KR20160081163A - 컴파운드 k 및 이카리시드 b2를 함유하는 피부 보습 또는 미백용 외용제 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부 보습 또는 미백용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 컴파운드 K 및 이카리시드 B2를 유효성분으로 함유하여 손상된 피부 장벽기능을 회복시키고 피부 보습력을 증가시킬 뿐만 아니라, 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상 또는 피부의 칙칙함을 개선하고, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.

Description

컴파운드 K 및 이카리시드 B2를 함유하는 피부 보습 또는 미백용 외용제 조성물{Skin external composition for moisturizing or whitening the skin comprising compound K and icariside B2}

본 발명은 피부 보습 또는 미백용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 컴파운드 K 및 이카리시드 B2를 유효성분으로 함유하여 손상된 피부 장벽기능을 회복시키고 피부 보습력을 증가시킬 뿐만 아니라, 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상 또는 피부의 칙칙함을 개선하고, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 하는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.

피부는 외부로부터 개체를 보호하는 장벽기능이라는 매우 중요한 역할을 수행한다. 장벽기능은 외부로부터의 다양한 자극(화학물질, 대기오염물질, 건조한 환경, 자외선 등)에 대한 방어와 피부를 통한 체내 수분의 과도한 발산을 막는 보호 기능이며, 이러한 보호기능은 각질형성세포로 구성된 각질층이 정상적으로 형성되어 있을 경우에만 그 기능을 유지할 수 있다.

표피 중에서도 가장 바깥쪽에 존재하는 각질층(Stratum corneum, horney layer)은 각질형성세포로부터 형성되며, 분화가 완결된 각질세포와 그를 둘러싼 지질층으로 구성되어 있다(Marcelo C. L. et al, J. Invest. Dermatol .,80, pp37-44, 1983).

각질세포는 표피 최하층에서 지속적으로 증식(proliferation)하는 기저세포(basal cell)가 단계적으로 형태 및 기능상의 변화를 거치며, 피부 표면까지 상승한 특징적인 세포이며, 일정 기간이 경과하면 오래된 각질세포는 피부에서 탈락되고 새로운 각질세포가 그 기능을 대신하게 되는데, 이러한 반복적인 일련의 변화 과정을 “표피 세포의 분화” 또는 “각화(keratinization)”라고 부른다.

또한, 각화과정 중에 각질형성세포는 천연보습인자(Natural moisturizing factor; NMF)와 세포간 지방질(세라마이드, 콜레스테롤, 지방산)을 생성하면서 각질층을 형성하여 각질층이 견고함과 유연성을 가지게 하여 피부 장벽(skin barrier)으로서의 기능을 보유하게 한다.

이러한 각질층은 과도한 세안이나, 목욕 등의 생활 습관적 요소나, 건조한 대기 오염 물질 등의 환경적인 요인, 및 아토피성 피부나 노인성 피부 같은 내인성 질환 등으로 인해 쉽게 그 기능이 손실될 수 있으며, 실제로 현대에 들어서 더욱 늘어난 다양한 요인들로 인해 최근에는 건조피부증상 및 이로 인한 제반 장해를 호소하는 부분들이 점점 증가하고 있는 추세이다.

따라서, 적절한 피부 수분을 유지하기 위하여 외부로부터 수분을 공급하거나, 체내로부터의 수분 손실을 방지하기 위한 연구가 다양하게 진행되어 왔으며, 실제로 수분 보유 능력이 있는 다양한 보습제(moisturizer)가 개발되어 있다. 피부 보습제로는 세라마이드 등의 지질성분과 필수지방산 및 지질복합체 등 각질층에서의 수분보유를 증가시킬 수 있는 물질을 사용하는 것이 일반적이다(Rawlings A. V. et al, J. Invest. Dermatol., 5, pp731-741, 1994).

그러나, 최근 피부에 대한 위해 요인이 점점 증가되고 있고, 식생활 양상의 변화로 각질층의 생성, 탈락 속도가 늦어지며, 각질형성세포의 기능 저하로 각질층의 보습인자와 지질의 양이 감소되어 각질층이 정상적인 피부 장벽 기능을 발휘하지 못하는 피부를 가진 사람들이 증가하고 있는 추세이다. 이런 피부 장벽 기능의 와해는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 건선 등의 다양한 피부 질환을 유발하게 된다. 이와 같은 질환들은 기존의 통상적인 수분보유기능을 갖는 보습제만으로도 증상 완화는 기대할 수 있지만 근본적인 치유는 어려운 실정이다.

