KR20170002911A - 백심 뿌리 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물 - Google Patents

백심 뿌리 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 함유하여 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린은 티로시나아제 활성을 저해하고 멜라닌 생성을 억제하여 피부 미백에 효과가 있다.

Description

백심 뿌리 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for skin whitening comprising the extract of Caragana Sinica}
본 발명은 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 함유하여 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부의 흑화(Melanism)는 내적, 외적 요인에 대한 피부세포의 반응에 의하여 발생하는 것으로, 대표적인 요인은 피부가 자외선에 노출됨으로 인한 것이다. 즉, 피부가 자외선에 노출되면 티로시나제가 활성화되고, 이것은 피부조직에 존재하는 아미노산의 일종인 티로신에 작용하여 도파(dopa)를 생성시킨다. 이후 다시 도파퀴논(dopaquinone)을 생성시키는 산화과정을 통해 피부 색소세포인 멜라노사이트(Melanocyte) 내의 멜라노좀(Melanosome)에서 멜라닌이라는 중합체가 합성된다. 이 멜라닌은 피부의 각질형성세포인 케라티노사이트(Keratinocyte)로 전달되며, 각질화 과정에 의해 피부 표면에 도달하여 자외선으로부터 피부를 보호하게 된다.
멜라닌은 우리 인체에 없어서는 안 되는 자외선 방어제이며, 단백질, 지질, 핵산 등과 같은 생체성분을 변형시키는 다양한 라디칼을 제거하는데 효과적인 프리 라디칼 소거제의 역할을 담당한다. 하지만, 멜라닌이 국소적으로 과도하게 합성되거나 피부병변 및 노화에 따른 피부의 생리기능이 떨어지게 되면, 멜라닌이 피부 표면에 침착되어 기미, 주근깨 및 다양한 색소침착을 유발하게 된다.
이러한 피부 흑화의 원인과 기작이 밝혀지면서, 피부 흑화 과정에 관여하는 티로시나제(Tyrosinase)의 활성 저해 효과를 갖는 물질들을 화장료에 배합하거나, 멜라닌 생성과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시키는 방법이 피부 흑화를 방지하기 위해 일반적으로 사용되고 있다. 이러한 목적으로 사용되고 있는 대표적인 물질로는 알부틴, 아스코르빈산, 히드로퀴논과 식물 추출물로는 상백피 추출물 및 감초 추출물 등이 있다.
알부틴의 경우, 우수한 티로시나제 활성 저해 작용을 갖는 반면, 화장품에 배합 시 변색 및 경시변화에 따른 역가 저하 등 안정성에 문제점이 있으며, 피부자극이 커 사용상 한계가 있다. 아스코르빈산은 티로시나제 활성 저해 효과가 낮고, 분자 자체의 안정성이 낮아 멜라닌 생성 억제제로 적합하지 않은 문제가 있다. 히드로퀴논은 피부에 대한 자극이 높아 안전성 문제로 현재 화장품 배합 시에 그 사용성이 제한되는 문제가 있다. 또한, 대부분의 식물 추출물들은 고농도에서만 비교적 높은 티로시나제 활성 저해 효과를 나타내며, 저농도에서는 저해 효과가 거의 나타나지 않는 등의 문제점을 갖고 있다. 특히, 기존 멜라닌 생성 억제제들은, 실제 사람 피부에 대한 임상적인 실험 시 미백 효과가 미약하다는 가장 큰 문제점이 있다.
