KR20190108520A - 관중, 단삼 및 황금 추출물을 포함하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents

Abstract

관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물 및 상기 조성물의 제조방법이 개시된다.
상기 조성물은 세균류 또는 진균류와 같은 균주에 대한 항균 또는 항진균 효능이 우수하므로, 항균 또는 항진균 효과를 나타내는 다양한 제품에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

관중, 단삼 및 황금 추출물을 포함하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물 및 이의 제조방법{COMPOSITION WITH ANTIMICROBIAL OR ANTIFUNGAL ACTIVITY COMPRISING DRYOPTERIS CRASSIRHIZOMA NAKAI EXTRACT, SALVIA MILTIORRHIZA BUNGE EXTRACT AND SCUTELLARIA BAICALENSIS EXTRACT AND METHOD FOR PREAPARING THE SAME}

본 발명은 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물 및 상기 조성물의 제조방법에 관한 것이다.

관중(Dryopteris crassirhizoma Nakai)은 면마과에 속하는 여러해살이풀로 우리나라 각처의 산지에서 자라는 여러해살이 양치류다. 습기가 많고 토양이 비옥한 곳에 잘 자란다. 주로 무리를 지어 자란다. 키는 50~100㎝이고, 잎은 길이가 약 1m 내외이며, 폭은 약 25㎝로 뿌리에서 바로 나온다. 줄기에는 광택이 많이 나고 황갈색 혹은 흑갈색의 비늘 같은 것이 있다. 잎 조각은 약 20~30쌍이 달린다. 관중은 전 세계에 약 150종이 자라고 우리나라에도 20여 종이 자란다. 양치식물 중에는 그 종류가 가장 많은 편이다. 관중의 원산지는 우리나라이다.

단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge)은 다년생 초본으로 근경이나 종자로 번식한다. 중국이 원산지로 중부지방에 분포하며 산지에서 자란다. 줄기는 높이 40~80cm 정도이고 전체에 털이 많다. 잎은 마주나고, 단엽 또는 2회 우상복엽으로 소엽은 1~3쌍으로 난형이고 뒷면에 털이 있으며 가장자리에 톱니가 있다. 5~6월에 층층으로 달리는 꽃은 자주색이다. '둥근배암차즈기’와 달리 전체 털이 많으며 꽃대축에 선모가 밀생하고 뿌리는 굵다. 약용식물로 재배하고 밀원용이나 관상용으로도 심는다. 어린순을 삶아 나물로 먹는다.

황금(Scutellaria baicalensis)은 꿀풀과에 속하는 여러해살이풀로 주로 남부지방에서 재배한다. 잎은 마주나는데 길이 4.5cm, 나비 8mm의 댓잎피침형으로서 양 끝이 좁고 가장자리가 밋밋하며 위로 올라갈수록 잎이 작아진다. 잎자루는 길이 2mm 정도로 거의 없다. 꽃은 7∼8월에 자주색 꽃이 줄기 끝과 가지 끝에서 총상 꽃차례를 이루며 한쪽으로 치우쳐 달려 핀다. 꽃차례에 잎이 있으며 잎겨드랑이마다 꽃이 1개씩 달린다. 길이 1.5~2.5cm인 꽃부리는 밑 부분에서 꼬부라져 곧게 서는데 밑은 통 모양이며 위는 양 입술 모양이고 위쪽이 2개로 갈라진다. 꽃받침도 양 입술 모양이며 위쪽에 돌기 같은 부속체가 있다. 수술은 4개이고 2개가 길다. 암술은 1개이고 씨방은 4개로 깊게 갈라진다.

본 발명자들은 상기 약재들을 사용하여 항균 조성물을 제조할 경우, 항균 또는 항진균 효과가 우수한 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

이와 관련하여, 대한민국 등록특허 제10-1575603호는 질염의 예방 또는 치료용 항균제 조성물 및 이를 유효성분으로 포함하는 여성용 청결제 조성물에 대하여 개시하고 있다.

