KR20180008102A - 세토카 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

세토카 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 화장료 조성물, 식품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염증 또는 항균용 조성물은 세포 내에서 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성을 저해하는 활성이 뛰어날 뿐만 아니라 염증성 피부상재균에 대한 생장 저해 활성이 우수한 특징을 지니므로, 염증 작용 및 미생물 감염에 의해 유발되는 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장품, 식품 및 의약품 등에 유용하게 이용될 수 있다.

Description

세토카 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION INCLUDED SETOKA(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) EXTRACTION}
본 발명은 세토카(천혜향) 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 한균용 화장료 조성물에 관한 것이다.
염증 반응에 관여하는 주요 세포는 macrophage로 알려져 있으며, 여러 자극이나 면역 세포들이 분비하는 사이토카인에 의해 활성화 되어 염증 매개 물질들인 nitrice oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2), proinflammatory cytokine을 생성함으로써 통증, 부종, 열 등의 염증 반응을 유발시키고 염증 부위로 면역세포의 이동을 촉진시킨다.
이 중 반응성이 높은 물질인 NO는 NO synthase (NOS) 중 inducible NOS (iNOS)에 의한 생성이 절대적으로 많으며 염증상태에서의 과도한 NO 생성은 염증 반응을 촉진시킬 뿐만 아니라 염증 매개체의 생합성을 촉진하고 염증을 심화시켜 조직 손상, 유전자 변이 및 신경 손상을 일으킨다.
여드름은 모낭-피지선에서 발생하는 피부 질환이다. 피지 분비의 증가와 표피 과각화로 모낭-피지선에서 피지가 정체되어 모낭이 막힘에 따라 모낭 내부가 Propionibacterium acnes를 비롯한 혐기성 세균이 잘 자랄 수 있는 환경이 된다.
동시에 Staphylococcus epidermidis와 같은 다른 세균들이 모낭 주위에서 여드름과 여드름 합병증을 일으키는데 역할을 한다.
P. acnes와 S. epidermidis 등의 균들은 염증 반응을 유발하는데 주된 역할을 하게 되므로 염증성 여드름의 치료에 다양한 항생제가 사용되고 있으나 피부건조증이나 과민증 등 부작용이 알려져 있다. 또한 항생제에 대한 내성 발생으로 인하여 지속적인 사용이 어려움에 따라 항균 효과가 있으면서 부작용이 없는 여드름 치료제를 개발하려고 노력중이다.
식물의 정유(精油, essential oil)는 식물 내 함유되어 있는 방향성 기름 성분으로 주로 식물의 내분비선에서 분비되는 2차 대사산물이며, 최근 천연 원료에 대한 관심이 고조되면서 여러 정유성분에 대한 방향효과, 항염, 항균 및 방부효과에 대한 연구뿐만 아니라 식품 및 의약품, 화장품 등의 첨가제로써의 활용이 활발히 이루어지고 있다.
이에, 아래와 같이 정유의 염증억제와 관련하여 식물을 이용한 연구가 시행되어 왔다.
한국등록특허공보 제10-0147430(튤립나무 잎 에센셜 오일을 함유하는 항산화 및 항염증 조성물)에는, 항산화 및 항염증 효과를 갖는 튤립나무 잎 에센셜 오일을 함유한 화장료 조성물에 관한 것이 공개되어 있다.
한국등록특허공보 제10-0050614호(사자발쑥 정유를 함유하는 여성용 아로마 오일 조성물)에는 사자발쑥 정유에 대한 항균 효과 및 호르몬 밸런스의 개선효과를 갖는 아로마오일 조성물에 관한 것이 공개되어 있다. 상기와 같이 여러 식물 정유에 대한 연구가 시행되고 있으나, 아직까지 세토카 가지를 이용한 화장료 조성물에 대한 연구는 시행된 바가 없다.