이에, 본 발명자들은 천연 식물소재 추출물들의 문제점을 해결하고자 연구를 수행한 결과, 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린에서 우수한 미백 효능을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명이 해결하고자 하는 다른 과제는 상기 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 미백 방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명이 해결하고자 하는 또 다른 과제는 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하고자, 본 발명은 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 미백 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명은 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 백심(Caragana Sinica)은 다년생의 낙엽, 활엽의 관목식물로서 다른 근연 식물에 비하여 하얀 것이 특징이며, 골담초, 금작목, 금작화, 은계아, 강남금봉, 파치화, 장판자 등으로도 불린다. 백심은 수직적으로는 표고 400m 이하, 수평적으로는 전북, 경남, 충남, 경기 등 우리나라 각지에 야생하며 촌락 부근에도 식재한다. 줄기에 가지가 뭉쳐나고 높이는 2m에 달한다. 잎은 우상복엽으로 2쌍씩 붙어 있고 호생하며, 잎의 끝은 대개 가시로 되고 소엽은 4개로서 도란형, 또는 타원형이며 두껍다. 열매는 길이가 1 ~ 3cm 이며 표면은 진록색이고, 광택이 나며 뒷면은 회록색이며 털은 없다. 잎자루는 길이가 4 ~ 8mm이며, 가시로 변한다. 위를 향한 가지는 사방으로 늘어져 자라고, 가지는 5개의 능선이 있으며 회갈색이고 털이 없다. 전체적으로 가시가 있으며, 잔뿌리는 길게 자란다. 꽃은 5월에 나비 모양의 황적색 꽃이 1개씩 총장화서로 핀다. 화경은 길이 1cm 정도로 중앙부에 한 개의 환절이 있다. 꽃받침은 종 모양이며 갈색 털이 약간 있다. 협과는 길이가 3 ~ 3.5cm로서 원주형이고 털이 없으며 9월에 익지만 결실이 드물다.
상기 추출물은 백심 뿌리를 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득할 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있고, 보다 구체적으로 에탄올일 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 백심 뿌리 에탄올 추출물이 티로시나아제 활성을 억제하고, 멜라닌 생성을 억제하여 우수한 피부 미백 효과를 나타냄을 확인하였다.
상기 추출물, 분획물 또는 알파-비니페린은 총 조성물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 함유될 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유될 수 있다. 상기 추출물, 분획물 또는 알파-비니페린의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 피부 미백 개선 효과가 나타나지 않으며, 30중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 미백 개선 효과 증대 정도가 미미하고, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며, 경제적이지 않다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 유기용매를 가하여 수득한 것일 수 있고, 보다 구체적으로 에틸아세테이트를 가하여 수득한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구체예에서, 백심 뿌리 추출물로부터 얻어진 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물이 티로시나아제 활성을 억제하고, 멜라닌 생성을 억제하여 우수한 피부 미백 효과를 나타냄을 확인하였으며, 에틸아세테이트 분획물의 미백 효과가 보다 우수함을 확인하였다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 총 분획물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 알파-비니페린을 함유할 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유할 수 있으며, 보다 더 구체적으로 0.1중량% 내지 1중량%로 함유할 수 있다.
상기 알파-비니페린은 하기 [화학식 1]로 표시되는 구조를 가진다.
Figure pat00001
본 발명에서, 상기 백심 뿌리 추출물 또는 이의 분획물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다:
1) 백심 뿌리에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계;
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압 농축한 후 건조하는 단계; 및
4) 단계 3)의 건조한 추출물에 유기용매를 가하여 백심 뿌리 분획물을 제조하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 백심 뿌리는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.
상기 방법에 있어서, 백심 뿌리 추출물의 추출 방법으로는 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출, 초임계 추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있고, 당업계에 공지된 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서 제조될 수 있다. 또한, 추출용매는 물, C1 내지 C4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득할 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 백심 뿌리 분량의 1 내지 20배 첨가하여 추출할 수 있고, 구체적으로 5 내지 15배 첨가하여 추출할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 추출온도는 20 내지 70℃일 수 있고, 구체적으로 25 내지 65℃일 수 있으며, 보다 구체적으로 30 내지 60℃일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 추출시간은 1 내지 20시간일 수 있고, 구체적으로 2 내지 15시간일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 2)의 백심 뿌리 추출물을 1 내지 5회 여과할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조 하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 4)의 유기용매는 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 또는 물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 분획물은 백심 뿌리 추출물을 상기 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 또는 물로 분획하여 수득한 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 또는 물 분획물 중 어느 하나일 수 있으며, 보다 구체적으로 에틸아세테이트 분획물일 수 있다. 상기 분획물은 분획 후 감압 농축할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 일 예로 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 일 예로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 일 예로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 계면활성제 함유된 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형 또는 비누일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 일 예로, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물은 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 활성성분으로 알파-비니페린을 포함하는 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 함유하여 티로시나제 활성을 저해하고 멜라닌 생성을 억제함으로써 피부 미백 효과가 우수하다.
