KR20210064510A - 장내 유익균 증가 효과를 가지는 락토바실러스 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유산균(lactobacilli), 프로피온산 박테리아(propionic acid bacteria) 및/또는 비피도박테리아(bifidobacteria)의 서로 다른 조합을 포함하는 장내 유익균 증가 효과를 가지는 락토바실러스 조성물에 관한 것이다. 상기 조합물을 적합한 프리바이오틱스와 혼합하여 신바이오틱스를 생성하는 것이 바람직하다. 본 발명의 조합물은 그 자체로 사용하거나 적합한 식품 또는 약품과 혼합하여 사용할 수 있고, 예컨대, 면역 시스템을 자극하거나 전반적인 건강 증진에 치료적으로 유용하다.
Description
본 발명은 프로바이오틱스(probiotics) 조합물에 관한 것으로, 상기 조합물은 유산균 (lactobacilli), 프로피온산 박테리아(propionic acid bacteria) 및/또는 비피도박테리움 (bifidobacteria)을 다양한 조합으로 포함한다.프로바이오틱스는 바람직하게 적절한 프리바이오틱(prebiotic)과 조합되어 신바이오틱(synbiotic)을 생성한다. 본 발명의 조성물은 그 자체로 또는, 유제품 또는 음료와 같은 적절한 식료품과 조합되어 섭취될 수 있으며, 이는, 예컨대, 면역계의 자극 및 일반적인 건강 증진에 치료적으로 유용하다.
프로바이토틱스(probiotics)는, 인간 또는 동물에 투여되어, 장내 미생물 균형을 개선하여 숙주(host)의 건강을 증진시키는 살아있는 미생물을 의미한다 (Fuller, R. Probiotics in man and animals, 1989, J. Appl. Microbiol. 66: 365-378). 가장 잘 보고된 프로바이오틱스에는 L. rhamnosus LGG), L. johnsonii LAI, L. casei Shirota 및 Bifidobacferium lactis Bbl2 등이 있다. 또한, 많은 다른 프로바이오틱스가 본 발명이 속하는 기술분야의 문헌에 기재되어 있다.
(예컨대, M. E. Sanders amp; J. H. in't Veld 1999. Antonie vanLeeuwenhoek 76: 293-315, Kluwer Academic Publishers 참조). 프로바이오틱스의 건강 증진 효과는 장내 균총(flora) 의 밸런싱 및 유지, 면역계의 자극 및 항암 활성(anti-carcinogenic activity)을 포함한다. 프로바이오틱스의 인간 장내에서의 유용한 효과는 살아있는 박테리아세포, 그들의 구조 및 대사산물에 기인하는 몇 몇 인자들에 기초한다. 프로바이오틱스는 통상 영양제에 포함되어 또는 캡슐 형태로 투여된다.
다음의 요구조건을 본질적으로 만족시키는 박테리아를 프로바이오틱스라고 칭한다 (Lee, Y-K and Salminen, S. 1995 The coming age of probiotics. Trend Food Sci Technol, 6: 241-245): 소화관 내의 일반적인 요구 조건 (위의낮은 pH, 소화계의 산, 등)에서 생존할 것; 장관벽에 잘 부착할 것; 장내에서 대사할 것; 기술적으로 적용가능할 것 (조작을 견딜 수 있을 것); 임상적으로 시험되고 보고된 건강 효과를 나타낼 것; 및 섭취하기에 안전할 것.
프리바이오틱스(prebiotics)는 대장내에서 한 가지 또는 몇몇 프로바이오틱 박테리아의 성장 및 활성을 선택적으로 자극함으로써 인간의 건강을 증진시키는 비소화성(nondigestible) 않는 식품 성분이다 (Gibson, G. R. and Roberfroid, M. B. 1995. Dietary modulation of the human colonic microbiota-introducing a concept of prebiotics. J. Nutr. 125: 1401-1412). 프리바이오틱은 일반적으로 비소화성 탄수화물(올리고- 또는 폴리사카라이드) 또는 소화관 상부에서 분해되지 않거나 흡수되지 않는 당알코올(sugar alcohol)이다. 상품에서 사용되는 알려진 프리바이오틱스 에는 이눌린(inulin; 프락토-올리고사카라이드, 또는 FOS) 및 트랜스갈락토-올리고사카라이드(GOS 또는 TOS) 등이 있다.
