KR20170136958A - 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조성물은 항염 및 항산화 효과가 우수하며, 멜라닌 총량 감소 효과를 나타내고 콜라겐 합성 촉진 효과, 및 보습 효과가 우수하여 피부 미백용, 탄력 증진용 또는 주름 개선용, 및 피부 보습용 화장료 조성물로서 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 포함하는 조성물은 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물로서 사용할 수 있다.

Description

혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물 {Composition for skin improvement comprising multiple extract}
본 발명은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 상기 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 항산화 또는 항염 등의 우수한 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 포함하는 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 알려진 미백 성분으로서, 코지산(Kojic acid) 또는 알부틴 (Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논 (Hydroquinone), 비타민 C(L-Ascorbic acid) 또는 이들의 유도체와 각종 식물 추출물이 있다. 이들은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부 과색소 침착증의 개선이 가능하다. 그러나 피부 적용 시, 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적인 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다.
콜라겐은 피부의 섬유아세포(Fibroblast)에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포 외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포접착의 지탱, 세포 분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유 시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광 노화에 의해 감소하며, 콜라겐을 분해하는 콜라게나제 효소 활성으로 콜라겐 감소가 촉진된다. 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다.
아울러, 콜라겐은 진피층 내의 수분 보유에 중요한 역할을 하는 기질 단백질로 이러한 기질 단백질이 수분을 흡착하며, 이들이 이루는 구조 내부에 수분 보유력을 높여 피부가 적정 수분을 함유한 상태를 유지할 수 있도록 해주며, 이를 통해 피부의 탄력을 유지하는데 관여한다고 알려져 있다.
현재, 피부 탄력 증진 및 주름 개선 화장료로는 레티노이드, 아데노신, 동물태반유래 단백질, 클로렐라 추출물 등이 알려져 있다. 가장 잘 알려져 있는 레티놀은 콜라겐 합성을 촉진하는 물질이지만 불안정하며, 피부 적용 시 자극, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있으며, 클로렐라 추출물 등은 효과가 미미하여 실질적으로 피부 탄력 증진 및 주름 개선 효과를 기대하기가 어렵다고 알려져 있다.
인체는 산화촉진물질과 산화억제물질이 균형을 이루고 있으나, 여러 가지 요인들로 인하여 이러한 균형 상태를 잃고 산화를 촉진하는 방향으로 기울게 되면, 생체 내에 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 세포손상 및 병리적 질환을 유발하게 된다. 이러한 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종 (reactive oxygen species, ROS)은 화학적으로 불안정하고 반응성이 높아 DNA, 단백질, 지질 및 탄수화물과 같은 여러 생체물질과 쉽게 반응할 수 있으며, 생체 내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 암 등을 초래하게 된다.
한편, 인체 내에서 대식세포는 병원체에 반응하여 종양 괴사 인자-α(tumor necrotic factor-α, TNF-α), 인터루킨-6(IL-6), 인터루킨-1β(IL-1β) 등과 같은 염증유발인자를 생성하고, 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나제-2(cyclooxygenase-2, COX-2)를 합성하여 일산화질소(NO) 및 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)을 생성한다. 생리학적으로 NO는 세균과 종양을 제거하고 혈압을 조절하거나 신경 전달을 매개하는 등 다양한 역할을 한다. 그러나 염증 반응이 일어나게 되면 관련 세포들에서 iNOS의 발현이 증가하여 많은 양의 NO가 생성되고, 과도하게 생성된 NO는 조직의 손상, 유전자 변이, 신경 손상 등을 유발하며, 혈관 투과성을 증가시켜 부종 등의 염증 반응을 촉진시킨다.
염증 반응시에는 다양한 염증유발인자와 더불어 다양한 자유기(free radical)가 생성된다. 정상적인 자유기는 세포의 항상성 유지에 관여하며, 세포의 분화, 성장, 생존, 노화에 영향을 준다. 이러한 자유기 중 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 세포 내의 미토콘드리아에서 호흡과 면역 반응에 의한 산소의 산화와 환원 과정을 통해 끊임없이 생성된다. 유해한 ROS는 일반적으로 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase), 카탈라제(catalase), 글루타치온 퍼옥시다제(glutathione peroxidase), 글루타민 리덕타제(glutamine reductase), 비타민 C, 비타민 E, 요산, 빌리루빈(bilirubin)과 같은 항산화 체계의 작용으로 제거된다. 그러나 자유기의 생성과 소거의 균형이 무너지게 되면 산화적 스트레스(oxidative stress)가 발생하게 되어 염증, 노화 또는 암과 같은 다양한 병리학적인 변화를 일으킨다. 실제로 많은 임상 질환에서 산화적 스트레스가 증가되는 것이 확인되었으며, 이러한 산화적 스트레스를 줄이기 위해 새로운 항산화 물질에 대한 다양한 연구가 이루어지고 있다.
