KR20190063171A - 까마중 추출물 또는 솔라소닌을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 까마중 추출물 또는 솔라소닌을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 까마중 추출물 또는 솔라소닌은 피부의 콜라겐 분해에 관여하는 콜라겐 분해 효소의 mRNA 및 단백질 발현을 억제하고, 피부를 구성하는 콜라겐 생성을 촉진시킴에 따라, 피부 항노화 활성에 우수한 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 약품, 식품 또는 화장품으로 사용될 수 있다.

Description

까마중 추출물 또는 솔라소닌을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 조성물{COMPOSITION COMPRISING EXTRACT OF SOLANUM NIGRUM OR SOLSONINE AS AN EFFECTIVE INGREDIENT FOR PREVENTING SKIN AGING OR IMPROVING SKIN WRINKLE}

본 발명은 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 까마중(Solanum nigrum) 추출물 또는 솔라소닌(solasonine)을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부환경의 자극으로부터 체내의 기관들을 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이러한 피부는 여러 가지 내외적 요인에 의해서 노화가 발생되며, 크게 유전적 원인에 의한 내인성 노화와 환경적 원인에 의한 외인성 노화로 구분된다. 이 중, 광노화는 자외선(ultraviolet; UV)에 의한 노화를 의미한다. 최근 환경오염으로 인한 오존층 파괴는 자외선의 양을 증가시켰고 이에 따라 광노화에 대한 연구가 주목되고 있다(Dermatol. Ther. 23:31-47, 2010). 광노화 된 피부에서는 거칠어짐, 탄력 손실, 주름 발생 및 불규칙한 색소 침착 등과 같은 외관상의 특징이 관찰되며, 이 중 광노화의 주된 연구 분야는 피부 주름의 변화에 대한 것이다. 상기 광노화에 의한 피부 주름 형성에 관해 피부의 주요 구성성분인 콜라겐(collagen)의 합성, 분해 및 수분 함유량 등의 기초적인 생리 대사 변화에 대한 연구 결과가 다수 보고되고 있다(Ann. N. Y. Acad. Sci., 973:31-43, 2002).

피부 진피층에 존재하는 콜라겐은 피부 전체 건조 중량의 약 70-80%를 차지하며 탄력섬유인 엘라스틴(elastin)과 함께 피부의 탄력을 주관하는 것으로 알려져 있다. 특히 자외선에 의해 활성 산소종(reactive oxygen species) 생성이 증가되고 피부의 효소적, 비효소적 항산화 방어체계가 붕괴되어 콜라겐의 분해 증가 및 생합성을 감소시켜 진피층 내의 콜라겐이 현저하게 감소된다 (J. Invest. Dermatol., 126:2565-2575, 2006). 상기 콜라겐 감소에 중요한 영향을 미치는 것은 콜라겐 분해 효소 (matrix metalloproteinase; MMP)로, 이는 세포외기질(extracellular matrix)과 기저막(basement membrane)의 분해에 관여 한다. 상기 효소는 자외선에 의해 활성이 증가되며 이를 억제함으로써 자외선에 의해 유도되는 피부 두께 증가 및 주름 형성이 감소된다는 연구 결과들이 보고되어 있다(J. Invest. Dermatol., 120:128-134, 2003). 따라서 광노화의 예방 및 치료를 위해서는 MMPs를 억제하는 것이 효과적인 방법이다.

주름 개선에 대한 전 세계 소비자의 기대와 관심은 레티놀을 시작으로 하여 2000년대부터 천연물추출성분, 아데노신, 세포성장인자 등 그 종류와 기능이 다양해지고 있는 추세이다(J. Kor. Soc. Cosm, 17:127-133, 2011). 기존의 방법은 레티노이드, 아스코르브산, 토코페롤 및 히알루론산 등을 함유하는 화장료나 의약품을 제조하여 사용하는 것이다. 하지만 현재 개발되고 있는 피부 주름 개선 또는 항노화를 위한 유효성분들은 일부 화장품 원료로 사용할 수 없거나 매우 불안정하고 피부로의 전달이 용이하지 않아 특별한 안정화 시스템과 전달체계가 필요하며, 피부주름의 개선효과가 가시적이지 않다는 문제점이 있다. 상기 피부 주름 개선 유효성분인 레티노이드는 콜라겐 분해효소를 저해하고 콜라겐 합성을 증가시킴으로써 주름 형성 및 탄력 감소 등의 광노화 현상을 개선하기 위해 이용되고 있다. 그러나 자외선에 매우 민감하여 쉽게 화학적인 변화를 일으키므로 피부 자극 등의 부작용을 일으키며, 장기적으로 사용해야 효과가 나타난다는 문제점이 있다(J. Am. Acad. Dermatol., 55:1-19, 2006). 상기 유효성분들의 문제점을 해결하기 위하여 안정성이 입증된 천연물 유래의 유효성분에 대한 연구가 요구되고 있다.