또한, 본 발명은 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 미백 방법을 제공한다.
본 명세서에서 사용되는 용어, "도포"는 어떠한 적절한 방법으로 개체의 피부에 본 발명에 따른 조성물을 접촉시키는 모든 방법을 의미하며, 이를 통해 해당 조성물을 피부 내부로 흡수시키는 것을 목적으로 한다.
상기 추출물은 백심 뿌리를 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득할 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있고, 보다 구체적으로 에탄올일 수 있다.
상기 추출물, 분획물 또는 알파-비니페린은 총 조성물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 함유될 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유될 수 있다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 유기용매를 가하여 수득한 것일 수 있고, 보다 구체적으로 에틸아세테이트를 가하여 수득한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 총 분획물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 알파-비니페린을 함유할 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유할 수 있으며, 보다 더 구체적으로 0.1중량% 내지 1중량%로 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "멜라닌 색소의 과다침착(hyperpigmentation)"은 피부 또는 손발톱의 특정 부위에서 멜라닌의 과도한 증가에 의해 다른 부위에 비해 검게 또는 어둡게 되는 것을 의미한다.
상기 멜라닌 색소 과다침착 질환은 기미, 주근깨, 노인성 색소반, 또는 일광흑색증(solar lentigines) 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
상기 추출물은 백심 뿌리를 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득할 수 있으며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올일 수 있고, 보다 구체적으로 에탄올일 수 있다.
상기 추출물, 분획물 또는 알파-비니페린은 총 조성물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 함유될 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유될 수 있다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 유기용매를 가하여 수득한 것일 수 있고, 보다 구체적으로 에틸아세테이트를 가하여 수득한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 백심 뿌리 추출물의 분획물은 총 분획물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 알파-비니페린을 함유할 수 있고, 보다 구체적으로 0.01중량% 내지 10중량%로 함유할 수 있으며, 보다 더 구체적으로 0.1중량% 내지 1중량%로 함유할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 유효성분 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있으며, 이러한 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 한편, 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 바람직하게는 1일 당 0.0001-100mg/kg(체중)일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여의 경우, 피부에 국소적으로 도포, 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물이 멜라닌 색소 과다침착 질환을 예방 또는 치료를 위해 적용되는 점을 감안하면, 피부에 국소적으로 도포되어 이루어지는 것이 바람직하다.
본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 유효성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요기간 등을 고려하여 결정할 수 있으며 특정 범위의 농도로 제한되지 않는다.
본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질 중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 있어서, 본 발명의 약학적 조성물은 피부외용 제형을 갖는다. 상기 피부외용 제형은 파우더, 젤, 연고, 크림, 로션, 액제 또는 에어로졸 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린은 티로시나아제 활성을 저해하고 멜라닌 생성을 억제하여 피부 미백에 효과가 있다. 따라서 본 발명은 미백용 화장료 조성물 또는 멜라닌 색소 과다침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물의 HPLC를 통한 성분 분석 결과를 나타낸다.
도 2는 백심 뿌리 에탄올 추출물로부터 분리한 알파-비니페린의 HPLC를 통한 성분 분석 결과를 나타낸다.
도 3a는 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리한 알파-비니페린의 1H-NMR 분석 결과를 나타낸다.
도 3b는 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리한 알파-비니페린의 13C-NMR 분석 결과를 나타낸다.