본 발명은 전술한 문제를 해결하고자 안출된 것으로서, 본 발명의 일 실시예는 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명의 다른 일 실시예는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 기술적 과제로 한정되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

전술한 기술적 과제를 달성하기 위한 기술적 수단으로서, 본 발명의 일 측면은,

관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물을 제공한다.

상기 조성물은 녹농균(psedomonas aeruginosa), 황색포도산구균(staphylococcus aureus) 또는 대장균(escherichia coli)에 대해 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.

상기 조성물은 아스페르길루스 브라실리엔시스(aspergillus brasiliensis), 아스페르길루스 푸리가투스(aspergillus fumigatus), 캔디다 알비칸스(candida albicans) 또는 크립토고쿠스 네오포만스(cryptococcus neoformans)에 대해 항진균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.

상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물은 각각 관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 물, C1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출한 것일 수 있다.

상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 중량 혼합 비율은 1: 0.5 내지 2: 0.5 내지 2인 것일 수 있다.

상기 조성물은 화장품, 피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 욕실용 세정제, 구강 세정제, 주방용 세정제, 화장품 보존제, 식품 보존제, 의약품 보존제, 식품첨가제 및 사료첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상에 사용되는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.

또한, 본 발명의 다른 일 측면은,

관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 각각 용매와 혼합시키는 단계; 상기 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 및 상기 추출된 각각의 혼합물을 혼합시키는 단계;를 포함하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 관중 분말, 단삼 분말 또는 황금 분말과 용매와의 혼합은 용매 1 L 대비 상기 분말을 100 g 내지 300 g의 비율로 혼합하는 것일 수 있다.

상기 조성물의 제조방법은 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 이후에, 상기 추출된 각각의 혼합물을 감압농축 및 동결건조 시키는 단계;를 더 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 관중, 단삼 및 황금 추출물을 포함하는 조성물은 세균류 또는 진균류와 같은 균주에 대한 항균 또는 항진균 효능이 우수하므로, 항균 또는 항진균 효과를 나타내는 다양한 제품에 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 특허청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 관중의 추출 과정을 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 최종적으로 추출된 관중 추출물을 나타낸 사진이다.
도 3은 본 발명의 일 실험예에 따른 관중 추출물을 분석한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 단삼의 추출 과정을 나타낸 사진이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 최종적으로 추출된 단삼 추출물을 나타낸 사진이다.
도 6은 본 발명의 일 실험예에 따른 단삼 추출물을 분석한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 황금의 추출 과정을 나타낸 사진이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 최종적으로 추출된 황금 추출물을 나타낸 사진이다.
도 9는 본 발명의 일 실험예에 따른 황금 추출물을 분석한 그래프이다.
도 10은 본 발명의 일 실험예에 따른 3 종의 세균류 배지에 조성물을 처리한 후의 사진이다.
도 11은 본 발명의 일 실험예에 따른 4 종의 진균류 배지에 조성물을 처리한 후의 사진이다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 않으며 본 발명은 후술할 청구범위의 의해 정의될 뿐이다.

덧붙여, 본 발명에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 발명의 명세서 전체에서 어떤 구성요소를 '포함'한다는 것은 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있다는 것을 의미한다.

본원의 제 1 측면은,

관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물을 제공한다.