또한, 사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성, 혈관의 분포, 피부의 두께, 및 카로티노이드, 빌리루빈 등 인체 내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정된다. 특히, 멜라노사이트에서 타이로시나제(tyrosinase) 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색 색소가 가장 중요한 요인이다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인, 호르몬 분비, 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 하지만 멜라닌이 과잉생산됨으로써 색소침착 및 피부노화를 촉진하고 피부암 유발에도 주요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다. 피부색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜주기 위해서 이전부터 아스코르빈산(ascorbic acid), 코지산(kojicadcid), 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논(hudroquinone), 글루타치온(glutathione) 또는 이들의 유도체, 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용해 왔는데, 이들은 불충분한 미백 효과, 피부에 대한 안전성 문제, 및 화장료에 배합시 제형 내에서의 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

한편, 이카리시드 B2는 양치식물 꼬리고사릿과에 속한 여러해살이풀인 골고사리(Asplenium scolopendrium)의 일부분에서 추출한 터페노이드(terpenoid) 성분에서 분리하거나, 화학적으로도 합성이 가능하다(Natural Product Sciences, 14(4): 265-268 (2008)). 이카리시드 계열 화합물인 이카리시드 II(icarisideII)에 대하여, 미백 활성은 이미 알려져 있다(국제특허공개공보 WO 2008/035918호, 2008년 3월 27일 공개). 반면, 이카리시드 계열 화합물인 이카리시드 B2에 대한 연구는 미미하며, 특히 피부 상태 개선 등과 관련하여 나타내는 효능 및 다른 성분과의 병용을 통한 상승 효과에 대해서는 아직 주목할만한 연구성과가 보고된 바 없다.

한국 공개특허 10-2012-0083943호(2012년 7월 27일 공개) 국제특허공개공보 WO 2008/035918호(2008년 3월 27일 공개)

Natural Product Sciences, 14(4): 265-268 (2008)

본 발명은 컴파운드 K를 이카리시드 B2와 조합하여 함유함으로써 피부 보습력 개선 및 손상된 피부 장벽 개선 효과와 함께 피부 미백 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표현되는 컴파운드 K; 및 하기 화학식 2로 표현되는 이카리시드 B2를 유효성분으로 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 손상된 피부 장벽 기능의 회복 및 피부 보습력을 증가시키는 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 우수한 피부 재생 효과도 나타내어 피부 보습용, 피부 장벽 기능 강화용 및 피부 각질형성세포 분화 유도용 조성물로서 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선 등의 예방 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 우수한 피부 미백 효과를 제공하여 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상을 감소시키고, 피부 칙칙함을 개선시키며, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 한다.

본 발명에 의한 조성물은 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 유효성분으로 함유함으로써, 피부 보습력 개선 및 피부 미백에 효과적으로 작용할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 컴파운드 K(compound K)는 하기 화학식 1의 구조를 가지며 분자량은 622.88인 화합물이다.

[화학식 1]

본 발명에서 사용되는 컴파운드 K는 식물에서 추출될 수도 있고, 당업계에 공지된 방법에 따라 합성하여 사용할 수도 있으며, 상업적으로 시판되는 것을 사용할 수도 있다. 또한 컴파운드 K는 인삼 추출물에서 수득할 수 있다. 이 때 사용되는 인삼의 종류는 특히 제한되지 않고, 수삼, 홍삼, 백삼, 태극삼, 미삼 등을 사용할 수 있다. 또한 상기 인삼 추출물은 인삼으로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액 뿐 아니라 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물 또는 상기의 농축물을 다시 건조시켜 제조한 침체, 전제, 정기, 유동엑기스 및 인삼 중에 함유되어 주 효과를 발휘하는 화학 물질은 물론 식물 그 자체를 모두 포함하며, 줄기, 뿌리, 잎, 꽃, 열매 등 인삼의 모든 부분으로부터의 추출물이 사용가능하고 어느 특정 부분의 추출물로 한정되지 않는다. 또한 인삼 추출물로부터 컴파운드 K를 추출하는 방법은 공지의 방법을 사용할 수 있다.

