KR20210116783A

KR20210116783A - Composition for treating skin whitening comprising fucosyllactose

Info

Publication number: KR20210116783A
Application number: KR1020200031761A
Authority: KR
Inventors: 빈범호; 이미기; 허효진; 박혜인; 백진명; 차병선; 박채원
Original assignee: 아주대학교산학협력단; 재단법인 경기도경제과학진흥원
Priority date: 2020-03-16
Filing date: 2020-03-16
Publication date: 2021-09-28

Abstract

The present invention relates to a composition comprising fucosyllactose. The composition according to the present invention more effectively inhibits the expression and activity of a protein involved in melanin synthesis, which is highly related to the onset of melanin hyperpigmentation disease, thereby exhibiting an excellent effect in preventing and treating diseases. Therefore, the composition can be widely used in various ways as a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease, a skin whitening cosmetic materials, a skin external preparation, and a quasi-drug composition.

Description

Composition for whitening comprising fucosyllactose {COMPOSITION FOR TREATING SKIN WHITENING COMPRISING FUCOSYLLACTOSE}

본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose)를 포함하는 미백용 조성물, 및 멜라닌 색소 과다 침착 질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for whitening containing fucosyllactose, and a composition for preventing and treating diseases of melanin hyperpigmentation.

피부는 해부학상 신체의 가장 바깥쪽에 위치하여 공기 중의 병원성 미생물이나 바이러스, 화학물질 등의 직접적인 체내유입을 차단함으로써 외부 환경으로부터 신체를 보호하며 체내수분의 과다한 누출을 막는 중요한 장벽(Barrier) 기능을 수행하고 있다. 피부 조직은 기저층(Basal layer), 분화층(Spinous and Granular layer) 및 각질층(Cornified layer)으로 층 구조를 이루고 있다. The skin is anatomically located at the outermost part of the body and blocks the direct influx of pathogenic microorganisms, viruses, and chemicals in the air, thereby protecting the body from the external environment and performing an important barrier function to prevent excessive leakage of body water. are doing The skin tissue has a layered structure with a basal layer, a spinous and granular layer, and a cornified layer.

멜라닌은 피부, 머리카락, 눈 그리고 다른 색소가 침착되는 조직에 존재하는 갈색 또는 흑색의 색소로, 사람의 외모에서 큰 비중을 차지하며, 피부 항상성을 유지하는 데에도 중요하다. 피부의 멜라닌 생합성은 호르몬 변화와 영양 상태 등 다양한 요인의 영향을 받으며, 멜라닌이 정상적으로 생성되지 않고 생합성 과정이 교란되면 색소 침착 감소 또는 과잉 색소 침착으로 분류되는 색소 침착의 결함이 발생하게 된다. 색소 침착의 결함은 유전적이거나 후천적일 수 있고, 일시적이거나 영구적일 수 있으며, 또한 신체 일부 또는 전체적으로 발생할 수 있다. 멜라닌이 비정상적으로 축적되거나 분포하게 되면 외관상 비호감을 줄 수 있는 기미, 주근깨, 노인성 흑점 등이 유발되기 때문에, 원치 않는 멜라닌의 축적을 방지하는 것은 화장품 업계의 초미의 관심사이다.Melanin is a brown or black pigment present in skin, hair, eyes, and other tissues where pigment is deposited. Melanin biosynthesis of the skin is affected by various factors such as hormonal changes and nutritional status, and when melanin is not produced normally and the biosynthesis process is disturbed, a pigmentation defect classified as reduced pigmentation or hyperpigmentation occurs. Defects in pigmentation can be hereditary or acquired, temporary or permanent, and can occur in part or all of the body. When melanin is abnormally accumulated or distributed, spots, freckles, and age spots that can give an unfavorable appearance are induced.

멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신(tyrosin)을 전구물질로 하여, 도파(DOPA), 도파 퀴논(DOPA quinone) 및 인돌-5,6-디히드로퀴논(indole-5,6-dihydroquinone)을 거쳐 인돌-5,6-디히드로퀴논의 중합체인 멜라닌으로 생합성된다. 멜라닌은 멜라노사이트(melanocyte) 내에서 생성되며, 멜라노솜(melanosome)이라는 과립 형태로 표피와 진피의 경계부로 이동하여 침착된다. 멜라닌은 검은 피부의 직접적인 원인이 될 뿐만 아니라, 기미, 주근깨의 형성을 촉진하는 등 피부 미용 측면에서 심각한 문제를 일으킨다. 또한 과잉 생산된 멜라닌은 피부노화 및 피부암을 유발하는 원인이 되는 것으로 밝혀졌다.The biosynthesis of melanin uses tyrosine, a kind of amino acid, as a precursor, and goes through dopa, dopa quinone and indole-5,6-dihydroquinone to indole-5,6-dihydroquinone. It is biosynthesized from melanin, a polymer of -5,6-dihydroquinone. Melanin is produced in melanocytes, and moves to the boundary between the epidermis and the dermis in the form of granules called melanosomes and is deposited. Melanin is not only a direct cause of dark skin, but also causes serious problems in terms of skin beauty, such as promoting the formation of spots and freckles. In addition, it has been found that excessive production of melanin is the cause of skin aging and skin cancer.

