KR20170000366A - 감귤 추출물 및 꿩의비름 추출물을 포함하는 항산화, 및 항염증용 조성물 - Google Patents
감귤 추출물 및 꿩의비름 추출물을 포함하는 항산화, 및 항염증용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 하기 꿩의비름 추출물 또는 감귤추출물과 꿩의비름 추출물을 함께 포함하는 항산화, 및 항염증용 조성물, 특히 화장료, 약학 또는 건강식품용 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료, 약학 또는 건강식품용 조성물은 부작용이 적어 인체에 안전하면서도 우수한 항산화, 또는 항염증 효과를 가진다.
Description
본 발명은 항산화, 및 항염증과 관련된 조성물, 특히 화장료, 약학, 건강식품용 조성물에 관한 것으로, 적은 양으로도 항산화, 및 항염증 효과가 우수한 화장료, 약학, 건강식품용 조성물에 관한 것이다.
생체 외부로부터 유입되거나, 생체 내에서 발생하는 활성 산소는 생체의 노화를 촉진시키거나, 암을 발생시키는 등 많은 문제의 원인이 된다. 따라서 활성 산소에 의한 산화를 억제하는 항산화 물질에 대한 개발 및 연구가 많이 이루어 지고 있다. 항산화 물질은 동, 식물계에 널리 분포되어 있으며 과일과 채소에 많은 페놀성 화합물, 플라보노이드, 토코페롤, 비타민 C, 셀레늄 등이 알려져 있다. 다만, 천연에 존재하는 항산화 물질은 피부 적용 시 실질적으로 충분한 효과를 기대할 수 없는 실정이다. 따라서, 항산화력이 뛰어나고 가격이 저렴한 합성 항산화제가 많이 사용되고 있으나, 인체 부작용 등 안전성에 대한 우려로 그 사용이 제한된다.
또한, 염증은 상처나 질병에 반응하는 인체의 면역 반응으로, 자외선이나 활성산소, 자유라디칼 등의 산화적 스트레스 등이 염증성 인자를 활성화시켜 각종 질병 및 피부의 노화를 일으킨다. 혈관 활성 폴리펩타이드인 키닌(kinin), 플라스민(plasmin), 보체 (complement) 등이 혈관 확장과 수축 및 주화성(chemotaxis) 작용을 하고, 그 외에 인터루킨-6(IL-6) 등과 같은 림포카인과 아라키돈산(arachidonic acid) 등이 염증 반응을 담당한다. 아라키돈산은 싸이클로옥시게나아제(cyclooxygenase) 혹은 리포옥시게 나아제(lipooxygenase)의 2가지 경로를 거쳐 염증 매개체인 프로스타글란딘(prostaglandin), 류코트리엔(lukotriene)들로 대사되어 다양한 염증 반응을 매개한다.
한편, 염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체 반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 것을 항염제라 한다. 현재까지 항염의 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드계로 플루폐나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin) 등이 있고 스테로이드계통으로 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손 (dexamethasone) 등이 있다. 또한, 알란토인, 아즈엔, 하이드로코티손 등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있으나, 이들 물질은 피부에 대한 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 염증 완화 효과를 기대할 수 없는 문제점이 있다.
따라서 본 발명은 위와 같은 문제점을 해결하고, 항산화 효과 및 항염증 효과가 우수한 화장료 조성물, 약학 조성물 및 식품 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명이 이루고자 하는 다른 기술적 과제는 안전한 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료, 약학, 또는 식품 조성물을 제공하고자 한다.
다시 말해, 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 상기 효능이 우수한 자생식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 또한, 감귤 추출물 및 꿩의비름 추출물의 항산화 용도, 및 항염증 용도를 제공하고자 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 꿩의비름(Hylotelephium erythrostictum) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용, 또는 항염증용 조성물, 바람직하게는 화장료 조성물, 약학 조성물, 또는 건강식품용 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 오랫동안 사용되어 안전성이 입증된 천연물 중에서 꿩의비름 추출물이 항산화 효과, 또는 항염증 효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
꿩의비름(학명: Hylotelephium erythrostictum)은 돌나물과에 딸린 여러해살이풀이다.
본 발명은 특히 꿩의비름 지상부를 이용할 수 있다. 꿩의비름은 부위마다 상이한 활성을 가지는 것을 확인하였으며, 특히 본 발명의 발명자들은 꿩의비름 뿌리, 잎, 꽃 등에 비해서 꿩의비름 지상부가 특히 뛰어난 활성을 가진다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 꿩의비름 추출물은 본 발명이 속한 분야에서 통상적인 방법으로 추출해낸 추출물을 의미하며, 추출 후 분획, 분리, 여과 등의 방법으로 추가적으로 정제될 수 있다.