본 발명의 발명자들은 버려지는 제주 자원을 이용하여 연구한 결과, 세토카 가지에서 추출된 정유 성분이 항균효과 및 세포에 대한 독성 없이 우수한 염증억제 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이러한 우수한 활성을 갖는 세토카 가지 정유 추출물은 기능성 화장품 원료로의 응용이 가능하며, 천연식물을 사용함으로서 합성원료들로 야기되는 알러지 및 부작용, 안전성 및 안정성 면을 해결할 수 있음을 확인함으로서 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허공보 제10-0147430호 한국등록특허공보 제10-0050614호
본 발명의 목적은 세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지 추출물을 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 세토카 가지 추출물을 함유하는 항염증 또는 항균용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 세토카 가지 추출물을 함유하는 항염증 또는 항균용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 세토카 가지 추출물을 함유하는 항염증 또는 항균용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 세토카(천혜향) 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 용어 “세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis))”는 일본 과수연구소에서 청견(Kiyomi)과 앙코르(Encore No. 2)의 교잡 과실에 머코트(Murcott)를 교배하여 육성한 감귤류 품종으로 즙이 많고 독특한 맛과 향을 지니고 있어 2001년부터 한국에 본격적으로 도입된 외래종으로 국내에서 천혜향으로 불린다.
본 발명의 상기 세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지 추출물은 C1-C4의 저급알코올로 추출한 후, 이를 호호바 오일을 넣고 용해되는 정유(精油, essential oil) 성분으로 구성될 수 있다. 바람직하게는 상기 정유 성분을 감압 농축한 정유 추출물 일 수 있다.
본 발명의 세토카 가지 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
1) 세토카 가지에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 상기 1)단계의 추출물을 감압 농축한 후 건조하여 세토카 가지의 추출물을 제조하는 단계;
3) 상기 2) 단계의 추출물을 호호바오일(jojoba oil)에 침출시키는 단계; 및
4) 상기 3)단계에서 추출된 정유 성분을 감압 농축하는 단계.
상기 방법에 있어서, 1)단계의 세토카 가지는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 또한, 단계 1)에서 이에 제한되지는 않으나, 세토카 가지 이외에 과피, 잎 또는 뿌리를 모두 포함하여 추출하는 것일 수 있다.
상기 방법에 있어서, 상기 1)단계의 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C4 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하며, 저급 알코올로는 에탄올을 이용하는 것이 바람직하다. 추출방법으로는 진탕추출, 속슬렛(Soxhlet) 추출 또는 환류 추출을 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다. 상기 추출용매를 건조된 세토카 가지 분량에 1 내지 10배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하다. 추출온도는 20℃ 내지 100℃ 인 것이 바람직하고, 20℃ 내지 40℃인 것이 더욱 바람직하고, 실온인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 10 내지 48시간인 것이 바람직하며, 15 내지 30시간인 것이 더욱 바람직하고, 24시간인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정하지 않는다. 아울러, 추출 횟수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3 내지 4회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하고, 3회인 것이 가장 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 방법에 있어서, 2) 단계 및 4) 단계의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 용어 "항염증"은 염증를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 염증 반응의 조절은 대단히 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위한 것으로 알려져 있다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 그 결과로 영구적인 유전자의 변형이 야기된다. 이처럼 ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다. 염증 과정 중에는 많은 양의 전염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokines), 일산화질소(nitric oxide, NO) 그리고 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)이 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2, COX-2)에 의해 생성된다. 염증은 다양한 염증성 질환을 유발하는 원인으로써, 본 발명의 세토카 가지 추출물을 포함하는 조성물은 항염증 작용을 통해 다양한 염증성 질환에 대한 예방 및 개선 효과를 가질 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 세토카 가지 추출물의 항염증 효과를 확인하기 위하여, RAW 264.7 뮤린 대식세포(RAW 264.7 murine macrophage cell)를 이용하여 일산화질소(nitric oxide, NO) 생성 저해 활성을 측정한 결과, 세토카 가지 추출물이 세포독성 없이 농도의존적으로 NO 생성 저해 활성을 나타내는 것을 확인하였다.