여러 가지 원인에 의한 환경으로부터의 자극, 스트레스, 화학적 시술 등으로부터 피부를 보호하고, 생태계 친화적이면서 환경과 인간에 무해한 성분에 관한 연구가 지속되고 있다.
상기와 같이, 전술한 화장료 조성물들은 사람들에게 경제적 부담 및 고통을 주거나 부작용을 유발하고, 효과가 일시적이거나 또는 단편적인 약리학적 기작만을 사용하는 등의 문제점을 가지고 있어서, 효과가 보다 탁월하고 지속적이며, 부작용이 없는 조성물들의 요구가 증대되고 있는 실정이다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 피부 미백, 피부 탄력 증진, 주름 개선, 피부 보습, 항산화 및 항염 효과가 우수한 물질에 관하여 연구를 수행하였으며, 이에 장미, 작약 및 아이리스의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물이 멜라닌 총량 감소, 콜라겐 합성 촉진, 보습, 항염 및 항산화 효과를 나타냄을 규명하여, 이를 활용한 화장료 조성물, 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물을 완성하기에 이르렀다.
대한민국 등록특허 제10-0920896호 대한민국 등록특허 제10-1638538호
본 발명의 주된 목적은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위한, 본 발명의 하나의 양태는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "푸른연꽃(Nymphaea Caerulea)"은 물 속에서 가련한 꽃을 피우는 수련과 연꽃은 물의 요정이라 일컬어진다. 이집트 신화에서 태초의 물에서 솟아오른 연꽃으로 기록되어 있다. 고대 이집트에서는 옛날부터 특히 하늘색 련을 귀중하게 여겼는데, 꽃잎이 태양의 햇살처럼 퍼지고 아침에 피었다가 저녁에 오므라들며, 토지와 생물에 생명을 주는 나일강에서 자라 더욱 귀중한 것으로 생각하였다. 푸른 연꽃의 꽃잎, 씨앗등은 마음을 안정시키는 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "수련(Nymphaea Alba)"은 물 속에서 가련한 꽃을 피우는 수련과 연꽃은 물의 요정이라 일컬어진다. 'White Water Rose(물에서 자라는 백장미)라고 불릴 만큼 대단히 아름다워 널리 사랑 받고 있다. 'Water lily with white flowers (하얀 꽃을 피우는 물에서 피는 백합)'으로도 불리며, 백합 같은 고고하고 고아한 아름다움을 지니는 것으로 알려져 있다. 냉랭한 지역에서도 잘 피어나며, 오전 중에 피어나 해지기 전 오므라드는 특성이 있다. 연은 한의학에서도 매우 유용한 한약재로 사용하고 있는데, 열매에서부터 잎, 꽃, 연밥, 연의 암술, 뿌리에 이르기까지 연의 대부분을 활용하고 있다. 가장 많이 사용하는 부분은 열매로 기력을 돕고 오장을 보호해주며 갈증과 설사를 없애준다. 특히 마음을 안정시키는 효능이 있어 신경이 예민한 현대인들에게 유용한 약재다.