구체적으로 상기 컴파운드 K는 인삼에서 당업계에 잘 알려진 방법으로 물 또는 유기용매로 인삼 추출물을 제조한 후, 이로부터 분리할 수 있다. 본 발명에 사용하는 유기용매는 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 이들 유기용매와 물의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 바람직하게는 80% 에탄올을 사용한다. 이때, 추출온도는 10~80℃가 바람직하며, 3~24시간 동안 추출할 수 있다. 상기 추출온도 및 추출시간을 벗어나면 추출 효율이 떨어지거나 성분의 변화가 생길 수 있다.

본 발명에서 사용되는 이카리시드 B2는 하기 화학식 2의 구조를 가지는 화합물로서, 분자량은 384이며, 메가스티그만(megastigmane) 또는 4-[2,2,6-트리메틸-4-(3,4,5-트리하이드록시-6-하이드록시메틸-테트라하이드로-피란-2-일옥시)-7-옥사-바이사이클로[4.1.0]헵트-1-일]-부트-3-엔-2-온(4-[2,2,6-Trimethyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-hydroxymethyl-tetrahydro-pyran-2-yloxy)-7-oxa-bicyclo[4.1.0]hept-1-yl]-but-3-en-2-one)이라고도 한다.

[화학식 2]

본 발명에 의한 조성물은 컴파운드 K를 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20중량%, 바람직하게는 0.1~10중량%의 양으로 함유할 수 있다. 또한, 본 발명에 의한 조성물은 이카리시드 B2를 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20중량%, 바람직하게는 0.1~10중량%의 양으로 함유할 수 있다. 유효성분의 함량이 상기 함량 범위 미만이면, 상기 성분에 의한 효능, 효과를 기대하기 어렵고, 상기 함량 범위를 초과하면 피부 안정성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.

또한, 바람직하게 본 발명의 조성물은 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 중량비로 1:1 내지 1:4의 비율로 함유한다.

본 발명에 의한 조성물은 피부 장벽 기능 강화용 및 피부 각질형성세포 분화 유도용으로 사용될 수 있으며, 따라서 표피 분화의 불완전함으로 생기는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선 등을 예방 또는 개선하는 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명에 의한 조성물은 손상된 피부 장벽의 회복능을 높이고, 피부 수분량을 증가시키는 능력이 우수하여 피부 재생용 조성물로도 사용될 수 있다.

또한, 본 발명에 의한 조성물은 멜라닌의 생성을 효과적으로 억제함으로써 우수한 미백 효과를 제공하여, 기미, 주근깨와 같은 색소 침착 증상 또는 피부의 칙칙함을 개선하고, 피부색을 균일하고 밝게 보일 수 있게 한다.

본 발명의 조성물은 피부 외용제 조성물, 특히 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있으며, 예를 들어 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제공될 수 있다. 구체적으로 본 발명의 조성물은 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~5중량%, 구체적으로 0.01~3중량%일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 약학 조성물로서 제형화될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 본 발명에서 사용되는 유효성분에 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제형화할 수 있으며, 본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다.

상기 경구 투여를 위한 제형으로서는 정제, 환제, 과립제, 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제, 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제형으로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 상법에 따라 실시함으로써, 유효성분을 용이하게 제형화할 수 있으며, 이 때 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 유효 성분의 투여 용량은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적당한 용량의 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1mg/kg/일 내지 100mg/kg/일, 보다 구체적으로는 5mg/kg/일 내지 50mg/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

[참고예 1] 컴파운드 K의 준비

본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 컴파운드 K는 앰보연구소(한국)로부터 구입하여 사용하였다.

[참고예 2] 이카리시드 B2의 준비

본 발명의 조성물의 효능을 실험하기 위한 이카리시드 B2는 Simagchem Corporation(중국)로부터 구입하여 사용하였다.

