KR20210049642A - Pharmaceutical composition comprising the extraction of cattail pollen as an effective component for prevention or treatment of diabetes and health functional food comprising the same - Google Patents

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KR20210049642A
KR20210049642A KR1020190134184A KR20190134184A KR20210049642A KR 20210049642 A KR20210049642 A KR 20210049642A KR 1020190134184 A KR1020190134184 A KR 1020190134184A KR 20190134184 A KR20190134184 A KR 20190134184A KR 20210049642 A KR20210049642 A KR 20210049642A
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손호용
박종이
이만효
표수진
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재단법인 경북바이오산업연구원
안동대학교 산학협력단
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Abstract

The present invention relates to a pharmaceutical composition and a health functional food for preventing or treating diabetes comprising an extract of pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient, and more specifically, to a pharmaceutical composition and a health functional food for preventing or treating/alleviating diabetes, comprising an ethyl acetate fraction of an ethanol extract of pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient. As an active ingredient of the anti-diabetic composition of the present invention, the extract of pollen of Typha augustifolia L. exhibits an excellent effect, which can be used in the medicine and health functional food for preventing and alleviating diabetes as proven through an embodiment of the present specification. Furthermore, the extract of pollen of Typha augustifolia L. of the present invention shows no loss of starch degrading enzyme inhibitory activity even under acidic conditions of pH 2 and in plasma, and is easily processed into various forms such as liquids, creams, powders, pills, tablets, etc., and thus is very useful in the pharmaceutical industry and food industry.

Description

부들 화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품{PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING THE EXTRACTION OF CATTAIL POLLEN AS AN EFFECTIVE COMPONENT FOR PREVENTION OR TREATMENT OF DIABETES AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD COMPRISING THE SAME}Pharmaceutical composition and health functional food for prevention or treatment of diabetes containing the extract of pumice pollen as an active ingredient {PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING THE EXTRACTION OF CATTAIL POLLEN AS AN EFFECTIVE COMPONENT FOR PREVENTION OR TREATMENT OF DIABETES AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD COMPRISING THE SAME}

본 발명은 부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병(diabetes)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는, 부들 화분의 에탄올 추출물을 유효성분으로 하는 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition and health functional food for the prevention or treatment of diabetes containing a pollen (Pollen of Typha augustifolia L.) extract as an active ingredient, and more specifically, an ethanol extract of a pollen of Typha It relates to a pharmaceutical composition and health functional food for preventing or treating/improving diabetes using as an active ingredient.

현대인에게 가장 흔한 질병중 하나인 당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 등의 대사 질환의 일종으로서 혈중 포도당 농도가 높은 것이 특징이며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으킨다. Diabetes, one of the most common diseases in modern people, is a type of metabolic disease such as insufficient secretion of insulin or inability to function normally. It is characterized by high blood glucose concentration and causes various symptoms and signs due to high blood sugar.

당뇨병은 제1형과 제2형으로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 유전적 영향에 의해 인슐린을 전혀 생산하지 못하는 것이 원인이 되어 발생하며, 제2형 당뇨병은 인슐린 기능이 떨어져 인슐린 저항성(insulin resistance)이 원인으로 알려져 있다. 특히, 제2형 당뇨병은 식생활의 서구화에 따른 고열량, 고지방, 고단백의 식단, 운동부족, 스트레스 등 환경적인 요인이 크게 작용하는 것으로 알려져 있다. Diabetes is classified into type 1 and type 2. Type 1 diabetes is caused by the inability to produce insulin at all due to genetic effects, and type 2 diabetes is caused by poor insulin function and insulin resistance. ) Is known as the cause. In particular, type 2 diabetes is known to be largely affected by environmental factors such as high calorie, high fat, high protein diet, lack of exercise, and stress due to westernization of diet.

당뇨병의 치료를 위해서는 제1형 당뇨병의 경우에는 인슐린 주사가 필수적이며, 제2형 당뇨병의 경우에는 생활습관 교정 및 약물치료가 필요하며, 대표적으로 인슐린 분비 촉진제(예, 레파글리나이드, 미티글이나이드) 및 소장에서의 탄수화물 흡수 지연제[글루코바이: 성분명-아카보즈(acarbose), 베이슨: 성분명-보글리보스 (voglibose)] 등이 이용되고 있다.For the treatment of diabetes, insulin injection is essential in the case of type 1 diabetes, and lifestyle correction and drug treatment are necessary in the case of type 2 diabetes. Nide) and a delaying agent for carbohydrate absorption in the small intestine (glucobi: ingredient name-acarbose, bason: ingredient name-voglibose), and the like have been used.

한편, 부들(Typha augustifolia L.)은 부들과의 다년초 외떡잎식물로서, 연못이나 하천, 강, 늪지 등의 습지에 자라며 에서 볼 수 있는데, 근경이 가로로 뻗고 굵으며, 줄기는 원주형으로 곧게 서고, 잎은 선형으로서 좁고 길며 녹색이다. 국내에서는 주로 관상용, 꽃꽂이용으로 사용되고 있으며, 부들 화분(꽃가루)은 민간에서 지혈, 통증 완화, 이뇨 용도의 사용되고 있다. 한방에서는 특히 부들 화분을 포황(蒲黃)이라 하며, 맛이 달고 독성이 없어 지혈제, 자궁 출혈, 토혈, 출혈성하리, 탈항, 소염성 이뇨약, 치질, 대하증, 월경 불순, 방광염 등의 광범위한 용도의 약재로 사용하여 왔다.On the other hand, Typha augustifolia L. is a perennial monocotyledonous plant of the cattail family. It grows in wetlands such as ponds, rivers, rivers, and swamps, and can be found in. , Leaves are linear, narrow and long, green. In Korea, it is mainly used for ornamental and flower arrangements, and caterpillar pollen (pollen) is used in the private sector for hemostasis, pain relief, and diuresis. In oriental medicine, especially the pollen is called phohwang. It has a sweet taste and is not toxic, so it has a wide range of uses such as hemostatic agents, uterine bleeding, hemostatic, hemorrhagic hari, prolapse, anti-inflammatory diuretics, hemorrhoids, hypoplasia, menstrual impurities, cystitis, etc. It has been used as a medicinal material.

