KR20190009595A - 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 - Google Patents
해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은, 급성염증으로 인한 대식세포의 사이토카인 분비, 일산화질소 생성, 염증성 매개 물질의 활성 억제함으로써, 이에 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공할 수 있다. 또한 부작용이 없는 천연물 염증질환 치료약이 필요한 시점에서 천연물 소재인 해죽순 및 해죽순 추출물을 함유하는 조성물은 급성염즘의 예방, 개선 또는 치료를 위래 응용될 수 있다고 사료된다.
본 발명에 따른 조성물은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은, 급성염증으로 인한 대식세포의 사이토카인 분비, 일산화질소 생성, 염증성 매개 물질의 활성 억제함으로써, 이에 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공할 수 있다. 또한 부작용이 없는 천연물 염증질환 치료약이 필요한 시점에서 천연물 소재인 해죽순 및 해죽순 추출물을 함유하는 조성물은 급성염즘의 예방, 개선 또는 치료를 위래 응용될 수 있다고 사료된다.
Description
본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은, 급성염증으로 인한 대식세포의 사이토카인 분비, 일산화질소 생성, 염증성 매개 물질의 활성 억제함으로써, 이에 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
급성염증은 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)의 침입에 의하여 통증, 열, 홍조, 농양 등의 증상이 나타나게 된다. 일반적으로 생체의 세포나 조직에 어떠한 기질적 변화를 가져오는 자극이 가해질 때 유도되는 염증반응은 생체를 보호하기 위한 방어 시스템이다.
이러한 급성염증에 의한 치료는 소염작용을 통하여 촉진될 수 있는데, 소염작용이란 침입균의 증식을 억제하거나 이물질들을 탐식하는 대식세포 (macrophage)를 활성화하여 상기 이물질들을 소화 및 배설하는 대식세포의 기능을 항진시키는 등의 염증치료 촉진작용이다. 현재 가장 강력한 항염작용을 지니고 있는 약제는 스테로이드 제제이다.
그러나 스테로이드 제제 대부분이 합성 제제들로써 장기적 사용 시 부신억제, 체액의 저류, 백내장 등의 부작용을 수반하게되는 경우가 많다. 따라서 천연식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약품이나, 별도의 정제 과정 없이 안전하게 섭취할 수 있으며, 급성 염증을 억제할 수 있는 물질에 대한 연구가 필요한 실정이다.
본 발명과 관련된 선행특허를 살펴보면, '등록번호 10-2014-0133163호'에 구글스테론이 급성염증 및 패혈증에 효능이 있다는 것이 기재되어 있으나, 본 발명은 상기 선행특허와 다른 천연물 소재로서 전염증성 사이토카인 및 염증성 매개물질의 조절 매카니즘에서 급성염증에 특이적으로 효능을 밝혔으므로 상기 선행특허와는 상이하다 하겠다.
본 발명과 관련된 선행특허를 살펴보면, '등록번호 10-2016-0087807호'에 니파야자 꽃대를 이용한 음료첨가물용 조성물에 대해 기재되어 있으나, 본 발명은 상기 선행특허와 다른 전염증성 사이토카인 및 염증성 매개물질의 매카니즘에서 급성염증의 예방, 개선 또는 치료 조성물로써 특이적으로 효능을 밝혔으므로 상기 선행특허와는 상이하다 하겠다.
이에, 본 발명자들은 부작용을 최소화하기 위하여 천연물 소재에 대하여 연구하던 중, 해죽순(Nypa fruticans Wurmb. Fruit, NF)은 천남성과에 속한 식물을 발견하였다. 해죽순, 니파팜, 니파야자, Nypa fruticans Wurmb. Fruit, NF, Nypa fruticans, Nypapalme, Mangrovenpalme, Nypa palm, Attap palm, Palmier Nypa 등은 학술적 동의어로서 본 발명에서는 해죽순으로 통일하여 명명하기로 한다.
