KR20170068805A - 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템, 이의 제조방법 및 이를 이용한 단백질 검출용 바이오센서 - Google Patents

분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템, 이의 제조방법 및 이를 이용한 단백질 검출용 바이오센서 Download PDF

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Abstract

본 발명은 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템, 이의 제조방법 및 이를 이용한 단백질 검출용 바이오센서에 관한 것으로,
미세유체의 유동이 가능한 미세 채널부; 상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자가 점착되어 형성된 분자각인고분자층; 및 상기 미세 채널부의 상부에 형성된 커버용 기판;으로 이루어지는 미세유체채널을 포함하고, 상기 분자각인고분자층은 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템에 관한 것이다.

Description

분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템, 이의 제조방법 및 이를 이용한 단백질 검출용 바이오센서{Detecting protein with microfluidic channel system using molecular imprinted polymer and manufacturing method of the system, biosensor detecting protein made thereby}
본 발명은 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템, 이의 제조방법 및 이를 이용한 단백질 검출용 바이오센서에 관한 것이다.
바이오센서란 특정 효소, 단백질, 세포 등 바이오물질의 존재를 확인하기 위해, 물질의 물리량이나 화학량에 선택적으로 반응하는 생체감지 물질(bioreceptor)을 이용하여 다양한 신호(광학, 자기, 화학 등)로 변환ㅇ출력하는 장치를 말한다. 지금까지 바이오센서를 제작하기 위해서는 여러 종류의 생물분자(효소, 항체, 수용체)등을 고도의 분리 정제 기술을 이용해 정제하여 사용하였다. 이러한 기능성 바이오 물질을 이용해 바이오센서를 제작하기 위해서는 복잡한 과정에 따른 오랜 시간과 막대한 비용이 요구된다. 따라서 뛰어난 선택성과 민감성 그리고 안정성을 지닌 바이오센서를 효율적으로 제작할 필요성이 대두되고 있다.
단백질을 분리ㅇ정제하기 위한 방법으로는 친화크로마토그래피(Affinity Chromatography), LPLC(low pressure liquid chromatography), HPLC(high pressure liquid chromatography), 전기영동(electrophoresis) 등이 사용되어 왔다. 하지만 이러한 특정 단백질에 대한 분리ㅇ정제 방법으로 흡착 크로마토그래피를 사용하는 것은 고가의 생체감지 물질(bioreceptor)을 사용해야 하므로 바이오센서의 크기 조정이 힘들다. 또한 특정 단백질을 생체감지 물질(bioreceptor)로 부터 분리하기 위해서는 효소를 사용해야 하지만 이 과정에서 드는 추가적인 비용과 시간을 단점으로 꼽을 수 있다. 이러한 단점들을 극복하고, 기존의 방식보다 뛰어난 안정성, 선택성, 민감성을 가진 분자각인 고분자 기술(molecular imprinted polymer, MIP)을 이용한 바이오센서 개발이 진행되고 있다.
분자각인 고분자 기술(molecular imprinted polymer, MIP)은 생물학적 모형을 본떠 만든 생물 작용성 인공분자라 할 수 있다. 분자 각인은 주형분자(template)와 공유 혹은 비공유 결합을 하는 단분자(monomer), 그리고 가교 결합을 할 수 있는 불활성 단위체(cross-linker)를 중합시켜 제작할 수 있다. 중합 후에는 주형분자(template)를 제거하여 주형분자(template)와 3차원적으로 결합할 수 있는 결합자리를 만들어 준다. 이렇게 만들어진 결합자리는 주형분자(template)의 구조와 화학적 기능에 상호 보완적으로 반응하게 된다. 분자각인 고분자는 높은 온도와 압력에서도 사용이 가능하며, 강산, 강염기 그리고 유기용매에서도 사용이 가능하다. 이러한 물리적, 화학적 안정성을 보이는 분자각인 고분자는 제작비용 또한 저렴하기 때문에 바이오센서로서 사용이 적합하다.
이에, 본 발명자는 상기 종래기술의 추가적인 비용 및 시간 등의 문제점을 해결하고자, 본 발명의 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 제조하여 단백질 검출용 바이오센서에 적용함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명은 단백질을 검출할 수 있는 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 제공하는 것을 그 해결과제로 한다.
또한, 본 발명은 상기 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법을 제공하는 것을 다른 해결과제로 한다.
