KR20200124892A - Composition comprising extracts of chrysanthyum indicum for improving sleep disturbance caused by caffeine - Google Patents

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KR20200124892A
KR20200124892A KR1020190048315A KR20190048315A KR20200124892A KR 20200124892 A KR20200124892 A KR 20200124892A KR 1020190048315 A KR1020190048315 A KR 1020190048315A KR 20190048315 A KR20190048315 A KR 20190048315A KR 20200124892 A KR20200124892 A KR 20200124892A
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박지호
이윤정
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경희대학교 산학협력단
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Abstract

An object of the present invention relates to a food composition and a pharmaceutical composition for ameliorating sleep disorders caused by caffeine, comprising a Chrysanthemum indicum extract.

Description

감국 추출물을 포함하는 카페인에 의한 수면장애 개선용 조성물{COMPOSITION COMPRISING EXTRACTS OF CHRYSANTHYUM INDICUM FOR IMPROVING SLEEP DISTURBANCE CAUSED BY CAFFEINE}A composition for improving sleep disorders caused by caffeine containing Gamguk extract {COMPOSITION COMPRISING EXTRACTS OF CHRYSANTHYUM INDICUM FOR IMPROVING SLEEP DISTURBANCE CAUSED BY CAFFEINE}

본 발명의 목적은 감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 개선용 식품 조성물 및 약학적 조성물에 관한 것이다.An object of the present invention relates to a food composition and a pharmaceutical composition for improving sleep disorders caused by caffeine, comprising a Gamguk extract.

카페인은 전 세계적으로 오랜 기간 섭취되어 왔으며 많은 사람들이 즐겨 섭취하는 다양한 종류의 커피, 차, 청량음료, 초콜릿 등의 식품과 자양강장제 및 기타 의약품 등의 성분이다. 카페인의 섭취는 부정적인 금단 및 중독증상을 유발할 수 있다. 또한, 적당량의 카페인 섭취는 우리 몸에 쌓인 피로를 풀어주고 정신을 맑게 해주며 이뇨작용을 통해 체내 노폐물을 제거하는 등 신체에 이로운 작용을 하는 것으로 알려져 있으나, 과잉섭취시 불안·초조함·신경과민·흥분·불면증 등의 부작용을 일으키며 지속적으로 과잉 섭취할 경우 카페인 중독증이 생길 수 있다. 특히 어린이·임산부 등 취약계층은 성인에 비해 카페인 과잉섭취에 따른 부작용 정도가 심하게 나타날 수 있어 카페인 함유 식품 섭취시 주의가 요구된다.Caffeine has been consumed for a long time around the world and is an ingredient in various types of foods such as coffee, tea, soft drinks, chocolate, etc. that many people enjoy, as well as nutrients and tonics and other medicines. Caffeine consumption can lead to negative withdrawal and addiction symptoms. In addition, intake of caffeine in an appropriate amount is known to have beneficial effects on the body, such as releasing fatigue accumulated in our body, clearing the mind, and removing body wastes through diuretic action. It causes side effects such as excitement and insomnia, and can lead to caffeine addiction if consumed continuously. In particular, vulnerable groups such as children and pregnant women may have more severe side effects from caffeine intake than adults, so caution is required when eating caffeine-containing foods.

한편, 수면은 인간 수명의 1/3을 차지하고 있으며 가장 근본적이고 필수적인 생리현상으로 건강 유지 및 정신적 안정에 있어 매우 중요한 요소이다. 만성적인 수면 부족 및 장애는 심혈관 질환, 고혈압, 기억, 학습, 대사조절, 체중, 면역력, 암 저항력, 당뇨병, 안전사고 및 기분 등 전반적인 신체적 및 정신적 건강에 부정적인 영향을 끼친다.On the other hand, sleep accounts for 1/3 of human lifespan and is the most fundamental and essential physiological phenomenon, and is a very important factor in maintaining health and mental stability. Chronic sleep deprivation and disorders negatively affect overall physical and mental health, including cardiovascular disease, high blood pressure, memory, learning, metabolic regulation, weight, immunity, cancer resistance, diabetes, safety accidents and mood.

불면증과 같은 수면장애를 치료하는 약물로는 벤조다이아제핀 계열과 세로토닌 계열 등의 약물이 사용되고 있으나, 이러한 약물들을 장기간 복용할 때 약물에 대한 내성 및 약물 의존성이 형성되는 부작용이 발생하여 초기 또는 일시적인 불면을 호소하는 사람들에게 사용하기에는 부적합한 면이 있다. 따라서, 수면제를 장기 복용해야 하는 사람들의 경우 이를 대체할 수 있는 수단으로 천연 소재에서 유래한 수면 보조 및/또는 수면 질 개선제에 대한 필요성이 증가하고 있다.Drugs such as benzodiazepines and serotonins are used as drugs to treat sleep disorders such as insomnia, but when these drugs are taken for a long time, side effects that form resistance to drugs and drug dependence occur, resulting in initial or temporary insomnia. There are some aspects that are not suitable for use with those who appeal. Therefore, in the case of people who need to take sleeping pills for a long time, there is an increasing need for sleep aids and/or sleep quality improvement agents derived from natural materials as a substitute for this.

또한, 수면 증진 건강기능식품에 대한 관심이 높아짐에 따라, 불면증과 같은 수면장애를 치료 또는 예방할 수 있는 의약품뿐만 아니라 일반인의 수면의 질을 향상시킬 수 있는 건강기능식품에 대한 개발이 더욱 요구되고 있다.In addition, as interest in sleep-promoting health functional foods increases, development of health functional foods that can improve the quality of sleep of the general public as well as medicines that can treat or prevent sleep disorders such as insomnia is more demanded. .

한국등록특허 제10-1207781호Korean Patent Registration No. 10-1207781

본 발명의 목적은 감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다. It is an object of the present invention to provide a food composition for improving sleep disorders caused by caffeine, comprising an extract of Gamguk.

본 발명의 다른 목적은 감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing and treating sleep disorders caused by caffeine, comprising an extract of Gamguk.

본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.Terms used in the present specification have selected general terms that are currently widely used as possible while considering functions in the present invention, but this may vary depending on the intention or precedent of a technician working in the field, the emergence of new technologies, and the like. In addition, in certain cases, there are terms arbitrarily selected by the applicant, and in this case, the meaning of the terms will be described in detail in the description of the corresponding invention. Therefore, the terms used in the present invention should be defined based on the meaning of the term and the overall contents of the present invention, not a simple name of the term.

