KR20180079232A - L1cam 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 피리미딘 유사체 및/또는 플라틴계 항암제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
L1cam 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 피리미딘 유사체 및/또는 플라틴계 항암제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 피리미딘 유사체의 일종인 젬시타빈 및/또는 플라틴계 항암제의 일종인 시스플라틴을 병용 투여하는 경우에는, 이들을 단독 투여하는 경우에 비하여 담도암의 성장 억제에 대하여 상승효과를 나타내므로, 상기 항체 및 약물을 포함하는 본 발명의 약학적 조성물은 담도암의 치료에 유용하게 활용될 수 있다.
L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 피리미딘 유사체의 일종인 젬시타빈 및/또는 플라틴계 항암제의 일종인 시스플라틴을 병용 투여하는 경우에는, 이들을 단독 투여하는 경우에 비하여 담도암의 성장 억제에 대하여 상승효과를 나타내므로, 상기 항체 및 약물을 포함하는 본 발명의 약학적 조성물은 담도암의 치료에 유용하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 피리미딘 유사체 및/또는 플라틴계 항암제를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
담도암은(biliary tract cancer)는 담즙 기관의 관 상피(ductal epithelium)에서 발생하는 악성종양으로서, 담도암은 해부학적으로 간내 담도암(ICC; intrahepatic cholangiocarcinoma) 또는 간외 담도암(ECC; extrahepatic cholangiocarcinoma)으로 분류할 수 있다(Khan SA, et al., Cholangiocarcinoma. Lancet. 2005;366(9493):1303-14.). 담도암은 최근의 임상 증상으로 진단하기가 어렵고, 기존의 화학 요법 및 방사선 요법에 내성이 있어 예후가 좋지 않은데, 담도암 환자의 전체 5년 생존율은 5 ~ 10%이며, 치유 가능한 수술을 포함하는 경우에도 보고된 5년 생존율은 25 ~ 30%이다. 따라서, 담도암 환자의 생존율을 향상시키는 새롭고 효과적인 치료 요법이 요구되고 있다.
담도암에 대한 화학 요법 약물로서, DNA 합성을 억제하는 피리미딘 유사체(pyrimidine analog)인 젬시타빈(gemcitabine)은 광범위하게 연구되어왔다. 2기 임상 시험에서, 젬시타빈의 단일 요법은 진행성 또는 전이성 담도암 환자에게 효능을 나타냄이 공지되었다(Okusaka T, et al,. Cancer Chemother Pharmacol. 2006;57(5):647-53.). 또한, 젬시타빈과 5-플루오루우라실 및 아미노산을 포함하는 담도암 치료약이 개발된바 있으며(한국 공개특허공보 제2014-0079831호), 젬시타빈 및 시스플라틴의 병용 요법은 국소 진행성 또는 전이성 담도암 환자에서 젬시타빈 단독 요법에 비해 생존율이 유의하게 높음이 보고된바 있지만, 담도암 환자의 화학 요법에 대한 반응은 제한적이며 여전히 5년 생존율은 낮다(Rizvi S, et al., Semin Liver Dis. 2014;34(4):456-64.).
이와 관련하여, 담즙 상피 세포 성장을 조절하며, 담도암에서 과발현되는 표피 성장 인자 수용체(Epidermal growth factor receptor; EGFR)를 타겟으로한 약물의 사용이 증가하고 있다. 예로, 젬시타빈 및 옥살리플라틴(oxaliplatin)에 항-EGFR 항체인 세툭시맙(cetuximab)을 추가 투여하는 방법이 최근 시도되었으나, 임상 2상 시험에서 진행성 담도암 환자에 대한 효능이 향상되지 않았다. 또한, 젬시타빈 및 옥살리플라틴과 EGFR 티로신 인산화효소 억제제인 에를로티닙(erlotinib)의 병용 요법이 시도되었으나, 최근에 발표된 임상 3상 시험 결과에서는 화학 요법과 비교하는 경우에 개선된 효과를 나타내지 못하였다. 이에, 환자의 생존율을 향상시키는 화학 요법과 함께 새로운 표적 치료법이 필요한 실정이다.
한편, L1 세포 부착 분자(L1CAM; L1 cell adhesion molecule, CD171)는 200-220 kDa 막관통 당단백질로서, 6개의 면역 글로불린 유사 도메인, 5개의 피브로넥틴-타입 III 도메인, 막관통 스트레치(transmembrane stretch) 및 짧은 세포질 꼬리로 구성된다. L1CAM은 소뇌 세포의 이동 및 신경 돌기의 성장에 중요한 역할을 수행하는 중추 신경계의 신경 세포 접착 분자로서 흑색종(melanoma), 신경아세포종(neuroblastoma), 난소암, 대장암, 담관암 및 담낭암 등 여러 암에서 발현되고, 암세포의 성장과 전이에 중요한 역할을 하며, L1CAM 과발현이 암의 불량 예후와 관련이 있음이 보고되고 있다(Raveh et al., Cancer Letters 282: 137-145, 2009).
이러한 배경 하에, 본 발명자들은 암, 구체적으로 담도암을 효과적으로 치료하는 방법을 개발하고자 예의 노력 연구한 결과, L1CAM을 타겟하는 항체인 Ab417와 담도암 치료 약물인 젬시타빈 및/또는 시스플라틴을 병용 투여하는 경우, 담도암의 성장 억제에 대하여 상승효과를 나타냄을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 항암제, 구체적으로 피리미딘 유사체(pyrimidine analog), 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 조성물을 포함하는 키트를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 이를 필요로 하는 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 암의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 하나의 양태는 L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및 항암제, 구체적으로 피리미딘 유사체(pyrimidine analog), 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서는, L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체와 피리미딘 유사체인 젬시타빈 또는 플라틴계 항암제인 시스플라틴을 병용 투여하는 경우, 상기 항체 및 약물을 단독 투여하는 경우에 비하여 담도암의 치료 효율이 현저히 증가함을 확인하였다.
본 발명에서 용어, "L1CAM(L1 cell adhesion molecule)"은 면역글로불린 수퍼패밀리 세포부착단백질들(immunoglobulin superfamily cell adhesion molecules, CAMs)에 속하는 내재성 막 당단백질(integral membrane glycoprotein)중 하나를 의미한다. 상기 L1CAM은 흑색종(melanoma), 신경아세포종(neuroblastoma), 난소암, 대장암, 담관암 및 담낭암 등 여러 암에서 발현되고, 암세포의 성장과 전이에 중요한 역할을 하며, L1CAM 과발현이 암의 불량 예후와 관련이 있음이 보고되고 있다(Raveh et al., Cancer Letters 282: 137-145, 2009).
