KR20210078007A - 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물 - Google Patents
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 자바강황(Curcuma xanthorrhiza) 추출물 또는 잔소리졸(xanthorrhizol)이 포함된 피부자극 완화, 피부보호 또는 피부오염 방지용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극을 완화하고 피부를 보호할 수 있으며 피부오염을 방지할 수 있다. 본 발명에 따른 자바강황 추출물 및 잔소리졸은 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 유전자 발현을 감소시켰으며, 미세먼지로 인한 피부 손상을 억제시켰다. 따라서 자바강황(Curcuma xanthorrhiza) 추출물 및 잔소리졸(xanthorrhizol)은 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극의 완화 또는 피부보호에 우수한 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 식품 및 화장료 조성물로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 잔소리졸 또는 자바강황 추출물을 유효성분으로 함유하여 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체 활성화에 의한 자극을 완화시키는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부환경의 각종 자극으로부터 체내의 기관들을 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 그러나 과도한 자외선이나 오염물질에 노출되면 피부 자극이 유발되어 결과적으로 피부 노화로 이어지게 된다. 이러한 외부 자극 중에서도 특히, 중금속 등의 유해물질이 섞인 미세먼지(particulate matter; PM)와 황사(yellow sand)는 피부 노화 및 피부 손상의 주요 원인으로 알려져 있다(J. Prev. Med. Public Health, 39: 205-212, 2006).
PM10은 입자크기 10 μm 이하의 미세먼지(이하 PM10)를 통칭하며, 2.5 μm 이하dml 초미세먼지(이하 PM2.5)는 PM2.5로 구분된다. 미세먼지는 주로 화석연료를 연소할 때 발생하는데, 석탄 의존도가 70%인 중국이 미세먼지의 주요 발생 국가이다. 한편, 황사는 중국 및 몽고 등의 내륙에 위치한 사막에서 작은 모래나 황토가 부유하여 상층 바람을 타고 멀리 수송되면서 지면 가까이 낙하한다. 국내에서는 PM10을 대기 오염물질로 규제하고 있으며, 이런 미세먼지 등 대기 오염물질은 호흡기 질환과 심장 질환을 유발한다고 알려져 있다(J. Exp. Biol. Med., 232: 1109-1118, 2007; J. Biosci., 28: 77-81, 2003).
민감성 피부의 경우에는 대기 오염물질과 같은 환경의 변화에 대하여 일반적인 피부보다 3배 이상 피부 자극이 발생한다. 특히, PM2.5는 일반 먼지보다 입자가 작아 피부 모공 속에 깊숙이 들어가 피부 트러블을 일으키며, 자극성 피부염, 여드름, 알레르기 피부염 등 각종 증상을 더욱 악화시킨다. 또한 역학적 연구에 의하면 미세먼지에 노출된 피부가 주름을 증가시켜 노화에 직접적인 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 미세먼지 표면에 흡착된 다환 방향족 탄화수소 (polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH)가 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR, aryl hydrocarbon receptor)의 활성을 증가시키고 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 부착하여 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1) 유전자의 발현이 증가함에 따라 피부 노화가 발생한다. 따라서 미세먼지와 황사에 의해 유발된 피부 염증 반응을 완화시킬 수 있는 안전하고도 효능이 높은 천연 소재의 개발이 필요하다. 따라서 환경 오염인자에 의해 유도되는 피부노화를 막을 수 있는 오염 방지(anti-pollutant) 소재에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있다(J. Mol. Med. (Berl)., 92(6): 615-628, 2014; Exp. Dermatol., 22(5): 349-353, 2013).
자바강황(Java tumeric)은 주로 인도네시아, 말레이시아, 태국 등 열대직역에 자생하는 약용식물이다. 자바강황은 식물 분류학적으로 생강과(Zingiberaceae)에 속하며, 학명은 커큐마 잔소리자(Curcuma xanthorrhiza Roxb.)로 알려져 있다. 지금까지 자바강황과 관련하여 항균 효과(J. Microbiol., 46: 228-232, 2008; Asian Pac. J. Trop. Biomed., 2: S637-S640, 2012), 항산화 효과(Evid. Based Complement Alternat. Med. 2012: 438356, 2012), 항치주 효과(J. Microbiol. Biotechnol., 28(8): 1270-1281, 2018) 등의 활성이 보고된 바 있다. 또한 자바강황 추출물에 함유되어 있는 대표 성분인 잔소리졸(xanthorrhizol)은 항염증(J. Environ. Patho. Toxicol. Oncol., 21: 141-148, 2002), 항고혈당(Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2014: 205915, 2014) 활성 등이 보고된 바 있다.
그러나, 본 발명의 이전에는 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호에 미치는 효과에 관해서는 알려진 바 없다.
이에 본 발명자들은 천연물 유래의 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호 기능이 있는 물질을 탐색한 결과, 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호 기능이 있음을 규명함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 화장품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부오염 방지용 조성물을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유한 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는, 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 잔소리졸(xanthorrhizol)은 자바강황 추출물로부터 분리되고, 상기 자바강황(Java tumeric) 추출물은 자바강황의 뿌리로부터 추출된 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 자바강황(Java tumeric) 추출물은, 자바강황을 용매추출 또는 초고압 추출한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 용매추출은, 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매, 아임계 유체 및 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 용매를 사용하여 추출한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 피부자극은 피부염(dermatitis), 아토피(atopy), 건선(psoriasis), 여드름(acne), 습진(eczema), 피부암(skin cancer)으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 실시예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유하는 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 식품 조성물이 제공될 수 있다.