예를 들어, 본 발명에 따른 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름의 용매 추출물 또는 이의 건조물일 수 있다. 꿩의비름 추출 시 추출 용매는 천연물 추출에 사용되는 용매이면 제한 없이 사용할 수 있으며, 예를 들어, 정제수; 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글라이콜, 프로필렌글라이콜 등의 다가 알코올; 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들은 혼합 용매를 이용할 수 있으나, 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올과 같은 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합 용매를 사용하는 것이 바람직하고, 정제수, 에탄올 또는 이들의 혼합용매를 사용하는 것이 더욱 바람직하며, 정제수와 에탄올의 혼합용매를 사용하는 것이 본 발명의 목적상 더욱 바람직하다.
상기 추출 용매의 양은 꿩의비름 중량대비 10 내지 100배가 이용될 수 있고, 바람직하게는 20 내지 80배가 이용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 30 내지 50배가 이용될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 꿩의비름 추출물을 추출하는 방법은 교반 추출, 냉침 추출, 열수 추출, 침지 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 고온 추출, 고압 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 당업계의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있으며, 가온하여 환류 추출 또는 상온에서 추출하는 것이 바람직하다. 추출 시 온도는 10 내지 30℃인 것이 바람직하고, 상기 추출 시간은 1일 내지 20일인 것이 바람직하며, 1 내지 5일인 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
더욱 구체적으로, 꿩의비름을 음건하여 분쇄한 후, 추출용매를 꿩의비름 분쇄물의 1 내지 20배 부피량만큼 가하여 추출하고 나서, 선택적으로 (감압)농축, 건조 또는 정제 과정을 거쳐 제조할 수 있다. 보다 구체적으로, 전술한 방법과 같이 추출용매를 가하여 유효성분물질을 추출하되 (a) 냉각 콘덴서가 장치되어 용매가 증발되는 것을 방지한 상태에서 50 내지 100℃의 온도 조건에서 1 내지 20시간 가열하여 추출하거나, (b) 5 내지 37℃의 온도 조건에서 1 내지 15일간 침적시켜 유효성분을 추출할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 또 다른 실시예에 따르면, 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름 추출물의 분획물일 수 있다.
본 발명의 꿩의비름 분획물은 상기 꿩의비름 추출물(바람직하게는 탄소수 1-4의 저급 알코올 추출물)을 헥산, 클로로포름, 부탄올 및 에틸 아세테이트와 같은 물보다 극성이 낮은 용매로 분획하여 얻을 수 있으며, 바람직하게는 헥산 또는 클로로포름을 이용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
특히, 본 발명에 따른 효과를 달성한다는 목적에서 본 발명에 따른 꿩의비름 추출물은 탄소수 1-4의 저급 알코올 추출물의 헥산 또는 클로로포름 분획물인 것이 바람직하다. 가장 바람직하게는 100% 에탄올 추출물인 것이 바람직하다.
상기 분획물은 건조시키기 전의 액상 상태의 꿩의비름 추출물을 이용하거나 건조된 꿩의비름 추출물을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매 등 적당한 용매에 현탁 또는 용해시킨 후, 헥산, 클로로포름, 부탄올 또는 에틸 아세테이트와 같은 물보다 극성이 낮은 용매를 순차적으로 첨가하여 각각의 층을 분리한 다음 각 층을 감압 농축 및/또는 건조시켜 수득할 수 있다.
이때, 상기 감압 농축은 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
또한, 본 발명에 따른 “건조”는 감압 건조, 진공 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결 건조일 수 있으나, 동결 건조를 하는 것이 더욱 바람직하다. 다만 본 발명은 이러한 건조 방법에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 실시예는 꿩의비름 추출물의 항산화용, 또는 항염증용이라는 새로운 용도를 제공한다.
본 발명의 발명자들은 꿩의비름 추출물이 자유 라디칼을 소거하여 항산화 효과, NO 생성을 억제하여 항염증 효과가 있다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명에 있어서, '항산화 효과'라 함은 세포내 대사 또는 자외선의 영향으로 인한 산화적 스트레스에 따라 반응성이 높은 자유 라디칼(free radical) 또는 활성산소종(reactive oxygen species;ROS)에 의한 세포의 산화를 억제하는 것을 말하며, 자유 라디칼 또는 활성산소종을 제거하여 이로 인한 세포의 손상이 감소되는 것을 포함한다.
