KR20180091594A - Bacillus subtilis strain YGB70 and microbial agent for prevention of ginseng root rot pathogens comprising the same - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 신규의 바실러스 서브틸리스 균주 YGB70 및 이를 포함하는 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 인삼 뿌리썩음병원균에 대하여 길항작용을 갖는 바실러스 서브틸리스 균주 YGB70 균주를 유효성분으로 포함하는 인삼 뿌리썩음병원균 및 뿌리혹선충 방제용 미생물 제제에 관한 것이다. The present invention relates to a novel Bacillus subtilis strain YGB70 and a microorganism preparation for controlling the germplasm of root rot caused by the same, and more particularly to a microorganism preparation for inhibiting Bacillus subtilis strain YGB70 having an antagonistic action against ginseng root rot disease bacteria. The present invention relates to a microorganism preparation for controlling ginseng root rot disease and root-knot nematode.
한국은 기후풍토가 인삼의 자생과 재배지로 알맞아 약효가 탁월한 고려인삼을 생산하는 인삼 종주국이다. 그러나 인삼이 건강식품 또는 보건의약품으로서 갖추고 있는 이상적인 조건에 대하여 많은 국가들의 관심이 높아지고, 기존의 인삼생산국뿐만 아니라 비생산국도 경쟁적으로 인삼의 연구와 생산을 장려하는 정책을 펼쳐 나가고 있는 추세이다. 인삼을 재배하는 나라는 한국을 비롯한 중국, 일본, 미국, 유럽 일부 지역이며, 인삼을 소비하는 나라는 과거에는 그 대부분이 유교 문화권으로 한국, 중국, 일본, 대만 및 동남아 등이었으나 세계 각국에 인삼소비층이 확대되고 있다. 80년대 후반까지 전 세계 인삼생산량의 46%를 유지하던 한국은 90년대 39%내외로 점유율이 감소하여, 세계 평균 생산증가율에 미치지 못하는 0.5%의 생산증가율을 나타낸 반면, 80년대에는 전 세계 생산량의 43% 정도를 점유하고 있던 중국은 90년대에는 50% 이상으로 증가하여 연평균 7.2% 이상의 높은 증가율을 나타내어 인삼종주국인 한국을 추격하고 있다. 이렇듯, 고려인삼은 가격 면에서 국제경쟁력이 약화되고 있는 실정이며, 국제경쟁력을 강화하기 위해서는 원료삼인 수삼품질 향상을 위한 재배기술 개발 연구가 필요하다. 특히 최근 인삼 재배시 가장 시급한 문제점은 적정예정지의 절대부족, 산지토양 조건 악화로 인한 높은 발병율, 이에 따른 농약 사용량의 증가로 인한 잔류 농약으로 인해 수출하지 못하는 예가 많으므로 무농약 원료삼의 안전한 다수확 생산법에 관한 집중연구가 시급히 요구되고 있다.Korea is a ginseng suzerain producing climatic ginseng, which is excellent in its medicinal effect due to its natural climate and cultivation area. However, many countries are increasingly interested in the ideal condition of ginseng as a health food or health care drug, and the existing ginseng producer as well as the non-producing country are also competing to promote the research and production of ginseng. In Korea, China, Japan, the United States, and some parts of Europe, ginseng has been cultivated in Korea, China, Japan, Taiwan and Southeast Asia. Is expanding. Korea, which had maintained 46% of global ginseng production until the late 1980s, had a share of less than 39% in the 1990s, which accounted for 0.5% of production growth that did not reach the world average. However, in the 1980s, China, which occupied about 43% of the total, grew to more than 50% in the 1990s, showing a high annual growth rate of over 7.2%. As such, Korean Ginseng has weakened international competitiveness in terms of price, and in order to enhance international competitiveness, it is necessary to study the development of cultivation technology to improve the quality of ginseng as a raw material. Especially, the most urgent problems in cultivation of ginseng in recent years are the absolute shortages of suitable sites, the high incidence due to deterioration of the soil conditions in the mountains, and the pesticide residue due to the increase of pesticide usage. There is an urgent need for intensive research on