신바이오틱스는 프리바이오틱과 프로바이오틱의 조합으로 정의되며, 상기 프 리바이오틱은 첨가된 미생물의 생존력(viability) 및 장에서의 부착(착생)을 증진시킴으로써, 건강을 증진시킨다 (상기 Gibson and Roberfroid 1995). 소장을 통과한 비소화성 탄수화물이 대장에서 발효될 때, 예컨대, 단쇄 지방산(short-chain fatty acid), 다른 유기산, 알코올, 수소 및 이산화탄소 등이 생성된다 (상기 Gibson and Roberfroid 1995). 발효에 의하여 생성되는 주요한 지방산은 아세트산, 낙산(butyric acid) 및 프로피온산(propionic acid)이다 (Cummings, J. H. Short-chain fatty acids, in: Human Colonic Bacteria: Role in Nutrition, Physiology and Pathology, G. R. Gibson and G. T. Macfarlane (eds.), pp. 101130, CRC Press, Boca Raton, 1995). 단쇄 지방산 수의 증가는 일반적으로 이롭다. 비소화성 탄수화물은, 장내 발효시 해로운 화합물을 포함하고 있을 수 있음에도 불구하고, 대장 미생물의 주요한 기질이다 (상기 Gibs
on and Roberfroid, 1995).
인간 소화관은 숙주와 공생하며 생존하는 많은 수의 박테리아를 수용한다. 미생물 존재량에 있어서 소화관의 서로 다른 부분 사이에 많은 차이가 있으며, 모든 장내 박테리아의 약 95%가 내장 중에서 가장 중요한 부분인 대장에 존재한다. 약 400 종의 박테리아의 대장 내에서의 번식을 평가하였다. 이들에 더하여, 내장은 일시적 미생물로 알려진 미생물을 포함한다 (G. R. Gibson and M. B. Roberfroid (eds.) Colonic Microbiota; Nutirition and Health. Kluwer Academic Publisher, Dordrecht, 1999). 다음과 같은 종이 우세하다: 박테로이드( Bacteroides ), 비피도박테리움( Bifidobacterium ), 코프로코커스( Coprococcus ), 펩토스트렙토코커스( Peptostreptococcus ), 유박테리움( Eubacterium ) 및 루미노코커 스( Ruminococcus ). 유산균( Lactobacillus ), 스트렙토코커스( Streptococcus ), 푸조박테리움( Fusobacterium ), 베일로넬라( Veillonella ), 프로피오니박테리움( Propionibacterium ) 및 장내세균과( Enterobacteriaceae )의 수는 약간 적다. 상기 종들 중 몇몇은 유용한 미생물이지만, 나머지는 해로울 수도 있다. 배설물 내
의 평균적인 미생물 존재량은 10 12 cfu/g (건조량 기준)이다.
박테리아는 소장에서 흡수되지 않은 식품 성분을 대장에서 분해하고 발효시키며, 발효의 최종 산물은 신체에 사용되기 위하여 장내로 흡수된다. 영양분 이외에도, 대장의 미생물 균형이 인간의 건강 상태에 매우 중요하다 (Tannock, G. W. 1998. Studies of the intestinal microflora : Aprerequisite for the development of probiotics, Int. Dairy J. 8: 527-533). 장내 균총 조성의 변화 또는 그 양의 갑작스런 감소 (심한 설사, 항생제 치료 등에 기인함)는 잠재적 병원성 종의 감염성을 증가시키고, 이는 심각한 결과를 가져올 수 있다.
담즙은 접합된 글루쿠론(glucurone) 화합물을 소장으로 운반하고, 거기에서부터 상기 화합물은 글루쿠
로니다제(glucuronidase) 효소가 이들 화합물을 가수분해할 수 있는 대장까지 더 이동하여, 대장내로 독성 화합물을방출한다 (Rowland, I. R. 1995. Toxicology of the colon : role of the intestinal microflora, in: Human Colonic Bacteria, Role in nutrition, physiology, and pathology. Editors: Gibson, G. R. and Macfarlane, G. T., pp. 155-174, Boca Raton: CRC Press). 유박테리움( Eubacterium ), 박테로이드( Bacteroides ) 및 클로스트리듐( Clostridium ) 종류들이 비피도박테리움( Bifidobacterium ) 및 유산균( Lactobacillus ) 종류들보다 많은 양의 이들 유해한 효소들을 장으로 방출하는 것으로 생각된다.
따라서, 이는 장내 균총이 비피도박테리움 및 유산균으로 이루어지는 것이 유리한 이유 중 하나를 제공한다.또한, 식물 또는 예컨대, 차에서 유래하는 글리코시드는 소장에서 흡수되지 않고 대장까지 이동하며, 여기서 β -글리코시다제의 작용에 의하여 가수분해되어 독성 또는 변이유발성 아글리콘 화합물 (mutagenic aglycone compounds)를 생성할 수 있다 (Goldin, B. R. 1990. Intestinal Microflora : metabolism of drugs and carcinogens. Annals of Medicine 22: 43-48).