본 발명에서의, "추출물(extract)"은, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 푸른연꽃, 수련 추출물을 의미한다. 상기 푸른연꽃, 수련 추출물은 천연, 잡종, 변종식물의 다양한 기관으로부터 추출될 수 있고, 예를 들어 뿌리, 지상부, 줄기, 잎, 꽃, 열매의 몸통, 열매의 껍질뿐만 아니라 식물 조직으로부터 추출 가능하다. 상기 푸른연꽃, 수련 추출물은 물 또는 다양한 유기용매 등으로 추출하여 수득할 수 있다. 이때, 사용되는 유기용매는 추출물을 수득할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로는 물, 극성용매 또는 비극성용매가 될 수 있고, 보다 구체적으로는 물, 탄소수 1 내지 6의 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 프로판올 또는 부탄올 등), 이들의 혼합용매 일 수 있으며, 가장 구체적으로는 메탄올 또는 이의 혼합용매일 수 있다. 또한, 본 발명에서 추출물의 용매로 당류를 포함할 수 있다. 구체적으로 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류, 프락토올리고탕 등이 사용될 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 추출물을 수득하기 위한 방법 푸른연꽃, 수련 추출물을 수득할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로는 상기 푸른연꽃, 수련의 뿌리, 줄기, 잎, 열매, 꽃, 이들의 건조물, 가공물 등을 상기 용매에 침지하고, 상온에서 추출하는 냉침추출법, 가열추출법, 초음파를 가하여 추출하는 초음파추출법, 환류냉각기를 이용한 환류추출법 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "혼합 추출물"은, 푸른연꽃, 수련의 각 성분의 추출물을 적절한 중량 배합비로 혼합한 추출물일 수 있고, 또한, 푸른연꽃, 수련 을 적절한 중량 배합비로 혼합한 후 추출한 것 일 수 있다. 혼합 추출물은 각각의 푸른연꽃, 수련 단일 추출물보다 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 피부 노화 방지, 항산화, 및 피부 염증 개선에 효과적임을 확인하였는바, 우수한 시너지 작용을 하는 것을 알 수 있다.
푸른연꽃 추출물 및 수련 추출물의 중량 배합비는 1~25 : 1~25의 중량비(w/w), 구체적으로는 1~15 : 1~15의 중량비(w/w), 보다 구체적으로는 1~5 : 1~5의 중량비(w/w)일 수 있고, 동량의 중량 배합비를 가질 수 있다.
본 발명에서는 상기 혼합 추출물에 추가로 당류를 포함할 수 있다. 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류, 프락토올리고탕 등이 사용되나 이에 제한되지 않고 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 물질이라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 보다 구체적으로는 당류로서 꿀, 로얄젤리를 사용할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "꿀"은 벌이 꽃의 꿀샘에서 채집하여 먹이로 저장해 둔 것을 의미한다. 꿀은 벌의 종류에 따라 토종꿀과 양봉꿀로 나누어지고, 꽃에 따라 아카시아꿀, 싸리꿀, 유채꿀, 밤꿀, 메밀꿀 등으로 불리며, 꽃의 종류에 따라 빛깔과 맛이 달라진다. 꿀은 약 80% 가량이 탄수화물로 과당이 36~38%, 포도당이 34~36%, 설탕과 덱스트린이 2~3%이다. 그 밖에는 단백질 0.2~0.3%, 회분 0.05~0.2%, 비타민 B 복합체인 B1, B2, B6, 판토텐산 등과 개미산, 젖산, 사과산, 색소, 고무질, 왁스, 효소 등이 함유되어 있다. 우리나라에서 꿀은 식용과 약용으로 널리 이용되며, 감미료로 사용되기도 한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "로얄젤리"는 일벌들이 '왕에게 바치는 선물'로, 여왕벌의 먹이를 의미한다. 로얄젤리는 단백질, 지방, 탄수화물 및 각종 미량원소를 고루 함유한 신비의 영양 물질과 아직도 밝혀지지 않은 R이라는 성분을 함유하여 다양한 효능을 가지는 것으로 알려져 있다. 또한 로얄젤리의 성분자체가 영양만점에 피부 미용에도 효과적인 것으로 알려져 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀, 로얄젤리 등의 당류가 추가된 경우에 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물과 비교하여, 콜라겐합성이 증진되고, 멜라닌 생성이 억제되며, 보습인자인 HAS(Hyaluronan Synthases) 발현이 증가되고, 라디칼 소거능과, NO 생성이 억제되는 것을 확인하였다.
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리와 같은 당류가 추가되는 경우 추출물과 시너지 작용을 일으켜, 피부 미백, 피부 탄력, 피부 보습, 항염 및 항산화에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에서 상기 화장료 조성물은 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서의 "피부 미백"이라 함은 멜라닌 색소의 합성을 저해함으로써 피부 톤을 밝게 할 뿐만 아니라, 자외선, 호르몬 또는 유전에 기인한 기미나 주근깨 등의 피부의 과색소 침착을 개선하는 것을 말한다.
구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 푸른수련 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른수련 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리를 더한 조성물을 멜라노마 세포에 처리한 후 멜라닌의 총량을 측정한 결과, 혼합 추출물이 대조군 또는 단일추출물들과 비교할 때 멜라노마 세포에 대하여 더 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 나타내므로 피부 미백 용도로 사용할 수 있음을 확인하였다(표 3).