인삼재배에 있어서 중요하게 여기는 인삼뿌리썩음 증상(인삼 근부 증상)은 연작지뿐만 아니라 초작지에서도 관찰되고 있으며 근부 증상은 묘삼 식부 후 고년근으로 재배되면서 출아 및 잔존율을 떨어뜨리게 하는 원인중의 하나이다. 실제로 농가에서 식부한 묘삼은 5년 후 수확시에는 약 50% 이하의 잔존율을 나타내는 것이 보통이다. 그 이유는 초작 재배 중 인삼 뿌리를 썩히는 부위에서 근부병원균들이 서식하고 있기 때문이다. 이와 같이 초작지에서 근부병원균에 의해 인삼이 피해를 받은 후 연작으로 인삼을 재배할 때 토양 내에서 잔존 근부병원균의 후막포자 등이 예정지 관리시 7-10회 기경 및 로타리 작업으로 토양에 균일하게 분포되면 더욱 인삼에 피해를 일으키는 것이다. 실제로 뿌리썩음의 원인으로는 실린드로카폰 디스트럭턴스(Cylindrocarpon destructans), 푸사리움 소라니(Fusarium solani), 피시윰(Pythium sp.), 파이토프토라 캑토럼(Phytophthora cactorum), 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora)등에 의한 병해가 단독으로 또는 복합적으로 크게 관여한다고 보고되어 있다(인삼재배, 표준영농교본 p103, 농촌진흥청, 2000). 또한, 인삼의 지상부병의 원인으로는 유묘의 지상부에 발병하는 모잘록병의 원인인 라이족토니아 소라니(Rhizoctonia solani) 및 피시윰(Pythium sp.), 및 점무늬병의 원인인 알타나리아 파낙스(Alternaria panax), 탄저병의 원인인 콜레토트리쿰(Collectotrichum sp.) 등에 의해 피해를 받기 때문에 문제시되고 있다. 이러한 병해의 방제법으로 토양 내 병원균의 밀도를 감소시키거나 발병을 억제시키기 위한 유기물 사용 등을 통한 예정지 관리와 토양 훈증제를 이용한 화학적 방제가 시도되고 있으며, 답전 윤환의 논삼 재배법 등에 의한 경종적 방제가 실시되고 있다. 그러나 이상의 방제법으로 뚜렷한 효과를 거두기 어렵고 인삼뿌리썩음병 등과 같은 토양전염성 병원균들은 토양 중에 후막포자를 형성하면서 병을 일으키므로 방제가 거의 불가능하다. 특히 인삼의 주요 토양 병들은 다양한 온도범위에서 감염이 성립되므로 한번 감염되면 비록 병의 진전은 느리지만 연중 피해를 받게 된다. 따라서 효과적인 토양병 방제를 위해서는 인삼재배 특성상 병방제 효과가 지속적이고 환경에 안정적인 생물학적 방제가 요구된다.Ginseng root rot (Ginseng root symptom), which is considered to be important in ginseng cultivation, is observed not only in aged paddy field, but also in superpowder. Root symptom is one of the causes of dropping the emergence and survival rate after being cultivated as high quality aged paddy field. In fact, it is common for the seedlings that have been consumed at the farmhouse to have a survival rate of about 50% or less at harvest time after 5 years. This is because the root pathogens live in the area where the ginseng root rotates during the primary cultivation. When ginseng was cultivated as a result of ginseng damage after root damage caused by root pathogens in the supercollade, the thick spores of residual root pathogens in the soil were uniformly distributed in the soil by 7-10 times tillage and rotary work It will cause more damage to ginseng. Indeed, root rot is caused by Cylindrocarpon destructans , Fusarium solani , Pythium sp., Phytophthora cactorum , Erwinia carotovora , ( Erwinia carotovora ) have been reported to be involved either singly or in combination (ginseng cultivation, standard farming manual p103, RDA, 2000). The causes of giant ginseng groundworm include Rhizoctonia solani , Pythium sp., And Alternaria panax , which are the cause of the mildew disease on the surface of seedlings. ), it has been questioned because of feed of the damage by the collet Sat tree glutamicum (Collectotrichum sp.) causes anthrax. In order to reduce the density of pathogens in the soil or to control the disease, chemical control using soil fumigant is being attempted through the use of organic matter and the use of organic materials to control the disease. . However, it is difficult to obtain clear effects by the above control method, and soil infectious pathogens such as ginseng root rot disease cause the disease by forming a thick spore in the soil, so it is almost impossible to control. In particular, the major soil diseases of ginseng are infected at various temperature ranges, so once infected, the disease progresses slowly but it is damaged throughout the year. Therefore, for the effective control of soil disease, the biological control of the ginseng cultivation should be continuous and environmentally stable.