다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.Unless otherwise defined, all terms used herein, including technical or scientific terms, have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which the present invention belongs. Terms such as those defined in commonly used dictionaries should be interpreted as having a meaning consistent with the meaning in the context of the related technology, and should not be interpreted as an ideal or excessively formal meaning unless explicitly defined in this application. Does not.

상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 측면은 감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.One aspect of the present invention for achieving the above object relates to a food composition for improving sleep disorders caused by caffeine, including a Gamguk extract.

본 발명에서, “감국(Chrysanthemum indicum L.)”은 국화과(菊花科, Asteraceae)에 속하는 여러해살이풀로서 황국(黃菊)이라고도 한다. 주로 산에서 자라며, 10월에 꽃을 말려서 술에 넣어 마시거나, 어린잎은 나물로 사용하고 있다. 감국은 몸을 가볍게 하고 늙지 않게 하며 장수하게 하고, 근골을 장하게 하고 골수를 보하며 눈을 밝게 하며, 풍현두통(風睍頭痛)을 치료하며, 술을 마시고 깨지 않을 때 이용하는 것으로 알려져 있다.In the present invention, " Chrysanthemum indicum L." is a perennial plant belonging to the chrysanthemum family (菊花科, Asteraceae) and is also referred to as Hwangguk (黃菊). It grows mainly in the mountains, and in October, flowers are dried and drunk in alcohol, and young leaves are used as herbs. Gamguk is known to lighten the body, do not get old, make long life, increase muscle bones, see bone marrow, brighten eyes, heal punghyeon headache, and use it when drinking alcohol and not awakening.

구체적으로, 상기 감국 추출물은 물, C1 내지 C4의 무수 또는 저급 알코올, 상기 물과 저급 알코올의 혼합 용매, 아세톤, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상의 단독 또는 혼합 용매로 추출하여 수득한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다.Specifically, the Gamguk extract is 1 selected from the group consisting of water, C 1 to C 4 anhydrous or lower alcohol, a mixed solvent of water and lower alcohol, acetone, 1,3-butylene glycol, ethyl acetate, and chloroform It may be obtained by extraction with one or more species alone or a mixed solvent, but is not limited thereto, and any solvent known in the art may be used.

또한, “추출물”은 상기 감국의 추출물 뿐 아니라 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. In addition, the "extract" is formed using the extract itself and the extract, such as the extract of Gamguk, as well as the dilution or concentrate of the extract, a dried product obtained by drying the extract, a preparation or purified product of the extract, or a mixture thereof. Includes extracts of all possible formulations.

본 발명의 상기 추출물은, 상기 감국의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.The extract of the present invention may be extracted from natural, hybrid or variant plants of the Gamguk, and may also be extracted from plant tissue culture.

본 발명의 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다. The method of extracting the extract of the present invention is not particularly limited, and may be extracted according to a method commonly used in the art. Non-limiting examples of the extraction method include a hot water extraction method, an ultrasonic extraction method, a filtration method, a reflux extraction method, and the like, which may be performed alone or in combination of two or more methods.

본 발명에서 열수 추출 또는 냉침 추출한 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조시켜 사용할 수 있다.In the present invention, the extract extracted with hot water or cold needle is filtered to remove floating solid particles, for example, nylon, etc. to filter the particles, or after filtration using a freeze filtration method, etc., or use as such, or freeze drying, hot air drying, It can be used after drying by spray drying or the like.

본 발명 일 실시예에서는 열수 추출 방식을 통해 감국 추출물을 수득하였으며, 상기 감국 추출물이 카페인에 의한 신경 활성 및 수면 시간 감소를 완화시킴으로써 수면장애를 개선시킬 수 있음을 확인하였다.In one embodiment of the present invention, a Gamguk extract was obtained through a hot water extraction method, and it was confirmed that the Gamguk extract can improve sleep disorders by mitigating the decrease in nerve activity and sleep time caused by caffeine.

본 발명에서, “수면장애”는 신체 기능이 각성 시에는 정상이더라도 수면 중에는 병적일 수 있는 모든 장애를 포함하며, 스트레스, 건강 상태, 통증, 투약, 시차증(jet lag) 또는 소음 등에 의한 수면장애일 수 있으며, 불면증, 수면호흡장애, 수면과다증, 일주기리듬 수면장애, 수면 중 이상운동, 사건수면(parasomnia) 등이 포함될 수 있다. 상기 수면장애는 임의의 및 모든 수면 상실의 유형 및 등급을 의미하는 것으로서 널리 사용되고 있다. 수면 장애는 급성 또는 만성으로 지속될 수 있으며, 구체적으로 카페인에 의한 수면장애일 수 있다.In the present invention, "sleep disorder" includes all disorders that may be pathological during sleep, even if the physical function is normal during awakening, and is a sleep disorder caused by stress, health conditions, pain, medication, jet lag, or noise. Insomnia, sleep respiration disorder, hypersomnia, circadian rhythm sleep disorder, abnormal exercise during sleep, parasomnia, etc. may be included. The sleep disorder is widely used as meaning any and all types and grades of sleep loss. The sleep disorder may persist acutely or chronically, and specifically, may be a sleep disorder caused by caffeine.

더욱 구체적으로, 상기 수면장애는 카페인에 의한 불면증 또는 일주기리듬 수면장애(circadian rhythm sleep disorders)인 것일 수 있다.More specifically, the sleep disorder may be caffeine-induced insomnia or circadian rhythm sleep disorders.

본 발명에서, “불면증”은 잠들기 어렵거나 자다가 자주 깨거나 아침에 일어나면 개운하지 않은 증상을 단독 또는 복합적으로 보이는 상태를 말한다. 카페인 복용시 상기 불면증이 발생될 수 있음은 알려진 바 있으며, 본 발명의 조성물은 카페인에 의한 수면 시간 감소를 개선시키는 것을 확인하였는 바(도 6), 상기 불면증 개선 용도로 활용될 수 있다.In the present invention, "insomnia" refers to a state where it is difficult to fall asleep, awakening frequently while sleeping, or showing unpleasant symptoms alone or in combination when waking up in the morning. It is known that the insomnia may occur when caffeine is taken, and the composition of the present invention has been confirmed to improve the reduction of sleep time caused by caffeine (FIG. 6), and can be used for improving the insomnia.

