KR20200088936A - 녹두 씨앗 추출물 등을 이용한 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 한천배지확산법(disc-agar plate diffusion method)에 의해 치아우식증의 원인균인 스트렙토코커스 뮤탄스, 치주질환의 원인균인 포피로모나스 진지발리스 등에 대해 항균 활성이 확인된 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 및 이들의 혼합물을 이용한 이용한 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물을 개시한다.

Description

녹두 씨앗 추출물 등을 이용한 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물{Composition for improvement of dental caries and periodontal disease using an extract of seeds of Phaseolus radiatus, etc.}

본 발명은 녹두 씨앗 추출물 등을 이용한 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물에 관한 것이다.

국민의 생활수준 향상과 의료기술 발달로 평균수명이 연장되면서 고령인구의 삶의 질을 높이기 위한 구강건강 관리의 중요성이 커지고 있다. 구강건강이 문제가 되어 치아상실까지 유발할 수 있는 대표적인 질환으로 치아우식증과 치주질환이 있다. 2013년 보건복지부의 자료에 따르면, 우리나라 성인 남성의 영구치우식 경험율은 87% 수준이었으며, 여성은 90% 이었다. 또한 우리나라 성인의 만 30세 이상 치주질환 유병률은 2007년부터 2012년까지 감소하다가 2013년에는 다시 증가하였고, 성인 세 명 중에 한 명은 치주질환에 이완된 것으로 조사되었다.

치아우식증은 세계인구의 80% 이상이 경험하고 있으며 서구 일부 선진국에서 1970년대 이후 지속적으로 발병이 감소하고 있으나 우리나라를 비롯하여 동유럽과 일부 아프리카 지역 등에서는 아직도 증가하고 있다(Nishi et al., 2002 Community Dent Oral Epidemiol 2002 30:296-301.). 치아우식증은 여러 가지 동통을 유발할 뿐 아니라, 계속적으로 진행되면 치근단, 치조골 파괴 및 치아 상실을 유발한다. 치아우식증 발생은 식이습관 및 구강 내 미생물과 깊은 관련이 있으며 인체 구강에 서식하는 약 750여종에 달하는 미생물 중 치아우식증을 대표하는 원인균은 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus Mutans)로 알려져 있다(Loesche WJ. Medical Microbiology 1996 (4th ed.);Kilian Clarke J. Br J Exp Pathol. 1924 Jun; 5(3): 141147.; 김혜영, 서울대학교 대학원 박사학위논문 2002).

구강 내에서 스트렙토코커스 뮤탄스가 당분 등을 접하게 되면 치아 사이에 polysaccharide 결정체를 만들어 저장하게 된다. 치아 피막에 부착하여 glucosyltransferase(GTase) 효소의 작용으로 불용성 글루칸(glucan)을 합성한다. 합성된 글루칸은 균 사이의 결합력을 증가시키고 신진대사 폐기물로 형성된 젖산이 polysaccharide 결정체 아래에 축적하여 농축된다. 이렇게 농축된 고농도의 젖산은 치아 구성성분인 인산칼슘 중 Ca²⁺를 녹아내리게 하여 치아 표면 법랑질에 구멍을 내며 치아우식증을 유발하는 것으로 알려져 있다(Sigmund, SS et al., 1992 J. Periodontol. 63:322-331.; Kim et al., Hyunmoonsa 2009 19:307-316). 이에 따라 치아우식증을 예방하기 위하여 스트렙토코커스 뮤탄스에 효과적인 항균제나 GTase의 억제 활성을 보유한 물질을 탐색이 활발하게 진행되고 있다.

치주질환은 잇몸 출혈과 종창, 치주낭의 형성, 부착 치은의 상실, 치조골의 파괴 및 구취와 같은 다양한 임상적인 증상을 나타낸다(Ali RW et al., J. Clin. Periodontol. 1997 24:830-835; Socransky SS et al., J. Clin.Periodontol. 1998 15;440-444). 치주질환은 병의 정도에 따라 치은염(gingivitis)과 치주염(periodontitis)으로 나뉠 수 있는데 비교적 가볍고 회복이 빠른 형태의 치주질환으로 잇몸 즉, 치은출혈 등 연조직에만 국한된 형태를 치은염이라 하고, 이러한 염증이 잇몸과 잇몸뼈(치조골) 주변까지 진행되어 치조골의 흡수 등이 일어나는 경우에는 치주염이라 한다(petersen and Ogawa, J Periodontol. 2005 76;2187-2193).