현재 식물병해에 대한 길항미생물을 이용한 미생물농약은 총 20여종 이상 품목 등록되어 있으며, 이들 중 대부분은 바실러스속(Bacillus sp.)의 균주를 이용한 미생물농약이 대부분을 차지하고 있으며 대상작물로는 시설 작물(고추, 오이, 가지)에 한정되어 있고 탄저병, 흰가루병, 역병, 잿빛곰팡이병 등 일부 식물병원균에 대해서만 적용되고 있다. 미생물제제 개발 기술의 경우 국외기술과 비교해 제제화 및 생물활성 평가기술 이외에는 경쟁력이 다소 낮은 편이다.Currently, more than 20 kinds of microbial pesticides using antagonistic microorganisms have been registered. Most of them are microbial pesticides using strains of Bacillus sp., And most of them are plant crops Red pepper, cucumber, eggplant) and it is applied only to some plant pathogens such as anthrax, powdery mildew, plague, and gray mold. In the case of microbial drug development technology, its competitiveness is somewhat lower than that of overseas technology, other than formulation and biological activity evaluation technology.
이에 본 발명자들은 인삼에 대하여 다양한 병원성을 갖는 미생물들에 대하여 우수한 항진균 활성을 보이는 길항미생물을 토양으로부터 탐색 분리한 결과, 신규한 바실러스 속 YGB70(Bacillus subtilis) 균주를 확보하고 동정하였고, 인삼 뿌리썩음병원균의 일종인 시린드로카폰 디스트럭탄스(Cylindrocarpon destructans)의 생육을 억제하여 인삼 뿌리썩음병을 방제할 수 있음을 확인하였다. As a result, the inventors of the present invention have obtained a new strain of Bacillus subtilis YB70 ( Bacillus subtilis ) and identified it as an antifungal microorganism having excellent antifungal activity against ginseng against various pathogenic microorganisms, ( Cylindrocarpon destructans ), which is a kind of ginseng root rot, can be controlled.
본 발명의 목적은 신규한 바실러스 서브틸리스 균주 YGB70 및 이를 포함하는 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제를 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a novel Bacillus subtilis strain YGB70 and a microorganism preparation for controlling germplasm of root rot caused by it.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 인삼 뿌리썩음병원균에 대한 항진균 활성이 있는 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주를 제공한다. 상기 뿌리썩음병원균은 시린드로카폰 디스트럭탄스 (Cylindrocarpon destructans) 또는 푸사리움 소라니(Fusarium solani)일 수 있다. In order to accomplish the above object, the present invention provides a strain of Bacillus subtilis YGB70 having an antifungal activity against a ginseng root rot disease fungus. The roots of the root rot disease are Cylindrocarpon destructans or Fusarium solani .
본 발명의 또 다른 목적은 인삼 뿌리혹선충에 대한 항진균 활성이 있는 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주를 제공하는 데 있다. Another object of the present invention is to provide a Bacillus subtilis YGB70 strain having antifungal activity against ginseng root nematodes.
본 발명의 상기 균주는 뿌리썩음병을 일으키는 균주의 생육을 억제하는 길항 능력을 가진 균주로서, 특히 상기 균주는 포자발아를 억제하여 인삼 뿌리썩음병원균의 생육을 억제할 수 있다. The strain of the present invention has an antagonistic ability to inhibit the growth of a strain causing root rot disease. In particular, the strain can suppress spore germination and inhibit growth of ginseng root rot disease bacteria.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주 또는 그의 배양액을 유효성분으로 포함하는 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a microorganism preparation for controlling germplasm of root rot of ginseng comprising the strain or a culture thereof as an active ingredient.
