KR20160136342A

KR20160136342A - 모발 성장의 억제를 위한 오스테오폰틴 유도체를 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR20160136342A
Application number: KR1020167027851A
Authority: KR
Inventors: 얀 알렌팔; 폰투스 두네르; 안나 훌트고르드 닐손; 랄프 파우스
Original assignee: 폴리쿰 에이비
Priority date: 2014-04-17
Filing date: 2015-04-17
Publication date: 2016-11-29
Also published as: RU2016144971A; US20170143605A1; CA2945930A1; AU2015248652A1; BR112016023899A2; GB201406989D0; RU2016144971A3; SG11201608497YA; EP3131528A1; JP2017513856A; CN106413734A; MX2016013589A; WO2015159099A1; IL248084A0

Abstract

본 발명은 활성 폴리펩타이드 성분 및 약제학적으로 허용가능한 및/또는 미용적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 포유동물에서 모발 생산을 억제하기 위한 조성물을 제공한다. 본 발명은 포유동물, 예컨대, 인간에서 모발 생산을 억제하는 방법을 추가로 제공한다.

Description

모발 성장의 억제를 위한 오스테오폰틴 유도체를 포함하는 조성물{COMPOSITIONS COMPRISING OSTEOPONTIN DERIVATIVES FOR THE INHIBITION OF HAIR GROWTH}

본 발명은 포유동물 (인간 포함)에서 모발 생산을 억제하기 위한 치료에 관한 것이다. 특히, 원치 않는 또는 과다한 모발 성장을 치료하고 예방하는데 있어 의료 및 미용적으로 사용하기 위한 폴리펩타이드 조성물이 제공된다.

원치 않는 모발 성장은 특히 여성에서 흔한 문제이며, 가장 흔히 민족적 배경 또는 유전의 결과이다. 소수의 여성에서, 그것은 안드로겐 과다생산, 순환 안드로겐에 대한 민감도 증가, 또는 다른 대사 및 내분비 이상에 의해 유발될 수 있다. 대략 22%의 여성이 콧수염 및 턱 부위에 원치 않는 모발 성장의 존재에 의해 영향을 받으며, 이는 큰 골치거리로서, 불안, 우울증 및 삶의 질 저하를 야기할 수 있다.

원치 않는 모발 성장의 근본적인 원인은 다를 수 있다. 대부분은 민족성이거나 유전성이지만, 안드로겐 과다, 예컨대, 체모의 증가, 불규칙한 월경 주기, 여드름, 탈모증 (alopecia), 및 지루 (seborrhoea)의 어떤 신호를 배제해야 한다.

다낭성 난소 증후군 (PCOS)은 안드로겐 과다의 가장 흔한 원인이고, 안드로겐 과다 환자 중 70-80%는 다모증 (hirsutism)을 나타내지만, 이 신호는 아시아 혈통의 여성 사이에 많이 퍼져있진 않다. 다모증에 대한 한 집안에 유전적인 강한 성향이 있는데, 이는 주로 이 집단에서의 근본적인 내분비 장애 및 모발 성장의 발달을 조절하는 인자가 강한 유전 성분을 가지기 때문이다.

환자는 제모를 위해 이용가능한 치료법에 대해 충분히 조언을 받아야 한다. 단일 제모 방법은 모든 신체의 위치 또는 환자에게 적절하지 않으며, 채택된 방법은 특성, 모발 성장 영역 및 양, 뿐만 아니라 환자의 연령, 기저 질환 또는 병태 및 환자의 개인적 선호도 뿐만 아니라 선택된 치료의 가능한 부작용에 좌우될 것이다.

물론, 건강한 개인이 순수하게 미용적 이유로 그들의 선택된 신체 영역에서 모발 성장을 억제하기를 원할 수 있음이 또한 알려져 있다.

과다한 모발을 제거하기 위한 치료 옵션은 제한적이며, 효과, 불편한 정도, 및 비용이 달라질 수 있다. 이 원치 않는 모발을 제거하기 위한 현재의 방법은 처방전 없이 살 수 있는 방법, 예컨대 발모 (plucking), 왁싱 (waxing) (당 형태 포함), 제모제 (depilatories), 면도, 및 가정용 전기분해 (home electrolysis)를 포함한다. 병원에서 일어날 수 있는 제모 방법은 레이저 제모 및 강한 펄스광 (IPL)을 포함한다. 추가적인 방식은 모발 성장을 억제하는 국소 크림이다: 에플로니틴 13.9% 크림 (Vaniqa®, Shire Pharmaceuticals).

이러한 방법들은 며칠 내지 몇 개월 범위의 재성장 시간을 갖는 일시적이다. PCOS와 연관된 다모증의 경우, 치료는 경구 피임약 및/또는 항-안드로겐, 예컨대 스피로노락톤, 사이프로테론 아세테이트, 플루타미드 및 피나스테라이드를 포함한다.

따라서, 의료 및 미용 적용 모두에서 사용하기에 적합한, 모발 성장을 억제하기 위한 새로운 치료가 필요하다.

발명의 요약

본 발명의 제1 측면은 하기를 포함하는, 포유동물에서 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물을 제공한다:

(a) 서열번호:1의 아미노산 서열

VDTYDGDISVVYGLR 서열번호:1 ["FOL-005"]

또는 포유동물 모발 생산에 대해 억제 활성을 보유하는 그것의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는 폴리펩타이드; 및

(b) 약제학적으로 허용가능한 및/또는 미용적으로 허용가능한 부형제, 담체, 보조제 또는 희석제.

상기 폴리펩타이드는 5 내지 50개의 아미노산 길이이다.

본 발명의 조성물 내에 존재하는 폴리펩타이드는 포유동물에서 모발 생산을 억제할 수 있다.

"모발 생산을 억제하는 것"은 조성물이 투여되는 포유동물에서 상기 조성물이 모발 생산의 하기 매개변수 중 하나 이상을 감소시키거나, 약화시키거나, 예방하거나 또는 제거할 수 있다는 것을 의미한다:

(a) 기존 모낭으로부터 각각의 모발의 성장; 및/또는

(b) 기존 모낭으로부터 각각의 모발의 두께; 및/또는

(c) 기존 모낭의 수 및/또는 밀도; 및/또는

(d) 새로운 모낭의 생산; 및/또는

(e) 모낭의 성장기 (anagen phase)의 지속; 및/또는

(f) 기존 모낭의 색소침착 (pigmentation).

그러한 억제는 본 발명의 조성물의 부재시의 포유동물에서의 모발 생산과 비교하여 전체 또는 일부일 수 있음이 인식될 것이다. 예를 들어, 상기 조성물은 기존 모낭으로부터의 모발 성장을 늦추지만 완전히 정지시키지 않을 수 있다.

유리하게도, 상기 조성물은 생체내에서 모발의 생산을 억제할 수 있다.

일 구현예에서, 상기 조성물은 인간의 모발 성장을 억제할 수 있다.

추가 구현예에서, 상기 조성물은 건강한 피부에 의해 모발의 생산을 억제할 수 있다.

추가 구현예에서, 상기 조성물은 두피 상에서 모발 생산을 억제할 수 있다.

전술한 바와 같이, 본 발명의 조성물에 의한 모발 생산의 억제는 기존 모낭에 대한 억제 효과에 의해 및/또는 새로운 모낭의 형성을 억제함으로써 매개될 수 있다.

따라서, 일 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 하기를 유도함으로써 기존 모낭을 억제할 수 있다:

(a) (예컨대, 성장기에서 퇴행기로의 변화를 유도함으로써) 모낭에서 성장기 길이의 감소; 및/또는

(b) 모낭에서 퇴행기 길이의 증가; 및/또는

(c) 모낭에서 휴지기 길이의 증가.

예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 기존 모낭에서 성장기로부터 퇴행기 및/또는 휴지기로의 변화를 유도하여, 모낭에 의한 활발한 모발 성장을 끝냄으로써 기존 모낭을 억제할 수 있다.

본 발명의 조성물의 폴리펩타이드 성분은 천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질의 하위 영역 (sub-region)과 아미노산 서열 유사성을 공유한다. 따라서, 일부 구현예에서 적어도, 상기 활성 폴리펩타이드 성분은 천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질의 활성 단편 또는 상기 단편의 변이체로서 간주될 수 있다 (즉상기 폴리펩타이드는 천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질의 단편의 변형된, 예를 들어 돌연변이된 형태의 것에 상응하는 아미노산 서열을 포함함).

골 시알로단백질 (bone sialoprotein) ┃ (BSP-1 또는 BNSP), 초기 T-림프구 활성화 (ETA-1), 분비된 인단백질 1 (SPP1), 2ar 및 리케챠 내성 (Rickettsia resistance) (Ric)으로도 공지된 오스테오폰틴은, 몇 가지 포유동물 종에서 보존된 유전자 산물이다.

상기 유전자는 5 킬로베이스 길이로 걸쳐있는 7개의 엑손을 가지며, 인간에서 염색체 4 영역 13 (4q13)의 긴 팔 (arm) 상에 위치한다. 상기 단백질은 ~300개의 아미노산 잔기로 구성되며 산성 잔기가 풍부하다: 30-36%는 아스파트산 또는 글루탐산이다. 오스테오폰틴은 10개의 시알산 잔기를 포함하는 약 30개의 부착된 탄수화물 잔기를 가지며, 이들은 골지체에서 번역후 수식 동안 상기 단백질에 부착되어 있다.

오스테오폰틴은 석회화된 골 기질 상의 골 고정화 파골세포에서 신규한 시알로단백질로서 처음 발견되었다 (Franzen & Heinegard, 1985, Biochem . J. 232 (3)715-24). 명칭 오스테오폰틴은 골 (오스테오 -)에서의 상기 단백질의 존재 및 골 세포 및 석회기 (mineral phase) 사이에 다리 (bridge) (-폰스)를 형성하는 그의 능력으로부터 비롯된다. 서열 분석 및 이후의 구조 연구는 오스테오폰틴이 오스테오폰틴의 미네랄 결합 특성을 매개하는 것으로 생각되는 약 10개의 아스파트산 잔기의 높은 산성 영역으로 구성된 32 kDa 당단백질임을 보여주었다. 더욱이, 오스테오폰틴 분자의 중간부에는, 또한 R-G-D 서열을 통해 매개되는 세포 부착 도메인이 있다 (Oldberg 등, 1986, Proc . Natl . Acad . Sci . USA 83 (23):8819-23, 그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨).

오스테오폰틴은 조골세포와 몇 가지 상피 세포 유형에서 항시적으로 발현되어, 많은 체액 내로 분비된다. 골은 오스테오폰틴이 침착되는 유일한 조직 유형이고, 이곳으로부터 오스테오폰틴은 다량으로 회수될 수 있다. 오스테오폰틴의 발현은 또한 혈관 평활근 세포에서, 상이한 암 세포 유형에서 그리고 염증 세포 (특히 대식세포 및 T 림프구) 중에서 유도될 수 있다. 부착, 증식, 이동, 항-세포자멸사 및 화학 유인작용 (chemo attraction)과 같은 몇 가지 중요한 세포 기능은 오스테오폰틴에 기인해왔다. 이러한 기능 중 일부는 상이한 인테그린, 주로 αvβ3 뿐만 아니라 αvβ1, 및 αvβ5와 상호작용하는 RGD 세포-부착 도메인을 통해 매개되는 것으로 여겨진다 (검토를 위해, Scatena 등, 2007, Arterio. Thromb.Vasc. Biol. 27:2302-2309 참고).

최근에, 오스테오폰틴은 염증 및 면역 반응과 관련된 몇 가지 세포 유형을 조절할 수 있는 강력한 사이토카인으로서 부각되었다. 오스테오폰틴에 기인한 광범위한 기능들은 난해하며, 단일 세포-결합 RGD 서열에 의해 전부 설명될 수는 없다. 상기 설명은 오스테오폰틴 내의 11개 아미노산 펩타이드 R¹⁴⁵-G-D-S-L-A-Y-G-L-R-S¹⁵⁵ (서열번호:135) (UniProt 코드 P10923의 아미노산 144 내지 154에 상응함)가 확인되고 이후에 기능적으로 맵핑되었을 때 나왔다. αvβ3 인테그린에의 결합을 매개하는 상기 공지된 R¹⁴⁵-G-D¹⁴⁷ 부위 외에도, 오스테오폰틴분자 내의 2개의 부가적인 필수 영역, 다시 말하면, 고 특이적 트롬빈 절단 부위, 즉 R¹⁵⁴-S¹⁵⁵, 및 α9β1 인테그린에 결합하는 잠적 (cryptic) 인테그린 결합 부위, 즉 S¹⁴⁸-L-A-Y-G-L-R¹⁵⁴ (서열번호:136)가 발견되었다 (상기 Scatena 등, 참고). α4β1에 대한 부가적인 결합 부위가 또한 확인되어 왔다 (상기 Scatena 등, 참고).

천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질은 전형적으로 대략 300개의 아미노산 길이이다. 그러나, 본 발명의 조성물의 폴리펩타이드 성분은 길이가 상당히 더 짧으며, 단지 5 내지 50개의 아미노산이다.

따라서, 상기 폴리펩타이드는 50 미만의 아미노산 길이, 예를 들어 35, 30, 28, 26, 24, 22, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 또는 10개 미만의 아미노산 길이이다.

일 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 5 내지 30개의 아미노산 길이, 예를 들어 5 내지 20, 5 내지 20, 8 내지 20, 8 내지 16, 또는 10 내지 15개의 아미노산 길이이다.

본원에 사용된 용어 '아미노산'은 표준 20개의 유전적으로 인코딩된 아미노산 및 (천연 'L' 형태와 비교하여) 'D' 형태의 이들의 상응하는 입체이성질체, 오메가-아미노산 및 다른 천연적으로 존재하는 아미노산, 비전통적인 (unconventional) 아미노산 (예컨대, α,α-이치환된 아미노산, N-알킬 아미노산, 등) 및 화학적으로 유도체화된 아미노산 (하기 참고)을 포함한다.