이하, 본원의 제 1 측면에 따른 상기 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물을 상세히 설명한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중(Dryopteris crassirhizoma Nakai)은 면마과에 속하는 여러해살이풀로 우리나라 각처의 산지에서 자라는 여러해살이 양치류다. 습기가 많고 토양이 비옥한 곳에 잘 자란다. 주로 무리를 지어 자란다. 키는 50~100㎝이고, 잎은 길이가 약 1m 내외이며, 폭은 약 25㎝로 뿌리에서 바로 나온다. 줄기에는 광택이 많이 나고 황갈색 혹은 흑갈색의 비늘 같은 것이 있다. 잎 조각은 약 20~30쌍이 달린다. 관중은 전 세계에 약 150종이 자라고 우리나라에도 20여 종이 자란다. 양치식물 중에는 그 종류가 가장 많은 편이다. 관중의 원산지는 우리나라이다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 단삼(Salvia miltiorrhiza Bunge)은 다년생 초본으로 근경이나 종자로 번식한다. 중국이 원산지로 중부지방에 분포하며 산지에서 자란다. 줄기는 높이 40~80cm 정도이고 전체에 털이 많다. 잎은 마주나고, 단엽 또는 2회 우상복엽으로 소엽은 1~3쌍으로 난형이고 뒷면에 털이 있으며 가장자리에 톱니가 있다. 5~6월에 층층으로 달리는 꽃은 자주색이다. '둥근배암차즈기’와 달리 전체 털이 많으며 꽃대축에 선모가 밀생하고 뿌리는 굵다. 약용식물로 재배하고 밀원용이나 관상용으로도 심는다. 어린순을 삶아 나물로 먹는다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 황금(Scutellaria baicalensis)은 꿀풀과에 속하는 여러해살이풀로 주로 남부지방에서 재배한다. 잎은 마주나는데 길이 4.5cm, 나비 8mm의 댓잎피침형으로서 양 끝이 좁고 가장자리가 밋밋하며 위로 올라갈수록 잎이 작아진다. 잎자루는 길이 2mm 정도로 거의 없다. 꽃은 7∼8월에 자주색 꽃이 줄기 끝과 가지 끝에서 총상 꽃차례를 이루며 한쪽으로 치우쳐 달려 핀다. 꽃차례에 잎이 있으며 잎겨드랑이마다 꽃이 1개씩 달린다. 길이 1.5~2.5cm인 꽃부리는 밑 부분에서 꼬부라져 곧게 서는데 밑은 통 모양이며 위는 양 입술 모양이고 위쪽이 2개로 갈라진다. 꽃받침도 양 입술 모양이며 위쪽에 돌기 같은 부속체가 있다. 수술은 4개이고 2개가 길다. 암술은 1개이고 씨방은 4개로 깊게 갈라진다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 “항균 활성을 갖는 조성물” 또는 “항진균 활성을 갖는 조성물”은 항미생물제를 총칭하는 의미인 항생제와 같은 의미일 수 있고, 항균제, 항진균제, 살균제, 방부제, 보존제 또는 제균제와 같은 의미일 수 있으며, 일예로 식중독을 일으키거나 화농성 감염증의 원인이 되는 세균, 수술, 화상 등 생체의 저항력이 저하되어 있는 경우 감염으로 인해 질환을 악화시킬 수 있는 세균, 구강 질환이나 질염의 원인이 되는 세균을 포함하는, 병원성 미생물의 발육과 생활 기능을 저지, 억제 또는 사멸할 수 있는 물질을 의미한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 녹농균(psedomonas aeruginosa), 황색포도산구균(staphylococcus aureus) 또는 대장균(escherichia coli)에 대해 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 것일 수 있으며, 아스페르길루스 브라실리엔시스(aspergillus brasiliensis), 아스페르길루스 푸리가투스(aspergillus fumigatus), 캔디다 알비칸스(candida albicans) 또는 크립토고쿠스 네오포만스(cryptococcus neoformans)에 대해 항진균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 추출물을 수득하기 위한 추출방법은 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법 또는 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있으나, 바람직하게는 용매추출법을 사용하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물은 각각 관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 물, C1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출한 것일 수 있다. 본원의 일 실시예에 따르면, 상기 추출 용매는 혼합 용매일 수 있으며, 이때 상기 혼합 용매는 에탄올 및 증류수를 1:1의 중량비로 혼합한 것일 수 있다. 한편, 상기 추출 온도는 40℃ 내지 100℃일 수 있으며, 바람직하게 60℃인 것일 수 있고, 추출 시간은 24 시간 내지 100 시간일 수 있고, 바람직하게 72 시간 동안 수행되는 것일 수 있다. 상기 추출 온도 및 추출 시간이 상기 범위 미만일 경우 추출이 원활히 진행되지 않는 것일 수 있으며, 상기 범위 초과일 경우 이미 추출이 원활히 진행되는 조건을 벗어난 것이기 때문에 비경제적인 것일 수 있다. 또한, 상기 추출은 플라스크 내부에서 수행되는 것일 수 있으며, 이때 상기 플라스크는 쉐이커(shaker)를 포함하는 것일 수 있고, 상기 쉐이커의 교반속도는 200 rpm 내지 300 rpm인 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중 추출물은 필마론(filmarone), 아스피딘(aspidin), 알바아스피딘(albaspidin), 아스피디놀(aspidinol), 플라바스피딕산(flavaspidic acid), 필리신산(filicinic acid), 포나스테론 A(ponasterone A), 엑디스테론(ecdysterone), 프테로스테론 알칼로이드 : 살비아밀트아마이드(pterosteroned Alkaloid : salviamiltamide), 3-(3',4'-디하이드록시페닐)-(2R)-락타마이드(3-(3',4'-dihydroxyphenyl)-(2R)-lactamide) 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 물질을 포함하는 것일 수 있다. 