KR20210102917A - 종양 질환을 치료하기 위한 il-15 단백질 복합체 연합 pd-l1 항체의 용도 - Google Patents

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Abstract

종양 질환을 치료하기 위한 IL-15 단백질 복합체 연합 PD-L1 항체(IL-15 protein complex joint PD-L1 andtibody)의 용도가 제공된다.

Description

종양 질환을 치료하기 위한 IL-15 단백질 복합체 연합 PD-L1 항체의 용도
본 개시는 의학 분야에 속해 있고, 종양 질환(tumor disease)의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서 PD-L1 항체와 조합된 IL-15 단백질 복합체(protein complex)의 용도에 관한 것이다.
종양 면역요법(Tumor immunotherapy)은 최근 들어 종양 요법 분야에서 뜨거운 관심사이며, T 세포를 사용하는 종양 면역요법이 종양 면역요법에 중요하다. 종양 면역요법은 종양-내재 대상체에 존재하는 킬러 T 세포(killer T cell)를 완전히 활용하고 동원함으로써 종양에 사멸 효과를 나타낸다. 그것은 종양 치료를 위한 가장 효과적인 안전한 방법일 수 있다. 종양 회피(tumor escape)는 종양 면역요법에 큰 장애물이다. 종양 세포는 종양의 제어되지 않는 성장을 촉진하기 위하여 면역 체계에 그 자체의 억제 효과를 활용한다. 종양 면역 회피의 기저에 있는 메커니즘과 종양에 대한 신체의 면역 반응 사이에는 매우 복잡한 관계가 있다. 종양 면역요법의 초기 단계에서, 종양-특이적 킬러 T 세포는 여전히 생물학적 활성을 유지한다. 그러나, 종양-특이적 킬러 T 세포는, 종양이 성장함에 따라, 진전된 단계에서 그것의 사멸 기능을 상실한다. 그러므로, 현재의 종양 요법은 종양에 대한 대상체의 자체 면역 체계 반응을 최대화하는 것이다. 면역 종양요법에 대한 핵심 포인트는 생체내에서 선천적 면역 체계 반응을 활성화할뿐만 아니라 면역 체계 반응의 기간 및 강도를 유지하는 것이다.
프로그래밍된 사멸 수용체(Programmed death receptor) 1(PD-1) 항체는 림프구의 표면 상에 존재하는 PD-1을 특이적으로 인식하여 그것에 결합할 수 있고, PD-1/PD-L1 신호전달 경로를 차단함으로써, 면역 T 세포의 종양에 대한 사멸 효과를 활성화하고, 신체의 면역 체계를 동원하여 신체로부터 종양 세포를 제거한다. 2개의 PD-1 리간드인 PD-L1 및 PD-L2가 있다. PD-L1은 주로 T 세포, B 세포, 대식세포 및 수지상 세포(DC) 상에서 발현되며, 세포 상에서의 발현은 활성화시 상향조절될 수 있다. PD-L1은 PD-1 및 B7-1에 결합함으로써 면역 체계를 억제한다. 종양 조직 미세환경에 존재하는 다양한 종양 세포 및 면역 세포가 PD-L1을 발현한다. 최근의 연구는 높은 발현 수준의 PD-L1 단백질이 인간 종양 조직, 예컨대, 유방암(breast cancer), 폐암(lung cancer), 위암(gastric cancer), 장암(intestinal cancer), 신장암(kidney cancer), 흑색종(melanoma), 비-소세포 폐암(non-small cell lung cancer), 결장암(colon cancer), 방광암(bladder cancer), 난소암(ovarian cancer), 췌장암(pancreatic cancer) 및 간암(liver cancer)에서 검출되었고, PD-L1의 발현 수준이 환자의 임상 및 예후와 밀접하게 관련되는 것을 나타냈다. PD-L1은 T 세포 증식을 억제하는 제2 신호전달 경로로서 작용한다. 그러므로, PD-L1/PD-1 사이의 결합을 차단하는 것은 종양 면역요법 분야에서 매우 잠재적인 부상하는 목표가 되었다. 면역 체크포인트 억제제(immune checkpoint inhibitor)(예컨대 PD-1 및 PD-L1 항체)와 다른 작용제와의 병용 요법이 또한 뜨거운 연구 분야이다. 현재, 일련의 항-PD-L1 항체가 보고되었고, 그 중에서도, WO2017084495에서 개시된 PD-L1 항체가 종양발생 및 발달을 억제하는 효과를 효과적으로 개선할 수 있다.
인터류킨 15(IL-15)는 1994년에 Grabstein 등에 의해 발견된, 대략 12-14 kD의 사이토카인이다. IL-15는 신체의 정상적인 면역 반응, 예를 들어, T 세포, B 세포, 및 천연 살해(NK) 세포의 증식을 촉진하는 데에서 역할을 한다. IL-15는 그것의 수용체에 결합함으로써 그것의 생물학적 활성을 발휘한다. IL-15 수용체는 3개의 수용체 하위유닛: IL-15 수용체 α(IL-15Rα), IL-2 수용체 β(IL-2Rβ) 및 γc로 구성된다. IL-15Rα는 IL-15에 결합할 수 있고 결합된 IL-15가 생물학적 기능을 발휘하는 데 필요한 Sushi 도메인을 포함한다. 최근, IL-15와 그것의 수용체 IL-15Rα에 의해 형성된 복합체가 IL-15의 생물학적 활성을 상당히 증강시킬 수 있는 것으로 밝혀졌다.
많은 국내 또는 국외 기업 또는 연구 기관이 종양 면역요법 분야에서 IL-15의 긍정적 기대로 인해 IL-15 면역요법 관련 연구에 참여하였다. 예를 들어, 특허 CN100334112C에 포함된 IL-15-hIgG4Fc 호모다이머는 미생물 감염의 치료에 유용하다; IL-15N72D:IL-15RαSu/Fc 융합 단백질 복합체가 CN103370339B에서 개시되는데, 그것의 IL-15 폴리펩타이드는 N72D 돌연변이를 가지며, 돌연변이는 원래의 IL-15와 비교하여 IL-15βγC 수용체에 대한 감소된 결합 활성을 보인다; WO2016095642에서 개시된 IL-15 단백질 복합체는 IL-15 폴리펩타이드 및 IL-15Rα/Fc로 구성되며, 이황화 결합(들)이 IL-15과 IL-15Rα 사이에 도입되어, 분자 안정성 및 생물학적 활성을 개선할뿐만 아니라, 제조 과정을 단순화할 수 있다.
현재, 일부 연구자가 면역 체크포인트 억제제 및 IL-15의 병용 요법을 수행하였다. John M Wrangle 등(The Lancet Oncology, Volume 19, Issue 5, May 2018, Pages 694-704)은 진전된 비-편평성 비-소세포 폐암의 치료를 위해 항-PD-1 항체 니볼루맙(nivolumab)과 조합된 IL-15 복합체 ALT-803의 안전성을 평가하였다.
본 개시는 종양 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서, 유리한 항-종양 효과를 보이는, PD-L1 항체와 조합된 IL-15 단백질 복합체의 용도를 제공한다.