본 발명에서, 상기 배양액은 미생물 배지에 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주를 25 내지 30℃에서 1 내지 3일 동안 배양하여 수득한 배양액인 것을 특징으로 할 수 있고, 배지는 뇌심장침출액(Brain Heart Infusion) 배지인 것을 특징으로 할 수 있다. In the present invention, the culture medium may be a culture solution obtained by culturing the Bacillus subtilis YGB70 strain in a microorganism medium for 1 to 3 days at 25 to 30 ° C. The medium may be a brain heart infusion (Brain Heart Infusion) And a culture medium.
본 발병에서 용어 "뿌리썩음병"은 인삼 연작 재배시 50% 이상 발생하는 토양 식물병으로 뿌리가 흑갈색으로 부패하며 잎이 조기 홍엽화되는 현상이 발생되는 병이다.The term "root rot disease" in the present invention refers to a soil disease caused by over 50% of ginseng cultivation, in which the roots turn brownish brown and the leaves become red leaflets.
본 발명에 있어서 용어 "배양액"은 미생물 생장에 적절한 배지에 일정 농도의 포자를 접종하여 배양기에서 일정 기간 동안 미생물이 생장하도록 유도한 후 수득된, 균체, 균체가 생장하면서 분비한 물질 및 생장에 필요한 영양성분이 혼합된 액으로서, 불순물을 걸러내는 과정을 거쳐 제조할 수 있다.In the present invention, the term "culture liquid" is used to refer to a microorganism which is inoculated with a certain concentration of spores in a medium suitable for microorganism growth, inducing the microorganism to grow for a certain period in an incubator, It is a mixed liquid of nutrients and can be produced through a process of filtering off impurities.
본 발명에 있어서 용어 "방제"는 일반적으로 식물 병원체 감염을 예방, 감소 또는 근절시키는 것을 포함하며, 감염에 있어서의 예방 또는 감소는 비처리된 기주식물에 대하여 통계적으로 현저한 차이가 있음을 의미한다.In the present invention, the term " control "generally includes preventing, reducing or eradicating plant pathogenic infections, wherein the prevention or reduction in infection means that there is a statistically significant difference for untreated host plants.
본 발명에 따른 길항 미생물 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주는 인삼 뿌리썩음병 원인균의 생장을 효과적으로 저해하고, 또한 뿌리혹 선충에 대한 살선충 효과가 뛰어나다. 상기 균주를 사용하면 인삼 경작 시 환경공해를 일으키지 않고 인체에 독성이 없어 친환경 인삼 뿌리썩음병 및 뿌리혹병 방제제로 유용하다. The antagonistic microorganism Bacillus subtilis YGB70 strain according to the present invention effectively inhibits the growth of causative bacteria of root rot of ginseng, and is also excellent in nematode effect against root-knot nematodes. When the above-mentioned strain is used, it does not cause environmental pollution in the cultivation of ginseng and is not toxic to the human body, so it is useful as an environmentally friendly ginseng root rot disease and root canal disease prevention agent.
도 1은 시린드로카폰 디스트럭탄스(Cylindrocarpon destructans)에 억제활성을 인삼 절편에서 검정한 것이다.
도 2는 본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) YGB70 균주 현탁액을 인삼 절편에 처리한 경우 구조저항성 주피(이층)의 생성이 유도된 것을 확인한 것이다.
도 3은 본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) YGB70 균주 현탁액을 묘삼에 처리한 경우 인삼 뿌리썩음병 발병이 억제되는 것을 확인한 것이다.
도 4는 본 발명의 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) YGB70 균주 현탁액을 인삼에 처리한 경우 뿌리혹을 생성하는 뿌리혹 선충의 억제활성을 나타낸 것이다.Figure 1 shows the inhibitory activity of Cylindrocarpon destructans in ginseng slices.
FIG. 2 shows that the suspension of Bacillus subtilis YGB70 strain of the present invention was treated with ginseng slices to induce the production of a structure-resistant hops (two-layered).
