KR20200111876A - 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 이용한 항균 및 항염증 조성물 - Google Patents
황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 이용한 항균 및 항염증 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스 CCARM 9009(Propionibacterium acnes CCARM 9009), 표피포도상구균인 스타필로코쿠스 에피더미스 CCARM 3709(Staphylococcus epidermidis CCARM 3709) 및 황색포도상구균인 스타틸로코쿠스 아우레우스 CCARM 0027(Staphylococcus aureus CCARM 0027)에 항균 활성을 가지며, LPS로 자극된 뮤린 대식세포주에서 NO 생성을 억제하고 염증성 사이토카인의 생성을 억제하는 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 개시한다.
Description
본 발명은 황칠나무(Dendropanax morbifera) 추출물, 애기달맞이꽃(Oenothera laciniata Hill) 추출물 및 온주밀감(Citrus unshiu) 추출물을 이용한 항균 및 항염증용 조성물에 관한 것이다.
인간의 피부는 주위환경과 직접 접촉하는 기관으로서 각종 피부 질환에 관여하는 세균, 곰팡이 등의 감염이 쉽게 일어난다. 예컨대 피부에 화농을 일으키는 황색포도상구균인 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus)을 비롯하여 피부 상재균인 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphyococcus epidermidis), 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes) 등이 피부에 존재하며, 이 균들은 피부상에 분비된 피지나 땀을 분해시켜 냄새를 발생시키며, 이와 더불어 그 분해 산물들은 피부에 자극을 주고 염증을 발생시킨다. 특히 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)는 지방산 분해효소인 리파아제(lipase)를 이용하여 피지를 분해시켜서 유리지방산을 생성시킨다. 이들 유리지방산은 피부에 자극을 줄 뿐만 아니라 여드름에서 볼 수 있는 붉은 발진인 구진, 농포, 결절 등의 염증성 병변을 유발시킨다.
이러한 세균들에 대한 항균성 물질로서 트리클로카반(triclocarban), 트리클로산(triclosan) 등 항균성 화합물이 사용되어 왔으나 장기간 사용시 피부 작열감, 화끈거림, 피부 발적 등의 피부 부작용을 유발하는 것으로 알려져 있다.
한편, 염증반응은 조직의 손상을 비롯하여 외부의 물리적, 화학적 자극 및 다양한 감염원에 대한 방어 반응으로서 손상된 조직을 수복하고 재생하려는 기전이다(Zamora R et al., Mol. Med. 6: 347-373 (2000); Mariathasan S and Monack DM. Nat. Rev. Immunol. 7: 31-40 (2007); Lee HN et al., Korean J. Food Sci. Technol. 43: 65-71 (2011)). 염증 반응 시에는 염증 부위에 혈장이 축적되어 세균이 분비한 독성을 희석시키며, 혈류가 증가하고, 홍반, 통증, 부종, 발열 등의 증상이 수반되게 된다. 정상적인 경우에 생체는 염증 반응을 통하여 발병 요인을 중화시키거나 제거하고 상한 조직을 재생시켜서 정상적인 구조와 기능을 회복시키지만, 지속적으로 또는 과도하게 발생된 만성 염증반응은 조직의 손상을 유발한다. 이러한 염증반응은 위, 대장, 방광 그리고 전립선암으로의 진행을 유도하며, 류마티스 관절염, 만성 감염 등 다양한 질환의 원인이 된다(Hofseth LJ and Ying L. Biochim. Biophys. Acta 1765: 74-84 (2006); Yun HY et al., Rev. Neurobiol. 10: 291-316 (1996); Stuehr DJ et al., P. Natl. Acad. Sci. USA 88: 7773-7777 (1991)).