[시험예 1] 각질형성세포 분화 촉진 효과 측정

본 발명에서 사용되는 성분의 각질형성세포의 분화 촉진 효과를 알아보기 위해, 하기와 같이 각질형성세포의 분화시 생성되는 CE(Cornified Envelop)양을 흡광도를 이용하여 측정하였다.

먼저, 신생아의 표피로부터 분리해 일차 배양한 사람의 각질형성세포(HEK; Lonza사, NHEK-Neo-Neonatal Normal Human Epidermal Keratinocytes, Pooled)를 배양용 플라스크에 넣어 바닥에 부착시킨 뒤 배양액에 시험물질로서 상기 참고예 1의 컴파운드 K와 상기 참고예 2의 이카리시드 B2를 하기 표 1에 나타낸 농도로 처리한 후 세포가 바닥 면적의 70~80% 정도 자랄 때까지 5일간 배양하였다. 이때, 저칼슘(0.03mM) 처리군과 고칼슘(1.2mM) 처리군을 각각 음성 대조군, 양성 대조군으로 하였다. 그 다음 상기 배양한 세포를 수확하여 PBS(Phophate buffered saline)로 세척한 뒤 2% SDS(sodium dodecyl sulfate)와 20mM 농도의 DTT(Dithiothreitol)를 함유한 10mM 농도의 트리스-염산 완충액(Tris-HCl, pH 7.4) 1ml를 가하여 소니케이션(sonication), 보일링(boiling), 원심분리를 하고, 침전물을 다시 PBS 1ml에 현탁시켜 340nm에서의 흡광도를 측정하였다. 이와 별도로 상기 소니케이션 후의 용액을 일부 취하여 단백질 함량을 측정하고, 세포 분화정도 평가시 기준으로 삼았다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

시험물질	각질형성세포에서의 분화능(%)
저칼슘(0.03mM) 용액 (음성 대조군)	100
고칼슘(1.2mM) 용액 (양성 대조군)	210
컴파운드 K(3ppm) + 이카리시드 B2(2ppm)	246
컴파운드 K(2.5ppm) + 이카리시드 B2(2.5ppm)	306
컴파운드 K(1.7ppm) + 이카리시드 B2(3.3ppm)	301
컴파운드 K(1.25ppm) + 이카리시드 B2(3.75ppm)	298
컴파운드 K(1ppm) + 이카리시드 B2(4ppm)	296
컴파운드 K(5ppm)	295
이카리시드 B2(5ppm)	224

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 함께 처리한 경우 이들 2가지 성분의 상승 효과에 의하여 컴파운드 K 또는 이카리시드 B2을 단독으로 처리한 경우에 비하여 현저하게 우수한 각질형성세포의 분화 촉진능을 보임을 확인할 수 있다.

또한, 상기 결과로부터 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 1:1~1:4의 비율로 조합하여 사용하는 경우 각질형성세포의 분화 촉진에 있어서 상승 효과를 보일 수 있다는 것도 확인할 수 있다.

[시험예 2] 피부 장벽기능 회복 효과 측정

본 발명의 조성물에 사용되는 성분이 피부 손상으로 인해 손상된 피부 장벽기능의 회복에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다. 성인 남녀 10명의 상박을 테이프 스트립핑(Tape Stripping) 방법을 이용하여 피부 장벽에 손상을 주고 각각 하기 표 2의 조성으로 제조한 제형예 1 내지 2, 및 비교제형예 1 내지 4의 6개 군을 도포하면서 7일 동안 하루에 한번씩 경피수분손실량(TWEL)의 회복 정도를 Vapometer(Delfin, 핀란드)로 측정 비교하였다. 여기에서 비교제형예 1은 음성대조군으로서 비히클(vehicle)이며, 비교제형예 2는 상기 참고예 1의 컴파운드 K만을 함유하는 비교 대조군이고, 비교제형예 3은 상기 참고예 2의 이카리시드 B2만을 함유하는 비교 대조군이며, 비교제형예 4는 컴파운드 K와 이카리시드 B2의 조합비가 3:2의 중량비인 비교 대조군이다. 실험 결과는 하기 표 3에 나타내었다. 표 3의 결과는 장벽 손상 전과 장벽 손상 후의 처리전 차이를 100% 기준으로 하여 비교하였다.