본 개시는 종양 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합된 IL-15 또는 단백질 복합체의 용도를 제공한다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편 중 임의의 하나는 다음의 CDR 영역 서열 또는 그것의 돌연변이 서열: 항체 중쇄 가변 영역 HCDR 영역 서열: SEQ ID NO: 1-3; 및 항체 경쇄 가변 영역 LCDR 영역 서열: SEQ ID NO: 4-6로부터 선택된 CDR(들)을 포함하며;
특히:
HCDR1은
SYWMH SEQ ID NO: 1로부터 선택되고:
HCDR2는
RI X1PNSG X2TSYNEKFKN SEQ ID NO: 2로부터 선택되며:
HCDR3은
GGSSYDYFDY SEQ ID NO: 3으로부터 선택되고:
LCDR1은
RASESVSIHGTHLMH SEQ ID NO: 4로부터 선택되며:
LCDR2는
AASNLES SEQ ID NO: 5로부터 선택되고:
LCDR3은
QQSFEDPLT SEQ ID NO: 6으로부터 선택되며;
여기서 X1은 H 또는 G로부터 선택되고, 바람직하게는 G이며; X2는 G 또는 F로부터 선택되고, 바람직하게는 F이다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 아미노산 서열: SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5 및 SEQ ID NO: 6에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 경쇄 가변 영역 CDR 서열; 및 아미노산 서열: SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 및 SEQ ID NO: 3에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 중쇄 가변 영역 CDR 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 쥐과 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 및 인간 항체로 이루어지는 군으로부터 선택될 수 있고, 바람직하게는 인간화 항체일 수 있다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 아미노산 서열 SEQ ID NO: 7에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 중쇄 가변 영역 서열; 및 아미노산 서열 SEQ ID NO: 8에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 또는 그것의 변이체의 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하며, 바람직하게는 인간 IgG2 또는 IgG4의 중쇄 불변 영 역을 포함하고, 보다 바람직하게는 F234A 및 L235A 돌연변이가 도입된 IgG4의 중쇄 불변 영역을 포함하고; 인간화 항체 경쇄는 인간 카파, 람다 사슬 또는 그것의 변이체의 불변 영역을 추가로 포함한다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 아미노산 서열 SEQ ID NO: 9에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 중쇄 가변 영역 서열; 및 아미노산 서열 SEQ ID NO: 11에 대해 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 가지는 경쇄 서열을 포함한다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 중쇄 서열은 SEQ ID NO: 9이고, 경쇄 서열은 SEQ ID NO: 11이다.
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFT SYWMH WVRQAPGQGLEWMG RIGPNSGFTSYNEKFKN RVTMT
RDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCAR GGSSYDYFDY WGQGTTVTVSS
SEQ ID NO: 7;
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITC RASESVSIHGTHLMH WYQQKPGQPPKLLIY AASNLES GVPARFSGSGS
GTDFTLTINPVEAEDTANYYC QQSFEDPLT FGQGTKLEIK
SEQ ID NO: 8;
주의: 이탤릭체 서열은 FR을 나타내며, 밑줄친 서열은 CDR을 나타낸다.
중쇄 서열
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMHWVRQAPGQGLEWMGRIGPNSGFTSYNEKFKNRVTMT
RDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARGGSSYDYFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA
ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKV
DKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVH
NAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQE
EMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSV
MHEALHNHYTQKSLSLSLGK
SEQ ID NO: 9;
중쇄 서열을 암호화하는 유전자 서열
CAGGTGCAACTGGTGCAGAGCGGTGCCGAGGTGAAGAAGCCTGGCGCAAGCGTGAAAGTGAGCTGCAAGGC
CAGCGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGCACTGGGTGAGGCAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAGTGGA
TGGGCAGGATCGGGCCCAACAGTGGTTTCACTAGCTACAATGAAAAGTTCAAGAACAGGGTAACCATGACC
AGGGACACCTCCACCAGCACAGTGTATATGGAGCTGAGCAGCCTGAGGAGCGAGGACACCGCCGTGTACTA
CTGTGCCAGAGGCGGCAGCAGCTACGACTACTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGAGCA
GTGCTTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCC
GCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGAC
CAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCG
TGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACGAAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTG
GACAAGAGAGTTGAGTCCAAATATGGTCCCCCATGCCCACCATGCCCAGCACCTGAGGCTGCTGGGGGACC
ATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCG
TGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGTGCAT
AATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCT
GCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCG
AGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAGCCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCAGGAG
GAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGA
GTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCT
TCTTCCTCTACAGCAGGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGGAGGGGAATGTCTTCTCATGCTCCGTG
ATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCTGGGTAAATGA
SEQ ID NO: 10;
경쇄 서열
DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIHGTHLMHWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVPARFSGSGS
GTDFTLTINPVEAEDTANYYCQQSFEDPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNN
FYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF
NRGEC
SEQ ID NO: 11;
경쇄 서열을 암호화하는 유전자 서열:
GACATCGTGCTGACCCAGAGTCCCGCCTCACTTGCCGTGAGCCCCGGTCAGAGGGCCACCATCACCTGTAG
GGCCAGCGAGAGCGTGAGCATCCACGGCACCCACCTGATGCACTGGTATCAACAGAAACCCGGCCAGCCCC
CCAAACTGCTGATCTACGCCGCCAGCAACCTGGAGAGCGGCGTGCCCGCCAGGTTCAGCGGCTCCGGCAGC
GGCACCGACTTCACCCTCACTATCAACCCCGTGGAGGCCGAGGACACCGCCAACTACTACTGCCAGCAGAG
CTTCGAGGACCCCCTGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAGATCAAGCGTACGGTGGCTGCACCATCTG
TCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAAC
TTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAG
TGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACT
ACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTC
AACAGGGGAGAGTGTTGA
SEQ ID NO: 12.
일부 구현예에서, IL-15 단백질 복합체는 가용성 융합 단백질(soluble fusion protein) (I) 및 가용성 융합 단백질 (II)로 구성되며; 가용성 융합 단백질 (I)은 IL-15 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편을 포함하고; 가용성 융합 단백질 (II)은 IL-15Rα 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편을 포함하며; 가용성 융합 단백질 (I) 또는 가용성 융합 단백질 (II)의 하나 이상의 아미노산 부위는 Cys로 돌연변이되어, 가용성 융합 단백질 (II) 또는 가용성 융합 단백질 (I)의 상응하는 아미노산 부위(들)에서 Cys와 쌍을 형성함으로써 이황화 결합(들)을 형성한다.
일부 구현예에서, 가용성 융합 단백질 (II)은 Fc 단편 또는 그것의 돌연변이를 추가로 포함하며; 바람직하게, 가용성 융합 단백질 (II)은 Fc 단편의 N-말단에 연결된 IL-15Rα 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편으로 구성되고; 보다 바람직하게는, Fc 단편은 SED NO: 13이다.
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREE
MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM
HEALHNHYTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO: 13.
일부 구현예에서, 가용성 융합 단백질 (I)의 서열은 SEQ ID NO: 14이다.
NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISCESGDASIHDTVENLIILAN
NSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS
SEQ ID NO: 14.
특정 구현예에서, IL-15 단백질 복합체의 아미노산 Cys 돌연변이(들)는 IL-15 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편의 L45, Q48, V49, L52, E53, C88 또는 E89에서 일어나며, 바람직하게는 L52, E53 또는 E89에서, 보다 바람직하게는 L52에서 일어난다.
특정 구현예에서, IL-15 단백질 복합체의 아미노산 Cys 돌연변이(들)는 IL-15Rα 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편의 K34, L42, A37, G38 또는 S40에서 일어나며, 바람직하게는 A37, G38 또는 S40에서, 보다 바람직하게는 S40에서 일어난다.
일부 구현예에서, 가용성 융합 단백질 (II)의 서열은 SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17 및 SEQ ID NO: 18로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTCSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVH
QRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSPSSNNTAATTAAIVPGSQLMPSKSPSTGTTEISSHESSH
GTPSQTTAKNWELTASASHQPPGVYPQGHSDTTGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLF
PPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWL
NGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG
QPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO: 15
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREE
MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM
HEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTCSL
TECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSPSSNNTAATT
AAIVPGSQLMPSKSPSTGTTEISSHESSHGTPSQTTAKNWELTASASHQPPGVYPQGHSDTT
SEQ ID NO: 16
ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTCSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVH
QRGGGGSGGGGSEPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVK
FNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPRE
PQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSR
WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO: 17
EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREE
MTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVM
HEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTCS
TECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQR
SEQ ID NO: 18.
일부 구현예에서, IL-15 단백질 복합체는 가용성 융합 단백질 (I) 및 가용성 융합 단백질 (II)의 다음의 조합으로부터 선택된다.