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리가 추가되는 경우에 단일 추출물에 비하여 시너지 작용을 일으켜, 피부 미백에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에서의 "피부 탄력 증진"이란 피부가 쳐지거나 늘어지는 정도를 완화시켜주는 것으로, 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐(collagen)이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지되는 것을 말한다. 본 발명에 있어서, "주름 개선"이란 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.
구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 또는 로얄젤리를 더한 조성물을 처리한 HF(Human Fibroblast) 세포를 배양하여 프로 콜라겐의 합성을 측정한 결과, 콜라겐 합성 효과가 혼합 추출물에서 가장 우수함을 확인하였다(표 2).
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리가 추가되는 경우에 단일 추출물에 비하여 시너지 작용을 일으켜, 피부 탄력 증진에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에서의 "피부 보습"이란 피부에 수분감을 증가시켜주고, 촉촉한 상태를 유지시키는 것을 의미한다. 피부 보습 효과는 피부의 주름개선, 탄력도 증가에 도움을 줄 수 있다.
구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리를 더한 조성물에 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)을 배양하고, HAS3 mRNA양을 비교하여 보습력을 실험한 결과, 상기 혼합 추출물을 처리한 경우가 대조군과 단일추출물에 비하여 HAS3 mRNA 발현이 증가됨을 확인하였다(표 4).
이러한 결과를 통해 상기 혼합 추출물이 피부 보습 효과를 나타낼 수 있음을 알 수 있었다.
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리가 추가되는 경우에 단일 추출물에 비하여 시너지 작용을 일으켜, 피부 보습에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에서의 "항산화"란 산화를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 인체는 산화촉진물질(prooxidant)과 산화억제물질(antioxidant)이 균형을 이루고 있으나 여러 가지 요인들에 의하여 이런 균형상태가 불균형을 이루게 되고 산화촉진 쪽으로 기울게 되면, 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 잠재적인 세포손상 및 병리적 질환을 일으키게 된다. 이러한 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 불안정하고 반응성이 높아 여러 생체물질과 쉽게 반응하고, 체내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 발암 등을 초래하게 된다. NO, HNO2, ONOO-와 같은 활성 질소종(reactive nitrogen species, RNS)은 염증 반응 시 대식세포 호중구 및 다른 면역 세포 들의 면역반응으로 인해 다량 생성되며, 이때 ROS도 같이 생성된다. 상기와 같은 활성산소는 체내에서 세포를 산화시켜 파괴시키며, 그에 따라 각종 질환에 노출되게 된다. 따라서, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련 추출물을 화장품에 포함시키면 항산화 효과를 달성함으로써, 건강증진에 기여할 수 있다.
구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물의 DPPH 라디칼 소거능(표 5)을 분석하여 강한 항산화능을 갖는 것을 확인하였다. 상기 혼합 추출물이 단일추출물에 비하여 IC50값이 감소됨을 확인하였다. 이러한 결과를 통하여 상기 혼합 추출물이 항산화 효과를 나타낼 수 있음을 알 수 있었다.
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리가 추가되는 경우에 단일 추출물에 비하여 시너지 작용을 일으켜, 항산화에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에서의 "항염증"은 염증을 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 염증반응의 조절은 대단히 복잡한 것으로 알려져 있는데, 이는 생체 내 복구체계의 증강 및 손상을 감소시키기 위한 것으로 알려져 있다. 그러나 반복되는 조직의 손상이나 재생에 의해 염증반응이 지속되면, 염증관련 세포에서 ROS와 RNS가 과다 생성되고 그 결과로 영구적인 유전자의 변형이 야기된다. 이처럼 ROS와 RNS는 생체 내 여러 가지 세포의 작용을 조절하는 염증 반응과 깊이 관련되어 있다. 염증 과정 중에는 많은 양의 염증유도 사이토카인(proinflammatory cytokines), 아질산(nitric oxide, NO) 그리고 프로스타글란딘(prostaglandin E2, PGE2)이 유도성 일산화질소 합성효소(inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시게나아제(cyclooxygenase-2, COX-2)에 의해 생성된다. 염증은 다양한 염증성 질환을 유발하는 원인으로써, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 포함하는 조성물은 항염증 작용을 통해 다양한 염증성 질환에 대한 예방 및 개선 효과를 가질 수 있다.