까마중(Solanum nigrum)은 가지과의 한 해살이 풀로, 한국 및 온대, 열대 지역에 걸쳐 널리 분포한다. 까마중의 어린잎은 나물로 먹거나 약재로 사용된다. 한방에서는 전초를 말린 것을 사용하며, 특히 줄기와 잎은 해열, 산후복통에 사용되고 뿌리는 이뇨제로 사용된다. 현재 항산화(Indian J. Clin. Biochem., 19:57-61, 2004), 항암 (Pharmacogn. Mag., 6:176-179, 2010), 간보호 (Chem. Biol. Interact., 171:283-293, 2008) 등의 활성이 보고되어 있다.

솔라소닌(Solasonine) 은 가지과, 주로 까마중에서 발견되는 지표성분으로 glycoalkaloid계이다. 지금까지 문헌상으로 항염(J. Planta Med., 58:706-707, 1992), 항암(J. Nat. Med., 68:236-241, 2014) 등의 활성이 보고되어 있다.

그러나, 본 발명의 이전에는 까마중 또는 솔라소닌의 피부 노화 방지 또는 주름 개선 효과에 관해서는 알려진 바 없었다.

본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물을 제공하고자 한다:

[화학식 1]

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본 발명의 또 다른 목적은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 까마중 추출물은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물을 포함할 수 있다:

[화학식 1]

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상기 까마중 추출물은 까마중을 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출할 수 있다.

상기 까마중 추출물은 까마중을 아임계 추출법, 초임계 유체 추출법 또는 초고압추출법에 의해 추출할 수 있다.

또한, 본 발명은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공한다:

[화학식 1]

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또한, 본 발명은 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 솔라소닌 화합물은 까마중 추출물로부터 분리되는 화합물일 수 있다.

본 발명에 따른 까마중 추출물 또는 솔라소닌은 피부의 콜라겐 분해에 관여하는 콜라겐 분해 효소의 mRNA 및 단백질 발현을 억제하고, 피부를 구성하는 콜라겐 생성을 촉진시킴에 따라, 피부 항노화 활성에 우수한 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 약품, 식품 또는 화장품으로 사용될 수 있다.

도 1은 까마중 열수 및 10, 30, 50, 70, 90% 에탄올 추출물의 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현 억제 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 까마중 열수 및 10, 30, 50, 70, 90% 에탄올 추출물의 제 1 형 프로콜라겐 증가 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 분해 효소(MMP)-1, 2, 9, 13 mRNA 발현 억제 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 mRNA 발현 증가 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현 억제 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 6는 까마중 50% 에탄올 추출물의 제 1 형 프로콜라겐 증가 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 솔라소닌의 콜라겐 분해효소(MMP)-1, 2 mRNA 발현 억제 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 솔라소닌의 콜라겐 mRNA 발현 증가 활성을 측정한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명자들은 까마중 추출물 또는 솔라노닌이 콜라겐 분해를 억제하고, 콜라겐 생성을 촉진하여 피부 노화 방지 또는 주름 개선에 우수한 효과가 있음을 밝혀냄으로써, 본 발명을 완성하였다.

본 명세서 내 "피부 노화"라 함은 내인성 노화 및 외인성 노화를 모두 포함하는 개념이다. 이때, 내인성 노화는 나이가 들어감에 따라 자연적으로 발생하는 자연적인 노화를 의미하는 것이고, 외인성 노화는 자외선 노출에 의해 발생하는 광노화를 의미한다. 내인성 노화는 우리 몸의 신진대사과정에서 만들어진 반응성 활성 산소 라디칼에 의하여 우리 몸의 구성 성분에 생기는 손상이 누적되어 피부가 얇아지는 특징이 있는 반면, 외인성 노화는 자외선 노출에 의해 피부의 두께가 두꺼워지고 탄력섬유가 증가하는 특징을 가지는바, 서로 상이한 메커니즘을 가지고, 이로 인해 초래되는 증상이 서로 상이하다고 볼 수 있는데, 상기 피부 노화는 외인성 노화를 의미하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.