염증반응이 일어나면 대식세포와 단핵구 등 면역세포들은 nitric oxide(NO), prostagladin E2(PGE2), tumor necrosis factor-α(TNF-α), interleukin-1β(IL-1β), IL-6, IL-8, IL-12 등의 염증 매개물질을 분비한다(Guha M and Mackman N. Cell Signal. 13: 85-94 (2001)). 염증반응의 대표적인 예로, pathogen associated molecular patterns (PAMPs)에 의한 대식세포의 toll like receptor(TLR) 신호전달체계 활성화를 들 수 있다. 그람 음성 세균의 외막(outer membrane)에 존재하는 엔도톡신(endotoxin)의 일종인 lipopolysaccharide (LPS)는, 외부 미생물에 존재하는 염증성 매개물질인 PAMPs에 속한다. 세균이 인체 내로 침투하는 경우, 대식세포 표면에서 TLR4는 MD-2 또는 CD14 등의 도움을 받아 LPS를 인식하며(Miyake K. Trends Microbiol. 12: 186-192 (2004)), 하위 신호전달체계의 활성화를 유도하며 궁극적으로 전사인자인 nuclear factor-κB(NF-κB)를 활성화한다(Youn HS. Korean. J. Food Sci. Technol. 39:481-487 (2007); Youn HS. Korean. J. Food Sci. Technol. 41: 477-482 (2009)). 핵으로 이동한 NF-κB는 염증성 cytokine(TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-12 등), inducible nitiric oxide synthase(iNOS), cyclooxygenase-2(COX-2)의 유전자 발현을 유도하며, iNOS에 의하여 발생된 산화질소(nitric oxide; NO)는 염증발생을 심화시킨다(Noh KH et al., J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 40: 625-634 (2011); Weisz A et al., Biochem. J. 316: 209-215 (1996)). 대식세포에서 iNOS에 의해 과다 생성된 산화질소는 수퍼옥사이드(superoxide)와 반응하여 퍼옥시니트라이트(peroxynitrite)를 형성하고 이는 강력한 산화제로 작용하여 세포에 손상을 입힘으로써 염증과 암을 포함한 다양한 병리적 과정에 관여하는 것으로 알려져 있다(Gupta SC et al., Exp Biol Med., 236:658-671, (2011); Riehemann et al., FEBS Lett., 442:89-94(1999)).
염증의 치료제에는 이부프로펜(ibuprofen)과 같은 합성의약품, 항히스타민제, 스테로이드, 코티손, 면역억제제, 면역 항진제 등이 사용되고 있으나 치료효과가 일시적이거나 단순 증상완화, 과민반응, 면역체계 악화 등의 부작용이 많이 있고 염증의 근본적인 치료가 어렵다. 현재 항염증제로서 널리 사용되고 있는 비스테로이드성 소염제(non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDS)도 장기간 복용하게되면 위장관 장애, 간장애, 신장애 등의 심각한 부작용을 야기한다고 알려져 있다(Rainsford KD., Subcell biochem., 42:3-27, 2007; Guruprasad P. Aithal.,Rheumatology., 7:139-150, 2011; Praveen P. N. Rao et al.,Pharmaceuticals., 3:1530-1549, 2010).
따라서 항염, 항균 활성 등을 가지면서 부작용이 적은 새로운 약물 등의 개발이 여전히 요구되고 있다.
본 발명은 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물의 항균 및 항염증 활성을 개시한다.
본 발명의 목적은 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 이용한 항염증용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 이용한 항균용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 여타의 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.
본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물의 단독 또는 혼합물이 LPS로 자극된 뮤린 대식세포주에서 NO 생성을 억제하고 염증성 사이토카인의 생성을 억제하며, 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스 CCARM 9009(Propionibacterium acnes CCARM 9009), 표피포도상구균인 스타필로코쿠스 에피더미스 CCARM 3709(Staphylococcus epidermidis CCARM 3709) 및 황색포도상구균인 스타틸로코쿠스 아우레우스 CCARM 0027(Staphylococcus aureus CCARM 0027)에 항균 활성을 가짐을 확인함으로써 완성된 것이다.
전술한 바를 고려할 때, 본 발명은 일 측면에 있어서, 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물의 단독 또는 혼합물을 유효성분으로 하는 항염증용 조성물에 관한 것이고, 다른 측면에 있어서는 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물의 단독 또는 혼합물을 유효성분으로 하는, 프로피오니박테리움 아크네스, 스타필로코쿠스 에피더미스 또는 스타틸로코쿠스 아우레우스에 대한 항균용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 항균용 조성물은 프로피오니박테리움 아크네스에 높은 항균 활성을 보인다는 점에서, 프로피오니박테리움 아크네스가 일으키는 여드름의 개선(즉 치료, 예방 또는 증상의 경감) 용도로 적합하게 사용될 수 있다.