화분(Pollen)은 종자를 만드는 유관속 식물의 생식기관으로, 수컷 배우체를 보호하기 위해 견고한 껍질로 둘러싸여 있는 구조이며, 주로 바람이나 곤충에 의해 운반되어 암컷 배우체에 도달하여 수정한 후 종자를 형성한다. 화분은 곤충에 의해 매개되는 충매화분과 바람에 의해 매개되는 풍매화분이 있으며, 충매화분은 다래화분, 도토리 화분과 같은 단일식물 화분 및 다양한 식물 화분이 모인 잡화분으로 구분하며, 풍매화분은 대표적으로 송화분, 부들 화분을 들 수 있다.Pollen is a reproductive organ of a vascular plant that makes seeds. It is a structure surrounded by a sturdy shell to protect male gametes, and is transported mainly by wind or insects to reach female gametes and fertilize them to form seeds. Pollen is divided into chungmae pots mediated by insects and air pollen pots mediated by wind, and chungmae pots are divided into single plant pots such as darae pots and acorn pots, and miscellaneous pots in which various plant pots are collected. There is a potted plant.

통상 화분은 조단백 20~25%, 조지질 7~15%, 조회분 2~5%, 조탄수화물 20~50%, 수분 10~15%를 포함하고 있어 영양적으로 우수하며, 다양한 생리 활성 물질을 포함하여 영양보조제와 전통의약품으로 사용되어 왔다. 그러나, 화분은 'sporopollenin'이라는 두꺼운 층으로 구성된 외피(extine)와 내피(intime)로 구성되어 있어 그 자체로는 소화, 분해가 되지 않아 생체이용률은 10~15%로 낮다는 문제점이 있으며(Pyeon HI, 2018, Journal of Life Science 28: 605~614), 다양한 식물로부터 기인하여 미생물학적 오염이 나타날 수 있으며, 쉽게 부패하는 단점도 있다. 또한, 서양 지치꽃 화분에서 간독성, 폐독성 및 발암성이 의심되는 독성물질(1,2-dehydro pyrollizidine alkaloids)이 확인된 바도 있다(Boppre, M 등, J. Agric. Food Chem. 53, 594-600). Usually, pollen contains 20 to 25% crude protein, 7 to 15% crude lipid, 2 to 5% crude ash, 20 to 50% crude carbohydrate, and 10 to 15% moisture, so it is excellent nutritionally and contains various physiologically active substances. Including, it has been used as a nutritional supplement and traditional medicine. However, the pollen is composed of a thick layer called'sporopollenin', an extine and an intime, so it cannot be digested or decomposed by itself, so the bioavailability is low, 10-15% (Pyeon HI, 2018, Journal of Life Science 28: 605~614), microbiological contamination may occur due to various plants, and there is also a disadvantage of easily decaying. In addition, toxic substances (1,2-dehydro pyrollizidine alkaloids) suspected of hepatotoxicity, lung toxicity, and carcinogenicity have been identified in pollen of Western borer flowers (Boppre, M et al., J. Agric. Food Chem. 53, 594- 600).

따라서, 기존의 화분에 대한 연구는, 화분의 영양학적 특성과 견고한 외피를 분해하여 소화흡수를 증진시키기 위한 추출 조건, 전처리 방법 개발에 주로 집중되어 있다. 최근에는 유용 생리활성에 대한 연구가 진행되고 있으며, 혈관 및 순환계, 소화계, 신진대사계, 노화 등 다양한 질환에 효과가 있다고 알려지고 있으며, 항균 및 항산화 효능, 면역증강 효과, 전립선 비대증 및 전립선염 치료 효과 등이 보고되었다(최 등, 2007, Korean J. Food preserv. 14, 87-93; Abouda et al., 2011, J. Microbiol. 6, 376-384; Li et al., 2009, Carbohydrate Polymers 78, 80-88; 홍인표 외, 2016, Journal of Apiculture 31, 219-225; 홍인표, 2014, Journal of Apiculture 29, 137-142; 박용기 외, 2015. Journal of Apiculture 30, 299-306; 김석중 외, 2005, 한국식품과학회지 37, 833-837). Therefore, the research on the existing pollen is mainly focused on the development of extraction conditions and pretreatment methods for enhancing digestion and absorption by decomposing the nutrient properties of the pollen and the robust outer shell. In recent years, research on useful physiological activity is being conducted, and it is known to be effective in various diseases such as vascular and circulatory system, digestive system, metabolic system, and aging. Antibacterial and antioxidant effects, immunity enhancing effects, prostatic hyperplasia and prostatitis treatment Effects, etc. have been reported (Choi et al., 2007, Korean J. Food preserv. 14, 87-93; Abouda et al., 2011, J. Microbiol. 6, 376-384; Li et al., 2009, Carbohydrate Polymers 78 , 80-88; In-pyo Hong et al., 2016, Journal of Apiculture 31, 219-225; In-pyo Hong, 2014, Journal of Apiculture 29, 137-142; Yong-ki Park et al., 2015. Journal of Apiculture 30, 299-306; Seok-joong Kim et al., 2005 , Korean Journal of Food Science and Technology 37, 833-837).

