KR20160147170A - 신규 파조파닙 유도체 및 이를 함유하는 약학조성물 - Google Patents

신규 파조파닙 유도체 및 이를 함유하는 약학조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 혈관신생 억제 활성 및 상피세포성장인자 억제 활성을 동시에 갖는 신규 파조파닙 유도체 또는 그의 염과, 이를 유효성분으로 함유하는 약학조성물에 관한 것으로서, 상기 파조파닙 유도체는 파조파닙과 달리 혈관신생 억제 활성 외 상피세포성장인자를 억제하는 활성을 동시에 갖고 있어 다표적 타겟을 통해 보다 효과적으로 폐암, 결장암 또는 유방암과 같은 EGFR 관련 암질환을 치료하고 예방할 수 있으며 특히 이레사나 타세바가 효과를 발휘하지 못하는 비소세포성 폐암을 효과적으로 치료하고 예방할 수 있다.

Description

신규 파조파닙 유도체 및 이를 함유하는 약학조성물{Novel pazopanib derivatives and pharmaceutical composition comprising the same}
본 발명은 혈관신생 및 상피세포성장인자를 동시에 억제하는 신규 파조파닙 유도체 및 이를 함유하는 약학조성물에 관한 것이다.
상피세포성장인자수용체(EGFR)는 세포의 증식, 생존, 이동, 분화 등을 조절 하고, 암세포의 성장에도 중요한 역할을 한다. EGFR 저해제인 제피티닙(gefitinib, 제품명: 이레사)과 엘로티닙(erlotinib, 제품명: 타세바)은 현재 임상에서 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer; NSCLC) 치료에 좋은 효과를 보이고 있다.
그러나 제피티닙과 엘로티닙은 야생형 EGFR 또는 카이나아제 도메인을 활성화 시켜주는 돌연변이(L858R)를 가진 EGFR에는 좋은 효과를 보이지만 EGFR-T790M 에는 미약한 효과를 보인다.
T790M 변이체는 ATP 결합 포켓의 게이트키퍼(gatekeeper) 위치에 단일 점돌연변이가 일어나 Threonine790이 Methionine790으로 바뀐 형태이다. 이러한 돌연변이가 일어나면 EGFR의 제피티닙과 엘로티닙에 대한 친화도는 거의 변하지 않지만 ATP에 대한 친화도는 증가한다. 따라서 제피티닙과 엘로티닙이 T790M에 좋은 효과를 보이지 못하게 된다. 이러한 EGFR T790M 돌연변이는 임상적으로 발생하는 적응 내성의 50% 가량을 차지하기 때문에 비소세포성 폐암의 치료에 있어 매우 큰 장애물이 된다.
현재 많은 연구자들이 T790M을 극복하기 위한 연구를 진행하고 있다. 현재까지 알려져 있는 EGFR T790M 저해제들은 ATP 결합 부위의 Cystein797에 공유결합을 하는 ATP 경쟁적인 비가역적 저해제이다. 하지만 HKI-272, PF00299804, BIBW-2992 등의 퀴나졸린 구조를 가진 1세대 저해제들은 임상시험에서 기대에 못 미치는 효과를 보이고 있다.
따라서, 비소세포성 폐암과 같은 EGFR 관련 암질환을 효과적으로 치료할 수 있는 새로운 계열의 항암제 개발이 필요하다.
한편, 한국등록특허 제0524701호에서는 상피세포 성장인자 수용체(EGFR)에 대한 우수한 억제활성을 나타내는 5-이미노메틸기가 치환된 2,4-피리미딘다이온 유도체를 개시하고 있다.
이에, 본 발명자들은 비소세포성 폐암과 같은 EGFR 관련 암질환을 효과적으로 치료할 수 있는 새로운 계열의 항암제를 개발하기 위하여, 혈관신생 및 상피세포성장인자를 동시에 억제하는 새로운 파조파닙 유도체를 밝혀내어 본 발명을 완성하였다.
이에, 본 발명의 목적은 혈관신생 및 상피세포성장인자를 동시에 억제하는 새로운 파조파닙 유도체 및 이를 이용한 약학조성물을 제공하는 데에 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00001
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00002
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 제피티닙 내성 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00003
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 신규 파조파닙 유도체 또는 그의 염은 파조파닙과 달리 혈관신생 억제 활성 외 상피세포성장인자를 억제하는 활성을 동시에 갖고 있어 다표적 타겟을 통해 보다 효과적으로 폐암, 결장암 또는 유방암과 같은 EGFR 관련 암질환을 치료하고 예방할 수 있으며 특히 이레사나 타세바가 효과를 발휘하지 못하는 비소세포성 폐암을 효과적으로 치료하고 예방할 수 있다.
도 1은 MKP101 처리에 따른 세포 생존율을 검토한 것이고,
도 2는 MKP101 처리에 따른 혈관신생 억제효과를 검토한 것이고,
도 3은 EGFR 카이네이즈 도메인에서 MKP101의 도킹 예측 결과를 나타낸 것이고(도 3A 및 도 3C: MKP101, 도 3B 및 도 3D: 파조파닙),
도 4는 MKP101 외 다른 파조파닙 유도체들의 도킹 예측 결과를 나타낸 것이다.
본 발명에 기재된 용어, 기술 등은 특별한 한정이 없는 한, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 일반적으로 사용되는 의미로 사용된다. 또한, 본 명세서에 언급된 문헌들은 모두 본 발명을 설명하기 위한 문헌으로 본 명세서에 포함된다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00004
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
바람직하게는, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 NH, N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시) 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
또한, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2 중 어느 하나는 설폰아마이드이고, 다른 하나는 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시로 이루어진 군에서 선택되고; R3는 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; R4는 수소일 수 있다.
보다 바람직하게는 5-(4-((1H-인돌-5-일)(메틸)아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP101), 2-메틸-5-(4-(메틸(3-메틸-1H-인돌-5-일)아미노)피리미딘-2-일아미노)벤젠설폰아마이드(MKP102), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-(2-모르폴리노에톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP106), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-(4-모르폴리노부톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP107), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 4 -메틸-N 2 -(4-(4-모르폴리노부톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP108), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP109), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP110), N 4 -(1-메틸-1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP111), N 4 -메틸-N 4 -(1-메틸-1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP112), N 2 -(3-플루오로-4-모르폴리노페닐)-N 4 -(1H-인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민(MKP113), N 2 -(3-플루오로-5-모르폴리노페닐)-N 4 -(1H-인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민(MKP114), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-메톡시-3-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP115), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-메톡시-5-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP116), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-메톡시-5-모르폴리노페닐)-N 4 -메틸피리미딘-2,4-디아민(MKP117), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 6 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4,6-디아민(MKP118), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 4 -메틸-N 6 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4,6-디아민(MKP119), 6-(1H-인돌-5-일옥시)-N-(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4-아민(MKP120), 6-(1H-인돌-5-일옥시)-N-(4-메톡시-3-모르폴리노페닐)피리미딘-4-아민(MKP121), 5-(4-(1H-인돌-5-일옥시)피리미딘-2-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP122) 및 5-(6-(1H-인돌-5-일옥시)피리미딘-4-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP123)으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 파조파닙 유도체는 공지의 방법에 의해 상응하는 염으로 제조할 수 있다. 이러한 염은 독성이 없는 수용성의 것이 바람직하다. 바람직한 염으로는 칼륨, 나트륨 등 등과 같은 알칼리 금속의 염; 칼슘, 마그네슘 등과 같은 알칼리토류 금속의 염; 그리고 테트라메틸 암모늄, 트리에틸아민, 메틸아민, 디메틸아민, 시클로펜틸아민, 벤질아민, 페네틸아민, 피페리딘, 모노에탄올아민, 디에탄올아민, 트리스(히드록시메틸)아민, 라이신, 아르기닌, N-메틸-D-글루카민 등과 같은 약학적으로 허용 가능한 아민의 염을 들 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 파조파닙 유도체는 공지의 방법에 의해 상응하는 산 부가염으로 제조할 수 있다. 이러한 산 부가염은 독성이 없는 수용성인 것이 바람직하다. 바람직한 산 부가염으로는 염산염, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 황산염, 인산염 및 질산염과 같은 무기산염, 또는 아세트산염, 젖산염, 주석산염, 옥살산염, 푸마르산염, 말레인산염, 구연산염, 벤조산염, 메탄술폰산염, 에탄술폰산염, 벤젠술폰산염, 톨루엔술폰산염, 이세티온산염, 글루쿠론산염 및 글루콘산염과 같은 유기산염을 들 수 있다.
본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그의 염은 공지의 방법에 의해 수화물로 제조할 수 있다.
특히, 본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그 염은 혈관신생을 억제할 뿐 아니라, EGFR를 억제할 수 있는 다표적 항암활성을 나타낸다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00005
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환은 폐암, 결장암 및 유방암으로 이루어진 군에서 선택된 암질환일 수 있으며, 바람직하게는 비소세포성 폐암일 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 제피티닙 내성 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00006
상기 화학식 1에서, X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며; A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 약학조성물은 약학조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용가능한 담체, 부형제 또는 희석제로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등을 들 수 있다.
본 발명에 따른 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 파조파닙 유도체는 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있다.