또한, 상기 피부자극 완화 및 피부보호용 식품 조성물에서 상기 잔소리졸(xanthorrhizol)은 자바강황(Java tumeric) 추출물로부터 분리된 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유하는 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 화장품 조성물이 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면 상기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유하는 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는 환경 오염인자로부터 유도되는 피부오염 방지용 약학적 조성물이 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면 상기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유하는 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는 환경 오염인자로부터 유도되는 피부오염 방지용 식품 조성물이 제공될 수 있다.
본 발명의 또 다른 실시예에 따르면 상기 화학식 1로 표시되는 잔소리졸(xanthorrhizol) 또는 이를 함유하는 자바강황(Java tumeric) 추출물을 유효성분으로 함유하는 환경 오염인자로부터 유도되는 피부오염 방지용 화장료 조성물이 제공될 수 있다.
본 발명에 따른 자바강황(Java tumeric) 추출물 또는 잔소리졸(xanthorrhizol)은 피부 세포 내에서 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1), 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) 등과 같은 유전자의 발현량을 감소시켰고, 미세먼지로 인한 피부 손상을 억제시켰으므로, 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호 기능이 탁월하여 식품, 화장품 조성물에 사용될 수 있다.
도 1은 자바강황 초임계 유체 추출물 처리에 따른 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성 변화를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 자바강황 초임계 유체 추출물 처리에 따른 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 잔소리졸 처리에 따른 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성 변화를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 잔소리졸의 처리에 따른 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 자바강황 초임계 유체 추출물과 잔소리졸 처리에 따른 표피 손상 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 자바강황 초임계 유체 추출물 처리에 따른 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 잔소리졸 처리에 따른 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성 변화를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 잔소리졸의 처리에 따른 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 자바강황 초임계 유체 추출물과 잔소리졸 처리에 따른 표피 손상 억제 효과를 측정한 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예 및 첨부한 도면을 참고로 하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 발명에서, '포함하다' 또는 '가지다' 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 자바강황 추출물 또는 잔소리졸(xanthorrhizol)이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호용 약학적 조성물을 제공한다.
[화학식 1]
본 발명에서 상기 자바강황 추출물은 생강과(Zingiberaceae)의 쿠르쿠마속(Curcuma) 식물인 것으로, 상기 자바강황의 뿌리(rhizome)가 추출 대상이 될 수 있다.
구체적으로, 상기 자바강황 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출할 수 있다. 이때, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 6(C1 내지 C6)의 저급 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌 클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane) 및 석유에테르(petroleum ether)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 자바강황의 추출에 사용되는 저급 알코올 역시 에탄올 또는 메탄올인 것이 더욱 바람직하며, 에탄올인 것이 가장 바람직하다.
추출 시 건조된 자바강황을 분쇄한 후, 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 분쇄된 자바강황 무게의 2배 내지 20배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
추출온도는 20℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 60℃ 내지 100℃인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
추출시간은 1시간 내지 10시간인 것이 바람직하며, 2시간 내지 5시간인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
추출방법은 냉침, 초음파 추출 또는 환류냉각 추출방법이 모두 이용가능하며, 환류 냉각 추출방법을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
추출 횟수는 1회 내지 5회인 것이 바람직하며, 2회 내지 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 자바강황 추출물은 초고압, 아임계 유체 또는 초임계 유체 추출법에 의해 수행될 수 있다.
추출에 사용되는 자바강황은 수확한 후 세척하여 그대로 사용하거나 건조하여 사용할 수 있다. 건조방법으로는 양건, 음건, 열풍건조 및 자연 건조하는 방법 중 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. 또한, 추출효율을 증대시키기 위해 자바강황 또는 그 건체를 분쇄기로 분쇄하여 사용할 수 있다.
본 발명의 잔소리졸(xanthorrhizol)은 바람직하게 하기 화학식 1의 구조를 갖는다.
[화학식 1]
본 발명의 잔소리졸(xanthorrhizol)의 IUPAC 명은 5-[(1R)-1,5-디메틸-4-헥센-1-일]-2-메틸-페놀(5-[(1R)-1,5-dimethyl-4-hexen-1-yl]-2-methyl-phenol)이며, 천연으로부터 분리 정제하거나, 상업적으로 구입하여 사용하거나 또는 당업계에 공지된 화학적 합성법으로 제조할 수 있다.
바람직하게 본 발명의 잔소리졸은 천연으로부터 분리 정제될 수 있다. 더 바람직하게는, 자바강황으로부터 분리 정제될 수 있으며, 가장 바람직하게는 자바강황의 뿌리(rhizome)로부터 분리 정제될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 유전자의 발현량을 감소시킴으로써 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호에 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부자극 완화 및 피부보호 효과를 가지며, 이러한 피부 자극은 환경 오염인자에 의한 피부기능 저하, 피부 노화 촉진 등으로의 피부 질환으로서 당업계에 보고된 질병인 것이 바람직하며, 이를 예방 및 보호하는 것을 말한다.
