인, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 IgG1 분자인, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제8항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 1의 중쇄 및 서열번호 2의 경쇄를 포함하는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 제형화되는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제10항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 인산나트륨, 시트르산, 히스티딘, 염화나트륨 및 폴리솔베이트 80을 포함하는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제11항에 있어서, 상기 인산나트륨은 약 30mM의 농도로 존재하고, 상기 시트르산은 약 19mM의 농도로 존재하고, 상기 히스티딘은 약 50mM의 농도로 존재하고, 상기 염화나트륨은 약 90mM의 농도로 존재하고, 상기 폴리솔베이트 80은 약 0.01%의 농도로 존재하는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 피하로 투여되는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 HAE를 갖거나, 이를 갖는 것으로 의심되거나, 이의 위험이 있는 인간 환자인, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.
제14항에 있어서, 상기 대상체는 HAE I형 또는 II형을 갖는, HAE 발작의 치료 방법 또는 HAE 발작률의 감소 방법.