본 발명의 항체는 인간 및 마우스 L1CAM 단백질 모두에 고친화적으로 결합하며 현저한 암 성장 억제 효과를 나타내므로, L1CAM이 과발현되는 암의 예방 또는 치료 분야에 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명의 용어, "항체"는 면역학적으로 특정 항원과 반응성을 갖는 면역글로불린 분자를 포함하는, 항원을 특이적으로 인식하는 수용체 역할을 하는 단백질 분자를 의미하며, 다클론항체, 단일클론항체, 전체(whole) 항체 및 항체 단편을 모두 포함한다. 또한, 상기 용어는 키메라성 항체(예를 들면, 인간화 뮤린 항체) 및 이가(bivalent) 또는 이중특이성 분자(예를 들어, 이중특이성 항체), 디아바디, 트리아바디 및 테트라바디를 포함한다. 상기 용어는 추가로 FcRn에 대한 결합 기능을 보유한 단쇄 항체, 스캡, 항체 불변영역의 유사체 및 단백질 스캐폴드에 기초한 인공 항체를 포함한다. 전체 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 구조이며, 각각의 경쇄는 중쇄와 다이설파이드 결합으로 연결되어 있다. 상기 전체 항체는 IgA, IgD, IgE, IgM 및 IgG를 포함하며, IgG는 아형(subtype)으로, IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함한다. 상기 항체 단편은 항원결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, Fd, Fab, Fab', F(ab')2 및 Fv 등을 포함한다. 상기 Fd는 Fab 단편에 포함되어 있는 중쇄 부분을 의미한다. 상기 Fab는 경쇄 및 중쇄의 가변영역과 경쇄의 불변 영역 및 중쇄의 첫 번째 불변 영역(CH1 도메인)을 가지는 구조로 1개의 항원 결합 부위를 가진다. Fab'는 중쇄 CH1 도메인의 C 말단에 하나 이상의 시스테인 잔기를 포함하는 힌지 영역(hinge region)을 가진다는 점에서 Fab와 차이가 있다. F(ab')2 항체는 Fab'의 힌지 영역의 시스테인 잔기가 디설파이드 결합을 이루면서 생성된다. Fv(variable fragment)는 중쇄 가변부위 및 경쇄 가변부위만을 가지고 있는 최소의 항체조각을 의미한다. 이중디설파이드Fv(dsFv)는 디설파이드 결합으로 중쇄 가변부위와 경쇄 가변부위가 연결되어 있고 단쇄 Fv(scFv)는 일반적으로 펩타이드 링커를 통하여 중쇄의 가변 영역과 경쇄의 가변 영역이 공유 결합으로 연결되어 있다. 이러한 항체 단편은 단백질 가수분해 효소를 이용해서 얻을 수 있고(예를 들어, 전체 항체를 파파인으로 제한 절단하며 Fab를 얻을 수 있고 펩신으로 절단하면 F(ab')2 단편을 얻을 수 있다), 바람직하게는 유전자 재조합 기술을 통하여 제작할 수 있다.
본 발명에서, 상기 '면역글로불린'은 중쇄 및 경쇄를 가지며, 각각의 중쇄 및 경쇄는 불변 영역 및 가변 영역(상기 부위는 도메인으로 또한 알려져 있음)을 포함한다. 경쇄 및 중쇄의 가변 영역은, 상보성 결정 영역(complementarity-determining region, 이하 "CDR"이라 함)이라 불리우는 3개의 다변가능한 영역 및 4개의 구조 영역(framework region)을 포함한다. 상기 CDR은 주로 항원의 에피토프(epitope)에 결합하는 역할을 한다. 각 사슬의 CDR은 전형적으로 N-말단으로부터 시작하여 순차적으로 CDR1, CDR2, CDR3로 불리우고, 또한 특정 CDR이 위치하고 있는 사슬에 의해서 식별된다.
본 발명에서 용어, "L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체"는 L1CAM 단백질에 결합하여 L1CAM 단백질의 활성을 저해할 수 있는 항체를 의미한다. 본 발명의 목적상, 상기 L1CAM에 특이적으로 결합하는 항체는 L1CAM의 Ig5 영역에 결합하는 항체이나, 이에 제한되지 않는다.
구체적으로, 상기 L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체 또는 이의 기능성 변이체일 수 있다.
본 발명에서 용어, "서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체의 기능성 변이체"는 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 모항체와 비교하여 중쇄 가변영역 및/또는 경쇄 가변영역의 1개 이상의 아미노산에 차이가 있는 항체로서, 상기 모항체에 비해 물성이 개선된 항체일 수 있다. 또한, 상기 기능성 변이체는 모항체와 동등한 생물학적 활성을 보유할 수 있다.
특히, 상기 항체는 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 모항체와 비교하여 중쇄 가변영역 및/또는 경쇄 가변영역의 1개 내지 10개의 아미노산에서 차이가 있는 항체, 구체적으로 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 모항체의 중쇄 가변영역 및/또는 경쇄 가변영역에서 1 이상의 아미노산, 구체적으로 1 내지 10개, 보다 더 구체적으로 1개 내지 6개의 아미노산이 치환된 것일 수 있다.
이러한 항체는 단일클론항체일 수 있으며, 전장 항체 또는 이의 항체 단편 형태일 수 있다.
보다 구체적으로, 이러한 항체는 서열번호 2로 기재된 중쇄 CDR1; 서열번호 3 또는 10으로 기재된 중쇄 CDR2; 및 서열번호 4로 기재된 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변영역과 서열번호 6 또는 12로 기재된 경쇄 CDR1; 서열번호 7로 기재된 경쇄 CDR2; 및 서열번호 8로 기재된 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변영역을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 상기 항체는 서열번호 1, 9 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 중쇄 가변영역; 및 서열번호 5, 11, 14 및 15로 이루어진 군으로부터 선택된 경쇄 가변영역을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 L1CAM에 특이적으로 결합하는 항체는 대한민국 공개특허 제10-2014-0066101 A호, WO2014-077648 A1, 또는 US 2015-0344571 Al에 개시되어 있는 항체일 수 있다. 상기 특허의 명세서 전문은 참고자료로서 모두 본원에 포함된다.
구체적으로, 상기 L1CAM에 특이적으로 결합하는 항체는 다음과 같은 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되는 것은 아니다:
(1) 서열번호 2로 기재된 중쇄 CDR1; 서열번호 3으로 기재된 중쇄 CDR2; 및 서열번호 4로 기재된 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변영역과 서열번호 6으로 기재된 경쇄 CDR1; 서열번호 7로 기재된 경쇄 CDR2; 및 서열번호 8로 기재된 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변영역을 포함하는 것일 수 있으며, 보다 구체적으로 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체; 또는 서열번호 13의 중쇄 가변영역 및 서열번호 15의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체일 수 있다. 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체는 본 발명에서 Ab417로 명명되며, 서열번호 13의 중쇄 가변영역 및 서열번호 15의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체는 본 발명에서 Ab417-H5L1으로 명명된다.
(2) 서열번호 2로 기재된 중쇄 CDR1; 서열번호 10으로 기재된 중쇄 CDR2; 및 서열번호 4로 기재된 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변영역과 서열번호 12로 기재된 경쇄 CDR1; 서열번호 7로 기재된 경쇄 CDR2; 및 서열번호 8로 기재된 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변영역을 포함하는 것일 수 있으며, 보다 구체적으로 서열번호 9의 중쇄 가변영역 및 서열번호 11의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체; 또는 서열번호 9의 중쇄 가변영역 및 서열번호 14의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체일 수 있다. 서열번호 9의 중쇄 가변영역 및 서열번호 11의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체는 본 발명에서 Ab417-H6L2로 명명되며, 서열번호 9의 중쇄 가변영역 및 서열번호 14의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체는 본 발명에서 Ab417-H6L6로 명명된다.
상기 기술된 Ab417-H5L1, -H6L2, 및 -H6L6는 모두 본 출원인의 선행특허, 즉 대한민국 공개특허 제10-2014-0066101A호, WO2014-077648 A1, 또는 US 2015-0344571 Al 등에서 Ab417에 비해 물성이 개선된 항체로서 개발된 것으로, Ab417과 동등한 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명에서 이용되는 서열은, 생물학적으로 균등 활성을 갖는 변이를 고려한다면, 서열목록에 기재된 서열과 실질적인 동일성(substantial identity)을 나타내는 서열도 포함하는 것으로 해석된다. 상기 용어, '실질적인 동일성'은 본 발명의 서열과 임의의 다른 서열을 최대한 대응되도록 얼라인(align)하고, 당업계에서 통상적으로 이용되는 알고리즘을 이용하여 얼라인된 서열을 분석한 경우에, 최소 60%의 상동성, 더욱 구체적으로 70%의 상동성, 더더욱 구체적으로 80%의 상동성, 가장 구체적으로 90%의 상동성을 나타내는 서열을 의미한다.