또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그 염은 약학조성물 총 100 중량부에 대하여 0.01 내지 30.0 중량부로 포함될 수 있다. 상기 함량이 0.01 중량% 미만일 경우에는 혈관신생 억제 효과와 EGFR 억제 효과가 미미하며, 30.0 중량%를 초과할 경우에는 사용량에 따른 효과가 미미한 문제가 야기될 수 있다.
상기 약학조성물의 유효성분인 본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그 염의 사용량은 환자의 나이, 성별, 체중, 질환에 따라 달라질 수 있으나, 0.001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.01 내지 10 mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여할 수 있다.　
또한, 본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그 염의 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다.　 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 약학조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 기관지내 흡입, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 파조파닙 유도체 또는 그 염은 50% 치사량(LC50)이 1 g/kg 이상으로 안정성이 확보된 것으로서, 본 발명의 약학조성물에 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
< 합성예 1> 화합물 4a-b 합성
[반응식 1]
Figure pat00007
1. 2-(4- 니트로페녹시 )에탄올(화합물 1a) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 1a를 합성하였다.
4-니트로페놀(1.55g, 11.15 mmol), 2-브로모에탄올(1.583 mL, 22.3 mmol) 및 포타슘 카보네이트(738 mg, 5.34 mmol)를 DMF (1mL)에 녹인 혼합물을 80℃에서 하룻밤 동안 교반하였다.
상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물과 염수로 세정하고, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 화합물 1a(1.38g, 7.53 mmol, 67.6 %)를 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3):δ8.21(d,J=9.3Hz,2H), 6.99(d,J=9.3Hz,2H), 4.19(t,J=4.8Hz,2H), 4.01-4.06(m,2H).
2. 4-(4- 니트로페녹시 ) 부탄올 (화합물 1b) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 1b를 합성하였다.
4-니트로페놀(248 mg, 1.78 mmol), 4-브로모부탄올(328 mg, 2.14 mmol) 및 포타슘 카보네이트(7.7 g, 55.75 mmol)를 DMF (3mL)에 녹인 혼합물을 80℃에서 하룻밤 동안 교반하였다.
상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물과 염수로 세정하고, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 흰색 고체인 화합물 1b(57 mg, 0.269 mmol, 15.1 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ8.19(d,2H,J=9.3Hz), 6.95(d,2H,J=9.3Hz), 4.11(t,2H,J=6.3Hz), 3.71-3.77(m, 2H), 1.89-1.97 (m, 2H), 1.73-1.81 (m, 2H).
3. 2-(4- 니트로페녹시 )에틸 메탄설포네이트 (화합물 2a) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 2a를 합성하였다.
상기 화합물 1a(1.0 equiv) 및 트리메틸아민(3.0 equiv)을 무수 THF에 녹이고, 메탄설포닐크로라이드(1.5 equiv.)을 실온에서 적가하였다.
상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, EtOAc로 희석하고 물과 염수로 세정하고, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 추가정제 없이 다음 반응에 이용하였다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ8.20(dd,J=9.3Hz,2H), 7.00(dd,J=9.3Hz,2H), 4.63(t,J=4.5Hz,2H), 4.37(t, J=4.5Hz,2H), 3.12(s,3H)
4. 4-(4- 니트로페녹시 )부틸 메탄설포네이트 (화합물 2b) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 2b를 합성하였다.
상기 화합물 1b(1.0 equiv) 및 트리메틸아민(3.0 equiv)을 무수 THF에 녹이고, 메탄설포닐크로라이드(1.5 equiv.) 몇 방울을 실온에서 첨가하였다.
상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, EtOAc로 희석하고 물과 염수로 세정하고, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 추가정제 없이 다음 반응에 이용하였다.
5. 4-(2-(4- 니트포페녹시 )에틸)모르폴린(화합물 3a) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 3a를 합성하였다.
상기 화합물 2a(0.727 mmol), 모르폴린(2.18 mmol) 및 포타슘 카보네이트(3.64 mmol)를 DMF (1mL)에 녹인 혼합물을 80℃에서 하룻밤 동안 교반하였다.
상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고 여과한 후, 여과물을 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(MeOH : DCM = 1 : 30)로 정제하여 노란색 고체인 화합물 3a를 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3):δ 8.21 (d, J=9.6Hz,2H), 6.98(d,J=9.6Hz,2H), 4.20(t,J=5.7Hz,2H), 3.74(t,J=4.8Hz,4H), 2.84(t,J=5.7Hz,2H), 2.59(t,J=4.8Hz,4H).
6. 4-(4-(4- 니트로페녹시 )부틸)모르폴린(화합물 3b) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 3b를 합성하였다.
상기 화합물 2b(1.0 equiv), 모르폴린(3.0 equiv) 및 포타슘 카보네이트(5.0 equiv)를 DMF (1mL)에 녹인 혼합물을 80℃에서 하룻밤 동안 교반하였다.
상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고 여과한 후, 여과물을 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(MeOH : DCM = 1 : 30)로 정제하여 노란색 고체인 화합물 3b를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ8.18(d,J=9.3Hz,2H), 6.94(d,J=9.3Hz,2H), 4.09(t,J=6.3Hz,2H), 3.71(t,J=4.5Hz,2H), 2.35-2.47(m,6H), 1.83-1.92(m,2H), 1.64-1.74(m,2H).
7. 4-(2- 모르폴리노에톡시 )아닐린(화합물 4a) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 4a를 합성하였다.
상기 화합물 3a와 팔라듐 10%를 메탄올에 넣고 수소 하 실온에서 1시간 동안 교반한 후 여과하였다. 상기 여과물을 진공하에서 농축하고, 조산물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다.
8. 4-(4- 모르폴리노부톡시 )아닐린(화합물 4b) 합성
상기 반응식 1과 같은 방법으로 화합물 3b를 사용하여, 화합물 4a와 같은 과정으로 화합물 4b를 합성하였다.
< 합성예 2> 화합물 7a-c 합성
[반응식 2]
Figure pat00008
1. 1- 플루오로 -3- 메톡시 -5-니트로벤젠(화합물 5c) 합성
DMF (2mL)에 용해시킨 3,5-디플루오로니트로벤젠(333.76 μL, 3.0 mmol), 메탄올(267.1 μL, 6.6 mmol) 및 포타슘 카보네이트(1243.9 mg, 9.0 mmol) 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 아세톤으로 희석하고 여과한 후, 진공에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc : Hexane = 1 : 5)로 정제하여 희색 고체 화합물 5c(147.8mg,0.863mmol,28%)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ7.52-7.58(m,2H), 6.94(dt,J=9.6,2.4Hz,1H), 3.90(s,3H).
2. 4-(3- 니트로페닐 )모르폴린(화합물 6a) 합성
DMSO (3 mL)에 용해시킨 3-플루오로니트로벤젠(319.5 μL, 3.0 mmol), 모르폴린(528.0 μL, 6.0 mmol) 및 포타슘 카보네이트(1.382 g, 10.0 mmol) 혼합물을 140℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 여과한 후, 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(CHCl3)로 정제하여 노란색 고체인 화합물 6a(397.3mg,1.908mmol,63.6%)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ7.67-7.72 (m, 2H), 7.34 (t, J=7.8Hz,1H), 7.17-7.21(m,1H), 3.89(t,J=4.8Hz,4H), 3.25(t,J=4.8Hz,4H).
3. 4-(3- 플루오로 -5- 니트로페닐 )모르폴린(화합물 6b) 합성
DMSO (2mL)에 용해시킨 3,5-디플루오로니트로벤젠(500 μL, 4.494 mmol), 모르폴린(411.4 μL, 4.675 mmol) 및 포타슘 카보네이트(1.86 g, 13.48 mmol) 혼합물을 140℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 여과한 후, 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(CHCl3)로 정제하여 노란색 고체인 화합물 6b(867.6mg,3.855mmol,85.3%)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ7.52(m,1H), 7.36(dt,J=8.1,2.1Hz,1H), 6.84(dt,J=8.4,2.4Hz,1H), 3.88(t,J=4.8Hz,4H), 3.26(t,J=4.8Hz,4H).
4. 4-(3- 메톡시 -5- 니트로페닐 )모르폴린(화합물 6c) 합성
DMSO (2mL)에 용해시킨 3-플루오로-5-메톡시니트로벤젠(200 mg, 1.169 mmol), 모르폴린(411.4 μL, 4.675 mmol) 및 포타슘 카보네이트(807.6 mg, 5.844 mmol) 혼합물을 140℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하고 여과한 후, 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc : Hexane = 1 : 3)로 정제하여 노란색 고체인 화합물 6c를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ7.39(t,J=2.1Hz,1H), 7.23(t,J=2.1Hz,1H), 6.68(t,J=2.1Hz,1H), 3.83-3.88(m,7H), 3.22(t,J=4.8Hz,4H).
5. 3- 모르폴리노아닐린 (화합물 7a) 합성
화합물 3a 대신 화합물 6a를 이용하여 상기 화합물 4a와 동일한 합성과정으로 화합물 7a를 합성하였다.
6. 3- 플루오로 -5- 모르폴리노아닐린 (화합물 7b) 합성
화합물 3a 대신 화합물 6b를 이용하여 상기 화합물 4a와 동일한 합성과정으로 화합물 7b를 합성하였다.