본 발명에서, “일주기리듬 수면장애(circadian rhythm sleep disorders)”는 일주기 리듬을 관장하는 신체기관에 문제가 생기거나 혹은 내적인 일주기 리듬과 외부적 요인 사이에 정렬이 깨지면서 생기는 장애이다. 대표적인 질환으로 지연성 혹은 전진성 수면위상 증후군 등이 있으며, 카페인 등과 같은 화합물에 의해 생리활성 또는 신경활성이 영향을 받음으로 인하여 생체 주기가 바뀌면서 발생될 수 있다. 본 발명의 조성물은 카페인에 의한 신경 활성을 완화시킬 수 있음을 확인하였는 바(도 4), 카페인에 의한 생체 주기 변화에 따른 일주기리듬 수면장애를 개선시킬 수 있다.In the present invention, “circadian rhythm sleep disorders” are disorders that occur when a problem occurs in the body organs in charge of the circadian rhythm or the alignment between the internal circadian rhythm and external factors is broken. Representative diseases include delayed or progressive sleep phase syndrome, and may occur as the biological cycle changes due to the influence of physiological or neurological activity by compounds such as caffeine. It was confirmed that the composition of the present invention can alleviate the neural activity caused by caffeine (FIG. 4), and it can improve the circadian rhythm sleep disorder according to the change in the circadian cycle caused by caffeine.

또한 구체적으로, 상기 식품의 형태는 커피일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 커피는 원두커피 또는 인스턴트 커피일 수 있으며, 커피의 형태는 특별히 제한되지 않는다. 또한 구체적으로, 상기 커피는 노카페인 커피를 포함할 수 있다.In addition, specifically, the form of the food may be coffee, but is not limited thereto. The coffee may be ground coffee or instant coffee, and the form of the coffee is not particularly limited. In addition, specifically, the coffee may include no-caffeine coffee.

원두커피는 자메이카 블루마운틴, 인도네시아 토라자, 콜롬비아 수프리모, 과테말라 안티구아, 케냐 아라비카, 브라질 산토스, 에티오피아 모카 예가체프 등의 원두를 사용할 수 있다. 이러한 원두는 생두를 건조시켜, 로스팅 후에 분쇄하여 사용할 수 있으며, 로스팅은 생두를 가열하여 볶는 것으로, 커피 생두에 열을 가하여 생두 내부 조직에 물리적, 화학적 변화를 일으킴으로써 커피 특유의 맛과 향을 결정하는 가공처리이다.For coffee beans, you can use beans from Jamaica Blue Mountain, Indonesia Toraja, Colombia Souprimo, Guatemala Antigua, Kenya Arabica, Brazil Santos, Ethiopia Mocha Yegachev. These beans can be used by drying the green beans and grinding them after roasting, and roasting is by heating the green beans and roasting them.By applying heat to the green coffee beans, it causes physical and chemical changes in the internal structure of the green beans to determine the unique taste and aroma of coffee. It is a processing treatment.

인스턴트 커피는 원두커피에 당류 및 유지 등이 더 첨가될 수 있다. 이때, 당류는 백설탕, 포도당, 덱스트린, 과당, 올리고당, 프로폴리스, 트레할로스, 솔비톨, 자일리톨, 만니롤, 만티롤, 람니롤, 이노시롤, 에리스리롤, 파라티노스 및 쿠에르시롤 중 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. 또한, 유지는 분유, 탈지분유 및 식물 성분말 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. Instant coffee may further contain sugars and fats and oils to the coffee beans. At this time, the saccharide is any one selected from white sugar, glucose, dextrin, fructose, oligosaccharide, propolis, trehalose, sorbitol, xylitol, mannirol, mantyrol, ramnirol, inosyrol, erythrolol, paratinose, and quersirol You can use the above. In addition, the fat or oil may be used any one or more selected from powdered milk, skim milk powder, and plant ingredients.

본 발명의 감국 추출물을 포함하는 커피는 커피에 의한 부작용 중 하나인 수면장애를 방지할 뿐 아니라, 카페인 과다 복용에 의한 신경 과다 활성을 억제시킬 수 있다. 특히, 상기 감국 추출물은 커피에 첨가되거나 포함됨으로써 커피 본연의 맛을 변질시키지 않으며, 카페인과 경쟁적으로 작용함으로써 카페인에 의해 유발될 수 있는 불면 효과를 최소화할 수 있다.Coffee containing the extract of Gamguk of the present invention not only prevents sleep disturbance, which is one of the side effects caused by coffee, but also inhibits neurological hyperactivity caused by an overdose of caffeine. In particular, by being added to or included in coffee, the Gamguk extract does not alter the original taste of coffee, and acts competitively with caffeine, thereby minimizing the insomnia effect that may be caused by caffeine.

본 발명의 감국 추출물을 첨가할 수 있는 식품은 상기 커피 뿐 아니라 소세지, 육류, 빵, 초콜릿류, 스넥류, 캔디류, 과자류, 라면, 피자, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있다. 음료수로 제형화할 경우에 본 발명의 감국 추출물 외에 첨가되는 액체 성분으로는 이에 한정되지는 않으나, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예, 포도당, 과당 등), 디사카라이드(예, 말토오스, 수크로오스 등) 및 폴리사카라이드(예, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당), 및 자일리톨, 소르비톨, 에리스리톨 등의 당 알코올일 수 있다.Foods to which the Gamguk extract of the present invention can be added include not only coffee, but also sausage, meat, bread, chocolate, snacks, candy, confectionery, ramen, pizza, other noodles, gum, dairy products including ice cream, various soups, Beverages, teas, beverages, alcoholic beverages and vitamin complexes. When formulated as a beverage, the liquid component added in addition to the extract of the present invention is not limited thereto, but may contain various flavoring agents or natural carbohydrates as an additional component, such as a conventional beverage. The natural carbohydrates described above are monosaccharides (e.g., glucose, fructose, etc.), disaccharides (e.g., maltose, sucrose, etc.) and polysaccharides (e.g., common sugars such as dextrin, cyclodextrin, etc.), and xylitol, sorbitol. And sugar alcohols such as erythritol.