따라서, 상기 서열번호 1 내지 15로 표시되는 서열과 높은 상동성을 갖는 아미노산 서열, 예를 들면 그 상동성이 70% 이상, 구체적으로 80% 이상, 더욱 구체적으로 90% 이상의 높은 상동성을 갖는 아미노산 서열도 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
본 발명의 용어, "피리미딘 유사체(pyrimidine analog)"는 대사성 피리미딘의 구조를 모방하는 뉴클레오시드(nucleoside) 유사체 화합물을 의미한다. 상기 피리미딘 유사체는 세포 내(intracellular) 화학치료제, 세포 내 항암제, DNA 바이러스에 대한 항-바이러스제 또는 핵산 성분 등으로 사용될 수 있다.
본 발명의 목적상, 상기 피리미딘 유사체는 항암제로 사용되는 것일 수 있으며, 구체적인 예로 젬시타빈(gemcitabine)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 용어, "플라틴계 항암제"(Platinum-based anticancer drugs)는 백금을 함유한 중금속 화합물로서 DNA를 손상시키는 약물로 사용되는 항암제를 의미한다. 주로 유방암, 방광암, 위암 및 자궁경부암 등과 같은 다양한 종류의 암을 치료하는데 사용되고 있으며, DNA 가닥상의 인접한 2개의 구아닌과 결합하여 사슬 내 가교(interstrand crosslink)를 형성하여 DNA 합성을 억제함으로써 항암효과를 나타낸다고 알려져 있다. 구체적으로, 상기 플라틴계 항암제는 시스플라틴(cisplatin), 옥살리플라틴(oxaliplatin), 테트라플라틴(tetraplatin), 헵타플라틴(heptaplatin), 파라플라틴(paraplatin), 카보플라틴(carboplatin) 또는 나노플라틴(nanoplatin)일 수 있으며, 더욱 구체적으로 시스플라틴일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서, 암의 종류는 특별히 이에 제한되지 않으나, L1CAM이 과발현되는 암일 수 있다. 구체적으로, 흑색종(melanoma), 신경아세포종(neuroblastoma), 난소암, 대장암, 담도암(담관암 또는 담낭암)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어, "담도암"(biliary tract cancer)은 '담관암' 및 '담낭암'을 총칭하는 것으로서, 담낭 내부를 둘러싸고 있는 상피세포에서 발생하는 악성종양을 의미한다. 담관암은 간에서 배출하는 담즙의 통로인 담관에서 생기는 암이며, 담낭암은 상기 담즙을 1차적으로 저류하는 장소인 담낭에서 생기는 암을 의미한다. 담도암은 종양의 위치에 따라 간내 담도암과 간외 담도암으로 나눌 수 있는데, 간내 담도암은 주변부 담도암(peripheral cholangiocarcinoma)과 간문부 담도암(hilar cholangiocarcinoma)으로; 간외 담도암은 발생 부위에 따라 상부(근위부), 중부, 하부(원위부) 담도암으로 구분될 수 있다.
담도암은 상당히 진행되기 전까지는 특징적인 증상이 나타나지 않아 조기 진단이 매우 어렵다. 또한, 담도, 혈관계에 해부학적 구조가 다양하고, 수술 전, 심지어는 수술 중에도 정확한 종양 침습 범위를 판단하기가 어려워 근치적 절제(암이 존재하거나 존재할 가능성이 있는 모든 부위를 최대한 제거하는 것)가 불가능한 경우도 있다. 항암 화학요법은 암이 전이되어 수술이 힘든 경우나 수술 후에 남아 있을 수 있는 암세포들의 성장을 막기 위해 시행되는데, 담도암의 치료에 있어 많은 발전이 있었으나 아직은 그 효과가 확실히 증명되지는 않은 상태이다.
본 발명의 용어, "예방"은 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는 조성물의 투여로 암을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 용어, "치료"는 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는 조성물의 투여로 암의 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 일 실시예에서, ICC 세포인 Choi-CK 세포에 대하여, Ab417 또는 젬시타빈을 단독 투여하는 경우에는 각각 35.3% 또는 44.4%의 암 성장 저해율을 나타내었지만, 이들을 병용 투여하는 경우에는 88.8%의 저해율을 나타냄을 확인하였다(도 5). 또한, ECC 세포인 TFK-1 세포에 대하여, Ab417 또는 젬시타빈을 단독 투여하는 경우에는 각각 10.7% 또는 21.7%의 암 성장 저해율을 나타내었지만, 이들을 병용 투여하는 경우에는 52.2%의 저해율을 나타냄을 확인하였다(도 10).
상기 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있고, 상기 담체는 비자연적 담체(non-naturally occuring carrier)를 포함할 수 있다.
상기 용어, '약학적으로 허용가능한'은 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
구체적으로, 상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으나, 당업계에서 암의 예방 또는 치료를 위하여 사용되는 제형이라면, 이에 제한되지 않는다.
상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는, 구체적인 예로, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 폴리카프로락톤(PCL; polycaprolactone), 폴리락틱액시드(PLA; Poly Lactic Acid), 폴리-L-락틱액시드(PLLA; poly- L -lactic acid), 광물유 등을 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 추출물과 이의 분획물들에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당 되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에 포함된 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합의 함량은 최종 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 내지 50 중량%, 보다 구체적으로 0.01 내지 20 중량%의 함량으로 포함될 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다.
상기 용어, '약제학적으로 유효한 양'은 의학적 치료 또는 예방에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료 또는 예방하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 질환의 중증도, 약물의 활성, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 사용된 본 발명 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율 치료기간, 사용된 본 발명의 조성물과 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 투여하거나 공지된 담도암 치료제와 병용하여 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 사용목적, 질환의 중독도, 환자의 연령, 체중, 성별, 기왕력, 또는 유효성분으로서 사용되는 물질의 종류 등을 고려하여 당업자가 결정할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 약학적 조성물은 성인 1인당 약 0.1 ng/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏, 구체적으로 약 1 ng/㎏ 내지 약 10 ㎎/㎏로 투여할 수 있고, 본 발명의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또 다른 하나의 양태는 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 약제학적으로 유효한 양으로 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 암의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 용어, "개체"는 암이 발병될 가능성이 있거나 또는 발병된 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물, 양식어류 등을 제한없이 포함할 수 있다.
본 발명의 암의 예방 또는 치료 방법에서, 상기 조성물을 투여하는 투여 경로 및 투여 방식은 특별히 제한되지 않으며, 목적하는 해당 부위에 상기 조성물이 도달할 수 있는 한, 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다.
구체적으로, 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 그 투여 경로의 비제한적인 예로는, 안구, 구강, 직장, 국소, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 경피, 비측내 또는 흡입 등을 통하여 투여되는 것을 들 수 있다.
또한, 상기 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
또한, 상기 항체; 및 피리미딘 유사체, 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합은 병용 투여될 수 있다.
본원에서, "병용"이란 용어가 사용될 경우 이는 동시, 개별 또는 순차 투여를 나타내는 것으로 이해되어야 한다. 상기 투여가 순차 또는 개별적인 경우, 2차 성분 투여의 간격은 상기 병용의 이로운 효과를 잃지 않도록 하는 것이어야 한다.