FIG. 3 shows that when the suspension of Bacillus subtilis YGB70 strain of the present invention is treated with seedling ginseng, the occurrence of root rot disease of ginseng is inhibited.
FIG. 4 shows the inhibitory activity of root-knot nematodes producing rootlets when the suspension of Bacillus subtilis YGB70 strain of the present invention was treated with ginseng.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .
길항 미생물의 선발Selection of antagonistic microorganisms
인삼의 뿌리썩음병원균의 생육을 억제하는 길항 미생물을 탐색하기 위하여, 바실러스 균주를 인삼재배지 토양에서 분리하였다. 토양에서 분리된 세균을 인삼 뿌리썩음병원균과 대치배양하여 효과 검정 후 균주를 선발하였다.Bacillus strains were isolated from the soil of ginseng cultivation area in order to investigate antagonistic microorganisms which inhibit the growth of root rot rot disease ginseng. Bacteria isolated from soil were incubated with Ganoderma lucidum root rot fungus, and the strain was selected.
토양 미생물 분리 및 선발Separation and selection of soil microorganisms
본 발명의 신규한 균주는 인삼 5년근 재배지 토양에서 다음과 같은 과정을 거쳐 분리 및 선발을 하였다. The novel strain of the present invention was isolated and selected from the soil of the 5-year-old root of ginseng through the following procedure.
지표면에서 5 cm 아래의 토양을 채취하여 시료로 사용하였으며, 토양 1 g 멸균수 9 ml에 현탁하여 희석평판법으로 희석 후, 103, 104, 105의 희석액 0.1 ml을 NA(Nutrient agar) 한천배지에 도말하여 28℃에서 2일간 배양하여 단일 콜로니의 미생물을 분리하였다. Was collected soil below 5 cm from the ground used as a sample, and then diluted with dilute pyeongpanbeop and suspended in the soil 1 g sterilized water, 9 ml, 10 3, 10 4 , (Nutrient agar) the diluted solution 0.1 ml of 10 5 NA agar And cultured at 28 DEG C for 2 days to isolate microorganisms of a single colony.
인삼 뿌리썩음병원균 시린드로카폰 디스트럭탄스(Cylindrocarpon destructans) 포자 현탁액 (105 spores/ml) 100 ul 도말한 PDA 평판배지에 단일 콜로니를 이쑤시개로 묻혀 접종한 후 21℃에서 5일간 배양하였다. 배양 후 단일 콜로니 주위로 억제영역이 발생하였을 때, 인삼 뿌리썩음병원균의 길항미생물로 1차 선발하였다. Ginseng roots rot rotavirus Cylindrocarpon destructans spores suspension (10 5 spores / ml) 100 μl of PDA plate medium was inoculated with a single colony toothpick and incubated at 21 ° C for 5 days. When the inhibitory region was generated around the single colony after the cultivation, the strain was firstly selected as an antagonistic microorganism of the ginseng root rot.
선발미생물 동정Identification of selected microorganisms
인삼 뿌리썩음병균과 대치배양하여 균사생장의 억제력이 가장 우수한 균주를 선발하였으며, 길항세균의 분류학적 동정을 위해 탄소이용도, 지방산 분석 및 16S rDNA sequencing을 통하여 동정하였다. Ginseng root rot fungi were cultured to identify the strains with the best inhibitory effect on mycelial growth. The identification of antagonistic bacteria was carried out using carbon availability, fatty acid analysis and 16S rDNA sequencing.
상기 분리된 바실러스 균주를 사용시까지 20 % 글리세롤을 포함하는 멸균 증류수에서 -50 ℃ 에서 저장하였다. 세균을 2일 동안 28 ℃에서 BHIA(brain heart infusion agar) 배지에서 키웠다. The isolated Bacillus strains were stored at -50 < 0 > C in sterile distilled water containing 20% glycerol until use. Bacteria were grown in BHIA (brain heart infusion agar) medium at 28 ° C for 2 days.