본 명세서에서, "황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물"이란 추출 대상인 황칠나무, 애기달맞이꽃 또는 온주밀감의 식물 전체, 잎, 줄기, 가지, 지상부, 뿌리, 근경, 지하부, 과실 또는 이들의 혼합물을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물, 더 바람직하게는 추출용매로서 물과 에탄올의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다.
또 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
또 본 명세서에서, "항염증"은 아래에서 정의되는 염증성 질환의 개선(증상의 경감), 치료, 그러한 질환의 발병 억제 또는 지연을 포함하는 의미이다.
또 본 명세서에서, 상기 "염증성 질환"이란 외부의 물리·화학적 자극 또는 박테리아, 곰팡이, 바이러스, 각종 알레르기 유발 물질 등 외부 감염원의 감염 또는 자가면역에 대한 국부적 또는 전신적 생체 방어 반응으로 특정되는 염증 반응이 일으키는 병리적 증상으로서 정의될 있다. 이러한 염증 반응은 각종 염증 매개 인자와 면역세포와 관련된 효소(예컨대 iNOS, COX-2 등) 활성화, 염증 매개 물질의 분비(예컨대, NO, TNF-α, IL-6 등의 분비), 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등의 일련의 복합적인 생리적 반응을 수반하며, 홍반, 통증, 부종, 발열, 신체의 특정 기능의 저하 또는 상실 등의 증상에 의해 외적으로 나타난다. 상기 염증성 질환은 급성, 만성, 궤양성, 알레르기성 또는 괴사성을 띨 수 있으므로, 어떠한 질환이 상기와 같은 염증성 질환의 정의에 포함되는 한 그것이 급성이든지, 만성이든지, 궤양성이든지, 알레르기성이든지 또는 괴사성이든지를 불문한다. 구체적으로 상기 염증성 질환에는 천식, 알레르기성 및 비-알레르기성 비염, 만성 및 급성 비염, 만성 및 급성 위염 또는 장염, 궤양성 위염, 급성 및 만성 신장염, 급성 및 만성 간염, 만성 폐쇄성 폐질환, 폐섬유증, 과민성 대장 증후군, 염증성 통증, 편두통, 두통, 허리 통증, 섬유 근육통, 근막 질환, 바이러스 감염(예컨대, C형 감염), 박테리아 감염, 곰팡이 감염, 화상, 외과적 또는 치과적 수술에 의한 상처, 프로스타글라딘 E 과다 증후군, 아테롬성 동맥 경화증, 통풍, 관절염, 류머티스성 관절염, 강직성 척추염, 호지킨병, 췌장염, 결막염, 홍채염, 공막염, 포도막염, 피부염(아토피성 피부염 포함), 습진, 다발성 경화증 등이 포함될 것이다.
본 발명의 항염증 조성물과 항균용 조성물(이하 "본 발명의 조성물")은 그 유효성분을 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 치료를 의도하는 염증성 질환의 개선 활성, 항균 활성 등을 나타낼 수 있는 한 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게 의료 전문가 등의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 염증성 질환 등의 개선, 치료, 또는 그러한 병리적 증상의 발병 억제/지연 등 의도한 의료적·약리학적 효과를 나타낼 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 항염증용 조성물 등은 유효성분 이외에, 항염증 효과 등의 상승·보강을 위하여 이미 안전성이 검증되고 항염증 활성 등을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 구체적으로 그러한 화합물 또는 추출물로서는 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품공전(식약처 고시, 건강기능식품의 기준 및 규격)상의 MSM(dimethylsulfonylmethane), N-아세틸글루코사민, 글루코사민, 그리고 개별인정을 받은 CMO 함유 FAC(Fatty acid Complex), 가시오갈피 등의 복합추출물, 강황 추출물, 닭가슴 연골 분말, 로즈힙 분말, 보스웰리아 추출물, 비즈왁스알코올, 전칠삼 추출물 등의 복합물, 지방산 복합물, 차조기 등의 복합 추출물, 초록입홍합 추출 오일, 호프 추출물, 황금 추출물 등의 복합물 등을 들 수 있다. 이러한 화합물 또는 천연 추출물은 본 발명의 항염증 조성물에 그 유효성분과 함께 하나 이상 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구르트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품이거나, 식품위생법의 식품공전(식약처 고시, 식품의 기준 및 규격)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 두유류, 발효음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 복용되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품위생법에 따른 식품첨가물공전(식약처 고시, 식품첨가물 기준 및 규격)에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 화학적 합성품, 천연 첨가물, 혼합 제제류로 구분하여 한정적으로 규정되어 있다.