이는 미얀마, 인도네시아, 필리핀 등 남아시아에서 재배되고, 전통적으로 치아 염증에 쓰던 식물로서, 급성염증의 예방, 개선 또는 치료용 약학적 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있음을 밝힘으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성 염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 조성물은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
또한 본 발명은, 급성염증으로 인한 대식세포의 사이토카인 분비, 일산화질소 생성, 염증성 매개 물질의 활성 억제함으로써, 이에 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은, 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공함으로써, 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은, 급성염증으로 인한 염증성 매개물질의 분비를 억제하고, 염증성 사이토카인의 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공함으로써, 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은, 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 NF-κB의 활성 억제를 통해 일산화질소 및 전염증성 사이토카인의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공함으로써, 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학적 조성물을 제공함으로써, 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은, 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 유효성분으로 함유하되, 약학적으로 추가될 수 있는 첨가제를 추가하여 제조된 급성 염증을 치료하기 위한 약학적 조성물을 제시함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은, 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 의약품, 건강기능식품으로 제조된 항염증 및 급성염증을 예방, 개선 또는 치료하기 위한 조성물을 제시함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명의 실험예에 따라 입증된바, 해죽순 및 해죽순 추출물이 대식세포에서 NF-κB의 활성 억제를 통하여 일산화질소 및 IL-1β, IL-6,TNF-α의 생성을 억제하였음을 보여준다.
본 발명의 실험예에 따라 입증된바, 본 발명에 따른 조성물은, 급성염증으로 인한 대식세포의 사이토카인 분비, 일산화질소 생성, 염증성 매개 물질의 활성 억제함으로써, 이에 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공할 수 있다. 또한 부작용이 없는 천연물 염증질환 치료약이 필요한 시점에서 천연물 소재인 해죽순 및 해죽순 추출물을 함유하는 조성물은 급성염즘의 예방, 개선 또는 치료를 위래 응용될 수 있다고 사료된다.
도 1은 해죽순 추출물이 세포 생존에 대한 영향을 실험한 결과를 나타낸 도면이다.
도 2는 해죽순 추출물이 LPS 유도 대식세포에서 NO 생성을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 3은 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 해죽순 추출물이 LPS 유도 Iκ-Bα 분해를 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 해죽순 추출물이 염증성 매개물질의 생성을 유도하는 NF-κB의 핵 내로의 이동을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 2는 해죽순 추출물이 LPS 유도 대식세포에서 NO 생성을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 3은 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 4는 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 5는 해죽순 추출물이 LPS 유도 Iκ-Bα 분해를 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
도 6은 해죽순 추출물이 염증성 매개물질의 생성을 유도하는 NF-κB의 핵 내로의 이동을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서 본 명세서에 기재된 실시예, 참조예 및 도면에 기술된 사항은 본 발명의 가장 바람직한 일 예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
실험예
1. 해죽순 추출물의 제조
해죽순은 미얀마에서 수입되어 건조된 것을 원광대학교 한의과대학 본초학교실에서 정선한 후 사용하였다. 해죽순 물 추출물을 얻기 위하여 증류수 1ℓ에 해죽순을 전탕한 액을 여과한 후, 여과액을 동결 건조하여 3차 증류수에 녹여서 필터한 후 사용하였다.
해죽순 추출물을 동결건조 한 후 나온 분말 가루는 15.6 g으로 수율은 15.6 %였다.
실험예 2. 실험예의 시약
Fetal bovine serum, RPMI 1640 media, antibiotics 등의 세포 배양용 시약들은 Gibco BRL (Grand Island, USA)사에서 구입하였으며, chloroform, sodium dodesyl sulfate, sodium chloride, acrylamide, Tris-HCL, LPS, acetic acid 등은 SIGMA (St.Louis, USA)사에서 구입하였다. 실험에 사용된 항체인 Iκ-Bα, NF-κB p65, β-actin은 Santa Cruz(CA, USA)사에서 구입하였다. 실험에 사용된 모든 시약은 분석용 등급 이상을 사용하였다.
실험예 3. 해죽순 추출물의 RAW 264.7 세포 독성 평가
본 발명에 따른 조성물은, 96 well 기준으로 RAW 264.7 대식세포 5× 103 /100 μl에 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 처리한 후 24시간동안 배양한 뒤 MTT용액을 첨가하고 다시 30분 동안 배양하였다. Formazan 생성물은 DMSO로 용해했다. Formazan 용해액을 96-well plate에 loading한 후, spectrophotometer (MD, USA)를 이용하여 540 nm에 흡수되는 양을 측정하였다. 세포의 생존율은 어떠한 처리도 가하지 않은 naive cell과의 비율로 나타내었다.
실험예 4. 해죽순 추출물의 RAW 264.7 세포 독성 평가: 결과
해죽순 추출물의 세포내 독성을 평가하기 위해서 RAW 264.7 세포에 해죽순 물 추출물을 처리하여 MTT 방법을 이용하여 세포의 생존율을 측정하였다.