상기 물질은 각각 동시, 순차적, 또는 역순으로 투여될 수 있으며, 적절한 유효량의 조합으로 동시에 투여될 수 있으나, 특정 투여 방법 또는 순서에 제한되지 않는다.
본 발명의 방법은 상기 유효 성분들을 약학적 유효량으로 투여하는 것을 포함할 수 있다. 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있으며, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 본 발명의 목적상, 특정 환자에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다.
다른 하나의 양태는 상기 조성물을 포함하는 약학적 키트를 제공한다.
본 발명에서, 상기 약학적 키트는 정제, 캡슐 또는 주사 형태일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 키트는 약학적으로 유효한 투여량으로 상기 항체; 및 피리미딘 유사체(pyrimidine analog), 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 키트는 상기 성분들의 투여를 위한 설명서를 포함할 수 있다.
L1CAM 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 젬시타빈 및/또는 시스플라틴을 병용 투여하는 경우에는, 이들을 단독 투여하는 경우에 비하여 담도암의 성장 억제에 대하여 현저한 효과를 나타내므로, 상기 항체 및 약물을 포함하는 본 발명의 약학적 조성물은 담도암의 치료에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417의 항암 효과를 보여준다. Ab417(10 mg/kg), 비교군으로서 항-L1CAM 항체인 Hz2.2(10 mg/kg) 또는 동종형 대조군(hFc, 3.3 mg/kg)을 Choi-CK 세포를 갖는 누드 마우스(n=8)에 일주일에 세 번 정맥 주사하였다. A는 종양 부피 및 B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett t-검정(Dunnett's t-test)에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**)는 동종형 대조군에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 2는 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417의 항암 효과를 보여준다. Ab417(10 mg/kg) 또는 동종형 대조군(hFc, 3.3 mg/kg)을 Choi-CK 세포를 갖는 누드 마우스(n=8)에 일주일에 두 번 정맥 주사하였다. A는 종양 부피, B는 종양 무게 및 C는 몸무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett t-검정(Dunnett's t-test)에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정(Steel's test)에 의한 p < 0.05 (#)는 동종형 대조군에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다. D는 종양 섹션에서 항-인간 Ki-67 항체로 염색된 영역을 나타낸다. Ki-67 지수(index)는 전체 면적에 대한 양성 염색부위의 백분율로 나타내었다.
도 3은 L1CAM가 발현된 Choi-CK에 결합한 Ab417의 모습, 및 상기 Ab417의 막-L1CAM 수준 감소 효과를 보여준다. A는 Ab417 내면화의 공초점 현미경 분석을 보여준다. SCK-L1 세포를 지정된 시간 동안 Ab417(10 ㎍/mL)로 전처리하였고, 막 L1CAM에 결합된 Ab417는 항-인간 IgG(H+L) Cross Adsorbed DyLight 594 (적색), 및 내면화 Ab417는 항-인간IgG (Fc-특이적)-FITC(녹색)을 이용하여 탐지하였다. B는 지정된 시간 동안 Ab417(10 ㎍/mL)로 처리된 Choi-CK 세포를 나타낸다. 막 L1CAM는 A10-A3을 이용하여 웨스턴블롯 분석으로 탐지하였고, 판-카드헤린(pan-cadherin)은 로딩 컨트롤로 사용하였다. Ab417로 처리되지 않은 세포는 대조군(C)으로 사용하였다. C는 PBS(위) 또는 Ab417(아래)로 처리된 Choi-CK 종양에 대하여 L1CAM으로 염색한, 400배로 확대된 공초점 현미경 이미지이다. 전체 면적에 대한 양성 염색 부위의 퍼센트로 나타내었다. D는 종양 섹션에서 인간 L1CAM의 N-말단 부위에 특이적인 항체로 염색된 영역을 나타낸다. 전체 면적에 대한 양성 염색부위의 백분율로 나타내었다.
도 4는 Choi-CK 이종 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴의 항암 효과를 보여준다. 3주 또는 4주 동안 일주일에 두 번씩 지정된 용량의 약물을 복강 내 주사하였다. A는 종양 부피, B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정에 의한 p < 0.05 (#) 및 p < 0.01 (##)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 5는 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 항암효과를 보여준다. A 및 C는 종양 부피, B 및 D는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정에 의한 p < 0.05 (#) 및 p < 0.01 (##)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 6은 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 몸무게 변화 정도를 보여준다. A는 젬시타빈 또는 시스플라틴 단독 투여, B는 Ab417 또는 젬시타빈 단독 투여, 및 Ab417과 젬시타빈의 병용 투여, C는 Ab417 또는 시스플라틴 단독 투여, 및 Ab417과 시스플라틴의 병용 투여에 관한 것이다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타낸다.
도 7은 TFK-1 세포에서 Ab417에 의해 발현이 억제된 막 L1CAM 수준을 보여준다.
도 8 TFK-1 이종이식 모델에서 Ab417의 항암 효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett t-검정(Dunnett's t-test)에 의한 p < 0.01 (**)는 동종형 대조군(hFc)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 9는 TFK-1 이종이식 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴의 항암 효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 10은 TFK-1 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 항암효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 몸무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 2는 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417의 항암 효과를 보여준다. Ab417(10 mg/kg) 또는 동종형 대조군(hFc, 3.3 mg/kg)을 Choi-CK 세포를 갖는 누드 마우스(n=8)에 일주일에 두 번 정맥 주사하였다. A는 종양 부피, B는 종양 무게 및 C는 몸무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett t-검정(Dunnett's t-test)에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정(Steel's test)에 의한 p < 0.05 (#)는 동종형 대조군에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다. D는 종양 섹션에서 항-인간 Ki-67 항체로 염색된 영역을 나타낸다. Ki-67 지수(index)는 전체 면적에 대한 양성 염색부위의 백분율로 나타내었다.
도 3은 L1CAM가 발현된 Choi-CK에 결합한 Ab417의 모습, 및 상기 Ab417의 막-L1CAM 수준 감소 효과를 보여준다. A는 Ab417 내면화의 공초점 현미경 분석을 보여준다. SCK-L1 세포를 지정된 시간 동안 Ab417(10 ㎍/mL)로 전처리하였고, 막 L1CAM에 결합된 Ab417는 항-인간 IgG(H+L) Cross Adsorbed DyLight 594 (적색), 및 내면화 Ab417는 항-인간IgG (Fc-특이적)-FITC(녹색)을 이용하여 탐지하였다. B는 지정된 시간 동안 Ab417(10 ㎍/mL)로 처리된 Choi-CK 세포를 나타낸다. 막 L1CAM는 A10-A3을 이용하여 웨스턴블롯 분석으로 탐지하였고, 판-카드헤린(pan-cadherin)은 로딩 컨트롤로 사용하였다. Ab417로 처리되지 않은 세포는 대조군(C)으로 사용하였다. C는 PBS(위) 또는 Ab417(아래)로 처리된 Choi-CK 종양에 대하여 L1CAM으로 염색한, 400배로 확대된 공초점 현미경 이미지이다. 전체 면적에 대한 양성 염색 부위의 퍼센트로 나타내었다. D는 종양 섹션에서 인간 L1CAM의 N-말단 부위에 특이적인 항체로 염색된 영역을 나타낸다. 전체 면적에 대한 양성 염색부위의 백분율로 나타내었다.