본 발명에 있어서, '항염증 효과'라 함은 염증을 억제하는 것을 말하며, 상기 염증은 어떤 자극에 대한 생체조직의 방어반응의 하나로, 조직 변질, 순환 장애와 삼출, 조직 증식의 세가지를 병발하는 복잡한 병변을 말한다. 보다 구체적으로 염증은 선천성 면역의 일부이며 다른 동물에서처럼 인간의 선천성 면역은 병원체에 특이적으로 존재하는 세포 표면의 패턴을 인식한다. 식세포는 그런 표면을 가진 세포를 비자기로 인식하고 병원체를 공격한다. 만일 병원균이 신체의 물리적 장벽을 깨고 들어온다면 염증반응이 일어난다. 염증반응은 상처부위에 침입한 미생물들에 대한 적대 환경을 만드는 비특이적인 방어작용이다. 염증반응에서, 상처가 나거나 외부 감염체가 체내로 들어왔을 때, 초기단계 면역반응을 맡고 있는 백혈구들이 몰려들어 사이토카인을 발현한다. 따라서 세포 내 사이토카인의 발현양이 염증반응 활성화의 지표가 된다. 염증과 관련된 피부질환의 예로는 아토피 피부염, 건선, 방사선, 화학물질, 화상 등에 의해 촉발되는 홍반성 질환, 산 화상, 수포성 피부병, 태선 모양 종류 질환, 알레르기에 기한 가려움증, 지루성 습진, 여드름, 심상성 천포창, 다형 삼출성 홍반, 결절 홍반, 귀두염, 음문염, 원형 탈모증과 같은 염증성 모발 손실, 피부 T-세포 림프종 등이 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
바람직하게 본 발명의 꿩의비름 추출물은 여드름을 유발하는 염증성 질환에 특히 우수한 효과를 나타낼 수 있으며, 여드름 개선을 위한 화장료 조성물로 제조될 수 있다.
본 발명은 또한 꿩의비름 추출물을 포함하는 항산화, 및 항염증용 화장료의 제형으로 제공할 수 있다.
상기 꿩의비름 추출물을 화장품으로 사용하는 경우, 상기 꿩의비름 추출물을 유효성분으로 함유하여 제조되는 화장품은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등과 같은 화장수, 훼이셜 로션, 바디로션 등과 같은 유액, 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등과 같은 크림, 에센스, 화장연고, 스프레이, 젤, 팩, 선 스크린, 메이크업 베이스, 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션, 파우더, 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일과 같은 메이크업 제거제, 클렌징 폼, 비누, 바디 워쉬 등과 같은 세정제 등의 제형을 가질 수 있다.
또한, 상기 화장품은 상기 꿩의비름 추출물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
상기 꿩의비름 추출물은 화장품으로 제품화되는 경우에 유효성분이 단기간 내에 피부에 머무르게 되는 메이크업 제거제, 세정제 등과 같은 워쉬-오프(wash-off) 타입의 화장품의 경우에는 비교적 높은 농도의 꿩의비름 추출물을 포함할 수 있을 것이다. 반면, 유효성분이 장기간 동안 피부에 머무르게 되는 화장수, 유액, 크림, 에센스 등의 리브-온(leave-on) 타입의 화장품의 경우에는 워쉬-오프 타입의 화장품에 비해 낮은 농도의 꿩의비름 추출물을 포함해도 무방할 것이다. 이에 제한되는 것은 아니나, 본 발명의 한 구체예에서, 상기 조성물은 상기 꿩의비름 추출물을 전체 조성물 중량에 대하여 0.0001 중량% 내지 10 중량%(바람직하게는 0.01 중량% 내지 1 중량%)로 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물이 상기 꿩의비름 추출물을 0.0001 중량% 미만으로 포함할 경우에는 충분한 항산화, 및 항염증 효과를 기대할 수 없고, 10 중량%를 초과하여 포함할 경우에는 알러지 등 원치 않는 반응이 발생하거나 피부 안전성에 문제가 있을 수 있으므로 이를 방지하기 위한 것이다.
또한, 본 발명의 상기 꿩의비름 추출물을 의약품으로 사용하는 경우, 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 예컨대, 공지의 항산화, 및 항염증 성분을 포함할 수 있을 것이다. 추가적인 항산화, 및 항염증 성분을 포함하게 되면 본 발명의 조성물의 항산화, 및 항염증 효과는 더욱 증진될 수 있다.
본 발명의 발명자들은 상기 꿩의비름 추출물과 감귤 추출물을 혼합하는 경우 꿩의비름 추출물 및 감귤 추출물 각각을 사용하는 경우보다 현저히 향상된 효과를 가져온다는 사실을 확인하였다.
즉, 꿩의비름 추출물 단독을 사용하는 경우보다 감귤 추출물을 함께 사용하는 경우, 항산화 활성이 향상되거나; 또는 항염활성이 향상된다는 사실을 실험을 통해 확인하였다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
보다 구체적으로, 예를 들어, 산제는 본 발명의 추출물과 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용되는 적당한 부형제를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 발명의 추출물; 약제학적으로 허용되는 적당한 부형제; 및 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약제학적으로 허용되는 적당한 활택제화 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.