치주질환은 감염성 원인인 가장 일반적인 만성 질환 중 하나로, 진단 상태에 따르기는 하지만 10~60%의 성인이 갖고 있는 것으로 알려졌다(Xiong X et al., BJOG. 2006 113;135-143; Papapanou PN. Ann Periodontol. 1996 1:1-36; Albandar JM and Rams TE, Periodontol. 2002;29, 7-10). 치주질환은 구강 내 치태라는 생물막(biofilm)에 공존하는 미생물들과 염증작용을 유발하는 미생물 분비물들에 의해 발생하는 특이한 염증성 질환이며(Feng Z and Weinberg A, Periodontol. 2006, 40;50-76.) 미흡한 구강관리, 흡연, 고령화 등에 의해 촉발된다(Burt, J Periodontol. 2005 76;1406-1419).

치주질환의 원인균은 치은을 중심으로 그 하방에 존재하는 치은연하치태(subgingival plaque)에 존재하는 미생물 중 소위 complex라고 명명되는 군에 속한 균 중 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)가 대표적으로 알려져 있다.

포르피로모나스 진지발리스는 숙주조직과 세포에 부착 또는 침투하는 과정에서 대사산물 또는 세포벽 구성성분인 리포폴리사커라이드(Lipopolysaccharide), nuclease, leukotoxin, 황화수소 등의 병원성 물질을 내어 주변 치주조직에 염증 반응을 일으킨다. 이때 숙주 세포에서 생산되는 사이토카인(cytokine), 그리고 사이토카인에 반응하여 생산된 면역계 물질이 치주조직을 더욱 파괴하게 된다(Noda D et al. J Periodontal Res. 2007 42(6): 566-571;Dong Chen et al.,2008 Pharmacology 82(4): 264-269). 치주세포에서 염증 반응이 유도되면 비활성형의 콜라게나제(collagenase)를 비롯한 매트릭스 메탈로프로테나제(matrix metalloproteinase, MMPs)의 활성이 높아지거나 이들의 분비가 자극된다. 메트릭스 매탈로프로테나제는 다형핵백혈구, 대식세포, 치은섬유아세포, 골세포와 같은 다양한 세포로부터 분비되는 칼슘 및 아연 의존 펩티다제로 중성의 pH에서 작용하며, 기질로서는 다양한 세포외기질을 이용하는데 콜라게나제 등의 메트릭스 매탈로프로테나제는 치주조직의 기질인 콜라겐(collagen) 등을 분해하여 국소적인 조직파괴를 일으키며 잇몸 퇴축을 유발한다(Jeng AY et al., Bioorg Med Chem Lett 1998 8: 897.; Emingil G et al., J Clin Periodontol 2008 35(3): 221-229). 이와 같은 진행에 따라 결합조직의 부착상실 및 치조골 상실은 치아 상실로 이어지게 된다.

만성질환인 치아우식증 또는 치주질환을 치료하기 위하여 일반 항균제 또는 소염제를 지속적인 복용할 경우엔 소화기장애, 과민반응, 신장독성, 구강내 독성, 치아변색 등 여러 부작용이 나타날 수 있기 때문에 해당 질환에 특이적이며 안전성이 높은 천연물질을 탐색이 지속적으로 시도되고 있다. 이에 따라 한국등록특허 제1015449390000호에서는 진교 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 치료용 조성물을 개시하고 있으며 한국등록특허 제1015069950000호에서는 오리나루 수피 추출물, 한국등록특허 제1013158050000호에서는 씀바귀 추출물, 한국등록특허 제1012952420000에서는 구맥 추출물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 예방 또는 치료용 조성물을 개시하고 있다. 또한 한국등록특허 제1008716280000호에서는 비틀대모자반 추출물, 한국등록특허 제1012808680000호에서는 야콘 추출물을 포함하는 포르피로모나스 진지발리스 항균 조성물 또는 치주질환 예방용 조성물을 개시하는 등 활발한 연구가 진행되고 있다.

본 발명은 녹두 추출물 등이 치우우식증의 원인균인 스트렙토코커스 뮤탄스, 치주질환의 원인균인 포피로모나스 진지발리스 등에 대해 항균 활성을 가짐을 개시한다.

본 발명의 목적은 녹두 추출물 등을 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.

본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 한천배지확산법(disc-agar plate diffusion method)에 의해, 녹두(Vigna radiata) 씨앗 추출물, 육두구(Myristica fragrans) 씨앗 추출물, 청미래덩굴(Smilax china) 뿌리 추출물 및 이들의 혼합물이 치아우식증의 원인균인 스트렙토코쿠스 뮤탄스(streptococcus mutans)와 치주질환의 원인균인 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)에 항균 활성을 가지고 또 기타 유해 미생물인 대장균(E. coli), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)에 대해 항균 활성을 가지며, 또한 구강 청결 항균 효과, 구취 제거 효과 등을 가질 뿐만 아니라 자극도 낮고 향미 등 기호도가 우수함을 확인함으로서 완성된 것이다.