또한, 장내 균총은 요소를 암모니아로 분해하는 우레아제 효소를 생산한다. 많은 양의 암모니아는 장의 상피(epithel) 세포에 유독할 수 있다 (Mobley, H. L. T. and Hausinger, R. P. 1989. Microbial ureases: significance, regulationand molecular characterization. Microbiological Reviews 53: 85-108).
인간 장내 균총은 일생 중 초년기에 형성되고, 그 이후로 그 구성에 있어서 큰 변화가 발생하지 않는다. 단지, 종 내에서의 작은 변화만 발생할 뿐이다 (예컨대, 비피도박테리움 내에서).
따라서, 장내 균총의 중요성에 대한 증대된 이해와 함께, 연구는 유익한 박테리아 종은 강화시키고 유해한 것은 감소시키는 방법으로 균총의 구성 및 그의 작용 (생존력)에 영향을 미치는데 사용될 수 있는 인자들을 발견하는데 적극적으로 초점이 맞추어졌다. 미생물의 작용이 유익균을 증진시키는 프리바이오틱스에 의하여 영향을 받을 수 있다고 생각된다. 연구를 디-. 트리-, 테트라-, 펜타- 및 헥사사카라이드류이고 본래 갈락토오즈 단위체를 포함하는 갈락토올리고사카라이드류(GOS)로 확대하여 수행하였다. 이들을 락토오스로부터 효소적으로 제조하며, 최종 생성물의 양은 사용된 효소에 따라 달라진다 (Matsumoto, K. et al. 1993. Galactooligosaccharides, in: Oligosaccharides. Production, properties and applications. Ed. Nakakuki, T., Japanese Technology Reviews. Vol. 3. No. 2., pp. 90-116, Gordon and Breach Science Publishers, Switzerland, Australia). GOS는 이미 예컨대, 비피도제닉(bifidogenic) 특성, 즉 비피도박테리아의 성장을 촉진하는 특성을 보이는 것으로 알려져 있다 (Ito, M. et al. 1990. Effect of adm
inistration of galactooligosaccharides on the human faecal microflora, stool weight, and abdominal sensation.Microb. Ecol Health Dis. 3: 285-292).
단일 프로바이오틱 균주를 함유하는 생산물 및 많은 수의 상이한 프로바이오틱스의 조합을을 함유하는 산물 모두 본발명이 속하는 기술분야의 문헌에 풍부하게 기재되어 있다. 신바이오틱스 또한 본 발명이 속하는 기술분야의 문헌에 기재되어 있다.
예컨대, 유럽공개특허 EP 904 784 (N. V. Nutricia)에는 비피도박테리움( Bifidobacterium ), 엔테로코커스 파에시움( Enterococcus faecium ) 및 유산균( Lactobacillus )를 함유하는 프로바이오틱스가 기재되어 있다. 또한, 상기 산물은 폴리사카라이드 또는 비-분해성 녹말, 및 면역글로불린, 비타민 등과 같은 프리바이오틱스를 함유할 수 있다.
상기 공개특허에 따르면, 상기 산물은, 예컨대, 면역시스템을 자극하여 건강 증진 효과를 갖는다. 그러나, 이러한 효과는 임상적인 시험에 의하여 보여진 것이 아니고 다른 어떤 생물학적 활성도 연구된 바가 없다.
국제공개 WO 00/33854 (N. V. Nutricia)에는 프로바이오틱스와 올리고사카라이드를 포함하는 산물이 기재되어 있다. 프로바이오틱스로서 페디오코커스( Pediococcus ), 프로피오니박테리움( Propionibacterium ), 로이코노스토크(Leuconostoc ) 및 사카로마이세스( Saccharomyces )도 언급되어 있지만, 특별히 언급된 프로바이오틱스는 유산균(Lactobacillus )과 비피도박테리움( Bifidobacterium )이다. 수반되는 프리바이오틱스는 트랜스갈락토올리고사카라이드(TOS) 및 프룩토올리고사카라이드(FOS)를 포함한다. 상기 공개 특허에 따르면, 특히 유리한 조합물은 락토바실러스 람노서스( Lactobacillus rhamnosus )와 트랜스갈락토올리고사카라이드 또는 감자 갈락탄(potato galactane)의 가수분해 산물을 포함하며, 이러한 조합 및 그의 제조 또한 실시예에 예시되어 있다. 상기 공개 특허에 따르면, 상기 산물은 건강 증진 효과를 가지며 특히 장질환의 치료에 유용하다. 그러나, 그의 활성은 어떤 방법으로도 나타나있지 않다.