본 발명의 발명자들은 상기와 같이 분리된 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주를 국립농업과학원에 2015년 11월 03일자로 기탁하여 기탁번호 KACC92098P를 부여받았다.The inventors of the present invention deposited the above-isolated Bacillus subtilis YGB70 strain on Nov. 3, 2015, and received the deposit number KACC92098P.
바실러스 서브틸리스 YGB70 균주의 항균 활성 확인(인삼 절편)Identification of antimicrobial activity of Bacillus subtilis strain YGB70 (ginseng slice)
바실러스 서브틸리스 YGB70 균주가 시린드로카폰 디스트럭탄스(Cylindrocarpon destructans)에 항균력이 있는지 알아보기 위하여, 1% NaOCl에 표면 소독한 인삼을 5mm 간격의 인삼 절편으로 자른 후 이를 이용하여 실험하였다. 인삼 절편에 C. destructans 포자 현탁액(105spores/ml)을 20ul 떨어뜨린 후 실온에서 30분간 건조시킨 다음, 본 균주 현탁액(107CFU/ml)을 동일한 방법으로 20ul 떨어뜨려 습실처리 후 병 발생 억제를 관찰하였다. 구조저항성 주피(periderm)의 형성을 확인하고자 도수절편(hand section) 방법을 이용하였고, 0.1% 톨루이딘 블루-O를 이용하여 염색 후 현미경 관찰 하였다. 그 결과, 인삼 뿌리썩음병을 일으키는 C. destructans 접종한 후 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주 현탁액을 처리한 인삼에서는 무처리구보다 70%의 방제율을 보였으며, 주피가 형성되는 것을 확인하였다(도 1 및 도 2).To investigate the antibacterial activity of Cylindrocarpon destructans , Bacillus subtilis YGB70 strain was treated with 1% NaOCl surface sterilized ginseng slices at intervals of 5 mm. 20 g of C. destructans spore suspension (10 5 spores / ml) was added to the ginseng slices and the mixture was dried at room temperature for 30 minutes. The suspension of this strain (10 7 CFU / ml) Inhibition was observed. To confirm the formation of the structure-resistant periderm, a hand section method was used. After staining with 0.1% toluidine blue-O, a microscope was observed. As a result, it was confirmed that the ginseng treated with the suspension of Bacillus subtilis YGB70 after C. destructans inoculation causing ginseng root rot disease showed a control ratio of 70% and formed juniper (Fig. 1 and Fig. 2 ).
바실러스 서브틸리스 YGB70 균주의 항균 활성 확인(묘삼)Identification of Antimicrobial Activity of Bacillus subtilis YGB70 (Myosam)
바실러스 서브틸리스 YGB70 균주가 시린드로카폰 디스트럭탄스(Cylindrocarpon destructans)에 항균력이 있는지 알아보기 위하여, 1% NaOCl에 표면 소독한 묘삼을 이용하여 실험하였다. 묘삼에 일정한 간격(2mm)으로 상처를 내고 C. destructans 포자 현탁액(105spores/ml)을 10ul 떨어뜨린 후 실온에서 30분간 건조 시킨 다음, 본 균주 현탁액(107CFU/ml)을 동일한 방법으로 10ul 떨어뜨려 습실처리 후 병 발생 억제를 관찰 하였다. 그 결과, 인삼 뿌리썩음병을 일으키는 C. destructans 접종한 후 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주 현탁액을 처리한 인삼에서는 무처리구보다 91.6%의 방제율을 보였다(도 3).To investigate the antibacterial activity of Bacillus subtilis YGB70 strains on Cylindrocarpon destructans , the experiment was conducted using seedling germs sterilized with 1% NaOCl. With a cut out at regular intervals (2mm) to the seedling C. destructans spore suspension (10 5 spores / ml) was the dried at room temperature for 30 minutes and then dropped 10ul following the same procedures for the strain suspension (10 7 CFU / ml) And the inhibition of disease development was observed after the dewatering. As a result, the ginseng treated with the suspension of Bacillus subtilis YGB70 strain after C. destructans inoculation causing ginseng root rot disease showed a control ratio of 91.6% (FIG. 3).