또한, 상기 단삼 추출물은 디테르페노이드(Diterpenoid) 계열 화합물인 탄시논 I, II, IIA, IV(tanshinone I, II, IIA, IV), 올레오일 네오크립토탄시논(oleoyl neocryptotanshinone), 올레오일단센신컨(oleoyl danshenxinkun), 네오크립토탄시논(neocryptotanshinone), 디하이드로탄시논 I(dihydrotanshinone I), 단센신컨 A, B(danshenxinkun A, B), 네오크립토탄시논 II(neocryptotanshinone II), 6,12-디히드-로실아비-타-5,8,11,13-테트라엔-7-온(6,12-dihyd-roxyabie-ta-5,8,11,13-tetraen-7-one)과 페놀릭(Phenolic) 계열 화합물인 로스마린산(rosmarinic acid), 리토스페르민산 A, B(lithospermic acid A, B), 살-비아놀린산 A, B(sal-vianolic acid A, B), 그리고 알칼로이드(Alkaloid) 계열 화합물인 살비아밀타마이드(salviamiltamide), 3-(3',4'-디히드록시페닐)-(2R)-락타마이드(3-(3',4'-dihydroxyphenyl)-(2R)-lactamide) 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 물질을 포함하는 것일 수 있다. 더불어, 상기 황금 추출물은 바이칼린(baicalin), 바이칼레인(baicalein), 우고닌(wogonin), 우고닌-7-O-글루쿠로-나이드(wogonin-7-O-glucuro-nide), 오로실린 A(oroxylin A), 스컬캅플래본 I, II(skullcapflavone I, II), 2(S)-,2',5,6', chrysin, 디히드로오록실린 A(dihydrooroxylin A) 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 물질을 포함하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 중량 혼합 비율은 1: 0.5 내지 2: 0.5 내지 2인 것일 수 있으며, 바람직하게 상기 세 가지 추출물 중 두 가지 추출물 1 중량부 대비 나머지 하나의 추출물이 1.5 중량부만큼 혼합되는 것일 수 있고, 더욱 바람직하게는 1:1:1의 중량 혼합 비율로 혼합되는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 화장품, 피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 욕실용 세정제, 구강 세정제, 주방용 세정제, 화장품 보존제, 식품 보존제, 의약품 보존제, 식품첨가제 및 사료첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상에 사용되는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물이 세정제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품은 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 핸드워시, 바디워시, 샴푸, 린스, 클렌징폼, 클렌징젤, 비누, 가글, 치약, 욕실용 세정제, 주방용 세정제 등에 적용될 수 있다. 이 경우 상기 조성물은 세정제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/mL 내지 10000 μg/mL의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 세정제는 상기 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질을 더 포함할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물이 보존제 또는 방부제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품은 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 화장품, 식품, 의약품 등에 적용될 수 있다. 이 경우 상기 조성물은 보존제 또는 방부제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/mL 내지 10000 μg/mL의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 보존제 또는 방부제는 상기 조성물 이외에, 항균 활성 또는 방부 활성을 가지는 다른 공지 물질을 더 포함할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물이 첨가제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품은 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 식품 및 동물사료 등에 적용될 수 있다. 이 경우 상기 조성물은 첨가제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/mL 내지 10000 μg/mL의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 첨가제는 상기 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질이나 기타 기능성을 부여할 수 있는 물질을 더 포함할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물이 살균제 소재로 사용되는 경우, 적용될 수 있는 물품은 특별히 한정되지 않으며, 구체적으로는 소독제 및 가습기 살균제 등에 적용될 수 있다. 이 경우 상기 조성물은 첨가제 총 중량에 대하여 0.00001 내지 50 중량%로 포함될 수 있고, 1 μg/mL 내지 10000 μg/mL의 농도로 포함될 수 있다. 또한, 상기 첨가제는 상기 조성물 이외에, 항균 활성을 가지는 다른 공지 항균 물질이나 기타 기능성을 부여할 수 있는 물질을 더 포함할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물은 투여를 위하여 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 포함하여 약학적 조성물로 제제화될 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 약학적 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함할 수 있다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함할 수 있다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.