아미노산이 '알라닌' 또는 'Ala' 또는 'A'와 같이 구체적으로 열거되고 있을 때, 상기 용어는, 달리 명백하게 언급하지 않는 한 l-알라닌 및 d-알라닌 모두를 가리킨다. 다른 비전통적인 아미노산이 또한 본 발명의 폴리펩타이드를 위한 적합한 성분일 수 있는데, 상기 폴리펩타이드에 의해 원하는 기능적 특성이 유지되는 한 그러하다. 나타낸 폴리펩타이드의 경우, 각각 인코딩된 아미노산 잔기는, 적절한 경우, 전통적 아미노산의통속명 (trivial name)에 상응하는, 단일문자 지정에 의해 표시된다.

관례에 따라, 본원에 개시된 아미노산 서열은 N-말단에서 C-말단 방향으로 제공된다.

전형적으로, 본 발명의 조성물에서 사용되는 폴리펩타이드는 L-아미노산을 포함하거나 구성된다.

일 바람직한 구현예에서, 본 발명의 조성물의 폴리펩타이드 성분은 서열번호:1의 아미노산 서열로 구성된다.

대안적인 구현예에서, 본 발명의 조성물의 폴리펩타이드 성분은 서열번호:2의 아미노산 서열로 구성된다.

VDTYDGDISVVYGLS 서열번호: 2

추가 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 모발 생산에 대해 (적어도 일부) 억제 활성을 보유하는 서열번호: 1의 아미노산 서열의 단편을 포함하거나 구성될 수 있다.

"단편"은 서열번호: 1의 아미노산 서열의 적어도 5개의 인접 아미노산, 예를 들어 서열번호: 1의 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 또는 14개의 인접 아미노산을 포함한다. 따라서, 상기 단편은 14 이하의 아미노산 길이, 예를 들어 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개의 아미노산 길이일 수 있다.

예시적인 구현예에서, 상기 단편은 서열번호: 3 내지 65 중 임의의 하나에 따른 아미노산 서열을 포함하거나 그것으로 구성된다.

예를 들어, 상기 단편은 서열번호: 26의 아미노산 서열을 포함하거나 그것으로 구성될 수 있다.

대안적으로, 본 발명의 조성물은 모발 생산에 대해 (적어도 일부) 억제 활성을 보유하는, 서열번호: 1의 아미노산 서열의 변이체, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되는 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.

"변이체"는 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 1과 100% 아미노산 서열 동일성을 공유하지 않는다는 것을 의미하며, 즉 서열번호: 1의 하나 이상의 아미노산은 돌연변이되어야 한다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 서열번호: 1의 아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다.

퍼센트 동일성은 본 기술분야에서 잘 알려진 방법에 의해, 예를 들어 하기 Expasy 기능 사이트 (http://www.ch.embnet.org/software/LALIGN_form.html)에 있는 LALIGN 프로그램 (Huang 및 Miller, Adv . Appl . Math. (1991) 12:337-357)을 이용하여, 파라미터로서, 전역 정렬 옵션 (global alignment option), 스코어링 매트릭스 (scoring matrix) BLOSUM62, 오프닝 갭 패널티 (opening gap penalty) -14, 연장 갭 패널티 (extending gap penalty) -4를 이용하여 계산될 수 있다.

대안적으로, 2개의 폴리펩타이드 간의 퍼센트 서열 동일성은 적합한 컴퓨터 프로그램, 예를 들어 위스컨신 대학 유전자 컴퓨팅 그룹의 GAP 프로그램을 이용하여 결정될 수 있고, 퍼센트 동일성이 서열이 최적 정렬된 폴리펩타이드와 관련하여 계산된다는 것이 인식될 것이다.

"돌연변이된"은, 특정한 위치에 있는 아미노산이 서열번호: 1에 따른 폴리펩타이드에 있는 아미노산과 비교하여 변경된다는 것을 의미한다. 예를 들어, 특정한 위치에 있는 아미노산이 결실되거나, 치환되거나 또는 하나 이상의 아미노산의 삽입/부가의 부위일 수 있다. 상기 치환은 보존적 또는 비-보존적일 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다.

대안적으로, 또는 부가적으로, 특정한 위치에 있는 아미노산은 화학적으로 변형 (유도체화)될 수 있다; 하기를 참고한다.

일 구현예에서, 변이체 폴리펩타이드는 서열번호: 1의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 그것으로 구성되고, 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된다. "보존적으로 치환된"은 폴리펩타이드의 기능이 유의미하게 변화되지 않도록, 하나의 아미노산을 유사한 특성 (크기, 소수성, 등)을 갖는 또 다른 아미노산으로 치환하는 것을 의미한다. 따라서, "보존적 치환"은 Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg; 및 Phe, Tyr과 같은 의도된 조합이다.

변이체 폴리펩타이드가 서열번호:1의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함할 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성될 수 있다. 상기 변이체 폴리펩타이드는 천연적으로 존재하거나 비-천연적으로 존재할 수 있다.

일 바람직한 구현예에서, 상기 부가적인 아미노산은 야생형 인간 오스테오폰틴, 즉 GenBank: AAA59974.1 [서열번호:66] (서열번호:1에 대해 서열 유사성이 가장 높은 영역이 이탤릭체로 밑줄쳐 있음)의 상응하는 부분으로부터의 아미노산이다:

서열번호:66

야생형 인간 오스테오폰틴의 "상응하는 부분"은 상기 부가적인 아미노산이 상기 야생형 인간 오스테오폰틴 내의 동등한 위치에 존재하는 아미노산과 동일하다는 것을 의미한다 (서열번호:1의 아미노산 서열이 서열번호:66에서 이탤릭체로 밑줄쳐진 서열을 대체한다고 상상하는 경우). 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 서열번호:1의 아미노 말단에 있는 3개의 아미노산 VPT- 및/또는 서열번호:1의 카복시 말단에 있는 5개의 아미노산 -SKSKK를 포함할 수 있다.

추가 구현예에서, 상기 변이체 폴리펩타이드 서열은 서열번호: 67의 아미노산 서열, 또는 그것의 단편 또는 변이체를 포함하거나 그것으로 구성될 수 있다.

VDTYDGRGDSVVYGLR 서열번호: 67

적합한 단편은 서열번호: 67의 15개 이하의 인접 아미노산, 예를 들어 서열번호: 67의 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개의 아미노산 인접 아미노산으로 구성될 수 있다.

유사하게, 적합한 변이체 (상기 정의된 바와 같음)는 서열번호:67의아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다.

일 구현예에서, 상기 변이체는 서열번호:67의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 RGD 서열은 불활성화된다.

천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질에서 정상적으로 발견되는 활성 트리-펩타이드 서열 "아르기닌-글리신-아스파트산"은 많은 상이한 전략에 의해 불활성화될 수 있다. 일 구현예에서, 상기 RGD 도메인은 천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질과 비교하여 하나 이상의 결실, 치환 및/또는 부가, 또는 이의 조합을 함유하도록, 폴리펩타이드 내의 하나 이상의 아미노산이 돌연변이된다. 예를 들어, 상기 RGD 도메인은, 아르기닌 및/또는 글리신 및/또는 아스파트산 잔기가 부재하도록, 적어도 일부, 결실될 수 있다.

대안적으로, 또는 부가적으로, 상기 RGD 도메인은 하나 이상의 아미노산에서 치환될 수 있다. 예를 들어, 상기 아르기닌 및/또는 글리신 및/또는 아스파트산 잔기는 또 다른 아미노산으로 치환될 수 있다. 상기 치환은 보존적이거나 비-보존적일 수 있다.

마찬가지로, 상기 RGD 도메인은 하기를 포함하는, 치환 및 결실의 조합에 의해 불활성화될 수 있다:

(a) 아르기닌 잔기의 치환 및 글리신 및 아스파트산 잔기의 결실;

(b) 아르기닌 및 글리신 잔기의 치환 및 아스파트산 잔기의 결실 (예를 들어, -RGD- 트리펩타이드가 디펩타이드 서열 -DI-로 대체될 수 있음);

(c) 아르기닌 및 아스파트산 잔기의 치환 및 글리신 잔기의 결실; 또는

(d) 아르기닌 및 아스파트산 잔기의 결실 및 글리신 잔기의 치환.

일 구현예에서, 상기 트리펩타이드 -RGD- 서열은 디펩타이드 -DI- 서열에 의해 대체된다.

이론에 구속되기를 바라지 않지만, 상기 RGD 서열의 불활성화는 오스테오폰틴 폴리펩타이드의 형태적 변화를 유발하여 (상응하는 천연적으로 존재하는 오스테오폰틴 단백질과 비교하여), 주변 환경에게 새로운 부위의 생성/노출을 야기할 수 있는 것으로 여겨진다.

본 발명의 조성물의 상기 정의된 폴리펩타이드 성분은 인간 오스테오폰틴, 및 이의 돌연변이된 변이체의 아미노산 서열로부터 유래된다. 그러나, 상기 폴리펩타이드는 대안적으로 서열번호:1의 아미노산 서열의 종 상동체 (예를 들어, 마우스, 소, 돼지, 토끼, 랫트, 등으로부터의 상동체)일 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다.

상기 서열번호:1의 종 상동체의 아미노산 서열은 하기 식에 의해 나타낼 수 있다:

서열번호:68

상기 식에서,

X1은 V, E, G 또는 K이고;

X2는 D, E, S 또는 P이며;

X3은 임의의 아미노산 (예컨대, T, V, P, A 또는 L)이고;

X4는 Y, P, N 또는 A이며;

X5는 D, N 또는 E이고;

X6은 G 또는 I이며;

X8은 G 또는 부재이고;

X10은 S 또는 E이며;

X11은 V 또는 L이고;

X12는 V, A 또는 T이며;

X15는 L 또는 I이고;

X16은 R 또는 K이며;

X17은 R, K 또는 부재이다.

상기 변이체 폴리펩타이드는 서열번호:68의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 부가된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함할 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성될 수 있다. 일 바람직한 구현예에서, 상기 부가적인 아미노산은 야생형 오스테오폰틴, 즉 인간, 마우스, 소, 돼지, 토끼, 랫트, 등으로부터의 야생형 오스테오폰틴의 상응하는 위치로부터의 아미노산이다.

따라서, 일 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 서열번호:69 또는 70의 아미노산 서열, 또는 그것의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는 쥣과 상동체이다:

VDVPNGDISLAYGLR 서열번호:69

DVPNGDISLAYGLRS 서열번호:70

적합한 단편은 서열번호: 69 또는 70의 14개 이하의 인접 아미노산, 예를 들어 서열번호: 69 또는 70의 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개 아미노산 인접 아미노산으로 구성될 수 있다.

예를 들어, 상기 단편은 서열번호: 71 내지 133 중 어느 하나에 따른 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다:

구현예에서, 상기 단편은 서열번호:94의 아미노산 서열을 포함하거나 구성된다.

마찬가지로, 상기 폴리펩타이드는 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열의 변이체 또는 그것의 단편을 포함하거나 그것으로 구성된다.

적합한 변이체 (상기 정의된 바와 같음)는 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열의 적어도 50% 서열 동일성, 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다.

상기 변이체는 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열을 포함하거나 그것으로 구성될 수 있고, 여기서 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된다.

선택적으로, 상기 폴리펩타이드는 서열번호:69 또는 70의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성될 수 있다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성될 수 있고, 이는 야생형 쥣과 오스테오폰틴, 즉 NCBI 참조 서열: NP_001191162.1 [서열번호:134] (서열번호:68에 대해 서열 유사성이 가장 높은 영역이 이탤릭체로 밑출쳐 있음)의 상응하는 위치로부터 유래될 수 있다:

MRLAVICFCLFGIASSLPVKVTDSGSSEEKLYSLHPDPIATWLVPDPSQKQNLLAPQNAVSSEEKDDFKQETLPSNSNESHDHMDDDDDDDDDDGDHAESEDSVDSDESDESHHSDESDETVTASTQADTFTPIVPT VDVPNGRGDSLAYGLR SKSRSFQVSDEQYPDATDEDLTSHMKSGESKESLDVIPVAQLLSMPSDQDNNGKGSHESSQLDEPSLETHRLEHSKESQESADQSDVIDSQASSKASLEHQSHKFHSHKDKLVLDPKSKEDDRYLKFRISHELESSSSEVN 서열번호:134

일 구현예에서, 상기 폴리펩타이드 서열번호: 135의 아미노산 서열, 또는 그것의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성된다

VDVPNGRGDSLAYGLR 서열번호:135

적합한 단편은 서열번호: 135의 15개 이하의 인접 아미노산, 예를 들어 서열번호: 135의 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개 아미노산 인접 아미노산으로 구성될 수 있다.

마찬가지로, 적합한 변이체 (상기 정의된 바와 같음)는 서열번호: 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다.

일 구현예에서, 상기 변이체는 서열번호: 135의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 RGD 서열은 불활성화된다.

본 발명의 조성물의 추가 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 직렬 반복 (tandem repeat)을 포함하거나 구성된다.

따라서, 상기 직렬 반복은 서열번호: 1 내지 65 중 어느 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다 (예를 들어, 상기 직렬 반복은 서열번호:1 또는 26의 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있음).

대안적으로, 상기 직렬 반복은 서열번호: 69 내지 133 중 어느 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있다 (예를 들어, 상기 직렬 반복은 서열번호: 69 및/또는 94의 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있음).

본 발명의 조성물의 폴리펩타이드 성분은 하나 이상의 아미노산 위치에서 변형되거나 유도체화될 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다.

하나 이상의 아미노산의 화학적 유도체는 기능성 측면 그룹과의 반응에 의해 달성될 수 있다. 그러한 유도체화된 분자는, 예를 들어, 자유 아미노산 그룹이 유도체화되어 아민 하이드로클로라이드, p-톨루엔 설포닐 그룹, 카복시벤즈옥시 그룹, t-부틸옥시카보닐 그룹, 클로로아세틸 그룹 또는 포밀 그룹을 형성한 분자들을 포함한다. 자유 카복실 그룹은 유도체화되어 염, 메틸 및 에틸 에스테르 또는 다른 유형의 에스테르 및 하이드라자이드를 형성할 수 있다. 자유 하이드록실 그룹은 유도체화되어 O-아실 또는 O-알킬 유도체를 형성할 수 있다. 20개 표준 아미노산의 천연적으로 존재하는 아미노산 유도체를 함유하는 펩타이드가 또한 화학적 유도체로서 포함된다. 예를 들어: 4-하이드록시프롤린이 프롤린을 치환할 수 있고; 5-하이드록실리신이 리신을 치환할 수 있고; 3-메틸히스티딘이 히스티딘을 치환할 수 있고; 호모세린이 세린을, 오르니틴이 리신을 치환할 수 있다. 유도체는 또한 필요한 활성이 유지되는 한 하나 이상의 부가 또는 결실을 함유하는 펩타이드를 포함한다. 다른 포함되는 변형은 아미드화, 아미노 말단 아실화 (예컨대, 아세틸화 또는 티오글리콜산 아미드화), 말단 카복실아미드화 (예컨대, 암모니아 또는 메틸아민을 이용), 및 기타 말단 변형이다.