본 발명의 꿩의비름 추출물은 치료해야할 질환 및 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약제학적으로 허용되는 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다. 일정 시간 동안 약물을 지속적으로 방출할 수 있는 데포(depot) 제형 또한 본 발명의 범위에 포함된다.
본 발명의 꿩의비름 추출물을 식품 조성물로 사용하는 경우, 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 꿩의비름 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 비스켓, 떡, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강 식품을 모두 포함한다.
본 발명의 꿩의비름 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 중의 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 50 중량%로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 식품 조성물 중 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 꿩의비름 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상기 향미제는 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.
본 발명의 꿩의비름 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
본 발명의 꿩의비름 추출물을 포함하는 조성물은 항산화 효과, 또는 항염증 효과를 나타낸다.
본 발명의 꿩의비름 추출물을 포함하는 조성물은 안전하면서도 우수한 화장품 원료, 약학 성분, 건강 기능 식품 원료로 이용될 수 있다.
도 1은 꿩의비름 추출물의 전체 플라보노이드 함량 및 폴리페놀 함량을 보여준다.
도 2는 꿩의비름 추출물의 항산화 활성을 보여주는 그래프이다. DPPH 라디칼 소거능 활성, ABTS 라디칼 소거능 활성 결과, superoxide 라디칼 소거능 및 FRAP 환원력 분석 결과를 확인한 결과, 꿩의비름 지상부는 농도 의존적으로 항산화 활성을 갖는 것을 확인할 수 있었다.
도 3은 꿩의비름 추출물의 NO 소거능을 통해 항염증 활성을 보여주는 그래프이다. 또한, 본 발명의 꿩의비름 추출물이 세포독성이 없음을 확인할 수 있다.
도 4 및 도 5는 꿩의비름 추출물; 및 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피 추출물의 혼합물이 사이토카인 발현에 미치는 영향을 확인한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 6은 꿩의비름 부위별 항산화 활성을 확인한 결과를 나타낸 그래프이다. 도 6에서 확인할 수 있는 바와 같이, 꿩의비름 지상부는 다른 부위에 비해 항산화 활성이 매우 뛰어난 것을 알 수 있다.
도 7은 꿩의비름, 온주밀감 과피, 및 꿩의비름과 온주밀감 과피의 항산화 활성을 확인한 결과이다. 도 7에서 확인할 수 있듯이, 꿩의비름과 온주밀감 과피를 함께 사용하는 경우 같은 농도에서도 더욱 우수한 활성을 갖는 것을 알 수 있다.
도 8은 P.acnes를 처리한 후 THP-1 세포의 TNF-a 생산량과 세포 생존률(Cell viability)을 확인한 결과를 나타낸다.
도 2는 꿩의비름 추출물의 항산화 활성을 보여주는 그래프이다. DPPH 라디칼 소거능 활성, ABTS 라디칼 소거능 활성 결과, superoxide 라디칼 소거능 및 FRAP 환원력 분석 결과를 확인한 결과, 꿩의비름 지상부는 농도 의존적으로 항산화 활성을 갖는 것을 확인할 수 있었다.
도 3은 꿩의비름 추출물의 NO 소거능을 통해 항염증 활성을 보여주는 그래프이다. 또한, 본 발명의 꿩의비름 추출물이 세포독성이 없음을 확인할 수 있다.
도 4 및 도 5는 꿩의비름 추출물; 및 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피 추출물의 혼합물이 사이토카인 발현에 미치는 영향을 확인한 결과를 보여주는 그래프이다.
도 6은 꿩의비름 부위별 항산화 활성을 확인한 결과를 나타낸 그래프이다. 도 6에서 확인할 수 있는 바와 같이, 꿩의비름 지상부는 다른 부위에 비해 항산화 활성이 매우 뛰어난 것을 알 수 있다.
도 7은 꿩의비름, 온주밀감 과피, 및 꿩의비름과 온주밀감 과피의 항산화 활성을 확인한 결과이다. 도 7에서 확인할 수 있듯이, 꿩의비름과 온주밀감 과피를 함께 사용하는 경우 같은 농도에서도 더욱 우수한 활성을 갖는 것을 알 수 있다.
도 8은 P.acnes를 처리한 후 THP-1 세포의 TNF-a 생산량과 세포 생존률(Cell viability)을 확인한 결과를 나타낸다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위하여 하기 실시예 등을 들어 설명한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 본 발명의 구체적 이해를 돕기 위해 예시적으로 제공되는 것이다.
<실시예 1> 꿩의비름 추출물의 제조
본 실험에 사용된 꿩의비름 100% 추출물은 꿩의비름의 지상부를 음건하여 분쇄후 100% 에탄올로 50℃에서 추출하였다. 감귤의 경우 과육과 과피를 분리하여 건조한 후 분쇄하여 70% 에탄올로 상온(25℃)에서 추출하여 준비한 시료를 사용하였다.