피부 노화 또는 주름 개선용 약학적 조성물

본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물을 제공한다.

상기 까마중(Solanum nigrum)은 가지과의 식물로, 상기 까마중 추출물은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물을 포함할 수 있다:

[화학식 1]

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이때, 상기 까마중 추출물 내 포함된 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물의 함량은 0.1(w/w)% 내지 10(w/w)%인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

또한, 상기 까마중 추출물을 제조하기 위해서는, 상기 까마중의 잎, 줄기, 꽃, 뿌리, 껍질, 열매 또는 이들의 혼합물이 추출 대상이 될 수 있다.

구체적으로, 상기 국화 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출할 수 있다. 이때, 상기 유기용매는 C1 내지 C4의 저급 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌 클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane) 및 석유에테르(petroleum ether)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

또한, 상기 까마중의 추출에 사용되는 저급 알코올 역시 에탄올 또는 메탄올인 것이 더욱 바람직하며, 에탄올인 것이 가장 바람직하다. 추출 시 건조된 까마중 을 분쇄한 후, 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 분쇄된 까마중 무게의 2배 내지 20배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 20℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 60℃ 내지 100℃인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 1시간 내지 10시간인 것이 바람직하며, 2시간 내지 5시간인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출방법은 냉침, 초음파 추출 또는 환류냉각 추출방법이 모두 이용가능하며, 환류 냉각 추출방법을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출 회수는 1회 내지 5회인 것이 바람직하며, 2회 내지 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.

뿐만 아니라, 상기 까마중 추출물은 초고압 추출법, 아임계 유체 추출법 또는 초임계 유체 추출법에 의해 수행될 수 있다. 이때, 초고압 추출법은 200 MPa 내지 500 MPa의 추출압력 및 1분 내지 30분의 추출시간의 조건에서 수행될 수 있고, 초임계 유체 추출법은 10 MPa 내지 100 MPa의 추출압력, 50℃ 내지 80℃의 추출온도, 30 mL/분 내지 80 mL/분의 초임계 이산화탄소의 유속 및 30 분 내지 5시간의 추출시간의 조건에서 수행될 수 있다.

또한, 본 발명은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물을 제공한다:

[화학식 1]

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상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물의 구조명은 β-D-Galactopyranoside이며, CAS No.는 19121-58-5에 해당한다.

상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물은 까마중 추출물로부터 분리 또는 합성하여 이용하거나, 시판되고 있는 화합물을 이용할 수 있다.

상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물의 농도는 1 ㎍/㎖ 내지 10 mg/㎖ 인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 이때, 상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물의 농도가 상기 범위 미만인 경우, 피부 항노화 활성에 우수한 효과를 발휘하기 어려운 문제점이 있고, 상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물의 농도가 상기 범위를 초과하는, 세포독성을 포함한 안전성 또는 제조상의 문제점이 있을 수 있다.

상기 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구제 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화되어 사용할 수 있고, 제형화를 위하여 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.

상기 담체 또는, 부형제 또는 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리게이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조할 수 있다.

경구 투여를 위한 고형제제는 상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 제조할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다.

경구를 위한 액상 제제로는 현탁액, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용하는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등을 사용할 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤젤라틴 등을 사용할 수 있다.

상기 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서는 1일 0.0001 내지 2,000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 2,000 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수회 나누어서 투여할 수도 있다. 다만, 상기 투여량에 의해서 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

상기 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유 동물에 다양한 경로로 투여할 수 있다. 투여의 모든 방식은 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해서 투여할 수 있다.

피부 노화 또는 주름 개선용 식품 조성물

본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공한다.

상기 까마중 추출물에 대해서는 전술한 바와 같으므로, 중복 설명을 생략하기로 한다.

또한, 본 발명은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물을 제공한다:

[화학식 1]

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상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물에 대해서는 전술한 바와 같으므로, 중복 설명을 생략하기로 한다.

상기 식품 조성물(예컨대, 건강기능식품 또는 건강음료)에 있어서, 상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물을 식품의 첨가물로 사용하는 경우 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 예방, 건강 또는 치료 등의 각 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.

상기 식품 조성물의 제형은 산제, 과립제, 환, 정제, 캡슐제의 형태뿐만 아니라 일반 식품 또는 음료의 형태 어느 것이나 가능하다.