구체적인 일 실시예에 따르면, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물의 NO 생성 억제 효과를 분석한 결과, 단일 추출물에 비하여 혼합 추출물에서 동일 농도로 처리시 더욱 높은 NO 생성 억제능을 확인하였는 바, 상기 혼합 추출물이 강한 항염증 효과를 갖는 것을 확인하였다(표 6).
이를 통해, 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 꿀 및/또는 로얄젤리가 추가되는 경우에 단일 추출물에 비하여 시너지 작용을 일으켜, 항염증에 더 우수한 효과를 가짐을 알 수 있었다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속 염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유지, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물 또는 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물에 추가로 꿀 또는 로얄젤리의 당류를 포함할 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 함유할 수 있다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 기능성 식품 조성물은 추가로 당류를 포함할 수 있다. 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류, 프락토올리고탕 등이 사용되나 이에 제한되지 않고 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 물질이라면 어느 것이든 사용할 수 있다.
본 발명에서 상기 기능성식품 조성물은 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 푸른연꽃, 수련, 추출물, 혼합 추출물, 꿀, 로얄젤리, 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염증은 상기에서 설명한 바와 같다. 상기 기능성 식품 조성물은 건강기능식품의 형태로 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 기능성 식품 조성물에 포함된 푸른연꽃, 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물은 이의 추출물, 이의 분획물 또는 이의 가공물의 형태로 포함될 수 있다. 또한 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 기능성 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에 있어서, "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조 가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 또는 피부 보습, 항산화, 항염증 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함한다.
상기의 목적을 달성하기 위한 또 다른 양태로서, 본 발명은 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 의약외품 조성물은 추라고 당류를 포함할 수 있다. 당류는 꿀, 로얄젤리, 설탕, 과당, 당알콜류, 프락토올리고탕 등이 사용되나 이에 제한되지 않고 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 물질이라면 어느 것이든 사용할 수 있다.
본 발명에서 상기 의약외품 조성물은 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염증 등의 효과를 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 푸른연꽃, 수련, 추출물, 혼합 추출물, 꿀, 로얄젤리, 피부 미백, 피부 탄력증진 및 주름 개선, 피부 보습, 항산화, 항염증은 상기에서 설명한 바와 같다.
본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제의 대표적인 예로는, 락토즈, 덱스트로스, 슈크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 전분, 젤라틴, 글리세린, 아카시아 고무, 알지네이트, 칼슘포스페이트, 칼슘카보네이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 식물성 오일, 주사가능한 에스테르, 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우리지 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 의약외품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 피부 미백, 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 효과는 더욱 증가될 수 있을 것이다. 상기 성분 추가 시에는 복합 사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 상기 의약외품 조성물은 당업계에 공지된 미백 성분으로서, 코즈산(Kojic acid), 알부틴(Arbutin) 등과 같은 티로시나제 효소활성을 억제하는 물질, 하이드로퀴논(Hydroquinone), 비타민-C(L-Ascorbic acid); 당업계에 공지된 피부 탄력, 주름 개선 또는 보습 성분으로서, 레티노산, TGF, 동물 태반 유래의 단백질, 베툴린산 및 클로렐라 추출물; 및 이들의 유도체와 각종 식물 추출물로 구성되는 군으로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가 성분은 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%로 포함될 수 있을 것이며, 상기 함량 범위는 피부 안전성, 용이성 등의 요건에 따라 조절될 수 있을 것이다.
본 발명의 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 연고액, 물티슈, 코팅제 등을 예시할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물은 개체의 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 또는 피부 보습 방법에 사용될 수 있다. 상기 개체는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유동물을 제한 없이 포함한다.
본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물은 피부 미백, 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 항산화 및 항염 효과가 우수하다. 구체적으로 본 발명의 혼합 추출물을 포함하는 조성물은 멜라닌 총량 감소 효과를 나타내고 콜라겐 합성 촉진 효과 및 보습 효과가 우수하며, NO 생성 억제효과와 DPPH 라디칼 소거능이 단일 추출물에 비하여 우수하므로 피부 미백용, 탄력 증진용 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 항산화용 및 항염증용 화장료 조성물로서의 활용도가 높다. 또한, 본 발명의 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 기능성 식품 조성물 및 의약외품 조성물로서 사용할 수 있다.