<실시예 2> 꿩의비름과 온주밀감 과피의 혼합 추출물 제조
온주밀감 과피 추출물은 9월 수확한 미숙과를 이용하였다. 껍질과 과육을 분리해서 건조 후 70% 에탄올에 침지시켜 추출하였다. 추출후에는 감압농축기를 이용하여 용매를 제거하고 분말로 만든 후 실험에 사용하였다.
실시예 1에서 획득한 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피 추출물을 혼합한 혼합 추출물을 제조하였다.
<플라보노이드 및 폴리페놀 함량>
1. 총 폴리페놀 함량 측정
70% 에탄올에 침지하여 추출하였고, 추출 후 추출액은 종이필터로 거르고 0.45 μm 실린지 필터를 이용하여 추가적으로 여과하여 꿩의비름 추출물을 준비하였다. 준비된 추출물은 감압농축하여 파우더로 만들어 실험에 사용하였다. 상기 여과하여 제조한 꿩의비름 추출물을 100 μl씩 테스트 튜브에 넣고, 0.2 N folin-ciocalteu's phenol reagent 용액 500 ml을 첨가한 후 호일로 싸서 빛을 차단하였다. 10% 탄산수소나트륨(Na2CO3) 용액 1.3 ml과 증류수 6 ml을 첨가하였다. 실온에서 2시간 동안 반응시킨 후 765 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 총 폴리페놀 함량 측정을 위하여 대조군으로 다양한 농도의 갈산(gallic acid)을 사용하여 정량곡선을 제작한 후 이에 꿩의비름 추출물로부터의 측정값을 대입하여 총 폴리페놀 함량을 계산하였다.
2. 총 플라보노이드 함량 측정
상기 방법과 동일한 방법으로 제조한 꿩의비름 추출물 10 ml을 플라스크에 준비하였다. 1N NaOH 용액 1 ml과 디에틸글리콜 10 ml을 첨가하였다. 총 플라보노이드 함량 측정을 위한 대조군으로는 퀘르세틴 (quercetin)을 농도별로 준비하여 시료와 동일한 방법으로 처리하였다. 시료 또는 대조군과 NaOH 및 디에틸글리 콜 혼합물을 실온에 방치하여 1시간 동안 반응시킨 후 420 nm에서 흡광도를 측정하여 총 플라보노이드 함량을 계산하였다.
3. 결과
도 1에서 확인할 수 있듯이, 꿩의비름 추출물은 총 플라보노이드 함량이 약 200㎍/㎎으로 나타났으며, 총 폴리페놀 함량은 약 250㎍/㎎ 으로 나타났다.
<항산화 활성>
상기 꿩의비름 추출물의 항산화 활성을 측정하기 위하여 하기의 방법으로 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 및 ABTS(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid))에 대한 억제활성을 확인하였다.
1. DPPH 라디칼 소거활성
DPPH는 자체적으로 보유하고 있는 홀수 개의 안정한 라디칼 전자로 인해 517 nm에서 강한 흡수를 나타내는 한편, 폴리페놀과 같은 수소에 전자를 제공하는 전자 공여체와 반응할 경우 전자가 수소 라디칼을 받아 페녹시 (phenoxy) 라디칼을 형성하여 안정한 형태의 분자로 변하고, 따라서 상기 파장에서의 흡광도가 감소한다. 이때 공여된 전자는 비가역적으로 결합하며 그 수에 비례하여 DPPH의 진보라색은 점점 옅어지며 흡광도가 감소하였다. 12웰 플레이트에 시료 1 ml와 0.15 mM DPPH(Sigma Co., USA) 1 ml를 첨가한 후 진탕배양기에 30℃ 에서 5분간 반응시킨 후 실온에서 30분 동안 추가적으로 반응시킨 후 분광광도계를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 항산화 활성 즉, 환원력은 50% 저해활성 농도(inhibition concentration at 50% of activity, IC50)로 나타내었다.
DPPH 항산화 효과(%)=(흡광도blank-흡광도sample)/흡광도blankX100
2. ABTS 라디칼 소거활성
ABTS 라디칼 소거 실험은 총 항산화 활성(total antioxidant activity, TAA)의 측정방법 중의 한 가지로 무색의 환원된 ABTS가 산화되며서 특징적인 청록색을 띄는 ABTS+ (ABTS radical cation)가 형성되는 것을 이용한 방법이다. 이 청록색 ABTS+는 산화될 수 있는 물질과 반응하면 본래의 무색 ABTS로 환원되고 그와 반응한 물질의 산화가 일어나게 되어 흡광도의 감소가 일어나게 되고 항산화 능력을 측정할 수 있다.