상기 식품의 종류는 식품 첨가제일 수 있으며, 상기 식품 첨가제는 식품의 제조, 가공, 또는 보존을 위해 식품에 첨가, 혼합, 침윤 기타의 방법에 의해 사용되는 물질을 의미한다. 상기 식품 첨가제는 천연물과 합성품이 있으며, 기능과 용도에 따라 분류할 수 있다. 현재 한국에 식품첨가물로 허가되어 있는 품목은 화학적 합성품 370여종, 천연첨가물 50여종이며, 주로 용도에 따라 보존료, 살균제, 산화방지제, 착색료, 발색제, 표백제, 조미료, 감미료, 착향료, 팽창제, 강화제, 개량제, 유화제, 증점제(호료) 및 안정제, 피막제, 껌 기초제, 소포제, 용제, 이형제, 방충제, 품질개량제와 기타 식품제조용 첨가제 등으로 분류되어 쓰이고 있다. The type of food may be a food additive, and the food additive refers to a substance used by a method such as adding, mixing, infiltrating or adding to food for the preparation, processing, or preservation of food. The food additives include natural products and synthetic products, and can be classified according to functions and uses. Currently, 370 kinds of chemical synthetic products and 50 kinds of natural additives are approved as food additives in Korea. Depending on the purpose, preservatives, fungicides, antioxidants, coloring agents, coloring agents, bleaching agents, seasonings, sweeteners, flavoring agents, expanding agents, strengthening agents, and improving agents , Emulsifiers, thickeners and stabilizers, coating agents, gum base agents, defoaming agents, solvents, releasing agents, insect repellents, quality improvers and other additives for food manufacturing.

상기 식품첨가제의 형태는 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 액상 형태를 포함할 수 있으며, 상기 형태에 제한되는 것은 아니다.The form of the food additive may include a powder, granule, tablet, capsule or liquid form, but is not limited thereto.

또한, 상기 식품의 종류는 구체적으로 건강기능식품일 수 있다. 상기 건강기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 점증제, pH 조절제, 안정화제, 보존제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 건강기능식품은 과일 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 단독으로 또는 조합으로 사용될 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 조성물 전체 중량당 0.001 내지 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이나, 이에 제한되는 것은 아니다.In addition, the type of food may specifically be a health functional food. The health functional foods include various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic flavors and natural flavoring agents, coloring agents and enhancers (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and its salts, organic acids, protective colloidal growth It may contain an agent, a pH adjuster, a stabilizer, a preservative, glycerin, alcohol, a carbonation agent used in carbonated beverages, and the like. In addition, the health functional food of the present invention may contain pulp for the manufacture of fruit and vegetable beverages. These components may be used alone or in combination, and the ratio of these additives is generally selected from 0.001 to 50 parts by weight per total weight of the composition, but is not limited thereto.

상기 건강기능식품은 식품의 생체 조절 기능을 강조한 식품으로 물리적, 생화학적, 생물공학적인 방법을 이용하여 특정 목적에 작용 및 발현하도록 부가가치를 부여한 식품이다. 이러한 건강기능 식품의 성분은 생체 방어와 신체 리듬의 조절, 질환의 방지 및 회복에 관계하는 신체 조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발휘하도록 설계하여 가공하게 되며, 식품으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 감미료 또는 기능성 원료를 함유할 수 있다. The health functional food is a food that emphasizes the biological regulation function of food, and is a food that has added value to act and express it for a specific purpose by using physical, biochemical, and bioengineering methods. Ingredients of these health functional foods are designed and processed to fully exert the body's control functions related to body defense, regulation of body rhythm, prevention and recovery of diseases to the living body, and food additives, sweeteners, or functional foods acceptable as foods. It may contain raw materials.

본 발명의 감국 추출물을 건강기능식품(또는 건강기능 음료 첨가물)으로 사용할 경우, 상기 감국 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용하고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 감국 추출물을의 혼합량은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 개선, 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. When using the Gamguk extract of the present invention as a health functional food (or a health functional beverage additive), the Gamguk extract may be added as it is or used with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixing amount of the Gamguk extract may be appropriately determined according to the purpose of use (prevention, health or improvement, therapeutic treatment).

본 발명의 다른 일 측면은 감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 상기 수면장애는 카페인에 의한 불면증 또는 일주기리듬 수면장애(circadian rhythm sleep disorders)인 것일 수 있다. Another aspect of the present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating sleep disorders caused by caffeine, comprising an extract of Gamguk. Specifically, the sleep disorder may be caffeine-induced insomnia or circadian rhythm sleep disorders.

“수면장애”, “불면증”, “일주기리듬 수면장애” 는 상기 설명한 바와 같다. “Sleep disorder”, “insomnia”, and “circadian rhythm sleep disorder” are as described above.

본 발명의 약학적 조성물은 투여를 위하여, 상기 본 발명의 감국 추출물 외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.For administration, the pharmaceutical composition of the present invention may contain a pharmaceutically acceptable carrier, excipient, or diluent in addition to the extract of the present invention. The carrier, excipient and diluent include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, gum acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline Cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, and mineral oils.

또한, 본 발명의 약학적 조성물은 어떠한 제형으로도 적용가능하며, 보다 구체적으로 경구용 제형일 수 있다. 비경구용 제형으로는 주사용, 도포용, 에어로졸 등의 스프레이 형일 수 있다In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be applied in any formulation, and more specifically, may be an oral formulation. The parenteral formulation may be in the form of a spray such as injection, application, or aerosol.

비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성 용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized formulations, and suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate may be used.

본 발명의 또 다른 측면은 감국 추출물을 포함하는 약학적 조성물을 치료를 필요로 하는 개체에 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함하는, 수면장애의 치료방법에 관한 것이다. 구체적으로, 상기 수면장애는 카페인에 의한 불면증 또는 일주기리듬 수면장애인 것일 수 있다.Another aspect of the present invention relates to a method of treating sleep disorders, comprising administering a pharmaceutical composition comprising an extract of Gamguk to an individual in need thereof in a pharmaceutically effective amount. Specifically, the sleep disorder may be caffeine-induced insomnia or circadian rhythm sleep disorder.

“수면장애”, “불면증”, “일주기리듬 수면장애” 는 상기 설명한 바와 같다. “Sleep disorder”, “insomnia”, and “circadian rhythm sleep disorder” are as described above.

본 발명에서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 성병, 연령, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. In the present invention, "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is the patient's sexually transmitted disease, age, type of disease, severity, drug Activity, sensitivity to drugs, time of administration, route of administration and rate of excretion, duration of treatment, factors including concurrent drugs, and other factors well known in the medical field.

본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 또한 본 발명의 약학적 조성물은 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or administered in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with a conventional therapeutic agent. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may be administered single or multiple. It is important to administer an amount capable of obtaining the maximum effect in a minimum amount without side effects in consideration of all the above factors, and can be easily determined by a person skilled in the art.