현재까지 화분의 항당뇨 효과는 민간에서 일부 인정하고 있으나, 일부에서는 화분의 많은 당 함유로 인해 오히려 당뇨 환자가 피해야 할 식품 원료로 이해되고 있어 상반된 의견이 존재하고 있다. 양봉 부산물 중, 로얄젤리와 프로폴리스에는 항당뇨 효과가 보편적으로 인정되고 있으나, 화분은 밀원 식물의 종류에 따라 구성성분이 크게 변화하므로 당뇨와 관련된 활성을 이해하기는 매우 어려운 실정이다. Until now, the anti-diabetic effect of pollen has been partially recognized by the private sector, but some have contradicted opinions as it is understood as a food ingredient that diabetic patients should avoid due to the high sugar content of pollen. Among the by-products of beekeeping, royal jelly and propolis have an antidiabetic effect, but pollen is very difficult to understand the diabetes-related activity because the composition of pollen varies greatly depending on the type of plant.

과학적 근거하의 화분의 항당뇨 효과는 부들 화분의 고분자 다당류(Lei X 등, 2018. J Ethnopharmacol. 224:169-176) 및 해당화 화분의 고분자 다당류(Li X et al. 2017, Molecules. 22(5): E699)에 의한 항당뇨 효과가 알려져 있으나, 이는 화분의 고분자 다당류에 의한 당뇨 합병증과 인슐린 내성 개선 효과로 제한되어 있는 실정이다. 또한, 부들 화분의 플라본 성분이 인슐린 내성을 개선함이 보고(Feng, Xiao-Tao 등, 2014, Bioscience, Biotechnology, Biochemistry 78: 1738-1742)되어 있으며, 대추야자 화분이 당혈증(glycemia)를 완화함이 알려져 있다(Mohamed, Nema A. 2018, Biomedicine & Pharmacotherapy 97: 9-18). The antidiabetic effect of pollen on scientific basis was determined by the high molecular weight polysaccharides of caterpillar pollen (Lei X et al., 2018. J Ethnopharmacol. 224:169-176) and macromolecular polysaccharides of the pollen (Li X et al. 2017, Molecules. 22(5)). : The antidiabetic effect of E699) is known, but this is limited to the effect of improving insulin resistance and diabetic complications caused by high molecular polysaccharides in pollen. In addition, it has been reported that the flavone component of caterpillar pollen improves insulin resistance (Feng, Xiao-Tao et al., 2014, Bioscience, Biotechnology, Biochemistry 78: 1738-1742), and date palm pollen relieves glycemia. It is known (Mohamed, Nema A. 2018, Biomedicine & Pharmacotherapy 97: 9-18).

그러나, 현재까지 부들 화분의 특정 지용성 성분이 강력한 α-glucosidase 및 β-amylase 저해를 통한 항당뇨 활성을 나타냄은 알려진 바 없다. However, until now, it has not been known that a specific fat-soluble component of caterpillar pollen exhibits antidiabetic activity through strong α-glucosidase and β-amylase inhibition.

Lei X 등, 2018. J Ethnopharmacol. 224:169-176 Lei X et al., 2018. J Ethnopharmacol. 224:169-176 Li X et al. 2017, Molecules. 22(5): E699 Li X et al. 2017, Molecules. 22(5): E699 Feng, Xiao-Tao 등, 2014, Bioscience, Biotechnology, Biochemistry 78: 1738-1742 Feng, Xiao-Tao et al., 2014, Bioscience, Biotechnology, Biochemistry 78: 1738-1742 Mohamed, Nema A. 2018, Biomedicine & Pharmacotherapy 97: 9-18 Mohamed, Nema A. 2018, Biomedicine & Pharmacotherapy 97: 9-18

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 부들 화분 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품을 제공하고자 하는 것이다.The present invention was conceived to solve the problems of the prior art as described above, and the problem to be solved in the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating diabetes containing a pollen extract as an active ingredient and a health functional food I want to.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating diabetes containing an ethanol extract of Pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient.

상기 부들 화분 에탄올 추출물은 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.It is preferable that the potted plant ethanol extract is a hexene fraction or an ethyl acetate fraction of the potted plant ethanol extract.

또한, 본 발명은 부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food for preventing or improving diabetes containing an ethanol extract of Pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient.

상기 부들 화분 에탄올 추출물은 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.It is preferable that the potted plant ethanol extract is a hexene fraction or an ethyl acetate fraction of the potted plant ethanol extract.

본 발명의 항당뇨 조성물의 유효성분으로서의 부들 화분 추출물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 당뇨병의 예방 또는 개선용 의약품 및 건강 기능 식품으로 사용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다. 뿐만 아니라, 본 발명의 부들 화분 추출물은 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성조건 및 혈장 내에서도 전분분해효소 저해활성의 손실이 나타나지 않아, 액상, 크림, 분말, 환, 정 등의 다양한 형태로 손쉽게 가공될 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용하게 이용될 수 있다.Budeul pollen extract as an active ingredient of the antidiabetic composition of the present invention, as proven through the examples of the present specification, has excellent effects that can be used as medicines and health functional foods for preventing or improving diabetes. In addition, the Budeul pollen extract of the present invention has excellent thermal stability and does not show any loss of starch degrading enzyme inhibitory activity even in the acidic condition of pH 2 and plasma, so it can be easily used in various forms such as liquid, cream, powder, pills, tablets, etc. Because it can be processed, it can be very useful in the pharmaceutical industry and the food industry.

