KR20180045346A

KR20180045346A - 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물

Info

Publication number: KR20180045346A
Application number: KR1020160139343A
Authority: KR
Inventors: 김우경; 남주현
Original assignee: 동국대학교 산학협력단
Priority date: 2016-10-25
Filing date: 2016-10-25
Publication date: 2018-05-04

Abstract

본 발명은 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 조성물을 이용하면, 일광(日光) 조사 시 피부 멜라닌 세포 멜라닌 형성으로 인한 피부흑화 시 중요한 역할을 담당하는 Orai-1 이온통로를 억제할 뿐만 아니라 티로시나제 활성을 저해할수 있는 효과를 가진다. 따라서, cytokine (ET-1) 또는 자외선에 의한 멜라닌 생성을 효과적으로 억제할 수 있는바, 피부 미백을 위한 용도로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물{Composition for the inhibition of UV-induced melanogenesis comprising extracts of Phellodendri Cortex, Anemarrhena asphodeloides, and Alismatis Rhizoma}

본 발명은 혼합 생약 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 피부 미백용 조성물에 관한 것이다.

피부가 태양광에 의해 자외선에 노출되면 각질형성세포 및 멜라닌형성세포 모두 영향을 받게 되는데, 각질형성세포의 경우 멜라닌 형성세포를 자극시킬 수 있는 다양한 cytokine (예: ET-1)을 분비하고, 이렇게 분비된 단백은 Orai-1 이온통로 및 타이로시나제 (tyrosianse) 등을 활성화 시켜 멜라닌 형성을 증대시킨다.

보다 구체적으로, 멜라닌 세포의 활성에 따른 멜라닌 형성은 크게 두 가지 신호전달 기전을 통해 일어날 수 있다. 첫 번째는 세포 내 cAMP 자극에 의해 일어나는 멜라닌 형성 기전이고 두 번째는 세포내 칼슘 농도 증가에 따른 멜라닌 형성 기전이다.

두 신호전달 기전이 서로 복잡하게 상호작용을 하기 때문에 서로 완벽히 분리되어 작용하지는 않지만, 멜라닌 형성의 가장 대표적인 기전이라 할 수 있는 멜라닌 형성 자극 호르몬에 의해 일어나는 피부 흑화 기전의 경우 proopiomelanocortin (POMC)/Melanocortin receptors 1 (MC1-R)/cyclicAMP (cAMP) 전달경로를 통하는 것으로 melanocyte stimulating hormone (α-MSH)이나 adrenocorticotropic hormone (ACTH)에 의해 시작된다.

반면 외인성 노화에 의한 흑화 즉, 자외선 조사에 의한 멜라닌 형성의 경우, 최근 ISI web of knowledge dermatology 분야 1위 저널인 JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY에 따르면 (2012 May;132(5):1443-51), 자외선이 조사되면 멜라닌 세포가 활성화되어 멜라닌을 형성하는데, 세포 내 칼슘 농도 증가에 의한 멜라닌 형성 기전이 작동한다고 한다. 좀 더 자세히 기술하면 세포내 칼슘 농도 증가를 위해서는 세포 밖에서의 칼슘 유입이 매우 중요한데, 이 논문에 따르면 Orai-1 이온통로를 통한 세포 내 칼슘 유입이 이러한 멜라닌 형성에 중요한 역할을 한다고 한다.

상기 논문에서 인간 멜라닌 세포를 이용하여 Orai-1 저해제를 처리해 본 결과, 자외선에 의한 멜라닌 형성이 억제된다는 것이 확인되었다. 따라서, 멜라닌 세포 Orai-1 이온통로를 타깃으로 하여, 이를 억제할 수 있는 약물이 개발된다면, 자외선에 의한 피부 흑화 억제제가 개발 될 수 있을 것으로 예상되었다.

최근 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연 추출물로부터 얻어진 항산화, 주름완화, 미백 등의 기능을 가진 기능성 피부 외용제(functional cosmetics)에 많은 관심이 집중되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 피부 외용제에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 피부 외용제 원료로서 개발가치가 한층 커지고 있다.