도 4는 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리한 알파-비니페린의 멜라닌 생성 억제 효과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제형예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제형예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예 및 제형예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 백심( Caragana Sinica ) 뿌리 추출물의 제조
세절하여 음건한 백심 뿌리 500g을 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 5ℓ를 첨가한 후, 5시간 동안 환류추출하고 냉침하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 여과지 No.2(Whatman)로 다시 한번 여과하였다. 그 후, 감압 농축하여 백심 뿌리 에탄올 추출물 24g을 수득하였다.
실시예 2 ~ 5: 백심 뿌리 추출물의 분획물 제조
상기 실시예 1에서 얻은 백심 뿌리 에탄올 추출물 10g을 헥산과 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 통상적인 방법으로 용매분획을 실시한 후 감압농축하여 실시예 2의 헥산 분획물 2.12g, 실시예 3의 클로로포름 분획물 1.32g, 실시예 4의 에틸아세테이트 분획물 1.24g, 실시예 5의 부탄올 분획물 0.82g을 수득하였다.
실험예 1: 백심 뿌리 추출물의 분획물 유효성분 분리 및 분석
상기 실시예 2 ~ 5에서 얻은 백심 뿌리 추출물의 분획물 0.1g 각각을 메탄올로 용해하여 10㎖ 검액을 획득하였다. 또한, 알파-비니페린(C42H30O9:678.68) 표준품 10mg을 메탄올로 100ml가 되도록 용해한 후, 이 중 0.5㎖를 메탄올로 100㎖가 되도록 다시 용해하고 1/2, 1/4로 희석하여 표준액을 획득하였다. 상기 검액 및 표준액 20㎕씩을 가지고 HPLC 분석을 하여 알파-비니페린 함량을 측정하였고, 하기 [표 1]에 나타내었다.
HPLC를 통한 분석은 UV/VIS 151 검출기가 장착된 길슨 HPLC 시스템(Gilson Inc., Middleton, WI, USA)을 이용하였다. 고정상으로는 5㎛ 헥터-M C18 컬럼(Hector-M C18 column; 4.6mm×250mm; RS tech co., Daejeon, Korea)을 사용하였다. 이동상으로는 0.5% 포름산(formic acid; A)과 아세토니트릴(acetonitrile; B)의 혼합용액을 이용하였으며, 50분에 걸쳐 B의 함량을 30%에서 100%로 일정한 구배로 증가시키면서 진행하였다. 유속은 분당 0.8㎖이었고, 자외선 검출기의 검출파장은 280nm로 설정하였다. HPLC 분석결과를 도 1 및 도 2에 나타내었다.
또한, 상기 실시예 4의 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에 포함된 알파-비니페린을 NMR 분석을 통해 확인하였다.
구체적으로, 상기 실시예 4의 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물 15g을 실리카 겔 컬럼 크로마토그라피(silica gel column chromatography) (2.5×28cm, EtOAc:MeOH=10:1→100% MeOH)를 시행하여 8개의 분획(CE1 ~ CE8)으로 구분하였고, 분획 CE7에 대하여 실리카 겔 C.C.(2.5×28cm, CH2Cl2:MeOH=50:1→100% MeOH), 그리고 sephadex LH-20 C.C(70% MeOH 100% MeOH)를 시행하여 알파-비니페린 0.1g을 분리하였다.
NMR 기기로 1H-NMR은 바리안사(Varian, GEMINI, 500MHz), 13C-NMR은 바리안사(Varian, GEMINI, 200MHz)의 NMR 기기로 그 구조를 분석하였으며, 사용된 용매는 아세톤(acetone-d6)으로 알드리치(Aldrich)사에서 구입하여 사용하였고, 내부표준물질로 트리메칠실란을 사용하여 δ값(ppm)으로 나타내었으며, NMR 결과를 도 3a 및 도 3b에 나타내었다.
샘플 알파-비니페린 함량 (중량%)
실시예 2 -
실시예 3 0.12%
실시예 4 0.52%
실시예 5 0.17%
실험예 2: 백심 뿌리 추출물 및 이의 분획물의 미백 효과 확인
실험예 2-1: 백심 뿌리 추출물 및 이의 분획물의 티로시나제 활성 저해 효과 확인
티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되도록 하는 효소이다. 따라서, 상기 실시예 1 ~ 5에서 제조된 백심 뿌리 에탄올 추출물 및 이의 분획물의 티로시나제 활성 저해 효과를 확인하였다.