7 mM ABTS 용액과 2.4 mM K2S2O8 용액을 1:1 비율로 섞어 어두운 곳, 실온에서 16 내지 24시간 방치시킨 후, 이를 734㎚에서 대조구의 흡광도 값이 0.7±0.002가 되도록 조절한 ABTS 용액을 사용하였다. 시료용액 60㎕와 ABTS 용액 240㎕를 혼합하여 10분간 반응시키고 734㎚에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 1에 의하여 ABTS 라디칼 소거능(Radical scavenging activity, RSA)을 계산하였다.
[수학식 1]
그 결과 도 2에서 확인할 수 있듯이, 농도 의존적으로 ABTS 라디칼 소거능을 갖는다는 것을 확인하였다.
3. FRAP 환원력 분석
상기 실시예 1-1, 1-2 및 1-3과 비교예 1 내지 4에서 얻어진 추출물에 대하여 ferric reducing /antioxidant power(FRAP) assay를 이용하여 시료의 환원력 분석 실험을 실시하였다. FRAP 방법은 colored ferrous tropyridyl triazine complex에 의해 ferric ion이 ferrous로 전환되어지는 과정을 분석함으로써 시료 내의 총 항산화력을 측정하는 방법으로, 낮은 pH에서 환원제에 의해 3가 철이 2가 철로 환원되는 원리를 기초로 하는 방법이다.
원액(stock solution)으로 300 mM 아세테이트 완충액(acetate buffer, pH3.6), 40 mM 염산(HCl)로 용해시킨 10 mM TPTZ(2,4,6-tripyridyl-s-triazine) 용액, 그리고 증류수에 용해시킨 20 mM FeCl·6H2O를 제조하여, 사용 직전에 이들을 10 : 1 : 1의 비율로 혼합하여 37℃, 10 내지 15분 동안 가온(warming)해준 뒤 FRAP 시약(working solution)으로 사용하였다. 희석한 추출물 15㎕에 285㎕의 FRAP시약을 혼합하여 암소에서 10분간 반응시킨 다음 593㎚에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2에 의하여 환원력을 계산하였다.
[수학식 2]
도 2에서 확인할 수 있듯이, 본 발명의 꿩의비름 추출물은 라디칼 소거능이 우수한 것을 알 수 있다.
도 2에서 확인할 수 있듯이, 환원력에 의한 항산화 활성 실험결과, 꿩의비름 추출물은 높은 환원력을 가진다는 것을 알 수 있었다. 또한 농도가 증가할수록 환원력이 증가하였다.
<항염증 효과>
LPS 로 RAW 264.7 cell을 자극한 경우(LPS(+)), 그렇지 않은 경우(LPS(-))를 각각 대조군으로 하여 꿩의비름 추출물의 항염증 효과 및 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피 추출물의 혼합물의 항염증 효과를 알아보았다.
이를 위해, 꿩의비름 추출물 및 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피 추출물이 NO 생성 억제에 미치는 영향 및 세포내 사이토카인 발현에 미치는 영향을 확인하였다.
1. NO 생성 억제 효과
NO생성량 측정은 세포 배양액 내의 nitrite농도를 그리스시약(Griess reagent)을 이용하였다. 실험에 사용된 대식기 murine macrophage cell line RAW 264.7세포를 12-well plate에 세포수가 1 × 105 cells/well이 되게 분주하고 80% confluence로 배양하였다. 그 후 추출물을 처리하고, LPS (100 ng/mL)로 24시간 동안 NO생성을 유도한 뒤 배양 상등액과 Griess reagent를 1:1로 혼합하여 ELISA reader를 사용하여 540 nm에서 NO생성량을 측정하였다. Sodium Nitrite (NaNO2)를 사용하여 standard curve를 작성한 후 NO측정에 사용하였다. NO생성량을 백분율로 나타내었다.
2. 세포 배양액 내의 사이토카인 측정
세포 배양액 내의 cytokines 측정 세포 배양액 내의 cytokines의 양을 측정하기 위해 Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)를 수행하였다. 세포에 꿩의비름 EA 추출물을 처리하고 1시간 후 100 ng/ml의 LPS 를 처리하였다. 18 시간 후 세포 배양액을 얻어 cytokine 측정에 이용하였다. 배양액을 적절한 농도로 희석한 후, cytokine으로 coating된 96 well plate에 50 ㎕씩 첨가하여 4℃에서 overnight시 켰다. Washing buffer로 3회 세척하고 100 ㎕의 biotinylated antibody reagent를 각각의 well에 처리하여 1시간 동안 상온에 서 반응시킨 후 3회 세척한 다음, 100 ㎕의 streptavidine-HRP solution을 처리하여 1시간 동안 상온에서 반응시킨 후 다시 washing buffer로 3회 세척하였다. 여기에 di(2-ethylhexyl)-2,4,5- trimethoxy benzalmalonate (TMB) substrate를 100 ㎕씩 처리하여 5-30분간 반응시킨 후 100 ㎕의 stop solution을 처리한 후 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. 결과
도 3은 꿩의비름 추출물을 처리한 군의 처리 농도에 따른 NO 생산량을 확인한 결과를 보여준다. 농도가 증가함에 따라 NO 생산량이 감소되는 결과를 보여준다.