현재 개발되고 있는 광노화 억제에 쓰이는 유효성분들은 화장품 원료로 사용할 수 없거나 매우 불안정하고, 피부로의 전달이 용이하지 않아 특별한 안정화 시스템과 전달체계가 필요하며, 피부주름의 개선효과가 가시적이지 않는 등의 문제점이 있어서 최근 레티노이드(retinoid)를 함유한 피부보호제로 관심이 점차 집중되고 있으며, 현재 레티노이드는 일광으로 축적된 결과인 주름살, 피부의 두꺼워짐, 처짐, 탄력 감소 등의 광노화 현상을 해결하는 수단으로 이용되고 있다. 그러나 레티노이드는 매우 불안정한 화합물로 자외선, 수분, 열, 산소에 민감하여 쉽게 화학적인 변화를 일으키는 문제점이 있어 이를 해결하기 위한 천연물 연구에 집중되고 있는 실정이다.

따라서, 세포 내 칼슘 신호를 생성하는 Orai-1 이온 통로를 타깃으로 천연물 유래 염증 억제제를 개발한다면 현존하는 치료제보다 훨씬 더 강력한 면역억제 능력을 발휘할 수 있을 것이다.

본 발명자들은 자외선 노출로 인한 멜라닌 형성 억제를 통해 피부 흑화를 억제하는데 효과적인 천연물을 연구하던 중, 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물이 Orai-1 이온통로 활성을 억제하는 것을 발견하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

따라서, 본 발명의 목적은 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공하는 것이다.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물. 피부 미백용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현예로, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출할 수 있다.

본 발명의 다른 구현예로, 상기 조성물은 황백 추출물 5중량%, 지모 추추물 5 중량% 및 택사 추출물 5중량%를 포함할 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 ORAI-1 이온 통로의 저해를 통해 멜라닌 형성을 억제할 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 티로시나제 활성을 저해할 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 자외선 노출로 인한 피부 흑화를 억제할 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 약제학적 조성물일 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 화장품학적 조성물일 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로, 상기 조성물은 기능성 식품 조성물일 수 있다.

본 발명의 조성물을 이용하면, 일광(日光) 조사 시 피부 멜라닌 세포 멜라닌 형성으로 인한 피부흑화 시 중요한 역할을 담당하는 Orai-1 이온통로를 억제할 뿐만 아니라 티로시나제 활성을 저해할수 있는 효과를 가진다. 따라서, cytokine (ET-1) 또는 자외선에 의한 멜라닌 생성을 효과적으로 억제할 수 있는바, 피부 미백을 위한 용도로 유용하게 이용될 수 있다.

도 1a 내지 도 1c는 (a) 택사, (b) 지모 및 (c) 황백 추출물의 칼슘이동통로 저해 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물의 혼합 비율에 따른 물리화학적 안정도를 확인한 결과를 나타낸 것이다.

본 발명자들은 여러 천연물들을 대상으로 멜라닌 형성 억제 효과가 있는 새로운 천연물을 찾기 위하여 연구에 몰두하던 중, 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물이 ORAI-1 활성을 억제 및 Endothelin-1(ET-1)에 의한 멜라닌 생성을 효과적으로 억제한다는 것을 확인하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하게 되었다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 황백(Phellodendri Cortex), 지모(Anemarrhena asphodeloides) 및 택사(Alismatis Rhizoma) 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물을 제공한다.

본 발명에서, 추출물은 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 예컨대, 본 발명에서, 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합용매로부터 선택된 1종 이상의 용매를 이용할 수 있으며, 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올, 가장 바람직하게는 70% 에탄올을 이용할 수 있다. 또한, 추출물을 추출하는 방법은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 추출, 초음파 추출 등의 다양한 방법을 통하여 추출할 수 있지만, 이것으로 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 일 실시예에서는, 황백, 지모 및 택사 추출물의 ORAI-1 억제 효과를 확인한 결과, 상기 추출물이 ORAI-1 이온 통로의 저해 효과가 우수하다는 것을 확인하였다(실시예 2 참조).