전술한 폴리펩타이드의 형태 및 바람직한 특징을 모사하는, 펩타이드모사 화합물이 또한 유용할 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 추가로 인식될 것이다. 따라서, '폴리펩타이드'는 서열번호: 1의 폴리펩타이드의 모발 성장 억제 활성을 갖는 펩타이드모사체를 포함한다.

예를 들어, 본 발명의 폴리펩타이드는 아미노산 잔기가 펩타이드 (-CO-NH-) 연결에 의해 연결된 분자뿐만 아니라 펩타이드 결합이 역전된 분자를 포함한다. 그러한 레트로-인버소 (retro-inverso) 펩타이드모사체는 본 기술분야에서 공지된 방법, 예를 들어 문헌[Meziere 등 (1997) J. Immunol . 159, 3230-3237, 본원에 참고로 통합되어 있음]에 기재된 것을 이용하여 제조될 수 있다. 이러한 접근법은 백본을 포함하나, 및 측쇄의 배향성을 포함하지 않는 변화를 함유하는 유사펩타이드를 제조하는 것을 포함한다. CO-NH 펩타이드 결합 대신에 NH-CO 결합을 함유하는 레트로-인버스 (retro-inverse) 펩타이드는 단백질분해에 대해 훨씬 더 저항성이다. 대안적으로, 본 발명의 폴리펩타이드는 펩타이드모사 화합물일 수 있으며, 여기서 아미노산 잔기 중 하나 이상은 통상적인 아마이드 연결 대신에 -y(CH₂NH)- 결합에 의해 연결된다.

추가 대안에서, 아미노산 잔기의 탄소 원자들 간의 간격 (spacing)을 보유하는 적절한 링커 모이어티가 사용된다면, 상기 펩타이드 결합은 완전히 없어질 수 있으며, 상기 링커 모이어티가 상기 펩타이드 결합과 실질적으로 동일한 전하 분포 및 실질적으로 동일한 평면성 (planarity)을 갖는 것이 유리할 수 있다.

단백질외 분해 (exoproteolytic digestion)에 대한 민감성을 감소시키는 것을 돕기 위해 상기 폴리펩타이드는 그의 N- 또는 C-말단이 간편하게 차단될 수 있음이 인식될 것이다.

D-아미노산 및 N-메틸 아미노산과 같은 다양한 비코팅된 또는 변형된 아미노산이 또한 포유동물 폴리펩타이드를 변형하는데 사용되어 왔다. 또한, 추정되는 생물활성 형태는 공유 변형, 예컨대 고리화에 의해 또는 락탐 또는 다른 유형의 다리의 혼입에 의해 안정화될 수 있다. 예를 들어 문헌[Veber 등, 1978, Proc . Natl . Acad. Sci . USA 75:2636 및 Thursell 등, 1983, Biochem . Biophys . Res. Comm. 111:166, 참고로 본원에 통합되어 있음]을 참고한다.

많은 합성 전략 중에서 통상적인 주제는 일부 사이클릭 모이어티를 펩타이드-기반의 프레임워크 내로 도입하는 것이었다. 상기 사이클릭 모이어티는 펩타이드 구조의 형태적 공간을 제한하고 이것은 빈빈하게 특정 생물학적 수용체에 대한 상기 펩타이드의 특이성 증가를 야기한다. 이 전략의 부가적인 이점은 사이클릭 모이어티를 펩타이드 내에 부가하는 것이 또한 세포의 펩티다아제에 대해 감소된 민감성을 갖는 펩타이드를 야기할 수 있다는 것이다.

따라서, 본 발명의 폴리펩타이드는 말단 시스테인 아미노산을 포함할 수 있다. 그러한 폴리펩타이드는 말단 시스테인 아미노산 내의 메르캅티드 (mercaptide) 그룹의 디설파이드 결합의 형성에 의해 헤테로데틱 (heterodetic) 사이클릭 형태로 존재하거나 또는 말단 아미노산 간의 아마이드 펩타이드 결합 형성에 의해 호모데틱 (homodetic) 형태로 존재할 수 있다. 상기 표시한 바와 같이, N- 및 C-말단 영역 시스테인 간의 디설파이드 또는 아마이드 결합을 통해 작은 펩타이드를 고리화하는 것은, 단백질분해를 감소시키고 또한 구조의 견고함을 증가시킴으로써, 선형 펩타이드에서 가끔 관찰되는 특이성 및 반감기의 문제를 극복할 수 있으며, 이는 더 높은 특이성 화합물을 생산할 수 있다. 디설파이드 결합에 의해 고리화된 폴리펩타이드는 단백질 분해에 여전히 민감할 수 있는 자유 아미노 및 카복시-말단을 가지는 반면, N-말단 아민 및 C-말단 카복실 간의 아마이드 결합의 형성에 의해 고리화된 펩타이드는 더 이상 자유 아미노 또는 카복시 말단을 함유하지 않는다. 따라서, 본 발명의 펩타이드는 C-N 연결 또는 디설파이드 연결 중 하나에 의해 연결될 수 있다.

본 발명은 펩타이드의 고리화 방법에 의해 어떤 식으로든 제한되지 않지만, 사이클릭 구조가 임의의 적합한 합성 방법에 의해 달성될 수 있는 펩타이드를 포괄한다. 따라서, 헤테로데틱 연결은, 비제한적으로 디설파이드, 알킬렌 또는 설파이드 다리를 통한 형성을 포함할 수 있다. 디설파이드, 설파이드 및 알킬렌 다리를 포함하는, 사이클릭 호모데틱 펩타이드 및 사이클릭 헤테로데틱 펩타이드의 합성 방법은 US 5,643,872호에 개시되어 있으며, 이는 본원에 참고로 통합되어 있다. 고리화 방법의 다른 예는 클릭 화학 (click chemistry), 에폭사이드, 알데하이드-아민 반응을 통한 고리화뿐만 아니라, 본원에 참고로 통합된 US 6,008,058호에 개시된 방법을 포함한다.

그러한 말단 변형은, 잘 알려진 바와 같이, 프로테아제 소화에 의한 민감성을 감소시키고 따라서 용액에서, 특히 프로테아제가 존재할 수 있는 생물학적 유체에서 상기 펩타이드의 반감기를 증가시키는데 유용하다. 폴리펩타이드 고리화는 또한, 고리화에 의해 형성된 안정한 구조 때문에 그리고 사이클릭 펩타이드에서 관찰되는 생물학적 활성에 비추어 유용한 변형이다.

따라서, 일 구현예에서 본 발명의 제1 측면의 폴리펩타이드는 사이클릭이다.

그러나, 대안적인 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 선형이다.

그러나, 일 바람직한 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는 페길화, 아미드화, 에스테르화, 아실화, 아세틸화 및/또는 알킬화에 의해 변형되거나 유도체화된 하나 이상의 아미노산을 포함한다.

본 기술분야의 숙련가는 상기 폴리펩타이드가 하나 이상의 아미노산에서 당화될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 상응하는 ('친계') 오스테오폰틴 단백질의 당화 부위 중 하나 이상을 보유할 수 있으며, 탄수화물 그룹이 상기 부위에 부착될 수 있다.

추가 구현예에서, 상기 폴리펩타이드는, 예컨대, 서열번호: 1, 26, 69 또는 94의 아미노산 서열의 융합, 또는 그것의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성된다.

예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 서열번호: 1 또는 26의 아미노산 서열의 융합을 포함할 수 있다.

폴리펩타이드의 '융합'은, 예를 들어, 임의의 다른 폴리펩타이드에 융합된 서열번호: 1 또는 26 (또는 그것의 단편 또는 변이체)에 상응하는 아미노산 서열을 포함한다. 예를 들어, 상기 폴리펩타이드는 상기 폴리펩타이드의 정제를 용이하게 하기 위하여 글루타치온-S-트랜스퍼라아제 (GST) 또는 단백질 A와 같은 폴리펩타이드에 융합될 수 있다. 상기 융합의 예는 본 기술분야의 숙련가에게 널리 공지되어 있다. 유사하게, 상기 폴리펩타이드는 His6과 같은 올리고-히스티딘 태그에 융합될 수 있거나 또는 널리 공지된 Myc 태그 에피토프와 같은 항체에 의해 인식되는 에피토프에 융합될 수 있다. 상기 폴리펩타이드의 임의의 변이체 또는 유도체에의 융합이 또한 본 발명의 범위에 포함된다.

상기 융합은 본 발명의 상기 폴리펩타이드에게 바람직한 특성을 제공하는 추가의 부분을 포함할 수 있고; 예를 들어 상기 부분은 모발 성장 억제 효과를 증강시키거나 연장하는데 유용할 수 있다. 예를 들어, 일 구현예에서 상기 융합은 인간 혈청 알부민 또는 유사한 단백질 (그 개시내용이 본원에 참고로 통합된, US 2009/0005312에 개시된 바와 같음)을 포함한다.

대안적으로, 상기 융합된 부분은, 본 기술분야의 숙련가에게 공지된 바와 같이, 폴리펩타이드의 세포 흡수를 촉진할 수 있는 친유성 분자 또는 폴리펩타이드 도메인일 수 있다.

본 발명의 조성물에서 사용하기에 적합한 폴리펩타이드는 본 기술분야의 숙련가에게 널리 알려진 시험관내 세포-기반의 발현 방법에 의해 제조될 수 있다 (예를 들어, Green & Sambrook, 2012, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Fourth Edition, Cold Spring Harbor, New York, 문헌이 참고로 본원에 통합된 관련 개시내용 참고). 사용될 발현 벡터 및 숙주 세포의 선택은 많은 인자에 좌우될 수 있다. 예를 들어, 만약 상기 폴리펩타이드가 당화될 경우, 포유동물 발현 시스템이 필요할 것이다.

적합한 발현 벡터 및 숙주 세포는 많은 공급원으로부터 상업적으로 이용가능하다.

대안적으로, 상기 폴리펩타이드는 지질상 및 고상 합성 (예를 들어, t-Boc 고상 펩타이드 합성 및 BOP-SPPS)과 같은, 공지된 수단에 의해 합성될 수 있다.

본 발명은 또한 전술한 폴리펩타이드의 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 산 또는 염기 부가염의 사용을 포함한다는 것이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다. 본 발명에서 유용한 전술한 염기 화합물의 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 산 부가염을 제조하는데 사용되는 산은 무독성 산 부가염을 형성하는 산, 즉 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 음이온을 함유하는 염, 예컨대 그중에서도 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로아이오다이드, 니트레이트, 설페이트, 바이설페이트, 포스페이트, 산 포스페이트, 아세테이트, 락테이트, 시트레이트, 산 시트레이트, 타르트레이트, 바이타르트레이트, 석시네이트, 말레에이트, 푸마레이트, 글루코네이트, 사카레이트, 벤조에이트, 메탄설포네이트, 에탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 파모에이트 [즉 1,1'-메틸렌-비스-(2-하이드록시-3 나프토에이트)] 염이다.

약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 염기 부가염이 또한 상기 폴리펩타이드의 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 염 형태를 생산하는데 사용될 수 있다. 천연적으로 산성인 본 발명의 화합물의 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 염기 염을 제조하기 위한 시약으로서 사용될 수 있는 화학적 염기는 상기 화합물과 무독성 염기 염을 형성하는 염기이다. 그러한 무독성 염기 염은, 비제한적으로, 그 중에서도, 상기 약제학적으로 및/또는 미용적으로 허용가능한 양이온, 예컨대 알칼리 금속 양이온 (예컨대, 칼륨 및 나트륨) 및 알칼리 토금속 양이온 (예컨대, 칼슘 및 마그네슘), 암모늄 또는 수용성 아민 부가염, 예컨대 N-메틸글루카민- (메글루민), 및 저급 알카놀암모늄 및 약제학적으로 허용가능한 유기 아민의 다른 염기 염으로부터 유래된 것을 포함한다.

상기 폴리펩타이드는 보관 동안 동결건조될 수 있고 사용 전에 적합한 담체에 재구성될 수 있음이 추가로 인식될 것이다. 임의의 적합한 동결건조 방법 (예컨대, 분무 건조, 케이크 건조) 및/또는 재구성 기술이 이용될 수 있다. 동결건조 및 재구성이 다양한 정도의 활성 손실을 야기할 수 있다는 것과 사용 수준이 상쇄하기 위해 상향 조절되어야 할 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다. 바람직하게는, 상기 동결건조된 (냉동 건조된) 폴리펩타이드는, 재수화될 때 (동결건조 전) 그의 활성의 약 20% 이하, 또는 약 25% 이하, 또는 약 30% 이하, 또는 약 35% 이하, 또는 약 40% 이하, 또는 약 45% 이하, 또는 약 50% 이하를 잃는다.

상기 폴리펩타이드는, 상기 폴리펩타이드 및 의도된 투여 경로 및 표준 약제학적 조성물 또는 화장용 관행과 관련하여 선택된, 약제학적으로 허용가능한 및/또는 미용적으로 허용가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물의 형태로 제공된다 (예를 들어, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19^th edition, 1995, Ed. Alfonso Gennaro, Mack Publishing Company, Pennsylvania, USA, which is incorporated herein by reference 참고).

"약제학적으로 허용가능한"은 상기 제형이 멸균이고 발열성 물질이 없다는 것이 포함된다. 적합한 약제학적 조성물 담체는 약학 분야에서 널리 공지되어 있다. 담체 (들)는 본 발명의 화합물과 양립가능하고 이의 수용자에게 해롭지 않다는 의미에서 "허용가능"할 것이다. 전형적으로, 상기 담체는 물 또는 식염수이고, 이는 멸균이고 발열성 물질이 없을 것이지만; 다른 허용가능한 담체가 사용될 수 있다. 따라서, "약제학적으로 허용가능한 담체" 및 "약제학적으로 허용가능한 부형제"는 단지 담체로서 작용하도록 의도된, 즉, 그 자체가 생물학적 활성을 갖도록 의도되지 않은, 제형의 일부를 형성하는데 사용되는 임의의 화합물 (들)을 포함한다. 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 일반적으로 안전하고, 무독성이고, 생물학적으로 또는 그 외에도 바람직하다. 본원에 사용된 바와 같은 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 하나 및 하나 이상의 상기 담체 또는 부형제를 포함한다.