구체적으로, 티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 시그마(Sigma) 사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 L-티로신은 0.05M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1㎎/㎖ 용액으로 만들고, 상기 실시예 1 ~ 5의 백심 뿌리 에탄올 추출물 및 분획물을 0.05M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 0.05%, 0.1%, 및 0.2% 농도로 용해하였다. 그 다음, L-티로신 용액 0.5㎖를 시험관에 넣고 상기 백심 뿌리 추출물 및 분획물 시료액 0.5㎖를 가하고 37℃ 항온기에서 10분간 방치하였다. 그 후, 200unit/㎖ 티로시나제 0.5㎖를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시킨 후, 분광광도계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 백심 뿌리 추출물 대신 완충용액 0.5㎖를 넣은 것을 사용하였으며 비교군으로는 피부 미백제로 잘 알려진 알부틴을 사용하였다. 이때, 티로시나제에 대한 활성 저해율(%)은 하기 [수학식 1]에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 하기 [표 2]에 나타내었다.
Figure pat00002
시료 농도 티로시나아제 활성 저해율(%)
실시예 1
0.2% 67.2
0.1% 45.8
0.05% 32.2
실시예 2
0.2% 45.5
0.1% 23.2
0.05% 13.2
실시예 3
0.2% 53.1
0.1% 31.2
0.05% 16.4
실시예 4
0.2% 79.2
0.1% 55.8
0.05% 36.2
실시예 5
0.2% 49.7
0.1% 29.2
0.05% 12.4
알부틴
0.2% 78.7
0.1% 38.4
0.05% 21.2
그 결과, 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 ~ 5의 백심 뿌리 에탄올 추출물 및 분획물은 티로시나제 활성을 농도의존적으로 저해하였다. 특히, 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물과 양성 대조군인 알부틴을 비교하였을 때 유사한 저해능을 나타내었으므로, 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 티로시나제 활성 억제 효과가 뛰어난 것을 확인하였다.
실험예 2-2: 백심 뿌리 추출물 및 이의 분획물의 멜라닌 생성 억제 효과 확인
상기 실시예 1 ~ 5에서 제조된 백심 뿌리 에탄올 추출물 및 이의 분획물의 미백 효과를 확인하기 위하여, B16F1 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다.
구체적으로, B16F1 멜라닌 형성 세포는 마우스에서 유래한 세포군으로, ATCC(American Type Culture Collection)로부터 분양 받아 사용하였다. 상기 B16F1 멜라닌 형성 세포를 6웰 플레이트에 각 웰당 2×105 농도로 분주하고, 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 분주하였다. 이후, 상기의 실시예 1 ~ 5의 백심 뿌리 에탄올 추출물 및 분획물을 농도별로 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후, 세포를 트립신-EDTA로 떼어내고, 세포 수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄(Lotan: Cancer Res., 40: 3345-3350, 1980)의 방법을 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS로 1회 세척한 후 균질화 버퍼액(50mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2mM PMSF) 1ml를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포 여액에 1N NaOH(10% DMSO)를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후, 마이크로 플레이트 판독기로 405nm에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라닌 형성 세포의 멜라닌 생성 저해율(%)은 하기 [수학식 2]에 의하여 계산하였으며, 그 결과를 [표 3]에 나타내었다.
Figure pat00003
A: 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양
B: 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양
시료 처리 농도(㎍/㎖) 멜라닌 함량(pg/cell)
무처리군 0.2 4.41
실시예 1
200 1.09
100 1.74
실시예 2
200 1.35
100 2.12
실시예 3
200 1.25
100 1.81
실시예 4
200 0.79
100 1.34
실시예 5
200 2.88
100 3.31
알부틴 200 1.07
100 1.61
그 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 ~ 5의 백심 뿌리 추출물 및 이의 분획물은 멜라닌 생성을 농도의존적으로 저해하는 것을 확인하였다. 특히, 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물은 멜라닌 생성 억제능이 미백제로 알려진 알부틴보다 우수하게 나타나는 것을 확인하였다.