도 1은 부들 화분의 사진도이다.
도 2는 부들 화분의 현미경(200배) 관찰 사진도이다.
1 is a photograph of a potted plant.
2 is a microscope (200 times) observation photograph of a potted plant.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 발명자들은 부들 화분을 대상으로 항당뇨 효능을 검정하기 위하여, 일정 방법으로 부들 화분 추출물을 조제하고, 이의 에탄올 추출물을 항당뇨 활성 성분으로 회수하였으며, 상기 에탄올 추출물은 열 안정성과 산 안정성이 우수한 특징을 가짐을 확인함으로서 상기 부들 화분 추출물을 항당뇨 조성물로 활용하고자 하였다. In order to test the anti-diabetic efficacy of the caterpillar pollen, the inventors of the present invention prepared caterpillar pollen extract by a certain method, and recovered the ethanol extract thereof as an antidiabetic active ingredient, and the ethanol extract has thermal stability and acid stability. By confirming that it has excellent characteristics, it was attempted to utilize the potted plant extract as an antidiabetic composition.

구체적으로, 본 발명자들은 혈관 및 순환계, 소화계, 신진대사계 등의 다양한 질환에 효과가 있다고 알려진 부들 화분을 이용하여 항당뇨 조성물을 개발하기 위하여, 부들 화분을 대상으로 열수 및 에탄올 추출물을 조제하고, 에탄올 추출물을 대상으로 순차적 유기용매 분획물을 조제한 후, 이의 β-amylase 및 α-glucosidase에 대한 저해 활성을 평가한 결과, 부들 화분 에탄올 추출물과 이의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물에서 강력한 β-amylase 및 α-glucosidase 효소 저해활성을 확인하였다.Specifically, the present inventors prepared hot water and ethanol extracts for the potted pots in order to develop an antidiabetic composition using potted plants known to be effective in various diseases such as vascular and circulatory system, digestive system, and metabolic system, After preparing sequential organic solvent fractions from the ethanol extract, their inhibitory activity against β-amylase and α-glucosidase was evaluated. As a result, potent β-amylase and α- in the ethanol extract of Budeul pollen and its hexene fraction and ethyl acetate fraction. The inhibitory activity of the glucosidase enzyme was confirmed.

따라서, 본 발명은 부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.Accordingly, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating diabetes containing an ethanol extract of Pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient.

상기 부들 화분 에탄올 추출물은 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.It is preferable that the potted plant ethanol extract is a hexene fraction or an ethyl acetate fraction of the potted plant ethanol extract.

또한, 본 발명은 부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food for preventing or improving diabetes containing an ethanol extract of Pollen of Typha augustifolia L. as an active ingredient.

상기 부들 화분 에탄올 추출물은 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하다.It is preferable that the potted plant ethanol extract is a hexene fraction or an ethyl acetate fraction of the potted plant ethanol extract.

이하에서는, 본 발명의 부들 화분 에탄올 추출물 및 이의 항당뇨 활성 분획물의 제조 방법 및 효능 실험 등을 보다 구체적으로 설명한다.Hereinafter, a method for preparing the ethanol extract of Budeul pollen of the present invention and an antidiabetic active fraction thereof and an efficacy experiment will be described in more detail.

본 발명의 발명자들은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 부들 화분으로부터 추출물을 조제하는 단계; 부들 화분 에탄올 추출물로부터 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올의 순차적 유기용매 분획물 조제 및 이후 얻어지는 물 잔류물의 조제 단계; 상기 추출물 및 분획물의 항당뇨 활성 평가 단계; 및 에탄올 추출물, 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물의 안정성 조사 단계를 포함한다.The inventors of the present invention, in order to achieve the object of the present invention, preparing an extract from a potted plant; A step of preparing sequential organic solvent fractions of hexene, ethyl acetate, and butanol from the ethanol extract of puppet pollen and preparing a water residue obtained thereafter; Antidiabetic activity evaluation step of the extracts and fractions; And a stability investigation step of the ethanol extract, the hexene fraction and the ethyl acetate fraction.

본 발명의 조성물에 포함되는 "부들 화분 추출물"은 부들 화분을 유기용매로 추출하는 단계 및 상기 추출액을 0.06mm 이하의 여과망을 사용하여 여과하고, 이를 감압농축하는 단계에 의해 수득될 수 있다.The "Budeul pollen extract" included in the composition of the present invention may be obtained by extracting the Budeul pollen with an organic solvent and filtering the extract using a filter net of 0.06mm or less, and concentrating it under reduced pressure.

본 발명에서 사용되는 용매는 물(냉수, 열수), 주정, 탄소수 1~4의 무수 또는 함수 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 주정, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매 등을 이용할 수 있으며, 열수, 또는 95% 에탄올 추출이 가장 바람직하다.The solvent used in the present invention includes water (cold water, hot water), alcohol, anhydrous or hydrated lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, alcohol, propanol, butanol, etc.), and a mixed solvent of the lower alcohol and water. Hot water, or 95% ethanol extraction is most preferred.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 부들 화분을 열수 또는 에탄올로 추출할 수 있다. 또한, 상기 열수 또는 에탄올 추출물은 헥센, 에틸아세테이트 및 부탄올의 유기용매로 순차 또는 각각 분획하여 헥센 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 잔류물을 추가적으로 수득할 수도 있다. As a preferred embodiment, the potted plant of the present invention may be extracted with hot water or ethanol. In addition, the hot water or ethanol extract may be sequentially or separately fractionated with an organic solvent of hexene, ethyl acetate and butanol to additionally obtain a hexene fraction, an ethyl acetate fraction, a butanol fraction, and a water residue.

본 발명의 부들 화분 에탄올 추출물과 이의 헥센 또는 에틸아세테이트 분획물은 감압건조 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말로 제조될 수 있다. 상기 활성 추출물 및 분획물들은 혈장 내의 다양한 분해효소에 분해되지 않으며, 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.The ethanol extract of Budeul pollen of the present invention and the hexene or ethyl acetate fraction thereof may be prepared as a powder through a conventional powdering process such as vacuum drying, freeze drying, or spray drying. The active extracts and fractions are not decomposed by various degrading enzymes in plasma, and maintain activity even at a heat treatment of 100° C. and a pH in the stomach of the human body at pH 2.