본 발명의 피부자극은 환경 오염인자에 의해 유도되는 피부염(dermatitis), 아토피(atopy), 건선(psoriasis), 여드름(acne), 피부암(skin cancer), 습진(eczema)으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 어느 하나인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 본 발명의 피부 오염 방지는 자연적 요인(내인성 노화) 또는 환경 오염인자(다환방향족탄화수소, 미세먼지(particulate matter), 담배연기, 황사 또는 중금속 등)로부터 피부를 보호하여 피부상태의 개선을 유도하는 것을 의미하며, 바람직하게는 환경 오염인자로부터 피부를 보호하는 것을 의미한다.
본 발명에서의 용어 “화학식 1로 표시되는 잔소리졸 또는 이를 함유하는 자바강황 추출물”에는 이들의 약학적으로 허용 가능한 이들의 염 또는 이들의 전구 약물을 포함하는 것으로 본다.
본 발명에서의 용어 '전구 약물'은 표적이 되는 생리학적 시스템 내에서 전구 약물이 활성 약물로 분비 또는 전환(예컨대, 효소적으로, 생리학적으로, 기기적으로, 전자기적으로) 되기 위해서는 생변이(예컨대, 원발적인 또는 효소 적인)가 요구되는 근원 '약물' 분자의 약학적으로 불활성인 유도체를 말한다. 전구 약물은 안정성, 독성, 특이성의 결여 또는 제한된 생체이용률과 연관된 문제점들을 극복하기 위해 디자인된다. 전형적인 전구 약물들은 활성 약물 분자 그 자체와 화학적 차단그룹(예컨대, 역으로 그 약물의 활성을 저지하는 그룹)을 포함한다. 몇몇 선호되는 약물들은 대사조건에 따라 분리가능한 그룹을 가진 성분들의 변형체 또는 유도체이다. 전형적인 약물들은 생리학적 조건하에서 가용매 분해를 수행하거나 효소적 분해를 수행하거나 기타 다른 생화학적 변형(예컨대, 인산화, 수소화, 탈수소화, 글리코실화 반응)이 이뤄질 때 약학적으로 체내 및 체외에서 활성화된다. 전구 약물은 종종 용해도, 조직 적합성, 또는 포유류 체내에서의 서방성 등의 장점을 제공한다. 일반적인 전구 약물은 적절한 알코올(예컨대, 저급 알칸올)을 근원 산들과 반응시킴으로써 얻어지는 에스테르와 같은 산유도체, 아민과 근원산 성분이 반응하여 이루어진 아미드 또는 염기성 그룹이 반응하여 형성하는 아실화된 염기유도체 (예컨대, 저급 알킬아미드) 등을 포함한다.
본 발명의 자바강황 추출물 또는 잔소리졸은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 조성물 내에 포함될 수 있다. “약학적으로 허용가능한 염”은 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여시 통상적인 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 것을 말하며, 상기 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의하여 형성된 산 부가염이 바람직하다. 상기 유리산은 유기산과 무기산을 사용할 수 있다. 상기 유기산은 이에 제한되는 것은 아니나, 구연산, 초산, 젖산, 주석산, 말레인산, 푸마르산, 포름산, 프로피온산, 옥살산, 트리플로오로아세트산, 벤조산, 글루콘산, 메타술폰산, 글리콜산, 숙신산, 4-톨루엔술폰산, 글루탄산 및 아스파르트산을 포함한다. 또한, 상기 무기산은 이에 제한되는 것은 아니나 염산, 브롬산, 황산 및 인산을 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체와 함께 당업계에 공지된 방법으로 투여경로에 따라 다양하게 제형화될 수 있다.
일반적인 의약품의 형태로 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 잔소리졸에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제,시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 연고제, 크림제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사 주입방식 및 경피 투여 방식에 의한다. 주사 주입 방식의 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 잔소리졸을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제화한다. 투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배로, 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 경피 투여제의 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태가 포함된다. 상기에서 "경피 투여"는 약학적 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학적 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다.
본 발명에서의 용어 '약학적으로 유효한 양'은 의학적 용도에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 피부자극 완화 또는 피부를 보호하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
이들 제형은 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania)에 기술되어 있다.
그 밖의 약학적으로 허용되는 담체로는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., 1995, Mack Publishing Company, Easton, PA).
나아가, 본 발명의 약학적 조성물은 천식, 아토피 피부염과 같은 피부 자극을 예방 및 치료하는 효과를 가지는 공지의 화합물과 병행하여 투여할 수 있다.
다른 양상으로, 본 발명의 조성물을, 중금속 등에 의하여 피부 자극을 나타내는 세포, 조직, 기관 또는 개체에 투여하여 피부 자극을 완화 또는 억제시키는 방법을 제공한다. 이와 관련하여, 피부자극의 원인 질환 및 병리상태는 본 조성물 및 방법을 사용하여 예방 또는 치료될 수 있다.
본 발명에서 용어, '개체'란 피부자극을 완화하거나 피부를 보호할 필요성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미하고 피부 자극을 동반하는 질환의 질환자 또는 민감성 피부 보유자를 포함한다. 본 발명의 조성물을 개체에 투여함으로써, 피부자극을 완화 또는 억제, 피부를 보호할 수 있다.