또한, 본 발명은 상기 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 이용하여 제조되는 단백질 검출용 바이오센서를 제공하는 것을 다른 해결과제로 한다.
상기 본 발명의 과제를 해결하기 위한 본 발명의 일 측면에 따르면,
미세유체의 유동이 가능한 미세 채널부;
상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자가 점착되어 형성된 분자각인고분자층 및
상기 미세 채널부의 상부에 형성된 커버용 기판으로 이루어지는 미세유체채널을 포함하고,
상기 분자각인고분자층은 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명은, 상기 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법을 제공하는 것에 관한 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 과제를 해결하기 위한 본 발명은, 상기 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 이용하여 제조되는 단백질 검출용 바이오센서를 제공하는 것에 관한 것이다.
본 발명에 따른 단백질 검출용 미세유체채널 시스템은 간단한 방법으로 단시간에 단백질을 검출할 수 있고, 저렴한 비용 및 간단한 공정으로 제조할 수 있는 장점이 있다.
또한, 본 발명의 단백질 검출용 미세유체채널 시스템은 의약, 의료 및 생명공학, 고분자학 등 다양한 분야에 적용할 수 있다.
또한, 본 발명의 단백질 검출용 미세유체채널 시스템은 분자각인 고분자가 단백질을 선택적으로 분리할 수 있는 장점이 있다.
도 1 (a)는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체채널 시스템의 전체 채널의 모습을 나타낸 사진이고, (b) 및 (c)는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체채널의 모습을 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체채널의 제조방법을 나타낸 모식도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 분자각인고분자(MIP)의 제작 과정을 나타낸 모식도이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 미세유체채널의 시간에 따라 단백질-형광물질(FITC) 용액이 흐르는 모습을 나타낸 사진이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 분자각인고분자(MIP)층을 포함하는 미세유체채널 및 비분자각인고분자(NIP)층을 포함하는 미세유체채널의 단백질과의 결합을 나타낸 사진이다.
이하, 도면을 참고하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다.
본 발명은 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 고분자층을 포함하는 분자각인 고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템 및 미세유체채널 시스템의 제조방법, 이에 의해 제조되는 단백질 검출용 바이오센서에 관한 것이다.
구체적으로 본 발명의 일 측면에 따르면 본 발명의 단백질 검출용 미세유체채널 시스템은,
미세유체의 유동이 가능한 미세 채널부; 상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자가 점착되어 형성된 분자각인고분자층; 및 상기 미세 채널부의 상부에 형성된 커버용 기판으로 이루어지는 미세유체채널을 포함하고, 상기 분자각인고분자층은 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 것을 특징으로 한다.
상기 미세 채널부는 폴리디메틸실록산, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리아크릴레이트, 폴리카보네이트, 폴리실릭올레핀, 폴리이미드, 폴리우레탄, 폴리스티렌, 스테인레스 스틸 및 유리로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나로 형성될 수 있으며 바람직하게는 폴리디메틸실록산(PDMS)을 이용하여 제작할 수 있다. 본 발명의 PDMS 채널은 포토리소그래피(Photolithography) 방식을 이용하여 채널의 몰드(mold)를 제조한 후, PMDS를 상기 몰드 위에 붓고, 가열하여 원하는 형태의 채널을 제조하여 제작될 수 있다.
상기 커버용 기판은 실리콘 웨이퍼 또는 글라스 슬라이드일 수 있으며, 바람직하게는 글라스 슬라이드를 사용할 수 있다.
상기 분자각인 고분자층은 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 알부민 단백질일 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 단백질 검출용 미세유체채널 시스템은 복수 개의 미세유체채널이 직렬로 연결된 것을 특징으로 한다.