화장품으로서의 미백제의 연구는 정서적으로 흰 피부를 선호하는 동양권의 생활수준 향상과 더불어 피부 흑화가 자외선에 의한 피부 노화로 인식되면서 그 필요성이 점차 증대되고 있다. 그에 따라 아스코르브산(ascorbic acid), 하이드로퀴논(hydroquinone), 글루타치온(glutathione), 알부틴(arbutin), 비사보롤(bisabolol) 등의 티로시나아제 저해 활성을 나타내는 물질들이 화장료나 의약품에 배합하여 사용되어 왔으나(KR10-0923141호, KR10-0921947호), 이들 중 대부분의 것은 효과가 불충분하거나 제형상 불안정한 면이 있어 활용도가 떨어지는 것으로 알려져 있으며, 세포 독성을 동반하는 경우가 많은 것으로 알려져 있다. 특히 하이드로퀴논과 같은 화합물은 강한 탈색 작용을 나타내며 그 자체가 피부 감작성을 가지고 있어 피부 알레르기 등을 유발할 수 있고, 정상적인 피부의 기능을 변화시켜 백반증을 유발하는 등의 부작용을 나타내어 피부에 대한 안전성 측면에서 그 사용이 제한되고 있다.The study of whitening agents as cosmetics is increasingly necessary as the standard of living in the East, which favors white skin emotionally, is improved and skin blackening is recognized as skin aging caused by UV rays. Accordingly, substances exhibiting tyrosinase inhibitory activity, such as ascorbic acid, hydroquinone, glutathione, arbutin, and bisabolol, are used in combination with cosmetics and pharmaceuticals. However (KR10-0923141, KR10-0921947), most of them are known to have insufficient effectiveness or have an unstable formulation, so their utility is poor, and it is known that they are often accompanied by cytotoxicity. In particular, compounds such as hydroquinone exhibit a strong bleaching action and have skin sensitization themselves, which can cause skin allergies, etc. its use is limited.

한편, 사람의 모유에서 유래한 올리고당인 푸코실락토오스는 최근에 유아용 분유, 노인용 건강기능식품의 소재로 일부 알려진 바가 있다. On the other hand, fucosyllactose, an oligosaccharide derived from human breast milk, has recently been partially known as a material for infant formula and health functional food for the elderly.

대한민국등록특허 10-1856508Republic of Korea Patent 10-1856508 대한민국등록특허 10-1299013Republic of Korea Patent 10-1299013

본 연구진은 푸코실락토즈가 피부에서 멜라닌 생성을 억제하여 피부의 미백 효과를 증진시키며 멜라닌 침착을 억제함으로써 기미, 주근깨, 점, 검버섯 등과 같은 멜라닌 색소 과다 침착 질환에 대한 우수한 예방 및 치료 효과를 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다. This research team found that fucosyllactose suppresses melanin production in the skin to enhance the skin's whitening effect, and by inhibiting melanin deposition, it shows an excellent preventive and therapeutic effect on melanin hyperpigmentation diseases such as melasma, freckles, spots, and age spots. Confirmed and completed the present invention.

이에 따라, 본 발명은 하기를 제공하는 것을 그 목적으로 한다 : Accordingly, it is an object of the present invention to provide:

본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating a disease of melanin hyperpigmentation, comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for skin whitening comprising Fucosyllactose or a cosmetically acceptable salt thereof.

본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 의약외품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a quasi-drug composition for skin whitening comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 피부외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for external application for skin whitening comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하다. In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease comprising fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

본 발명에 따른 조성물은 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 발병과 관련이 높은 멜라닌 합성에 관여하는 단백질의 발현 및 활성을 더욱 효과적으로 저해함으로써 상기 질환의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다. The composition according to the present invention exhibits an excellent effect in preventing and treating the disease by more effectively inhibiting the expression and activity of a protein involved in melanin synthesis, which is highly related to the onset of melanin hyperpigmentation disease.

본 발명의 상기 조성물은 유효성분으로, 푸코실락토즈(Fucosyllactose)를 포함한다. 모유에 함유된 올리고당(human milk oligosaccharides: HMO)의 한 종류로, 푸코오스(fucose)가 락토오스(lactose)에 첨가된 3탄당을 지칭한다.The composition of the present invention includes, as an active ingredient, fucosyllactose. It is a type of oligosaccharides contained in human milk (human milk oligosaccharides: HMO), and refers to a trisaccharide in which fucose is added to lactose.

구체적으로, 푸코실락토즈는 α-(1,2)-과 α-(1,3)-결합으로 각각 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose, 2'-FL) 또는 3-푸코실락토오스(3-fucosyllactose, 3-FL)의 형태를 가질 수 있다. Specifically, fucosyllactose is 2'-fucosyllactose (2'-fucosyllactose, 2'-FL) or 3-fucosyllactose by α-(1,2)- and α-(1,3)-bonds, respectively. (3-fucosyllactose, 3-FL).

구체적으로, 2'-푸코실락토즈는 하기 화학식 1의 구조를 가지는 화합물이다. Specifically, 2'-fucosyllactose is a compound having a structure of the following formula (1).

[화학식 1][Formula 1]

구체적으로, 3'-푸코실락토즈는 하기 화학식 2의 구조를 가지는 화합물이다. Specifically, 3'-fucosyllactose is a compound having a structure of the following formula (2).

[화학식 2][Formula 2]

본 발명에 있어서, 푸코실락토즈는 바람직하게 2'-푸코실락토즈일 수 있다. In the present invention, the fucosyllactose may be preferably 2'-fucosyllactose.