그 결과 해죽순는 500 ㎍/ml 에서 독성을 나타내었으며, 200 ㎍/ml 이하의 농도에서는 독성이 나타나지 않았다. 이에 본 발명에서는 200 ㎍/ml 이하의 농도 사용하였다.
도 1은 해죽순 추출물이 세포 생존에 대한 영향을 실험한 결과를 나타낸 도면이다.
실험예 5. 해죽순 추출물이 NO 생성에 미치는 영향
해죽순 추출물의 세포의 NO 생성에 미치는 영향을 평가하기 위해서 RAW 264.7 세포세포 상층액을 획득하여 96-well plate에 loading하였다. 해죽순을 대식세포에 1시간 전처리한 후, LPS로 염증을 유도하였다. 96-well plate에 그리스 시약을 첨가하고, 그 혼합물의 흡광도를 측정하였다. 흡광도는 spectrophotometer (MD, USA)로 540 ㎚에서 측정하였다. NO의 농도는 아질산염의 표준커브로부터 계산하였다.
실험예 6. 해죽순 추출물이 NO 생성에 미치는 영향: 결과
해죽순 추출물이 염증에서의 NO 생성에 어떠한 영향을 주는지 알아보기 위하여, 해죽순을 대식세포에 1시간 전처리한 후, LPS로 염증을 유도하였다.
Griess 반응을 통한 NO 생성을 측정한 결과 해죽순 전 처리군에서 LPS로 유도한 nitrite 생성을 억제하였다.
도 2는 해죽순 추출물이 LPS 유도 대식세포에서 NO 생성을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
실험예 7. 해죽순 추출물이 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 생성에 미치는 영향
전염증성 사이토카인의 염증매개물질은 세포 상층액에서 Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)법으로 정량하였다. ELISA는 BD pharmingen (CA, USA)에서 Mouse ELISA kit for IL-1β, IL-6, TNF-α를 구입하여 시행하였다.
LPS로 유도한 대식세포에서 염증 발생 시, 해죽순이 전 염증성 사이토카인의 생성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 ELISA 방법을 이용해 전 염증성 사이토카인의 단백질 수준을 측정하였다. 해죽순 추출물을 1시간 전 처리한 후 RAW 264.7 cell을 24시간 동안 LPS로 자극 하였다.
실험예 8. 해죽순 추출물이 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 생성에 미치는 영향: 결과
도 3은 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
전 염증성 사이토카인의 발현을 측정한 결과, 해죽순 처리군에서 IL-1β,IL-6 및 TNF-α 생성을 유의성있게 억제하는 것을 확인할 수 있었다.
실험예 9. 해죽순 추출물이 mRNA 에서 미치는 영향 : RNA 추출
세포를 획득한 후, Easy Blue (intron biotechnology, USA)용액을 1 ml 넣어서 세포를 용해시킨 후 100 μl의 chloroform 용액을 가하고 잘 섞어준 뒤 원심분리하여 상층액을 취한다. 그 후 2-propanol과 섞은 뒤 원심 분리하여 위에 상층액은 버리고 남은 침전물에 80% ethanol로 2회 씻고 침전물을 건조시켰다. 그리고 침전물에 DEPC 처리한 증류수를 넣어 RNA를 용해시키고 정량하였다.
실험예 10. 해죽순 추출물이 mRNA 에서 미치는 영향 : 실시간 정량적 역전사 중합 효소 연쇄반응 (real time RT-PCR)
RNA의 발현을 정량적으로 표현하기 위해 정량 중합 효소 반응을 측정하였다. 합성된 cDNA 1 μl, Real time PCR master mix 4 μl (ABI), primer 및 probe를 넣고 PCR 조건으로 반응 시켰다. PCR 조건은 92℃에서 30초, 58℃에서 45초, 그 후에 72℃에서 30초를 35 cycle로 하였다. 정량 중합 효소 반응에 쓰인 custom taqman probe (Cat.#4331182) 및 TaqMan master mix는 ABI (CA, USA)에서 구입하였다.
실험예 11. 해죽순 추출물이 mRNA 에서 미치는 영향 : 결과
해죽순 물 추출물이 mRNA 수준에서도 전 염증성 cytokine의 활성을 억제할 수 있는지 확인하기 위하여 해죽순 물 추출물을 1시간 전 처리 한 후 RAW 264.7 cell을 24시간 동안 LPS로 자극 하여 IL-1β,IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발현을 정량적 중합 효소 반응 방법으로 측정하였다.