본 발명의 용어 "개체"는 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 증상이 호전될 수 있는 수면장애를 가진 동물 또는 인간을 포함한다. 본 발명에 따른 치료용 조성물을 개체에게 투여함으로써, 수면장애를 효과적으로 예방 및 치료할 수 있다. The term "subject" of the present invention includes an animal or human having a sleep disorder whose symptoms can be improved by administration of the pharmaceutical composition according to the present invention. By administering the therapeutic composition according to the present invention to an individual, sleep disorders can be effectively prevented and treated.

본 발명의 용어 "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 인간 또는 동물에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명에 따른 치료용 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 치료용 조성물은 유효성분이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다. The term "administration" of the present invention means introducing a predetermined substance to humans or animals by any suitable method, and the route of administration of the therapeutic composition according to the present invention is through any general route as long as it can reach the target tissue. It can be administered orally or parenterally. In addition, the therapeutic composition according to the present invention can be administered by any device capable of moving the active ingredient to target cells.

본 발명에 따른 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. The preferred dosage of the pharmaceutical composition according to the present invention varies depending on the condition and weight of the patient, the degree of the disease, the drug form, the route and duration of administration, but may be appropriately selected by those skilled in the art.

본 발명의 조성물은 카페인에 의한 과다한 신경활성을 진정시킴과 동시에 수면장애를 개선시키는 효과를 나타내며, 특히 단시간에서의 카페인의 신경 활성을 억제하는 효과를 넘어서 카페인의 지속적 작용까지도 억제할 수 있음에 따라, 카페인에 의해 유도된 신경 활성을 안정시킴과 함께 수면장애를 개선시키는 용도로 널리 활용될 수 있다.The composition of the present invention has the effect of pacifying excessive neurological activity caused by caffeine and improving sleep disorders at the same time. In particular, as it can inhibit the continuous action of caffeine beyond the effect of inhibiting the neurological activity of caffeine in a short time, , It can be widely used for improving sleep disorders while stabilizing the nerve activity induced by caffeine.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.The effects of the present invention are not limited to the above effects, and should be understood to include all effects that can be deduced from the configuration of the invention described in the detailed description or claims of the present invention.

도 1은 해마 조직 절편 배양 과정을 나타낸 것이다.
도 2는 해마조직의 마이크로일렉트로드 어레이(MEA) 셋팅 과정을 나타낸 것이다.
도 3은 마이크로일렉트로드 어레이(MEA) 실험 프로토콜(A) 및 band pass filter를 이용한 스파이크 검출 과정(B)을 나타낸 것이다.
도 4는 감국 추출물 처리시 카페인에 의한 신경 활성이 완화된 것을 확인한 결과를 나타낸 것이다(A: 카페인 처리시 신경 활성, B: 카페인 및 감국 추출물 처리시 신경 활성, C: 카페인 단독 처리 및 카페인 및 감국 추출물 처리시의 워싱 전 신경활성 비교, D: 카페인 단독 처리 및 카페인 및 감국 추출물 처리시의 워싱 후 신경활성 비교).
도 5는 수면시간 측정을 위해 SD rat에 경구투여 및 녹화를 하는 실험과정을 나타낸 것이다(A: SD rat에 경구투여 과정, B: 수면시간 측정을 위한 녹화 과정).
도 6은 감국 추출물 처리시 수면시간이 회복된 것을 확인한 결과를 나타낸 것이다(A: 카페인 단독 처리, B: 카페인 및 감국추출물 처리).
1 shows a hippocampal tissue section culture process.
Figure 2 shows a microelectrode array (MEA) setting process of the hippocampal tissue.
3 shows a microelectrode array (MEA) experimental protocol (A) and a spike detection process (B) using a band pass filter.
Figure 4 shows the results confirming that the nerve activity by caffeine was alleviated when treated with Gamguk extract (A: neurological activity during caffeine treatment, B: neurological activity during caffeine and Gamguk extract treatment, C: caffeine alone treatment and caffeine and Gamguk Comparison of neuronal activity before washing in extract treatment, D: Comparison of neuronal activity after washing in caffeine alone treatment and caffeine and Gamguk extract treatment).
5 shows an experimental process of oral administration and recording to SD rats for measuring sleep time (A: oral administration process to SD rats, B: recording process for measuring sleep time).
Figure 6 shows the results of confirming that the sleep time was recovered during the treatment of Gamguk extract (A: caffeine alone treatment, B: caffeine and Gamguk extract treatment).

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by examples. However, the following examples are only illustrative of the present invention, and the present invention is not limited by the following examples.

실시예 1. 감국 추출물의 제조Example 1. Preparation of Gamguk Extract

감국(Gio Herb Co., Yangju, Korea) 50g에 10배(w/v)의 증류수를 가하여 121℃에서 40분간 열수추출하였다. 추출액은 Whatman No. 1 필터 페이퍼 (Whatman International Ltd., Maidstone, UK)를 이용하여 여과하였으며, 걸러진 추출액은 농축기(Eyela Co., Tokyo, Japan)를 이용하여 40 ℃에서 5시간 동안 농축시켰다. 농축된 추출액은 동결건조기(Ilsin Bio Co., Yangju., Korea)로 -70 ℃, 5 mTorr에서 7일간 동결건조 시킨 후 글라인더(Ilsin Bio Co., Yangju., Korea)로 분쇄하여 실험에 이용하였다. 위의 과정을 통해 감국을 열수추출 하였을 때 수율은 11.4% 이다.10 times (w/v) of distilled water was added to 50 g of Gamguk (Gio Herb Co., Yangju, Korea), followed by hot water extraction at 121°C for 40 minutes. Whatman No. 1 Filtered using filter paper (Whatman International Ltd., Maidstone, UK), and the filtered extract was concentrated for 5 hours at 40 ℃ using a concentrator (Eyela Co., Tokyo, Japan). The concentrated extract was freeze-dried for 7 days at -70°C and 5 mTorr with a freeze dryer (Ilsin Bio Co., Yangju., Korea), then pulverized with a grinder (Ilsin Bio Co., Yangju., Korea) for experiments. Was used. The yield is 11.4% when hot water extraction of Gamguk is performed through the above process.