미국특허 US 5,895,648 (Sitia-Yomo S.p.A.)에는 한 가지 이상의 올리고사카라이드와 결합된 적어도 2 종 이상의 스트렙토코커스 또는 유산균 및 적어도 두 종 이상의 비피도박테리아 생균을 동결건조된 형태로 포함하는 프로바이오틱스 조성물이 기재되어 있다. 상기 조성물은 총 4 내지 20 중량부의 프로바이오틱스 및 5 내지 22 중량부의 올리고사카라이드를 포함하며, 상기 올리고사카라이드의 예로서 갈락토- 및 프룩토올리고사카라이드, 특히 이눌린이 기재되어 있다. 기재된 프로바이오틱스는 비피도박테리움 브레베( Bifidobacterium breve ), 비피도박테리움 인판티스( Bifidobacterium infantis ), 비피도박테리움 롱검( Bifidobacterium longum ), 비피도박테리움 비피덤( Bifidobacterium bifidum ), 락토바실러스 악시도필러스( Lactobacillus acidophilus ), 락토바실러스 불가리쿠스( Lactobacillus bulgaricus ), 락토바실러스 카세이( Lactobacillus casei ), 락토바실러스 플란타룸( Lactobacillus plantarum ),스트렙토코커스 써모필러스( Streptococcus thermophilus ) 및 스트렙토코커스 파에시움( Streptococcus faecium)을 포함한다.
상기 공개특허 따르면, 프로바이오틱스와 프리바이오틱스를 함유하는 혼합물을 우유-기재 디저트, 우유 또는 주스에 첨가하여 장의 기능의 균형을 잡아준다. 그러나 조합물의 어떠한 생물학적 활성도 기재되어 있지 않다.
공개된 문헌 'Milchwissenschaft (1988, Vol. 53, No. 11, pp. 603-605)'에는 다음과 같은 3 종류의 박테리아 균주를 포함하는 PAB-우유가 기재되어 있다: 츠로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 MTCC 1371( Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii MTCC 1371), 락토바실러스 악시도필러스 R.( Lactobacillus acidophilus R.) 및 비피도박테리움 비피덤 NDRI( Bifidobacterium bifidum NDRI). 프리바이오틱스는 상기 산물에 첨가되지 않았다. 상기 공개 특허에 따르면, PAB-우유는 아기 및 어린이에게 적합하며, 락토오스 분해효소 결핍증(lactose intolerance)을 앓고 있는 사람들에게도 적합하다.
국제공개 WO 99/10476에는 특정 박테리아 균주, 즉 락토바실러스 람노서스 ( Lactobacillus rhamnosus ) HN001 (NM97/09514)와 HN067 (NM97/01925), 및 락토바실러스 악시도필러스( Lactobacillus acidophilus ) HN017 (NM97/09515)와 비피도박 테리움 락티스( Bifidobacterium lactis ) HN019 (NM97/09513)가 식세포작용 (phagocytosis)을 증진시켜 면역 시스템을 자극하는 효과가 있다고 기재되어 있다. 상기 균주는 단독적으로 사용될 수 있고, 유제품 및 약학적 제제에 첨가될 수 있다.
미국특허 US 5,902,578 (Abbott Laboratories)는 락토바실러스 로이테리( Lactobacillus reuterii ), 락토바실러스악시토필러스( Lactobacillus acidophilus ) 및 비피도박테리움 인판티스( Bifidobacterium infantis )의 혼합물을 이용한 설사(diarrhea) 예방 및 치료방법에 관한 것으로, 상기 혼합물은 분말, 액상 또는 환약으로 제조될 수 있다.
상기와 같은 유형의 프로바이오틱스와 신바이오틱스의 생물학적 및 치료적 효과가 또한 본 발명의 배경기술 분야에 기재되어 있다. 그 예로서, 쥐(rats)에서의 비피도박테리아( bifidobacteria ) 및 락토바실러스 악시도필러스( Lactobacillus acidophilus )의 대장암에 대한 효과가 기재되어 있고, 박테리아와 프룩토올리고사카라이드를 함께 사용할 때가장 좋은 결과를 얻을 수 있다고 기재되어 있는 'Gallagher, D. et al. Journal of Nutrition (1996, Vol. 126, No. 5,pp. 1362-1371)', 및 개별적으로 연구된 두 종의 유산균주, 락토바실러스 람노서스 GG( Lactobacillus rhamnosusGG)와 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 JS( Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii JS)의 림프구 레벨 및 이에 의한 마우스의 면역 반응에 대한 양성 효과를 기재하는 'Kirjavainen, P. et al. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology (Nov 1999, Vol. 6, No. 6, pp. 799-802)'를 들 수 있다. 이들 두 가지의 박테리아의 조합은 기재되어 있지 않고 연구되어 있지도 않다.