번호 가용성 융합 단백질(I) 가용성 융합 단백질(II)
1 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) IL-15Rα-ECD(S40C)-Fc(SEQ ID NO: 15)
2 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) Fc-IL-15Rα-ECD(S40C)(SEQ ID NO: 16)
3 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) IL-15Rα-Sushi+(S40C)-Fc(SEQ ID NO:17)
4 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) Fc-IL-15Rα-sushi+(S40C)(SEQ ID NO:18)
일부 구현예에서, IL-15 단백질 복합체는 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) 가용성 융합 단백질 (I) 및 IL-15Rα-Sushi+(S40C)-Fc(SEQ ID NO: 17) 가용성 융합 단백질 (II)의 조합으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 종양은 악성 종양(malignant tumor) 및 양성 종양(benign tumor)으로 이루어지는 군으로부터 선택된다. 악성 종양은 흑색종, 피부암(skin cancer), 신장 세포 암종(renal cell carcinoma), 간암, 위암, 유방암, 대장암(colorectal cancer), 교모세포종(glioblastoma), 난소암, 전립선암(prostate cancer), 혈액암(hematologic malignancy), 요로상피/방광암(urothelial/bladder cancer), 폐암, 식도암(esophageal cancer), 및 두경부암(head and neck cancer)으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 개시에서 기술되는 혈액암으로는, 한정하는 것은 아니지만, 급성 및 만성 골수성 백혈병(acute 및 chronic myelogenous leukemia), 급성 림프구성 백혈병(acute lymphocytic leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia), 골수 조직 증식성 질환(bone marrow tissue proliferative disease), 다발성 골수종(multiple myeloma), 호지킨병(Hodgkin's disease), 비-호지킨 림프종(Non-Hodgkin's lymphoma), B-세포 림프종(B-cell lymphoma), T-세포 림프종(T-cell lymphoma), 여포 중심 세포 림프종(follicular center cell lymphoma) 및 만성 과립구성 백혈병(chronic granulocytic leukemia)을 들 수 있다.
일부 구현예에서, 종양은 진행된 종양(advanced tumor), 재발 및 난치성 종양(refractory tumor), 화학요법제의 치료에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 방사선 요법에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 표적화된 작용제 요법에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 및 면역요법에 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
특정 구현예에서, 종양은 진행성/전이성 악성 종양(advanced/metastatic malignancies)으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 용량은 1-100 ㎍/kg으로부터 선택되며, 바람직하게는 1 ㎍/kg, 2 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 4 ㎍/kg, 5 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 7 ㎍/kg, 8 ㎍/kg, 9 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 11 ㎍/kg, 12 ㎍/kg, 13 ㎍/kg, 14 ㎍/kg, 15 ㎍/kg, 16 ㎍/kg, 17 ㎍/kg, 18 ㎍/kg, 19 ㎍/kg, 20 ㎍/kg, 21 ㎍/kg, 22 ㎍/kg, 23 ㎍/kg, 24 ㎍/kg 및 25 ㎍/kg; 바람직하게는, 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg, 또는 20 ㎍/kg으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 용량은 50-3000 mg, 바람직하게는 490-2000 mg, 보다 바람직하게는 490 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 750 mg, 1200 mg, 1280 mg, 또는 1500 mg, 가장 바람직하게는, 600 mg 또는 750 mg으로부터 선택된다.
본 개시의 조합된 투여 경로는 경구 투여, 비경구 투여, 및 경피 투여로부터 선택된다. 비경구 투여로는, 한정하는 것은 아니지만, 정맥내 주사, 피하 주사, 및 근육 주사를 들 수 있다.
본 개시는 추가로 종양 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합된 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 용도에 관한 것으로, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 투약 빈도는 주 1회, 2주마다 1회, 또는 3주마다 1회일 수 있다. PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 투약 빈도는 주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 또는 4주마다 1회일 수 있다.
일부 구현예에서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 경우, 투약 빈도는 주 1회이고, 용량은 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg이며; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 경우, 투약 빈도는 2주마다 1회이고, 용량은 600 mg 또는 750 mg이다.
일부 구현예에서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 단일-작용제 로딩(single-agent loading)으로서 투여된 후, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합되어 투여된다. 로딩 기간은 1주, 2주, 3주, 4주, 5주 또는 6주, 바람직하게는 2주 또는 4주일 수 있다. 용량은 매번 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg일 수 있고, 투약 빈도는 주 1회일 수 있다.
일부 구현예에서, 본 개시는 추가로 종양 질환의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합된 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 용도에 관한 것으로, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 처음에 2 또는 4주 동안 단일 약물로서 투여되며, 용량은 매번 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg일 수 있고, 투약 빈도는 주 1회이며; 그런 후 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합되어 투여되며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 투약 빈도는 주 1회일 수 있고, 용량은 매번 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg일 수 있으며, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 투약 빈도는 2주마다 1회 또는 3주마다 1회이고, 용량은 600 mg 또는 750 mg이다.
본 개시에서, 투약 기간은 1일, 3일, 1주, 2주, 3주(21일), 3-4주(21-28일), 4주(28일), 5주, 또는 6주일 수 있다.
일부 구현예에서, 투약 기간은 4주이며, 처음 2주는 로딩 기간으로 간주되고, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 각 투약 기간의 제1, 8, 15 및 22일에 투여되며; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 각 투약 기간의 제15일에 투여된다.
일부 구현예에서, 투약 기간은 4주이며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 각 투여 기간의 제1, 8, 15 및 22일에 투여되고; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 각 투여 기간의 제1 및 15일에 투여된다.
일부 구현예에서, 투약 기간은 5주이며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 각 투여 기간의 제1, 8, 15 및 22일에 투여되고; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 각 투여 기간의 제1 및 15일에 투여된다.
일부 구현예에서, 투약 기간은 6주이며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 각 투여 기간의 제1, 8, 15 및 22일에 투여되고; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 각 투여 기간의 제1 및 15일에 투여된다.
일부 구현예에서, 투약 기간은 6주이며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 각 투여 기간의 제1, 8, 15, 22 및 29일에 투여되고; PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 각 투여 기간의 제1 및 15일에 투여된다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 주사, 예컨대 피하 또는 정맥내 주사에 의해 투여된다.
일부 구현예에서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 주사, 예컨대 피하 또는 정맥내 주사, 바람직하게는 피하 투여에 의해 투여된다.
일부 구현예에서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체, 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 투여가 독성 및 부작용으로 인해 환자에서 불내성(intolerance)을 초래하는 경우, 당업자는 시약의 용량 및 투약 빈도를 적절하게 수정할 수 있다.
본 개시에서 기술된 구현예에서, 조합된 투여는 선택적으로 다른 구성요소를 추가로 포함하고, 다른 구성요소로는, 한정하는 것은 아니지만, 다른 항-종양제 등을 들 수 있다.
본 개시는 또한 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 종양 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
일부 구현예에서, 환자가 표준 치료의 실패를 경험하였거나 표준 치료에 불내성이었거나, 또는 질환이 재발/진행된 후에는 더 이상의 표준 치료가 없었다.
본 개시는 또한 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 종양 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 단독으로 또는 다른 작용제(예를 들어, 화학요법제)와 조합되어 투여될 수 있다.
여기서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 상기에서 기술된 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편이다.
일부 구현예에서, 방법은 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 고정된 용량(fixed dose)을 환자에게 투여하는 것을 포함한다.
투여되는 용량은 환자의 체중과 관련이 없다.
PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 고정된 용량은 490-2000 mg, 바람직하게는 490 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 750 mg, 1200 mg, 1280 mg, 또는 1500 mg, 보다 바람직하게는 600 mg 또는 750 mg으로부터 선택된다.
PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 투약 빈도는 2주마다 1회 또는 3주마다 1회이다.
일부 구현예에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 고정된 용량은 490-2000 mg이고, 투약 빈도는 2주마다 1회 또는 3주마다 1회이며; 바람직하게, 용량은 490 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 750 mg, 1200 mg, 1280 mg 또는 1500 mg이고, 투약 빈도는 2주마다 1회이거나; 또는 용량은 490 mg, 500 mg, 550 mg, 600 mg, 750 mg, 1200 mg, 1280 mg 또는 1500 mg이고, 3주마다 1회 투여되며; 보다 바람직하게는, 용량은 600 mg 또는 750 mg이고, 투약 빈도는 2주마다 1회 또는 3주마다 1회이다.
일부 구현예에서, 투여는 표적 환자 집단이 평균 약동학적(pk) 분포를 달성하는 것을 허용한다:
PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 약동학적(pk) 분포의 경우, 평균 Cmax는 약 269.75 ㎍/mL(±20%)이고, 및/또는 최대 농도에 도달하기 위해 걸리는 중간 시간(Tmax)은 약 0.54시간(±20%)(예컨대 0.08 내지 약 2시간)이며, 및/또는 투약 시점(시간 0)으로부터 투약 후 약 21시간 후까지의 평균 혈장 농도-시간 곡선 아래의 면적(AUC 0-21)은 약 1985.61 ㎍.일/mL(±20%)이고, 및/또는 투약 시점(시간 0)으로부터 투약 후 무한대까지의 평균 혈장 농도-시간 곡선 아래의 면적(AUCinf)은 약 3568.48 ㎍.일/mL(±20%)이다.