전술한 바를 고려할 때, 본 발명은 일 측면에 있어서, 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 개선용 조성물로 파악할 수 있고, 다른 측면에 있어서는 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 치주질환 개선용 조성물로 파악할 수 있으며, 다른 측면에 있어서는 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 스트렙토코커스 뮤탄스, 포피로모나스 진지발리스, 대장균, 스타필로코쿠스 아우레우스 또는 바실러스 세레우스에 대한 항균용 조성물로 파악할 수 있다.

본 명세서에서, "추출물"이란 추출 대상을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매, 특히 60% 내지 90%의 에탄올 수용액으로 추출하여 얻어진 것을 의미한다.

또 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

또 본 명세서에서, "개선"이란 대상 질환인 치아우식증 또는 치주질환의 예방, 치료 또는 증상의 경감을 포함하는 의미이다.

또 본 명세서에서, "항균"은 해당 미생물의 사멸 유도 또는 증식 억제를 포함하는 의미이다.

본 발명의 치아우식증 개선용 조성물, 치주질환 개선용 조성물 또는 항균용 조성물(이하 통칭하여 "본 발명의 조성물")은 그 유효성분을 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 치료를 의도하는 치아우식증 개선 활성, 치주질환의 개선 활성, 항균 활성 등을 나타낼 수 있는 한 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게 의료 전문가 등의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 치아우식증 등의 개선, 치료, 또는 그러한 병리적 증상의 발병 억제/지연 등 의도한 의료적·약리학적 효과를 나타낼 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품이거나, 식품위생법의 식품공전(식약처 고시, 식품의 기준 및 규격)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 두유류, 발효음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해되는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 복용되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품위생법에 따른 식품첨가물공전(식약처 고시, 식품첨가물 기준 및 규격)에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 화학적 합성품, 천연 첨가물, 혼합 제제류로 구분하여 한정적으로 규정되어 있다.

이들 식품첨가물은 기능적 측면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분될 수 있다.

감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것을 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.

보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.

점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.

그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 구강청결제 조성물 제형 또는 치약 조성물 제형 등의 의약외품 제형, 경구용 제형 또는 비경구용 제형 등의 의약품 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.

본 발명의 조성물이 구강청결제 조성물 제형, 치약 조성물 제형으로 제조될 경우, 페이스트상, 분말상, 분무상 또는 액상(가글상)으로 제조될 수 있으며, 본 발명의 유효성분인 카르노스산을 포함하는 이외에, 충치 예방 약효 성분, 연마제 성분, 습윤제 성분, 결합제 성분, 기포제 성분, 감미제 성분, 향료 성분 및 색소 성분으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다.

상기 충치 예방 약효 성분으로서 불화나트륨, 불화인산나트륨, 불화아민, 불화주석, 클로로헥시딘, 세틸피리디움 클로라이드, 트리클로산, 자일리톨, 죽염 및 프로폴리스으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 성분을 사용할 수 있다.

또 상기 연마제 성분으로서 침강실리카, 실리카겔, 지르코늄실리케이트, 인산일수소칼슘, 무수인산일수소칼슘, 함수알루미나, 경질탄산칼슘, 중질탄산칼슘, 칼슘피로인산염, 불용성메타인산염 및 알루미늄실리케이트으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 성분을 사용할 수 있다.

또 상기 습윤제 성분으로서 글리세린, 소르비톨, 자일리톨, 폴리에틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. 이러한 습윤제 성분은 페이스트 제형을 만드는데 필수적인 베이스 성분으로 치약이 공기 중에 노출될 때 건조, 고화되는 것을 방지하고 치약의 표면에 윤기를 제공할 뿐만 아니라, 종류에 따라서는 양치시 감미 효과를 주는 역할을 한다.

또 상기 결합제 성분으로서 수용성의 고분자 종류라면 어떤 것이든 사용할 수 있는데, 바람직하게는 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 카라기난류, 잔탄검 등을 사용할 수 있다. 상기 결합제는 고체인 분말 성분과 액체 성분이 분리되지 않게 하는 작용을 한다.