이하 본 발명을 하기 예에 의해 상세히 설명한다. 다만, 하기 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 하기 예에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
제조예 1. 푸른연꽃 , 수련 추출물의 제조
푸른연꽃, 수련을 물로 세척한 후, 세척된 푸른연꽃, 수련을 추출용기에 넣고 추출용매를 추가하여 상온에서 천천히 추출하였다. 상기 수득한 추출물을 거름종이 등을 이용하여 고형분을 제거하고 여과한 다음, 상기 추출액을 감압 농축하여 각각의 추출물을 제조하였다.
제조예 2. 혼합 추출물의 제조
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물을 동량으로 주입하여 혼합 추출물을 제조하였다. 각 혼합 추출물에는 미네랄 워터 또는 당류인 꿀 및/또는 로얄젤리를 추가하였다. 혼합 추출물의 제조 비율 예는 표 1에 나타내었다.
성분 실시예 1( % ) 실시예2 ( % ) 실시예3 ( % ) 실시예4 ( % )
미네랄워터 To 100 - - -
푸른푸른연꽃 34 34 34 34
수련 34 34 34 34
To 100 - 16
로얄젤리 To 100 16
제조예 1의 각각의 추출물을 바탕으로 실시예 1 내지 4의 함량을 결정하였다. 실시예 1 내지 4의 경우, 각 추출물들이 대등한 비율로 혼합되어 협업작용으로 시너지 효과를 낼 수 있도록 최대 함량비를 조절한 것이다.
실험예 1. 콜라겐 합성 증진 효과
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 대하여 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 콜라겐 합성 증진 효과를 측정하였다.
키트 (procollagen type-1 C-peptide EIA kit, Takara, Japan)를 사용하여 프로 콜라겐의 합성을 측정하였다. HF(Human Fibroblast) 세포를 5 × 104세포/㎖의 밀도로 24 웰 플레이트에 넣고, 무첨가(대조군), 제조예 1에서 제조한 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물 0.01 중량%를 넣고 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 항-PIP 항체가 코팅된 (anti-PIP antibody-coated) 96 웰 플레이트에 항체-POD가 결합된 용액 (antibody-POD conjugate sol'n) 100㎕를 넣고 무첨가, 제조예 1에서 제조한 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 표준액 20 ㎕를 첨가하고 알루미늄 호일로 차광시킨 후 3시간 동안 37°C에서 배양하였다.
배양액을 제거하고 PBS로 4회 세척 후 말끔히 제거하고 기질용액 100 ㎕를 첨가한 후 실온에서 15분간 둔 후, H2SO4 100 ㎕를 첨가하여 가볍게 흔든 후, 450 nm에서 측정 흡광도를 측정하였다. 실험 결과는 표 2에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
콜라겐 발현 증가량(%) (n=3)
구분 콜라겐 합성 증가율 (%)
무처리 0
푸른푸른연꽃 5.8
수련 10.2
7.05
로얄젤리 11.73
실시예 1 17.6
실시예 2 17.9
실시예 3 18.68
실시예 4 21.3
그 결과, 상기 표 2에서 나타나듯이, 제조예 2에서 제조된 실시예 1의 혼합 추출물 처리 시, 제조예 1에서 제조된 각각의 단일 추출물보다 우수한 콜라겐 합성 증가 효과가 있음을 확인하였고, 제조예 2에서 제조된 실시예 2 내지 4의 혼합 추출물은 꿀 및/또는 로얄젤리에 의하여 실시예 1의 혼합 추출물보다 더욱 우수한 콜라겐 합성 증가 효과 있음을 확인하였다.
실험예 2. 멜라닌 생성 억제 효과
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 대하여 미백 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 멜라닌 억제 효과를 측정하였다.
구체적으로, 상기 시료의 미백 효능은 melanocyte내에 존재하는 멜라닌색소의 양이 감소하는 정도를 측정하여 평가하였다. 상기 시료를 0.01 중량%로 희석하여 B16 melanocyte에 처리하고 48시간 배양한 후, 멜라닌을 정량하여 미백 효능을 평가하였다. 멜라닌 함량은 총 단백질량 대비로 계산한 후, DMSO 대조군 기준 %로 구하였다. 양성 대조군은 Arbutin 100 ppm (Lim YJ et al., 2009, Arch Pharm Res.)을 사용하였다.