프로바이오틱스를 치료적 효과를 갖는 다른 물질과 혼합하는 것 또한 본 발명이 속하는 기술분야의 문헌에 기재되어있다. 예컨대, 국제 공개 WO 97/29762와 WO 97/29763 (Procter amp; Gamble Company)에는 철쭉속(genus Ericaceae )의 식물 또는 이들의 추출물과 함께 갈락토- 또는 프룩토올리고사카라이드와 혼합된 유산균( lactobacilli )과 비피도박테리아( bifidobacteria )의 요로감염 및 장질환의 치료를 위한 용도가 기재되어 있으며, 국제공개 WO 00/29007 (Reddy)에는 락토코커스( Lactococcus ), 유산균( Lactobacillus ), 페디오코커스( Pediococcus ), 스트렙토코커스( Streptococcus ), 프로피오니박테리움( Propionibacterium ), 브레비박테리움( Brevibacterium ), 페니실리움( Penicillium ) 및 사카로마이세스( Saccharomyces )과 같은 프로바이오틱스를 초본-기재(herb-based) 천연물 및 약물-유사 물질과 혼합하는 것이 기재되어 있다.
프로바이오틱스와 신바이오틱스가 광범위하게 연구되어 있지만, 충분한 모든 범위로 사용될 수 있는 우수하고 다목적의 제품을 개발하지지 못하였다. 결론적으로, 소비자에게 명백하게 입증된 프로바이오틱 효과를 가지며 예컨대, 매일 매일의 식사의 보충물(supplement) 또는 간편식(convenient part)으로서 사용가능한 형태로 생산되는 새로운 제품을 제공해야 하는 지속적이고 명백한 필요성이 있다.
본 발명의 목적은 새로운 프로바이오틱스 함유 산물을 제공하는 것 으로, 상기 산물의 프로바이오틱 효과는 명백하게 입증되어 있으며, 사용에 적합하고 이용자의 건강에 유익하다.
이러한 목적은 다수의 프로바이오틱스를 포함하는 본 발명의 신규한 조합물에 의하여 달성된다. 따라서, 본 발명은 두종류의 유산균 균주, 프로피온산 박테리움(propionic acid bacterium) 및/또는 비피도박테리움( bifidobacterium )을포함하는 신규한 조합물에 기초한 것이다. 또한, 상기 조합물은 상기한 미생물의 성장을 지원하는 프리바이오틱스를 포함하는 것이 바람직하다.
본 발명의 목적은 다양한 장내 병원성 세균들에 대한 억제 능력이 뛰어나면서도 내산성 및 내담즙성이 우수한 프로바이오틱 유산균을 제공하는 것이다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 락토바실러스 크리스파투스(Lactobacillus crispatus) G19 균주 및 비피도박테리움 보움(Bifidobacterium boum) R5 균주는 다양한 병원성 세균에 대해 우수한 항균 활성을 나타냄을 물론 내산성 및 내담 즙성 등이 우수하고, 락토바실러스 크리스파투스 G19의 경우 우수한 장상피세포 부착능을, 그리고 비피도박테리움 보움 R5의 경우 내산소성 및 건조 열에 대한 우수한 안정성을 나타내므로, 장내 병원성 세균 억제제, 살균제, 소화제, 정장제 및 지사제 등의 프로바이오틱 조성물로 제조하여 사료, 식품, 화장품 및 의약품 등에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 PHA-자극 T-세포(PHA-stimulated T-cells)에 의한 IFN-γ 의 분비를 보여주는 것이다.
도 2는 PHA-자극 T-세포내의 티미딘 삽입을 보여주는 것이다.
도 2는 PHA-자극 T-세포내의 티미딘 삽입을 보여주는 것이다.