또 상기 기포제 성분으로서는 음이온성 계면활성제인 라우릴황산나트륨을 사용하는 것이 바람직하며, 제형의 특성에 따라 보조적으로 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌의 공중합체(폴록사머), 폴리옥시에틸렌경화피마자유 또는 폴리옥시에틸렌솔비탄 지방산에스테르 등의 비이온성 계면활성제를 사용할 수 있다. 이러한 기포제 성분은 제품의 사용감을 증진시키고 세정 작용을 도와주며, 기타 약효 성분의 분산 및 침투를 신속하게 하고, 계면장력을 감소시킴으로서 구강내 이물질을 쉽게 떨어지게 하는 작용을 한다.

또 상기 향료 성분, 감미제 성분, 색소 성분 등은 치약 조성물의 사용감을 좋게 하기 위한 것으로, 향료 성분으로서는 식용 가능한 것을 사용하는 것이 바람직한데, 그러한 성분으로서는 예컨대 멘톨, 페파민트 오일, 스피아민트 오일, 세이지, 유칼립톨, 메틸살리실레이트 또는 과일추출물 등을 들 수 있다.

또 상기 감미제 성분으로서는 삭카린나트륨을 사용하는 것이 바람직하며, 상기 색소 성분으로서는 식용색소를 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약제학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 들수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화될 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화될 수 있으며, 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등이 사용될 수 있다.

약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 보다 구체적인 사항은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.

본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되지 아니 한다.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 녹두 추출물 등을 치아우식증 및 치주질환 개선용 조성물을 제공할 수 있다. 본 발명의 조성물은 구강 청결제, 치약 등의 의약외품, 기능성 식품, 약품 등으로 제품화될 수 있다.

도 1은 녹두 추출물 등의 스트렙토코쿠스 뮤탄스 등에 대한 항균 활성을 나타낸 결과이다.
도 2는 녹두 추출물 등이 함유된 구강 청결제의 스트렙토코쿠스 뮤탄스 등에 대한 항균 활성을 나타낸 결과이다.
도 3은 녹두 추출물 등이 함유된 구강 청결제 사용 전후의 구강 내 세균수 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 녹두 추출물 등이 함유된 구강 청결제 사용 전후의 구강내 구취가스 분석 실험 결과이다.

이하 본 발명을 실시예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예에 한정되는 것은 아니다.

< 실시예 > 구강 미생물 등에 대한 항균 활성 실험, 구강내 세균수 측정 실험, 구강내 구취가스 분석 실험 및 관능평가 실험

1.시료 및 방법

1.1 시료

추출물 시료는, 녹두(추출 부위: 씨앗), 육두구(추출 부위: 씨앗) 및 청미래덩굴(추출 부위: 뿌리) 각 건조 분말에 10배 중량의 80% 에탄올을 가하고 80℃에서 4시간 동안 추출하고 여과지(Whatman #2)로 여과 후 감압농축하고 동결건조하여 분말로 준비하였다.

혼합물 시료는 아래 표에 기재된 바의 중량비로 준비하였다. 5% 에탄올은 보존제 및 가용화제의 용도로 사용되었으며, 용매는 구강청결제로서의 사용을 고려하여 계면활성제인 Tween 20을 사용하여, 시제품 형태로 제조하였다.

혼합 비율(%, w/v)

구분	녹두 추출물	육두구 추출물	청미래덩굴 추출물	5% 에탄올
CM1	0	1	1	3
CM2	0.5	1	0.5	3
CM3	0.5	0.5	1	3
CM4	0.5	1	1	3

1.2 항균 활성 실험

항균 활성은, 구강 미생물인 스트렙토코쿠스 뮤탄스(streptococcus mutans)와 포르피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis)와 기타 유해 미생물인 대장균(E. coli), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)를 대상으로 하였다.

배지는, 스트렙토코쿠스 뮤탄스에 대해서는 BHI(Brain Heart Infusion 배지(Bacto BHI, BD, USA)를, 혐기성 균인 포르피로모나스 진지발리스에 대해서는 sheep blood + hemin + menadione 5%가 포함된 TSA(Tryptic Soy Agar) 배지를, 기타 유해 미생물에 대해서는 LB 배지를 사용하였다.

혐기성 균인 포르피로모나스 진지발리스는 혐기성을 유지하는 챔버로 배양용 anaerobic jar, Merck co.)를 구입하여 내부에 가스팩을 넣고 인디케이터로 혐기성 유무를 확인하여 실험을 수행하였다.

시료의 항균 활성 실험은 한천배지확산법(disc-agar plate diffusion method)을 이용하였다. 구체적으로 시료를 메탄올에 일정한 농도로 녹여 0.45 ㎛ membrane filter(Milipore, USA)로 여과하여 멸균된 filter paper disc(Toyo seisakusho, 8 ㎜)에 다양한 농도로 40 ㎕씩 흡수시킨 후 시험용 평판배지 위에 놓고 28℃의 incubator에서 20시간 배양한 다음 disc 주변의 clear zone의 직경(㎜)을 측정하였다.