그 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
멜라닌 생성량 (%) (n=3)
시료 멜라닌생성량 (%)
무처리 100
Arbutin 55
푸른연꽃 94
수련 85
120
로얄젤리 146
실시예 1 78
실시예 2 72
실시예 3 75
실시예 4 68
그 결과, 상기 표 3에서 나타나듯이, 제조예 2에서 제조된 실시예 1의 혼합 추출물 처리 시, 제조예 1에서 제조된 각각의 단일 추출물보다 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하였고, 제조예 2에서 제조된 실시예 2 내지 4의 혼합 추출물은 꿀 및/또는 로얄젤리에 의하여 실시예 1의 혼합 추출물보다 더욱 우수한 멜라닌 생성 억제 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 3. 보습 인자 합성 요소 증진 효과
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 대하여 보습 인자 합성 요소 증진 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 피부 보습 효과를 측정하였다.
구체적으로, 37℃, 5% CO2의 조건에서 10% FBS(Gibco), 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/㎖, 페니실린 (penicillin) 100 ㎍/㎖, 암포테리신B (amphotericin B) 0.25 ㎍/㎖가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 증식시켰다.
구체적으로, 37℃, 5% CO2의 조건에서 10% FBS(Gibco), 스트렙토마이신(streptomycin) 100 ㎍/㎖, 페니실린 (penicillin) 100 ㎍/㎖, 암포테리신B (amphotericin B) 0.25 ㎍/㎖가 첨가된 DMEM 배지를 사용하여 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 증식시켰다.
형성된 각질형성세포(HaCaT, Human keratinocyte)를 6웰에 5 X 105cell/well의 밀도로 3ml의 배지와 함께 분주한 뒤, 37℃, 5% CO2 배양기에서 24시간 배양하였다. 배양된 상기 배지는 PBS로 씻어 FBS를 제거하였다. FBS가 제거된 배지에 무처리, 제조예 1에서 제조된 장미, 작약, 아이리스 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1, 2, 3, 4를 0.01 중량%로 각각 3ml씩 처리한 후 다시 배양하고, HAS3(Hyaluronan Synthases 3) mRNA양을 비교하였다. RNA는 RNA추출 키트(RNeasy Mini Kit, Qiagen, USA)를 사용하였고, cDNA는 수퍼스크립트 II 역전사효소(SuperScript II reverse transcriptase (Invitrogen, USA))를 이용하여 합성하였으며, 플레티넘 PCR 수퍼믹스 (Platinum PCR supermix (Invitrogen, USA))와 제작된 프라이머를 사용하여 PCR을 수행하였다. cDNA 합성은 1㎍의 총 RNA(total RNA)로 50℃에서 1시간, 85℃에서 5분 동안 열을 가한 후, 반응을 중지시켰다. PCR 증폭은 94℃에서 50초 동안 변성시키고 60℃에서 50초 동안 어닐링하고 72℃에서 50초 동안 익스텐션시켰다. 이를 26 싸이클(cycle) 반복하고 마지막 익스텐션은 72℃에서 5분간 수행하였고, 증폭된 결과물은 2% 아가로스 겔에서 전기영동하여 유전자 발현을 퓨전 Fx5 검출 시스템 (Fusion Fx5 detection system (VilberLourmat, Germany))으로 확인하였다.
그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
HAS 발현 증가 (%) (n=3)
구분 HAS mRNA 발현 ( % )
무처리 100
푸른연꽃 106
수련 98
112
로얄젤리 115
실시예 1 109
실시예2 124
실시예 3 126
실시예 4 132
그 결과, 상기 표 4에서 나타나듯이, 제조예 2에서 제조된 실시예 1의 혼합 추출물 처리 시, 제조예 1에서 제조된 각각의 단일 추출물보다 HAS 발현이 증가함을 확인하였고, 제조예 2에서 제조된 실시예 2 내지 4의 혼합 추출물은 꿀 및/또는 로얄젤리에 의하여 실시예 1의 혼합 추출물보다 HAS 발현이 더욱 증가함을 확인하였다.
실험예 4. 항산화 효과
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 대하여 항산화 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 피부 항산화 효과를 측정하였다.
구체적으로, 상기 시료의 라디칼 소거능은 DPPH에 존재하는 라디칼이 소거될 때, DPPH가 보라색에서 노란색으로 변화하는 것을 이용하여 평가하였다. 대조군으로는 Vit C를 사용하였다. 상기 시료를 메탄올에 녹인 후 이용하였으며 실험방법은 0.15 mM DPPH 용액과 시료를 100㎕씩 혼합하여 상온에서 30분 반응시킨 후, DPPH의 색의 변화를 540 nm에서 흡광도(A540)를 측정하였다. A540 값을 통해 IC50값을 구하여 라디칼 소거능을 비교 평가하였다.