실험예 2-3: 알파- 비니페린의 멜라닌 생성 억제 효과 확인
상기 실시예 4의 백심 뿌리 분획물에서 분리한 알파-비니페린의 미백 효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라닌 형성 세포에 대한 멜라닌 생성 억제 효과를 확인하였다.
구체적으로, 상기 실시예 4의 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리한 알파-비니페린 또는 알부틴과 자극제 α-MSH를 동시에 처리한 다음 70-74 시간 후 상기 실시예 2-2와 같이 멜라닌 양을 측정하였다.
그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 알파-비니페린의 α-MSH에 의해 유도한 멜라닌 생성 억제 효과가 시료 농도 4μM에서 8%의 억제율, 6μM에서 21% 그리고 8μM에서 63%의 억제율을 나타내었고, IC50값은 7μM이었다. 반면, 대조물질인 알부틴의 α-MSH 자극으로 유도한 멜라닌 생성에 대한 억제 효과는 시료농도 100μM에서 13%의 억제율, 200μM에서 44% 그리고 400μM에서 73%의 억제율을 나타내었고, IC50값은 242μM이었다. 따라서, 알파-비니페린이 α-MSH로 유도한 멜라닌 생성에 대한 미백 효과가 알부틴보다 약 35배 높음을 확인하였다.
제형예 1: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 가용화 제형의 제조
백심 뿌리 추출물의 분획물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 안정성을 확인하기 위하여, 부틸렌글리콜, 정제수가 50:50의 비율로 혼합된 용매에 상기 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 용해시킨 후, 하기 [표 4]와 같이 가용화 제형을 제조하였다.
성분 함량 (%)
수상 정제수 To 100
글리세린 10 ~ 25
디프로필렌글라이콜
베타인
D-판테놀
소디움히알루로네이트
점증제 적량
금속이온 봉쇄제 적량
가용화상 피이지-60하이드로제네이티드캐스터오일 0 ~ 2
피이지-40하이드로제네이티드캐스터오일 0 ~ 2
다가알코올 0 ~ 10
향료 적량
에탄올 0 ~ 20
첨가 I 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물 3.2
첨가 II 보존제 적량
기타 첨가제 적량
<제조방법>
(1) 수상과 가용화상을 각각 균일하게 혼합 및 용해시켰다.
(2) 수상에 가용화상을 넣고 혼합 및 가용화 시켰다.
(3) 첨가 I은 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 함유한 상으로 가용화 한 후 투입하여 혼합시킨 후 첨가 II를 혼합하여 완료하였다.
제형예 2: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 에센스 제형의 제조
백심 뿌리 추출물의 분획물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 안정성을 확인하기 위하여, 부틸렌글리콜, 정제수가 50:50의 비율로 혼합된 용매에 상기 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 용해시킨 후, 하기 [표 5]와 같이 에센스 제형을 제조하였다.
성분 함량 (%)
수상 정제수 To 100
세테아리스-6올리베이트 0.1 ~ 3
글리세린 10 ~ 25
1,2-프로판디올
소디움히알루로네이트
점증제 적량
금속이온 봉쇄제 적량
유상 피이지-100스테아레이트 0.1 ~ 1
글리세릴스테아레이트 0.1 ~ 1
폴리소르베이트 60 0.1 ~ 1
세틸알코올 0.1 ~ 1
베헤닐알코올 0.1 ~ 1
스쿠알란 5 ~ 20
토코페릴아세테이트 0.1 ~ 0.5
첨가상 I 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물 3.2
첨가상 II 적량
보존제 적량
기타 첨가제 적량
<제조방법>
(1) 수상과 유상을 가온 하여 각각 균일하게 혼합 및 용해시켰다.