본 개시는 또한 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편, 및 하나 이상의 제약학적 담체(들), 부형제(들) 또는 희석제(들)를 포함하는 제약학적 조성물에 관한 것이다. 제약학적 조성물은 임의의 제약학적으로 허용되는 투여 형태로서 제형화될 수 있다. 예를 들어, 그것은 정제, 캡슐, 환, 과립, 용액, 현탁액, 시럽, 주사제(주사 용액, 주사용 멸균 분말 및 주사용 농축액을 포함함), 좌제, 흡입제 또는 분무제로서 제형화될 수 있다.
본 개시에서 기술된 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체, 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편을 포함하는 제약학적 조성물은 단독으로 또는 하나 이상의 치료제와 조합되어 투여될 수 있다.
본 개시는 또한 본 개시의 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편이 포장되는 키트를 제공한다.
본 개시에서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합되어 투여된 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체는 그로써 항-종양 활성을 증강시키고 종양 질환에 대한 치료 효과를 개선시킨다.
도 1. 실시예 1에서 마우스 결장암 세포 MC38/H11로 피하 이식된 종양 모델에서 종양 부피에 미치는, 단독으로 또는 조합되어 투여된 IL-15 융합 단백질 및 PD-L1 항체의 영향.
도 2. 실시예 1에서 마우스 결장암 세포 MC38/H11로 피하 이식된 종양 모델에서 상대적인 종양 부피에 미치는, 단독으로 또는 조합되어 투여된 IL-15 융합 단백질 및 PD-L1 항체의 영향.
도 3. 실시예 3에서 PD-L1 항체의 C1D15 수용체 점유;
도 4. 실시예 3에서 PD-L1 항체의 C1D21 수용체 점유;
도 5. 실시예 3에서, PD-L1 항체의 최소 유효 농도로 관찰된 값과 시뮬레이션된 값의 비교.
본 개시에서 사용된 아미노산에 대한 3-문자 코드 및 1-문자 코드는 J. biol. chem, 243, p3558 (1968)에서 기술된 것과 같다.
본원에서 사용되는 바, "항체"는 사슬간 이황화 결합(들)에 의해 함께 연결된 2개의 동일한 중쇄 및 2개의 동일한 경쇄에 의해 형성된 면역글로불린, 4-펩타이드 사슬 구조를 나타낸다. 면역글로불린 중쇄 불변 영역은 상이한 아미노산 조성 및 순서를 나타내고, 그로써 상이한 항원성을 나타낸다. 따라서, 면역글로불린은 5가지 유형으로 나누어지거나, 또는 면역글로불린 아이소타입, 즉, IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE로 명명되고, 상응하는 중쇄는 각각 μ, δ, γ, α 및 ε 사슬이다. 중쇄 이황화 결합의 수 및 위치뿐만 아니라 힌지 영역의 아미노산 조성에 따라서, 동일한 유형의 Ig는 추가로 상이한 하위 유형으로 나누어질 수 있고, 예를 들어, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 나누어질 수 있다. 경쇄는 상이한 불변 영역을 토대로 κ 또는 λ 사슬로 나누어질 수 있다. Ig의 5가지 유형의 각각은 카파 사슬 또는 람다 사슬을 가진다.
본 개시에서, 본 개시에서 기술된 항체 경쇄는 추가로 경쇄 불변 영역을 포함할 수 있고, 경쇄 불변 영역은 인간 또는 쥐과 카파, 람다 사슬 또는 이것들의 변이체를 포함한다.
본 개시에서, 본 개시에서 기술된 항체 중쇄는 추가로 중쇄 불변 영역을 포함할 수 있고, 중쇄 불변 영역은 인간 또는 쥐과 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 또는 이것들의 변이체를 포함한다.
항체 중쇄 및 경쇄의 N-말단에 인접한 약 110개의 아미노산이 매우 가변적이며, 가변 영역(Fv 영역)으로 알려져 있고; C-말단에 가까운 아미노산 서열의 나머지는 상대적으로 안정적이며, 불변 영역으로 알려져 있다. 가변 영역은 3개의 초가변 영역(HVR) 및 4개의 상대적으로 보존된 프레임워크 영역(FR)을 포함한다. 항체의 특이성을 결정하는 3개의 초가변 영역은 또한 상보성 결정 영역(CDR)으로 알려져 있다. 경쇄 가변 영역(LCVR) 및 중쇄 가변 영역(HCVR)의 각각은 3개의 CDR 영역 및 4개의 FR 영역으로 구성되며, 아미노 말단으로부터 카르복실 말단까지의 순차적 순서는: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, 및 FR4이다. 경쇄의 3개의 CDR 영역은 LCDR1, LCDR2, 및 LCDR3을 나타내고, 중쇄의 3개의 CDR 영역은 HCDR1, HCDR2, 및 HCDR3을 나타낸다. 본 개시에서 기술된 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 LCVR 영역 및 HCVR 영역의 CDR 아미노산 잔기의 수 및 위치는 공지된 Kabat 넘버링 기준을 따른다.
본 개시의 항체는 쥐과 항체, 키메라 항체, 및 인간화 항체, 바람직하게는 인간화 항체를 포함한다.
CDR-그라프팅된 항체로도 알려져 있는, 용어 "인간화 항체(humanized antibody)"는 인간 항체 가변 영역 프레임워크 위로 쥐과 CDR 서열이 그라프팅됨으로써 생성된 항체, 즉, 인간 생식선 항체 프레임워크 서열의 상이한 유형으로 생성된 항체를 나타낸다. 그것은 대다수의 쥐과 단백질 구성요소를 담지(carry)하는 키메라 항체에 의해 유도된 항체 가변 영역에 대한 강력한 반응을 피할 수 있다. 그러한 프레임워크 서열은 생식선(germline) 항체 유전자 서열을 포함하는 공공의 DNA 데이터베이스 또는 공개된 참고문헌으로부터 얻어질 수 있다. 예를 들어, 인간 중쇄 및 경쇄 가변 영역 유전자의 생식선 DNA 서열은 "VBase" 인간 생식선 서열 데이터베이스(www.mrccpe.com.ac.uk/vbase 상에서 이용 가능함)에서뿐만 아니라, Kabat, EA, et al. 1991 Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed에서 찾아볼 수 있다. 감소된 면역원성에 의해 유도된 활성의 감소를 피하기 위하여, 인간 항체 가변 영역의 프레임워크 서열은 활성을 유지하기 위하여 최소 역 돌연변이 또는 복귀 돌연변이의 대상이 될 수 있다. 본 개시의 인간화 항체는 또한 CDR 친화성 성숙이 파지 디스플레이에 의해 수행되는 인간화 항체를 포함한다.
본 개시에서 기술되는 "그것의 항원 결합 단편"은 인간 PD-L1 및 항원 결합 활성을 가지는 ScFv 단편에 결합하는 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, 및 Fv 단편을 나타낸다; 그것은 본 개시에서 기술된 항체의 SEQ ID NO: 1 내지 SEQ ID NO: 12로부터 선택된 하나 이상의 CDR 영역을 포함한다. 불변 영역 없이, 항체 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 함유하는 Fv 단편은 모든 항원 결합 부위를 포함하는 최소 항체 단편이다. 일반적으로, Fv 항체는 또한 VH와 VL 도메인 사이의 폴리펩타이드 링커를 함유하며, 항원 결합에 필요한 구조를 형성할 수 있다. 상이한 링커는 또한 단일 사슬 항체 또는 단일 사슬 Fv(sFv)로서 언급되는 폴리펩타이드 사슬을 형성하기 위하여 두 항체의 가변 영역을 연결하기 위해 사용될 수 있다. 본 개시에서 사용되는 용어 "PD-L1에 대한 결합"은 인간 PD-L1과 상호작용하는 능력을 나타낸다. 본 개시에서 기술되는 용어 "항원 결합 부위"는 본 개시의 항체 또는 그것의 항원 결합 단편에 의해 인식되는 항원 상에 존재하는 별개의 3차원 공간 부위를 나타낸다.