본 발명의 피부자극 완화 및 피부보호용 조성물이 식품 조성물인 경우, 환경 오염인자로부터 유도되는 피부자극 완화 및 피부보호에 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food), 식품 첨가제(food additives) 및 사료 등의 모든 형태를 포함하며, 인간 또는 가축을 비롯한 동물을 취식대상으로 한다. 상기 유형의 식품 조성물은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.
예를 들면, 건강식품으로는 본 발명의 잔소리졸 또는 자바강황 추출물 또는 이의 염 자체를 차, 주스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용하도록 하거나, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 잔소리졸 또는 자바강황 추출물과 피부 자극에 개선효과가 있다고 알려진 공지의 물질 또는 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
상기 유형의 식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료(알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용식물 유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 영양보조제로는 이에 한정되지 않지만 캡슐, 타블렛, 환 등에 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 건강기능식품으로는 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 자바강황 추출물 또는 잔소리졸 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용(건강음료)할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 자바강황 추출물 또는 잔소리졸과 피부자극 완화 및 피부보호용 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.
본 발명의 피부자극 완화 및 피부보호용 조성물이 건강음료 조성물로 이용되는 경우, 상기 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ∼ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ∼ 0.03 g 이다.
자바강황 추출물 또는 잔소리졸은 피부자극 완화 및 피부보호용 식품 조성물의 유효성분으로 함유될 수 있는데, 그 양은 피부자극 완화 및 피부보호 작용을 달성하기에 유효한 양으로 특별히 한정되는 것은 아니나, 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%일 수 있으며, 0.01 내지 50 중량% 인것이 바람직하다. 본 발명의 식품 조성물은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸과 함께 피부자극 완화 및 피부보호에 효과가 있는 것으로 알려진 다른 활성 성분과 함께 혼합하여 제조될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명의 피부자극 완화 및 피부보호용 조성물은 화장품 조성물일 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물은 본 발명의 잔소리졸 또는 자바강황 추출물 또는 이들의 염과 함께 화장료 조성물의 제조 분야에서 일반적으로 사용되는 하나 이상의 부형제 및 첨가제를 포함하여 당 분야의 공지의 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있다.
본 발명의 화장품 조성물은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하며 피부학적으로 허용 가능한 부형제와 함께 기초 화장품 조성물(화장수, 크림, 에센스, 클렌징 폼 및 클렌징 워터와 같은 세안제, 팩, 보디오일), 색조 화장품 조성물(화운데이션, 립스틱, 마스카라, 메이크업 베이스), 두발 제품 조성물(샴푸, 린스, 헤어컨디셔너, 헤어젤) 및 비누 등의 형태로 제조될 수 있다. 상기 부형제로는 이에 한정되지는 않으나 예를 들어, 피부연화제, 피부 침투 증강제, 착색제, 방향제, 유화제, 농화제 및 용매를 포함할 수 있다. 또한, 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제 및 보습제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 물성개선을 목적으로 점증제, 무기염류, 합성 고분자 물질 등을 포함할 수 있다.
상기 부형제로는 이에 한정되지는 않으나 예를 들어, 피부연화제, 피부 침투 증강제, 착색제, 방향제, 유화제, 농화제 및 용매를 포함할 수 있다. 또한, 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제 및 보습제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 물성개선을 목적으로 점증제, 무기염류, 합성 고분자 물질 등을 포함할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 화장품 조성물로 세안제 및 비누를 제조하는 경우에는 통상의 세안제 및 비누 베이스에 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 첨가하여 용이하게 제조할 수 있다. 크림을 제조하는 경우에는 일반적인 수중유적형(O/W)의 크림베이스에 자바강황 추출물 또는 잔소리졸 또는 이의 염을 첨가하여 제조할 수 있다. 여기에 향료, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제 등과 물성개선을 목적으로 한 단백질, 미네랄, 비타민 등 합성 또는 천연소재를 추가로 첨가할 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 잔소리졸 또는 자바강황 추출물을 포함하는 세안제 및 비누를 제조하는 경우에는 통상의 세안제 및 비누 베이스에 잔소리졸 또는 자바강황 추출물을 첨가하여 용이하게 제조할 수 있다. 크림을 제조하는 경우에는 일반적인 수중유적형(O/W)의 크림베이스에 잔소리졸 또는 자바강황 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 여기에 향료, 킬레이트제, 색소, 산화방지제, 방부제 등과 물성개선을 목적으로 한 단백질, 미네랄, 비타민 등 합성 또는 천연소재를 추가로 첨가할 수 있다.
본 발명의 화장품 조성물에 함유되는 자바강황 추출물 또는 잔소리졸의 함량은 이에 한정되지 않지만 전체 조성물 총중량에 대하여 0.001 내지 10 중량%인 것이 바람직하고, 0.01 내지 5중량%인 것이 더욱 바람직하다. 상기 함량이 0.001중량% 미만에서는 목적하는 항노화 또는 주름개선 효과를 기대할 수 없고, 10중량% 초과에서는 안전성 또는 제형상의 제조에 어려움이 있을 수 있다.
또한, 본 발명은 자바강황 추출물 또는 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 피부오염 방지용 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 약학적 조성물, 화장료 조성물, 및 식품 조성물의 형태로 제공될 수 있다. 이에 대한 설명은 상기 전술한 바와 같다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다.