상기 결과로부터 꿩의비름 추출물은 세포내 염증 억제 활성을 가질 것으로 생각된다.
아래 표 1은 RAW 264.7세포에서 사이토카인 발현량을 확인한 결과이다.
ug/mL | TNF-α(%) | IL-6(%) | ||
LPS(-) | control | 48.08 | 43.32 | |
LPS(+) | control | 100 | 100 | |
꿩의비름 | 50 | 85.48 | 68.7 | |
25 | 96.12 | 83.36 | ||
12.5 | 100 | 97.56 | ||
온주과피 | 50 | 78.73 | 88.32 | |
25 | 80.33 | 93.51 | ||
12.5 | 93.57 | 106 | ||
꿩의비름+온주과피 | 50 | 70.43 | 56.56 | |
25 | 78.98 | 75.88 | ||
12.5 | 92.8 | 91.37 |
상기 표 1 및 도 4는 꿩의비름 추출물을 처리한 군에서 TNF-a 생산량이 감소한 결과를 보여주고, 표 1 및 도 5는 꿩의비름 추출물을 처리한 군에서 IL-6 생산량이 감소한 결과를 보여주고 있다.
상기 결과로부터 본 발명의 꿩의비름 추출물은 세포의 사이토카인 발현을 억제하여 염증반응을 감소시킨다는 것을 알 수 있다.
한편, 꿩의비름과 온주과피 추출물을 함께 처리한 경우, 사이토카인 발현 억제율이 더욱 증가하였고, 염증반응 감소에 더욱 효과적임을 알 수 있었다.
<꿩의비름 지상부 및 온주과피 혼합물의 항산화 활성 측정>
앞서 살핀, 항산화 활성 측정방법을 이용하여, 꿩의비름 지상부와 온주과피 혼합물의 항산화 활성을 측정하였다. 본 발명의 감귤 추출물은 9월 수확한 미숙과를 이용하였다. 껍질과 과육을 분리해서 건조 후 70% 에탄올에 침지시켜 추출하였다. 추출후에는 감압농축기를 이용하여 용매를 제거하고 분말로 만든 후 실험에 사용하였다. 그 결과, 꿩의비름과 온주과피 각각보다 이들의 혼합물은 더 우수한 항산화 활성을 갖는다는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과는 도 7에 나타냈다. 도 7에서 확인할 수 있듯이, 꿩의비름과 온주과피 추출물의 혼합물은 이들을 함께 사용할 때 항산화 활성이 더욱 우수하였으며, 이들은 비타민 C에 비해 더욱 우수한 항산화 활성을 갖는 것을 알 수 있다.
<꿩의비름 지상부 및 온주과피 혼합물의 THP-1 세포를 통한 항염 활성 측정>
1. TNF-α 억제 효과 측정
꿩의비름 지상부와 온주과피 혼합물이 TNF-α 분비에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 하기와 같이 TNF-α 유도 물질인 리포폴리사카라이드 (lipopolysaccharide; LPS)를 처리한 후, TNF-α의 분비량을 효소면역 측정법 (ELISA)으로 측정하였다.
사람 단핵 세포주 (Human monocytic cell line)인 THP-1 세포 (ATCC No.: TIB-202)를 RPMI 1640 (Gibco, BRL, USA)에 10% FBS (fetal bovine serum)를 첨가한 배지에서 배양하였다.
96-웰 플레이트에 5×105 세포/ml/웰이 되도록 상기 배양액을 분주하고, 리포폴리사카라이드 (LPS) 100 ug/ml를 첨가하여 TNF-α가 유리되도록 세포를 활성화시켰다.