배합성분	제형예 1	제형예 2	비교제형예 1	비교제형예2	비교제형예3	비교제형예4
정제수	69	69	70	69	69	69
프로필렌글리콜	30	30	30	30	30	30
컴파운드 K	0.5	0.2	-	1	-	0.6
이카리시드 B2	0.5	0.8	-	-	1	0.4

시험군	TWEL 변화 (%)
	처리전	1일	2일	3일	4일	5일	6일
제형예1	100	131	129	124	122	118	112
제형예2	100	130	128	122	120	115	110
비교제형예1	100	121	112	98	70	62	43
비교제형예2	100	127	129	123	117	111	109
비교제형예3	100	124	119	112	111	109	106
비교제형예4	100	126	123	115	113	111	108

상기 표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 함께 처리한 경우 이들 2가지 성분의 상승 효과에 의하여 컴파운드 K 또는 이카리시드 B2를 단독으로 처리한 경우에 비하여 빠른 속도로 경피 수분 손실량이 정상으로 돌아오며 장벽 손상이 회복됨을 확인할 수 있다.

[참고예 3] 제형예 3 내지 4 및 비교제형예 5 내지 8

하기 표 4의 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양크림을 제조하였다(단위: 중량%).

배합성분	제형예3	제형예4	비교제형예5	비교제형예6	비교제형예7	비교제형예8
정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100
컴파운드 K	0.25	0.1	-	0.5	-	0.3
이카리시드 B2	0.25	0.4	-	-	0.5	0.2
식물성경화유	1.50	1.50	1.50	1.50	1.50	1.50
스테아린산	0.60	0.60	0.60	0.60	0.60	0.60
글리세롤스테아레이트	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
스테아릴알코올	2.00	2.00	2.00	2.00	2.00	2.00
폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트&베헤닐알코올&소디움스테아로일락틸에이트	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
아라키딜베헤닐알코올&아라키딜글루코사이드	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
세틸아릴알코올&세테아릴글루코사이드	2.00	2.00	2.00	2.00	2.00	2.00
PEG-100 스테아레이트&글리세롤올레이트&프로필렌글리콜	1.50	1.50	1.50	1.50	1.50	1.50
카프릴릭/카르릭트리글리세라이드	11.00	11.00	11.00	11.00	11.00	11.00
사이클로메디콘	6.00	6.00	6.00	6.00	6.00	6.00
방부제, 향	적량	적량	적량	적량	적량	적량
트리에탄올아민	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1

[시험예 3] 피부 보습력 증가 효과 측정

본 발명의 조성물에 사용되는 성분이 피부 보습력 증가에 미치는 효과를 측정하기 위하여, 상기 제형예 3 내지 4 및 비교제형예 5 내지 8을 이용하였고, 하기와 같이 평가하였다.

건조 피부로 분류된 40~50대 성인 남녀 60명을 각각 제형예 3 내지 4 및 비교제형예5 내지 8의 6개 군에 대해 10명씩 6개조로 나누어 영양크림을 매일 2회씩 4주간 안면에 도포하게 하였다. 도포 개시 전과, 도포 후 1주, 2주, 4주 경과한 시점, 그리고 도포를 중지한 2주 경과(총 6주 경과) 후에 항온, 항습 조건(24℃, 상대습도 40%)에서 피부수분량측정기(Corneometer CM825, C+K Electronic Co., 독일)로 피부수분량을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 표 5의 결과는 시험개시 직전에 측정한 피부 수분량 측정기 값을 기준으로 하여 일정기간 처치한 후의 측정값의 증가분을 백분율로 표시한 것이다.

시험군	수분 증가율 (%)
	1주 경과	2주 경과	4주 경과	6주 경과
제형예3	33	37	39	35
제형예4	34	38	40	37
비교제형예5	30	32	32	15
비교제형예6	31	33	36	33
비교제형예7	32	35	34	32
비교제형예8	31	34	35	32

상기 표 5의 결과를 보면, 비교제형예 5를 도포한 경우에는 도포가 이루어진 4주까지는 약 30% 정도의 수분 증가율을 보이지만, 도포를 중지한 후에는 피부수분량이 급격하게 감소하였고, 컴파운드 K를 단독으로 함유한 비교제형예 6 또는 이카리시드 B2를 단독으로 함유한 비교제형예 7을 도포한 경우에는 피부 수분 증가율이 대부분 30% 대에 머물렀다. 반면, 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 모두 함유하는 제형예 3 및 4를 도포한 경우에는 이들 2가지 성분의 상승 효과에 의하여 도포를 중지한 후에도 35% 이상의 피부 수분 증가율을 보임을 확인할 수 있다. 이를 통해 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 함유하는 본 발명의 조성물은 피부 보습력 효과가 매우 우수함을 알 수 있다.