7. 3- 메톡시 -5- 모르폴리노아닐린 (화합물 7c) 합성
화합물 3a 대신 화합물 6c를 이용하여 상기 화합물 4a와 동일한 합성과정으로 화합물 7c를 합성하였다.
< 합성예 3> 화합물 10a-b 합성
[반응식 3]
Figure pat00009
1. 4-(2- 메톡시 -5- 니트로페닐 )모르폴린(화합물 9a) 합성
무수 톨루엔에 용해시킨 2-브로모-4-니트로아니솔(200 mg, 0.862 mmol) 및 모르폴린(152.0 μL, 1.724 mmol), 세슘 카보네이트(393.0 mg, 1.207 mmol) 및 BINAP (32.4 mg, 0.052 mmol) 혼합물의 가스를 10분간 제거하였다. 상기 혼합물에 Pd(OAc)2(3.8 mg,0.017 mmol)를 첨가한 후 5분간 가스를 제거하고, 상기 혼합물을 100℃에서 20시간 동안 교반하였다. 상기 반응혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고 여과한 후, 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc : Hexane = 1 : 2)로 정제하여 화합물 9a(174.1 mg, 0.731 mmol, 84.8 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, Acetone-d 6 ):δ7.94(dd,J=9.0,3.0Hz,1H), 7.71(d,J=3.0Hz,1H), 7.16(d,J=9.0Hz,1H), 4.02(s,3H), 3.79(t,J=4.8Hz,4H), 3.11(t,J=4.8Hz,4H).
2. 4-(2- 플루오로 -4- 니트로페닐 )모르폴린(화합물 9b) 합성
무수 톨루엔에 용해시킨 1-브로모-2-플루오로-4-니트로벤젠(330 mg, 1.6 mmol), 모르폴린(158.4 μL, 1.8 mmol), 세슘 카보네이트(684.3 mg, 2.1 mmol) 및 BINAP(56.1 mg, 0.09 mmol) 혼합물의 가스를 10분간 제거하였다. 상기 혼합물에 Pd(OAc)2(27.5 mg,0.03 mmol)를 첨가한 후 5분간 가스를 제거하고, 상기 혼합물을 100℃에서 24시간 동안 교반하였다. 상기 반응혼합물을 디에틸 에테르로 희석하고 여과한 후, 진공하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc : Hexane = 1 : 5)로 정제하여 화합물 9b(291.9 mg, 1.290 mmol, 86.0 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ7.96-8.02(m,1H), 7.89-7.94(m,1H), 6.92(t,J=8.7Hz,1H), 3.88(t,J=4.8Hz,4H), 3.29(t,J=4.8Hz,1H).
3. 4- 메톡시 -3- 모르폴리노아닐린 (화합물 10a) 합성
화합물 3a 대신 화합물 9a를 이용하여 상기 화합물 4a와 동일한 합성과정으로 화합물 10a를 합성하였다.
4. 3- 플루오로 -4- 모르폴리노아닐린 (화합물 10b) 합성
화합물 3a 대신 화합물 9b를 이용하여 상기 화합물 4a와 동일한 합성과정으로 화합물 10b를 합성하였다.
< 실시예 1> MKP 101-104, 106, 107 및 122 화합물 합성
하기 반응식 4와 같은 방법으로 화합물 MKP 101-104, 106, 107 및 122를 합성하였다.
[반응식 4]
Figure pat00010
1. N- (2- 클로로피리미딘 -4-일)-1 H- 인돌-5-아민(12a)
이소프로판올(20 mL)에 5-아미노인돌(396.5 mg, 3.0 mmol), 2,4-디클로로피리미딘(536.3 mg, 3.6 mmol) 및 트리에틸아민(418.1 μL, 3.0 mmol)을 녹인 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공 하에 농축하고, 조산물을 플래쉬 크로마토그래피(MeCN : CHCl3=1:10)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 12a(405.2mg,1.656mmol,55.2%)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, Acetone-d 6 ): δ10.34(s,1H), 8.81(s,1H), 8.04(d,J=5.7Hz,1H), 7.73(s,1H), 7.46(d,J=8.7Hz,1H), 7.39(t,J=3.0Hz,1H), 7.19(d,J=8.7Hz,1H), 6.61(d,J=5.7Hz,1H), 6.486.50(m,1H).
2. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)-3- 메틸 -1 H -인돌-5-아민(화합물 12b) 합성
2-프로판올(10 mL)에 용해시킨 3-메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 1b; 87.7 mg, 0.6 mmol) 및 2,4-디클로로피리미딘(107.3 mg, 0.72 mmol)의 혼합물에 트리에틸아민(83.6 μL, 0.6 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후 용매를 증발시켰다. 남은 잔사를 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올 = 50:1)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 12b(97.4 mg, 63%)를 얻었다.
1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ 8.07 (s, 1H), 8.02 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38 (d, J = 8.46 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.04-7.06 (m, 2H), 6.43 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 1.0 Hz, 3H); 13C NMR (600 MHz, CDCl3): δ 164.21, 160.74, 157.75, 134.98, 129.03, 128.27, 123.31, 119.80, 115.83, 112.09, 112.04, 101.64, 9.59; HRMS (ESI): calcd for C13H11ClN4 [M+H]+, 259.0745, found 259.0751.
3. N- (2- 클로로피리미딘 -4-일)-2- 메틸 -1 H- 인돌-5-아민(화합물 12c) 합성
이소프로판올(5 mL)에 5-아미노-2-메틸인돌(87.7 mg, 0.6 mmol), 2,4-디클로로피리미딘(107.3 mg, 0.72 mmol) 및 트리에틸아민(83.6 μL, 0.6 mmol)을 녹인 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 진공하에서 농축하고 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(메탄올:디클로로메탄:헥산 = 1 : 20 : 5)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 12c(89.5mg,0.346mmol,57.7%)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, DMSO-d 6 ):δ10.94(s,1H), 9.75(s,1H), 8.02(d,J=6.0Hz,1H), 7.58(brs,1H), 7.25(d,J=8.4Hz,1H), 7.02(brs,1H), 6.58(s,1H), 5.75(s,1H), 2.37(s,3H).
4. 5-(2- 클로로피리미딘 -4- 일옥시 )-1H-인돌(화합물 12d) 합성
아세토나이트릴(3.4 mL)에 5-하이드록시인돌(266.3 mg, 2.0 mmol), 2,4-디클로로피리미딘(387.4 mg, 2.6 mmol) 및 DBU (598.2 μL, 4.0 mmol)를 녹인 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트(EtOAc)로 희석하고 물과 염수로 세정한 후, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다.
상기 방법으로 얻어진 조산물을 플래쉬 크로마토그래피(MeCN:CHCl3=1:20)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 12d(182.6 mg,0.743 mmol,37.2 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, Acetone-d 6 ):δ10.48(s,1H), 8.51(d,J=5.7Hz,1H), 7.53(d,J=8.7Hz,1H), 7.397.45(m,2H), 6.97(dd,J=8.7,2.4Hz,1H), 6.92(d,J=5.7Hz,1H), 6.52-6.54(m,1H).
5. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)-N- 메틸 -1 H -인돌-5-아민(화합물 13a) 합성
0℃에서 디메틸포름아마이드(DMF; 3 mL)에 용해시킨 화합물 12a(300 mg, 1.226 mmol) 및 소듐 하이드라이드(60% dispersed in mineral oil, 58.9 mg, 1.471 mmol)의 혼합물에 아이오도메탄(114.5 μL, 1.839 mmol) 몇 방울을 첨가하였다.
상기 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물과 염수로 세정하며, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다.
이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(EtOAc:Hexnae = 1:3)로 정제하여 화합물 13a(239.7 mg, 0.929 mmol, 75.8 %)를 얻었다.
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δ 8.89 (s, 1H), 7.79 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.33 (t, J = 3.0 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 6.58 - 6.59 (m, 1H), 6.08 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H); 13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ 164.14, 160.47, 155.43, 135.79, 134.95, 128.89, 126.09, 120.50, 118.89, 112.84, 103.64, 102.88, 38.79; HRMS (ESI) : calcd for C13H11ClN4 [M+H]+, 259.0745, found 259.0749.
6. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)- N ,3-디메틸-1 H -인돌-5-아민(화합물 13b) 합성
건조 DMF(2 mL)에 용해시킨 화합물 12b(90.0 mg, 0.35 mmol) 및 세슘 카보네이트(114.0 mg, 0.35 mmol)의 혼합물에 아이오도메탄(21.8 μL, 0.35 mmol) 몇 방울을 첨가하고, 실온에서 12시간 동안 교반한 후 여과하였다. 상기 여과물을 농축하고 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(디클로로메탄:아세토니트릴 = 20:1)로 정제하여 노란색 오일상의 화합물 3b(73.8mg, 77%)를 얻었다.
1H NMR (600 MHz, CDCl3):δ 8.47 (s, 1H), 7.78 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 6.97 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 6.08 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.32 (s, 3H); 13C NMR (600 MHz, CDCl3): δ 164.23, 160.49, 155.47, 135.34, 135.33, 129.33, 123.49, 120.43, 117.10, 112.69, 112.10, 103.65, 38.83, 9.57; HRMS (ESI): calcd for C14H13ClN4 [M+H]+, 273.0902, found 273.0913.