(표 2 및 도 1). 따라서, 본 발명의 항염증 효과는 NO 생성 저해 활성에 의해 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어 "항균"은 세균이나 진균 등의 미생물의 생장 및 증식을 억제 또는 제어하는 작용을 의미하는 것으로, 본 발명의 미생물은 이에 제한되지는 않으나, 피부 상재균인 스타필로코쿠스 에피더미디스(S. epidermidis), 프로피오니박테리움 아크네스(P. acnes) 및 스타필로코쿠스 아우레우스(S. aureus)일 수 있다. 여러 종류의 피부 질환은 주로 피부상재균에 의해서 발생되며 여드름균, 비듬균 등이 대표적이다. 여드름의 발병은 여드름균이 염증 반응을 유발하는 주된 요인으로 보고되고 있으며, 비듬균은 등, 목덜미와 같은 피부에서 이상적으로 증식하여 지루성 피부염을 유발시킨다. 아토피성 피부염의 원인은 아직 정확히 밝혀지지 않았으나, 발병 원인균으로 포도상 구균으로 보고되고 있다. 이러한 피부상재균 및 기타 세균에 의한 피부질환의 발생을 감소시키고 피부를 보호하기 위해 방부제 및 항균제의 사용은 필수적이지만 기존에 사용되고 있는 합성물질들은 피부에 알러지를 유발할 수 있으므로 비교적 인체에 무해한 물질을 사용하는 것이 중요하다. 따라서, 본 발명의 세토카 가지 추출물을 화장품에 포함시키면 미생물, 특히 피부 미생물 생장 억제 효과를 달성함으로써, 피부 질환 예방 및 개선에 기여할 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 세토카 가지 추출물의 항균 효과를 확인하기 위하여, 페이퍼 디스크 확산법(paper disc diffusion method)을 이용하여 피부상재균인 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis; CCARM 3709, 3710, 3711), 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes; CCARM 9009, 9010, 0081) 및 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus; CCARM 0027, 3707, 3708)의 균주에 대한 항균 활성을 측정한 결과, 원형 발육 저지환(clear zone)의 직경 크기가 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes; CCARM 9009, 9010, 0081) 및 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus; CCARM 0027, 3707, 3708) 균주에 대하여 생장 저해 활성이 우수함을 확인하였다(표 1). 따라서, 본 발명의 항균 효과는 피부 미생물에 대한 생장 억제 활성에 의해 달성되는 것일 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 화장료 조성물은 여드름, 아토피, 무좀, 건선, 습진 및 피부염을 포함하는 군에서 선택되는 어느 하나의 피부 질환을 예방 또는 개선하며, 피부 미백 효과가 있을 뿐만 아니라, 피부의 노화, 주름 또는 탄력 소실을 예방 또는 개선하는 효과가 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 상기 유화 제형으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 상기 가용화 제형으로는 유연화장수 등이 있다. 적합한 제형은 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 바이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태일 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 추가적으로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제, 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
또한, 약학적 조성물로 이용할 수 있으며, 약제학적 분야에서의 공지의 방법에 의해 제조될 수 있고, 그 자체 또는 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 희석제 등과 혼합하여 분말, 과립, 정제, 캡슐제 또는 주사제 등의 제형으로 제조되어 사용될 수 있고, 이들은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 세토카 가지 정유 추출물의 유효 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성화율 및 배설속도, 환자의 연령, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증 정도 등에 따라 적절히 선택될 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
상기 세토카 가지 추출물에 관해서는 전술한 바와 같으며, 본 발명의 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 세토카 가지 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 식품학적으로 허용가능한 식품 보조 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래한 추출물 및 이의 분획물을 유효성분으로 하므로 안정성 면에서 문제가 없기 때문에 혼합량에 큰 제한은 없다.
본 발명의 식품 조성물은 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있으며, 기능성 식품, 건강기능식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다.
본 발명의 용어 "기능성 식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
또한, 본 발명의 용어 "건강기능식품"은 건강보조의 목적으로 특정성분을 원료로 하거나 식품 원료에 들어있는 특정성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말하며, 상기 성분에 의해 생체방어, 생체리듬의 조절, 질병의 방지와 회복 등 생체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발휘할 수 있도록 설계되고 가공된 식품을 말하는 것으로서, 상기 건강식품용 조성물은 질병의 예방 및 질병의 회복 등과 관련된 기능을 수행할 수 있다.