본 발명의 부들 화분 에탄올 추출물, 이의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물은 강력한 β-amylase 및 α-glucosidase에 대한 전분 분해효소 저해 활성을 나타내어, 제1형 당뇨병, 제2형 당뇨병 또는 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증 등과 같은 당뇨 합병증의 예방 및 치료/개선과 관련되는 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 소재로 사용될 수 있다.The ethanol extract of puppet pollen of the present invention, its hexene fraction and ethyl acetate fraction exhibit potent inhibitory activity against starch degrading enzymes against β-amylase and α-glucosidase, and thus type 1 diabetes, type 2 diabetes or diabetic retinopathy, diabetic It can be used as a material for a pharmaceutical composition and health functional food related to the prevention and treatment/improvement of diabetic complications such as nephropathy.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 항당뇨 조성물은 약학적 조성물의 용도로서 적용될 수 있다. As a preferred embodiment, the antidiabetic composition of the present invention can be applied as a pharmaceutical composition.

상기 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다. The pharmaceutical composition is formulated in various forms such as oral formulations such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, and injections of sterile injectable solutions according to a conventional method according to each purpose of use. It may be used, and may be administered orally, or administered through various routes including intravenous, intraperitoneal, subcutaneous, rectal, topical administration, and the like. Such pharmaceutical compositions may further include a carrier, excipient, or diluent, and examples of suitable carriers, excipients or diluents that may be included include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, Starch, gum acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, amorphous cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil And the like. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may further include a filler, an anti-aggregating agent, a lubricant, a wetting agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a preservative, and the like.

본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. In the present invention, "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is the type of disease, severity, drug activity, Sensitivity to the drug, time of administration, route of administration and rate of excretion, duration of treatment, factors including drugs used concurrently, and other factors well known in the medical field. The pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or administered in combination with another therapeutic agent, may be administered sequentially or simultaneously with a conventional therapeutic agent, and may be administered single or multiple. It is important to administer an amount capable of obtaining the maximum effect in a minimum amount without side effects in consideration of all the above factors, and this can be easily determined by a person skilled in the art.

본 발명의 약학적 조성물에서 항당뇨 활성을 갖는 성분의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intra-cerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다. 본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다. The effective amount of the component having antidiabetic activity in the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on the age, sex, and body weight of the patient, and is generally 1 to 5,000 mg per body weight, preferably 100 to 3,000 mg daily or every other day. It can be administered or divided into 1 to 3 times a day. However, since it may increase or decrease according to the route of administration, the severity of the disease, sex, weight, age, etc., the dosage amount does not limit the scope of the present invention in any way. The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to a subject through various routes. All modes of administration can be expected and can be administered, for example, by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dura mater or intra-cerebroventricular injection. In the present invention, "administration" means providing a predetermined substance to a patient by any suitable method, and the route of administration of the pharmaceutical composition of the present invention is oral or parenteral through all general routes as long as it can reach the target tissue. It can be administered orally. In addition, the composition of the present invention may be administered using any device capable of delivering an active ingredient to target cells. In the present invention, the "subject" is not particularly limited, but includes, for example, a human, a monkey, a cow, a horse, a sheep, a pig, a chicken, a turkey, a quail, a cat, a dog, a mouse, a mouse, a rabbit, or a guinea pig. And, preferably, it means a mammal, more preferably a human.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 항당뇨 조성물은 건강 기능 식품의 용도로서 적용될 수 있다. As a preferred embodiment, the antidiabetic composition of the present invention can be applied as a health functional food.

본 발명의 항당뇨 활성이 우수한 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다. 본 발명의 활성 성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 15중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100 ml를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다. 본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다. 상기 향미제로는 타우마틴, 레바우디오시드 A, 글리시르히진, 사카린, 아스파르탐 등을 사용할 수 있다. 상기 향미제의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 상기 활성 분획물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.Foods containing an active ingredient having excellent antidiabetic activity of the present invention include, for example, various foods, beverages, gum, tea, vitamin complexes, health supplement foods, etc., and powders, granules, tablets, capsules or beverages. Can be used in the form. In general, the active ingredient of the present invention may be added in an amount of 0.01 to 15% by weight of the total food weight, and the health beverage composition may be added in an amount of 0.02 to 10g, preferably 0.3 to 1g, based on 100 ml. The health functional food of the present invention may contain the compound as an essential component in the indicated ratio as an additional component, as well as food supplementary additives acceptable for food, such as natural carbohydrates and various flavoring agents. Examples of the natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. Taumatin, rebaudioside A, glysirhizin, saccharin, aspartame, and the like may be used as the flavoring agent. The proportion of the flavoring agent is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 ml of the health functional food of the present invention. In addition to the above, the health functional food of the present invention includes a variety of nutrients, vitamins, minerals, synthetic flavors and natural flavors, and other flavoring agents, coloring agents and thickeners, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloids. It may contain thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the health functional food of the present invention may contain pulp for the production of natural fruit juices, fruit juice beverages, and vegetable beverages. These components may be used independently or in combination. The proportion of these additives is generally selected in the range of 0.01 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the active fraction of the present invention.

이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 일 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. The following examples are only a preferred specific example of the present invention, and the scope of the present invention is not limited to the scope of the following examples.