(2) 75℃에서 수상에 유상을 넣고 혼합시켜 유화시켰다
(3) 첨가상 I은 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유한 상으로 50℃에서 투입하고 혼합시킨 후 첨가상 II를 혼합하였다.
제형예 3: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 크림 제형의 제조
백심 뿌리 추출물의 분획물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물의 안정성을 확인하기 위하여, 부틸렌글리콜, 정제수가 50:50의 비율로 혼합된 용매에 상기 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 용해시킨 후, 하기 [표 6]과 같이 크림 제형을 제조하였다.
성분 함량 (%)
수상 정제수 To 100
글리세린 10 ~ 25
베타인
소디움히알루로네이트
점증제 적량
금속이온 봉쇄제 적량
유상 피이지-100스테아레이트 0.1 ~ 2
글리세릴스테아레이트 0.1 ~ 2
폴리소르베이트 60 0.1 ~ 2
스테아릭애씨드 0.1 ~ 2
세테아릴알코올 0.1 ~ 2
카프릭카프릴릭트리글리세라이드 10 ~ 30
토코페릴아세테이트 0.1 ~ 0.5
첨가 I 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물 3.2
첨가 II 적량
보존제 적량
기타 첨가제 적량
<제조방법>
(1) 수상과 유상을 가온 하여 각각 균일하게 혼합 및 용해시켰다.
(2) 75℃에서 수상에 유상을 넣고 혼합시켜 유화시켰다
(3) 첨가상 I은 실시예 4의 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유한 상으로 50℃에서 투입하고 혼합시킨 후 첨가상 II를 혼합하였다.
실험예 3: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 화장료 조성물의 안정성 확인
실험예 3-1: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 화장료 조성물의 원료 안정성 확인
원료 안정성을 확인하기 위하여, 상기 제형예 1 내지 제형예 3의 가용화 제형, 에센스 제형, 크림 제형을 4℃, 30℃, 45℃, 일광의 조건에 12주 동안 보관한 후, 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석을 통해 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물에 함유된 알파-비니페린 성분의 경시 변화를 관찰하였고, 그 결과를 하기 [표 7]에 나타내었다.
경과
시간
알파-비니페린(초기 함량 대비 %)
가용화 제형 에센스 제형 크림 제형
4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광
초기 99.9 100 99 99.2 99 99.8 100 99.3 100 99.5 99.3 100
1주 96.2 96.7 97.2 97 97.3 96.6 96 97.7 97 96.2 95.7 94.4
3주 97 97.6 97.3 94.3 97 98.1 98.5 97.1 96.7 97.7 98.3 92.4
5주 97.6 98.2 97.7 90.9 96.1 96.1 98.8 96.3 95.8 96.8 99.4 92
8주 96.6 99 94.6 86.4 94.3 96 96.6 96.9 96.4 95.2 100.2 90.9
12주 94.9 94.2 98.7 92.3 97 95.7 98.1 94.2 95.9 93.9 101.7 88.9
결과 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정 안정
그 결과, 표 7에 나타낸 바와 같이, 가용화 제형, 에센스 제형 및 크림 제형 모두 고온 조건 및 일광 조건에서 백심 뿌리 추출물의 에틸아세테이트 분획물 내 유효성분인 알파-비니페린의 안정성이 우수함을 확인하였다.
실험예 3-2: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 화장료 조성물의 제형 안정성 확인
제형 안정성을 확인하기 위하여, 상기 제형예 1 내지 제형예 3의 가용화 제형, 에센스 제형, 크림 제형을 4℃, 30℃, 45℃, 일광의 조건에 12주 동안 보관한 후, 육안평가와 관능평가를 통해 색, 취, 제형 변화를 관찰하였으며, 그 결과를 하기 [표 8] 내지 [표 10]에 나타내었다. 이때, 색, 취 제형 변화 정도는 하기의 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.