단, 하기 실시 예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시 예에 한정되는 것은 아니다.
자바강황 추출물의 제조
1-1) 초임계 유체 추출물
건조된 자바강황 뿌리를 믹서로 분쇄 한 다음, 분쇄한 자바강황 시료 1 g을 시료 카트리지에 충전하고 초임계 장치(SFX 3560, Isco Inc., Lincoln, NE, USA)를 이용하여 추출하였다. 초임계 유체 추출 조건은 추출 압력이 40 MPa, 추출 온도는 50, 초임계 이산화탄소의 유속은 60 mL/min, 추출 시간은 60 min이었다. 초임계 추출이 완료되면, 추출 장치의 압력을 낮춰 초임계 유체 상태를 해제함으로써 자바강황 초임계 유체 추출물을 얻었다.
1-2) 95% 에탄올 추출물
건조된 자바강황 뿌리를 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 자바강황 뿌리 100 g을 95% 에탄올 1 L에 넣고 3시간 50℃에서 추출하였다. 추출된 시료는 와트만(Whatman) 2번 여과지로 감압여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거한 후 자바강황 에탄올 추출물을 얻었다.
1-3) 70% 에탄올 추출물
에탄올과 물을 중량비로 각각 70:30 혼합한 70% 에탄올을 사용하여 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법으로 수행하여 자바강황 70% 에탄올 추출물을 얻었다.
1-4) 50% 에탄올 추출물
에탄올과 물을 중량비로 각각 50:50 혼합한 50% 에탄올을 사용하여 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법으로 수행하여 자바강황 50% 에탄올 추출물을 얻었다.
1-5) 열수 추출물
물을 사용하였다는 점과 80℃ 조건을 제외하고는 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법으로 수행하여 자바강황 열수 추출물을 얻었다.
1-6) 에틸아세테이트 추출물
100% 에틸아세테이트를 사용하였다는 점을 제외하고는 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법으로 수행하여 자바강황 에틸아세테이트 추출물을 얻었다.
1-7) 헥산 추출물
100% 헥산을 사용하였다는 점을 제외하고는 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법으로 수행하여 자바강황 헥산 추출물을 얻었다.
1-8) 초고압 추출물
건조된 자바강황 뿌리를 믹서로 분쇄한 다음, 18% 에탄올 76 mL을 폴리에틸렌(polyethylene) 팩에 넣고 밀봉한 후 초고압 추출장치(Frescal MFP-7000; Mitsubishi Heavy Industries, Tokyo, Japan)를 이용하여 추출하였다. 초고압 추출 조건은 추출압력이 320 MPa, 추출시간은 5 min 이였다. 이후, 상기 실시예 1-2)와 동일한 방법을 수행하여 자바강황 초고압 추출물을 얻었다.
1-9) 아임계 추출물
분쇄한 자바강황 뿌리 50 g을 1 L 물과 함께 아임계 추출장치(Biovan, Gyeonggi, Korea)의 아임계수 반응기에 넣고 밀폐하였다. 밀폐 후, 반응기의 온도를 200℃로 압력은 20 MPa로 상승시켰으며, 반응기의 온도가 200℃에 도달하면 상기 온도를 20분간 유지하여 추출을 하였다. 20분 후 추출물의 냉각수가 공급되는 저장탱크로 이송하여 30℃까지 급속 냉각시킨 후, 부유 잔사를 분리하기 위해 3,600 rpm으로 30분 동안 원심분리하여 상등액만 취하였다. 동결건조기(ilShin Lab Co. Ltd., Seoul, Korea)를 이용하여 물을 전부 제거함으로써 자바강황 아임계 추출물을 제조하였다.
잔소리졸의 분리 및 구조결정
상기 실시예 1-1에서 얻은 자바강황 초임계 유체 추출물을 실리카겔이 충진된 컬럼에 적재하고 헥산 및 에틸아세테이트를 10:1 (v/v)의 비율로 혼합한 용매시스템을 이용하여 분취하였다. 상기 분취 순서에 따라서 총 6개의 분획으로 나누어 각각의 분획을 농축 건조하였다. 6개의 분획 중 5번 분획(분획 5)을 Rp-18 역상 컬럼크로마토그래피(Lichroprep Rp-18 25~40μm, Merck & Co., al USA)를 이용하여 전개 용매 80% 메탄올로 분취하였다. 상기 분취 순서에 따라서 총 3개의 분획으로 나누어 농축 건조하였다. 상기 3개의 분획 중 3번 분획(분획3-3)을 농축 건조시켜 순수한 단일 활성 물질 잔소리졸을 분리하였다.