원물 (g)Raw material (g) 추출물 (g)Extract (g) 수율 (%; 추출물/원물)Yield (%; extract/raw material) 감국Secret country 5050 5.75.7 11.411.4

실험예 1. 신경활성 측정Experimental Example 1. Measurement of nerve activity

1-1. 해마 조직 절편 배양(Hippocampal organotypic slice culture, HOSC)1-1. Hippocampal organotypic slice culture (HOSC)

박막을 사용하여 뇌 해마의 절편을 organotypic 배양하는 하는 방법은 이미 일반적으로 많이 사용하는 방법을 사용하였다. 구체적으로, 뇌 해마는 5일령에서 7일령 사이의 Sprague Dawley 흰 어린 쥐(Orientbio Co., Seungnam, Korea)로부터 적출하였고 조직 박절기를 이용하여 350μm 두께로 절편내었다(Mickle Laboratory Engineering Co., UK). 5조각에서 6조각을 0.4μm 구멍을 갖고 있는 박막 insert (Millicell-CM; Millipore, MA) 안에 배치한 후, 6-well plate(SPL Life Sciences Co., Korea)에 넣고 36°C 로 5% CO2(Dong-A Co., Seoul, Korea)를 유지하는 배양기에서 배양하였다. 배양액(MEM; Welgene, Gyeongsan, South Korea), 20mM HEPES (Sigma, St. Louis, Mo, USA), 25% Hank's balanced salt solution(HBSS; Welgene, Gyeongsan, South Korea), 6 g/L D-glucose(Sigma, St. Louis, Mo, USA), 1mM L-glutamine(Sigma, St. Louis, Mo, USA), 25% horse serum(Welgene, Gyeongsan, South Korea) 과 1% penicillin-streptomycin(Gibco BRL, USA), pH=7.1)은 이틀에 한번 씩 갈아주었고 배양 기간은 12~14일이며 이후 실험에 사용하였다(도 1).The method of organotypic culturing of the brain hippocampus slices using a thin film has already used a commonly used method. Specifically, the cerebral hippocampus was excised from Sprague Dawley white young rats (Orientbio Co., Seungnam, Korea) between 5 and 7 days old and sectioned to a thickness of 350 μm using a tissue slicer (Mickle Laboratory Engineering Co., UK). After placing 5 to 6 pieces in a thin film insert (Millicell-CM; Millipore, MA) with a 0.4μm hole, put it in a 6-well plate (SPL Life Sciences Co., Korea) and 5% CO at 36°C. 2 (Dong-A Co., Seoul, Korea) was cultured in an incubator maintained. Culture solution (MEM; Welgene, Gyeongsan, South Korea), 20mM HEPES (Sigma, St. Louis, Mo, USA), 25% Hank's balanced salt solution (HBSS; Welgene, Gyeongsan, South Korea), 6 g/L D-glucose (Sigma, St. Louis, Mo, USA), 1mM L-glutamine (Sigma, St. Louis, Mo, USA), 25% horse serum (Welgene, Gyeongsan, South Korea) and 1% penicillin-streptomycin (Gibco BRL, USA), pH=7.1) was changed once every two days, and the culture period was 12 to 14 days, which was used in subsequent experiments (Fig. 1).

1-2. MEA 탐침으로 배양된 뇌해마 조직의 이동1-2. Migration of cerebral hippocampal tissue cultured with MEA probes

핀을 이용하여 배양된 뇌해마 절편을 배양 박막 insert로부터 조심스럽게 분리한 후, 0.01% 폴리에틸렌이민(polyethylenimine, Sigma, St. Louis, Mo, USA)으로 코팅된 직경 10 μm, 간격 100 μm인 8x8 마이크로일렉트로드 어레이(microelectrode array, MEA; Multi Channel Systems, Germany)에 올려놓았다. 절편은 멸균된 인공 척수용액(aCSF; 114 mM NaCl, 26 mM NaHCO3, 10 mM glucose, 3 mM KCl, 2 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 20 mM HEPES, pH=7.4, Sigma, Louis, Mo, USA)에서 15 분 동안 5% CO2 및 95% O2 혼합가스 (Dong-A Co., Seoul, Korea)를 주입하며 33 °C를 유지한 상태로 안정화시켰다. 이후에 뇌 해마를 포함한 MEA를 MEA1060(Multi Channel Systems Inc., Reutlingen, Germany) 증폭장치에 장착하고, MEA 속 인공 척수용액은 Ag/AgCl 으로 접지를 시켰다. 이후에 실험하는 동안은 5% CO2 및 95% O2 혼합가스를 투입시킨 인공 척수 용액을 3 mL/min의 속도로 관류시켰으며, MEA와 인공 척수 용액은 33°C로 유지하였다(도 2).After carefully separating the cerebral hippocampal section cultured using a pin from the culture thin film insert, it was coated with 0.01% polyethyleneimine (polyethylenimine, Sigma, St. Louis, Mo, USA) and coated with 10 μm diameter and 100 μm spacing. It was placed on an electro-electrode array (MEA; Multi Channel Systems, Germany). Sections are sterile artificial spinal cord solution (aCSF; 114 mM NaCl, 26 mM NaHCO 3 , 10 mM glucose, 3 mM KCl, 2 mM CaCl 2 , 1 mM MgCl 2 , 20 mM HEPES, pH=7.4, Sigma, Louis, Mo , USA) for 15 minutes, 5% CO 2 and 95% O 2 mixed gas (Dong-A Co., Seoul, Korea) was injected and stabilized at 33 °C. After that, the MEA including the brain hippocampus was mounted on the amplification device of MEA1060 (Multi Channel Systems Inc., Reutlingen, Germany), and the artificial spinal cord solution in the MEA was grounded with Ag/AgCl. During the subsequent experiment, the artificial spinal cord solution into which 5% CO 2 and 95% O 2 mixed gas were added was perfused at a rate of 3 mL/min, and the MEA and the artificial spinal cord solution were maintained at 33°C (Fig. 2). ).

1-3. 신경 활성 측정1-3. Nerve activity measurement

안정화가 끝난 해마 조직을 3 분 동안 레코딩(recording) 하였으며, 이후 1 mM의 카페인(Sigma, St. Louis, Mo, USA)이 포함된 인공 뇌척수액 또는 1mM 카페인 및 감국 추출물 200 μg/ml 이 포함된 인공 뇌척수액을 각각 20 분 동안 동일한 조건으로 관류한 후 3분 레코딩 하였고, 다시 인공 뇌척수액만으로 20 분간 워싱한 후 3분을 레코딩하여 총 9 분간의 데이터를 얻었다. Stabilized hippocampal tissue was recorded for 3 minutes, and thereafter, artificial cerebrospinal fluid containing 1 mM caffeine (Sigma, St. Louis, Mo, USA) or artificial cerebrospinal fluid containing 1 mM caffeine and 200 μg/ml of Gamguk extract. The cerebrospinal fluid was perfused under the same conditions for 20 minutes, and then recorded for 3 minutes. After washing for 20 minutes only with artificial cerebrospinal fluid, the data was recorded for 3 minutes to obtain data for a total of 9 minutes.