본 발명에서, 약제학적으로 허용가능한 염은 의약업계에서 통상적으로 사용되는 염을 의미하며, 예컨대 칼슘, 칼륨, 나트륨 및 마그네슘 등으로 제조된 무기이온염, 염산, 질산, 인산, 브롬산, 요오드산, 과염소산 및 황산 등으로 제조된 무기산염, 아세트산, 트라이플루오로아세트산, 시트르산, 말레산, 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산, 만델산, 프로피온산, 시트르산, 젖산, 글리콜산, 글루콘산, 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산, 글루쿠론산, 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 바닐릭산, 하이드로 아이오딕산 등으로 제조된 유기산염, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 및 나프탈렌설폰산 등으로 제조된 설폰산염, 글리신, 아르기닌, 라이신 등으로 제조된 아미노산염 및 트라이메틸아민, 트라이에틸아민, 암모니아, 피리딘, 피콜린 등으로 제조된 아민염 등이 있으나, 열거된 이들 염에 의해 본 발명에서 의미하는 염의 종류가 한정되는 것은 아니다.In the present invention, the pharmaceutically acceptable salt means a salt commonly used in the pharmaceutical industry, for example, inorganic ionic salts prepared from calcium, potassium, sodium and magnesium, hydrochloric acid, nitric acid, phosphoric acid, hydrobromic acid, iodic acid, etc. , perchloric acid and sulfuric acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, citric acid, maleic acid, succinic acid, oxalic acid, benzoic acid, tartaric acid, fumaric acid, mandelic acid, propionic acid, citric acid, lactic acid, glycolic acid, gluconic acid, galactu Organic acid salts prepared from ronic acid, glutamic acid, glutaric acid, glucuronic acid, aspartic acid, ascorbic acid, carbonic acid, vanillic acid, hydroiodic acid, etc., methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid Sulfonic acid salts prepared from phonic acid and naphthalenesulfonic acid, amino acid salts prepared from glycine, arginine, lysine, etc., and amine salts prepared from trimethylamine, triethylamine, ammonia, pyridine, picoline, etc. The types of salts in the present invention are not limited by these salts.

상기 푸코실락토즈를 유효성분으로 포함하는 조성물은 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 및 치료 효과를 가지며, 피부 미백 효과를 또한 나타낼 수 있다. The composition comprising the fucosyllactose as an active ingredient has a preventive and therapeutic effect on melanin hyperpigmentation disease, and may also exhibit a skin whitening effect.

본 발명의 용어 “멜라닌 색소 과다 침착 질환”은 피부 또는 손·발톱의 특정 부위에서 멜라닌의 과도한 증가에 의해 다른 부위에 비해 검게 또는 어둡게 되어 발생하는 질환을 의미한다. 구체적으로, 주근깨, 검버섯, 노인성 반점, 간반, 기미, 흑점, 일광 색소반, 흑피증, 약물 사용 후의 과다색소침착, 임신성 갈색반(gravidic chloasma), 또는 상처 또는 피부염으로 인한 염증 후 과다 색소 침착 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다.As used herein, the term “melanin hyperpigmentation disease” refers to a disease that occurs due to excessive increase in melanin in a specific area of the skin or fingernails, resulting in darkening or darkening compared to other areas. Specifically, freckles, age spots, senile spots, liver spots, melasma, black spots, solar pigmentation, melasma, hyperpigmentation after drug use, gravidic chloasma, or hyperpigmentation after inflammation due to wounds or dermatitis, etc. including, but not limited to.

본 발명의 실시예에서, 푸코실락토즈는 피부에서 멜라닌의 발현을 감소시켜 피부 색소 침착 개선 및 미백 측면에서 우수한 개선 효과를 나타낸다. 이러한 과정에서 푸코실락토즈는 예컨대 AMPK 경로를 통해 멜라닌의 함량을 감소시키는 것일 수 있고, 푸코실락토즈에 의해 Autophagy가 유도될 수 있으며 위 과정에서 AMPK 경로가 중요 역할을 할 수도 있다. 또한 멜라닌 합성에 관여하는 단백질의 발현 및 활성을 더욱 효과적으로 저해함으로써 상기 질환의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다. In an embodiment of the present invention, fucosyllactose shows an excellent improvement effect in terms of skin pigmentation improvement and whitening by reducing the expression of melanin in the skin. In this process, fucosyllactose may be to reduce the content of melanin through, for example, the AMPK pathway, autophagy may be induced by fucosyllactose, and the AMPK pathway may play an important role in the above process. In addition, by more effectively inhibiting the expression and activity of proteins involved in the synthesis of melanin, it exhibits an excellent effect in the prevention and treatment of the disease.

본 발명의 약학적 조성물은 색소 침착 억제 활성을 나타내는 유효성분을 1종 이상 더 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention may further include one or more active ingredients exhibiting pigmentation inhibitory activity.

본 발명의 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산 알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 ~ 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.The composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable additive, wherein the pharmaceutically acceptable additive includes starch, gelatinized starch, microcrystalline cellulose, lactose, povidone, colloidal silicon dioxide, calcium hydrogen phosphate, and lactose. , mannitol, syrup, gum arabic, pregelatinized starch, corn starch, powdered cellulose, hydroxypropyl cellulose, Opadry, sodium starch glycolate, lead carnauba, synthetic aluminum silicate, stearic acid, magnesium stearate, aluminum stearate, calcium stearate , sucrose, dextrose, sorbitol and talc and the like can be used. The pharmaceutically acceptable additive according to the present invention is preferably included in an amount of 0.1 to 90 parts by weight based on the composition, but is not limited thereto.

본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 바람직하게 본 발명에서는 비경구제로 특히 도포제로 이용 가능하다. The composition of the present invention may be administered in various oral and parenteral formulations during actual clinical administration. When formulating, diluents or excipients such as commonly used fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants are used. can be prepared. Preferably, in the present invention, it can be used as a parenteral agent, particularly as a coating agent.