도 4는 Choi-CK 이종 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴의 항암 효과를 보여준다. 3주 또는 4주 동안 일주일에 두 번씩 지정된 용량의 약물을 복강 내 주사하였다. A는 종양 부피, B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정에 의한 p < 0.05 (#) 및 p < 0.01 (##)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 5는 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 항암효과를 보여준다. A 및 C는 종양 부피, B 및 D는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**), 및 Steel 검정에 의한 p < 0.05 (#) 및 p < 0.01 (##)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 6은 Choi-CK 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 몸무게 변화 정도를 보여준다. A는 젬시타빈 또는 시스플라틴 단독 투여, B는 Ab417 또는 젬시타빈 단독 투여, 및 Ab417과 젬시타빈의 병용 투여, C는 Ab417 또는 시스플라틴 단독 투여, 및 Ab417과 시스플라틴의 병용 투여에 관한 것이다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타낸다.
도 7은 TFK-1 세포에서 Ab417에 의해 발현이 억제된 막 L1CAM 수준을 보여준다.
도 8 TFK-1 이종이식 모델에서 Ab417의 항암 효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett t-검정(Dunnett's t-test)에 의한 p < 0.01 (**)는 동종형 대조군(hFc)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 9는 TFK-1 이종이식 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴의 항암 효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 종양 무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
도 10은 TFK-1 이종이식 모델에서 Ab417 및 젬시타빈, 또는 시스플라틴 병용 투여의 항암효과를 보여준다. A는 종양 부피 및 B는 몸무게를 나타낸다. 각 지점은 '평균 ± 표준편차'를 나타내며, Dunnett 검정에 의한 p < 0.05 (*) 및 p < 0.01 (**)는 대조군(saline)에 비하여 유의적인 차이를 나타냄을 의미한다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에서 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐, 이들에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실험예
1. 사용한 세포주 및 배양 방법
인간 ICC(intrahepatic cholangiocarcinoma; 간내 담도암) 세포주인 Choi-CK 및 SCK-L1는 10% FBS(Atlas Biologics, USA)가 보충된 DMEM(Welgene, Republic of Korea)에서 배양하였다. 상기 Choi-CK는 전북대학교 김대곤 박사님으로부터 제공받았다. ECC(extrahepatic cholangiocarcinoma; 간외 담도암) 세포주인 TFK-1는 DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures, Human and Animal Cell Lines, Braunschweig, Germany)에서 구매하였고, RPMI(Thermo Fisher Scientific, USA)에서 배양하였다. Ab417 항체를 발현하는 CHO-DG44 세포주 #9-20(Cho S, et al., MAbs. 2016;8(2):414-25.)는 5%(v/v) 투석된 FBS(Thermo Fisher Scientific)가 보충된 MEM-α(Welgene)에서 배양하였고, 항체의 생산을 위하여 혈청이 포함되지 않은 배지(SFM4CHO, GE Lifesciences, USA)로 교체하였다. 모든 세포주는 5% CO2, 37℃의 습식 인큐베이터에서 배양하였다.
실험예
2.
Ab417
항체의 생산 방법
Ab417 항체(이하, 'Ab417'로 명명)는 CHO-DG44 세포주(#9-20)에서 생산하였다. 배양 상층액을 원심분리하고, 바틀탑 필터(0.22 ㎛ PES, Sartorius)를 이용하여 여과하였으며, 정제를 위하여 단백질 A-아가로스(GenScript, USA)에서 친화 크로마토그래피를 수행하였다. 단백질 A에 결합한 항체들을 150 mM 염화나트륨(pH 3.6)이 포함된 0.1 M 구연산 나트륨을 이용하여 용출하였다. 용출된 항체를 150 mM 염화나트륨 및 0.007% Tween-20(pH 6.4)가 포함된 25 mM의 구연산 나트륨 버퍼(pH 6.4)로 교체한 뒤 보관하였다. 단백질 농도는 NanoDrop 2000 UV-Vis 분광광도계(Thermo Fisher Scientific)로 측정하였다.
실험예
3.
인비보
(
In
vivo
) 항암 효과 분석
누드 마우스(BALB/c Slc-nu, 5 주령)는 일본 SLC, Inc.에서 구입하였고, Biotoxtech(한국)의 동물 관리위원회의 지침에 따라 7일 동안 특정 병원균이 없는 환경에서 보관하였다.
Ab417, 약물(젬시타빈; gemcitabine 또는 시스플라틴; cisplatin), 또는 Ab417 및 상기 약물의 조합에 대한 항암 효과를 확인하기 위하여, 위원회의 사전 승인을 받았다(각각 B13698, B13933, 또는 B13934).
구체적으로, Choi-CK 세포(1 × 106)를 각 마우스의 오른쪽 측복부에 피하 접종하였다. Choi-CK 종양 조직(3 × 3 × 3 mm3)을 새로운 누드 마우스의 등부에 피하 접종하였다. 종양 체적이 약 100 mm3에 이르는 경우, 마우스를 임의의 그룹으로 나누었고 Ab417 또는 약물(젬시타빈 또는 시스플라틴)을 일주일에 두 번(그룹 당 n = 8) 정맥 내(i.v.) 또는 복강 내(i.p.) 주사하였다. 젬시타빈(Gemcitabine hydrochloride, Sigma Aldrich)과 시스플라틴(cis-Diammineplatinum (II) dichloride, Sigma Aldrich)은 염화나트륨(sodium chloride; Choongwae, Republic of Korea)을 이용하여 적절한 농도로 용해하였다. 사용되지 않은 추가의 동물들은 CO2 가스 및 치명적인 출혈을 이용하여 안락사시켰다.
종양의 성장은 캘리퍼로 길이와 넓이를 측정하였고, 다음의 공식을 이용하여 종양 부피를 계산하였다: TV (mm3) = L (mm) × W2 (mm2) × 1/2. 이때, 상기 L은 길이, W는 넓이를 의미한다. 또한, 동물의 체중도 측정하였다. 아이소플루레인(isoflurane)을 이용하여 동물을 마취시켰고, 종양 조직을 꺼낸 뒤 무게를 측정하였다. IR(Tumor growth inhibition rate; 종양 성장 저해율)은 다음과 같은 공식을 이용하여 계산하였다: IR (%) = (1 - T/C) × 100. 이때, 상기 T는 테스트 물질 그룹에 대한 종양의 평균 무게, C는 음성 대조 그룹에 대한 부피 또는 무게를 의미한다.
항암 활성의 메커니즘을 규명하기 위하여, 누드 마우스(BALB/c-nude, 6 주령)을 NARA Biotech (Republic of Korea)로부터 구입하였고, 강원대학교 IACUC (KW-160429-1)의 지침에 따라 7일 동안 특정 병원균이 없는 환경에서 보관하였다.
Choi-CK 세포(1 × 106)를 누드 마우스(n=3)의 오른쪽 측복부에 피하 접종하였다. 종양 부피가 약 110 mm3에 도달할 때, 마우스를 임의의 두 그룹으로 나누었고, 항체 또는 PBS를 일주일에 세 번 복강 내 주사하였다. 주사 10일 후, 종양을 꺼내어 Ki-67의 탐지를 위해 면역조직화학 및 L1CAM의 탐지를 위해 면역형광염색을 수행하였다. 실험 후, 동물들은 CO2 가스 및 치명적인 출혈을 이용하여 안락사시켰다.
한편, TFK-1의 이종모델을 위하여, NOD/SCID 마우스(5 주령)을 동물자원센터(Animal Resources Center; ARC, Australia)에서 구입하였고, 아산의료원(한국)의 동물윤리위원회의 지침에 따라 특정 병원균이 없는 환경에서 보관하였다. TFK-1 세포(5 × 106)를 각 마우스의 우측 뒷다리에 이식하였다. 마우스를 임의의 그룹(그룹 당 n=8)으로 나누었고, Ab417 또는 약물을 일주일에 두 번 주입하였다.