7. N-(2- 클로로피리미딘 -4-일)-N,2-디메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 13c) 합성
DMF (2 mL)에 화합물 12c(113 mg, 44 mmol)와 세슘 카보네이트(700 mg, 2.15 mmol)를 용해시킨 혼합물에 아이오도메탄(27.2 μL, 0.44 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 1시간 30분간 교반한 후, 아틸 아세테이트로 희석하고, 물과 염수로 세정한 후, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다.
이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 크로마토그래피(MeCN:CHCl3=1:40)로 정제하여 화합물 13c(74.2 mg,0.272 mmol,61.8 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3):δ8.19(brs,1H),7 .77(d,J=5.7Hz,1H), 7.36(d,J=8.4Hz,1H), 7.33(d,J=2.1Hz,1H), 6.89(dd,J=8.4,2.1Hz,1H), 6.25(d,J=0.9Hz,1H), 6.06(d,J=5.7Hz,1H), 3.51(s,3H),2.48(s,1H).
8. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)- N ,1-디메틸-1 H -인돌-5-아민(화합물 13d) 합성
0℃에서 DMF(1 mL)에 용해시킨 화합물 12a(50 mg, 0.204 mmol) 및 소듐 하이드라이드(60% dispersed in mineral oil, 40.8 mg, 1.022 mmol)의 혼합물에 아이오도메탄(38.1 μL, 0.612 mmol) 몇 방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물과 염수로 세정하며, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(CHCl3:아세토니트릴 = 40:1)로 정제하여 화합물 3d(59.9 mg, 0.195 mmol, 95.6 %)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 7.78 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 6.51 (dd, J = 3.0, 0.6 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.52 (s, 3H);. 13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ 164.19, 160.55, 155.61, 135.77, 134.59, 130.49, 129.37, 120.20, 119.12, 110.91, 103.54, 101.40, 38.76, 33.11; HRMS (ESI) : calcd for C14H13ClN4 [M+H]+, 273.0902, found 273.0909.
9. N- (2- 클로로피리미딘 -4-일)-1- 메틸 -1 H- 인돌-5-아민(화합물 13e) 합성
무수 THF(2mL)에 화합물 12a(50mg,0.204mmol) 및 소디움 하이드라이드(60% dispersed in mineral oil, 40.8 mg, 1.022 mmol)를 녹인 혼합물에 아이오도메탄(38.1 μL, 0.612 mmol) 몇 방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 물과 염수로 세정한 후 무수 MgSO4로 건조하고 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(EtOAc:Hexnae=2:3)로 정제하여 화합물 13e(21.6 mg,0.084 mmol,40.9 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, Acetone-d 6 ):δ8.84(s,1H), 8.04(d,J=6.0Hz,1H), 7.73(s,1H), 7.417.46(m,2H), 7.27(d,J=3.0Hz,1H), 6.61(d,J=6.0Hz,1H), 6.44(d,J=3.3Hz,1H), 3.85(s,3H).
10. 5-(4-((1 H -인돌-5-일)( 메틸 )아미노)피리미딘-2- 일아미노 )-2-메틸벤젠설폰아마이드( MKP101 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드(14.4 mg, 0.077 mmol) 및 화합물 13a(20mg,0.077mmol)를 1-부탄올(1.5mL)에 녹인 혼합물을 200℃에서 30분 동안 초음파 반응시켰다. 상기 반응 바이알을 실온으로 식히고 진공하에서 용매를 증발시켰다. 조산물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(MeOH : DCM = 1 : 20)로 정제하여 화합물 MKP101(20.1 mg, 0.0492 mmol, 63.9 %)를 얻었다.
1H NMR (600 MHz, CD3OD, Acetone d6 ) δ 8.64 (s, 1H), 7.67 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.19 (brs, 1H), 6.97 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.49 (dd, J = 3.0, 0.6 Hz, 1H), 5.69 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.60 (s, 3H); 13C NMR (150 MHz, CD3OD, Acetone d6 ) δ 163.61, 159.16, 153.99, 141.32, 138.92, 136.27, 135.14, 132.12, 128.91, 128.44, 125.85, 122.10, 120.05, 118.41, 118.03, 112.18, 101.50, 96.87, 38.24, 18.28; HRMS (ESI) : calcd for C20H20N6O2S [M+H]+, 409.1458, found 409.1450.
11. 2- 메틸 -5-(4-( 메틸(3-메틸-1H-인돌-5-일)아미노 )피리미딘-2- 일아미노 ) 벤젠설폰아마이드 ( MKP102 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드 및 화합물 13b를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP102를 합성하였다(70.3 %yield).
1H NMR (600 MHz, DMSO d6 ): δ 11.12 (s, 1H), 11.05 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.43 (s, 3H), 7.26-7.27 (m, 1H), 7.05 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.26 (s, 3H); 13C NMR (600 MHz, DMSO d6 ) : δ 162.32, 151.15, 142.57, 142.27, 135.40, 135.16, 133.28, 132.63, 131.23, 128.46, 124.72, 123.63, 119.39, 118.81, 116.04, 112.75, 109.97, 97.40, 39.98, 19.15, 9.35; HRMS (ESI): calcd for C21H22N6O2S [M+H]+, 423.1615, found 423.1617.
12. 2- 메틸 -5-(4-( 메틸(2-메틸-1H-인돌-5-일)아미노 )피리미딘-2- 일아미노 ) 벤젠설폰아마이드 ( MKP103 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드 및 화합물 13c를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP103을 합성하였다.
1H NMR (600 MHz, CD3OD d6 ) δ 8.63 (s, 1H), 7.63 (d, J = 6.24, 1H), 7.60 (dd, J = 8.3, 2.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 1H), 5.68 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.43 (s, 3H); 13C NMR(150 MHz, CD3OD d6 ) δ 165.06, 160.46, 155.01, 142.64, 140.27, 138.49, 137.41, 136.91, 133.50, 131.51, 129.97, 123.60, 120.20, 119.52, 118.65, 112.56, 100.81, 98.33, 39.63, 19.63, 13.51; HRMS (ESI) : calcd for C21H22N6O2S [M+H]+, 423.1620, found 423.1621.
13. 2- 메틸 -5-(4-( 메틸(1-메틸-1 H -인돌-5-일)아미노 )피리미딘-2- 일아미노 ) 벤젠설폰아마이드 ( MKP104 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드 및 화합물 13d를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP104를 합성하였다(81.9 %yield).
1H NMR (600 MHz, DMSO d6 ) δ 9.35 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.77 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.23 (s, 2H), 7.17 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 3.0, 0.6 Hz, 1H), 5.60 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.49 (s, 3H), 2.51 (s, 3H); 13C NMR (150 MHz, DMSO d6 ) δ 163.35, 159.80, 155.80, 142.26, 139.76, 136.70, 135.56, 132.47, 131.35, 129.15, 127.46, 121.82, 120.76, 119.15, 117.68, 111.46, 101.11, 97.01, 38.97, 33.11, 19.58; HRMS (ESI) : calcd for C21H22N6O2S [M+H]+, 423.1616, found 423.1615.
14. N 4 - (1 H- 인돌-5-일)- N 2 - (4-(2- 모르폴리노에톡시 ) 페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP106 ) 합성
4-(2-모르폴리노에톡시)아닐린(화합물 4a)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP106을 합성하였다(15.8 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ10.26(s,1H), 8.29(s,1H), 8.17(s,1H), 7.91(d,J=6.0Hz,1H), 7.87(s,1H), 7.69-7.73(m,2H), 7.33-7.42(m,2H), 7.19(dd,J=9.0, 1.8Hz,1H), 6.81-6.85(m,2H), 6.44(s,1H), 6.11(dd,J=5.7,1.5Hz,1H), 4.08(t,J=5.7Hz,2H), 3.61(t,J=4.5Hz,4H), 2.72(t,J=5.7Hz,2H), 2.52(t,J=4.5Hz,4H); HRMS(ESI):exact mass calcd for C24H26N6O2[M+H]+,431.2190, found 431.2180.
15. N 4 - (1 H- 인돌-5-일)- N 2 - (4-(4- 모르폴리노부톡시 ) 페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP107 ) 합성
4-(4-모르폴리노부톡시)아닐린(화하물 4b)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP107을 합성하였다(10 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.28 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.91 (d, J=6.0Hz,1H), 7.88(s,1H), 7.71(d,J=6.0Hz,1H), 7.35-7.42(m,2H), 7.14-7.18(m,2H), 7.20(d,J=9.9Hz,1H), 6.83 (d, J=9.0Hz,2H), 6.45(s,1H)6.12(d,J=5.7Hz,1H), 3.98(t,J=6.3Hz,2H), 3.60(t,J=4.5Hz,4H), 2.34-2.9(m,6H).1.62-1.85(m,4H); HRMS(ESI):exact mass calcd for C26H30N6O2[M+H]+,459.2503, found 459.2491.