상기 식품의 종류에는 특별히 제한은 없고, 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있다.

일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 까마중 추출물 또는 상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물은 원료 100 중량부에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 또한 본 발명은 천연물질을 이용하는 점에서 안전성 면에서 문제가 없으므로 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.

상기 식품 조성물 중 음료는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 상기 음료 100 mL당 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g일 수 있다.

상기 외에 상기 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 상기 식품 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나 본 발명의 식품 100 중량부 대비 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

피부 노화 또는 주름 개선용 화장료 조성물

본 발명은 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

상기 까마중 추출물에 대해서는 전술한 바와 같으므로, 중복 설명을 생략하기로 한다.

또한, 본 발명은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다:

[화학식 1]

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상기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물에 대해서는 전술한 바와 같으므로, 중복 설명을 생략하기로 한다.

상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 및, 그들의 유도체(팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 dl-알파 토코페롤, 니코틴산 dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등)를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴 또는 케라틴이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염(나트륨염 등)이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 갈조 엑기스, 홍조 엑기스 또는 녹조 엑기스이 바람직하고, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨 또는 아르긴산칼륨이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합할 수 있다. 상기 다른 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제 또는 정제수가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지 또는 식물 유지가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴 또는 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스 또는 와셀린 등의 탄화 수소계 유지가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유 또는 아미노 변성 실리콘유가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린 또는 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자 또는 지용성 고분자가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n=2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n=2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n=2 이상), 락트산 또는 락트산염이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤 또는 콜레스테롤에스테르가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산 또는 덱스트린 이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르 또는 고분자 실리콘이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산 또는 라놀린지방산콜레스테릴에스테르가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제 또는 양성 계면활성제가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지

방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEPOP (폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드 또는 수소첨가대두인지질이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염 또는 퍼플루오로알킬인산에스테르가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드 또는 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형 또는 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 또는 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 사불화에틸렌가 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert -부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p -(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진 또는 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨 또는 운데시렌산이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필 또는 엘리소르빈산이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨 또는 인산일수소나트륨이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 0.01 ~ 5% 중량 백분율로 배합되는 것이 바람직하고, 0.01 ~ 3% 중량 백분율로 배합되는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 화장료 조성물은 용액, 유화물 또는 점성형 혼합물의 형상을 취할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 화합물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액 또는 모발화장료로 제조될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 구체적으로, 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 또는 바디클린저의 제형을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.

상기 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연이 이용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트가 이용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

상기 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르가 이용될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.

따라서, 본 발명에 따른 까마중 추출물 또는 솔라소닌은 피부의 콜라겐 분해에 관여하는 콜라겐 분해 효소의 mRNA 및 단백질 발현을 억제하고, 피부를 구성하는 콜라겐 생성을 촉진시킴에 따라, 피부 항노화 활성에 우수한 효과가 있다. 또한, 본 발명은 천연물이므로 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있어, 약품, 식품 또는 화장품으로 사용될 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[실시예]

실시예 1. 까마중 추출물의 제조

(1) 까마중 메탄올 추출물 제조

건조된 까마중을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 까마중 분말 100 g을 100% 메탄올 1 L에 침지하여 24 시간 동안 상온에 방치한 후 추출액을 수득하는 과정을 3회 반복하였다. 수득한 추출액을 와트만(Whatman) 2번 여과지로 감압 여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매 성분을 제거한 까마중 메탄올 추출물을 수득하였다.

(2) 까마중 에탄올 추출물 제조

10%, 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-(1) 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과 까마중 10%, 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올 추출물을 제조하였다.

(3) 까마중 에틸아세테이트 추출물 제조

에틸아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-(1)과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과 까마중 에틸아세테이트 추출물을 제조하였다.

(4) 까마중 헥산 추출물 제조

헥산을 사용한 것을 제외하고는 실시예 1-(1)과 동일한 방법으로 수행하였고, 그 결과 까마중 헥산 추출물을 제조하였다.

(5) 까마중 열수 추출물 제조

건조된 까마중을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 까마중 분말 100 g을 물 1 L에 넣고 80℃에서 2 시간 교반하여 추출액을 수득하였다. 수득한 추출액을 와트만 2번 여과지로 감압 여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매 성분을 제거한 까마중 열수 추출물을 수득하였다.