본원의 제 2 측면은,

관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 각각 용매와 혼합시키는 단계; 상기 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 및 상기 추출된 각각의 혼합물을 혼합시키는 단계;를 포함하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법을 제공한다.

본원의 제 1 측면과 중복되는 부분들에 대해서는 상세한 설명을 생략하였으나, 본원의 제 1 측면에 대해 설명한 내용은 제 2 측면에서 그 설명이 생략되었더라도 동일하게 적용될 수 있다.

이하, 본원의 제 2 측면에 따른 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법을 단계별로 상세히 설명한다.

우선, 본원의 일 구현예에 있어서, 상기 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법은 관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 각각 용매와 혼합시키는 단계;를 포함한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중 분말, 단삼 분말 또는 황금 분말과 용매와의 혼합은 용매 1 L 대비 상기 분말을 100 g 내지 300 g의 비율로 혼합하는 것일 수 있으며, 바람직하게 용매 1 L 대비 상기 분말을 200 g의 비율로 혼합하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 용매는 물, C1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매를 포함하는 것일 수 있으며, 바람직하게 에탄올 및 증류수를 1:1의 중량비로 혼합한 것일 수 있다.

다음으로, 본원의 일 구현예에 있어서, 상기 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법은 상기 혼합물을 각각 추출시키는 단계;를 포함한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 추출 온도는 40℃ 내지 100℃일 수 있으며, 바람직하게 60℃인 것일 수 있고, 추출 시간은 24 시간 내지 100 시간일 수 있고, 바람직하게 72 시간 동안 수행되는 것일 수 있다. 상기 추출 온도 및 추출 시간이 상기 범위 미만일 경우 추출이 원활히 진행되지 않는 것일 수 있으며, 상기 범위 초과일 경우 이미 추출이 원활히 진행되는 조건을 벗어난 것이기 때문에 비경제적인 것일 수 있다. 또한, 상기 추출은 플라스크 내부에서 수행되는 것일 수 있으며, 이때 상기 플라스크는 쉐이커(shaker)를 포함하는 것일 수 있고, 상기 쉐이커의 교반속도는 200 rpm 내지 300 rpm인 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물의 제조방법은 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 이후에, 상기 추출된 각각의 혼합물을 필터링하는 단계;를 더 포함하는 것일 수 있다. 이때, 상기 필터링은 상기 혼합물에 포함된 이물질을 제거하기 위하여 수행하는 것으로서 3회 정도 수행하는 것일 수 있다. 바람직하게 상기 필터링은 Whatman Glass Microfiber filter paper를 이용하여 수행하는 것일 수 있다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 조성물의 제조방법은 상기 추출된 각각의 혼합물을 필터링하는 단계; 이후에, 상기 필터링된 각각의 혼합물을 감압농축 및 동결건조 시키는 단계;를 더 포함하는 것일 수 있다. 이때, 상기 추출물을 감압농축 및 동결건조 시키는 것은 통상적인 방법을 사용하는 것이면 제한이 없으며, 이를 통하여 상기 추출물을 분말화 시킬 수 있는 것일 수 있다.