[실시예][Example]

실시예 1: 부들 화분의 이화학적 특성 및 영양성분 분석Example 1: Analysis of Physicochemical Properties and Nutritional Components of Cattail Pollen

실험에 사용한 부들 화분은 2018년 경북 안동에서 수확한 부들 화분으로서 진노랑의 미세 과립으로 명도 59.44, 적색도 0.35, 황색도는 30.49를 나타내었으며, pH 5.6, brix 20.0, 산도 0.51을 나타내어 약간 시큼한 단맛을 나타내었다. 수분함량은 12.5%로 건조된 상태로, 장시간 실온에 방치시 수분을 다시 흡습할 수 있는 상태였다(도 1, 표 1). 현미경(200배) 관찰 결과 부들 화분은 단립의 구형으로, 표면은 과립상으로 도토리 화분과 유사하였으며, 그물무늬 날개구조가 없어 대표적인 풍매화분인 송화분과도 차별화되었다(도 2). Caterpillar pollen used in the experiment was a caterpillar pollen harvested in Andong, Gyeongbuk in 2018. It had a lightness of 59.44, a redness of 0.35, and a yellowness of 30.49 as fine granules of jin yellow. Indicated. The moisture content was in a dried state of 12.5%, and when left at room temperature for a long time, moisture was absorbed again (FIG. 1, Table 1). As a result of observation under a microscope (200 times), the caterpillar pollen was a single-grained spherical shape, and the surface was granular, similar to the acorn pollen, and was differentiated from the typical wind plum pollen, Songhwabun, because there was no net patterned wing structure (Fig. 2).

[표 1] 부들 화분의 이화학적 특성 및 색차 분석[Table 1] Analysis of Physicochemical Characteristics and Color Difference of Cattail Pollen

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영양성분 분석 결과, 조단백 18.2%, 조지방 1.0%, 조탄수화물 64.1%를 나타내어 338 kcal/100g으로 우수하였으며, 회분 함량도 4.2%를 나타내어 다양한 미네랄을 대량으로 포함하고 있었다(표 2). As a result of nutritional analysis, crude protein 18.2%, crude fat 1.0%, and crude carbohydrate 64.1% were excellent at 338 kcal/100g, and ash content also showed 4.2%, which contained a large amount of various minerals (Table 2).

[표 2] 부들 화분의 영양성분 분석[Table 2] Analysis of nutrient composition of caterpillar pollen

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실시예 2: 부들 화분 추출물의 제조 및 이들의 유용 성분 분석Example 2: Preparation of Cattle Pollen Extract and Analysis of Their Useful Components

실시예 1의 부들 화분을 열수 및 에탄올 추출물 제조에 사용하였다. 구체적으로는 부들 화분 시료에 대해 10배의 에탄올을 가하고, 상온에서 2회 반복 추출한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하여 에탄올 추출물을 제조하였으며, 부들 화분 열수 추출물의 경우에는 부들 화분 시료에 대해 10배의 멸균 증류수를 가하고 100℃에서 1시간 2회 반복 추출한 후 상기와 동일하게 여과, 농축하였다. The potted plants of Example 1 were used to prepare hot water and ethanol extracts. Specifically, 10 times the amount of ethanol was added to the Budeul pollen sample, extracted twice at room temperature, collected and filtered, and concentrated under reduced pressure to prepare an ethanol extract. 10 times of sterilized distilled water was added to the pollen sample, and extraction was repeated at 100° C. for 1 hour twice, followed by filtration and concentration in the same manner as above.

부들 화분 추출물의 성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고, 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다. 이들의 분획 효율과 성분 분석 결과는 표 3에 나타내었다.Contents of total polyphenols, total flavonoids, total sugars and reducing sugars were measured by analysis of the components of the pollen extract. For the total polyphenol content, 50 μl of Folin-ciocalteau and 100 μl of Na 2 CO 3 saturated solution were added to 400 μl of the extraction sample, and the absorbance was measured at 725 nm after standing at room temperature for 1 hour. Tannic acid was used as a standard reagent. For the total flavonoid content, each sample was extracted with methanol for 18 hours, and 4 ml of 90% diethylene glycol was added to 400 μl of the filtered extraction sample solution, 40 μl of 1 N NaOH was added, and the absorbance was measured at 420 nm after 1 hour reaction at 37°C. As a standard reagent, rutin was used. Reducing sugar was quantified by DNS method and total sugar was quantified by phenol-sulfuric acid method. Their fractionation efficiency and component analysis results are shown in Table 3.

[표 3] 부들 화분 추출물의 추출 효율과 유용 성분 분석[Table 3] Analysis of Extraction Efficiency and Useful Components of Budeul Pollen Extract

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표 3에 나타낸 바와 같이, 부들 화분 에탄올 추출 효율은 12.5%로 열수 추출효율(29.8%)보다 낮았다. 또한, 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량은 열수 추출물에 비해 57.4% 수준으로 낮았으며, 총 플라보노이드 함량은 열수 추출물 및 에탄올 추출물에서 유사하게 나타났다. 또한, 총당 및 환원당 함량은 열수 추출물이 에탄올 추출물보다 2.7배 및 2.65배 높게 나타나, 열수 추출물은 대부분이 당으로 구성되어 있음을 알 수 있었다. As shown in Table 3, the efficiency of extracting ethanol from the potted plant was 12.5%, which was lower than that of the hot water extraction efficiency (29.8%). In addition, the total polyphenol content of the ethanol extract was 57.4% lower than that of the hot water extract, and the total flavonoid content was similar in the hot water extract and the ethanol extract. In addition, the contents of total sugar and reducing sugar were 2.7 times and 2.65 times higher in the hot water extract than in the ethanol extract, and it was found that most of the hot water extract was composed of sugar.