[시험예 4] B16/F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효과

본 시험예에 사용된 B16/F10 멜라노마는 마우스에서 유래한 세포주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포의 악성화로 생긴 암세포이다. 이 세포의 인공 배양 중에 시험물질을 처리하여 멜라닌 생성이 감소하는 정도를 비교 평가 하였다. 본 시험예에서 사용된 B16/F10 멜라노마는 한국세포주은행(KCLB No: 8008)으로부터 분양받아 사용하였다.

B16/F10 멜라노마의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16/F10 멜라노마를 6웰 플레이트에 5×10⁵/웰로 분주하여 37℃, 5% CO₂ 배양기(MCO-20AIC, Sanyo)에서 약 24시간 동안 10% FBS(fetal bovine serum)를 함유한 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에서 배양하였다. FBS가 없는 새로운 DMEM 배지에 시험물질로서 상기 참고예 1의 컴파운드 K와 상기 참고예 2의 이카리시드 B2를 하기 표 6에 나타낸 농도로 첨가하고 72시간 경과시켰다. 트립신-EDTA를 처리하고 원심분리하여 세포를 분리한 후, DMSO를 함유한 1N NaOH를 이용해 95℃에서 멜라닌을 용해하였다. ELISA 리더(DIbiotech, Korea)를 활용하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 시험물질을 첨가하지 않은 세포를 대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 각 시험물질의 멜라닌 생성 저해 정도를 측정하였다. 수학식 1에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 6에 나타내었다.

시험물질	멜라닌생성 저해율(%)
대조군(무첨가)	0
코지산	53
컴파운드 K(0.05중량%) + 이카리시드 B2(0.05중량%)	48
컴파운드 K(0.02중량%) + 이카리시드 B2(0.08중량%)	46
컴파운드 K(0.1중량%)	44
이카리시드 B2(0.1중량%)	39
컴파운드 K(0.06중량%) + 이카리시드 B2(0.04중량%)	40

상기 표 6의 결과를 보면, 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 함께 처리한 경우 컴파운드 K 또는 이카리시드 B2를 단독으로 처리한 경우에 비하여 멜라닌 생성 억제율이 상승되며, 특히 본원발명에 따른 조합비로 사용한 경우 이들 2가지 성분의 상승 효과에 의하여 현저하게 우수한 멜라닌 생성 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.

[시험예 5] 피부톤 개선 효과

본 발명의 조성물에 사용되는 성분이 피부톤 개선에 미치는 효과를 알아보기 위하여, 60명의 피험자를 10명씩 6개 군으로 나누고 각 군의 피험자에게 상기 제형예 3 내지 4 및 비교제형예 5 내지 8을 각각 사용(저녁 1회/일 도포, 총 1주간)하도록 한 후, Facial Stage DM-3(Moritex, Japan) 기기를 활용하여 피부톤 개선 정도를 평가하였다. 피부톤 개선율은 피부의 명도 및 색채 측정값으로부터 피부의 명도 및 색채 변화 값을 구하여 판단하였으며, 그 결과의 평균값을 구하여 하기 표 7에 나타내었다. 명도 및 색채 변화값이 클수록 피부톤이 개선되었음을 의미한다.

시험물질	피부톤 개선율(%)
	명도	색채
제형예3	18	16
제형예4	17	15
비교제형예5	5	5
비교제형예6	15	12
비교제형예7	14	12
비교제형예8	15	13

상기 표 7의 결과를 보면, 컴파운드 K와 이카리시드 B2를 함께 처리한 경우 컴파운드 K 또는 이카리시드 B2를 단독으로 처리한 경우에 비하여 피부톤 개선율이 상승되며, 특히 본원발명에 따른 조합비로 사용한 경우 이들 2가지 성분의 상승 효과에 의하여 현저하게 우수한 멜라닌 생성 효과를 나타냄을 확인할 수 있다.