본 발명에 있어서, 두 가지의 유산균, 즉 락토바실러스 람노서스 LGG( Lactobacillus rhamnosus LGG, ATCC 53103) 및 락토바실러스 람노서스 LC705( Lactobacillus rhamnosus LC705, DSM 7061)를 주로 사용한다. 프로피온산 박테리움은 일반적으로 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS ( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS, DSM 7067)이다. 비피도박테리움은 프로바이오틱 효과를 갖는 모든 비피도박테리움일 수 있으며, 통상적으로는 비피토박테리움 브레베( Bifidobacterium breve ), 비피도박테리움 인판티스( Bifidobacterium infantis ), 비피도박테리움 롱검( Bifidobacterium longum ), 비피도박테리움 비피덤( Bifidobacterium bifidum ) 및 비피도박테리움 아돌레센티스( Bifidobacterium adolescentis ) 종을 사용한다.
상기 조합물은 주로 상기 박테리아 중 적어도 3 가지 이상을 포함하며, 락토바실러스 람노서스 LGG( Lactobacillus rhamnosus LGG) 및/또는 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS)를 포함하는 것이 바람직하다.
가장 바람직한 조합물은 4 가지 균주, 락토바실러스 람노서스 LGG( Lactobacillus rhamnosus LGG, ATCC 53103),락토바실러스 람노서스 LC705( Lactobacillus rhamnosus LC705, DSM 7061), 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS, DSM 7067) 및 비피도박테리움 인판티스 Bbi99( Bifidobacterium infantis Bbi99, DSM 13692)의 혼합물이다. 그러나, 원한다면, 어떠한 비피도박테리움(예컨대, Bbl2)도 상기 조합물에 포함시킬 수 있다. 사용되는 프리바이오틱스는 갈락토올리고사카라이드(GOS)가 바람직하다.
다른 바람직한 조성물은 비피도박테리움( bifidobacterium )과 프로피온산 박테리움(propionic acid bacterium)의 조합물이며, 이 때, 모든 비피도박테리움이 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS, DSM 7067)과 함께 사용될 수 있다.
상기 신규한 조합물은 그 자체로 사용될 수 있고 약물 또는 식품과 같은 다른 산물의 일부분으로써 사용될 수 있다.
본 발명의 조합물은 엔테로락톤(entero-lactone) 생산을 증가시키고 바람직하지 못하게 높은 pH 값을 감소시켜 인간장내 균형에 유리한 효과를 갖는다. 상기 조합물은 또한 림프구와 γ -인터페론(IFN)의 양을 증가시키고 발암성 물질의 생성을 감소시킴으로써 면역 반응에 영향을 미친다. 따라서, 본 발명의 조합물은 장질환, 알레르기 및 암의 예방과 치료 및 전반적인 건강 증진에 유용하다.
따라서, 본 발명에 있어서, 상기 조합물은 또한 치료 물질로서 적용될 수 있고 치료 물질 제제에 적용될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 균주들 중에서, 락토바실러스 람노서스 GG( Lactobacillus rhamnosus GG, LGG), 락토바실러스 카세이 아종 람노서스 LC705( Lactobacillus casei ssp. rhamnosus LC705) 및 프로피오니박테리움 프로이덴라 이히 아종 쉐르마니 JS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii JS, PJS)는 본 발명이 속하는 기술분야에 개시되어 있다. 상기 조합물에 포함되는 비피도박테리움 인판티스 Bbi99( Bifidobacterium infantis Bbi99)는 신규 한 균주이며, 매우 상세히 후술할 것이다.
락토바실러스 람노서스 GG( Lactobacillus rhamnosus GG, LGG)는 예컨대, 미국특허 US 5,032,399 (Gorbach amp; Goldin)에 개시되어 있다. 이 균주는 인간 배설물로부터 분리되며, pH 3에서 잘 자랄 수 있으며, 고함량의 담즙산 에서 뿐 아니라 보다 낮은 pH에서도 생존한다. 상기 균주는 점액과 상피세포 모두에 우수한 부착력(adhesion)을 나타낸다. 글루코오스로부터 얻어지는 락트산(lactic acid) 수율이 우수하다: 상기 균주를 MRS 브로스(broth)에서 키울때 1.5 -2 %의 유산을 생산한다. 상기 균주는 락토오스를 발효시키지 않기 때문에 락토오스로부터 락트산을 생산하지 않는다. 상기 균주는 다음과 같은 탄수화물을 사용한다: D-아리비노오스, 리보오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-프룩토오스, D-만노오스, 람노오스, 둘시톨(dulcitol), 이노시톨(inositol), 만니톨(mannitol), 소르비톨(sorbitol), N-아세틸글루코사민, 아미그달린(amygdalin), 아르부틴(arbutin), 에스쿨린(esculin), 살리신(salicin), 셀로비오스(cel
lobiose), 말토오스, 사카로오스, 트레할로오스(trehalose), 멜레지토오스(melezitose), 겐티비오스(gentibiose), D-타가토오스(D-tagatose), L-푸코오스(L-fucose) 및 글루코네이트(gluconate). 상기 균주는 +15 - 45 ℃에서 잘 자라며, 최적 온도는 30 - 37 ℃이다. 락토바실러스 람노서스 GG는 기탁기관 American Type Culture Collection에 기탁번호 ATCC 53103로 기탁되었다.