그 결과 해죽순 물 추출물을 전 처리한 군에서 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발현이 농도 의존적으로 억제됨을 확인할 수 있었다.
도 4는 해죽순 추출물이 LPS 유도 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 mRNA 발생을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
실험예 12. 해죽순 추출물이 NF-κB기전 활성 미치는 영향 :Western blot analysis
세포를 획득하여 RIPA lysis buffer를 넣어 단백질을 lysis 시켜서 원심분리 (15,000 rpm, 20 min)하여 pellet을 가라앉히고 단백질을 정량하였다. 동일한 양의 단백질을 샘플링 버퍼 (4X)를 같이 넣어 섞은 다음 샘플을 전기영동 한 후 membrane에 옮기고 나서 5% skim milk로 2 시간 blocking 하였다. Iκ-Bα와 β-actin은 ECL detection 용액 (Amersham) 으로 확인하였다.
실험예 13. 해죽순 추출물이 NF-κB기전 활성 미치는 영향 : Immunocytochemisty
4% paraformaldehyde로 세포를 고정 한 후, 0.1% Triton-100으로 permeabilization을 하고, 1% FBS로 2 시간 blocking 하였다. NF-κB p65항체를 overnight 반응 후, Alexa 488 goat anti-mouse 항체를 2시간 반응 시켰다. 세포의 핵은 DAPI (Sigma, MO, USA) (5 mg/ml) 사용하여 5분간 염색하고, prolong gold anti-fading mount solution (invitrogen, CA, USA)를 이용하여 mounting하였다. 그 후 Flourscence microscopy (Olympus X 70, Tokyo, Japan)으로 관찰하였다.
실험예 14. 해죽순 추출물이 NF-κB기전 활성 미치는 영향 : 결과
RAW 264.7 세포가 LPS에 의하여 염증이 일어나게 되면 다양한 신호 전달 기전에 의하여 염증성 매개물질들을 분비하게 되는데, 대표적인 경로로 NF-κB가 있다.
NF-κB는 염증에서 염증성 매개물질을 조절하는 중요 전사 인자이다. NF-κB는 일반적으로 염증 반응이 없을 시, inhibitory kappaB (Iκ-B)단백질과 결합 되어있는데, LPS에 의하여 염증이 발생하여 NF-κB가 활성화 되면, Iκ-Bα가 분해되고, NF-κB는 핵 내로 이동하여 여러 염증성 매개물질의 생성을 유도하게 된다.
본 발명에서는 분석한 결과 해죽순 물 추출물은 LPS에 의하여 염증이 활성화된 RAW 264.7 세포에서 Iκ-Bα의 분해를 억제하였고, NF-κB의 핵 내로의 이동을 억제하였다. 이는 NF-κB활성을 해죽순이 억제하였고, 이를 통하여 염증성 매개물질을 억제하였음을 보여준다.
도 5는 해죽순 추출물이 LPS 유도 Iκ-Bα 분해를 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
또한, NF-κB의 활성화 지표인 NF-κB의 핵 내로의 이동을 해죽순 추출물이 억제하였다.
도 6은 해죽순 추출물이 염증성 매개물질의 생성을 유도하는 NF-κB의 핵 내로의 이동을 억제하는 실험결과를 나타낸 도면이다.
실험예 15. 통계처리
모든 실험 결과는 3회 이상 실시하여 그 평균값을 기초로 Mean ± S.E. 로 나타내었다. 실험결과에 대한 통계처리는 SPSS 분석프로그램의 one way ANOVA에 준하였고, p-value가 0.05 미만일 경우 유의한 것으로 판정하였다.
실험예 16. 실험예에 따른 실험결과 분석
해죽순 및 해죽순 추출물의 급성염증 예방, 개선 및 치료를 위한 조성물의 효능을 확인하였다. 상기 실험예들을 진행하여 분석한 결과, 해죽순 추출물은 200 ㎍/㎖ 이하의 농도에서 세포독성을 나타내지 않았으며, nitrite의 생성을 억제, IL-1β, IL-6, TNF-α와 같은 염증성 cytokine의 생성을 억제, Iκ-Bα의 분해 및 NF-κB의 핵 전이를 억제하는 것으로 나타났다.