실험예
4. 면역조직화학 분석
마우스를 마취시키고 조직을 수득한 뒤, 파라핀 섹션(paraffin sections)을 위해 수득한 조직을 포르말린(formalin)으로 고정하였다. 파라핀-임베딩 조직 섹션을 자일렌(xylene), 및 95%, 90%, 70% 및 50% 에탄올로 탈-파라핀화시켰고, PBS로 세척하였다. 탈-파라핀화된 슬라이드를 30분 동안 0.1 mol/L 구연산 버퍼(pH 6.0)에서 가열하였고, 메탄올에 포함된 0.3%(v/v) 과산화수소에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 섹션을 상온에서 일반 말 혈청에 두어 블로킹하였고, Ki-67(C-term) (1:200, Acris, Germany)에 대한 일차 항체로 4℃에서 하룻밤 동안 면역염색을 수행하였다. ABC 및 DAB 키트(Vector Laboratories, USA)를 이용하여 타겟 단백질을 가시화하였고, 헤마톡실린(hematoxylin)으로 교차염색하였다.
면역형광 염색을 위해, 항-NCAM-L1(N-14) mAb(1:50, Santa Cruz Biotechnology, USA)로 4℃에서 하룻밤 동안 면역염색을 수행하였고, 동키(donkey) 항-고트(goat) Alexa 488-접합 이차항체(1:200, Thermo Fisher Scientific)로 상온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 세포핵은 DAPI(5 μM, Sigma Aldrich)로 표지하였다. Zeiss 공초점 현미경을 이용하여 이미지를 촬영하였으며, Image J 소프트웨어를(version 1.45)를 사용하여 염색 정도를 정량적으로 평가하였다.
실험예
5. 항체 내면화(Antibody internalization)
어세이
Ab417의 내면화는 공초점 레이저 스캐닝 현미경을 이용하여 측정하였다. Ab417(10 ㎍/mL)를 포함하는 배지를 슬라이드 글라스에 올려진 L1CAM-발현 SCK-L1 세포에 첨가하였다. 37℃에서 0.5 또는 4시간 동안 배양한 이후, 세포를 얼음에 두었고, 4℃ PBS로 헹군 뒤, 4% 포름알데히드(Sigma Aldrich)로 고정하였다.
제로 타임(zero-time) 대조군으로서, Ab417를 포름알데히드로 고정된 세포에 첨가하였다. 세포 표면 항체를 래빗(rabbit) 항-인간 IgG(H+L) Cross Adsorbed DyLight 594 다클론성 항체(1:100, v/v, Thermo Fisher Scientific)로 탐지하였다. 세포 표면 이차 항체를 포름알데히드를 사용하여 5분 동안 고정하였다. 세척한 이후, 세포를 블로킹하였고, PBS에 포함된 10% 고트 혈청 및 0.1% Triton X-100로 상온에서 30분 동안 투과시켰다. 내면화된 L1CAM을 표지하기 위하여, 세포를 5% 고트 혈청 및 0.02% Triton X-100가 포함된 PBS에서 항-인간 IgG(Fc-specific)-FITC (1:500, v/v)로 상온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 슬라이드를 PBS로 3번 세척하였고, SlowFade® Antifade 키트(Thermo Fisher Scientific)를 이용하여 마운트하였다. 형광 신호를 Olympus LX70 FV300 05-LGP-193(OLYMPUS, Japan)로 탐지하였다.
실험예
6.
Ab417
-처리 세포에서의 세포막
L1CAM
수준의 분석
Choi-CK 또는 TFK-1 세포는 Ab417(10 ㎍/mL)로 지정된 시간 동안 인큐베이션하였고, 막단백질 분획을 MEM-PERTM Plus Membrane Protein Extraction 키트(Thermo Fisher Scientific)로 수득하였다. 수득한 단백질 샘플을 BCA 단백질 정량 어세이를 통해 정량하였고, SDS-PAGE를 수행하였다. 단백질을 니트로셀룰로스 막(nitrocellulose membrane)에 옮긴 후, 0.1% Tween-20 및 5% 스킴 밀크(skim milk, BD Biosciences)가 포함된 TBS(Tris-buffered saline)로 블로킹하였다. L1CAM은 인간 L1CAM에 결합한 마우스 mAb 및 고트 항-마우스 IgG-HRP 접합체(1:8,000, v/v, Thermo Fisher Scientific)를 이용하여 탐지하였다. 판-카드헤린(Pan-cadherin)을 판-카드헤린 래빗 mAb(1: 2,500, v/v, Cell Signaling Technology, USA) 및 항-래빗 IgG-HRP 접합체(1:5,000, v/v, Cell Signaling Technology)의 로딩 컨트롤(loading control)로 사용하였다. 이후, 면역반응성 밴드를 SuperSignalTM West Femto Maximum Sensitive 기질(Thermo Fisher Scientific)을 이용하여 가시화하였다.
실험예
7. 통계적 분석
결과값은 '평균 ± 표준 편차'로 나타내었고 그룹 간의 통계적 비교는
Dunnett t-검정(Dunnett's t-test) 또는 Steel 검정(Steel's test)에 이어 단방향 분석을 이용하여 수행하였다. p <0.05의 값은 통계적으로 유의한 것으로 판단하였다.
실시예
1. ICC 이종이식 마우스 모델에서 항암 활성 확인
실시예
1-1.
Ab417의
항암 활성 확인
본 발명자들의 선행연구에서는, ICC 세포인 Choi-CK 이종이식을 갖는 누드 마우스(n=8)에 Ab417 항체(10 mg/kg)를 일주일에 세 번 정맥 내 주입하였을 때의 Ab417의 항암 활성을 측정한 결과, 도 1의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, 동종형 대조군으로서 재조합 인간 Fc(hFc)와 비교 시, 종양 무게의 평균에 기초하여 68.6%의 암 성장 저해 활성을 나타냄을 확인하였다. 또한, 상기 Ab417는 몸무게에 영향을 미치지 않았으며, 다른 부작용을 야기하지 않음을 확인하였다(Cho S, et al. MAbs. 2016;8(2):414-25.).
이에, 본 발명에서는, Ab417가 용량 의존적인 항암 효과를 나타내는지 확인하기 위하여, 상기 실험예 3에 따라, Ab417(10 mg/kg) 또는 hFc(3.3 mg/kg)를 동일한 모델(n=8)에 일주일에 두 번 정맥 주사하였다.
그 결과, 도 2의 A 내지 C에서 볼 수 있듯이, Ab417는 몸무게에 영향을 미치지 않으면서 암 성장을 억제함을 확인하였다. 주입 22일 이후에, Ab417가 처리된 그룹의 평균 종양 부피 및 무게는 각각 278.3 mm3(p < 0.05) 및 0.17 g(p < 0.05), 대조군은 574.5 mm3 및 0.26 g로서, 대조군(hFc)과 비교 시 Ab417 처리된 그룹의 암 성장 억제율은 35.6%임을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417은 Choi-CK 이종이식 모델에서 용량 의존적으로 종양 성장을 억제함을 알 수 있었다.
아울러, Ab417에 의한 종양 성장 억제는 암세포의 증식이 억제된 것에 기인한 결과인지 확인하고자, 상기 실험예 3 및 4에 따라, 세포 증식의 마커인 Ki-67로 면역 염색을 수행하였다.