자바강황 추출물의 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase)
억제 활성
COS-7 원숭이 신장세포 (ATCC, Manassas, VA, USA) 세포를 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)가 포함된 Dulbecco's modified Eagle's media (DMEM; Hyclone)에서 배양하여 24-웰 플레이트에 24시간 이상 배양하였다. Transfection을 위해 혈청이 없는 DMEM (Hyclone)에 plus reagent (Aptabio, Gyeonggi, Korea)와 XRE plasmid를 함께 섞고 15분 간 incubation 시켰다. 그 후, lipofecter reagent (Aptabio)를 혼합하여 상온에 다시 15분간 incubation시킨 다음 세포에 처리하였다. 4 시간 후, 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)이 포함된 DMEM (Hyclone)에서 세포를 24 시간 안정화 시켰다. 안정화 후, 미세먼지 성분 중 하나이며, 다환 방향족 탄화수소에 속하는 물질 벤조피렌(benzo(a)pyrene, BaP; Sigma-aldrich, St. Louis, MO, USA) 5 μM와 함께 실시예 1-1)에서 제조한 자바강황 초임계 유체 추출물을 1 μg/mL으로 처리하였다. 24 시간이 지난 후, proteinase inhibitor cocktail (Sigma-aldrich)이 포함된 NP-40 lysis buffer (Elpis, Daejeon, Korea)로 세포를 용해시켰다. 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성 정도를 luciferase substrate (Promega, Madison, WI, USA)를 넣어준 다음 Microlumateplus LB 96V luminometer (Berthlod, Wildbab, Germany)로 사용하여 측정하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, BaP는 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE) 통제 하에 있는 루시퍼레이즈(Luciferase)의 활성을 유의적(## p < 0.01)으로 증가시켰으며, 자바강황 초임계 유체 추출물을 처리함에 따라 증가한 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성이 유의적(** p < 0.01)으로 감소하였다. 이는 본 발명의 자바강황 초임계 유체 추출물이 환경 오염인자에 의한 피부 자극을 효율적으로 감소시킨다는 것을 의미한다.
자바강황 초임계 유체 추출물의 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) 발현량 저해 활성
피부 각질세포인 HaCaT (ATCC)을 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS; Hyclone, Logan, UT, USA)이 함유된 DMEM (Hyclone)와 함께 6-웰 플레이트에 2 × 105 cell/mL이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, 100 mg/L 미세먼지 (NIST, Gaithersburg, MD, USA)와 함께 실시예 1-1의 자바강황 초임계 유체 추출물을 0.5와 1 μg/mL로 24시간 처리하였다. 배양이 끝난 뒤, TRIzol시약(Takara, Tokyo, Japan)을 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 정량된 16 μL RNA를 Reverse Transcriptase Premix (Elpis)와 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700; Applied Biosystems, Foster, CA, USA)를 이용하여 42℃ 60분, 95℃ 5분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 16 μL의 생성된 cDNA 중 1 μL의 cDNA, 하기의 특정 프라이머(Bioneer, Daejeon, Korea) 그리고 PCR premix (Elpis)로 95℃에서 30초, 60℃에서 1분, 72℃에서 1분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다. PCR로 인해 증폭된 cDNA를 1.5% agarose gel로 전기영동하여 분리하였으며, G;BOX EF imaging system (Syngene, India)을 이용하여 cDNA band를 확인하였다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
CYP1A1
Forward primer: 5’-CTACCCAACCCTTCCCTGAAT-3’
Reverse primer: 5’-CGCCCCTTGGGGATGTAAAA-3’
CYP1B1
Forward primer: 5’-CTGCGACTCCAGTTGTGAGA-3’
Reverse primer: 5’-AAGGAACTGGGACCTTTGCC-3’
GAPDH
Forward primer: 5’-ATTGTTGCCATCAATGACCC-3’
Reverse primer: 5’-TCGCCCCACTTGATTTTGGA-3’
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 미세먼지를 처리하였을 때 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR)에 의해 매개되는 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량이 유의적(## p < 0.01)으로 증가하였으나, 자바강황 초임계 유체 추출물을 처리함에 따라 농도 의존적으로 감소하였다. 이는 본 발명의 자바강황 초임계 유체 추출물이 환경 오염인자로부터 유도되는 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 매개 피부질환을 효율적으로 감소시킨다는 것을 의미한다.
잔소리졸의 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase) 억제 활성
잔소리졸의 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE)에 의해 매개되는 루시퍼레이즈(Luciferase) 억제 활성을 알아보기 위하여 상기 실시예 2에서 제조한 잔소리졸을 1 μM로 세포에 처리하여 실시예 3과 동일한 방법으로 실험을 진행하였다.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, Bap은 제노바이오틱 반응 요소(Xenobiotic Response Element, XRE) 통제 하에 있는 루시퍼레이즈(Luciferase)의 활성을 유의적(## p < 0.01)으로 증가시켰으며, 잔소리졸을 처리함에 따라 증가한 루시퍼레이즈(Luciferase) 활성이 유의적(** p < 0.01)으로 감소하였다. 이는 본 발명의 잔소리졸이 환경 오염인자에 의한 피부 자극을 효율적으로 감소시킨다는 것을 의미한다.
잔소리졸의 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) 발현량 저해 활성
잔소리졸의 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1) mRNA 발현량 저해 활성을 알아보기 위하여 상기 실시예 2에서 제조한 잔소리졸을 0.5와 1 μM로 세포에 처리하여 실시예 4와 동일한 방법으로 실험을 진행하였다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 미세먼지를 처리하였을 때 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR)에 의해 매개되는 시토크롬 P450s 1A1 (Cytochrome P450s 1A1, CYP1A1)과 시토크롬 P450s 1B1 (Cytochrome P450s 1B1, CYP1B1) mRNA 발현량이 유의적(** p < 0.01)으로 증가하였으나, 잔소리졸을 처리함에 따라 농도 의존적으로 감소하였다. 이는 본 발명의 잔소리졸이 환경 오염인자의 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 활성화에 의해 유도되는 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 매개 피부질환을 효율적으로 감소시킨다는 것을 의미한다.