실시예 3: 부들 화분 추출물의 항당뇨 활성 평가 Example 3: Evaluation of Antidiabetic Activity of Cattle Pollen Extract

실시예 2에서 제조된 부들 화분 추출물의 항당뇨 활성을 평가하였으며, in-vitro β-amylase 저해 활성 및 α-glucosidase 저해 활성을 평가하여 나타내었다. 먼저, β-amylase(4-alpha-D-glucan maltohydrolase) 저해활성은 시료 2.5μl와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 α-amylase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μl를 가하여 37℃에서 10분간 2차 반응한 후 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150μl의 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) 용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다. The antidiabetic activity of the extract of Caterpillar pollen prepared in Example 2 was evaluated, and in-vitro β-amylase inhibitory activity and α-glucosidase inhibitory activity were evaluated and shown. First, β-amylase (4-alpha-D-glucan maltohydrolase) inhibitory activity was obtained by mixing 2.5 μl of a sample and 25 μl of α-amylase (0.25 U/ml) diluted with 50 mM phosphate buffer (pH 6.8) at 37°C for 10 minutes. After the first reaction, 25 μl of 0.5% soluble starch (Samchun Chemicals Co., Korea) was added and the second reaction was performed at 37°C for 10 minutes, and then the reaction was stopped by heating at 100°C for 5 minutes, and 150 μl of DNS in the reaction solution (3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) solution was added, heated at 100° C. for 5 minutes to develop color, and then allowed to cool at room temperature. The color developing solution was calculated by measuring the absorbance at 540 nm.

저해율 (%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] x 100Inhibition rate (%) = [1-(Enzyme activity after addition of sample/Enzyme activity after addition of control)] x 100

α-glucosidase 저해활성은 pNPG(p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA)를 이용하여 평가하였으며, 시료 2.5μl와 50mM Sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 2차 반응하였다. 이후, 1M NaOH 25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다. α-glucosidase inhibitory activity was evaluated using pNPG (p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA), and α-glucosidase (0.25 U/ml) 25 μl diluted with 2.5 μl of sample and 50 mM sodium acetate buffer (pH 5.6). The mixture was first reacted at 37° C. for 10 minutes, and 25 μl of a 1 mM pNPG solution was added, followed by a second reaction at 60° C. for 10 minutes. Thereafter, 25 μl of 1M NaOH was added to stop the reaction, and the inhibition rate was calculated by measuring the absorbance at 405 nm.

저해율 (%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] x 100Inhibition rate (%) = [1-(Enzyme activity after addition of sample/Enzyme activity after addition of control)] x 100

[표 4] 부들 화분 추출물의 항당뇨 활성[Table 4] Antidiabetic activity of extracts of pollen extract

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그 결과, 표 4에 나타낸 바와 같이, 임상에서 당뇨병 치료제로 사용하고 있는 acarbose는 농도 의존적으로 강력한 β-amylase 저해활성 및 α-glucosidase 저해활성을 나타내었다. 부들 화분의 열수 추출물의 경우, β-amylase 및 α-glucosidase 저해활성이 전혀 나타나지 않았으나, 에탄올 추출물의 경우, 0.5mg/ml 농도에서 매우 강력한 β-amylase 및 α-glucosidase 저해활성을 나타내었다. As a result, as shown in Table 4, acarbose, which has been used clinically as a therapeutic agent for diabetes, showed strong β-amylase inhibitory activity and α-glucosidase inhibitory activity in a concentration-dependent manner. In the case of the hot-water extract of Caterpillar pollen, the inhibitory activity of β-amylase and α-glucosidase was not observed at all, but the ethanol extract showed very strong β-amylase and α-glucosidase inhibitory activity at the concentration of 0.5mg/ml.

실시예 4: 부들 화분 에탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물의 제조 및 이들의 유용 성분 분석Example 4: Preparation of sequential organic solvent fractions of ethanol extract of Budeul pollen and analysis of useful components thereof

실시예 2의 부들 화분 에탄올 추출물 에탄올 추출물을 대상으로 헥센, 에틸아세테이트, 부탄올로 순차적 유기용매 분획하였으며, 최종적으로 물 잔류물을 회수하였다. 실시예 2에 기재된 분석 방법에 따라 이들의 분획 효율과 성분 분석 결과를 표 5에 나타내었다.Budeul pollen ethanol extract of Example 2 The ethanol extract was subjected to sequential organic solvent fractionation with hexene, ethyl acetate, and butanol, and finally the water residue was recovered. According to the analysis method described in Example 2, their fractionation efficiency and component analysis results are shown in Table 5.

[표 5] 부들 화분 에탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물들의 분획 효율과 유용 성분 분석[Table 5] Analysis of fractionation efficiency and useful components of sequential organic solvent fractions of ethanol extract of Budeul pollen