다음으로, 본원의 일 구현예에 있어서, 상기 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법은 상기 추출된 각각의 혼합물을 혼합시키는 단계;를 포함한다.

본원의 일 구현예에 있어서, 상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 중량 혼합 비율은 1: 0.5 내지 2: 0.5 내지 2인 것일 수 있으며, 바람직하게 상기 세 가지 추출물 중 두 가지 추출물 1 중량부 대비 나머지 하나의 추출물이 1.5 중량부만큼 혼합되는 것일 수 있다.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.

제조예 1: 관중 추출물의 제조

시중에서 판매하는 국산 관중을 이용하여 관중 추출물을 제조하였다.

먼저, 플라스크에 에탄올 50% 및 증류수 50%의 혼합 용매를 넣은 후, 관중을 혼합용매 1L당 200g의 비율로 첨가하였다. 상기 플라스크를 수조에 넣은 후, 수조 온도를 60℃로 유지하면서 72시간 동안 추출 공정을 진행하였다. 교반속도는 250rpm으로 유지하였고, 플라스크 내부에 플라스틱 shaker를 넣어 추출 공정을 진행하였다.

다음으로, 추출 공정이 끝난 후의 추출 용액을 3회 필터링하여 이물질을 제거하였다. 필터링을 통해 이물질이 제거된 추출용액을 2일 동안 상온에서 보관한 후, Whatman Glass Microfiber filter paper를 이용하여 한 번 더 필터링 하였다.

마지막으로, 필터링이 완료된 추출용액을 수분이 없어질 때 까지 농축하여 분말화하여 관중 추출물을 제조하였다.

도 1은 관중의 추출 과정을 촬영한 사진이고, 도 2는 최종적으로 추출된 관중 추출물의 사진이고, 도 3은 관중 추출물을 분석한 그래프이다.

관중 추출물의 분석결과 주요 성분은 필마론(filmarone), 아스피딘(aspidin), 알바아스피딘(albaspidin), 아스피디놀(aspidinol), 플라바스피딕산(flavaspidic acid), 필리신산(filicinic acid), 포나스테론 A(ponasterone A), 엑디스테론(ecdysterone), 프테로스테론 알칼로이드 : 살비아밀트아마이드(pterosteroned Alkaloid : salviamiltamide), 3-(3',4'-디하이드록시페닐)-(2R)-락타마이드(3-(3',4'-dihydroxyphenyl)-(2R)-lactamide) 등으로 확인되었다.

제조예 2: 단삼 추출물의 제조

관중 대신 단삼을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 단삼 추출물을 제조하였다.

도 4는 단삼의 추출 과정을 촬영한 사진이고, 도 5는 최종적으로 추출된 단삼 추출물의 사진이고, 도 6은 단삼 추출물을 분석한 그래프이다.