16. N 4 - (1 H- 인돌-5-일)- N 4 - 메틸 - N 2 -(4-(4- 모르폴리노부톡시 ) 페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP108 ) 합성
4-(4-모르폴리노부톡시)아닐린(화합물 4b)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-N-메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 13a)을 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP108을 합성하였다(31.8 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 8.25 (s, 1H), 7.71-7.75 (m, 3H), 7.50-7.55 (m, 2H), 7.43 (t, J=2.7Hz,1H), 7.02(dd,J=8.4,2.1Hz,1H), 6.84(d,J=9.0Hz,1H), 6.53(s,1H), 5.63(d,J=6.0Hz,1H), 3.97 (t, J=6.6Hz,2H), 3.45-3.65(m,7H), 2.30-2.40(m,6H), 1.61-1.69(m,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C27H32N6O2[M+H]+, 473.2659, found 473.2649.
17. N 4 - (1 H -인돌-5-일)- N 2 - (4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4- 디아민 ( MKP109 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP109를 합성하였다 (8.1 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.25 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.91 (d, J=6.0Hz,1H), 7.88(s,1H), 7.70(dd,J=8.7,4.5Hz,1H), 7.33-7.41(m,2H), 7.18-7.21(m,1H), 6.87(d,J=9.3Hz,2H), 6.44 (d, J=2.4Hz,1H), 6.11(dd,1H)6.12(dd,J=5.7,1.5Hz,1H), 3.77(t,J=4.8Hz,4H), 3.06(t,J=4.8Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C22H22N6O[M+H]+, 387.1928, found 387.1915.
18. N 4 -(1 H -인돌-5-일)- N 2 -(3- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4- 디아민 ( MKP110 ) 합성
3-모르폴리노아닐린(화합물 7a)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP110을 합성하였다(52.7 %yield).
1H NMR (300 MHz, CD3OD):δ 7.81-7.84 (m, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.31-7.37 (m, 2H), 7.23 (t, J=3.0Hz,1H), 7.15(dd,J=8.4,2.4Hz,1H), 6.99-7.13(m,2H), 6.56(dd,J=8.1,2.1Hz,1H), 6.38-6.40(m,1H), 6.09(d,J=8.7Hz,1H), 3.59(t,J=4.8Hz,4H), 2.90(t,J=4.8Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C22H22N6O[M+H]+, 387.1928, found 387.1916.
19. N 4 -(1- 메틸 -1 H -인돌-5-일)- N 2 -(4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP111 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1-메틸-1H-인돌-5-아민 (화합물 13e)를 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP111을 합성하였다
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ):δ9.04(s,1H), 8.79(s,1H), 7.93(s,1H), 7.89(d,J=5.46Hz,1H), 7.59(d,J=8.88Hz,2H), 7.37(d,J=9.84Hz,1H), 7.30(d,3.06Hz,1H), 7.21(d,J=7.95Hz,1H), 6.82(d,J=9.09Hz,2H), 6.34(d,J=3.3Hz,1H), 6.08(d,J=5.07Hz,1H), 3.78(s,3H), 3.74(t,J=8.82Hz,4H), 3.02(t,J=8.91Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C23H24N6O[M+H]+, 401.2084, found 401.2074.
20. N 4 - 메틸 - N 4 -(1- 메틸 -1 H -인돌-5-일)- N 2 -(4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP112 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-N,1-디메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 13d)을 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP112를 합성하였다.
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ8.38(s,1H), 7.71(d,J=8.37Hz,3H), 7.52(s,1H), 7.50(d,J=1.68Hz,1H), 7.32(d,J=3.03Hz,1H)7.08(dd,J=8.61,1.92Hz1H), 6.88(d,8.67Hz,2H), 6.49(d,J=3.15Hz,1H), 5.62(d,5.85Hz,1H), 3.89(s,3H), 3.77(t,9.54Hz,4H), 3.49(s,3H), 3.06(t,9.42Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C24H26N6O[M+H]+, 415.2241, found 415.2228.
21. N 2 - (3- 플루오로 -4- 모르폴리노페닐 )- N 4 -(1 H -인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민( MKP113 ) 합성
3-플루오로-4-모르폴리노아닐린(화합물 10b)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)을 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP113을 합성하였다(48.2 %yield).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ):δ 11.21 (s, 1H), 10.78 (s, 1H), 10.50 (s, 1H), 7.91 (d, J=7.2Hz,1H), 7.81(s,1H), 7.50-7.55(m,1H), 7.39-7.41(m,2H), 7.18-7.24(m,2H), 7.03(t,J=9.0Hz,1H), 6.37-6.41(m,2H), 3.75(t,J=4.5Hz,4H), 2.98(t,J=4.5Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C22H21FN6O[M+H]+, 405.1834, found 405.1826.
22. N 2 - (3- 플루오로 -5- 모르폴리노페닐 )- N 4 -(1 H -인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민( MKP114 ) 합성
3-플루오로-5-모르폴리노아닐린(화합물 7b)과 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)을 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP114를 합성하였다(48.7 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.29 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.97 (d, J=6.0Hz,1H), 7.78(s,1H), 7.36-7.43(m,3H), 7.21(dd,J=8.7,2.1Hz,1H), 7.12(s,1H), 6.45(s,1H), 6.19-6.30(m,2H), 3.66(t,J=4.8Hz,4H), 3.04(t,J=4.8Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C22H21FN6O[M+H]+, 405.1834, found 405.1823.
23. N 4 -(1 H -인돌-5-일)- N 2 -(4- 메톡시 -3- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP115 ) 합성
4-메톡시-3-모르폴리노아닐린(화합물 10a)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)을 이용하여 상기 화합물 MKP101 합성방법으로 화합물 MKP115를 합성하였다(69.2 %yield).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 10.99 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.89 (d, J=6.0Hz,1H), 7.86(s,1H), 7.41(dd,J=8.7,2.4Hz,1H), 7.30-7.34(m,2H), 7.14-7.18(m,2H), 6.78(d,J=8.7Hz,1H), 6.36(s,1H), 6.08(d,J=6.0Hz,1H), 3.74(s,3H), 3.63(t,J=4.5Hz,4H), 2.86(t,J=4.5Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C23H24N6O2[M+H]+, 417.2033, found 417.2020.
24. N 4 - (1 H -인돌-5-일)- N 2 -(3- 메톡시 -5- 모르폴리노페닐 )피리미딘-2,4-디아민( MKP116 ) 합성
3-메톡시-5-모르폴리노아닐린(화합물 7c)와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 12a)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP116을 합성하였다(64.5 %yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ10.23(s,1H), 8.30(s,1H), 8.19(s,1H), 7.96(d,J=5.7Hz,1H), 7.79(s,1H), 7.34(t,J=2.7Hz,1H), 7.20(dd,J=8.7Hz,2.1Hz,1H), 7.06(d,J=2.1Hz,1H), 6.43-6.45(m,1H), 6.14(d,J=6.0Hz,1H), 6.10-6.11(m,1H), 3.66(s,3H), 3.64(t,J=4.8Hz,4H), 3.01(t,J=4.8H,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C23H24N6O2[M+H]+, 417.2033, found 417.2016.
25. N 4 -(1 H -인돌-5-일)- N 2 -(3- 메톡시 -5- 모르폴리노페닐 )- N 4 - 메틸피리미딘 -2,4-디아민( MKP117 ) 합성
3-메톡시-5-모르폴리노아닐린(화합물 7c)과 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-N-메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 13a)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP117을 합성하였다(66.6% yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.46 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.76 (d, J=6.0Hz,1H), 7.56(s,1H), 7.53(t,J=2.1Hz,1H), 7.44(t,J=2.7Hz,1H), 7.23(t,J=2.1Hz,1H), 7.11(s,1H), 7.04(dd,J=8.7Hz,2.1Hz,1H), 6.53(d,J=2.1Hz,1H), 6.14(t,J=2.1Hz,1H), 5.64(d,J=6.0Hz,1H), 3.74-3.81(m,7H), 3.53(s,3H), 3.13(t,J=4.8Hz,4H);HRMS(ESI):exact mass calcd for C24H26N6O2[M+H]+, 431.2190, found 431.2181.
26. 5-(4-(1 H -인돌-5- 일옥시 )피리미딘-2- 일아미노 )-2-메틸벤젠설폰아마이드( MKP122 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드와 5-(2-클로로피리미딘-4-일옥시)-1H-인돌(화합물 12d)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP122를 합성하였다(49.6 % yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.43 (br s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.30 (d,J=5.7Hz,1H), 8.22(s,1H), 7.83(dd,J=8.1,2.4Hz,1H), 7.51(d,J=8.7Hz,1H), 7.45(t,J=3.0Hz,1H), 7.38(d,J=1.5Hz,1H), 6.93-7.03(m,2H), 6.40-6.54(m,2H), 6.34(d,J=5.7Hz,1H), 2.54(s,3H);HRMS(ESI): exact mass calcd for C19H17N5O3S[M+H]+, 396.1125, found 396.1115.
< 실시예 2> 파조파닙 유도체 MKP105 합성
[반응식 5]
Figure pat00011
1. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)- N - 메틸 -1 H -인돌-6-아민(화합물 14) 합성
6-아미노인돌(297.4 mg, 2.25 mmol), 2,4-디클로로피리미딘(217.5 mg, 1.5 mmol), 메탄올(1 mL) 및 물(3 ml)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다.