Figure pat00005
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표 5에 나타낸 바와 같이, 부들 화분 에탄올 추출물 중 가장 많은 부분은 헥센 분획물(70.3%)로서 부들 화분 에탄올 추출물이 상당량의 지용성 성분을 포함함을 알 수 있었으며, 부탄올 분획물 및 물 잔류물은 각각 추출물의 12.8% 및 12.1%를 차지하였다. 가장 낮은 수율을 나타낸 에틸아세테이트 분획물은 부들 화분 에탄올 추출물의 9.5%를 나타내어, 부들 화분 100g당 1.18g을 회수할 수 있었다. 또한, 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량 분석 결과 에틸아세테이트 분획물에서 가장 높은 함량의 폴리페놀 함량(89.0mg/g) 및 플라보노이드 함량(101.6mg/g)을 나타내었다. 이는 가장 낮은 함량을 나타낸 물 잔류물에 비해 9.1배의 높은 폴리페놀 함량 및 5.95배의 높은 플라보노이드 함량이었다. 따라서, 부들 화분 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 다양한 생리활성을 나타내리라 예상되었으며, 실제 분석 결과, 상기 분획물은 강력한 항산화 활성 및 nitrite 소거능을 나타내었다. 따라서, 부들 화분의 에틸아세테이트 분획물은 우수한 항산화 활성, 발암억제 활성을 나타내어 혈행개선 및 항혈전 활성에 부가적으로 기여하리라 예상된다.As shown in Table 5, the most part of the ethanol extract of Caterpillar pollen was a hexene fraction (70.3%), and it was found that the ethanol extract of Caterpillar pollen contained a significant amount of fat-soluble components. They accounted for 12.8% and 12.1%. The ethyl acetate fraction showing the lowest yield represented 9.5% of the ethanol extract of Caterpillar pollen, and 1.18g per 100g of Caterpillar pollen could be recovered. In addition, the analysis of the total polyphenol and total flavonoid content showed the highest polyphenol content (89.0 mg/g) and flavonoid content (101.6 mg/g) in the ethyl acetate fraction. This was 9.1 times higher polyphenol content and 5.95 times higher flavonoid content compared to the water residue showing the lowest content. Therefore, the ethyl acetate fraction of the ethanol extract of Caterpillar pollen was expected to exhibit various physiological activities, and as a result of actual analysis, the fraction showed strong antioxidant activity and nitrite scavenging activity. Therefore, the ethyl acetate fraction of caterpillar pollen is expected to additionally contribute to improving blood circulation and antithrombotic activity by exhibiting excellent antioxidant and carcinogenic activity.

실시예 5: 부들 화분 에탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물의 항당뇨 활성 평가 Example 5: Evaluation of Antidiabetic Activity of Sequential Organic Solvent Fractions of Ethanol Extract of Budeul Pollen

실시예 4에서 제조된 부들 화분 에탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물들의 항당뇨 활성을 실시예 3에 기재된 방법에 따라 평가하였다. The antidiabetic activity of the sequential organic solvent fractions of the ethanol extract of Caterpillar pollen prepared in Example 4 was evaluated according to the method described in Example 3.

[표 6] 부들 화분 에탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물의 항당뇨 활성[Table 6] Antidiabetic Activity of Sequential Organic Solvent Fractions of Ethanol Extract of Budeul Pollen

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그 결과, 표 6에 나타낸 바와 같이, 에탄올 추출물의 분획물 중에서는 헥센 분획물과 에틸아세테이트 분획물(0.5mg/ml)에서 17.4~18.5%의 β-amylase 저해 및 8.1~14.8%의 α-glucosidase 저해를 나타내었다. 이러한 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물의 항당뇨 활성은 고농도 처리시에 보다 강력하게 나타났으며, 농도 의존적인 저해 활성을 나타내었다. 따라서, 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물은 제2형 당뇨병의 예방 및 치료에 이용 가능함을 확인하였다. As a result, as shown in Table 6, among the fractions of the ethanol extract, the hexene fraction and the ethyl acetate fraction (0.5 mg/ml) showed 17.4 to 18.5% of β-amylase inhibition and 8.1 to 14.8% of α-glucosidase inhibition. I got it. The antidiabetic activity of the hexene fraction and ethylacetate fraction of the ethanol extract of Caterpillar pollen showed stronger antidiabetic activity when treated with high concentration, and showed a concentration-dependent inhibitory activity. Therefore, it was confirmed that the hexene fraction and ethyl acetate fraction of the ethanol extract of Caterpillar pollen can be used for the prevention and treatment of type 2 diabetes.

실시예 6: 부들 화분 에탄올 추출물, 이의 헥센 또는 에틸아세테이트 분획물의 혈장, 산 및 열 안정성 평가 Example 6: Plasma, acid, and thermal stability evaluation of ethanol extract, hexene or ethyl acetate fraction thereof

상기 실시예 2 및 실시예 4에서 얻은 부들 화분 에탄올 추출물, 이의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 항당뇨 활성에 대한 혈장 안정성, 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 부들 화분 추출물, 이의 헥센 및 에틸아세테이트 분획물은 100℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서의 1시간 처리, 혈장에서 1시간 처리시에도 β-amylase 및 α-glucosidase 저해활성의 감소가 거의 나타나지 않았다. 따라서, 부들 화분 추출물, 이의 헥센 분획물 및 에틸아세테이트 분획물은 내산성, 내열성을 가진 항당뇨 활성물질을 포함하고 있음을 확인하였다. Plasma stability, thermal stability, and acid stability for antidiabetic activity were confirmed with respect to the antidiabetic activity of the ethyl acetate fraction of the Ethanol extract, its hexene fraction and the ethyl acetate fraction obtained in Examples 2 and 4 above. Caterpillar pollen extract, its hexene and ethyl acetate fractions were heat treated at 100°C for 1 hour, treated at pH 2 (0.01M HCl) for 1 hour, decreased β-amylase and α-glucosidase inhibitory activity even when treated in plasma for 1 hour. Rarely appeared. Therefore, it was confirmed that the pollen extract, the hexene fraction and the ethyl acetate fraction contained an antidiabetic active substance having acid resistance and heat resistance.

Claims (3)

부들 화분(Pollen of Typha augustifolia L.) 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.Budeul pollen (Pollen of Typha augustifolia L.) A pharmaceutical composition for preventing or treating diabetes containing ethanol extract as an active ingredient. 제 1항에 있어서, 상기 부들 화분 에탄올 추출물은 부들 화분 에탄올 추출물의 헥센 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the potted plant ethanol extract is a hexene fraction or an ethyl acetate fraction of the potted plant ethanol extract. 제 1항 또는 제 2항에 기재된 유효성분으로 포함하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.A health functional food for preventing or improving diabetes, comprising as an active ingredient according to claim 1 or 2.
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