이하, 본 발명에 따른 조성물의 제제예를 설명하나, 약학 조성물 및 화장료 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

[제제예 1] 화장수

아래 표 8에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 화장수를 제조한다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	1.0
이카리시드 B2	1.0
글리세린	3.0
부틸렌글리콜	2.0
프로필렌글리콜	2.0
카르복시비닐폴리머	0.1
PEG 12 노닐페닐에테르	0.2
폴리솔베이트 80	0.4
에탄올	10.0
트리에탄올아민	0.1
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 2] 영양 크림

아래 표 9에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 영양 크림을 제조한다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	1.0
이카리시드 B2	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올리에이트	0.5
PEG 60 경화피마자유	2.0
유동파라핀	10.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프락트리글리세라이드	5.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 3] 마사지 크림

아래 표 10에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 마사지 크림을 제조한다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	0.5
이카리시드 B2	0.5
밀납	10.0
폴리솔베이트 60	1.5
PEG 60 경화피마자유	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	0.8
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
글리세린	5.0
부틸렌글리콜	3.0
프로필렌글리콜	3.0
트리에탄올아민	0.2
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 4] 팩

아래 표 11에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 팩을 제조한다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	0.5
이카리시드 B2	0.5
폴리비닐알콜	13.0
소듐카르복시메틸셀룰로오스	0.2
글리세린	5.0
알란토인	0.1
에탄올	6.0
PEG 12 노닐페닐에테르	0.3
폴리솔베이트 60	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 5] 젤

아래 표 12에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 젤을 제조한다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	0.25
이카리시드 B2	0.25
에틸렌디아민초산나트륨	0.05
글리세린	5.0
카르복시비닐폴리머	0.3
에탄올	5.0
PEG 60 경화피마자유	0.5
트리에탄올아민	0.3
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 6] 연고

아래 표 13에 기재된 조성으로 통상적인 방법으로 연고를 제조하였다.

	함량(중량%)
컴파운드 K	0.05
이카리시드 B2	0.05
글리세린	8.0
부틸렌글리콜	4.0
유동파라핀	15.0
베타글루칸	7.0
카보머	0.1
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	3.0
스쿠알란	1.0
세테아릴글루코사이드	1.5
소르비탄스테아레이트	0.4
세테아릴 알코올	1.0
밀납	4.0
방부제, 색소, 향료	적량
정제수	잔량

[제제예 7] 연질캅셀제

컴파운드 K 0.0012g, 이카리시드 B2 0.0013g, 비타민 C 0.0025g, 팜유 2mg, 팜경화유 8mg, 황납 4mg 및 레시틴 6mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.

[제제예 8] 정제

컴파운드 K 0.0012g, 이카리시드 B2 0.0013g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 100mg, 전분 96mg 및 마그네슘 스테아레이트 4mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.

[제제예 9] 과립제

컴파운드 K 75mg, 이카리시드 B2 75mg, 비타민 C 150mg, 포도당 100mg, 및 전분 600mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.

[제제예 10] 드링크제

컴파운드 K 0.0012g, 이카리시드 B2 0.0013g, 비타민 C 0.0025g, 포도당 10g, 구연산 2g 및 정제수 187.8g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200ml로 하였다.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (8)

1. 하기 화학식 1로 표현되는 컴파운드 K; 및 하기 화학식 2로 표현되는 이카리시드 B2를 유효성분으로 함유하는 보습용 또는 미백용 피부 외용제 조성물.
   [화학식 1]
   

   

   
   [화학식 2]
   

   
2. 제1항에 있어서, 상기 컴파운드 K는 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 이카리시드 B2는 조성물 총 중량에 대하여 0.001~20중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 컴파운드 K와 이카리시드 B2는 1:1 내지 1:4의 중량비로 함유됨을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 장벽 기능 강화용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 피부 각질형성세포 분화 유도용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 혈색 및 피부톤 개선용임을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
8. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물임을 특징으로 하는 조성물.