(6) 까마중 초고압 추출물 제조

건조된 까마중을 믹서로 분쇄한 다음, 18% 에탄올 76 mL을 폴리에틸렌(polyethylene) 팩에 넣고 밀봉한 후 초고압 추출장치(Frescal MFP-7000; Mitsubishi Heavy Industries, Tokyo, Japan)를 이용하여 추출하였다. 초고압 추출 조건으로서 추출압력을 320 MPa, 추출시간은 5 분으로 설정하였다. 추출된 시료는 와트만 2번 여과지로 여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거함으로써 까마중 초고압 추출물을 얻었다.

(7) 까마중 초임계 추출물 제조

건조된 까마중을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 까마중 1 g을 시료 카트리지에 충전하고 초임계 유체 추출 장치(SFX 3560, Isco Inc., Lincoln, NE, USA)를 이용하여 추출하였다. 초임계 유체 추출 조건은 추출 압력이 20 MPa, 추출 온도는 60℃, 초임계 이산화탄소의 유속은 60 mL/분, 추출 시간은 60 분이었다. 초임계 유체 추출이 완료되면, 추출 장치의 압력을 낮춰 초임계 유체 상태를 해제하여 까마중 초임계 유체 추출물을 얻었다

실시예 2. 솔라소닌 분리

실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 50% 에탄올 추출물 을 실리카 겔(silica gel; 70-230 mesh, Merck & Co., Whitehouse Station, NJ, USA)로 충진시킨 컬럼에 적재한 후, 에틸아세테이트와 헥산을 혼합한 용매시스템을 이용하여 분취하였다. 분취 순서에 따라 10개의 하부 분획물로 나누었다. 두 번째 분획물을 다시 진공회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거하였다. RP-18로 충진된 컬럼에 농축액을 적재한 후, 물과 메탄올로 혼합한 용매시스템을 이용하여 분취하였다. 상기 분취순서에 따라서 6개의 하부 분획물로 나누었다. 그 중 5번의 분획물에서 하기 [화학식 1]의 화합물인 솔라소닌을 분리 및 정제하였다.

[화학식 1]

실시예 3. 까마중 추출물에 함유되어 있는 솔라소닌 함량 분석

건조된 까마중을 믹서로 분쇄한 다음, 분쇄한 까마중 시료 10 g을 50% 에탄올 100 mL에 넣고 70℃에서 3시간 추출하였다. 추출된 시료는 와트만(Whatman) 2번 여과지로 감압여과하고, 여과된 추출액을 진공 회전 농축기로 농축하여 용매성분을 제거한 후 까마중 50% 에탄올 추출물을 제조하였다. 이때, 까마중 추출물의 수율은 16.43% 였다. High-performance liquid chromatography (HPLC: YL 9100 System, Young Lin, Seoul, Korea)를 이용하여 까마중 추출물 속에 하기 화학식 1의 화합물 솔라소닌 함량을 분석하였다. HPLC 분석을 위해 0.01% phosphoric acid와 아세토나이트릴(acetonitrile) 용매를 사용하였으며, 206 nm 파장 및 0.7 mL/분의 유속으로 까마중 50% 에탄올 추출물을 분석하였다. 체류 시간 6.2분에 솔라소닌이 검출되었으며, 까마중 50% 에탄올 추출물에 솔라소닌이 0.47(w/w)% 함유되어 있다.

[실험예]

실험예 1. 까마중 추출물의 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현 억제 활성

섬유아세포인 HS68 (ATCC)을 10% fetal bovine serum (Gibco, Gaithersburg, MD, USA) 가 함유된 Dulbecco's modified Eagle's Media (DMEM; Hyclone, Logan, UT, USA)와 함께 6-웰 플레이트에 2 × 10⁵cell/mL이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, 실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 10% 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올 추출물 및 실시예 1-(5)에서 제조한 까마중 열수 추출물을 1 μg/mL 로 세포에 24시간 처리하였다. 24시간 후, 각 웰의 배지를 모두 제거하고 15 mJ/cm²UVB를 처리하여 광노화를 유도하였다. 이후 실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 10% 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올 추출물 및 1-(5)에서 제조한 까마중 열수 추출물을 다시 1 μg/mL 로 처리하였으며, 이 때, 까마중 추출물 대신 0.01% DMSO를 처리한 군을 대조군으로 하였다. 48 h 배양 후, 배지를 취하여 ELISA kit (Abcam, Cambridge, UK)를 이용하여 측정하였다. Immuno-well plate에 100 μL씩 배지를 웰에 분주하여 37℃, 1시간 반응시켰다. 1시간 반응시킨 후, 콜라겐 분해 효소-1 항체를 100 μL씩 분주하고 다시 37℃, 1시간 반응시켰다. 1시간 후, HRP-streptavidin 용액을 100 μL씩 분주하고, 37℃, 1시간 반응시킨 후 TMB를 웰당 100 μL 씩 넣어 30 분간 빛을 차단한 채 반응시켰다. 마지막으로 50 μL stop solution을 첨가하여 반응을 완전히 중지 시킨 후, Versa Max tunable microplate reader (Molecular Devices Inc., Sunnyvale, CA, USA) 을 사용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료에 의한 콜라겐 분해 효소-1 억제 활성은 아래 식에 따라 환산하였다.