마찬가지로, 용어 "미용적으로 허용가능한"은 화장용 제품으로서 사용하는데 적합한 제형을 가리키기 위해 사용된다. 적합한 화장용 담체는, 샴푸, 로션, 크림 및 다른 그러한 제품에서 통상적으로 사용되는 것과 같이, 본 기술분야에서 널리 알려져 있다.

부형제는 탄수화물, 중합체, 지질 및 미네랄 중 하나 이상일 수 있다. 탄수화물의 예는 락토스, 수크로스, 만니톨, 및 사이클로덱스트린을 포함하고, 이는 예컨대, 동결건조를 용이하게 하기 위해, 조성물에 부가된다. 중합체의 예는 모든 상이한 분자량의 전분, 셀룰로오스 에테르, 셀룰로오스 카복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 에틸하이드록시에틸 셀룰로오스, 알지네이트, 카라기난, 히아루론산 및 이의 유도체, 폴리아크릴산, 폴리설포네이트, 폴리에틸렌글리콜/폴리에틸렌 옥사이드, 폴리에틸렌옥사이드/폴리프로필렌 옥사이드 공중합체, 상이한 가수분해도의 폴리비닐알콜/폴리비닐아세테이트, 및 폴리비닐피롤리돈이며, 이는, 예컨대, 점도 제어를 위해, 생물부착을 달성하기 위해, 또는 지질을 화학적 및 단백질 분해로부터 보호하기 위해, 조성물에 부가된다. 지질의 예는 지방산, 인지질, 모노-, 디-, 및 트리글리세라이드, 세라마이드, 스핑고지질 및 글리콜지질 (모두 상이한 아실 사슬 길이 및 포화), 달걀 레시틴, 대두 레시틴, 수소첨가된 달걀 및 대두 레시틴이며, 이는 중합체와 유사한 이유로 조성물에 부가된다. 미네랄의 예는 탈크, 마그네슘 옥사이드, 아연 옥사이드 및 티타늄 옥사이드이고, 이는 지질 축적의 감소 또는 유리한 색소 특성과 같은 이점을 얻기 위해 조성물에 부가된다.

용어 "희석제"는 약제 제조에서 펩타이드를 희석하기 위한 목적을 갖는 수성 또는 비-수성 용액을 의미하고자 하는 것이다. 희석제는 식염수, 물, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 에탄올 또는 오일 (예컨대, 홍화유, 옥수수 기름, 땅콩유, 면실유 또는 참기름) 중 하나일 수 있다.

희석제는 또한 완충제로서 기능할 수 있다. 용어 "완충제"는 pH를 안정화시키는 목적을 갖는 산-염기 혼합물을 함유하는 수용액을 의미하고자 하는 것이다. 완충제의 예는 Trizma, Bicine, Tricine, MOPS, MOPSO, MOBS, Tris, Hepes, HEPBS, MES, 포스페이트, 카보네이트, 아세테이트, 시트레이트, 글리콜레이트, 락테이트, 보레이트, ACES, ADA, 타르트레이트, AMP, AMPD, AMPSO, BES, CABS, 카코딜레이트, CHES, DIPSO, EPPS, 에탄올아민, 글리신, HEPPSO, 이미다졸, 이미다졸락트산, PIPES, SSC, SSPE, POPSO, TAPS, TABS, TAPSO 및 TES이다.

선택적으로, 상기 조성물은 보조제를 포함할 수 있다. 용어 "보조제"는 펩타이드의 생물학적 효과를 증가시키기 위해 제형에 부가되는 임의의 화합물을 의미하고자 하는 것이다. 보조제는 상이한 음이온을 갖는 아연, 구리 또는 은 염 중 하나 이상, 예를 들어, 비제한적으로 상이한 아실 조성물의 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 티오시아네이트, 설파이트, 하이드록사이드, 포스페이트, 카보네이트, 락테이트, 글리콜레이트, 시트레이트, 보레이트, 타르트레이트, 및 아세테이트일 수 있다.

본 발명의 조성물의 약제학적 조성물은 또한 생분해성 미소구체의 형태일 수 있다. 지방족 폴리에스테르, 예컨대 폴리 (락트산) (PLA), 폴리 (글리콜산) (PGA), PLA 및 PGA의 공중합체 (PLGA) 또는 폴리 (카프로락톤) (PCL), 및 폴리안하이드라이드가 미소구체의 생산에서 생분해성 중합체로서 광범위하게 사용되어 왔다. 그러한 미소구체의 제조는 US 5,851,451호 및 EP0213303호에서 발견될 수 있다.

본 발명의 조성물의 약제학적 조성물은 또한 중합체 겔의 형태일 수 있고, 여기서 전분, 셀룰로오스 에테르, 셀룰로오스 카복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로오스, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 에틸하이드록시에틸 셀룰로오스, 알지네이트, 카라기난, 히알룰론산 및 이의 유도체, 폴리아크릴산, 폴리설포네이트와 같은 중합체가 사용된다.

상기 폴리펩타이드는 사용되는 특정한 폴리펩타이드의 효능/독성에 따라, 다양한 농도로 제형화될 수 있다. 바람직하게는, 상기 조성물은 1 nM 내지 1 M, 예를 들어 0.1 μM 내지 1 mM, 1 μM 내지 100 μM, 5 μM 내지 50 μM, 10 μM 내지 50 μM, 20 μM 내지 40 μM 및 선택적으로 약 30 μM의 농도로 폴리펩타이드를 포함한다. 생체외 및 시험관내적용을 위해, 조성물은, 예를 들어 0.0025 μM 내지 1 μM, 10 nM 내지 300 nM 또는 15 nM 내지 150 nM의 더 낮은 농도의 폴리펩타이드를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다양한 경로, 예를 들어 국소, 경피, 비경구 또는 경구 투여에 의해 투여될 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다.

유리하게도, 본 발명의 조성물은 국소 투여 또는 피내 투여에 적합하다.

따라서, 본 발명의 조성물은 피부 (예컨대, 얼굴, 다리, 등)에 국소로 투여될 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물은 하기 중 하나 이상의 혼합물에 현탁되거나 용해된, 활성 폴리펩타이드를 함유하는 연고의 형태로 제공될 수 있다: 광물유, 유동 파라핀, 백색 바셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화용 왁스 및 물 대안적으로, 상기 폴리펩타이드는, 예를 들어, 하기 중 하나 이상의 혼합물에 현탁되거나 용해된, 적합한 로션 또는 크림으로서 제형화될 수 있다: 광물유, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 유동 파라핀, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알콜, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알콜 및 물.

선택적으로, 국소 투여용 조성물은 투과 향상제를 포함할 수 있다 (예를 들어, 문헌[Osborne & Henke, 1997, Pharmaceutical Technology, November: 58-82 and Pathan & Setty, 2009, Tropical Journal of Pharmaceutical Research 8 (2): 173-179, 그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨]에서 기술된 바와 같음).

대안적으로, 본 발명의 조성물은 비경구로, 예를 들어 피내로 투여될 수 있다. 그러한 조성물은 멸균 수용액의 형태로 가장 잘 이용되며, 이는 다른 물질, 예를 들어, 용액을 혈액과 등장성이 되도록 만드는 충분한 염 또는 글루코스를 함유할 수 있다. 상기 수용액은, 필요한 경우 적절하게 완충되어야 한다 (바람직하게는 3 내지 9의 pH로). 멸균 조건 하에 적합한 비경구 제형의 제조는 본 기술분야에서 잘 알려진 표준 약제학적 기술에 의해 쉽게 달성된다.

비경구 투여에 적합한 조성물은 항-산화제, 완충제, 세균발육저지제 및 현탁액을 포함제형이 의도된 수용자의 혈액과 등장성이게 하는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 상기 제형은 단위-용량 또는 다중-용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰풀 및 바이알로 제공될 수 있고, 사용하기 바로 전, 멸균 액체 담체, 예를 들어 주사용수의 부가만을 필요로 하는 냉동-건조된 (동결건조된) 조건에서 보관될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 이전에 기술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다.

폴리펩타이드를 전달하기 위해, 미소구체 제형과 같은, 서방형 시스템을 사용하는 것이 유리할 수 있다.

폴리펩타이드를 전달하기 위해 미세-바늘 및 다른 디바이스를 사용하는 것이 또한 유용할 수 있다. 적합한 미세-바늘의 예는 Hollow Microneedle Technology (3M) 및 Micro-Trans Microneedle Array Patch (Valeris)를 포함한다. 폴리펩타이드를 전달하기 위한 디바이스의 다른 포맷은 경피 패치 및 경피 젤을 포함한다. 적합한 경피 패치의 예는 다우 코닝사 (Dow Corning)로부터 이용가능한 접착제를 포함한다. 경피 젤의 예는 호르몬의 경피 투여용으로 사용되는 것을 포함한다. 또한, 문헌[Prausnitz & Langer, 2008, Nature Biotechnology 26:1261-1268; Jain 등, 2014, Crit . Rev. Ther . Drug Carrier Syst. 31 (3):219-72, 및 Wu 등, 2012, Curr Pharm Biotechnol . 13 (7):1292-8 (그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨)]을 참고한다.

대안적으로, 조성물은 활성 폴리펩타이드를 필요한 부위 (즉, 표피)에 직접 방출하는 수술로 이식된 디바이스에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 또한 경피 방법에 의해 전달될 수 있다.

예를 들어, 전기천공 요법 (EPT) 및/또는 이온천공 시스템이 단백질 및 폴리펩타이드의 투여를 위해 이용될 수 있다. 그러한 방법에서, 펄스 전기장 (pulsed electric field)을 세포에게 전달하여 약물에 대한 세포막의 증가된 투과성 및 세포내 약물 전달의 유의미한 향상을 야기하기 위해 디바이스가 사용된다.

대안적인 경피 방법인 전기결합 (electroincorporation)은 전기천공에서 사용된 것과 동일하거나 유사한 전기적 펄스를 경험하는 피부의 표면 상에 최대 30 마이크론 직경의 작은 입자를 이용한다. 상기 입자는 각질층 (stratum corneum)을 통해 그리고 피부의 더 깊은 층 내로 움직인다. 입자들이 로딩되거나 약물 또는 유전자로 코팅될 수 있거나, 약물이 통과해 들어갈 수 있는 피부 내에 공극을 생성하는 단순히 "탄환 (bullet)"으로서 작용할 수 있다.

또한 PowderJect Pharmacuticals사 (Novartis AG 소유)에 의해 부가적인 경피 방법이 개발되어 왔다.

본 발명의 폴리펩타이드 및 조성물의 투여를 위한 적합한 방법은 본 기술분야에서 널리 알려져 있으며, 예를 들어, 문헌[Therapeutic Protein and Peptide Formulation and Delivery, Zahra Shahrokh 등 (Eds), 1997, American Chemical Society, ISBN13: 9780841235281]을 참고한다.

본 발명의 조성물은 포유동물에서 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 것이다. 그러한 용도는 사실상 의료 및/또는 미용적일 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다 (하기에 보다 상세히 기술된 바와 같음). 예를 들어, 억제될 모발 성장은 질환 또는 장애와 연관될 수 있거나, 대안적으로, 미용적 이유에 대해 아쉬운 점이 없는 정상적인 모발 성장 (건강한 개인에서)일 수 있다.

따라서, 일 구현예에서, 상기 정의된 바와 같은 조성물은 포유동물에서 원치 않는 및/또는 과다한 모발 성장과 연관된 질환 또는 장애, 예컨대 다모증을 치료하거나 예방하기 위해 사용하기 위한 것이다.

예를 들어, 원치 않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애는 가장 흔한 원인인 다낭성 난소 증후군 (PCOS), 선천성 부신 과형성 (congenital adrenal hyperplasia), 쿠싱병, 성장 호르몬 과다 (acromegaly), 난소내 종양, 부신 암, 폰히텔 린다우병 (Von Hippel-Lindau disease), 인슐린 저항성, 기질 난포막과다형성증 (stromal hyperthecosis) (SH), 비만, 만발성 피부 포르피린증 (porphyria cutanea tarda), 약물의 부작용 (예컨대, 테트라하이드로게스트리논, 페니토인, 미녹시딜), 호르몬 치료 및 호르몬 장애로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

추가 구현예에서, 상기 조성물은 포유동물에서 내생 (ingrown) 모발 (예컨대, 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된)을 치료하거나 예방하기 위한 것이다.

본 발명의 추가의 관련된 측면은 포유동물에서 원치 않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애, 예컨대 다모증을 치료하거나 예방하기 위한 약제의 제조에 있어서 상기 정의된 바와 같은 조성물을 제공한다.

추가 구현예에서, 상기 약제는 포유동물에서 내생 (ingrown) 모발을 치료하거나 예방하기 위한 것이다 (예컨대, 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된).

유리하게도, 상기 포유동물은 인간이다.

상기 포유동물, 예컨대, 인간은 남성 또는 여성일 수 있다.

본 발명의 추가의 관련된 측면은 포유동물에서 원치 않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애, 예컨대 다모증을 치료하거나 예방하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 정의된 바와 같은 조성물의 효과적인 양을 포유동물에게 투여하는 것을 포함한다.

추가 구현예에서, 상기 방법은 포유동물에서 내생 (ingrown) 모발을 치료하거나 예방하기 위한 것이다 (예컨대, 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된).