이들 식품첨가물은 기능적 측면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분될 수 있다.
감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것을 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.
풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.
보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.
점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.
그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.
본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.
본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약제학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 들 수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화될 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화될 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등이 사용될 수 있다.
약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 구체적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.
본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다.
본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다. 본 발명의 항염증용 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우, 그 용도는 염증성 피부 자극의 완화로 이해될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 항염증 활성 등을 나타내는 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 황칠나무 추출물, 애기달맞이꽃 추출물 및 온주밀감 추출물을 이용한 항균 및 항염증용 조성물을 제공할 수 있다. 본 발명의 조성물은 식품, 약품 또는 화장품으로 제품화될 수 있다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예> 시료의 제조
시료는 황칠나무 잎 추출물, 애기달맞이꽃 전초 추출물 및 온주밀감 꽃 추출물을 제조하고 단독 또는 혼합하여 사용하였다.
추출물은 건조 분말에 70% 에탄올을 가하고 24시간 동안 교반 추출한 후 여과하고 여과액을 감압농축하고 동결건조하여 분말상으로 제조하여 준비하였다.
추출물 단독 및 혼합물 시료는 아래 표 1과 같다. 혼합 비율은 중량비이다.
| 구분 | 황칠나무 잎 추출물 | 애기달맞이꽃 추출물 | 온주밀감 꽃 추출물 |
| 실시예 1 | 1 | - | - |
| 실시예 2 | - | 1 | - |
| 실시예 3 | - | - | 1 |
| 실시예 4 | 1 | 1 | 1 |
| 실시예 5 | 2 | 1 | 1 |
| 실시예 6 | 1 | 2 | 1 |
| 실시예 7 | 1 | 1 | 2 |
<실험예> 항균 활성 실험 및 항염증 활성 실험
<실험예 1> 항균 활성 실험
(1) 균주 배양
항균 활성은 황색포도상구균인 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 표피포도상구균인 스타필로코쿠스 에피더미스(Staphylococcus epidermidis) 및 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)을 대상으로 하였으며, CCARM(Culture Collection of Antimicrobial Resistant Microbes)으로부터 분양받아 사용하였다.
균주 배양기 위한 배지로 TSA 배지(tryptic soy agar medium) 및 GAM 배지(gifu anaerobic medium)을 디프코라사(Difco La; Sparks, MD. USA)에서 구입하여 사용하였다. 스타틸로코쿠스 아우레우스 및 스타필로코쿠스 에피더미스는 37℃ 호기 조건에서 TSA 배지를 이용하여 배양 하였고 24시간 마다 계대 배양을 실시하였다. 프로피오니박테리움 아크네스는 37℃ 혐기 조건에서 GAM 배지를 이용하여 배양 하였으며 24~48시간 마다 계대 배양하여 실험에 사용 하였다.
(2) 항균 활성 평가
항균 활성 평가는 paper disc 방법을 사용하였다. 구체적으로 각 균주는 10 mL의 액체배지에 접종하고 37℃에서 18시간씩 3회 계대 배양하여 항균 활성 시험균주로 사용하였으며, 시험용 평판배지는 각각의 시험균 농도를 106 CFU/mL로 하여 pour-plate 방법에 따라 배지가 분주된 배양접시에 균일하게 섞은 후 실온에서 응고시켜 사용하였다. 각 시료는 200㎍/mL로 농도로 조제하여 paper disc(Whatman No5, 8 mm)에 25㎕씩 천천히 흡수시킨 후, 용매를 완전히 증발시키고 시험용 평판배지 표면에 disc를 밀착시키고 최적온도 37℃에서 24시간 배양한 후 disc 주변에 생성된 생육저해환(clear zone, mm)의 크기를 측정하였다.