그 결과, 도 2의 D에서 볼 수 있듯이, Ab417 처리된 종양은 대조군에 비하여 더 낮은 Ki-67 지수를 나타내었다.
상기 결과를 통해, Ab417는 생체 내(in vivo) 암세포의 증식을 억제함으로써 종양의 성장을 저해함을 알 수 있었다.
실시예
1-2.
Ab417의
막
L1CAM에
대한 영향 분석
L1CAM 발현의 하향 조절은 인비트로 ICC 세포의 증식 및 이동을 저해하고, 생체 내 종양의 성장을 억제한다고 알려져 있다(Min JK, et al., Clin Cancer Res. 2010;16(14):3571-80.). 이에, Ab417에 의한 종양 세포 증식 저해 활성의 메커니즘을 확인하기 위하여, 상기 실험예 5에 따라, SCK-L1 세포를 이용하여 항체 내면화 어세이를 수행하였다.
그 결과, 도 3의 A에서 볼 수 있듯이, Ab417의 세포질로의 내면화는 항체가 세포에 첨가된 4시간 이후에 탐지됨을 확인하였다.
이후, 막(membrane) L1CAM 수준이 Ab417의 내면화에 의하여 감소되는지 확인하고자, 상기 실험예 6에 따라, Choi-CK 세포를 각 지정된 시간(1, 2, 4 또는 6시간) 동안 항체로 인큐베이션하였고, 처리된 세포의 막단백질 분획을 인간 L1CAM의 Ig1 도메인에 결합하는 뮤라인(murine) 항-L1CAM mAb(A10-A3)를 이용한 웨스턴블롯으로 분석하였다.
그 결과, 도 3의 B에서 볼 수 있듯이, Ab417는 농도 의존적인 방법으로 막 L1CAM 수준을 하향조절함을 확인하였다. 또한, 도 3의 C 및 D에서 볼 수 있듯이, 인간 L1CAM의 N-말단 부위에 특이적인 mAb로 수행된 Choi-CK 종양의 면역형광 염색을 통해, Ab417 처리된 종양은 대조군인 hFc가 처리된 종양에 비하여 L1CAM 수준이 상당히 감소됨을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417는 내면화되어 막 L1CAM 수준을 감소시킴으로써 암세포의 증식을 억제함을 알 수 있었다.
실시예
1-3.
젬시타빈
또는
시스플라틴의
암세포 증식 억제 효과 확인
젬시타빈 또는 시스플라틴은 진행된 담도암의 표준 치료제로 고려되고 있기 때문에, Choi-CK 세포의 생체 내 증식에 대한 상기 약물의 영향을 확인하였다.
그 결과, 젬시타빈 또는 시스플라틴은 Choi-CK 세포의 증식을 용량 의존적인 방법으로 저해하였고, 젬시타빈 또는 시스플라틴의 IC50 값은 각각 1.5 ㎍/mL 또는 3.0 ㎍/mL임을 확인하였다.
아울러, 상기 약물에 의한 종양 세포 증식 저해 활성의 메커니즘을 확인하기 위하여, 유세포 분석을 수행하였다.
그 결과, IC50 값의 젬시타빈 또는 시스플라틴을 처리하는 경우, 세포 주기는 G2/M 상태에서 정지됨을 확인하였다. 또한, 젬시타빈보다 시스플라틴을 처리하는 경우에 세포 주기가 정지된 세포가 더욱 증가함을 확인하였다.
상기 결과를 통해, 젬시타빈 또는 시스플라틴은 암세포의 주기를 정지시킴으로써 세포의 증식을 저해함을 알 수 있었다.
실시예
1-4.
젬시타빈
또는
시스플라틴의
항암 효과
Ab417, 및 젬시타빈 또는 시스플라틴의 병용 투여를 위하여, 본 발명자들은 Choi-CK 종양 이종이식 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴의 항암 효과를 확인하였다. 구체적으로, 상기 실험예 3에 따라, 젬시타빈(10, 25, 또는 50 mg/kg), 시스플라틴(0.5 또는 1.5 mg/kg) 또는 대조군으로서 살린(saline)을 Choi-CK 이종이식을 갖는 누드마우스(n=8)에 일주일에 두 번씩 복강 내 주사하였다. 주사 22일 후, 암 조직을 제거하여 무게를 측정하였다.
그 결과, 도 4의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, 10 또는 25 mg/kg의 젬시타빈은 각각 55.4% 또는 80.7%의 암 성장 저해율을 나타내었고, 용량 의존적인 방법으로 암 성장을 저해함을 확인하였다. 반면, 0.5 또는 1.5 mg/kg의 시스플라틴은 각각 39.8% 또는 36.7%의 암 성장 저해율을 나타내었고, 농도가 달라져도 동일한 항암 효과를 나타냄을 확인하였다.
실시예
1-5.
Ab417
, 및
젬시타빈
또는
시스플라틴
병용 투여의 항암 효과 확인
Ab417과 약물을 병용 투여하는 경우, 항체 또는 약물 단독을 투여하는 경우에 비하여 종양 성장 억제 효과가 월등한지 확인하였다.
구체적으로, Ab417, 및 젬시타빈 또는 시스플라틴의 최대 투여량을 Choi-CK 이종 이식 모델에 주입하였고, 상기 실험예 3에 따라, Ab417(10 mg/kg) 단독; 젬시타빈(10 mg/kg) 단독; 또는 시스플라틴(0.5 mg/kg) 단독을 투여하거나, Ab417(10 mg/kg) 및 젬시타빈(10 mg/kg); Ab417(10 mg/kg) 및 시스플라틴(0.5 mg/kg); 또는 Ab417(10 mg/kg) 및 대조군으로서 살린을 일주일에 두 번씩 3주 동안 Choi-CK 이종이식을 갖는 마우스에 주입하였다.
그 결과, 도 5의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, Ab417 및 젬시타빈을 병용 투여하는 경우에 암 성장은 완전히 저해되었고, 종양 무게에 근거하여, 대조군에 비하여 88.8%의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다. 반면, Ab417 또는 젬시타빈은 각각 35.3% 또는 44.4%의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다.
또한, 도 5의 C 및 D에서 볼 수 있듯이, Ab417 및 시스플라틴을 병용 투여한 경우, 종양 무게에 근거하여, 대조군에 비하여 79.2%(p < 0.01)의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다. 반면, Ab417 또는 시스플라틴은 각각 39.7% 또는 51.2%의 암 성장 저해율을 나타내었다.
아울러, 도 6의 A 내지 C에서 볼 수 있듯이, 병용 또는 단독 투여는 몸무게에 영향을 미치지 않음을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417, 및 시스플라틴 또는 젬시타빈의 병용 투여는 항체 또는 약물 단독 투여에 비하여, 현저히 우수한, 상승효과를 나타냄을 알 수 있었다.
실시예
2.
ECC
이종이식 마우스 모델에서 항암 활성 확인
실시예
2-1.
Ab417의
막
L1CAM에
대한 영향 분석
Ab417의 내면화에 의하여 ECC 세포인 TFK-1 세포의 막 L1CAM 수준이 감소하는지 확인하고자 하였다.
구체적으로, 상기 실험예 6에 따라, 지정된 시간(1, 2, 4, 6 시간) 동안 TFK-1 세포를 항체와 함께 배양하였고, 처리된 세포의 막단백질 분획을 인간 L1CAM의 Ig1 도메인에 결합하는 뮤라인(murine) 항-L1CAM mAb(A10-A3)를 이용한 웨스턴블롯으로 분석하였다.