본 발명의 조성물의 펩타이드는 효과적인 양으로 환자에게 투여된다 본원에 사용된 바와 같이, '치료적으로 효과적인 양', 또는 '효과적인 양', 또는 '치료적으로 효과적인'은 모발 성장에 대해 억제 효과를 제공하는 양을 가리킨다. 이것은 원하는 치료 효과를 생성하기 위해 계산된 활성 물질의 미리 결정된 양이다. 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식되는 바와 같이, 화합물의 양은 그의 특이적 활성에 따라 달라질 수 있다. 적합한 투여량은 필요한 희석제와 함께 원하는 치료 효과를 생성하기 위해 계산된 활성 조성물의 미리 결정된 양을 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물의 제조를 위한 방법 및 용도에서, 활성 성분의 치료적으로 효과적인 양이 제공된다. 치료적으로 효과적인 양은 환자의 특징, 예컨대 본 기술분야에서 널리 알려진 바와 같은 연령, 체중, 성별, 상태, 합병증, 다른 질환 등에 기초하여 통상의 기술을 가진 의료진 또는 수의학 종사자에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 제1 측면의 조성물은 의료 용도에 제한되는 것이 아니라 화장용 제제로서 사용될 수 있음이 본 기술분야의 숙련가에 의해 인식될 것이다 (상기 조성물이 그러한 것으로서 어떤 신체적 건강 개선을 제공하지 않지만 단지 포유동물에게 미적 이점을 제공한다는 관점에서).

따라서, 본 발명의 제4 측면은 인간에서 미용상 제모를 위한 상기 정의된 바와 같은 조성물의 용도를 제공한다.

일 구현예에서, 상기 인간은 남성이다. 예를 들어, 모발은 얼굴 (예컨대, 볼, 턱 및 윗입술 위), 가슴, 어깨, 목 및 등으로 이루어진 군으로부터 선택되는 몸의 부위로부터 제거될 수 있다.

대안적인 구현예에서, 상기 인간은 여성이다. 예를 들어, 모발은 얼굴 (예컨대. 볼, 턱 및 윗입술 위), 등, 다리, 팔, 손가락, 발, 발가락 및 치골로 이루어진 군으로부터 선택되는 신체 부위로부터 제거될 수 있다.

본 발명의 추가의 관련된 양태는 상기 정의된 바와 같은 조성물의 효과적인 양을 인간에게 투여하는 것을 포함하는 인간에서 미용상 제모를 위한 방법을 제공한다.

본 발명의 조성물은 그 자체로 또는 다른 치료적 또는 미용적 치료와 조합하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 하기 모발 제거/예방 치료 중 하나 이상과의 조합 요법에서 사용될 수 있다:

- 면도, 발모 (plucking), 탈모 (depilation), 핫 왁싱 (hot waxing), 레이저 제모, 전기분해 (전기발생 (galvanic) 또는 열분해 (thermolytic)), 국소 크림 (예컨대, 에플로니틴) 및/또는 경구 약물 (예컨대, 여성을 위한 경구 피임약, 항-안드로겐, 피나스테라이드, 및 생식선 자극 호르몬 방출 호르몬 (gonadotrophin-releasing hormone)).

생체내에서,생체외에서 또는 시험관내에서 사용될 수 있음이 숙련가에 의해 추가로 인식될 것이다.

따라서, 포유동물에게 직접 도포되거나 투여되는 것 외에도, 상기 조성물은생체외에서, 예를 들어 포유동물에게 피부를 이식하기 전에 피부 외식편 (explant)에서 모발 생산을 억제하는데 사용될 수 있다.

대안적으로, 폴리펩타이드는 시험관내에서 모발 성장 모낭 (또는 이의 줄기 세포 전구체)을 억제하는데 사용될 수 있다.

본 발명의 어떤 측면을 이용하는, 바람직한, 비제한적인 예가 하기 도면을 참고하여 설명될 것이다:

문맥이 달리 나타내지 않는 한, 본 밤령의 제시된 측면, 특징 또는 파라미터에 대한 선호 및 옵션은 본 발명의 모든 다른 측면, 특징 및 파라미터에 대한 임의 및 모든 선호 및 옵션과 조합하여 개시된 것으로 간주되어야 한다. 예를 들어, 일 구현예에서 본 발명은 약물의 부작용의 부작용과 연관된 원치 않는 모발 성장을 치료하기 위해 서열번호:1의 폴리펩타이드를 포함하는 국소 조성물을 제공한다.

본 명세서에서 명백히 이전에 공개된 문헌의 열거 또는 논의는 상기 문헌이 본 기술분야의 기술 수준의 일부이거나 통상적인 일반적인 지식이라는 것을 인정하는 것으로 반드시 받아들여져야 하는 것은 아니다.

부정관사의 사용은 청구항 및/또는 명세서에서 용어 "포함하는"과 함께 사용될 때 "하나"를 의미할 수 있지만, 그것은 또한 "하나 이상," "적어도 하나," 및 "하나 또는 하나 초과"의 의미와 일맥상통한다.

본 발명의 이러한, 및 다른 구현예들은 상기 명세서 및 첨부된 도면과 함께 고려될 때 더 잘 인식되고 이해될 것이다. 하지만, 상기 명세서는, 본 발명의 다양한 구현예 및 이의 많은 구체적인 세부사항을 나타내긴 하지만, 예시로서 제공되며 제한하는 것이 아닌 것으로 이해되어야 한다. 본 발명의 의미를 벗어나지 않으면서 본 발명의 범위 내에서 많은 치환, 변형, 부가 및/또는 재배열이 이뤄질 수 있으며, 본 발명은 그러한 모든 치환, 변형, 부가 및/또는 재배열을 포함한다.

하기 도면은 보 명세서의 일부를 형성하며, 본 발명의 어떤 측면을 추가 입증하기 위해 포함된다. 본 발명은 본원에 제시된 특정 구현예의 상세한 설명과 조합하여 이들 도면 중 하나 이상을 참조함으로써 더 잘 이해될 수 있다.

도 (1). 본 발명의 예시적인 폴리펩타이드, "FOL-005" (서열번호: 1; 모은 3명의 환자로부터의 데이터)에 의한 배양된 단리된 인간 모낭에서 성장기에서 퇴행기 전이의 유도. 분석된 모낭의 수는 군당 32-45이다.

도 (2). FOL-005가 성장기로부터 퇴행기로의 전이를 유도한다는 것을 보여주는 대표적인 동결절편 사진

A: 대표적인 모간 (hair shaft)의 사진

B: 모구 부위 (bulb area)의 확대

C: 진피 유두 (dermal papilla)에 대한 강한 효과를 입증하는 모구 부위의 염색

도 (3). 배양된 단리된 인간 모낭 내의 멜라토닌에 대한 FOL-005의 효과. 상기 분석을 각 조직 절편의 마손 폰타나 조직화학 (Masson Fontana histochemistry) 및 형태적 평가를 이용하여 수행하였다. 결과를 평균+/-SEM으로 나타내었고, n= 26-47 모낭을 각 군에서 평가하였다. 일원 (One-way) ANOVA 및 본페로니 사후 검정 (Bonferroni's post-hoc test), ^* p<0.05

도 (4). 배양된 단리된 인간 모낭에서 멜라닌 색소침착에 대한 FOL-005의 효과를 보여주는 대표적인 동결절편 사진 (x200 배율로 촬영됨). 좌측 패널의 검정 정사각형은 형태계측 참고 부위를 나타내었고, 상기 형태계측 데이터는 도 3에 제시되어 있다.

도 (5). FOL-005에 의한 온전한 인간 두피 피부에서 성장기에서 퇴행기로의 유도.

도 (6). FOL-005가 더 높은 농도에서 온전한 인간 두피 피부에서 퇴행기를 유도한다는 확증 (2명의 환자의 평균).

도 (7). 온전한 인간 두피 피부에서 Ki67 양성 세포의 증식에 대한 FOL-005의 효과. FOL-005의 농도는 60 nM, 평균+/-SEM였고, n= 6-17 사진/펀치를 평가하였다. "D3" = 치료후 3일.

도 (8). 온전한 인간 두피 피부 내의 멜라토닌 함량에 대한 FOL-005의 효과. 상기 분석을 각 조직 절편의 마손 폰타나 조직화학 (Masson Fontana histochemistry) 및 형태적 평가를 이용하여 수행하였다. 결과를 평균+/-SEM으로 나타내었다. 일원 ANOVA 및 본페로니 사후 검정,^**p<0.01, ^* p<0.05. "D3" = 치료후 3일.

도 (9). 각각의 대표적인 환자에서 멜라닌 색소침착에 대한 FOL-005의 효과.^*** p<0.001.

도 (10). 온전한 인간 두피 피부에서 멜라닌 색소침착에 대한 FOL-005의 효과를 보여주는 대표적인 동결절편 사진 (x200의 배율로 촬영됨). 유두 진피를 촬영한 사진, 2-5 사진/펀치를 평가하였다.

도 (11). 진피 유두 (DP) 세포의 이주에 대한 FOL-005의 효과. 성장기 모낭 (HF)만을 분석하였다. 결과는 6명의 환자로부터 모은 데이터에 기초하였다. FOL-005로 처리된 HF에서 이주하는 DP 세포의 수의 유의미한 변화가 없었다. 평균 +/- SEM, 평가된 n=18-22 HF, 만-휘트니 검정, ns

도 (12). 진피 유두 (DP) 세포의 이주에 대한 FOL-005의 효과. 성장기 모낭 (HF)만을 분석하였다. 결과는 6명의 환자로부터 모은 데이터에 기초하였다. FOL-005로 처리된 HF에서 이주하는 DP 세포의 수의 유의미한 변화가 없었다. 평균 +/- SEM, 평가된 n=18-22 HF, 만-휘트니 검정, ns

도 (13). 모발 주기 단계결정. FOL-005를 이용한 HF의 처리는 시험된 6명의 모든 환자에서 인간 두피 피부 내의 성장기 HF가 너무 이르게 퇴행기로 들어가도록 지속적으로 유도한다 (각 수직 막대에서, 상부 영역은 중간-퇴행기에 상응하고, 중간 영역은 초기 퇴행기에 상응하며, 하부 영역은 성장기에 상응함). 6명의 환자로부터 모은 데이터.

도 (14). 모발 주기 단계결정. FOL-005를 이용한 HF의 처리는 시험된 6명의 모든 환자에서 인간 두피 피부 내의 성장기 HF가 너무 이르게 퇴행기로 들어가도록 지속적으로 유도한다. 6명의 환자로부터 모은 데이터.

도 (15). 마손 폰타나 염색. FOL-005로 처리된 HF에서 HF 색소침착의 유의미한 변화가 없었다. 분석된 성장기 & 퇴행기 모낭. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, 평가된 n=41-51 HF, 독립표본 스튜던트 t-검정, ns

도 (16). 마손 폰타나 염색. FOL-005로 처리된 HF에서 HF 색소침착의 유의미한 변화가 없었다. 분석된 성장기 & 퇴행기 모낭. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, 평가된 n=41-51 HF, 독립표본 스튜던트 t-검정, ns

도 (17). 마손 폰타나 염색. FOL-005로 처리된 HF에서 HF 색소침착의 유의미한 변화가 없었다. 분석된 성장기 HF. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, 평가된 n=13-22 HF, 독립표본 스튜던트 t-검정, ns

도 (18). 마손 폰타나 염색. FOL-005로 처리된 HF에서 HF 색소침착의 유의미한 변화가 없었다. 분석된 성장기 HF. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, 평가된 n=13-22 HF, 독립표본 스튜던트 t-검정, ns

도 (19). FOL-005로 처리된 모낭 내의 기저막의 형태에 관찰가능한 차이가 없었다 (PAS 염색).

도 (20). Ki67/TUNEL. 15nM FOL-005로 처리된 HF에서 세포자멸 세포의 수의 유의미한 증가 (중간 쌍의 오른쪽 막대 참고). FOL-005로 처리된 HF에서 증식성 세포의 수에서 유의미하지 않은 변화가 결정되었다 (각 쌍의 좌측 컬럼 참고). 분석된 성장기 & 퇴행기 HF. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, n=48-59 HF를 평가함, 만-휘트니 검정, ^*p<0.02. 이상치 (outlier)에 의한 데이터 왜곡을 감소시키기 위해, 그럽의 시험 (Grubb's test)을 수행하였고, 분석으로부터 이상치를 제거하였다.

도 (21). Ki67/TUNEL. 15nM FOL-005로 처리된 HF에서 세포자멸 세포의 수에서의 유의미한 증가. FOL-005로 처리된 HF에서 증식성 세포의 수에서 유의미하지 않은 변화가 결정되었다. 분석된 성장기 & 퇴행기 HF. 6명의 환자로부터 모은 데이터. 평균 +/- SEM, n=48-59 HF를 평가함, 만-휘트니 검정, *p<0.02. 이상치 (outlier)에 의한 데이터 왜곡을 감소시키기 위해, 그럽의 시험 (Grubb's test)을 수행하였고, 분석으로부터 이상치를 제거하였다.

도 (22). 비만 세포를 검출하기 위한 톨루이딘 블루 염색 (Toluidine blue staining). 조직화학적으로 검출가능한 모낭 주위의 비만 세포의 수에서의 현저하지 않은 차이.

도 (23). MHCII 염색하는 HS 14-061 (간접적 면역형광. DAKO사로부터의 마우스 항 인간 Ab HLA-DP-DQ-DR). 조직화학적으로 검출가능한 모낭 주위의 MHC 계열 II+ 세포의 수의 현저하지 않은 차이. 이들 MHCII+ 세포는 아마도 대식세포이다.

도 (24). CD31 염색하는 HS14-061 (간접적 면역형광, DAKO사로부터의 마우스 항-인간 CD31 Ab). CD31+ 세포 (내피 세포)의 수에 현저한 차이 없음.

도 (25). K15 염색하는 HS14-087 (간접적 면역형광, Chemikon사로부터의마우스 항-인간 CK15 Ab). K15+ 세포의 수에 현저한 차이 없음. 인간 모낭 (HF) 상피 줄기 세포는 부정적으로 영향을 받지 않는다. FOL-005에 의한 HF 줄기 세포 집단의 보존 및 이에 따른 재생 잠재성.

도 (26). 인간 모낭의 이식 후 3회 촬영된 이식편의 대표적인 사진. (A) 비히클-처리된 동물, (B) FOL-005-처리된 동물, (C) 미녹시딜-처리된 동물 및 (D) FOL-005 및 미녹시딜-처리된 동물.

도 (27). 이식 후 인간 모낭의 평균 수에 대한 효과. (A) 비히클-처리된 동물, (B) FOL-005-처리된 동물, (C) 미녹시딜-처리된 동물 및 (D) FOL-005 및 미녹시딜-처리된 동물.