본 발명의 다른 실시예에서는, 상기 추출물의 ET-1에 의한 멜라닌세포 활성 억제효과 및 자외선 조사에 의한 멜라닌세포 활성 억제 효과를 확인한 결과, 우수한 멜라닌세포 활성 억제 효과가 있음을 확인하였다(실시예 3 및 4 참조).

따라서, 본 발명에 따른 추출물은 ORAI-1 이온 통로의 저해 및 티로시나제 활성 억제를 통해 ET-1 또는 자외선 노출로 인한 멜라닌 형성을 억제하는 효과를 가지는바, 피부의 흑화를 억제하는 등 피부 미백을 위한 용도로 유용하게 이용될 수 있다.

이에, 본 발명의 피부 미백용 조성물은 약제학적 조성물의 형태일 수 있으며, 약제학적 조성물은 유효성분으로서 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 포함하고 약제학적으로 허용되는 담체를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체로는 식염수, 완충 식염수, 물, 글리세롤 및 에탄올 등이 있으나 이에 한정되지 않는다.

본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구투여를 위한 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 바람직하게는 피부외용 제형을 갖는다. 피부외용 제형은 파우더, 젤, 연고, 크림, 액체 또는 에어로졸 제형일 수 있으나, 이것으로 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 약제학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 피부 도포, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 약제학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 질병종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1㎏ 당 0.001 내지 150 mg, 바람직하게는 0.01 내지 100 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

또한, 본 발명의 피부 미백용 조성물은 화장품학적 조성물의 형태일 수 있으며, 화장품학적 조성물은 유효성분으로서 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 포함할 수 있다.

본 발명의 화장품학적 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장품학적 조성물에 함유된 화장품학적으로 유효한 담체는 제형에 따라, 당업계에서 통상적으로 이용되는 담체가 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로 플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장품학적 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분과 담체 성분 이외에, 화장품학적 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.

더욱이, 본 발명의 피부 미백용 조성물은 미백을 예방 또는 개선하는 기능성 식품 조성물의 형태일 수 있으며, 기능성 식품 조성물은 유효성분으로서 황백, 지모 및 택사 혼합 추출물을 포함할 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 유효성분을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명의 기능성 식품 조성물에서 유효성분을 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.

본 발명의 기능성 식품 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 유효성분을 함유하는 것 이외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.

상기 외에 본 발명의 기능성 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[ 실시예 ]

실시예 1. 혼합 추출물의 제조

황백, 지모 및 택사를 혼합하여 분쇄한 다음, 70% 에탄올로 3시간 가열 추출한 후, 감압증류법으로 용매를 완전히 제거하고 냉동 건조시켜 추출물 분말을 제조하였다.

실시예 2. 추출물의 ORAI -1 억제 효과 확인

측정을 위해 인간 피부세포에 발현되어 있는 인간 ORAI-1 단백질을 클로닝한 뒤, 이를 HEK-293T 세포주에 과발현시켜 세포 내 칼슘 전류를 실시간으로 직접 측정할 수 있는 팻취클램프 (patch clamp) 기법을 이용하여 측정하였다. 이때, Orai-1을 통한 전류를 측정하기 위해 세포 밖 용액의 조성은 하기 표 1에 나타내었다.