hibitory activity of MMP-1 secretion (%) =

1-(As-Ab/Ac-Ab)]×100

c: Mock irradiated medium의 흡광도

b: UVB를 조사하고 sample 처리하지 않은 medium의 흡광도

s: UVB를 조사하고 sample 처리한 medium의 흡광도

그 결과, 도 1에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현량이 유의적(^## p<0.01)으로 증가하였으나, 증가한 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현량이 까마중 열수 추출물 또는 까마중 에탄올 추출물을 처리함에 따라 유의하게(^** p<0.01) 감소하였다. 이는 본 발명의 까마중 열수 추출물 및 까마중 에탄올 추출물이 피부에서 UVB에 의해 촉진된 콜라겐 분해를 억제하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 2. 까마중 추출물의 제 1 형 프로콜라겐 증가 활성

섬유아세포인 HS68 (ATCC)을 10% FBS (Gibco) 가 함유된 DMEM (Hyclone)와 함께 6-웰 플레이트에 2 × 10⁵cell/mL이 되도록 넣었다. 세포밀도가 약 80~85%가 되었을 때, 실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 10% 30%, 50%, 70%, 90% 에탄올 추출물 및 실시예 1-(5)에서 제조한 까마중 열수 추출물을 1 μg/mL 로 세포에 24시간 처리하였다. 24 h 후, 제 1 형 프로콜라겐 ELISA kit (Abcam)를 사용하여 배지 내에 있는 콜라겐 함량을 측정하였다. Immuno-well plate에 50 μL씩 배지를 웰에 분주하고 antibody cocktail을 50 μL씩 분주하여 1시간 반응하였다. TMB를 웰당 100 μL 씩 넣어 10 분간 반응시킨 뒤, stop solution을 100 μL 씩 첨가하여 1분 동안 TMB의 반응을 중지시켰다. 그 후, Versa Max tunable microplate reader (Molecular Devices Inc) 로 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 까마중 열수 추출물 및 까마중 에탄올 추출물 처리에 의해 HS68 섬유아세포에서 제 1 형 프로콜라겐 함량이 유의적으로(^** p<0.01) 증가하였다. 이는 본 발명의 까마중 열수 추출물 및 까마중 에탄올 추출물이 피부에서 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 3. 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 분해 효소 mRNA 발현 억제 활성

실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 50% 에탄올 추출물을 1과 10 μg/mL 농도로 실험예 1과 동일한 방법으로 세포를 배양하였다. 배양이 끝난 뒤, TRIzol시약(Takara)을 사용하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 총 RNA는 나노드랍(NanoDrop 1000; Thermo Fisher Scientific Inc., MA, USA)을 이용하여 정량하였다. 정량된 16 μL의 RNA를 Reverse Transcriptase Premix (ELPIS-Biotech, Daejeon, Korea)와 PCR 기계(Gene Amp PCR System 2700; Applied Biosystems, MA, USA)를 이용하여 42℃ 55분, 70℃ 15분의 조건에서 cDNA로 합성하였다. 16 μL의 생성된 cDNA 중 4 μL의 cDNA, 하기의 특정 프라이머(Bioneer, Daejeon, Korea) 그리고 PCR premix (ELPIS-Biotech, Daejeon, Korea)로 95℃에서 30초, 60℃에서 1분, 72℃에서 1분을 30번 반복하여 PCR을 수행하였다. PCR로 인해 증폭된 cDNA를 1.5% agarose gel로 전기영동하여 분리하였으며, G;BOX EF imaging system (Syngene)을 이용하여 cDNA band를 확인하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다.