그 결과, 도 7에서 볼 수 있듯이, Ab417는 농도 의존적인 방법으로 막 L1CAM 수준을 하향조절함을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417는 ECC 세포에서도, 내면화되어 막 L1CAM 수준을 감소시킴으로써 암세포의 증식을 억제함을 알 수 있었다.
실시예
2-2.
Ab417의
항암 활성 확인
ECC 모델에서 Ab417의 항암효과를 확인하기 위하여, 상기 실험예 3에 따라, Ab417(10 mg/kg), hFc(3.3 mg/kg) 또는 대조군으로서 살린을 TFK-1 이종이식을 갖는 NOD/SCID 마우스(n=8)에 일주일에 두 번씩 4주 동안 정맥 내 주사하였다.
그 결과, 도 8의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, Ab417는 대조군에 비하여, 종양 무게에 근거하여, 65.4%의 항암 활성을 나타냄을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417은 ECC 세포에서도, 우수한 종양 성장을 억제 활성을 나타냄을 알 수 있었다.
실시예
2-3.
젬시타빈
또는
시스플라틴의
항암 효과 확인
Ab417, 및 젬시타빈 또는 시스플라틴 병용 투여의 항암 효과를 확인하기 위하여, 먼저 ECC 종양 모델에서 젬시타빈 또는 시스플라틴 단독 투여의 항암효과를 확인하였다. 상기 실험예 3에 따라, 젬시타빈(5 또는 10 mg/kg), 시스플라틴(0.5 또는 2 mg/kg) 또는 대조군으로서 살린(saline)을 TFK-1 이종이식을 갖는 NOD/SCID 마우스(n=8)에 일주일에 두 번씩 복강 내 주사하였다. 주사 22일 후, 암 조직을 제거하여 무게를 측정하였다.
그 결과, 도 9의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, 5 또는 10 mg/kg의 젬시타빈은 종양 무게에 근거하여, 각각 43.2% 또는 77.0%의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였고, 용량 의존적인 방법으로 암 성장을 저해함을 확인하였다.
반면에, 0.5 또는 2.0 mg/kg의 시스플라틴은 종양 무게에 근거하여, 각각 54.1% 또는 63.5%의 암 성장 저해율을 나타내었으나, 종양 부피에 근거하여는 단지 8.3% 또는 20.4% 정도의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다.
실시예
2-4.
Ab417
, 및
젬시타빈
또는
시스플라틴
병용 투여의 항암 효과 확인
Ab417과 약물을 병용 투여하는 경우, 항체 또는 약물 단독을 투여하는 경우에 비하여 종양 성장 억제 효과가 월등한지 확인하였다.
구체적으로, 10 mg/kg의 Ab417은 TFK-1 모델에서 우수한 암 성장 저해 효과를 나타내었기 때문에, 본 발명에서는 더 낮은 용량인 5 mg/kg의 Ab417를 사용하였다.
상기 실험예 3에 따라, Ab417(5 mg/kg) 단독; 젬시타빈(5 mg/kg) 단독; 또는 시스플라틴(0.5 mg/kg) 단독을 투여하거나, Ab417(5 mg/kg) 및 젬시타빈(5 mg/kg); Ab417(5 mg/kg) 및 시스플라틴(0.5 mg/kg); 또는 Ab417(5 mg/kg) 및 대조군으로서 살린을 일주일에 두 번씩 3주 동안 TFK-1 이종이식을 갖는 NOD/SCID 마우스(n=8)에 주입하였다.
그 결과, 도 10의 A 및 B에서 볼 수 있듯이, Ab417 및 젬시타빈을 병용 투여하는 경우에 암 성장은 완전히 저해되었고, 종양 부피에 근거하여, 대조군에 비하여 52.2%의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다. 반면, Ab417 또는 젬시타빈을 단독 투여하는 경우에는 각각 10.7% 또는 21.7%의 암 성장 저해율을 나타냄을 확인하였다.
상기 결과를 통해, Ab417, 및 젬시타빈의 병용 투여는 항체 또는 약물 단독 투여에 비하여, 그 효과가 현저히 우수한, 상승효과를 나타냄을 알 수 있었다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
<110> University-Industry Cooperation Foundation, Kangwon National Univeristy
<120> A pharmaceutical composition for preventing or treating cancer
comprising antibody specifically binding to L1CAM and pyrimidine
analogs and/or platinum-based anticancer drugs
<130> KPA161641-KR-P1
<150> KR 10-2016-0183615
<151> 2016-12-30
<160> 15
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 121
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a heavy chain variable region
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Phe
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Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Gly Arg Ala Tyr Gly Ser Gly Ser Leu Phe Asp Pro Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR1 of a heavy chain variable region
<400> 2
Arg Phe Gly Met His
1 5
<210> 3
<211> 17
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR2 of a heavy chain variable region
<400> 3
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Gly
<210> 4
<211> 12
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 4
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a light chain variable region
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR1 of a light chain variable region
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<213> Artificial Sequence
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<223> CDR2 of a light chain variable region
<400> 7
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1 5
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<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CDR3 of a light chain variable region
<400> 8
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a heavy chain variable region (H6)
<400> 9
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<211> 17
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Gly
<210> 11
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a light chain variable region (L2)
<400> 11
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Thr Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
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<400> 12
Arg Ala Ser Arg Thr Ile Ser Ser Tyr Val Asn
1 5 10
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<213> Artificial Sequence
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<223> a heavy chain variable region (H5)
<400> 13
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Phe
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Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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<210> 14
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> a light chain variable region (L6)
<400> 14
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<210> 15
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Light chain variable region (L1)
<400> 15
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Arg Thr Ile Ser Ile Tyr
20 25 30
Val Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Glu Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Asn Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ile Gly Arg Gly Val
85 90 95
Val Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
Claims (9)
- (ⅰ) L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및
(ⅱ) 피리미딘 유사체(pyrimidine analog), 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는, 담도암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체는 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체 또는 이의 기능성 변이체인, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 기능성 변이체는 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체의 중쇄 가변영역, 경쇄 가변영역, 또는 이들 둘 다에서 1개 이상의 아미노산이 치환되고, 서열번호 1의 중쇄 가변영역 및 서열번호 5의 경쇄 가변영역을 포함하는 항체에 비해 물성이 개선된 것인, 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 2로 기재된 중쇄 CDR1; 서열번호 3 또는 10으로 기재된 중쇄 CDR2; 및 서열번호 4로 기재된 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변영역과 서열번호 6 또는 12로 기재된 경쇄 CDR1; 서열번호 7로 기재된 경쇄 CDR2; 및 서열번호 8로 기재된 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변영역을 포함하는 것인, 약학적 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 항체는 서열번호 1, 9 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된, 중쇄 가변영역; 및
서열번호 5, 11, 14 및 15로 이루어진 군으로부터 선택된, 경쇄 가변영역을 포함하는, 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 피리미딘 유사체는 젬시타빈(gemcitabine)인 것인, 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 플라틴계 항암제는 시스플라틴(cisplatin), 옥살리플라틴(oxaliplatin), 테트라플라틴(tetraplatin), 헵타플라틴(heptaplatin), 파라플라틴(paraplatin), 카보플라틴(carboplatin) 또는 나노플라틴(nanoplatin)인 것인, 약학적 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 담도암은 간내 담도암 또는 간외 담도암인 것인, 약학적 조성물.
- (ⅰ) L1CAM(L1 cell adhesion molecule) 단백질에 특이적으로 결합하는 항체; 및
(ⅱ) 피리미딘 유사체(pyrimidine analog), 플라틴계 항암제 또는 이들의 조합을 포함하는, 담도암의 예방 또는 치료용 약학적 키트.
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