본 개시에서 사용되는 "단백질 복합체(protein complex)" 또는 "복합체 단백질(complex protein)"은 2개의 상이한 모노머 단백질을 결합시킴으로써 형성된 단백질을 나타낸다. 본 개시의 단백질 복합체를 형성하는 "모노머 단백질"(즉 가용성 융합 단백질 (I) 및 가용성 융합 단백질 (II))은 융합 단백질 또는 비-융합 단백질일 수 있다.
본 개시에서 기술된 "융합 단백질"은 둘 이상의 유전자의 코딩 영역을 연결시키고 재조합 유전자를 유전자 재조합 방법, 화학적 방법 또는 다른 적절한 방법을 통해 동일한 조절 서열의 제어 하에 발현시킴으로써 얻어진 단백질 생성물을 나타낸다. 본 개시의 일부 구현예에서, 가용성 융합 단백질 (I)은 생물학적으로 활성인 폴리펩타이드, 예컨대 Fc 단편에 융합된 또는 융합되지 않은 IL-15 또는 그것의 변이체를 발현시킴으로써 얻어진 모노머 단백질이고; 가용성 융합 단백질 (II)은 생물학적으로 활성인 폴리펩타이드, 예컨대 Fc 단편에 융합된 또는 융합되지 않은 IL-15Rα 또는 그것의 변이체를 발현시킴으로써 얻어진 모노머 단백질이다. 본 개시의 융합 단백질 내에서, 둘 이상의 유전자의 코딩 영역은 펩타이드 링커를 암호화하는 서열을 통해 하나 이상의 위치(들)에서 서로에게 융합될 수 있다. 펩타이드 링커는 또한 본 개시의 융합 단백질을 구성하기 위해 사용될 수 있다.
동물, 인간, 실험 대상체, 세포, 조직, 장기, 또는 생물학적 유체에 적용되는 바, "투여" 또는 "치료"는 외인성 제약학적 제제, 치료제, 진단제, 또는 조성물을 동물, 인간, 대상체, 세포, 조직, 장기, 또는 생물학적 유체와 접촉시키는 것을 나타낸다. "투여" 및 "치료"는 예컨대, 치료, 약동학적, 진단, 연구, 및 실험 방법을 나타낼 수 있다. 세포의 치료는 시약을 세포와 접촉시키는 것뿐만 아니라, 시약을 유체와 접촉시키고, 유체를 결국 세포와 접촉시키는 것을 포함한다. "투여" 또는 "치료"는 또한 시약, 진단, 결합 조성물로 또는 또 다른 세포로, 예컨대, 세포의 시험관내 또는 생체외 치료를 의미한다. 인간, 수의학적, 또는 연구 대상체에 적용되는 바, "치료"는 치료적 치료, 예방적 또는 방지 조치, 연구 및 진단 적용을 나타낸다.
"치료하는 것"은 치료제(예컨대 본 개시의 임의의 결합 화합물을 포함하는 조성물)를, 그것에 대한 작용제가 알려져 있는 치료 활성을 나타내는 하나 이상의 질환 증상을 가지는 환자에게, 내부적으로 또는 외부적으로 적용하는 것을 의미한다. 전형적으로, 작용제는 임의의 임상적으로 측정 가능한 정도로, 치료되는 환자 또는 집단에서 하나 이상의 질환 증상을 효과적으로 경감시키거나, 그러한 증상(들)의 퇴행을 효과적으로 유도하거나 또는 진행을 효과적으로 억제시키는 양으로 투여된다. 임의의 특정 질환 증상을 경감시키기에 효과적인 치료제의 양(또한 "치료적 유효량"으로도 언급됨)은 환자의 질환 상태, 연령, 및 체중, 및 환자에게서 원하는 반응을 유도하는 작용제의 능력과 같은 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다. 질환 증상이 경감되었는지의 여부는 그 증상의 중증도 또는 진행 상태를 평가하기 위해 의사 또는 다른 숙련된 건강관리 제공자에 의해 전형적으로 사용된 임의의 임상적 측정에 의해 평가될 수 있다. 본 개시의 구현예(예컨대, 치료 방법 또는 제조 물품)가 모든 환자에서 표적 질환 증상(들)을 경감시키는 데 효과적이지 않을 수 있지만, 그것은 스튜던츠 t-테스트, 카이-제곱 테스트, 만과 휘트니(Mann and Whitney)에 따르는 U-테스트, 크러스칼-월리스 테스트(Kruskal-Wallis 테스트, H-테스트), 존키어-터프스트라 테스트(Jonckheere-Terpstra-test) 및 윌콕슨 테스트(Wilcoxon-test)와 같은 기술분야에 알려져 있는 임의의 통계학적 테스트에 의해 측정되는 바 통계학적으로 유의한 수의 환자에서 표적 질환 증상(들)을 경감시켜야 한다.
본 개시에서 기술된 "조합"은 투여 모드를 의미하며, 특정 기간 내에 적어도 한 용량(one dose)의 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체 및 적어도 한 용량의 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 투여를 나타내고, 여기서 두 작용제는 모두 약리학적 효과를 보여준다. 상기 기간은 1회 투약 기간 이내, 바람직하게는 4주 이내, 3주 이내, 2주 이내, 1주 이내, 또는 24시간 이내, 보다 바람직하게는 12시간 이내일 수 있다. IL-15 또는 그것의 단백질 복합체 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 그러한 기간 내에서, 치료가 포함되며, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체 및 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편이 동일한 또는 상이한 투여 경로를 통해 투여된다. 본 개시의 조합된 투여 모드는 동시 투여, 별도의 제형의 공동 투여, 및 별도의 제형의 순차적 투여로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
"유효량(effective amount)"은 의학적 상태의 증상 또는 징후를 개선 또는 방지하기에 충분한 양을 포함한다. 유효량은 또한 진단을 허용하거나 용이하게 하기에 충분한 양을 의미한다. 특정 환자 또는 수의학적 대상체를 위한 유효량은 치료되는 상태, 환자의 전체적인 건강 상태, 투여 경로 및 용량 및 부작용의 중증도와 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 유효량은 유의한 부작용 또는 독성 효과를 피하는 최대 용량 또는 투약 프로토콜일 수 있다.
발명의 상세한 설명
실시예 1: 마우스에서 마우스 결장암 세포 MC38/H11의 이식된 종양에 미치는 IL-15 단백질 복합체 및 항-PD-L1 항체(조합 투여된 또는 단독 투여됨)의 치료 효과와 관련된 연구
1. 테스트 작용제
IL-15 융합 단백질: 이것의 서열은 No.3에 제시된 것과 같고 가용성 융합 단백질 (I)(SEQ ID NO: 14) 및 가용성 융합 단백질 (II)(SEQ ID NO: 17)로 이루어진다. 제조 방법: 1.0 mL의 주사용 물을 IL-15 융합 단백질의 동결건조된 분말(1.0 mg)에 주입하여 완전히 용해시킴으로써 1.0 mg/mL 용액을 제조하였다. 1.5 mL의 1.0 mg/mL IL-15 융합 단백질 용액을 13.5 mL의 식염수와 함께 첨가하고 완전히 혼합하여 20 mL의 0.075 mg/mL 용액을 얻었다. 0.25 mL의 1.0 mg/mL IL-15 융합 단백질 용액에 9.75 mL의 식염수를 첨가하고, 잘 혼합하여 10 mL의 0.025 mg/mL 용액을 얻었다.
PD-L1 항체: 이것의 중쇄 서열은 SEQ ID NO: 9이고, 이것의 경쇄 서열은 SEQ ID NO: 11이다. 제조 방법: 0.8 mL의 50 mg/mL PD-L1 항체 용액을 19.2 mL의 5% 글루코스 용액과 함께 첨가하고, 잘 혼합하여 20 mL의 2 mg/mL 용액을 얻었다.
hIgG1: 0.075 mg/mL 용액을 식염수로 제조하였다.
hIgG4-Fc: 2 mg/mL 용액을 5% 글루코스 용액으로 제조하였다.
2. 실험실 동물
생후 8-10주령의 암컷 C57BL/6 마우스를 Zhejiang Charles River Laboratory Animal Technology Co., Ltd로부터 구입하였다. 실험실 동물 인증 번호: 1806280013.
급식 환경: SPF 수준; 온도: 온도를 20 내지 26℃에서 조절하였다; 상대 습도: 상대 습도를 40% 내지 70%에서 조절하였다; 빛: 자동 조명, 12/12시간의 명/암 사이클.