상기 반응 혼합물에 물을 첨가하여 희석하고 2N-HCl로 산성화시킨 후 초음파처리하였다. 그 후 생성된 고체를 여과하여 물로 세정하고 건조시켜 흰색 고체 화합물 14(247 mg, 67.3 %)를 얻었다.
1H NMR (300MHz, DMSO-d 6 ):δ11.12(s,1H), 9.93(s,1H), 8.08(d,J=6.0Hz,1H), 7.77(brs,1H), 7.51(d,J=8.4Hz,1H), 7.31(t,J=2.7Hz,1H), 7.03(d,J=8.4Hz,1H), 6.70(d,J=6.0Hz,1H), 6.40(s,1H).
2. N -(2- 클로로피리미딘 -4-일)- N - 메틸 -1 H -인돌-6-아민(화합물 15) 합성
-10℃에서 DMF(1 mL)에 용해시킨 화합물 14(50 mg, 0.204 mmol) 및 소듐 하이드라이드(60% dispersed in mineral oil, 8.2 mg, 2.04 mmol)의 혼합물에 아이오도메탄(12.7 μL, 2.04 mmol) 몇 방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 -10℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물과 염수로 세정하며, 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(EtOAc:Hexane = 1:2)로 정제하여 화합물 15(42.6 mg, 0.165 mmol, 80.7 %)를 얻었다.
1H NMR (600MHz, CDCl3) δ 8.77 (s, 1H), 7.79 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 3.2, 2.5 Hz, 1H), 7.23-7.24 (m, 1H), 6.92 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 6.60 - 6.61 (m, 1H), 6.12 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H); 13C NMR (150 MHz, CDCl3) δ 164.04, 160.452, 155.55, 137.78, 136.21, 127.52, 126.01, 122.41, 118.51, 109.49, 103.67, 102.74, 38.73; HRMS (ESI) : calcd for C13H11ClN4 [M+H]+, 259.0745, found 259.0748.
3. 5-(4-((1 H -인돌-6-일)( 메틸 )아미노)피리미딘-2- 일아미노 )-2-메틸벤젠설폰아마이드( MKP105 ) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드와 N-(2-클로로피리미딘-4-일)-N-메틸-1H-인돌-6-아민(화합물 15)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP105를 합성하였다(58.3%yield).
1H NMR (600MHz, CD3OD):δ8.61(s,1H), 7.68(d,J=6.0Hz,1H), 7.63(d,J=8.4Hz,1H), 7.59(dd,J=8.4,2.4Hz,1H), 7.31(d,J=3.0Hz,1H), 7.28-7.29(m,1H), 7.17(d,J=8.4Hz,1H), 6.89(dd,J=8.4,1.8Hz,1H), 6.50(dd,J=3.0,0.6Hz,1H), 5.74(d,J=6.0Hz,1H), 3.56(s,3H), 2.59(s,3H);13CNMR(150MHz,CD3OD):δ164.97, 160.58, 155.40, 142.65, 140.29, 139.74, 138.06, 133.52, 130.01, 128.80, 127.15, 123.64, 122.55, 119.55, 119.32, 110.99, 102.57, 98.30, 39.59, 19.66; HRMS(ESI):exact mass calcd for C20H20N6O2S[M+H]+, 409.1458, found 409.1457.
< 실시예 3> 화합물 MKP118 -121, 123 합성
[반응식 6]
Figure pat00012
1. N -(6- 클로로피리미딘 -4-일)-1 H -인돌-5-아민(화합물 16a) 합성
이소프로판올(10 mL)에 4,6-디클로로피리미딘(500 mg, 3.356 mmol), 5-아미노인돌(443.6 mg, 3.356 mmol), 트리메틸아민(468 μL)을 녹인 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸아세테이트(EtOAc)로 희석하고 물과 염수로 세정한 후 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 크로마토그래피(MeOH:DCM = 1:40)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 16a(800 mg, 3.270 mmol, 97.4%)를 얻었다.
2. 5-(6- 클로로피리미딘 -4- 일옥시 )-1 H -인돌(화합물 16b) 합성
아세토나이트릴(5 mL)에 5-하이드록시인돌(536.3 mg, 3.6 mmol), 4,6-디클로로피리미딘(399.5 mg, 3.0 mmol) 및 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]undec-7-엔(897.3 μL, 6.0 mmol)을 녹인 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 에틸아세테이트(EtOAc)로 희석하고 물과 염수로 세정한 후 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 플래쉬 크로마토그래피(MeOH:DCM = 1:40)로 정제하여 흰색 고체인 화합물 16b(683.8 mg, 2.783 mmol, 92.8 %)를 얻었다.
3. N -(6- 클로로피리미딘 -4-일)- N - 메틸 -1 H -인돌-5-아민(화합물 17a) 합성
0℃에서 DMF(2 mL)에 용해시킨 화합물 16a(150 mg,0.613 mmol)와 소듐 하이드라이드(60% dispersed in mineral oil, 29.4 mg, 0.736 mmol)의 혼합물에 아이오도메탄(76.3μL, 1.226 mmol) 몇 방울을 첨가하였다. 상기 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반시켰다. 상기 반응 혼합물을 에틸아세테이트(EtOAc)로 희석하고 물과 염수로 세정한 후 무수 MgSO4로 건조한 후, 진공 하에서 농축하였다. 이렇게 얻어진 조산물을 실리카겔 상 플래쉬 크로마토그래피(EtOAc:Hexane = 1:2)로 정제하여 화합물 17a(42.3 mg, 0.166 mmol, 27.1%)를 얻었다.
4. N 4 -(1 H -인돌-5-일)- N 6 -(4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-4,6- 디아민 ( MKP118 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 N-(6-클로로피리미딘-4-일)-1H-인돌-5-아민(화합물 16a)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP118을 합성하였다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 )δ:11.00(s,1H), 8.71(s,2H), 8.13(s,1H), 7.61(s,1H), 7.30-7.35(m,4H), 7.06(dd,J=8.79,2.07Hz.1H), 6.88(d,J=8.94Hz,2H), 5.92(s,1H), 3.73(t,J=9.27Hz,4H), 3.02(t,J=9.42Hz,4H); HRMS(ESI): exact mass calcd for C22H22N6O[M+H]+, 387.1928, found 387.1912.
5. N 4 -(1 H -인돌-5-일)- N 4 - 메틸 - N 6 -(4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-4,6-디아민( MKP119 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 N-(6-클로로피리미딘-4-일)-N-메틸-1H-인돌-5-아민(화합물 17a)를 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP119를 합성하였다(51.1%yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.45 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.36-7.54 (m, 5H), 7.00 (dd, J=8.4Hz,1.8Hz,1H), 6.80(dd,J=9.3Hz,2.4Hz), 6.53(d,J=2.1Hz), 5.43(d,J=0.9Hz,1H), 3.73(t,J=4.8,4H), 3.46(s,3H), 2.99(t,J=4..8Hz,4H); HRMS(ESI):exact mass calcd for C23H24N6O[M+H]+, 402.2084, found 402.2075.
6. 6-(1 H -인돌-5- 일옥시 )- N -(4- 모르폴리노페닐 )피리미딘-4-아민( MKP120 ) 합성
4-모르폴리노아닐린과 5-(6-클로로피리미딘-4-일옥시)-1H-인돌 (화합물 16b)를 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP120을 합성하였다 (35.2%yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.45 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.24 (d, DJ=0.6Hz,1H), 7.40-7.49(m,4H), 7.34(d,J=2.1Hz,1H), 6.89-6.94(m,3H), 6.50(t,J=1.1Hz,1H), 5.88(d,J=0.6Hz,1H), 3.76(t,J=4.8Hz,4H), 3.07(t,J=4.8Hz,4H); HRMS(ESI): exact mass calcd for C22H21N5O2[M+H]+, 388.1768, found 388.1758.
7. 6-(1 H -인돌-5- 일옥시 )- N -(4- 메톡시 -3- 모르폴리노페닐 )피리미딘-4-아민( MKP121 ) 합성
4-메톡시-3-모르폴리노아닐린(화합물 10a)와 5-(6-클로로피리미딘-4-일옥시)-1H-인돌(화합물 16b)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP121을 합성하였다 (66.8%yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone d6 ): δ 10.41 (br s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.48 (d, J=8.7Hz,1H), 7.41(t,J=3.0Hz,1H), 7.34(d,J=2.4Hz,1H), 7.08(dd,J=8.4,2.4Hz,1H), 7.00(d,J=2.4Hz,1H), 6.90(dd,J=8.7,2.4Hz,1H), 6.50(t,J=2.1Hz,1H), 5.91(s,1H), 3.79(s,3H), 3.72(t,J=4.8Hz,4H), 2.90(t,J=4.8Hz,4H); HRMS (ESI) : exact mass calcd for C23H23N5O3[M+H]+, 418.1874, found 418.1863.
8. 5-(6-(1 H -인돌-5- 일옥시 )피리미딘-4- 일아미노 )-2- 메틸벤젠설폰아마이드 (MKP123) 합성
5-아미노-2-메틸벤젠설폰아마이드와 5-(6-클로로피리미딘-4-일옥시)-1H-인돌(화합물 16b)을 이용하여 상기 MKP101의 합성방법으로 화합물 MKP123을 합성하였다(50.9%yield).