그 결과를 하기 표 5에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
라디칼 소거능 (IC 50 ) (n=3)
구분 IC 50
Vit C 0.0005
푸른연꽃 0.267
수련 0.283
12.04
로얄젤리 6.049
실시예 1 0.21
실시예2 0.241
실시예 3 0.208
실시예 4 0.19
그 결과, 상기 표 5에서 나타나듯이, 제조예 2에서 제조된 실시예 1의 혼합 추출물 처리 시, 제조예 1에서 제조된 각각의 단일 추출물보다 우수한 항산화 효과가 있음을 확인하였고, 제조예 2에서 제조된 실시예 2 내지 4의 혼합 추출물은 꿀 및/또는 로얄젤리에 의하여 실시예 1의 혼합 추출물보다 더욱 우수한 항산화 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 5. 항염 효과
제조예 1에서 제조된 푸른연꽃, 수련 각각의 단일 추출물, 꿀, 로얄젤리 및 제조예 2에서 제조한 실시예 1 내지 4의 혼합 추출물에 대하여 항염 효과를 확인하기 위하여, 다음과 같이 배양된 세포를 이용하여 피부 항염 효과를 측정하였다.
구체적으로, Raw 264.7 cell을 이용하여 상기 추출물들의 NO 생성 억제 효과를 측정하였다. 양성 대조군으로는 20 mg/ml L-NMMA1 (NOS 억제제)를 사용했으며 상기 시료를 0.01 중량% 농도로 희석하여 30분 전 처리 후, 1 μg/ml LPS를 처리하고 24시간 배양한 후 NO 정량 Kit를 이용하여 NO 생성 억제능을 아래와 같이 평가하였다.
Figure pat00001
그 결과를 하기 표 6에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차(SD)로 나타내었다.
NO 생성 억제 효과 (%) (n=3)
구분 NO 생성 억제 효과 ( % )
양성대조군 42
푸른연꽃 19.4
수련 18.4
13.1
로얄젤리 15.5
실시예 1 25.7
실시예2 27
실시예 3 28.3
실시예 4 31
그 결과, 상기 표 6 나타나듯이, 제조예 2에서 제조된 실시예 1의 혼합 추출물 처리 시, 제조예 1에서 제조된 각각의 단일 추출물보다 높은 NO 생성 억제능을 확인하였고, 제조예 2에서 제조된 실시예 2 내지 4의 혼합 추출물은 꿀 및/또는 로얄젤리에 의하여 실시예 1의 혼합 추출물보다 더욱 높은 NO 생성 억제능을 확인하였다.
즉, 본 발명에 따른 혼합 추출물(실시예 1)은 각각의 푸른연꽃, 수련 단일 추출물보다 우수한 시너지 작용을 하는 것을 알 수 있으며, 실시예 2 내지 4를 통해 꿀 및/또는 로얄젤리가 첨가된 경우, 혼합 추출물의 시너지 작용이 더 높아짐을 알 수 있다.
이러한 결과를 통해 상기 혼합 추출물이 피부 미백, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선, 피부 보습, 피부 노화 방지, 항산화, 및 피부 염증 개선 효과에 매우 효과적임을 알 수 있다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (13)

  1. 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    꿀, 로얄젤리, 또는 둘 모두를 추가로 포함하는, 화장료 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 미백용인 것인, 화장료 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용인 것인, 화장료 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 보습용인 것인, 화장료 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 항산화용인 것인, 화장료 조성물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 항염증용인 것인, 화장료 조성물.
  8. 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 기능성 식품 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    꿀, 로얄젤리, 또는 둘 모두를 추가로 포함하는, 기능성 식품 조성물.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서,
    상기 기능성 식품 조성물은 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 항산화용 또는 항염증용인 것인, 기능성 식품 조성물.
  11. 푸른연꽃 및 수련의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약외품 조성물.
  12. 제11항에 있어서,
    꿀, 로얄젤리, 또는 둘 모두를 추가로 포함하는, 의약외품 조성물.
  13. 제11항 또는 제12항에 있어서,
    상기 의약외품 조성물은 피부 미백용, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용, 피부 보습용, 항산화용 또는 항염증용인 것인, 의약외품 조성물.

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