본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 경피투여, 피부 외용, 피부 도포, 복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택할 수 있으며, 예컨대 경피 투여될 수 있다. 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 바람직하게 본 발명에 따른 조성물은 비경구 투여로, 피부 외용 또는 피부 도포에 의해 인체 등에 투여될 수 있다. The composition of the present invention may be administered orally or parenterally according to a desired method, and when administered parenterally, transdermal administration, external application to the skin, skin application, intraperitoneal injection, intrarectal injection, subcutaneous injection, intravenous injection, intramuscular injection Alternatively, an intrathoracic injection injection method may be selected, for example, it may be administered transdermally. The dosage varies according to the patient's weight, age, sex, health status, diet, administration time, administration method, excretion rate, and severity of disease. Preferably, the composition according to the present invention may be administered to the human body by parenteral administration, external application to the skin or skin application.

경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화할 수 있다. When formulated for transdermal administration, it can be formulated in the form of ointments, creams, lotions, gels, external solutions, pasta agents, liniment agents, air rolls, and the like.

약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 구체적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주된다.Formulation of pharmaceutical compositions is known in the art, and specifically, reference may be made to the literature [Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)] and the like. This document is considered a part of this specification.

본 발명에 따른 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The composition according to the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. In the present invention, "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is the type, severity, and drug activity of the patient. , sensitivity to drugs, administration time, administration route and excretion rate, duration of treatment, factors including concurrent drugs, and other factors well known in the medical field. The composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and may be administered single or multiple. In consideration of all of the above factors, it is important to administer an amount that can obtain the maximum effect with a minimum amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.

구체적으로, 본 발명에 따른 화합물의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 kg 당 0.1 mg 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 mg 내지 10 mg을 매일, 격일 또는 일주일에 1 내지 5 회 투여하거나 1일 1 내지 5회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Specifically, the effective amount of the compound according to the present invention may vary depending on the age, sex, and weight of the patient, and generally 0.1 mg to 100 mg, preferably 0.5 mg to 10 mg per kg of body weight daily, every other day, or It can be administered 1 to 5 times a week or divided into 1 to 5 times a day. However, since the dosage may be increased or decreased depending on the route of administration, severity, sex, weight, age, etc., the dosage is not intended to limit the scope of the present invention in any way.

상기 목적을 달성하기 위한 다른 양태에서, 본 발명은 푸코실락토즈(Fucosyllactose) 또는 이의 화장품학적으로 허용가능한 염을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하다. In another aspect for achieving the above object, the present invention provides a cosmetic composition for skin whitening comprising fucosyllactose or a cosmetically acceptable salt thereof.

본 발명에 있어서 용어 “피부 미백”이란 자외선 노출, 호르몬 밸런스의 변화, 유전적 프로그램 등의 각종 요인에 의해 발생하는 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클을 개선 또는 방지하는 효과, 피부를 투명감 있는 아름다운 것으로 하는, 혹은 투명감 있는 아름다운 피부를 유지하는 효과, 피부의 칙칙함을 경감하여 윤기ㆍ팽팽함을 증가시키는 효과 등을 말할 수 있다. 일반적으로, 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클은 자외선에 의한 자극이나 호르몬 밸런스의 변화 등에 의해 멜라노사이트(melanocyte)가 자극되고, 그래서 생합성된 멜라닌 색소가 피부에 침착하여 발생한다고 알려져 있다. 따라서, 멜라닌의 생성을 억제할 수 있다면, 거뭇한 피부나 기미, 주근깨, 다크서클을 예방ㆍ개선하는 것이 가능하다.In the present invention, the term "skin whitening" refers to the effect of improving or preventing darkened skin, freckles, freckles, and dark circles caused by various factors such as UV exposure, changes in hormonal balance, and genetic programs, making the skin transparent. The effect of making it beautiful or maintaining beautiful skin with transparency, the effect of reducing dullness of the skin, and increasing the glossiness and tightness, etc. can be mentioned. In general, dark skin, freckles, freckles, and dark circles are known to be caused by stimulation by ultraviolet rays or changes in hormonal balance, such as melanocytes, and thus biosynthesized melanin pigments are deposited on the skin. Therefore, if the production of melanin can be suppressed, it is possible to prevent and improve darkened skin, blemishes, freckles, and dark circles.

본 발명에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 멜라닌 과다 발현을 억제하거나 감소시켜 피부 미백 효과가 우수하며, 피부의 색을 밝게 조절함으로써 피부 미백용 조성물로 우수한 효과를 나타낸다. The cosmetic composition for skin whitening according to the present invention has excellent skin whitening effect by inhibiting or reducing overexpression of melanin, and exhibits an excellent effect as a skin whitening composition by brightening the skin color.

본 발명에서 사용되는 용어, “화장품학적으로 허용가능한 염”은, 양이온과 음이온이 정전기적 인력에 의해 결합하고 있는 물질인 염 중에서도 화장품학적으로 사용될 수 있는 형태의 염을 의미하며, 그 종류에 대한 구체적인 예는 상술한 "약제학적으로 허용가능한 염"의 예를 포함한다.As used in the present invention, the term “cosmetically acceptable salt” refers to a salt in a form that can be used cosmetically among salts, which are substances in which cations and anions are combined by electrostatic attraction, Specific examples include the examples of "pharmaceutically acceptable salts" described above.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션,왁스 파운데이션, 패치 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.The cosmetic composition according to the present invention includes solutions, external ointments, creams, foams, nourishing lotions, softening lotions, packs, soft water, emulsions, makeup bases, essences, soaps, liquid detergents, bathing agents, sunscreen creams, sun oils, suspensions, Emulsion, paste, gel, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, patch and spray can be prepared in one or more formulations selected from the group consisting of, but It is not limited.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In addition, the cosmetic composition of the present invention may further include one or more cosmetically acceptable carriers to be formulated in general skin cosmetics, and conventional ingredients include, for example, oil, water, surfactant, humectant, lower alcohol, A thickener, a chelating agent, a colorant, a preservative, a fragrance, etc. may be appropriately mixed, but the present invention is not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.The cosmetically acceptable carrier included in the cosmetic composition of the present invention varies depending on the formulation.