1H NMR (300 MHz, Acetone-d 6 ):δ 10.43 (br s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.25 (d, J=2.4Hz,1H), 7.87(dd,J=8.4,2.4Hz,1H), 7.51(d,J=8.4Hz,1H), 7.43(t,J=3.0Hz,1H), 7.36(d,J=2.1Hz,1H), 7.30(d,J=8.4Hz,1H), 6.93(dd,J=8.4,2.1Hz,1H), 6.50-6.61(m,3H), 5.98(s,1H), 2.61(s,3H); HRMS(ESI): exact mass calcd for C19H17N5O3S[M+H]+, 396.1125, found 396.1119.
[파조파닙 및 MKP101]
Figure pat00013
[MKP102 ~ MKP105]
Figure pat00014
[MKP106 ~ MKP114]
Figure pat00015
[MKP115 ~ MKP123]
Figure pat00016

< 실시예 4> 세포 배양
EGFR TKI-민감성 비소세포성폐암 세포주인 HCC827 세포를 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA)로부터 구매한 후, 10% 태아소혈청(FBS, Welgene Inc.) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신(Gibcoㄾ, Life Technologies, Carlsbad, CA, USA)을 보강한 RPMI 1640(Welgene Inc., Daegu, Republic of Korea) 배지에서 37℃, 5% 이산화탄소 분위기 하 배양하였다. 인간 제대정맥 내피세포(HUVECs, ScienCell Research Laboratories, Carlsbad, CA, USA)는 내피성장배지-2(EGM-2; Lonza, Walkersville, MD, USA)에서 3계대 내지 6계대로 배양하였다.
< 실시예 5> In vitro 카이네이즈 분석
모든 카이네이즈 분석은 IC50 ProfilerTM(Millipore Corp., Billerica, MA, USA)을 이용하여 수행하였다. 이때, IC50 값을 산출하기 위하여 8개 농도에서 화합물을 테스트 하였다.
표 1은 인간 카이네이즈에 대한 MKP101의 IC50 값(nM)을 산출한 것이고, 이때 파조파닙의 EGFR에 대한 IC50 값은 문헌(Br J Cancer 101:1717-1723, 2009)에 기재되어 있어 별도의 실험을 수행하지 않았다. 이때, MKP101은 EGFR 및 돌연변이 EGFR (L858R)에 대해 IC50 값이 각각 43 nM 및 17 nM인 것으로 나타나 EGFR 및 돌연변이 EGFR (L858R)에 대한 강한 억제 활성을 나타내었고, 더불어 안지오카이네이즈(angiokinase)인 VEGFRs, FGFR3, PDGFRs 및 cKit도 의미있게 억제하였다. 한편, 파조파닙은 EGFR을 억제하지 않았다.
Kinase EGFR EGFR (L858R) FGFR1 FGFR3 VEGFR-1 VEGFR-2 VEGFR-3 PDGFRα PDGFRβ cKit
MKP101 43 17 28 43 3 32 2 162 70 108
Pazopanib >3,000 - 80 138 7 15 2 73 215 48
표 2는 40개의 카이네이즈에 대한 1 mM MKP101의 카이네이즈 프로파일 결과를 나타낸 것이다.
카이네이즈 % 억제율 카이네이즈 % 억제율
Abl (h) 100 MAPK2 (h) 0
AMPKα1 (h) 0 p70S6K (h) 20
CaMKIIβ (h) 17 PhKγ2 (h) 0
CaMKIIγ (h) 37 PKA (h) 7
CaMKIIδ (h) 41 PKBβ (h) 14
CaMKIV (h) 0 PKCα (h) 10
CDK1/cyclin B (h) 18 PKCβI (h) 7
CDK2/cyclin A (h) 12 PKCβII (h) 8
CDK2/cyclin E (h) 8 PKCγ (h) 12
CDK3/cyclin E (h) 6 PKCδ (h) 0
CDK5/p25 (h) 47 PKCε (h) 2
CDK5/p35 (h) 38 PKCη (h) 0
CDK7/cyclin H/MAT1 (h) 16 PKCι (h) 5
CDK9/cyclin T1 (h) 54 PKCμ (h) 7
Flt3 (h) 91 PKCθ (h) 16
GSK3β (h) 18 PKCζ (h) 5
IR (h) 14 PKG1α (h) 0
LKB1 (h) 0 PKG1β (h) 7
Lyn (h) 98 ROCK-II (h) 4
MAPK1 (h) 4 SAPK2a (h) 82
표 3은 EGFR 및 HCC827에 대한 파조파닙 유도체들의 IC50 값(nM)을 나타낸 것으로서, MKP101과 MKP102는 HCC827에 대해 의미있는 증식억제 활성을 나타낸 반면, 다른 MKP 화합물들은 HCC827에 대해 증식억제 활성을 나타내지 못하였다.
화합물
 EGFR HCC827
IC50(nM)
% 억제율 1mM IC50(nM)
MKP101 97 43 160
MKP102 93 55 197
MKP103 42 NDa 1633
MKP104 20 ND 2680
MKP105 47 ND 1465
Gefitinib 100 3 10
화합물
 IC50(nM)
EGFR VEGFR-2
MKP106 210 20
MKP107 178 130
MKP108 200 26
MKP109 240 50
MKP110 180 30
MKP111 2240 1574
MKP112 10120 360
MKP113 1630 30
MKP114 610 41
MKP115 56 10
MKP116 41 20
MKP117 27 31
MKP118 7 1200
MKP119 35 >3000
MKP120 10 22
MKP121 58 46
MKP122 2042 20
MKP123 18 45
< 실시예 6> 세포생존율 분석
1. HCC827 세포 생존율 분석
5% FBS 및 1% 페니실린-스트렙토마이신이 보강된 RPMI 1640 배지 100 mL에서 배양한 HCC827 세포를 96웰 플레이트에 분주하였다. 상기 세포를 24시간 동안 배양한 후, 테스트 화합물을 농도별로 희석하여 72시간 동안 세포에 처리하였다. 세포생존율은 제조사의 지침에 따라 EZ-Cytox(Daeil Lab Service, Seoul, South Korea)을 이용하여 분석하였다. 그리고, EGFR 인산화 억제 여부를 확인하기 위하여 알려진 방법으로 웨스턴 블롯 분석을 수행하였다.
도 1과 같이, MKP101은 EGFR TKI-민감성 비소세포성폐암 세포주인 HCC827 세포의 증식을 의미있게 억제하였으며, 웨스턴 블롯 분석을 통해 분석한 결과 MKP101이 인산화된 EGFR의 수준을 감소시키는 것으로 확인되었다.
2. HUVEC 생존율 분석
HUVEC 생존율 분석을 위해, HUVEC에 인산완충생리식염수(PBS) 또는 EGM-2 배지에 농도별로 처리한 VEGF 억제제를 24시간 동안 처리하였다. 이렇게 처리한 세포를 PBS로 세정한 후, 도립 광학현미경(Nikon Eclipse Ti-U; Nikon Corp., Tokyo, Japan)을 이용하여 각 웰로부터 5개의 랜덤 영역에서 세포수를 카운팅하였다.
도 2A와 같이, 파조파닙과 MKP101을 각각 5 ㎍/mL 및 10 ㎍/mL로 처리한 경우에는 1 ㎍/mL로 처리한 경우와 달리 의미있는 세포 독성이 나타나서 이후 in vitro 혈관신생 분석에서는 파조파닙과 MKP101을 1 ㎍/mL로 처리하여 분석을 수행하였다.
< 실시예 7> In vitro 혈관신생 분석
VEGF에 대한 길항적 반응을 분석하기 위하여, 50 ng/mL VEGF-A(R&D Systems, Minneapolis, MN)에 HUVEC을 노출시킨 후 관 형성, 긁힌 상처 이동 및 세포 증식 분석을 수행하였다.
세포 증식 분석을 위해, 세포를 0.5% FBS 함유한 내피기저배지(EBM; Lonza, Walkersville, MD, USA), 또는 VEGF-A 및/또는 MKP101을 첨가한 내피기저배지(EBM; Lonza, Walkersville, MD, USA)에서 밤새도록 반응시켰다. 이렇게 반응시킨 세포를 PBS로 세정하고 4개의 랜덤 현미경 영역에서 세포수를 카운팅하였다.
관 형성 분석은 매트리젤 코팅 플레이트(BD Bioscience, Bedford, MA, USA) 상에 세포를 분주하고 0.5% FBS 함유한 EBM, 또는 VEGF-A 및/또는 MKP101을 첨가한 EBM에서 반응시켜 수행하였다. 밤새도록 반응시킨 후, 4개 랜덤 현미경 영역에서 세관 길이를 측정하여 세관 네트워크를 정량하였다.
긁힌 상처 이동 분석을 위해, 6웰 플레이트 상에 잘 성장한 세포 단일층을 형성한 후 마이크로피펫 팁을 이용하여 긁었다. 플레이트를 PBS로 세정하여 제자리에서 떨어져나간 세포를 제거하고 0.5% FBS 함유한 EBM, 또는 VEGF-A 및/또는 MKP101을 첨가한 EBM에서 8시간 동안 반응시켰다. 세포 이동은 광학 현미경으로 관찰하였으며, 상처 가장자리로부터 이동한 세포수를 측정하여 정량하였다.