자바강황 초임계 유체 추출물과 잔소리졸의 표피 손상 억제 효과
자바강황 초임계 유체 추출물과 잔소리졸의 피부 표피 자극 완화효과를 평가하기 위해 3D 인공피부모델 Neoderm-E (Tegoscience, Seoul, Korea)을 이용하여 미세먼지에 의해 손상된 표피층의 완화 효과를 평가하였다. 미세먼지 100 μg/mL를 인공 피부 표면에 도포하고 상기 실시예 1-1에서 제조한 자바강황 초임계 유체 추출물을 0.5과 1 μg/mL의 농도로 배지에 녹여 인공피부에 처리하였다. 동일하게, 상기 실시예 2에서 제조한 잔소리졸도 0.5과 1 μM을 배지에 녹여 인공피부에 처리하였다. 72시간 추가 배양한 후 10% 포르말린 용액 Junsei Chemical Co., Ltd., Tokyo, Japan)에 고정시키고, 파라핀 블록을 제작한 후 H&E 염색하였다. 염색 된 피부 조직은 eXcope T500 카메라(배율, × 100, DIXI Science, Daejeon, Korea)가 장착된 반전 광학 현미경(CK40, Olympus, Tokyo, Japan) 하에서 관찰되었다. 이를 통해서 표피층의 각질층 형태를 측정하였다. 측정한 결과를 도 5에 나타내었다.
그 결과, 도 5에서 나타나는 바와 같이 자바강황 초임계 유체 추출물 및 잔소리졸을 처리했을 때 미세먼지에 의한 인공 피부조직의 각질층의 손상 정도가 크게 억제됨을 확인하였다. 이는 본 발명의 자바강황 초임계 유체 추출물과 잔소리졸이 환경 오염인자에 의한 피부 자극 및 손상을 효율적으로 감소시킨다는 것을 의미한다.
이하, 본 발명에 따른 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 포함하는 환경 오염인자로부터 유도되는 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 매개 질환 예방 및 완화용 의약품, 식품, 화장품의 제조예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다. 아릴 하이드로 카본 수용체(AhR) 매개 질환 예방 및 완화 활성이 우수한 자바강황 초임계 유체 추출물 또는 잔소리졸을 이용하여 하기와 같은 조성 성분 및 조성비에 따라 제조예 1 내지 3의 의약품, 식품, 화장품 조성물을 통상적인 방법에 따라서 제조하였다.
제조예 1 : 의약품
1) 산제
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 50 mg, 결정셀룰로오즈 2 g을 혼합한 후 통상의 산제 제조방법에 따라서 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
2) 정제
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 50 mg, 결정셀룰로오즈 400 mg, 스테아린산 마그네슘 5 mg을 혼합한 후 통상의 정제 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
3) 캡슐제
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 30 mg, 유청단백질 100 mg, 결정셀룰로오즈 400 mg, 스테아린산 마그네슘 6 mg을 혼합한 후 통상의 캡슐제 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
4) 주사제
통상의 주사제 제조방법에 따라 활성성분을 주사용 증류수에 용해하고 pH를 약 7.5로 조절한 다음 잔소리졸 100 mg, 주사용 증류수, pH 조절제를 혼합하여 2 mL 용량의 앰플에 충진하고 멸균시켜서 주사제를 제조하였다.
제조예 2 :식품
1) 건강식품의 제조
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 1000 mg, 비타민 A 아세테이트 70 μL, 비타민 E 1.0 mg, 비타민 B1 0.13 mg, 비타민 B2 0.15 mg, 비타민 B6 0.5 mg, 비타민 B12 0.2 μg, 비타민 C 10 mg, 비오틴 10 μg, 니코틴산아미드 1.7 mg, 엽산 50 μg, 판토텐산 칼슘 0.5 mg, 황산제1철 1.75 mg, 산화아연 0.82 mg, 탄산마그네슘 25.3 mg, 제1인산칼륨 15 mg, 제2인산칼슘 55 mg, 구연산칼륨 90 mg, 탄산칼슘 100 mg, 염화마그네슘 24.8 mg를 혼합하여 제조할 수 있으며, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
2) 건강음료의 제조
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 1000 mg, 구연산 1000 mg, 올리고당 100 g, 매실농축액 2 g, 타우린 1 g에 정제수를 가하여 전체 900 mL 통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2L용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강음료 조성물 제조에 사용할 수 있다.
3) 츄잉껌
껌 베이스 20 중량%, 설탕 76.9 중량%, 향료 1 중량% 및 물 2 중량%와 자바강황 초임계 또는 잔소리졸 0.1 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 츄잉껌을 제조하였다.
4) 캔디
설탕 60 중량%, 물엿 39.8 중량% 및 향료 0.1 중량%와 자바강황 추출물 또는 잔소리졸 0.1 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 캔디를 제조하였다.