본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 세토카 가지 추출물을 활성성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물 및 이의 분획물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.
또한, 본 발명에 적용될 수 있는 식품에는 예컨대, 특수영양식품(예: 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예: 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예: 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예:스낵류), 유가공품(예: 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예: 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면스프 등) 등 모든 식품을 포함할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품 조성물이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다.
상기 세토카 가지 추출물에 관해서는 전술한 바와 같으며, 본 발명의 추출물 및 이의 분획물은 항염증 효과 및 피부상재균에 대한 항균 효과를 갖기 때문에 약학 조성물로 활용하여 염증성 질환 및 피부상재균에 인해 발생하는 피부 질환을 예방, 개선 및 치료하기 위한 의약품에 포함시킬 수 있다.
상기 항염증에 대해서는 전술한 바와 같으며, 그에 따라 항염증, 즉 염증성 질환의 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물에 포함될 수 있다. 상기 염증성 질환은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 이에 제한되지는 않으나, 알러지성 천식, 알러지성 비염, 알러지성 점막염, 두드러기 및 아나필락스(anaphylax)를 포함하는 알러지성 질환, 경피증(systemic sclerosis), 피부근염(dermatomyositis) 및 포함체 근육염(inclusion body myositis)을 포함하는 근병증, 관절염, 아토피성 피부염, 건선, 천식, 다발성 경화증, ssRNA 및 dsRNA 바이러스 감염증, 패혈증, 다발성 연골염, 경피증, 습진, 통풍, 치주질환, 베체트 증후군, 부종, 맥관염, 가와사키병, 당뇨병성 망막염, 자가 면역 췌장염, 혈관염, 사구체 신염, 급성 및 만성 기관지염, 및 인플루엔자 감염증일 수 있다.
또한, 상기 항균에 대해서는 전술한 바와 같으며, 그에 따라 항균을 목적으로 하는 약학 조성물에 포함될 수 있으며, 스타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis; CCARM 3709, 3710, 3711), 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes; CCARM 9009, 9010, 0081), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus; CCARM 0027, 3707, 3708)와 같은 피부상재균으로 인해 발생하는 피부 질환의 예방 또는 치료 효과를 가질 수 있다. 상기 피부상재균에 의해 발생하는 질환들은 이에 제한되지는 않으나, 여드름, 아토피, 무좀, 건선, 습진 및 피부염을 포함하는 것일 수 있다.
상기 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 허용가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 용어 "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 것이라면 제한없이 사용할 수 있다.
또한 본 발명의 약학조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 나아가, 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 싸이코트리아 루브라 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
한편, 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
상기 용어 "개체"란 는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.
상기 용어 "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.
본 발명의 세토카 가지 추출물은 천연식물을 원료로 하므로 화장료 조성물, 식품 조성물 또는 약학적 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로 안전하게 포함되어 유용하게 사용될 수 있다
본 발명에 의해, 염증 억제 효과를 갖는 세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물은 세포 내에서 일산화질소(nitric oxide, NO)의 생성을 저해하는 활성이 뛰어날 뿐만 아니라 염증성 피부상재균에 대한 생장 저해 활성이 우수한 특징을 지니므로, 염증 작용 및 미생물 감염에 의해 유발되는 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장품, 식품 및 의약품 등에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 RAW264.7 세포배양 시스템에서 nitric oxide (NO) 저해효과를 나타낸 그래프이다.
- : 무처리군(LPS 무첨가군)
+ : 대조군(LPS를 첨가하고 시료를 첨가하지 않은 군)
C : 호호바오일 단독 첨가군
0.25 : 추출물 0.25 μg/mL
0.5 : 추출물 0.5 μg/mL
1.0 : 추출물 1.0 μg/mL
2.0 : 추출물 2.0 μg/mL
도 2는 WST-1 방법에 의한 세포독성를 나타낸 그래프이다.