도 1(a)는 본 발명의 미세유체채널 시스템의 전체 채널의 모습을 나타낸 사진이고, 도 1(b) 및 (c)는 본 발명의 미세유체채널의 모습을 나타낸 사진이다. 도 1을 참고하면, 본 발명의 시스템은 채널 전체의 모양을 결정하고, 미세유체채널은 채널 내의 유체의 흐름을 제어하는 것을 특징으로 한다. 상기 미세유체채널의 크기에 따라 형성되는 유체의 층류가 달라지므로 시료의 크기에 따라 미세유체채널의 크기를 달리하여 미세유체채널을 제작하는 것을 특징으로 한다. 상기 미세유체채널의 크기는 바람직하게는 가로 160 내지 200 ㎛, 세로 100 내지 140 ㎛일 수 있고, 더 바람직하게는 가로 180 ㎛, 세로 120 ㎛일 수 있다. 상기 미세유체채널이 복수 개로 직렬연결된 상기 미세유체채널 시스템은 바람직하게는 전체 길이가 10 내지 100 mm, 더 바람직하게는 50.15 mm일 수 있다. 상기 미세유체채널 시스템에서 미세유체채널의 역할은 시료를 미세유체채널에 가두고, 유체의 흐름을 제어할 뿐만 아니라 표면적을 넓혀 효율적으로 단백질을 크기에 따라 분리한다. 마이크로 크기의 채널에서 넓어지는 부분은 내부 경계층의 분리효과를 가져온다. 층의 분리는 채널 내부에서 와류 현상을 일으키게 된다. 와류 현상으로 인해 시료는 채널 내부에 갇히게 되고, 시간이 지남에 따라 작은 시료부터 차례차례 빠져나가 시료가 크기별로 나뉘게 된다. 따라서 상기와 같이 본 발명의 미세유체채널 시스템은 미세유체채널 복수 개가 직렬연결됨에 따라 유체의 흐름 및 유체에 포함되어 있는 단백질의 양을 검출하여 확인할 수 있는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 측면에 따르면,
상기 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법은,
주형분자, 완충용액, 가교제, 기능성 단분자 및 개시제를 포함하는 분자각인고분자 혼합용액을 제조하는 제1 단계; 미세 채널부의 내부에 상기 혼합용액을 캐스팅한 후, 열을 가하여 상기 캐스팅된 분자각인고분자 혼합용액을 열중합시켜 고분자화함으로써 상기 고분자 내에 주형분자를 각인시키는 제2 단계; 상기 각인된 주형분자를 제거하여, 상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자층을 형성하는 제3 단계; 및 상기 제3 단계를 거친 미세 채널부의 상부에 커버용 기판을 형성하는 제4 단계;를 포함하여 이루어지고, 상기 주형분자는 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질인 것을 특징으로 한다.
도 2는 본 발명의 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법을 나타낸 모식도이다. 도 2를 참고하면 본 발명의 미세유체채널은 크게 4 단계의 제조과정을 거쳐 제조됨을 알 수 있다.
제1 단계는 상기 분자각인 고분자 혼합용액을 제조하는 단계로, 주형분자 및 완충용액을 혼합하여 혼합액을 제조하고, 상기 혼합액에 가교제 및 기능성 단분자를 첨가하고 마지막으로 개시제를 첨가하여 제조되는 것을 특징으로 한다. 상기 완충용액은 HEPES 완충용액일 수 있으며, 상기 가교제는 MBAA(N,N-methylenebisacrylamide), EBA(ethylene-bis-acrylamide 및 BAP(bis-acryloylpiperazine)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나이고, 상기 기능성 단분자는 AAc(Acrylic acid), styrene 및 Methyl methacrylate로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 상기 가교제는 MBAA(N,N-methylenebisacrylamide), 상기 기능성 단분자는 AAc(Acrylic acid)일 수 있다.
제2 및 제3 단계를 본 발명의 분자각인고분자(MIP)의 제작 과정을 나타내는 도 3을 참고하여 살펴보면, 주형분자(Template)와 기능성 단량체가 수소결합, 전자적 상호결합, 배위결합 등의 결합을 하면 과량의 가교제가 고분자 매트릭스를 가교결합하고, 이후 주형분자를 제거하여 검출을 위해 유입되는 주형분자와 결합이 가능한 결합자리를 만들어 주형분자를 검출할 수 있는 분자각인고분자를 제작하는 것을 특징으로 한다. 이 때, 상기 주형분자는 바람직하게는 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin)일 수 있다.
상기 제2 단계는 미세 채널부의 내부에 상기 혼합용액을 캐스팅한 후, 열을 가하여 상기 캐스팅된 분자각인고분자 혼합용액을 열중합시켜 고분자화함으로써 상기 고분자 내에 주형분자를 각인시키는 단계이다. 이 때, 상기 열중합은, 20 내지 50 ℃에서 1 내지 5시간 동안 이루어지며, 바람직하게는 36 ℃에서 3시간 동안 이루어질 수 있다.