3. 실험 과정
1Х106 MC38/H11 마우스 결장암 세포(마우스 결장암 세포주 MC38로부터 CRISPR/Cas9 기술을 사용하여 마우스 내인성 PD-L1을 녹아웃시킨 후, 인간 PD-L1 유전자를 전달하여 인간 PD-L1을 안정적으로 발현하는 MC38 세포를 만들었다. H-11은 스크리닝 후 구성된 단클론성 세포주임)를 마우스의 왼쪽 겨드랑이에 주사하였다. 종양이 50-100 mm3의 평균 부피까지 성장했을 때, 63마리의 마우스를 7개 그룹으로 나누었다: 음성 대조군 그룹(대조군), PD-L1 항체 20 mg/kg 그룹, IL-15 융합 단백질 0.75 mg/kg(정맥내) 그룹, IL-15 융합 단백질 0.75 mg/kg(피하) 그룹, PD-L1 항체 + IL-15 융합 단백질 20 + 0.25 mg/kg(정맥내) 그룹, PD-L1 항체 + IL-15 융합 단백질 20 + 0.75 mg/kg(정맥내) 그룹 및 PD-L1 항체 + IL-15 융합 단백질 20+0.75 mg/kg(피하) 그룹, 각 그룹을 9마리씩의 동물이 포함되었다. 상응하는 농도의 테스트 물질을 10 mL/kg의 투여 부피로 각 그룹에 투여하였다. 체중 및 종양 부피를 주 2회 측정하였고, 투약 기간은 25일이었다. 제26일에, 체중 및 종양 부피를 측정하였고, 상대적 종양 부피(RTV) 및 상대적 종양 성장률(T/C)을 계산하여 통계학적 분석을 수행하였다. 계산 공식은 다음과 같다:
(1) TV(종양 부피) =1/2xaxb2, 식에서 a 및 b는 각각 종양의 길이 및 폭을 나타낸다;
(2) RTV(상대적 종양 부피) =Vt/V0, 식에서 V0는 그룹화 날(즉 d0)에 측정된 종양 부피를 나타내고, Vt는 매번 측정된 종양 부피를 나타낸다;
(3) T/C(%) =TRTV/CRTV x100%, 식에서 TRTV는 치료 그룹의 RTV를 나타내고, CRTV는 대조군 그룹의 RTV를 나타낸다;
(4) TGI(종양 성장 억제)(%) =(1- TRTV/CRTV)x100%, 식에서 TRTV는 치료 그룹의 RTV를 나타내고, CRTV는 대조군 그룹의 RTV를 나타낸다.
4. 실험 결과
Figure pct00001
대조군 그룹과 비교하여, * : P <0.05, ** : P <0.01, *** : P <0.001(일원변량분석 One-way ANOVA); PD-L1 항체 20 mg/kg 그룹과 비교하여, ## : P <0.01, ### : P <0.001(일원변량분석); IL-15 융합 단백질 0.75 mg/kg(정맥내) 그룹과 비교하여, PD-L1 항체 + IL-15 융합 단백질 20+0.75 mg/kg(정맥내) 그룹은 통계학적 유의성을 보이지 않음(T-테스트); IL-15 융합 단백질 0.75 mg/kg(피하) 그룹과 비교하여, □ : P <0.05(T-테스트); PD-L1 항체 + IL-15 융합 단백질 20+0.75 mg/kg(정맥내) 그룹과 비교하여, △ : P <0.05(T-테스트).
실험 결과는 PD-L1 항체와 조합된 IL-15 융합 단백질 0.25 mg/kg(정맥내), 0.75 mg/kg(정맥내 및 피하)이 마우스에서 MC38/H11 마우스 결장암 세포의 피하 이식된 종양의 성장에 대해 PD-L1 항체의 억제 효과를 유의하게 개선시킬 수 있음을 보여준다.
실시예 2: 진행된 악성 종양을 가진 환자에서 PD-L1 항체와 조합된 IL-15 융합 단백질의 내성, 안전성, 약동학 및 약력학의 1상 임상 연구
1. 테스트 작용제
IL-15 융합 단백질: 이것의 서열은 No. 3에 제시되며 가용성 융합 단백질 (I)(SEQ ID NO: 14) 및 가용성 융합 단백질 (II)(SEQ ID NO: 17)로 이루어진다. 사양: 1 mg/바이알.
PD-L1 항체는 SEQ ID NO: 9의 중쇄 서열 및 SEQ ID NO: 11의 경쇄 서열을 가진다. 사양: 600 mg/바이알.
2. 등록된 대상체
(1) 18 내지 70세의 남성 및 여성;
(2) 조직병리학 또는 세포학에 의해 진행된/전이성 악성 종양으로 진단받은 환자;
(3) 표준 치료에 실패한 경험이 있거나 표준 치료에 불내성이었던 환자, 질환이 재발/진행되면 더 이상의 표준 치료는 없었다.
3. 투여 방법
선별 후 적격인 대상체에게 IL-15 융합 단백질 및 PD-L1 항체를 투여하였다.
IL-15 융합 단백질을 정맥내 주입에 의해 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg 또는 10 ㎍/kg으로, 또는 피하 주사에 의해 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg으로, 주 1회 투여하고; PD-L1 항체를 정맥내 주입에 의해 600 mg으로, 2주마다 1회 투여하였다. 투여 중에, IL-15 융합 단백질을 먼저 단일-작용제 로딩으로서 2주 또는 4주 동안 투여한 후, IL-15 융합 단백질을 PD-L1 항체와 함께 투여하였다.
실시예 3: 진행된 고형 종양(solid tumor)을 가진 환자에서 PD-L1 항체의 내성, 안전성, 약동학 및 약력학의 1상 임상 연구
1. 테스트 작용제
PD-L1 항체는 SEQ ID NO: 9의 중쇄 서열 및 SEQ ID NO: 11의 경쇄 서열을 가진다. 사양: 600 mg/바이알.
2. 등록된 대상체
(1) 18세 초과;
(2) 조직병리학 또는 세포학에 의해 전이성 또는 국지적으로 진행된 고형 종양으로 진단받은 환자;
(3) 표준 치료에 실패한 경험이 있는 환자, 또는 기존의 항-종양 치료가 비효과적인 환자.
3. 투여 방법
선별 후 적격인 대상체에게 PD-L1 항체를 투여하였고, 투약 기간은 3주마다로 간주되었다. 각 투약 기간의 제1일에, PD-L1 항체를 30분 이내의 정맥내 주입을 통해 1 mg/kg, 3 mg/kg, 10 mg/kg 또는 20 mg/kg의 용량으로 투여하였다.
4. 실험 결과
용량-제한 독성(DLT: Dose-limiting toxicity)은 어떠한 용량 수준에서도 관찰되지 않았다. 질환 제어율(disease control rate)은 40.0%였고, 객관적 반응률(objective response rate)은 8.6%였다. 약동학 데이터를 하기 표에 제시한다.
파라미터 PD-L1 항체의 용량
1 mg/kg 3 mg/kg 10 mg/kg 20 mg/kg
대상체의 수(n) 1 12 12 12
AUCinf(μg.일/mL) 205.75 731.57±332.8 3568.48±1761.96 7532.96±2565.61
AUC0-21(μg.일/mL) 182.82 490.31±155.66 1985.61±477.46 3791.57±1049.05
Cmax(μg/mL) 27.8 69.83±15.78 269.75±58.38 489.92±100.86
Tmax(시간) 1.0 1(0.08-1) 0.54(0.08-2) 1(0.08-2)
Vd(mL/kg) 44.43 63.92±15.97 62.87±13.82 70.74±23.9
CL(mL/kg/일) 4.86 5.36±3.47 3.52±1.82 3.04±1.34
T(일) 6.94 11.28±5.73 17.08±12.07 19.74±12.06
MRT(일) 9.14 15.5±8.11 23.34±16.56 27.47±16.53
테스트 환자의 체중:
파라미터 값
대상체의 수 37
평균 체중(kg) 74.30
중간 체중(kg) 73.78
표준(kg) 16.95
CV (%) 22.82
각 용량 그룹의 치료 효과 및 부작용은 다음과 같다. PD-L1 항체의 치료 효과 및 부작용은 용량 증가와 유의한 상관이 없다.