- : 무처리군(LPS 무첨가군)
+ : 대조군(LPS를 첨가하고 시료를 첨가하지 않은 군)
C : 호호바오일 단독 첨가군
0.25 : 추출물 0.25 μg/mL
0.5 : 추출물 0.5 μg/mL
1.0 : 추출물 1.0 μg/mL
2.0 : 추출물 2.0 μg/mL
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 본 발명의 세토카 가지 추출물 제조
세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지는 제주도 한림읍 월림리 농가에서 제공받아 준비하였다. 준비한 세토카 가지 2.2 kg을 잘게 자른 후, 이를 70 % 에탄올 10 kg에 넣고 일주일 동안 침적시킨 후 여과하였다. 여과하여 걸러진 이 여액을 감압 건조하여 세토카 가지 에탄올 추출물을 준비하였다. 상기 여과하여 걸러진 이 여액에 호호바오일(jojoba oil)을 200 mL 첨가하여 침출시켰다. 이 때 호호바오일에 추출된 정유 성분을 감압 농축하여 세토카 가지 정유 추출물을 준비하였다.
< 실험예 1> 본 발명인 세토카 가지 추출물의 P. acens 및 S. aureus 에 대한 항균 효과
1. 실험방법
항균 활성 실험에 사용된 P. acnes 및 S. aureus는 항생제내성균주은행(CCARM, Seoul Women's University)에서 분양 받아 실험에 사용하였다.
균주를 배양하기 위한 배지로 luria bertani agar 및 tryptic soy agar를 Difco La. (Sparks, MD. USA)에서 구입하여 사용하였으며 37℃에서 배양하였다.
세토카 가지 추출물의 항균활성을 확인하기 위하여 페이퍼 디스크 확산법(paper disc diffusion assay)를 수행하였으며 세토가 가지 추출물이 나타내는 생육저해환(clear zone, mm)을 측정하여 항균활성을 측정하였다.
Agar 0.8%를 포함하는 각각의 배지에 TM타필로코쿠스 에피더미디스(Staphylococcus epidermidis; CCARM 3709, 3710, 3711), 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes; CCARM 9009, 9010, 0081), 스타필로코쿠스 아우레우스(Staphylococcus aureus; CCARM 0027, 3707, 3708)균주를 0.5 MacFarland로 탁도를 조절하여 넣어 agar 1.5%를 포함하는 배지 위에 붓고 배지가 굳으면 세토카 가지 추출 용액을 포함하는 페이퍼 디스크(paper disc)를 올려 37℃에서 24시간 배양한 다음 디스크 주변에 형성된 생육억제환의 직경을 측정하여 항균활성을 확인하였다.
대조군으로는 추출에 사용된 호호바 오일을 동일한 방법으로 수행하였다.
2. 실험결과
상기 실험결과, 아래의 표 1에 나타내었다.
Microorganisms Clear zone diameter (mm)
S. aureus CCARM 0027 10.17 ± 0.241)
CCARM 3707 9.27 ± 0.21
CCARM 3708 9.23 ± 0.21
S. epidermidis CCARM 3709 N.D.2)
CCARM 3710 N.D.
CCARM 3711 N.D.
P. acnes CCARM 0081 8.93 ? 0.33
CCARM 9009 9.83 ± 0.24
CCARM 9010 9.17 ± 0.24
1) Results indicate mean±SD of triplicate determinations.
2) Not Detected
3) Disc size : 8 mm
상기 표 1에 나타나 있듯이, 실시예의 세토카 가지 추출물(정유 성분)의 항균활성은 S. aureus 및 P. acnes에서 생육억제환을 생성하였다.
추출에 사용된 호호바오일도 같은 조건으로 실험한 결과 생육억제환을 생성하지 않았으며 세토카 가지 추출물(정유 성분)에 의해 피부 관련 미생물의 항균활성이 나타나는 것을 확인하였다.