해죽순 추출물을 전 처리한 후 LPS로 대식세포를 자극하였을 때, 전염증성 사이토카인 및 염증성 매개물질이 농도의존적으로 개선되었으며, 이는 해죽순이 염증 반응 억제에 유효한 반응을 보였음을 보여준다.
NF-κB는 염증에서 염증성 매개물질을 조절하는 중요 전사 인자이다. NF-κB는 일반적으로 염증 반응이 없을 시, inhibitory kappaB (Iκ-B)단백질과 결합 하여 존재한다.
그러나 LPS에 의하여 염증이 발생하여 NF-κB가 활성화 되면, Iκ-Bα가 분해되고, NF-κB는 핵 내로 이동하여 여러 염증성 매개물질의 생성을 유도하게 된다. 상기 실험예에서 확인 된 바, 해죽순 물 추출물이 Iκ-Bα 분해를 억제하였고, NF-κB의 핵 내로의 이동을 억제하였다. 이는 NF-κB활성을 해죽순이 억제하였고, 이를 통하여 염증성 매개물질을 억제하였음을 보여준다.
따라서 해죽순 및 이의 추출물은 급성염증 반응에 있어서 가장 중요한 전염증성 사이토카인 및 염증성 매개물질의 조절 및 억제하여 급성염증을 예방, 개선 또는 치료제로서 응용할 수 있다.
실시예 1. 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성 염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학적 조성물
본 실시예에 따른 조성물은 상기 실험예의 실험 결과에 근거하여, 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학적 조성물이다.
상기 약학 조성물은 해죽순 추출물을추출물을 유효성분으로 하는 약학적 조성물을 제조한다. 이외에 통상 약제학적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제 등을 추가하여 약제학적 단위 투여형 제형으로 제조한다.
여기에서, 담체, 부형제, 희석제로는 토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과의 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 제형화하여 사용될 수 있다. 적합한 제형으로는 산제, 환제, 과립제,당의정, 결질 또는 연질의 캡슐제, 정제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 좌제 및 멸균 주사용액 등의 형태로 사용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 경구 투여를 위한 고형 제제에는 상기 혼합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분은 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다.
상기 비 수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 상기의 담체 외에도 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 용해제, 감미제, 착색제, 삼투압 조절제, 산화방지제 등을 더 포함할 수 있다.
본 제조예에 따른 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 연령, 성별, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 발명자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 제조예에 따른 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하주사에 의해 투여될 수 있다.
실시예 2. 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성 염증의 예방, 개선을 위한 건강기능성식품 조성물
본 발명에 따른 식품 조성물을 이용한 건강기능식품은, 기능성 음료, 각종 식품류, 건강보조식품, 차, 과자류, 껌, 차, 비타민 복합제 등과 같이 다양한 형태로 제공될 수 있다.
본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 캡슐 등의 다양한 형태로 제조될 수 있다.
본 발명의 조성물은 급성염증 예방 및 개선을 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이때, 식품 또는 음료 중의 상기 조성물의 양은 일반적으로 본 발명의 건강식품 조성물은 전체 식품 중량의 1 내지 5 중량%로 가할 수 있으며 건강 음료 조성물은 100㎖를 기준으로 0.02 내지 10g, 바람직하게는 0.3 내지 1g의 비율로 가할 수 있다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 지시된 비율의 필수 성분으로서 자초를 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리통 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 일긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 채소 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하지는 않으나 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
Claims (5)
- 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 함유하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 조성물은, 급성염증으로 인한 염증성 매개물질의 분비를 억제하고, 전염증성 사이토카인의 생성 및 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 조성물은 NF-κB의 활성 억제를 통해 NO 및 전염증성 사이토카인 IL-1β, IL-6 및 TNF-α의 생성 및 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는 급성염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물.
- 청구항 1에 있어서,
상기 해죽순 및 해죽순 추출물은, RAW 264.7 대식세포 5× 104 cells/㎖ 기준으로 해죽순 추출물을 10 ~ 200 μg/ml 포함하는 것을 특징으로 하는 급성염증을 예방, 개선 또는 치료를 위한 약학적 조성물.
- 해죽순 및 해죽순 추출물을 유효성분으로 유효성분으로 함유하되, 건강학적으로 추가될 수 있는 첨가제를 추가하여 제조된 급성 염증을 예방, 개선하기 위한 건강기능성식품 조성물.
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