해마조직이 있는 MEA는 총 60개 채널을 통해 각 채널 당 25kHz의 sampling 속도로 데이터를 읽어내며, MC_Rack 및 MC_Data Tool(Multi Channel Systems, GmbH) 소프트웨어를 이용하여 컴퓨터를 통해 기록된다. 기록된 전체 신호들 중 의미있는 스파이크(spike)를 추출하기 위해 4단계의 band pass filter를 이용하였으며, 식은 아래와 같다.MEA with hippocampal tissue reads data at a sampling rate of 25 kHz for each channel through a total of 60 channels, and is recorded through a computer using MC_Rack and MC_Data Tool (Multi Channel Systems, GmbH) software. A band pass filter of 4 steps was used to extract meaningful spikes from all recorded signals, and the equation is as follows.

[식 1][Equation 1]

Figure pat00001
Figure pat00001

상기 식에서 X는 노이즈(noise)에 대한 실효값(RMS)을 나타내며, ĸ는 각 각의 임계값(threshold)을 결정하는 인자이다. 여기서는 총 3개의 인자로 threshold를 구성하였다(0.6, 1 및 3). ĸ값이 0.6이상인 경우 의미있는 스파이크(spike)로 하였으며, 이 때의 threshold level은 -21.63 μV 이다. 이 과정은 60개 전 channel을 대상으로 MATLAB(Mathworks Inc., Natick, Massachusetts, USA) 프로그램을 이용하여 수행하였다(도 3). In the above equation, X represents an effective value (RMS) for noise, and ĸ is a factor that determines each threshold. Here, the threshold was constructed with a total of 3 factors (0.6, 1 and 3). When the ĸ value is more than 0.6, a meaningful spike is used, and the threshold level at this time is -21.63 μV. This process was performed using a MATLAB (Mathworks Inc., Natick, Massachusetts, USA) program for all 60 channels (FIG. 3).

그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이 카페인에 의한 신경 활성이 감국 추출물을 처리한 경우 완화되는 것을 확인하였다.As a result, as shown in Figure 4, it was confirmed that the nerve activity caused by caffeine was alleviated when the extract of Gamguk was treated.

구체적으로, 카페인을 처리한 경우 신경 활성이 증가되었으며, 카페인을 처리한 후 워싱하더라도 카페인의 작용이 지속되어 신경활성이 200% 이상 증가되었다(도 4A). 반면, 카페인 및 감국 추출물을 함께 처리한 경우, 카페인만 처리한 경우에 비해 신경활성 정도가 현저히 감소되었으며, 카페인 단독 처리시와 달리 워싱한 후에도 신경활성의 지속적 증가가 나타나지 않음에 따라 신경활성의 유의적 증가 없이 유지되는 것을 확인하였다(도 4B). 이는 카페인을 단독 처리한 경우 및 카페인 및 감국 추출물을 함께 처리한 경우 각각에 대하여 워싱 전, 워싱 후끼리 비교한 경우에도 감국 추출물을 처리시 현저한 신경활동 감소 효과가 나타남을 확인하였다(도 4C 및 도 4D). 특히, 카페인을 처리 후 워싱한 후에도 신경에서의 카페인에 의한 활성은 증가되는 바, 이는 카페인이 신경에 미치는 활성 작용이 단시간에 짧게 나타나기 보다는 지속적으로 이어짐을 나타내는 것이다. 본 발명의 감국 추출물은 상기와 같이 지속적으로 이어지면서 증가되는 카페인의 효과를 억제시킴으로써 신경 활성을 감소시키는 효과를 나타내었다.Specifically, when caffeine was treated, neuronal activity was increased, and even after washing after caffeine treatment, the action of caffeine continued to increase neuronal activity by 200% or more (FIG. 4A). On the other hand, when caffeine and Gamguk extract were treated together, the degree of neuronal activity was significantly reduced compared to when caffeine was treated alone. Unlike caffeine alone treatment, the neuronal activity did not show a continuous increase even after washing. It was confirmed that it was maintained without increasing the enemy (Fig. 4B). It was confirmed that when caffeine was treated alone and when caffeine and Gamguk extract were treated together, a remarkable neuronal activity reduction effect was observed when the Gamguk extract was treated even before washing and after washing for each (Fig. 4C and FIG. 4D). In particular, the activity of caffeine in the nerves is increased even after washing after treatment with caffeine, which indicates that the active action of caffeine on the nerves does not appear briefly in a short time, but rather continues. Gamguk extract of the present invention exhibited the effect of reducing neuronal activity by suppressing the effect of caffeine which is continuously increased as described above.

실험예 2. 수면시간 측정Experimental Example 2. Measurement of sleep time

2-1. 실험동물2-1. Experimental animals

실험동물로는 Sprague Dawley rat 6주령을 선정하였으며, ㈜오리엔트 바이오 (Seongnam, Korea)에서 구입하였다. 실험환경을 일정하게 유지하기 위해, 한 케이지 당 실험동물은 1개체씩 넣어 사육하였다. 실험동물은 25℃, 습도 50%, 조명 (12시간 명/암)이 자동적으로 유지되고 음수와 식이가 자유롭게 공급되는 환경에서 하루 동안 적응기간을 거쳤다. 모든 과정은 경희대학교 실험동물 윤리위원회의 방침과 동물실험관련 규정을 따랐다(IRB 승인번호: KHUASP(SE)-17-039). Sprague Dawley rat 6 weeks old was selected as the experimental animal, and it was purchased from Orient Bio (Seongnam, Korea). In order to keep the experimental environment constant, one experimental animal per cage was put and reared. The experimental animals went through an adaptation period for one day in an environment where 25℃, 50% humidity, and lighting (12 hours light/dark) were automatically maintained, and drinking water and diet were supplied freely. All procedures followed the policy of Kyunghee University's Laboratory Animal Ethics Committee and regulations related to animal testing (IRB approval number: KHUASP(SE)-17-039).

2-2. 수면시간 측정2-2. Sleep time measurement

15개체의 SD rat들을 3군으로 나누어 실험을 수행하였다(n=5). 1군에는 물을 경구투여 하였고, 2군에는 카페인(20mg/Kg)을 경구투여 하였으며, 3군에는 감국 추출물(50mg/Kg) 및 카페인(20mg/Kg)을 함께 경구투여 하였다. The experiment was performed by dividing 15 SD rats into 3 groups (n=5). Water was orally administered to Group 1, caffeine (20mg/Kg) was orally administered to Group 2, and Gamguk extract (50mg/Kg) and caffeine (20mg/Kg) were orally administered to Group 3 together.