< 실험예 2> 본 발명인 세토카 가지 추출물의 RAW264 .7 대식세포(macrophage cell)에 대한 nitric oxide (NO) 저해 효과
1. 실험방법
염증 억제 활성 실험에 사용된 RAW264.7 대식세포는 American Type Culture Collection (ATCC, USA)으로부터 분양 받아 실험에 사용하였다.
1% Penicillin-streptomycin과 10% fetal bovine serum (FBS)이 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였으며, 2~3일 간격으로 계대 배양을 시행하였다.
염증 유도에 사용된 lipopolysaccharide (LPS)는 Sigma-Aldrich (St. Louis, Mo, USA)로부터 구입하여 사용하였다.
LPS를 넣지 않은 경우를 무처리군, 세토카 가지 추출물을 넣지 않은 경우를 대조군으로 하였다. 정유 성분 추출에 사용된 호호바 오일 및 세토카 가지 추출물을 넣은 것(실시예)을 실험군으로 하고 대조군과 비교하여 세토카 가지 추출물의 농도 별 nitric oxide (NO) 생성율을 측정하였다.
2. 실험결과
상기 실험결과, 아래의 표 2과 도 1에 나타났다.
처리농도(㎕/mL) nitric oxide 생성율(%)
실시예 무처리 5.2
대조군 100.0
호호바오일 97.5
0.25 96.0
0.5 91.8
1.0 86.3
2.0 77.6
상기 표 2에 나타나 있듯이, 실시예의 세토카 가지 추출물(정유 성분)의 nitric oxide 생성율은 LPS로 염증을 유도하고 시료를 처리하지 않은 대조군을 100%로 나타내어 비교하였다. 추출에 사용된 호호바 오일은 NO 생성량이 대조군 대비 97.5%로 나타났으며, 세토카 가지 추출물을 0.25 ㎕/mL 처리 시 NO 생성량이 대조군에 대비하여 96.4%, 0.5 ㎕/mL 처리 시 91.8%, 1.0 ㎕/mL 처리 시 86.3%, 2.0 ㎕/mL 처리 시 77.6%로 나타났고 처리 농도가 높아질수록 NO 생성이 효과적으로 억제됨을 확인하였다.
이에, 추출에 사용된 호호바 오일에 대한 염증 억제 효과는 미미하고, 본 발명의 세토카 가지 추출물에 대해 nitric oxide (NO) 소거활성이 나타났으며, 농도 의존적으로 NO 생성이 효과적으로 억제됨을 확인하였다.
< 실험예 3> 본 발명인 세토카 가지 추출물의 WST -1 방법에 의한 세포독성 평가 실험
1. 실험방법
WST-1 assay는 RAW264.7 macrophage cell을 24 well plate에 18시간 배양 후 세코카 가지 추출물(실시예)을 여러 농도별로 처리하고 24일간 배양 후 WST-1 reagent를 well 당 10%(v/v)를 첨가하였다.
37℃에서 30분 동안 반응 시킨 후 살아있는 세포와 반응하여 생긴 포르마잔(formazan) 침전물을 마이크로 플레이트 리더기(microplate reader)로 440nm에서 흡광도를 측정하였다.
LPS를 넣지 않은 경우를 무처리군, 세토자 가지 추출물을 넣지 않은 경우를 대조군으로 하였다. 정유 성분 추출에 사용된 호호바 오일 및 시료를 넣은 것(실시예)을 실험군으로 하고 대조군과 비교하여 세토카 가지 추출물의 농도 별 세포 독성을 측정하였다.
2. 실험결과
상기 실험결과를 아래의 표 3과 도 2에 나타내었다.
처리농도 (㎕/mL) 세포 생존율 (%)
실시예 무처리 100.0
대조군 102.0
호호바오일 101.0
0.25 99.5
0.5 100.3
1.0 98.7
2.0 98.4
상기 표 3와 도 2에 나타나 있듯이, RAW264.7 대식세포(macrophage)에서의 세포독성을 확인한 결과 추출에 사용된 호호바 오일 및 염증 억제에 좋은 활성을 보였던 정유 추출물의 농도가 높아져도 세포독성이 거의 없었다. 이에 따라 앞으로 이를 이용한 기능성 화장품, 식품, 의약품 소재개발에 유용하리라 사료된다.