본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an ointment, paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, zinc oxide or Mixtures thereof may be used.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, polyamide powder, or a mixture thereof may be used as a carrier component. In particular, in the case of a spray, additional chlorophyll propellants such as fluorohydrocarbons, propane/butane or dimethyl ether.

발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수배종 오일, 올리브 오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르,폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 ,3-Butyl glycol oil may be used, and in particular, cottonseed oil, peanut oil, corn germ oil, olive oil, castor oil and sesame oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or fatty acid ester of sorbitan may be used. .

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제,미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸 트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester; Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.

본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a soap, alkali metal salts of fatty acids, fatty acid hemiester salts, fatty acid protein hydrolysates, isethionate, lanolin derivatives, aliphatic alcohols, vegetable oils, glycerol, sugar, etc. may be used as carrier components. can

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시테이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcositate, fatty acid amide as carrier components Ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters can be used.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 푸코실락토즈를 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량%로 함유할 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention may contain fucosyllactose in an amount of 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition.

상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태에서, 본 발명은 푸코실락토즈를 포함하는, 피부 미백용 의약외품 조성물을 제공한다.In another aspect for achieving the above object, the present invention provides a quasi-drug composition for skin whitening, comprising fucosyllactose.

본 발명에서 상기 의약외품 조성물은 피부 미백을 목적하는 의약외품 조성물이다.In the present invention, the quasi-drug composition is a quasi-drug composition for skin whitening.

본 발명에서 사용되는 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미하는 것으로, 예를 들어 약사법에 따르면 의약외품이란 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람ㆍ동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 섬유ㆍ고무 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염병을 막기 위한 살균ㆍ살충제 등이 이에 포함된다.The term "quasi-drug" as used in the present invention refers to items with a milder action than pharmaceuticals among items used for the purpose of diagnosing, treating, improving, alleviating, treating or preventing diseases of humans or animals, for example, in the Pharmaceutical Affairs Act. According to the definition of quasi-drugs, quasi-drugs are products that are not used for medicinal purposes. Textile and rubber products used for the treatment or prevention of diseases of humans and animals, those that have a slight or no direct action on the human body, and are not instruments or machines, and similar products. , and disinfectants and insecticides to prevent infectious diseases.

본 발명의 의약외품 조성물의 종류나 제형은 특별히 제한되지 아니하나, 바람직하게는 소독 청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제 비누, 핸드 워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제 등일 수 있다.The type or formulation of the quasi-drug composition of the present invention is not particularly limited, but preferably disinfectant, shower foam, gargrin, wet tissue, detergent soap, hand wash, humidifier filler, mask, ointment or filter filler.

본 발명의 조성물을 피부 미백 용도로 의약외품에 포함시킬 경우, 상기 조성물을 그대로 포함하여 사용하거나 다른 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있으며, 본 발명에 의한 의약외품 조성물은 상기 푸코실락토즈를 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량%로 함유할 수 있다.When the composition of the present invention is included in a quasi-drug for skin whitening, the composition may be used as it is or may be used together with other quasi-drug ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixing amount of the active ingredient may be appropriately determined according to the purpose of use, and the quasi-drug composition according to the present invention may contain the fucosyllactose in an amount of 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition.

상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태에서, 본 발명은 푸코실락토즈를 포함하는, 피부 미백용 피부외용제 조성물을 제공한다.In another aspect for achieving the above object, the present invention provides a composition for external application for skin whitening, comprising fucosyllactose.

본 발명에서 상기 피부외용제 조성물은 피부 미백을 목적하는 것인, 피부외용제 조성물이다.In the present invention, the composition for external application for skin is a composition for external application for skin that is intended for skin whitening.

본 발명에 의한 피부외용제 조성물은, 예를 들어, 연고, 로션, 가용화상, 현탁액, 에멀젼, 크림, 젤, 스프레이, 파프제, 경고제, 패치제 또는 물파스 등을 들 수 있지만, 이들에만 한정되지 않고, 당업계에 주지된 어떠한 기제에도 배합될 수 있다. 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 상기 푸코실락토즈를 조성물 총 중량에 대하여 0.01~20 중량%로 함유할 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention may include, but is not limited to, ointments, lotions, solubilizing burns, suspensions, emulsions, creams, gels, sprays, patches, warning agents, patches, or water pastes. It may be formulated with any base known in the art. The composition for external application for skin according to the present invention may contain the fucosyllactose in an amount of 0.01 to 20% by weight based on the total weight of the composition.

본 발명은 치료학적으로 유효한 양의 푸코실락토즈를 대상체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 치료방법을 제공한다.The present invention provides a method for treating a disease of melanin hyperpigmentation comprising the step of applying a therapeutically effective amount of fucosyllactose to the skin of a subject.

본 발명은 푸코실락토즈를 대상체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부의 미백 및/또는 라이트닝 방법을 제공한다.The present invention provides a method for skin whitening and/or lightening, comprising the step of applying fucosyllactose to the skin of a subject.

상기 대상체는 동물을 말하며, 전형적으로 본 발명의 푸코실락토즈를 이용한 치료로 유익한 효과를 나타낼 수 있는 포유동물일 수 있다. 이러한 대상체의 바람직한 예로 인간과 같은 영장류가 포함될 수 있다. 또한 이와 같은 대상체들에는 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 증상을 갖거나 이와 같은 증상을 가질 위험이 있는 대상체, 피부의 미백 및/또는 라이트닝이 필요한 대상체 등이 모두 포함될 수 있다.The subject refers to an animal, and typically may be a mammal that can exhibit beneficial effects by treatment with the fucosyllactose of the present invention. Preferred examples of such subjects may include primates such as humans. In addition, such subjects may include all subjects having or at risk of having symptoms of melanin hyperpigmentation disease, subjects in need of skin whitening and/or lightening, and the like.