단삼 추출물의 분석결과 주요 성분은 디테르페노이드(Diterpenoid) 계열 화합물인 탄시논 I, II, IIA, IV(tanshinone I, II, IIA, IV), 올레오일 네오크립토탄시논(oleoyl neocryptotanshinone), 올레오일단센신컨(oleoyl danshenxinkun), 네오크립토탄시논(neocryptotanshinone), 디하이드로탄시논 I(dihydrotanshinone I), 단센신컨 A, B(danshenxinkun A, B), 네오크립토탄시논 II(neocryptotanshinone II), 6,12-디히드-로실아비-타-5,8,11,13-테트라엔-7-온(6,12-dihyd-roxyabie-ta-5,8,11,13-tetraen-7-one)과 페놀릭(Phenolic) 계열 화합물인 로스마린산(rosmarinic acid), 리토스페르민산 A, B(lithospermic acid A, B), 살-비아놀린산 A, B(sal-vianolic acid A, B), 그리고 알칼로이드(Alkaloid) 계열 화합물인 살비아밀타마이드(salviamiltamide), 3-(3',4'-디히드록시페닐)-(2R)-락타마이드(3-(3',4'-dihydroxyphenyl)-(2R)-lactamide) 등으로 확인되었다.

제조예 3: 황금 추출물의 제조

관중 대신 황금을 사용하는 것을 제외하고는 상기 제조예 1과 동일한 방법으로 황금 추출물을 제조하였다.

도 7는 황금의 추출 과정을 촬영한 사진이고, 도 8는 최종적으로 추출된 황금 추출물의 사진이고, 도 9는 황금 추출물을 분석한 그래프이다.

황금 추출물의 분석결과 주요 성분은 바이칼린(baicalin), 바이칼레인(baicalein), 우고닌(wogonin), 우고닌-7-O-글루쿠로-나이드(wogonin-7-O-glucuro-nide), 오로실린 A(oroxylin A), 스컬캅플래본 I, II(skullcapflavone I, II), 2(S)-,2',5,6', chrysin, 디히드로오록실린 A(dihydrooroxylin A) 등인 것으로 확인되었다.

실시예 1: 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조 1

상기 제조예 1 내지 제조예 3에서 제조된 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 혼합비율을 1.5:1:1로 혼합하여 항균 조성물을 제조하였다.

실시예 2: 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조 2

상기 제조예 1 내지 제조예 3에서 제조된 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 혼합비율을 1:1.5:1로 혼합하여 항균 조성물을 제조하였다.

실시예 3: 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조 3

상기 제조예 1 내지 제조예 3에서 제조된 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 혼합비율을 1:1:1로 혼합하여 항균 조성물을 제조하였다.

실시예 4: 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조 4

상기 제조예 1 내지 제조예 3에서 제조된 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 혼합비율을 1:1:1.5로 혼합하여 항균 조성물을 제조하였다.

하기 표 1에 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 조성물의 조성비를 정리하여 나타내었다.

[표 1]

실험예 1: 조성물의 항균 효과 측정 실험 1

상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 조성물의 Psedomonas aeruginosa(녹농균) 및 Staphylococcus aureus(황색포도산구균) 및 Escherichia coli(대장균) 3종의 세균류 균주에 대한 항균 효과를 측정하는 실험을 수행하였다.

먼저, Psedomonas aeruginosa(녹농균) 및 Staphylococcus aureus(황색포도산구균) 및 Escherichia coli(대장균) 3종의 균주 각각을 32℃에서 3일 동안 진탕배양하여 세균 배지를 제조하였다.

다음으로, 제조된 세균 배지에 상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 조성물을 200ppm의 농도로 3회 반복 처리 하여 3종 균주에 대한 각각의 조성물의 콜로니 형성 정도를 육안으로 확인하였다.

도 10은 Psedomonas aeruginosa(녹농균) 및 Staphylococcus aureus(황색포도산구균) 및 Escherichia coli(대장균) 3종의 세균류 배지에 조성물을 처리한 후의 사진이다.