설치류가 본래 야행성이라는 점에 착안하여, 수면시간은 SD rat이 본래 수면을 취해야 할 주간동안 측정하였다. 경구투여가 끝난 후, 오전 10시부터 캠코더 (Sony Co., Tokyo, Japan)을 이용하여 5시간 동안 케이지를 녹화하여 수면 시간을 측정하였으며, 측정시간은 선행 연구를 참고하였다. 하루에 각 군별로 1개체씩 총 3개체의 녹화를 진행하였으며, 개체 간에 서로 영향을 받지 않도록 각 케이지 당 1개체씩만 놓았다. 그리고 측정하는 공간의 조도는 일정하게 유지하였으며, 습도 50%, 온도 25℃를 유지하고, 방음을 유지하였다. 수면 패턴 및 시간은 Multi-Channel Stopwatch(Techsys Co. Seoul, Korea)를 이용하여 rat이 눈을 감고, 옆으로 동그랗게 엎드려있는 자세로 5분 이상 지속할 경우를 수면 상태로 판정하여, 수면을 시작하는 시점부터 수면을 끝마칠 때까지의 시간들을 합산하여 측정하였다(도 5). Considering that rodents are nocturnal in nature, sleep time was measured during the week in which SD rats were supposed to sleep. After the oral administration was over, the cage was recorded for 5 hours using a camcorder (Sony Co., Tokyo, Japan) from 10 am to measure the sleep time, and the measurement time was referred to in previous studies. A total of 3 subjects were recorded, one for each group per day, and only one for each cage was placed so as not to be affected by each other. And the illuminance of the space to be measured was kept constant, humidity 50%, temperature 25°C were maintained, and sound insulation was maintained. Sleep pattern and time are determined as sleep state when rats are in a position with their eyes closed and in a prone position for more than 5 minutes using Multi-Channel Stopwatch (Techsys Co. Seoul, Korea). The time from the time point to the end of sleep was summed and measured (FIG. 5).

그 결과, 도 6에 나타난 바와 같이 카페인을 처리한 경우 수면시간은 정상 대조군에 비해 약 16% 수준으로 감소되었으나, 카페인과 감국 추출물을 함께 처리한 경우 수면시간이 약 4배 이상 회복되는 것을 확인하였다. As a result, as shown in FIG. 6, when caffeine was treated, the sleeping time was reduced to about 16% level compared to the normal control, but it was confirmed that the sleeping time was recovered by about 4 times or more when caffeine and Gamguk extract were treated together. .

상기와 같은 결과들은 본 발명의 감국 추출물은 카페인에 의한 과다한 신경활성을 진정시킴과 동시에 수면장애를 개선시키는 효과를 나타냄을 확인한 것으로서, 특히 단시간에서의 카페인의 신경 활성을 억제하는 효과를 넘어서 카페인의 지속적 작용까지도 억제할 수 있음을 나타내는 것이다. 이에 따라, 본 발명의 감국 추출물은 카페인에 의해 유도된 신경 활성을 안정시킴과 함께 수면장애를 개선시키는 용도로 널리 활용될 수 있다.The above results confirmed that the extract of Gamguk of the present invention has an effect of pacifying excessive neuronal activity caused by caffeine and at the same time improving sleep disorders.In particular, the effect of inhibiting the neurological activity of caffeine in a short time It indicates that even persistent action can be suppressed. Accordingly, the Gamguk extract of the present invention can be widely used for improving sleep disorders while stabilizing neuronal activity induced by caffeine.

본 실험의 결과들은 평균 ± 표준오차 (S.E.M)으로 나타내었다. 각 군의 계산된 spike 값들이나 이들을 비율로 변환한 후, 그룹 간의 차이를 조사하기 위해서 ANOVA Tukey 사후검정을 실시하였다. p<0.05, p<0.01, p<0.001일 때, 그룹 간에 통계적으로 유의미한 차이가 있다고 보았다.The results of this experiment were expressed as mean ± standard error (S.E.M). After converting the calculated spike values or ratios of each group, an ANOVA Tukey post-test was performed to investigate the differences between groups. When p<0.05, p<0.01, and p<0.001, there were statistically significant differences between groups.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다. The above description of the present invention is for illustrative purposes only, and those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains will be able to understand that it can be easily modified into other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, it should be understood that the embodiments described above are illustrative in all respects and not limiting. For example, each component described as a single type may be implemented in a distributed manner, and similarly, components described as being distributed may also be implemented in a combined form.

본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.The scope of the present invention is indicated by the claims to be described later, and all changes or modified forms derived from the meaning and scope of the claims and the concept of equivalents thereof should be construed as being included in the scope of the present invention.

Claims (7)

감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 개선용 식품 조성물. A food composition for improving sleep disorders caused by caffeine, comprising an extract of Gamguk. 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 무수 또는 저급 알코올, 상기 물과 저급 알코올의 혼합 용매, 아세톤, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상의 용매로 추출하여 수득한 것인, 식품 조성물.
The method of claim 1,
The extract is one or more solvents selected from the group consisting of water, C 1 to C 4 anhydrous or lower alcohol, a mixed solvent of water and lower alcohol, acetone, 1,3-butylene glycol, ethyl acetate, and chloroform. The food composition obtained by extraction.
제1항에 있어서,
상기 수면장애는 카페인에 의한 불면증 또는 일주기리듬 수면장애(circadian rhythm sleep disorders)인 것인, 식품 조성물.
The method of claim 1,
The sleep disorder is caffeine-induced insomnia or circadian rhythm sleep disorders.
제1항에 있어서,
상기 식품 조성물은 커피인 것인, 식품 조성물.
The method of claim 1,
The food composition will be coffee, food composition.
제1항에 있어서,
상기 식품 조성물은 식품 첨가제인 것인, 식품 조성물.
The method of claim 1,
The food composition will be a food additive, food composition.
감국 추출물을 포함하는, 카페인에 의한 수면장애 예방 및 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for preventing and treating sleep disorders caused by caffeine, comprising an extract of Gamguk. 제6항에 있어서,
상기 수면장애는 카페인에 의한 불면증 또는 일주기리듬 수면장애(circadian rhythm sleep disorders)인 것인, 약학적 조성물.
The method of claim 6,
The sleep disorder is caffeine-induced insomnia or circadian rhythm sleep disorders, the pharmaceutical composition.
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