1.3 구강내 세균수 측정 실험

구강내 미생물에 대한 항균 활성 실험은, 가글 후(입안 행굼 후 10분, 20분 및 60분) LB 배지 및 BHI(Brain Heart Infusion) 배지를 이용하여 세균수를 측정하여 수행하였다. 여기서 대조군은 멸균수로 입안을 행구고 그 행굼액을 가지고 한 것이다.

1.4 구강내 구취가스 분석 실험

구강내 구취 가스 분석 실험은 가글 후(입안 행굼 후 10분, 20분 및 30분)에 구취의 주요 원인물질 중 하나인 methyl mercaptan을 정량하여 이루어졌다. 입속의 구취가스 채취는 가글후 입을 10분간 다물게 한 후 500 ml 부피의 폴리프로필렌 재질의 공기주머니에 구취가스를 입으로 불어 주입하고 밀봉하였다. 시료는 가스검지기(GV-100S, Gastec, Japan)를 사용하여 측정하였다. 정량 방법은 멸균수로 입안을 행굼처리한 대조구 측정값과 시제품처리 측정값을 상호비교하여 수행하였다.

1.5 관능평가

관능평가는 동신대학교 학생 20명을 관능평가 요원으로 하여 자극도(irritation degree), 맛, 냄새, 기호도에 대해서 아래의 5점 척도법에 따라 수행하고 각 평가점수를 합산하였다. 비교예(Control)는 시중에 판매되는 리스테린(녹차 첨가)를 가지고 수행하였다.

- 자극도: 자극이 강함(1), 자극이 보통(2), 자극이 적당(3), 자극이 약함(4), 자극이 없음(5)

- 냄새, 맛 또는 기호도: 아주 좋음(5), 좋음(4), 보통(3), 나쁨(2), 매우 나쁨(1)

2. 실험 결과

2.1 항균 활성 실험 결과

항균 활성 실험 결과를, 추출물에 대해서는 도 1에 나타내었고, 혼합물에 대해서는 도 2에 나타내었다. 도 1을 참조하여 보면, 3가지 추출물 시료 모두 대체로 항균 활성을 보였고, 특히 육두구 추출물과 청미래덩굴 추출물은 거의 모든 미생물에 대해서 대체로 높은 항균 활성을 보였으며, 구강 미생물에 대해서는 스트렙토코쿠스 뮤탄스에 대해서 높은 항균 활성을 보였다. 도 2를 참조하여 보면 혼합물의 경우 도 2에서 확인되듯이 CM4가 가장 높은 항균 활성을 보였다.

2.2 구강내 세균수 측정 결과

구강내 세균수 측정 결과를 도 3에 나타내었다. 여기서 시료는 가장 항균 활성이 높은 CM4만을 사용하였다. 구강내 세균수 측정 결과 가글 전후 구강내 세균수는 뚜렷하게 감소하였음을 알 수 있다. 도 3의 사진은 가글액을 뱉어내고 20분 후 세균수를 측정한 결과이다.

2.3 구강내 구취가스 분석 실험 결과

상기 혼합물 시료에 대해서 구강내 구취가스 분석 실험 결과를 도 4에 나타내었다. 도 4를 참조하여 보면, 혼합물 시료는 모두 구취 제거 효과가 있었으며, 특히 CM4 시료가 효과가 높았다.

2.4 관능평가 결과

관능평가 결과를 아래의 표에 나타내었다. 관능평가도 CM4만을 가지고 수행하였다.

시중에 판매되는 리스테린(녹차첨가)의 경우 자극성이 강하다는 의견이 많았으나 개발된 시제품 CM4는 자극성이 적고 전체적인 기호도가 양호한 것으로 조사되었다. 시제품 CM4는 린스테린보다 뛰어난 유의적으로 차이가 있었고 우수한 제품임을 확인하였다.

Claims (9)

1. 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 치아우식증 개선용 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 구강청결제 조성물 또는 치약 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
5. 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 치주질환 개선용 조성물.
   
6. 제5항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 구강청결제 조성물 또는 치약 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
7. 제5항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
8. 제5항에 있어서,
   상기 상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
9. 녹두 씨앗 추출물, 육두구 씨앗 추출물, 청미래덩굴 뿌리 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물로서,
   상기 항균은 스트렙토코커스 뮤탄스, 포피로모나스 진지발리스, 대장균, 스타필로코쿠스 아우레우스 또는 바실러스 세레우스에 대한 항균 활성인 것을 특징으로 하는 조성물.

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