도 10에서도 확인할 수 있듯이, 본 발명의 일측면에 따라 제조된 실시예 1 내지 실시예 4의 조성물을 처리하였을 경우, 세균류에 대한 항균 효과가 우수한 것을 알 수 있었다.

실험예 2: 조성물의 항진균 효과 측정 실험 2

상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 조성물의 Aspergillus brasiliensis(아스페르길루스, 브라실리엔시스), Aspergillus fumigatus(아스페르길루스 푸리가투스), Candida albicans(캔디다 알비칸스) 및 Cryptococcus neoformans(크립토고쿠스 네오포만스) 4종의 진균류 균주에 대한 항진균 효과를 측정하는 실험을 수행하였다.

먼저, Aspergillus brasiliensis(아스페르길루스, 브라실리엔시스), Aspergillus fumigatus(아스페르길루스 푸리가투스), Candida albicans(캔디다 알비칸스) 및 Cryptococcus neoformans(크립토고쿠스 네오포만스) 4종의 균주 각각을 32℃에서 3일 동안 진탕배양하여 진균 배지를 제조하였다.

다음으로, 제조된 진균 배지에 상기 실시예 1 내지 실시예 4에서 제조된 조성물을 200ppm의 농도로 3회 반복 처리 하여 4종 균주에 대한 각각의 조성물의 콜로니 형성 정도를 육안으로 확인하였다.

도 11은 Aspergillus brasiliensis(아스페르길루스, 브라실리엔시스), Aspergillus fumigatus(아스페르길루스 푸리가투스), Candida albicans(캔디다 알비칸스) 및 Cryptococcus neoformans(크립토고쿠스 네오포만스) 4종의 세균류 배지에 조성물을 처리한 후의 사진이다.

도 11에서도 확인할 수 있듯이, 본 발명의 일측면에 따라 제조된 실시예 1 내지 실시예 4의 조성물을 처리하였을 경우, 진균류에 대한 항진균 효과가 우수한 것을 알 수 있었다.

Claims (9)

1. 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 녹농균(psedomonas aeruginosa), 황색포도산구균(staphylococcus aureus) 또는 대장균(escherichia coli)에 대해 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 아스페르길루스 브라실리엔시스(aspergillus brasiliensis), 아스페르길루스 푸리가투스(aspergillus fumigatus), 캔디다 알비칸스(candida albicans) 또는 크립토고쿠스 네오포만스(cryptococcus neoformans)에 대해 항진균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
4. 제1항에 있어서,
   상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물은 각각 관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 물, C1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출한 것인 조성물.
   
5. 제1항에 있어서,
   상기 관중 추출물, 단삼 추출물 및 황금 추출물의 중량 혼합 비율은 1: 0.5 내지 2: 0.5 내지 2인 것인 조성물.
   
6. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 화장품, 피부 세정제, 모발 세정제, 질 세정제, 욕실용 세정제, 구강 세정제, 주방용 세정제, 화장품 보존제, 식품 보존제, 의약품 보존제, 식품첨가제 및 사료첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상에 사용되는 것을 특징으로 하는 조성물.
   
7. 관중 분말, 단삼 분말 및 황금 분말을 각각 용매와 혼합시키는 단계;
   상기 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 및
   상기 추출된 각각의 혼합물을 혼합시키는 단계;
   를 포함하는 항균 또는 항진균 활성을 갖는 조성물의 제조방법.
   
8. 제7항에 있어서,
   상기 관중 분말, 단삼 분말 또는 황금 분말과 용매와의 혼합은 용매 1 L 대비 상기 분말을 100 g 내지 300 g의 비율로 혼합하는 것인 조성물의 제조방법.
   
9. 제7항에 있어서,
   상기 조성물의 제조방법은 혼합물을 각각 추출시키는 단계; 이후에, 상기 추출된 각각의 혼합물을 감압농축 및 동결건조 시키는 단계;
   를 더 포함하는 것인 조성물의 제조방법.

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