상기 제3 단계는 상기 각인된 주형분자를 제거하여, 상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자층을 형성하는 단계이다. 이 때, 1M NaCl에서 10 내지 50분 동안, 바람직하게는 30분 동안 침지시켜 상기 각인된 주형분자를 제거하는 것을 특징으로 한다. 상기 미세 채널부에 잔류하는 NaCl 용액을 제거하기 위해 증류수를 이용하여 세척하는 것을 특징으로 한다.
제4 단계는 상기 제3 단계를 거친 미세 채널부의 상부에 커버용 기판을 형성하는 단계이다.
또한, 본 발명의 다른 측면에 따르면,
상기 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 이용하여 제조되는 것을 특징으로 하는 단백질 검출용 바이오센서를 제공한다.
이하, 실시예를 참고하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예
본 실시예에서는, 분자각인고분자 및 비분자각인고분자의 제조에 앞서 하기와 같은 채널을 제조한 후, 실시예에 따라 분자각인고분자 및 비분자각인고분자를 제조하였다.
PMDS 채널의 제조.
PDMS 채널의 제조를 위해 포토리소그래피(Photolithography) 방법을 이용한 채널의 몰드를 제작하였다. 먼저 실리콘 기판 위에 고르게 감광제(Photoresist)를 도포하였다. 상기 감광제를 코팅시킨 후, 불순물 제거 및 감광제의 접착을 위해 110 ℃에서 열을 가해주었다. 그 후, 채널 모양이 패턴화되어 있는 포토마스크(Photo mask)를 상기 기판 위에 정렬시키고 15초 동안 UV를 조사하였다. 상기 조사된 부분을 현상액(developer)을 이용하여 감광제를 제거하여 채널의 몰드를 제작하였다. 상기 몰드 위에 PDMS를 붓고, 80 ℃에서 1시간동안 가열하여 원하는 형태의 PDMS 채널을 제조하였다.
<실시예 1> 분자각인고분자(MIP)층을 포함하는 미세유체채널의 제조.
분자각인고분자를 제조하기 위해 50 mM HEPES Buffer 6 ml에 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin) 1.3 mg을 넣어 모두 용해될 때 까지 교반하였다. 그 후, Acrylic acid 7.206 mg와 MBAA 154.17 mg를 넣은 다음, Pottasium peroxodisulfate 6 mg을 넣어 교반시켜 분자각인고분자 제조를 위한 혼합용액(Pre-polymerization mixture)을 제조하였다. 앞서 제조한 PDMS 채널 위에 상기 혼합용액을 부어주었다. 상기 혼합용액을 36 ℃에서 3시간 동안 열중합시켜 고분자화하며 용매를 증발시키고, 고분자 내에 알부민 단백질을 각인시켰다. 상기 각인된 알부민 단백질을 제거하기 위해 30분 동안 1M NaCl에 침지시켰고, 상기 채널의 내부 바닥면에 분자각인 고분자층을 형성하였다. 상기 채널에 잔류하는 상기 NaCl 용액을 제거하기 위해 증류수를 이용하여 채널을 세척하였다. 그 후, 채널의 상부에 유리기판을 덮어 분자각인고분자층을 포함하는 미세유체채널을 제조하였다.
<비교예 1> 비분자각인고분자(NIP)층을 포함하는 미세유체채널의 제조.
비분자각인고분자를 제조하기 위해 50 mM HEPES Buffer 6 ml에 Acrylic acid 7.206 mg와 MBAA 154.17 mg를 넣은 다음, Pottasium peroxodisulfate 6 mg을 넣어 교반시켜 비분자각인고분자 제조를 위한 혼합용액(Pre-polymerization mixture)을 제조하였다. 앞서 제조한 PDMS 채널 위에 상기 혼합용액을 부어주었다. 상기 혼합용액을 36 ℃에서 3시간 동안 열중합시켜 상기 채널의 내부 바닥면에 점착시킴으로써 비분자각인고분자층을 형성하였다. 그 후, 채널의 상부에 유리기판을 덮어 비분자각인고분자층을 포함하는 미세유체채널을 제조하였다.
이하, 상기 실시예 및 비교예의 결과를 도면을 참고하여 설명하기로 한다.
도 4는 본 발명의 미세유체채널의 시간에 따라 단백질-형광물질(FITC) 용액이 흐르는 모습을 나타낸 사진이다. 도 4를 참고하면, 1초부터 3초까지 단백질-형광물질(FITC) 용액이 시스템에 유입됨에 따라 미세유체채널 내부의 분자각인고분자와 반응하여 단백질이 결합함에 따라 점차적으로 형광을 띄는 것을 확인할 수 있다. 채널에 전체적으로 고르게 형광이 분포됨에 따라 채널이 막히거나 틈이 없으며, 용액이 원활하게 통과됨을 알 수 있다.