제조예 1: 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 화장료의 제조
제조예 1-1 유연 화장수의 제조
상기 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연 화장수는 하기 표 4과 같이 제조하였다.
원료 함량(중량부)
본 발명의 세토카 가지 정유 추출물 10.00
1,3-부틸렌글리콜 1.00
디소듐이디티에이 0.05
알란토인 0.10
디포타슘글리시리제이트 0.05
시트릭애씨드 0.01
소듐시트레이트 0.02
글리세레스-26 1.00
알부틴 2.00
하이드로제네이티드캐스터오일 1.00
에탄올 30.00
보존제 미량
착색제 미량
착향제 미량
정제수 잔량
제조예 1-2 영양 크림의 제조
상기 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연 영양 크림은 하기 표 5의 조성과 같이 제조하였다.
원료 함량(중량부)
세토카 가지 정유 추출물 10.0
1,3-부틸렌글리콜 7.0
글리세린 1.0
D-판테놀 0.1
식물 추출물 3.2
마그네슘알루미늄실리케이트 0.3
PEG-40 스테아레이트 1.2
스테아릭애씨드 2.0
폴리소르베이트 60 1.5
친유형글리세릴스테아레이트 2.0
소르비탄세스퀴올리에이트 1.5
세테아릴알코올 3.0
미네랄오일 4.0
스쿠알란 3.8
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드 2.8
식물성 오일 1.8
디메치콘 0.4
디포타슘글리시리제이트 미량
알란토일 미량
소듐 히아루로네이트 미량
토코페릴아세테이트 적량
트리에탄올아민 적량
보존제 적량
착향제 적량
정제수 잔량
제조예 2: 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 식품의 제조
제조예 2-1: 밀가루 식품의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
제조예 2-2: 스프 및 육즙(gravies)의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
제조예 2-3: 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
제조예 2-4: 유제품(dairy products)의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
제조예 2-5: 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 세토카 가지 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 본 발명의 세토카 가지 추출물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다:
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), 본 발명의 세토카 가지 추출물(3 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부).
제조예 2-6: 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명의 세토카 가지 추출물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
제조예 2-7: 야채 주스의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 5 g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.
제조예 2-8: 과일 주스의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖ 에 가하여 과일 주스를 제조하였다.
제조예 3: 세토카 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 약학 조성물의 제조
제조예 3-1: 산제의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 2 g에 유당 1 g을 혼합하고, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제조예 3-2: 정제의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 100 ㎎, 옥수수전분 100 ㎎, 유당 100 ㎎ 및 스테아린산 마그네슘 2 ㎎을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제조예 3-3: 캡슐제의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 100 ㎎, 옥수수전분 100 ㎎, 유당 100 ㎎ 및 스테아린산 마그네슘 2 ㎎을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예 3-4: 환의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 1 g, 유당 1.5 g, 글리세린 1 g 및 자일리톨 0.5 g을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
제조예 3-5: 과립의 제조
본 발명의 세토카 가지 추출물 150 ㎎, 대두추출물 50 ㎎, 포도당 200 ㎎ 및 전분 600 ㎎을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60 ℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.

Claims (8)

  1. 세토카(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) 가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염증 또는 항균용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 세토카 가지 추출물은 C1-C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출한 후, 이를 호호바 오일에 침출시켜 얻은 정유 성분을 감압 농축한 것인 항염증 또는 항균용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 저급 알코올은 에탄올인 것인 항염증 또는 항균용 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 항균 효과는 피부 미생물인 스타필로코쿠스 아우레우스(S. aureus) 및 프로피오니박테리움 아크네스(P. acnes)로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 미생물에 대한 생장 억제 활성에 의해 달성되는 것인 항염증 또는 항균용 조성물.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항의 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 화장료 조성물.
  6. 제 5항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 파운데이션, 젤, 연고 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  7. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항의 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 식품 조성물.
  8. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항의 항염증 또는 항균용 조성물을 포함하는 약학 조성물.
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