대조군은 LPS만을 처리하였고, 실험군에는 LPS 처리와 동시에 꿩의비름 추출물과 온주과피 추출물을 처리하였다. 플레이트를 24시간 동안 방치하였고, 그 후 세포 배양액 안의 TNF-α의 양을 ELISA 키트 (Oscotec.Inc, Korea)를 이용하여 측정하였다. 효소면역 측정 시 흡광도는 다이나테크 MR-7000 (Dynatech Laboratorie 사)을 이용하여 450 mm에서 측정하였으며, TNF-α의 분비 억제율을 대조군에 대한 백분율로 계산하여 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
ug/mL | TNF-a(%) | cell viability(%) | |
LPS | (-) | 71.05 | 100 |
(+) | 100 | 99.5 | |
꿩의비름 | 2.5 | 67.9 | 110 |
5 | 55.4 | 90.47 | |
10 | 56.45 | 77.26 | |
온주과피 | 25 | 98.1 | 106 |
50 | 92.03 | 103 | |
100 | 89.7 | 100 | |
꿩의비름+온주과피 | 25 | 60.1 | 108 |
50 | 50.3 | 90 | |
100 | 48 | 76 |
표 1과 도 8에서 확인할 수 있듯이, 꿩의비름 추출물을 처리하였을 때 P. acnes 에 의해 유발된 TNF-a 생산량이 감소되었다는 것을 확인할 수 있었다.
한편, 온주밀감 과피만 단독으로 처리한 경우에 TNF-a 생산량 감소에 큰 영향이 없었지만, 꿩의비름 추출물과 온주밀감 과피를 함께 처리한 경우에 TNF-a 생산량 감소에 탁월한 효과를 나타냈다.
2. 세포독성 검정
피부세포인 skin fibroblast (HDF)를 대상으로 항염증 세포독성 검정을 수행하였다. 세포독성 검정방법으로는 MTT 분석법을 이용하였고, 이 때 570nm~690nm에서의 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 8에서 확인할 수 있듯이, 본 발명의 꿩의비름 추출물은 세포독성이 없었으며, 항염증 화장료 조성물의 원료로 이용될 수 있는 것을 확인하였다.
제제예
1: 화장품의 제조
1. 유연화장수(스킨로션)의 제조
하기 조성과 같이, 꿩의비름 추출물을 유효성분으로 포함하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
꿩의비름 추출물 | 0.1 중량% |
베타-1,3-글루칸 | 1.0 중량% |
부틸렌글리콜 | 2.0 중량% |
프로필렌글리콜 | 2.0 중량% |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 중량% |
피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.2 중량% |
폴리솔베이트80 | 0.4 중량% |
에탄올 | 10.0 중량% |
트리에탄올아민 | 0.1 중량% |
방부제 | 0.05 중량% |
색소 | 0.05 중량% |
향료 | 0.05 중량% |
정제수 | to 100 중량% |
2. 영양화장수(밀크로션)의 제조
하기 조성과 같이, 꿩의비름 추출물을 유효성분으로 포함하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
꿩의비름 추출물 | 0.1 중량% |
베타-1,3-글루칸 | 1.0 중량% |
밀납 | 4.0 중량% |
폴리솔베이트60 | 1.5 중량% |
솔비탄세스퀴올레이트 | 1.5 중량% |
유동파라핀 | 0.5 중량% |
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 | 5.0 중량% |
글리세린 | 3.0 중량% |
부틸렌글리콜 | 3.0 중량% |
프로필렌글리콜 | 3.0 중량% |
카르복시비닐폴리머 | 0.1 중량% |
트리에탄올아민 | 0.2 중량% |
방부제 | 0.05 중량% |
색소 | 0.05 중량% |
향료 | 0.05 중량% |
정제수 | to 100 중량% |
제제예
2: 식품의 제조
본 발명의 꿩의비름 추출물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.
1. 밀가루 식품의 제조
상기 꿩의비름 추출물을 0.05 ~ 1.0 중량부 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강식품을 제조하였다.
2. 유제품(dairy products)의 제조
상기 꿩의비름 추출물 0.2 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
3. 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다. 상기 꿩의비름 추출물이 포함된 분말을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 꿩의비름 추출물의 건조분말을 혼합 분말 100 중량부에 대하여 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), 꿩의비름 추출물 (0.1 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부) |
제제예
3: 음료의 제조
꿩의비름 추출물 1 g을 감귤 착즙액 1,000 mL에 가하여 건강 증진용 과일주스를 제조하였다.
Claims (12)
- 꿩의비름 (Hylotelephium erythrostictum) 추출물을 포함하는, 항산화용 조성물.
- 꿩의비름 (Hylotelephium erythrostictum) 추출물을 포함하는, 항염증용 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름 지상부 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름 에탄올 100% 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물은 화장료, 약학 또는 건강기능 식품용 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 꿩의비름 (Hylotelephium erythrostictum) 추출물 및 감귤 추출물을 포함하는, 항산화용 조성물.
- 꿩의비름 (Hylotelephium erythrostictum) 추출물 및 감귤 추출물을 포함하는, 항염증용 조성물.
- 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름 지상부 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 꿩의비름 추출물은 꿩의비름 에탄올 100% 추출물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 조성물은 화장료, 약학 또는 건강기능 식품용 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 꿩의비름 추출물을 포함하는 여드름 억제용 화장료 조성물.
- 제11항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 온주과피 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 여드름 억제용 화장료 조성물.
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