<평가 기준>
변화 무: ○
약간의 변화: △
유의적 변화: ×
경과
시간
가용화 제형
취 변화 색 변화 제형 변화
4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광
1주
2주
4주
8주
12주
경과
시간
에센스 제형
취 변화 색 변화 제형 변화
4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광
1주
2주
4주
8주
12주
경과
시간
크림 제형
취 변화 색 변화 제형 변화
4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광 4℃ 30℃ 45℃ 일광
1주
2주
4주
8주
12주
그 결과, 표 8 내지 표 10에 나타낸 바와 같이, 가용화 제형, 에센스 제형 및 크림 제형 모두 고온 조건 및 일광 조건에서 안정성이 우수함을 확인하였다.
실험예 3-3: 백심 뿌리 추출물의 분획물로부터 분리된 알파- 비니페린의 안정성 확인
알파-비니페린의 안정성을 확인하기 위하여, 상기 실험예 1의 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물에서 분리한 알파-비니페린 및 백심 뿌리 추출물에서 분리한 코보페놀 A를 50℃ 조건에 2주 동안 보관한 후, 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 HPLC 분석을 통해 상기 코보페놀 A 및 알파-비니페린 성분의 함량 변화를 관찰하였고, 그 결과를 하기 [표 11]에 나타내었다.
시험 조건 및 기간 코보페놀 A 알파-비니페린
초기 121.4ppm 252.8ppm
1주 115.6ppm 249.60ppm
95.2% 98.7%
2주 103.6ppm 253.45ppm
85.3% 100.3%
그 결과, 표 11에 나타낸 바와 같이, 레스베라트롤 삼량체인 알파-비니페린은 50℃의 고온에서 2주 동안 함량이 떨어지지 않은 것으로 보아, 레스베라트롤 사량체 코보페놀 A에 비하여 안정성이 우수함을 확인하였다.
실험예 4: 백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 자극 확인
백심 뿌리 추출물의 분획물을 함유하는 화장료 조성물의 피부 자극을 확인하기 위하여, 상기 제형예 3의 크림 제형의 피부 자극에 대한 평가를 실시하였다.
구체적으로, 성인 30명을 대상으로 등 부위에 5×20cm 크기로 상기 제형예 3에서 제조한 백심 뿌리 에탄올 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 농도의존적으로 함유하는 크림 제형의 일정량(20㎕)을 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고, 1시간, 24시간 경과 후 육안으로 피부 상태 변화를 판독하였으며, 그 결과를 [표 12]에 나타내었다. 이때, 피부상태의 변화 정도는 하기의 피부상태 평가 기준에 따라 분류하여 평가하였다.
<피부 상태 평가 기준>
0: 변화 없음
1: 극히 조금 변함
2: 조금 변함
3: 조금 심하게 변함
4: 심하게 변함
5: 극히 심하게 변함
피검자
(성별, 피부타입)
경과시간 분획물 함량에 따른 피부 상태
3.2% 6.4% 16%
1(남, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
2(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
3(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
4(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
5(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
6(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
7(남, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
8(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
9(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
10(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
11(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
12(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
13(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
14(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
15(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 1
16(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
17(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
18(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
19(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
20(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
21(남, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
22(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
23(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 1
24(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
25(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
26(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
27(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
28(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
29(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 0
30(여, 중성) 1시간 0 0 0
24시간 0 0 1
그 결과, 표 12에 나타낸 바와 같이, 높은 함량의 알파-비니페린을 포함한 크림 제형에서도 피부 자극이 적은 것을 확인하였다.

Claims (8)

  1. 백심(Caragana Sinica) 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린(α-viniferin)을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 백심 뿌리를 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득하는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 추출물, 분획물 또는 알파-비니페린은 총 조성물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 분획물은 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 유기용매를 가하여 수득하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
  5. 제 4항에 있어서, 상기 분획물은 총 분획물 중량 대비 0.001중량% 내지 30중량%로 알파-비니페린을 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 미백 방법.
  7. 백심 뿌리 추출물, 이의 분획물 또는 이로부터 분리된 알파-비니페린을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 색소 과다침착 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  8. 제 7항에 있어서, 상기 멜라닌 색소 과다침착 질환은 기미, 주근깨, 노인성 색소반 또는 일광흑색종인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
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