본 발명은 또한 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 치료를 위한 약제의 제조에서 푸코실락토즈의 용도를 제공한다. The present invention also provides the use of fucosyllactose in the manufacture of a medicament for the treatment of a disease of melanin hyperpigmentation.

본 발명은 또한 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 치료에 사용하기 위한 푸코실락토즈를 포함하는 조성물을 제공한다. The present invention also provides a composition comprising fucosyllactose for use in the treatment of a disease of melanin hyperpigmentation.

본 발명은 또한 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 치료를 위한 푸코실락토즈의 용도를 제공한다.The present invention also provides the use of fucosyllactose for the treatment of a disease of melanin hyperpigmentation.

본 발명에 따른 조성물은 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 발병과 관련이 높은 멜라닌 및 이의 합성에 관여하는 단백질의 발현 및 활성을 더욱 효과적으로 저해함으로써 상기 질환의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다. 이에 따라, 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물; 피부 미백용 화장료, 피부외용제 및 의약외품 조성물로 다양하게 이용 가능하다. The composition according to the present invention exhibits an excellent effect in the prevention and treatment of the disease by more effectively inhibiting the expression and activity of melanin, which is highly related to the onset of melanin hyperpigmentation disease, and a protein involved in its synthesis. Accordingly, a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease; It can be used in various ways as a skin whitening cosmetic, external preparation for skin, and quasi-drug composition.

도 1은 본 발명에 따른 2'-푸코실락토즈의 세포 독성 평가를 수행한 결과를 나타낸다 (A: 형태학적 변화, B: 세포 독성).
도 2는 본 발명에 따른 2'-푸코실락토즈 처리에 따른 멜라닌 감소를 확인한 결과를 나타낸다 (A: 육안 상 관찰, B: Melanin Assay 수치화 그래프)
도 3은 본 발명에 따른 2'-푸코실락토즈의 Anti-melanogenesis 기전 확인을 위한 Dorsomorphin 처리에 따른 AMPK pathway 기전 변화 및 멜라닌 변화를 확인한 결과를 나타낸다 (A: Melanin Assay 수치화 그래프, B: 육안 상 관찰)
도 4는 2'-푸코실락토즈 처리에 따른 활성화 AMPK 및 Autophagy 유도를 확인한 결과를 나타낸다 (A : 2'-푸코실락토즈 처리, B : Dorsomorphin 전처리 후 2'-푸코실락토즈 처리)1 shows the results of performing cytotoxicity evaluation of 2'-fucosyllactose according to the present invention (A: morphological change, B: cytotoxicity).
2 shows the results of confirming the decrease in melanin according to the 2'-fucosyllactose treatment according to the present invention (A: visual observation, B: Melanin Assay numerical graph)
Figure 3 shows the results of confirming the AMPK pathway mechanism change and melanin change according to the Dorsomorphin treatment for confirming the anti-melanogenesis mechanism of 2'-fucosyllactose according to the present invention (A: Melanin Assay numerical graph, B: visual observation )
Figure 4 shows the results of confirming the activation of AMPK and Autophagy induction according to 2'-fucosyllactose treatment (A: 2'-fucosyllactose treatment, B: 2'-fucosyllactose treatment after Dorsomorphin pretreatment)

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of Examples. However, the following examples are merely illustrative of the present invention, and the present invention is not limited by the following examples.

실시예 1. 2′-푸코실락토즈 처리에 따른 멜라닌 생성 억제 확인 Example 1. Confirmation of inhibition of melanin production according to 2′-fucosyllactose treatment

사람의 피부색을 결정하는 요인 중 멜라닌(melanin)의 영향이 가장 큰 것으로 알려져 있다. 멜라닌은 표피 내 기저층에 존재하는 색소세포인 멜라노사이트(melanocyte)에서 합성되고, 주변의 각질세포로 전이되어 피부색을 결정할 수 있다. It is known that melanin has the greatest influence among the factors that determine a person's skin color. Melanin is synthesized in melanocytes, which are pigment cells present in the basal layer of the epidermis, and metastasizes to surrounding keratinocytes to determine skin color.

이에 따라, 2'-푸코실락토즈를 처리하여 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다. Accordingly, the effect of inhibiting melanin production was confirmed by treatment with 2'-fucosyllactose.

2'-푸코실락토즈 처리에 따른 인간 흑색종 세포에서 멜라닌 억제을 확인하기 위해 인간 흑색종 세포인 MNT-1을 MEM with Glucose, High Glucose 50 ml, 1M HEPES, 20 % Fetal Bovine serum, 100 U/ml penicillin, 100 μg/mL streptomycin 조성으로 하여 37°C, 5% CO₂ Incubator 조건에서 배양하였다. In order to confirm melanin inhibition in human melanoma cells following 2'-fucosyllactose treatment, MNT-1, a human melanoma cell, was mixed with MEM with Glucose, High Glucose 50 ml, 1M HEPES, 20% Fetal Bovine serum, 100 U/ml Penicillin and 100 μg/mL streptomycin composition were incubated at _{37°C, 5% CO 2 Incubator condition.}

(1) 세포 독성 확인 (1) Confirmation of cytotoxicity

2'-푸코실락토즈의 세포 독성을 확인하기 위하여, 2'-푸코실락토즈를 human melanoma MNT-1 cells에 처리하고, MTT [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide] assay로 세포 증식을 측정하였다. To confirm the cytotoxicity of 2'-fucosyllactose, 2'-fucosyllactose was treated with human melanoma MNT-1 cells, and MTT [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5 -Diphenyltetrazolium Bromide] assay was used to measure cell proliferation.