실시예

실시예 A: 단리된 인간 모낭에 대한 예시적인 펩타이드 FOL-005 [서열번호:1]의 효과

(i) FOL-005 는 성장기에서 퇴행기로의 변화를 유도한다

물질& 방법

성장기 VI 모낭 (Kloepper 등, 2010 참고, 그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨)을 일상적인 얼굴 주름 제거 성형 수술 (face-lift cosmetic surgery)을 받고 있는 3명의 건강한 성인 여성으로부터 사전 동의를 받아 수득된 정상적인 인간 두피로부터 미세절개하였다.

단리된 모낭을 문헌[Philpott 등]에 따라 인슐린- 및 하이드로코르티손-보강 윌리엄 E 배지에서 6-10일간 기관 배양 (organ-culture)하였다. (Philpott 등, 1990;

등, 2009;

등, 2010 참고, 그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨).

상기 모낭을 배양하자마자 곧바로 예시적인 폴리펩타이드 FOL-005의 처리를 개시하였고, 7 내지 10일간 지속하였다.

기관 배양 말기에, 모낭을 포매시키고 세로 (longitudinal) 동결절편을 위해 가공하였다 (

등, 2009;

등, 2010).

결과

본 발명의 예시적인 펩타이드 FOL-005 (서열번호:1; 15nM, 60nM 및 300 nM)는 단리된 인간 모낭에서 성장기에서 퇴행기로의 용량-의존적 전이를 유도하였다 (도 1 참고).

동결절편의 분석은 FOL-005가 모낭 퇴화를 촉진한다는 것을 밝혀내었고, 이는 FOL-005가 시험관내에서인간 모발 성장의 강한 억제제임을 보여준다 (도 2 참고).

(ii) FOL-005는 색소침착 변화를 유도한다

물질& 방법

마손 폰타나 염색: 동결절편을 공기 건조시키고, 에탄올-아세트산에서 고정시켰다. 상기 절편을 트리-완충 식염수 (TBS) 및 증류수에서 수차례 세척하였다. 동결절편을 어두운 곳에서 56 ℃에서 40분간 암모니아성 은 용액 (ammoniacal silver solution) (Fluka, Seelze, Germany)으로 처리하였다. 증류수에서 세척 후, 상기 절편을 1분간 5% 수성 나트륨 티오설페이트 (Merck, Darmstadt, Germany)로 처리하였다. 그 다음, 상기 절편을 흐르는 수돗물에서 3분간 세척하고, 0.5% 수성 중성 레드 (Sigma)에서 반대-염색하였다. 증류수에서 세척 후, 절편을 탈수시키고 Eukitt에서 봉입 (mounting)하였다 (O. Kindler, Freiburg, Germany).

면역조직화학: 상이한 모발 주기 단계에 있는 HF의 증식 및 세포자멸사를 비교하기 위해, Ki-67 마우스 항-Ki-67 항혈청 (DAKO, Hamburg, Denmark) 및 TUNEL (ApopTag Fluorescein In Situ Apoptosis detection kit; Millipore, Berlin, Germany)의 이중 면역표지 (double immunolabelling)을 이전에 기술된 바와 같이 수행하였다 (Kloepper 등, 2010, Experimental Dermatology 19:305-12 참고, 이의 관련 개시내용이 참고로 통합되어 있음).

결과

멜라닌 색소침착 분석 결과가 도 3에 나타나 있다.

60nM FOL-005의 용량에서, 색소침착의 유의미한 감소가 검출될 수 있었고, 이는 단리된 모낭에서 성장기에서 퇴행기로의 유도된 전이를 확인시켜준다.

하나의 대상에서의 멜라닌 색소침착에 대한 FOL-005의 효과를 보여주는 대표적인 동결절편 사진이 도 4에 나타나 있다. 비히클-처리된 대조군에서, 더 강한 색소침착이 진피 유두 가까이에서 관찰되는 반면, 15 nM 및 특히 60 nM FOL-005에의 노출 후 색소침착이 도면의 도면에서 오른쪽에 더 관찰된다 (진피 유두 근처에서 더 이상 멜라닌이 합성되지 않음에 따른 모간의 이동과 일치함).

실시예 B: 인간 피부 조각에 대한 예시적인 펩타이드 FOL-005 [서열번호:1]의 효과

(i) FOL-005는 성장기에서 퇴행기로의 변화를 유도한다

물질& 방법

전층 (full-thickness) 인간 두피 피부 기관 배양을 문헌 (Lu 등, 2007, 그 개시내용이 본원에 참고로 통합됨)에 기재된 바와 같이 무혈청 조건 하에 6일간 수행하였다.

요약하면, 여성 환자의 두피 피부를 사전 동의 후 일상적인 얼굴 주름 제거 수술로부터 수득하였다. 인간 두피 피부를 100 IU/ml 페니실린 G (Sigma, St Louis, MO, USA), 10 μg/ml 스트렙토마이신 (Sigma), 0.25 μg/ml 암포테리신 B (Gibco, Karlsruhe, Germany)이 보충된 윌리엄 E 배지 (Biochrom, Cambridge, UK)에서 5분간 세척하였다. 과다성장하는 모간을 표피 수준까지 면도한 다음, 온전한 두피 피부의 2 mm 생검을 Acu-puncher (STIEFEL, Offenbach am Main, Germany)를 이용하여 펀칭하였다 (모발 성장의 방향과 평행하게, 즉, 사각 (oblique angle)으로).

인간 두피 조직의 펀치를 윌리엄 E 배지 [100 IU/ml 페니실린/10 μg/ml 스트렙토마이신, 10 μg/ml의 인슐린 (Sigma), 10 ng/ml의 하이드로코르티손 (Sigma) 및 2 mmol/l의 I-글루타민 (Invitrogen, Paisley, UK)이 보충됨] 안에 조심스럽게 넣었다. 상기 피부 단편을 배지에 부유시켰고, 표피는 공기/액체 계면 위쪽에 그리고 피부/피하조직은 아래에 있었다. 상기 배양물을 95% 공기 및 5% CO₂를 갖는 기체공급 배양기에서 37 ℃에 유지시켰다. 상기 배양 배지를 2일마다 교환하였다.

배양 개시 후 곧바로, 피부 단편을 예시적인 폴리펩타이드 FOL-005 (15 nM 내지 3 μM의 용량)에 노출시키고, 배양 시간 동안 지속시켰다.

상이한 시점에, 피부 검체를 O.C.T.^TM Tissue-TEK (Sakura, Zoeterwoude, the Netherlands)에 포매시키고, 액체 질소에서 동결시키고, 6 μm 동결절편을 절개하였다. 그리고 나서, 상기 절편을 아세톤에 후-고정시키고, 공기 건조시키고, 헤마톡실린 및 에오신 (H&E; Sigma), 김사 (Giemsa) 또는 마손-폰타나 조직화학 (Masson-Fontana histochemistry)을 위해 가공하였다. 각각의 모낭을 기술된 바와 같이 이들의 주기 단계에 대해 분석하는 한편 (Whiting 등 1999), 모낭 멜라닌화를 표준 은 니트레이트 조직화학 (Masson-Fontana stain)에 의해 평가하였다. 근위 모발 기질 내의명확한 참조 영역의 정량을 이미지 J 소프트웨어 (NIH)를 이용하여 수행하였다.

세포자멸성 및 증식 세포를 평가하기 위해, 이중 면역형광을 적용하였다. 이전에 기술된 바와 같이, 말단 dUTP 니켈 표지 (ApopTag^®Fluorescein in situ Apoptosis Detection Kit; Chemicon, Tenecula, CA, USA)를 세포자멸사에 대한 마커로서 사용하였고, Ki67 면역반응성 (DakoCytomation, Glostrup, Denmark)을 세포 증식의 지시자로서 사용하였다 (Foitzik 등, 2006).

결과

FOL-005는 온전한 인간 두피 피부에서 성장기에서 퇴행기로의 급격한 전이를 유도하였다 (도 5 및 6 참고).

배양 배지에 FOL-005를 부가한 후 거의 모든 모낭이 초기 성장기에서 관찰된다.

또한 두피 피부 조직 내로 FOL-005를 주사함으로써 퇴행기가 유도되었다.

(ii) FOL-005는 Ki67 양성 세포의 증식을 억제하고 세포자멸사를 증가시킨다

물질& 방법

마손 폰타나 염색및 면역조직화학을 상기 기술된 바와 같이 수행하였다.

Ki67 양성 세포의 증식 및 상기 세포에서의 세포자멸사를 문헌[Whiting 등, 1999, J Investig Dermatol Symp Proc 4:282-284 (이의 관련 개시내용이 참고로 통합되어 있음)]에 기재된 바와 같이 결정하였다.

세포를 60 nM의 용량의 예시적인 폴리펩타이드 FOL-005에 노출시켰다.

결과

Ki67 양성 세포의 감소된 비율에 의해 나타난 바와 같이, FOL-005 처리된 피부에서 증식이 감소하는 강한 경향이 있다 (도 7 참고; 흰색 막대).

모발 성장의 억제에 맞추어, 또한 FOL-05 처리 후 TUNEL 양성 세포의 비율에 의해 표시된 바와 같이 세포자멸사의 수준이 증가한다 (도 7 참고; 음영 막대).

(iii) FOL-005는 색소침착 변화를 유도한다

물질& 방법

예시적인 폴리펩타이드 FOL-005로 처리된 단리된 모낭에서의 색소침착 변화를 마손-폰타나 (Masson-Fontana) 조직화학법에 의해 평가하였다 (Whiting 등, 1999, J Investig Dermatol Symp Proc 4:282-284 참고, 이의 관련 개시내용이 참고로 통합되어 있음).

결과

멜라닌 색소침착 분석 결과가 도 8 및 9에 나타나 있다.

배양 배지에의 주사 또는 부가에 의한 온전한 인간 두피 피부의 FOL-005에의 노출은 색소침착의 유의미한 감소를 유도하였고, 이는 모낭에서 성장기에서 퇴행기로의 전이를 확인시켜준다.

하나의 대상에서의 멜라닌 색소침착에 대한 FOL-005의 효과를 보여주는 대표적인 동결절편 사진이 도 10에 나타나 있다. 강하지 않은 색소침착을 나타내는 FOL-005 (중앙 및 우측 패널) 처리된 모낭과 대조적으로, 비히클 처리된 대조군 (좌측 패널)은 강한 색소침착을 나타낸다.

실시예 C: 두피 모낭 (HF) 상에서 FOL-005 [서열번호:1]의 생체외 평가

상기 관찰된 모발 성장의 억제의 견고성을 입증하기 위해, 두피 모낭 (HF)에 대한 예시적인 펩타이드 FOL-005의 효과의 상기 생체외 평가를 반복하였다.

하기 실험을 기관-배양된 전층 인간 두피 피부 단편 (4 mm, 6명의 여성 환자, 42-65세)에서 인간 HF를 이용하여 수행하였다.

a) DP 세포의 이주

HF에서 이주하는 진피 유두 (DP) 세포의 수에서 FOL-005 처리의 유의미한 효과가 관찰되지 않았다 (6명의 환자로부터 모은 데이터; 평균+/- SEM, n=18-22 HF, 만-휘트니 검정).

결과가 도 11 및 12에 나타나 있다.

b) HF 주기의 분석

FOL-005를 이용한 HF의 처리는 시험된 6명의 모든 환자 (6명의 환자로부터 모은 데이터)에서 인간 두피 피부 내의 성장기 HF가 너무 이르게 퇴행기로 들어가도록 지속적으로 유도한다.

결과가 도 13 및 14에 나타나 있다.

c) 모발 색소침착

시험된 용량의 FOL-005로 처리된 HF에서 HF 색소침착의 유의미한 변화가 관찰되지 않았다 (평균 +/- SEM, 독립표본 스튜던트 t-검정).

결과가 도 15 및 16에 나타나 있다 (성장기 및 퇴행기 HF가 분석됨).

추가 결과가 도 17 및 18 9에 나타나 있다 (성장기 HF만이 분석됨).

d) 모낭 형태학 (PAS)

FOL-005로 처리된 HF에서 BM의 형태학에서 관찰가능한 차이가 관찰되지 않았다 (어떤 독성 효과의 부재를 나타냄)

결과가 도 19에 나타나 있다.

e) 증식/세포자멸사

15nM FOL-005로 처리된 HF에서 세포자멸성 세포의 수에서 유의미한 증가가 관찰되었다 (성장기 및 퇴행기 HF가 분석됨).

이 농도에서 FOL-005로 처리된 HF에서 증식성 세포의 수에서 유의미하지 않은 변화가 결정되었다.

평균 +/- SEM, n=48-59 HF를 평가함, 만-휘트니 검정, ^*p<0.02. 이상치 (outlier)에 의한 데이터 왜곡을 감소시키기 위해, 그럽의 시험 (Grubb's test)을 수행하였고, 분석으로부터 이상치를 제거하였다.

결과가 도 20 및 21에 나타나 있다.

f) MC (비만 세포), MHCII+, CD31+ 세포에 대한 염색

조직화학적으로-검출가능한 모낭 주위의 비만 세포의 수에서 현저한 차이가 관찰되지 않았다 (도 22 참고; 비만 세포를 검출하기 위한 톨루이딘 블루 염색)

면역조직학적으로 검출가능한 모낭 주위의 MHC 계열 II+ 세포의 수에서 현저한 차이가 관찰되지 않았다 (도 23 참고)

CD31+ 세포 (내피 세포)의 수에서 현저한 차이가 관찰되지 않았다 (도 24 참고).

g) K15+ 세포에 대한 염색

K15+ 세포의 수에서 현저한 차이가 관찰되지 않았다.

K15 염색을 HS14-087을 이용하여 수행하였다 (간접적 면역형광, Chemikon사로부터의 마우스 항-인간 CK15 Ab).

인간 HF 상피 줄기 세포는 부정적으로 영향을 받지 않았다.

HF 줄기 세포 집단의 보존이 달성되었고, 따라서 이는 FOL-005에 의한 재생 잠재성을 입증한다 (도 25 참고)

요약

상기 발견은 예시적인 펩타이드 FOL-005이 하기 효과를 유도함으로써, 인간 두피 HF에서 퇴행기 발달을 강하게 촉진한다는 것을 보여주는 실시예 B에서의 결과를 확인시켜주고 확장시켜준다.