인삼뿌리혹선충에 대한 살선충 효과 검정Studies on the Nematode Effect on Ginseng Root-knot Nematode
토마토에서 사육하고 있었던 뿌리혹선충(Meloidogyne incognita) 을 분리하여 각 처리구 당 100마리를 기준으로 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) YGB70 균주의 현탁액(107CFU/ml)과 액체배지에서 2일 배양 후 얻은 배양여액을 처리 하였다. 24시간 후 현미경 상에서 뿌리혹선충의 생존율을 구하였다. 그 결과, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) YGB70 균주는 뿌리혹선충에 대한 살선충 효과가 현탁액과 배양여액 모두에서 100% 억제효과를 보였다(도 4). Meloidogyne, a nematode, incognita ) Were separated, and on the basis of 100 rats per each treatment, Bacillus subtilis Subtilis YGB70 strain (10 7 CFU / ml) was cultured in liquid medium for 2 days. Survival rates of root-knot nematodes were determined on a microscope after 24 hours. As a result, Bacillus subtilis strain YGB70 showed a 100% inhibitory effect on the root nematode effect on root and nematode in both suspension and culture filtrate (FIG. 4).
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.The present invention has been described with reference to the preferred embodiments. It will be understood by those skilled in the art that various changes in form and details may be made therein without departing from the spirit and scope of the invention as defined by the appended claims. Therefore, the disclosed embodiments should be considered in an illustrative rather than a restrictive sense. The scope of the present invention is defined by the appended claims rather than by the foregoing description, and all differences within the scope of equivalents thereof should be construed as being included in the present invention.
기탁기관명 : 농업생명공학연구원Depositor Name: Agricultural Biotechnology Research Institute
수탁번호 : KACC92098Accession number: KACC92098
수탁일자 : 20151103Checked on: 20151103
Claims (9)
상기 균주는 인삼 뿌리썩음병원균에 대한 항진균 활성이 있는, 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주(기탁번호: KACC92098P).The method according to claim 1,
This strain is Bacillus subtilis YGB70 strain (Accession No .: KACC92098P), which has antifungal activity against ginseng roots rot fungi.
상기 인삼 뿌리썩음병원균은 시린드로카폰 디스트럭탄스 (Cylindrocarpon destructans) 및 푸사리움 소라니(Fusarium solani)로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인, 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주(기탁번호: KACC92098P). 3. The method of claim 2,
The ginseng root rot fungus is any one selected from the group consisting of Cylindrocarpon destructans and Fusarium solani . (Accession No .: KACC92098P) Bacillus subtilis YGB70 strain.
상기 균주는 인삼 뿌리혹선충에 대한 항진균 활성이 있는, 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주(기탁번호: KACC92098P). The method according to claim 1,
This strain is Bacillus subtilis YGB70 strain (Accession No .: KACC92098P), which has antifungal activity against ginseng root-knot nematodes.
상기 배양액은 미생물 배지에 바실러스 서브틸리스 YGB70 균주 (기탁번호: KACC92098P)를 25 내지 30℃에서 1 내지 3일 동안 배양하여 수득한 배양액인, 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제. 6. The method of claim 5,
Wherein the culture solution is a culture obtained by culturing a strain of Bacillus subtilis YGB70 (Accession No .: KACC92098P) at 25 to 30 DEG C for 1 to 3 days in a microorganism medium.
상기 배지는 뇌심장침출액(Brain Heart Infusion) 배지인, 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제. The method according to claim 6,
The culture medium is a brain heart infusion medium, a microorganism preparation for controlling ginseng root rot disease.
상기 인삼 뿌리썩음병원균은 시린드로카폰 디스트럭탄스 (Cylindrocarpon destructans) 및 푸사리움 소라니(Fusarium solani) 로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 인삼 뿌리썩음병원균 방제용 미생물 제제. 6. The method of claim 5,
The ginseng roots rot fungus is classified into Cylindrocarpon destructans and Fusarium sp. solani ). The microorganism preparation for controlling ginseng root rot rot disease ginseng.
A method for controlling ginseng root rot disease bacteria using the microorganism preparation according to any one of claims 5 to 8.
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