용량 대상체의 수 SD PR PD 평가되지 않음
3 mg/kg 12 5(41%) 1(8.3%) 6(50%) 0
10 mg/kg 12 6(50%) 0 4(33.3%) 2(16.7%)
20 mg/kg 12 5(41%) 0 2(16.7%) 5(41%)
부작용
(Adverse events) 		부작용 횟수
3 mg/kg
(n=12) 		10 mg/kg
(n=12) 		20 mg/kg
(n=12)
모든 부작용 77 61 32
투여와 무관한 부작용 64(83.1%) 48(78.7%) 24(75%)
투여와 관련된 부작용 13(16.9%) 13(21.3%) 8(25%)
중증도 수준 1 53(68.8%) 44(72.1%) 23(71.9%)
중증도 수준 2 15(19.5%) 15(24.6%) 6(18.8%)
중증도 수준 3 7(9.1%) 1(1.6%) 2(6.3%)
중증도 수준 4 0 0 0
중증도 수준 5(사망) 2(2.6%) 1(1.6%) 1(3.1%)
투여 후 환자로부터 전혈 샘플을 수집하고, 말초혈 T 세포 표면 상에서의 PD-L1 수용체 점유(RO; Receptor occupancy)를 PD-L1 항체의 투여 후 유동 세포분석(flow cytometry)을 사용함으로써 검출하고(도 3), PD-L1 항체의 최소 유효 농도를 약 70 ㎍/mL로서 확인하였다. 환자의 혈액-약물 농도를 2-구획 모델로 피팅하였고, 다음의 표에서 나타낸 것과 같이, 일련의 최저 농도를 고정-용량 투여 방법에서 다양한 용량에 대해 얻었다.
관찰값 시뮬레이션된 Q3W 시뮬레이션된 Q2W
3 mg/kg 10 mg/kg 20 mg/kg 490 mg 750 mg 1280 mg 490 mg 750 mg 1280 mg
평균 혈액-약물 농도(μg/mL) 16 70 156 121 185 315 181 307 460
최대 혈액-약물 농도/90% 상위 CI 28 100 212 188 288 492 283 480 718
최소 혈액-약물 농도/90% 하위 CI 6 36 111 53 81 138 79 135 202
PD-L1 항체의 혈액-약물 농도를 최소 유효 농도와 비교하였다. Q3W 490 mg 양생법을 제외한 모든 투약 양생법에서, 최소 혈액-약물 농도는 모두 PD-L1 항체의 최소 유효 농도보다 높았고, 이것은 모든 투약 양생법이 임상 치료의 필요를 충족할 수 있음을 나타낸다. 그러므로, PD-L1 항체를 고정-용량 모드로 투여할 수 있다.
<110> JIANGSU HENGRUI MEDICINE CO., LTD., SUZHOU SUNCADIA BIOPHARMACEUTICALS CO., LTD. <120> USE OF IL-15 PROTEIN COMPLEX JOINT PD-L1 ANTIBODY FOR TREATING TUMOR DISEASES <130> 719111CPCT <150> 201811526262.6 <151> 2018-12-13 <150> 201910026017.7 <151> 2019-01-11 <160> 18 <170> SIPOSequenceListing 1.0 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 1 Ser Tyr Trp Met His 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 2 Arg Ile Xaa Pro Asn Ser Gly Xaa Thr Ser Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asn <210> 3 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 3 Gly Gly Ser Ser Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 4 Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile His Gly Thr His Leu Met His 1 5 10 15 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 5 Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> CDR <400> 6 Gln Gln Ser Phe Glu Asp Pro Leu Thr 1 5 <210> 7 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> VR <400> 7 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Gly Pro Asn Ser Gly Phe Thr Ser Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asn Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Gly Ser Ser Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 8 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> VR <400> 8 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile His 20 25 30 Gly Thr His Leu Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Phe 85 90 95 Glu Asp Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 9 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> HC <400> 9 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Arg Ile Gly Pro Asn Ser Gly Phe Thr Ser Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asn Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Gly Ser Ser Tyr Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 10 <211> 1341 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> mis_feature <223> HC <400> 10 caggtgcaac tggtgcagag cggtgccgag gtgaagaagc ctggcgcaag cgtgaaagtg 60 agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc agctactgga tgcactgggt gaggcaggcc 120 cctggacagg gcctggagtg gatgggcagg atcgggccca acagtggttt cactagctac 180 aatgaaaagt tcaagaacag ggtaaccatg accagggaca cctccaccag cacagtgtat 240 atggagctga gcagcctgag gagcgaggac accgccgtgt actactgtgc cagaggcggc 300 agcagctacg actacttcga ctattggggc cagggcacca ccgtgaccgt gagcagtgct 360 tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcgccctgct ccaggagcac ctccgagagc 420 acagccgccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac gaagacctac 600 acctgcaacg tagatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagagagt tgagtccaaa 660 tatggtcccc catgcccacc atgcccagca cctgaggctg ctgggggacc atcagtcttc 720 ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 780 gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc 840 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt 900 gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 960 aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 1020 cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat gaccaagaac 1080 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 1140 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 1200 ggctccttct tcctctacag caggctcacc gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat 1260 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagagcctc 1320 tccctgtctc tgggtaaatg a 1341 <210> 11 <211> 218 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> LC <400> 11 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile His 20 25 30 Gly Thr His Leu Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn 65 70 75 80 Pro Val Glu Ala Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Phe 85 90 95 Glu Asp Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 12 <211> 657 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> mis_feature <223> LC <400> 12 gacatcgtgc tgacccagag tcccgcctca cttgccgtga gccccggtca gagggccacc 60 atcacctgta gggccagcga gagcgtgagc atccacggca cccacctgat gcactggtat 120 caacagaaac ccggccagcc ccccaaactg ctgatctacg ccgccagcaa cctggagagc 180 ggcgtgcccg ccaggttcag cggctccggc agcggcaccg acttcaccct cactatcaac 240 cccgtggagg ccgaggacac cgccaactac tactgccagc agagcttcga ggaccccctg 300 accttcggcc agggcaccaa gctggagatc aagcgtacgg tggctgcacc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttga 657 <210> 13 <211> 232 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fc <400> 13 Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 10 15 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 25 30 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 40 45 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 55 60 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 65 70 75 80 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 85 90 95 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 100 105 110 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 115 120 125 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 130 135 140 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 145 150 155 160 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 180 185 190 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 195 200 205 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 210 215 220 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 225 230 <210> 14 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fusion I <400> 14 Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile 1 5 10 15 Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His 20 25 30 Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln 35 40 45 Val Ile Ser Cys Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu 50 55 60 Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val 65 70 75 80 Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile 85 90 95 Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn 100 105 110 Thr Ser <210> 15 <211> 417 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fusion II <400> 15 Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val 1 5 10 15 Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly 20 25 30 Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Cys Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn 35 40 45 Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile 50 55 60 Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Ser Thr Val 65 70 75 80 Thr Thr Ala Gly Val Thr Pro Gln Pro Glu Ser Leu Ser Pro Ser Gly 85 90 95 Lys Glu Pro Ala Ala Ser Ser Pro Ser Ser Asn Asn Thr Ala Ala Thr 100 105 110 Thr Ala Ala Ile Val Pro Gly Ser Gln Leu Met Pro Ser Lys Ser Pro 115 120 125 Ser Thr Gly Thr Thr Glu Ile Ser Ser His Glu Ser Ser His Gly Thr 130 135 140 Pro Ser Gln Thr Thr Ala Lys Asn Trp Glu Leu Thr Ala Ser Ala Ser 145 150 155 160 His Gln Pro Pro Gly Val Tyr Pro Gln Gly His Ser Asp Thr Thr Gly 165 170 175 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys 180 185 190 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 195 200 205 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 210 215 220 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 225 230 235 240 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 245 250 255 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 260 265 270 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 275 280 285 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 290 295 300 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 305 310 315 320 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 325 330 335 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 340 345 350 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 355 360 365 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 370 375 380 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 385 390 395 400 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 405 410 415 Lys <210> 16 <211> 417 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fusion II <400> 16 Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 10 15 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 25 30 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 40 45 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 55 60 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 65 70 75 80 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 85 90 95 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 100 105 110 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 115 120 125 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 130 135 140 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 145 150 155 160 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 180 185 190 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 195 200 205 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 210 215 220 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 225 230 235 240 Gly Ser Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile 245 250 255 Trp Val Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn 260 265 270 Ser Gly Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Cys Ser Leu Thr Glu Cys Val 275 280 285 Leu Asn Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys 290 295 300 Cys Ile Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Ser 305 310 315 320 Thr Val Thr Thr Ala Gly Val Thr Pro Gln Pro Glu Ser Leu Ser Pro 325 330 335 Ser Gly Lys Glu Pro Ala Ala Ser Ser Pro Ser Ser Asn Asn Thr Ala 340 345 350 Ala Thr Thr Ala Ala Ile Val Pro Gly Ser Gln Leu Met Pro Ser Lys 355 360 365 Ser Pro Ser Thr Gly Thr Thr Glu Ile Ser Ser His Glu Ser Ser His 370 375 380 Gly Thr Pro Ser Gln Thr Thr Ala Lys Asn Trp Glu Leu Thr Ala Ser 385 390 395 400 Ala Ser His Gln Pro Pro Gly Val Tyr Pro Gln Gly His Ser Asp Thr 405 410 415 Thr <210> 17 <211> 315 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fusion II <400> 17 Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val 1 5 10 15 Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly 20 25 30 Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Cys Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn 35 40 45 Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile 50 55 60 Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 65 70 75 80 Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 85 90 95 Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 100 105 110 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 115 120 125 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 130 135 140 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 145 150 155 160 Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 165 170 175 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 180 185 190 Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 195 200 205 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 210 215 220 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 225 230 235 240 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 245 250 255 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 260 265 270 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 275 280 285 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 290 295 300 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 305 310 315 <210> 18 <211> 315 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> DOMAIN <223> Fusion II <400> 18 Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 1 5 10 15 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 20 25 30 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 35 40 45 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 50 55 60 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 65 70 75 80 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 85 90 95 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 100 105 110 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 115 120 125 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 130 135 140 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 145 150 155 160 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 180 185 190 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 195 200 205 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 210 215 220 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 225 230 235 240 Gly Ser Ile Thr Cys Pro Pro Pro Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile 245 250 255 Trp Val Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn 260 265 270 Ser Gly Phe Lys Arg Lys Ala Gly Thr Cys Ser Leu Thr Glu Cys Val 275 280 285 Leu Asn Lys Ala Thr Asn Val Ala His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys 290 295 300 Cys Ile Arg Asp Pro Ala Leu Val His Gln Arg 305 310 315

Claims (18)

  1. 종양 질환(tumor diseases)의 예방 또는 치료를 위한 의약의 제조에서의 PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편과 조합된 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 용도.