표적 유전자명	프라이머 서열	프라이머 방향	서열번호
MMP-1	5'-ATTCTACTGATATCGGGGCTTTGA-3'	정방향	서열번호 1
	5'-ATGTCCTTGGGGTATCCGTGTAGT-3'	역방향	서열번호 2
MMP-2	5'-CATACAAAGGGATTGCCAGGAC-3'	정방향	서열번호 3
	5'-ATCGCTCCAGACTTGGAAGG-3'	역방향	서열번호 4
MMP-9	5'-ATTCTACTGATATCGGGGCTTTGA-3'	정방향	서열번호 5
	5'-ATGTCCTTGGGGTATCCGTGTAGT-3'	역방향	서열번호 6
MMP-13	5'-CTATGGTCCAGGAGATGAAG-3'	정방향	서열번호 7
	5'-AGAGTCTTGCCTGTATCCTC-3'	역방향	서열번호 8
GAPDH	5'-ATTGTTGCCATCAATGACCC-3'	정방향	서열번호 9
	5'-TCGCCCCACTTGATTTTGGA-3'	역방향	서열번호 10

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 분해 효소-1, 2, 9, 13 mRNA 발현량이 증가하였으나, UVB에 의해 증가한 콜라겐 분해 효소-1, 2, 9, 13 mRNA 발현량이 까마중 50% 에탄올 추출물을 처리함에 따라 농도 의존적으로 감소하였다. 이는 본 발명의 까마중 50% 에탄올 추출물이 피부에서 UVB에 의해 촉진된 콜라겐 분해를 억제하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 4. 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 mRNA 발현 증가 효과

실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 50% 에탄올 추출물 1과 10 μg/mL 농도로 실험예 3과 동일한 방법으로 RT-PCR을 진행하였다. MMP-1, 2, 9, 13 의 프라이머 대신 하기의 COL1A1, COL3A1, COL4A1, COL7A1 프라이머를 처리하여 결과를 확인하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.

표적 유전자명	프라이머 서열	프라이머 방향	서열번호
COL1A1	5'-AGTCCCCAATGGTGAGACGTG-3'	정방향	서열번호 1
	5'-GCACGGAAACTCCAGCTGAT-3'	역방향	서열번호 2
COL3A1	5'-AGCGGCTGAGTTTTATGACG-3'	정방향	서열번호 3
	5'-AGCACAGGAGCAGGTGTAGA-3'	역방향	서열번호 4
COL4A1	5'-GCCAAAGCCAAACCCATTCC-3'	정방향	서열번호 5
	5'-TGGTACGTGTGGTAACTTCTC-3'	역방향	서열번호 6
COL7A1	5'-AAGCCGAGATTAAGGGCTGG-3'	정방향	서열번호 7
	5'-CACCAAATGGAGCACAGCAG-3'	역방향	서열번호 8
GAPDH	5'-ATTGTTGCCATCAATGACCC-3'	정방향	서열번호 9
	5'-TCGCCCCACTTGATTTTGGA-3'	역방향	서열번호 10

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 mRNA 발현량이 감소하였으나, UVB에 의해 감소한 콜라겐 mRNA 발현량이 까마중 50% 에탄올 추출물을 처리함에 따라 농도 의존적으로 증가하였다. 이는 본 발명의 까마중 50% 에탄올 추출물이 피부에서 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 5. 까마중 50% 에탄올 추출물의 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현 억제 활성

실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 50% 에탄올 추출물을 1과 10 μg/mL 농도로 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 진행하였다.

그 결과, 도 5에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현량이 유의적(^## p<0.01)으로 증가하였으나, UVB에 의해 증가한 콜라겐 분해 효소-1 단백질 발현량이 까마중 50% 에탄올 추출물을 처리함에 따라 유의하게(^** p<0.01) 감소하였다. 이는 본 발명의 까마중 50% 에탄올 추출물이 피부에서 UVB에 의해 촉진된 콜라겐 분해를 억제하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 6. 까마중 50% 에탄올 추출물의 제 1 형 프로콜라겐 증가 활성

실시예 1-(2)에서 제조한 까마중 50% 에탄올 추출물 1과 10 μg/mL 농도로 실험예 1과 동일한 방법으로 세포를 배양했으며, 실험예 2에서 사용한 제 1 형 프로콜라겐 ELISA kit (Takara)를 사용하여 제 1 형 프로콜라겐 함량을 측정하였다.