락토바실러스 카세이 아종 람노서스 LC705( Lactobacillus casei ssp. rhamnosus LC705)는 핀란드 특허 제92498호 (Valio Oy)에 매우 상세히 기재되어 잇다. LC705는 연쇄상으로 생기는 짧은 그람-양성 간균이고; 동종 발효성이며; 약하게 단백질 분해성이고; +15 - 45 ℃에서에서 잘 자라며; 아르기닌으로부터 암모니아를 생성하지 않으며; 카탈라아제-음성(catalase-negative)이고; 상기 균주를 MRS 브로스(LAB M)에서 키울 때, L(+) 입체구조의 광학 활성을 갖는 락트산을 1.6 % 생산하며; 상기 균주는 시트레이트(0.169%)를 분해하여 디아세틸 및 아세토인을 생성하고; 상기 균주는 적어도 다음과 같은 탄수화물(당, 당알코올)을 발효시킨다: 리보오스, 갈락토오스, D-글루코오스, D-프룩토오스, D-만노오스, L-소르보오스(L-sorbose), 람노오스, 만니톨, 소르비톨, 메틸-D-글루코시드, N-아세틸글루코사민, 아미그달린, 아그부틴, 에스쿨린, 살리신, 셀로비오스, 말토오스, 락토오스, 수크로오스, 트레할로오스, 멜레지토오스, 겐티오비오스, D-투라노오스(D-turanose) 및 D-타가토오스. LC705는 점액세포에 약하게 부착하지만
상피세포에는 적당하게 부착한다. 상기 균주의 생존률은 낮은 pH 값 및 고함량의 담즙산에서 우수하다. 상기 균주는5 % 염분에서 잘 생존하며, 10 % 염분에서 보다 잘 생존한다. 락토바실러스 카세이 아종 람노서스 LC705는 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM)에 기탁번호 DMS 7061로 기탁되어 있다.
프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 JS ( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii JS, PJS) 또한 핀랜드 특허 제92498호 (Valio Oy)에 상세히 개시되어 있다. PJS는 짧은 그람-양성 간균이고; 글루코오스, 프룩토오스, 갈락토오스 및 락토오스를 발효시키고; 락테이트를 잘 발효시키고; 최적 성장 온도는 32 ℃이다. 상기 균주의 생존률은 낮은 pH 및 고함량의 담즙산에서 우수하다. 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 JP는 Deutsche Sammiung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM)에 기탁번호 DSM 7067로 기탁되어 있다.
비피도박테리움 인판티스 Bbi99(Bifidobacterium infantis Bbi99)를 건강한 신생아의 배설물로부터 분리하였다. 비피도박테리움 인판티스 Bbi99는 그람-양성 다형성 간균이다. 상기 균주는 카탈라아제-음성이고, 프룩토오스-6-포스페이트-포스포케토라아제(F6PPK)-양성이고, α - 및 β -갈락토시다아제 및 α - 및 β -글루코시다아제 모두에 양성이다. 비피도박테리움 인판티스 Bbi는 다음과 같은 탄수화물을 발효시킨다: 리보오스, 갈락토오스, D-글루코오스,D-프룩토오스, D-만노오스, 메틸-D-만노오스, N-아세틸글루코사민, 에스쿨린, 살리신, 셀로비오스, 말토오스, 멜리비오스 및 겐티비오스. 최적 성장 온도는 30 - 40 ℃이며 pH는 6.5 - 7.0이다. 상기 균주를 헥소오스를 포함하는 브로스에서 키우면, L-락트산 및 아세트산(2:3의 비율)을 생산한다. DNA의 G+C 함량은 55 - 67 몰%이다. 비피도박테리움 인판티스 Bbi99를 부다페스트 조약에 따라 2000년 8월 28일자로 Deutsche Sammiung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM)에 기탁번호 DSM 13692로 기탁하였다.
본 발명의 조합물은 또한 낙농 산업에 사용되는 발효제(starter)에 포함된 프로바이오틱스 및 미생물과 같은 다른 미생물을 포함할 수 있다. Hansen A/S, (Denmark) 및 Danisco/Wiesby GmbH (Germany)와 같은 제조업체로부터 상업적으로 입수할 수 있는 많은 발효제 균주가 잘 보고되어 있다.