도 5는 본 발명의 분자각인고분자(MIP)층을 포함하는 미세유체채널과 비분자각인고분자(NIP)층을 포함하는 미세유체채널의 단백질과의 결합을 나타낸 사진이다. 도 5를 참고하면, 분자각인고분자(MIP)층을 포함하는 미세유체채널은 채널내부에 단백질-형광물질이 결합된 모습을 나타냄에 따라 형광을 띄는 것을 확인할 수 있다. 분자각인고분자는 단백질이 결합할 수 있는 결합자리가 존재하므로 단백질이 결합하여 형광을 나타냄을 알 수 있다.
반면, 비분자각인고분자(NIP)층을 포함하는 미세유체채널은 분자각인 고분자를 만드는 과정에서 주형분자인 알부민 단백질을 첨가하지 않아 단백질과 결합할 수 있는 결합자리가 생성되지 않은 고분자이므로 단백질과의 결합이 형성되지 않아 형광을 띄지 않음을 확인할 수 있다.
상술한 바와 같이, 본 발명은 분자각인 고분자를 바이오센서의 생체감지 물질로서 사용하여 단백질의 선택적 분리 여부를 확인하도록 한 것으로, PDMS 채널에 분자각인 고분자를 포함하는 단백질 검출용 미세유체채널 시스템에 단백질-형광물질(FITC) 용액을 흘려줌에 따라 단백질이 고분자에 결합하면서 형광을 띄는 것을 확인할 수 있고, 이로부터 단백질이 선택적으로 분리되며 검출될 수 있다.
이제까지 본 발명에 대하여 바람직한 실시예를 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예는 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (6)

  1. 미세유체의 유동이 가능한 미세 채널부;
    상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자가 점착되어 형성된 분자각인고분자층; 및
    상기 미세 채널부의 상부에 형성된 커버용 기판;으로 이루어지는 미세유체채널을 포함하고,
    상기 분자각인고분자층은 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 검출할 수 있도록 분자각인된 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 시스템은, 복수 개의 미세유체채널이 직렬로 연결된 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템.
  3. 주형분자, 완충용액, 가교제, 기능성 단분자 및 개시제를 포함하는 분자각인고분자 혼합용액을 제조하는 제1 단계;
    미세 채널부의 내부에 상기 혼합용액을 캐스팅한 후, 열을 가하여 상기 캐스팅된 분자각인고분자 혼합용액을 열중합시켜 고분자화함으로써 상기 고분자 내에 주형분자를 각인시키는 제2 단계;
    상기 각인된 주형분자를 제거하여, 상기 미세 채널부의 내부 바닥면에 분자각인고분자층을 형성하는 제3 단계; 및
    상기 제3 단계를 거친 미세 채널부의 상부에 커버용 기판을 형성하는 제4 단계;를 포함하여 이루어지고,
    상기 주형분자는 알부민 단백질(Bovine Serum Albumin), 스트렙타아비딘(streptavidin), 미오글로빈(myoglobin) 및 트립신(trypsin)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질인 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법.
  4. 제 3 항에 있어서,
    상기 가교제는 MBAA(N,N-methylenebisacrylamide), EBA(ethylene-bis-acrylamide 및 BAP(bis-acryloylpiperazine)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나이고, 상기 기능성 단분자는 AAc(Acrylic acid), styrene 및 Methyl methacrylate로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법.
  5. 제 3 항에 있어서,
    상기 제2 단계의 열중합은, 20 내지 50 ℃에서 1 내지 5시간 동안 이루어지고; 상기 제3 단계는 1M NaCl에서 10 내지 50분 동안 침지시켜 상기 각인된 주형분자를 제거하는 것을 특징으로 하는, 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널의 제조방법.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 분자각인고분자를 이용한 단백질 검출용 미세유체채널 시스템을 이용하여 제조되는 것을 특징으로 하는, 단백질 검출용 바이오센서.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20210026390A (ko) 2019-08-30 2021-03-10 주식회사 아스플로 다층구조형 복합기능성 필터 및 그 제조방법
CN113522379A (zh) * 2020-04-20 2021-10-22 中国科学院化学研究所 微墙阵列及其制备方法与应用、微通道及其制备方法、微通道反应器及其应用

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