  2. 제1항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편 중 임의의 하나는 다음의 CDR 영역 서열 또는 그것의 돌연변이 서열: 항체 중쇄 가변 영역 HCDR 영역 서열: SEQ ID NO: 1-3; 및 항체 경쇄 가변 영역 LCDR 영역 서열: SEQ ID NO: 4-6으로부터 선택된 CDR을 포함하며; 특히,
    HCDR1은
    SYWMH SEQ ID NO: 1로부터 선택되고:
    HCDR2는
    RI X1PNSG X2TSYNEKFKN SEQ ID NO: 2로부터 선택되며:
    HCDR3은
    GGSSYDYFDY SEQ ID NO: 3으로부터 선택되고:
    LCDR1은
    RASESVSIHGTHLMH SEQ ID NO: 4로부터 선택되며:
    LCDR2는
    AASNLES SEQ ID NO: 5로부터 선택되고:
    LCDR3은
    QQSFEDPLT SEQ ID NO: 6으로부터 선택되며;
    여기서 X1은 H 또는 G로부터 선택되고, 바람직하게는 G이며; X2는 G 또는 F로부터 선택되고, 바람직하게는 F인 것인 용도.
  3. 제2항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 중쇄 가변 영역 서열은 SEQ ID NO: 7이고, 경쇄 가변 영역 서열은 SEQ ID NO: 8인 것인 용도.
  4. 제3항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 또는 그것의 변이체의 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하며, 바람직하게는 인간 IgG2 또는 IgG4의 중쇄 불변 영역을 포함하고, 보다 바람직하게는 F234A 및 L235A 돌연변이를 가지는 IgG4의 중쇄 불변 영역을 포함하고; 인간화 항체 경쇄는 인간 카파, 람다 사슬 또는 그것의 변이체의 불변 영역을 추가로 포함하는 것인 용도.
  5. 제4항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편에 대한 중쇄 서열은 SEQ ID NO: 9이고, 경쇄 서열은 SEQ ID NO: 11인 것인 용도.
  6. 제1항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편은 쥐과 항체, 키메라 항체, 인간화 항체 및 인간 항체로 이루어지는 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 인간화 항체인 것인 용도.
  7. 제1항에 있어서, IL-15 단백질 복합체는 가용성 융합 단백질 (I) 및 가용성 융합 단백질 (II)로 구성되며; 가용성 융합 단백질 (I)은 IL-15 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편을 포함하고; 가용성 융합 단백질 (II)은 IL-15Rα 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편을 포함하며; 가용성 융합 단백질 (I) 또는 가용성 융합 단백질 (II)의 하나 이상의 아미노산 부위(들)는 Cys로 돌연변이되어, 가용성 융합 단백질 (II) 또는 가용성 융합 단백질 (I)의 상응하는 아미노산 부위(들)에서 Cys와 함께 이황화 결합(들)을 형성하는 것인 용도.
  8. 제7항에 있어서, 가용성 융합 단백질 (II)은 Fc 단편 또는 그것의 돌연변이를 추가로 포함하고; 바람직하게는, 가용성 융합 단백질 (II)은 Fc 단편의 N-말단에 연결된 IL-15Rα 폴리펩타이드 또는 그것의 기능적 단편으로 구성되며; 보다 바람직하게는, Fc 단편은 SEQ ID NO: 13으로서 제시되는 것인 용도.
  9. 제7항에 있어서, 가용성 융합 단백질 (I)의 서열은 SEQ ID NO: 14인 것인 용도.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 가용성 융합 단백질 (II)의 서열은 SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17 및 SEQ ID NO: 18로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것인 용도.
  11. 제7항에 있어서, IL-15 단백질 복합체는 가용성 융합 단백질 (I) 및 가용성 융합 단백질 (II)의 다음의 조합으로부터 선택되는 것인 용도:
    Figure pct00002
  12. 제8항에 있어서, IL-15 단백질 복합체는 IL-15(L52C)(SEQ ID NO: 14) 가용성 융합 단백질 (I) 및 IL-15Rα-Sushi+(S40C)-Fc(SEQ ID NO: 17) 가용성 융합 단백질 (II)의 조합으로부터 선택되는 것인 용도.
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 종양 질환은 악성 종양(malignant tumor) 및 양성 종양(benign tumor)으로 이루어지는 군으로부터 선택되며, 바람직하게는 흑색종(melanoma), 피부암(skin cancer), 신장 세포 암종(renal cell carcinoma), 간암(liver cancer), 위암(gastric cancer), 유방암(breast cancer), 대장암(colorectal cancer), 교모세포종(glioblastoma), 난소암(ovarian cancer), 전립선암(prostate cancer), 혈액암(hematologic malignancy), 요로상피/방광암(urothelial/bladder cancer), 폐암(lung cancer), 식도암(esophageal cancer), 및 두경부암(head and neck cancer)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것인 용도.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 종양은 진행된 종양(advanced tumor), 재발 및 난치성 종양(refractory tumor), 화학요법제의 치료에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 방사선 요법에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 표적화된 작용제 요법에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양, 및 면역요법에 실패한 경험이 있거나 및/또는 재발된 종양으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것인 용도.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 종양은 진행된 또는 전이성 악성종양(metastatic malignancy)으로부터 선택되는 것인 용도.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, IL-15 또는 그것의 단백질 복합체의 용량은 1 ㎍/kg 내지 100 ㎍/kg, 바람직하게는 1 ㎍/kg, 3 ㎍/kg, 6 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 15 ㎍/kg 또는 20 ㎍/kg으로부터 선택되는 것인 용도.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편의 용량은 50 mg 내지 3000 mg, 바람직하게는 600 mg 또는 750 mg으로부터 선택되는 것인 용도.
  18. 제1항의 IL-15 또는 그것의 단백질 복합체, PD-L1 항체 또는 그것의 항원 결합 단편, 및 하나 이상의 제약학적으로 허용되는 부형제(들), 희석제(들) 또는 담체(들)를 포함하는 제약학적 조성물.
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