결과를 아래의 표 2에 나타내었다.
| 구분 | S. aureus CCARM 0027 | S. epidermidis CCARM 3710 | P. acnes CCARM 0081 |
| 실시예 1 | 13 | 13 | 12 |
| 실시예 2 | - | 8 | 11 |
| 실시예 3 | - | 8 | 9 |
| 실시예 4 | 9 | 9 | 12 |
| 실시예 5 | 11 | 16 | 11 |
| 실시예 6 | 9 | 13 | 12 |
| 실시예 7 | 11 | 11 | 18 |
스타필로코쿠스 아우레우스에 대해서는 황칠나무 잎 추출물이 가장 항균 활성이 우수하였고, 스타필로코쿠스 에피더미스에 대해서는 실시예 5의 혼합물이, 프로피오니박테리움 아크네스에 대해서는 실시예 7의 혼합물이 가장 항균 활성이 우수하였다.
<실험예 2> 항염증 활성 실험
(1) 세포배양
실험에 사용된 뮤린 대식세포주(murine macrophage cell line)인
한국세포주은행(Korea Cell Line Bank, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였으며, 10% fetal bovine serum (FBS, WELGENE Inc., Daegu, Korea)과 L-glutamine(2mM), penicillin(100U/ml) 및 streptomycin(100U/ml, WelGENE Inc.)이 첨가된 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM, WELGENE Inc.)를 사용하여 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. .
(2) 일산화질소(Nitric oxide, NO) 측정
24 웰 플레이트에 RAW264.7 세포를 웰당 1.5×105 cells로 분주하고 각 시료를 100㎍/mL로 1시간 동안 처리한 후 LPS 1 ㎍/ml를 처리하여 24시간 배양하였다. 다음 세포 배양액을 수집하여 그리스 시약(griess reagent, Sigma)과 10분 동안 반응시킨 후, ELISA reader로 540 nm에서 흡광도 값을 측정하였다. NO 함량은 sodium nitrite(NaNO2)로 표준곡선을 작성하여 계산하였다. 결과를 시료 무처리군 대비 백분율로 아래의 표 3에 나타내었다.
| 구분 | NO 생성 억제 활성 |
| 실시예 1 | 28% |
| 실시예 2 | 23% |
| 실시예 3 | 11% |
| 실시예 4 | 46% |
| 실시예 5 | 31% |
| 실시예 6 | 27% |
| 실시예 7 | 58% |
NO 생성 억제 활성에 있어서 추출물 단독은 대체로 낮은 활성을 나타내었고, 혼합물의 경우는 실시예 7의 혼합물, 실시예 4의 혼합물 순으로 우수하였다.
(3) 염증성 사이토카인 측정
24 웰 플레이트에 RAW264.7 세포를 웰당 1.5×105 cells로 분주하고 각 시료를 100㎍/mL로 1시간 동안 처리한 후 LPS 1 ㎍/ml를 처리하여 24시간 배양하였다. 24시간 배양 후 원심분리(12,000 rpm, 3 min)하여 얻어진 상층액의 염증성 사이토카인을 ELISA 키트(R&D systems, USA)를 이용하여 제조사의 프로토콜에 따라 측정하였다. 결과를 시료 무처리군(LPS만의 처리군) 대비 백분율로 아래의 표 4에 나타내었다.
결과를 아래의 표 2에 나타내었다.
| 구분 | TNF-α | IL-1β |
| 실시예 1 | 24% | 16% |
| 실시예 2 | 16% | 23% |
| 실시예 3 | 14% | 13% |
| 실시예 4 | 43% | 48% |
| 실시예 5 | 27% | 25% |
| 실시예 6 | 34% | 28% |
| 실시예 7 | 62% | 54% |
염증성 사아토카인의 억제 활성에 있어서도 상기 NO 생성 억제 활성과 유사한 경향을 보이면서, 실시예 7의 혼합물과 실시예 4의 혼합물이 우수한 것으로 나타났다.
Claims (11)
- 황칠나무 잎 추출물, 애기달맞이꽃 전초 추출물 및 온주밀감 꽃 추출물 중에서 선택된 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는, 프로피오니박테리움 아크네스, 스타필로코쿠스 에피더미스 또는 스타틸로코쿠스 아우레우스에 대한 항균용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물과 에탄올의 혼합용매로 추출하여 얻어진 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제5항에 있어서,
상기 조성물은 여드름의 치료 또는 예방의 약리 효과를 갖는 조성물.
- 황칠나무 잎 추출물, 애기달맞이꽃 전초 추출물 및 온주밀감 꽃 추출물 중에서 선택된 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증용 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 추출물은 물과 에탄올의 혼합용매로 추출하여 얻어진 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제7항 또는 제8항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
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