본 발명의 조합물을 제조하기 위하여, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상적인 방법을 사용하여 미생물을 배양한다.이들을 순수한 배양물로서 또는 다른 혼합 배양물로서 배양할 수 있다. 상기 배양물은 그 자체로 사용하거나, 예컨대,정제, 농축, 동결건조 또는 마무리와 같이 원하는 바대로 처리하여 다양한 제제를 생산할 수 있다.원하는 프로바이오틱 효과를 얻기 위하여 충분한 양의 프로바이오틱스를 상기 조합물에 사용한다. 따라서, 각각의 프로바이오틱스의 양은, 예컨대, 사용되는 균주 및 그 수, 프로바이오틱스 세포의 총량, 1일 총 복용량 및 산물의 다른특성 및 성분에 따라서 넓은 범위에서 다양한 값을 가질 수 있다. 상기 조합물의 1일 복용량은 일반적으로 약 10 6 -10 10 cfu의 프로바이오틱스를 포함한다.
한 가지 이상의 프리바이오틱스를 상기 조합물에 첨가하여 신바이오틱스를 생성하는 것이 바람직하다. 상기 프리바이오틱스는 상기 관련 조합물에 포함된 미생물에 따라 상기 미생물의 성장을 지원할 수 있는 것으로 선택된다. 적절한프리바이오틱스는, 예컨대, 올리고사카라이드(oligosaccharides), 특히 갈락토올리고사카라이드(galactooligosaccharide, GOS), 팔라티노스올리고사카라이드(palatinoseoligosaccharide), 대두 올리고사카라이드(soybean oligosaccharide), 겐티오올리고사카라이드(gentiooligosaccharide), 크실로올리고머(xylooligomers), 비-분해성 녹말(non-degradable starch), 락토사카로오스(lactosaccharose), 락툴로오스(lactulose), 락티톨(lactitol), 말티톨(maltitol),폴리덱스트로오스(polydextrose) 등을 포함할 수 있다. 프리바이오틱 효과를 얻기 위하여 충분한 양의 프리바이오틱스를 신바이오틱스에 첨가한다. 충분한 양이 얼마인가는 예컨대 관련 균주, 포함된 프리바이오틱스 및 다른 내용물의 양 및 산물의 적용에 따라서 결정된다. 따라서, 그 양 또한 넓은 범위에서 다양한 값을 가질 수 있다; 예컨대, 1일 복용
량에 있어서 0.5 내지 5 g 일 수 있다.
Claims (6)
- 미생물 락토바실러스 람노서스 LGG( Lactobacillus rhamnosus LGG, ATCC 53103), 락토바실러스 람노서스 LC705( Lactobacillus rhamnosus LC705, DSM 7061), 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS, DSM7067) 및 비피도박테리움 중에서 3 가지 이상을 포함하거나,프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS( Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii PJS, DSM7067) 및 비피도박테리움을 포함하는 것을 특징으로 하는 조합물.
- 제 1 항에 있어서, 락토바실러스 람노서스 LGG (ATCC 53103), 락토바실러스 람노서스 LC705 (DSM 7061), 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS (DSM7067) 및 비피도박테리움을 포함하는 것을 특징으로 하는조합물.
- 제 1 항에 있어서, 프로피오니박테리움 프로이덴라이히 아종 쉐르마니 PJS (DSM7067) 및 비피도박테리움을 포함하는 것을 특징으로 하는 조합물.
- 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 비피도박테리움이 비피도박테리움 인판티스 Bbi99( Bifidobacterium infantis Bbi99, DSM 13692)인 것을 특징으로 하는 조합물.
- 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 통상적인 발효제 미생물을 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 조합물.
- 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 프리바이오틱스를 추가적으로 포함하거나 프리바이오틱스와 함께 사용되는 것을 특징으로 하는 조합물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190152697A KR20210064510A (ko) | 2019-11-25 | 2019-11-25 | 장내 유익균 증가 효과를 가지는 락토바실러스 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190152697A KR20210064510A (ko) | 2019-11-25 | 2019-11-25 | 장내 유익균 증가 효과를 가지는 락토바실러스 조성물 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210064510A true KR20210064510A (ko) | 2021-06-03 |
Family
ID=76396571
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020190152697A KR20210064510A (ko) | 2019-11-25 | 2019-11-25 | 장내 유익균 증가 효과를 가지는 락토바실러스 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20210064510A (ko) |
-
2019
- 2019-11-25 KR KR1020190152697A patent/KR20210064510A/ko unknown
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