5) 비스켓
박력 1급 25.59 중량%, 중력 1급 22.22 중량%, 정백당 4.80 중량%, 식염 0.73 중량%, 포도당 0.78 중량%, 팜쇼트닝 11.78 중량%, 암모늄 1.54 중량%, 중조 0.17 중량%, 중아황산나트륨 0.16 중량%, 쌀가루 1.45 중량%, 비타민 B 0.0001 중량%, 밀크향 0.04 중량%, 물 20.6998 중량%, 전지분유 1.16 중량%, 대용분유 0.29 중량%, 제1인산칼슘 0.03 중량%, 살포염 0.29 중량% 및 분무유 7.27 중량%와 자바강황 추출물 또는 잔소리졸 0.1 중량%를 배합하여 통상의 방법으로 비스켓을 제조하였다.
제조예 3 : 화장품
1) 영양 화장수(밀크 로션)
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 1의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 영양 화장수를 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-1) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
2.0 |
스쿠알란 | 5.0 |
밀납 | 4.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
솔비탄세스퀴올레이트 | 1.5 |
유동파라핀 | 0.5 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 5.0 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
2) 유연 화장수(스킨 로션)
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 2의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 유연 화장수를 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-2) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
2.0 |
글리세린 | 3.0 |
부틸렌글리콜 | 2.0 |
프로필렌글리콜 | 2.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
PEG 12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
폴리솔베이트 80 | 0.4 |
에탄올 | 10.0 |
트리에탄올아민 | 0.1 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
3)영양크림
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 3의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 영양크림을 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-3) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
2.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
솔비탄세스퀴올레이트 | 0.5 |
PEG60 경화피마자유 | 2.0 |
유동파라핀 | 10 |
스쿠알란 | 5.0 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 5.0 |
글리세린 | 5.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제 | 적량 |
색소 | 적량 |
향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
4) 마사지 크림
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 4의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 마사지 크림을 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-4) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
1.0 |
밀납 | 10.0 |
폴리솔베이트 60 | 1.5 |
PEG 60 경화피마자유 | 2.0 |
솔비탄세스퀴올레이트 | 0.8 |
유동파라핀 | 40.0 |
스쿠알란 | 5.0 |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 4.0 |
글리세린 | 5.0 |
부틸렌글리콜 | 3.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
5) 팩
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 5의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 팩을 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-5) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
1.0 |
폴리비닐알콜 | 13.0 |
소듐카르복시메틸셀룰로오스 | 0.2 |
글리세린 | 5.0 |
알란토인 | 0.1 |
에탄올 | 6.0 |
PEG 12 노닐페닐에테르 | 0.3 |
폴리솔베이트 60 | 0.3 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
6) 젤
자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 하기 표 6의 성분 및 함량으로 통상적인 방법에 따라 젤을 제조하였다.
배합성분 | 제조예3-6) (중량%) |
자바강황 추출물 또는 잔소리졸 |
0.5 |
에틸렌디아민초산나트륨 | 0.05 |
글리세린 | 5.0 |
카르복시비닐폴리머 | 0.3 |
에탄올 | 5.0 |
PEG 60 경화피마자유 | 0.5 |
트리에탄올아민 | 0.3 |
방부제, 색소, 향료 | 적량 |
정제수 | to 100 |
상기 표 1 내지 6에서 '적량'은 전체 성분에 영향을 주지 않으면서 기호에 따른 적정량을 의미하며, '정제수 to 100 중량%' 는, 전체 100 중량%에서 정제수를 제외한 배합성분의 중량%를 뺀 나머지 중량%를 정제수의 중량%로 함을 의미한다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (9)
- 제1 항에 있어서, 상기 환경 오염인자는, 다환 방향족 탄화수소, 미세먼지(particulate matter), 담배연기, 황사 및 중금속으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 오염인자를 포함하는, 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 약학적 조성물.
- 제1 항에 있어서, 상기 잔소리졸(xanthorrhizol)은 자바강황(Curcuma xanthorrhiza) 추출물로부터 분리된 것이고, 상기 자바강황 추출물은 자바강황의 뿌리로부터 추출된 것을 특징으로 하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 약학적 조성물.
- 제1 항에 있어서, 상기 자바강황(Curcuma xanthorrhiza) 추출물은,
자바강황을 용매추출 또는 초고압 추출한 것을 특징으로 하는, 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 약학적 조성물. - 제4 항에 있어서, 상기 용매추출은,
자바강황을 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매, 아임계 유체 및 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 용매로 추출하는 것을 특징으로 하는, 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 약학적 조성물. - 제1 항에 있어서, 상기 피부자극은 피부염(dermatitis), 아토피(atopy), 건선(psoriasis), 여드름(acne), 습진(eczema) 및 피부암(skin cancer)으로 이루어진 군에서 선택된 적어도 하나의 자극을 포함하는, 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 약학적 조성물.
- 제7 항에 있어서, 상기 잔소리졸(xanthorrhizol)은 자바강황(Curcuma xanthorrhiza) 추출물로부터 분리된 것을 특징으로 하는, 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 식품 조성물.
Priority Applications (1)
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KR1020190169614A KR20210078007A (ko) | 2019-12-18 | 2019-12-18 | 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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KR1020190169614A KR20210078007A (ko) | 2019-12-18 | 2019-12-18 | 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물 |
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KR1020190169614A KR20210078007A (ko) | 2019-12-18 | 2019-12-18 | 자바강황 추출물 또는 잔소리졸을 유효성분으로 함유하는 피부자극 완화, 피부 보호 또는 피부오염 방지용 조성물 |
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