도 2B 내지 도 2D와 같이, VEGF에 의해 유도된 내피 증식, 관 형성 및 세포 이동 증가는 파조파닙과 MKP101의 처리에 의해 의미있게 억제되었다.
< 실시예 8> 분자 모델링
도킹 연구를 수행하기 위하여, 선행문헌(J. Comput. Aid. Mol. Des., 27: 221-234, 2013; Maestro, version 9.4, Schrodinger, LLC, New York, NY, USA, 2013)을 참조하여 TAK-285(PDB ID: 3POZ)에 결합된 인간 EGFR 카이네이즈 도메인의 결정구조를 준비하였다. 즉, (i) TAK-285로부터 5Å 이상의 물 분자들을 제거하고, (ii) 수소 원자를 첨가하고, (iii) Epik을 이용하여 전체 반응계의 프로톤 부가를 pH 7.0 ± 3.0의 범위가 되도록 조정하였으며, (iv) 수소결합 네트워크와 Gln, Asn 및 His 잔기의 플립 방향성/호변이성 상태를 최적화하였고, (v) OPLS2005 힘마당(force field)을 이용하여 최대 RMSD 0.3Å로 기하학적 구조 최적화를 수행하였다. 파조파닙과 이들 유도체들의 프로톤 부가 및 중성 상태는 선행문헌(LigPrep, version 2.6, Schrodinger, LLC, New York, NY, 2013)에 따라 준비하였다.
플렉서블 도킹을 위해, 디폴트 결합 크기를 이용하여 그리드 박스를 TAK-285 결정구조의 중심에 두어 각 측면 상 10Å의 내부 박스와 25.7Å의 외부 박스를 가지며, 디폴트 파라미터를 갖는 플렉서블 도킹을 위해 글라이드 SP(Standard-Precision)를 사용하였다. 이후 분석을 위해, 가장 낮은 GlideScores를 갖는 가장 바람직한 도킹 배치를 선택하였다.
도 3은 EGFR 카이네이즈 도메인에서 MKP101의 도킹 예측 결과로서, MKP101는 TAK-285와 유사하게 EGFR의 ATP 결합부위를 점유하고 있고, MKP101의 인돌 고리가 TAK-285의 3-트리플루오로메틸페닐기와 유사하게 Met766, Cys775, Leu777, Leu788 및 Phe856에 의해 소수성 포켓을 형성하며, Phe856의 골격과 직접적인 수소결합을 형성하며, MKP101의 설폰아마이드기는 TAK-285의 하이드록시메틸부탄아마이드기와 유사하게 용매에 노출되어 있다(도 3A, 도 3C 참조).
한편, 도 3B 및 도 3D와 같이 파조파닙은 ATP 결합부위에 잘 맞지 않으며, 파조파닙의 단단하고 벌크한 디메틸인다졸기는 Phe856와 수소결합을 형성하지 않을 뿐 아니라, EGFR의 소수성 포켓 내에도 잘 맞지 않는다. 따라서, 파조파닙의 아닐린기는 힌지(hinge) 영역을 점유하지 못하며 용매에 노출되어 있다.
그리고, 도 4에서는 MKP101 외 다른 파조파닙 유도체들의 결합 형태를 예측한 것으로서, MKP101과 유사한 HCC827에 대한 증식억제 활성을 나타낸 MKP102는 MKP101과 유사한 결합 배치를 나타낸 반면, 다른 파조파닙 유도체들은 MKP101과 다른 결합 배치를 나타내므로, ATP 결합부위에서 MKP101이 제한된 공간을 갖는 소수성 포켓과 힌지 영역으로 둘러싸여 있고, 소수성 포켓에서 Phe856와의 수소결합이 EGFR 억제제를 설계하는 데에 중요한 인자임을 확인할 수 있었다.
< 실시예 9> 독성 실험
웅성 Balb/c 마우스에 화합물 MKP101을 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 각각 현탁하여 100 mg/kg, 500 mg/kg 및 1g/kg의 용량으로 1회 단회 경구투여하고 7일간 마우스의 생존율 및 체중을 조사하였다.
이러한 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다.
이상의 결과, 본 발명의 파조파닙 유도체는 마우스에서 1g/㎏까지 독성변화를 나타내지 않으며, 따라서, 경구 투여 중간치사량(LD50)은 1g/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
하기에 본 발명에 따른 화합물 MKP101을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
<제제예 1> 산제의 제조
화합물 MKP101 5 mg, 유당 100 mg 및 탈크 10 mg을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<제제예 2> 정제의 제조
화합물 MKP101 5 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2 mg을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<제제예 3> 캅셀제의 제조
화합물 MKP101 5 mg, 옥수수전분 100 mg, 유당 100 mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후 통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<제제예 4> 주사제의 제조
화합물 MKP101 2 mg, 주사용 멸균 증류수 적량 및 pH 조절제 적량을 혼합한 후 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (12)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염:
    [화학식 1]
    Figure pat00017

    상기 화학식 1에서,
    X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며;
    A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며;
    R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고;
    R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택됨.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 NH, N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시) 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2 중 어느 하나는 설폰아마이드이고, 다른 하나는 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시로 이루어진 군에서 선택되고; R3는 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; R4는 수소인 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 5-(4-((1H-인돌-5-일)(메틸)아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP101), 2-메틸-5-(4-(메틸(3-메틸-1H-인돌-5-일)아미노)피리미딘-2-일아미노)벤젠설폰아마이드(MKP102), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-(2-모르폴리노에톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP106), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-(4-모르폴리노부톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP107), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 4 -메틸-N 2 -(4-(4-모르폴리노부톡시)페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP108), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP109), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP110), N 4 -(1-메틸-1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP111), N 4 -메틸-N 4 -(1-메틸-1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP112), N 2 -(3-플루오로-4-모르폴리노페닐)-N 4 -(1H-인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민(MKP113), N 2 -(3-플루오로-5-모르폴리노페닐)-N 4 -(1H-인돌-5-일)피리미딘-2,4-디아민(MKP114), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(4-메톡시-3-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP115), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-메톡시-5-모르폴리노페닐)피리미딘-2,4-디아민(MKP116), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 2 -(3-메톡시-5-모르폴리노페닐)-N 4 -메틸피리미딘-2,4-디아민(MKP117), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 6 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4,6-디아민(MKP118), N 4 -(1H-인돌-5-일)-N 4 -메틸-N 6 -(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4,6-디아민(MKP119), 6-(1H-인돌-5-일옥시)-N-(4-모르폴리노페닐)피리미딘-4-아민(MKP120), 6-(1H-인돌-5-일옥시)-N-(4-메톡시-3-모르폴리노페닐)피리미딘-4-아민(MKP121), 5-(4-(1H-인돌-5-일옥시)피리미딘-2-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP122) 및 5-(6-(1H-인돌-5-일옥시)피리미딘-4-일아미노)-2-메틸벤젠설폰아마이드(MKP123)으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  5. 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물:
    [화학식 1]
    Figure pat00018

    상기 화학식 1에서,
    X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며;
    A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며;
    R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고;
    R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택됨.
  6. 청구항 5에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 NH, N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  7. 청구항 5에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2 중 어느 하나는 설폰아마이드이고, 다른 하나는 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시로 이루어진 군에서 선택되고; R3는 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; R4는 수소인 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  8. 청구항 5, 청구항 6 또는 청구항 7에 있어서, 상기 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환은 폐암, 결장암 및 유방암으로 이루어진 군에서 선택된 암질환인 것을 특징으로 하는 약학조성물.
  9. 청구항 5, 청구항 6 또는 청구항 7에 있어서, 상기 상피세포성장인자수용체(EGFR) 관련 암질환은 비소세포성 폐암인 것을 특징으로 하는 약학조성물.
  10. 하기 화학식 1로 표시되는 파조파닙 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 함유하는, 제피티닙 내성 암질환 치료 또는 예방용 약학조성물:
    [화학식 1]
    Figure pat00019

    상기 화학식 1에서,
    X 또는 Y 중 어느 하나는 질소이고, 다른 하나는 CH이며;
    A는 N-R5, O, S 또는 CH2 중 어느 하나이고, R5는 수소 또는 C1 내지 C4의 알킬이며;
    R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알킬), 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시), 설폰아마이드 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고;
    R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택됨.
  11. 청구항 10에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 NH, N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시, 모르폴리노, 모르폴리노(C1 내지 C4의 알콕시) 및 할로겐으로 이루어진 군에서 선택되고; R3 또는 R4는 각각 동일하거나 다를 수 있으며, 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.
  12. 청구항 10에 있어서, 상기 파조파닙 유도체는 상기 화학식 1에서 A는 N-CH3 또는 O 중 어느 하나이고; R1 또는 R2 중 어느 하나는 설폰아마이드이고, 다른 하나는 수소, C1 내지 C4의 알킬, C1 내지 C4의 알콕시로 이루어진 군에서 선택되고; R3는 수소 및 C1 내지 C4의 알킬로 이루어진 군에서 선택되고; R4는 수소인 것을 특징으로 하는 파조파닙 유도체 또는 그의 염.


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