For whole cell patch	조성 (mM)
Bath solution (pH 7.4)
Orai-1	135mM NaCl, 3.6mM KCl, 10mM HEPES, 5mM Glucose, 10mM CaCl_2,1mM MgCl₂
Pipette solution (pH 7.2)	조성 (mM)
Orai-1	135mM CsCl, 125 glutamic acid, 20mM BAPTA, 20mM HEPES, 3mM Mg-ATP, 0.002mM Na-pyruvate, 1mM MgCl₂, 0.02mM IP3

그 결과, 하기 표 2 및 도 1a 내지 도 1c에 나타낸 바와 같이, 황백, 지모 및 택사 추출물이 ORAI-1 이온 통로의 저해 효과가 있음을 확인할 수 있었다

		Inhibition rate (%)
		100ug/ml
		Orai1
식물명	분획물
택사	70% 에탄올	-12 % 저해
지모	70% 에탄올	-45 % 저해
황백	70% 에탄올	-65 % 저해

실시예 3. ET-1에 의한 멜라닌세포 활성 억제효과 확인

B16F10 murine melanoma cell을 Endothelin-1(ET-1, 30 ng/ml)과 천연물 추출물을 함유하는 배지에서 72시간 동안 배양하고 PBS로 세척한 다음 trypsin과 EDTA의 혼액을 이용하여 얻은 뒤 1N-NaOH를 사용하여 세포내 B16F10 murine melanoma cell이 함유하고 있는 melanin의 양을 405nm에서 흡광도로 측정하였고, 효과는 대조군에 대한 % 억제율로 계산하였다.

그 결과, 하기 표 3에 나타낸 바와 같이, 황백, 지모 및 택사 추출물이 ET-1에 의한 멜라닌세포 활성 억제효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

ET-1 30 ng/ml 처리	멜라닌 함량
실험군 (Control)	100%
대조군 (ET-1 단독처리 30ng/ml)	110.1 ± 1.34 %
ET-1 + 택사 (100μg/ml)	86.3 ± 1.03 %
ET-1 +지모 (100μg/ml)	58.7 ± 1.06 %
ET-1 + 황백 (100μg/ml)	60.6 ± 1.42 %

실시예 4. 자외선 조사에 의한 멜라닌세포 활성 억제효과 확인

B16F10 murine melanoma cell을 인산완충용액으로 세척해준 뒤 조사량이 10mj/cm² 만큼의 양이 되도록 UV를 쬐어준 다음 천연물 추출물을 함유하는 배지와 함께 5% CO2, 37℃의 조건하 48시간 배양한 뒤, PBS로 세척한 다음 trypsin과 EDTA의 혼액을 이용하여 얻은 뒤 1N-NaOH를 사용하여 세포내 B16F10 murine melanoma cell이 함유하고 있는 melanin의 양을 405nm에서 흡광도로 측정하였고, 효과는 대조군에 대한 % 억제율로 계산하였다.

그 결과, 하기 표 4에 나타낸 바와 같이, 황백, 지모 및 택사 추출물이 자외선 조사에 의한 멜라닌세포 활성 억제효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

실험군 (자외선 조사 10mJ/cm2)	114.83 ± 2.91 %
대조군 (자외선 조사 + 코지산 7.5 μg/ml)	111.54 ± 1.10 %
자외선 조사 + 택사	88.46 ± 1.11 %
자외선 조사 + 지모	100.5 ± 1.02 %
자외선 조사 + 황백	89.01 ± 0.95 %

실시예 5. 혼합 추출물의 혼합 비율 및 물리화학적 안정도 확인

황백, 지모 및 택사 혼합 추출물에서, 각 추출물의 혼합 비율에 따른 안정성을 확인한 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이, 황백, 택사, 지모를 각각 5중량%로 혼합한 경우에 최적의 효능 및 안정성을 나타냄을 확인할 수 있었다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해되어야 한다.

Claims

황백(Phellodendri Cortex), 지모(Anemarrhena asphodeloides) 및 택사(Alismatis Rhizoma) 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 황백 추출물 5중량%, 지모 추추물 5 중량% 및 택사 추출물 5중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 ORAI-1 이온 통로의 저해를 통해 멜라닌 형성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 티로시나제 활성을 저해하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 자외선 노출로 인한 피부 흑화를 억제하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 화장품학적 조성물인 것을 특징으로 하는, 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 기능성 식품 조성물인 것을 특징으로 하는, 조성물.