도 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 2'-푸코실락토즈를 24 시간 동안 10 g/L 및 20 g/L로 처리한 human melanoma MNT-1 cells에서 세포 독성은 나타나지 않았으며 형태학적 변화도 관찰되지 않았다(도 2의 A 및 B). As can be seen in FIG. 1 , no cytotoxicity and no morphological change were observed in human melanoma MNT-1 cells treated with 2'-fucosyllactose at 10 g/L and 20 g/L for 24 hours. did not (A and B in FIG. 2).

(2) 멜라닌 생성 억제 효과 확인 (2) Confirmation of melanin production inhibitory effect

MNT-1 세포를 5 X 10⁵ cells/ml로 6 well에 seeding 하고, 5% CO₂가 존재하는 37℃ 배양기에서 24 시간 배양하였다. 그리고 나서, 기존 배지를 제거하고, 20 g/L의 2′-푸코실락토즈를 10일 동안 처리하였다. 배양액을 제거한 후, 얼음 위에서 lysis buffer를 처리하여 세포를 수확하고, 15000 rpm으로 4°C에서 10분 동안 원심분리하였다. BCA assay를 통하여 상등액의 단백질량을 측정하였다. pellet이 담겨진 튜브에 1N NaOH 용액 90 μL 을 넣어 히팅블럭에서 80 ℃, 1 시간 동안 가열하고, vortexing 후 96 well에 옮겨 분주하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. MNT-1 cells were seeded in 6 wells at ^{5 X 10 5} cells/ml, and incubated for 24 hours at 37° C. in the presence of _{5% CO 2 .} Then, the old medium was removed, and 20 g/L of 2'-fucosyllactose was treated for 10 days. After removing the culture medium, the cells were harvested by treatment with lysis buffer on ice, and centrifuged at 15000 rpm at 4 °C for 10 min. The amount of protein in the supernatant was measured through BCA assay. Put 90 μL of 1N NaOH solution in the tube containing the pellet, heated in a heating block at 80 °C for 1 hour, vortexed, transferred to 96 wells, and the absorbance was measured at 450 nm.

측정된 흡광도 값은 단백질양으로 나누어 멜라닌 상대값을 계산하였다. The measured absorbance value was divided by the protein amount to calculate the relative melanin value.

그 결과를 도 2에 나타내었다. The results are shown in FIG. 2 .

도 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 2'-푸코실락토즈(2'-FL)의 처리에 따라 멜라닌의 발현량이 크게 감소하는 것을 육안적으로 직접 확인할 수 있었고 (도 2의 A), 발현량 감소 또한 확인하였다(도 2의 B). 위 결과로부터 본 발명에 따른 2'-푸코실락토즈가 우수한 색소 침착 억제 및 미백 효과를 나타내는 것을 확인하였다.As can be seen in FIG. 2, it was possible to visually directly confirm that the expression level of melanin was greatly reduced according to the treatment of 2'-fucosyllactose (2'-FL) (FIG. 2A), and the expression level decreased It was also confirmed (FIG. 2B). From the above results, it was confirmed that 2'-fucosyllactose according to the present invention exhibited excellent pigmentation inhibition and whitening effects.

실시예 2. 2′-푸코실락토즈 처리에 따른 멜라닌 생성 억제 기전 확인 Example 2. Confirmation of melanin production inhibition mechanism according to 2′-fucosyllactose treatment

2′-푸코실락토즈 처리에 따른 멜라닌 생성 억제 기전를 확인하기 위하여 AMPK 경로에 따라 anti-melanogenesis가 일어나는지 여부를 시험을 통해 확인하였다. 상기 실시예 1-(2)와 동일하게 Melanin assay를 수행하면서, AMPK inhibitor인 dorsomorphin 처리(10 uM의 Dorsomorphin (AMPK inhibitor)을 전처리 하고 나서 20 g/L의 2'-푸코실락토즈를 처리)에 따른 멜라닌 합성 변화를 확인하였다. In order to confirm the mechanism of inhibiting melanogenesis according to 2'-fucosyllactose treatment, it was confirmed through a test whether anti-melanogenesis occurred according to the AMPK pathway. While performing the melanin assay in the same manner as in Example 1-(2), to the AMPK inhibitor dorsomorphin treatment (10 uM of Dorsomorphin (AMPK inhibitor) and then 20 g/L of 2'-fucosyllactose) Changes in melanin synthesis were confirmed.

상기 결과를 도 3에 나타내었다. The results are shown in FIG. 3 .

도 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 2′-푸코실락토즈의 처리는 멜라닌의 발현을 크게 저해하였으나, AMPK inhibitor인 dorsomorphin를 처리하는 경우 멜라닌 합성 저해가 일어나지 않았다. As can be seen in FIG. 3, treatment with 2'-fucosyllactose significantly inhibited the expression of melanin, but when treated with dorsomorphin, an AMPK inhibitor, melanin synthesis inhibition did not occur.

이러한 결과를 통해 본 발명에 따른 2′-푸코실락토즈가 일예시적으로 AMPK 경로를 따라 anti-melanogenesis 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다. Through these results, it was confirmed that 2'-fucosyllactose according to the present invention can exhibit an anti-melanogenesis effect along the AMPK pathway by way of example.

또한, 2′-푸코실락토즈가 AMPK의 인산화를 통해 Autophagy를 활성화시킬 수 있음을 추가로 확인하였다. In addition, it was further confirmed that 2'-fucosyllactose can activate Autophagy through phosphorylation of AMPK.