(a) FOL-005로 처리 후 퇴행기 HF의 증가된 %;

(b) 모은 데이터에서 처리된 HF의 모발 기질에서 세포자멸성 세포의 증가; 및

(c) 치료 후 성장기 HF로부터 이주가 증가하는 경향

하기 관찰에 의해 입증된 바와 같이, 예시적인 펩타이드 FOL-005는 잘 용인되는 것으로 보인다:

(a) FOL-005로 처리 후 HF 멜라닌 함량에서의 유의미한 변화가 없음;

(b) FOL-005-처리된 샘플에서 기저막 형태에서 또는 모낭 주위의 대식세포 및 비만 세포의 수 및 CD31+ 세포의 수에서 현저한 차이가 없음; 및

(c) K15+ 세포의 수에서 현저한 차이가 없음

결론

FOL-005는 HF 퇴행기를 명확하게 촉진하며, 이는 인간 모발 성장 억제제로서의 그의 활성을 확인시켜준다: 그것은 잘 용인되고 효과적인 것으로 보인다. 어떤 독성 효과의 신호도 없었다.

실시예 D: [서열번호:1]에 대한 예시적인 펩타이드 FOL-005 [서열번호:1]의 효과

SCID 마우스 상에 이식된 인간 남성 두피 피부의 모발 성장에 대한 FOL-005의 효과를 연구하였다.

상기 연구의 목적은 남성형 탈모증 (androgenetic alopecia)의 경향을 갖는 인간 남성 두피 피부의 모발 성장에 대한 FOL-005의 효과를 조사하는 것이었다. 이 사안을 다루기 위해, 6주령의 42마리의 암컷 SCID/베이지 마우스를 상기 연구에 연루시켰다. 흔한 탈모증이 생기는 경향을 갖는 인간 지원자의 두피 피부로부터 수득된, 펀치 이식편, 3 mm²를 SCID/베이지 마우스에 이식하였다 (마우스 당 3개의 이식편).

이식 후 1주에, 마우스를 무작위로 하기와 같이 4개의 처리군으로 나누었다:

1. 비히클 (10마리 마우스)를 1주에 2회 피내 주사하고, 음성 대조군으로서 제공하였다.

2. 미녹시딜 (5%) (11마리 마우스)를 1일 2회로 국소 도포하고, 양성 대조군으로서 제공하였다.

3. FOL-005 (이식편당 300nM) (11마리 마우스)를 1주일에 2회씩 피내 주사하였다.

4. 미녹시딜 5% + FOL-005 / 미녹시딜 (5%) (11마리 마우스)을 1일에 2회씩 국소 도포하였다. FOL-005 (이식편당 300nM)를 1주일에 2회씩 피내 주사하였다. 첫 4주 동안, 동물을 미녹시딜 단독 (모발 성장을 개시하기 위해)으로 처리한 다음, 나머지 기간 (2개월) 동안, 미녹시딜 처리를 국소 도포로서 유지하면서, FOL-005 처리를 주사로서 부가하였다.

모발/이식편의 수를 2명의 독립적 관찰자에 의해 1주일에 2회씩 계수하였다. 피부 이식 후 3개월에, 이식편을 마우스로부터 수득하고, 액체 질소에서 급속 냉동하고, 추가분석을 위해 -80 ℃에서 보관하였다.

비히클 처리된 군 (각각 3.7±0.6, p<0.05)과 비교하여 FOL-005 처리된 군 (2.1±0.4)에서 모발/이식편의 수의 유의미한 감소가 관찰되었다 (도 26 및 도 27 참고).

더욱이, 미녹시딜 단독으로 처리된 군 (8.1±0.1, p<0.001)과 비교하여, FOL-005+미녹시딜 (3.4±0.7) 처리군에서 모발/이식편의 수의 유의미한 감소가 검출되었다.

비히클 군 및 FOL-005+미녹시딜 (3.7±0.6 및 3.4±0.7, p=NS)에서 모발/이식편의 유사한 평균 수가 관찰되었다.

이 연구의 결과는 FOL-005가 모발 성장에 대해 억제 효과를 갖는다는 것을 확인시켜준다. 생체내에서 인간 두피 피부에서 FOL-005의 전체 모발 성장-억제 잠재성은 또한 FOL-005가 미녹시딜 (임상 의학에서 가장 잘 인식된 다모증-유도제 중 하나)의 모발 성장-촉진 효과를 강하게 길항작용하였다는 사실에 의해 강조된다.

참고문헌

SEQUENCE LISTING <110> Follicum AB <120> Inhibition of Hair Growth <130> FOLBA/P57747PC <140> GBPCT/GB2015/051165 <141> 2015-04-17 <150> GB1406989.2 <151> 2014-04-17 <160> 137 <170> BiSSAP 1.2 <210> 1 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FOL-005, Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 1 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 15 <210> 2 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 2 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Ser 1 5 10 15 <210> 3 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 3 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 4 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 4 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 5 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 5 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 6 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 6 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 10 <210> 7 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 7 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 8 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 8 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 9 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 9 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 10 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 10 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 10 <210> 11 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 11 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 10 <210> 12 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 12 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 13 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 13 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 14 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 14 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 15 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 15 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 10 <210> 16 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 16 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 10 <210> 17 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 17 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 10 <210> 18 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 18 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 19 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 19 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 20 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 20 Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 21 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 21 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val 1 5 10 <210> 22 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 22 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 10 <210> 23 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 23 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 10 <210> 24 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 24 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 10 <210> 25 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 25 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 26 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 26 Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 27 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 27 Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 28 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 29 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 29 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val 1 5 <210> 30 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 30 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 <210> 31 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 31 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 <210> 32 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 32 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 <210> 33 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 33 Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 <210> 34 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 34 Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 <210> 35 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 35 Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 <210> 36 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 36 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile 1 5 <210> 37 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 37 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 38 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 38 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val 1 5 <210> 39 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 39 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 <210> 40 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 40 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 <210> 41 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 41 Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 <210> 42 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 42 Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 <210> 43 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 43 Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 <210> 44 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 44 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Asp 1 5 <210> 45 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 45 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp Ile 1 5 <210> 46 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 46 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 47 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 47 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser Val 1 5 <210> 48 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 48 Asp Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 <210> 49 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 49 Gly Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 <210> 50 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 50 Asp Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 <210> 51 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 51 Ile Ser Val Val Tyr Gly Leu 1 5 <210> 52 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 52 Asp Thr Tyr Asp Gly Asp 1 5 <210> 53 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 53 Thr Tyr Asp Gly Asp Ile 1 5 <210> 54 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 54 Tyr Asp Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 55 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 55 Asp Gly Asp Ile Ser Val 1 5 <210> 56 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 56 Gly Asp Ile Ser Val Val 1 5 <210> 57 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 57 Asp Ile Ser Val Val Tyr 1 5 <210> 58 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 58 Ile Ser Val Val Tyr Gly 1 5 <210> 59 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 59 Thr Tyr Asp Gly Asp 1 5 <210> 60 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 60 Tyr Asp Gly Asp Ile 1 5 <210> 61 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 61 Asp Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 62 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 62 Gly Asp Ile Ser Val 1 5 <210> 63 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 63 Asp Ile Ser Val Val 1 5 <210> 64 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 64 Ile Ser Val Val Tyr 1 5 <210> 65 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 65 Ser Val Val Tyr Gly 1 5 <210> 66 <211> 300 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <223> Osteopontin <400> 66 Met Arg Ile Ala Val Ile Cys Phe Cys Leu Leu Gly Ile Thr Cys Ala 1 5 10 15 Ile Pro Val Lys Gln Ala Asp Ser Gly Ser Ser Glu Glu Lys Gln Leu 20 25 30 Tyr Asn Lys Tyr Pro Asp Ala Val Ala Thr Trp Leu Asn Pro Asp Pro 35 40 45 Ser Gln Lys Gln Asn Leu Leu Ala Pro Gln Thr Leu Pro Ser Lys Ser 50 55 60 Asn Glu Ser His Asp His Met Asp Asp Met Asp Asp Glu Asp Asp Asp 65 70 75 80 Asp His Val Asp Ser Gln Asp Ser Ile Asp Ser Asn Asp Ser Asp Asp 85 90 95 Val Asp Asp Thr Asp Asp Ser His Gln Ser Asp Glu Ser His His Ser 100 105 110 Asp Glu Ser Asp Glu Leu Val Thr Asp Phe Pro Thr Asp Leu Pro Ala 115 120 125 Thr Glu Val Phe Thr Pro Val Val Pro Thr Val Asp Thr Tyr Asp Gly 130 135 140 Arg Gly Asp Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg Ser Lys Ser Lys Lys Phe 145 150 155 160 Arg Arg Pro Asp Ile Gln Tyr Pro Asp Ala Thr Asp Glu Asp Ile Thr 165 170 175 Ser His Met Glu Ser Glu Glu Leu Asn Gly Ala Tyr Lys Ala Ile Pro 180 185 190 Val Ala Gln Asp Leu Asn Ala Pro Ser Asp Trp Asp Ser Arg Gly Lys 195 200 205 Asp Ser Tyr Glu Thr Ser Gln Leu Asp Asp Gln Ser Ala Glu Thr His 210 215 220 Ser His Lys Gln Ser Arg Leu Tyr Lys Arg Lys Ala Asn Asp Glu Ser 225 230 235 240 Asn Glu His Ser Asp Val Ile Asp Ser Gln Glu Leu Ser Lys Val Ser 245 250 255 Arg Glu Phe His Ser His Glu Phe His Ser His Glu Asp Met Leu Val 260 265 270 Val Asp Pro Lys Ser Lys Glu Glu Asp Lys His Leu Lys Phe Arg Ile 275 280 285 Ser His Glu Leu Asp Ser Ala Ser Ser Glu Val Asn 290 295 300 <210> 67 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <400> 67 Val Asp Thr Tyr Asp Gly Arg Gly Asp Ser Val Val Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 15 <210> 68 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of osteopontin <220> <221> VARIANT <222> 1 <223> V, E, G or K <220> <221> VARIANT <222> 2 <223> D, E, S or P <220> <221> VARIANT <222> 3 <223> any amino acid (e.g. T, V, P, A or L) <220> <221> VARIANT <222> 4 <223> Y, P, N or A <220> <221> VARIANT <222> 5 <223> D, N or E <220> <221> VARIANT <222> 6 <223> G or I <220> <221> VARIANT <222> 8 <223> G or absent <220> <221> VARIANT <222> 10 <223> S or E <220> <221> VARIANT <222> 11 <223> V or L <220> <221> VARIANT <222> 12 <223> V, A or T <220> <221> VARIANT <222> 15 <223> L or I <220> <221> VARIANT <222> 16 <223> R or K <220> <221> VARIANT <222> 17 <223> R, K or absent <400> 68 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asp Xaa Ile Xaa Xaa Xaa Tyr Gly Xaa Xaa 1 5 10 15 Xaa <210> 69 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 69 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 15 <210> 70 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 70 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 15 <210> 71 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 71 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 72 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 72 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 73 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 73 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 74 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 74 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 10 <210> 75 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 75 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 76 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 76 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 77 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 77 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 78 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 78 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 10 <210> 79 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 79 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 10 <210> 80 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 80 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 81 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 81 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 82 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 82 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 83 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 83 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 10 <210> 84 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 84 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 10 <210> 85 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 85 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 10 <210> 86 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 86 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 87 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 87 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 88 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 88 Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 89 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 89 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 10 <210> 90 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 90 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 10 <210> 91 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 91 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 10 <210> 92 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 92 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 10 <210> 93 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 93 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 10 <210> 94 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 94 Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 <210> 95 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 95 Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10 <210> 96 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 96 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 97 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 97 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 <210> 98 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 98 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 <210> 99 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 99 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 <210> 100 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 100 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 <210> 101 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 101 Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 <210> 102 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 102 Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 <210> 103 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 103 Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 <210> 104 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 104 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile 1 5 <210> 105 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 105 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 106 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 106 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 <210> 107 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 107 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 <210> 108 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 108 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 <210> 109 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 109 Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 <210> 110 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 110 Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 <210> 111 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 111 Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 <210> 112 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 112 Val Asp Val Pro Asn Gly Asp 1 5 <210> 113 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 113 Asp Val Pro Asn Gly Asp Ile 1 5 <210> 114 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 114 Val Pro Asn Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 115 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 115 Pro Asn Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 <210> 116 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 116 Asn Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 <210> 117 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 117 Gly Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 <210> 118 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 118 Asp Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 <210> 119 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 119 Ile Ser Leu Ala Tyr Gly Leu 1 5 <210> 120 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 120 Asp Val Pro Asn Gly Asp 1 5 <210> 121 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 121 Val Pro Asn Gly Asp Ile 1 5 <210> 122 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 122 Pro Asn Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 123 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 123 Asn Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 <210> 124 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 124 Gly Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 <210> 125 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 125 Asp Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 <210> 126 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 126 Ile Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 <210> 127 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 127 Val Pro Asn Gly Asp 1 5 <210> 128 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 128 Pro Asn Gly Asp Ile 1 5 <210> 129 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 129 Asn Gly Asp Ile Ser 1 5 <210> 130 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 130 Gly Asp Ile Ser Leu 1 5 <210> 131 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 131 Asp Ile Ser Leu Ala 1 5 <210> 132 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 132 Ile Ser Leu Ala Tyr 1 5 <210> 133 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 133 Ser Leu Ala Tyr Gly 1 5 <210> 134 <211> 294 <212> PRT <213> Murinae <220> <223> Osteopontin <400> 134 Met Arg Leu Ala Val Ile Cys Phe Cys Leu Phe Gly Ile Ala Ser Ser 1 5 10 15 Leu Pro Val Lys Val Thr Asp Ser Gly Ser Ser Glu Glu Lys Leu Tyr 20 25 30 Ser Leu His Pro Asp Pro Ile Ala Thr Trp Leu Val Pro Asp Pro Ser 35 40 45 Gln Lys Gln Asn Leu Leu Ala Pro Gln Asn Ala Val Ser Ser Glu Glu 50 55 60 Lys Asp Asp Phe Lys Gln Glu Thr Leu Pro Ser Asn Ser Asn Glu Ser 65 70 75 80 His Asp His Met Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp Gly Asp 85 90 95 His Ala Glu Ser Glu Asp Ser Val Asp Ser Asp Glu Ser Asp Glu Ser 100 105 110 His His Ser Asp Glu Ser Asp Glu Thr Val Thr Ala Ser Thr Gln Ala 115 120 125 Asp Thr Phe Thr Pro Ile Val Pro Thr Val Asp Val Pro Asn Gly Arg 130 135 140 Gly Asp Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser Lys Ser Arg Ser Phe Gln 145 150 155 160 Val Ser Asp Glu Gln Tyr Pro Asp Ala Thr Asp Glu Asp Leu Thr Ser 165 170 175 His Met Lys Ser Gly Glu Ser Lys Glu Ser Leu Asp Val Ile Pro Val 180 185 190 Ala Gln Leu Leu Ser Met Pro Ser Asp Gln Asp Asn Asn Gly Lys Gly 195 200 205 Ser His Glu Ser Ser Gln Leu Asp Glu Pro Ser Leu Glu Thr His Arg 210 215 220 Leu Glu His Ser Lys Glu Ser Gln Glu Ser Ala Asp Gln Ser Asp Val 225 230 235 240 Ile Asp Ser Gln Ala Ser Ser Lys Ala Ser Leu Glu His Gln Ser His 245 250 255 Lys Phe His Ser His Lys Asp Lys Leu Val Leu Asp Pro Lys Ser Lys 260 265 270 Glu Asp Asp Arg Tyr Leu Lys Phe Arg Ile Ser His Glu Leu Glu Ser 275 280 285 Ser Ser Ser Glu Val Asn 290 <210> 135 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Peptide with similarity to sub-region of murine derived osteopontin <400> 135 Val Asp Val Pro Asn Gly Arg Gly Asp Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 10 15 <210> 136 <211> 7 <212> PRT <213> Murinae <220> <223> Peptide derived from osteopontin <400> 136 Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg 1 5 <210> 137 <211> 11 <212> PRT <213> Murinae <220> <223> Peptide derived from osteopontin <400> 137 Arg Gly Asp Ser Leu Ala Tyr Gly Leu Arg Ser 1 5 10