그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 제 1 형 프로콜라겐 함량이 유의적(^## p<0.01)으로 감소하였으나, UVB에 의해 감소한 제 1 형 프로콜라겐 함량이 까마중 50% 에탄올 추출물을 처리함에 따라 유의하게(^** p<0.01) 증가하였다. 이는 본 발명의 까마중 50% 에탄올 추출물이 피부에서 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 7. 솔라소닌의 콜라겐 분해 효소 mRNA 억제 효과

실시예 2에서 분리한 솔라소닌을 1 과 5 μM의 농도로 실험예 3과 동일한 방법으로 실험을 진행하였다. 그 결과를 도 7에 나타내었다.

그 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 mRNA 발현량이 감소하였으나, UVB에 의해 감소한 콜라겐 mRNA 발현량이 솔라소닌을 처리함에 따라 농도 의존적으로 증가한 것을 확인하였다. 이는 본 발명의 솔라소닌이 주UVB에 의해 촉진된 콜라겐 분해를 억제하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

실험예 8. 솔라소닌의 콜라겐 mRNA 발현 증가 효과

실시예 2에서 분리한 솔라소닌을 1과 5 μM의 농도로 실험예 4와 동일한 방법으로 실험을 진행하였다. 그 결과를 도 8에 나타내었다.

그 결과, 도 8에 나타낸 바와 같이 UVB를 처리하였을 때 콜라겐 mRNA 발현량이 감소하였으나, UVB에 의해 감소한 콜라겐 mRNA 발현량이 솔라소닌을 처리함에 따라 농도 의존적으로 증가한 것을 확인하였다. 이는 본 발명의 솔라소닌이 피부에서 콜라겐 생성을 촉진하는 효과가 뛰어나다는 것을 의미한다.

하기에 본 발명의 화합물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제제예 1: 산제의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 20 mg

유당수화물 100 mg

탈크 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

제제예 2: 정제의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

옥수수전분 100 mg

유당수화물 100mg

스테아르산마그네슘 2mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

제제예 3: 캅셀제의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

미결정셀룰로오스 3 mg

유당수화물 14.8 mg

스테아르산마그네슘 0.2 mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캅셀제의 제조방법에 따라서 젤라틴캡슐에 충전하여 캅셀제를 제조하였다.

제제예 4: 주사제의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

만니톨 180mg

주사용 멸균 증류수 2974 mg

인산일수소나트륨 26 mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1앰플당(2mL) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.

제제예 5: 액제의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

레몬향 적량

상기의 성분을 통상의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 정제수를 가하여 전체 100mL로 조절한 후 멸균시켜 갈색병에 충진하여 액제를 제조한다.

제제예 6: 건강기능식품의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B₁0.13㎎

비타민 B₂0.15㎎

비타민 B₆0.5㎎

비타민 B₁₂ 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강기능식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강기능식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 제조에 사용할 수 있다.

제제예 7: 건강음료의 제조

까마중 추출물 또는 솔라소닌 10 mg

비타민 C 15 g

비타민 E(분말) 100 g

젖산철 19.75 g

산화아연 3.5 g

니코틴산아미드 3.5 g

비타민 A 0.2 g

비타민 B₁0.25g

비타민 B₂0.3g

정제수 정량

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (10)

1. 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물.
   
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 까마중 추출물은 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는
   피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   .
   
3. 제 1 항에 있어서,
   상기 까마중 추출물은 까마중을 물, 탄소수 1 내지 6의 유기용매 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출한 것을 특징으로 하는
   피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물.
   
4. 제 1 항에 있어서,
   상기 까마중 추출물은 까마중을 아임계 추출법, 초임계 유체 추출법 또는 초고압추출법에 의해 추출한 것을 특징으로 하는
   피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물.
   
5. 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   .
   
6. 제 5 항에 있어서,
   상기 솔라소닌 화합물은 까마중 추출물로부터 분리되는 화합물인 것을 특징으로 하는
   피부 노화 방지 또는 주름 개선용 약학적 조성물.
   
7. 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물.
   
8. 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 식품 조성물:
   [화학식 1]
   

   

   .
   
9. 까마중 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물.
   
10. 하기 [화학식 1]로 표시되는 솔라소닌 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지 또는 주름 개선용 화장료 조성물:
    [화학식 1]
    

    

    .

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