구체적으로, 활성화 AMPK (p-AMPK)는 ULK1 (Ser555)을 직접 인산화하여 Autophagy를 유도하는 한편, 비활성화 AMPK는 mTOR 경로와 관련된 phosphor-ULK1 (Ser757)을 통하여 Autophagy를 억제하는 것으로 알려져 있다. Specifically, it is known that activated AMPK (p-AMPK) directly phosphorylates ULK1 (Ser555) to induce autophagy, while inactivated AMPK inhibits autophagy through phosphor-ULK1 (Ser757) related to the mTOR pathway.

이에 따라, 2′-푸코실락토즈가 human melanoma MNT-1 cells에서 Autophagy를 어떠한 방식으로 유도하는지 확인하기 위해, 2′-푸코실락토즈를 처리하고 시간 의존적으로 처리한 후 워스턴 블랏을 통해 AMPK, 인산화 AMPK(p-AMPK) 및 LC3B-Ⅰ과 LC3B-Ⅱ의 발현 변화를 확인하였다. Accordingly, in order to determine how 2'-fucosyllactose induces Autophagy in human melanoma MNT-1 cells, 2'-fucosyllactose was treated and time-dependently treated with AMPK, Changes in the expression of phosphorylated AMPK (p-AMPK) and LC3B-I and LC3B-II were confirmed.

그 결과를 도 4의 A에 나타내었다. 도 4의 A에서 확인할 수 있는 바와 같이, 활성화 AMPK (p-AMPK)는 2′-푸코실락토즈 (2'-FL)를 처리하고 시간이 지날수록 증가하였고, LC3BII 또한 AMPK 활성화 (p-AMPK)의 증가에 따라 human melanoma MNT-1 cells에서 증가하였다. The results are shown in A of FIG. 4 . As can be seen in FIG. 4A, activated AMPK (p-AMPK) increased over time after treatment with 2′-fucosyllactose (2′-FL), and LC3BII also activated AMPK (p-AMPK) increased in human melanoma MNT-1 cells with the increase of

한편, dorsomorphin 처리(10 uM의 Dorsomorphin (AMPK inhibitor)을 전처리 하고 나서 20 g/L의 2'-푸코실락토즈를 처리)를 처리하였을 때 결과를 확인하여, 이를 도 4의 B에 나타내었다. On the other hand, when dorsomorphin treatment (pre-treatment with 10 uM of Dorsomorphin (AMPK inhibitor) and then 20 g/L of 2'-fucosyllactose) was confirmed, the results were confirmed, and this is shown in FIG. 4B.

도 4의 B에서 확인할 수 있는 바와 같이, AMPK 경로의 억제에 따라 활성화 AMPK (p-AMPK)는 증가하지 않았고 더불어 LC3BII도 증가하지 않는 것을 확인하였다. As can be seen in FIG. 4B , it was confirmed that the activated AMPK (p-AMPK) did not increase according to the inhibition of the AMPK pathway, and also LC3BII did not increase.

상기 결과로부터 2′-푸코실락토즈 (2'-FL)가 AMPK 경로에 관여되고 이는 Autophagy 유도에도 관련성이 높음을 확인할 수 있었다.From the above results, it was confirmed that 2'-fucosyllactose (2'-FL) is involved in the AMPK pathway and is highly related to autophagy induction.

상기 실험 결과들로부터 본 발명에 따른 2′-푸코실락토즈의 우수한 멜라닌 억제 효과를 확인할 수 있었다. 또한, 이러한 결과들을 통해 2′-푸코실락토즈가 멜라닌 색소 과다 침착 질환의 예방 또는 치료에 이용될 수 있을 뿐만 아니라, 피부 미백 용도로 이용될 수 있음을 확인하였다. From the above experimental results, it was possible to confirm the excellent melanin inhibitory effect of 2'-fucosyllactose according to the present invention. In addition, through these results, it was confirmed that 2'-fucosyllactose can be used for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease, as well as for skin whitening.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 관련 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 있어 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구범위와 그의 등가물에 의하여 정의될 것이다.As described above in detail a specific part of the present invention, for those of ordinary skill in the related art, this specific technique is only a preferred embodiment, and it is clear that the scope of the present invention is not limited thereto. Accordingly, the substantial scope of the invention will be defined by the appended claims and their equivalents.

Claims

A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease, comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

According to claim 1,
The disease of melanin hyperpigmentation is freckles; blotch; senile spots; Kanban; freckles; black spot; sun pigment plaque; melasma; hyperpigmentation after drug use; gestational chloasma; And a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease, which is any one selected from the group consisting of hyperpigmentation after inflammation due to wounds or dermatitis.

3. The method of claim 2,
The melanin hyperpigmentation disease is any one selected from the group consisting of freckles, age spots, melasma and black spots, a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease.

According to claim 1,
The pharmaceutical composition is a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease that is administered by application to the skin.

According to claim 1,
The fucosyllactose (Fucosyllactose) is 2'-fucosyllactose, a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of melanin hyperpigmentation disease.

According to claim 1, wherein the pharmaceutical composition is any one formulation selected from the group consisting of an ointment, a cream, a lotion, a gel, an external solution, a pasta agent, a liniment agent, and an aerosol agent of melanin hyperpigmentation disease A pharmaceutical composition for prophylaxis or treatment.

A cosmetic composition for skin whitening comprising Fucosyllactose or a cosmetically acceptable salt thereof.

8. The method of claim 7,
The cosmetic composition is a solution, external ointment, cream, foam, nutrient lotion, softening lotion, pack, soft water, emulsion, makeup base, essence, soap, liquid detergent, bath agent, sunscreen cream, sun oil, suspension, emulsion, A cosmetic composition for skin whitening, which is at least one formulation selected from the group consisting of paste, gel, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, patch and spray.

A quasi-drug composition for skin whitening comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.

A composition for external application for skin whitening comprising Fucosyllactose or a pharmaceutically acceptable salt thereof.