Claims

포유동물에서 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물로서,
(a) 서열번호:1의 아미노산 서열
VDTYDGDISVVYGLR 서열번호:1
또는 포유동물 모발 생산에 대해 억제 활성을 보유하는 이의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는 폴리펩타이드; 및
(b) 약제학적으로 허용가능한 및/또는 미용적으로 허용가능한 부형제, 담체, 보조제 또는 희석제를 포함하고,
상기 폴리펩타이드는 5 내지 50개의 아미노산 길이인, 포유동물에서 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물이 인간 모발의 성장을 억제할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 조성물이 건강한 피부에 의한 모발의 생산을 억제할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 두피 상의 모발 생산을 억제할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 기존 모낭을 억제할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 하기를 유도하는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
(a) 모낭에서 성장기 길이의 감소 (예컨대, 성장기에서 퇴행기로의 변화를 유도함으로써); 및/또는
(b) 모낭에서 퇴행기 길이의 증가; 및/또는
(c) 모낭에서 휴지기 길이의 증가.
제6항에 있어서, 상기 조성물이 모낭을 말단 모발의 생산으로부터 연모 (vellus) 모발로의 생산으로 전환하도록 유도할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 새로운 모낭, 또는 이를 생산하기 위한 줄기 세포의 형성을 억제할 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 40 미만의 아미노산 길이, 예를 들어 35, 30, 28, 26, 24, 22, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10개 또는 그 미만의 아미노산 길이인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제9항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 5 내지 30개의 아미노산 길이, 예를 들어 5 내지 20, 5 내지 20, 8 내지 20, 8 내지 16, 또는 10 내지 15개의 아미노산 길이인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제10항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 10 내지 15개의 아미노산 길이인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:1의 아미노산 서열로 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:2의 아미노산 서열로 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
VDTYDGDISVVYGLS 서열번호:2
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 1의 아미노산 서열의 단편으로 구성된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제14항에 있어서, 상기 단편이 14개 이하의 아미노산 길이, 예를 들어 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개 아미노산 길이인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제14항 또는 제15항에 있어서, 상기 단편이 서열번호: 3 내지 65 중 임의의 하나에 따른 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
제16항에 있어서, 상기 단편은 서열번호: 26의 아미노산 서열을 포함하거나 그것으로 구성된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:1의 아미노산 서열의 변이체, 또는 그것의 단편을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제18항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호: 1의 아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제18항 또는 제19항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:1의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제18항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:1의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제21항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제22항에 있어서, 상기 부가적인 아미노산이 야생형 인간 오스테오폰틴 (서열번호:66)의 상응하는 위치로부터의 아미노산인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제18항 또는 제19항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 67의 아미노산 서열, 또는 이의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
VDTYDGRGDSVVYGLR 서열번호: 67
제24항에 있어서, 상기 단편이 15개 이하의 아미노산 길이, 예를 들어 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개 아미노산 길이인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제24항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:67의 아미노산 서열의 변이체, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제26항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:67의 아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:67의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:67의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 RGD 서열이 불활성화된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제26항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:67의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제30항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제31항에 있어서, 상기 부가적인 아미노산이 야생형 인간 오스테오폰틴의 상응하는 위치로부터의 아미노산인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 하기 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:

서열번호: 68
상기 식에서,
X1은 V, E, G 또는 K이고;
X2는 D, E, S 또는 P이며;
X3은 임의의 아미노산이고;
X4는 Y, P, N 또는 A이며;
X5는 D, N 또는 E이고;
X6은 G 또는 I이며;
X8은 G 또는 부재이고;
X10은 S 또는 E이며;
X11은 V 또는 L이고;
X12는 V, A 또는 T이며;
X15는 L 또는 I이고;
X16은 R 또는 K이며;
X17은 R, K 또는 부재이다.
제18항, 제19항 및 제33항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:69 또는 70의 아미노산 서열, 또는 이의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물
VDVPNGDISLAYGLR 서열번호:69
DVPNGDISLAYGLRS 서열번호:70
제34항에 있어서, 상기 단편이 14개 이하의 아미노산 길이, 예를 들어 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개 아미노산 길이를 포함하는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제34항 또는 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단편이 서열번호: 71 내지 133 중 어느 하나에 따른 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
제36항에 있어서, 상기 단편이 서열번호: 94의 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
GDISLAYGLR 서열번호: 94
제34항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열, 또는 그것의 단편의 변이체를 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제38항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는, 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물
제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호: 69 또는 70의 아미노산 서열, 또는 하기의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제38항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:69 또는 70의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제41항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제42항에 있어서, 상기 부가적인 아미노산이 야생형 쥣과 오스테오폰틴의 상응하는 위치로부터의 아미노산인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제38항 또는 제39항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 134의 아미노산 서열, 또는 이의 단편 또는 변이체를 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물:
VDVPNGRGDSLAYGLR 서열번호:135
제44항에 있어서, 상기 단편이 15개 이하의 아미노산 길이, 예를 들어 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 또는 5개의 아미노산 길이를 포함하는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제44항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호: 135의 아미노산 서열, 또는 그것의 단편의 변이체를 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제46항에 있어서, 상기 변이체가 하기의 서열번호:135의 아미노산 서열에 대해 적어도 50% 동일성, 더욱 바람직하게는 상기 서열에 대해 적어도 60%, 70% 또는 80% 또는 85% 또는 90% 동일성, 및 가장 바람직하게는 상기 아미노산 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 구성될 수 있는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제46항 또는 제47항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:135의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 하나 이상의 아미노산이 보존적으로 치환된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제46항 또는 제47항에 있어서, 상기 변이체가 서열번호:135의 아미노산 서열, 또는 이의 단편을 포함하거나 구성되며, 여기서 RGD 서열이 불활성화된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제46항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 서열번호:135의 아미노산 서열 내의 N- 및/또는 C-말단 및/또는 내부에 삽입된, 하나 이상의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제49항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 적어도 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 또는 20개의 부가적인 아미노산을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제49항 또는 제50항에 있어서, 상기 부가적인 아미노산이 야생형 쥣과 오스테오폰틴의 상응하는 위치로부터의 아미노산인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제51항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 비-천연적으로 존재하는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 직렬 반복을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제53항에 있어서, 상기 직렬 반복이 서열번호: 1 내지 65 중 어느 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제54항에 있어서, 상기 직렬 반복이 서열번호:1 또는 26의 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제53항에 있어서, 상기 직렬 반복이 서열번호: 69 내지 133 중 어느 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제55항에 있어서, 상기 직렬 반복이 서열번호: 69 및/또는 94의 아미노산 서열을 포함하거나 구성되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 하나 이상의 아미노산 위치에서 변형되거나 유도체화되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제58항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 하나 이상의 아미노산 위치에서 당화되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제58항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 하나 이상의 아미노산 위치에서 페길화되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 국소 투여용인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제61항 중 어느 한 항에 있어서, 경피 투여용인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 피내 투여용인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제63항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포유동물이 인간인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 있어서, 포유동물에서 원치않는 및/또는 과다한 모발 성장과 연관된 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하기 위한, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제65항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 성장과 연관된 질환 또는 장애가 다모증인, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제65항 또는 제66항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 성장과 연관된 질환 또는 장애가 가장 흔한 원인인 다낭성 난소 증후군 (PCOS), 선천성 부신 과형성 (congenital adrenal hyperplasia), 쿠싱병, 성장 호르몬 과다 (acromegaly), 난소내 종양, 부신 암, 폰히텔 린다우병 (Von Hippel-Lindau disease), 인슐린 저항성, 기질 난포막과다형성증 (stromal hyperthecosis) (SH), 비만, 만발성 피부 포르피린증 (porphyria cutanea tarda), 약물의 부작용 (예컨대, 테트라하이드로게스트리논, 페니토인, 미녹시딜), 호르몬 치료 및 호르몬 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제65항에 있어서, 포유동물에서 내생 (ingrown) 모발을 치료하거나 예방하기 위한, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
제68항에 있어서, 상기 내생 모발이 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된, 모발 생산을 억제하는데 사용하기 위한 조성물.
포유동물에서 원치않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하기 위한 약제의 제조에서 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
제70항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애가 다모증인 용도.
제70항 또는 제71항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애가 가장 흔한 원인인 다낭성 난소 증후군 (PCOS), 선천성 부신 과형성 (congenital adrenal hyperplasia), 쿠싱병, 성장 호르몬 과다 (acromegaly), 난소내 종양, 부신 암, 폰히텔 린다우병 (Von Hippel-Lindau disease), 인슐린 저항성, 기질 난포막과다형성증 (stromal hyperthecosis) (SH), 비만, 만발성 피부 포르피린증 (porphyria cutanea tarda), 약물의 부작용 (예컨대, 테트라하이드로게스트리논, 페니토인, 미녹시딜), 호르몬 치료 및 호르몬 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 용도.
제70항에 있어서, 상기 약제가 포유동물에서 내생 모발을 치료하거나 예방하기 위한 용도.
제73항에 있어서, 상기 내생 모발이 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된 용도.
제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 효과적인 양을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 원치않는 및/또는 과다한 모발 성장과 연관된 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하는 방법.
제75항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애가 다모증인 방법.
제75항 내지 제86항에 있어서, 상기 원치않는 및/또는 과다한 모발 생산과 연관된 질환 또는 장애가 가장 흔한 원인인 다낭성 난소 증후군 (PCOS), 선천성 부신 과형성 (congenital adrenal hyperplasia), 쿠싱병, 성장 호르몬 과다 (acromegaly), 난소내 종양, 부신 암, 폰히텔 린다우병 (Von Hippel-Lindau disease), 인슐린 저항성, 기질 난포막과다형성증 (stromal hyperthecosis) (SH), 비만, 만발성 피부 포르피린증 (porphyria cutanea tarda), 약물의 부작용 (예컨대, 테트라하이드로게스트리논, 페니토인, 미녹시딜), 호르몬 치료 및 호르몬 장애로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
제76항에 있어서, 포유동물에서 내생 모발을 치료하거나 예방하기 위한 방법.
제78항에 있어서, 상기 내생 모발이 면도, 왁싱 (waxing) 및/또는 여드름과 연관된 방법.
제75항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포유동물이 인간인 방법.
제75항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포유동물이 수컷인 방법.
제75항 내지 제80항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포유동물이 암컷인 방법.
인간에서 미용 제모를 위해 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
제83항에 있어서, 상기 인간이 남성인 용도.
제84항에 있어서, 상기 모발이 얼굴 (예컨대, 볼, 턱 및 윗입술 위), 가슴, 어깨, 목 및 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 신체의 부위로부터 제거되는 용도.
제83항에 있어서, 상기 인간이 여성인 용도.
제86항에 있어서, 상기 모발이 얼굴 (예컨대, 볼, 턱 및 윗입술 위), 등, 다리, 팔, 손가락, 발, 발가락 및 치골로 이루어진 군으로부터 선택된 신체의 부위로부터 제거되는 용도.
제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 효과적인 양을 인간에게 투여하는 것을 포함하는, 인간에서 미용 제모를 위한 방법.
제88항에 있어서, 상기 인간이 남성인 방법.
제88항 또는 제89항에 있어서, 상기 모발이 얼굴 (예컨대, 볼, 턱 및 윗입술 위), 가슴, 어깨, 목 및 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 신체의 부위로부터 제거되는 방법.
제88항에 있어서, 상기 인간이 여성인 방법.
제91항에 있어서, 상기 모발이 얼굴 (예컨대, 볼, 턱 및 윗입술 위), 등, 다리, 팔, 손가락, 발, 발가락 및 치골로 이루어진 군으로부터 선택된 신체의 부위로부터 제거되는 방법.
모발 생산을 억제하기 위한 생체외에서 또는 시험관내에서 제1항 내지 제64항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 폴리펩타이드의 용도.
제93항에 있어서, 포유동물에게 외식편을 접합하기 전에 피부 외식편 상의 모발 성장을 억제하기 위한 용도.
제93항에 있어서, 시험관내에서 모발 성장 모낭 (또는 이의 줄기 세포 전구체)을 억제하기 위한 용도.
명세서 및 도면을 참고하여 실질적으로 본원에 정의된 바와 같은 포유동물에서 모발 생산의 억제에서 사용하기 위한 조성물.
명세서를 참고하여 실질적으로 본원에 정의된 바와 같은 용도.
명세서를 참고하여 실질적으로 본원에 정의된 바와 같은 방법.